SU1574178A3 - Способ получени производных 4-замещенного андростендиона, или их фармацевтически приемлемых солей - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к производным стероидов, в частности к получению производных 4-замещенного андростендиона ф-лы @ где ( @ ) означает, что (X) и (Y) независимо означают ординарную св зь или двойную св зь

или их формацевтически приемлемых солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами. Цель - разработка способа получени  более активных соединений указанного класса. Получение ведут восстановлением соответствующего 4-азидоандростендиона, получа  соединение ф-лы 1 и, если необходимо, соединение ф-лы I, где (X) - ординарна  св зь, а (Y) - двойна  св зь, подвергают восстановлению, получа  соответствующее соединение ф-лы I, где (X) и (Y) - оба ординарна  св зь, и, если необходимо, соединение ф-лы I, где (X) - ординарна  св зь, подвергают окислению, получа  соответствующее соединение ф-лы I, где (X) двойна  св зь, если необходимо, полученные соединени  ф-лы I подвергают солеобразованию. 1 табл.

Description

Ч)

ХрУNH ,

Изобретение относитс  к способу получени  новых производных 4-замещенного андростендиона, формулы

О

где - - - и (X) и (Y) независимо означают ординарную или двойную св зь, или их приемлемых дл  фармацевтики солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретени  - получение новых производных андростендиона, обладающих преимуществами в сравнении с известными, например А -тесголо- лактоном..

3

с

Пример 1. 4-Азидоандрост-4- ен-3,1 7-дион (Формула (II), где (X)1 (Y) - ординарна  св зь).

К перемешиваемому раствору, сое- то щему из J,0 г 4-метансульфоцилок- сиандрост-4-ен-З,17-диона в 5 мл диметилформамида, добавл ют 220 мг растертого в порошок азида натри , растворенного в 3 мл воды. Получив- Иуюс  смесь нагревают при 60°С в те- .чение 1 ч, охлаждают, приливают к 250 мл холодной воды, и экстрагируют ртилацетатом ( мл). Перемешанные Экстракты промывают насыщенным вод- раствором NaCl, сушат над Подвергают вакуум-вьшарке, чтобы поручить остаток, который очищают экспресс-хроматографией на нейтральном А120$. Элюирование смесью н-гексан: Простой диэтиловый эфир дает 0,52 г соединени , т.пл. 142-14J3 С.

УФ (95% EtOH),VMaKC 284 нм, 8 « 9,844.

ИК (Nujol): Хмакс - 2100, 1730, 4670, 1590 см-1 .

ЯМР (CDC13 + DM CO), 8 : 0,91 (ЗН s) s 1,21 (ЗН, s), 3,10 (lH,s) .

Пример 2. 4-Азидоандрост- -4-ен-3,17 дион (формула (II), где (X) (Y) - ординарна  св зь).

К переметиваемоу раствору из 1,5 |4,5-эпоксиандроста-3,17 диона в 26 м диметилсульфоксида и 0,35 мл концентрированной серной кислоты добавл ют 5,2 г порошкообразного азида натри . Смесь нагревают при 40°С в течение 40 мин, охлаждают, приливают к 250 мл лед ной воды и экстрагируют этилаце- татом ( мл). Перемешанные экст- ракты обрабатывают. Получают 115 г соединени , т.пл. 142-143°С.

Пример 3. 4-Азидоандрост-4- -ен-3,17-дион (формула (II), где (X) (Y) - ординарна  св зь).

К перемешиваемому раствору из 1,1 бромоандрост-4-ен-З,17-диона в 57,4 мп диметилформамида добавл ют 0,250 г азида натри . Получающуюс  смесь нагревают при 30-35°С в течение 72 ч, охлаждают и обрабатывают. Получают 0,467 г соединени , т.пл. (МеОН) 143-144°С (разл.).

W - +237° (С 1, СНС1,). УФ (95% ШШ) : мо,кс 284 нм, .Ј 10,495,1

Пример 4. 4-Азидоандрост- -1,4,6-триен-З,17-дион (формула (II

,

0

5

где R - N,, R 1 R Н, (X) (X) - двойна  св зь).

К перемешиваемому раствору из 0,5 г 6-бром- 7-ацетоксиандрост-1 ,4- -диен-3,17-диона в 30 мл диметилформамида и 1,2 мл воды добавл ют 0,11 г азида натри . Реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 45 мин, охлаждают , приливают к 500 мл лед ной воды и экстрагируют этилацетатом. Перемешанные экстракты промывают водой , сушат над сульфатом натри , фильтруют и выпаривают в вакууме, чтобы получить остаток, который очищают с помощью капилл рной хроматографии на силикагеле. Элюирование смесью н-гексан: этилацетат в соотношении 30-70 дает 0,28 г соединени , т.пл. J23-125°C (разл.). ЕеОу +155° (С 0,5,СНС1Э).

ИК (Nujol): MqKC 2120, 1740, 1650, 1630, 1605, 1575 см-1.

ЯМР(СВС1,),5 :0,92 (3H,s), 1,18 (3H,s); 6,22 (lH,dd)i 6,26 (lH,d)J 6,66 (lH,dd); 7,29(lH,d).

Поступа  аналогичным образом получают соединение и из 6Й, 7р6-дибром- tандрост-1,4-диен-З,17-диона.

. Пример 5. 4 Азидоандрост-1,4- диен-3,17-дион (формула .(II), где R N4, R, R Н, (X) - двойна  св зь, (Y) - ординарна  св зь).

Соединение получают из 4-метан- сульфонил-оксиандрост-1,4-диен-З,17- -диона и азида натри  по процедуре примера 1.

По другому варианту соединение получают из 4,5-эпоксиандрост-1-ен- -3,17-диона и азида натри , следу  примеру 4, т.пл.144-146°С (разл.).

УФ (95% EtIH): Макс 239 нм, Ј 15,945, Ънаи 303 нм, б . 4,490.

ИК (Nujol):#MaKc 2110, 1730, 1650, 1630, 1595 .

ЯМР (CDC13X : 0,93 (ЗН, s); 1,25 (3H,s); 3S15 (lH,m); 6,27 (1H,d); 7,08 (lH,d).

Пример 6. 4-Аминоандрост- -4-ен-3,17-дион (формала (I), где (X) (Y) - ординарна  св зь).

К суспензии, состо щей из 3,83 г ,4-азидоандрост-4-ен-3,17-диона в 600 мл свежедистиллированного безводного метанола, добавл ют 9 мл пропан-1,3-дитиола и 12 мл триэтил- амина. Получившуюс  желтую смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 7 ч. приливают в воду, повышают рН до 2, добавл   1 н, водный раствор НС1, промывают простым диэтиловым эфиром. Водную фазу нейтрализуют 2 н.водным раствором NaOH, получившийс  осадок отфильтровывают, сушат и кристаллизуют из этилацетата. Получают 2,60 г соединени , т.пл.186-188°С.

tcGj +1670 (С 1, СНСЬ).

УФ (95% EtOH):,, 294 нм, е 7,354. ,

ЯМР (CDC1,),Ј : 0,93 (3H,s)J 1,20 (2H,s); 290 (2H,m).

Использу  методику примера 6 получены следующие соединени :

4-аминоандрост 4,6-диен-З, 1 7-дион- (1 ,R NHi} R,, (X) - ординар- на  св зь, (Y) - двойна  св зь), в виде твердого вещества желтого цвета т.пл. 148-150°С (разл.).

Мв + 199, Г (С 1, СНС13).

УФ (95% EtOH): макс 347 нм, 6 12,395.

ЯМР (CDC1,), : 0,87 (3H,s); 1,00 (3H,s); 4,46 (2H,ds), 6,01 (IH.dd); 6,40 (IH.dd);

4-амин6андрост-1,4-диен 3, 1 7-дион с т.пл. 162-9°С.

ИК (КВг) 3460,3370, 1735, 1665, 1620, 1580 см-1 .

УФ (95% 3tOH) : 1макс 226, Ј 15,509, 332, 3,293.

ЯМР (CDC1,), 8 : 0,94 (ЗН,с); 1,23 (ЗН,с);3,65 (2Н,с) 6,32 (lH,d)i ,7,10 (IH.d);

4-аминоандрост-1,4,6-триен-З,17- цион с т.пл.206-8°С.

Ж (KBr):0MqitC 3460, 3380, 1730, 1645, 1620, 1560 .

ЯМР (CDClj),S: 1,00 (ЗН,с), 1,19 (ЗН.с); 4,00 (ЗН,с) 5,93 (1Н,дд); 6,33 (1Н,д); 6,52 (1Н,дд); 7,10 (1Н,

,Д),

Пример 7. 4-Аминоандрост-4- -ен-3,17-дион (формула (I), где (Х) (Y) - проста  св зь).

К перемешанному раствору 0,45 г 4-аминоандрост-4,6-диен-З,17-пиона в 20 мл простого диэтилового эфира и 40 мл жидкого аммиака небольшими порци ми добавл ют 0,28 г металлического лити . Полученную реакционную смесь голубого цвета перемешивают дополнительно в течение 30 мин, гас т абсолютным этиловым спиртом до исчезновени  голубого цвета и дают достичь комнатной температуры. Полученный оЬадок раствор ют в воде, экстрагируют простым днэтиловым эфиром и очищают. Получают 0,280 г соединени , имеющего т.пл.185-187°С.

Пример 8. 4-Аминоандрост- -1,4,6-триен-З,17-дион (формула (I), где (X) (Y) двойна  св зь) .

Раствор 0,400 г 4-аминоандрост- -4,6-диен-З,17-диона в 25 мл обезвоженного бензола обрабатывают 0,400 г1

2,З-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохи- | ноина и нагревают при температуре дефлегмации. Реакционной смеси дают

5 отсто тьс  при 80 С в течение 20 ч. затем охлаждают до комнатной температуры , Фильтруют и твердую Фракцию промывают этилацетатом.

Отобранные органические фазы про0 мывают 5%-ным раствором NaHCOj, насыщенным водным раствором NaCl и затем растворитель удал ют при пониженном давлении. Сырой продукт очи- щают хроматографически на силикагеле,

5

использу  смесь этилацетата: метанол (95:5), чтобы получить 0,180 г чистого соединени .

ЯМР (CDC1,),Ј : 1,00 (ЗН,С); 1,19 (ЗН,С); 4,00 (ЗН,С); 5,93 (1Н,дд); 0 6,33 (1Н,д); 7,10(1Н,д).

ИК (KBr):V,v,ouc 3460, 3380, 1730, 1645, 1620, 1560 см-1.

Пример 9. 4-Аминоандрост- -4,6-диен-З,17-дионгидрохлорид (Фор- 5 мула (1),где (X) - проста  св зь, (Y) - двойна  св зь, как гидрохло- рид) .

Раствор 0,5 г 4-аминоандрост-4,6- -диен-3,17-диона в 20 мл этанола об- 0 вабатывают 16,7 мл 01 н. водным раствором НС1.Затем желтый раствор обрабатывают 0,02 г углерода, фильтруют и спирт дистиллируют при пониженном давлении. Получившийс  водный 5 раствор лиофилизуют, чтобы получить 0,54 г сухого соединени  в виде порошка слегка желтоватого цвета.

По аналогичной проиедуре начина  с других 4-аминовых соединений (приме- 0 Ры 7 и 8) получают соответствующие гидрохлориды.

Пример 10. Таблетки, кажда  весом 0,150 г, содержаща  25 мг активных веществ, выпускают со следующим составом (дл  10000 таблеток),г:

4-Аминоандрост-4,6-диен-3 ,17-дион250

Лактоза800

Кукурузный крахмал 415

5

Тальковый порошок 30 Стеарат магни 5

Смешивают 4-аминоандрост-4,6-диен- -3,17-дион, лактозу и половину кукурузного крахмала. Смесь затем пропускают через сито с размером 0,5 мм меш. Кукурузный крахмал (10 г) суспендируют в теплой воде (90 г), получившуюс  пасту используют дл  гра- , нулировани  порошка. Гранул т с унта т, 1 пропускают через сито с размером 1,4 мм меш, затем добавл ют оставшеес  количество крахмала, талька и стеарата магни , тшательно перемешивают и превраптают в таблетки.

Пример 11. Готов т капсулы кажда  весом 0,200 г, содержашие 20 мг активного вешеетва. Состав- 500 капсул, г: 4-Ацетиламино- андрост-4,6-диен- -3,17-дион10

Лактоза80

Кукурузный крахмал 5 Стеарат магни  5 Эти формы выпуска помещают в твердые желатиновые капсулы, состо щие из двух частей, доза в каждой капсуле составл ет 0,200 г.

Соединени  изобретени  представ- л ют собой ингибиторы биотрансформации эндогенных андрогенов, т.е. стероидные ингибиторы ароматазы.

Ароматаза (эстрогенна  синтета- эа) - фермент, отвечающий за последнюю ступень биосинтеза эстрогенов, превращение андрогенов в эстрогены, Например андростендиона и тестосье- рона в эстрон и эстрадиол соответственно . Ароматаза - микросоматиче- екий комплекс Фермента Р450, который действует на андрогенный субстрат. Поскольку продукты действи  ароматазы, т.е. эстрогены, ответствены за рост опухолей, вызываемых действием гормонов , то соединени  - ингибиторы ароматазы изобретени  можного использовать дл  лечений этих опухолей, Учи50

тыва  сказанное соединение изобретени  можно использовать в качестве ильтернативы удалению эндокринных желез, например овариэктомии, гипо- сЬизэктомии или андренаэлектомии при лечении уже развившихс  опухолей, ин- ее Аудируемых гормонами, например, молочной железы, поджелудочной железы, рака эндометри  и  ичников, в особенности рака молочной железы. Ингибито15741788

ры ароматазы Формулы (I) можно так е использовать дл  контрол  репродуктив- ности. Снижение уровней экстрогенов in vivo приводит к подавлению гонадной активности и недостаточному развитию матки, ингибиторы ароматазы могут одновременно быть ингибиторами имплантации. Друга  область

(О применени  соединений изобретени  за- лючаетс  в лечении гипертрофии про- статы или гиперплазии, относ щейс  к избыточному продуцированию эстрогена и к сдвигу отношени  эстроген/ан15 дроген ч более высоким показател м. Соединени  изобретени , вызывающие уменьшение образовани  экстрадиола, можно использовать дл  лечени  нарушений фертильности у мужчин (Drugs

2j 2S.263, 1984). Известно, что эстрадиол может регулировать сперматогенез , а также может непр мо подавл ть сперматогенез, преп тству  клеткам Лейдига продуцировать тестостерон в

25 большом количестве, реагиру  на действие ЛГ. Соответственно уменьшенное образование эстрадиола, достигнутое путем соединений изобретени , приводит как к увеличению количества

30 сперматозоидов, так и повышению Фертильности у больных, страдающих бесплодием из-за олигозооспермии. Степень подавлени  ароматазы соединени ми изобретени  определ ют, например,

зс как in vitro (ароматаза плаценты человека ) , следу  следующему способу испытаний,,

При подавлении ароматазы Фермент- . ную систему выдел ют из микросома40 тической Фракиии ткани плаценты человека в соответствии со стандартным способом. Использовали статью Thompson и Siiter (Thompson E.A. и Siiter P.К., I.Biol. Chem., 249, 5364,

45 1974), где определ ют степень ароматизации , как установлено при высвобождении из , 2fb- 3Н)андро- стен-3,17-диона. Все случаи инкубировани  в перемешиваемой вод ной бане при 37°С в воздушной атмосфере в буферном растворе 10 N фосфата кали  при рН 7,5, в котором 100 мМ КС1 ЭДА и 1 мМ дитиотреитола. Эти эксперименты провод т в инкубационном объеме в 1 мл, содержащем 50 нМ 4-(Н) андростендиона , ингибиторы в различных концентраци х, 100 мМ НАДО и 0,05 мг микросоматических белков. После инкубировани  в течение 15 мин реакцию

прекращают путем добавлени  хлороформа (5 мл). После центрифугировани  при 1500 об. в течение 5 мин удал ют аликвоты (0,5 мл) из водной Фазы дл  того, чтобы определить количество образовавшегос  Р20. Концентрацию каждого соединени , необходимого дл  снижени  уровн  контрольной арома- тазы на 50% (ИК50), определ ют по графику процента подавлени  от 1 до концентрации ингибитора. Так, в частности , четыре соединени  по изобретению испытаны под кодовыми номерами FGE 24210, FGE 24566, FGE 24661 и FGF 24928 по описанной выше процедуре с известным ингибитором ароматазы Д - тестололактоном (Cancer Research Suppe, 42, 3327S - 3333S, 1982).

Результаты ингибировани  аромата- зы плаценты человека in vitro приведены в таблице.

ИК50 (относительна  активность in vitro)}нМ

& -Тестололактон 4-Аминоандрост-4,6-дие -3,17-дион (FGE 24210) 4-Аминоандрост-4-ен- -3,17-дион (FGE 24566) 4-Аминоандрост-1,4-дие -3,17-дион (FGE 24661) 4-Аминоандрост-1,4,6- -триен-3,17-дион (FGE 24928)

Данные, приведенные в таблице, указывают на то, что соединени  изобретени   вл ютс  очень сильными ингибиторами ароматазы in vitro. Ho- (вые соединени , как установили, приблизительно в 55 раз действуют сильнее , чем Л1 -тестололактон.

Учитыва  высокий терапевтический показатель этих соединений, они достаточно безопасны дл  использовани  в медицине. Например, остра  токсичность (ЛД5б) соединений изобретени  дл  мыши, определенна  одним введением увеличивающихс  доз и измерен- на  на седьмой день после пероралъ - |Ного введени , как оказываетс , весьма незначительна 

В испытуемых дозах соединени  по изобретению не про вл ют признаков токсичности и их можно отнести к категории малотоксичньгх.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ получени  производных 4-замешенного андростендиона общей

   формулы

   о

   где символ - - - указывает на то,что (X) и (Y) независимо означают ординарную св зь или двойную св зь, или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийс  тем, что соединение формулы

   О

   (II)

   - э

   где (X) и TY) имеют указанные значени ,

   подвергают восстановлению, получа  соединение формулы I и, если необходимо , соединение формулы (I), где (X) - ординарна  св зь, a (Y) - двойна  св зь, подвергают восстановлению , получа  соответствующее соединение Формулы (I), где (X) и (Y) - оба ординарна  св зь, и, если необходимо , соединение формулы (I), где (X) - ординарна  св зь, подвергают окислению, получа  соответствующее соединение Формулы (I), где (X) - двойна  св зь, если необходимо, полученные соединени  формулы (I), подвергают солеобразованию.