SK182499A3 - BENZO(5,6)CYCLOHEPTA(1,2-B)PYRIDINE DERIVATIVES FOR THEì (54) INHIBITION OF FARNESYL PROTEIN TRANSFERASE - Google Patents

Description

Zlúčeniny na inhibíciu farnesyl-proteintransferázy, spôsob ich použitia a ich obsahujúce farmaceutické prostriedky

Oblasť techniky

Tento vynález popisuje nové zlúčeniny, vhodné na inhibíciu nenormálneho rastu buniek, inhibíciu farnesyl-proteíntransferázy a liečenie rakovín. Popisuje tiež spôsoby inhibicie nenormálneho rastu buniek, inhibicie farnesyl-proteintransferázy a liečenie rakovín, použitím týchto nových zlúčenín.

Doterajší stav techniky

Biologický význam Ras-onkogénu a úloha Ras a enzýmu, známeho ako farnesyl-proteíntransferáza, pri premene normálnych buniek na rakovinové bunky, sú popísané v PCT International Publication No. WO 95/00497 a WO 95/10516. Obidve tieto publikácie tiež popisujú rozdielne skupiny zlúčenín, ktoré inhibujú aktivitu enzýmu farnesyl-proteintransferázy a tým farnesyláciu Ras-proteínu.

PCT International Publication No. WO 95/10516 sa týka tricyklických amidových a močovinových zlúčenín všeobecného vzorca (1.0)

(1.0) a ich použitie pri inhibícii funkcie Ras a nenormálneho rastu buniek. Je v nej popisaný rad podskupín zlúčenín vzorca (1.0), ktoré zahrnujú zlúčeniny vzorcov (5.0c), (5.1c) a (5.2a),

r⁵^<^N\-r⁷

Rovnako ako 11-R-izomér a 11-S-izoméry zlúčenín (5.0c)a(5.1c) . Je v nej tiež popísaný rad konkrétnych zlúčenín v každej podskupine, rovnako ako biologická aktivita týchto zlúčenín.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález poskytuje nové tricyklické amidové zlúče niny vybrané zo skupiny, obsahujúce :

o

f

racemická

Br

Br

X, 1----/ ™°0 O _OW

t

T

alebo solváty.

alebo ich farmaceutický prija^teIné soli

II

Optické rotácie zlúčenín (( + )- alebo (-)-) sú merané v metanole alebo etanole pri 25° C. Tento vynález zahrnuje horeuvedené zlúčeniny v amorfnom alebo kryštalickom stave.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu teda patria zlúčeniny, vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0, 7,0 a 6,0, alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli definované hore.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 10,0, 11,0, 12,0, 13,0, 16,0

17,0, 18,0, 19,0, 20,0,

21,0 a 22,0, alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uve-

dené hore.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce : zlúčeniny 8,0, 9,0, 14,0 a 15,0 alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúče niny, aké boli uvedené hore.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 23,0, 25,0, 26,0, 27,0,

28,0, 29,0, 30,0, 31,0, 32,0, 33,0, 34,0, 60,0, 61,0, 62,0,

63,0, 64,0 alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené hore.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané

zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 23,0A,

24,0, 35,0, 36,0,

37,0, 38,0, 39,0, 40,0, 41,0, 42,0, 47,0,

48,0, 49, 0, 50,0,

51,0, 52,0, 53,0, 54,0, 55,0, 56,0, 57,0,

58,0, 59,0, a 65,0 alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené hore.

Medzi zlúčeniny tohto vynálezu tiež patria zlúčeniny vybrané zo skupiny, obsahujúce: zlúčeniny 43,0, 44,0, 45,0 a 46,0 alebo ich farmaceutický prijatelné soli, kde sú uvedené také zlúčeniny, aké boli uvedené hore.

Medzi uprednostňované zlúčeniny patria zlúčeniny 5,0, 7,0, 25,0, 27,0, 29,0 a 34,0.

Medzi uprednostňované zlúčeniny tiež patria zlúčeniny 51,0 a 53,0.

Medzi uprednostňované zlúčeniny tiež patria zlúčeniny 40,0 a 42,0.

Medzi viac uprednostňované zlúčeniny patria zlúčeniny 25,0, 27,0, 51,0 a 53,0.

Odborníci v odbore pochopia, že je tento tricyklický systém číslovaný:

Odborníci v odbore tiež pochopia, že S a R priestorové usporiadanie na väzbe C-11 sú:

Inhibícia farnesyl-proteíntransferázy tricyklickými zlúčeninami ešte nebola popísaná. Tento vynález teda poskytuje spôsob inhibície farnesyl-proteíntransferázy pri použití tricyklických zlúčenín tohto vynálezu, ktoré: (i) účinne inhibujú farnesyl-proteintransferázu, ale nie geranylgeranylproteíntrans-

ferázu I, in vitro;

(ii) blokujú fenotypickú zmenu, indukovanú

formou transformujúceho Ras, ktorá je akceptor farnesylu, ale nie formou transformujúceho Ras, ktorá bola vytvorená tak, aby bola akceptorom geranylgeranylu; (iii> blokuje intracelulárnu úpravu Ras, ktorý je akceptorom farnesylu, ale nie Ras, ktorý bol vytvorený tak, aby bol akceptorom geranylgeranylu, a (iv) blokuje nenormálny bunkový rast v kultúrach, indukovaných transformujúcim Ras.

Tento vynález poskytuje spôsob inhibicie alebo liečenia nenormálneho rastu buniek, vrátane transformovaných buniek, podávaním účinného množstva zlúčeniny tohto vynálezu. Nenormálny rast buniek označuje bunkový rast, ktorý je nezávislý na normálnych regulačných mechanizmoch (napr. strata kontaktnej inhibície). Zahrnuje nenormálny rast : (1) nádorových buniek (nádorov), exprimujúcich aktivovaný Ras-onkogén; (2) nádorových buniek, v ktorých je Ras-proteín aktivovaný ako výsledok onkogénnej mutácie v inom géne; (3) benígnych a malignych buniek iných proliferatívnych porúch, v ktorých dochádza k chyb nej aktivácii Ras.

Tento vynález tiež poskytuje spôsob inhibicie alebo liečenia nádorového rastu (rakoviny) podávaním účinného množstva tri cyklických, tu popísaných zlúčenín, cicavcovi (napr. človeko vi), ktorý takú liečbu potrebuje. Konkrétne tento vynález pos kytuje spôsob inhibicie alebo liečenia rastu nádorov, exprimu júcich aktivovaný Ras-onkogén, podávaním účinného množstva ho reuvedených zlúčenín. Príklady nádorov, ktoré môžu byť inhibované alebo liečené, zahrnujú, ale nielen rakovinu plúc (napr. plúcny adenokarcinóm), rakovinu slinivky brušnej (napr. pankreatický karcinóm, ako je napr. exokrinný pankreatický karci nóm), rakovinu hrubého čreva (napr. kolorektálne karcinómy,

ako je napr. adenokarcinóm hrubého čreva a adenom hrubého čreva), miechovú leukémiu (napr.akútnu myelogénnu leukémiu(AML)), rakovinu folikulov štítnej žlazy, myelodisplastický syndróm (MDS), karcinóm žlčníka, epidermálny karcinóm, rakovinu prsníka a rakovinu prostaty.

Tento vynález tiež poskytuje spôsob inhibicie proliferatívnych porúch, ako benígnych, tak aj malignych, kde sú Ras-proteiny chybne aktivované, ako výsledok onkogénnej mutácie v iných gé noch, --t. j. Ras-gén sám nie je aktivovaný mutáciou na onkogénnu formu —, kde je spomenutej inhibicie dosiahnuté podávaním účinného množstva tricyklických, tu popísaných, zlúčenín ci cavcovi, (napr. človekovi), ktorý takú liečbu potrebuje. Tu popísanými tricyklickými zlúčeninami môže byt inhibovaná napr. genigna proliferatívna porucha neurofibromatóza, alebo nádory, v ktorých je aktivácia Ras spôsobená mutáciou alebo nadexpresiou tyrosinkinázových onkogénov (napr.neu,src,abl,lck a fyn). Zlúčeniny tohto vynálezu inhibujú farnesyl-proteintransferázu a farnesyláciu onkogénneho proteínu Ras. Tento vynález ďalej poskytuje pôsob inhibície Ras farnesyl-proteíntransferázy u cicavcov, najmä u človeka, podávaním účinného množstva tricyklických zlúčenín, popísaných hore. Padávanie zlúčenín tohto vynálezu pacientom, za účelom inhibície farnesyl-proteín-

transferázy, je užitočné pri liečení horepopísaných rakovín. Tieto tricyklické zlúčeniny, užitočné v metódach tohto vynále zu, inhibujú nenormálny rast buniek. Domnienka je, že tieto zlúčeniny môžu fungovať cez inhibíciu funkcie G-proteínu ako je Ras p21, blokovaním izoprenylácie G-proteínu, čím sa stáva jú užitočnými pri liečení proliferativnych porúch, ako je nádorový rast a rakovina. Domnienka je, že tieto zlúčeniny inhibujú Ras farnesyl-proteintransferázu a vykazujú teda antiproliferatívnu aktivitu u buniek transformovaných Ras.

Keď sú tu použité, sú nasledujúce termíny použité tak, ako je definované nižšie, pokial nie je uvedené ináč:

M*- predstavuje molekulový ión molekuly v hmotnostnom spektre; MH⁺ - predstavuje molekulový ión plus vodík molekuly v hmot nostnom spektre;

Pyridyl-N-oxidy sú tu predstavované skupinou

Nasledujúce rozpúšťadlá a činidlá sú predstavované uvedenými skratkami: tetrahydrofurán (THF); etanol (EtOH); metanol (MeOH); kyselina octová (HOAc alebo AcOH); etylacetát (EtOAc); N,N-dimetylformamid (DMF); kyselina trifluóroctová (TFA); an15 hydrid kyseliny trifluóroctovej (TFAA); 1-hydroxybonzotriazol (HOBT); kyselina m-chlórbenzoová (MCPBA); trietylamin (Et₃N); dietyléter (Et₂O); etylchlórmravenčan (ClCO₂Et); hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (DEC); hydrid diisobutylhlinika (DIBAL); izopropanol (iPrOH); dimetylsulfoxid (DMSO).

Niektoré zlúčeniny predkladaného vynálezu môžu existovať v rôznych izomérnych formách (napr. enantioméry alebo diastereoizoméry) vrátane atropizomérov (t.j. zlúčenín, ktoré majú 7-členný kruh v ustálenej konformácii tak, že je uhlíkový atóm v pozícii 11 umiestnený nad alebo pod rovinou fúzovaných ben-

zénových kruhov, pre prítomnosť brómového substituentu v pozícii 10). Tento vynález zahrnuje všetky také izoméry ako v čis tej forme, tak aj v zmesiach, vrátane zmesi racemických. Enol formy sú zahrnuté tiež.

Niektoré zásadité tricyklické zmesi tiež vytvárajú farmaceu tický prijateľné soli, napr. soli vzniknuté pridaním kyselín. Napríklad, dusíkové atómy pyridínu môžu vytvárať soli so silnými kyselinami. Príklady vhodných kyselín na tvorbu solí sú kyselina sírová, fosforečná, octová, citrónová, oxalová, malónová, salicylová, jablčná, fumarová, jantárová, askorbová, maleínová, metánsulfonová a iné anorganické a karboxylové kyse-

liny, dobre známe v odbore. Tieto soli sú pripravené stretnutím formy s volnou bázou, s dostatočným množstvom požadovanej kyseliny na vznik soli bežným spôsobom. Formy s volnou bázou môžu byť obnovené tak, že je na sol pôsobené rozriedeným, vod ným roztokom vhodnej bázy, ako je napr. rozriedený vodný NaOH, uhličitan draselný, hydrogénuhličitan sodný alebo amónny. For my s volnou bázou sa trochu líšia od ich podobných solí v niektorých fyzikálnych vlastnostiach, ako je rozpustnosť v polárnych rozpúšťadlách, ale soli kyselín alebo bázy sú ináč pre účely tohto vynálezu rovnocenné formám s volnou bázou.

Všetky také soli sú považované za farmaceutický prijatelné a pre účely tohto vynálezu považované za rovnocenné volným formám im zodpovedajúcich zlúčenín.

Zlúčeniny predkladaného vynálezu môžu byť pripravené pomocou postupov, ktoré sú popísané nižšie.

Príprava piperidinových zlúčenín.

Zlúčeniny tohto vynálezu, majúce piperidínový kruh (kruh IV) :

môžu byť pripravené technikami, ktoré sú v odbore dobre známe, zo zodpovedajúcich neoxidovaných pyridylových zlúčenín :

Zlúčeniny tohto vynálezu teda môžu byť pripravené z :

Ο

Piperidínové zlúčeniny (vzorec I) tohto vynálezu môžu byť pripravené z horeuvedených pyridylových zlúčenín oxidáciou kyselinou meta-chlôrperoxybenzoovou. Táto reakcia je uskutočňovaná vo vhodnom organickom rozpúšťadle, napr. dichlórmetane (bežne bezvodom) alebo metylénchloride, pri vhodnej teplote, počas vzniku zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré majú v pozícii 1 kruhu I tricyklického systému N-O-substituent.

Všeobecne je roztok východzej tricyklickej zlúčeniny v organickom rozpúšťadle pred pridaním kyseliny meta-chlórperoxybenzoovej ochladený na 0°C. Reakčná zmes potom v priebehu reakcie sa nechá zohriať na izbovú teplotu. Požadovaný produkt môže byť získaný štandardnými separačnými spôsobmi. Reakčná zmes môže byť napríklad premytá vodným roztokom vhodnej bázy, napr. nasýteným hydrogénuhličitanom sodným alebo NaOH (napr. 1 N NaOH) a potom vysušená pomocou bezvodého síranu horečnatého. Roztok obsahujúci produkt môže byť zahustený vo vákuu. Produkt môže byť purifikovaný štandardnými spôsobmi, napr. chrómatografiou pri použití silikagélu (napr. flash kolónovou chróma-

tografiou).

Alternatívne môžu byť piperidínové zlúčeniny (vzorec I) tohto vynálezu vytvorené z intermediátových zlúčenín vzorcov 1.1 až

65.1, pri použití oxidačného postupu kyselinou m-chlórperoxybenzoovou. Tieto oxidované intermediátové zlúčeniny sa potom nechajú reagovať pri použití metód známych v odbore, aby vznikli zlúčeniny tohto vynálezu. Napríklad, 3,8-dihalogénové zlúčeniny môžu byť vytvorené z tohto intermediátu:

ktorý je vytvorený oxidáciou tejto pyridylovej zlúčeniny

kyselinou m-chlórperoxybenzoovou.

3.7.8- trihalogénové zlúčeniny, 3,8,10-trihalogénové zlúčeniny,

3.8- dihalogénové zlúčeniny a 3,10-dihalogénové zlúčeniny môžu byť vytvorené jednotlivo z týchto intermediátov:

Zlúčeniny III až VI môžu byť jednotlivo pripravené pri použití horeuvedeného oxidačného postupu kyselinou m-chlórperoxybenzoovou a pyridylových zlúčenín

halogén halogén

COOC₂h₅ v

cooc₂h₅ jednotlivo pri vzniku týchto zlúčenín.

halogén

Zlúčeniny XI až XIV môžu byť jednotlivo premenené na zlúčeniny

III

Pri až IV, metódami známymi v odbore, horeuvedených zlúčeninách predstavuje volitelnú väzbu a X predstavuje CH väzba chýba, intermediáty prerušovaná čiara (keď táto volitelná väzba prítomná.

N-0 zlúf a C, keď je táto volitelná sa potom nechajú ďalej reagovať, aby vznikli čeniny tohto vynálezu.

Odborníci v odbore ocenia, že táto oxidačná reakcia môže byť uskutočnená pri racemických zmesiach a izoméry môžu byť potom oddelené známymi technikami, alebo môžu byť izoméry najskôr oddelené a potom oxidované na zodpovedajúce N-oxidy.

Odborníci v odbore pochopia, že keď je uskutočnená oxidačná reakcia pri zlúčeninách, majúcich v C-ll piperidínového kruhu IV dvojitú väzbu (napr. zlúčeniny 5,1, 6,1, 9,1 a pod.), je uprednostňované vyvarovanie sa prebytku kyseliny m-chlórperoxybenzoovej. V týchto reakciách by prebytok kyseliny m-chlórperoxybenzoovej mohol spôsobiť oxidáciu dvojitej väzby v pozícii C-ll.

Intermediátové zlúčeniny VII, VIII, IX a X sú pripravené metódami známymi v odbore napr. metódami, popísanými vo WO 95/10516, v U.S. 5 151 423 a popísanými nižšie. Napr. zlúčeninami VII až X môžu byť jednotlivo pripravené reakcie zlúčenín

s C₂H₅OCOC1 a Et₃N v nejakom inertnom rozpúšťadle (napr.CH₂Cl₂) .

Intermediátové zlúčeniny XV, XVI, XVII a XVIII, kde je pozícia C-3 pyridínového kruhu tricyklickej štruktúry substituovaná brómom, môžu byť tiež pripravené postupom, obsahujúcim nasle dujúce kroky:

(a) reakciou amidu vzorca

11a

NR⁵³ R⁶³ kde R¹¹ je Br, R⁵ je vodík a R⁶ je Ci-C₆-alkyl, aryl alebo hete26 roaryl; R^5a je Ci-Ce-alkyl, aryl alebo heteroaryl a R⁶* je vodík; R^5a a R⁶“ sú nezávisle vybrané zo skupiny obsahujúcej CiC₆-alkyl a aryl; alebo R^Sa a R^6a, spoločne s dusíkovým atómom, na ktorý sú viazané, vytvára kruh, obsahujúci 4 až 6 uhlíkových atómov alebo obsahuje 3 až 5 uhlíkových atómov a jednu heteroskupinu, vybranú zo skupiny, obsahujúcu -0- a -NR⁹®-, kde R^9a je H, Ci-Ce-alkyl alebo fenyl; so zlúčeninou vzorca

kde R^la, R^2a, R^3a a R^4a sú nezávisle vybrané zo skupiny, obsahujúcej vodík a halogén, a R^1a je C1 alebo Br, počas prítomnosti nejakej silnej bázy, na získanie zlúčeniny vzorca

(b) reakciou zlúčeniny z kroku (a) s (i) POC1₃ na získanie kyanozlúčeniny vzorca

alebo

(c) reakciu tejto kyanozlúčeniny alebo tohto aldehydu s derivátom piperidinu vzorca

MgL

Ô

I kde L je odštepovaná skupina, vybraná zo skupiny, obsahujúcej

C1 a Br, na získanie alebo ketónu alebo alkoholu vzorca:

(d)(i) cyklizáciou tohto ketónu CF3SO3H, na získanie zlúčeniny vzorca

kde prerušovaná čiara predstavuje dvojitú väzbu; alebo (d)(ii) cyklizáciou tohto alkoholu kyselinou polyfosforečnou na získanie intermediátovej zlúčeniny, kde prerušovaná čiara predstavuje jednoduchú väzbu.

Spôsoby na prípravu týchto intermediátových zlúčenín popísané v WO 95/10516, U.S. 5 151 423 a popísané nižšie, využívajú tricyklický ketónový intermediát. Takéto intermediáty vzorca

kde R^llb, R^la, R^2a, R^3a a R^4a sú nezávisle vybrané zo skupiny, obsahujúcej vodík a halogén, môže byť pripravený pomocou nasledujúceho postupu, ktorý zahrnuje:

(a) reakciu zlúčeniny vzorca

(i) s amínom vzorca NHR^5aR^6a, kde R^5a a R^6a sú definované v horeuvedenom postupe; za prítomnosti paládiového katalyzátora a oxidu uhličitého, na získanie amidu vzorca

(ii) s alkoholom vzorca R^10aOH, kde R¹⁰ je nižšie Ci-C6-alkyl alebo C3-C6-cykloalkyl, za prítomnosti paládiového katalyzátora a oxidu uhličitého, na získanie esteru vzorca

OR^10a a ďalej reakciou tohto esteru s aminom vzorca NHR^5aR^6a, na zís kania amidu;

(b) reakciu tohto amidu s benzylovou zlúčeninou, substituovanou jódom vzorca

kde R^la, R^2a, R^3a, R^4a a R^7a sú definované hore, za prítomnosti silnej bázy, na získanie zlúčeniny vzorca

_R3a (c) cyklizáciu zlúčeniny kroku (b) činidlom vzorca R^8aMgL, kde R^8a je Ci-C₆-alkyl, aryl alebo heteroaryl a L je Br alebo Cl, kde sa pred cyklizáciou zlúčeniny, kde je R^5a a R^6a vodík, nechajú reagovať s vhodnou N-blokujúcou skupinou.

(+)-Izoméry zlúčenín vzorca XVI

halogén (XVI) kde X je CH môžu byť pripravené vyššou enantioselektivitou, pri použití postupu, ktorý obsahuje enzýmom katalyzovanú transesterifikáciu. Prednostne sa racemická zlúčenina vzorca

XVI, kde X je C a dvojitá väzba je prítomná, nechá reagovať s enzýmom, ako je ToYobo LIP-300 a nejakým acylačným činidlom, ako je trifluoetylsobutyrát; výsledný (+)-amid je potom hydrolyzovaný, napríklad refluxovaním s nejakou kyselinou, ako je H2SO4, na získanie zodpovedajúceho opticky obohateného (+)izoméru, kde X je CH.

Alternatívne je racemická zlúčenina vzorca XVI, kde X je C a dvojitá väzba je prítomná, najskôr redukovaná na zodpoveda-

júcu racemickú zlúčeninu vzorca XVI, kde X je CH a potom sa na ňu pôsobí enzýmom (Toyobo LIP-300) a nejakým acylačným činid lom, ako je horeuvedené, na získanie (+)-amidu, ktorý je hydrolyzovaný, na získanie zodpovedajúceho opticky obohateného (+)-izoméru.

Zlúčenina príkladu 21 je získaná v kryštalickom stave. Odborníci v odbore pochopia, že zlúčeniny, získané v amorfnom stave môžu byť získané v kryštalickom stave kryštalizáciou amorfných látok z rozpúšťadiel, ako je acetón, dietyléter, etylacetát, etanol, 2-propanol, terc.-butyléter, voda a pod. podľa postupu, v odbore dobre známych.

Odborníci v odbore tiež pochopia, že racemická zmes zlúčeniny

11.0 môže byť vytvorená podľa dolepopisaných postupov. Naprí klad na prípravu zlúčeniny 11.0 môže byť použitý intermediát príkladu 6.

Príprava piperazínových zlúčenín.

Zlúčeniny tohto vynálezu, majúce piperazinový kruh

Br

môžu byť pripravené z tricyklického ketónu :

(XX)

Ketón XX môže byť pripravený oxidáciou zodpovedajúcej pyridylovej zlúčeniny :

(XXI) kyselinou m-chlórperoxybenzoovou

Ketón XX môže byť premenený na zodpovedajúcu C-ll-hydroxyzlúčeninu, ktorá môže byť premenená na zodpovedajúcu zlúčeninu s chlórom v pozícii C-ll.

Zlúčenina XXIII môže potom reagovať s piperazínom na vzniku tohto intermediátu :

Intermediát XXIV môže potom reagovať s tými činidlami, ktoré poskytnú požadovaný konečný produkt.

Horeuvedené reakcie sú v odbore dobre známe a sú objasnené v nasledujúcich príkladoch.

Nasledujúce príklady majú objasňovať tento nárokovaný vynález a nemali by byť chápané ako obmedzujúci popis alebo tento nárokovaný vynález.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Zmiešajte 10 g (60,5 mol) etyl-4-pyridylacetátu a 120 ml bezvodého pri CH3CI2 pri -20°C, pridajte 10,45 g (60,5 mol) MCPBA a miešajte pri -20°C počas 1 hodiny a potom pri 25°C počas 67 hodín. Pridajte ďalších 3,48 g (20,2 mol) MCPBA a miešajte pri 25°C počas 24 hodín. Rozrieďte CH₂C1₂ a premyte nasýteným NaHCO3 (vodným) a potom vodou. Vysušte pomocou MgSO₄, zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, 2%-5,5% (10% NH4OH

v MeOH)/CH₂C1₂) na získanie 8,12 g produktu. Hmôt.spektr.: MH*= 182,15

Krok B :

Zmiešajte 3,5 g (19,3 mol) produktu kroku A, 17,5 ml EtOH a 96,6 ml 10% NaOH (vodného) a túto zmes zohrievajte pri 67°C počas 2 hodín. Pridaním 2 N HC1 (vodné) a upravte pH na 2,37 a zahustite vo vákuu. Pridajte 200 ml bezvodého EtOH, prefil trujte cez celíte® a filtračný koláč premyte bezvodým EtOH (2 x 50 ml). Zahustite zmiešané filtráty vo vákuu na získanie 2,43 g cielovej zlúčeniny.

Príklad 2 o

>(CHgJgC·— O

I₂H

Cieľová zlúčenina bola pripravená postupom, popísaným v PCT

International Publication No. WO 95/10516.

H

i

CO₂Et

Zmiešajte 14,95 g (39 mol) 8-chlór-ll-(l-etoxykarbonyl-4piperidinyl)-llH-benzo[5,6]cyklohepta[1,2-b]-pyridínu a 150 ml

CH2CI2, potom pridajte 13,07 (42,9 mol) (nBu)4NNO3 a túto zmes ochlaďte na 0°C. Pomaly (po kvapkách), počas 1,5 hodiny, pridávajte roztok 6,09 ml (42,9 mol) TFAA v 20 ml CH2CI2. Zmes udržiavajte počas noci na 0°C a potom ju postupne premyte nasýteným NaHCCh (vodným), vodou a roztokom NaCl. Tento organický roztok vysušte pomocou Na2SO4, zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, EtOAc/hexánový gradient) na získanie 4,32 g a 1,90 g dvoch produktov 3A(i) a 3A(ii).

Hmôt.spektrum pre zlúčeninu 3A(i) : MH⁺= 428,2.

Hmôt.spektrum pre zlúčeninu 3A(ii) : MH⁺ = 428,3.

Krok B:

Zmiešajte 22 g (51,4 mol) produktu 3A(i) kroku A, 150 ml 85%

25,85 g (0,463 mol) Fe prášku a 2,42 g (21,8 počas noci pod spätným chladičom. PriFe prášku a

EtOH (vodného), mol) CaC12 a zohrievajte dajte 12,4 g (0,222 mol) a zohrievajte pod spätným chladičom ďalších 12,4 g (0,222 mol) Fe prášku

1,2 g počas a 1,2 (10,8 mol) CaCl₂ ml hodín. Pridajte g (10,8 mol) CaC12 ml a zohrievajte pod spätným chladičom počas ďalších 2 hodín. Túto horúcu zmes prefiltrujte cez celite®, tento celíte® premyte 50 ml horúceho EtOH a filtrát zahustite vo vákuu. Pridajte 100 ml bezvodého EtOH, zahustite a chrómatografujte (silikagél, MeOH/CH₂Cl₂ gradient) na získanie 16,47 g produktu.

MH⁺ = 398.

Krok C:

Zmiešajte (vodné) a

16,47 ochlaďte na g (41,4 mol) -3°C.

potom pomaly (po produktu kroku B a 150 ml 48% HBr Pomaly (po kvapkách), pridajte 18 kvapkách), pridajte roztok 8,55 g ml brómu, (0,124 mol) NaNO₂ v 85 ml vody. Miešajte počas 45 minút pri -3 až 0°C a potom upravte pH na 10, pridaním 50% NaOH (vodného). Extrahujte EtOAc, extrakty premyte roztokom mocou NažSO<. Zahustite a chrómatografujte Ac/hexánový gradient) na získanie 10,6 g a duktov 3C(i) Hmôt.spektr. Hmôt.spektr.

NaCl a vysušte po(silikagél, EtO3,28 g dvoch proa 3C(ii).

zlúčeninu pre pre zlúčeninu

3C(i) : MH* = 461,2. 3C(ii) : MH⁺ = 539.

Hydrolyzujte produkt 3C(i) kroku C rozpustením v koncentrovanej HC1 a zohriatím na asi 100°C počas 16 hodín. Zmes ochlaďte a potom ju neutralizujte 1 M NaOH (vodným). Extrahujte CH2CI2, extrakty vysušte pomocou MgSO_4r prefiltrujte a zahustite vo vákuu na získanie cieľovej zlúčeniny.

Hmot.spektr. : MH⁺ = 466,9.

Príklad 4

Krok A:

Zmiešajte 25,86 g (55,9 mol) etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3 bróm-5,6- dihydro- HH-benzo[5,6]cyklohepta[1,2-b]-pyridin-11 ylidén)-1-piperidin-l-karboxylovej a 250 ml koncentrovanej H2SO₄, pri -5°C, potom pridajte 4,8 g (56,4 mol) NaNO₃ a mie šajte počas 2 hodín. Túto zmes prilejte k 600 g ľadu a alkalizujte ju pridaním koncentrovaného NH₄OH (vodného). Zmes prefiltrujte a premyte 300 ml vody, potom extrahujte 500 ml CH2CI2. Exrakt premyte 200 ml vody, vysušte pomocou MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél,

EtOAc/CH₂Cl₂ gradient) na získanie 24,4 g (výťažok 86%) produk tu.

m.p. = 165-176^eC, hmot.spektr. : MH⁺= 506 (Cl) .

Prvková analýza : vypočítané -C-52,13;H-4,17;N-8,29 zistené -C-52,18;H-4,51;N-8,16.

Krok B:

Zmiešajte 29 g (40,5 mol) produktu kroku A a 200 ml koncentro vanej H₂SOí pri 20^eC, potom zmes ochlaďte na 0°C. K tejto zmesi pridajte 7,12 (24,89 mol) 1,3-dibróm-5,5-dimetylhydantoinu a miešajte počas 3 hodin pri 20°C. Ochlaďte na 0°C, pridajte ďalší 1 g (3,5 mol) dibrómhydantoinu a miešajte pri 20°C počas hodín. Túto zmes pridajte do 400 g ladu a zvýšte pH pridaním koncentrovaného NH₄OH (vodného) pri 0°C a výslednú pevnú látku sústreďte filtráciou. Premyte ju 300 ml vody, suspendujte v

200 ml acetónu a prefiltrujte, na získanie 19,79 g 85,6%) produktu.

m.p. = 236-237°C hmot.spektr.: MH⁺= 584 (Cl).

(výťažok

Prvková analýza: vypočítané-C-45,ll;H-3,44;N-7,17 zistené-C-44,95;H-3,57;N-7,16.

Zmiešajte 25 g (447 mol) Fe náplne, 10 g (90 mol) CaCl₂ a suspenziu 20 g (34,19 mol) produktu kroku B v 700 ml zmesi EtOH /voda (90:10) pri 50°C. Túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom počas noci, prefiltrujte cez celíte® a filtračný koláč premyte 2x200 ml horúceho EtOH. Spojte filtrát a premytie a zahustite vo vákuu. Extrahujte 600 ml CH2CI2, premyte 300 ml vody a vysušte pomocou MgSO«. Prefiltrujte a zahustite vo vákuu, potom chrómatografujte (silikagél, 30 EtOAc/CH2Cl₂) na získanie 11,4 g (výťažok 60%) produktu.

m.p. = 211-212°C hmôt.spektr.: MH⁺ = 554 (Cl).

Prvková analýza : vypočítané-C-47,55;H-3,99;N-7,56 zistené-C-47,45;H-4,31;N-7,49.

Pomaly (po častiach), pridávajte 20 g (35,9 mol) produktu kroku C k roztoku 8 g (116 mol) NaNO₂ v 120 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) pri -10°C. Výslednú zmes miešajte pri 0°C počas 2 hodín, potom pomaly (po kvapkách), pri 0°C, počas 1 hodiny, pridávajte 150 ml (1,44 mol) 50% H3PO4. Túto zmes miešajte pri 0°C počas 3 hodín, potom ju pridajte k 600 g Iadu a alkalizujte pridaním koncentrovaného NH<OH (vodného). Extrahujte 2x300 ml

CH₂C1₂, extrakty vysušte pomocou MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, 25% EtOAc/hexán) na získanie 13,67 g (výťažok 70%) produktu.

m.p. = 163-165^eC hmot.spektr.: MH* - 539 (Cl) . Prvková analýza: vypočítané-C-48,97;H-4,05;N-5,22 zistené-C-48,86;H-3,91;N-5,18.

Zmiešajte trovanej ochlaďte, trovaného

6,8

HC1

g (12,59 mol) produktu kroku (vodnej) a miešajte počas noci nalejte na 300 g ladu a alkalizujte NH4OH (vodného). Extrahujte 2x300 ml

100 ml koncenpri 85 °C. Zmes pridaním koncenCH2CI2, extrakty potom vysušte pomocou MgSOí. Prefiltrujte a zahustite vo vákuu, potom chrómatografujte (silikagél, 10% MeOH/EtOAc + 2% NH₄OH (vodný) na získanie 5,4 (výťažok 92%) produktu.

m.p. = 172-174°C hmot.spektr.: MH⁺- 467.

φ Prvková analýza: vypočítané-C-48,69;H-3,65;N-5,97 zistené-C-48,83;H-3,80;N-5,97.

Príklad 5

O^OEt

Hydrolyzujte 2,42 g etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3-bróm-5,6 dihydro-llH-benzo[5,6]cyklohepta[l,2—b]-pyridín-11- ylidén)-!

piperidín-1-karboxylovej podlá v podstate rovnakého postupu

ako je ten, ktorý je popísaný v kroku D príkladu 3, na získanie 1,39 g (výťažok 69% produktu).

MH⁺ = 389.

Zmiešajte 1 g (2,48 mol) produktu kroku A a 25 ml bezvodého toluénu, pridajte 2,5 ml 1 M DIBAL v toluéne a túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom. Po pol hodine pridajte ďalšie 2 ml 1 M DIBAL v toluéne a zohrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny. (Reakcia je sledovaná pomocou TLC, pri použití 50% MeOH/CH2C12+NH₄OH (bezvodý) . Zmes ochlaďte na izbovú teplotu, pridajte 1 N HC1 (vodnú) a miešajte 5 minút. Pridajte 100 ml 1 N NaOH (vodného) a potom extrahujte EtOAc (3x150 ml). Ex trakty vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite vo vákuu na získanie 1,1 g cielovej zlúčeniny.

MH* = 391.

CH3CN

D príkladu 4 s roztoa vody (212,64 ml CH₃CN a 70,8 ml vody) a miešajte počas noci pri izbovej teplote.

(0,153 mol) NalO« a potom 0,31 g (2,30 izbovej teplote produktu kroku výsPrimol) (pridanie RUO2 je sprevádzané teploty z 20°C na 30°C) . Túto (teplota asi po 30 min. znova potom ju prefiltrujte za účelom odstránenia

Zmiešajte kom (3:1) lednú suspenziu dajte 32,833 g a miešajte pri exotermnou reakciou a zvýšením zmes miešajte počas 1,3 hodiny klesne na 25°C), pevných látok a tie premyte CH2CI2. Filtrát a rozpusťte v CH₂C1₂. Prefiltrujte za účelom zahustite vo vákuu odstránenia nerozpúštnych pevných látok a tie premyte CH₂C1₂. Filtrát premyte vodou, zahustite na objem asi 200 ml a premyte lúhom a potom vodou. Extrahujte 6 N HC1 (vodnou). Vodný extrakt ochlaďte na 0°C a pomaly pridávajte 50% NaOH (vodný), za účelom upravenia

pH na 4, a pritom udržuje teplotu nižšiu ako 30°C. Extrahujte dvakrát CH2CI2, vysušte pomocou MgSO« a zahustite vo vákuu. Zvyšok suspendujte v 20 ml EtOH a ochlaďte na 0°C. Sústreďte výsledné pevné látky filtráciou a vysušte vo vákuu, na získanie 7,95 g produktu. ^XH NMR (CDC1₃, 200 Mhz) : 8,7 (s, 1H); 7,85 (m,

6H);7,5(d,2H);3,45(m,2H);3,15(m,2H).

Príklad 7

Krok A:

Zmiešajte 15 g (38,5 mol) etylesteru kyseliny 4-(8-chlór-3 bróm-5,6-dihydro-llH-benzo[5,6]cyklohepta[1,2-b]-pyridín-ll-y lidén)-1-piperidín-l-karboxylovej a 150 ml koncentrovanej H2SO4 pri -5°C, potom pridajte 3,89 g (38,5 mol) KNO3 a miešajte po-

čas 4 hodín. Túto zmes prilejte k 3 1 ľadu a alkalizujte ju pridaním 50% NaOH (vodného). Extrahujte CH2CI2 vysušte pomocou

MgSO₄, potom prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Zvyšok pre kryštalizujte z acetónu, na získanie 6,69 g produktu.

^XH NMR(CDC1₃,200Mhz) :8,5(s,lH) ;7,75(s,lH) ;7,6(s,lH) ;7,35(s,lH) ;

4,15(q,2H);3,8(m,2H);3,5-3,1(m,4H);3,0-2,8(m, 2H);2,6-2,2(m,4H) ;l,25(t,3H) .

MH⁺ = 506.

Zmiešajte 6,69 g (13,1 mol) produktu kroku A a 100 ml 85% roztoku EtOH/voda, potorr, pridajte 0,66 (5,9 mol) CaCl₂ a 6,56 g (117,9 mol) Fe a túto zmes zohrievajte počas noci pod spätným chladičom. Horúcu reakčnú zmes prefiltrujte cez celíte® a filtračný koláč premyte horúcim EtOH. Filtrát zahustite vo vákuu r.d získanie 7,72 g produktu.

Hmôt.spektr.: ΜΗ* = 476,0.

Krok C:

Zmiešajte 7,70 g produktu kroku B a 35 ml HOAc, potom pridajte

ml roztoku Br₂ v HOAc a túto zmes miešajte počas noci pri izbovej teplote. Pridajte 300 ml 1 N NaOH (vodného), potom 75 ml 50% NaOH (vodného) a extrahujte EtOAc. Extrakt vysušte po mocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, 20% EtOAc/hexán) pri vzniku 3,47 g produktu (spoločne s ďalšími 1,28 g čiastočne purifikovaného produktu).

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 554.

^JH NMR (CDC1₃, 300 Mhz):8,5(s,1H);7,5(s,1H);7,15(s,1H);4,5 (s, 2H); 4,15 (m, 3H);3,8(br s,2H);3,4-3,1(m, 4H);9-2,75(m,1H);2,72,5(m,2H);2,4-2,2(m,2H);1,25(m,3H).

Zmiešajte 0, 557 g (5,4 g mol) dusitanu t-butylnatého a 3 ml DMF a túto zmes zohrievajte pri 60-70°C. Pomaly (po kvapkách), pridajte zmes 2,00 g (3,6 mol) produktu kroku C a 4 ml DMF, potom zmes ochlaďte na izbovú teplotu. Pridajte ďalších 0,64 ml dusitanu t-butylnatého pri 40°C a zmes znova zohrejte na 6C-7C°C na doba 30 min. Ochlaďte na izbovú teplotu a prilejte túto zmes k 150 ml vody. Extrahujte CH2CI2, vysušte pomocou MgSOí a zahustite vo vákuu. Chromatografujte (silikagél, 10-20% EtOAc/hexán) na získanie 0,74 produktu.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 539.

NMR(CDC1₃, 200Mhz) : 8,52 (s, 1H) ; 7,5 (d, 2H) ; 7,2 (s, 1H); 4,15 (q, 2H) ;

3, 9-3,7(m, 2H);3,5-3,1(m,4H);3,0-2,5(m,2H);2, 4-2,2(m,2H)2,1-1,9 (m,2H);l,26(t,3H).

Zmiešajte 0,70 g (1,4 mol) produktu kroku D a 8 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) a zohrievajte počas noci pod spätným chladičom. Pridajte 30 ml 1 N NaOH (vodného), potom 5 ml 50% NaOH

(vodného) a extrahujte	CH2CI2.	Extrakt	vysušte	pomocou MgSOí
a zahustite vo vákuu na	získanie	0, 59 g	cielovej	zlúčeniny.
Hmôt.spektr.: MH+ = 467
m.p. = 123,9-124,2°C.

Príklad 8

Krck A :

Pripravte roztok 8,1 g cieľovej zlúčeniny príkladu 7 v toluéne a pridajte 1 M roztok DIBAL v toluéne. Túto zmes zohrievajte pod spätným chladičom a pomaly (po kvapkách), pridávajte ďalších 21 ml 1 M roztoku DIBAL/toluén počas 40 min. Reakčnú zmes ochlaďte na asi 0°C a pridajte 700 ml 1 M HC1 (vodnej). Oddeľte a odložte organickú fázu. Vodnú fázu premyte 0Η₂01₂ a ex-

trakt odložte, potom vodnú fázu alkalizujte pridaním 50% NaOH (vodného). Extrahujte CH2CI2, vysušte pomocou MgSO₄ a zahustite vo vákuu na získanie 7,30 g cieľovej zlúčeniny, ktorá je race mickou zmesou enantiomérov.

MH⁺ = 469.

Krok B - oddelenie enantiomérov

kroku B rozdelená preparatívnou

Racemická zlúčenina chiráInou chrómatografiou (Chiralpack AD, kolóna 5 cm x 50 cm, pri použití 20% iPrOH/hexánu+O,2% dietylamínu), počas vzniku (+)enantioméru a (-)-enantioméru cieľovej zlúčeniny.

Fyzikálne chemické údaje pre (+)-enantiomér: m.p. - 148,8°C. Hmôt.spektr. : MH* = 469; [a]_D ²⁵ - +65, 6° (112, 93 mg/2ml MeOH). Fyzikálno chemické údaje pre (-)-enantiomér: m.p. = 112°C.

Hmôt. spektr. : MH⁺= 469; [a]_D ²⁵ = -65,2° (3,65 mg/2ml MeOH).

Zmiešajte a ochlaďte na (0,124 mol) východzieho ketónu a 200 ml H2SO4

0°C. Počas 1,5 hodiny pomaly pridávajte 13,78 g (0,136 mol) KNO3, potom počas noci. Reakčnú zmes nakého postupu, ako je príkladu 4.

hexán. Potom 100% EtOAc) pri spoločne s menším množstvom 7-nitro- a 9-nitrozlúčeniny.

zohrejte na izbovú teplotu a miešajte spracujte pri použití v podstate rovten,

Chrómatografujte ktorý bol popísaný v kroku A, (silikagél,20%,30%,40%,50%,EtOAc/ získaní 28 g 9-nitrozlúčeniny, 7-nitrozlúčeniny a 19 g zmesi

ME⁺ (9-nitro) - 367.

Krok B:

reagovať 28 g (76,2 mol) a

Nechajte

400 ml 85% roztoku EtOH/voda, 3,8 g (0,685 mol) Fe, pri použití v podstate rovnakého bol je ten, ktorý g

MH⁺ = produktu.

337.

popísaný v kroku C,

9-nitrozlúčeniny kroku A, (34,3 mol) CaC12 a 38,28 g postupu, ako získanie príklad 4, na

140

kroku

Zmiešajte a počas 20 v 10 ml HOAc. Túto reakčnú mol) produktu min. pridávajte pomaly roztok 2,95 zmes miešajte pri izbovej

Pridajte CH₂C1₂ a vodu, potom 50%

8-9. Premyte organickú fázu vodou,

Zahustite vo ml HOAc teplote, potom zahustite vo vákuu.

NaOH (vodným) upravte pH na potom roztokom NaCl a vysušte pomocou Na₂SO4. vákuu na získanie 11,3 g produktu.

^XH NMR (CDC1₃,200Mhz);8,73(d,1H);7,74(d,1H);7,14(s,1H);4,63(s, 2H);3,23-3,15(m,2H);3,07-2,98(m,2H).

Ochlaďte 100 ml koncentrovanej HC1 (vodnej) na 0°C, potom pri48 dajte 5,61 g (31,4 mol) NaNO₂ a miešajte počas 10 minút. Pomaly (po častiach), pridajte 11,3 g (27,1 mol) produktu kroku C a túto zmes miešajte pri 0^eC-3°C počas 2,25 hodín. Pomaly (po kvapkách), pridajte 180 ml 50% HjPO« (vodné) a nechajte túto zmes stáť počas noci pri 0°C. Počas 30 minút pomaly (po kvapkách), pridávajte 50% NaOH, za účelom upravenia pH na 9, potom extrahujte CH₂C1₂. Extrakt premyte vodou, potom roztokom NaCl a vysušte pomocou Na₂SO₄. Zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, 2% EtAc/CH₂Cl₂) na získanie 8,6 g produktu.

MH⁺ = 399,9.

NMR (200 Mhz, CDC1₃, ) : 8,75(d, 1H);7,77(d,1H);7,56(d,1H);7,21

(d,lH) a 3,3-3,3(m,4H).

Príklad 10

Racemická rovnako ako (+)- a (-)-enantioméry

Krok A:

Zmiešajte 13 g (33,3 mol) delovej zlúčeniny kroku D príkladu a 300 ml toluénu pri 20°C, potom pridajte 32,5 ml (32,5 mol)

M DIBAL v toluéne. Túto zmes zahrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny, ochlaďte na 20°C, pridajte ďalších 32,5 ml 1 M roztoku DIBAL a zohrievajte pod spätným chladičom počas 1 hodiny. Zmes ochlaďte na 20°C a prilejte do zmesi 400 g ľadu, 500 ml EtOAc a 300 ml 10% NaOH (vodného) . Vodnú vrstvu extrahujte CH2CI2 (3x200 ml), organickej vrstvy vysušte pomocou MgSO« a potom zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, 12% MeOH/CH₂C12+4% NH4OH) na získanie 10,4 g cieľovej zlúčeniny ako racemátu.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 469 (FAB).

Čiastočná ^XH NMR (CDC1₃, 400 Mhz):8,38(s,1H)i 7,57(s,1H);7,27;

(d,1H);7,06(d,1H) a 3,95(d,lH).

Krok B - oddelenie enantiomérov:

Racemická zlúčenina kroku A bola rozdelená preparátnou chirálnou chrómatografiou (Chiralpack AD, kolóna 5 cm x 50 cm, pri použití 5% iPrOH/hexánu+0,2% dietylamínu), na získanie (+)enantioméru a (-)-enantioméru cieľovej zlúčeniny.

Fyzikálno chemické údaje pre (+)-enantiomér:

Hmôt.spektr.: MH* = 469 (FABS); [a] _D ²⁵ = +43,5°(c=0,402, EtOH) . Čiastočná ^ΧΗ NMR (CDC1₃, 400Mhz):8,38(s,1H);7,57(s,1H);7,27;(d, 1H);7,05(d,lH) a 3,95(d,lH).

Fyzikálno chemické údaje pre (-)-enantiomér:

Hmot.spektr.: MH⁺ = 4 69(FAB);[a] _D“ = -41,8°(c=0,328 EtOH). Čiastočná ¹H NMR ÍCDCI3, 400 Mhz) :8,38(s, IH);7,57(s,IH);7,27;

(d,lH);7,05(d,lH) a 3,95(d,lH).

Rozpusťte ml dm:

zlúčeniny príkladu 3

1,160 , miešajte pri izbovej teplote a pridajte 0,3914 4-metylmorfolínu, 0,7418 g (3,87 mol) DEC, 0,5229

HOBT a 0,8795 g (8,37 mol) kyseliny 1-N-t-butoxykarbonyl-piperidinyl-4-octovej. Túto zmes miešajte pri izbovej teplote 2 dni, potom zahustite vo vákuu a zvyšok rozdeľte me dzi CH2CI2 a vodu. Organickú fázu premyte postupne nasýteným NaHCO3 (vodným), 10% NaH₂PO₄ (vodným) a roztokom NaCl. Organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, 2% ΜθΟΗ/ΟΗ₂Ο1₂+ΝΗ_}) na ziskar.ie 1,72 g produktu.

rn.p. -- 94,0-94,ú°C.

Hmôt.spektr.: ΜΗ* = 614.

Prvková analýza: vypočítané-C-60,54;H-6,06;N-6,83 zistené-C-59,93,45;H-6,62;N-7,45.

Zmiešajte 1,67 g

(2,7 mol) produktu kroku A a 20 ml CH2CI2 a miešajte pri 0°C. Pridajte 20 ml TFA, zmes miešajte počas 2 hodín, potom alkalizujte 1 N NaOH (vodným). Extrahujte CH2CI2, organickú fázu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite vo vákuu pri vzniku 1,16 g produktu.

m.p. = 140,2-140, 8°C.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 514.

Krok C:

Zmiešajte 0,50 g produktu kroku B, 20 ml CH2CI2, a 4,5 ekvivalentov (CII3) 3 SinCO a miešajte pri izbovej teplote počas 3 hodín. Túto zmes extrahujte nasýteným NaHCO3 (vodným) a organickú fázu vysušt.o pomocou MgSO₄. Prefiltrujte a zanjs*.ite vo vákuu na získanie hrubého produktu. Tento hrubý produkt chrómatogra fujte (silikagél, 5% MeOH/CH₂Cl₌+NH₃) na získanie 0,26 g pro duktu .

m.p. = 170,2-170,5°C.

Hmôt.spektr. : MH⁺ = 557.

Zmiešajte 0,5 g (1,06 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 4, 0,4 g (2,61 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 1, 5 ml bezvodého DMF a 0,5 ml (4,53 mol)4-metylmorfolínu pri 0°C, potom pridajte 0,6 g (3,12 mol) DEC a 0,4 g (2,96 mol) HOBT a túto zmes miešajte počas noci pri 20°C. Zahustite vo vákuu a extrahujte CH2CI2 (2x50 ml). Extrakty premyte 25 ml vody, vysušte pomocou MgSO_4f potom zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, 10% MeOH/EtOAc+2%NH₄OH (vodný) na získanie 0,6 g (výťažok

93,7%) cieľovej zlúčeniny.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 602 (FABS).

Čiastočná NMR (CDCI3, 300 Mhz):8,48(s,1H);8,16(d,2H);7,61;

(s,1H);7,29(m,1H);7,18(d,2H);7,04(d,1H);3,71(s,2H).

Prvková analýza : vypočitané-C-48,81;H-4,10;N-6, 57 zistené-C-49,10;H-3,79;N-6,74.

Rozpusťte 5,9 g (9,78 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 12 v 300 ml CH₂C12/EtOAc (1:5) pri 0°C. Pomaly (po kvapkách), pridajte 3 ml 4 N HC1 (vodné) a túto zmes miešajte pri 0°C počas 5 minút. Pridajte 200 ml Et₂O, sústreďte pevné látky filtráciou a premyte ich 50 ml Et₂O. Vysušte ich pri 20°C a 0,2 mm Hg na získanie 5,9 g (výťažok 96%) cieľovej zlúčeniny.

Hmôt.spektr.: MH⁺= 602 (FABS).

Čiastočná ^XH NMR (DMS0-d₆, 300 Mhz):δ 8,66 (d,2H); 8,51 (s,lH); 7,95; (s,lH);7,67(d,2H);7,47(m,1H);7,15(m,1H);3,99(s,2H). Prvková analýza : vypočítané-C-48,77;H-3,62;N-6,56 zistené-C-48,34;H-3,95;N-6,84.

Príklad 14

Zmiešajte O,5C1 g (2,28 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 5 a 20 ml bezvodého DMF, potom pridajte 0,405 g (1,664 mol) kyseliny l-N-butoxykarbonylpiperidinyl-4octovej, 0,319 g (1,664 mol)DEC, 0,225 g (1,664 mol)HOBT a 0,168 g (1,664 mol) 4-metylmorfolinu a túto zmes miešajme počas noci pri izbovej teplote. Túto zmes zahustite vo vákuu a zvyšok rozdeľte medzi 150 ml CH2CI2 a 150 rr.l nasýteného NaHCC>3 (vodného). Vodnú fázu extrahujte ďalšími 150 ml CH₂C1₂. Organickú fázu vysušte pomocou

MgSOí a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (silikagél, 500 ml hexánu, 111% MeOH/CH2C12+0,1% NH4OH (vodný), potom 112% MeOH/

CH₂C1₂+O,1% NH4OH (vodný) na získanie 0,575 g produktu.

m.p. = 115°C-125°C. Hmôt.spektr.: MH⁺= 616.

Zmiešajte 0,555 g (0,9 mol) produktu kroku A a 15 ml CH₂C1₂ a túto zmes ochlaďte na 0°C. Pridajte 15 ml TFA a miešajte pri 0°C počas 2 hodín. Zahustite vo vákuu pri 40-45°C a zvyšok rozdeľte medzi 150 ml CH2CI2 a 100 ml nasýteného NaHCO3 (vodného) . Vodnú vrstvu extrahujte 100 ml CH2CI2, spojte extrakty a vysušte ich pomocou MgSO4- Zahustite vo vákuu na získanie

0,47 g produktu.

ir..p.= 140°C-150°C.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 516.

Zmiešajte 0,449 g (0,87 mol) produktu kroku B, 20 ml CH₂C1₂ a 0,501 g (0,59 mol) (CH₃)₃SiNCO a miešajte počas noci pri izbovej teplote. Pridajte 50-75 ml nasýteného NaHCO₃ (vodného)

a miešajte počas 0,5 hodiny. Rozrieďte CH₂C1₂ oddeľte vrstvy a vodnú vrstvu extrahujte 2x100 ml CH₂C1₂. Spojené extrakty vy sušte pomocou MgSCU a zahustite vo vákuu. Chrómatografujte (si— likagél, 500 ml hexánu, 111% MeOH/CH₂Cl₂+0,1% NH₄OH; 112% MeOH/CH₂C1₂+0,2% NH4OH; potom 3% MeOH/CH₂Cl₂+0, 3% NH₄OH) na získanie 0,33 g cieľovej zlúčeniny.

m.p. = 145°C-155°C.

Hmot.spektr.: MH⁺ = 559.

Nechajte reagovať cieľovú zlúčeninu príkladu 7 a cieľovú zlúčeninu príkladu 1, pri použití v podstate rovnakého postupu ako je ten, ktorý bol popísaný v príklade 12, na získanie 0,25 g cieľovej zlúčeniny, ktorá je racemickou zmesou atropisomórov.

Hmôt.spektr.: ΜΗ* - 602.

m.p. = 167,2°C-167,8°C.

Sol HC1 cieľovej zlúčeniny príkladu 15 je pripravená miešaním počas 1 hodiny s HC1/CH₂C1₂ a potom zahustením vo vákuu pri vzniku soli.

Príklady 16A a 16B

Príklad 16A Príklad 16B

Cieľová zlúčenina príkladu 15 je racemickou zmesou atropisomérov. Tieto atropisoméry sú oddelené preparátnou chrómatografiou (HPLC), pri použití kolóny Chiralpack AD (5 cm x 50 cm) a 40% iPrOH/hexánu+0,2% dietylamínu ako mobilnej fázy, pri získaní jednotlivo ( + ) a (-)-enantiomérov, príkladov 16B a 16A.

Fyzikálno chemické údaje pre (-)-enantiomér, príklad 16A:

m.p. = 114,2°C-114,8°C; [ct]_D ²⁵ = -154,6° (8,73 mg/2 ml MeOH) .

Fyzikálno chemické údaje pre (+)-enantiomér, príklad 16B:

m.p. = 112,6°C-113, 5°C; [a]_D ²⁵ = +159, 7° (10,33 mg/2 ml MeOH).

Príklad 17

Krok A:

Nechajte reagovať 6,0 g (12,8 mol) cieľovej zlúčeniny príkladu 7 s 3,78 g (16,6 mol) kyseliny 1-N-t-butoxykarbonyl-piperidinyl-4-octovej, pri požití v podstate rovnakých postupov ako sú tie, ktoré boli popísané pre krok A príkladu 14, na získanie 8,52 g produktu.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 692(FAB).

^XH NMR (CDC1₃, 200 Mhz):8,5(d,lH);7,5(d,2H);7,2;(d,lH);4,153,9(m, 3H); 3, 8-3, 6 (m, 1H);3,5-3,15(m,3H);2,9(d,2H); 2,8-2,5(m,4H) 2,4-1,8(m,6H);1,8-1,6(br d,2H);1,4(s,9H);1,25-1,0(m,2H).

Zmiešajte 8,50 g produktu kroku A CH2CI2, potom ochlaďte na 0°C a pridajte 50 ml TFA. Túto zmes miešajte pri 0°C počas 3 hodín, potom pridajte 500 ml 1 N NaOH (vodného) a nasledovne 30 ml 50% NaOH (vodného). Extrahujte 0Η₂01₂, vysušte pomocou MgSO₂ a zahustite vo vákuu, na získanie 7,86 g produktu.

Hmôt.spektr.: MH⁺= 592 (FAB).

^XH NMR (CDCI3, 200Mhz):8,51(d,1H);7,52(d,2H);7,20;(d,1H);4,13, 95 (m, 2H) ; 3, 8-3, 65 (m, 2H) ; 3, 5-3, 05 (m, 5H); 3, 0-2, 5 (m, 6H); 2, 4-1,8 (m,6H);l,4-l,l(m,2H).

Nechajte reagovať 7,80 g (13,1 mol) produktu kroku B s 12,1 g (105 mol)(CH₃) ₃SiNCO, pri použití v podstate rovnakého postupu ako je ten, ktorý bol popísaný pre krok C príkladu 14, na získanie 5,5 g cieľovej zlúčeniny, ktorá je racemickou zmesou atrcpisomárov.

m.p. = 163,6°C-164,0°C.

Hmôt.spektr.: MH⁺= 635 (FAB).

^XH NMR (CDCI3, 200 Mhz): 8,5(d,1H);7,52(d,1H);7,48;(d, 1H); 7,21 (d, 1H); 4,54(s, 2H); 4,1-3,6(m,4H);3,45-3,15(m,4H);3,0-2,5(m,5H);

2, 45-1,6 (m, 7H); 1,4-1,0 (m, 2H) .

Príklad 18B

Cieľová zlúčenina príkladu 17 je racemickou zmesou atropisomé rov. Tieto atropisoméry sú oddelené preparátnou chrómatogra-

fiou (HPLC), pri použití kolóny Chiralpack AD (5cm x 50 cm) a 20% iPrOH/hexánu+0,2% dietylamínu ako mobilnej fázy, pri prietokovej rýchlosti lOOml/min., na získanie jednotlivo (+) a (-)

-enantiomérov, príkladov 18A a 18B.

Fyzikálno chemické údaje pre (-)-enantiomér, príklad 18A: m.p. = 142, 9°C-143, 5°C; [a]d²⁵ = -151,7° (11,06 mg/2 ml MeOH) .

Fyzikálno chemické údaje pre (+)-enantiomér, príklad 18B: m.p. = 126, 5°C-127, 0 “C; [a] d²⁵ = +145, 6° (8,38 mg/2 ml MeOH).

Príklad 19

Zmiešajte 3,32 g (+)-enantioméru cielovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 a 2,38 g cielovej zlúčeniny príkladu 1, 1,92 g

HOBT, 2,70 g DEC, 156 ml N-metylmorfolinu a 50 ml bezvodého DMF a miešajte pri 25°C počas 24 hodín. Zahustite vo vákuu, potom rozrieďte CH2CI2. Premyte 1 N NaOH (vodným), potom nasýteným NaH₂PO₄ (vodným) a vysušte pomocou MgSO₄. Zahustite vo vákuu a chrómatografujte (silikagél, 2% MeOH/CH₂Cl₂+NH₄OH) na získanie 3,82 g cielovej zlúčeniny.

Hmôt.spektr.: MH* = 604 (FAB).

Sol kyseliny chlorovodíkovej bola pripravená rozpustením cieľovej zlúčeniny príkladu 19 v vodíkom. Zahustením vo vákuu dichlórmetane, nasýtenom chlórobola získaná cieľová zlúčenina príkladu 19 ako sol HC1.

(9,9 mg/2 ml

MeOH).

Príklady 20A a

20B

m.p. = 166,5°C;[a]_D

Príklad 20B

Pri kláti 20A (-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 (3,38 g) sa nechá reagovať s 2,20 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, podľa v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný pre príklad 19, na získanie 3,58 g cieľovej zlúčeniny príkladu 20A.

Sol HC1 cieľovej zlúčeniny príkladu 20A bola pripravená rozpustením tejto cieľovej zlúčeniny v CH2CI2, pridaním 6M HC1 (g) v CH₂C1₂, potom zahustením vo vákuu, na získanie tejto soli.

m.p. = 129°C; [aj_D ²⁵ = -72,3° (3,32 mg/2 ml MeOH) .

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 sa nechá reagovať s 2,20 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1, podľa v podstate

rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný v príklade 20A, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 20B.

m.p. = 145,0°C.

Príklad 21

kroku B príkladu 8 s 1,37 g kyseliny 1-N-t-butozykarbor.yl-pibl peridinyl-4-octovej, pri pcužiti v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný v kroku A príkladu 14, na získanie 2,78 g produktu.

Hmôt.spektr. : MH⁺=694,0° (ΕΆΒ); [a] _D ²⁵ =+34,1°(5,45mg/2 ml MeOH) .

Upravte 2,78 g produktu kroku A podlá v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný v kroku B príkladu 17, na získanie 1,72 g produktu.

m.p. = 104,1°C.

Hmôt.spektr.: MH⁺= 594; [a]_D ²⁵ = +53, 4° (11,42 mg/2 ml MeOH).

Krok C:

Upravte 1,58 g produktu kroku B 6 ml (CH3)₃SiNCO, pri použití v podstate rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný pre krok C príkladu 14, na získanie 1,40 g cielovej zlúčeniny, m.p. = 140°C.

Hmôt.spektr.: MH* 627; [a]_n ²⁵ - t49,l° (4,24 mg/2ml MeOH). Prekryštaližujte z acetónu na získanie cielovej zlúčeniny ako pevnej látky.

Príklady 22A a 22B

Príklad 22A

Príklad 22B (-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 8 (3,38 g) bol premenený na cieľovú zlúčeninu (príkladu 22A) v podstate

rovnakým postupom, ktorý bol popísaný pre kroky A-C príkladu

21, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 22A.

m.p. = 152°C.

Hmot.spektr.: MH⁺= 637; [a]_D ²⁵ = -62,5° (1,12 mg/2ml MeOH) .

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 bola premenená na cieľovú zlúčeninu (príkladu 22B) v podstate rovnakým postupom, ktorý bol popísaný pre kroky A-C príkladu 10, na získanie cieľovej zlúčeniny príkladu 22B.

m.p. = 111°C.

Príklad 23

Krok A:

Nechajte reagovať 1,35 g H)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 s 1,4 g kyseliny l-N-t-butozykarbor.yl-pl peridinyl-4-octovej a ďalej postupujte v podstate podlá rovnakého postupu, ktorý bol popísaný v kroku A príkladu 14, na získanie 2,0 g produktu.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 694,0 (FAB),

Čiastočná NMR (CDC1₃, 300 Mhz): 8,38(s,lH); 7,60{s,lH); 7,25 (d,1H);7,05(m,1H);l,45(s,9H).

Krok B :

Upravte 1,95 g produktu kroku A v podstate rovnakým postupom, ktorý bol popísaný pre krok B príkladu 17, na získanie 1,63 g produktu.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 594;

Čiastočná ^XH NMR (CDC1₃, 300Mhz):8,38 (s,lH); 7,60(s,lH); 7,25 (d,lH);7,03(m,lH);4,64(d,lH);3,90(m,2H).

Upravte 1,6 g produktu kroku B s 1,3 ml (CH₃)₃SiNCO, pri použili v podstate rovnakého postupu, ktorý bol popísaný pre krok C príkladu 14, na získaní o 1,27 g cieľovej zlúčeniny.

Μ

Hmôt.spektr. : MH⁺= 627 (FABS) ; [aj_D ⁼⁵=-33,1° (c=0, 58,EtOH) .

Čiastočná ^ľH NMR(CDC1₃, 400Mhz):8,38(s,1H);7,60 (s,lH); 7,25 (d, 1H);7,O4(m, 1H); 4,60 (d, 1H), 4,41(s,2H).

racemická

Príklad

24B

Príklad

24A zlúčeniny kroku

B príkladu cielovej na cieľovú zlúčeninu v podstate rovnakým postupopísaný pre kroky A-C príkladu 21, na získanie bol premenený pom, ktorý bol cieľovej zlúčeniny príkladu 24A.

Hmôt.spektr. : MH⁺= 637 (FABS) ; [a]_D ²⁵=+32,4° (c=0, 57, EtOH) .

Čiastočná ^XH NMR(CDC1₃, 400Mhz):8,39(s,1H);7,59(s, 1H); 07, 25(d,

1H); 7,04 (m, 1H); 4,60 (d, 1H), 4,41 (s, 2H) .

Čiastočná ^ľH NMR(DMSO-d₆, 400 Mhz):8,42(s,1H);7,88(s,1H);7,41(d,

1H);7,29(m,1H);5,85(s,2H),4,20(d,1H).

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 8 bola premenená na cieľovú zlúčeninu príkladu 22B podobným spôsobom.

Čiastočná ^XH NMR (CDC1₃, 400Mhz):8,38(s,1H);7,59(s,1H);7,25(d,

1H) ; 7,04 (m, 1H) ; 4,60 (d, 1H) , 4,41 (s, 2H) .

Čiastočná *H NMR(DMSO-d₆, 400Mhz):8, 42(s,1H);7,88(s,1H);7,41(d,

1H);7,29(d, 1H);5,85(s,2H)4,20(d,1H).

Príklad 25

Nechajte reagovať 2,6 g (+)-enantioméru cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 a 1,68 g cieľovej zlúčeniny príkladu 1 v podstate podľa rovnakého postupu, ktorý bol popísaný pre príklad 19, na získanie 2,10 g cieľovej zlúčeniny.

Hmôt .spektr. : MH⁺ = 604 (FAB); [a]_D ²⁵=+34,1° (10, 98,mg/2M EtOH) .

Čiastočná ²H NMR(CDC1₃, 400Mhz):8,38(s,1H);8,15(d,2H);7,58(s, lH);7,26(d,lH);7,15(d,2H),7,03(d,lH);4,57(d,lH).

Na prípravu soli HC1 cieľovej zlúčeniny príkladu 25 rozpusťte 700 mg tejto cieľovej zlúčeniny v 4 ml CH2CI2, pridajte 4 ml Et₂O, ochlaďte na 0°C a pomaly (po kvapkách), pridajte 1 ml dioxanu, Pridajte 2 ml Et2O a miešajte pri 0°C počas 7 minút.

Rozrieďte 30 ml Et₂O, prefiltrujte, za účelom zhromaždenia pev ného produktu a premyte 30 ml Et2O. Pevnú látku vysušte vo vá-

kuu na získanie 0,936 g soli HC1 príkladu 14.

[otj _D ²² = +64,8°(9,94m/g,EtOH).

Príklad 26A

Príklad 26B (-)-enantiomér cieľovej zlúčeniny kroku B príkladu 10 (0,60 g) sa nechal reagovať s 0,39 g cielovej zlúčeniny príkladu 1, v podstate rovnakým postupom, ako je ten, ktorý bol popísaný pre príklad 19, na získanie 0,705 g cieľovej zlúčeniny.

Hmôt, spektr. : MH* = 604 (FABS); [a]_D ²⁵=41,8° (EtOH) .

Čiastočná ^ľH NMR (CDC1₃, 300Mhz):8,38(s,1H);8,15(d,2H);7,58(s, 1H);7,26(d,lH);7,15(d,2H),7,03(d,1H);4,57(d,1H).

Sol HC1 cielovej zlúčeniny príkladu 26A bola pripravená v podstate rovnakým postupom, ako je ten, ktorý bol popísaný pre príklad 25.

[a]_D ²⁵=-63 , 2° (EtOH) .

Racemická cieľová zlúčenina kroku A príkladu 10 bola premenená na cieľovú zlúčeninu príkladu 26B v podstate podľa rovnakého postupu, ako je ten, ktorý bol popísaný pre príklad 19.

Čiastočná ^ľH NMR (CDC1₃,400Mhz):8,38(s,1H);8,15(d,2H);7,58(s, 1H);7,26(d,1H);7,15(d,2H);7,03(d,lH);4,57(d,lH).

Čiastočná ^XH NMR (DMSO-d₆, 400Mhz) : 8, 77 (d, 2H); 8,47 (s, 1H); 7,95 (s,1H);7,74(d,2H);7,43(m,lH);7,27(d,lH);4,35(d,lH).

Príklad 27

Br

Cieľová zlúčenina príkladu 4 sa nechá reagovať v podstate rovnakými spôsobmi, akú sú tie, ktoré boli popísané pre kroky A-C príkladu 17.

Hmôt.spektr.: MH⁺ = 635(FAB); ^rH NMR (CDC1)_3: 8,45(s,1H);7,60(s, 1H);7,35(d,1H);7,05(d,1H);4,45(s,1H).

Príklad 28

Krok A:

Rozpusťte 9,90 g (18,9 mol) produktu kroku B príkladu 7 v 150 ml CH2CI2 a 200 ml CH₃CN a zohrejte na 60°C. Pridajte 2,77 g (20,8 mol) N-chlórsukcinimidu a zohrievajte pod spätným chladičom počas 3 hodín, pri sledovaní reakcie na TLC (30%EtOAc/ H2O) . Pridajte ďalších 2,35 g (10,4 mol) N-chlórsukcinimidu a zohrievajte pod spätným chladičom ďalších 45 minút. Ochlaďte reakčnú zmes na izbovú teplotu a extrahujte 1 N NaOH a CH2CI2.

CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a purifikujte flash chrómatografiou (1200 ml silikagélu, vymývané 30% EtOAC/H2O) na získanie 6,24 g požadovaného produktu.

m.p. = 193-195,4°C.

MH*= 510.

Krok B:

K 160 ml kone. HC1 pridajte pri -10°C 2,07 g (30,1 mol) NaNO₂ a miešajte počas 10 minút. Pridajte 5,18 g (10,1 mol) produktu kroku A a túto reakčnú zmes zohrejte z -10^eC na 0’C na 2 hodiny. Ochlaďte ju na -10°C, pridajte 100 ml H₃PO₂ a nechajte stáť počas noci. Za účelom extrakcie tejto reakčnej zmesi ju nalejte na rozdrvený lad a alkalizujte 50% NaOH/CH₂Cl₂. Organickú vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, prefiltrujte a zahustite do sucha. Purifikujte flash chrómatografiou (600 ml silikagélu, vymývané 20% EtOAc/hexán) na získanie 3,98 g produktu.

Hmot.spekt.: MH⁺ = 495.

Krok C:

Rozpusťte 3,9 g produktu kroku B v 100 ml kone. HC1 a refluxu j te počas noci. Zmes ochlaďte, alkalizujte 50% w/w NaOH

a výslednú zmes extrahujte CH₂C1₂. CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSO₄, odparte rozpúšťadlo a vysušte vo vákuu na získanie 3,09 g požadovaného produktu.

Hmot.spekt.: MH⁺= 423.

Krok D:

Pri

1,73

m.p.

použití postupu, podobného tomu g požadovaného produktu.

196, 6-170,1°C; [ot]_D ²⁵ = +48,2° (c=l,

Hmôt.spekt.: MH* - 425.

z príkladu 8,

MeOH).

získajte

Krok E:

Použite podobný postup ako v príklade ako východzou látkou, na získanie delovej zlúčeniny, m.p. 152, 3-153, 3°C; [a]_D ²⁵

Hmôt.spekt.: MH⁺

14, s produktom kroku D

Príklad 29 = +53,0°(c=l, MeOH).

Krok A:

Nechajte 9 s 6,52 reagovať 15,0 (44,4 mol) produktu kroku

B príkladu g

g (48,90 mol) N-chlórsukcinimidu spôsobom, podobným tomu, ktorý bol popísaný v kroku A príkladu 28 a extrahujte tak, ako je popísané, na získanie 16,56 g požadovaného produktu.

m.p.= 234,7-235,0°C.

MH* = 370.

Krok B:

produktu kroku A spôsobom, príkladu 28, na získanie 13,07 g

(45,6

Upravte 16,95 bol popísaný v dovaného produktu.

g kroku B ktorý poža70

m.p.=191,7-192,1°C.

MH* = 356.

200

v

Zohrievajte polyfosforečnej nalejte na Iad,

Extrahujte CH2CI2, mg východzej pri 190-200°C pridajte 30% premyte kyanatej látky počas 45 minút. HC1 a miešajte roztokom NaCl, kyseliny g

Výslednú zmes počas 30 minút, vysušte pomocou

Na₂SOí, prefiltrujte a zahustite.

Purifikujte preparátnou TLC, pri vymývaní EtOAc/hexánom, na získanie 21 mg požadovaného produktu (tiež je získané 59 mg produktu, ktorý je chlórovný v pozícii 10).

Rozpusťte pri izbovej teplote 10 g (29,6 mol) produktu kroku B príkladu 9 v 150 ml CH₂C1₂ a 200 ml CH₃CN. Túto zmes zohrejte na 60°C, pridajte 10,45 g (32,6 mol) l-fluór-4-hydroxy-l,4diazoniabicyklo[2,2,2]oktán-bis-(tetrafluoborátu), zohrievajte pod spätným chladičom počas 4 hodín. Zmes ochlaďte na izbovú teplotu, extrahujte CH₂C1₂ a 1 N NaOH. CH₂C1₂ vrstvu vysušte pomocou MgSOe, prefiltrujte a zahustite do sucha. Výsledný zvyšok purifikujte flash chrómatografiou, pri použití 1400 ml šili71 kagélu, pri vymývaní 10% získaní 2,00 g produktu.

103,2-103,5°C.

335.

EtOAc/CH₂Cl₂ + 2 kvapky NH₄OH, pri

m. p.

MH⁺ =

Krok

1,80 mol) produktu kroku A upravte state ku D fiou, hexánom.

g (5,1 rovnakého postupu, ako je ten, ktorý príkladu 9.

pri použití

Hrubý produkt purifikuje

200 ml silikagélu, použití v podpopísaný v kroflash chrómatograpri vymývaní 20% EtOAc/

Hmot.spekt.: MH⁺

339.

pri bol

Príklad 32

Pri použití vhodných východzích látok a postupov, ktoré boli popísané hore, by mohli byť pripravené nasledujúce zlúčeniny:

K roztoku 3-bróm-8-chlór-5,6-dihydro-llH-benzo[5,6]cyklopenta [1,2-b]-pyridin-ll-onu (2 g) (6,2 mol) v bezvodom dichlórmetane (14 ml) bol pri 0°C v prostredí argónu počas 30 minút po kvapkách pridávaný roztok kyseliny 3-chlórber.zoovej (1,76 g) (10,4 mol) v bezvodom dichlórmetane (35 ml). Táto zmes sa ne chala zohriať na izbovú teplotu a po 18 hodinách bcla pridaná ďalšia kyselina 3-chlórbenzoová (0,88 g) (5,2 mol) v bezvodom dichlórmetane (25 ml) a táto zmes bola miešaná počas 42 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetanom a premytá 1 N NaOH (200 ml) . Vodná vrstva bola extrahovaná ďalším dichlórmetanom (2 x 200 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou síranu horečnatého, prefiltrované a odparené do sucha. Produkt bol

chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 0,25%-0,5%-l% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, na získanie delovej zlúčeniny (výťažok: 1,386 g, 66%): ESIMS; m/z338,1 (MH⁺); ô_c(CDC1₃) :CH_Z:30,5,34,0;CH: 126, 9, 127,6, 130,3, 132,5, 140,4;

C:121,0,135,1,138,3,139,7,141,6,145,3,188,0 ppm.

Krok B:

Cieľová zlúčenina príkladu 33A(1,3422 g)(3,96 mol) bola rozpustená v metanole (18 ml) a dichlórmetane (20 ml), bol prida ný hydrid sodno-bóritý (0,219 g)(5,79 mol). Táto zmes bola miešaná pod argónom pri 0°C počas 1 hodiny a potom sa zohriala na 25°C na 1 hodinu. Zmes bola rozriedená dichlórmetanom (800 ml) a premytá 1 N NaOH (150 ml). Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetanom (2x100 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou MgSO₄, prefiltrované a odparené do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 1% (10% kone. NH4OH v metanole) dichlórmetanom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,24g, 92'έ) : ESIMS;m/z340,1 (ΜΗ*); δ- (CDC1₃):

CH₂: 31,2,32, O;CH:

69,1,126,8,129,5,131,7,136,7;C: 118,3,134,7,

135,2, 139,7, 141,0, 148,9 ppm.

Krok C:

Cieľová zlúčenina príkladu 33B (1,19 g)(3,49 mol) bola rozpus-

tená v bezvodom toluéne (22,5 ml) a tento roztok bol pod argónom ochladený na 0°C. Bol pridaný tionylchlorid (0,472 g) (6,64 mol) v bezvodom toluéne (5 ml) a zmes bola pri 0°C miešaná počas 1 hodiny. Zmes sa nechala zohriať na 25°C na 2,5 hodiny. Roztok bol pridaný k 20% roztoku etylacetátu v dichlórmetáne (800 ml) a bol premytý 1 N NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetanom (2x200 ml) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou Mg₄SO, prefiltrované a odparené do sucha, na získanie produktu, ktorý bol použitý bez ďalšej purifikácie.

Krok D :

v bezvodom THF pridaný roztok piperazínu

Cieľová zlúčenina príkladu mol) bola rozpustená (10 ml), bol

(1,505 bezvodom THF zmes bola miešaná pod argór.crr. pri

25°C počas 69 hodín. Táto zmes bola pridaná k dichlórmetanu (800 ml) a bola premytá 1 N

NaOH.

Vodná vrstva bola g z t r a r. o va r. á d i c h 1 ó rmo t. a n om (2z200 rnl) a spojené organické vrstvy boli vysušené pomocou síranu horečnatého, prefi 1 trovené a odparené do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 5% (10% kone. NH4OH v metanole) dichlórmetanom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,2772 g, 89%) : FABMS;m/z408 (MH⁺) ;ô_c (CDC1₃) :CH₂: 30, 1, 30, 4, 46, 2, 46,2,

52,3, 52,3; CH:64, 6, 126, 3, 130, 3, 130, 6, 133, 6, 138,6, 138,6; C:118,0, 133,9, 134,5, 139,8, 140,8, 148,8 ppm.

Cieľová racemická zlúčenina kroku D (1 gg) bola rozdelené na Chiralpack AD HPLC kolóne (5cmx50cm, veľkosť častíc 20 μ) , pri použití zmesi 2-propanol:hexán:dietylamin:30:70:0,2 až 40:60: 0,2; po prejdení 2 1, ako vymývacej zmesi, bol získaný R(+)enantiomér ako prvá frakcia vymývania (0,486 g):FABMS m/z408 (MH⁺) ;ô_c(CDCI3) :CH₂: 30, 1, 30, 4, 46, 3, 46, 3, 52,5 52,5; CH:

64,7, 126,2, 130, 4, 130,6, 133,6 138,5; C: 118,0, 133,9,

134,4, 139, 8, 140, 8, 148, 9; [a]_D ²³’^c = +90,9° (10,34 mg/2ml, MeOH) a tá bola nasledovaná S(-)-enantiomérom, ako druhou frakciou vymývania (0, 460 g) : FABMSm/z408,1 (MH⁺) ;ô_c (CDCI3) :CH₂: 30,1, 3C,4 46,2, 46,2, 52,4 52,4; CH: 64,6, 126,3, 130,4, 130, 6, 133,6

138,5; C:118,l, 133,9,

134,4, 139, 8, 140, 8, 148,8; [a]_D ²³*^c =

-85,9°(8,61 mg/2ml, MeOH).

Príklad 34

Cieľová zlúčenina príkladu 33D (0,4 g) (C, 979 mol), Nl-oxiď kyseliny 4-pyridyloctovej (0,1948 g)(1,27 mol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (0,244)(1,27 mol), l-hydroxybenzotriazol (0,172 g) (1,27 mol) a 4-metylmorfolin (0,14 ml) (1,27 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (15 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C počas 18 hodín. Tento roztok bol pridaný k dichlórmetanu (800 ml) a bol premytý 1 N NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná dichlórmetanom (2x200 ml) a spojené organické vrstvy boli odparené do sucha. Zvyšok bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, na získanie cieľovej zlúčeniny (výťažok: 0, 4806 g, 90%) :LSIMS;m/z543 (MH⁺); ô_c (CDC1₃) :CH₂: 30,1, 30,5, 38,4, 42, 1, 45, 9 50, 4, 50, 6; CH: 63, 8, 126,5, 126, 8,

130,4, 130,5, 133,4 138,4, 139,0, 139,0; C:118,4, 133,4, 133,9, 134,8, 139,8, 141,0, 148,8, 167,0 ppm. PMR: Ô_h (CDC1₃) : 5,78(s,lH,H_n); 7,14(d,2H,Ar-H) ; 7,15(s,2H,Ar-H); 7,20(d,lH, Ar-H); 7,22(d,1H,Ar-H); 8,16(d,2H,Ar-H); 8,29(s,1H,Ar-H).

Príklad 35

K roztoku produktu kroku C príkladu 21 (1,06 g, 1,65 mol) v dichlórmetáne (50 ml) bola pridaná kyselina meta-chlórperozybenzoová (0,5 g, 57-86% čistota). Po miešaní pri izbovej teplote počas 5 hodín bolo pridané ďalších 0,23 g metachlórperozybenzoovcj a výsledná zmes bola miešaná pri izbovej teplote poňa.'j noci. Reakčná zmes bola premytá nasýteným vodným n

roztokom uhličitanu sodného, vysušená pomocou bezvodého sirar.u horečnatého, prefiltrovaná a zahustená vo vákuu pri získaní bledožltej peny. Purifikáciou flash kolór.ovou chromatograf iou (silikagél), pri použití 5% metanol-dichlórmetanu, nasýteného hydroxidom amónnym, bola získaná cieľová zlúčenina (0,60 g, výťažok 56%, m.p. 170-5-175°C),

La]_D ²¹’^c = +116,2°(c=0,113 metanol) .

Príklad 36

Podlá postupu z príkladu 35, s tou výnimkou, že namiesto príkladu 19 bol použitý produkt kroku C príkladu 21, bol získaný produkt ako biela pevná látka, m.p. = 174,2°C.

Príklad 37

K produktu kroku C príkladu 23 (1,0 g, 1,48 mol) v metylénchloride (1ϋ ml) bola pri 0°C pridaná kyselina m-chlórbenzoová (50% ], 'j g, 4,36 mol), potom bola táto zmes miešaná pri 0°C počas 5 hodír. a pri izbovej teplote počas 3 nodín. Bola pridá ná voda (50 ml) hydroxid amónny (10 ml, kone.) a táto zmes bola extrahovaná metylénchloridom (2x200 ml). Organická vrstva bola oddelená, vysušená pomocou síranu horečnatého prefiltrovaná a rozpúšťadlo bolo odparené pri získaní pevnej látky, ktorá bola chrómatografovaná na silikagéli, pri vymývaní zmesí 10% v/v metanol: metylénchlorid, obsahujúci 2% hydroxid amónny, pri získaní cieľového produktu ako bielej pevnej látky (700 mg, 70%),

Ĺa]_D ²⁴’^c = -68, 9° (c=0, 352, etanol).

MS (FAB,MH,653) HRMS Vypočítané Merané 655,0518.

(C27H32N403BrCl(81)Br)655,0509 (d,1H);

(CDC1₃) δ 5,37(m,lH) 2,89(m,4H) 1,66(m,1H);

8,31(s,lH);

4,60(d,lH)

Príklad

7,19(d,lH); 7,11

2,04(m,lH); 1,78

Podľa rovnakého postupu namiesto produktu kroku né množstvo produktu príkladu 26A, bol získaný cieľový produkt ako biela pevná látka (výťažok 73%).

[<xJd²⁴’^c - -76,6° (c=0,197, etanol).

ako v príklade

C príkladu 23 bolo použité ekvivalent37, s tou výnimkou, že

MS (FAB,MH620) HRMS Vypočítané MHC26H25N303BrCl(81)Br)621,9931 Merané 621,9942.

*H NMR (CIX;i₃₎ δ 8,32(S,1H); 8,22(d,2H); 7,29(s,lH); 7,19 (d, líí); 7,18(d,2H); 7,10(d,lH); '>,37(m,lH); 4,58(d,lH); 3,78 (d,

1H); 3,66(d,2H); 3,41(s,2H)

1H), 2,28(m,lH); l,63(m,lH);

; 3,38(m,lH); 2,95(m,3H); 2,50(m,

1,45(m,2H) .

Príklad 39

Racemická racemická

Podlá postupu príkladu 12, s tou výnimkou, že namiesto zlúčeniny príkladu 3 je použitý produkt kroku D príkladu 3, bol získaný východzí reaktant. Podlá postupu príkladu 12, s tou výnimkou, že namiesto produktu kroku C príkladu 23 bol použitý horeuvedený reaktant, bola získaná cielová zlúčenina ako biela pevná látka (100%).

MS (FAB,MH540) HRMS Vypočítané MH C26H24N303BrCl (540,0690),

Merané (540,0691).

^XH NMR (CDC1₃) δ 8,45(s,lH); 8,14(d,2H); 7,26-7,34 (m, 3H); 7,11

(d,2H); 7,03(d,lH); 6,73(d,lH); 5,55(d,lH), 4,40(m,lH); 3,70 (m,2H);3,59(d,2H);2,85(m,1H);2,45(m,1H),2,15(m,1H);1,35(m,1H),

15(m,3H).

Príklad 40

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, R { +) -enantiomér (360,4 mg, 0,882 mol), Nl-oxid kyseliny 4-pyridyloctovej (175,5 mg, 1,146 mol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbidiimidu (220 mg, 1,146 mol), 1-hydroxybenzotriazol (155 mg, 1,146 mol) a 4-metylmcrfol í r. (0,126 ml, 1,146 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (11 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C počas 18 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je popísané géli, v príklade 34 pri vymývaní na získanie a produkt bol chrómatografovaný na silika4% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetacieľovej zlúčeniny

92%) :LCMS:m/z543,l (MH⁺) ;ô_c(CDC1₃) :CH₂:30,l, nom, (výťažok: 441,1 mg,

30,6,

38,5,

42,1,

46,0,

50,5, 50,9; CH:63,9, 126,5, 126,9,

126,9,

130,5,

133,5,

138,5, 139, 0, 139,0; C:118,4, 134,0,

134,0,

130,6,

134,9,

139,9,

141,0, 147,8, 167,1;

Ôh (CDCI3) : 5,74(s,lH,H_u); 7,12(d,2H,Ar-H); 7,13(s,2H,Ar-H);

7,19(d,lH,Ar-H); 7, 21(d,IH,Ar-H); 8,14(d,2H, Ar-H); 8,27(s,lH,

Ar-H), [αΐη²³’⁰ = +69, 2° (10 mg/2ml,MeOH) .

Príklad 41

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, S(-)-enantiomér (374,8 mg, 0,917 mol), Nl-oxid kyseliny 4-pyridyloctovej (182,6 mg, 1,192 mol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbiimidu (229 mg, 1,192 mol), 1-hydroxybenzotriazol (161 mg, 1,192 mol) a 4-metylmorfol í n (0,131 ml, 1,192 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (11 rr.i; a táto zmes bo^a miešaná pri 25°C počas 18 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je popísané v príklade 34 a produkt bo', chrómatografovar.ý na si', ikru81 géli, vymývanom 4% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanorc, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 467,3 mg, 94%): LCMS :m/z543, 1 (MH*) ;ô_c (CDC1₃) : CH₂: 30, 0, 30, 5, 38,4, 42, 0, 45, 9,

50.4, 50,8; CH:63, 8, 126, 5, 126, 8, 126, 8, 130, 4, 130, 6, 133, 4,

138.4, 138,9, 138,9; 0:118,4, 134,0, 134,0, 134,8, 139,8,

140, 9, 147,7, 167,0, δ_Η (CDC1₃): 5,76(s, 1H,Hh) ; 7,13(d,2H,Ar-H); 7,15(s,2H,Ar-H);

7,21 (d, 1H, Ar-H); 7,23(d,1H,Ar-H); 8,16(d,2H,Ar-H); 8,29(s,lH,

Ar-H), ía]_D ^z3’^c = -65, 5° (10, 4 mg/2ml, MeOH) .

Cieľová zlúčenina kroku D príkladu 33, (±) (789,1 mg, 1,93 mol), kyselina 1-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinyloctová (610 mg, 2,51 mol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbidiimidu (481,2 mg, 2,51 mol), 1-hydrozyber.zotriazo. (339,2 mg, 2,51 mol) a 4-met.y lmorfol í n (0,276 ml, 2,51 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (30 ml) a táto zmes bola rriošaná pri 25°Ο počas 21 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ,jko je popísané v príklade 34 a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, vymývanom 0,5%-l% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,22 g, 100%) :FABMS:m/z633,3(MH⁺) ;8_c(CDC1₃) :CH₃:28,5, 28,5, 28,5; CH₂ :

30,2, 30, 5, 32,2, 32,2, 39, 5, 41,7, 43, 8, 43, 8, 45, 8, 50,A,

51,2; CH:33,3, 64,0, 126,5, 130, 6, 130, 6, 133,5, 138,5;

C:79,3, 118,3, 133,6,134,8, 139,9, 140,9, 148,1, 154,8, 170,0; ô_h(CDC1₃) :1,46 (s, 9H, -Cme), 5, 75 (s, lH,H_n) ;7,13 (d, lH,Ar-H) ;7,16 (s, lH,Ar-H) ;7,19 (s, lH,Ar-H) ;7,23 (d, 1H,Ar-H) ;8,29(s, lH,Ar-H) .

Krok B:

CH, zlúčenina

Cieľová kroku A (1,21 g,

1,91 mol) bola ml) a 10%(v/v)konc.H₂S0₄ v dioxane rozpustená (26 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25°C počas 1,5 hodiny. Táto zmes bola zahustená a rozriedená CH₂C1₂ a alkalizovaná IN vodným NaOH. CH₂C1₂ extrakt, obsahujúci len časť produktu, pre jeho rozpustnosť vo vode, bol vysušený (MgSO₄), prefiltrovaný a odparený do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10%(10%konc. NH₄OH metanom, pri získaní cielovej zlúčeniny v metanole (10,6 v metanole)dichlór(výťažok: 87,7 mg,

10%) :FABMS:m/z533,1 (MH⁺) ;ô_c(CDCl₃) :CH₂:30,2,

30,4,

32,4;

32,4,

39,6,

41,6, 45,7, 45, 9,

45,9, 50,7, 51,2;

CH:32,7,

64,0,

126,5,

130,6,

130, 6, 133,5, 138,5; 0:118,3,

133,5,

134,7,

139,9,

140, 9, 148,1, 1 69,8, 169, 8; 8_H(CDC1₃):

5,73(s, 1H, H_n);

7,12 (d, 1 H, Ar-H); 7,1b(s,1H,Ar-H); 7,18(s,1H,Ar-H); 7,21(d,lH,

Ar-H); 8,28(s,1 H,Ar-H).

Krok C:

zlúčenina kroku B (99,1 mg,

Cieľová

0,189 mol) a trimetyl-

silylizokyanát (0,384 ml, 2,83 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetane (3 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C pod argónom počas 20 hodín. K reakcii bol pridaný ďalší a trimetylsilylizokyanát (0,0768 ml, 0,567 mol) a bežala ďalších 5 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetanom a premytá nasýteným vodným NaHCO3, vysušená (MgSOí), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chromatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5% (10% kone. NH4OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 80,4 mg, 81%);FABMS:m/z 576, 1 (MH⁺) ;8c(CDC1₃) :CH₂:30,1; 30,4; 32,0; 32,0; 39,2; 41,6;

44,4; 44,3; 45,7; 50,7; 51,1; CH:32,9; 63,9; 126,4; 130,5; 130,6; 133,4; 138,4; C;118,4; 133,5; 134,7; 139,8; 140,9;

148,0; 169,7; 8_H(CDC1₃) :5, 74 (s, 1H,Hu), 7,12(d,1H,Ar-H), 7,15(s,

lH,Ar-H), 7,19(s, lH,Ar-H), 7,22(d,1H,Ar-H), 8,28(s,lH,Ar-H).

Príklad 43

O

Krok A:

Cieľová zlúčenina kroku

E príkladu 33, R(+)-enantiomér (1 g,

2,45 mol), kyselina l-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinylocto3,181 mol), hydrochlorid 1-(3-dimetylaminopro(61C mg, 3,181 mol), mol) a 4-metylmorfolín bezvodom DMF (30,5 ml) vá (487 mg, pyl)-3-etylkarboimidu triazol (430 mg, 3,181 mol) boli rozpustené v miešaná pri 25°C počas ako je napísané na silikagéli, dichlórmetanom,

1-hydroxyber.zo(0,35 ml, 3,181 a táto zmes bola hodín.

v príklade 34 a pri vymývaní 1% pri získaní

Reakcia bola spracovaná tak, produkt bol chrómatografovaný (10% kone. NH4OH v metanole) cieľovej zlúčeniny (výťažok:

g, 81%) :LCMS:m/z 633,1 (MH⁺) ;8_C (CDC1₃)CH₃:28,5; 28,5;

28, 5;

CH₂:3C,2; 30,5;

51,2; CH:33,3;

118,3; 133,6;

32,2; 32,2; 39,4; 41,7;

64,0; 126,5;

134,8; 139,9;

130,6;

140,9;

43,6;

43,6;

45,8;

50,7;

133,5;

148,1;

138,5; C:79,3;

154,9; 170,0;

Sh(CDC1₃) l,46(s, 9H,-CMe₃),

5,74(s,1H,H_U),

7,12(d,lH,Ar-H),

7,16 's,1H,Ar-H), 7,19(s,1H,Ar-H), 7,23(d,1H,Ar-H) ,

Ar-H); [a]_D ^23,Vc=+56, 4° (9, 05 mg/2ml MeOH).

8,29(s,lH,

o

Cieľová zlúčenina kroku A (1,149 g, 1,812 ir.cl) bola rozpustená

v metanole (9,5 ml) a 10% (v/v)konc. H₂SO₄ v dioxane (24,7 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25^eC počas 1 hodiny. Táto zmes prešla cez vrstvu iónomeničovej živice BioRad AG1X8(OH' forma) a táto živica bola premytá metanolom. Spojené eluáty boli odparené do sucha a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 762,9 mg, 79%):LSIMS: m/z 533 (MH⁺) ;8_C (CDC1₃) : CH₂: 30,2; 30,5; 32,2;

32,2; 40,1; 41,7; 45,9; 46,4; 46,4; 50,8; 51,2; CH:33,4; 64,0; 126,5; 130,6; 133,6; 138,6; C:118,4; 133,6; 134,8; 139,9;

140,9; 148,2; 170,2; δ_Η (CDC1₃) : 5, 73 (s, 1H, Hu) , 7,11 (d, 1H, Ar-H) ,

7,14(s, 1H,Ar-H), 7,19(s,1H,Ar-H), 7,22(d,1H,Ar-H), 8,28(s,lH,

Ar-H); [a] _d ²³'^{4 c}=+66, 4° (10, 90 mg/2ml MeOH) .

Krok C:

lizokyanát (2,092 ml, 15,45 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetáne (16,4 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C pod argónom počas 18 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetanom a premytá nasýteným vodným NaHCO₃, vysušená (MgSO₄), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 3,5% (10% kone. NH₄OH v metanole/dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny výťažok:570, 3 mg,

99%):FABMS:m/z 576, 3 (MH⁺) ;ô_c (CDC1 ₃) : CH₂: 30, 2; 30,5; 32,1; 32,1;

39,3; 41,7; 44,4; 44,5; 45,8; 50,R;

CH:33,0;

64,0;

126,5; 130,6; 130,6; 133,5; 138,6; C:118,4; 133,5; 134,8;

139,9; 141,0; 148,1; 157,9; 169,8; Ô_H(CDC1₃): 5,73 (s, 1H, H_n),

7,12 (d, 1H, Ar-H), 7,14(s,1H,Ar-H), 7,19 (s, lH,Ar-H), 7,21(d,lH,

Ar-H), 8,28(s,1H,Ar-H);

[a] _d ²³'^{4 c}=⁺60, 2° (10,28 mg/2ml MeOH).

Cieľová zlúčenina kroku E príkladu 33, S(-)-enantiomér (1 g,

1-terc.-butoxykarbonyl-4-piperidinyloctová mol), hydrochlorid (610 mg, 3,18 mol), a 4-metylmorfolín

2,45 mol) kyselina (487 mg, 3,181 etylkarboimidu mg, 3,181 mol)

1-(3-dimetylaminopropyl)-31-hydroxybenzotriazol (430 (0,35 ml, 3,181 mol) boli rozpustené v bezvodom DMF (30,5 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C počas 66 hodín. Reakcia bola spracovaná tak, ako je popísané v príklade 34 a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 1%(10% kone. MH₄OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 1,204 g, 78%):LSIMS:m/z 633, 5 (MH*) ;ô_c (CDC1₃) CH₃:28,5; 28,5; 28,5; CH₂:

30,2; 30,5;

32,2; 39,4; 41,7; 43,6; 43,6; 45,8;

51,2; CH:33,3; 64,0; 126,5; 130,5; 130,5; 133,6; 138,5;

C:79,3; 118,3; 133,6; 134,8; 139,9; 140,9; 148,1; 154,8;

170,0; ô_h(CDC1₃): 1,46 (s, 9H,-CMe₃) , 5, 74 (s, 1Η,Ε_η), 7,12(d,lH,

Ar-H), 7,15(s, 1H, Ar-H), 7,19(s,1H,Ar-H), 7,22(d,1H,Ar-H) , 8,28 (s,lH,Ar-H); [a] _D ^:3,4*^c=-57,2° (9, 09 mg/2ml MeOH).

Krok B:

Cieľová zlúčenina kroku A (1,104 g, 1,714 mol) bola rozpustená v metanole (9,13 ml) a 10% (v/v) kone. H₂SO₄ v dioxane (23,75 ml) a táto zmes bola miešaná pod argónom pri 25°C počas 1 hodiny. Táto zmes prešla cez vrstvu iónomeničovej živice BioRad AGI-x8(OH'forma) a táto živica bola premytá metanolom. Spojené eluáty bolu odparené do sucha a produkt bol chrómatografovaný na silikagéli, pri vymývaní 10% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 771,1 mg, 83%) :LSIMS:m/z 533 (MH⁺) ;5c(CDC1₃) :CH₂:30, 3; 30,5; 33,0;

33,0; 40,0; 41,7; 45,8; 46,2; 46,2; 50,8; 51,2; CH:33,3; 64,0; 126,5; 130,6; 130,6; 133,6; 138,6; C:118,4; 133,6; 134,8;

139,9; 140,9; 148,2; 170,1; Ôh(CDC1₃): 5,73 (s, 1H,H_U), 7,12(d, lH,Ar-H), 7,14(s,lH,Ar-H), 7,19(s,1H,Ar-H), 7,22(d,1H,Ar-H),

8,28(s,lH,Ar-H);

[a]_D ²³'⁴’^c- -66, 9° (10,29 mq/2ml

MeOH).

Cieľová zlúčenina kroku B (550 mg, 1,03 mol) a trimetylsilylizokyanát (2,092 ml, 15,45 mol) boli rozpustené v bezvodom dichlórmetáne (16,4 ml) a táto zmes bola miešaná pri 25°C pod

argónom počas 18 hodín. Zmes bola rozriedená dichlórmetanom a premytá nasýteným vodným NaHCO3, vysušená (MgSO₄), prefiltrovaná a odparená do sucha. Produkt bol chrómatografovaný na si likagéli, pri vymývaní 3,5% (10% kone. NH₄OH v metanole) dichlórmetanom, pri získaní cieľovej zlúčeniny (výťažok: 571,5 mg,

99%) : FABMS :m/z 576,3 (MH⁺) ;ô_c (CDC1₃) :CH₂:30, 2; 30,5; 32,0; 32,0; 39,3; 41,7; 44,4; 44,5; 45,7; 50,7; 51,2; CH:33,0; 64,0;

126,5; 130,6; 130,6; 133,5; 138,6; C:118,4; 133,6; 134,8;

139,9; 141,0; 148,1; 157,9; 169,8; Ô_H(CDC1₃): 5,73 (s, 1H, H_u) ,

7,12(d,lH,Ar-H), 7,15(s, 1H,Ar-H), 7,20(s,1H,Ar-H), 7,22(d,lH,

Ar-H), 8,28 (s, 1H,Ar-H); [a]_D ²³'⁴’^c= -62,5° (9,54 mg/2ml MeOH) .

Príklad 45

Východzí reaktant (0,1 g, 0,18 mol) bol rozpustený v CH2CI2 (5 mi) a potom bol ochladený na -18°C. Potom bola pridaná kyseii na m-chlórperoxybenzoová (0,18 g, 1,07 mol) a reakčná zmes bola počas noci miešaná pri izbovej teplote. Reakčná zmes bola rozdelená medzí CH2CI2 a nasýtený NaHCO3 (vodný). Vodná fáza bola ďalej extrahovaná CH2CI2. Spojené CH2CI2 frakcie boli vysušené porr.ccou MgSO₄ a zahustené vo vákuu, pri získaní zvyškj, ktorý bol chrómatografovaný na silikagélovej doske, pri vymývaní 10% MeOH (nasýtený NH₃)-CH2C1₂, pri získaní cieľovej zlúčeniny ako bielej pevnej látky (0,013 g, výťažok 13%, m.p. = 146, 8-147,4°C, MH⁺=577).

Východzí reaktant bol získaný pri použití postupu príkladu 14 a horepopisaných postupov separácie chirálnej chrómatografie.

Príklad

zlúčenina bola

Cieľová postupu ako je popísaný pripravená príklade podľa v podstate rovnakého (m.p.=120-121°C,MH⁺ =577) .

Príklad

Východzí reaktant. bol oxidovaný kyselinou m-chlňrperoxybenzoovou podľa v podstate rovnakého oxidačného postupu ako v príklade 45, pri získaní cieľovej zlúčeniny (m.p. = 109110°C, MH* =542).

Východzí reaktant bol získaný reakciou S(-) izoméru cieľovej zlúčeniny príkladu 3 s cieľovou zlúčeninou príkladu 12. S(-) izomér racemátu príkladu 3 bol získaný pri použití horepopísaných postupov separácie chirálnej chromatografie.

Príklad 48

Cieľová zlúčenina bola pripravená podľa v podstate rovnakého postupu, ako je popísaný v príklade 47 (m.p.=125,5-126,3°C, MH⁺ =542).

Príklad 49

FTP IC₅₀ (inhibicia farnesyl-proteíntransferázy, enzymatický

pokus in vitro) bola stanovená podľa postupov, popísaných vo WO 95/10516, publikovanom 20. apríla 1995. GGPT IC50 (inhibicia geranylgeranyl-proteintransferázy, enzymatický pokus in vitro), COS Celí IC50 (na bunkách založený pokus), Celí Mat Assay a protinádorová aktivita (nádorové štúdie in vivo) mohli byť stanovené podľa postupov, popísaných vo WO 95/10516. Popis WO 95/10516 je tu zahrnutý odkazom.

Ďalšie pokusy mohli byť uskutočnené podľa v podstate rovnakého postupu, ako je popísaný hore, ale pri .nahradení buniek T24BAG inými indikátorovými nádorovými bunkovými líniami. Tieto pokusy mohli byť uskutočnené pri použití alebo buniek ľudského karcinórnu hrubého čreva DLD-l-BAG, ezprimujúcich aktivovaný gén K-Ras, alebo buniek ľudského karcinómu hrubého čreva SW620-BAG, exprimujúcich aktivovaný gén K-Ras. Pri použití iných nádorových bunkových línií, známych v odbore, mohla byť ukázaná aktivita zlúčenín tohto vynálezu proti iným typom rakoviny .

Soft Agar Assay:

Na podklade nezávislý rast je vlastnosťou tumorogénnych bunkových línií. Ľudské nádorové bunky môžu byť suspendované v rastovom médiu, obsahujúcom 0,3% agarózu a inhibítora farnesyl-proteíntransferázy.

spevnené inhibítora uvedenú koncentráciu byť prevrstvené rastové médium, hujúcou rovnakou koncentráciu transferázy. Po stuhnutí hornej

Týmto roztokom môže 0,6% agarózou, obsafarnesyl-proteínbyť misky inkuboumožní rast kolóvrstvy môžu vané počas 10-16 dní pri 37°C, pri 5% CO2, čo nii. Po inkubácii môžu byť kolónie farbené prevrstvením agaru roztokom MTT (3-[4,5-dimetyl-tiazol-2-yl]-2,5-difenyltetrazoliumbromid, Thyazolil blue) (1 mg/ml v PBS). Kolónie môžu byť počítané a hodnoty IC₅₀ môžu byť stanovené.

FTP pM IC50 assay :

Enzymatická reakcia prebiehala v 50 mM Tris, 5 μΜ ZnCl₂, 5 mM

MgCl₂, (pufor

0,01% Tritónu

R) pri 37°C

X-100, 5 mM ditiotreitolu (DTT), pH 7,7 hodiny. Purifikované ľudské FPT počas 1 (>95% odvodené z expresného systému Baculovirus/Sf-9 expression systém.

bol biotín-CVLS (SynPep Corp., Ci/mol) kúpený (Boston, MA).

Použitím

Dublin, od New England

Zlúčeniny boli

Nuclear najskôr peptidovaný substrátom

CA) a (1-³H)-FPP (21,5

Life Science Products rozpustené na konečnú koncentráciu 4 mg/ml v 100% DMSO a potom na 0,25 pg/ml v 100%

DMSO. Nasledovné rozriedenie týchto zlúčenín bolo vykonané v pufri R.

Enzymatická reakcia prebiehala v konečnom objeme 100 μΐ. Reakcia s j vykonávané na 96-jamkových doštičkách. Konečné kor.cen trácie ľudskej FPT, FPP a biotin-CVLS boli jednotlivo 30 pM,

176 nM a 100 nM, v objeme 100 μΐ. Typická reakcia zahrnuje mie šanie FPT a FPP v 40 μΐ pri izbovej teplote počas 15 minút, potom nasleduje pridanie 40 μΐ roztoku obsahujúceho testovanú zlúčeninu. Roztok sa potom mieša počas 15 minút pri izbovej teplote. Enzymatická reakcia je naštartovaná pridaním 20 μΐ biotin-CVLS peptidového substrátu a prebieha pri 37°C počas 1 hodiny. Reakcia je ukončená použitím 150 μ roztoku Stop Solution, ktorý obsahuje 1,3 mg/ml scintilačných guličiek (straptavidinom obalené guličky od Amersham (Arlington Heights, IL), 250 mM EDTA, pH 8,0 a 0,5% BSA. Rádioaktivita je meraná po 20 minútach pri izbovej teplote.

Pri zlúčeninách je stanovená ich schopnosť inhibovať túto reakciu, meraním na koncentrácii závislé percento inhibície reakcie. Zásoby roztokov týchto zlúčenín 25 μΐ/ml (DMSO) boli rozriedené v pufri R a potom v reakčnej zmesi, ako je napísané hore, pri získaní konečnej koncentrácie 0,01, 0,003, 0,001,

0,0003, 0,0001 a 0,00003 μΐ/ml reakčnej zmesi. Enzymatická aktivita bola zistená meraním CPM/jamku, pri použití scintilač-

ného počítača Wallac 1204 Betaplate BS liquid scintilation computer. Kontrolné pokusy boli vykonané bez inhibitorov, za účelom získania hodnoty CPM pre neinhibovanú reakciu. Ďalej boli vykonané reakcie bez biotin-CVLS, na získanie signálu pre

CPM hodnoty pozadia. Po korekcii signálov na pozadí môže byť vypočítané percento inhibície pre každú koncentráciu inhibítora a môže byť interpolovaná hodnota IC_j0 metódou najmenších štvorcov z údajov v rámci lineárneho úseku inhibície.

Zlúčeniny príkladov 34-49 a zlúčenina 54,0 mali FTP IC_j0 v rozmedzí od 0,7 nM do >174 nM. Zlúčenina príkladu 40 mala FT? pM IC_M 0,44 nM a zlúčenina príkladu 43 mala FTP pM IC» 0,41 nM.

Zlúčeniny príkladov 35, 36 a 40 mali COS Celí 1C_SU v rozmedzí oú

0,9 nM do 85 nM a Soft Aga r IC₅₍, v rozmedzí od 25 nM do 183 nM.

Príklad 51

Na prípravu farmaceutických prípravkov zo zlúčenín popísaných týmto vynálezom môžu byť inertné, farmaceutický prijateľné nosiče pevné alebo tekuté. Prípravky v pevnej forme zahrnujú prášky, tabletky, dispergovateľné granule, kapsule a čipky. Prášky a tabletky môžu obsahovať od asi 5 do asi 70% aktívnej látky. Vhodné pevné nosiče sú známe v odbore, napr. uhličitan horečnatý, stearan horečnatý, mastenec, cukor a laktóza. Tab lety, prášky, tobolky a kapsule môžu byť použité ako pevné dávkové formy, vhodné na orálne podávanie.

Na prípravu čípkov sa najskôr rozpusti vosk s nízkou teplotou topenia, ako je zmes gliceridov mastných kyselín alebo kakaové maslo a aktívna látka je v ňom potom homogénne dispergovaná napr. miešaním. Rozpustená homogénna zmes je potom naliata do foriem vhodnej veľkosti, nechá sa vychladnúť a tak stuhnúť.

Prípravky v tekutej forme zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie. Ako príklad môžu byť uvedené vodné alebo vodo-propylénglykolové roztoky pre parenterálnu injekciu.

Prípravky v tekutej forme môžu tiež zahrnovať roztoky na in tranazálne podávanie.

Aerosólové prípravky, vhodné na inhaláciu, môžu zahrnovať roztoky a pevné látky vo forme prášku, ktoré môžu byť v spojení s farmaceutický prijateľným nosičom, ako je inertný stlačený plyn.

Zahrnuté môžu byť tiež prípravky v pevnej forme, ktoré môžu byť krátko pred použitím premenené na prípravky v tekutej fotme na orálne alebo parenterálne podávanie. Takéto tekuté formy zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie.

Zlúčeniny tohto vynálezu môžu byť tiež dopravené transder málne. Transaermálne prosLriedky môžu byť vo forme krémov, pleťových vôd, aerosolov a/alebo emulzií a môžu byť obsiahnuté v transdermá. rr/ch náplast: art. matrizového alebo porózneho typu, ako j r* v odbore pre t. ieto účely bežné.

Prednostne sú zlúčeniny podávané orálne.

Prednostne je tento farmaceutický prostriedok v jednotkovej dávkovacej forme. V takejto forme je tento prípravok rozdelený do jednotkových dávok, obsahujúcich príslušné množstvo aktívnej zložky, napr. množstvo, ktoré je účinné na dosiahnutie požadovaného ciela.

Množstvo aktívnej látky v jednotkovej dávkovacej forme prípravku môže byť menené alebo upravené od asi 0,1 mg do 10C0 mg, lepšie od asi 1 mg do 300 mg, podlá konkrétneho použitia.

Skutočné použité dávkovanie sa môže meniť v závislosti na potrebách pacienta a závažnosti liečeného stavu. Určenie ho dávkovania na konkrétnu situáciu správneodborníka. Všeobecne, menšie ako je vanie zvyšované po menších optimálny účinok za daných byť celková denná dávka v priebehu dňa.

je v možnostiach menšími dávkami, zlúčeniny. Potom je dávkoktoré sú liečenie je zahájené optimálna dávka tejto častiach pokial nie je dosiahnutý okolností. Ak je požadované, môže rozdelená a podávaná po častiach

Množstvo a frekvencia podávania zlúčenín tohto vynálezu a ich farmaceutický prijateľných solí môže byť regulovaná podľa posúdenia navštíveného lekára, ktorý zváži všetky faktory, ako je vek, stav a výška pacienta, rovnako ako závažnosť liečených príznakov. Bežným doporučeným režimom dávkovania na zastavenie rastu nádoru je orálne podávanie od 10 mg do 200 mg/deň, prednostne 10 až 1000 mg/deň, vo dvoch oddelených dávkach. Keď sú podávané v tomto dávkovom rozmedzí, sú tieto zlúčeniny netoxické.

Príklady farmaceutických dávkovacích foriem

Tabletky

Číslo	Zložka	Mg/tabletka	Mg/tabletka
1 . 3.	Aktívna látka Lakt’óza'uŠP Kukuričný škrob, Eood Grácie,	100 122 3 Ó	500 ” 113 40

ίako 10* zmes v čistej vode i
	4 .	í Kukuričný škrob, Fooči Gráde 1 | i	45	40
	5.	jStearan horečnatý j	3	7
		Celkom |	300	700

Spôsob výroby

Miešajte zložky č. 1 a 2 počas 10-15 minút. Zmes granulujte zložkou č.3. Ak je to nutné, rozdrvte vlhké granule cez hrubé sito (napr. 1/4, 0,63 cm). Vysušte vlhké granule. Prezrite suché granule, ak je to nutné, a zmiešajte ich so zložkou č. 4

a miešajte počas 10-15 minút. Pridajte zložku č.5 a miešajte

1-3 minúty. Zmes stlačte na príslušnú veľkosť a zviažte na vhodnom tabletkovacom stroji.

Kapsule

Číslo	Zložka	Mg/kapsula	Mg/kapsula
1.	Aktívna látka	100	500
2.	Laktóza USP	106	123
3.	Kukuričný škrob, Food Gráde	40	70
4.	Stearan horečnatý NF	7	7
Celkom	300	700

Spôsob výroby

Miešajte zložky č. 1, 2 a 3 počas 10-15 minút. Pridajte zložku č. 4 a miešajte 1-3 minúty. Zmesou naplňte dvojdielne želatínové kapsule na vhodnom stroji.

Predkladaný vynález bol popísaný v spojení s konkrétnym uskutočnením, uvedeným hore. Odborníkovi v odbore budú zrejmé jeho viaceré alternatívy, modifikácie a variácie. Všetky takéto alternatívy, modifikácie a variácie spadajú do rozsahu a myšlienky predkladaného vynálezu.

Claims (13)

1. Zlúčenina, vybraná zo skupiny, obsahujúca :

Br

Br raccmická

100

Br

Br

101

102

103

104 alebo alebo jej farmaceutický prijateľné soli alebo solváty.

105 alebo vybraná zo skupiny, obsahujúca:

3. Zlúčenina podlá nároku 1,

106

4.

Zlúčenina podľa nároku j vzorcom:

nenormálneho

5.

Spôsob inhibície ú c i sa t ý rastu buniek, v y z množstvo m, že sa podáva účinné

5, sú

5, zlúčeniny vyznačuj nádorové bunky, že ide o tivovaný noch ako

9.

exprimujúce ú c i sa tým, aktivoj buniek dochádza ý m, inhij buniek, kde onkogénnej ú c i sa t ý m, bol Ras-proteín akmutácie v iných géRas-gén.

inhibície farnesyl-proteíntransferázy liečbu potrebuje, vy zn ač uj ú j

podľa nároku 1.

6. Spôsob podľa nároku že inhibovanými bunkami vaný Ras-onkogén.

7. Spôsob podľa nároku že k tejto inhibícii nenormálneho rastu bíciou farnesyl-proteíntransferázy.

8. Spôsob podľa nároku 5, vy inhibíciu nádorových ako výsledok nejakej je

Spôsob ktorý takú tým, že sa podáva účinné množstvo zlúčeniny podľa 10. Spôsob inhibície farnesyl-proteíntransferázy ktorý takú liečbu potrebuje, vy zn ač uj ú účinné množstvo zlúčeniny podľa rakoviny slinivky brušnej, rakoviny pľúc, rakoviny folikulov, štítnej žľazy, myeloepidermálneho karcinórnu, karcinórnu hrubého čreva, rakoviny pŕs a rakoviny prosktorý takúto liečbu potrebuje, vy z n a t ý rr., že sa podáva účinné množstvo zlúčeniu pacienta, c i sa nároku 1.

u pacienta, c i sa nároku 3.

t ý m, že sa podáva

11. Spôsob liečenia miechcvej leukémie, displastického syndrómu, žlčníka, rakoviny taty u pacienta, č u j ú c: i s a n y podľa nároku 1.

107

12. Spôscb liečenia rakoviny slinivky brušnej, rakoviny pľúc, miechovej leukémie, rakoviny folikulov, štítnej žľazy, myelodisplast irkét.o syndrómu, epidermálneho karcinómu, karcir.ómu žlčníka, rakoviny hrubého čreva, rakoviny pŕs a rakoviny prostaty u pacienta, ktorý takút.o liečbu potrebuje, vy z n a čujúci sa tým, že sa podáva účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 3.

13. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje účinné množstvo zlúčeniny podlá nároku 1 v spojení s farmaceutický prijateľným nosičom.

14. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 3 v spojení s farmaceutický prijateľným nosičom.

15. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1, na výrobu liečiva pre inhibiciu rastu nenormálnych buniek.

16. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1, pre inhibiciu rastu nenormálnych buniek.