SK3792002A3

SK3792002A3 - Kinase inhibitors as therapeutic agents

Info

Publication number: SK3792002A3
Application number: SK379-2002A
Authority: SK
Inventors: Gavin C Hirst; Paul Rafferty; David Calderwood; Helen Twigger; Gallay Stephen St; Kurt Ritter
Original assignee: Abbott Gmbh & Co Kg
Priority date: 1999-09-17
Filing date: 2000-09-15
Publication date: 2003-09-11
Also published as: CA2385769A1; CY1107886T1; AU7491400A; BR0014075A; WO2001019828A2; NO20021329L; BG106585A; ATE380814T1; DE60037455D1; AR029766A1; CZ2002934A3; HK1053831A1; EP1268481B1; KR20020063854A; CN1390220A; MXPA02002938A; PT1268481E; DK1268481T3; JP2003509427A; ES2299434T3

Description

i

Inhibítory kináz ako terapeuticky účinné látky

Oblasť techniky

Vynález sa týka inhibítorov kináz ako terapeuticky účinných látok. Táto prihláška vychádza z US predbežnej prihlášky č. 60/154,618 podanej dňa 17.9.1999.

Doterajší stav techniky

Ako proteínkinázy už bolo identifikovaných aspoň 400 enzýmov. Tieto enzýmy katalyzujú fosforyláciu cieľových proteínových substrátov. Fosforylácia je obvykle reakcia, pri ktorej dochádza k prenosu fosfátovej skupiny z ATP na proteínový substrát. Špecifická štruktúra v cieľovom substráte, na ktorú je fosfátová skupina prenášaná, je tyrozínový, serínový alebo treonínový zvyšok. Nakoľko tieto aminoskupinykyselinové zvyšky sú cieľové štruktúry pre prenos fosforylu, sú tieto proteinkinázové enzýmy bežne označované ako tyrozínkinázy alebo serín/treonínkinázy.

Fosforylačné reakcie a protipôsobiace fosfatázové reakcie na tyrozínových, serínových a treonínových zvyškoch sa podieľajú na mnohých bunkových procesoch, ktoré sú základom odpovedí na rôzne intracelulárne signály (typicky sprostredkované bunkovými receptormi), regulácii bunkových funkcií a aktivácii alebo deaktivácii bunkových procesov. Kaskáda proteínkináz často participuje na intracelulárnej signálnej transdukcii a tieto enzýmy sú dôležité na realizáciu týchto bunkových procesov. Vďaka ich všadeprítomnosti, sú proteínkinázy integrálnou súčasťou plazmatickej membrány alebo cytoplazmatických enzýmov alebo môžu byť lokalizované v jadre, veľmi často ako komponenty enzýmových komplexov. V mnohých prípadoch sú tieto proteínkinázy nevyhnutnými prvkami enzýmu a štruktúralnych proteínových komplexov, ktoré determinujú, kedy a kde sa v bunke budú odohrávať bunkové procesy.

Proteínové tyrozínkinázy

Proteínové tyrozín kinázy (PTK) sú enzýmy, ktoré katalyzujú fosforyláciu špecifických tyrozínových zvyškov v bunkových proteínoch. Posttranslačná modifikace týchto substrátových proteínov, často enzýmov samotných, pôsobí ako molekulárni spínač regulujúci bunkovú proliferaciu, aktiváciu alebo diferenciáciu (viď Schlessinger and Ulrich, 1992, Neurón 9:383-391). Aberantná alebo prebytočná aktivita PTK bola pozorovaná u mnohých ochorení zahrnujúcich benígne a malígne proliferačné poruchy, ako aj ochorení vyplývajúcich z neprimeranej aktivácie imunitného systému (napr. autoimunitné poruchy), rejekcia aloimplantátu a ochorenie šlepu proti hostiteľovi. Navyše endoteliálne bunkové špecifické receptorové PTK, napr. KDR a Tie-2, sprostredkovávajú angiogénne procesy, a tým sa podieľajú na podpore rozvoja rakoviny a iných ochorení týkajúcich sa neprimeranej vaskularizácie (napr. diabetická retinopatia, choroidálna neovaskularizácia v dôsledku makulárnej degenerácie súvisiacej s vekom, psoriázy, artritídy, retinopatie nedonosených, detské hemangiómy).

Tyrozínkinázy môžu byť receptorového typu (majúce extracelulárne, transmembránové a intracelulárne domény) alebo nereceptorového typu (sú úplne intracelulárne).

Receptorové tyrozínkinázy (RTK)

RTK zahrnujú veľkú rodinu transmembránových receptorov s rozdielnymi biologickými aktivitami. Do súčasnosti bolo identifikovaných najmenej devätnásť (19) rozdielnych podrodín RTK. Rodina receptorových tyrozínkináz (RTK) zahrnuje receptory, ktoré sú rozhodujúce pre rast a diferenciáciu rôzných bunkových typov (Yarden and Ullrich, Ann. Rev. Biochem. 57:433-478, 1988; Ullrich and Schlessinger, Celí 61:243-254, 1990). Vnútorná funkcia RTK je aktivovaná po väzbe ligandu, čo má za následok fosforyláciu receptora a mnohých bunkových substrátov a následne rôzne bunkové odpovede (Ullrich & Schlessinger, 1990, Celí 61:203-212). Receptorová tyrozínkináza sprostredkovávajúca signálnu transdukciu je iniciovaná extracelulárnou interakciou so špecifickým rastový faktorom (ligand), typicky nasledovaná dimerizáciou receptora, stimuláciou vnútornej aktivity proteínovej tyrozínkinázy a transfosforylá3 ciou receptora. Tým sú vytvorené väzbové miesta pre molekuly intracelulárnej signálnej transdukcie a vedú k tvorbe komplexov so spektrom cytoplazmatických signálnych molekúl, ktoré podporujú príslušnú bunkovú odpoveď (napr. bunkové delenie, diferenciáciu, metabolické účinky, zmeny v extracelulárnom mikroprostredí) viď Schlessinger and Ullrich, 1992, Neurón 9:1-20.

Proteíny s SH2 (src homológia-2) alebo s doménami pre väzbu fosfotyrozínu (PTB) viažu aktivované receptorové tyrozínkinázy a ich substráty s vysokou afinitou, čím šíria signály do buniek. Obidve domény rozoznajú fosfotyrozín. (Fantl et al., 1992, Celí 69: 413-423; Songyang et al., 1994, Mol. Celí. Biol. 14: 2777-2785; Songyang et al., 1993, Celí 72: 767-778; and Koch et al., 1991, Science 252: 668-678; Shoelson, Curr. Opin. Chem. Biol. (1997), 1 (2), 227-234; Cowburn, Curr. Opin. Struct. Biol. (1997), 7 (6), 835-838). Bolo identifikovaných niekoľko intracelulárnych substrátových proteínov, ktoré sa asociujú s receptorovými tyrozínkinázami (RTK). Môžu byť rozdelené do dvoch hlavných skupín: (1) substráty, ktoré majú katalytickú doménu; a (2) substráty, ktoré túto doménu nemajú, ale slúžia ako adaptéry a asociujú sa s katalytický aktívnymi molekulami (Songyang et al., 1993, Celí 72:767-778). Špecificita interakcií medzi receptormi alebo proteínmi a SH2 alebo PTB doménami ich substrátov je determinovaná aminokyselinovými zvyškami bezprostredne obklopujúcimi fosforylovaný tyrozínový zvyšok. Napríklad rozdiely vo väzbových afinitách medzi SH2 doménami a aminokyselinovými sekvenciami obklopujúcimi fosfotyrozínové zvyšky na špecifických receptoroch korelujú s pozorovanými rozdielmi v ich substrátových fosforylačných profiloch (Songyang et al., 1993, Celí 72:767-778). Pozorovania poukazujú na to, že funkcia každej receptorovej tyrozínkinázy nie je determinovaná len svojim modelom expresie a dostupnosťou ligandu, ale tiež sústavou downstreamových dráh signálnej transdukcie, ktoré sú aktivované špecifickým receptorom, ako aj časovaním a dobou daných stimulácií. Teda fosforylácia má dôležitý regulačný krok, ktorý determinuje selektivitu signalizačných dráh doplnených špecifickými receptormi rastového faktora, ako aj receptormi faktoru diferenciácie.

Predpokladá sa, že niekoľko receptorových tyrozínkináz, napr. FGFR-1, PDGFR, TIE-2 a c-Met, a rastové faktory, ktoré sa na ne viažu, hrajú určitú ú4 lohu pri angiogenéze, aj keď niektoré môžu podnecovať angiogenézu nepriamo (Mustonen and Alitalo, J. Celí. Biol. 129:895-898, 1995). Jedna taká receptorová tyrozínkináza, známa ako „fetálna pečeňová kináza 1“ (FLK-1), je členom typu III podtriedy RTK. Iné označenie pre ľudskú FLK-1 je „receptor kinázy obsahujúci inzertovanú doménu“ (kinaze insert domain-containing receptor) (KDR) (Terman et al., Oncogene 6:1677-83, 1991). Ďalšie označenie pre FLK1/KDR je „receptor 2 rastového faktoru vaskulárnej endoteliálnej bunky“ (VEGFR-2), nakoľko má vysokú afinitu k VEGF. Myšia verzia FLK-l/VEGFR2 bola tiež nazývaná NYK (Oelrichs et al., Oncogene 8(1):11-15, 1993). Bola izolovaná DNA kódujúca myšiu, krysiu a ľudskú FLK-1 a bol publikovaný nukleotid a kódujúca aminokyselinová sekvencia (Matthews et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88: 9026-30, 1991; Terman et al., 1991, supra; Terman et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 187: 1579-86,1992; Sarzani et al., supra·, and Millauer et al., Celí 72: 835-846, 1993). Mnoho štúdií, napr. publikovaných Millauerom et al., supra, predpokladá, že VEGF a FLK-l/KDR/VEGFR-2 je ligand-receptorový pár, ktorý hrá dôležitú úlohu pri proliferácii vaskulárnych endoteliálnych buniek a tvorbe a raste krvných ciev, označované ako vaskulogenéza, respektíve angiogenéza.

Ďalší typ III podskupiny RTK označenej „fms-podobná tyrozínkináza-1 (fms-like tyrosine kináze-1)“ (Flt-1) je príbuzná FLK-l/KDR (DeVries et al. Science 255; 989-991, 1992; Shibuya et al., Oncogene 5:519-524, 1990). iné označenie pre Flt-1 je „receptor 1 vaskulárneho endoteliálneho bunkového rastového faktora“ (VEGFR-1). Doteraz bolo zistené, že členovia podrodín FLK-l/KDR/VEGFR-2 a Flt-l/VEGFR-1 sa primárne exprimujú na endoteliálnych bunkách. Členovia týchto podskupín sú špecificky stimulovaní členmi rodiny ligandov vaskulárneho endoteliálneho bunkového rastového faktora (VEGF) (Klagsburn and D'Amore, Cytokine & Growth Factor Reviews 7:259270, 1996). Vaskulárny endoteliálny bunkový rastový faktor (VEGF) sa viaže na Flt-1 s vyššou afinitou než na FLK-l/KDR a je mitogénny voči vaskulárnym endoteliálnym bunkám (Terman et al., 1992, supra·, Mustonen et al. supra·, DeVries et al., supra). Predpokladá sa, že Flt-1 je podstatným faktorom pri endoteliálnej organizácii počas vaskulárneho vývoja. Expresia Flt-1 súvisí so skorým vaskulárnym vývojom u myších embryí a s neovaskularizáciou počas liečenia zranení (Mustonen and Alitalo, supra). Expresia Flt-1 u monocytov, osteoklastov a osteoblastov, ako aj u dospelých orgánov, napr. glomerulitíde ľadvín, predpokladá ďalšie funkcie tohto receptora, ktoré nesúvisia s bunkovým rastom (Mustonen and Alitalo, supra).

Ako je uvedené vyššie, posledné dôkazy predpokladajú, že VEGF hrá úlohu pri stimulácii normálnej aj patologickej angiogenézy (Jakeman et al., Endocrinology 133: 848-859, 1993; Kolch et al., Breast Cancer Research and Treatment 36 : 139-155, 1995; Ferrara et al., Endocrine Reviews 18 (1); 4-25, 1997; Ferrara et al., Regulation of Ängiogenesis (ed. L. D. Goldberg and E. M. Rosen), 209-232, 1997). Navyše bola VEGF zahrnutá do kontroly a zvýšenia vaskulárnej permeability (Connolly, et al., J. Biol. Chem. 264: 20017-20024, 1989; Brown et al., Regulation of Ängiogenesis (ed. L. D. Goldberg and E. M. Rosen), 233-269, 997).

Boli publikované rôzne formy VEGF vyplývajúce z alternatívneho zostrihu mRNA, vrátane štyroch druhov opísaných Ferrarom et al. (J. Celí. Biochem. 47: 211-218,1991). Ferrarom et al., supra, boli identifikované sekretované aj druhy VEGF prevážne s bunkou spojené, a zistilo sa, že proteín existuje vo forme dimérov spojených disulfidovou väzbou. Do súčasnosti bolo identifikovaných niekoľko príbuzných homológov VEGF. Avšak ich úloha v normálnych fyziologických procesoch a ochoreniach nebola ešte vysvetlená. Navyše členovia rodiny VEGF sú často koexprimovaní s VEGF v mnohých tkanivách a všeobecne sú schopní tvorby heterodimérov s VEGF. Táto vlastnosť pravdepodobne obmeňuje špecifitu receptora a biologické účinky heterodimérov a ďalej komplikuje objasnenie ich špecifických funkcií, viď nižšie (Korpelainen and Alitalo, Curr. Opin. Celí Biol., 159-164, 1998 a odkazy citované v predloženom vynáleze).

Rastový faktor placenty (P1GF) má aminokyselinovú sekvenciu, ktorá je signifikantne zhodná so sekvenciou VEGF (Park et al., J. Biol. Chem. 269:25646-54, 1994; Maglione et al. Oncogene 8:925-31, 1993). Rovnako ako v prípade VEGF, vyplývajú rozdielne druhy P1GF z alternatívneho zostrihu mRNA a proteín existuje v dimérnej forme (Park et al., supra). P1GF-1 a P1GF2 sa viažu na Flt-1 s vysokou afinitou a P1GF-2 sa na neuropilín-1 viaže tiež silne (Migdal et al., J. Biol. Chem. Π3 (35): 22272-22278), ale ani jeden sa neviaže na FLK-l/KDR (Park et al., supra). Bolo publikované, že P1GF potenciuje ako vaskulárnu permeabilitu, tak aj mitogénny účinok VEGF na endoteliálne bunky za predpokladu, že VEGF je prítomná v nízkych koncentráciách (údajne vďaka tvorbe heterodiméru)(Park et al., supra).

VEGF-B je produkovaná vo forme dvoch izoforiem (167 a 185 zvyškov), o ktorých sa predpokladá, že sa tiež viažu na Flt-l/VEGFR-1. VEGF-B môže tiež hrať určitú úlohu pri regulácii degradácie extracelulárnej matrix, bunkovej adhézii a migrácii vrátane modulácie expresie a aktivity plazminogénneho aktivátora urokinázového typu a inhibítora 1 plazminogénneho aktivátora (Pepper et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. (1998), 95(20):11709-11714).

VEGF-C bol pôvodne klonovaný ako ligand pre VEGFR-3/Flt-4, ktorý je primárne exprimovaný lymfatickými endoteliálnymi bunkami. Vo svojej plne upravenej forme môže tiež VEGF-C viazať KDR/VEGFF-2 a stimulovať proliferáciu a migráciu endoteliálnych buniek in vitro a agniogenézu u in vivo modelov (Lymboussaki et al., Am. J. Pathol. (1998), 153(2):395-403; Witzenbichler et al., Am. J. Pathol. (1998), 153(2), 381-394). Transgénna preexprimácia VEGF-C spôsobuje proliferáciu a rozšírenie len lymfatických ciev, zatiaľ čo krvné cievy zostávajú nedotknuté. Na rozdiel od VEGF nie je expresia VEGF-C indukovaná hypoxiou (Ristimaki et al, J. Biol. Chem. (1998), 273(14), 8413-8418).

Posledný z objavených je VEGF-D, ktorá je štruktúrne veľmi podobný VEGF-C. Bolo publikované, že VEGF-D sa viaže a aktivuje aspoň dve VEGFR, VEGFR-3/Flt-4 a KDR/VEGFR-2. Bol pôvodne klonovaný ako c-fos indukovateľný mitogén pre fibroblasty a je prominentné exprimovaný v mezenchymálnych bunkách pľúc a kože (Achen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1998), 95(2), 548-553 a odkazy v predloženom vynáleze.

Pokiaľ ide o VEGF, bol uplatňovaný nárok na VEGF-C a VEGF-D v tom zmysle, že indukujú in vivo prírastky vo vaskulárnej permeabilite pri Milesových testoch za predpokladu, že sú injektované do kutánneho tkaniva (PCT/US97/14696; WO98/07832, Witzenbichler et al., supra). Fyziologická ú7 loha a dôležitosť týchto ligandov pri modulácii vaskulárnej hyperpermeability a endoteliálnych odpovedí v tkanivách, kde sú exprimované, zostáva neobjasnená.

Nedávno bol publikovaný vírusovo kódovaný, nový typ vaskulárneho endoteliálneho rastového faktora, VEGF-E (NZ-7 VEGF), ktorý prednostne utilizuje receptor pre KDF/Flk-1 a má silnú mitotickú aktivitu bez domény pre väzbu heparínu (Meyer et al., EMBO J. (1999), 18(2), 363-374; Ogawa et al., J. Biol. Chem. (1998), 273 (47), 31273-31282). Sekvencie VEGF-E majú asi 25% zhodnosť s cicavčou VEGF a sú kódované parapoxvírusom Orf vírus (OV). Tento parapoxvirus, ktorý pôsobí u oviec a kôz a obvykle u ľudí, spôsobuje lézie s angiogenézou. VEGF-E je dimér o hmotn. zhruba 20 kDa s nebázickou doménou a tiež nemá afinitu pre heparín, ale má charakteristický motív cysteínovej slučky nachádzajúci sa vo všetkých cicavčích VEGF. Bolo tiež prekvapivo zistené, že je účinný a bioaktívny ako heparín viažuca izoforma VEGF-A, VEGF165, čo znamená, že oba faktory stimulujú uvoľnenie tkanivového faktora (TF), proliferáciu, chemotaxiu a rast kultivovaných vaskulárnych endoteliálnych buniek in vitro a angiogenézu in vivo. Podobne ako VEGF165, tak aj VEGF-E sa s vysokou afinitou viaže na receptor-2 VEGF (KDR), čo vedie k autofosforylácii receptora a dvojfázový vzrast voľnej intracelulárnej koncentrácie Ca²⁺, pričom na rozdiel od VEGF165 sa VEGF-E neviaže na receptor-1 VEGF (Flt-1).

Na základe zistených skutočností o ďalších homológoch VEGF a VEGFR a predošlých prípadoch pre ligandy a heterodimerizácii receptora, môže pôsobenie takých homológov VEGF zahrnovať tvorbu ligandových heterodimérov VEGF a/alebo heterodimerizáciu receptorov alebo väzbu na dosiaľ nezistené VEGFR (Witzenbichler et al., supra). V súčasných publikáciách je tiež vyslovený predpoklad, že neuropilín-1 (Migdal et al., supra) alebo VEGFR-3/Flt-4 (Witzenbichler et al., supra) alebo iné receptory než KDR/VEGFR-2 sa môžu zúčastňovať indukcie vaskulárnej permeability (Stacker S. A., Vitali A., Domagala T., Nice E. a Wilks A. F., „Angiogenesis and Cancer“ Conference, Amer. Assoc. Cancer Res., Jan. 1998, Orlando, FL; Williams, Diabetelogia

4O:S118-120 (1997)). Až doteraz nebol predložený priamy dôkaz o podstatnej úlohe KDR pri vaskulárnej hyperpermeabilite sprostredkovanej VEGF.

Nereceptorové tyrozínkinázy

Nereceptorové tyrozínkinázy predstavujú súbor bunkových enzýmov, ktoré nemajú extracelulárne a trasmembránové sekvencie. Do súčasnosti bolo identifikovaných viac než dvadsaťštyri jednotlivých nereceptorových tyrozínkináz obsahujúcich jedenásť (11) podrodín (Src, Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes/Fps, Fak, Ako, Ack a LIMK). Podrodina Src nereceptorových tyrozínkináz je zložená z najväčšieho množstva PTK a zahrnuje Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr a Yrk. Podrodina enzýmov Src súvisela s onkogenéziou a imunitnými odpoveďami. Podrobnejšie diskusie nad problematikou nereceptorových tyrozínkináz je uvedená v publikácii Bolen, 1993, Oncogene 8:2025-2031, tu je uvedené ako odkaz.

Bolo zistené, že mnoho tyrozínkináz a RTK, či nereceptorových tyrozínkináz sa zúčastňuje bunkových signálnych dráh mnohých patogénnych stavov, vrátane rakoviny, psoriázy a ďalších hyperproliferačných porúch alebo hyperimunitných odpovedí.

Vývoj zlúčenín za účelom modulácie PTK

Vzhľadom na predpokladanú dôležitosť úlohy, ktorú hrá PTK pri kontrole, regulácii a modulácii bunkovej proliferácie, ochorení a porúch spojených s abnormálnou bunkovou proliferáciou, bolo vykonaných mnoho pokusov identifikovať „inhibítory“ receptorových a nereceptorových tyrozínkináz rôznych možných spôsobov, vrátane použitia mutantných ligandov (U. S. Application No. 4,966,849), rozpustných receptorov a protilátok (Application No. WO 94/10202; Kendall & Thomas, 1994, Proc. Natl. Acad. Sci 90: 10705-09; Kim et al., 1993, Náture 362: 841-844), ligandov RNA (Jellinek, et al., Biochemistry 33: 10450-56; Takano, et al., 1993, Mol. Bio. Celí 4: 358A; Kinsella, et al. 1992, Exp. Celí Res. 199: 56-62; Wright, et al., 1992, J. Cellular Phys. 152: 448-57) a inhibítorov tyrozínkinázy (WO 94/03427; WO 92/21660; WO 91/15495; WO 94/14808; U. S. Patent No. Mariani, et al., 1994, Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 35: 2268).

Nedávno boli vykonané pokusy identifikovať malé molekuly, ktoré pôsobia ako inhibítory tyrozínkinázy. Napríklad bismonocyklické, bicyklické alebo heterocyklické arylové zlúčeniny (PCT WO 92/20642) a deriváty vinylénazaindolu (PCT WO 94/14808) boli všeobecne opísané ako inhibítory tyrozínkinázy. Styrylové zlúčeniny (U. S. Patent No. 5,217,999), pyridylové zlúčeniny substituované styrylom (U. S. Patent No. 5,302,606), určité deriváty chinazolínu (EP Application No. 0 566 266 Al; Expert Opin. Ther. Pat. (1998), 8 (4): 475-478), selenoindoly a selenidy (PCT WO 94/03427), tricyklické polyhydroxylové zlúčeniny (PCT WO 92/21660) a zlúčeniny benzylfosforečnej kyseliny (PCT WO 91/15495) boli opísané ako inhibítory tyrozínkinázy pri ošetrení rakoviny. Anilinocinnolíny (PCT WO97/34876) a deriváty chinazolínu (PCT W097/22596; PCT WO97/42187) boli opísané ako inhibítory angiogenézy a vaskulárnej permeability.

Navyše boli učinené pokusy identifikovať malé molekuly, ktoré pôsobia ako inhibítory serín/treonínkinázy. Napríklad zlúčeniny bis(indolylmaleimidu) boli opísané ako inhibítory najmä izoformy PKC serín/treonínkinázy, ktorých funkcia pri signálnej transdukcii súvisí so zmenou vaskulárnej permeability pri ochoreniach spojených s VEGF (PCT W097/40830; PCT WO97/40831).

Inhibítory Plk-1 kinázy

Plk-1 je serín/treonínkináza, ktorá je dôležitým regulátorom progresie bunkového cyklu. Hrá rozhodujúcu úlohu pri zostavení a dynamickej funkcii mitotického vretienka. Ukázalo sa tiež, že Plk-1 a príbuzné kinázy sú úzko spojené s aktiváciou a inaktiváciou ďalších regulátorov bunkového cyklu, napr. kináz závislých na cyklíne. Vysoké hladiny expresie Plk-1 sú spojené s aktivitami bunkovej proliferácie. Boli tiež zistené pri malígnych nádoroch rôzneho pôvodu. Očakáva sa, že inhibítory Plk-1 blokujú rakovinovú proliferáciu buniek prerušením procesov zahrnujúcich mitotické vretienka a neprimerene aktivované kinázy závislé na cyklíne.

Inhibítory Cdc2/cyklín B kinázy (Cdc2 je niekedy označovaná ako cdkl)

Cdc2/cyklín B je ďalší enzým, serín/treonínkináza, ktorý patrí do rodiny kináz závislých na cyklíne (cdks). Tieto enzýmy sa zúčastňujú rozhodujúceho prenosu medzi rôznymi fázami progresie bunkového cyklu. Predpokladá sa, že nekontrolovateľná bunková proliferácia, ktorá je charakteristickým znakom rakoviny, je závislá na elevovaných aktivitách cdk v týchto bunkách. Inhibícia elevovaných aktivít cdk v rakovinových bunkách inhibítora cdc2/cyklín B kinázy by mohla potlačiť proliferáciu a obnoviť normálnu kontrolu progresie bunkového cyklu.

Preto je dôležitá identifikácia účinných malých zlúčenín, ktoré špecificky inhibujú signálnu transdukciu a bunkovú proliferáciu moduláciou aktivity receptorových a nereceptorových tyrozínkináz a serín/treonínkináz, a tým regulujú a modulujú abnormálnu alebo neprimeranú bunkovú proliferáciu, diferenciáciu alebo metabolizmus. Najmä určenie spôsobov a zlúčenín, ktoré špecificky inhibujú funkciu tyrozínkinázy, ktorá je nevyhnutná pre angiogénne procesy alebo tvorbu vaskulárnej hyperpermeability vedúce k edému, ascites, efúzii, exsudátom a makromolekulárnemu extravazátu a depozícii matrix, ako aj súvisejúcim poruchám, by mohlo byť veľmi prospešné.

Podstata vynálezu

Predložený vynález poskytuje zlúčeninu všeobecného vzorca I, jej racemicko-diastereoizomérne zmesi, optické izoméry, farmaceutický prijateľné soli, proliečiva alebo biologicky aktívne metabolity vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo vzorcov 1-109:

substituent Rj má všeobecný vzorec

v ktorom Z¹⁰⁰ má všeobecný vzorec

alebo je skupina prípadne substituovaná substituentom Rb vybraným zo skupiny pozostávajúcej z cykloalkylovej skupiny, naftylu, tetrahydronaftylu, benzotienylu,

S furanylu, tienylu, benzoxazolylu, benzotiazolylu, , _s tiazolylu, benzofuranylu, 2,3-dihydrobenzofuranylu, indolylu, izoxazolylu, tetrahydropyranylu, tetrahydrofuranylu, piperidinylu, pyrazolylu, pyrolylu, oxazolylu, izotiazolylu, oxadiazolylu, tiadiazolylu, indolinylu, indazolylu, benzoizotiazolylu, pyrido-oxazolylu, pyridotiazolylu, pyrimido-oxazolylu, pyrimido-tiazolyl a benzimidazolylu;

v ktorom Z¹¹⁰ je kovalentná väzba alebo prípadne substituovaná (Ci-C₆) skupina, ktorá je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, CN, OH, halogénu, NO2, COOH, substituované alebo nesubstituované aminoskupiny a substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu;

v ktorom Z¹¹¹ je kovalentná väzba prípadne substituovaná skupina (CiCô) alebo prípadne substituovaná skupina -(CH2)_n-cykloalkyl-(CH2)_n-; pričom prípadne substituované skupiny sú prípadne substituované jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, CN, OH, halogénu, NO2, COOH, substituované alebo nesubstituované aminoskupiny a substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu;

substituenty R_a a Rb každý reprezentuje jeden alebo viac substituentov v každom prípade nezávisle vybraných zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, halogénu, -CN, -NO2, -C(O)OH, -C(O)H, -OH, -C(O)O-alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej karboxamidoskupiny, tetrazolylu, trifluórmetylkarbonyl-aminoskupiny, trifluórmetylsulfónamidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkenylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aryloxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroaryloxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkinylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej amidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroaryltioskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aryltioskupiny, -Z¹⁰⁵-C(O)N(R)2, -Z¹⁰⁵-N(R)C(O)-Z²⁰⁰, -Z¹⁰⁵-N(R)-S(O)2-Z²⁰⁰, -Z¹⁰⁵-N(R)-C(0)-N(R)-Z²⁰⁰, Rc a

CH₂OR_c;

pričom substituent R_c v každom prípade je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina, -CH2-NRdR_e, -W-(CH2)t-NR<jR_e, -W-(CH₂),-Oalkyl, -W-(CH₂), -S-alkyl alebo -W-(CH₂),-OH;

pričom Z¹⁰⁵ v každom prípade je nezávisle kovalentná väzba alebo skupina (Cj-Cô);

pričom Z²⁰⁰ v každom prípade je nezávisle substituovaná alebo nesubstituovaná skupina (Ci-C₆), substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl alebo substituovaný alebo nesubstituovaný -(Ci-Cň)-fenyl;

substituenty Rj a R_e v každom prípade sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina, alkanoylová skupina alebo SC>2-alkylová skúpi20 na; alebo substituenty Rd, R_e a atóm dusíka, ku ktorému sú pripojené spoločne tvoria a 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh; index t je v každom prípade nezávisle celé číslo nadobúdajúce hodnoty 2 až 6; W v každom prípade je nezávisle priama väzba alebo O, S, S(O), S(O)₂ alebo NRf, kde substituent Rf v každom prípade je nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina;

alebo substituent Ri je substituovaný alebo nesubstituovaný karbocyklický alebo heterocyklický kruh kondenzovaný s kruhom 2;

A je -O- ;-S- ;-S(O)_p; -N(R)-; -N(C(O)OR)-; -N(C(O)R)-; -N(SO₂R)-; -CH₂O-;

-CH₂S-; -CH₂N(R)-; -CH(NR)-; -CH₂N(C(O)R))- ; -CH₂N(C(O)OR)-;

-CH₂N(SO₂R)-; -CH(NHR)-; -CH(NHC(O)R)- ; -CH(NHSO₂R)-;

-CH(NHC(O)OR)-; -CH(OC(O)R)-; -CH(OC(O)NHR); -CH=CH-;

-C(=NOR)-; -C(O)-; -CH(OR)-; -C(O)N(R)-; -N(R)C(O)-; -N(R)S(O)_P-;

-OC(O)N(R)-; -N(R)-C(O)-(CH₂)_n-N(R)-, -N(R)C(O)O-;

-N(R)-(CH₂)„₊₁-C(O)-, -S(O)_pN(R)-; -O-(CR₂)_n+1-C(O)-, .-O-(CR₂)_n+1-O-, -N(C(O)R)S(O)_P; -N(R)S(O)_PN(R)-;

-N(R)-C(O)-(CH₂)„-O-,

-C(O)N(R)C(O)-; -S(O)_PN(R)C(O)-; -OS(O)_PN(R)-; -N(R)S(O)_PO-;

-N(R)S(O)_PC(O)-; -SO_PN(C(O)R)-; -N(R)SO_PN(R)-; -C(O)O-;

-N(R)P(OR_g)O-; -N(R)P(OR_g)-; -N(R)P(O)(OR_g)O-; -N(R)P(O)(OR_g)-;

-N(C(O)R)P(OR_g)O-; -N(C(O)R)P(OR_g)-; -N(C(O)R)P(O)(OR_g)O- alebo

-N(C(O)R)P(OR_g)-;

pričom substituent R v každom prípade je nezávisle atóm vodíka substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylalkylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina;

substituent R_g v každom prípade je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylalkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná cykloalkylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina;

index p nadobúda hodnoty 1 alebo 2;

alebo v skupinách obsahujúcich fosfor tvoria atóm dusíka, atóm fosforu, substituenty R a R_g spolu dohromady 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh; alebo

A je NRSO2 a substituenty R, R_a a atóm dusíka spolu dohromady tvoria 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh kondenzovaný ku kruhu 1;

substituent R2 je -Z¹⁰¹-Z¹⁰²;

Z¹⁰¹ je kovalentná väzba, skupina -(Ci-Cô)-, -(Ci-Cô)-O-, -(Ci-Cô)-C(O)-, -(Ci-C₆)-C(O)O-, -(C,-C₆)-C(O)NH-, -(C₁-C₆)-C(O)-N((C,-C₆))- alebo substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl;

Z¹⁰² je atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná, nasýtená alebo nenasýtená heterocyklická skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná, nasýtená alebo nenasýtená heterobicyklická skupina; uvedená substituovaná heterocyklická alebo substituovaná heterobicyklická skupina má jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z hydroxylu, kyanoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej sulfónamidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej ureidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej karboxamidoskupiny; substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, oxoskupiny, nasýtenej alebo nenasýtenej aromatickej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklickej skupiny obsahujúcej jeden alebo viac atómov dusíka, jeden alebo viac atómov kyslíka alebo ich kombinácie;

pričom dané atómy dusíka sú nezávisle prípadne substituované substituovanou alebo nesubstituovanou alkylovou skupinou, substituovanou alebo nesubstituovanou arylovou skupinou alebo substituovanou alebo nesubstituovanou arylalkylovou skupinou; alebo substituent R2 má všeobecný vzorec B-E, kde B je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej cykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylkarbonylovej skupiny, hydroxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylénovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylénkarbonylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylkarbonylovej skupiny; a E je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylkarbonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylkarbonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylkarbonylaminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylkarbonylaminoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny;

substituent R³ v každom prípade je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, hydroxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny;

a je 1 a Di, Gi, Ji, Li a Mi sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z

CR_a a N za predpokladu, že aspoň dve Di, Gi, Ji, Li a Mi sú CR_aalebo a je 0 a jedno z Dj, Gi, Li a Mi je NR_a, jeden z Dj, Gi, Li a Mi je CR_a a zvyšok je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z CR_a a

N, pričom substituent R_a je definovaný vyššie;

b je 1 a D₂, G₂, J2, L₂ a M₂ sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z

CR_a a N za predpokladu, že aspoň dve z D₂, G₂, J₂, L₂ a M₂ sú CR_a; alebo b je 0 a jeden z D₂, G₂, L₂ a M₂ je NR_a, jeden z D₂, G₂, L₂ a M₂ je CR_a a zvyšok je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z CR_a a N, pričom substituent R_a je definovaný vyššie; a index n v každom prípade je celé číslo nezávisle od 0 do 6.

Každý z dielčích vzorcov 1-117 je výhodným uskutočnením predloženého vynálezu.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú účinné ako inhibítory serín/treonínkináz a tyrozínkináz. Najmä sú zlúčeniny podľa predloženého vynálezu účinné ako inhibítory tyrozínkináz, ktoré sú dôležité pri hyperproliferačných ochoreniach, najmä pri procesoch angiogenézy. Napríklad niektoré z týchto zlúčenín sú inhibítory receptorových kináz, napr. KDR, Flt-1, FGFR, PDGFR, c-Met, TIE-2 alebo IGF-l-R. Nakoľko niektoré z týchto zlúčenín sú antiangiogénne, sú dôležitými látkami na inhibíciu progresie stavov ochorení, v ktorých hrá dôležitú úlohu angiogenéza. Niektoré zo zlúčenín podľa predloženého vynálezu sú účinné ako inhibítory serín/treonínkináz, napr. PKC, erk, MAP kináz, cdks, Plk-1 alebo Raf-1. Tieto zlúčeniny sú účinné pri ošetrení rakoviny a hyperproliferačných porúch. Ďalej sú niektoré zo zlúčenín účinnými inhibítormi nereceptorových kináz, napr. rodiny Src (napr. Ick, blk a lyn), Tec, Csk, Ako, Map, Nik a Syk. Tieto zlúčeniny sú účinné pri ošetrení rakoviny, hyperproliferačných porúch a imunologických ochorení.

Niektoré zo zlúčenín podľa predloženého vynálezu sú selektívnymi inhibítormi TIE-2 kinázy, ktoré môžu mať antiangiogénnu (najmä v kombinácii s jedným alebo viacerými inhibítormi VEGFR) alebo proangiogénnu aktivitu, pokiaľ sú používané v prítomnosti alebo spoločne s VEGF súvisiacim stimulom. Týmto spôsobom môžu byť uvedené inhibítory používané pri aktivácii terapeutickej angiogenézy na ošetrenie napr. ischémie, infarktu alebo oklúzie alebo na podporu liečenia zranení.

Predložený vynález poskytuje spôsob inhibície kinázovej aktivity tyrozínkináz a serín/treonínkináz zahrnujúci podanie zlúčeniny reprezentovanej všeobecnými vzorcami 1-109 proti uvedenej kináze v takej koncentrácii, ktorá je dostačujúca na inhibíciu enzýmovej aktivity uvedenej kinázy.

Predložený vynález ďalej zahrnuje použitie týchto zlúčenín vo farmaceutických prípravkoch s farmaceticky účinným množstvom vyššie uvedených zlúčenín a farmaceutický prijateľného nosiča alebo excipienta. Tieto farmaceutické prípravky môžu byť podávané pacientom na spomalenie alebo zastavenie procesu angiogenézy pri ochoreniach podporujúcich angiogenézu alebo na ošetrenie edému, efúzie, exsudátov alebo ascites a iných stavov súvisiacich s vaskulárnou hyperpermeabilitou. Niektoré farmaceutické prípravky môžu byť podávané pacientom na ošetrenie rakoviny a hyperproliferačných porúch inhibíciou serín/treonínkináz, napr. cdk, Plk-1, erk, atď.

Podrobný opis vynálezu

Progresia až do cyklu eukaryotickej bunky je riadená rodinou kináz nazývanou kinázy závislé na cyklíne (CDK) (Myerson et al., EMBO Journal, 11: 2909-2917 (1992)). Regulácia aktivácie CDK je komplexným systémom, avšak vyžaduje asociáciu CDK s členmi cyklínovej rodiny regulačných podjednotiek (Draetta, Trends in Celí Biology, 3: 287-289 (1993)); Murray and Kirschner, Náture, 339: 275-280 (1989); Solomon et al., Molecular Biology of Celí, 3: 1327 (1992)). Ďalší stupeň regulácie sa vyskytuje pri aktivácii aj inaktivácii fosforylácie podjednotiek CDK (Draetta, Trends in Celí Biology, 3: 287-289 (1993)); Murray and Kirschner, Náture, 339: 275-280 (1989); Solomon et al., Molecular Biology of Celí, 3: 13-27 (1992); Ducommun et al., EMBO Journal, 10: 331 1-3319 (1991); Gautier et al., Náture 339: 626-629 (1989); Gould and Nurse, Náture, 342: 39-45 (1989); Krek and Nigg, EMBO Journal, 10: 33313341 (1991); Solomon et al., Celí, 63: 1013-1024 (1990)). Na normálnu progre25 siu bunkového cyklu je potrebná koordinovaná aktivácie a inaktivácia rôznych komplexov cyklín/CDK (Pines, Trends in Biochemical Sciences, 18: 195-197 (1993); Sherr, Celí, 73: 1059-1065 (1993)). Rozhodujúce tranzície Gl-S aj G 2M sú riadené aktiváciou rôznych aktivít cyklín/CDK. Predpokladá sa, že pri G1 sprostredkovávajú cyklín D/CDK4 a cyklín E/CDK2 počiatok S-fázy (Matsushima et al., Molecular & Cellular Biology, 14: 2066-2076 (1994); Ohtsubo and Roberts, Science, 259: 1908-1912 (1993); Quelle et al., Genes & Development, 7: 1559-1571 (1993); Resnitzky et al., Molecular & Cellular Biology, 14: 1669-1679 (1994)). Progresia cez S-fázu vyžaduje aktivitu cyklínu A/CDK2 (Girard et al., Celí, 67: 1169-1179 (1991); Pagano et al., EMBO Journal, 11: 961-971 (1992); Rosenblatt et al., Proceedings the National Academy of Science USA, 89: 2824-2828 (1992); Walker and Maller, Náture, 354: 314-317 (1991); Zindy et al., Biochemical & Biophysical Research Communications, 182: 1144-1154 (1992)), a aktivácia cyklínu A/cdc2 (CDK1) a cyklínu B/cdc2 je potrebná na počiatku metafázy (Draetta, Trends in Celí Biology, 3: 287-289 (1993)); Murray and Kirschner, Náture, 339: 275-280 (1989); Solomon et al., Molecular Biology of Celí, 3: 13-27 (1992); Girard et al., Celí, 67: 1169-1179 (1991); Pagano et al., EMBO Journal, 1 1: 961-971 (1992); Rosenblatt et al., Proceedings of National Academy of Science USA, 89: 2824-2828 (1992); Walker and Maller, Náture, 354: 314-317 (1991); Zindy et al., Biochemical & Biophysical Research Communications, 182: 1 144-1 154 (1992)). Preto nie je prekvapujúce, že strata kontroly nad reguláciou CDK je častým prípadom pri hyperproliferačných ochoreniach a rakovine. (Pines, Current Opinion in Celí Biology, 4: 144-148 (1992); Lees, Current Opinion in Celí Biology, 7: 773-780 (1995); Hunter and Pines, Celí, 79: 573582 (1994)). Preto je zámerom predloženého vynálezu selektívna inhibícia CDK.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú d’alej účinné pri ošetrení jedného alebo viacerých ochorenení cicavcov, ktoré sú charakterizované bunkovou proliferáciou v oblastiach proliferačných porúch krvných ciev, fibrotických porúch, proliferačných porúch mezangiálnych buniek a metabolických ochorení. Proliferačné poruchy krvných ciev zahrnujú artritídu a restenózu. Fibrotické poruchy zahrnujú cirhózu pečene a aterosklerózu. Proliferačné poruchy mezangiálnych buniek zahrnujú glomerulonefritídu, diabetickú nefropatiu, malígnu nefrosklerózu, syndrómy trombotickej mikroangiopatie, rejekciu transplantovaného orgánu a glomerulopatiu. Metabolické poruchy zahrnujú psoriázu, diabetes mellitus, chronické hojenie rán, zápal, neurodegeneratívne ochorenie, degeneráciu makuly a diabetickú retinopatiu.

Inhibítory kináz podieľajúcich sa na sprostredkovaní alebo udržovaní týchto stavov ochorení reprezentujú nové spôsoby terapií. Príklady takých kináz zahrnujú, ale nie je to limitované len na ne: (1) inhibíciu c-Src (Brickell, Critical Reviews in Oncogenesis, 3: 401-406 (1992); Courtneidge, Seminars in Cancer Biology, 5: 236-246 (1994), raf (Powis, Pharmacology & Therapeutics, 62: 57-95 (1994)) a kináz závislých na cytokíne (CDK) 1, 2 a 4 pri rakovine (Pines, Current Opinion in Celí Biology, 4: 144-148 (1992); Lees, Current Opinion in Celí Biology, 7: 773-780 (1995); Hunter and Pines, Celí, 79: 573-582 (1994)), (2) inhibíciu CDK2 alebo PDGF-R kináz pri restenóze (Buchdunger et al., Proceedings of National Äcademy of Science USA, 92: 2258-2262 (1995)), (3) inhibíciu CDK5 a GSK3 kináz pri Alzheimerovej chorobe (Hosoi et al., Journal of Biochemistry (Tokyo), 1 17: 741-749 (1995); Aplin et al., Journal of Neurochemistry, 67: 699-707 (1996), (4) inhibíciu c-Src kinázy pri osteoporóze (Tanaka et al., Náture, 383: 528-531 (1996), (5) inhibíciu GSK-3 kinázy pri diabetes typu 2 (Borthwick et al., Biochemical & Biophysical Research Communications, 210: 738-745 (1995), (6) inhibíciu p38 kinázy pri zápale (Badger et al., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 279: 1453-1461 (1996)), (7) inhibíciu VEGF-R 1-3 a TIE-1 a -2 kinázy pri ochoreniach zahrnujúcich angiogenézu (Shawver et al., Drug Discovery Today, 2: 5063 (1997)), (8) inhibíciu UL97 kinázy pri vírusových infekciách (He et al., Journal of Virology, 71: 405-41 1 (1997)), (9) inhibíciu CSF1R kinázy pri ochoreniach kostí a hematopoetických ochoreniach (Myers et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 7: 421-424 (1997) a (10) inhibíciu Lck kinázy pri autoimunitných ochoreniach a rejekciu transplantátu (Myers et al., Bioorganic & Medicinal ChemistryLetters, 7: 417-420 (1997)).

Navyše je možné, že inhibítory niektorých kináz môžu byť účinné pri ošetrení ochorenení, pri ktorých nedochádza k zlej regulácii kináz, avšak sú nevyhnutné pre zotrvanie stavu ochorenia. V tomto prípade by u týchto ochorení mohla inhibícia aktivity kinázy pôsobiť buď ako liečivý alebo utišujúci prostriedok. Napríklad mnoho vírusov, napr. ľudský papiloma vírus, naruší bunkový cyklus a prechod buniek do S-fázy bunkového cyklu (Vousden, FASEB Journal, 7: 8720879 (1993)). Ochrana buniek pred zahačatím syntézy DNA po infekcii vírusom pomocou inhibície nevyhnutných iniciačných aktivít S-fázy, napr. CDK2, môže narušiť životný cyklus vírusu zabránením replikácie vírusu. Tento rovnaký princíp môže byť používaný na ochranu normálnych buniek tela pred toxickými účinkami chemoterapeutických činidel špecifických pre daný cyklus (Stone et al., Cancer Research, 56 : 3199-3202 (1996); Kohn et al., Journal of Cellular Biochemistry, 54: 44-452 (1994)). Inhibícia CDK 2 alebo 4 bude zabraňovať progresii do cyklu normálnych buniek a obmedzovať toxicitu cytostatík, ktoré pôsobia v S-fázy, G2 alebo mitóze. Dalej bolo publikované, že aktivita CDK2/cyklínu E reguluje NF-kB. Inhibícia aktivity CDK2 stimuluje expresiu génu závislého na NF-kB, jav sprostredkovaný interakciou s koaktivátorom p300 (Perkins et al., Science, 275: 523-527 (1997)). NF-kB reguluje gény podieľajúce sa na zápalových odpovediach (napr. hematopoetické rastové faktory, chemokíny a leukocitové adhezívne molekuly) (Baeuerle and Henkel, Annual Review of Immunology, 12: 141-179 (1994)) a môže sa podieľať na supresii apoptických signálov v bunkách (Beg and Baltimore, Science, 274: 782-784 (1996); Wang et al., Science, 2Ί4\ 784-787 (1996); Van Antwerp et al., Science, 274: 787-789 (1996)). Teda inhibícia CDK2 môže potlačiť apoptózu indukovanú cytostatiky mechanizmom zahrnujúcim NF-kB. Z čoho je možné predpokládať, že inhibícia aktivity CDK2 sa môže využiť aj pri ďalších prípadoch, pri ktorých regulácia NF-kB hrá určitú úlohu v etiológii ochorenia. Ďalší príklad je možné nájsť u infekcií pliesňami: Aspergilóza je bežnou infekciou u pacientov s oslabenou imunitou (Armstrong, Clinical Infectious Diseases, 16: 1-7 (1993)). Inhibícia aspergilózových kináz Cdc2/CDC28 alebo Nim A (Osmani et al., EMBO Journal, 10: 2669-2679 (1991); Osmani et al., Celí, 67: 283-291 (1991)) môže spôsobiť zastavenie množenia alebo zánik pliesne, čím dôjde k zlepšeniu terapeutického profilu pacientov s týmito infekciami.

V rámci jedného uskutočnenia poskytuje predložený vynález zlúčeniny vyššie uvedených všeobecných vzorcov 1-109. Významy substituentov v preferovaných skupinách zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 sú uvedené nižšie.

Výhodne je substituent Rb vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, I, CH3, NO2, OCF3, OCH3, CN, CO2CH3, CF3, /-butylu, pyridylu, substituovaného alebo nesubstituovaného oxazolylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzénsulfonylu, substituovanej alebo nesubstituovanej fenoxyskupiny, substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, karboxylu, substituovaného a nesubstituovaného tetrazolylu, substituovaného a nesubstituovaného styrylu, substituovanej a nesubstituovanej aryltioskupiny, substituovanej a nesubstituovanej heteroaryltioskupiny; CthORc, kde substituent R_c je atóm vodíka alebo substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová alebo arylová skupina; a -W-(CH2)t-NRdR_e, kde t je celé číslo nadobúdajúce hodnoty 1 až 6; W je priama väzba, O, S, S(O), S(O)2 alebo NRf, kde substituent Rf je atóm vodíka alebo alkylová skupina a substituenty R<j a R_e sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina, alkanoylová skupina alebo SC>2-alkylová skupina; alebo substituenty Ra, R_e a atóm dusíka, ku ktorému sú pripojené, společne tvoria 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh.

Výhodne je substituent R_a vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, I, CH3, NO2, OCF3, OCH3, CN, CO2CH3, CF3, /-butylu, pyridylu, substituovaného alebo nesubstituovaného oxazolylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzénsulfonylu, substituovanej alebo nesubstituovanej fenoxyskupiny, substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, karboxylu, substituovaného a nesubstituovaného tetrazolylu, substituovaného a nesubstituovaného styrylu, substituovanej a nesubstituovanej aryltioskupiny, substituovanej a nesubstituovanej heteroaryltioskupiny; CH^ORc, kde substituent R_c je atóm vodíka alebo substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina alebo arylová skupina; a -W-(CH2)t-NRdR_e, kde index t je celé číslo nadobúdajúce hodnoty 1 až 6; W je priama väzba, O, S, S(O), S(O)2 alebo NRf, kde substituent Rf je atóm vodíka alebo alkylová skupina a substituenty Rd a R_e sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina, alkanoylová skupina alebo SO229 alkylová skupina; alebo substituenty R_d, R_e a atóm dusíka, ku ktorému sú pripojené, spoločne tvoria 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh.

V rámci jedného uskutočnenia je substituent R2 oxacykloalkylová skupina všeobecného vzorca

v ktorom index n nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R2 všeobecný vzorec

ReO

m v ktorom index m nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3 a substituent R_g je atóm vodíka alebo -(CFhjPNCRzQRs, v ktorom index p je celé číslo 2 až 6, substituenty R₄ a R5 sú každý nezávisle atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CFhjp, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, aminoskupina, arylová skupina, heteroarylová alebo heterocykloalkylová skupina alebo substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne tvorí 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovaná heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R2 všeobecný vzorec

v ktorom index m nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3. Indexy a a b sú každý nezávisle celé číslo nadobúdajúce hodnoty 0 až 6, okrem prípadu, kedy dva substituenty sú pripojené na rovnaký atóm uhlíka, index a je celé číslo 1 až 6, Q je NR4R5 alebo -ORô- Každý substituent R4 a R5 je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, (CH₂)_qS(O)_r; pričom index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, amínoskupina, arylová skupina, heteroarylová alebo heterocykloalkylová skupina, substituenty R4, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R2 všeobecný vzorec

v ktorom index n nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3; a substituent R4 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo YZ, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH2)_P-, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R2 všeobecný vzorec

Ri v ktorom index m nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3, substituent R5 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CFhjp, -S(O)2-,

-C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, -(CH₂)qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; pričom index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny, substituent Rô reprezentuje jeden alebo viac substituentov nezávisle vybraných zo skupiny pozostávajúcej atómu vodíka, hydroxyskupiny, oxoskupiny a substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, arylovej, heteroarylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, aminokarbonylovej, alkylkarbonylovej, arylkarbonylovej, heteroarylkarbonylovej, aminoalkylovej a arylalkylovej skupiny, za predpokladu, že atómy uhlíka susediace s atómom dusíka nie sú substituované hydroxyskupinou.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R2 všeobecný vzorec

N v ktorom substituent R4 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z

-C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNHa

-(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R₂ všeobecný vzorec

z s R4 R5 v ktorom index m je celé číslo 1 až 6; a substituenty R4 a R5 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -C(O)O-, -SO₂-NH-, -CONH-,(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a (CH₂)_P-, -S(O)₂-, -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny, substituenty R4, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má substituent R₂ všeobecný vzorec

v ktorom index n je celé číslo 0 až 4; a index r nadobúda hodnoty 0 alebo 1. Pokiaľ index r nadobúda hodnotu 0, potom m je celé číslo 0 až 6. Pokiaľ index r nadobúda hodnotu 1, potom m je celé číslo 1 až 6, Q je -NR4R5 alebo -ORô. Každý zo substituentov R4 a R5 je nezávisle atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, aminoskupina, arylová skupina, heteroarylová alebo heterocykloalkylová skupina, substituenty R4, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu, substituent Rô je atóm vodíka alebo substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina.

V rámci dalšieho uskutočnenia má substituent R₂ všeobecný vzorec

v ktorom index n je celé číslo 0 až 4 a m je celé číslo 0 až 6. Substituent R₄ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skúpi34 ny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -S(O)2-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-,(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -C(O)-, -(CH₂)_P-, (CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny, substituent Re je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny.

Vo vyššie uvedených uskutočneniach substituentu R₂ je zahrnutá skupina -N(R4)R5, ktorá môže tvoriť heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

v ktorom substituenty R7, Rg, R9, Rio, R11, Ri₂, R13 a R14 sú každý nezávisle nižšia alkylová skupina alebo atóm vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R7 a Rs; R9 a Rio; R11 a Ri₂; alebo Rn a R14 dohromady sú atóm kyslíka; alebo aspoň jeden zo substituentov R₇ a Rs je kyanoskupina, CONHR15, COOR15, CH2OR15 alebo CH₂NRi5(Ri6), kde substituenty R15 a Ri6 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R15, Rie a atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu; X je O, S, SO, SO₂, CH₂, CHOR17 alebo NR17, kde substituent R17 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej skupiny, arylalkylovej skupiny,

C(NH)NH₂, -C(O)Ri₈ alebo -C(O)ORig, kde substituent Rj₈ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, arylovej alebo arylalkylovej skupiny; a index t je 0 alebo 1.

Substituenty R₄, R₅ a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

N

v ktorom substituenty Rjg a R₂o sú, každý nezávisle, atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina; alebo substituenty Rig a R₂o dohromady sú atóm kyslíka. Substituenty R₂i a R₂₂ sú, každý nezávisle, atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-,

-(CH₂)qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R₂j, R₂₂ a atóm dusíka môžu spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu; index m je celé číslo 1 až 6; a index n je celé číslo 0 až 6.

Substituenty R₄, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

N

R23

v ktorom index m je celé číslo 1 až 6; substituent R₂j je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z CH2OH, NRR', C(O)NR'R alebo COOR, kde substituenty R a R' sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, arylovej alebo arylalkylovej skupiny.

Substituenty R4, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

v ktorom substituent R24 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, arylovej alebo arylalkylovej skupiny, karboxylu, kyanoskupiny, C(O)OR₂5, CH2OR25, CH2NR26R27 alebo C(O)NHR₂6· Substituent R25 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, arylovej, arylalkylovej, heterocyklickej alebo heteroarylovej skupiny. Substituenty R₂6 a R27 sú, každý nezávisle, atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)NH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny. Substituenty R₂6, R27 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu.

V jednej podskupine zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 má aspoň jeden zo substituentov R₄ a R5 všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

ΛΛ

v ktorom T je C(O), S, SO, SO₂, CHÓR alebo NR, kde substituent R je atóm vodíka alebo substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová, arylová alebo arylalkylová skupina; a index n nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má aspoň jeden zo substituentov R4 a R₅všeobecný vzorec Y-Z, kde Zje -N(R₂g)R₂9 a substituenty R₂8 a R₂g sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej karboxyalkylovej, alkoxykarbonylalkylovej, hydroxyalkylovej, alkylsulfonylovej, alkylkarbonylovej alebo kyanoalkylovej skupiny. Substituenty R₂8 a R₂9 spoločne s atómom dusíka môžu tiež tvoriť 5 alebo 6 člennú heterocyklickú skupinu.

V ďalšom uskutočnení má aspoň jeden zo substituentov R4 a R5 všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec N(R3o)R3i· Substituenty R30 a R31 sú každí nezávisle vybraní zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej a aminokarbonylovej skupiny, kyanoskupiny, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

V rámci ďalšieho uskutočnenia má aspoň jeden zo substituentov R₄ a R5 všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

Každé X je nezávisle CH alebo N. Substituent R₃₂ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

Jeden zo substituentov R₄ a R5 môže mať tiež všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

νχ ^R32 v ktorom index g nadobúda hodnoty 0 alebo 1; a T je C(O), O, S, SO, SO2, CH2, CHOR17 alebo NR17. Substituent R17 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej skupiny, arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH2, -C(O)Rig, C(0)N2 alebo -C(0)0Ri8, v ktorom substituent Rig je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej skupiny alebo arylalkylovej skupiny. Substituent R₃₂ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

Jeden zo substituentov R4 a R5 môže mať tiež všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

R32 v ktorom index g je 0, 1 alebo 2; substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

Z môže mať tiež všeobecný vzorec

T R₃₂ v ktorom index g nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3 a T je O, S, SO, SO2, CH2, CHOR17 alebo NR17. Substituent R17 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej skupiny, arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH₂, -C(O)Ri7 alebo -C(O)ORig, kde substituent Rig je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej alebo arylalkylovej skupiny. Substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

Jeden zo substituentov R₄ a R5 môže mť tiež všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

v ktorom substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej a alkylkarbonylovej skupiny, tioalkoxyskupiny alebo arylalkylovej skupiny; substituent R33 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, aminokarbonylovej, perhalogénalkylovej, alkenylovej, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecných vzorcoch 1-109 má substituent R2 všeobecný vzorec

v ktorom index m nadobúda hodnoty 0 alebo 1; substituenty R34, R35, R36, R37, R385 R39, R40 a R41 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z metylu alebo atómu vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R34 a R35; R₃6 a R₃₇; R38 a R39; alebo R40 a R41 spoločne sú atóm kyslíka. Substituent R₄₂je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r ; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

Vo výhodnom uskutočnení má substituent R4₂ všeobecný vzorec

R46

R45

R47 'R48

R43 N Reo

Rsi kde index u je 0 alebo 1; substituenty R43, R44, R45, R46, R47, R48, R49 a R50 sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z metylu alebo atómu vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R43 a R44; R45 a R46; R47 a R48 ; alebo R49 a R50 spoločne sú atóm kyslíka. Substituent R51 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, C(O)O-, -SO2NH-, -C0NH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo

2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 má substituent R-2 všeobecný vzorec \ Rs4' Rg_w_

Rfiľ/i

Rh

Ir. .

Rco

Reo v ktorom indexy h, i, j, k a 1 sú nezávisle 0 alebo 1; substituenty R52, R53, R54, R55, R₅₆, R57, R58, R59, R_g a R_h sú každý nezávisle vybraní zo skupiny pozostávajúcej z metylu alebo atómu vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R52 a R53; R54 a R55 ; R56 a R57; alebo R58 a R59 spoločne sú atóm kyslíka. Substituent Rŕo je atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH2)_P-, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)qO, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

V rámci jedného uskutočnenia má substituent Rďo všeobecný vzorec

v ktorom index v je 0 alebo 1; substituenty Rďi, Ró2, Ró3, Ró4, Rďs, Ró6, Rŕ7 a Rg8 sú, každý nezávisle, nižšia alkylová skupina alebo atóm vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov Rói a Ró2í Ró3 a Rô4í Rôs a R₆ô; a Rô7 a Rôs společne sú atóm kyslíka; substituent Rô9 je atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, (CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo heterocykloalkylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R3 atóm vodíka; substituent R₂ -Z¹⁰¹-Z¹⁰², kde Z¹⁰¹ je kovalentná väzba, -(Ci-Cé)-, -(C,-C₆)-O-, -(C,-C₆)-C(O)-, -(<2,-<2₆)-<2(Ο)Ο-, -(C,-C₆-C(0)-NH-,

-(Ci-C6-C(O)-N((C,-C6))- alebo substituovaný fenyl; a

Z¹⁰² je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej, nasýtenej alebo nenasýtenej heterocyklickej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je Z¹⁰¹ vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -CH₂-C(O)O-, -CH₂-C(O)-, -CH₂-C(0)-NH-,

-CH₂-C(0)-N(Me), -CH(Me)-C(0)0-, -(CH₂)₃-C(O)O-, -CH(Me)-C(0)-NH- a -(CH₂)₃-C(O)-NH-;

Z¹⁰² je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, metylu, etylu, 77, jV-dimetylaminoetylu, 7V,/V-dietylaminoetylu, 2-fenyl-2-hydroxyetylu, morfolinoskupiny, piperazinylu, 77-metylpiperazinylu a 2-hydroxymetylpyrolidinylu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I má substituent R, všeobecný vzorec

nebo

, kde Z¹⁰⁰ je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovaného alebo nesubstituovaného benzoxazolylu alebo substituovaného alebo nesubstituovaného benzotiazolylu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I má substituent Ri všeobecný vzorec

v ktorom sa vyskytuje len substituent R_a a je atóm vodíka alebo fluóru.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je Z¹⁰¹ kovalentná väzba; a Z¹⁰² je prípadne substituovaný pyridyl.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₃ atóm vodíka; substituent R₂ je cyklopentyl; a substituent Ri má všeobecný vzorec

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je Z¹¹⁰ atóm vodíka;

A je O; a Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaný fenyl, furanyl alebo tienyl, pričom Ζ^ιθθ je prípadne substituovaný jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, COOH, NO2, OMe, -COOMe, OCF₃ a CF₃.

A je -0-, -0-(CR.2)_n, -C(0)- alebo -0-(CR2)_n-0-; index n v každom prípade je O až 3;

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z cyklohexylu, fenylu, tetrahydropyranylu, tetrahydrofuranylu, izoxazolylu a piperidinylu; pričom Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, alkoxyskupiny, halogénu, hydroxyskupiny a alkoxykarbonylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R2 prípadne substituovaný skupinou vybranou zo skupiny pozostávajúcej z cyklobutylu a cyklohexylu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R2 prípadne substituovaný jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z hydroxyskupiny, alkylovej, hydroxyalkylovej, karboxyalkylovej a fenylalkoxyalkylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent Ri 4fenoxyfenyl.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I nadobúda index m hodnoty 2; index a je 0; substituent Rô je atóm vodíka; index b je 1 alebo 2; a substituenty R4 a R5 sú každý atóm vodíka.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I nadobúda index m hodnoty 0, 1 alebo 2; substitutent Rô je atóm vodíka; substituent R5 je atóm vodíka alebo Y-Z;

kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z kovalentnej väzby, -C(O)-, -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_q, -(CH₂)_qC(O)- alebo -C(O)(CH₂)_q-, kde alkylová časť skupín -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_P, -(CH₂)_qC(O)- a -C(O)(CH₂)_q- je prípadne substituovaná halogénom, hydroxyskupinou alebo alkylovou skupinou; a

Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylovej skupiny, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, alkoxyalkylovej skupiny, prípadne substituovanej heterocykloalkylovej skupiny, prípadne substituovanej heteroarylovej skupiny alebo prípadne substituovanej aminoskupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je Z vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, metylu, etylu, hydroxymetylu, metoxyetylu, TV-metyl-piperidinylu, (z-butoxykarbonyl)(hydroxy)piperidinylu, hydroxypiperidinylu, (hydroxymetyl)piperidinylu, (hydroxy)(metyl)piperidinylu, morfolinoskupiny, (metoxyetyl)piperizinylu, metylpiperizinylu,

4-piperidinylpiperidinylu, imidazolylu, metylimidazolylu, yV-metylaminoskupiny, N, jV-dimety lamino skúp iny, TV-izopropylaminoskupiny, N, TV-diety lamino skupiny, 2,3-dihydroxypropyl amino skupiny,

2-hydroxyetyl aminoskupiny, 3-hydroxypropyl aminoskupiny, metoxyetylaminoskupiny, etoxykarbonylmetyl aminoskupiny, fény Imetyl aminoskupiny,

ridinylety lamino skúp iny, 7V-(2-TV, ľV-dimety laminoety l)-jV-mety 1-aminoskupiny,

2-jV,jV-dimetyl-aminoety lamino skupiny, A^r-metyl-A^r-(A^r-metyl-piperidin-4yl)aminoskupiny, 2-morfolinoehylaminoskupiny, 3-morfolino3-morfolinopropylaminoskupiny, 3-imidazolylpropylaminoskupiny alebo 3-(2-oxopyrolidinyl)propylaminoskupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I nadobúda index m hodnotu 2; substituent R5 je Y-Z; Y je —C(O)-; a Z má všeobecný vzorec

R , v ktorom index n nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₄ vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo metylu;

substituent Ri má všeobecný vzorec

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z O, -N(R)- a -N(R)C(O)-; Z¹¹¹je -(CH₂)_n-cykloalkyl-(CH₂)_n-;

substituent R je atóm vodíka alebo alkylovej skupiny;

index n je celé číslo 0 až 5;

substituent R_a je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, OH, F, Cl, metylu a metoxyskupiny; a substituent Rb je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, CN, F, CF₃, OCF3, metylu, metoxyskupiny a prípadne substituovanej aminoskupiny;

kde uvedená amínoskupina je prípadne substituovaná jednou alebo viacerými skupinami, pričom každá je nezávisle vybraná zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, alkoxyalkylovej skupiny, fenylu, substituovaného fenylu a prípadne substituovanej heteroarylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I substituent Rb je 4-metylfenyltioskupina alebo 2-pyridinyltioskupina.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent Ri kde Z¹⁰⁰ je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z benzojújtiofénu, fúranylu a tiofénu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R_a alkoxyskupina;

A je NH-C(O)-; a medzi A a Z¹⁰⁰ je kovalentná väzba.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je

substituent Ri '-’

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -N(R)-C(O)-N(R)-, -(CH2)_n-N(R)C(0)N(R)-, -N(R)- a -N(R)-SO₂-; substituent R je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo alkylovej skupiny;

> pyridinyl, tiazolyl, furanyl, benzofuranyl alebo oxazolyl;

X je S, O alebo NR, kde substituent R v každom prípade je nezávisle atóm vodíka alebo Me;

substituent R_a je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka a F; a substituent Rb je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, F, Cl, Br, NO₂, CF3, alkylovej skupiny, alkoxyskupiny a alkoxykarbonylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R4 metyl; index m nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3;

substituent R5 je Y-Z, kde Y je -C(O)O-, -C(O)- alebo -C(0)-(CH2)_p-; a Z je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z aminoalkylovej skupiny, ?/-alkylaminoskupiny, TV.N-dialkylaminoskupiny alebo hydroxyalkylaminoalkylovej skupiny.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₄

Y metyl; substituent Ri má všeobecný vzorec I , kde index n je celé číslo 0 až 3; Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z indolylu, indenylu, metylindenylu, metylindolylu, dimetylaminofenylu, fenylu, cyklohexylu a benzofuranylu.

_zUP_A__zIU_z»oo

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z fenylu, imidazolylu, indolylu, furanylu, benzofuranylu a 2,3dihydrobenzofuranylu;

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, CN, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, -O- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny), -COOH, -Z¹⁰⁵-C(O)N(R)2, -Z^lt,5-N(R)-C(O)-Z²⁰⁰, -Z^l05-N(R)-S(O)2-Z²⁰⁰ a -Z¹⁰⁵-N(R)-C(O)-N(R)-Z²⁰⁰;

Z¹⁰⁵ je kovalentná väzba alebo (Ci-Cô);

Z²⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny (Ci-Có), fenylu a -(Ci-C6)-fenylu;

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nezávisle kovalentná väzba alebo skupina (C1-C3) prípadne substituovaná alkylovou skupinou, hydroxyskupinou, COOH, CN alebo fenylom; a

A je O, -N(R)-C(O)-N(R)-, -N(R)-C(O)-O-, -N(R)- alebo -N(R)-C(O)-, kde substituent R je atóm vodíka alebo alkylová skupina.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₄ metyl.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I má substituent Ri ý Aa-z^1m všeobecný vzorec / , kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z benzoxazolylu, benzotiazolylu a benzimidazolylu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₄metyl; A je -NH- ; v tomto prípade je tu len jeden substituent R_a vybraný z atómu vodíka alebo F; a Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, halogénu, CF3 a alkoxyskupiny.

R.

_ζπρ_Α__ζπι_ζι°ο

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z fenylu, pyrolylu, pyridylu, benzimidazolylu, naftylu a vSi kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, NO2, aminoskupiny, 7V-alkylaminoskupiny, TV, A-dialkylaminoskupiny, CN, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, -O- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny) a fenylu;

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ v každom prípade je nezávisle (C0-C3) prípadne substituovaná prípadne substituovaným fenylom; a

A je -N(R)-C(O)-N(R)-, -N(R)-S(O)₂-, -N(R)-C(O)-, -N(R)- alebo -N(R)C(O)-O-.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R₄metyl a v tomto prípade je tu len jeden substituent R_a vybraný z atómu fluóru.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I má substituent Ri

R.

100 všeobecný vzorec

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z fenylu, izoxazolylu, tetrahydronaftylu, furanylu, benzofuranylu, pyridylu a indolylu;

kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, CN, NO2, C(O)H, -CONH2, -NHSO2CF3, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, prípadne substituovanej heteroarylovej skupiny a -O- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny);

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nezávisle prípadne substituovaná skupina (C0-C3); a

A je O, -N(R)-C(O)-(CH₂)_n-N(R)-, -C(O)-N(R)-, -N(R)-C(O)-O-, -N(R)C(O)aIebo -N(R)-.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je substituent R4 metyl; substituent R_a je atóm vodíka alebo metoxyskupina; a Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nesubstituovaný.

O

kde substituent R je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina a index n v každom prípade je nezávisle 1 až 6.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I je Ζ^1θθ substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl.

Τλ-.

z , kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z benzoxazolylu, benzotiazolylu a benzimidazolylu.

V ďalšej podskupine zlúčenín všeobecného vzorca I nadobúda index n hodnotu 2; substituent Re je atóm vodíka; index m nadobúda hodnotu 1; index r nadobúda hodnotu 1; a substituenty R4 a R5 sú každý atóm vodíka.

Podskupina zlúčenín všeobecných vzorcov 1-117 má substituent Ri = 4-fenoxyfenyl, R₂ = cyklopentyl a obidva R3 = atóm vodíka. Tieto zlúčeniny sú znázornené nižšie

í?	A 1 UyUJ	‘p* 3 ο-0-Q ’ζΤό	^s~ô 5 c-ODo O
	O- IľPO. ä Č	!%ρ	^!όΛ
Ô	* »—/	’O Λ	9 ŠXkvO “O⁸
X ^xA~s	’QXpp	Q pOÄ-O
.9 pO^o	*	£K s *» emí	9 ? “Όλο =0
₌ z n -^VaZ/ %5' ô	9 ? °Ok-vO ’-O	_B	’c/Λ

’V⁹	s »/>So ”0	’V'⁹	z-z 5°^Xk Ó
	•Z.-K	^í<>85^>?	^ϊχ? Mo
9 ’-O	S \=z^^° =0^	⁷ *-w	«-Λ 3 o-^ľľ^”\=/ ’crb
9	^síV	-ô ’ď^	o» ay&
ίΟ-γ/ν⁵) ’ 6	z-z	_s9 . ⁼Ó	?3=\Xr^ Q-
.0, J? pp'	_s vP ’ň/raj z	í-i ^?t>\5	,9 i UUsX3 Z—£ y/

q ? 0	5 ,-O-Q-O	Λ *^0°	-1ΊΜ 7°
q	«Λ : ο-0-^-Ο	i o-O-^-O	š j-O-Q-0
	'Ó	'Ó	'Ó
	cpľ	.9	c< s 1¾
	ó	^cl> .	ô
-9 ? S5^o	as-s t? 5^>Ck , x. Ô	čr² ChQ ? ó	-9 ? Ό-&-Ο X^®
S b# á	5. /	9- 5 ^ά>ί> ? ľZL^ X*-/ )c	q 5 Ó 7
	Q .fl	. 9 3 ^όηΠ	Z. f a: ^,y-^Ä 2 n
	CPf Q-	=-6	6

O“Í?Q·¹ b	x<> 5 z-K^	ς ** /^vk 2 x^y Q^z	q <* jrí r n \ /
'V²	n ** \—f ¹ o -	? O^-o s -Z λ	O< í ó
.Q J? ä x-e t o=ť V'SJ'	3ί^ s JťbtS ’/b	^7-g ^!<Λ	x 7 Μγζ_ο ^z“O
5 o-O-S-O ó	q 2 (”5 r* ľ“* X-#^Z	q ? 0 o-o Q-*	S of XsX tlt ** Py ú
ô - H.	s'^’-Ô'ťXo ô	o P R ^?cuy^	Q jO^S
,ÍĽ w iH ll /—> ⁷ UJk/V-O		σίΓ 5 (k ó	X-X Q-X \|Ol>0._o b

Zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu existovať ako soli s farmaceutický prijateľnými kyselinami. Predložený vynález zahrnuje tieto soli. Príklady týchto solí zahrnujú hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, metánsulfonáty, nitráty, maleáty, acetáty, citráty, fumaráty, tartráty [napr. (+)tartráty, (-)-tartráty alebo ich zmesi, vrátane racemických zmesí], sukcináty, benzoáty a soli s aminokyselinami, napr. glutámová kyselina. Tieto soli môžu byť pripravené štandardnými spôsobmi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109, ktoré majú kyslé substituenty, môžu existovať ako soli s farmaceutický prijateľnými bázami. Predložený vynález zahrnuje tieto soli. Príklady takýchto solí zahrnujú sodné, draselné, lýzinovej a arginínovej soli. Tieto soli môžu byť pripravené štandardnými spôsobmi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 a ich soli môžu existovať vo viac než jednej kryštalickej forme a predložený vynález zahrnuje každú túto kryštalickú formu a ich zmesi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 a ich soli môžu tiež existovať vo forme solvátov, napr. hydrátov, a predložený vynález zahrnuje každý tento solvát a ich zmesi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu obsahovať jedno alebo viac chirálnych centier, a teda existujú v rôznych opticky aktívnych formách. Pokiaľ zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 obsahujú jedno chirálne centrum, potom zlúčeniny existujú v dvoch enantiomérnych formách a predložený vynález zahrnuje oba enantioméry a zmesi enantiomérov, napr. racemické zmesi. Enantioméry môžu byť rozdelené štandardnými spôsobmi, napr. tvorbou diastereoizomérnych solí, ktoré môžu byť separované, napr. kryštalizáciou; tvorbou diastereoizomérnych derivátov alebo komplexov, ktoré môžu byť separované, napr. kryštalizáciou, GLC alebo LC; selektívnou reakciou jedného enantioméru s enantiomérne selektívnym činidlom, napr. enzymatická esterifikácia; alebo GLC alebo LC v chirálnou prostredí, napr. na chirálnom pomocnom médiu, napr. silikagél s viazaným chirálnym ligandom alebo za prítomnosti chirálneho rozpúšťadla. Tam, kde požadovaný enantiomér je konvertovaný na inú chemickú entitu jedným z vyššie uvedených spôsobov, je potreba ďalšieho kroku na uvoľnenie požadovanej enantiomérnej formy.

Alebo špecifické enantioméry môžu byť syntetizované asymetrickou syntézou pomocou opticky aktívnych činidiel, substrátov, katalyzátorov alebo rozpúšťadiel alebo konvertovaním jedného enantioméru na druhý asymetrickou transformáciou.

Pokiaľ zlúčenina všeobecných vzorcov 1-109 obsahuje viac než jedno chirálne centrum, môže existovať v diastereoizomérnych formách. Diastereoizomérne páry môžu byť separované štandardnými spôsobmi, napr. chromatografiou alebo kryštalizáciou a jednotlivé enantiomíry v každom páre môžu byť separované vyššie uvedenými spôsobmi. Predložený vynález zahrnuje každý diastereoizomér zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 a ich zmesi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu existovať v rôznych tautomérnych formách alebo ako rôzne geometrické izoméry a predložený vynález zahrnuje každý tento tautomér a/alebo geometrický izomér zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 a ich zmesi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu existovať v rôznych stabilných konformačných formách, ktoré môžu byť separovateľné. Torzná asymetria vďaka svojej obmedzenej rotácii okolo asymetrickej jednoduchej väzby, napr. vďaka stérickej zábrane alebo kruhovému napätiu, môžu umožniť separáciu rôznych konformérov. Predložený vynález zahrnuje každý tento konformačný izomér zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 a ich zmesi.

Určité zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu existovať vo forme zwitterionu zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 a ich zmesí. Heteroaromatické skupiny používané v predloženom vynáleze zahrnujú heteroarylový kruh (napr. pre názornosť, nie však limitujúci: tienyl, pyridyl, pyrazol, izoxazolyl, tiadiazolyl, oxadiazolyl, indazolyl, furany, pyroly, imidazoly, pyrazoly, triazoly, pyrimidíny, pyrazíny, tiazoly, izotiazoly, oxazolyl alebo tetrazoly) a heteroarylový kruh, v ktorom karbocyklický aromatický kruh, karbocyklický nearomatický kruh alebo heteroarylový kruh je kondenzovaný na jeden alebo viac ďalších heteroarylových kruhov (napr. pre názornosť, nie však limitujúci: ben60 zo[ô]tienyl, benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzotiazolyl, benzotiadiazolyl, benzoxadiazolyl, indol, tetrahydroindol, azaindol, indazol, chinolín, imidazopyridín, chinazolín, purín, pyrolo[2,3-d]pyrimidín, pyrazolo[3,4-d]pyrimidín) a ich TV-oxidy. Substituované heteroarylové skupiny sú výhodne substituované jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z halogénu, hydroxyskupiny, alkylovej skupiny, alkoxyskupiny, alkyl-O-C(O)-, alkoxyalkylovej skupiny, heterocykloalkylovej skupiny, prípadne substituovaného fenylu, nitroskupiny, aminoskupiny, monosubstituovanej amino skupiny alebo disubstituovanej aminoskupiny.

Termín heterocyklická (heterocyklyl)skupina, ako je používaný v predloženom vynáleze, sa vzťahuje na heteroarylovú aj heterocykloalkylovú skupinu.

Termín heterobicyklická skupina, ako je používaná v predloženom vynáleze, sa vzťahuje na bicyklickú skupinu majúcu jeden alebo viac heteroatómov, ktoré sú nasýtené, čiastočne nasýtené alebo nenasýtené.

Termín arylalkylová skupina, ako je používaný v predloženom vynáleze, sa vzťahuje na aromatický substituent, ktorý je pripojený na zlúčeninu alifatickou skupinou majúcou jeden až asi šesť atómov uhlíka. Výhodná arylalkylová skupina je benzylová skupina.

Termín heteroaralkylová skupina, ako je používaný v predloženom vynáleze, je heteroaromatický substituent, ktorý je pripojený na zlúčeninu alifatickou skupinou majúcou jeden až šesť atómov uhlíka.

Termín heterocykloalkylová skupina, ako je používaný v predloženom vynáleze, sa vzťahuje na nearomatický kruhový systém, ktorý má 3 až 8 atómov a zahrnuje aspoň jeden heteroatóm, napr. atóm dusíka, kyslíka alebo síry. Alifatické skupiny alebo označenie, napr. „Co-Có“, zahrnujú lineárny, rozvetvený alebo cyklický reťazec uhľovodíkov, ktorý je kompletne nasýtený alebo obsahuje jeden alebo viac jednotiek nenasýtenosti. Pokiaľ je skupina Co, znamená to, že tu nie je žiadna časť prítomná alebo inými slovami znamená väzbu.

Termín aromatické skupiny (alebo arylové skupiny) zahrnujú aromatický karbocyklický kruh (napr. fenyl) a kondenzovaný polycyklický aromatický kruh (napr. naftyl a 1,2,3,4-tetrahydronaftyl).

Termín prírodná aminokyselina sa vzťahuje na 23 známych prírodných aminokyselín, ktoré sú (označené svojimi skratkami): Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Cys-Cys, Glu, Gin, His, Hyl, Hyp, íle, Leu, Lys, Met, Phe, Pre, Ser, Thr, Trp, Tyr a Val. Termín umelé aminokyseliny sa vzťahuje na zlúčeniny všeobecného vzorca NH2-(C(X)₂)_n-COOH, ktoré sú a-(pokiaľ index n je 1) alebo P~(pokiaľ index n je 2) aminokyseliny, pričom X v každom prípade je nezávisle akákoľvek časť postranného reťazca; príklady umelých aminokyselín zahrnujú, ale nie obmedzujúco; hydroxyprolín, homoprolín, 4-amino-fenylalanín, β-(2naftyl)alanín, norleucín, cyklohexylalanín, 3-(3-pyridinyl)alanín, β-(4pyridinyl)alanín, α-aminoizobutyrovú kyselinu, urokánovú kyselinu, N,Ntetrametylamidino-histidín, N-metylalanín, N-metylglycín, N-metylglutámovú kyselinu, terc-butylglycín, α-aminobutyrovú kyselinu, Zerc-butylalanín, ornitín, α-aminoizobutyrovú kyselinu, β-alanín, γ-aminobutyrovú kyselinu, 5-aminovalérovú kyselinu, 12-aminododekánovú kyselinu, 2-aminoindán-2karboxylovú kyselinu, atď. a ich deriváty, najmä tie, v ktorých je dusík aminovej skupiny mono- alebo di-alkylovaný.

Bolo uvedené, že mnoho častí alebo substituentov je buď „substituovaných alebo nesubstituovaných“ alebo „prípadne substituovaných“. Pokiaľ je časť modifikovaná jedným z týchto termínov, znamená to, že akákoľvek časť majúca schopnosť byť substituovaná môže byť substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom pokiaľ je substituovaná viac než jedným substituentom, sú tieto substituenty nezávisle vybrané. Pre názornosť, nie však obmedzujúco, zahrnujú príklady skupín substituentov následujúce: alkylové skupiny (ktoré môžu byť sami substituované, napr. CF3), alkoxyskupinu (ktoré môžu byť samé substituované, napr. OCF3), halogén alebo halogénové skupiny (F, Cl, Br, I), hydroxyskupinu, nitroskupinu, oxoskupinu, CN, COOH, COH, aminoskupinu, N-alkylaminoskupinu alebo jV,jV-dialkylaminoskupinu (v ktorej môžu byť alkylové skupiny substituované), estery (-C(O)-OR, kde substituent R sú napr. skupiny vybrané z alkylovej skupiny, arylovej skupiny, atď., ktoré môžu byť substituované), arylovú skupinu (najvýhodnejšie fenyl, ktorý môže byť substituovaný) a arylalkylovú skupinu (ktorá môže byť substituovaná).

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu majú antiangiogénne vlastnosti. Tieto antiangiogénne vlastnosti sú spôsobené aspoň čiastečne inhibíciou proteínových tyrozínkináz nepostrádateľných pre angiogénny proces. Z tohto dôvodu môžu byť tieto zlúčeniny používané ako aktívne agens proti ochoreniam, napr. artritíde, ateroskléroze, restenóze, psoriáze, hemangiómom, angiogenéze myokardu, koronárnym a cerebrálnym kolaterálom, ischemickej angiogenéze končatiny, ischémii/reperfúznemu poškodeniu, hojeniu rán, peptickému vredu súvisiacom s Helicobacter, vírusovo indukovaným angiogénnym poruchám, fraktúre, syndrómu Crow-Fukasa (POEMS), preeklampsii, menometroragii, horúčke mačacieho uškrabnutia, rubeóze, neovaskulárnemu glaukómu a retinopatiám, napr. tým, ktoré súvisia s diabetickou retinopatiou, retinopatiou nedonosených alebo makulárnou degeneráciou súvisiacou s vekom. Ďalej môžu byť niektoré z týchto zlúčenín používané ako aktívne agens proti pevným nádorom, malignému ascites, von Hippel-Lindauovej chorobe, hematopoetickým rakovinám a hypeproliferačným poruchám, napr. tyreotropnej hyperplazii (najmä Gravesova choroba), a cystám (napr. hypervaskularita ovariálnej stomy príznačná pre polycystický ovariálny syndróm (Steinov-Leventhalov syndróm) a polycystické ochorenie obličky, nakoľko takéto ochorenia vyžadujú proliferáciu krvných buniek pre rast a/alebo metastázu.

Ďalej môžu byť niektoré z týchto zlúčenín používané ako aktívne agens proti spáleninám, chronickému pľúcnemu ochoreniu, mŕtvici, polypom, anafylaxii, chronickému a alergickému zápalu, oneskorenému typu hypersenzitivity, ovariálnemu hyperstimulačnému syndrómu, cerebrálnemu edému súvisiacemu s mozgovým nádorom, výškovej chorobe, traume alebo cerebrálnemu alebo pulmonárnemu edému vyvolanom hypoxiou, očnému alebo makulárnemu edému, ascites a ďalším ochoreniam, v ktorých je vaskulárna hyperpermeabilita, efúzia, exsudáty, proteínový extravazát alebo edém prejavom ochorenia. Zlúčeniny budú tiež účinné pri ošetrení porúch, v ktorých proteínová extravazácia povedie k ukladaniu fibrínu a extracelulárnej matrix, podporujúcej stromálnu proliferáciu (napr. keloid, fibróza, cirhóza a syndróm karpálneho tunelu)).

Zvýšená tvorba VEGF potenciuje zápalové procesy, napr. získavanie a aktiváciu monocytov. Zlúčeniny tohto vynálezu budú tiež účinné pri ošetrení zápalových porúch, napr. zápalového črevného ochorenia (IBD) a Crohnovej choroby.

VEGF sú unikátne v tom, že sú len angiogénnymi rastovými faktormi, o ktorých je známe, že prispievajú k vaskulárnej hyperpermeabilite a tvorbe edému. Zdá sa, že vaskulárna hyperpermeabilita a edém, ktorý súvisí s expresiou alebo aplikáciou mnohých ďalších rastových faktorov, môžu byť sprostredkované cez tvorbu VEGF. Zápalové cytokíny stimulujú tvorbu VEGF. Hypoxia vedie k značnej regulácii v mnohých tkanivách, a teda situácie zahrnujúce infarkt, oklúziu, ischémiu, anémiu alebo poruchu krvného obehu typicky používajú odpoveď sprostredkovanú VEGF/VPF. Vaskulárna hyperpermeabilita, súvisiaci edém, zmenená transendoteliálna výmena a makromolekulárny extravazát, ktorý je často sprevádzaný diapedézou, môže mať za výsledok nadbytok depozície matrix, aberantnú stromálnu proliferáciu, fibrózu, atď. A teda hyperpermeabilita sprostredkovaná VEGF môže výrazne prispievať k poruchám s uvedenými etiologickými rysmi.

Pretože implantácia blastocytov, vývoj placenty a embryogenéza sú na angiogenézy závislé, sú určité zlúčeniny podľa predloženého vynálezu účinné ako kontraceptíva a antifertilitá.

Predpokladá sa, že vyššie uvedené poruchy sú sprostredkované k výraznému nadbytku aktivitou proteínovej tyrozínkinázy zahrnujúcej K.DR/VEGFR-2 a/alebo Flt-l/VEGFR-1 a/alebo TIE-2 tyrozínkinázy. Inhibíciou aktivity týchto tyrozínkináz je inhibovaná progresia uvedených porúch, pretože angiogénny alebo vaskulárny komponent hyperpermeabilnej zložky ochorenia je kriticky zredukovaný. Účinok niektorých zo zlúčenín tohto vynálezu daná ich selektivitou pre špecifické tyrozínkinázy vedie k minimalizácii vedľajších účinkov, ktoré by sa mohly vyskytovať, pokiaľ by boli používané inhibitory tyrozínkináz s menšou selektivitou. Určité zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú tiež účinnými inhibítormi FGFR, PDGFR, c-Met a IGF-l-R. Tieto receptorové kinázy môžu priamo alebo nepriamo potenciovať angiogénne a hyperproliferačné odpovede pri rôznych poruchách, a teda ich inhibícia môže brániť progresii ochorení.

Tie-2 (TEK) je člen nedávno objavenej rodiny špecifických receptorových tyrozínkináz endoteliálnych buniek, ktoré sa podieľajú na rozhodujúcich angiogénnych procesoch, napr. vetvení, raste, premene, dozrievaní a stabilite ciev. Tie-2 je prvá cicavčia receptorová tyrozínkináza, u ktorej bol identifikovaný agonistický ligand(y) (napr. angiopoietínl („angl“), ktorý stimuluje autofosforyláciu receptora a signálnu transdukciu) aj antagonistický ligand(y) (napr. angiopoietín2 („ang2“). Vylučovanie a transgénna manipulácia expresie Tie-2 a jeho ligandov indikuje tesnú priestorovú a temporálnu reguláciu signalizácie Tie-2, ktorá je podstatná pre vlastný vývoj novej vaskulácie. Súčasný model predpokladá, že stimulácia Tie-2 kinázy ligandom angl sa priamo podiela na vetvení, raste a prerastaní nových ciev a získavaní a interakcii periendoteliálnych podporných buniek, ktoré sú dôležité pri udržovaní cievnej integrity a indukcii pokojového štádia. Nedostatočná stimulácia angl Tie-2 kinázy alebo nedostatočná inhibícia autofosforylácie pomocou ang2, ktorá sa vytvára vo vysokých hladinách v miestach vaskulárnej regresie, môže spôsobiť úbytok vaskulárnej štruktúry a matricových kontaktov, ktoré vedú k usmrteniu endoteliálnych buniek, najmä vedú k nedostatočnej stimulácii rastu/prežitia. Avšak daný stav je omnoho komplexnejší, nakoľko aspoň dva ďalšie ligandy Tie-2 (ang3 a ang4) boli už skôr publikované a tiež bola vysvetlená schopnosť heterooligomerizácie rôznych agonistických a antagonistických angiopoietínov, čím dochádza k modifikácii ich aktivity. Cieľové ligand-receptorové interakcie Tie2 ako antiangiogénny terapeutický prístup je týmto menej výhodný, a teda inhibícia kinázy je preferovaná.

Rozpustná extracelulárna oblasť Tie-2 („ExTek“) môže tiež narušiť usadenie nádorovej vaskularizácie v xenoimplantáte prsného nádora a modelov pľúcnej metastázy a tiež v očnej neovaskularizácii sprostredkovanej nádorovými bunkami. Adenovírusovou infekciou môže byť u hlodavcov po dobu 7-10 dní docielená in vivo produkcia ExTeku v mg/ml hladinách bez nepriaznivých vedľajších účinkov. Tieto výsledky predpokladajú, že narušenie signálnych dráh Tie-2 u normálnych zdravých zvierat môže byť dobre znášané. Tieto inhibičné odpovede Tie-2 na ExTek môžu byť dôsledkom konfiškácie ligandu(ov) a/alebo generácie neproduktívneho heterodiméru úplnou Tie-2.

V poslednej dobe bola objavená výrazná stimulácia expresie Tie-2 v ľudskom vaskulárnom synoviálnom panuse artritických kĺbov, ktorá je zhodná s úlohou pri neprimeranej neovaskularizácii, čím sa vysvetľuje úloha Tie-2 pri progresii reumatoidnej artritídy. V súvislosti s ľudskými venóznymi malformáciami boli zistené bodové mutácie produkujúce konštitutívne aktivované formy Tie-2. Z tohto dôvodu sú inhibítory Tie-2 účinné pri ošetrení týchto porúch a ďalších prípadov neprimeranej neovaskularizácie.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu majú inhibicnú aktivitu proti proteínkinázam, čo znamená, že tieto zlúčeniny modulujú signálnu transdukciu proteínkináz. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu inhibujú proteínkinázy z rodiny serín/treonínkináz a tyrozínkináz. Najmä tieto zlúčeniny selektívne inhibujú aktivitu KDR/FLK-l/VEGFR-2 tyrozínkináz. Určité zlúčeniny podľa predloženého vynálezu tiež inhibujú aktivitu ďalších tyrozínkináz, napr. Flt1/VEGFR-l, Flt-4/VEGFR-3, Tie-1, Tie-2, FGFR, PDGFR, IGF-1R, c-Met, Srcpodrodinu kináz, napr. Lek, hek, fgr, Src, fyn, yes, etc. Ďalej niektoré zlúčeniny podľa predloženého vynálezu signifikantne inhibujú serín/treonínkinázy, napr. PKC, MAP kinázy, erk, CDKs, Plk-1 alebo Raf-1, ktoré hrajú významnú úlohu pri bunkovej proliferácii a progresii bunkového cyklu. Účinnosť a špecifita generických zlúčenín tohto vynálezu najmä voči proteínkinázam môže byť často zmenená a optimalizovaná obmenami v charaktere, počte a usporiadaní substituentov (tzn. Ri, R₂, R3, A a kruh 1) a konformačnými reštrikciami. Navyše metabolity určitých zlúčenín môžu mať tiež signifikantnú inhibičnú aktivitu proti proteínkinázam.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, pokiaľ sú podávané recipientom pri potrebe takej zlúčeniny, inhibujú vaskulárnu hyperpermeabilitu a tvorbu edému u týchto recipientov. Predpokladá sa, že tieto zlúčeniny účinkujú cez inhibíciu aktivity KDR tyrozínkináz, ktoré sa zúčastňujú procesu vaskulárnej hyperpermeability a tvorby edému. KDR tyrozínkináza môže byť tiež označovaná ako FLK-1 tyrozínkináza, NYK tyrozínkináza alebo VEGFR-2 tyrozínkináza. KDR tyrozínkináza je aktivovaná, pokiaľ sa rastový faktor vaskulárnych endoteliálnych buniek (VEGFR) alebo ďalší aktivačný ligand (napr. VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E alebo HIV Tat proteín) viaže na KDR receptorovú tyrozín66 kinázu, ktorá sa nachádza na povrchu vaskulárnych endoteliálnych buniek. Po aktivácii KDR tyrozínkinázy nastane hyperpermeabilita krvných ciev a tekutina putuje z krvného riečiska cez steny krvných ciev do intersticiálnych priestorov, a tým vytvára oblasť edému. Túto formu odpovedi tiež často sprevádza diapedéza. Podobne, nadbytok vaskulárnej hyperpermeability môže narušiť normálnu molekulárnu výmenu cez endotel v kritických tkanivách a orgánoch (napr. pľúca a ľadviny), čím spôsobuje makromolekulárny extravazát a depozíciu. Po tejto akútnej odpovedi na KDR stimuláciu, o ktorej sa predpokladá, že podporuje nasledujúci angiogénny proces, prolongovaná stimulácia KDR tyrozínkinázy vedie k proliferácii a chemotaxii vaskulárnych endoteliálnych buniek a tvorbe nových ciev. Inhibíciou aktivity KDR tyrozínkinázy vykonanou buď blokovaním produkcie aktivovaného ligandu, blokovaním väzby aktivovaného ligandu na receptor KDR tyrozínkinázy, zabránením dimerizácii a transfosforylácii receptora, inhibíciou enzýmovej aktivity KDR tyrozínkinázy (inhibíciou fosforylačnej funkcie enzýmu) alebo niektorým iným mechanizmom, ktorý preruší danú downstreamovú signálnu dráhu (D. Mukhopedhyay et al., Cancer Res. 55:1278-1284 (1998) a súvisiace odkazy), môže byť inhibovaná a minimalizovaná hyperpermeabilita, ako aj s tým súvisiaca extravazácia, následná tvorba edému a matricovej depozície a angiogénnej odpovedi.

Jedna skupina výhodných zlúčenín podľa predloženého vynálezu má schopnosť inhibície aktivity KDR tyrozínkinázy bez signifikantnej inhibície aktivity Flt-1 tyrozínkinázy (Flt-1 tyrozínkináza je tiež označovaná ako VEGFR-1 tyrozínkináza). Ako KDR tyrozínkináza, tak aj Flt-1 tyrozínkináza sú aktivované väzbou VEGF na receptory KDR tyrozínkinázy, respektíve na receptory Flt-1 tyrozínkinázy. Nakoľko aktivita Flt-1 tyrozínkinázy môže sprostredkovávať dôležité údaje v endoteliálnom zásobovaní a vaskulárnych funkciách, môže mať inhibícia aktivity tohto enzýmu toxické alebo nepriaznivé účinky. Určité výhodné zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú jedinečné v tom zmysle, že inhibujú aktivitu jedného VEGF-receptorovej tyrozínkinázy (KDR), ktorá je aktivovaná aktivovaným ligandom, ale neinhibujú ďalšie receptorové tyrozínkinázy, napr. Flt-1, ktoré sú tiež aktivované určitými aktivovanými ligandami. Preto sú výhodné zlúčeniny podľa predloženého vynálezu selektívnymi inhibitormi aktivity tyrozínkinázy.

V rámci jedného uskutočnenia poskytuje predložený vynález spôsob ošetrenia stavov u pacienta, ktoré sú sprostredkované proteínkinázou, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky alebo profylaktický účinného množstva jednej alebo viacerých zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 pacientovi.

Termín „stav sprostredkovaný proteínkinázou“ alebo „stav sprostredkovaný aktivitou proteínkinázy“ zahrnuje ochorenie, napr. ochorenie alebo ďalšie nežiaduce fyzické stavy, v ktorých genéza alebo progresia závisí aspoň čiastočne na aktivite aspoň jednej proteínkinázy. Proteínkináza môže byť napr. proteínová tyrozínkináza alebo proteínová serín/treonínkináza.

Pacient, ktorý má byť ošetrovaný, môže byť akýkoľvek živočích, výhodne cicavec, napr. zdomácnené či hospodárske zvieratá. Výhodne je pacientom ľudský subjekt.

Termín „terapeuticky účinné množstvo“ je množstvo zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 alebo kombinácie dvoch alebo viacerých takých zlúčenín, ktoré inhibujú úplne alebo čiastočne progresiu stavu alebo zlepšujú aspoň čiastočne jeden alebo viac symptómov stavu. Terapeuticky účinné množstvo môže byť také množstvo, ktoré je profylaktický účinné. Množstvo, ktoré je terapeuticky aktívne bude závisieť na pacientovej váhe, pohlaví, ochorenia, ktoré má byť ošetrované, závažnosti stavu a požadovanom výsledku. Pre jednotlivých pacientov bude terapeuticky účinné množstvo stanovené štandardným spôsobom.

Spôsob podľa predloženého vynálezu je účinný pri ošetrení stavov sprostredkovaných proteínkinázou, napr. akýkoľvek vyššie uvedený stav. V rámci jedného uskutočnenia je stav sprostredkovaný proteínkinázou charakterizovaný nežiaducou angiogenézou, edémom alebo stromálnou depozíciou. Napríklad môže byť jeden alebo viac ulkusov spôsobených bakteriálnymi alebo pliesňovými infekciami, Moorenove ulkusy a ulceratívna kolitída. Stavy môžu byť tiež spôsobené mikrobiálnou infekciou, napr. Lymskou chorobou, sepsou, septickým šokom alebo infekciou Herpes simplex, Herpes Zoster, vírusom spôsobujúcim syndróm získaného zlýhania imunity, protozoem, toxoplazmózou alebo parapoxvírusom; angiogénnymi poruchami, napr. Hippel-Lindauovou cho68 robou, polycystickým ochorením ľadvín, pemfigoidom, Pagetovou chorobou a psoriázou; reprodukčným ochorením, napr. endometriózou, syndrómom ovariálnej hyperstimulácie, preeklampsie alebo menometroragie; fibrotické a edemické stavy, napr. sarkoidóza, fibróza, cirhóza, tyreoiditída, systémový hypervizkózny syndróm, Oslerova-Renduova-Weberova choroba, chronické oklúzne ochorenie pľúc, astma a edém po traume, popáleniny, ožiarenie, mŕtvica, hypoxia alebo ischémia; alebo zápalovým/imunologickým stavom, napr. systémový lupus, chronický zápal, glomerulonefritída, synovitída, zápalové ochorenie čriev, Chronova choroba, reumatoidná artritída, osteoartritída, roztrúsená skleróza a rejekcia štepu. Príslušné stavy sprostredkované proteínkinázou tiež zahrnujú mesiačikovitú anémiu, osteoporózu, osteopetrózu, hyperkalcémiu indukovanú nádorom a kostné metastázy. Ďalšie stavy sprostredkované proteínkinázou, ktoré môžu byť ošetrené spôsobom podľa predloženého vynálezu, zahrnujú ochorenie očí, napr. okulárny alebo makulárny edém, okulárne neovaskulárne ochorenie, skleritída, radiálna keratotómia, uveitída, vitritída, myopia, fyziologická exkavácia papily, chronické odchlípenie sietnice, komplikácie po ošetrení laserom, konjunktivitída, Stargardtova choroba a Ealesova choroba, okrem retinopatie a makulárnej degenerácie.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú tiež účinné pri ošetrení kardiovaskulárnych stavov, napr. aterosklerózy, restenózy, vaskulárnej oklúzie a karotického obštruktívneho ochorenia.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú tiež účinné pri ošetrení indikácií súvisiacich s rakovinou, napr. pevné nádory, sarkóm (najmä Ewingom sarkóm a osteosarkóm), retinoblastóm, rabdomyosarkóm, neuroblastóm, hematopoézne zhubné bujnenie, vrátane leukémie a lymfómu, pleurálne alebo perikardiálne efúzie indukované nádorom a malígne ascites.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú tiež účinné pri ošetrení syndrómu Crow-Fukase (POEMS) a diabetických stavov, napr. glaukómu, diabetickej retinopatie a mikroangiopatie.

Rodiny Src, Tec, Ako, Map, Csk, NFkB i Syk kináz hrajú úlohy pri regulácii imunitných funkcií. Src rodina bežne zahrnuje Fyn, Lck, Fgr, Fes, Lyn,

Src, Yes, Hck a Blk. Rodina Syk všeobecne zahrnuje len Zap a Syk. Rodina Tec zahrnuje Tec, Btk, Rlk a Itk. Rodina Janus kináz sa zúčastňuje transdukcie rastového faktora a prozápalových signálov cytokínov za účasti mnohých receptorov. Aj keď úlohy BTK a ITK, členov rodiny Tec kináz, sú z hľadiska imunobiológie menšie, ich modulácia inhibítormi môže mať terapeutický účinok. Rodina Csk v súčasnej dobe zahrnuje Csk a Chk. Kinázy RIP, IRAK-1, IRAK-2, NIK, p38 MAP, Jnk, IKK-1 a IKK-2 sa podieľajú na drahách signálnej transdukcie kľúčových prozápalových cytokínov TNF a IL-1. Zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu, vďaka schopnosti účinne inhibovať jednu alebo viac z týchto kináz, pôsobiť ako imunomodulačné agens, ktoré sú účinné na stabilizáciu aloštepu a pri ošetrení autoimunitných ochorení. Vďaka svojej schopnosti regulovať migráciu alebo aktiváciu T-buniek, B-buniek, žírnych buniek, monocytov a neutrofilov, by mohli byť tieto zlúčeniny používané na ošetrenie týchto autoimunitných ochorení a sepsy; prevenciu rejekcie transplantátu, ať už reakcia hostiteľa proti štepu u pevných orgánov alebo reakcia štepu proti hostiteľovi u kostnej drene, sú obmedzené toxicitou bežne dostupných imunosupresív, a teda účinné liečivo so zlepšeným terapeutickým indexom by bolo veľmi prospešné. Experimenty zamerané na gény ukázali podstatnú úlohu Src v biológii osteoklastov, čo sú bunky odpovedné za resorpciu kosti. Zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu vďaka schopnosti regulácie Src byť tiež účinné pri ošetrení osteoporózy, osteopetrózy, Pagetovho ochorenia, hyperkalcémie indukovanej nádorom a pri ošetrení kostných metastáz.

Ukázalo sa, že veľký počet proteínkináz je protoonkogénnych. Prerušenie chromozómu (v bode prerušenia Itk kinázy na chromozóme 5), translokácia ako v prípade Abl génu s BCR (Philadelphia Chromosome), vypustenie v prípadoch ako c-Kit alebo EGFR, alebo mutácia (napr. Met) má za následok vytvorenie dysregulačných proteínov, ktoré zapríčiňujú premenu protoonkogénnych produktov na onkogénne produkty. V prípade ďalších nádorov je onkogenéza riadená autokrínnymi alebo parakrínnymi interakciami medzi ligandom a receptorom rastového faktoru. Členovia rodiny src kináz sa typicky zúčastňujú downstreamovej signálnej transdukcie, čím potenciujú onkogenézu a samotné sa môžu stáť onkogénnymi vďaka nadmernej expresii alebo mutácii. Inhibíciou aktivity proteínkináz môžu byť príslušné ochorenia ošetrené. Vaskulárna reste70 nóza môže zahrnovať proces FGF a/alebo proliferáciu hladkého svalstva propagovanú PDGF a proliferáciu endoteliálnych buniek. Ligandová stimulácia in vivo FGFR, PDGFR, IGF1-R a c-Met je proangiogénna a potenciuje poruchy závislé na onkogenézy. Inhibícia FGFr, PDGFr, c-Met alebo IGF1-R aktivity kináz môže byť účinnou stratégiou inhibície tohto fenoménu. Teda zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109, ktoré inhibujú aktivitu kinázy normálnych alebo aberantných c-kit, c-met, c-fms, členovia rodiny src, EGFr, erbB2, erbB4, BCR-Abl, PDGFr, FGFr, IGF1-R a ďalších receptorových alebo cytozolových tyrozínkináz, môžu hrať dôležitú úlohu pri ošetrení benígnych a neoplastických proliferačných ochorení.

V mnohých patologických stavoch (napr. pevné primárne nádory a metastázy, Kaposiho sarkóm, reumatická artritída, slepota spôsobená neprimeranou očnou neovaskularizáciou, psoriáza a ateroskleróza) je progresia ochorení po perzistentnej angiogenéze kontingentná. Polypeptidové rastové faktory často produkované chorobným tkanivom alebo sprievodnými zápalovými bunkami a ich odpovedajúce špecifické receptorové tyrozínkinázy endoteliálnych buniek (napr. KDR/VEGFR-2, Flt-l/VEGFR-1, Tie-2/Tek a Tie) sú podstatné pre stimuláciu endoteliálneho bunkového rastu, migrácie, usporiadanie, diferenciáciu a zostavenia nových funkčných vaskulátorov. Predpokladá sa, že v dôsledku aktivity „faktora vaskulárnej permeability“ VEGF pri sprostredkovaní vaskulárnej hyperpermeability má VEGF-stimulácia VEGFR kinázy dôležitú úlohu pri tvorbe nádorových ascites, cerebrálneho a pulmonárneho edému, pleurálnej a perikardiálnej efúzie, hypersenzitívnych reakcií oneskoreného typu, tkanivového edému a orgánovej dysfunkcie po traume, popálenín, ischémie, diabetických komplikácií, endometriózy, syndrómu respiračnej tiesne dospelých (ARDS), hypotenzii a hyperpermeability súvisiacej s post kardiopulmonárnym bypassom a očnému edému majúcemu za následok glaukóm alebo oslepnutie v dôsledku neprimeranej neovaskularizácie. Okrem VEGF, tiež v poslednej dobe identifikované VEGF-C a VEGF-D a vírusovo kódované VEGF-E alebo HIV-Tat proteín môžu spôsobovať odpoveď na báze vaskulárnej hyperpermeability sprostredkovanú stimuláciou VEGFR kinázy. KDR/VEGFR-2 a/alebo Tie2 je exprimovaný tiež v selektívnej populácii buniek hematopoietického kmeňa. Niektoré z členov tejto populácie sú multifunkčné v prírode a môžu byť stimu71 lované rastovými faktormi na rozlíšenie endoteliálnych buniek a participáciu pri vaskulogenetických angiogénnych procesoch. Z tohto dôvodu boli nazvané endoteliálne progenitórne bunky (EPC^J.clin.Investig. 103: 1231-1236 (1999)). V niektorých progenitoroch môže Tie-2 byť dôležitý pri ich získanvaní, adhézii, regulácii a diferenciácii (Blood, 4317-4326 (1997)) táto populácia exprimujúca Tie-2 môže slúžiť ako cirkulujúci angiogénny endoteliálny progenitor. Určité agens reprezentované všeobecnými vzorcami 1-109 schopné blokovať kinázovú aktivitu špecifických kináz endoteliálnych buniek by preto mohli inhibovať progresiu ochorení zahrnujúcich tieto stavy.

Má sa za to, že vaskulárna destabilizácia antagonistického ligandu Tie-2 (ang2) indukuje nestabilný „plastický“ stav v endotéliu. Za vysokých hladín VEGF môže viesť k silným angiogénnym odpovediam, avšak za neprítomnosti VEGF alebo stimulu súvisiaceho s VEGF môže dochádzať k zreteľnej regresii ciev a endoteliálnej apoptóze (Genes and Devel. 13: 1055-1066 (1999)). Analogicky, inhibítory Tie-2 kinázy môžu byť proangiogénne alebo antiangiogénne v prítomnosti, respektíve v neprítomnosti stimulu súvisiaceho s VEGF.

Preto môžu byť používané pri ošetrení stavov sprostredkovaných proteínkinázou, napr. vyššie uvedené benígne a neoplastické proliferačné ochorenia a poruchy imunitného systému, zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 alebo ich soli alebo farmaceutické prípravky obsahujúce ich terapeuticky účinné množstvo. Tieto ochorenia zahrnujú autoimunitné choroby, napr. reumatickú artritídu, tyreoiditídu, diabetes typu 1, roztrúsenú sklerózu, sarkoidózu, zápalové črevné ochorenie, Crohnovu chorobu, myasténiu gravis a systémový lupus erytematosus; psoriázu, rejekciu transplantovaného orgánu (napr. rejekciu ľadvín, štep proti hostiteľovi), benígne a neoplastické proliferačné ochorenie, ľudské rakoviny, napr. rakoviny pľúc, prsníka, žalúdku, mechúre, hrubého čreva, pankreasu, vaječníkov, prostaty a konečníka a hematopoietické zhubné bujnenia (leukémia a lymfóm) a ochorenia zahrnujúce neprimeranú vaskularizáciu, napr. diabetickú retinopatiu, retinopatiu nedonosených, choroidálnu neovaskularizáciu v dôsledku degenerácie makuly súvisiacu s vekom a infantilný hemangióm u ľudských subjektov. Navyše tieto inhibítory môžu byť účinné pri ošetrení porúch zahrnujúcich edém sprostredkovaný VEGF, ascites, efúzie a exsudáty, vrátane napr. makulárneho edému, cerebrálneho edému, akútneho pľúcneho poranenia a syndrómu respiračnej tiesne dospelých (ARDS).

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť tiež účinné pri ošetrení a pri profylaxii vyššie uvedených ochorení.

Predpokladá sa, že vyššie uvedené poruchy sú významne sprostredkované aktivitou proteínových tyrozínkináz zahrnujúcich VEGF receptory (napr. KDR, Flt-1 a/alebo Tie-2). Inhibíciou aktivity týchto receptorových tyrozínkináz je inhibovaná progresia uvedených porúch, pretože angiogénny komponent stavu ochorenia je silne zredukovaný. Účinok zlúčenín podľa predloženého vynálezu v dôsledku selektivity pre špecifické tyrozínkinázy vedie k minimalizácii vedľajších účinkov, ktoré by sa mohli vyskytovať, pokiaľ by boli používané menej selektívne inhibitory tyrozínkináz.

V ďalšom aspekte poskytuje predložený vynález zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109, ktoré sú definované vyššie na použitie ako liečivých prípravkov, najmä ako inhibítorov aktivity proteínkináz, napr. aktivity proteínkinázy, serínkinázy a treonínkinázy. V ešte ďalšom aspekte poskytuje predložený vynález použitie vyššie definovaných zlúčenín všeobecných vzorcov 1-109 pri výrobe liečivého prípravku určeného na inhibíciu aktivity proteínkinázy.

V predloženom vynáleze sú používané nasledujúce termíny:

Termín „fyziologicky prijateľné soli“ sa vzťahuje na tie soli, ktoré si ponechávajú biologickú účinnosť a vlastnosti voľných báz, a ktoré sú pripravené reakciou anorganických kyselín, napr. kyseliny chlorovodíkovej, bromovodíkovej, sírovej, dusičnej, alebo organických kyselín, napr. sírovej, karboxylovej alebo organickej fosforečnej, metánsulfónovej, etánsulfónovej, p-toluénsulfónovej, salicylovej, mliečnej, vínnej kyseliny, atď.

Farmaceutické formulácie

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť podávané ľuďom ako také alebo vo farmaceutických prípravkoch, v ktorých sú zmiešané s vhodnými nosičmi alebo excipientmi v dávkach, ktoré sú dostačujúce na ošetrenie alebo zlepšenie vaskulárnej hyperpermeability, edému a súvisiacich porúch. Zmesi týchto zlúčenín môžu byť tiež podávané pacientom ako jednoduchá zmes alebo vo vhodných pripravených farmaceutických prípravkoch. Terapeuticky účinná dávka ďalej označuje množstvo zlúčeniny alebo zlúčenín, ktoré je dostačujúce na prevenciu alebo atenuáciu neprimeranej neovaskularizácie, progresie hyperproliferatívnych porúch, edému, hyperpermeability súvisiacej s VEGF a/alebo hypotenzie spojenej s VEGF. Techniky prípravy a podania zlúčenín môžu byť nájdené v „Remington's Pharmaceutical Sciences“, Mack Publishing Co., Easton, PA, posledné vydanie.

Spôsoby podania

Vhodné spôsoby podania môžu byť napr. perorálne, vo forme očných kvapiek, rektálne, transmukózne, lokálne alebo intestinálne; parenterálne podanie zahrnujúce intramuskulárne a subkutánne podanie, intramedulárnu injekciu, ako aj intratekálne, priame intraventrikulárne, intravenózne, intraperitoneálne, intranazálne alebo intraokulárne injekcie.

Alebo je možné podávať zlúčeninu lokálnym než systémovým spôsobom, napr. injekciou zlúčeniny priamo do miesta edému, často v depotnej alebo trvalo uvolňujúcej formulácii.

Ďalej je možné liečivo podávať ako cieľovo špecifické podanie, napr. v lipozóme potiahnutom endoteliálnou, bunkovo špecifickou protilátkou.

Prípravky/Formulácie

Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu môžu byť vyrábané štandardným spôsobom, napr. štandardnými miešaniami, rozpustením, granuláciou, prípravou dražé, rozmelňovaním, emulgáciou, enkapsuláciou, uzavrením alebo lyofilizáciou.

Farmaceutické kompozície na použitie podľa predloženého vynálezu tak môžu byť pripravené štandardným spôsobom za použitia jedného alebo viacerých fyziologicky prijatelných nosičov obsahujúcich excipienty a pomocné látky, ktoré uľahčujú spracovanie aktívnych zlúčenín do preparátov používaných farmaceutickým spôsobom. Vlastná príprava je závislá na vybranom spôsobe podania.

Na injekcie môžu byť agens podľa predloženého vynálezu pripravené vo vodných roztokoch, výhodne vo fyziologicky kompatibilných pufroch, napr. Hanksov roztok, Ringerov roztok alebo pufry na báze fyziologického roztoku. Pre transmukózne podanie sú vo formulácii používané také penetrátory, ktoré sú vhodné na prekonanie danej bariéry. Tieto penetrátory sú všeobecne známe.

Na perorálne podanie môžu byť zlúčeniny ľahko pripravené spojením aktívnych zlúčenín so štandardnými farmaceutický prijateľnými nosičmi. Tieto nosiče umožňujú pripraviť zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vo forme tabliet, pilúl, dražé, kapsúl, roztokov, gélov, sirupov, injekčných zmesí, suspenzií, atd’., na perorálne požitie lieku pacientom, ktorý má byť ošetrovaný. Farmaceutické preparáty na perorálne použitie môžu byť pripravené spojením aktívnej zlúčeniny s pevným excipientom, prípadne rozomletím výslednej zmesi, a po pridaní vhodných pomocných látok, pokiaľ je treba, spracovaním zmesi granúl, čím je možné získať tablety alebo dražé. Vhodné excipienty sú najmä plnivá, napr. cukry zahrnujúce laktózu, sacharózu, manitol alebo sorbitol; celulózové prípravky, napr. kukuričný škrob, pšeničný škrob, ryžový škrob, zemiakový škrob, želatína, traganth, metylcelulóza, hydroxypropylmetylcelulóza, sodná soľ karboxymetylcelulózy a/alebo polyvinylpyrolidón (PVP). Pokiaľ je treba, môžu byť pridané agens zaisťujúce rozpad tablety po požití, napr. zosieťovaný polyvinylpyrolidón, agar alebo kyselina algínová alebo ich soli, napr. alginát sodný.

Jadra dražé sú vybavené vhodnými povrchovými vrstvami. Na tento účel môžu byť používané koncentrované roztoky cukrov, ktoré môžu prípadne obsahovať arabskú gumu, mastenec, polyvinylpyrolidón, karbopolový gél, polyetylénglykol a/alebo oxid titaničitý, roztoky laku a vhodné organické rozpúšťadlá alebo zmesi rozpúšťadiel. Organické farbivá alebo pigmenty môžu byť pridané do tabliet alebo poťahových vrstiev dražé na identifikáciu alebo charakterizáciu rozdielnych kombinácií dávok aktívnej zlúčeniny.

Farmaceutické prípravky, ktoré môžu byť používané perorálne zahrnujú kapsule vyrobené zo želatíny, ako aj mäkké, uzavrené kapsule vyrobené zo želatíny a zmäkčovadla, napr. glycerol alebo sorbitol. Kapsule môžu obsahovať aktívne zložky v prímesi s plnivami, napr. laktózou, spojivami, napr. škrobmi, a/alebo lubrikantmi, napr. mastenec alebo stearát horečnatý, a prípadne stabilizátory. V mäkkých kapsuliach môžu byť aktívne zlúčeniny rozpustené alebo suspendované vo vhodných roztokoch, napr. mastných olejoch, minerálnom oleji alebo tekutých polyetylénglykoloch. Navyše môžu byť pridávané stabilizátory. Všetky formulácie na perorálne podanie by mali byť v dávkach vhodných pre takýto spôsob podania.

Na bukálne podanie môžu byť prípravky vo forme tabliet alebo pastiliek pripravených štandardným spôsobom.

Na podanie inhalácie sú zlúčeniny podľa predloženého vynálezu štandardne dodávané vo forme aerosólového spreja v rozprašovači alebo v balení so stlačeným obsahom s vhodným propelentom, napr. dichlórdifluórmetánom, trichlórfluórmetánom, dichlórtetrafluóretánom, oxidom uhličitým alebo inými vhodnými plynmi. V prípade stlačeného aerosólu môže byť na dávkovanie využitý „ventil“, ktorý umožní uvolnenie presného množstva látky. Kapsule a nábojnice, napr. želatína, na použitie v inhalačnom prístroji alebo insuflátore môžu byť pripravené spôsobom s obsahom práškovej zmesi zlúčeniny a vhodnej práškovej bázy, napr. laktózy alebo škrobu.

Zlúčeniny môžu byť pripravené na parenterálne podanie injekcií, napr. injekcií bolusu alebo kontinuálnej infúzií. Formulácie pre injekcie môžu byť v jednotkových dávkovacích formách, napr. v ampuliach alebo v obaloch pre viac dávok, s pridanou konzervačnou látkou. Prípravky môžu byť tiež vo formách suspenzie, roztokov alebo emulzií v olejových alebo vodných nosičoch a môžu obsahovať pomocné agens, napr. suspendačné, stabilizačné a/alebo dispergačné prostriedky.

Farmaceutické formulácie na parenterálne podanie zahrnujú vodné roztoky aktívnych zlúčenín vo forme, ktorá je rozpustná vo vode. Ďalej môžu byť suspenzie aktívnych zlúčenín pripravené ako príslušné olejovité injekčné sus76 penzie. Vhodné lipofilné rozpúšťadlá alebo prenášače zahrnujú mastné oleje, napr. sezámový olej, alebo estery syntetických mastných kyselín, napr. etyloleát alebo triglyceridy, alebo lipozómy.

Vodné injekčné suspenzie môžu obsahovať látky, ktoré zvyšujú viskozitu suspenzie, napr. sodná soľ karboxymetylcelulózy, sorbitol alebo dextrán. Prípadne suspenzie môžu tiež obsahovať vhodné stabilizátory alebo agens, ktoré zvyšujú rozpustnosť zlúčenín, čím umožňujú pripraviť vysoko koncentrované roztoky.

Alebo môže byť aktívna zložka vo forme prášku určená na spojenie s vhodným nosičom, napr. sterilná voda bez pyrogénu.

Zlúčeniny môžu byť tiež pripravené ako rektálne prípravky, napr. čipky alebo retenčné klyzma, obsahujúce štandardné čipkové bázy, napr. kakaové maslo alebo iné glyceridy.

Okrem vyššie uvedených formulácií, môžu byť tiež pripravené zlúčeniny ako depotný preparát. Tieto formulácie s dluhou dobou účinku môžu byť podávané implantáciou (napr. subkutánne alebo intramuskulárne podanie alebo intramuskulárnou injekciou). Týmto spôsobom môžu byť pripravené zlúčeniny s vhodnými polymérnymi alebo hydrofóbnymi materiálmi (napr. ako emulzie v prijateľnom oleji) alebo ionexy alebo ako ťažko rozpustné deriváty, napr. ťažko rozpustné soli.

Príklad farmaceutického nosiča pre hydrofóbne zlúčeniny podľa predloženého vynálezu je systém spolurozpúšťadiel obsahujúci benzylalkohol, nepolárny surfaktant alebo organický polymér miešateľný s vodou a vodná fáza. Systém spolurozpúšťadiel môže byť systém spolurozpúšťadiel VPD. VPD je roztok 3 obj.% benzylalkoholu, 8 obj.% nepolárneho surfaktantu polysorbátu 80 a 65 obj.% polyetylénglykolu 300 a doplnené na konečný objem absolútnym etanolom. Systém spolurozpúšťadiel VPD (VPD:5W) pozostáva z VPD zriedeného 1:1 5% dextrózou vo vodnom roztoku. Tento systém spolurozpúšťadiel dobre rozpúšťa hydrofóbne zlúčeniny a sám má po systémovom podaní nízku toxicitu. Prirodzene môžu byť podiely systému spolurozpúšťadiel značne menené, avšak tak, aby sa zachovali charakteristické rysy jeho rozpustnosti a to77 xicity. Jednotlivé zložky systému spolurozpúšťadiel môžu byť menené: napr. miesto polysorbátu 80 môžu byť používané ďalšie nepoláme surfaktanty s nízkou toxicitou; veľkosť častíc polyetylénglykolu môže byť rôzna; polyetylénglykol môžu nahradiť ďalšie biokompatibilné polyméry, napr. polyvinylpyrolidón; a ďalšiej cukry alebo polysacharidy môžu nahradit dextrózu.

Alebo môže byť použitý ďalší systém podania pre hydrofóbne farmaceutické zlúčeniny. Pre hydrofóbne liečiva sú štandardnými príkladmi prenášačov a nosičov využívaných pri tomto spôsobe lipozómy a emulzie. Môžu byť používané určité organické rozpúšťadlá, napr. dimetylsulfoxid, avšak obvykle na úkor väčšej toxicity. Navyše zlúčeniny môžu byť dodávané systémom postupného uvolňovania, napr. semipermeabilnými matricami pevných hydrofóbnych polymérov obsahujúcich terapeutické agens. V tejto technike sa používajú zavedené rôzne látky s postupným uvoľňovaním. Kapsule s postupným uvolňovaním môžu v závislosti na svojom chemickom charaktere uvolňovať zlúčeniny po dobu niekoľkých týždňov až 100 dní. V závislosti na chemickom charaktere a biologickej stabilite terapeutického reagens môžu byť používané ďalšie stratégie stabilizácie proteínu.

Farmaceutické kompozície tiež môžu obsahovať vhodnú pevnú látku alebo nosiče alebo excipienty gélovej fázy. Príklady takýchto nosičov alebo excipientov zahrnujú, ale nie je to limitované, uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý, rôzne cukry, škroby, deriváty celulózy, želatínu a polyméry, napr. polyetylénglykoly.

Veľký počet zlúčenín podľa predloženého vynálezu môže byť vo forme soli s farmaceutický kompatibilnými protiióny. Farmaceutický kompatibilné soli môžu byť pripravené s mnohými kyselinami vrátane, ale nie je to limitované, kyseliny chlorovodíkovej, sírovej, octovej, mliečnej, tartárovej, jablčnej, sukcínovej, atď. Soli majú tendenciu byť omnoho rozpustnejšie vo vodných alebo iných protonizovaných rozpúšťadlách než ich odpovedajúce voľné bázy.

Účinná dávka

Farmaceutické kompozície vhodné na použitie v predloženom vynáleze zahrnujú prípravky, v ktorých sú aktívne zložky na dosiahnutie požadovaného účinku obsiahnuté v účinnom množstve. Najmä terapeuticky účinné množstvo znamená množstvo, ktoré je dostatočné na zabránenie alebo na zlepšenie stávajúcich symptómov u subjektu, ktorý je ošetrovaný. Stanovenie účinných množstiev patrí medzi štandardnú rutinu.

Pre akúkoľvek zlúčeninu používanú v spôsobe podľa predloženého vynálezu môže byť terapeuticky účinná dávka najprv stanovená podľa testov na bunkových kultúrach. Napríklad dávka môže byť testovaná na bunkových a zvieracích modeloch na dosiahnutie obehovej koncentrácie, ktorá zahrnuje IC50 stanovenú podľa testov na bunkových kultúrach (tzn. koncentrácia testovanej zlúčeniny, ktorá je potrebná na dosiahnutie 50% možnej inhibície aktivity danej proteínkinázy). V niektorých prípadoch je vhodné stanoviť hodnotu IC50 v prítomnosti 3 až 5% sérumalbumínu, nakoľko toto stanovenie aproximuje väzbové efekty plazmových proteínov na zlúčeninu. Tieto informácie môžu byť používané u ľudských subjektov na presnejšie stanovenie účinných dávok. Najvýhodnejšie zlúčeniny na systémové podanie účinne inhibujú signalizáciu proteínkináz v intaktných bunkách v hladinách, ktoré sú bezpečne dosiahnuteľné v plazme.

Terapeuticky účinná dávka znamená také množstvo zlúčeniny, ktoré má za následok zlepšenie pacientových symptómov. Toxicita a terapeutická účinnosť takých zlúčenín môže byť stanovená štandardnými farmaceutickými spôsobmi na bunkových kultúrach alebo experimentálnych zvieratách, napr. stanovenie maximálnej tolerovanej dávky (MTD) a ED₅o (koncentrácia látky, ktorá vyvolá 50% maximálneho účinku dávky). Dávkový pomer medzi toxickými a terapeutickými účinkami je určený terapeutickým indexom a môže byť vyjadrený ako pomer mezi MTD a ED50. Zlúčeniny, ktoré majú vysoké terapeutické indexy, sú výhodné. Dáta získané z testov na bunkových kultúrach a štúdie na zvieratách môžu byť používané na stanovenie rozpätia dávky určenej pre ľudské subjekty. Dávka takej zlúčeniny leží výhodne v rozmedzí koncentrácií v systémovej cirkulácii, ktorá zahrnuje ED50 s malou alebo žiadnou toxicitou. Dávka môže byť v tomto rozmedzí rôzna v závislosti na používanej dávkovej forme a spôsobu podania. Presná formulácia, spôsob podania a dávka môžu byť vybrané príslušným doktorom v závislosti na stave pacienta (viď Fingl et al., 1975, v „Pharmacological Basis of Therapeutics“, Ch. 1 pl). Pri ošetrení krízy môže byť na dosiahnutie rýchlej odpovedi použité podanie akútneho bólusu alebo infúzie na dosiahnutie MTD.

Množstvo dávky a interval môže byť individuálne upravený na dosiahnutie plazmovej hladiny aktívneho podielu, ktorá je dostatočná na udržanie účinkov modulujúcich kinázu alebo minimálnej účinnej koncentrácie (MEC). Hodnota MEC bude pre každú zlúčeninu rozdielná, ale môže byť stanovená podľa in vitro údajov; napr. koncentrácia potrebná na dosiahnutie 50-90% inhibície proteínkinázy pomocou testov opísaných v predloženom vynáleze. Dávka potrebná na dosiahnutie MEC bude závisieť na jednotlivých charakteristickách a spôsobu podania. Avšak na stanovenie plazmových koncentrácií môže byť používaná HPLC alebo biotesty.

Intervaly medzi dávkami môžu byť tiež stanovené pomocou hodnoty MEC. Zlúčeniny by mali byť podávané podľa režimu, ktorým sa udržujú plazmové hladiny nad hodnotou MEC v priebehu 10-90% doby, výhodne medzi 3090% a najvýhodnejšie 50-90%, dokiaľ nie je dosiahnuté požadované zlepšenie daných symptómov. V prípadoch miestného podania alebo selektívneho vychytávania, nemusia účinné lokálne koncentrácie liečiva odpovedať plazmovej koncentrácii.

Množstvo podávaného prípravku bude závisieť na ošetrovanom subjekte, jeho váhe, závažnosti bolesti, spôsobu podania a posúdenia stanoveného lekárom.

Technika balenia

Prípravky, pokiaľ je treba, môžu byť vo forme balení alebo zásobníku lieku, ktorý môže obsahovat jednu alebo viace jednotkových dávkovacích foriem obsahujúcich aktívnu zložku. Balenie môže napr. obsahovať kovovú alebo plastickú fóliu, napr. mäkké priehľadné balenie. Balenie alebo zásobník lieku môže byť distribuovaný spoločne s návodom na podanie. Tiež môžu byť pripravené prípravky obsahujúce zlúčeninu podľa predloženého vynálezu pripravené v kompatibilnom farmaceutickom nosiči, ktoré sú vložené do príslušného obalu a označené na ošetrenie udaného stavu.

V niektorých formuláciách môže byť prospešné používať zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vo forme čiastočiek s veľmi malou veľkosťou, napr. také, ktoré sú získané mletím využívajúcom energie tekutiny (fluid energy milling).

Použitie zlúčenín podľa predloženého vynálezu pri výrobe farmaceutických prípravkov je uvedené v nasledujúcom opise. V tejto opisnej časti znamená termín „aktívna zlúčenina“ akúkoľvek zlúčeninu podľa predloženého vynálezu, ale najmä akúkoľvek zlúčeninu, ktorá je finálnym produktom jedného z vyššie uvedených príkladov.

a) Kapsule

Pri príprave kapsúl môže byť 10 hmotnostných podielov aktívnej zlúčeniny a 240 hmotnostných podielov laktózy deagregovaných a zmiešaných. Zmes môže byť plnená do tuhých želatínových kapsúl, pričom každá kapsula obsahuje jednotkovú dávku alebo podiel jednotkovej dávky aktívnej zlúčeniny.

b) Tablety

Tablety môžu byť pripravené z nasledujúcich zložiek.

Hmotnostné podiely

Účinná zlúčenina 10

Laktóza 190

Kukuričný škrob 22

Polyvinylpyrolidón 10

Stearát horečnatý 3

Aktívna zlúčenina (účinná látka), laktóza a časť škrobu môžu byť deagregované, zmiešané a výsledná zmes môže byť granulovaná s roztokom polyvinylpyrolidónu v etanole. Suchý granulát môže byť zmiešaný so stearátom horečnatým a zvyškom škrobu. Zmes potom môže byť lisovaná v tabletovacom stroji, pričom každá tableta obsahuje jednotkovú dávku alebo časť jednotkovej dávky aktívnej zlúčeniny.

c) Tablety s enterosolventnými poťahmi

Tablety môžu byť pripravené spôsobom opísaným vyššie v bode (b). Tablety potom môžu byť enterosolventne potiahnuté štandardným spôsobom roztokom 20% acetátftalátu celulózy a 3% dietylftalátu v zmesi etanolu a vody (M)·

d) Čipky

Pri príprave Čípkov môže byť 100 hmotnostných dielov aktívnej zlúčeniny zmiešaných s 1300 hmotnostnými dielmi čipkovej matrice na bázy triglyceridov a vzniknutá zmes sa môže dávkovať do čípkov, pričom každý obsahuje terapeuticky účinné množstvo aktívnej zložky.

V prípravkoch podľa predloženého vynálezu môže byť, pokiaľ je treba, aktívna zlúčenina zmiešaná s ďalšími kompatibilnými farmakologicky aktívnymi zložkami. Napríklad zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť podávané v kombinácii s jedným alebo viacerými ďalšími farmaceutickými agens, ktoré inhibujú alebo zabraňujú produkciu VEGF alebo angiopoietínov, zmierňujú intracelulárne odpovede na VEGF alebo angiopoietíny, blokujú intracelulárnu signálnu transdukciu, inhibujú vaskulárnu hyperpermeabilitu, zmierňujú zápal alebo inhibujú alebo zabraňujú tvorbe edému alebo neovaskularizácii. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu môžu byť podávané pred, po alebo súčasne s ďalším farmaceutickým agens, ktorýmkoľvek vhodným spôsobom podávania. Ďalšie farmaceutické agens zahrnujú, ale nie je to limitované, antiedemické steroidy, NSAIDS, inhibitory ras, anti-TNF agens, anti-IL-1 agens, antihistaminiká, PAF-antagonistov, inhibitory COX-1, inhibitory COX-2, inhibítory NO syntázy, inhibitory Akt/PTB, inhibitory IGF-1R, inhibitory PKC a inhibítory PI3 kinázy. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu účinkujú buď aditívne alebo synergisticky. Teda ďalšia taká kombinácia látok, ktorá inhibuje angiogenézu, vaskulárnu hyperpermeabilitu a/alebo inhibuje tvorbu edému, môže poskytovať väčšie zmiernenie škodlivých účinkov hyperproliferačných ochorení, angiogenézy, vaskulárnej hyperpermeability alebo edému než podanie ktorejkoľvek samotnej látky. Pri ošetrení malígnych porúch sú predpokladané kombinácie s antiproliferačnými alebo cytotoxickými chemoterapiami alebo ožiarovaním.

Predložený vynález tiež zahrnuje použitie zlúčenín všeobecných vzorcov

1-109 ako liečivého prostriedku.

Ďalším aspektom predloženého vynálezu je použitie zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 alebo jej soľ pri výrobe liečivého prípravku na liečenie vaskulárnej hyperpermeability, porúch závislých na angiogéneze, proliferačných ochorení a/alebo porúch imunitného systému u cicavcoch, najmä ľudí.

Predložený vynález tiež poskytuje spôsob liečenia vaskulárnej hyperpermeability, neprimeranej neovaskularizácie, proliferačných ochorení a/alebo porúch imunitného systému, ktorý zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 cicavcovi, najmä lud’om, pri potrebe takového ošetrenia.

In vitro účinnosť zlúčenín pri inhibícii týchto proteínkináz môže byť stanovená nižšie uvedenými spôsobmi.

Účinnosť zlúčenín môže byť stanovená množstvom inhibície fosforylácie exogénneho substrátu (napr. syntetický peptid (Z. Songyang et al., Náture. 373:536-539) porovnaním testovanej zlúčeniny s kontrolou.

Produkcia KDR tyrozínkinázy pomocou Baculovírusového systému:

Kódujúca sekvencia pre ľudskú KDR intracelulárnu doménu (aa7891354) bola generovaná pomocou PCR a cDNA kusov izolovaných z buniek HUVEC. Sekvencia poly-Hisó bola zavedená na V-koniec tohto proteínu. Tento fragment bol klonovaný do transfekčného vektora pVL1393 v mieste Xbal a Not 1. Rekombinantný bakulovírus (BV) bol generovaný kotransfekciou pomocou reagens BaculoGold Transfection reagent (PharMingen). Rekombinantný BV bol plak čistený a overený analýzou západných odtlačkov (Western analysis). Za účelom produkcie proteínu boli bunky SF-9 pestované v médiu SF-90083 íl pri 2 x 106/ml a infikované v množstve tvoriacom 0,5 plaku na buňku (MOI). Bunky boli zbierané po 48 hodinách od infekcie.

Čistenie KDR

Bunky SF-9 exprimujúce (His)ôKDR(aa789-l 354) boli lyzované pridaním 50 ml lyzovacieho pufru Triton X-100 (20 mM Tris, pH 8.0, 137 mM NaCl, 10% glycerol, 1% Triton X-100, lmM PMSF, 10 pg/ml aprotinínu, 1 ug/ml leupeptínu) do bunkových peliet z 1 1 bunkovej kultúry. Lyzát bol centrifugovaný pri 19,000 ot. za min. na prístroji Sorval SS-34 rotor po dobu 30 minút pri teplote 4 °C. Bunkový lyzát bol aplikovaný do 5 ml NiCl₂ chelatujúceho sepharozového stĺpca, ekvilibrovaného 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.3 M NaCl. KDR bola eluovaná rovnakým pufrom obsahujúcim 0,25 M imidazol. Jednotlivé frakcie boli analyzované metódami SDS-PAGE a ELISA (viď nižšie), pomocou ktorých sa dala zmerať aktivita kinázy. Purifikovaná KDR bola naliata do 25mM HEPES, pH 7.5, 25mM NaCl, 5 mM pufru DTT a skladovaná pri teplote -80°C.

Tvorba a purifikácia ľudskej Tie-2 kinázy

Kódujúca sekvencia pre ľudskú intracelulárnu doménu Tie-2 (aa7751124) bola generovaná pomocou PCR a cDNA kusov izolovaných z ľudskej placenty ako templátov. Sekvencia poly-HiSó bola zavedená do V-konca a tento konštrukt bol klonovaný do transfekčného vektora pVL 1939 v mieste Xba 1 a Not 1. Rekombinantná BV bol generovaná kotransfekciou pomocou reagens BaculoGold Transfection reagent (PharMingen). Rekombinantná BV bol plak purifikovaný a verifikovaný analýzou západných odtlačkov (Western analysis). Za účelom produkcie proteínu boli bunky SF-9 pestované v médiu SF-900-II pri 2 x 106/ml a infikované v množstve jednotiek tvoriacich 0,5 plaku na bunku (MOI). Purifikácie používané His-značenej kinázy pri screeningu bola podobná ako u KDR.

Tvorba a purifikácia ľudskej Flt-1 tyrozínkinázy

Bol používaný bakulovírusový expresívny vektor pVL1393 (Phar Mingen, Los Angeles, CA). Nukleotidová sekvencia kódujúca poly-His6 bola umiestnená do nukleotidovej oblasti 5' kódujúcej celú intracelulárnu doménu ki84 názy ľudskej Flt-1 (aminokyseliny 786-1338). Nukleotidová sekvencia kódujúca oblasť kinázy bola generovaná pomocou PCR a cDNA knižníc izolovaných z buniek HUVEC. Histidínové zvyšky umožnili afinitnú purifikáciu proteínu podobným spôsobom ako u KDR a ZAP70. Insektované bunky SF-9 boli infikované s 0,5 multiplicitou a zbierané po 48 hodinách od infekcie.

Pôvod EGFR tyrozínkinázy

EGFR bola zakúpená od firmy Sigma (Cat # E-3641; 500 jednotiek/50 μΐ) a ligand EGF bol získaný u firmy Oncogen Research Products/Calbiochem (Cat # PF011-100).

Expresia ZAP70

Bol používaný bakulovírusový expresívny vektor pVL1393 (Phar Mingen, Los Angeles, CA). Nukleotidová sekvencia kódujúca aminokyseliny M(H)6 LVPR9S bola umiestnená do nukleotidovej oblasti 5' kódujúcej celú ZAP70 (aminokyseliny 1-619). Nukleotidová sekvencia kódujúca oblasť ZAP70 bola generovaná pomocou PCR a cDNA knižníc izolovaných z T-buniek imortalizovaných Jurkatom. Histidínové zvyšky umožnili afinitnú purifikáciu proteínu (viď infra). LVPR9S mostík tvorený rozpoznávacou sekvenciou pre proteolytické štiepenie trombínom umožňujúci odstránenie afinitného tágu z enzýmu. Insektované bunky SF-9 boli infikované s 0,5 multiplicitou infekcie a zbierané po 48 hodinách od infekcie.

Extrakcia a purifikácia ZAP70

Bunky SF-9 boli lyzované v pufry pozostávajúcom z 20 mM Tris, pH 8,0, 137 mM NaCl, 10% glycerol, 1% Triton X-100, lmM PMSF, 10 pg/ml aprotinínu, 1 ug/ml leupeptínu a 1 mM ortovanadátu sodného). Rozpustný lyzát bol aplikovaný na chelatujúci stĺpec sepharózy HiTrap (Pharmacia) ekvilibrovanom v 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,3 M NaCl. Fúzny proteín bol eluovaný s 250 mM imidazolu. Enzým bol skladovaný v pufry obsahujúcom 25mM HEPES, pH 7,5, 25mM NaCl, 5 mM pufru DTT.

Pôvod proteínkinázy

Lck, Fyn, Src, Blk, Csk a Lyn a ich skrátené formy môžu byť získané z komerčných zdrojov (napr. od Upstate Biotechnology Inc. (Saranac Lake, N.Y.) a Santa Cruz Biotechnology Inc. (Santa Cruz, Ca.)) alebo purifikované štandardnými spôsobmi zo známych prírodných alebo rekombinantných zdrojov.

Enzýmová imunoanalýza na pevnej fázy (ELISA) vykonaná s PTK

Na detekciu a meranie prítomnosti aktivity tyrozínkinázy bola používaná enzýmová imunoanalýza na pevnej fázy (ELISA). ELISA bola vykonávaná štandardným spôsobom, ktorý je opísaný napr. Voliér, et al., 1980, „Enzymelinked Immunosorbent Assay,“ In: Manual of Clinical Immunology, 2d ed., edited by Rose and Friedman, 359-371 Am.Soc. of Microbiology, Washington, D.C.

Uvedený spôsob bol upravený na stanovenie aktivity s ohľadom na špecifickú PTK. Napríklad výhodné spôsoby uskutočnenia ELISA experimentov sú uvedené nižšie. Úprava týchto protokolov na stanovenie aktivít zlúčenín u ostatných členov rodiny receptorovej PTK, ako aj nereceptorových tyrozínkináz, patrí medzi štandardnú rutinu. Na účely stanovenia selektivity inhibítora bol používaný univerzálny substrát PTK (napr. nepravidelný kopolymér na bázy poly(Glu4Tyr) s molekulovou hmotnosťou 20000-50000) spoločne s ATP (typicky 5 μΜ) v približne dvojnásobných koncentráciách oproti Km z testov.

Na stanovenie inhibičného účinku zlúčenín podľa predloženého vynálezu na aktivitu KDR, Flt-1, Flt-4, Tie-1, Tie-2, EGFR, FGFR, PDGFR, IGF-l-R, cMet, Lck, hck, Blk, Csk, Src, Lyn, fgr, Fyn a ZAP70 tyrozínkináz bol používaný nasledujúci postup:

Pufry a roztoky:

PGTPoly (Glu, Tyr)4:l

Skladovanie prášku pri teplote -20 °C. Rozpustenie prášku vo fyziologickom roztoku tlmenom fosfátom (PBS) na objem 50 mg/ml. Uchovanie 1 ml alikvotného podielu pri teplote -20 °C. Pokiaľ sa pripravujú pláty, zredenie na 250 pg/ml v Gibco PBS.

Reakčný pufer: 100 mM Hepes, 20mM MgCb, 4 mM MnCb, 5mM DTT, 0,02% BSA, 200 pM NaVO₄, pH 7,10.

ATP: Uchovanie alikvotných podielov 100 mM pri teplote -20 °C. Zriedenie na objem 20 pM vo vode.

Premývací pufer: PBS s 0,1% Tween 20

Protilátkový riediaci pufer: 0,1% hovädzie sérum albumín (BSA) v PBS

Substrát TMB: zmiešanie substrátu TMB a peroxidového roztoku 9:1 tesne pred použitím alebo použitie substrátu K-Blue od Neogen

Blokovací roztok: IM fosforečná kyselina

Postup

1. Príprava platní

Zriedenie zásobného roztoku PGT (50 mg/ml, zmrazeného) v PBS na 250 pg/ml. Pridanie (125 pl/jamka) ELISA platní s vysokou afinitou, ktoré majú modifikované zrnenie (Corning # 25805-96). Pridanie 125 pl PBS do slepých jamiek. Potiahnutie tesniacou páskou a inkubácia cez noc pri teplote 37 °C. lx premytie s 250 pl premývacieho pufru a sušenie po dobu 2 hodín pri teplote 37 °C v suchom inkubátore.

Uchovanie potiahnuných platničiek v uzavretej nádobe pri teplote 4 °C

2. Reakcia s tyrozínkinázou:

-príprava inhibičných roztokov v štvornásobenej koncentrácii v 20% DMSO vo vode.

-príprava reakčného pufru

-príprava enzýmového roztoku tak, aby požadovanej jednotky bolo v 50 μΐ, napr. pre KDR lng/μΐ z celkových 50 ng/jamka v reakciách. Uchovávanie na ľade.

-prípravu 4 x ATP roztoku s koncentráciou 20 μΜ zo 100 mM zásobného roztoku vo vode. Uchovávanie na ľade.

-pridanie 50 μΐ enzýmového roztoku na jamku (typicky 5-50 ng enzýmu na jamku v závislosti na špecifickej aktivite kinázy)

-pridanie 25 μΐ 4x inhibítora

-pridanie 25 μΐ 4 x ATP na stanovenie inhibície

-inkubácia pri izbovej teplote po dobu 10 minút

-zastavenie reakcie pridaním 50 μΐ 0,05N HCI na jamku

-premytie doštičiek **Finálna koncentrácia pre reakciu: 5 μΜ ATP, 5% DMSO

3. Naviazanie protilátok

-zriedenie 1 mg/ml alikvotného podielu PY20-HRP (Pierce) protilátky (fosfotyrozínová protilátka) na 50 ng/ml v 0,1 % BSA v PBS 2 krokovým zriedením (100 x, pak 200x)

-pridanie 100 μΐ Ab na jamku. Inkubácia pri izbovej teplote po dobu 1 hodiny. Inkubácia pri teplote 4 °C po dobu 1 hodiny.

-4x premytie platní

4. Farebné reakcie

-príprava substrátu TMB a pridanie 100 μΐ na jamku

-monitoring OD pri 650 nm, dokiaľ sa nedosiahne hodnota 0,6

-zastavenie reakcie pomocou IM fosforečnej kyseliny. Trepanie na detektore platničiek.

-okamžité prečítanie OD pri 450 nm

Optimálne inkubačné časy a podmienky enzýmovej reakcie sa môžu nepatrne líšiť a sú empiricky stanovené pre každú šaržu.

Pre Lck bol za podobných podmienok používaný reakčný pufer zloženia 100 mM MOPSO, pH 6,5, 4 mM MnCl₂, 20 mM MgCI₂, 5 mM DTT, 0,2% BSA, 200 mM NaVO₄.

Zlúčeniny všeobecných vzorcov 1-109 môžu byť terapeuticky účinné pri ošetrení ochorenení zahrnujúcich ako identifikované, vrátane tých, ktoré tu nie sú uvedené, tak aj doteraz neidentifikované proteínové tyrozínkinázy, ktoré sú inhibovaní zlúčeninami všeobecných vzorcov 1-109.

Pôvod Cdc2

Ľudský rekombinantný enzým a testovací pufer môžu byť získané z komerčných zdrojov (New England Biolabs, Beverly, MA. USA) alebo štandardnými spôsobmi čistené zo známych prírodných alebo rekombinantných zdrojov.

Testy s Cdc2

V postupe boli používané mierne modifikované činidlá získané z komerčných zdrojov. Reakcia bola vykonávaná v pufry so zložením 50mM Tris pH 7.5, lOOmM NaCI, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 0,01% Brij, 5% DMSO a 10 mM MgCl₂ (komerčný pufer) suplementovaný čerstvým 300 μΜ ATP (31 pCi/ml) a 30 pg/ml IIIss typu histón ako finálnymi koncentráciami. Reakčný objem činil 80 μΐ s obsiahnutými jednotkami enzýmu. Reakcia prebiehala 20 minút pri teplote 25 °C za prítomnosti alebo absencie inhibítora a bola ukončená pridaním 120 μΐ 10% octovej kyseliny. Substrát bol separovaný od neinkorporovanej značky nanesením zmesi na fosfocelulózový papier, 5 minútovým premytím (3 x 75 mM fosforečné kyseliny). Impulzy boli merané za prítomnosti kvapalného scintilátora na prístroji meracom beta-žiarenie. Meranie bolo vykonávané v prítomnosti tekutého scintilátora na prístroji detekujúcom žiarenie β.

Pôvod PKC kinázy

Katalytická podjednotka PKC môže byť získaná z komerčných zdrojov (Calbiochem).

Testy s PK.C kinázou

Použitý postup radiochemického stanovenia kináz bol na bázy publikovaného spôsobu viď Yasuda, I., Kirshimoto, A., Tanaka, S., Tominaga, M., Sakurai, A., Nishizuka, Y. Bichemical and Biophysical Research Communication 3:166, 1220-1227 (1990). Všetky reakcie sa vykonávali v kinázovom pufry pozostávajúcom z 50 mM Tris-HCl pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 1 mM EGTA, 100 μΜ ATP, 8 μΜ peptidu, 5% DMSO and ³³P ATP (8 Ci/mM). Zlúčenina a enzým boli zmiešané v reakčnej banke a reakcia bola iniciovaná pridaním ATP a substrátovej zmesi. Po terminácii reakcie pridaním 10 μΐ pufru zastavujúceho reakciu (5 mM ATP v 75 mM fosforečnej kyseliny), určitý podiel zmesi bol nanesený na fosfocelulózový pufer. Nanesené vzorky boli premývané (3x) v 75 mM fosforečnej kyseliny pri izbovej teplote po dobu 5 až 15 minút. Inkorporácia rádioaktívnej značky bola stanovená meraním kvapalnej scintilácie.

Pôvod enzýmu Erk2

Rekombinantný myší enzým a testovací pufer môžu byť zakúpené z komerčných zdrojov (New England Biolabs, Beverly MA. USA) alebo štandardnými spôsobmi purifikované z prírodných alebo rekombinantných zdrojov.

Testy s enzýmom Erk2

Reakcia bola vykonávaná v pufry pozostávajúcom z 50 mM Tris pH 7,5, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 0,01% Brij, 5% DMSO a 10 mM MgCl₂ (komerčný pufer) suplementovaným čerstvým 100 μΜ ATP (31 pCi/ml) a 30 μΜ myelínu za podmienok, ktoré sú odporúčané dodávateľom. Reakčné objemy a spôsob testovania inkorporovanej rádioaktívnej značky sú opísané u testov s PKC (vide supra).

In vitro modely aktivácie T-buniek

Po aktivácii mitogénu alebo antigénu sú T-bunky indukované na sekréciu IL-2, čo je rastový faktor, ktorý podporuje ich následnú proliferačnú fázu. Preto je možné merať buď produkciu IL-2 alebo bunkovú proliferáciu primárnych T-buniek alebo príslušných línií T-buniek ako náhrad za aktiváciu T90 buniek. Obidva tieto testy a jednotlivé parametre sú dobre opísané v literatúre (v Current Protocols in Immunology, Vol 2, 7.10.1-7.11.2).

T-bunky môžu byť aktivované kokultiváciou s alogénnym stimulátorom buniek, proces, ktorý je označovaný ako nevratná zmesná reakcia lymfocytu. Respondér a stimulátor periférnych krvných monocytov je purifikovaný FicollHypaque gradientom (Pharmacia) podľa návodu dodávateľa. Stimulátorové bunky sú mitoticky inaktivované reakciou s mitomycínom C (Sigma) alebo žiarením gama. Respondérové a stimulátorové bunky sú kokultivované v pomere 2:1 za prítomnosti alebo absencie testovanej zlúčeniny. Typicky 10⁵ respondérov je zmiešaných s 5 x 10⁴ stimulátormi a nanesených (v objeme 200 μΐ) do mikrotitračnej doštičky s dnom do U (Costar Scientific). Bunky sú kultivované v RPMI 1640 suplementovanom buď fetálnym hovädzím sérom (Hyclone Laboratories) inaktivovaným záhrevom alebo ľudským AB sérom od mužských dárcov, 5 x 10'⁵ M 2-merkaptoetanol a 0,5% DMSO. Jeden deň pred odberom (typicky tri dni) bolo do kultúr zabudovaných 0,5 pCi ³H tymidínu (amersham). Kultúry boli odoberané (Betaplate harvester, Wallac) a uptake izotopu bol vyhodnotený pomocou kvapalnej scintilácie (Betaplate, Wallac).

Rovnaký kultivačný systém bol používaný na stanovenie aktivácie Tbuniek meraním produkcie IL-2. Osemnásť až dvadsaťštyri hodín po iniciácii kultivácie bol odstránený supernatant a koncentrácia IL-2 bola meraná metódou ELISA (R a D systémy) podľa návodu dodávateľa.

In vivo modely aktivácie T-buniek

In vivo účinnosť zlúčenín môže byť testovaná na zvieracích modeloch priamym meraním aktivácie T-buniek alebo T-buniek, u ktorých boli dokázané efektory. T-bunky môžu byť aktivované in vivo ligáciou konštantnej časti receptora T-buniek s monoklonálnou protilátkou anti-CD3 (ab). V tomto modely bolo myšiam BALB/c 2 hodiny pred vykrvácaním intraperitoneálne podaných 10 pg anti-CD3 Ab. Zvieratá, ktoré mali dostať testované liečivo, boli vopred ošetrené jednorázovou dávkou zlúčeniny, jednu hodinu pred podaním anti-CD3 Ab. Sérové hladiny protizápalových cytokínov interferón-γ (IFN-γ) a faktoru-a (TNF-a) nádorovej nekrózy, indikátorov aktivácie T-buniek, boli merané metó91 dou ELISA. Podobný model využíva in vivo aktiváciu T-buniek so špecifickým antigénom, napr. hemocyanín kuželnatky (KLH), a následnú sekundárnu in vitro expozíciu drenovaných buniek uzliny rovnakému antigénu. Ako je uvedené vyššie, na stanovenie stavu aktivácie kultivovaných buniek bolo používané meranie produkcie cytokínov. Na nultý deň boli myši C57BL/6 subkutánne imunizované 100 pg KLH emulzifikovaného v kompletnom Freundovom adjuvans (CFA). Zvieratá boli jeden deň pred imunizáciou a následne prvý, druhý a tretí deň po imunizácii vopred ošetrené zlúčeninou. Drénované uzliny boli štvrtý deň odoberané a ich bunky kultivované v množstve 6 x 10⁶ na ml v médiu na kultiváciu tkaniva (RPMI 1640 suplementované fetálnym hovädzím sérom inaktivovaným záhrevom (Hyclone Laboratories 5 x 10'⁵ M 2-merkaptoetanolu a 0,5% DMSO) po dobu 24 aj 48 hodín. V kultivačných supernatantoch potom bol stanovený rastový faktor Interleukín-2 (IL-2)autokrínnych T-buniek a/alebo hladiny IFN-γ metódou ELISA.

Zlúčeniny môžu byť tiež testované na zvieracích modeloch simulujúcich ľudské ochorenenie, napr. experimentálna autoimunitná encefalomyelitída (EAE) a kolagénom indukovaná artritída (CIA). EAE modely, ktoré mimikujú aspekty ľudskej roztrúsenej sklerózy boli opísané u myší aj potkanov (recenzované FASEB J. 5:2560-2566, 1991 myšší model: Lab. Invest. 4(3):278, 1981; model na báze hlodavce: J. Immunol. 146(4):1 163-8, 1991). Myši a potkaní boli imunizovaní emulziou myelínového bázického proteínu (MBP) alebo jeho neurogénnymi peptidovými derivátmi a CFA. Akútne ochorenia môžu byť indukované pridaním bakteriálnych toxínov, napr. bordetella pertussis. Relapsujúce/ustupujúce ochorenie je indukované adoptívnym prenosom T-buniek zo zvierat imunizovaných MBP/peptidom.

CIA môže byť indukovaná u myší DBA/1 imunizáciou kolagénom typu II (J. Immunol: 142(7):2237-2243). U myší až vyvolá známky artritídy už desať dní po expozícii antigénu, ktoré môžu byť evidentné aj devädesiat dní po imunizácii. U EAE aj CIA modelov môže byť zlúčenina podávaná buď profylaktický alebo v dobe prepuknutie ochorenia. Účinné liečivá by mali redukovať silu a/alebo rozsah ochorenia.

Určité zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, ktoré inhibujú jednu alebo viac angiogénnych receptorových PTK a/alebo proteínkinázy, napr. lck zúčastňujúce sa sprostredkovania zápalových odpovedí, môžu u týchto modelov redukovať silu alebo rozsah artritídy.

Zlúčeniny môžu byť tiež testované na myších modeloch aloimplantátu kože (recenzované v Ann. Rev. Immunol., 10:333-58, 1992; Transplantation: 57( 12): 1701 -17D6, 1994) alebo srdca (Am. J. Anat.:l 13:273,1963). Kompletné epidermálne štepy boli transplantované z myší C57BL/6 myšiam BALB/c. Štepy môžu byť počínajúc šiestym dňom kvôli rejekcii denne sledované. U myšieho modelu neonatálneho transplantátu srdca, sú neonatálne srdcia ektopicky transplantované z myší C57BL/6 do ušných boltcov dospelých myší CBA/J. Srdce začína pracovať štyri až sedem dní po transplantácii a rejekcia môže byť skúmaná vizuálne disekujúcim mikroskopom kvôli sledovaniu prerušenia činnosti srdca.

Testy s bunkovými receptorovými PTK

Na stanovenie hladiny aktivity a účinku rôznych zlúčenín podľa predloženého vynálezu na KDR/VEGFR2 bol používaný nasledujúci bunkový test. Podobné testy receptorových PTK využívajúci stimuláciu špecifického ligandu môžu byť za použitia štandardných techník navrhnuté podľa rovnakých línií u ďalších tyrozínkináz.

VEGF-indukovaná fosforylácia KDR u ľudských endoteliálnych buniek pupočníkovej žily (HUVEC) môže byť meraná blotingom západných odtlačkov.

1. Bunky HUVEC (od poolových donorov) boli zakúpené u Clonetics (San Diego, CA) a kultivované podľa návodu dodávateľa. Na tieto testy boli používané len pasáže (3-8). Bunky boli kultivované v 100 mm nádobách (Falcon for tissue culture; Becton Dickinson; Plymouth, England) kompletným EBM médiom (Cionetics).

2. Na testy inhibičnej aktivity zlúčenín boli bunky trypsínované a naočkované v množstve 0,5-1,0 x 10⁵ buniek na jamku do každej jamky klastrovaných platničiek (6 jamiek každá)(Costar; Cambridge, MA).

3. 3-4 dni po naočkovaní bol u 90-100% platničiek pozorovaný súvislý nárast. Médium bolo zo všetkých jamiek odstránené, bunky boli premývané 5-10 ml PBS a inkubované 18-24 hodín s 5 ml EBM bazálneho média bez žiadnych pridaných suplementov (tzn. Nedostatok séra).

4. K bunkám bolo pridané sériové riedenie inhibítorov v 1 ml média EBM (25 μΜ, 5 μΜ alebo ΙμΜ konečnej koncentrácie) a bunky boli inkubované po dobu 1 hodiny pri teplote 37°C. Potom bola pridaná do všetkých jamiek ľudská rekombinantná VEGFiôs (R & D Systems) v 2 ml média EBM v konečnej koncentrácii 50 nug/ml a v inkubácii sa pri teplote 37°C pokračovalo po dobu 10 minút. Na stanovenie pozadia fosforylácie a fosforylačnej indukcie VEGF boli používané kontrolné bunky ošetrené alebo neošetrené VEGF. Všetky jamky potom boli premývané 5-10 ml studeného PBS obsahujúceho lm M ortovanadátu sodného (Sigma). Bunky boli lyzované a zotrené v 200 μΐ pufru RIPA (50mM Tris-HCl) pH 7, 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0,25% deoxycholátu sodného, 1 mM EDTA) obsahujúceho inhibítory proteázy (PMSF 1 mM, aprotinín 1 pg/ml, pepstatín 1 pg/ml, leupeptín 1 pg/ml, vanáde 1 mM, fluorid lmM) (všetky chemikálie boli od Sigma Chemical Company, St Louis, MO). Lyzát bol kvôli eliminácii jadier centrifugovaný pri 14000 ot. za min. po dobu 30 minút.

Ekvivalentné množstvo proteínov potom bolo precipitované pridaním studeného (-20°C) etanolu (2 objemy) po dobu min. 1 hodiny a max. cez noc. Pelety boli rekonštituované vo vzorkovom pufry Laemli obsahujúcom 5% merkaptoetanol (BioRad Hercules, CA) a zahrievané po dobu 5 minút. Proteíny boli znovu chromatografované gélovou elektroforézou na polyakrylamidoskupinyvom gély ((6%, l,5mm Novex, San Deigo, CA) a prenesené do nitrocelulózovej membrány pomocou systému Novex. Po blokácii hovädzím sérumalbumínom (3%) boli proteíny pri teplote 4°C značené polyklonálnou protilátkou antiKDR (C20, Santa Cruz Biotechnology; Santa Cruz, CA) alebo monoklonálnou protilátkou antifosfotyrozín (4G10, Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY). Po premytí a inkubácii s HRP-konjugovaným F(ab)2 boli jednotlivé pásy vizualizované emisnou chemiluminiscenciou (ECL) (Amersham Life Sciences, Arlington Height, IL).

In vivo model uterínneho edému

Pri tomto teste bola meraná kapacita zlúčenín inhibovať akútny prírastok uterínnej váhy u myší, ktorý sa objavil v prvých niekoľkých hodinách po stimulácii estrogénom. Je známe, že tento rýchly prírastok uterínnej váhy je spôsobený edémom v dôsledku zvýšenej permeability uterínnej vaskularity. Cullinan-Bove a Koss (Endocrinology (1993), 133: 829-837) ukázali blízky dočasný vzťah medzi uterínnym edémom stimulovaným estrogénom a zvýšenou expresiou VEGF mRNA v maternici. Tieto výsledky boli potvrdené použitím neutralizačných monoklonálnych protilátok voči VEGF, ktoré výrazne redukujú akútny prírastok uterínnej váhy po stimulácii estrogénom (WO 97/42187). Preto môže tento systém slúžiť ako model pre in vivo inhibíciu VEGF signalizačnej a asociovanej hyperpermeability a edému.

Látky: Všetky hormóny boli zakúpené u firmy Sigma (St. Louis, MO) alebo Cal Biochem (La Jolla, CA) ako lyofilizované prášky a pripravené podľa návodu dodávateľa.

Nosičové komponenty (DMSO, Cremaphor EL) boli zakúpené u firmy Sigma (St. Louis, MO).

Myši (Balb/c, 8-12 týždňov staré) boli zakúpené u firmy Taconic (Germantown, NY) a prechovávané s vylúčením patogénov v zariadení k tomu určnému a podľa „institutional Animal Čare and Use Committee Guidelines“

Spôsob:

l.deň: myšiam Balb/c bola intraperitoneálne (i.p.) podaná injekcia 12,5 jednotiek gonadotropínu zo séra oplodnených kobýl (PMSG).

3. deň: myšiam bolo podaných 15 jednotiek ľudského chorogonadotropínu (hCG)i.p.

4. deň: myši boli náhodne rozdelené do skupín o 5-10 kusoch. Testovaná zlúčenina bola podávaná i.p., i.v. alebo p.o. spôsobom, ktorý závisel na rozpustnosti nosiča v dávkach v rozmedzí 1-100 mg/kg. Kontrolná skupina dostala len nosič a dve skupiny neboli ošetrované.

Po 30 minútach experimentu bola kontrolnej skupine a jednej z neošetrovaných skupín podaná i.p. injekcia 17-estradiólu (500 pg/kg). Po 2-3 hodinách boli zvieratá usmrtené inhaláciou CO2. Po incízii vedenej v strednej čiare bola izolovaná každá maternica a odstránená rezom vedeným pod krčkom (cervix) a v mieste spojenia maternice a vajcovodov. Hrubé a spojivové tkanivo bola 0patrne odstránené tak, aby sa neporušilo pred vážením (vlhká váha) neporušila intergrita maternice. Z maternice bola tlakom medzi dvoma filtračnými papiermi s jednolitrovou sklenenou fľašou naplnenou vodou odstránená tekutina. Maternice boli po odstránení tekutiny zvážené (váhy po odstránení tekutiny). Rozdiel vo váhe pred a po odstránení tekutiny bol stanovený ako množstvo tekutiny v maternici. Stredný obsah vody ošetrovaných skupín bol porovnávaný s neošetrovanými alebo kontrolnými skupinami. Štatistické parametre boli stanovené Študentským testom. Na sledovanie odpovede na estradiol bola používaná nestimulovaná kontrolná skupina.

Určité zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, ktoré sú inhibítory angiogénnych receptorových tyrozínkináz môžu tiež vykazovať aktivitu na modely neovaskularizácie Matrigelového implantátu. Model neovaskularizácie Matrigelu zahrnuje tvorbu nových krvných ciev bez „mramorovej“ extracelulárnej matrix subkutánne implantovanej, ktorá je indukovaná prítomnosťou proangiogénneho faktora produkovaného nádorovými bunkami (viď: Passaniti, A., et al, Lab. Investig. (1992), 67 (4), 519528; Anat. Rec. (1997), 249 (1), 6373; Int. J. Cancer (1995), 63 (5), 694-701; Vasc. Biol. (1995), 15 (1 1), 18576). Model je výhodne použiteľný v priebehu 3-4 dní a výstupy zahrnujú makroskopické optické/obrazové vyhodnotenie neovaskularizácie, mikroskopické stanovenie hustoty mikrociev a stanovenie množstva hemoglobínu (Drabkinova metóda) a následne odstránenie implantátu proti kontrolám u zvierat neošetrovaných inhibítormi. V danom modele je možné alternatívne používať bFGF alebo HGF ako stimulans.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

7-Cyklopentyl-5-(4-fenoxyfenyl)-5//-pyrolo[3,2-í/]pyrimidín-4-amín

a) 2-cyklopentylacetonitril

Zmes hydridu sodného (2,17 g, 60% v oleji, 54,2 mmol) v dietylétery (100 ml) sa ochladí na teplotu 0 °C a nechá reagovať s dietyl(kyanometyl)fosfonátom (9,6 g, 54,2 mmol), pričom teplota zmesi sa udržuje pri menej než 0 °C. Pri teplote nižšej než 5 °C sa do zmesi pridá cyklopentanón (4,13 g, 49,3 mmol) v dietylétery (25 ml), potom sa reakčná zmes ohreje na izbovú teplotu a mieša ďalších 16 hodín. Do zmesi sa pridá voda (240 ml) a vzniknuté vrstvy sa separujú. Vodná vrstva sa extrahuje dietyléterom (50 ml). Spojené organické roztoky sa extrahujú vodou (50 ml), potom soľankou (50 ml) a sušia síranom horečnatým, filtrujú a filtrát sa koncentruje za zníženého tlaku. Výsledný zvyšok sa rozpustí v etanole (40 ml) a pridá sa 10% paládium na aktívnom uhlí (250 mg). Zmes sa hydrogenuje za atmosférického tlaku a izbovej teploty po dobu 16 hodín. Katalyzátor sa odstráni filtráciou cez vrstvu celitu a filtrát sa koncentruje na olej za zníženého tlaku. Požadovaná zlúčenina sa čistí frakčnou destiláciou, čím sa získa 4,08 g (75,6%) látky vo forme svetlo žltého oleja (teplota varu 63°C pri 20 torroch). 'H NMR (Chloroform-ď, 400 MHz) δ 2,35 (d, 2H), 2,18 (m, IH), 1,87 (m, 2H), 1,59-1,69 (m, 4H), 1,29 (m, 2H).

b) 1-cyklopentyl-2-oxoetylkyanid

Zmes 2-cyklopentylacetonitrilu (0,50 g, 4,59 mmol) v tetrahydrofuráne (10 ml) sa ochladí na teplotu -60 °C a nechá sa reagovať s 1,7 M tercbutylítiom v pentáne (3,25 ml, 5,50 mmol), pričom teplota reakcie sa udržuje pri -55 °C. Roztok sa mieša po dobu 10 minút, potom sa pridá po kvapkách etylformiát (0,41 g, 5,50 mmol). Zmes sa ohreje na izbovú teplotu a mieša ďalších 16 hodín, koncentruje za zníženého tlaku a výsledný zvyšok sa nanesie na stĺpec silikagélu a eluuje zmesou dichlórmetánu a etylacetátu (95: 5) ako mobilným systémom. Frakcie obsahujúce látku s Rf 0,1-0,3 (TLC, dichlórmetán/etylacetát (95: 5), manganistan draselný ako detekčné činidlo) sa spojia a koncentrujú, čím sa získa olej, ktorý sa bez čistenia používa ďalej. *H NMR (Chloroform-ď, 400 MHz) δ 9,57 (s, 1H), 3,54 (d, 1H), 2,45 (m, 1H), (m, 8H).

c) (4-fenoxyanilino)metylkyanid

Zmes 4-fenoxyanilínu (7,0 g, 37,8 mmol), brómacetonitrilu (4,5 g, 37,8 mmol) a trietylamínu (4,2 g, 41,6 mmol) v tetrahydrofuráne (50 ml) sa zahrieva pri teplote 85 °C po dobu 5,25 hodín, ochladí a pridá sa ďalší podiel brómacetonitrilu (6,5 g, 5,46 mmol). Zmes sa zahrieva pri teplote 85 °C po dobu 18 hodín, ochladí a koncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi dichlórmetánovú (50 ml) a vodnú vrstvu (50 ml). Vodná vrstva sa extrahuje dichlórmetánom (30 ml), spojené organické roztoky sa extrahujú 5 N vodným roztokom hydroxidu sodného (30 ml), suší síranom horečnatým, filtrujú a filtrát sa koncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa čistí zrýchlenou chromatografiou na stĺpci silikagélu zmesí dichlórmetánu a etylacetátu (98:2) ako mobilným systémom, čím sa získa 3,8 g (45%) požadovanej zlúčeniny vo forme tmavo hnedej pevnej látky: *H NMR (DMSO-ď_ŕ,400 MHz) δ 7,32 (t, 2H), 7,03 (t, 1H), 6,876,94 (m, 4H), 6,76 (d, 2H), 6,26 (bs, 2H), 4,25 (s, 2H); RP-HPLC (Hypersil HS-C18, 5 pm, 100A, 4,6 x 250 mm; 25%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) ír 18,4 minút; MS: MH⁺ 225,1.

d) 3-amino-4-cyklopentyl-l-(4-fenoxyfenyl)-l//-2-pyrolkarbonitril

Zmes (4-fenoxyanilino)metylkyanidu (0,68 g, 3,30 mmol) a 1-cyklopentyl-2-oxoetylkyanidu (0,54 g, 3,94 mmol) v 1,2-dimetoxyetáne (10 ml) sa nechá reagovať s 2 kvapkami kyseliny octovej, potom sa zahrieva pri teplote 85 °C po dobu 45 minút a zmes sa ochladí na izbovú teplotu a pridá sa 1,5diazabicyklo[4,3,0]non-5-én (DBN)(1,13 g, 9,09 mmol). Zmes sa zahrieva pri teplote 65 °C po dobu 16 hodín a pri 85 °C po dobu 6 hodín. Pridá sa čerstvý DBN (0,25 ml) a zmes sa zahrieva pri teplote 85 °C po ďalších 18 hodín. Rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku a zvyšok sa nanesie na vrstvu silikagélu a premýva zmesou heptánu etylacetátu (7:3) ako mobilným systémom, čím sa získa 185 mg (17,8%) požadovanej zlúčeniny v sklenenej forme.: *H NMR (DMSO-í/5,400 MHz) δ 7,42 (m, 4H), 7,17 (t, 1H), 7,04-7,11 (m, 4H), 6,99 (s, 1H), 5,10 (bs, 2H), 2,82 (m, 1H), 1,97 (m, 2H), 1,69 (m, 2H), 1,58 (m, 2H);

RP-HPLC (Hypersil HS-C18, 5 μιη, 100A, 4,6 x 250 mm; 25%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r 26,2 minút; MS: MH⁺

343,9.

e) 7-cyklopentyl-5-(4-fenoxyfenyl)-5//-pyrolo[3,2-í/]pyrimidin-4-amín

Zmes 3-amino-4-cyklopentyl-l -(4-fenoxyfenyl)-l//-2-pyrolkarbonitril (185 mg, 0,539 mmol) v absolútnom etanole (10 ml) sa nechá reagovať s acetátom formamidínu (450 mg, 4,33 mmol), potom zahriava pri teplote 85 °C po dobu 2 hodín. Rozpúšťadlo sa odparí za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí preparatívnou HPLC na reverznej fázy, čím sa po lyofilizácii získa 145 mg (73%) požadovanej zlúčeniny vo forme bielej pevnej láty.: 'H NMR (DMSO-í/6,400 MHz) δ 8,19 (s, 1H), 7,44 (m, 5H), 7,19 (t, 1H), 7,13 (m, 4H), 5,79 (bs, 2H),

3,23 (m, 1H), 2,05 (m, 2H), 1,77 (m, 4H), 1,64 (m, 2H); RP-HPLC (Hypersil HS-C18, 5 μπι, 100A, 4,6 x 250 mm; 5%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 minút, 1 ml/min) t_r 23,3 minút; MS: MH⁺ 371,5.

Príklad 2

-cyklopentyl-3- (4-fenoxyfenyl)-l//-pyrolo-[2,3-í/]pyridazín-4-amín

a) Etyl-3-kyano-l-cyklopentyl-l//-2-pyrolokarboxylát

Požadovaná zlúčenina sa pripraví z cyklopentylamínu a dietyl(2£,4£’,6£)-3,6-dikyano-2,7-dihydroxy-2,4,6-oktatriendioátu v 13% výťažku spôsobom opísaným Huisgenom¹: ’H NMR (DMSO-č/tf,400 MHz) δ 7,47 (d, 1H), 6,72 (d, 1H), 5,37 (m, 1H), 4,31 (q, 2H), 2,11 (m, 2H), 1,77 (m, 4H), 1,66 (m, 2H), 1,32 (t, 3H); RP-HPLC (Hypersil HS-C18, 5 μιη, 100A, 4,6 x 250 mm; 5%-l 00% acetonitril 0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r 22,2 min.

b) 3-kyano-l-cyklopentyl-l//-2-pyrolokarboxylová kyselina

Zmes etyl-3-kyano-1-cyklopentyl-1 Η-2-pyrolokarboxylát (1,15 g, 5,16 mmol) v etanole (25 ml) a vode (5 ml) sa nechá reagovať s hydroxidom drasel99 ným (0,58 g, 10,32 mmol). Zmes sa zahrieva pri teplote 75 °C po dobu 30 minút, ochladí a rozpúšťadla sa odparia za zníženého tlaku. Pridá sa voda (20 ml) a roztok sa ochladí na teplotu 0°C, okyslí kone. kyselinou chlorovodíkovou (1,3 g, 36 hmotn.%, 11,35 mmol). Vzniknutá kašovitá zmes sa mieša po dobu 10 minút, pevné látky sa spoja filtráciou, čím sa získa požadovaná zlúčenina (0,75 g, 75%) vo forme oranžovej pevnej látky.: NMR (DMSO-í/<j,400 MHz) δ 13,49 (bs, 1H), 7,41 (d, 1H), 6,67 (d, 1H), 5,47 (m, 1H), 22,09 (m, 2H), 1,77 (m, 4H), 11,64 (m, 2H); RP-HPLC (Hypersil HS-C18, 5 μιη, 100A, 4,6 x 250 mm; 5%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r12,52 minút.

c) l-cyklopentyI-2-formyl-l//-3-pyrolkarbonitril

Zmes 3-kyano-l-cyklopentyl-lH-2-pyrolokarboxylovej kyseliny (0,75 g, 3,68 mmol) v dichlórmetáne (5 ml) sa ochladí na teplotu 0°C a nechá reagovať s oxalylchloridom (0,52 g, 4,04 mmol), pridá sa jedna kvapka N,Ndimetylformamidu a zmes sa ohreje na izbovú teplotu a mieša po dobu 1,5 hodiny. Rozpúšťadla sa odstránia za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v diglymu (10 ml). Vzniknutý roztok sa ochladí na teplotu -60 °C, potom sa v priebehu približne 1,5 hodiny pridáva po kvapkách tri-tercbutoxyaluminohydrid lítny (8 ml, 0,5 M roztok v diglymu, 4,0 mmol), pričom teplota roztoku sa udržuje pod -60 °C. Zmes sa nechá ohriať na -10°C, ochladí na teplotu -60°C a pridá sa ďalší podiel 0,5 M tri-íerc-butoxyaluminohydridu lítneho (1,5 ml, 0,75 mmol). Zmes sa ohreje na izbovú teplotu, nechá reagovať s kone. kyselinou chlorovodíkovou (1 ml) a čistí preparatívnou HPLC na reverznej fázy, čím sa získa požadovaná zlúčenina (200 mg, 30%): *H NMR (DMSOd₆, 400 MHz) δ 9,82 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 6,84 (d, 1H), 5,32 (m, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,81 (m, 4H), 1,66 (m, 2H); 5%-l00% acetonitril-0,05 M octanu amónneho po dobu 25 minút, 1 ml/min) t_r 19,46 minút; GC/MS: MH⁺ 189,2.

d) 1 -cyklopentyl- l//-pyrolo[2,3-č/]pyridazín-4-amín

Zmes 1-cyklopentyl-2-formyl-l//-3-pyrolkarbonitrilu (0,525 g, 2,79 mmol) a hydrazín-dihydrochloridu (0,35 g, 3,35 mmol) v etanole (30 ml) sa zahrieva pri refluxe po dobu 2,5 hodiny, ochladí na izbovú teplotu a čistí prepa100 ratívnou HPLC na reverznej fázy, čím sa získa požadovaná zlúčenina vo forme hydroskopickej sklenenej látky kontaminovanej octanom amónnym (594 mg) (60 hmotn.% podľa *H NMR, výťažok = 337 mg; *H NMR (DMSO-d_Ä, 400 MHz) δ 8,83 (s, IH), 7,55 (d, IH), 6,71 (d, IH), 6,10 (bs, 2H), 4,94 (m, IH),

2,15 (m, 2H), 1,89 (m, 4H), 1,70 (m, 2H); 5%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r 19,46 minút;

LC/MS: MH⁺ 203,0.

e) 3-bróm-1 -cyklopenty 1-1 ŕŕ-pyrolo [2,3-ď]pyridazín-4-amí n

Zmes l-cyklopentyl-l//-pyrolo[2,3-č/]pyridazín-4-amín (0,595 mg, približne 60% čistý, 1,76 mmol) v dichlórmetáne (100 ml) sa nechá reagovať s roztokom dichlórmetánu (5 ml) obsahujúcim bróm (0,5 g, 2,95 mmol) v priebehu 1,25 hodiny. Zmes sa mieša ďalšiu hodinu, potom sa pridá ďalší dichlórmetán (3 ml) obsahujúci bróm (0,3 g). Zmes sa mieša po dobu 2,5 hodín, nechá reagovať s 5 ml 5N vodného hydroxidu sodného a 25 ml vody. Vrstvy sa separujú a organická vrstva sa koncentruje za zníženého tlaku, čím sa získa zvyšok, ktorý sa čistí preparatívnou HPLC na reverznej fázy, čím sa získa 3bróm-l-cyklopentyl-l//-pyrolo[2,3-ŕ/]pyridazín-4-amín (168 mg, 35%); *H NMR (DMSO-4 400 MHz) δ 8,94 (s, IH), 7,79 (s, IH), 6,11 (bs, 2H), 4,94 (m, IH), 2,12 (m, 2H), 1,83 (m, 4H), 1,67 (m, 2H); 5%-100% acetonitril-0,05 M octan amónny po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r 11,25 minút;

LC/MS: MH⁺ 282,8.

f) 1 -cyklopentyl-3-(4-fenoxyfenyl)-17/-pyrolo-(4-fenoxyfenyl)-l//-pyrolo-[2,3í/]pyridazín-4-amín

Zmes 3-brom-l-cyklopentyl-l/7-pyrrolo[2,3-í/]pyridazin-4-amin (0,057 g, 0,178 mmol), 4-fenoxyfenylboritá kyselina (0,057g, 0,266 mmol), uhličitan sodný (0,062 g, 0,588 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin)palladium (12 mg, 0,011 mmol) v dimethyletheru ethylenglykolu (3 ml) a vode (1,5 ml) sa zahrívá pri teplote 85°C pod atmosférou dusíku po dobu 2,5 hodiny. Zmes sa ochladí na izbovú teplotu a rozpouštedlo odparí za zníženého tlaku. Zvyšok sa čistí preparativní HPLC s reverzní fázi, čímž sa získá požadovaná zlúčenina kontamino101 vaná 4-fenoxyfenylboritou kyselinou. Zvyšok sa rozdelí mezi dichlormethan a 5 N vodný hydroxid sodný. Organická vrstva sa suší síranem horečnatým, filtruje a filtrát sa odparí, čímž sa získá požadovaná zlúčenina (14 mg, 21%); *H NMR (DMSO-ŕ/tf,400 MHz) δ 8,98 (s, 1H), 7,68 (s, 1H) 7,50 (d, 2H), 7,40 (t, 2H), 7,17 (t, 1H), 7,09 (m, 4H), 5,76 (bs, 2H), 5,01 (m, 1H), 2,19 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 1,71 (m, 2H); 5%-100% acetonitril-0,05 M octan amonný po dobu 25 min, 1 ml/min) t_r 20,60 minút;

LC/MS: MH⁺ 371,2.

(1) Huisgen, R.; Laschtuvka, E. Eine Neue Syntheses von Derivaten des Pyrroles. Chem. Ber. 1960, 93, 65.

Ďalšie výhodné zlúčeniny predloženého vynálezu majú všeobecný vzorec (I)

NH , v ktorom substituent R = trans-2-fenyl-cyklopropánkarboxamid fenyl-4-(trifluórmetyl)benzamid fenyl-1 -metyl-2-indolkarboxamid fenyl-2,2-dimetyl-3-fenylpropánamid fenoxyfenyl substituent R² = cyklopentyl c/s-cyklohexylpiperazín

Zranď-cyklohexylpiperazín piperazinyl-piperizinyl

102

Presnejšie povedané sú až nasledujúce zlúčeniny:

fVl-[4-(7-amino-3-cyklopentyl-l//-pyrazolo[3,4-c]pyridin-l -yl)fenyl]-/raws-2fenylcyklopropán-l-karboxamid;

Cz'j-7Vl-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-17/-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yl}fenyl)-frfl«j-2-fenylcyklopropán-l-karboxamid;

7>tfns-M-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l/7-pyrazolo[3,4c]pyridin-l -yl} fenyl)-trans-2-fenylcyklopropán-l-karboxamid;

M-(4-{7-amino-[3-(l-metylpiperidin-4-yl)piperidin-4-yl]-l/7-pyrazolo[3,4c]pyridin-l -yl} fenyl)-2-feny 1-1 -cyklopropánkarboxamid;

tVI -[4-(7-amino-3-cyklopentyl'l/7-pyrazolo[3,4-c]pyridin-l -yl)fenyl]-4(trifluórmetyl)benzamid;

Czs-/'/l-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-lŕ/-pyrazoIo[3,4cjpyridin-1 -yl} fenyl)-4-(trifluórmetyl)benzamid;

Trans-N\ -(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yl}fenyl)-4-(trifluórmetyl)benzamid;

jVI -(4-{7-amino-[3-( 1 -metylpiperidin-4-yl)piperidin-4-yl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l -yl }fenyl)-4-(trifluórmetyl)benzamid;

?/2-[4-(7-amino-3-cyklopentyl-l //-pyrazolo[3,4-c]pyridin-l -yl)fenyl]-l -metyl 17/-2-indolkarboxamid;

C/s-W2-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yl}fenyl)-l-metyl-17/-2-indolkarboxamid;

Trans-/V2-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l?/-pyrazolo[3,4· c]pyridin-fenyl)-l -metyl-l//-2-indolkarboxamid ;

N2-(4-{7-amino-3-[( 1 -metylpiperidin-4-yl)piperidin-4-yI]-17/-pyrazolo[3,4cjpyridin-1 -yl} fenyl)-1 -metyl-17/-2-indolkarboxamid;

103

Vl-[4-(7-amino-3-cyklopentyl-l//-pyrazolo[3,4-c]pyridin- l-yl)fenyl]-2,2dimetyl-3-fenylpropánamid;

Cz's-M-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yl}fenyl)-2,2-dimetyl-3-fenylpropánamid;

7raH5-Vl-(4-{7-amino-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yI}fenyl)-2,2-dimetyl-3-fenylpropánamid;

jVl-(4-{7-amino-3-[(l-metylpiperidin-4-yl)piperidin-4-yl]-l//-pyrazolo[3,4c]pyridin-l-yl}fenyl)-2,2-dimetyl-3-fenylpropánamid;

3-cyklopentyl-1-(4-fenoxyfenyl)-1/ŕ-pyrazolo [3,4-c]pyridín-7-amín;

Czs-3-[4-(4-metylpiperazino)cyklohexyl]-l -(4-fenoxy fenyl)-l//-pyrazolo [3,4c]pyridín-7-amín;

Trans-3 - [4-(4-mety lpiperazino)cyklohexyl] -1 -(4-fenoxy fény 1)-1//pyrazolo[3,4-c]pyridín-7-amín; a

3- [(1-metylpiperidin-4-y l)piperidin-4-y 1]-1-(4-fenoxy fenyl)-1//-pyr azolo [3,4c]pyridín-7-amín.

Ďalšie výhodné zlúčeniny zahrnujú:

7-cyklopentyl-5-(4-fenoxyfenyl)-5//-pyrolo[3,2-í/]ypyrimidin-4-amin;

l-cyklopentyl-3-(4-fenoxyfenyl)-l//-pyrolo[2,3-ŕ/]pyridazín-4-amín;

4- amino-9-cyklopentyl-6-(4-fenoxyfenyl)-6,7,8,9-tetrahydro-5//-pyrimido[4,5ά][1,4]diazepin-8-ón; a

4-amino-9-cyklopentyl-6-(4-fenoxyfenyl)-8,9-dihydro-5//-pyrimido[4,5b][l,4]diazepin-8-ón.

Vyššie uvedené zlúčeniny môžu byť z príslušných východiskových látok syntetizované v podstate podľa príkladov 1 alebo 2.

ΤΡ 7-002-

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina všeobecného vzorca I, jej racemicko-diastereoizomérne zmesi, optické izoméry, farmaceutický prijateľné soli, proliečiva alebo biologicky aktívne metabolity vybrané zo skupiny pozostávajúcej z

105

106

107

108

109

110 substituent Ri má všeobecný vzorec

111 v ktorom Ζ^1θθ má všeobecný vzorec alebo je skupina prípadne substituovaná substituentom Rb vybraným zo skupiny pozostávajúcej z cykloalkylovej skupiny, naftylu, tetrahydronaftylu, benzotienylu, furanylu, tienylu, benzoxazolylu, benzotiazolylu, ^w ,

N , tiazolylu, benzofuranylu, 2,3-dihydrobenzofuranylu, indolyiu, izoxazolylu, tetrahydropyranylu, tetrahydrofuranylu, piperidinylu, pyrazolylu, pyrolylu, oxazolylu, izotiazolylu, oxadiazolylu, tiadiazolylu, indolinylu, indazolylu, benzoizotiazolylu, pyrido-oxazolylu, pyridotiazolylu, pyrimido-oxazolylu, pyrimido-tiazolyl a benzimidazolylu;

v ktorom Z¹¹⁰ je kovalentná väzba alebo prípadne substituovaná skupina (Ci-Cô), ktorá je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, CN, OH, halogénu, NO₂, COOH, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny a substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu;

v ktorom Z¹¹¹ je kovalentná väzba prípadne substituovaná skupina (CiCó) alebo prípadne substituovaná skupina -(CH₂)_n-cykloalkyl-(CH₂)_n-; pričom prípadne substituované skupiny sú prípadne substituované jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, CN, OH, halogénu, NO₂, COOH, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny a substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu;

112 substituenty R_a a Rb každý reprezentuje jeden alebo viac substituentov v každom prípade nezávisle vybraných zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, halogénu, -CN, -NO₂, -C(O)OH, -C(O)H, -OH, -C(O)O-alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej karboxamidoskupiny, tetrazolylu, trifluórmetylkarbonyl-aminoskupiny, trifluórmetylsulfónamidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkenylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aryloxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroaryloxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkinylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej amidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroaryltioskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aryltioskupiny, -Z¹⁰⁵-C(O)N(R)2, -Z^IO5-N(R)C(O)-Z²⁰⁰, -Z¹⁰⁵-N(R)-S(O)₂-Z²⁰⁰,

-Z¹⁰⁵-N(R)-C(O)-N(R)-Z²⁰⁰, R_c a CH₂OR_c; pričom substituent R_c v každom prípade je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina, -CH₂-NR_dR_e, -W-(CH₂)_t-NR_dR_c, -W-(CH₂)t-O-alkyl, -W-(CH₂), -Salkyl alebo -W-(CH₂),-OH;

pričom Z¹⁰⁵ v každom prípade je nezávisle kovalentná väzba alebo skupina (C i-C₆);

pričom Z²⁰⁰ v každom prípade je nezávisle substituovaná alebo nesubstituovaná skupina (Ci-C₆), substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl alebo substituovaný alebo nesubstituovaný -(Ci-Có)-fenyl;

substituenty R_d a R_e v každom prípade sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina, alkanoylová skupina alebo SO₂-alkylová skupina; alebo substituenty R_d, R_e a atóm dusíka, ku ktorému sú pripojené spoločne tvoria a 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh; index

113 t je v každom prípade nezávisle celé číslo nadobúdajúce hodnoty 2 až 6; W v každom prípade je nezávisle priama väzba alebo O, S,

S(O), S(O)₂ alebo NRf, kde substituent Rf v každom prípade je nezávisle atóm vodíka alebo alkylová skupina;

alebo substituent Rj je substituovaný alebo nesubstituovaný karbocyklický alebo heterocyklický kruh kondenzovaný s kruhom 2;

substituent R₃ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, hydroxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny;

A je -O- ;-S- ;-S(O)_p; -N(R)-; -N(C(O)OR)-; -N(C(O)R)-; -N(SO₂R)-CH₂O-; -CH₂S-; -CH₂N(R)-; -CH(NR)-; -CH₂N(C(O)R))-CH₂N(C(O)OR)-; -CH₂N(SO₂R)-; -CH(NHR)-; -CH(NHC(O)R)-CH(NHSO₂R)-; -CH(NHC(O)OR)-; -CH(OC(O)R)-CH(OC(O)NHR); -CH=CH-; -C(=NOR)-; -C(O)-; -CH(OR)-C(O)N(R)-; -N(R)C(O)-; -N(R)S(O)_P-; -OC(O)N(R)-N(R)-C(O)-(CH₂)_n-N(R)-, -N(R)C(O)O-; -N(R)-(CH₂)_n+i-C(O)-S(O)_PN(R)-; -O-(CR₂)„₊i-C(O)-, -O-(CR₂)„+i-O-, -N(C(O)R)S(O)_P

-N(R)S(O)_PN(R)-S(O)_PN(R)C(O)-SO_PN(C(O)R)-;

-N(R)P(OR_g)-;

-N(R)-C(O)-(CH₂)„-O-, -OS(O)_PN(R)-; -N(R)S(O)_PO-; -N(R)SO_PN(R)-; -C(O)O-;

-N(R)P(O)(OR_g)O-;

-C(O)N(R)C(O)-N(R)S(O)_PC(O)-N(R)P(OR_g)O-N(R)P(O)(OR_g)-N(C(O)R)P(OR_g)O-; -N(C(O)R)P(OR_g)-; -N(C(O)R)P(O)(OR_g)Oalebo -N(C(O)R)P(OR_g)-;

pričom substituent R v každom prípade je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylalkylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina;

substituent R_g v každom prípade je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná arylalkylová skupina, substituovaná alebo ne114 substituovaná cykloalkylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina;

index p nadobúda hodnoty 1 alebo 2;

alebo v skupinách obsahujúcich fosfor tvorí atóm dusíka, atóm fosforu a substituenty R a R_g spolu dohromady 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh; alebo

A je NRSO2 a substituenty R, R_a a atóm dusíka spolu dohromady tvoria 5 alebo 6 členný heterocyklický kruh kondenzovaný ku kruhu 1;

substituent R2 je -Z¹⁰¹-Z¹⁰²;

Z¹⁰¹ je kovalentná väzba, skupina -(Ci-C₆)-, -(Ci-Cŕj-O-, -(Ci-C6)-C(O)-, -(C,-C₆)-C(O)O-, -(C,-C₆)-C(O)NH-, -(Ci-C₆)-C(O)-N((C,-C₆))- alebo substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl;

Z¹⁰² je atóm vodíka substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná cykloalkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná, nasýtená alebo nenasýtená heterocyklická skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná, nasýtená alebo nenasýtená heterobicyklická skupina; uvedená substituovaná heterocyklická alebo substituovaná heterobicyklická skupina má jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z hydroxylu, kyanoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej sulfónamidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej ureidoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej karboxamidoskupiny; substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, oxoskupiny, nasýtenej alebo nenasýtenej aromatickej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklickej skupiny obsahujúcej jeden alebo viac atómov dusíka, jeden alebo viac atómov kyslíka alebo ich kombinácie;

pričom dané atómy dusíka sú nezávisle prípadne substituované substituovanou alebo nesubstituovanou alkylovou skupinou, sub115 stituovanou alebo nesubstituovanou arylovou skupinou alebo substituovanou alebo nesubstituovanou arylalkylovou skupinou; alebo substituent R₂ má všeobecný vzorec B-E, kde B je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej cykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylkarbonylovej skupiny, hydroxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylénovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylénkarbonylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylkarbonylovej skupiny; a E je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylkarbonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylkarbonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylsulfonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azacykloalkylkarbonylaminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylkarbonylaminoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny;

a je 1 a Dj, Gi, Jj, Li a Mi sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z

CR_a a N za predpokladu, že aspoň dve z Dj, Gi, Jj, Li a Mi sú CR_a; alebo

116 a je O a jedno z Di, Gi, L] a Mi je NR_a, jeden z D|, Gi, Li aMi je CR_a a zvyšok sú nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z CR_a a N, pričom substituent R_a je definovaný vyššie;

b je 1 a D2, G₂, J₂, L2 a M2 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z

CR_a a N za predpokladu, že aspoň dve z D2, G2, J2, L₂ a M2 sú CR_a; alebo b je 0 a jeden z D2, G2, L2 a M₂ je NR_a, jeden z D2, G2, L2 a M₂ je CR_a a zvyšok sú nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z CR_a a N, pričom substituent R_a je definovaný vyššie; a index n je celé číslo a v každom prípade nadobúda nezávisle hodnoty 0 až 6.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent Ri je v každom prípade nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, I, CH₃, NO₂, OCF₃, OCH₃, CN, CO₂CH₃, -CH₂NR_dR_e, CF₃, /-butylu, pyridylu, substituovaného alebo nesubstituovaného oxazolylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzénsulfonylu, substituovanej alebo nesubstituovanej fenoxyskupiny, substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, karboxylu, substituovaného a nesubstituovaného tetrazolylu a substituovaného alebo nesubstituovaného styrylu.
3. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka; substituent R_a je v každom prípade nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, I, CH₃, NO₂, OCF₃, OCH₃, CN, CO₂CH₃, CF₃, tbutylu, pyridylu, substituovaného alebo nesubstituovaného oxazolylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzylu, substituovaného alebo nesubstituovaného benzénsulfonylu, substituovanej alebo nesubstituova117 nej fenoxyskupiny, substituovaného alebo nesubstituovaného fenylu, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, karboxylu, substituovaného a nesubstituovaného tetrazolylu a substituovaného a nesubstituovaného styrylu.

Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R 3 je atóm vodíka; substituent R2 má všeobecný vzorec v ktorom index n nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3.

Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je stituent R2 má všeobecný vzorec atóm vodíka; sub- v ktorom index m nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3 a substituent R_g je atóm vodíka alebo -(CH2)_PN(R₄)R5, v ktorom index p je celé číslo od 2 do 6, substituent R
4 a R₅ je každý nezávisle atóm vodíka, azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)q, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH2)qS(O)_r-; kde index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina, aminoskupina, arylová skupina, heteroarylová alebo heterocykloalkylová skupina alebo substituent R₄, R
5 a

118 atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu.
6. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka; substituent R₂ má všeobecný vzorec

Q NR4R5 v ktorom index m nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3. Indexy a a b sú každý nezávisle celé číslo nadobúdajúce hodnoty 0 až 6; Q je NR4R5 alebo -ORô; každý substituent R4 a R5 je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_q-, -S(O)₂-, -C(O)O-, (CH₂)_qS(O)_r; pričom index q je celé číslo 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina, substituovaná alebo nesubstituovaná alkoxyskupina, aminoskupina, arylová skupina, heteroarylová alebo heterocykloalkylová skupina, substituenty R4, R5 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5, 6 alebo 7-člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu;

substituent Rô je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny.
7. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka; substituent R₂ má všeobecný vzorec

119 v ktorom index n nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3; a substituent R₄ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_q-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r; kde index q je celé číslo majúce hodnotu 0 až 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, aminoskupiny, arylovej skupiny, heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny.
8. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka; substituent R₂ má všeobecný vzorec v ktorom index m nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3, substituent R₅ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_q, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH-, -(CH₂)_qC(O)-, -C(O)(CH₂)_q- a -(CH₂)_qS(O)_r-, kde alkylová časť -(CH₂)_q, -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH-, -(CH₂)_qC(O)-, -C(O)(CH₂)_q- a -(CH₂)_qS(O)_r- je prípadne substituovaná halogénom, hydroxyskupinou alebo alkylovou skupinou; pričomž index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo sub120 stituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny;

alebo Y a Z dohromady sú prírodná alebo syntetická aminokyselina, ktorá môže byť mono- alebo di-alkylovaná na dusíku amínovej skupiny; a substituent Ró reprezentuje jeden alebo viac substituentov nezávisle vybraných zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, hydroxyskupiny, oxoskupiny a substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklylkarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoalkylovej a substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, za predpokladu, že atómy uhlíka susediace s atómom dusíka nie sú substituované hydroxyskupinou.
9.

Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent R2 má všeobecný vzorec

121 v ktorom substituent R4 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny.

0. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R 3 je atóm vodíka; substituent R₂ má všeobecný vzorec z x R< Rs v ktorom index m je celé číslo 1 až 6; a substituenty R4 a R5 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -C(O)O-, -SO₂-NH-, -CONH-,(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a (CH₂)„-, -S(O)₂-, -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R₄, R₅ a atóm dusíka, ku ktorému sú pripojené, môžu tiež spoločne

122 tvoriť 3, 4, 5, 6 alebo 7-člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu.
11. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent R₂ má všeobecný vzorec v ktorom index n je celé číslo od 0 do 4; index r nadobúda hodnoty 0 a index m je celé číslo od 1 do 6 alebo index r je 1 a index m je celé číslo od 0 do 6, Q je -NR4R5 alebo -ORô, každý zo substituentov R₄ a R5 je nezávisle atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_q, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny, substituenty R₄, R₅ a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu, substituent Rô je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny.

123
12. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka; substituent R2 má všeobecný vzorec v ktorom index n je celé číslo 0 až 4 a m je celé číslo 0 až 6; substituent R₄ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -S(O)2-, -C(O)O-, -SO2NH-,

-CONH-,(CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -C(O)-, -(CH₂)„-, (CH₂)„S(O),-; kde index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny, substituent Rô je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny.
13. Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorej substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

124 v ktorom substituenty R7, Rs, R9, Rio, R11, R12, R13 a R14 sú každý nezávisle nižšia alkylová skupina alebo atóm vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R7 a Rs; R9 a Rio; R11 a R12; alebo R13 a R14 dohromady sú atóm kyslíka; alebo aspoň jeden zo substituentov R7 a R9 je kyanoskupina, CONHR15, COOR15, CH2OR15 alebo CF^NR^Riô), kde substituenty R15 a Riô sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, azabicykloalkylovej skupiny alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)2-, -C(O)O-,

-SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R15, Ri6 a atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu; X je O, S, SO, SO2, CH2, CHOR17 alebo NR₁₇, kde substituent R17 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH2, -C(O)Ri7 alebo -C(O)ORi8, kde substituent Rjg je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny; a index t je 0 alebo 1.

125
14. Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorom substituenty R₄, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom substituenty R19 a R₂o sú každý nezávisle, atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina; alebo substituenty R19 a R₂o dohromady sú atóm kyslíka; substituenty R₂i a R₂₂ sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka azabicykloalkylovej skupiny alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo 0 až 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R₂i, R22 a atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu; index m je celé číslo od 1 do 6; a index n je celé číslo od 0 do 6.
15. Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorej substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca

126

N

R23 v ktorom index m je celé číslo od 1 do 6; substituent R23 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z CH2OH, NRR', C(O)NR'R alebo COOR, kde substituenty R a R' sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
16. Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorom substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom substituent R24 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, karboxylu, kyanoskupiny, C(O)OR25, CH2OR25, CH2NR26R27 alebo C(O)NHR26; pričom substituent R25 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklickej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloarylovej skupiny; substituenty R26 a R27 sú, každý nezávisle, atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CFhjp-,

127

-S(0)₂-, -C(0)0-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a
17.

17.

-(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; substituenty R₂6, R27 a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu.

Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorej aspoň jeden zo substituentov R4 a R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

-N v ktorom T je C(O), S, SO, SO₂, CHÓR alebo NR, kde substituent R je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny; a index n nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2.

Zlúčenina podľa nároku 10, v ktorej aspoň jeden zo substituentov R₄ a R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec -N(R₂8)R₂9 a substituenty R₂8 a R29 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej karboxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylsulfonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbo128 nylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej kyanoalkylovej skupiny; alebo substituenty R28 a R29 spoločne s atómom dusíka tvoria 5 alebo 6 člennú heterocyklickú skupinu.
19. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej substituenty R₄, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom substituenty R₇, R₈, R₉, R_I0, Ru, Rj2, R13 a R₎₄ sú každý nezávisle nižšia alkylová skupina alebo atóm vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R₇ a R₈; R9 a Ri₀; Ru a Rj₂; alebo R13 a Ri₄ dohromady sú atóm kyslíka; alebo aspoň jeden zo substituentov R₇ a R9 je kyanoskupina, CONHR15, COOR15, CH2OR15 alebo CH2NRi5(Rié), kde substituenty R15 a R]6 sú, každý nezávisle, atóm vodíka substituovaná alebo nesubstituovaná, azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH2)_P-, -S(O)2-, -C(O)O-,

-SO2NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty Ri₅, Ri₆ a atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5, 6 alebo 7 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú alebo heterobicyklickú skupinu;

X je O, S, SO, SO2, CH2, CHORi₇ alebo NRi₇, kde substituent Rj₇ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo

129 nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH₂, -C(O)Rig alebo -C(O)OR₁₈, kde substituent R_!8 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny; a index t je 0 alebo 1.
20. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej substituenty R₄, Rs a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom substituenty Ri₉ a R₂₀ sú, každý nezávisle, atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina; alebo substituenty R19 a R₂o dohromady sú atóm kyslíka; substituenty R₂i a R₂₂ sú, každý nezávisle, atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R₂i, R₂₂ a atóm dusíka spoločne tvoria 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu;

130 index m je celé číslo od 1 do 6; a index n je celé číslo od 0 do 6.
21. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom index m je celé číslo od 1 do 6; substituent R23 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z CH2OH, NRR', C(O)NR'R alebo COOR, kde substituent R vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
22. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej substituenty R4, R5 a atóm dusíka spoločne vytvárajú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca v ktorom substituent R₂4 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, karboxylu, kyanoskupiny, C(O)OR25, CH2OR25, CH2NR26R27 alebo C(O)NHR26‘, kde substituent R25 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej,

131 substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heterocyklickej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloarylovej skupiny; a substituenty R₂6 a R₂₇ sú, každý nezávisle, atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-, (CH₂)qO- -(CH₂)NH- a

-(CH₂)qS(O)r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituenty R₂6, R₂₇ a atóm dusíka môžu tiež spoločne tvoriť 3, 4, 5 alebo 6 člennú, substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu.
23. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej aspoň jeden zo substituentov R4 a R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

R32 v ktorom index g nadobúda hodnoty 0 alebo 1; a

T je C(O), O, S, SO, SO₂, CH₂, CHOR17 alebo NR17, kde substituent Ri7 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH₂, -C(O)Rig alebo -C(O)ORig, kde substituent Ris je atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skúpi132 na, substituovaná alebo nesubstituovaná arylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná arylalkylová skupina; a substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
24. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej aspoň jeden zo substituentov R₄ a R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec Y-Z, kde Zje -N(R₂s)R29 a substituenty R₂8 a R29 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej karboxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylsulfonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej kyanoalkylovej skupiny; alebo substituenty R₂8 a R29 spoločne s atómom dusíka tvoria 5 alebo 6 člennú substituovanú alebo nesubstituovanú heterocyklickú skupinu.
25. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec N(R3o)R3i, v ktorom substituenty R30 a R31 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylovej, alkoxykarbonylovej, alkoxyalkylovej, hydroxyalkylovej, aminokarbonylovej, kyano, alkylkarbonylovej alebo arylalkylovej skupiny133
26. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R₅ má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec každé X je nezávisle CH alebo N; a substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
27. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec νχ ^R32 v ktorom index g nadobúda hodnoty 0 alebo 1; a

T je O, S, SO, SO2, CH₂, CHOR17 alebo NR17, kde substituent R_i7 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny, -C(O)NH₂, -C(NH)NH₂, -C(O)R,₈ alebo -C(O)OR₁₈, kde substituent Ri₈ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny alebo substituovanej alebo nesubstitu134
28.

28.

ovanej arylalkylovej skupiny; a substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.

Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R₅ má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec g

R32 v ktorom index g je 0, 1 alebo 2;

substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, kyanoskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
29. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

135 v ktorom T je C(O), O, S, SO, SO2, CH₂₎ CHOR17 alebo NR17, kde substituent R17 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, arylovej skupiny, arylalkylovej skupiny, -C(NH)NH₂, -C(O)Rig alebo -C(O)ORig, kde substituent Rjg je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.

index g nadobúda hodnoty 0 alebo 1; a substituent R3₂ je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
30. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej substituent R5 má všeobecný vzorec Y-Z, kde Z má všeobecný vzorec

R33 v ktorom substituent R32 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej

136 alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej hydroxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej a alkylkarbonylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej tioalkoxyskupiny alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny; a substituent R33 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxykarbonylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej alkoxyalkylovej, substituovanej alebo nesubstituovanej aminokarbonylovej, perhalogénalkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkenylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej alkylkarbonylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej arylalkylovej skupiny.
31.

Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent R² má všeobecný vzorec

R37 %β'

R38

-R39

R42 v ktorom index m nadobúda hodnoty 0 alebo 1;

substituenty R34, R₃₅, R₃₆, R₃₇, R_3g, R39, R40 a R41 sú, každý nezávisle, metyl alebo atóm vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R34 a R₃₅; R36 a R37; R₃8 a R39; alebo R₄o a R41 spoločne sú atóm kyslíka; substituent R42 je atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO2NH-, -CONH-,

137 (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituent R<t₂ má všeobecný vzorec

R44-7\ R43 N

R51 kde index u je 0 alebo 1;

substituenty R43, R44, R45, R₄6, R₄₇, R₄₈, R49 a R50 sú, každý nezávisle, metyl alebo atóm vodíka;

alebo aspoň jeden pár zo substituentov R43 a R44; R45 a R₄ó; R47 a R48 ; alebo R49 a R50 spoločne sú atóm kyslíka; a substituent R51 je atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná azabicykloalkylová skupina alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH,)_qO-, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny.

138
32. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent R2 má všeobecný vzorec *64 \Γ*57ί

Rg— ’ J

R63 *52'k N

Rse

R59

Reo v ktorom indexy h, i, j, k a 1 sú nezávisle 0 alebo 1; substituenty R52, R53, R54, R55, R56, R57, R58, R59, Rg a Rh sú každý nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z metylu alebo atómu vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R52 a R53; R54 a R55 ; R56 a R57; alebo Rse a R59 spoločne sú atóm kyslíka; substituent Rôo je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej azabicykloalkylovej skupiny alebo Y-Z, kde Y je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_p-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO, -(CH₂)_qNH- a -(CH₂)_qS(O)_r; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny; alebo substituent Rôo má všeobecný vzorec

139 v ktorom index v je 0 alebo 1; substituenty Rôi, Rď2, Ró3, Rď4, Rós, Róó,

R₆₇ a R₆₈ sú každý nezávisle vybrané zo skupiny pozostávajúcej z nižšej alkylovej skupiny alebo atómu vodíka; alebo aspoň jeden pár zo substituentov R₆i a R₆₂; Rď3 a Ró4) R-65 a R₆ó; a R₆₇ a R₆e spoločne sú atóm kyslíka; a substituent Rô9 je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, substituovanej alebo nesubstituovanej azabicykloalkylovej skupiny alebo V-L, kde V je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -C(O)-, -(CH₂)_P-, -S(O)₂-, -C(O)O-, -SO₂NH-, -CONH-, (CH₂)_qO-, -(CH₂)_qNH- a (CH₂)qS(O)_r-; kde index p je celé číslo od 0 do 6, index q je celé číslo od 0 do 6 a index r nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; a L je vybrané zo skupiny pozostávajúcej zo substituovanej alebo nesubstituovanej alkylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej aminoskupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej arylovej skupiny, substituovanej alebo nesubstituovanej heteroarylovej alebo substituovanej alebo nesubstituovanej heterocykloalkylovej skupiny.
33. Spôsob inhibície jednej alebo viacerých aktivít proteínkináz u pacienta, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli, proliečiva alebo biologicky aktívnych metabolitov danému pacientovi.
34. Spôsob podľa nároku 33, vyznačujúci sa tým, že daná proteínkináza je vybraná zo skupiny pozostávajúcej z KDR, FGFR-1, PDGFRP, PDGFRa, IGF-1R, c-Met, Flt-1, Flt-4, TIE-2, TIE-1, Lck, Src, fyn, Lyn, Blk, hck, fgr a yes.
35. Spôsob ovplyvnenia hyperproliferačných porúch u pacienta, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny

140 podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli, proliečiva alebo biologicky aktívnych metabolitov danému pacientovi.
36. Spôsob ovplyvnenia angiogenézy u pacienta, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli, proliečiva alebo biologicky aktívnych metabolitov danému pacientovi.
37. Spôsob podľa nároku 33, vyznačujúci sa tým, že proteínkináza je vybraná zo skupiny pozostávajúcej z proteínovej serín/treonínkinázy alebo proteínovej tyrozínkinázy.
38. Spôsob ošetrenia jedného alebo viac vredov u pacienta, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľné soli, proliečiva alebo biologicky aktívnych metabolitov danému pacientovi.
39. Spôsob podľa nároku 38, vyznačujúci sa tým, že vred alebo vredy sú spôsobené bakteriálnou alebo plesňovou infekciou; alebo vred alebo vredy sú Moorenove vredy; alebo vred alebo vredy sú symptómy ulceratívnej kolitídy.
40. Spôsob ošetrenia stavu u pacienta, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľné soli, proliečiva alebo biologicky aktívnych metabolitov danému pacientovi, pričom daný stav je ochorenie očí, kardiovaskulárne ochorenie, rakovina, syndróm Crow-Fukase (POEMS), diabetické ochorenie, mesiačikovitá anémia, chronický zápal, systémový lu141 pus, glomerulonefritída, synovitída, zápalové črevné ochorenie, Chronova choroba, glomerulonefritída, reumatoidná artritída, osteoartritída, roztrúsená skleróza, rejekcia štepu, Lymská choroba, sepsa, HippelLindauov syndróm, pemfigoid, psoriáza, Pagetova choroba, polycystické ľadvinové ochorenie, fibróza, sarkoidóza, cirhóza, tyreoiditída, hyperviskózny syndróm, ochorenie Osler-Weber-Rendu, chronické oklúzne ochorenie pľúc, astma alebo edém po popáleninách, trauma, ožiarenie, mŕtvica, hypoxia alebo ischémia, syndróm ovariálnej hyperstimulácie, preeklampsia, menometroragia, endometrióza alebo infekcia herpes simplex, herpes zoster, vírusom spôsobujúcim syndróm získaného zlýhania imunity, protozoem, toxoplazmózou alebo parapoxvírusom.
41. Spôsob podľa nároku 40, vyznačujúci sa tým, že ochorenie očí je okulárny alebo makulárny edém, okulárne neovaskulárne ochorenie, skleritída, radiálna keratotómia, uveitída, vitritída, myopia, fyziologická exkavácia papily, chronické odchlípenie sietnice, komplikácie po ošetrení laserom, konjunktivitída, Stargardtova choroba a Ealesova choroba, retinopatia a makulárna degenerácia.
42. Spôsob podľa nároku 40, vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárne ochorenie je ateroskleróza, restenóza, ischémia/reperfúzne poškodenie, vaskulárna oklúzia a karotické obštruktívne ochorenie.
43. Spôsob podľa nároku 40, vyznačujúci sa tým, že rakovina je pevný nádor, sarkóm, fibrosarkóm, osteóm, melanóm, retinoblastóm, rabdomyosarkóm, glioblastóm, neuroblastóm, teratokarcinóm, hematohematopoetické zhubné bujnenie, Kaposiho sarkóm, Hodgkinova choroba, lymfóm, myelóm, leukémia alebo malígny ascites.

142
44. Spôsob podľa nároku 40, vyznačujúci sa tým, že diabetické ochorenie je glaukóm závislý na inzulíne z diabetes mellitus, diabetická retinopatia alebo mikroangiopatia.
45. Spôsob zníženia fertility u pacienta, vyznačujúci sa tým, že daný spôsob zahrnuje krok, v ktorom dochádza k podaniu terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli, proliečivá alebo biologicky aktívnych metabolitov pacientovi.
46. Spôsob podľa nároku 36, vyznačujúci sa tým, že zlúčenina alebo jej fyziologicky prijateľná soľ, proliečivo alebo biologicky aktívny metabolit je podávaná v množstve, ktoré má na angiogenézu alebo vaskulogenézu promočný účinok.
47. Spôsob podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že proteínkináza je Tie-2.
48. Spôsob podľa nároku 46, vyznačujúci sa tým, že zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej fyziologicky prijateľná soľ, proliečivo alebo biologicky aktívny metabolit je podávaná v kombinácii s proangiogénnym rastovým faktorom.
49. Spôsob podľa nároku 48, vyznačujúci sa tým, že proangiogénny rastový faktor je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z VEGF, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E, HGF, FGF-1, FGF-2, ich derivátov a antijodotypickej protilátky.

143
50. Spôsob podľa nároku 46, vyznačujúci sa tým, že pacient trpí anémiou, ischémiou, infarktom, rejekciou transplantátu, zranením, gangrénou alebo nekrózou.
51. Spôsob podľa nároku 33, vyznačujúci sa tým, že aktivita proteínkinázy sa podiela na aktivácii T-buniek, aktivácii B-buniek, degranulácii žírnych buniek, aktivácii monocytu, potenciácii zápalovej odpovedi alebo ich kombinácii.
52. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R3 je atóm vodíka; substituent R₂ je -Z^I0l-Z¹⁰², kde Z¹⁰¹ je kovalentná väzba, -(Ci-C₆)-, -(CiC₆)-O-, -(C,-C₆)-C(O)-, -(Ci-C₆)-C(O)O-, -(Ci-C₆-C(O)-NH-, -(C,-C₆C(O)-N((Ci-C6))- alebo substituovaný fenyl; a

Z¹⁰² je atóm vodíka, substituovaná alebo nesubstituovaná alkylová skupina alebo substituovaná alebo nesubstituovaná, nasýtená alebo nenasýtená heterocyklická skupina.
53. Zlúčenina podľa nároku 52, v ktorej Z¹⁰¹ je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -CH₂-C(O)O-, -CH₂-C(O)-, -CH₂-C(O)-NH-, -CH₂‘C(O)-N(Me), -CH(Me)-C(O)O-, -(CH₂)₃-C(O)O-, -CH(Me)-C(O)-NH- a -(CH₂)₃-C(O)NH-;

Z¹⁰² je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, metylu, etylu, N, jV-dimetylaminoetylu, TV, 7V-diety lamino etylu, 2-fenyl-2-hydroxyetylu, morfolinoskupiny, piperazinylu, TV-metylpiperazinylu a

2-hydroxymetylpyrolidinylu.
54. Zlúčenina podľa nároku 53, v ktorej substituent Ri má všeobecný vzorec

144 stituovaný benzoxazolyl alebo substituovaný alebo nesubstituovaný benzotiazolyl.
55. Zlúčenina podľa nároku 8, 9, 10 alebo 53, v ktorej substituent Rj má všeobecný vzorec v ktorom sa vyskytuje len jeden substituent R_a a je vybraný z atómu vodíka alebo fluóru.
56. Zlúčenina podľa nároku 52, v ktorej Z¹⁰¹ kovalentná väzba; a Z¹⁰² je prípadne substituovaný pyridyl.
57. Zlúčenina podľa nároku 56, v ktorej substituent Ri má všeobecný vzorec

145
58. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej substituent R₃ je atóm vodíka;

substituent R2 je cyklopentyl; a substituent Ri má všeobecný vzorec
59. Zlúčenina podľa nároku 58, v ktorej Z¹¹⁰ je atóm vodíka;

A je O; a Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaný fenyl, furanyl alebo tienyl, pričom Z¹⁰⁰ je prípadne substituované jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F COOH, NO2, OMe, -COOMe, OCF₃ a CF₃.
60. Zlúčenina podľa nároku 58, v ktorej Z¹¹⁰ je atóm vodíka;

A je -0-, -O-(CR₂)_n, -C(O)- alebo -O-(CR₂)„-O-;

index n v každom prípade je 0 až 3;

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajú cej z cyklohexylu, fenylu, tetrahydropyranylu, tetrahydrofuranylu, izoxa zolylu a piperidinylu; pričom Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným ale bo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z al kýlovej skupiny, alkoxyskupiny, halogénu, hydroxyskupiny a alkoxykar bonylovej skupiny.

146
61. Zlúčenina podľa nároku 58, v ktorej substituent R₂ je prípadne substituovaný skupinou vybranou zo skupiny pozostávajúcej z cyklobutylu a cyklohexylu.
62. Zlúčenina podľa nároku 61, v ktorej substituent R₂ je prípadne substituovaný jedným alebo viacerými substituentami vybranými zo skupiny pozostávajúcej z hydroxyskupiny, alkylovej skupiny, hydroxyalkylovej skupiny, karboxyalkylovej skupiny a fenylalkoxyalkylovej skupiny.
63. Zlúčenina podľa nároku 62, v ktorej substituent R| je 4-fenoxyfenyl.
64. Zlúčenina podľa nároku 6, v ktorej index m nadobúda hodnoty 2; a je 0; substituent Rô je atóm vodíka; b je 1 alebo 2; a substituenty R4 a R5 sú každý atóm vodíka.
65. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej index m nadobúda hodnoty 0, 1 alebo 2; substitutent Rô je atóm vodíka; substituent R₅ je atóm vodíka alebo YZ;

kde Y je kovalentná väzba, -C(O)-, -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_q, -(CH₂)_qC(O)- alebo -C(O)(CH₂)_q-, kde alkylová časť skupín -(CH₂)_qO-, -(CH₂)_P, -(CH₂)_qC(O)- a -C(O)(CH₂)_q- je prípadne substituovaná halogénom, hydroxyskupinou alebo alkylovou skupinou; a

Z je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylovej skupiny, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, alkoxyalkylovej skupiny, prípadne substituovanej heterocykloalkylovej skupiny, prípadne substitu147 ovanej heteroarylovej skupiny alebo prípadne substituovanej aminoskupiny.
66. Zlúčenina podľa nároku 65, v ktorej Zje vybrané zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, metylu, etylu, hydroxymetylu, metoxyetylu, Nmetyl-piperidinylu, (/-butoxykarbonyl)(hydroxy)piperidinylu, hydroxypiperidinylu, (hydroxymetyl)piperidinylu, (hydroxy)(metyl)piperidinylu, morfolinoskupiny, (metoxyetyl)piperizinylu, metylpiperizinylu, 4piperidinylpiperidinylu, imidazolylu, metylimidazolylu,

JV-metylaminoskupiny, N, N-dimetyl aminoskupiny, jV-izopropylaminoskupiny, 7V,7V-dietylaminoskupiny, 2,3-dihydroxypropylaminoskupiny, 2-hydroxyetylaminoskupiny, 3-hydroxypropylaminoskupiny, metoxyetyl-aminoskupiny, etoxykarbonylmetylaminoskupiny, fenylmetylaminoskupiny, TV-metyl-TV-metoxyaminoskupiny, , furanylmetylaminoskupiny, piperidinyletylaminoskupiny, N(2 -N, 7V-dimetylaminoetyl)-7V-metyl-aminoskupiny, 2-/V,/V-dimetylaminoetyl aminoskupiny, /V-metyl-7V-(jV-metyl-piperidin-4yljaminoskupiny, 2-morfolino-etylaminoskupiny, 3-morfolinopropylaminoskupiny, 3-imidazolyl-propylaminoskupiny alebo 3-(2oxopyrolidinyljpropyl aminoskupiny.
67. Zlúčenina podľa nároku 8, v ktorej index m nadobúda hodnoty 2; substi- tuent R5 je Y-Z; Y je -C(O)-; a Z má všeobecný vzorec R , v ktorom index n nadobúda hodnoty 0, 1, 2 alebo 3.
68. Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej je substituent R4 vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka alebo metylu;

148
69.

69.
70.

70.

R substituent Ri má všeobecný vzorec '-' > · ;

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z O, -N(R)- a -N(R)C(O)-; Z¹¹¹je -(CH₂)n-cykloalkyl-(CH₂)n-;

substituent R je atóm vodíka alebo alkylová skupina;

index n je celé číslo 0 až 5;

substituent R_a je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, OH, F, Cl, metylu a metoxyskupiny; a substituent Rb je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, CN, F, CF3, OCF3, metylu, metoxyskupiny a prípadne substituovanej aminoskupiny;

kde uvedená aminoskupina je prípadne substituovaná jednou alebo viacerými skupinami, pričom každá je nezávisle vybraná zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, alkoxyalkylovej skupiny, fenylu, substituovaného fenylu a prípadne substituovanej heteroarylovej skupiny.

Zlúčenina podľa nároku 68, v ktorej substituent Rb je 4metylfenyltioskupina alebo 2-pyridinyltioskupina.

Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej je substituent R| .100

149 kde Ζ^1θθ je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z benzo[6]tiofénu, furanylu a tiofénu.
71. Zlúčenina podľa nároku 9C, v ktorej je substituent R_a alkoxyskupina;

A je NH-C(O)-; a medzi A a Z¹⁰⁰ je kovalentná väzba.
72. Zlúčenina podľa nároku 1, 8 alebo 9, v ktorej je

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z -N(R)-C(O)-N(R)-, -(CH₂)_nN(R)C(O)N(R)-, -N(R)- a -N(R)-SO₂-; substituent R je atóm vodíka alebo alkylovej skupiny;

furanyl, benzofuranyl alebo oxazolyl;

pyridinyl, tiazolyl,

X je S, O alebo NR, kde substituent R v každom prípade je nezávisle atóm vodíka alebo Me;

substituent R_a je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka a F; a substituent Rb je jeden alebo viac substituentov, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, F, Cl, Br, NO₂, CF3, alkylovej skupiny, alkoxyskupiny a alkoxykarbonylovej skupiny.

150
73. Zlúčenina podľa nároku 72, v ktorej je substituent R₄ metyl; index m nadobúda hodnoty 1, 2 alebo 3;

substituent R₅ je Y-Z, kde Y je -C(O)O-, -C(O)- alebo -C(O)-(CH2)_P-; a Z je aminoalkylová skupina, 77-alkylaminoskupina, 77,77dialkylaminoskupina alebo hydroxyalkylaminoalkylová skupina.
74. Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej je substituent R₄ metyl; substituent r x γ,ΙΟΟ , kde index n je celé číslo 0 až 3; Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z indolylu, indenylu, metylíndenylu, metylíndolylu, dimetylaminofenylu, fenylu, cyklohexylu a benzofuranylu.
75. Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej má substituent R, všeobecný vzorec

R.

í<_zia_A__zii>_z»

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z fenylu, imidazolylu, indolylu, furanylu, benzofuranylu a 2,3dihydrobenzofuranylu;

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, CN, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, -O- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny), -COOH, -Z¹⁰⁵C(O)N(R)2, -Z¹⁰⁵-N(R)-C(O)-Z²⁰⁰, -Z¹⁰⁵-N(R)-S(O)2-Z²⁰⁰ a -Z¹⁰⁵N(R)-C(O)-N(R)-Z²⁰⁰;

Z¹⁰⁵ je kovalentná väzba alebo skupina (Ci-Cô);

151

Ζ^2θθ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny (Ci-Cô), fenylu a -(Ci-Côj-fenylu;

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nezávisle kovalentná väzba alebo skupina (C1-C3) prípadne substituovaná alkylovou skupinou, hydroxyskupinou, COOH, CN alebo fenylom; a

A je O, -N(R)-C(O)-N(R)-, -N(R)-C(O)-O-, -N(R)- alebo -N(R)-C(O)-, kde substituent R je atóm vodíka alebo alkylová skupina.
76. Zlúčenina podľa nároku 75, v ktorej je substituent R4 metyl.

Zlúčenina podľa nároku 8, 9 alebo 10, v ktorej má substituent Ri všeobecný vzorec

Λα-, ,100 kde Z

100 skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej zolylu a benzimidazolylu.

je prípadne substituovaná z benzoxazolylu, benzotia78. Zlúčenina podľa nároku 77, v ktorej je substituent R4 metyl; A je -NH- ; v tomto prípade je tu len jeden substituent R_a vybraný z atómu vodíka alebo F; a Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z alkylovej skupiny, halogénu, CF3 a alkoxyskupiny.
79. Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej má substituent Ri všeobecný vzorec

R„ /Á 'Z—A—Z—Z¹⁰⁰

152

Ζ^1θθ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z fenylu, pyrolylu, pyridylu, benzimidazolylu, naftylu a je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, Cl, Br, NO2, aminoskupiny, W-alkylaminoskupiny, N,jV-dialkylaminoskupiny, CN, prípadne substituovanej alkylovej skupiny, -O- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny) a fenylu;

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ v každom prípade je nezávisle skupina (C0-C3) prípadne substituovaná prípadne substituovaným fenylom; a

A je -N(R)-C(O)-N(R)-, -N(R)-S(O)₂-, -N(R)-C(O)-, -N(R)- alebo -N(R)C(O)-O-.
80. Zlúčenina podľa nároku 79, v ktorej je substituent R₄ metyl a v tomto prípade je tu len jeden substituent R_a vybraný z atómu fluóru.
81. Zlúčenina podľa nároku 9 alebo 66, v ktorej má substituent Ri všeobecný R„ 'Z—A~Z—Z^IM vzorec

Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej sa z fenylu, izoxazolylu, tetrahydronaftylu, furanylu, benzofuranylu, pyridylu a indolylu;

kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, pričom každý je nezávisle vybraný zo skupiny pozostávajúcej z F, CN, NO₂, C(O)H, -CONH2, -NHSO2CF3, prípadne sub153 stituovanej alkylovej skupiny, prípadne substituovanej heteroarylovej skupiny a -0- (prípadne substituovanej alkylovej skupiny);

Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nezávisle prípadne substituovaná skupina (C0-C3); a

A je O, -N(R)-C(0)-(CH₂)_n-N(R)-, -C(0)-N(R)-, -N(R)-C(0)-0-, -N(R)C(0) alebo -N(R)-.
82. Zlúčenina podľa nároku 81, v ktorej je substituent R4 metyl; substituent R_a je atóm vodíka alebo metoxyskupina; a Z¹¹⁰ a Z¹¹¹ sú každý nesubstituovaný.
83. Zlúčenina podľa nároku 9, v ktorej má substituent Rj všeobecný vzorec

O

154 kde substituent R je atóm vodíka alebo nižšia alkylová skupina a index n v každom prípade je nezávisle 1 až 6.
84. Zlúčenina podľa nároku 83, v ktorej má substituent Rj všeobecný vzorec
85. Zlúčenina podľa nároku 84, v ktorej je Z¹⁰⁰ substituovaný alebo nesubstituovaný fenyl.

Zlúčenina podľa nároku 8, 9 alebo 10, v ktorej má substituent Ri všeobecný vzorec ^R‘Oa-_Z™ / , kde Z¹⁰⁰ je prípadne substituovaná skupina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z benzoxazolylu, benzotiazolylu a benzimidazolylu.
87. Zlúčenina podľa nároku 11, v ktorej index n nadobúda hodnoty 2; substituent R& je atóm vodíka; index m nadobúda hodnoty 1; index r nadobúda hodnoty 1; a substituenty R₄ a R5 sú každý atóm vodíka.
88. Zlúčenina podľa nároku 64 alebo 87, v ktorej je substituent R] 4fenoxyfenyl.