CN101160314A - Mdm2的小分子抑制剂以及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及可以发挥p53和MDM2之间相互作用的抑制剂功能的小分子。本发明还涉及这些化合物用于抑制细胞生长、诱导细胞死亡、诱导细胞周期停滞和/或增加细胞对另外的物质的敏感性的应用。

Description

MDM2的小分子抑制剂以及其应用

背景技术

技术领域

[0001]本发明属于医药化学领域。本发明特别是涉及可以对p53和MDM2之间的相互作用发生拮抗剂功能的小分子以及其用作一类用于治疗癌症和其它疾病的新治疗剂的应用。

相关现有技术

[0002]进攻性癌细胞表型是许多导致细胞内发信号途径失控的遗传和遗传后(epigenetic)改变的结果(Ponder，Nature 411：336(2001))。但是，对于所有的癌细胞而言，其共同特性是其不能完成细胞凋亡程序，并且由于正常细胞凋亡机构中的缺陷而缺乏适宜的细胞凋亡是癌症的标志(Lowe等人，Carcinogenesis 21：485(2000))。因此，癌细胞由于在正常细胞凋亡机构中的缺陷而不能完成适宜的细胞凋亡程序的情况使其常常对化疗、辐射或免疫疗法诱导的细胞凋亡具有耐受性。由于细胞凋亡缺陷而产生的不同起源的人类癌症对目前治疗方案的原发性或获得性耐受性是目前癌症治疗中的主要问题(Lowe等人，Carcinogenesis21：485(2000)；Nicholson，Nature 407：810(2000))。因此，目前和以后进行的设计和研制用于改善癌症患者的存活和生活质量的具有特异靶向性的新分子抗癌疗法的各种努力都必需包括特异地使癌细胞耐受性靶向细胞凋亡的策略。就此而言，在直接抑制癌细胞中的细胞凋亡方面起着中心作用的重要的靶向负调节剂代表了新抗癌药物设计的一种很有前景的治疗策略。

[0003]p53肿瘤抑制基因在控制细胞周期进行和细胞凋亡中起着重要作用(Vogelstein等人，Nature 408：307(2000))。因为可以刺激其肿瘤抑制基因活性以消灭肿瘤细胞，所以其是一种引人注意的抗癌药物设计的治疗目标(Vogelstein等人，Nature 408：307(2000)；Chene，Nat.Rev.Cancer 3：102(2003))。一种刺激p53活性的新方法是用非肽类小分子抑制剂来抑制其与蛋白MDM2之间的相互作用(Chene，Nat.Rev.Cancer 3：102(2003)；Vassilev等人，Science 303：844(2004))。MDM2和p53都是自动调节反馈回路的一部分(Wu等人，Genes Dev.7：1126(1993))。MDM2是被p53和MDM2转录活化的，其反过来又通过至少三种机理抑制了p53活性(Wu等人，Genes Dev.7：1126(1993)。首先，MDM2蛋白直接与p53转活区域结合，从而抑制了p53-介导的转活。其次，MDM2蛋白包含一种核输出信号序列，并且在与p53结合时，其诱导了p53的核输出，从而阻止了p53与其目标DNAs结合。第三，MDM2蛋白是一种E3泛素连接酶并且在与p53结合时能促进p53降解。因此，通过发挥有效的p53活性内源性细胞抑制剂的功能，MDM2有效抑制了p53-介导的细胞凋亡、细胞周期停滞和DNA修复。因此，与MDM2结合并能阻断MDM2和p53之间的相互作用的小分子抑制剂可以促进具有功能性p53的细胞中p53的活性并刺激p53介导的细胞作用如细胞周期停滞、细胞凋亡、或DNA修复(Chene，Nat.Rev.Cancer 3：102(2003)；Vassilev等人，Science 303：844(2004))

[0004]虽然过去已经成功设计出以肽为基础的高亲合力抑制剂(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem 43：3205(2000))，但是，这些抑制剂不是药物样分子，这是因为其细胞渗透性差和在体内的生物利用度差。尽管制药企业不断努力，但是，在鉴定有效的非肽小分子抑制剂时，高产量的筛选策略仅取得了十分有限的成功。因此，需要可以抑制p53-MDM2相互作用的药物样非肽类小分子。

[0005]以p53-MDM2相互作用为目标的非肽小分子抑制剂的设计是目前人们正在寻求的抗癌药物设计的有吸引力的策略(Chene，Nat.Rev.Cancer3：102(2003)；Vassilev等人，Science 303：844(2004))。已经通过x-射线晶体学确定了这种相互作用的结构基础(Kussie等人，Science 274：948(1996))。其晶体结构表明p53和MDM2之间的相互作用主要是由p53的三种疏水残基(Phe19，Trp23和Leu26)和MDM2中的微小的深疏水性裂缝介导的。对于可以破坏p53-MDM2相互作用的小分子抑制剂的设计方案而言，这种疏水性裂缝是一种理想的位置(Chene，Nat.Rev.Cancer 3：102(2003))。

本发明的概述

[0006]通常认为在对遗传损害或与细胞凋亡诱导剂(如抗癌剂和辐射)的接触进行响应时，癌细胞或其支持细胞不能进行细胞凋亡是癌症发生和进行的主要因素。认为在癌细胞或其支持细胞(例如，肿瘤血管系统中的新血管细胞)中诱导细胞凋亡实际上是市场上或目前实践中所有有效的癌症治疗剂或放疗的普遍作用机理。细胞不能进行细胞凋亡的一种原因是p53的肿瘤抑制基因活性降低，在许多情况中，其可能是由于MDM2对包含功能性p53的细胞中的p53的抑制作用造成的。p53活性的抑制导致了细胞凋亡途径以及细胞周期调节的变化。

[0007]本发明认为使患有癌症的动物与治疗有效量的通过抑制p53或与p53有关的蛋白(例如，p63，p73)和MDM2或与MDM2有关的蛋白(例如，MDMX)之间的相互作用来增加p53和与p53有关的蛋白的功能的药物(例如，小分子)进行接触将立即抑制癌细胞生长和/或使该类细胞成为更易受癌症治疗药或放疗的诱导细胞死亡活性的影响的群体。本发明的抑制剂特别是可以通过干扰通常促进p53降解的p53-MDM2相互作用来延长p53的半衰期。本发明认为，当以诱导癌细胞中细胞生长抑制、细胞凋亡和/或细胞周期停滞的单一疗法的形式进行应用时，或者当与其它治疗剂，如其它诱导细胞死亡或破坏细胞周期的癌症治疗药或放疗暂时相关进行应用(联合疗法)(只要与仅用所述癌症治疗药或放疗单独进行治疗的动物体内的细胞比例相比，易于实施细胞凋亡程序的癌细胞或支持细胞的比例更高即可)时，p53或与p53有关的蛋白和MDM2以及与MDM2有关的蛋白之间的相互作用的抑制剂都满足了许多类癌症治疗未被满足的需要。

[0008]在本发明的某些实施方案中，与仅用本发明的化合物或抗癌剂/辐射进行治疗的动物相比，用治疗有效量本发明的化合物和抗癌剂或辐射过程对动物进行联合治疗在该类动物体内产生了更好的肿瘤响应和临床益处。另一方面，因为所述化合物将降低所有细胞的细胞凋亡阈值，所以作为对抗癌药/辐射诱导的细胞凋亡活性的响应，将增加成功实施细胞凋亡程序的细胞的比例。或者，在产生与单独使用抗癌剂/辐射的常规剂量时产生的肿瘤响应/临床益处相同的肿瘤响应/临床益处时，本发明的化合物降低了抗癌剂和/或辐射的药剂量，因此降低了毒性并且更耐受。因为所有已经获得批准的抗癌药和辐射治疗的剂量都是已知的，因此本发明考虑其与本发明化合物的各种组合。因为本发明的化合物至少可以部分通过刺激p53和与p53有关的蛋白的前细胞凋亡(pro-apoptotic)和/或细胞周期抑制活性来起作用，所以使癌细胞和支持细胞与治疗有效量所述化合物进行接触暂时也认为与作为对抗癌剂或放疗的响应，这些细胞试图实施细胞凋亡程序的努力相一致。因此，在一些实施方案中，以某些暂时性关系给予本发明的组合物提供了尤其有效的治疗操作。

[0009]在本发明其它一些实施方案中，p53或与p53有关的蛋白和MDM2和与MDM2有关的蛋白的相互作用之间的抑制剂可以保护正常(例如，未过度增生)细胞不受某些化疗剂和辐射的毒性影响(其可能是由于该抑制剂诱导细胞周期停滞的能力造成的)。本发明的抑制剂特别是可以在包含野生型p53的细胞中引起细胞周期停滞，而对于包含突变型p53或删除了p53的癌细胞没有影响。这种差别保护作用使得可以通过在不增加该类治疗毒副作用的情况下使用更高剂量化疗剂进行治疗或者进行更长时间的治疗来更有效地治疗癌症。

[0010]本发明涉及用于抑制p53或与p53有关的蛋白和MDM2或与MDM2有关的蛋白间的相互作用和增加细胞对细胞凋亡和/或细胞周期停滞诱导剂的敏感性的化合物。在一个特定的实施方案中，所述化合物为式I的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

X是CH、O、N、或S，其中如果X是O或S则R₈不存在；

Y是O、S、或NR′；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、和R₇独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；或者

R₇与R₅或R₆中的一个形成一种芳基、环烷基、或杂环基团；

R₈是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、SO₂NR′R″、或(C＝NR′)NR″R；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、或(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；并且

各R′、R″和R独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一个环；或者

当R₃和R₄中的一个是CONRR′时，R和R′还可以是(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R ″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、((CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

本发明涉及式I所示的化合物，其是p53或与p53有关的蛋白和MDM2或与MDM2有关的蛋白间的相互作用的抑制剂。本发明涉及本发明的化合物在包含功能性p53或与p53有关的蛋白的细胞中诱导细胞周期停滞和/或细胞凋亡的应用。本发明还涉及本发明的化合物用于使细胞对另外的物质，如细胞凋亡和/或细胞周期停滞的诱导剂敏感和通过在用化疗剂进行治疗前诱导细胞周期停滞来对正常细胞进行化学保护的应用。在一个实施方案中，本发明涉及使正常细胞耐受化疗剂或一些处理的方法，其包括使所述细胞与本发明的化合物进行接触。在一个实施方案中，本发明涉及一些保护患有过度增生性疾病的动物的正常细胞不受化疗剂或一些治疗影响的方法，其包括给所述动物使用本发明的化合物。在一个特定的实施方案中，本发明涉及通过给进行化疗的动物使用本发明的化合物来治疗、改善或预防由于给正常非癌细胞使用化疗剂而造成的病症、副作用或情况。由化疗造成的该类病症和情况的实例非限制性地包括粘膜炎、口腔炎、口腔干燥、胃肠病症、和脱发。

[0012]本发明的化合物可用于治疗、改善或预防一些病症，如这些对诱导的编程性细胞死亡有反应的病症，如特征为细胞凋亡失调的病症，包括过度增生性疾病如癌症。在某些实施方案中，所述化合物被用于治疗、改善或预防特征为对癌症治疗耐受的癌症(例如，这些癌细胞耐受化疗、耐受辐射、耐受激素等)。在其它一些实施方案中，所述化合物可用于治疗特征为表达功能性p53或与p53有关的蛋白的过度增生性疾病。在其它一些实施方案中，本发明涉及本发明的化合物通过在正常细胞中诱导细胞周期停滞来保护正常(例如，未过度增生的)细胞不受化疗剂和一些治疗的毒副作用影响的应用。

[0013]本发明提供了包含对于在细胞中诱导细胞凋亡或使细胞对细胞凋亡诱导剂敏感而言治疗有效量的式I化合物的药物组合物。

[0014]本发明还提供了包含式I化合物和用于将所述化合物给药于动物的说明的药盒。所述药盒可任选地包含其它治疗剂，例如，抗癌剂或细胞凋亡调节剂。

[0015]本发明还提供了一些制备式I化合物的方法。

附图简要说明

[0016]图1表示了以spirotryprostatin A为基础的一类新MDM2抑制剂的设计方案。

[0017]图2A和2B表示了预测的化合物1a和1d与MDM2的结合模型。

[0018]图3表示了(1″R，2″S，2′R，3′R，3S，4′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-(3-甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺的X-射线结构。

[0019]图4A表示了与MDM2蛋白结合的PMDM6-F的饱和曲线。

[0020]图4B表示了未标记的荧光探针PMDM6和天然p53肽与MDM2蛋白的竞争结合曲线。

[0021]图5表示用以FP为基础的结合试验测定的MDM2抑制剂的竞争结合曲线和K_i值。

[0022]图6表示用WST细胞生长试验测定的对具有野生型p53的LNCaP前列腺癌细胞中细胞生长的抑制作用。

[0023]图7表示用WST细胞生长试验测定的对具有突变型p53的PC3前列腺癌细胞中细胞生长的抑制作用。

[0024]图8表示用WST细胞生长试验测定的对具有野生型p53的PrEC正常人前列腺上皮细胞中细胞生长的抑制作用。

[0025]图9表示一些p53-MDM2相互作用的抑制剂的竞争结合曲线。

[0026]图10表示Ke-43对p53-MDM2相互作用的分裂。

[0027]图11表示在具有或不具有野生型p53的结肠癌细胞和正常细胞中Ke-43的细胞生长抑制活性。

[0028]图12表示对作为对Ke-43的响应的p53以及其目标基因产物MDM2和p21在癌细胞中的表达进行的蛋白质印迹分析。

[0029]图13A和13B表示Ke-43和Ke-61在癌细胞和正常细胞中诱导的细胞死亡和细胞凋亡。

[0030]图14表示在用Ke-43和nutlin-3进行处理后，表达野生型p53或突变型p53的结肠癌细胞系和正常结肠细胞的细胞周期进行。

[0031]图15表示用Ke-63进行处理保护正常细胞不受TAXOL处理的影响的保护作用。

本发明的详细描述

[[0032]本发明涉及发挥p53或与p53有关的蛋白和MDM2或与MDM2有关的蛋白间的相互作用的抑制剂功能的式I所示的化合物。通过抑制MDM2或与MDM2有关的蛋白对p53或与p53有关的蛋白的消极作用，这些化合物使得细胞对细胞凋亡和/或细胞周期停滞的诱导剂敏感，并且在一些情况中，其本身诱导了细胞凋亡和/或细胞周期停滞。因此，本发明涉及使细胞对细胞凋亡和/或细胞周期停滞的诱导剂敏感的方法和在细胞中诱导细胞凋亡和/或细胞周期停滞的方法，其包括使所述细胞仅与式I的化合物进行接触或者与式I的化合物和其它物质，如细胞凋亡诱导剂或细胞周期破坏剂进行接触。本发明还涉及治疗、改善或预防动物的一些病症，如对诱导的细胞凋亡有响应的病症的方法，其包括给所述动物使用式I的化合物和一些另外的物质，例如细胞凋亡诱导剂。该类病症包括这些特征为细胞凋亡失调的病症和特征为表达功能性p53或与p53有关的蛋白的细胞增生的病症。在其它一些实施方案中，本发明涉及保护动物的正常(例如，非过度增生性)细胞不受化疗剂和一些治疗的毒副作用影响的方法，其包括给所述动物使用式I的化合物。

[0033]这里所用的术语“抗癌剂”和“抗癌药”指的是用于治疗过度增生性疾病，如癌症(例如哺乳动物的癌症)的任何治疗剂(例如，化疗化合物和/或分子治疗化合物)、反义疗法、放疗、或手术干预。

[0034]这里所用的术语“前体药物”指的是需要在目标生理学系统中进行生物转化(例如自发转化或酶转化)从而释放出活性药物或者将所述前体药物转化(例如酶学、生理学、机械、电磁转化(electromagnetically))成活性药物的母体“药物”分子无药理学活性的衍生物。用前体药物来克服与稳定性、毒性、缺乏特异性、或生物利用度有限有关的问题。一些实例性前体药物包含活性药物分子本身和一种化学掩盖基团(例如，一种可逆性抑制药物活性的基团)。一些优选的前体药物是具有可在代谢条件下裂解的基团的化合物的变型或衍生物。当在生理学条件下进行溶剂分解或者进行酶降解或其它生物化学转化(例如磷酸化、氢化、脱氢、糖基化)时，一些实例性前体药物在体内或体外变得有药学活性。前体药物常常可以提供溶解度、组织相容性或在哺乳动物体内的延迟释放方面的优点。(见例如，Bundgard，前体药物设计(Design of Prodrugs，第7-9、21-24页，Elsevier，Amsterdam(1985)；和Silverman，药物设计和药物作用有机化合物(The OrganicChemistry of Drug Design and Drug Action)，第352-401页，AcademicPress，San Diego，CA(1992))。常见的前体药物包括酸衍生物如通过将母体酸与适宜的醇(低级链烷醇)进行反应制得的酯、通过将母体酸化合物与胺或可以反应形成酰化碱衍生物(例如，低级烷基酰胺)的碱性基团进行反应制得的酰胺。

[0035]这里所用的术语“可药用的盐”指的是目标动物(例如哺乳动物)生理学耐受的任何本发明化合物的盐(例如通过将本发明的化合物与酸或碱进行反应而获得的盐)。本发明化合物的盐可以得自无机或有机酸和碱。酸的实例非限制性地包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、羟乙酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、酒石酸、醋酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。虽然其它一些酸如草酸本身是不可药用的，但是在制备用作获得本发明化合物以及其可药用酸加成盐的中间体时可以使用这些酸。

[0036]碱的实例非限制性地包括碱金属(例如，钠)氢氧化物、碱土金属(例如，镁)氢氧化物、氨、和其中W是C_1-4烷基的NW₄ ⁺化合物等。

[0037]盐的实例非限制性地包括：醋酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天门冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、重葡萄糖酸盐(digluconate)、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、flucoheptanoate、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐(mesylate)、甲烷磺酸盐(methanesulfonate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、扑酸盐(palmoate)、果胶酯酸盐、过硫酸盐、苯丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐等。盐的其它一些实例包括本发明化合物的阴离子与适宜的阳离子如Na⁺、NH₄ ⁺、和NW₄ ⁺(其中W是C_1-4烷基)等形成的盐。对于治疗应用而言，本发明化合物的盐是可药用的。但是，在可药用化合物的制备或纯化中也可以使用不可药用的酸和碱的盐。

[0038]这里所用的术语“治疗有效量”指的是足以改善病症的一种或多种症状或预防病症发展或引起病症消退的治疗剂的数量。例如，在涉及癌症的治疗时，治疗有效量优选地指的是降低肿瘤生长速度、降低肿瘤质量、降低转移瘤数目、增加肿瘤进行的时间、或者将存活时间增加至少5％，优选至少10％，至少15％，至少20％，至少25％，至少30％，至少35％，至少40％，至少45％，至少50％，至少55％，至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，或至少100％的治疗剂的数量。

[0039]这里所用的术语“敏感”和“敏化”指的是通过使用第一种物质(例如式I的化合物)，使得动物或动物体内的细胞对第二种物质的生物学作用(例如促进或阻止某方面的细胞功能，非限制性地包括细胞分裂、细胞生长、增生、侵袭、血管生成、坏死、或细胞凋亡)更敏感或者反应性更高。可以以在给予或不给予第一种物质的情况下给予第二种物质时观察到的所需生物学作用(例如，促进或阻止某方面的细胞功能，非限制性地包括细胞生长、增生、侵袭、血管生成、或细胞凋亡)的差异的形式来测量第一种物质对靶细胞的敏化作用。与不存在第一种物质时的响应相比，被敏化的细胞的响应可以增加至少10％，至少20％，至少30％，至少40％，至少50％，至少60％，至少70％，至少80％，至少90％，至少100％，至少150％，至少200％，至少350％，至少300％，至少350％，至少400％，至少450％，或至少500％。

[0040]这里所用的术语“细胞凋亡失调”指的是细胞通过细胞凋亡经历细胞死亡的能力(例如，倾向)方面的任何失常。细胞凋亡失调与许多情况有关或者是由许多情况诱导的，所述情况的实例非限制性地包括自身免疫性病症(例如，全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎、移植物抗宿主病、重症肌无力、或斯耶格伦氏综合征)、慢性炎性情况(例如，牛皮癣、哮喘或克罗恩氏病)、过度增生性病症(例如，肿瘤、B细胞淋巴瘤、或T细胞淋巴瘤)、病毒感染(例如，疱疹、乳头状瘤、或HIV)，其它情况如骨关节炎和动脉粥样硬化。应当注意的是，当所述失调与病毒感染有关或者是由病毒感染诱导时，在失调发生时所述病毒感染可探测或不可探测，或者可以被观察到。即，病毒诱导的失调甚至可以发生于病毒感染症状消失之后。

[0041]这里所用的术语“功能性p53”指的是以正常水平、高水平或低水平表达的野生型p53和保留了野生型p53至少5％活性，例如至少10％、20％、30％、40％、50％或更高活性的突变型p53。

[0042]这里所用的术语“与p53有关的蛋白”指的是与p53具有至少25％序列同源性、具有肿瘤抑制基因活性并且被与MDM2或与MDM2有关的蛋白的相互作用抑制的这些蛋白。与p53有关的蛋白的实例非限制性地包括p63和p73。

[0043]这里所用的术语“与MDM2有关的蛋白”指的是与MDM2具有至少25％的序列同源性并且与p53或p53有关的蛋白相互作用并抑制p53或与p53有关的蛋白的这些蛋白。与MDM2有关的蛋白的实例非限制性地包括MDMX和HDM2。

[0044]这里所用的术语“过度增生性疾病”指的是其中动物体内正在进行增生的细胞的局部群体不受正常生长的通常限制因素控制的任何情况。过度增生性病症的实例包括肿瘤、赘生物、淋巴瘤等。如果赘生物不进行侵袭或者转移，则其被称为是良性的，如果进行侵袭或转移，则该赘生物被称为是恶性的。“转移性的”细胞指的是可以侵袭和破坏邻近身体结构的细胞。增生是一种涉及组织或器官中细胞数目增加但组织或器官结构或功能没有显著改变的细胞增生形式。组织转化是一种其中一类充分分化的细胞替代了另一类分化细胞的受控的细胞生长形式。

[0045]被活化的淋巴样细胞的病理学生长常常导致自身免疫性病症或慢性炎性情况。这里所用的术语“自身免疫性病症”指的是其中有机体产生识别该有机体自身分子、细胞或组织的抗体或免疫细胞的任何情况。自身免疫性病症的非限制性实例包括自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、贝格尔氏病或IgA肾病、口炎性腹泻、慢性疲乏综合征、克罗恩氏病、皮肤肌炎、纤维肌痛、移植物抗宿主病、格雷夫斯氏病、桥本氏甲状腺炎、特发性血小板减少性紫癜、扁平苔藓、多发性硬化、重症肌无力、牛皮癣、风湿热、风湿性关节炎、硬皮病、斯耶格伦氏综合征、全身性红斑狼疮、1型糖尿病、溃疡性结肠炎、白癫风等。

[0046]这里所用的术语“瘤形成疾病”指的是良性(非癌性)或恶性(癌性)细胞的任何异常生长。

[0047]这里所用的术语“正常细胞”指的是不经历异常生长或分裂的细胞。正常细胞是非癌性的并且不是任何过度增生性疾病或病症的部分。

[0048]这里所用的术语“抗肿瘤剂”指的是阻碍目标(例如恶性)赘生物的增生、生长或扩散的任何化合物。

[0049]这里所用的术语“阻止”、“防止”和“预防”(“prevent”、“preventing”和“prevention”)指的是降低动物体内病理学细胞(例如过度增生或赘生细胞)的出现。本发明可以是完全的，例如使得个体体内完全没有病理性细胞。本发明也可以是不完全的，从而使得个体体内出现的病理性细胞低于不使用本发明时出现的病理性细胞。

[0050]这里所用的术语“细胞凋亡调节剂”指的是参与调节(例如抑制、降低、增加、促进)细胞凋亡的物质。细胞凋亡调节剂的实例包括包含死亡区域的蛋白，非限制性地如Fas/CD95、TRAMP、TNF RI、DR1、DR2、DR3、DR4、DR5、DR6、FADD、和RIP。细胞凋亡调节剂的其它一些实例非限制性地包括TNFα、Fas配体、Fas/CD95和其它TNF族受体的抗体、TRAIL(也被称为Apo2配体或Apo2L/TRAIL)、TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗体、Bc1-2、p53、BAX、BAD、Akt、CAD、PI3激酶、PP1、和半胱天冬酶蛋白。广义的调节剂包括TNF族受体和TNF族配体的激动剂和拮抗剂。细胞凋亡调节剂可以是可溶的或膜结合的{例如配体或受体)。优选的细胞凋亡调节剂是细胞凋亡的诱导剂，如TNF或TNF相关配体，特别是TRAMP配体、Fas/CD95配体、TNFR-1配体、或TRAIL。

[0051]本发明p53和MDM2之间相互作用的抑制剂是式I的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

X是CH、O、N、或S，其中如果X是O或S，则R₈不存在；

Y是O、S、或NR′；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆和R₇独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；或者

R₇与R₅或R₆中的一个形成一种芳基、环烷基、或杂环基团；

R₈是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、SO₂NR′R″、或(C＝NR′)NR″R；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；和

R′、R″和R独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一种环；或者

当R₃和R₄中的一个是CONRR′时，R和R′的一个还可以是(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

[0052]在一个更特定的实施方案中，R₁和R₂中的一个是被取代或未被取代的芳基(例如，苯基)、被取代或未被取代的杂芳基、环烷基、直链或支链烷基、酰胺或酯。

[0053]在另一个实施方案中，R₅和R₆中的一个是C_3-18烷基，例如，丙基、异丙基、仲-丁基、叔-丁基、异戊基、环戊基、降冰片基、或金刚烷基、或5-或6-员芳基或杂芳基。

[0054]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式II或式III中所示的立体化学结构：

或其可药用的盐或前体药物。

[0055]在一个实施方案中，所述的式I化合物具有式IV：

其中R₁-R₉和Y的定义如上所述。

[0056]在另一个实施方案中，式IV的化合物具有式V或式VI中所示的立体化学结构：

或其可药用的盐或前体药物。

[0057]在一个实施方案中，所述的式I化合物具有式VII：

其中R₁-R₉的定义如上所述。

[0058]在另一个实施方案中，式VII的化合物具有式VIII和式IX中所示的立体化学结构：

或其可药用的盐或前体药物。

[0059]在一个实施方案中，所述的式I化合物具有式X：

其中：

R₁、R₅、R₇、和R₉的定义如上所述；

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

[0060]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XI-XXVI中的一种：

其中R₁、R₅、R₇、R₉、R₁₀和R₁₁的定义如上所述。

[0061]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XXVII和XXVIII中的一种：

其中R₁、R₅、R₇、R₉、R₁₀和R₁₁的定义如上所述。

[0062]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XXIX：

其中：

Z是O、NH、NR′、CH₂、CHR′、或CR′R″；和

R₁、R₅、R₇、R₉、和R₁₀的定义如上所述。

[0063]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XXX-XLV中的一种：

其中Z、R₁、R₅、R₇、R₉、和R₁₀的定义如上所述。

[0064]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XLVI：

其中R₁、R₅、R₇、和R₉的定义如上所述。

[0065]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XLVII：

其中：

R₁、R₃、R₉、和R₉的定义如上所述；

R₁₂是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；和

n是0、1、或2。

[0066]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XLVIII：

其中：

R₁、R₃、R₄、R₅和R₉的定义如上所述；

[0067]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式XLIX-LXIV中的一种：

其中：

R₁、R₃、R₄、R₅和R₉的定义如上所述。

[0068]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有一种式LXV：

其中：

R₁、R₄、R₅、R₉、R₁₀和R₁₁的定义如上所述。

[0069]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式LXVI和LXVII中的一种：

其中：

R₁、R₄、R₅、R₉、R₁₀和R₁₁的定义如上所述。

[0070]在另一个实施方案中，所述的式I化合物具有式LXVIII和LXVIX中的一种：

其中：

R₁、R₄、R₅、R₉、R₁₁和Z的定义如上所述。

[0071]有用的烷基包括直链或支链C_1-18烷基，尤其是甲基、乙基、丙基、异丙基、叔-丁基、仲-丁基、3-戊基、金刚烷基、降冰片基、和3-己基。

[0072]有用的链烯基包括直链或支链C_2-18烯基，尤其是乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、和己烯基。

[0073]有用的炔基有C_2-18炔基，尤其是乙炔基、丙炔基、丁炔基、和2-丁炔基。

[0074]有用的环烷基有C_3-8环烷基。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。

[0075]有用的芳基包括C_6-14芳基，尤其是苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、环戊并环庚五烯基、联苯基、亚联苯基、和芴基。

[0076]有用的杂芳基包括噻吩基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、色烯基、呫吨基、phenoxanthenyl、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、quinozalinyl、肉啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌二氮苯基(perimidinyl)、菲咯啉基、吩嗪基、异噻唑基、吩噻嗪基、异恶唑基、呋咱基、吩恶嗪基、1，4-二氢喹喔啉-2，3-二酮、7-氨基异香豆素、吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮、1，2-苯并异恶唑-3-基、苯并咪唑基、2-羟吲哚基、和2-氧代苯并咪唑基。在所述杂芳基在环中包含氮原子的情况中，该类氮原子可以为N-氧化物，例如吡啶基N-氧化物、吡嗪基N-氧化物、嘧啶基N-氧化物等形式。

[0077]有用的杂环基团包括四氢呋喃基、吡喃基、哌啶基、哌嗪基(piperizinyl)、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、奎宁环基、吗啉基、异色满基、色满基、吡唑烷基、吡唑啉基、tetronoyl、tetramoyl、或四氢异喹啉基、以及与杂芳基环稠合的杂环，例如，任选地被取代的5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-A]吡嗪基。

[0078]任选的取代基包括一种或多种烷基；卤素；卤代烷基；环烷基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的芳基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的芳氧基；芳烷基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的杂芳基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的杂芳氧基；烷氧基；烷硫基；芳硫基；酰氨基；氨基；氨基烷基、烷基氨基、酰氧基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的芳基酰氧基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的二苯基氧膦基氧基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、杂芳基、氨基酸取代的磺酰基、或氨基酸衍生物取代的磺酰基取代的杂环；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的杂环酰基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的杂环烷氧基；任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基，芳基、或杂芳基取代的部分不饱和杂环烷基；或者任选地被一个或多个低级烷基、低级烷氧基、亚甲二氧基、卤代、卤代烷基、氨基磺酰基、芳基、或杂芳基取代的部分不饱和杂环烷氧基。

[0079]本发明的某些化合物可以以包括光学异构体在内的立体异构体的形式存在。本发明包括所有立体异构体，其可以为各纯立体异构体制剂和富含各异构体的制剂形式，并且可以为该类立体异构体的外消旋混合物以及可以用本领域技术人员众所周知的方法进行分离的各对映异构体形式。

[0080]可以结合下面的合成流程图来更好地理解本发明的化合物和方法，这些合成流程图对可以用来制备本发明化合物的方法进行了说明。起始材料可以得自商业来源或者可以用本领域普通技术人员已知的已经充分得到确认的文献方法来进行制备。对于本领域普通技术人员而言显而易见的是，上面所定义的化合物也可以通过对下面所示合成中的适宜试剂和物质进行替代来进行合成。

[0081]具有通式X的结构的化合物可以用不对称的1，3-偶极环加成作为关键步骤来进行合成(流程图1)。

流程图1.

[0082]试剂和条件：a)CH₂Cl₂-CH₃CN，KF-Al₂O₃，微波，或甲醇，哌啶回流；b)4分子筛，甲苯，70℃；c)胺，室温；d)Pb(OAc)₄，CH₂Cl₂-MeOH(1∶1)，0℃，或硝酸铈(IV)铵(CAN)，CH₃CN，K₂CO₃，室温

[0083]具有式XXIX的化合物可以用流程图2所示的操作来进行合成。

流程图2.

[0084]试剂和条件：a)4分子筛，甲苯，70℃；b)乙醇/HCl，回流；c)NaBH₄，乙醇回流；d)TBDMSCl，咪唑，DMF；e)i)三甲基乙酰氯，二异丙基乙基胺，CH₂Cl₂，ii)HCl/乙酸乙酯，室温；f)CBR₄，Ph₃P，CH₂Cl₂；g)R₁₀ONa(对于Z＝O而言)，或者R₁₀NH₂(对于Z＝NH而言)或其它标准操作；h)Pb(OAc)₄，CH₂Cl₂-MeOH(1∶1)，0℃或CAN，CH₃CN，K₂CO₃，室温；i)HCHO，NaBH₃CN，CH₃CN(对于R₇＝Me而言)或其它标准操作。

[0085]具有式XLVI的化合物可以用如流程图3中所示的公开了的1，3-偶极环加成反应来进行制备(Fejes等人，Tetrahedron57：1129(2000))。

流程图3.

[0086]具有式XLVII的化合物可以用如流程图4所示的公开了的另一种1，3-偶极环加成反应来进行制备(Fejes等人，Tetrahedron57：1129(2000))。

流程图4.

[0087]具有式LXV的化合物是用与式X的制备方法相似的方法来进行制备的(流程图5)。

流程图5.

[0088]试剂和条件：a)CH₂Cl₂-CH₃CN，KF-Al₂O₃，微波，或甲醇，哌啶回流；b)4分子筛，甲苯，70℃；c)胺，室温；d)Pb(OAc)₄，CH₂Cl₂-MeOH(1∶1)，0℃，或硝酸铈(IV)铵(CAN)，CH₃CN，K₂CO₃，室温。

[0089]本发明一方面涉及一些制备MDM2抑制剂化合物的方法。在一个实施方案中，本发明涉及一种制备具有式X的化合物的方法，其包括

a)将式1的化合物与式2的化合物进行缩合，例如，在溶剂或溶剂混合物(例如，CH₂Cl₂和CH₃CN)中在微波下在存在催化剂(例如，KF-Al₂O₃)或在存在碱的情况下在适宜溶剂中进行缩合，从而形成式3的化合物；

b)将式3的化合物与式4的化合物和式5的化合物进行缩合，例如，在非极性溶剂(例如，甲苯)中在存在脱水剂(例如，4分子筛)的情况下在升高的温度(例如，约70℃)下进行缩合，从而形成式6的化合物；和

c)用氧化剂(例如，Pb(OAc)₄，硝酸铈铵)在溶剂或溶剂混合物(例如，CH₂Cl₂和MeOH，CH₃CN)中在适宜的温度(例如，约0℃或室温)下对式6的化合物进行处理，从而形成式X的化合物；

其中：

R₁、和R₅独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；

n、m、和p各自独立地是1-6；和

R′、R″和R各自独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″，或者R″和R形成一种环。

[0090]在另一个实施方案中，本发明涉及一种制备具有式LXV的化合物的方法，其包括

a)将式16的化合物与式2的化合物缩合，例如，在溶剂或溶剂混合物(例如，CH₂Cl₂和CH₃CN)中在微波中在存在催化剂(例如，KF-Al₂O₃)的情况下或者在存在碱的情况下在适宜的溶剂中进行缩合，从而形成式17的化合物；

b)将式17的化合物与式4的化合物和式5的化合物进行缩合，例如，在非极性溶剂(例如，甲苯)中在存在脱水剂(例如，4分子筛)的情况下在升高的温度(例如，约70℃)下进行缩合，从而形成式18的化合物；和

c)在溶剂或溶剂混合物(例如，CH₂Cl₂和MeOH，CH₃CN)中在适宜的温度(例如，约0℃或室温)用氧化剂(例如，Pb(OAc)₄，硝酸铈铵)对式18的化合物进行处理，从而形成式LXV的化合物；

其中：

R₁、R₅、R₉、R₁₀和R₁₁的定义如上所述。

[0091]在另一个实施方案中，本发明涉及一种制备具有式XXIX的化合物的方法，其包括

a)将式3的化合物与式4的化合物和式5的化合物进行缩合，例如，在非极性溶剂(例如，甲苯)中在存在脱水剂(例如，4分子筛)的情况下进行缩合或者通过在升高的温度(例如约70℃下)进行共沸蒸馏来进行缩合，从而形成式7的化合物；

b)将式7的化合物在存在酸(例如，HCl)的情况下进行加热，然后向其中加入一种还原剂(例如，NaBH₄)，从而形成式8的化合物；

c)将式8的化合物与阻滞剂(例如，三烷基甲硅烷基卤化物如TBDMSCl)在极性溶剂(例如，DMF)中进行缩合，然后将其与三甲基乙酰氯或其它保护剂在溶剂或溶剂混合物(例如，二异丙基乙基胺，CH₂Cl₂)中进行缩合和然后将其和酸(例如，HCl)缩合，从而形成式10的化合物；

d)用卤化剂(例如，CBr₄和Ph₃P)在溶剂(例如，CH₂Cl₂)中对式10的化合物进行处理，从而形成一种式11的卤代化合物；

e)用R₁₀ONa或R₁₀NH₂置换式11化合物的卤素基团，从而形成式12的化合物；

f)在溶剂或溶剂混合物(例如，CH₂Cl₂和MeOH或CH₃CN)中在适宜的温度(例如，约0℃至室温)下用氧化剂(例如，Pb(OAc)₄，或硝酸铈铵)对式12的化合物进行处理，从而形成式13的化合物；和

g)用烷化剂(例如，HCHO，NaBH₃CN，和CH₃CN)对式13的化合物进行烷化，从而形成式XXIX的化合物；

其中R₁、R₅、R₇、R₉、R₁₀和Z的定义如上所述。

[0092]本发明的一个重要方面是式I的化合物诱导细胞周期停滞和/或细胞凋亡并且也可以是单独或者作为对另一种细胞凋亡诱导信号的响应加强诱导的细胞周期停滞和/或细胞凋亡。因此，认为这些化合物可以使细胞对细胞周期停滞和/或细胞凋亡的诱导敏感，所述细胞包括对该类诱导刺激有耐受性的细胞。可以在可以通过诱导细胞凋亡来进行治疗、改善或预防的任何病症中用本发明抑制p53或与p53有关的蛋白和MDM2或与MDM2有关的蛋白之间相互作用的抑制剂来诱导细胞凋亡。在一个实施方案中，可以用所述抑制剂在包含功能性p53或与p53有关的蛋白的细胞中诱导细胞凋亡。

[0093]在另一个实施方案中，本发明涉及与一种或多种细胞凋亡调节剂有关的对细胞凋亡有关的状态进行的调节。细胞凋亡调节剂的实例非限制性地包括Fas/CD95、TRAMP、TNF RI、DR1、DR2、DR3、DR4、DR5、DR6、FADD、RIP、TNFα、Fas配体、TRAIL、TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗体、Bcl-2、p53、BAX、BAD、Akt、CAD、PI3激酶、PP1、和半胱天冬酶蛋白。还可以包括参与细胞凋亡的初始相、决定相和降解相的其它物质。细胞凋亡调节剂的实例包括其活性、存在或浓度变化可以调节个体体内的细胞凋亡的物质。优选的细胞凋亡调节剂是细胞凋亡的诱导剂，如TNF或与TNF-有关的配体，特别是TRAMP配体、Fas/CD95配体、TNFR-1配体、或TRAIL。

[0094]在一些实施方案中，可以用本发明的组合物和方法来治疗动物(例如哺乳动物个体，非限制性地包括人和兽医动物)体内的患病细胞、组织、器官或病理学情况和/或疾病状态。就此而言，可以用本发明的方法和组合物治疗或预防各种疾病和病变。这些疾病和情况的非限制性实例列表非限制性地包括乳癌、前列腺癌、淋巴瘤、皮肤癌、胰腺癌、结肠癌、黑素瘤、恶性黑素瘤、卵巢癌、脑癌、原发性脑癌、头颈癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、肝癌、膀胱癌、非小细胞肺癌、头或颈癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、小细胞肺癌、维尔姆斯瘤、宫颈癌、睾丸癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、前列腺癌、泌尿生殖器癌、甲状腺癌、食管癌、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、肾上腺癌、肾细胞癌、子宫内膜癌、肾上腺癌、恶性胰腺胰岛素瘤、恶性类癌瘤、绒毛膜癌、蕈样真菌病、恶性高钙血、宫颈增生、白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、毛细胞性白血病、成神经细胞瘤、横纹肌肉瘤、卡波济氏肉瘤、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症(essential thrombocytosis)、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤、软组织肉瘤、骨肉瘤、原发性巨球蛋白血症、和成视网膜细胞瘤等、T和B细胞介导的自身免疫性疾病；炎性疾病；感染；过度增生性疾病；AIDS；变性情况、血管疾病等。在一些实施方案中，被治疗的癌细胞是转移性的。在其它一些实施方案中，被治疗的癌细胞对抗癌剂有耐受性。

[0095]在一些实施方案中，适于用本发明的组合物和方法进行治疗的感染非限制性地包括由病毒、细菌、真菌、支原体、朊病毒(prions)等造成的感染。

[0096]本发明的一些实施方案提供了一些将有效量式I的化合物和至少一种其它的治疗剂(非限制性地包括化疗的抗肿瘤剂、细胞凋亡调节剂、抗微生物剂、抗病毒剂、抗真菌剂、和抗炎剂)和/或治疗技术(例如，手术干预，和/或放疗)进行给药的方法。

[0097]认为本发明的方法可以使用许多适宜的抗癌剂。实际上，本发明非限制性地考虑给予许多抗癌剂如：诱导细胞凋亡的物质；多核苷酸(例如，反义，核酶，siRNA)；多肽(例如，酶和抗体)；生物学拟似物(例如，棉子酚或BH3拟似物)；与Bcl-2族蛋白如Bax结合(例如，寡聚或络合)的物质；生物碱类；烷化剂；抗肿瘤抗生素；抗代谢物；激素；铂化合物；单克隆或多克隆抗体(例如，与抗癌药、毒素、防卫素轭合的抗体)、毒素类；放射性核素；生物学响应改性剂(例如，干扰素(例如，IFN-α)和白介素(例如，IL-2))；过继免疫治疗剂；造血生长因子；诱导肿瘤细胞分化的物质(例如，全反式视黄酸)；基因治疗试剂(例如，反义治疗试剂和核苷酸)；肿瘤疫苗；血管生成抑制剂；蛋白体抑制剂；NF-κB调节剂；抗-CDK化合物；HDAC抑制剂等。许多适于与所公开的化合物一起进行给药的其它化疗化合物和抗癌治疗的实例对于本领域技术人员而言是已知的。

[0098]在优选的实施方案中，抗癌剂包括诱导或刺激细胞凋亡的物质。诱导细胞凋亡的物质非限制性地包括辐射(例如，X-射线、γ射线、UV)；与肿瘤坏死因子(TNF)有关的因子(例如，TNF族受体蛋白、TNF族配体、TRAIL、TRAIL-R1或TRAIL-R2的抗体)；激酶抑制剂(例如，表皮生长因子受体(EGFR)激酶抑制剂、血管生长因子受体(VGFR)激酶抑制剂、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)激酶抑制剂、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)激酶抑制剂、和Bcr-Abl激酶抑制剂(如GLEEVEC))；反义分子；抗体(例如，赫赛汀(HERCEPTIN)、B细胞单克隆抗体(RITUXAN)、ZEVALIN、和AVASTIN)；抗雌激素药(例如，雷洛昔芬和他莫昔芬)；抗雄激素药(例如，氟他胺、比卡鲁胺、非那雄胺、aminoglutethamide、酮康唑、和皮质类固醇)；环氧合酶2(COX-2)抑制剂(例如，塞来考西、美洛昔康、NS-398、和非甾体抗炎药(NSAIDs))；抗炎药(例如，保泰松、地卡特隆(DECADRON)、去氢可的松(DELTASONE)、地塞米松、地塞米松intensol、地塞米松磷酸钠(DEXONE)、HEXADROL、羟氯嗪、METICORTEN、ORADEXON、ORASONE、羟布宗、泼尼松磷酸钠制剂(PEDIAPRED)、苯丁唑酮、羟氯嗪(PLAQUENIL)、泼尼松龙、泼尼松、PRELONE、和坦特利尔(TANDEARIL))；和癌症化疗药(例如，依立替康(CAMPTOSAR)、CPT-11、氟达拉滨(FLUDARA)、达咔巴嗪(DTIC)、地塞米松、醚托蒽醌、MYLOTARG、VP-16、顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-FU、多柔比星、吉西他滨、bortezomib、gefitinib、贝伐单抗、泰索帝(TAXOTERE)或泰素(TAXOL))；细胞发信号分子；神经酰胺和细胞因子；十字孢碱等。

[0099]在其它一些实施方案中，本发明的组合物和方法提供了式I的化合物和至少一种选自烷化剂、抗代谢物、和天然产物(例如，草药和得自其它植物和/或动物的化合物)的抗过度增生或抗肿瘤剂。

[0100]适用于本发明组合物和方法的烷化剂非限制性地包括：1)氮芥类(例如，双氯乙基甲胺、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑(L-溶肉瘤素)；和苯丁酸氮芥)；2)氮丙啶和甲基蜜胺类(methylmelamines)(例如，六甲密胺和噻替哌)；3)烷基磺酸酯类(例如，白消安)；4)亚硝基脲类(例如，卡莫司汀(BCNU)；罗氮芥(CCNU)；司莫司汀(甲基-CCNU)；和链佐星(链唑霉素))；和5)三氮烯类(例如，氮烯咪胺(DTIC；二甲基三氮烯并咪唑甲酰胺(triazenoimid-azolecarboxamide))。

[0101]在一些实施方案中，适用于本发明组合物和方法的抗代谢物非限制性地包括：1)叶酸类似物(例如，甲氨蝶呤(氨甲叶的)；2)嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)，氟尿苷(氟尿嘧啶脱氧核苷；FudR)、和阿糖胞苷)；和3)嘌呤类似物(例如，巯基嘌呤(6-巯基嘌呤；6-MP)、硫鸟嘌呤(6-硫鸟嘌呤；TG)、和喷司他丁(2′-脱氧助间型霉素))。

[0102]在另一些实施方案中，适用于本发明组合物和方法的化疗剂非限制性地包括：1)长春花属生物碱(例如，长春花碱(VLB)、长春新碱)；2)鬼臼乙叉甙类(epipodophyllotoxins)(例如，依托泊苷和替尼泊苷)；3)抗生素类(例如，更生霉素(放线菌素D)、柔红霉素(道诺霉素；柔毛霉素)、多柔比星、博来霉素、普卡霉素(光辉美塞)、和丝裂霉素(丝裂霉素C))；4)酶类(例如，L-天门冬酰胺酶)；5)生物学响应改性剂(例如，干扰素-α)；6)铂配位络合物(例如，顺铂(顺式-DDP)和卡铂)；7)蒽二酮类(例如，米托蒽醌)；8)被取代的脲类(例如，羟基脲)；9)甲基肼衍生物(例如，丙卡巴肼(N-甲基肼；MIH))；10)肾上腺皮质抑制剂(例如，米托坦(o，p′-DDD)和氨基格鲁米特)；11)肾上腺皮质类固醇(例如，泼尼松)；12)黄体酮类(例如，己酸羟孕酮、醋酸甲羟孕酮酯、和醋酸甲地孕酮)；13)雌激素类(例如，己烯雌酚和乙炔基雌二醇)；14)抗雌激素药(例如，他莫昔芬)；15)雄激素药(例如，丙酸睾丸酮和氟甲睾酮)；16)抗雄激素药(例如，氟他胺)；和17)促性腺激素释放激素类似物(例如，醋酸亮丙瑞林)。

[0103]发现在本发明的组合物和方法中可以使用抗癌治疗背景中常用的任何溶瘤细胞剂。例如，美国食品药品监督管理局(U.S.Food andDrug Administration)维持了一种在美国获得批准应用的溶瘤细胞剂的处方。U.S.F.D.A.的国际对应机构维持了类似的配方。表1提供了批准可在美国进行应用的抗肿瘤剂的实例列表。本领域技术人员将意识到美国批准的所有化疗剂上要求的“产品标签”描述的是所述实例性物质被批准的适应征、给药信息、毒性数据等。

表1.

阿地白介素(脱-丙氨酰基-1，丝氨酸-125人白介素-2)	Proleukin	Chiron Corp.，Emeryville，CA
			阿仑单抗(IgGIκ抗CD52抗体)	Campath	Millennium and ILEXPartners，LP，Cambridge，MA
阿利维A酸(9-顺式视黄酸)	Panretin	Ligand Pharmaceuticals，Inc.，San Diego CA
			别嘌醇(1，5-二氢-4H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4酮单钠盐)	Zyloprim	GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC
六甲密胺(N，N，N′，N′，N″，N″-六甲基-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺)	Hexalen	US Bioscience，West Conshohocken，PA
			阿米斯丁(乙硫醇，2-[(3-氨基丙基)氨基]-，二氢磷酸盐(酯))	Ethyol	US Bioscience
阿那曲唑(1，3-苯二乙腈，a，a，a′，a′-四甲基-5-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基))	Arimidex	AstraZeneca Pharmaceuticals，LP，Wilmington，DE
			三氧化二砷	Trisenox	Cell Therapeutic，Inc.，Seattle，WA
天门冬酰胺酶(L-天门冬酰胺氨基水解酶，EC-2型)	Elspar	Merck&Co.，Inc.，Whitehouse Station，NJ
			BCG Live(牛分支杆菌(卡介苗(Bacillus Calmette-Gukin)[BCG]，次代品系蒙特利尔(Montreal))减毒菌株的冷冻干燥制剂)	TICE BCG	Organon Teknika，Corp.，Durham，NC
贝沙罗汀胶囊(4-[1-(5，6，7，8-四氢-3，5，5，8，8-五甲基-2-萘基)乙烯基]苯甲酸)	Targretin	Ligand Pharmaceuticals
			贝沙罗汀凝胶	Targretin	Ligand Pharmaceuticals

博来霉素(由轮丝链霉菌产生的细胞毒性的糖胎抗生素；博来霉素A2和博来霉素B2)	Blenoxane	Bri stol-Myers Squibb Co.，NY，NY
			卡培他滨(5′-脱氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷)	Xeloda	Roche
卡铂(铂，二铵[1，1-环丁烷二carboxylato(2-)-0，0′]-，(SP-4-2))	Paraplatin	Bristol-Myers Squibb
			卡莫司汀(1，3-二(2-氯乙基)-1-亚硝基脲)	BCNU，BiCNU	Bristol-Myers Squibb
具有聚苯丙生20植入物的卡莫司汀	GliadelWafer	Guilford Pharmaceuticals，Inc.，Baltimore，MD
			塞来考西(作为4-[5-(4-甲苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯磺酰胺)	Celebrex	Searle Pharmaceuticals，England
苯丁酸氮芥(4-[二(2氯乙基)氨基]苯丁酸)	Leukeran	GlaxoSmithKline
			顺铂(PtCl2H6N2)	Platinol	Bristol-Myers Squibb
克拉屈滨(2-氯-2′-脱氧-b-D-阿糖腺苷)	Leustatin2-CdA	R.W.JohnsonPharmaceutical ResearchInstitute，Raritan，NJ
			环磷酰胺(2-[二(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-13，2-氧杂氮杂膦2-氧化物单水合物)	Cytoxan，Neosar	Bristol-Myers Squibb
阿糖胞苷(1-b-D-阿糖呋喃糖胞嘧啶，C9H13N3O5)	Cytosar-U	Pharmacia&UpjohnCompany
			阿糖胞苷脂质体	DepoCyt	Skye Pharmaceuticals，Inc.，San Diego，CA
氮烯唑胺	DTIC-Dome	Bayer AG，Leverkusen，

(5-(3，3-二甲基-1-三唑)-咪唑-4-甲酰胺(DTIC))		德国
			更生霉素，放线菌素D(streptomyces parvullus产生的放线菌素，C62H86N12O16)	Cosmegen	Merck
Darbepoetin alfa(重组肽)	Aranesp	Amgen，Inc，Thousand Oaks，CA
			柔红霉素脂质体((8S-顺式)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-á-L-lyxo-己糖吡喃糖基)氧基]-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮盐酸盐)	DanuoXome	Nexstar Pharmaceuticals，Inc.，Boulder，CO
柔红霉素HCl，道诺霉素((1S，3S)-3-乙酰基-1，2，3，4，6，11-六氢-3，5，12-三羟基-10-甲氧基-6，11-二氧代-1-并四苯基3-氨基-2，3，6-三脱氧-(α)-L-lyxo-己糖吡喃糖苷盐酸盐)	Cerubidine	Wyeth Ayerst，Madison，NJ
			地尼白介素(重组肽)	Ontak	Seragen，Inc.，Hopkinton，MA
右雷佐生((S)-4，4′-(1-甲基-1，2-乙二基)二-2，6-哌嗪二酮)	Zinecard	Pharmacia&UpjohnCompany
			多西紫杉醇((2R，3S)-N-羧基-3-苯基异丝氨酸，N-叔-丁基酯，13-酯具有5b-20-环氧-12a，4，7b，10b，13a-六羟基tax-11-en-9-酮4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物)	Taxotere	Aventis Pharmaceuticals，Inc.，Bridgewater，NJ
多柔比星HCl((8S，10S)-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-a-L-1yxo-己糖吡喃糖基)氧基]-8-羟乙酰基-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮盐酸盐)	Adriamycin，Rubex	Pharmacia&UpjohnCompany
			多柔比星	AdriamycinPFS静脉内注射	Pharmacia&UpjohnCompany
多柔比星脂质体	Doxil	Sequus Pharmaceuticals，Inc.，Menlo park，CA

丙酸屈他雄酮(17b-羟基-2a-甲基-5a-雄甾烷-3-酮丙酸盐)	Dromostanolone	Eli Lilly&Company，Indianapolis，IN
			丙酸屈他雄酮	Masterone注射液	Syntex，Corp.，Palo Alto，CA
Elliott′s B溶液	Elliott′s B溶液	Orphan Medical，Inc
			表柔比星((8S-顺式)-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-a-L-阿拉伯糖-己糖吡喃糖基)氧基]-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-8-(羟基乙酰基)-1-甲氧基-5，12-并四苯酮盐酸盐)	Ellence	Pharmacia&UpjohnCompany
重组人肾红细胞生成素α(重组肽)	Epogen	Amgen，Inc
			雌莫司汀(雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二醇(17(β))-，3-[二(2-氯乙基)氨基甲酸酯]17-(二氢磷酸酯)，二钠盐，单水合物，或雌二醇3-[二(2-氯乙基)氨基甲酸酯]17-(二氢磷酸酯)，二钠盐，单水合物)	Emcyt	Pharmacia&UpjohnCompany
磷酸依托泊苷(4′-脱甲基鬼臼乙叉碱9-[4，6-O-(R)-亚乙基-(β)-D-吡喃葡萄糖苷]，4′-(二氢磷酸盐))	Etopophos	Bristol-Myers Squibb
			依托泊苷，VP-16(4′-脱甲基鬼臼乙叉碱9-[4，6-O-(R)-亚乙基-(β)-D-吡喃葡萄糖苷])	Vepesid	Bristol-Myers Squibb
依西美坦(6-亚甲基雄甾-1，4-二烯-3，17-二酮)	Aromasin	Pharmacia&UpjohnCompany
			非格司亭(r-metHuG-CSF)	Neupogen	Amgen，Inc
氟尿嘧啶脱氧核苷(动脉内)(2′-脱氧-5-氟尿苷)	FUDR	Roche

氟达拉滨(抗病毒剂阿糖腺苷，9-b-D-阿糖呋喃糖腺嘌呤(ara-A)的氟化核苷酸类似物)	Fludara	Berlex Laboratories，Inc.，Cedar Knolls，NJ
			氟尿嘧啶，5-FU(5-氟-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮)	Adrucil	ICN Pharmaceuticals，Inc.，Humacao，Puerto Rico
氟维司群(7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亚硫酰基)壬基]雌-1，3，5-(10)-三烯-3，17-β-二醇)	Faslodex	IPR Pharmaceuticals，Guayama，Puerto Rico
			吉西他滨(2′-脱氧-2′，2′-二氟胞苷单盐酸盐(b-异构体))	Gemzar	Eli Lilly
吉姆单抗奥佐米星(抗-CD33 hP67.6)	Mylotarg	Wyeth Ayerst
			醋酸戈舍瑞林([D-Ser(But)6，Azgly10]LHRH；pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2基团醋酸盐[C59H84N18O14·(C2H4O2)x	Zoladex植入物	AstraZeneca Pharmaceuticals
羟基脲	Hydrea	Bristol-Myers Squibb
			替伊莫单抗(由单克隆抗体Ibritumomab和联结子-螯合剂tiuxetan[N-[2-二(羧基甲基)氨基]-3-(对-异氰硫基苯基)-丙基]-[N-[2-二(羧基甲基)氨基]-2-(甲基)-乙基]甘氨酸之间的硫脲共价键产生的免疫轭合物)	Zevalin	Biogen IDEC，Inc.，Cambridge MA
伊达比星(5，12-并四苯二酮，9-乙酰基-7-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-(α)-L-lyxo-己糖吡喃糖基)氧基]-7，8，9，10-四氢-6，9，11-三羟基盐酸盐，(7S-顺式))	Idamycin	Pharmacia&UpjohnCompany
			异环磷酰胺(3-(2-氯乙基)-2-[(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1，3，2-氧杂氮杂phosphorine 2-氧化物)	IFEX	Bristol-Myers Squibb

甲磺酸伊马替尼(Imatinib Mesilate)(4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐)	Gleevec	Novartis AG，Basel，瑞士
			干扰素α-2a(重组肽)	Roferon-A	Hoffmann-La Roche，Inc，.Nutley，NJ
干扰素α-2b(重组肽)	Intron A(冷冻干燥的重组干扰素β-1b(Betaseron))	Schering AG，Berlin，德国
			伊立替康HCl((4S)-4，11-二乙基-4-羟基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)羰氧基]-1H-吡喃并[3′，4′：6，7]吲嗪并[1，2-b]喹啉-3，14(4H，12H)二酮盐酸盐三水合物)	Camptosar	Pharmacia&UpjohnCompany
来曲唑(4，4′-(1H-1，2，4-三唑-1-基亚甲基)二苄腈)	Femara	Novartis
			亚叶酸钙(L-谷氨酸，N[4[[(2氨基-5-甲酰基-1，4，5，6，7，8六氢4氧代6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰基]，钙盐(1∶1))	Wellcovorin，Leucovorin	Immunex，Corp.，seattle，WA
左旋咪唑HCl((-)-(S)-2，3，5，6-四氢-6-苯基咪唑并[2，1-b]噻唑单盐酸盐C11H12N2S·HCl)	Ergamisol	Janssen Research Foundation，Titusville，NJ
			罗莫司汀(1-(2-氯-乙基)-3-环己基-1-亚硝基脲)	CeeNU	Bristol-Myers Squibb
Meclorethamine，氮芥(2-氯-N-(2-氯乙基)-N-甲基乙胺盐酸盐)	Mustargen	Merck
			醋酸甲地孕酮17α(乙酰氧基)-6-甲基孕-4，6-二烯-3，20-二酮	Megace	Bristol-Myers Squibb
美法仑，L-PAM	Alkeran	GlaxoSmithKline

(4-[二(2-氯乙基)氨基]-L-苯丙氨酸)
			巯基嘌呤，6-MP(1，7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮单水合物)	Purinethol	GlaxoSmithKline
美司钠(2-巯基乙烷磺酸钠)	Mesnex	Asta Medica
			甲氨蝶呤(N-[4-[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸)	Methotrexate	Lederle Laboratories
甲氧沙林(9-甲氧基-7H-呜并[3，2-g][1]-苯并呋喃-7-酮)	Uvadex	Therakos，Inc.，Way Exton，Pa
			丝裂霉素C	Mutamycin	Bristol-Myers Squibb
丝裂霉素C	Mitozytrex	SuperGen，Inc.，Dublin，CA
			米托坦(1，1-二氯-2-(邻-氯苯基)-2-(对-氯苯基)乙烷)	lysodren	Bristol-Myers Squibb
米托蒽醌(1，4-二羟基-5，8-二[[2-[(2-羟基乙基)氨基]乙基]氨基]-9，10-蒽二酮二盐酸盐)	Novantrone	Immunex Corporation
			苯丙酸诺龙	Durabolin-50	Organon，INC.，West Orange，NJ
诺非单抗	Verluma	Boehringer Ingelheim Pharma KG，Germany
			奥普瑞白介素(IL-11)	Neumega	Genetics Institute，Inc.，Alexandria，VA
奥沙利铂(顺式-[(1R，2R)-1，2-环己烷二胺-N，N′][oxalato(2-)-0，0′]铂)	Eloxatin	Sanofi Synthelabo，Inc.，NY，NY
			紫杉醇(具有(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸的5β，20-环氧-1，2a，4，7β，10β，13a-六羟基tax-11-en-9-酮4，10-二醋酸2-苯甲酸13-酯)	TAXOL	Bristol-Myers Squibb

氨羟二磷酸二钠(膦酸(3-氨基-1-羟基亚丙基)二-，二钠盐，五水合物，(APD))	Aredia	Novartis
			培加酶((单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚氨基)11-17-腺苷脱氨基酶)	Adagen(腺苷脱氨酶缺乏症治疗药(PegademaseBovine))	Enzon Pharmaceuticals，Inc.，Bridgewater，NJ
培加帕酶(单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚氨基L-天门冬酰胺酶)	Oncaspar	Enzon
			Pegfilgrastim(重组甲硫氨酰基人G-CSF(非格司亭)和单甲氧基聚乙二醇的共价轭合物)	Neulasta	Amgen，Inc
喷司他丁	Nipent	Parke-Davis Pharmaceutical Co.，Rockville，MD
			哌泊溴烷	Vercyte	Abbott Laboratories，Abbott Park，IL
普卡霉素，光辉霉素(由Streptomyces plicatus产生的抗生素)	Mithracin	Pfizer，Inc.，NY，NY
			卟吩姆钠	Photofrin	QLT Phototherapeutics，Inc.，Vancouver，Canada
丙卡巴肼(N-异丙基-μ-(2-甲基肼基)-对-甲苯酰胺单盐酸盐)	Matulane	Sigma Tau Pharmaceuticals，Inc.，Gaithersburg，MD
			奎纳克林(6-氯-9-(1-甲基-4-二乙基-胺)丁基氨基-2-甲氧基吖啶)	Atabrine	Abbott Labs
拉布立酶(重组肽)	Elitek	Sanofi-Synthelabo，Inc
			利妥昔单抗(重组抗-CD20抗体)	Rituxan	Genentech，Inc.，South San Francisco，CA

沙格司亭(重组肽)	Prokine	Immunex Corp
			链佐星(链佐星2-脱氧-2-[[(甲基亚硝基氨基)羰基]氨基]-a(和b)-D-吡喃葡萄糖和220mg无水柠檬酸	Zanosar	Pharmacia&Upjohn Company
滑石粉(Mg3Si4O10(OH)2)	Sclerosol	Bryan，Corp.，Woburn，MA
			他莫昔芬((Z)2-[4-(1，2-二苯基-1-丁烯基)苯氧基]-N，N-二甲基乙胺2-羟基-1，2，3-丙烷三羧酸盐(1∶1))	Nolvadex	AstraZeneca Pharmaceuticals
替莫唑胺(3，4-二氢-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，1-d]-as-四嗪-8-甲酰胺)	Temodar	Schering
			替尼泊苷，VM-26(4′-脱甲基鬼臼乙叉碱9-[4，6-0-(R)-2-噻吩亚甲基-(β)-D-吡喃葡萄糖苷])	Vumon	Bristol-Myers Squibb
睾内酯(13-羟基-3-氧代-13，17-开环雄甾-1，4-二烯-17-酸[dgr]-内酯)	Teslac	Bristol-Myers Squibb
			硫鸟嘌呤，6-TG(2-氨基-1，7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮)	Thioguanine	GlaxoSmithKline
噻替派(环乙亚胺，1，1′，1″-膦基thioylidynetris-，或三(1-环乙亚胺基)膦硫化物)	Thioplex	Immunex Corporation
			托泊替康HCl((S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-乙基-4，9-二羟基-1H-吡喃并[3′，4′：6，7]吲嗪并[1，2-b]喹啉-3，14-(4H，12H)-二酮单盐酸盐)	Hycamtin	GlaxoSmithKline
托瑞米芬	Fareston	Roberts Pharmaceutical Corp.，Eatontown，NJ

(2-(对-[(Z)-4-氯-1，2-二苯基-1-丁烯基]-苯氧基)-N，N-二甲基乙基胺柠檬酸盐(1∶1))
			脱西莫单抗，I 131脱西莫单抗(重组的鼠科动物免疫治疗的单克隆IgG2aλ抗-CD20抗体(I 131是一种放射免疫治疗抗体))	Bexxar	Corixa Corp.，Seattle，WA
曲妥单抗(重组的单克隆IgG1κ抗HER2抗体)	Herceptin	Genentech，Inc
			维甲酸，ATRA(全反式视黄酸)	Vesanoid	Roche
尿嘧啶氮芥	UracilMustard胶囊	Roberts Labs
			戊柔比星，N-三氟乙酰基阿霉素-14-戊酸盐((2S-顺式)-2-[1，2，3，4，6，11]-六氢-2，5，12-三羟基-7-甲氧基-6，11-二氧代-[[4 2，3，6-三脱氧-3-[(三氟乙酰基)-氨基-α-L-lyxo-己糖吡喃糖基]氧基]-2-并四苯基]-2-氧代乙基戊酸盐)	Valstar	Anthra-->Medeva
长春碱，长春新碱(C46H56N4O10·H2SO4)	Velban	Eli Lilly
			长春新碱(C46H56N4O10·H2SO4)	Oncovin	Eli Lilly
长春瑞滨(3′，4′-二脱氢-4′-脱氧-C′-去甲长春碱[R-(R*，R*)-2，3-二羟基丁二酸盐(1∶2))	Navelbine	GlaxoSmithKline
			唑来膦酸盐，唑来膦酸((1-羟基-2-咪唑-1-基-膦酰基乙基)膦酸单水合物)	Zometa	Novartis

[0104]抗癌剂还包括已经被确定具有抗癌活性但是目前仍然未被美国食品药品监督管理局(U.S.Food and Drug Administration)或其它相应机构批准或者正在进行新应用评估的化合物。其实例非限制性地包括3-AP、12-O-四癸酰基佛波醇-13-乙酸酯、17AAG、852A、ABI-007、ABR-217620、ABT-751、ADI-PEG20、AE-941、AG-013736、AGRO100、阿拉诺新、AMG706、抗体G250、抗瘤酮类(antineoplastons)、AP23573、apaziquone、APC8015、阿替莫德、ATN-161、atrasenten、阿扎胞苷、BB-10901、BCX-1777、贝伐单抗、BG00001、比卡鲁胺、BMS247550、bortezomib、苔藓抑素-1、布舍瑞林、骨化三醇、CCI-779、CDB-2914、头孢克肟、西妥昔单抗、CG0070、西仑吉肽、clofarabine、布考他丁A4磷酸盐、CP-675,206、CP-724,714、CpG7909、姜黄(curcumin)、地西他滨、DENSPM、度骨化醇、E7070、E7389、ecteinascidin 743、efaproxiral、依洛尼塞、EKB-569、enzastaurin、erlotinib、依昔舒林、芬维A胺、flavopiridol、氟达拉滨、氟他胺、福莫司汀、FR901228、G17DT、galiximab、gefitinib、染料木素、葡磷酰胺、GTI-2040、组氨瑞林、HKI-272、高三尖杉酯碱、HSPPC-96、hu14.18-白介素-2融合蛋白、HuMax-CD4、伊洛前列素、咪喹莫特、英夫利昔单抗、白介素-12、IPI-504、伊罗夫文、ixabepilone、lapatinib、lenalidomide、lestaurtinib、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)、LMB-9免疫毒素、lonafarnib、luniliximab、马磷酰胺、MB07133、MDX-010、MLN2704、单克隆抗体3F8、单克隆抗体J591、莫特沙芬、MS-275、MVA-MUC1-IL2、尼鲁米特、硝基喜树碱、盐酸诺拉曲塞、他莫昔芬、NS-9，06-苄基鸟嘌呤、oblimersen sodium、ONYX-015、oregovomab、OSI-774、panitumumab、伯尔定、PD-0325901、培美曲塞、PHY906、吡格列酮、吡非尼酮、pixantrone、PS-341、PSC833、PXD101、吡唑啉吖啶、R115777、RAD001、豹蛙酶、rebeccamycin类似物、rhuAngiostatin蛋白、rhuMab 2C4、罗格列酮、卢比替康、S-1，S-8184、沙铂、SB-，15992、SGN-0010、SGN-40、sorafenib、SR31747A、ST1571、SU011248、suberoylanilide异羟肟酸、苏拉明、talabostat、他仑帕奈、tariquidar、temsirolimus、TGFa-PE38免疫毒素、沙利度胺、胸腺法新、tipifarnib、替拉扎明、TLK286、trabectedin、葡萄糖醛酸三甲曲沙、TroVax、UCN-1、丙戊酸、长春氟宁、VNP40101M、volociximab、vorinostat、VX-680，ZD1839、ZD6474、齐留通(zileuton)、和zosuquidar三盐酸盐。

[0105]对于抗癌剂和其它治疗剂的更详细的描述而言，本领域技术人员可参考任何数目的指导手册，所述指导手册非限制性地包括thePhysician′s Desk Reference和Goodman和Gilman的“治疗的药学基础(Pharmaceutical Basis of Therapeutics)”，第10版，Hardman等人编辑，2002。

[0106]本发明提供了将式I的化合物与放疗一起给药的方法。本发明不受用于将治疗剂量的辐射传递给动物所用的类型、数量、或传递和给药系统的限制。例如，所述动物可以接受光子放疗、粒子束辐射治疗、其它类型的放疗、以及其组合。在一些实施方案中，用线性加速器将辐射传递给动物。在另一些实施方案中，用咖玛刀将辐射传递给动物。

[0107]辐射源可以位于动物外部或内部。外部辐射疗法是最常见的并且涉及用例如线性加速器将一束高能量辐射通过皮肤指向肿瘤部位。虽然辐射光束集中在肿瘤部位，但是，其几乎不能避免接触正常的健康组织。但是，外部辐射通常可以被动物良好的耐受。内部辐射治疗涉及将一种辐射发射源，如小珠、导线、小丸、胶囊、微粒等植入到机体内的肿瘤部位或肿瘤附近，包括使用特异性靶向于癌细胞的传递系统(例如，使用与癌细胞结合配体相连的微粒)。在治疗后可以取出该类植入物，或者可以将其无活性地留在机体中。内部辐射治疗的类型非限制性地包括近程放射治疗、间质内照射、腔内辐射、放射免疫疗法等。

[0108]所述动物可以任选地接受放射致敏剂(例如，甲硝唑、米索硝唑、动脉内Budr、静脉内碘脱氧嘧啶核苷(IudR)、硝基咪唑、5-取代的-4-硝基咪唑类、2H-异吲哚二酮、[[(2-溴乙基)-氨基]甲基]-硝基-1H-咪唑-1-乙醇、硝基苯胺衍生物、DNA-affinic低氧选择性细胞毒素、卤化DNA配体、1，2，4苯并三嗪氧化物、2-硝基咪唑衍生物、包含氟的硝基吡咯衍生物、苯甲酰胺、烟酰胺、吖啶-插入剂、5-硫代四唑(thiotretrazole)衍生物、3-硝基-1，2，4-三唑、4，5-二硝基咪唑衍生物、羟基化texaphrins、顺铂、丝裂霉素、tiripazamine、亚硝基脲、巯基嘌呤、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、博来霉素、长春新碱、卡铂、表柔比星、多柔比星、环磷酰胺、长春地辛、依托泊苷、紫杉醇、热(过热)等)、辐射防护剂(例如，巯乙胺、氨基烷基二氢硫代磷酸酯、阿米斯丁(WR2721)、IL-1、IL-6等)。放射致敏剂增强了肿瘤细胞的杀灭。辐射防护剂保护健康组织不受辐射有害作用的影响。

[0109]可以给动物使用任何类型的辐射，只要辐射剂量可以被动物耐受并且不产生不可接受的消极副作用即可。适宜的放疗类项目包括例如电离(电磁)放疗(例如，X-射线或γ射线)或粒子束辐射治疗(例如，高能量线性辐射。电离辐射被定义为包含具有足以产生电离(即获得或损失电子)的能量的微粒或光子的辐射(如例如US5,770,581中所述，其在这里被全部引入作为参考)。临床医师可以至少部分控制辐射的作用。为了获得最大靶细胞接触和降低毒性，优选地对辐射的剂量进行分级给药。

[0110]被给药于动物的辐射的总剂量优选地为约0.01戈瑞(Gy)至约100Gy。在治疗过程中，更优选地使用约10Gy至约65Gy(例如，约15Gy、20Gy、25Gy、30Gy、35Gy、40Gy、45Gy、50Gy、55Gy、或60Gy)。虽然在一些实施方案中，可以在一天过程中给予辐射的全部剂量，但是理想地将该总剂量分成几部分并将其在几天内进行给药。令人希望地是在至少约3天，例如，至少5、7、10、14、17、21、25、28、32、35、38、42、46、52、或56天(约1-8周)的过程中进行放疗。因此，辐射的日剂量将包含约1-5Gy(例如，约1Gy、1.5Gy、1.8Gy、2Gy、2.5Gy、2.8Gy、3Gy、3.2Gy、3.5Gy、3.8Gy、4Gy、4.2Gy、或4.5Gy)，优选1-2Gy(例如，1.5-2Gy)。所述辐射的日剂量应足以诱导所靶向细胞的破坏。如果在一定时期内扩张(stretched)，则优选地不每天进行辐射，从而使得动物可以进行休息和实现该治疗的作用。例如，对于各治疗周而言，理想地连续5天进行辐射，然后两天不进行治疗，从而使得每周休息2天。但是，根据动物的响应和任何可能的副作用，辐射可以被1天/周、2天/周、3天/周、4天/周、5天/周、6天/周地进行或者一周7天都进行。可以在治疗周期的任何时间开始辐射治疗。优选地在第1或2周开始辐射，并且在该治疗周期的其余持续时间内进行辐射。例如，在包含对例如实体瘤治疗6周的治疗时期内，在该时期的1-6周或2-6周内进行辐射。或者，在包含5周的治疗时期的1-5周或2-5周内进行辐射。但是，并不是要用这些实例性放疗给药时间表对本发明进行限制。

[0111]还可以用抗微生物的治疗剂作为本发明的治疗剂。可以使用可以杀死、抑制或者减弱微生物功能的任何物质以及认为具有该类活性的任何物质。抗微生物剂非限制性地包括单独或联合使用的天然和合成抗生素、抗体、抑制性蛋白(例如，防御素)、反义核酸、破裂剂等。实际上，可以使用任何类型的抗生素，非限制性地包括抗菌剂、抗细菌剂、抗病毒剂、抗真菌剂等。

[0112]在本发明的一些实施方案中，式I的化合物和一种或多种治疗剂或抗癌剂在一种或多种下面的情况下被给药于动物：以不同的周期、不同的持续时间、不同的浓度、通过不同的给药途径等。在一些实施方案中，可以在使用所述治疗剂或抗癌剂之前给予所述化合物，例如可以在给予所述治疗剂或抗癌剂前0.5、1、2、3、4、5、10、12、或18小时，1、2、3、4、5、或6天，或1、2、3、或4周给予所述化合物。在一些实施方案中，所述化合物在给予所述治疗剂或抗癌剂之后进行给药，例如可以在给予所述抗癌剂后0.5、1、2、3、4、5、10、12、或18小时，1、2、3、4、5、或6天，或1、2、3、或4周给予所述化合物。在一些实施方案中，所述化合物和治疗剂或抗癌剂可以以不同的时间表并行给药，例如所述化合物可以被每天给药，而所述治疗剂或抗癌剂可以被每周给药一次、每隔周给药一次、每三周给药一次、或每四周给药一次。在其它一些实施方案中，所述化合物被每周给药一次，而所述治疗剂或抗癌剂被每天给药一次、每周给药一次、每两周给药一次、每三周给药一次、或每四周给药一次。

[0113]本发明范围中的组合物包括其中所含本发明化合物的数量为可以有效实现其所需目的数量的所有组合物。虽然个体的需要可能不同，但是本领域技术人员可以确定各组分有效量的最佳范围。被给药于哺乳动物，例如人的化合物的口服剂量典型地为0.0025至50mg/kg就对细胞凋亡有响应的病症进行治疗的哺乳动物体重/天，或等量其可药用的盐。为了治疗、改善或预防该类病症，口服给药量优选地为约0.01至约25mg/kg。对于肌内注射而言，所述剂量通常为口服剂量的大约一半。例如，适宜的肌内剂量为约0.0025至约25mg/kg，并且最优选地为约0.01至约5mg/kg。

[0114]所述单位口服剂量可以为约0.01至约1000mg，优选地为约0.1至约100mg所述化合物。所述单位剂量可以以各自包含约0.1至约10mg(方便地为约0.25至50mg)所述化合物或其溶剂化物的一片或多片或一枚或多枚胶囊的形式被给药一次或多次。

[0115]在典型的制剂中，所述化合物可以以约0.01至100mg/克载体的浓度存在。在一个优选的实施方案中，所述化合物的存在浓度为约0.07-1.0mg/ml，更优选地为约0.1-0.5mg/ml，最优选地为约0.4mg/ml。

[0116]除以新化学品的形式将所述化合物进行给药外，本发明的化合物还可以以包含适宜可药用载体的药物制剂的形式进行给药，所述适宜的可药用载体包括可以帮助将所述化合物加工成可以药用的制剂的赋形剂和助剂。所述制剂，特别是可以被口服或局部给药并且可用于优选给药类型的这些制剂，如片剂、糖锭剂、缓释锭剂和胶囊、口腔清洗剂和漱口剂、凝胶、液体混悬液、洗发剂、发用凝胶、香波并且还有可以被直肠给药的制剂，如栓剂、以及用于通过静脉内输入、注射、局部或口服给药的适宜溶液优选地包含约0.01至99％，优选约0.25至75％活性化合物和赋形剂。

[0117]本发明的药物组合物可以被给药于可以经历本发明化合物的有益作用的任何动物。其中最重要的该类动物是哺乳动物，例如，人，但是本发明并不因此受限。其它动物包括兽医动物(牛、羊、猪、马、狗、猫等)。

[0118]所述化合物以及其组合物可以用可以实现其所需目的的任何方法来进行给药。例如，可以通过胃肠外、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、经皮、颊、鞘内、颅内、鼻内或局部途径来进行给药。可以通过口服途径来进行交替或并行给药。给药剂量将取决于领受者的年龄、健康、和体重、以及如果有的话的并行治疗的种类、治疗频率、和所需作用的性质。

[0119]本发明的药物制剂是以本身已知的方式来进行制备的，例如可以通过常规混合、制粒、糖衣掩味、溶解、或冷冻干燥方法来进行制备。因此，用于口服应用的药物制剂可以通过将所述活性化合物与固体赋形剂混合物到一起，任选地将所得的混合物进行研磨和如果希望或需要的话，在加入适宜的助剂后对这些粒子的混合物进行加工从而得到片剂或糖锭剂核来获得。

[0120]适宜的赋形剂特别是填充剂如糖类，例如乳糖或蔗糖、甘露醇或山梨醇、纤维素制剂和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或磷酸氢钙、以及粘合剂如使用例如玉米淀粉、小麦淀粉、水稻淀粉、马铃薯淀粉的淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要的话，可以加入崩解剂如上述淀粉类物质并且还可以是羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或藻酸或其盐，如藻酸钠。助剂尤其是流动调节剂和润滑剂，例如，二氧化硅、滑石粉、硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁或硬脂酸钙、和/或聚乙烯醇。如果需要的话，可以给糖锭剂核提供耐胃液的适宜包衣。为此，可以使用浓的糖溶液，该糖溶液可任选地包含阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛、透明保护膜溶液(lacquer solutions)和适宜的有机溶剂或溶剂混合物。为了制备耐受胃液的包衣，使用适宜纤维素制剂如邻苯二甲酸乙酰基纤维素或邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素的溶液。例如为了进行鉴别或对活性化合物剂量的组合进行描述，可以向片剂或糖锭剂包衣中加入染料材料或颜料。

[0121]可以口服使用的其它药物制剂包括由明胶制成的推压-配合(push-fit)胶囊以及由明胶和增塑剂如甘油或山梨醇制成的密封的软胶囊。所述推压-配合的胶囊可以包含可混有填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉类物质、和/或润滑剂如滑石粉或硬脂酸镁、并任选地包含稳定剂的颗粒形式的活性化合物。对软胶囊而言，活性成分优选地被溶剂或混悬于适宜的液体，如脂肪油或液体石蜡中。此外，还可以加入稳定剂。

[0122]可以直肠使用的可能的药物制剂包括例如栓剂，其是由一种或多种活性化合物与栓剂基质的组合所组成的。适宜的栓剂基质有例如天然或合成的甘油三酯类、或石蜡烃类。此外，还可以使用由活性化合物和基质联合组成的直肠用明胶胶囊。可能的基质材料包括例如液体甘油三酯类、聚乙二醇类、或石蜡烃类。

[0123]用于胃肠外给药的适宜制剂包括水溶性形式的活性化合物，例如水溶性盐形式的化合物的水溶液和碱性溶液。此外，还可以使用适宜的油性注射混悬液的形式的活性化合物的混悬液。适宜的亲脂性溶剂或基质包括脂肪油，例如芝麻油、或合成的脂肪酸酯类，例如油酸乙酯或甘油三酯类或聚乙二醇-400。含水注射混悬液可以包含增加该混悬液粘度的物质，所述物质包括例如羧甲基纤维素钠、山梨醇、和/或葡聚糖。所述混悬液还可任选地包含稳定剂。

[0124]通过选择适宜的载体，本发明的局部组合物优选地被制备为油状物、霜剂、洗剂、软膏等形式。适宜的载体包括植物油或矿物油、白凡士林(白软石蜡)、支链脂类或油类、动物脂类和高分子量醇(高于C₁₂)。优选的载体是这些活性成分在其中可溶的载体。如果需要的话，其还可以包含乳化剂、稳定剂、润湿剂和抗氧剂以及赋予其颜色或香味的物质。此外，在这些局部制剂中还可以使用经皮渗透增强剂。在US专利3,989,816和4,444,762中可以找到该类增强剂的实例。

[0125]霜剂优选地是由矿物油、自乳化的蜂蜡和水制成的，将溶解于少量油如杏仁油中的活性成分混合于该混合物中。该类霜剂的一种典型实例是一种包含约40份水、约20份蜂蜡、约40份矿物油和约1份杏仁油的霜剂。

[0126]软膏可以通过将活性成分在植物油如杏仁油中的溶液与温热的软石蜡混合，然后使该混合物冷却来进行制备。该类软膏的一种典型实例是一种包含约30％重量杏仁油和约70％重量白软石蜡的软膏。

[0127]洗剂可以方便地通过将活性成分溶解于高分子量醇如丙二醇或聚乙二醇中来进行制备。

[0128]用下面的实施例来对本发明的方法和组合物进行非限制性说明。在临床治疗中通常会遇到对许多情况和参数进行其它适宜改变和调整的情况，其对于本领域技术人员而言都是显而易见的并且也被包括在本发明的主旨和范围中。

实施例1

MDM2抑制剂的设计方案

[0129]因为许多抗癌药是天然产物或者包含一种得自天然产物的核心药效团，所以对可以为能抑制p53和MDM2之间的相互作用的化合物的设计提供一种新框架的天然产物进行一项研究。

[0130]用具有ChemScore拟和功能的GOLD程序(2.1版)进行了一些计算对接研究(Computational docking studies)。在SYBYL 6.9和用Tripos力场(force field)最小化了的能量下构架一些配体结构。所述MDM2结构提取自与p53结合的MDM2的晶体结构(PDB代码：1YCR)。用SYBYL 6.9向该蛋白中加入氢气。将活性部位定义为在12半径球中包含所有的原子，其起端位于p53肽的Trp23的中心。选择标准的遗传算法方案来进行对接(docking)。对于各化合物而言，进行20次单独的对接运行。根据ChemScore的评分来对所产生的各配体的20种方案进行排序。用X-Score记录各配体最好序列的方案并用其来进一步进行结合模式分析。

[0131]SpirotryprostatinA代表一类由烟曲霉的发酵液分离出来的天然生物碱(Usui等人，Biochem.J.33：543(1998))(图1)。计算对接研究表明spirotryprostatin A不能在MDM2的疏水性裂缝种进行结合，但是对于一类新的p53-MDM2相互作用的抑制剂的设计而言，该螺环(羟吲哚-3，3′-吡咯烷)核结构可以被用作一种刚性框架。其羟吲哚单元精密模拟了形成氢键和与MDM2的疏水性相互作用中的Trp23残基。其吡咯烷基环提供了一种刚性框架，两个疏水性基团可以连接到其上来模拟Phe19和Leu26(图2A)。可以用具有不同构型的取代基来模仿许多模板化合物。其中，表明化合物1a在其氢键和与MDM2关键的疏水性相互作用方面很好地模拟了p53(图2A)。在所述羟吲哚环上的6-氯取代基占据了MDM2中的疏水小袋，已经表明其是一种可以有效增强MDM2的以p53为基础的肽抑制剂的亲合力的相互作用(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem 43：3205(2000))。

实施例2

荧光偏振结合试验

[0132]化合物1a是如流程图1中所示的那样用不对称的1，3-偶极反应(Sebehar等人，J.Am.Chem.Soc.122：5666(2000))作为关键步骤来进行合成的。通过对关键的中间体之一，(1″R，2″S，2′R，3′R，3S，4′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-(3-甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(图3)进行X-射线结晶分析来测定1a和所设计的其它类似物的绝对立体化学。

[0133]为了测定1a破坏MDM2和p53之间相互作用的能力，用重组人MDM2蛋白和用荧光标记物进行了标记的以p53为基础的肽来建立一种以荧光偏振(FP)为基础的结合试验(Garcia-Echeverria等人，J MedChem 43：3205(2000))。该被称为PMDM6-F的荧光探针具有序列(5-Fam-βAla-βAla-Phe-Met-Aib-pTyr-(6-Cl-1-Trp)-Glu-Ac3c-Leu-Asn-NH₂)(SEQ ID NO：1)，其中Fam是羧基荧光素(carboxyfluoroscein)，Aib是β-氨基异丁酸，和Ac3c是1-氨基环丙烷-1-甲酸。测得所设计的这种探针与MDM2蛋白的结合的K_d值是0.001μM(1nM±0.09)，表明这种探针以十分高的亲合力与MDM2蛋白的表面小袋进行结合(图4A)。通过用具有相同序列的未进行标记的肽与和MDM2蛋白进行结合的PMDM6-F的进行竞争性置换来证实试验特异性。证实相应的未进行标记的PMDM6肽(K_i＝0.7nM±0.1)的结合力显著高于野生型p53肽(PLSQETFSDLWKLLPEN-NH₂)(SEQ ID NO：2)(K_i＝6.7μM±1.2)(图4B)。在N末端与His-标记稠合的重组MDM2人蛋白(残基1-118)是稳定和可溶的，并且用其来进行以FP为基础的结合试验。

[0134]用一系列试验化合物在DMSO中的系列稀释物来进行所述剂量依赖性结合实验。将5μl位于试验缓冲液(100mM磷酸钾，pH7.5；100μg/ml牛γ球蛋白；0.02％叠氮化钠，购自Invitrogen LifeTechnology)中的试验样品和预培养的MDM2蛋白(0.010μM)和PMDM6-F肽(0.001μM)的样品在Dynex96孔黑色圆底板(FisherScientific)中进行混合，从而得到125μl的终体积。对于各试验而言，都包括包含MDM2蛋白和PMDM6-F的结合肽对照(相当于0％抑制)和仅包含游离PMDM6-F的游离肽对照(相当于100％抑制)。在培养3小时后，当该结合达到平衡时，用ULTRA READER(Tecan U.S.Inc.，Research Triangle Park，NC)来测量其偏振值。用非线性最小二乘法分析来由一种图测定其IC₅₀值(其下50％的结合肽被置换的抑制剂浓度)。用GRAPHPAD PRISM软件(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)来进行曲线拟和。

[0135]为了计算抑制剂的亲合力常数(K_i)，使用所建立的用于在以FP为基础的结合试验中计算K_i值的下面的方程：

K_i＝[I]₅₀/([L]₅₀/K_d+[P]₀/K_d+1)

其中[I]₅₀表示在50％抑制下游离抑制剂的浓度，[L]₅₀表示在50％抑制下进行了标记的游离配体的浓度，[P]₀表示在0％抑制下游离蛋白的浓度，和K_d表示蛋白-配体复合体的解离常数。为了用所示方程精确计算抑制剂的K_i值，建立了一种计算过程来计算该方程中所需所有参数的准确值(Nikolovska-Coleska et al，Anal. Biochem.332：261(2004))。还建立了一种以网络为基础的(web-based)计算机程序来根据相同的方程计算以FP为基础的结合试验中的抑制剂的K_i值。

[0136]以荧光标记的p53为基础的肽与MDM2具有1nM的K_d值，其与之前所报道的其对MDM2具有高亲合力的报道相一致(Garcia-Echeverria等人，Med.Chem 43：3205(2000))。在这种结合试验中，测得被用作阳性对照的天然p53肽(残基13-29)和1a的K_i值分别为6.7μM和8.5μM(图5)。因此，1a是一种十分有效的p53-MDM2相互作用的抑制剂。

[0137]对与MDM2结合的1a模式进行的分析(图2)表明为了与MDM2更好地进行相互作用，可以进一步对1a进行优化。例如，1a的苯基环与被Phe19的侧链占据的疏水性结合袋进行结合，但是在这种袋中仍然还有一些空间。类似地，1a的异丁基填充了被Leu26占据的疏水性结合袋，但是其可以容纳更大的疏水基团。设计了一些新的1a类似物来对在这两个疏水结合部位进行的相互作用进行进一步优化。

[0138]模型研究表明在1a苯基环的间位上引入氯原子可以开发在这种结合部位可获得的另外的空间并改善所述疏水性相互作用。这些研究还表明在1a苯基环的对-或邻-位引入氯原子可以破坏与MDM2的结合。合成了具有间位-Cl的化合物1b并测得其具有300nM的K_i值。因此，其效力比1a高28倍(图5)。为了进一步证实该模型预测，合成了具有对位-Cl的化合物(1c)并发现其效力比1b低26倍(K_i＝7.7μM)。

[0139]如上所示，1a中的异丁基不是最理想的并且用1b作为模板对在这种部位进行的疏水性相互作用进一步进行优化。模型研究表明2，2-二甲基丙基可以增强所述的疏水性相互作用(图2)并且合成了所得的化合物1d。发现其具有86nM的K_i值并且因此是一种十分有效的p53-MDM2相互作用的抑制剂，其效力比天然p53肽高78倍。

[0140]为了证实在这种部位的疏水性相互作用的重要性，设计和合成了化合物1e和1f，其分别具有比1d小和比1d大的疏水基团。模型研究表明1e和1f的效力都应低于1d，并且实际上，以FP为基础的结合试验证实K_i值分别为650和390nM的1e和1f的效力远远低于1d(图5)。

[0141]

实施例3

细胞生长抑制

[0142]非肽类小分子抑制剂优于以肽为基础的抑制剂的一个主要的优点是其优良的细胞渗透性。预测p53-MDM2相互作用的有效的非肽类抑制剂如1d将通过刺激p53的活性来有效抑制具有野生型p53的癌细胞的细胞生长和分裂。此外，预测其在丧失p53或者具有突变的非功能性p53的癌症细胞中具有选择性。为了对这种预测进行检验，用人前列腺癌LNCaP(p53野生型)和PC-3(p53无效力)细胞系来建立一种细胞生长试验。还在正常前列腺上皮细胞系上检查了这些化合物对正常细胞的毒性作用。

[0143]将细胞以3-4×10³个细胞/孔的密度接种到96孔平底细胞培养板中并将其在存在一些化合物的情况下培养4天。在用浓度增加的所述化合物进行处理后，用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4二磺基苯基)-2H-四唑翁单钠盐(Dojindo MolecularTechnologies Inc.，Gaithersburg，马里兰)来测定细胞生长抑制速率。将WST-8以10％的终浓度加入到各孔中并将这些板在37℃下培养2-3小时。在板式读数器中在450nm下测量这些样品的吸光度(MolecularDevice-TECAN ULTRA)。通过对未进行处理的细胞和用所述化合物进行了处理的细胞的吸光度进行比较来计算将细胞生长抑制50％的化合物浓度(IC₅₀)。所述化合物以剂量依赖性方式诱导了细胞生长抑制。

[0144]如所预测的那样，化合物1d以0.83μM的IC₅₀值十分有效地抑制了包含野生型p53的LNCaP细胞的细胞生长(图6)。化合物1b、1e和1f也分别以2.1、2.7、和1.9μM的IC₅₀值有效抑制了细胞生长(图6)。其在LNCaP细胞的细胞生长抑制方面的活性完全与其与MDM2的亲合力相关。用丧失p53的PC-3细胞来计算细胞选择性。如所预期的那样，这些MDM2抑制剂在PC-3细胞中的效力比在LNCaP细胞中的效力低得多(图7)。例如，1d在PC-3细胞中的活性(IC₅₀值为22.5μM)比其在LNCaP细胞中的活性低27倍。

[0145]因为正常细胞也具有野生型p53，所以在研制作为新抗癌药的p53-MDM2相互作用的抑制剂时一种可能的忧虑是其可能无选择性和以与杀死癌细胞的活性相等的活性杀死正常细胞。用具有野生型p53的正常人前列腺上皮细胞(PrEC)对化合物1d进行评估并且测得1d在PrEC细胞中具有6.0μM的IC₅₀值(图8)。因此，1d在PrEC细胞中的效力比在LNCaP中的效力低13倍并且其对正常细胞表现出良好的选择性。

实施例4

3-E-亚苄基-6-氯-1，3-二氢-吲哚-2-酮

[0146]一般技术：元素分析是由Department of Chemistry of theUniversity of Michigan，Ann Arbor，MI进行的。在给出分子式的情况中，除非特别说明，否则发现元素组成在理论值的0.3％之内。旋光度是在589nm下，在25℃下在Perkin-Elmer 241旋光计上(在CHCl₃中)进行测定的。单晶X-射线分析是在Naval ResearchLaboratory，Washington，DC中进行的。¹H NMR光谱是在300MHz下进行记录的和¹³C NMR光谱是在75MHz下在Bruker AVANCE300分光计上进行记录的。所有的NMR光谱都是在CDCl₃中获得的，并且其结果被记录为得自四甲基硅烷(TMS)的每百万份低磁场的份数(ppm)的形式。对于NMR信号的多重性而言，使用下面的缩写：s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，dd＝双重双峰，dt＝双三重峰，dq＝双四重峰，br＝宽。

[0147]方法A：向6-氯-羟吲哚(1.67g，10.0mmol)在60mLCH₂Cl₂∶CH₃CN(1∶1)中的溶液中加入苯甲醛(10.0mmol)和KF-Al₂O₃(10g)。在室温下10分钟后，真空除去溶剂，将残余物与该烧瓶一起放置在一个微波烘箱中并将其加热5分钟(60～80W)。用150mL CH₃CN进行萃取，将固体滤出，真空除去溶剂，得到粗品，将其在不进行进一步纯化的情况下进行应用。

[0148]方法B：向6-氯-羟吲哚(1.67g，10.0mmol)在60mL甲醇中的溶液中加入苯甲醛(10.0mmol)和哌啶(10g)并将所得的混合物回流4小时。将沉淀滤出并用冷甲醇对其进行洗涤，从而得到粗品。

[0149]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.90(br，1H)，7.63(d，J＝5.67Hz，2H)，7.55(d，J＝8.27Hz，1H)，7.49(d，J＝5.87Hz，2H)，7.39(d，J＝7.85Hz，2H)，6.90(s，1H)，6.85(d，J＝8.22Hz，1H)，4.66(s，1H)。

实施例5

[0150]用类似的操作制备下面的化合物。

a)3-E-6-氯-3-(3-氯-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

[0151]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.08(br，1H)，7.76(s，1H)，7.62～7.61(m，1H)，7.55～7.43(m，4H)，6.92(d，J＝1.52Hz，1H)，6.89(dd，J＝1.91，8.18Hz，1H)。

b)3-E-亚苄基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

[0152]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.32(br，1H)，7.87(s，1H)，7.77～7.66(m，3H)，7.75～7.43(m，3H)，7.24(td，J＝1.10，7.69Hz，1H)，6.93～6.87(m，2H)。

c)3-E-6-氯-3-(4-氯-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

d)3-E-亚苄基-6-溴-1，3-二氢-吲哚-2-酮

e)3-E-亚苄基-6-氟-1，3-二氢-吲哚-2-酮

f)3-E-亚苄基-6-三氟甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

g)3-E-6-氯-3-(4-溴-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

h)3-E-6-氯-3-(4-甲基-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

i)3-E-6-氯-3-(4-甲氧基-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

j)3-E-6-氯-3-(4-三氟甲基-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

k)3-E-6-氯-3-(3，4-二氯-亚苄基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

l)3-E-6-氯-3-(3，5-二氯-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

m)3-E-6-溴-3-(3-溴-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

n)3-E-6-氯-3-(3，3-二甲基-亚丁基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

o)3-E-6-氯-3-(3-甲基-亚丁基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

p)3-E-6-氯-3-(2-环己基-亚乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

q)3-E-6-氯-3-环己基亚甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

r)3-E-6-氯-3-环戊基亚甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

s)3-E-6-氯-3-噻吩-2-基亚甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

t)3-E-6-氯-3-吡啶-2-基亚甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

u)3-E-3-(6-氯-吡啶-2-基亚甲基)-6-氯-1，3-二氢-吲哚-2-酮

v)3-E-3-(3-氯-2-氟-亚苄基)-6-氯-1，3-二氢-吲哚-2-酮

w)3-E-3-(3-氯-4-氟-亚苄基)-6-氯-1，3-二氢-吲哚-2-酮

x)3-E-6-氯-3-(3-氯-5-氟-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

y)3-E-3-(3-溴-亚苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

z)3-E-3-(3-溴-亚苄基)-6-三氟甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

实施例6

(2′R，3S，4′R，5′R)6-溴-4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-29)

[0153]在氩气下，向一个具有搅拌棒的100mL烧瓶中加入(2S，3R)-2，3，5，6-四氢-2，3-二苯基-1，4-恶嗪-6-酮(1.0g，3.96mmol)、3-E-(3-溴)-亚苄基-6-溴-1，3-二氢-吲哚-2-酮(4.75mmol)、2g新活化的4分子筛、3，3-二甲基-丁醛(4.75mmol)和甲苯(50mL)。将该混合物加热至70℃并将其在该温度下保持5小时。将该混合物冷却至室温并将分子筛滤出。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述1，3-偶极产物。

[0154]将所得的1，3-偶极产物(2.0mmol)溶解于THF-二甲基胺(4M，5mL)中并将所得的溶液在室温下搅拌一夜。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到(1″R，2″S，2′R，3′R，3S，4′R)6-溴-4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺。

[0155]在0℃下，向(1″R，2″S，2′R，3′R，3S，4′R)6-溴-4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(2.0mmol)在CH₂Cl₂-MeOH(10mL，1∶1)中的溶液中加入Pb(OAc)₄(1.34g，3.0mmol)。将该反应在0℃下搅拌约5-10分钟，然后将该溶液用一根短硅胶柱进行过滤。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0156][α]²⁵ _D 82.7(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.15(br，1H)，7.20～7.28(m，2H)；]7.18～7.03(m，2H)，6.97(s，1H)，6.86(d，J＝8.00Hz，1H)，6.34(d，J＝8.08Hz，1H)，4.54(d，J＝7.50Hz，1H)，3.99(d，J＝7.49Hz，1H)，3.63(br，1H)，3.51(d，J＝9.13Hz，1H)，3.03(s，3H)，2.91(s，3H)，1.48(dd，J＝9.85，14.01Hz，1H)，0.90(d，J＝13.50Hz，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.16，170.08，142.73，141.20，131.55，130.49，130.06，127.52，127.09，126.08，124.60，122.58，121.46，113.17，68.03，65.15，64.49，58.08，43.12，37.21，36.19，30.10，29.79。

实施例7

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-苯基-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸

二甲基酰胺

[0157][α]²⁵ _D-81.9(c，0.3，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.25(br，1H)，7.73(d，J＝7.88Hz，1H)，7.42～6.93(m，16H)，6.78(s，1H)，5.20(s，1H)，4.64(d，J＝10.07Hz，1H)，4.59(s，1H)，4.52(d，J＝3.13Hz，1H)，4.17～4.10(m，1H)，3.50(d，J＝10.83Hz，1H)，2.86(s，3H)，2.64(dd，J＝12.45，13.20Hz，1H)，1.95(s，3H)，1.73～1.65(m，1H)，1.13～1.07(m，1H)，0.85(d，J＝6.38Hz，3H)，0.54(d，J＝6.08Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ176.43，174.25，140.95，140.55，135.38，133.91，133.77，131.39，130.81，129.78，127.96，127.81，127.58，126.58，125.90，125.36，122.19，110.52，75.52，75.10，73.58，64.71，60.59，58.45，57.52，37.34，36.54，36.30，29.56，28.12。

实施例8

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

[0158][α]²⁵ _D-76.0(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.15(br，1H)，7.75(d，J＝7.91Hz，1H)，7.21～6.86(m，14H)，6.82(d，J＝7.82Hz，1H)，6.73(s，1H)，5.18(s，1H)，4.69(d，J＝10.28Hz，1H)，4.51(d，J＝3.45Hz，1H)，4.32(br，1H)，4.22～4.11(m，1H)，3.48(d，J＝10.99Hz，1H)，2.90(s，3H)，2.57(dd，J＝12.53，13.24Hz，1H)，2.06(s，3H)，1.85～1.56(m，1H)，1.10～0.95(m，1H)，0.84(d，J＝6.41Hz，3H)，0.47(d，J＝6.90Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ176.06，173.83，140.80，140.61，136.27，135.04，134.06，133.86，130.81，130.71，129.54，129.23，128.09，127.87，127.62，127.38，126.70，125.80，125.54，122.39，110.60，73.92，72.51，72.23，62.55，60.41，56.75，39.23，36.59，26.43，23.39，21.03。

实施例9

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(4-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

[0159][α]²⁵ _D-93.3(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.80(br，1H)，7.74(d，J＝8.09Hz，1H)，7.34～6.90(m，14H)，6.91(d，J＝8.41Hz，1H)，6.78(s，1H)，5.18(s，1H)，4.65(d，J＝9.89Hz，1H)，4.51(d，J＝3.54Hz，1H)，4.36(br，1H)，4.18～4.10(m，1H)，3.48(d，J-10.96Hz，1H)，2.89(s，3H)，2.59(dd，J＝12.39，12.77Hz，1H)，2.05(s，3H)，1.70～1.60(m，1H)，1.10～1.00(m，1H)，0.85(d，J＝6.28Hz，3H)，0.49(d，J＝6.10Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ175.72，173.98，140.71，140.59，135.08，134.02，133.80，132.58，130.86，130.70，128.25，127.87，127.62，126.70，125.80，125.56，122.42，110.50，74.54，72.64，72.19，62.52，60.59，60.41，56.67，39.31，36.58，26.44，23.38，21.06。

实施例10

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

[0160][α]²⁵ _D-92.7(c，0.6 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.85(br，1H)，7.45(d，J＝8.10Hz，2H)，7.41-6.72(m，14H)，6.68(d，J＝7.72Hz，1H)，5.43(d，J＝3.24Hz，1H)，4.84(br，1H)，4.50(d，J＝3.55Hz，1H)，4.38(d，J＝10.46Hz，1H)，3.98(d，J＝10.46Hz，1H)，3.65(d，J＝9.00Hz，1H)，2.97(dd，J＝9.00Hz，12.00Hz，1H)，2.86(s，3H)，1.94～1.85(m，1H)，1.93(s，3H)，0.79(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ174.32，140.84，135.61，135.32，134.20，133.71，130.97，129.51，129.08，128.16，128.02，127.60，127.41，126.48，125.89，125.17，122.41，110.48，74.85，73.82，72.00，62.31，60.94，60.41，57.92，42.19，36.69，30.31，29.68。

实施例11

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-丙基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-

甲酸二甲基酰胺

[0161][α]²⁵ _D-73.9(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.27(br，1H)，7.66(d，J＝8.01Hz，1H)，7.63(d，J＝6.97Hz，1H)，7.42(d，J＝6.99Hz，1H)，7.32(d，J＝7.26Hz，1H)，7.28～6.57(m，14H)，5.14(s，1H)，4.60(d，J＝10.06Hz，1H)，4.58～4.48(m，1H)，4.48(d，J＝3.32Hz，1H)，4.17～4.10(m，1H)，3.37(d，J＝10.11Hz，1H)，2.87(s，3H)，2.56～2.40(m，1H)，1.99(s，3H)，2.00～1.88(m，1H)，1.10～0.87(m，2H)，0.27～0.72(m，3H)。

实施例12

(1″R，2″S，2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-2′-(3-甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

[0162][α]²⁵ _D-85.6(c，0.4 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.68(br，1H)，7.63(d，J＝7.77Hz，1H)，7.28～6.81(m，16H)，5.13(s，1H)，4.59(d，J＝10.12Hz，1H)，4.54(s，1H)，4.46(d，J＝2.94Hz，1H)，4.12(d，J＝10.10Hz，1H)，3.31(d，J＝10.26Hz，1H)，2.85(s，3H)，2.60～2.45(m，1H)，1.99(s，3H)，1.95～1.84(m，1H)，1.48～1.42(m，1H)，0.95～0.82(m，1H)，0.77(t，J＝5.50Hz，6H)，0.70～0.60(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ176.58，173.82，140.98，140.53，136.12，135.21，134.03，133.76，130.75，129.43，129.16，128.04，127.81，127.59，127.32，126.64，125.86，125.30，122.29，110.75，75.18，74.99，73.10，62.68，60.39，56.99，37.22，36.57，36.42，29.19，28.08，22.61。

实施例13

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3，4-二氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-32)

[0163]这种化合物是用与实施例6的方法相似的方法来进行合成的。

[0164][α]²⁵ _D 128.0(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.64(s，1H)，7.35(s，1H)，7.22(d，J＝1.79Hz，1H)，6.97(dd，J＝1.80，8.30Hz，1H)；6.88(d，J＝1.65Hz，1H)，6.78(dd，J＝1.75，8.10Hz，1H)，6.35(d，J＝8.06Hz，1H)，4.47(d，J＝7.92Hz，1H)，4.07(d，J＝7.91Hz，1H)，3.48(d，J＝9.47Hz，1H)，3.03(s，3H)，2.91(s，3H)，1.49(dd，J＝9.88，14.3Hz，1H)；0.90～0.88(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.88，169.71，142.30，139.07，133.72，132.55，131.32，130.41，127.14，126.60，125.69，121.99，110.41，68.64，65.41，64.20，57.67，43.15，37.28，36.16，30.14，29.81。

实施例14

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-(3-三氟甲基-苯基)-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-21)

[0165]这种化合物是用与实施例6的方法相似的方法来进行合成的。

[0166][α]²⁵ _D 61.0(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.19(br，1H)，7.45～7.21(m，4H)，6.82(d，J＝1.82Hz，1H)，6.70(dd，J＝1.90，8.12Hz，1H)，6.39(d，J＝8.11Hz，1H)，4.57(d，J＝8.28Hz，1H)，4.18(d，J＝8.10Hz，1H)，3.50(d，J＝9.80Hz，1H)，2.99(s，3H)，2.93(s，3H)，1.52(dd，J＝9.84，14.22Hz，1H)，0.96(d，J＝14.23Hz，1H)，0.90(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.70，169.84，142.03，139.71，133.64，132.33，129.09，126.72，125.73，125.06，124.09，121.89，110.14，68.44，65.05，64.38，58.55，43.26，37.02，36.15，30.17，29.82；EI/MS，508(M⁺+1)；HRMS C₂₆H₃₀ClF₃N₃O₂([M+H]⁺)需要值：508.1979，实测值：508.1965。

实施例15

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(4-氯-苯基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-10)

[0167]这种化合物是用与实施例6的方法相似的方法来进行合成的。

[0168][α]²⁵ _D 68.0(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.98(br，1H)，7.21(d，J＝8.18Hz，2H)，7.09(d，J＝8.17Hz，2H)，6.86(s，1H)，6.74(d，J＝7.75Hz，1H)，6.46(d，J＝7.78Hz，1H)，4.59(d，J＝7.63Hz，1H)，3.99(d，J＝7.64Hz，1H)，3.56(m，1H)，2.96(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68～1.53(m，2H)，0.98～0.88(m，1H)，0.79(d，J＝12.1Hz，3H)，0.77(d，J＝12.0Hz，3H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.86，170.40，142.35，136.85，133.62，133.28，130.04，128.76，127.16，125.73，121.87，110.29，68.90，64.35，63.60，59.40，38.66，37.24，36.24，25.83，23.42，21.76；EI/MS，460(M⁺+1)；HRMS C₂₄H₂₈Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：460.1559，实测值：460.1552。

实施例16

(2′S，3R，4′S，5′S)6-氯-4′-(4-氯-苯基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-38)

[0169][α]²⁵ _D-65.8(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.98(br，1H)，7.21(d，J＝8.18Hz，2H)，7.09(d，J＝8.17Hz，2H)，6.86(s，1H)，6.74(d，J＝7.75Hz，1H)，6.46(d，J＝7.78Hz，1H)，4.59(d，J＝7.63Hz，1H)，3.99(d，J＝7.64Hz，1H)，3.56(m，1H)，2.96(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68～1.53(m，2H)，0.98～0.88(m，1H)，0.79(d，J＝12.1Hz，3H)，0.77(d，J＝12.0Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.86，170.40，142.35，136.85，133.62，133.28，130.04，128.76，127.16，125.73，121.87，110.29，68.90，64.35，63.60，59.40，38.66，37.24，36.24，25.83，23.42，21.76；EI/MS，460(M⁺+1)；HRMSC₂₄H₂₈Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：460.1559，实测值：460.1552。

实施例17

(2′S，3R，4′S，5′S)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

[0170][α]²⁵ _D-50.0(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.30(br，1H)，7.27～6.95(m，4H)，6.88(s，1H)，6.73(d，J＝8.00Hz，1H)，6.47(d，8.01Hz，1H)，4.61(d，J＝7.66Hz，1H)，4.00(d，J＝7.64Hz，1H)，3.58～3.54(m，1H)，2.97(s，3H)，2.88(s，3H)，1.65～1.45(m，2H)，0.98～0.91(m，1H)，0.78(d，J＝6.63Hz，3H)，0.76(d，J＝6.53Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.98，170.23，142.44，140.40，134.35，133.58，129.77，128.68，127.64，126.94，125.64，121.75，110.36，68.84，64.08，63.59，59.50，38.54，37.22，36.21，25.78，23.38，21.72；EI/MS，460(M⁺+1)；HRMS C₂₄H₂₈Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：460.1559，实测值：460.1551。

实施例18

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-异丁基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-9)

[0171][α]²⁵ _D 50.0(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.30(br，1H)，7.27～6.95(m，4H)，6.88(s，1H)，6.73(d，J＝8.00Hz，1H)，6.47(d，8.01Hz，1H)，4.61(d，J＝7.66Hz，1H)，4.00(d，J＝7.64Hz，1H)，3.58～3.54(m，1H)，2.97(s，3H)，2.88(s，3H)，1.65～1.45(m，2H)，0.98～0.91(m，1H)，0.78(d，J＝6.63Hz，3H)，0.76(d，J＝6.53Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.98，170.23，142.44，140.40，134.35，133.58，129.77，128.68，127.64，126.94，125.64，121.75，110.36，68.84，64.08，63.59，59.50，38.54，37.22，36.21，25.78，23.38，21.72；EI/MS，460(M⁺+1)；HRMS C₂₄H₂₈Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：460.1559，实测值：460.1551。

实施例19

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-异丁基-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环

[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-5)

[0172][α]²⁵ _D 24.7(c，0.8 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.20(br，1H)，7.38～7.01(m，5H)，6.80(d，J＝1.86Hz，1H)，6.66(dd，J＝1.91，8.10Hz，1H)，6.32(d，J＝8.13Hz，1H)，4.63(d，J＝7.12Hz，1H)，3.94(d，J＝7.18Hz，1H)，3.65～3.55(m，1H)，2.97(s，3H)，2.75(s，3H)，1.76～1.51(m，2H)，0.99～0.88(m，1H)，0.82(d，J＝6.63Hz，3H)，0.78(d，J＝6.52Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.54，170.75，142.16，138.68，133.34，128.78，128.63，128.43，128.30，127.56，127.11，125.85，121.67，109.86，68.75，64.59，63.72，59.87，38.58，37.14，36.23，25.85，23.49，21.74；EI/MS，426(M⁺+1)；HRMS C₂₄H₂₉ClN₃O₂([M+H]⁺)需要值：426.1948，实测值：426.1937。

实施例20

(2′S，3R，4′S，5′S)6-氯-2′-异丁基-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-4)

[0173][α]²⁵ _D-24.7(c，0.8 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.20(br，1H)，7.38～7.01(m，5H)，6.80(d，J＝1.86Hz，1H)，6.66(dd，J＝1.91，8.10Hz，1H)，6.32(d，J＝8.13Hz，1H)，4.63(d，J＝7.12Hz，1H)，3.94(d，J＝7.18Hz，1H)，3.65～3.55(m，1H)，2.97(s，3H)，2.75(s，3H)，1.76-1.51(m，2H)，0.99～0.88(m，1H)，0.82(d，J＝6.63Hz，3H)，0.78(d，J＝6.52Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.54，170.75，142.16，138.68，133.34，128.78，128.63，128.43，128.30，127.56，127.11，125.85，121.67，109.86，68.75，64.59，63.72，59.87，38.58，37.14，36.23，25.85，23.49，21.74；EI/MS，426(M⁺+1)；HRMSC₂₄H₂₉ClN₃O₂([M+H]⁺)需要值：426.1948，实测值：426.1937。

实施例21

(2′S，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(3-甲基-丁基)-2-氧代1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-16)

[0174][α]²⁵ _D 25.1(c，0.5 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.15(br，1H)，7.21～7.07(m，4H)，6.81(s，1H)，6.76(dd，J＝1.85，8.06Hz，1H)，6.49(d，J＝8.08Hz，1H)，4.69(d，J＝7.90Hz，1H)，3.96(d，J＝7.89Hz，1H)，3.53(dd，J＝8.64，9.19Hz，1H)，2.97(s，3H)，2.85(s，3H)，1.68～1.56(m，1H)，1.46～1.36(m，1H)，1.30～1.20(m，2H)，1.11～0.99(m，1H)，0.78(d，J＝6.46Hz，3H)，0.75(d，J＝6.48Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.00，170.08，141.83，140.20，134.45，133.70，129.82，128.73，127.78，127.13，126.93，125.94，121.98，110.03，70.69，63.56，63.33，59.70，40.43，37.21，36.51，27.86，27.33，22.54，22.15.EI/MS，474(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：474.1715，实测值：474.1714。

实施例22

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4′-(3-碘-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-22)

[0175][α]²⁵ _D 84.2(c，0.4 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.79(br，1H)，7.50(m，2H)，7.15(d，J＝7.68Hz，1H)，6.96(dd，J＝7.80，8.10Hz，1H)，6.81(s，1H)，6.73(dd，J＝1.59，8.10Hz，1H)，6.40(d，J＝9.10Hz，1H)，4.52(d，J＝7.50Hz，1H)，3.96(d，J＝7.50Hz，1H)，3.50(d，J＝9.96Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.91(s，3H)，1.48(dd，J＝9.90，14.11Hz，1H)，0.89-0.85(m，1H)，0.84(s，9H)，¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.03，170.10，142.37，141.28，137.15，136.45，133.54，129.98，128.12，126.60，125.82，121.75，110.28，94.45，68.18，65.17，64.43，60.40，43.17，37.23，36.19，30.13，29.82；EI/MS，566(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀ClIN₃O₂([M+H]⁺)需要值：566.1071，实测值：566.1063。

实施例23

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-7)

[0176][α]²⁵ _D 53.3(c，0.9 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.68(br，1H)，7.28～7.12(m，5H)，6.78(d，J＝1.84Hz，1H)，6.43(dd，J＝1.88，8.14Hz，1H)，6.23(d，J＝8.13Hz，1H)，4.60(d，J＝6.81Hz，1H)，3.92(d，J＝6.84Hz，1H)，3.53(d，J＝8.99Hz，1H)，3.39(br，1H)，2.98(s，3H)，2.76(s，3H)，1.48(dd，J＝9.64，14.35Hz，1H)，0.97～0.90(m，1H)，0.86(s，9H)，EI/MS，440(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀ClN₃O₂([M+H]⁺)需要值：440.2105，实测值：440.2102。

实施例24

(2′S，3R，4′S，5′S)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-14)

[0177][α]²⁵ _D-50.6(c，0.6 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.68(br，1H)，7.28～7.12(m，5H)，6.78(d，J＝1.84Hz，1H)，6.43(dd，J＝1.88，8.14Hz，1H)，6.23(d，J＝8.13Hz，1H)，4.60(d，J＝6.81Hz，1H)，3.92(d，J＝6.84Hz，1H)，3.53(d，J＝8.99Hz，1H)，3.39(br，1H)，2.98(s，3H)，2.76(s，3H)，1.48(dd，J＝9.64，14.35Hz，1H)，0.97～0.90(m，1H)，0.86(s，9H)，EI/MS，440(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀ClN₃O₂([M+H]⁺)需要值：440.2105，实测值：440.2102。

实施例25

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3，5-二氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-20)

[0178][α]²⁵ _D 69.1(c，0.6 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.03(br，1H)，7.33(d，J＝8.00Hz，1H)，7.13(s，1H)，7.12(dd，J＝1.84，7.95Hz，1H)，7.04(d，J＝1.85Hz，2H)，6.80(d，1.84Hz，1H)，4.73(d，J＝8.52Hz，1H)，4.48(d，J＝8.51Hz，1H)，3.68(d，J＝9.12Hz，1H)，3.08(s，3H)，2.96(s，3H)，1.44～1.22(m，1H)，0.99～0.89(m，1H)，0.84(s，9H)，¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.07，172.13，141.75，139.98，134.69，134.00，127.69，127.04，126.36，123.48，123.11，110.55，66.57，66.08，61.65，56.48，43.34，37.49，36.32，30.15，29.78。

实施例26

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0179][α]²⁵ _D 88.5(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.91(br，1H)，7.18～7.14(m，3H)，7.05～7.02(m，1H)，6.85(d，J＝1.58Hz，1H)，6.72(dd，J＝1.61，8.11Hz，1H)，6.41(d，J＝8.12Hz，1H)，4.50(d，J＝7.42Hz，1H)，3.99(d，J＝7.49Hz，1H)，3.68～3.35(m，7H)，2.41～2.33(m，2H)，2.25(s，3H)，1.47(dd，J＝9.90，14.15Hz，1H)，1.03～0.88(m，1H)，0.72(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.12，168.55，142.42，140.76，134.47，133.62，129.89，128.73，127.69，127.06，126.42，125.79，121.85，110.30，67.99，65.24，64.27，58.01，54.57，54.29，45.49，45.09，43.08，42.03，30.13，29.79。

实施例27

(2′S，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(4-氯-苯基)-4′-(2′，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二乙基酰胺(KE-39)

[0180][α]²⁵ _D 124.0(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.46(br，1H)，7.25～7.09(m，3H)，7.02(dd，J＝7.85，7.93Hz，1H)，6.92(s，1H)，6.75(s，1H)，6.43(d，J＝7.45Hz，1H)，4.31(s，1H)，4.02(d，J＝6.82Hz，1H)，3.28(s，1H)，3.12～3.06(m，1H)，3.06(s，3H)，2.96(s，3H)，1.59(dd，J＝7.69，7.80Hz，1H)，1.23～1.18(m，1H)，0.55(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.58，170.44，142.54，137.79，133.99，133.84，129.18，129.00，128.19，126.32，126.19，124.28，122.13，110.61，74.67，66.15，60.40，50.42，42.21，38.88，37.68，30.30，28.90。

实施例28

(2′R，3S，4′R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-(吗啉-4-羰基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮(KE-28)

[0181]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.36(br，1H)，7.34～7.25(m，2H)，7.14～7.04(m，2H)，6.86(s，1H)，6.74(d，J＝7.87Hz，1H)，6.44(d，J＝7.99Hz，1H)，4.45(d，J＝7.64Hz，1H)，4.05(d，J＝7.51Hz，1H)，3.66～3.23(m，9H)1.53～1.43(m，1H)，1.05～0.90(m，1H)，0.85(s，9H)。

实施例29

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-(吗啉-4-羰基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮(KE-26)

[0182][α]²⁵ _D 56.5(c，0.2 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.76(br，1H)，7.18～7.15(m，3H)，7.04～7.01(m，1H)，6.86(d，J＝1-86Hz，1H)，6.72(dd，J＝1.76，8.10Hz，1H)，6.42(d，J＝8.13Hz，1H)，4.46(d，J＝7.57Hz，1H)，4.04(d，J＝7.55Hz，1H)，3.66～3.30(m，9H)，1.46(dd，J＝9.94，14.09Hz，1H)，1.04-0.89(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.05，168.71，142.40，140.74，134.48，133.62，129.90，128.66，127.71，127.08，126.37，125.75，121.84，110.32. 68.29，66.78，66.58，65.41，64.26，57.97，46.17，43.02，30.13，29.80。

实施例30

(2′R，3S，4′R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-23)

[0183]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.73(br，1H)，7.33～7.28(m，2H)，7.14～7.07(m，2H)，6.86(d，J＝1.79Hz，1H)，6.72(dd，J＝1.86，8.10Hz，1H)，6.40(d，J＝8.13Hz，1H)，4.54(d，J＝7.54Hz，1H)，4.00(d，J＝7.53Hz，1H)，3.50(d，J＝8.63Hz，1H)，2.92(s，3H)，2.87(s，3H)，1.52～1.44(m，1H)，0.97～0.92(m，1H)，0.89(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.49，170.49，142.76，141.68，134.00，132.02，130.95，130.51，127.96，127.02，126.23，123.05，122.24，110.70，62.59，65.62，64.85，60.84，58.59，43.61，37.66，36.62，30.57，30.25。EI/MS，518(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₉BrClN₃O₂([M+H]⁺)需要值：518.1210，实测值：518.1177。

实施例31

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2-氧代-2′-丙基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-30)

[0184][α]²⁵ _D 42.2(c，1.0 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.39(br，1H)，7.16～7.05(m，4H)，6.87(s，1H)，6.74(d，J＝7.98Hz，1H)，5.49(d，J＝8.07Hz，1H)，4.62(d，J＝7.82Hz，1H)，4.00(d，J＝7.81Hz，1H)，3.51(dd，J＝9.15，9.27Hz，1H)，2.97(s，3H)，2.74(s，3H)，1.65～1.44(m，2H)，1.29～1.18(m，2H)，0.77(t，J＝7.15Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.89，170.27，142.47，140.30，134.34，133.59，129.75，128.67，127.65，127.21，126.94，125.73，121.73，110.34，70.65，63.85，63.49，59.66，37.21，36.21，31.92，20.77，14.00；EI/MS，446(M⁺+1)；HRMS C₂₃H₂₆Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：446.1402，实测值：446.1408。

实施例32

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4′-(3-甲氧基-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-25)

[0185][α]²⁵ _D 46.9(c，0.4 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.87(br，1H)，7.34(d，J＝8.02Hz，1H)，7.12～6.93(m，2H)，6.74～6.64(m，4H)，4.87(d，J＝8.60Hz，1H)，4.34(d，J＝8.55Hz，1H)，3.79(d，J＝9.09Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.97(s，3H)，2.96(s，3H)，1.68(br，1H)，1.37～1.27(m，1H)，0.92～0.88(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)，δ178.33，173.23，159.20，141.99，137.60，133.54，129.22，127.24，123.59，122.63，120.63，114.03，112.75，110.15；EI/MS，470(M⁺+1)；HRMS C₂₆H₃₃ClN₃O₃([M+H]⁺)需要值：470.2210，实测值：470.2222。

实施例33

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2-氧代-2′-戊基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-19)

[0186][α]²⁵ _D 33.0(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.23(br，1H)，7.23～6.99(m，4H)，6.82(d，J＝1.59Hz，1H)，6.76(dd，J＝1.92，7.86Hz，1H)，6.48(d，J＝8.10Hz，1H)，4.61(d，J＝7.81Hz，1H)，3.99(d，J＝7.80Hz，1H)，3.51(dd，J＝9.35，9.49Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.83(s，3H)，1.66～1.54(m，1H)，1.48～1.42(m，1H)，1.26～1.15(m，6H)，0.80(t，J＝6.81Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.13，170.17，140.31，134.43，133.65，129.81，128.71，127.73，127.19，126.95，125.88，121.91，110.06，70.93，63.88，63.42，59.71，37.22，36.22，31.67，29.82，27.25，22.39，13.89；EI/MS，474(M⁺+1)。

实施例34

(2′R，3S，4′R，5′R)-丁基-6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-18)

[0187][α]²⁵ _D 20.0(c，0.3 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.03(br，1H)，7.24～6.88(m，4H)，6.78(s，1H)，6.76(dd，J＝1.90Hz，8.08Hz，1H)，6.48(d，J＝8.10Hz，1H)，4.62(d，J＝7.83Hz，1H)，3.99(d，J＝7.83Hz，1H)，3.81(dd，J＝9.19，9.51Hz，1H)，2.94(s，3H)，2.84(s，3H)，1.68～1.52(m，1H)，1.45～1.33(m，1H)，1.31～1.18(m，4H)，0.75(t，J＝6.891Hz，3H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.30，170.12，141.93，140.29，134.43，133.66，129.81，128.72，127.74，127.17，126.94，125.90，121.93，110.04，70.58，63.80，63.37，59.68，37.36，36.22，31.57，29.68，22.58，13.82；EI/MS，460(M⁺+1)。

实施例35

(2′R，3S，4′R，5′R)6，7-二氯-2′-异丁基-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-11)

[0188][α]²⁵ _D 55.7(c，0.6 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.83(br，1H)，7.28～7.15(m，5H)，6.75(d，J＝8.15Hz，1H)，6.19(d，J＝8.15Hz，1H)，4.61(d，J＝6.97Hz，1H)，3.93(d，J＝6.97Hz，1H)，3.60～3.50(m，1H)，2.94(s，3H)，2.74(s，3H)，1.80～1.55(m，2H)，0.90～0.85(m，1H)，0.85(d，J＝6.80Hz，3H)，0.78(d，J＝6.53Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ179.16，170.50，140.27，138.57，131.44，128.77，128.47，127.98，127.74，123.62，122.90，113.17，68.92，66.92，65.21，60.33，38.51，36.22，35.30，25.89，23.53，21.09

实施例36

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2-氧代-2′-(2，2-二甲基丙基)-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-17)

[0189][α]²⁵ _D 60.9(c，0.4 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.36(br，1H)，7.35～6.97(m，4H)，6.90(s，1H)，6.69(d，J＝8.10Hz，1H)，6.38(d，J＝8.11Hz，1H)，4.54(d，J＝47.41Hz，1H)，4.00(d，J＝7.39Hz，1H)，3.50(d，J＝9.41Hz，1H)，3.17(br，1H)，2.97(s，3H)，2.91(s，3H)，1.51～1.42(m，1H)，0.91～0.83(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.37，170.16，142.63，141.05，134.33，133.50，129.78，128.64，128.08，127.52，127.04，126.54，125.65，121.65，110.41，68.13，65.22，64.41，58.08，43.10，37.21，36.19，30.01，29.79；EI/MS，474(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：474.1715，实测值：474.1713。

实施例37

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(4-氯-苯基)-2-氧代-2′-(2，2-二甲基丙基)-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二乙基酰胺(KE-31)

[0190]EI/MS，474(M⁺+1)；HRMS C₂₅H₃₀Cl₂N₃O₂([M+H]⁺)需要值：474.1715，实测值：474.1703。

实施例38

(2′R，3S，4′R，5′R)2′-异丁基-2-氧代-4′-苯基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-8)

[0191]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ 9.13(br，1H)，7.28～6.98(m，6H)，6.81(d，J＝8.25Hz，1H)，6.68(t，J＝7.66Hz，1H)，6.50(d，J＝7.41Hz，1H)，4.69(d，J＝7.47Hz，1H)，3.96(d，J＝7.43Hz，1H)，3.65～3.60(m，1H)，3.58(br，1H)，2.95(s，3H)，2.83(s，3H)，1.67～1.56(m，2H)，0.98～0.85(m，1H)，0.75(d，J＝6.94Hz，3H)，0.73(d，J＝6.90Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.18，170.84，141.27，138.59，128.80，128.33，127.70，127.51，127.24，124.90，121.50，109.39，68.32，64.11，63.93，60.04，38.66，37.11，36.13，25.70，23.40，21.68。

实施例39

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-40)

[0192]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.45(br，1H)，7.40～7.20(m，2H)，7.15～7.00(m，2H)，6.80(s，1H)，6.72(d，J＝8.34Hz，1H)，6.30～6.25(m，1H)，4.29(d，J＝3.92Hz，1H)，3.85(d，J＝4.04Hz，1H)，3.80～3.57(m，4H)，3.56(d，J＝8.44Hz，1H)，3.40～3.20(m，4H)，2.55～2.35(m，6H)，1.70～1.60(m，2H)，1.55～1.48(m，1H)，0.98～0.83(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.44，171.61，142.14，141.12，133.79，131.58，130.90，129.98，127.50，126.91，126.04，122.77，121.91，110.18，67.25，66.83，66.75，66.11，63.38，57.06，26.78，53.54，43.73，38.24，30.15，29.95，29.82。

实施例40

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-环己基甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-41)

[0193]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.98(br，1H)，7.34～7.00(m，4H)，6.87(d，J＝1.50Hz，1H)，6.73(dd，J＝1.60，8.08Hz，1H)，6.43(d，J＝8.09Hz，1H)，4.59(d，J＝7.56Hz，1H)，3.98(d，J＝7.54Hz，1H)，3.65～3.55(m，1H)，2.98(s，3H)，2.86(s，3H)，1.68～1.30(m，7H)，1.11～0.85(m，4H)，0.78(t，J＝10.41Hz，1H)，0.66～0.55(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.80，170.29，142.39，140.63，134.41，133.57，129.82，128.72，127.67，126.99，126.85，125.66，121.76，110.28，68.38，64.36，63.67，60.39，59.39，37.22，36.23，35.22，34.17，32.52，26.37，26.15，25.96。

实施例41

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-43)

[0194]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.44(br，1H)，7.29(d，J＝7.99Hz，1H)，7.26(s，1H)，7.11～6.96(m，3H)，6.81(s，1H)，6.72(d，J＝8.08Hz，1H)，6.33(d，J＝8.07Hz，1H)，4.32(d，J＝7.15Hz，1H)，3.86(d，J＝7.13Hz，1H)，3.65～3.50(m，3H)，3.56(d，J＝9.41Hz，1H)，3.40～3.35(m，2H)，2.50～2.40(m，7H)，1.53(dd，J＝9.99，14.06Hz，1H)，1.28(br，1H)，0.99～0.92(m，1H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.19，171.65，142.09，141.11，133.78，131.44，130.49，130.00，127.49，126.47，125.87，122.58，121.91，110.18，67.11，66.94，66.26，63.59，57.05，56.76，53.18，43.85，35.59，30.21，29.88。

实施例42

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-5-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-47)

[0195][α]²⁵ _D 101.5(C 1.1 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.56(br，1H)，6.95～6.85(m，3H)，6.83～6.74(m，2H)，6.50(d，J＝8.10Hz，1H)，4.47(d，J＝7.97Hz，1H)，4.12(d，J＝7.81Hz，1H)，3.48(d，J＝9.83Hz，1H)，3.10(s，3H)，2.97(s，3H)，1.46(dd，J＝6.98，14.11Hz，1H)，1.05～0.98(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.87，169.59，142.72，142.62，142.29，135.23，133.82，126.57，125.61，124.69，122.01，115.39，114.37，110.43，68.66，65.25，64.22，57.94，43.19，37.28，36.18，30.17，29.84；C₂₅H₂₈Cl₂FN₃O₂需要值：C，60.98；H，5.73；N，8.53；实测值：C，61.12；H，6.14；N，8.00。

实施例43

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(4-氯-3-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-46)

[0196][α]²⁵ _D 58.0(c 0.75，CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.25(br，1H)，7.28～7.20(m，2H)，7.04(d，J＝7.67Hz，1H)，7.90(s，1H)，6.69(d，J＝7.94Hz，1H)，6.41(d，j＝2.82Hz，1H)，4.65(d，J＝7.60Hz，1H)，4.32(d，J＝7.54Hz，1H)，3.48(d，J＝9.44Hz，1H)，3.02(s，3H)，2.99(s，3H)，1.50～1.42(m，1H)，1.03～0.95(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.46，169.84，157.92，142.78，133.61，129.63，128.26，128.07，127.46，126.70，124.79，124.54，121.67，110.47，68.26，63.73，52.27，42.85，37.02，36.13，30.08，29.76；C₂₅H₂₈Cl₂FN₃O₂+H₂O需要值：C，58.83；H，5.92；N，8.23；实测值：C，59.09；H，5058；N，8.16。

实施例44

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-4-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-45)

[0197][α]²⁵ _D 97.4(c1，CHCl₃)；  ¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.10(br，1H)，7.18(d，J＝6.16Hz，1H)，7.01～6.90(m，2H)，6.89(d，J＝1.75Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.80，8.10Hz，1H)，6.45(d，J＝8.11Hz，1H)，4.47(d，J＝7.73Hz，1H)，4.06(d，J＝7.84Hz，1H)，3.49(d，J＝9.62Hz，1H)，2.98(s，6H)，1.48(dd，J＝9.96，14.18Hz，1H)，1.03～0.89(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.25，169.85，158.69，142.49，135.97，155.65，130.51，128.50，126.62，125.62，121.85，121.08，116.75，110.50，68.37，65.47，64.27，57.54，43.13，37.26，36.17，30.12，29.80；C₂₅H₂₈Cl₂FN₃O₂需要值：C，60.98；H，5.73；N，8.53；实测值：C，61.05；H，6.26；N，7.97。

实施例45

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(KE-48)

[0198]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.88(br，1H)，7.17～7.14(m，3H)，7.05～7.02(m，1H)，6.88(d，J＝1.77Hz，1H)，6.70(dd，J＝1.83，8.11Hz，1H)，6.37(d，J＝8.13Hz，1H)，4.53(d，J＝7.38Hz，1H)，4.01(d，J＝7.41Hz，1H)，3.49(d，J＝9.41Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.92(s，3H)，1.45(dd，J＝9.87，14.17Hz，1H)，1.28(br，1H)，1.20～1.16(m，2H)，0.92～0.87(m，1H)，0.78(s，6H)，0.62(t，J＝7.51Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.18，170.13，142.46，141.13，134.39，133.55，129.82，128.68，127.57，127.08，126.54，125.78，121.74，110.32，67.90，65.36，64.47，58.05，40.79，37.22，36.20，34.15，32.57，27.15，26.91，8.22。

实施例46

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(6-溴-吡啶-2-基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-50)

[0199]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.37(br，1H)，7.25～7.23(m，2H)，6.81～6.77(m，4H)，5.04(d，J＝8.34Hz，1H)，4.17(d，J＝8.41Hz，1H)，3.67(d，J＝9.17Hz，1H)，3.09(s，3H)，2.96(s，3H)，1.73(br，1H)，1.50(dd，J＝9.99，14.10Hz，1H)，0.99～0.90(m，1H)，0.87(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.25，170.60，159.68，141.96，141.14，138.80，133.38，127.06，126.98，126.36，123.62，121.98，109.88，69.70，64.79，64.11，60.08，42.97，37.32，35.92，30.19，29.84。

实施例47

1′-甲基-2′-(2-甲基-丙烯基)-4′-苯基-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮(KE-13)

[0200]将3-E-3-亚苄基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(10.0mmol)、N-甲基-甘氨酸(14mmol)和3-甲基-丁-2-烯醛(14mmol)在100mL甲苯中的混合物回流6小时。除去溶剂并将残余物在硅胶柱上进行纯化，得到所述产物。

[0201]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.06(br，1H)，7.28(d，J＝8.01Hz，1H)，7.10～6.95(m，4H)，6.74～6.67(m，4H)，5.72(s，1H)，4.15(m，1H)，3.48(dd，J＝5.51，12.01Hz，1H)，2.71～2.61(m，1H)，2.32(dd，J＝5.31，18.54Hz，1H)，2.05(s，3H)，1.84(s，6H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.61，143.07，138.56，135.89，133.75，128.14，127.78，127.55，127.32，127.10，121.45，120.85，110.33，67.38，57.30，47.31，43.06，34.77，23.09，14.19。

实施例48

6-氯-1′-甲基-2′-(2-甲基-丙烯基)-4′-苯基-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮(KE-2)

[0202]这种化合物是用与实施例47的方法相似的方法来进行合成的。

[0203]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.56(br，1H)，7.28(d，J＝8.04Hz，2H)，7.13～7.02(m，4H)，6.72～6.67(m，3H)，5.73(s，1H)，3.49(dd，J＝5.46，12.21Hz，1H)，2.65(dd，J＝12.64，17.30Hz，1H)，2.32(dd，J＝3.21，18.31Hz，1H)，2.08(s，6H)，1.91(s，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.21，142.86，138.57，135.89，133.75，128.17，127.81，127.64，127.33，127.11，121.52，120.75，110.20，67.40，57.33，47.33，43.15，34.74，23.12。

实施例49

1′-甲基-2′-(2-甲基-丙烯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-4′-甲酸叔-丁基酯(KE-3)

[0204]这种化合物是用与实施例47的方法相似的方法来进行合成的。

[0205]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.53(br，1H)，7.42(d，J＝7.40Hz，1H)，7.20(td，J＝1.27，7.69Hz，1H)，6.99(td，J＝0.97，7.53Hz，1H)，6.86(d，J＝7.66Hz，1H)，4.42(dt，J＝1.33，9.32Hz，1H)，3.85(dd，J＝5.51，9.72Hz，1H)，3.66(dd，J＝5.49，10.80Hz，1H)，3.58(d，J＝9.32Hz，1H)，2.70(t，J＝9.87Hz，1H)，2.28(s，3H)，1.63(d，J＝1.23Hz，3H)，1.49(d，J＝1.20Hz，3H)，0.95(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ179.44，169.54，141.21，138.48，129.20，127.89，126.16，122.15，120.52，108.86，80.80，71.64，60.95，54.48，49.94，39.97，27.17，26.05，18.48。

[0206]向(2-氧代-1，2-二氢-吲哚-3-亚基)-乙酸乙基酯和由2-溴-1-苯基-乙酮和3，4-二氢-异喹啉所形成的复合体(一种盐)在CH₂Cl₂中的溶液中加入Et₃N。将所得的溶液在室温下搅拌一夜。除去溶剂并将残余物在硅胶柱上进行纯化，从而得到所述产物。

[0207]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.13(br，1H)，8.10(d，J＝1.47Hz，1H)，8.07(d，J＝7.58Hz，1H)，7.63～7.59(m，1H)，7.55～7.49(m，2H)，7.44(s，1H)，7.32(d，J＝7.62Hz，1H)，7.21～7.16(m，1H)，7.08-7.05(m，1H)，6.86～6.80(m，2H)，6.16(d，J＝7.65Hz，1H)，5.42(d，J＝7.38Hz，1H)，5.19(s，1H)，4.27(d，J＝7.35Hz，1H)，3.89～3.76(m，3H)，3.22～3.15(m，1H)，2.96(d，J＝5.14Hz，1H)，2.95(d，J＝5.83Hz，1H)，0.76(d，J＝7.15Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ197.64，180.02，169.25，140.69，137.00，134.62，133.07，132.50，130.99，128.57，128.50，128.33，126.91，126.31，125.65，124.68，123.19，109.10，71.09，70.71，63.02，60.55，55.12，46.76，28.97，26.95，13.49。

实施例51

[0208]这种化合物是用与实施例50的方法相似的方法来进行合成的。

[0209]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.25(br，1H)，7.51(d，J＝7.26Hz，2H)，735～7.22(m，3H)，7.01～6.95(m，5H)，6.95～6.89(m，3H)，5.15(d，J＝3.90Hz，1H)，4.18(dd，J＝4.15，9.09Hz，1H)，3.93(d，J＝9.10Hz，1H)，3.57(s，1H)，3.37～3.30(m，1H)，3.18～3.15(m，1H)，2.90～2.80(m，2H)，0.78(s，9H)。

[0210]这种化合物是通过对实施例50的化合物进行氢化来进行制备的。

[0211]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.93(br，1H)，7.57～7.42(m，3H)，7.35～7.23(m，4H)，7.11～6.93(m，3H)，6.76～6.67(m，2H)，6.08(d，J＝7.70Hz，1H)，5.41(s，1H)，5.24(d，J＝5.83Hz，1H)，4.60(t，J＝5.89Hz，1H)，4.10～4.03(m，1H)，4.04(q，J＝7.14Hz，2H)，3.24～3.20(m，1H)，3.12～3.03(m，1H)，2.98(d，J＝5.88Hz，1H)，2.89～2.81(m，1H)，2.55～2.50(m，1H)，0.93(t，J＝6.40Hz，3H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ178.51，170.99，141.75，137.37，134.08，128.96，128.29，128.15，127.54，127.17，126.34，125.80，125.65，124.98，124.43，122.60，109.65，70.84，69.22，67.95，61.06，60.60，44.58，26.92，22.64，13.74。

实施例53

KE-6

[0212]这种化合物是通过对实施例51的化合物进行氢化来进行制备的。

[0213]¹H  NMR(300MHz，MeOH-d₆)，δ7.65～7.42(m，6H)，7.23-7.18(m，3H)，6.96～6.93(m，2H)，6.23(d，J-7.85Hz，1H)，6.00(s，1H)，5.42(d，J＝6.62Hz，1H)，5.28(t，J＝6.16Hz，1H)，3.59～2.83(m，6H)，1.46(s，9H)。

实施例54

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-环己基-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-51)

[0214]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.05(s，1H)，7.26-6.79(m，4H)，3.72(d，J＝8.0Hz，1H)，3.26(d，J＝8.3，1H)，3.11-2.95(m，2H)，2.89(d，J＝4.5Hz，3H)，2.50(t，J＝3.3Hz，1H)，2.29(br，1H)，1.93(s，1H)，1.70(s，1H)，1.43-1.21(m，5H)，1.19-0.85(m，3H)，0.74(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ182.36，176.77，142.27，133.62，128.30，125.29，122.09，110.62，67.30，67.14，61.70，57.76，43.20，38.51，34.61，32.77，31.54，30.64，30.02，29.71，26.29，26.02，25.69。

实施例55

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-环戊基-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-52)

[0215]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.12(s，1H)，7.26-6.97(m，4H)，4.13(d，J＝7.1Hz，1H)，3.68(d，J＝7.7Hz，1H)，3.11-2.95(m，2H)，2.97(s，3H)，2.62(t，J＝2.2Hz，1H)，1.92-1.86(m，2H)，1.61-1.08(m，7H)，0.75(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ182.52，174.10，142.48，133.71，128.60，125.65，122.26，110.57，68.98，66.47，61.94，59.09，43.50，41.58，31.59，31.45，30.84，30.06，26.29，25.48，24.63。

实施例56

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-环己基甲基-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-53)

[02161 ¹UH NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.33(s，1H)，7.10-6.85(m，4H)5，3.76(s，1H)，3.31-2.95(m，10H)，2.56(s，1H)，1.83-1.54(m，6H)，1.31-1.09(m，6H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ182.80，170.32，142.54，133.86，129.02，121.86，116.72，110.48，76.60，63.54，69.48，51.01，43.29，37.86，37.53，35.96，35.50，32.86，32.13，30.09，29.82，26.36，26.12。

实施例57

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-吡啶-2-基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-56)

[0217]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.13(s，1H)，8.61(t，J＝2.2Hz，1H)，7.38(t，J＝2.2Hz，1H)，7.07-7.03(m，1H)，6.86(d，J＝2.1Hz，1H)，6.78(d，J＝8.0Hz，1H)，6.63-6.60(m，1H)，6.50(d，J＝8.0Hz，1H)，5.23(d，J＝7.8Hz，1H)，4.12(d，J＝8.0Hz，1H)，3.51(d，J＝9.3Hz，1H)，3.0-2.92(m，6H)，1.50-1.32(m，1H)，0.88(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.80，171.13，158.49，148.66，142.33，136.51，133.12，127.04，126.30，125.74，124.29，122.19，121.56，109.97，68.86，64.88，63.77，59.85，53.41，42.76，37.08，35.91，31.55，30.43

实施例58

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-噻吩-2-基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-57)

[0218]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.38(s，1H)，7.10(d，J＝5.0Hz，1H)，6.80-6.35(m，5H)，4.48(d，J＝7.0Hz，1H)，4.27(d，J＝7.3Hz，1H)，3.51(d，J＝9.3Hz，1H)，2.98(d，J＝7.8Hz，6H)，1.52-1.44(m，1H)，1.31-1.23(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.64，169.93，142.30，142.09，133.58，127.06，126.73，126.20，125.34，124.30，121.83，110.05，67.69，67.52，64.34，53.28，43.05，37.09，36.21，31.57，30.15，29.82。

实施例59

(2′R，3S，4′R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-58)

[0219]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.75(br，1H)，7.30～7.27(m，2H)，7.08～7.03(m，3H)，6.83(d，J＝7.63Hz，1H)，6.74(dd，J＝7.45，7.49Hz，1H)，6.53(d，J＝7.45Hz，1H)，4.55(d，J＝7.68Hz，1H)，4.02(d，J＝7.67Hz，1H)，3.54(d，J＝9.14Hz，1H)，3.21(br，1H)，2.98(s，3H)，2.93(s，3H)，1.54～1.46(m，1H)，1.03～0.92(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ161.22，170.23，141.42，141.19，131.61，130.22，129.85，128.25，127.75，127.56，124.93，122.40，121.75，109.60，68.09，65.06，64.65，58.32，43.25，37.22，36.14，30.12，29.80。

实施例60

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4′-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二乙基酰胺(G-84)

[0220]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.33(s，1H)，6.88(s，1H)，6.71(d，J＝7Hz，1H)，6.38-6.08(m，4H)，4.56(d，J＝7.0Hz，1H)，4.01(d，J＝7.3Hz，1H)，3.43(d，J＝9.3Hz，1H)，3.14(s，3H)，3.05(s，3H)，2.90(s，3H)，1.41-1.27(m，1H)，0.92～0.90(m，1H)，0.89(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ180.62，l70.48，148.61，133.57，130.31，126.26，123.71，122.62，122.21，109.66，107.37，106.90，67.50，65.41，63.44，48.36，42.25，37.25，36.23，34.64，33.17，30.09，29.80。

实施例61

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-吡啶-4-基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-83)

[0221]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.91(s，1H)，8.39(d，J＝10Hz，2H)，7.53(d，J＝7Hz，1H)，7.34(d，J＝7Hz，1H)，7.08(d，J＝7.1Hz，2H)，6.75(s，1H)，4.89(d，J＝8.10Hz，1H)，4.49(d，J＝8.12Hz，1H)，3.75(d，J＝9.32Hz，1H)，3.04(s，3H)，2.91(s，3H)，1.31-1.27(m，1H)，0.90～0.86(m，1H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ(ppm)178.60，172.67，149.87，148，85，142.78，136.81，134.41，126.71，123.92，123.80，123.20，110.92，66.75，66.39，61.60，55.46，43.84，37.91，36.72，30.59，30.22。

实施例62

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-4′-吡啶-3-基-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺(G-82)

[0222]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.08(s，1H)，8.45(d，J＝7Hz，2H)，7.44-6.42(m，5H)，4.58(d，J＝7Hz，1H)，4.16(d，J＝8Hz，1H)，3.53(d，J＝7.7Hz，1H)，2.98(d，J＝6Hz，6H)，1.53-1.43(m，1H)，0.90～0.85(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ181.44，170.26，150.07，148.90，143.03，136.76，135.03，134.09，127.09，126.17，123.83，122.27，110.85，68.98，65.34，64.07，56.55，43.58，37.72，36.60，31.99，30.59，30.25。

实施例63

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4′-呋喃-3-基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸甲基酰胺(G-81)

[0223]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.01(s，1H)，7.30-6.56(m，5H)，6.01(s，1H)，4.08(d，J＝7.50Hz，1H)，3.75(d，J＝7.50Hz，1H)，3.42(d，J＝9.00Hz，1H)，2.99(s，3H)，1.53-1.43(m，1H)，0.91～0.86(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ181.26，173.14，143.63，142.69，140.61，134.18，127.30，126.60，123.45，123.41，111.25，110.62，67.97，66.08，62.96，48.57，44.09，30.57，30.35，26.60。

实施例64

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4′-呋喃-2-基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸甲基酰胺(G-80)

[0224]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.98(s，1H)，7.43(J＝4.8Hz，1H)，7.13～6.74(m，3H)，6.10～6.05(m，2H)，4.47(d，J＝9.30Hz，1H)，4.17(d，J＝9.35Hz，1H)，3.67(d，J＝8.00Hz，1H)，2.89(d，J＝4.90Hz，3H)，1.39-1.24(m，1H)，0.93～0.85(m，1H)，0.88(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)：δ178.45，173.65，151.36，142.40，142.15，134.26，126.04，125.88，122.33，111.11，110.49，107.83，65.77，65.20，64.01，52.45，45.11，32.00，30.57，30.36，26.48。

实施例65

(2′R，3S，4′R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-6-甲氧基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸二甲基酰胺

(KE-61)

[0225]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.55(s，1H)，7.30(d，J＝7.1Hz，2H)，7.08(d，J＝3.9Hz，2H)，6.43-6.23(m，3H)，4.50(d，J＝6.6Hz，1H)，3.95(d，J＝7.3Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.48(d，J＝8.3Hz，1H)，2.97(s，3H)，2.90(s，3H)，1.51-1.43(m，1H)，1.28(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ182.11，170.81，159.97，142.78，142.25，132.10，130.64，130.32，128.08，126.09，122.86，120.31，107.33，97.00，68.46，65.74，64.75，58.54，55.72，43.63，37.64，36.56，31.99，30.59，30.30。

实施例66

(2′R，3S，4′R，5′R)6-(氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-79)

[0226][α]²⁵ _D 45.29(c 0.17，CH₂Cl₂)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.33(s，1H)，7.17-7.10(m，4H)，6.95(d，J＝4.4Hz，1H)，6.81(dd，J₁＝8Hz，J₂＝1.6Hz，1H)，6.70(d，J＝1.8Hz，1H)，6.31(d，J＝8Hz，1H)，4.33(d，J＝7.1Hz，1H)，3.88(d，J＝7.12Hz，1H)，3.67-3.60(m，4H)，3.57(d，J＝8.1Hz，1H)，3.43-3.40(m，2H)，2.71-2.28(m，7H)，1.53-1.43(m，1H)，1.29-1.21(m，1H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.82，172.17，142.67，141.28，134.76，134.18，130.15，128.98，127.98，127.46，126.92，126.25，122.29，110.66，67.51，67.33，66.65，64.03，57.47，57.20，53.61，44.28，36.04，31.99，30.63，30.50，30.31；C₂₉H₃₀Cl₂N₄O₃+0.5H₂O需要值：C，61.26；H，6.56；N，9.85；实测值：C，61.38；H，7.08；N，9.50。

实施例67

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-78)

[0227]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.57(s，1H)，7.29(s，1H)，7.28-7.10(m，3H)，6.96-6.93(m，1H)，6.80(d，J＝1.6Hz，1H)，6.68(dd，J₁＝7.3Hz，J₂＝1.6Hz，1H)，6.27(d，J＝8.1Hz，1H)，4.28(d，J＝6.9Hz，1H)，3.87(d，J＝7.3Hz，1H)，3.86-3.67(m，4H)，3.35(d，J＝7.6Hz，1H)，3.89-3.34(m，2H)，2.43-2.37(m，6H)，1.72-1.68(m，2H)，1.53-1.48(m，1H)，1.29-1.26(m，2H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.91，172.08，142.67，141.34，134.76，134.19，130.13，129.08，127.99，127.49，126.76，126.31，122.29，110.63，67.79，67.35，66.62，63.80，57.47，57.41，54.10，44.15，38.83，31.99，30.59，30.40，30.26。

实施例68

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4-(3-氟-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸二甲基酰胺(KE-75)

[0228]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.59(s，1H)，7.29-7.20(m，1H)，6.98-6.87(m，4H)，6.68(dd，J₁＝7.8Hz，J₂＝1.7Hz，1H)，6.35(d，J＝7.5Hz，1H)，4.56(s，1H)，4.01(d，J＝6.1Hz，1H)，3.50(m，1H)，3.03(s，3H)，2.91(s，3H)，1.51-1.45(m，1H)，1.29-1.26(m，2H)，0.84(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ180.91，170.20，164.33，161.06，142.33，141.71，133.51，130.20，126.54，125.66，121.75，115.74，114.49，110.19，68.14，65.34，61.36，43.12，37.16，36.19，31.89，30.13，29.82。

实施例69

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4-(2，3-二氟-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸二乙基酰胺

(KE-74)

[0229]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.21(s，1H)，7.40(d，J＝8.0Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.10(d，J＝8.0Hz，1H)，6.94-6.77(m，3H)，4.98(d，J＝8.45Hz，1H)，4.80(d，J＝8.6Hz，1H)M，3.78(d，J＝8.7Hz，1H)，3.01(s，3H)，2.97(s，3H)，1.31-1.27(m，3H)，0.84(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ178.77，172.84，148.09，142.12，134.23，126.61，126.54，124.72，124.07，116.51，116.28，110.47，67.08，66.23，61.98，48.40，43.87，37.77，36.70，35.06，31.99，30.58，30.21。

实施例70

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸(2-DI乙基氨基-乙基)-酰胺(KE-73)

[0230]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.55(s，1H)，7.50(m，1H)，7.18(t，J＝2.4Hz，1H)，7.08(t，J＝3.2Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.64(d，J＝1.6Hz，1H)，6.26(d，J＝3.4Hz，1H)，4.43(d，J＝3.2Hz，1H)，4.25(d，J＝2.5Hz，1H)，4.43(d，J＝8.1Hz，1H)，4.16(d，J＝7.8Hz，1H)，3.60-3.51(m，2H)，3.41(d，J＝8.3Hz，1H)，3.40-2.91(m，6H)，1.48-1.43(m，2H)，1.19-1.14(t，J＝6.8Hz，6H)，0.79(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.59，177.47，172.58，143.39，134.01，129.76，127.48，126.92，125.51，124.85，121.99，110.70，67.90，66.56，63.64，53.01，51.62，43.60，35.88，31.99，30.54，23.26，23.05。

实施例71

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4-(3-氯-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸甲基酰胺(KE-71)

[0231]¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ181.25，170.16，142.89，134.06，133.01，128.70，128.49，126.82，125.59，125.37，125.21，122.21，110.62，68.94，64.30，64.09，52.99，43.32，37.48，36.55，30.58，30.25。

实施例72

(2′R，3S，4′S，5′R)6-(氯-4′-(3-溴-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-90)

[0232]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.99(m，1H)，7.10-6.90(m，4H)，6.78(s，1H)，3.73-3.67(m，4H)，3.42-3.39(m，3H)，3.01-2.96(m，1H)，2.56-2.49(m，6H)，2.3-2.2(m，2H)，1.51-1.47(m，1H)，1.27-1.18(m，3H)，0.87(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ179.40，174.02，142.20，134.24，126.74，125.84，122.70，111.22，68.96，67.92，67.25，65.40，57.64，53.84，49.27，44.95，44.58，35.50，30.59，30.11，29.90。

实施例73

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-4-(3-溴-2-氟-苯基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3-吡咯烷]-5-甲酸二甲基酰胺

(KE-91)

[0233]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.65(s，1H)，7.39-7.24(m，1H)，6.98-6.90(m，1H)，6.82(s，1H)，6.69(d，J＝6.5Hz，1H)，6.41(d，J＝6.7Hz，1H)，4.60-4.53(m，1H)，4.35(d，J＝7.4Hz，1H)，3.43-3.34(m，1H)，3.05(s，3H)，3.00(s，3H)，1.51-1.45(m，1H)，1.30-1.25(m，2H)，0.86(s，9H)。

实施例74

(2′R，3S，4′S，5′R)6-甲基-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-92)

[0234]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.70-7.00(m，5H)，6.62(s，1H)，6.49(d，J＝7.8Hz，1H)，6.20(d，J＝7.8Hz，1H)，4.40(d，J＝7.7Hz，1H)，4.07(d，J＝7.8Hz，1H)，3.82(m，4H)，3.52-3.34(m，3H)，2.62(m，6H)，2.24(s，3H)，1.85(m，2H)，1.54-1.46(m，1H)，0.98-0.91(m，2H)，0.87(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ181.12，172.46，141.51，138.67，129.71，129.01，128.81，127.87，124.71，124.65，124.50，123.04，121.81，110.73，66.64，66.17，63.08，57.03，53.74，51.37，43.76，38.18，30.56，30.22，30.10。

实施例75

(2′R，3′S，4′R，5′R)6-氯-4′-2，2-二甲基-丙基-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-93)

[0235]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.53(s，1H)，7.54(m，1H)57.10-6.95(m，2H)，6.94(s，1H)，4.20-4.11(m，4H)，3.43-3.15(m，4H)，2.65-2.34(m，6H)，2.29(m，1H)，1.76-1.18(m，7H)，0.76(s，9H)，0.55(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ182.24，142.81，134.08，129.13，127.09，122.46，110.81，68.70，67.44，64.53，62.82，57.80，54.12，49.41，43.97，43.03，39.30，38.99，31.99，30.64，30.52，30.21，29.39，25.74。

实施例76

(2′R，3S，4′R，5′R)6-氯-4′-2，2-二甲基-丙基-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸甲基酰胺

(KE-94)

[0236]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.90(s，1H)，7.10-6.90(m，3H)，3.52(d，J＝7.6Hz，1H)，3.25(d，J＝7.5Hz，1H)，2.88(d，J＝4.5Hz，3H)，2.54(m，1H)，2.30(m，1H)，1.64-1.45(m，3H)，1.27(m，2H)，0.76(s，9H)，0.56(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ182.51，173.37，142.95，134.13，129.05，127.14，122.47，110.96，71.11，68.01，62.60，48.92，44.09，42.88，39.81，31.99，30.60，30.51，30.20，29.35，26.43。

实施例77

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丁基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(GM-29)

[0237]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.23(s，1H)，7.39-7.21(m，3H)，7.05(t，J＝7.9Hz，1H)，6.83(s，1H)，6.68(d，J＝8.1Hz，1H)，6.30(d，J＝8.0Hz，1H)，4.40(d，J＝7.90Hz，1H)，4.09(d，J-7.6Hz，1H)，3.81-3.67(m，4H)，3.54-3.31(m，3H)，2.62-2.34(m，6H)，1.75-1.69(m，2H)，1.51-.145(m，1H)，1.24-1.20(m，2H)，1.18-1.10(m，2H)，0.76-0.70(m，6H)，0.57-.061(m，3H)。

实施例78

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-戊基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-101)

[0238]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.89(s，1H)，7.74-6.09(m，3H)，6.83(s，1H)，6.68(d，J＝8.0Hz，1H)，6.27(d，J＝8.1Hz，1H)，4.40(d，J＝7.6Hz，1H)，4.08(d，J＝7.5Hz，1H)，3.77(m，4H)，3.50-3.36(m，5H)，2.54(m，7H)，1.78(m，2H)，1.51-1.47(m，1H)，1.27(m，4H)，1.12-0.76(m，8H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.75，171.96，142.71，141.96，134.35，129.99，128.33，127.81，126.69，126.65，124.87，123.36，122.30，110.57，67.03，66.66，66.07，63.06，57.25，53.96，44.98，41.69，38.53，33.00，31.99，28.05，27.88，25.82，23.06，17.31，15.32。

实施例79

(2′R，3S，4S，5′R)6-甲氧基-4′-(3-溴-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-102)

[0239]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.55(s，1H)，7，41(m，1H)，7.32-7.00(m，3H)，6.36(s，1H)，6.26-6，17(m，2H)，4.37(d，J＝7.9Hz，1H)，4.0(d，J＝8.2 Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.70(m，6H)，3.44(d，J＝8.1Hz，1H)，3.38-3.34(m，2H)，2.43-2.38(m，4H)，2.05(m，1H)，1.75-1.69(m，2H)，1.51-1.47(m，1H)，0.97～0.89(m，1H)，0.79(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ181.37，160.20，142.56，129.72，128.27，127.85，125.55，119.62，110.05，97.05，70.81，67.33，66.65，66.16，62.89，57.36，55.72，54.11，52.30，51.57，49.29，43.75，38.60，30.59。

实施例80

(2′R，3S，4R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-5-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-103)

[0240]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.31(m，1H)，7.42(m，1H)，6.94-6.67(m，5H)，6.38(d，J＝7.5Hz，1H)，4.25(d，J＝7.8Hz，1H)，3.88(d，J＝8.2Hz，1H)，3.78(m，4H)，3.53(d，J＝8.1Hz，1H)，3.39(m，2H)，2.54-2.49(m，6H)，1.80-1.74(m，2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.90～0.85(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.31，171.79，143.02，142.37，135.42，126.51，126.18，125.16，122.58，115.82，115.50，114.83，114.54，110.70，67.63，67.01，66.79，63.58，57.26，54.08，46.38，38.60，33.32，30.59，30.35，30.23。

实施例81

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯，7-氟-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-104)

[0241]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.23(s，1H)，7.43-7.01(m，4H)，6.87(d，J＝6.0Hz，1H)，6.22(d，J＝8.6Hz，1H)，4.40(d，J＝8.0Hz，1H)，4.12(d，J＝7.8Hz，1H)，3.70(m，4H)，3.56-3.48(m，4H)，2.67-2.60(m，7H)，1.76-1.70(m，2H)，0.90～0.88(m，1H)，0.86(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.62，171.58，138.22，128.20，127.92，127.57，125.07，125.02，122.17，121.93，120.98，120.72，113.63，111.58，67.43，67.18，66.22，63.61，57.42，54.05，51.79，43.68，38.79，32.00，30.86，30.55，30.38。

实施例82

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯，7-氟-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-109)

[0242]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.53(s，1H)，7.23-7.10(m，4H)，6.87(d，J＝6Hz，1H)，6.22(d，J＝8.5Hz，1H)，4.43(d，J＝8.1Hz，1)，4.14(d，J＝8.1Hz，1H)，3.68(m，4H)，3.46-3.41(m，3H)，2.54-2.47(m，6H)，1.51-1.46(m，1H)，0.92～0.89(m，2H)，0.86(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ180.83，171.55，158.37，155.70，152.47，138.31，130.28，128.34，127.90，125.08，122.18，120.94，113.51，111.66，67.70，67.28，66.15，63.96，57.19，53.85，51.76，43.66，35.96，31.99，30.68，30.27。

实施例83

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯，7-氟-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(KE-110)

[0243]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.79(s，1H)，8.60(s，1H)，7.57(s，1H)，7.27-6.87(m，3H)，5.90(d，J＝8.1Hz，1H)，4.51(m，1H)，4.23(m，1H)，3.7-3.1(m，9H)，2.12(m 3H)，1.49-1.41(m，4H)，0.82(s，9H)；¹³CNMR(75MHz，CDCl₃)δ181.11，174.19，155.66，138.77，130.35，127.98，127.39，125.43，121.79，121.52，121.12，113.38，113.06，112.33，66.17，64.44，63.28，55.27，55.11，49.44，46.58，43.89，36.26，30.50，30.14，23.66。

实施例84

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯，7-氟-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-哌啶-1-基-乙基)-酰胺(KE-111)

[0244]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.34-7.23(m，4H)，7.13(m，1H)，6.88(m 1H)，6.22(d，J＝8.2Hz，1H)，4.42(d，J＝8.3Hz，1H)，4.15(d，J＝7.8Hz，1H)，3.41(m，3H)，2.47(m，7H)，1.58-0.92(m，8H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.89，171.50，158.38，155.69，152.47，130.19，128.49，127.88，125.06，122.09，121.85，120.60，113.51，111.63，67.93，66.13，54.04，57.80，54.81，51.76，43.61，36.14，32.00，30.85，30.67，26.25，25.90，24.39。

实施例85

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯，7-氟-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基]-酰胺(KE-112)

[0245]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.51(s，1H)，7.32-6.78(m，3H)，6.26(d，J＝8.5Hz，1H)，4.38(d，J＝7.8Hz，1H)，4.05(d，J＝7.7Hz，1H)，3.90-3.78(m，2H)，3.54-3.22(m，6H)，1.65-1.25(m，11H)，0.86(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.66，171.92，158.32，152.47，138.28，130.36，128.09，127.99，127.77，127.49，122.19，120.80，111.30，111.65，68.34，66.96，65.93，63.42，51.39，43.76，37.13，37.01，33.25，33.16，30.56，30.36，30.23，27.12。

实施例86

(2′R，3S，4R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-5-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-115)

[0246]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.01(s，1H)，7.13(m，1H)，6，94-6.70(m，5H)，6.42(d，J＝8.0Hz，1H)，4.30(d，J＝7.6Hz，1H)，3.88(d，J＝7.6Hz，1H)，3.68(m，4H)，3.56(d，J＝9.1Hz，1H)，3.43-3.37(m，2H)，2.56-2.40(m，4H)，1.80(m，2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.90～0.85(m，1H)，0.86(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.17，171.69，142.97，142.28，135.35，134.46，126.76，126.13，125.07，122.60，115.81，115.48，114.47，110.69，67.45，67.36，66.93，63.86，57.32，57.22，53.66，44.27，35.99，30.65，30.30。

实施例87

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(四氢-吡喃-4-基)-乙基]-酰胺(KE-MDM2-108)

[0247]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.65(s，1H)，7.33-7.20(m，2H)，7.08-7.03(m，2H)，6.83(d，J＝1.8Hz，1H)，6.67(dd，J₁＝8.1Hz，J₂＝1.8Hz，1H)，6.26(d，J＝6Hz，1H)，4.13(d，J＝7.8Hz，1H)，4.06(d，J＝7.5Hz，1H)，3.96-3.91(m，2H)，3.50(d，J＝9Hz，1H)，3.38-3.29(m，4H)，1.61-1.48(m，6H)，1.31-1.27(m，2H)，0.86(d，J＝9Hz，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ181.10，172.29，142.98，134.36，130.06，128.40，128.21，127.68，126.36，125.60，124.83，122.25，121.77，110.73，68.34，66.54，65.88，62.95，43.82，37.11，36.88，33.26，33.15，30.56，30.21。

实施例88

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-63)

[0248][α]²⁵ _D+5.8(c 0.9 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.83(br，1H)，7.34～7.20(m，3H)，7.07(t，dd，J＝7.91，7.94Hz，1H)，6.83(d，J＝1.83Hz，1H)，6.69(dd，J＝1.86，8.11Hz，1H)，6.30(d，J＝8.17Hz，1H)，4.44(d，J＝8.05Hz，1H)，4.12(d，J＝8.04Hz，1H)，3.68(t，J＝4.56Hz，4H)，3.49～3.35(m，3H)，2.59～2.20(m，7H)，1.52(dd，J＝9.80，14.10Hz，1H)，0.95～0.89(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.34，171.30，142.16，133.89，129.57，128.12，127.93，127.09，126.15，124.42，124.36，121.93，121.61，110.13，66.91，65.63，62.93，56.79，53.40，51.28，43.31，35.55，30.18，30.04，29.83；C₂₉H₃₅Cl₂FN₄O₃+H₂O需要值：C，58.49；H，6.26；N，9.41；实测值：C，58.70；H，6.44；N，9.23。

实施例89

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺(KE-64)

[0249]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.40(s，1H)，7.31-7.20(m，3H)，7.10-7.05(m，1H)，6.83(d，J＝1.8Hz，1H)，6.80(dd，J₁＝8.1Hz，J₂＝1.8Hz，1H)，6.30(d，J＝8.1Hz，1H)，4.44(d，J＝8.1Hz，1H)，4.13(d，J＝8.1Hz，1H)，3.70-3.66(m，4H)，3.49-3.40(m，3H)，3.08(m，2H)，2.55-2.46(m，6H)，1.51-1.45(m，1H)，0.95～0.85(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ180.61，171.38，142.38，133.85，129.55，128.09，127.90，127.07，126.14，125.08，124.43，121.84，121.33，110.23，66.83，65.61，62.97，60.40，56.77，53.18，51.25，43.30，35.53，30.16，29.81。

实施例90

(外消旋的)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸叔-丁基酯

[0250]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.16(s，1H)，7.53(m，1H)，7.30(m，1H)，7.08(m，1H)，6.93(d，J＝1.8Hz，1H)，6.72(dd，J₁＝8.1Hz，J₂＝1.8Hz，1H)，6.11(d，J＝7.9Hz，1H)，4.59(d，J＝7.5Hz，1H)，4.31(d，J＝7.3Hz，1H)，3.81-3.78(m，1H)，2.69(s，3H)，1.96-1.88(m，1H)，1.12(s，9H)，0.80-0.89(m，1H)，0.63(s，9H)。

实施例91

(2′S，3R，4′R，5′S)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-98(63B，KE-63的镜像))

[0251][α]²⁵ _D-6.5(c 1 CHCl₃)；C₂₉H₃₅Cl₂FN₄O₃+H₂O需要值：C，58.49；H，6.26；N，9.41；实测值：C，58.73；H，6.54；N，9.18 ¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.83(br，1H)，7.34～7.20(m，3H)，7.07(t，dd，J＝7.91，7.94Hz，1H)，6.83(d，J＝1.83Hz，1H)，6.69(dd，J＝1.86，8.11Hz，1H)，6.30(d，J＝8.17Hz，1H)，4.44(d，J＝8.05Hz，1H)，4.12(d，J＝8.04Hz，1H)，3.68(m，4H)，3.49～3.35(m，3H)，2.59～2.20(m，7H)，1.52(dd，J＝9.80，14.10Hz，1H)，0.95～0.89(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.34，171.30，142.16，133.89，129.57，128.12，127.93，127.09，126.15，124.42，124.36，121.93，121.61，110.13，66.91，65.63，62.93，56.79，53.40，51.28，43.31，35.55，30.18，30.04，29.83。

实施例92

(2′R，3S，4R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-甲基氨基甲酰基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-1′-甲酸甲基酯(KE-66)

[0252]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.86(s，1H)，7.70(s，1H)，7.27～6.95(m，5H)，4.56(d，J＝8.70Hz，1H)，3.93(s，3H)，3.87(d，J＝9Hz，1H)，3.50～3.47(m，1H)，3.05(m，1H)，2.88(d，J＝5.1Hz，3H)，1.55～0.89(m，2H)，0.89(s，9H)。

实施例93

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺(KE-62)

[0253]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ 7.28～7.16(m，3H)，7.06(t，dd，J＝7.91，7.94Hz，1H)56.82(d，J＝1.83Hz，1H)，6.70(dd，J＝1.86，8.11Hz，1H)，6.39(d，J＝8.17Hz，1H)，4.44(d，J＝8.05Hz，1H)，4.12(d，J＝8.04Hz，1H)，3.49～3.35(m，3H)，2.99(s，3H)，2.59～2.40(m，2H)，2.30(S，3H)，2.24(s，3H)，1.52(dd，J＝9.80，14.10Hz，1H)，0.95～0.89(m，1H)，0.84(s，9H)。

实施例94

KE-68

[0254]¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)，δ8.28(br，1H)，7.31～7.23(m，3H)，7.14～7.07(m，2H)，6.94(d，J＝1.79Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.86，8.10Hz，1H)，5.30(d，J＝12.1Hz，1H)，4.69(s，2H)，4.24(m，1H)，3.86(d，J＝8.12Hz，1H)，2.92(s，3H)，2.87(s，3H)，1.52～1.44(m，1H)，0.97～0.92(m，1H)，0.89(s，9H)。

实施例95

(2′R，3S，4R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-氧代-乙基]-酰胺(KE-67)

[0255]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.46(br，1H)，7.90(br，1H)，7.31～7.23(m，2H)，7.14～7.07(m，2H)，6.94(d，J＝1.79Hz，1H)，6.75(dd，J＝1.86，8.10Hz，1H)，4.45(d，J＝11Hz，1H)，4.22～4.15(m，1H)，4.03～3.95(m，1H)，3.87～3.83(m，1H)，3.73～3.65(m，3H)，3.43(m，2H)，2.44(m，4H)，2.32(s，3H)，1.85(m，1H)，0.97～0.92(m，1H)，0.89(s，9H)。

实施例96

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-120)

[0256]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.50(br，1H)，7.41(m，1H)，7.28(m，1H)，7.10(m，1H)，6.85(d，J＝1.54Hz，1H)，6.67(dd，J＝1.54，7.61Hz，1H)，6.33(d，J＝8.17Hz，1H)，4.45(d，J＝8.40Hz，1H)，4.13(dd，J＝8.40，1.54Hz，1H)，3.49～3.35(m，3H)，2.78(m，1H)，2.67(m，5H)，1.80(m，4H)，1.53(dd，J＝9.60，14.40Hz，1H)，0.93(m，1H)，0.81(s，9H)。

实施例97

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-哌啶-1-基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-121)

[0257]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.70(br，1H)，8.50(br，1H)，7.47(m，1H)，7.28(m，1H)，7.14(m，1H)，6.97(s，1H)，6.61(d，J＝8.41Hz，1H)，5.88(d，J＝8.10Hz，1H)，4.90(br，1H)，4.42(d，J＝8.14Hz，1H)，4.17(d，J＝5.4Hz，1H)，3.69(m，2H)，3.53(m，2H)，3.33(m，4H)，1.90～1.53(m，7H)，0.93(m，1H)，0.82(s，9H)。

实施例98

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(1-甲基-哌啶-4-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-122)

[0258]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.41-7.22(m，3H)，7.07(m，2H)，6.81(d，J＝1.82Hz，1H)，6.67(dd，J＝8.10，1.83Hz，1H)，6.24(d，J＝8.10Hz，1H)，4.41(d，J＝7.83Hz，1H)，4.05(d，J＝7.83Hz，1H)，3.51(m，1H)，3.33(m，2H)，2.93(m，2H)，2.32(s，3H)，2.02(m，3H)，1.72(m，2H)，1.53(m，3H)，1.35(m，3H)，0.93(m，1H)，0.82(s，9H)。

实施例99

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-哌啶-4-基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-123)

[0259]¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)，δ7.34(m，1H)，7.20(m，1H)，7.07(m，2H)，6.80(d，J＝1.23Hz，1H)，6.64(dd，J＝8.11，1.83Hz，1H)，6.24(d，J＝8.11Hz，1H)，4.41(d，J＝7.81Hz，1H)，4.05(d，J＝7.81Hz，1H)，3.45(m，1H)，3.32(m，2H)，2.86(m，2H)，1.92(m，3H)，1.48(m，3H)，1.28(m，3H)，0.93(m，2H)，0.80(s，9H)。

实施例100

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5 ′-甲酸(4-吗啉-4-基-丁基)-酰胺(MDM2-119)

[0260][α]²⁵ _D 2.6(c，0.5 CHCl₃)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.82(br，1H)，7.34(m，1H)，7.24(dt，J＝1.43，6.90Hz，1H)，7.10～7.05(m，2H)，6.83(d，J＝1.80Hz，1H)，6.68(dd，J＝1.86，8.11Hz，1H)，6.26(d，J＝8.14Hz，1H)，4.42(d，J＝7.80Hz，1H)，4.07(d，J＝7.74Hz，1H)，3.73(t，J＝7.62Hz，4H)，3.48(d，J＝9.16Hz，1H)，3.34～3.20(m，2H)，2.45～2.31(m，6H)，1.58～1.47(m，5H)，0.92～0.88(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C MMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.57，172.06，142.60，134.37，130.01，126.36，125.66，122.35，110.52，67.33，66.67，65.90，62.83，58.89，54.04，43.76，39.53，30.56，30.21，27.86，24.16。

实施例101

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-环己基-乙基)-酰胺(MDM2-DQ-125)

[0261]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.37(m，1H)，7.35(m，1H)，7.23(m，1H)，7.06(m，2H)，6.86(s，1H)，6.68(d，J＝8.11Hz，1H)，6.30(d，J＝8.12Hz，1H)，4.46(m，1H)，4.12(m，1H)，3.48(m，1H)，3.31(m，2H)，2.38(m，1H)，1.67(m，5H)，1.29(m，3H)，1.17(m，4H)，0.91(m，2H)，0.81(s，9H)

实施例102

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-126)

[0262]¹H  NMR(300 MHz，D₂O)，δ7.36(m，1H)，7.19(m，1H)，7.05(m，2H)，6.77(s，1H)，6.50(d，J＝7.80Hz，1H)，6.26(d，J＝7.80Hz，1H)，4.46(d，J＝7.51Hz，1H)，4.37(d，J＝7.50Hz，1H)，4.05(m，1H)，3.60～3.21(m，12H)，2.90(s，3H)，1.83(m，1H)，0.98(m，1H)，0.89(s，9H)。

实施例103

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-129)

[0263]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.46(br，1H)，7.70(br，1H)，7.50(m，1H)，7.26(m，1H)，7.12(m，1H)，6.94(d，J＝1.56Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.10，1.80Hz，1H)，6.10(d，J＝8.10Hz，1H)，4.51(d，J＝6.30Hz，1H)，4.12(d，J＝6.30Hz，1H)，4.05(m，1H)，3.53-2.66(m，16H)，1.35(t，J＝7.2Hz，3H)，0.92(m，1H)，0.80(s，9H)。

实施例104

(2′R，3S，4S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺(MDM2-DQ-130)

[0264]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.80(br，1H)，7.88(br，1H)，7.52(m，1H)，7.24(m，1H)，7.13(m，1H)，6.97(s，1H)，6.61(d，J＝8.10Hz，1H)，6.08(d，J＝8.10Hz，1H)，4.63(m，1H)，4.17(m，1H)，3.61(m，1H)，3.59-2.60(m，14H)，1.55(m，1H)，1.35(d，J＝6.3Hz，6H)，0.92(m，1H)，0.80(s，9H)。

实施例105

(外消旋的)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺(KE-100)

[0265]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.93～7.85(m，2H)，7.38～7.30(m，2H)，7.02(t，J＝7.92Hz，1H)，6.83(d，J＝1.86Hz，1H)，6.20(dd，J＝1.91，8.31Hz，1H)，5.61(d，J＝8.16Hz，1H)，4.70(d，J＝7.86Hz，1H)，4.3 9(d，J＝7.83Hz，1H)，3.90(d，J＝7.31Hz，1H)，3.78～3.75(m，4H)，3.34～3.24(m，2H)，2.74(s，3H)，2.52～2.48(m，6H)，2.01～1.94(m，1H)，0.79(s，9H)，0.71～0.67(m，1H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ179.72，171.31，142.57，134.78，130.29，127.80，127.34，125.74，124.83，123.95，122.07，110.53，74.22，67.50，65.09，63.32，57.11，53.69，45.13，39.55，37.30，35.28，30.67，30.00。

实施例106

(外消旋的)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺

[0266]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.37(s，1H)，8.22(t，J＝5.55Hz，1H)，7.42～7.28(m，2H)，7.03(t，J＝7.45Hz，1H)，6.81(d，J＝1.85Hz，1H)，6.63(dd，J＝1.89，8.96Hz，1H)，5.87(d，J＝8.14Hz，1H)，4.6 5(d，J＝7.50Hz，1H)，4.37(d，J＝7.45Hz，1H)，4.05～4.01(m，1H)，3.77～3.74(m，4H)，3.30～3.24(m，2H)，2.69(s，3H)，2.46～2.39(m，6H)，1.89～1.66(m，2H)，1.42～1.38(m，1H)，0.99-0.87(m，2H)，0.76(d，J＝6.53Hz，3H)，0.69(d，J＝6.42Hz，3H)。

实施例107

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[3-(2-羟基-乙氧基)-丙基]-酰胺

[0267]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.59(s，1H)，7.36-7.06(m，4H)，6.84(d，J＝1.8Hz，1H)，6.66(dd，J1＝7.5Hz，J2＝1.5Hz，1H)，6.25(d，J＝8.1Hz，1H)，4.43(d，J＝4.8Hz，1H)，4.10(d，J＝4.2Hz，1H)，3.79-3.41(m，11H)，1.84-1.81(m，2H)，1.51-1.46(m，1H)，0.93-0.89(m，1H)，0.81(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.12，171.97，142.93，134.29，129.95，128.47，127.66，126.46，125.57，124.83，124.78，122.22，110.71，72.89，70.62，70.50，69.73，66.84，66.01，63.09，62.11，43.74，37.57，30.74，30.34，29.43。

实施例108

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸{2-[3-(2，2，2-三氟-乙基)-5，6-二氢-8H-[1，2，4]三唑并[4，3-A]吡嗪-7-基]-乙基}-酰胺

[0268]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.98(s，1H)，7.58(m，1H)，7.29-7.03(m，3H)，6.89(d，J＝3.2Hz，1H)，6.02(d，J＝8.1Hz，1H)，4.42(d，J＝6.1Hz，1H)，4.08-4.03(m，4H)，3.96(d，J＝5.6Hz，1H)，3.93-3.78(m，1H)，3.71-3.42(m，2H)，3.19-3.12(m，1H)，3.02-2.74(m，3H)，2.10(m，2H)，1.54-1.48(m，1H)，1.24(m，1H)，0.96-0.92(m，1H)，0.86(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ180.35，173.22，152.60，138.67，130.37，128.25，127.65，127.32，125.07，125.01，113.37，113.04，111.81，66.16，65.77，63.14，56.24，49.80，48.22，44.27，43.99，36.89，34.92，31.99，30.17，23.06，14.54。

实施例109

(2′R，3S，3″S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺

[0269]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.72(s，1H)，7.31-7.21(m，3H)，7.08-6.93(m，1H)，6.83(d，J＝1.6Hz，1H)，6.66(dd，J1＝8.1Hz，J2＝1.8Hz，1H)，6.27(d，J＝8.01Hz，1H)，4.43(d，J＝7.6Hz，1H)，4.20-4.03(m，3H)，3.58-3.45(m，5H)，2.67(m，1H)，1.75-1.67(m，2H)，1.49-1.24(m，3H)，0.78(s，9H)。

实施例110

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]-酰胺

[0270]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.64(s，1H)，7.32-7.19(m，3H)，7.08(t，J＝7.9Hz，1H)，6.85(d，J＝1.8Hz，1H)，6.68(dd，J1＝8.1Hz，J＝1.8Hz，1H)，6.32(d，J＝8.1Hz，1H)，4.46(d，J＝8.0Hz，1H)，4.12-4.03(m，1H)，3.62-3.41(m，9H)，3.38(s，3H)，2.85(br，1H)，1.52-1.47(m，1H)，0.98-0.89(m，1H)，0.82(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.41，171.90，143.07，129.94，128.50，127.70，126.97，125.49，124.85，124.81，12 3.18，122.17，121.94，121.68，110.81，72.19，70.56，70.16，67.34，66.71，63.46，56.39，51.89，43.66，39.18，30.32，29.29

实施例111

(2′R，3S，4′S，5′R)4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺

[0271]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.45-7.04(m，7H)，6.83(t，J＝7.5Hz，1H)，6.34(d，J＝7.5Hz，1)，4.45(d，J＝5.8Hz，1H)，4.11(d，J＝5.9Hz，1H)，3.75-3.69(m，4H)，3.54(d，J＝4.8Hz，1H)，3.42-3.40(m，2H)，2.5 5-2.50(m，7H)，1.58-1.53(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ178.44，171.32，153.92，153.58，130.24，129.61，127.56，125.13，124.92，124.40，124.14，122.12，111.13，110.92，67.61，67.33，66.48，62.19，57.18，53.83，52.55，44.72，35.91，30.63，30.40，30.19。

实施例112

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸

[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]-酰胺

[0272]在氩气下，向实施例110的化合物(1mmol)、20mL CH₃CN、0.5mL 37％的福尔马林和1.1mmol NaBH₃CN的溶液中加入2滴HOAc。将所得的溶液在室温下搅拌2小时，然后向其中加入50mL乙酸乙酯。将所得的混合物用NaHCO₃溶液和盐水进行洗涤并用Na₂SO₄对其进行干燥。除去溶剂并将残余物用柱进行纯化(收率～90％)。

[0273]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.01(br，1H)，7.52(m，1H)，7.28-7.02(m，2H)，6.85-6.52(m，3H)，4.15(m，1H)，3.87(m，1H)，3.72-3.51(m，8H)，3.44(s，3H)，2.96(m，1H)，2.52(s，3H)，2.16(m，1H)，1.61-1.48(m，2H)，0.58(s，9H)。

实施例113

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-吗啉-4-基-丙基)-酰胺

[0274]实施例113的化合物是通过与实施例112的操作相同的操作来进行制备的。

[0275]¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)δ7.97(br，1H)，7.52(m，1H)，7.14-6.98(m，2H)，6.85-6.52(m，3H)，4.17(m，1H)，3.85-3.62(m，6H)，3.52-3.32(m，3H)，3.06(m，1H)，2.55-2.25(m，9H)，1.61-1.48(m，2H)，0.57(s，9H)。

实施例114

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺

[0276]实施例114的化合物是通过与实施例112的操作相同的操作来进行制备的。

[0277]¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)，δ7.62～7.30(m，2H)，7.21-6.92(m，3H)，6.92-6.50(m，3H)，4.17(m，1H)，3.79-3.36(m，5H)，3.46～3.31(m，2H)，2.92(m，1H)，2.65～2.30(m，8H)，1.95(m，1H)，1.80～1.45(m，2H)，0.58(s，9H)。

实施例115

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基氨基甲酰基]-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-1′-甲酸甲基酯

[0278]实施例115的化合物是通过与实施例112的操作相同的操作来进行制备的。

[0279]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.89(s，1H)，7.26-7.20(m，2H)，7.05-7.03(m，1H)，6.84-6.82(m，2H)，4.85-4.82(m，1H)，4.11-4.05(m，1H)，3.97(s，3H)，3.81(s，3H)，3.58-3.47(m，8H)，2.59-2.44(m，3H)，1.81-1.75(m，1H)，1.34-1.30(m，1H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ171.62，169.46，151.15，139.49，138.03，135.56，131.03，129.02，127.68，125.62，124.88，124.82，124.62，116.82，72.19，70.69，70.16，66.16，63.24，61.27，59.43，54.71，53.62，43.21，39.92，29.79，23.06。

实施例116

(1″R，2″S，2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-5′-羟基甲基-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0280]在氩气下，向一个具有搅拌棒的100mL烧瓶中加入(2 S，3R)-2，3，5，6-四氢-2，3-二苯基-1，4-恶嗪-6-酮(1.0g，3.96mmol)，3-E-(2-氟-3-氯)-亚苄基-6-氯-1，3-二氢-吲哚-2-酮(4.75mmol)、2g新活化的4分子筛、3，3-二甲基-丁醛(4.75mmol)和甲苯(50mL)。将该混合物加热至70℃并将其在该温度下保持5小时。将该混合物冷却至室温并将分子筛滤出。在真空下除去溶剂并用色谱法对残余物进行纯化，得到所述1，3-偶极产物。

[0281]将所得的1，3-偶极产物(2.0mmol)溶解于乙醇/HCl(10mL)中并将所得的溶液回流一夜。在真空下除去溶剂并将残余物用NaHCO₃/H₂O进行中和并用乙酸乙酯对其进行萃取。将有机相用Na₂SO₄干燥。在真空下除去溶剂，将残余物溶解于20mL乙醇中并十分小心地向其中加入10mmol NaBH₄。将所得的混合物回流一夜。在真空下除去溶剂，将残余物用NaOH/H₂O进行处理并用乙酸乙酯对其进行萃取。将有机相用Na₂SO₄进行干燥。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0282]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.60～7.34(m，11H)，7.14～7.09(m，1H)，7.04～6.93(m，2H)，6.82(t，J＝7.98Hz，1H)，6.57(d，J＝1.82Hz，1H)，5.38(d，J＝8.61Hz，1H)，4.47(d，J＝8.40Hz，1H)，3.93(dd，J＝2.6，12.0Hz，1H)，3.74(d，J＝9.21Hz，1H)，3.63(d，J＝11.30Hz，1H)，3.11(t，J＝9.60Hz，1H)，2.64(s，1H)，2.37(d，J＝9.18Hz，1H)，1，84～1.75(m，1H)，1.15(d，J＝14.44Hz，1H)，0.54(s，9H)。

实施例117

(1″R，2″S，2′R，3S，4′S，5′R)5′-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0283]向化合物116(1.0mmol)在10mL DMF中的溶液中加入TBDMSC1(1.1mmol)和咪唑(1.1mmol)。将所得的溶液在室温下搅拌2小时。在真空下除去溶剂，将残余物用乙酸乙酯进行溶解并用盐水对其溶液进行洗涤。将有机相用Na₂SO₄进行干燥。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0284]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.62(d，J＝6.98Hz，2H)，7.48(d，J＝7.33Hz，2H)，7.38～7.06(m，11H)，6.82(t，J＝8.16Hz，1H)，6.65(d，J＝1.78Hz，1H)，5.54(d，J＝5.84Hz，1H)，4.5 4(d，J＝5.85Hz，1H)，4.23(d，J＝7.34Hz，1H)，4.10(s，1H)，3.82(d，J＝8.57Hz，1H)，3.73(dd，J＝3.36，11.10Hz，1H)，3.49(d，J＝10.23Hz，1H)，3.22(d，J＝9.12Hz，1H)，1.89～1.81(m，1H)，1.34(d，J＝15.60Hz，1H)，0.91(s，9H)，0.52(s，9H)、-0.05(s，3H)、-0.12(s，3H)。

实施例118

(1″R，2″S，2′R，3S，4′S，5′R)2，2-二甲基-丙酸2-[6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-羟基甲基-2-氧代-1，2-二氢-螺环

[吲哚-3，3′-吡咯烷]-1′-基]-1，2-二苯基-乙基酯

[0285]向化合物116(1.0mmol)在10mL CH₂Cl₂中的溶液中加入三甲基乙酰氯(1.5mmol)和二异丙基乙基胺(2.0mmol)并将所得的溶液在室温下搅拌一夜。在真空下除去溶剂并将残余物用乙酸乙酯溶解。向有机相中加入HCl(1mL)并将所得的混合物在室温下搅拌2小时。然后，向其中加入5mL NaHCO₃/H₂O并对这两相进行分离。将有机相用Na₂SO₄进行干燥。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0286]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.59～7.15(m，15H)，6.84～6.82(m，2H)，5.40(d，J＝8.10Hz，1H)，4.48(d，J＝8.31Hz，1H)，8.18～8.10(m，1H)，3.94(dd，J＝2.52，11.87Hz，1H)，3.77(d，J＝8.72Hz，1H)，3.56(d，J＝10.02Hz，1H)，3.16(d，J＝11.80Hz，1H)，1.66～1.57(m，1H)，1.30～1.28(m，1H)，1.15(s，9H)，0.56(s，9H)。

实施例119

(1″R，2″S，2′R，3S，4′S，5′R)2，2-二甲基-丙酸2-[5′-溴甲基-6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环

[吲哚-3，3′-吡咯烷]-1′-基]-1，2-二苯基-乙基酯

[0287]向化合物118(1.0mmol)在10mL CH₂Cl₂中的溶液中加入CBr₄(1.5mmol)和Ph₃P(1.5mmol)并将所得的溶液在室温下搅拌6小时。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0288]¹H NMR(300 MHz，CDCl₃)，δ7.64(d，J＝6.69Hz，2H)，7.50(d，J＝7.20Hz，2H)，7.39～6.84(m，13H)，5.42(d，J＝7.40Hz，1H)，4.53(d，J＝6.90Hz，1H)，4.19(d，J＝9.00Hz，1H)，3.79(d，J＝8.61Hz，1H)，3.63～3.58(m，2H)，3.23(s，1H)，1.57～1.54(m，1H)，1.36～1.30(m，1H)，1.25(s，9H)，0.54(s，9H)。

实施例120

(1″R，2″S，2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-(2-羟基-1，2-二苯基-乙基)-5′-(2-吗啉-4-基-乙氧基甲基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0289]向2-吗啉-4-基-乙醇(10mmol)在10mL无水THF中的溶液中加入NaH(10mmol)并将所得的混合物在室温下搅拌2小时。然后，向其中加入化合物119(1mmol)并将所得的混合物在室温下搅拌一夜。在真空下除去溶剂，将残余物用乙酸乙酯溶解并用盐水对该溶液进行洗涤。将有机相用Na₂SO₄进行干燥。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0290]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.67(d，J＝7.05Hz，2H)，7.50(d，J＝7.38Hz，2H)，7.45～7.07(m，11H)，6.83(t，J＝7.94Hz，1H)，6.64(d，J＝1.79Hz，1H)，5.48(d，J＝5.68Hz，1H)，4.53(d，J＝5.82Hz，1H)，4.20(d，J＝10.61Hz，1H)，4.10(s，1H)，3.85(d，J＝5.66Hz，1H)，3.74～3.40(m，8H)，3.00(dd，J＝2.25，9.60Hz，1H)，2.61～2.49(m，6H)，1.91～1.84(m，1H)，1.35～1.30(m，1H)，0.55(s，9H)。

实施例121

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-(2-吗啉-4-基-乙氧基甲基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0291]在0℃下，向化合物120(2.0mmol)在CH₂Cl₂-MeOH(10mL，1∶1)中的溶液中加入Pb(OAc)₄(1.34g，3.0mmol)。将该反应在0℃下搅拌约5-10分钟，将该溶液用一根短硅胶柱进行过滤。在真空下除去溶剂并将残余物用色谱法进行纯化，得到所述产物。

[0292]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.12(s，1H)，7.39～6.71(m，6H)，4.18～3.40(m，11H)，2.63～2.47(m，7H)，1.29～1.13(m，2H)，0.85(s，9H)。

实施例122

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-1′-甲基-5′-(2-吗啉-4-基-乙氧基甲基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0293]化合物122是用与实施例112的操作相同的操作来获得的。

[0294]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ7.50(d，J＝8.66Hz，1H)，7.28～7.17(m，3H)，7.02～6.88(m，1H)，6.88(d，J＝1.80Hz，1H)，5.02～4.80(m，1H)，3.96(d，J＝11.15Hz，1H)，3.68(t，J＝4.50Hz，4H)，3.57～3.53(m，2H)，3.40～3.32(m，2H)，3.03(d，J＝6.83Hz，1H)，2.55(s，3H)，2.48～2.40(m，6H)，1.76～1.68(m，1H)，1.47(d，J＝15.10Hz，1H)，0.61(s，9H)。

实施例123

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺盐酸盐

[0295]¹H  NMR(300MHz，CD₃OD)，δ8.46(br，1H)，7.50～7.38(m，2H)，7.30～7.14(m，4H)，6.92(dd，J＝1.93，8.13Hz，1H)，6.80(d，J＝1.83Hz，1H)，5.08(d，J＝10.84Hz，1H)，4.30～4.26(m，1H)，4.20(d，J＝10.85Hz，1H)，3.51～3.31(m，8H)，2.05～2.00(m，1H)，1.64～1.46(m，3H)，0.85(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)，δ178.78，165.54，143.64，135.89，135.44，131.84，131.77，130.54，127.53，127.18，125.57，122.68，122.27，110.67，69.67，66.09，63.31，63.23，61.13，60.58，56.20，41.53，36.90，32.66，29.85，28.49；EIMS：580.1(M⁺+1)。

实施例124

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺

[0296]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.34(br，1H)，7.70(t，J＝6.00Hz，1H)，7.27-7.12(m，3H)，7.00(s，1H)，6.90(d，J＝7.40Hz，1H)，6.78(d，J＝6.10Hz，1H)，5.84(d，J＝8.94Hz，1H)，4.36(d，J＝5.14Hz，1H)，3.80～3.47(m，7H)，1.70～1.98(m，2H)，1.52～1.44(m，1H)，0.94～0.90(m，1H)，0.83(s，9H)；EIMS：552.2(M⁺+1)。

实施例125

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3-羟基-4-TRITYLOXY-丁基)-酰胺

[0297]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.46(br，1H)，7.46～7.23(m，15H)，7.18～7.09(m，3H)，6.90(d，J＝7.00Hz，1H)，6.80(s，1H)，6.69(d，J＝7.90Hz，1H)，6.19(d，J＝7.59Hz，1H)，4.33(5.82Hz，1H)，3.88(br，1H)，3.83(d，J＝6.56Hz，1H)，3.65～3.55(m，2H)，3.34～3.10(m，4H)，2.71(br，1H)，1.73～1.48(m，3H)，0.96～0.91(m，1H)，0.84(s，9H)。

实施例126

(2′R，3S，4′S，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5′-(吗啉-4-羰基)-1H-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-2-酮

[0298]¹H  NMR(300MHz，CDCl₃)，δ8.39(br，1H)，7.27～7.13(m，2H)，7.05～6.99(m，1H)，6.87(d，J＝1.57Hz，1H)，6.72(dd，J＝1.43，8.08Hz，1H)，6.49(d，J＝8.05Hz，1H)，4.61-4.54(m，1H)，4.39(d，J＝8.04Hz，1H)，3.80～3.45(m，8H)，2.97(m，1H)，1.80(br，1H)，1.51～1.42(m，1H)，0.90～0.87(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，δ181.47，168.74，142.90，134.17，130.24，128.44，128.25，126.69，125.37，125.11，122.38，122.31，110.75，68.96，67.26，67.17，64.38，63.97，52.84，46.62，43.21，31.99，30.58，30.24。

实施例127

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基)-酰胺盐酸盐

[0299]¹H  NMR(300MHz，CD₃OD)，δ8.46(br，1H)，7.26～7.15(m，6H)，6.92(dd，J＝1.83，8.13Hz，1H)，6.80(d，J＝1.81Hz，1H)，5.13(br，1H)，5.09(d，J＝10.71Hz，1H)，4.30～4.18(m，2H)，3.50～3.30(m，7H)，2.07～2.00(m，1H)，1.65～1.45(m，3H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)，δ178.76，165.45，143.66，135.62，135.45，134.68，130.34，128.88，128.78，127.13，125.51，122.28，110.67，69.67，66.07，63.30，63.21，61.06，60.58，56.18，41.49，37.05，36.91，32.64，29.84，28.48；EIMS：534.2(M⁺+1)。

实施例128

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺

[0300]¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ10.44(br，1H)，8.11(br，1H)，7.73(t，J＝6.69Hz，1H)，7.44～7.15(m，2H)，6.88～6.82(m，2H)，4.29～4.28(m，3H)，3.94(d，J＝9.60Hz，1H)，3.32～3.00(m，4H)，2.60～2.50(m，1H)，1.52～1.17(m，3H)，0.82(s，9H)。EIMS：570.2(M⁺+1)。

实施例129

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)4′-(3-溴-苯基)-6-氯-2′-(2，2-二甲基-丙基)-5-氟-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺

[0301]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.47(br，1H)，7.72(t，J＝5.59Hz，1H)，7.37(d，J＝7.84Hz，1H)，7.18(s，1H)，7.11(t，J＝7.77Hz，1H)，6.95(d，J＝7.74Hz，1H)，6.78(d，J＝9.04Hz，1H)，5.85(d，J＝8.96Hz，1H)，4.60(br，1H)，4.35(d，J＝4.94Hz，1H)，3.85～3.40(m，8H)，1.75～1.65(m，2H)，1.51～1.43(m，1H)，0.90～0.88(m，1H)，0.83(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)，180.62，174.19，155.61，141.86，138.55，132.04，131.33，130.66，127.12，123.26，121.14，114.20，111.91，70.47，67.14，66.98，65.20，63.49，55.96，44.34，36.97，33.23，30.55，30.27。

实施例130

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-2-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(4-羟基-丁基)-酰胺

[0302]¹H NMR(300MHz，CDCl₃)，δ9.63(br，1H)，7.84(s，1H)，7.47(s，1H)，7.23(t，J＝7.23Hz，1H)，7.09(t，J＝7.20Hz，1H)，6.91(s，1H)，6.65(d，J＝8.07Hz，1H)，6.22(d，J＝7.25Hz，1H)，4.61(m，1H)，4.12(m，1H)，3.65(m，3H)，3.48-3.25(m，4H)，1.65～1.50(m，5H)，0.91～0.90(m，1H)，0.86(s，9H)。

实施例131

(2′R，3S，3″S，4′R，5′R)6-氯-4′-(3-氯-4-氟-苯基)-2′-(2，2-二甲基-丙基)-2-氧代-1，2-二氢-螺环[吲哚-3，3′-吡咯烷]-5′-甲酸(3，4-二羟基-丁基)-酰胺

[0303][α]²⁵ _D 71.1(c，1.0MeOH)；¹H NMR(300MHz，CD₃COCD₃)，δ9.74(s，1H)，7.74(t，J＝5.8Hz，1H)，7.43(dd，J＝2.0，7.1Hz，1H)，7.33-6.84(m，5H)，4.42(d，J＝8.4Hz，1H)，4.05-3.98(m，1H)，3.91(d，J＝8.1Hz，1H)，3.70-3.33(m，6H)，3.04(br，2H)，1.53-1.45(m，3H)，0.98-.091(m，1H)，0.84(s，9H)；¹³C NMR(75MHz，CD₃COCD₃)，δ180.40，172.20，158.73，155.46，144.00，136.86，133.30，131.19，129.97，128.64，126.92，121.36，109.91，69.97，67.33，67.22，66.73，64.40，58.92，44.49，36.39，33.63，29.40.ESIMS[M+Na]＝574.1。

实施例132

P53-MDM2相互作用的竞争性抑制

[0304]用实施例2所述的FP结合试验来检验所合成的一些化合物抑制MDM2和p53之间相互作用的能力。对化合物Ke-43(实施例41)、Ke-61(实施例65)、PMDM6(实施例2)、和Ke-63(实施例88)对天然p53肽的作用进行了试验(实施例2)。表明化合物Ke-43、PMDM6、和Ke-63对天然p53肽的效力更强，其具有范围为低nM至低于nM范围的K_i值(图9)。

实施例133

MDM2抑制剂对P53-MDM2相互作用的瓦解

[0305]进行免疫共沉淀(Co-IP)/免疫印迹分析试验来对Ke-43对p53-MDM2相互作用的影响进行评估。在收获和用冷PBS洗涤一次后，通过在包含1mM苯基甲磺酰氯和蛋白酶抑制剂鸡尾酒的冷Co-IP缓冲液(50mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1mM EDTA(pH8.0)，0.5％NP-40)中进行声处理来使HCT116结肠癌细胞溶解。然后，将进行了声处理的溶胞产物在12,000xg下在4℃下离心15分钟。将包含2mg蛋白的上清液在不存在或存在Ke-43的情况下在4℃下培养1小时，然后向其中加入与抗-p53抗体(FL-393，Santa Cruz)或者非特异性抗体轭合的琼脂糖小珠。在将其在4℃下混合2小时后，将该琼脂糖小珠用冷Co-IP缓冲液洗涤3次，将其在样品缓冲液中煮沸，然后进行SDS-PAGE，用使用对抗p53和MDM-2蛋白的小鼠单克隆抗体的蛋白印迹分析来探测存在的p53和MDM2。浓度渐增的Ke-43通过抗-p53抗体使得MDM2的免疫沉淀降低，表明Ke-43破坏了p53和MDM2之间的相互作用(图10)。

实施例134

MDM2抑制剂的细胞生长抑制作用

[0306]将RKO(野生型p53)、HCT116(野生型p53)、和HT-29(突变型p53)结肠癌细胞系以3-4×10³个细胞/孔的密度接种到96-孔平底细胞培养板中并将其在存在化合物的情况下培养4天。在用浓度渐增的化合物进行处理后，用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4二磺基苯基)-2H-四唑翁单钠盐(Dojindo MolecularTechnologies Inc.，Gaithersburg，马里兰)测定细胞生长抑制速率。以10％的终浓度向各孔中加入WST-8并将这些板在37℃下培养2-3小时。在板式读数器中在450nm下测量这些样品的吸光度(MolecularDevice-TECAN ULTRA)。通过对用所述化合物进行处理的细胞的吸光度和未进行处理的细胞的吸光度进行比较来计算将细胞生长抑制50％的化合物浓度(IC₅₀)。表明对于表达野生型p53的癌细胞而言，化合物Ke-43(实施例41)是一种有效的生长抑制剂(图11)。对表达野生型p53的癌细胞的特异性显著高于表达突变型p53(HT-29)的癌细胞，其分别比其高18-倍(HCT116)和13-倍(RKO)(图11)。

实施例135

MDM2抑制剂对P53以及其目标基因产物MDM2和P21表达的作用

[0307]将癌细胞用试验化合物或0.1％DMSO处理24小时。通过胰蛋白酶消化来收集这些细胞并用冷磷酸盐缓冲的盐水，pH7.5(Invitrogen，Carlsbad，CA)对其进行洗涤。将这些细胞在包含2mM原钒酸钠、1mM苯基甲磺酰氟和蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Roche AppliedScience，Indianapolis，IN)的冰冷的溶解缓冲液(50mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1mM EDTA(pH8.0)，25mM氟化钠，1％NP-40和0.1％SDS)中溶解30分钟。接下来，将这些细胞提取物在12,000xg下在4℃下离心10分钟从而获得一种澄清的溶胞产物。用Bio-Rad染料来对蛋白进行估算。将包含35μg蛋白的细胞溶胞产物在4-20％tris-甘氨酸凝胶(Invitrogen，Carlsbad，CA)上进行拆解并将其转移到聚(偏二氟乙烯)膜上。用抗-p53(Ab-6，Oncogene Research Products，Boston，MA)、抗-MDM2(SMP 14，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)和抗-p21(BD Biosciences，San Diego，CA)小鼠单克隆抗体在所述转移膜上进行蛋白的免疫检测。用β-肌动蛋白抗体(Sigma，St Louis，MO)来对蛋白负载进行评估。当将RKO(野生型p53)和HT-29(突变型p53)结肠癌细胞系用Ke-43(实施例41)处理24小时时，Ke-43仅在表达野生型p53的RKO细胞中诱导了p53以及其目标基因-产物的蓄积(图12)。

实施例136

MDM2抑制剂诱导的细胞死亡和细胞凋亡

[0308]将RKO(野生型p53)和HT-29(突变型p53)结肠癌细胞系和CCD-18Co正常结肠成纤维细胞在6-孔陪替氏培养皿中用剂量渐增的Ke-43或Ke-61处理4天。进行台盼蓝染料排除试验以测定所述抑制剂诱导细胞死亡的能力。在处理4天后，收获漂浮和粘连的细胞并用0.2％台盼蓝染料溶液(Sigma，St Louis，MO)对其进行染色。各处理都是一式三份地进行的并且对至少100个细胞进行计数。将被染蓝的细胞或者形态上不健康的细胞记为死亡细胞。为了对细胞凋亡进行评估，通过propidium iodide(PI)染色来对用或不用试验抑制剂进行了处理的细胞中的亚二倍体DNA含量进行分析。在用冷PBS洗涤一次后，将这些细胞在70％乙醇中在-20℃下固定1天。然后，将该进行了乙醇固定的细胞用PBS洗涤两次并用在PBS中包含50μg/ml的propidiumiodide(PI)和100μg/ml的RNAse的染色溶液在室温下在黑暗中对其染色20分钟。用CellQuest软件，通过流式细胞计来进行细胞收获和亚二倍体DNA含量的分析。在使用Ke-43时，仅表达野生型p53的癌细胞对其发生响应进行细胞凋亡(图13)。

实施例137

MDM2抑制剂对结肠癌细胞的细胞周期进行的影响

[0309]通过混入溴脱氧尿苷(BrdU)，然后用FITC-标记的抗-BrdU抗体进行染色测定S-相细胞和根据制造商的指导(BD Biosciences，SanJose，CA)用7-氨基放线菌素D(7-AAD)进行染色测定总DNA-含量来对RKO(野生型p53)和HT-29(突变型p53)结肠癌细胞系和CCD-18Co正常结肠成纤维细胞中的细胞周期进程进行评估。简单地说，在培养一夜后，将癌细胞和正常细胞用试验化合物或者在不使用试验化合物的情况下处理22小时，然后再将其与10μM BrdU一起培养2小时。对细胞进行收集，固定并用FITC-标记的抗-BrdU和7-AAD对其进行染色。用流式细胞计对细胞周期分布进行分析。收集细胞并用CellQuest软件(BDBiosciences)对数据进行分析。Ke-43在表达野生型p53的RKO癌细胞和CCD-18Co正常人结肠成纤维细胞中都剂量依赖性地诱导了S-相的缺失(图14)。但是，Ke-43对表达突变型p53的HT-29细胞的细胞周期进程没有可察觉的影响(图14)。无活性的对照抑制剂Ke-61对所有这些试验细胞都没有显著影响。

实施例138

保护正常细胞不受用MDM2抑制剂进行的化疗影响的保护作用

[0310]将PrEC正常前列腺上皮细胞接种到6孔板中并将其与Ke-63(1μM和2.5μM)一起培养24小时，然后向其中加入1μMTAXOL(紫杉醇)再培养2天。用台盼蓝来测定细胞活力。数据表明当将正常前列腺上皮细胞用Ke-63预处理时，这些细胞受到了保护不受紫杉醇的影响(图15)

[0311]现在已经对本发明进行了充分描述，本领域技术人员应当清楚的是其同样可以在不影响本发明范围以及其任何实施方案的情况下，在一些情况、制剂和参数的很宽的等同范围内来进行。这里所列举的所有专利、专利申请和公开物在这里都被全部引入作为参考。

Claims (57)

1.式I的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

X是CH、O、N、或S，其中当X是O或S时R₈不存在；

Y是O、S、或NR′；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆和R₇独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(O＝NR′)NR″R、或NR′R″；或者

R₇与R₅或R₆中的一个形成一种芳基、环烷基、或杂环基团；

R₈是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、SO₂NR′R″、或(C＝NR′)NR″R；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；和

R′、R″和R各自独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一种环；或者

当R₃和R₄中的一个是CONRR′时，则R和R′中的另一个还可以是(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

2.具有式II或式III的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

3.具有式IV的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

4.具有式V或式VI的如权利要求3所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

5.具有式VII的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

6.具有式VIII或式IX的如权利要求5所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

7.如权利要求1所述的化合物，其中R₁和R₂中的一个是任选地被取代的芳基或杂芳基。

8.如权利要求1所述的化合物，其中R₁和R₂中的一个是环烷基、直链或支链烷基、酰胺或酯。

9.如权利要求1所述的化合物，其中R₅和R₆中的一个是C_3-18烷基、芳基、或杂芳基。

10.具有式X的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

11.具有式XI-XXVI中的一种的如权利要求10所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

12.具有式XXIX的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

Z是O、NH、NR′、CH₂、CHR′、或CR′R″；

R₁₀是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″；-CO-R′、-SOR′、-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

13.具有式XXX-XLV中的一种的如权利要求12所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

14.具有式XXVII或式XXVIII的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6.

15.具有式XLVI的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

16.具有式XLVII的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

R₁₂是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；和

n是0、1、或2。

17.具有式XLVIII的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

18.具有式XLIX-LXIV中的一种的如权利要求17所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

19.具有式LXV的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

20.具有式LXVI和LXVII中的一种的如权利要求19所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物。

21.具有式LXVIII和LXIX中的一种的如权利要求1所述的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

Z是O、NH、NR′、CH₂、CHR′、或CR′R″；

R₁₁是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″；-CO-R′、-SOR′、-SO₂R′；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

22.一种制备式X化合物的方法，其包括：

a)将式1的化合物与式2的化合物缩合，从而形成式3的化合物；

b)将式3的化合物与式4的化合物和式5的化合物缩合，从而形成式6的化合物；和

c)将式6的化合物用氧化剂进行处理，从而形成一种式X的化合物；

其中：

R₁和R₅独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R或NR′R″；

R₇是H；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；

n、m、和p各自独立地是1-6；和

R′、R″和R各自独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一种环。

23.一种制备式LXV化合物的方法，其包括：

a)将式16的化合物与式2的化合物缩合，从而形成式17的化合物；

b)将式17的化合物与式4的化合物和式5的化合物进行缩合，从而形成式18的化合物；和

c)将式18的化合物用氧化剂进行处理，从而形成一种式LXV的化合物

其中：

R₁和R₅独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；

R₄是H；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；

R₁₀和R₁₁独立地是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、-CO-R′、-SOR′、或-SO₂R′；

n、m、和p各自独立地是1-6；和

R′、R″和R各自独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一种环。

24.一种制备式XXIX化合物的方法，其包括：

a)将式3的化合物与式4的化合物和式5的化合物缩合，从而形成式7的化合物；

b)将式7的化合物在存在酸的情况下进行加热，然后向其中加入还原剂，从而形成式8的化合物；

c)将式8的化合物与阻滞剂，然后与三甲基乙酰氯，然后与酸缩合，从而形成式10的化合物；

d)将式10的化合物用卤化剂进行处理，从而形成式11的卤代化合物；

e)将式11化合物的卤代基团用R₁₀ONa或R₁₀NH₂置换，从而形成式12的化合物；

f)将式12的化合物用氧化剂进行处理，从而形成式13的化合物；和

g)将式13的化合物用烷化剂烷基化，从而形成式XXIX的化合物；

其中：

R₁和R₅独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″；

R₇是任选地被取代的烷基、链烯基、炔基、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、SO₂NR′R″、或(C＝NR′)NR″R；

R₉是一至四个独立地选自H、F、Cl、Br、I、OH、NO₂、烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、OR′、CO₂R′、OCOR′、CONR′R″、NR″COR′、NR′SO₂R″、SO₂NR′R″、(C＝NR′)NR″R、或NR′R″的基团；

R′、R″和R各自独立地是H或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、或杂环；或者

R′和R″、或者R″和R形成一种环；

R₁₀是H、OH或任选地被取代的烷基、环烷基、链烯基、环链烯基、炔基、芳基、杂环、(CH₂)_n-R′、(CH₂)_n-NR′R″、(CH₂)_n-NR′COR″、(CH₂)_n-NR′SO₂R″、(CH₂)_n-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_n-COOH、(CH₂)_n-COOR′、(CH₂)_n-CONR′R″、(CH₂)_n-OR′、(CH₂)_n-SR′、(CH₂)_n-COR′、(CH₂)_n-SO₃H、(CH₂)_n-SONR′R″、(CH₂)_n-SO₂NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_mCONR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OH、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-OR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-COOR′、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-CONR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′R″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′COR″、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′(C＝NR″)NR、(CH₂)_p-(CH₂CH₂O)_n-(CH₂)_m-NR′SO₂R″；-CO-R′、-SOR′、-SO₂R′；

Z是O、NH、NR′、CH₂、CHR′、或CR′R″；和

n、m、和p各自独立地是1-6。

25.一种包含如权利要求1所述的化合物和可药用载体的药物组合物。

26.一种抑制细胞生长和/或分裂、在细胞中诱导细胞凋亡和/或诱导细胞周期停滞的方法，其包括将所述细胞与如权利要求1所述的化合物进行接触。

27.一种使细胞对另外的物质敏感的方法，其包括将所述细胞与如权利要求1所述的化合物进行接触。

28.如权利要求27所述的方法，其还包括将所述细胞与另外的物质进行接触。

29.如权利要求28所述的方法，其中所述的另外的物质是一种化疗剂。

30.如权利要求28所述的方法，其中所述的另外的物质是辐射。

31.一种治疗、改善或预防动物的病症的方法，其包括给所述动物使用治疗有效量如权利要求1所述的化合物。

32.如权利要求31所述的方法，其还包括使用另外的物质。

33.如权利要求32所述的方法，其中所述的另外的物质是一种化疗剂。

34.如权利要求32所述的方法，其中所述的另外的物质是辐射。

35.如权利要求31所述的方法，其中所述的病症是过度增生性疾病。

36.如权利要求35所述的方法，其中所述的过度增生性疾病是癌症。

37.如权利要求32所述的方法，其中在给予所述另外的物质之前给予所述的如权利要求1所述的化合物。

38.如权利要求32所述的方法，其中在给予所述另外的物质之后给予所述的如权利要求1所述的化合物。

39.如权利要求32所述的方法，其中将所述的如权利要求1所述的化合物与所述的另外的物质同时给药。

40.一种抑制细胞中p53或与p53有关的蛋白和MDM2或与MDM2有关的蛋白之间的相互作用的方法，其包括使所述细胞与如权利要求1所述的化合物进行接触。

41.一种抑制包含功能性p53或与p53有关的蛋白的过度增生细胞生长的方法，其包括使所述细胞与如权利要求1所述的化合物进行接触。

42.一种治疗、改善或预防特征在于在动物体内表达功能性p53或与p53有关的蛋白的过度增生性疾病的方法，其包括给所述动物使用治疗有效量如权利要求1所述的化合物。

43.一种使正常细胞耐受化疗剂或一些治疗的方法，其包括使所述细胞与如权利要求1所述的化合物进行接触。

44.如权利要求43所述的方法，其中所述的正常细胞包含野生型p53。

45.一种保护患有过度增生性疾病的动物体内的正常细胞不受化疗剂或一些治疗的毒副作用影响的方法，其包括给所述动物使用如权利要求1所述的化合物。

46.如权利要求45所述的方法，其中所述的正常细胞包含野生型p53。

47.如权利要求45所述的方法，其中所述的过度增生性疾病是癌症。

48.如权利要求47所述的方法，其中所述的癌症包含p53的突变或缺失。

49.一种治疗、改善、或预防由于使用化疗剂或进行治疗所造成的疾病或情况的方法，其包括将如权利要求1所述的化合物和化疗剂共同给药于进行治疗的动物或者在进行治疗的同时共同给予如权利要求1所述的化合物。

50.如权利要求49所述的方法，其中所述的病症或情况是粘膜炎、口腔炎、口腔干燥、胃肠病症、或脱发。

51.如权利要求49所述的方法，其中在给予所述化疗剂或进行治疗前给予所述的如权利要求1所述的化合物。

52.一种包含如权利要求1所述化合物的药盒。

53.如权利要求52所述的药盒，其还包含用于将所述化合物给药于动物的说明。

54.如权利要求52所述的药盒，其还包括另外的物质。

55.如权利要求54所述的药盒，其中所述的另外的物质是一种化疗剂。

56.如权利要求53所述的药盒，其中所述的说明是用于说明将所述化合物给药于患有过度增生性疾病的动物。

57.如权利要求56所述的药盒，其中所述的过度增生性疾病是癌症。

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