RU2013132132A - Очистка ингибитора альфа1 протеазы, полученного из культуры клеток - Google Patents
Очистка ингибитора альфа1 протеазы, полученного из культуры клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2013132132A RU2013132132A RU2013132132/10A RU2013132132A RU2013132132A RU 2013132132 A RU2013132132 A RU 2013132132A RU 2013132132/10 A RU2013132132/10 A RU 2013132132/10A RU 2013132132 A RU2013132132 A RU 2013132132A RU 2013132132 A RU2013132132 A RU 2013132132A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reducing agent
- concentration
- reca1pi
- iron
- reduced
- Prior art date
Links
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title claims abstract 5
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 title claims 2
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 title claims 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract 67
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 32
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract 31
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims abstract 16
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract 14
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 13
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims abstract 13
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract 9
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 claims abstract 9
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims abstract 6
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 claims abstract 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims abstract 3
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims abstract 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 8
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims 6
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims 5
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 claims 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims 3
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims 3
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 claims 3
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims 2
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims 2
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims 2
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 claims 2
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 claims 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims 2
- GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 3-octoxypropane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCCOCC(O)CO GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 claims 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims 1
- BNMJSBUIDQYHIN-UHFFFAOYSA-N butyl dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCOP(O)(O)=O BNMJSBUIDQYHIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- C07K14/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- C07K14/8121—Serpins
- C07K14/8125—Alpha-1-antitrypsin
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
- C07K1/306—Extraction; Separation; Purification by precipitation by crystallization
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/99—Enzyme inactivation by chemical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
1. Способ устранения количества красящего агента в растворе, содержащем ингибитор альфапротеиназы (recA1PI), полученном из культуры клеток, включающий инкубирование раствора, содержащего recA1PI, с восстанавливающим агентом и отделение recA1PI от красящего агента.2. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин или DTT.3. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин.4. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет от приблизительно 1 мМ до приблизительно 100 мМ.5. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 10 мМ.6. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 1 мМ.7. Способ в соответствии с п. 1, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют в течение времени от приблизительно 1 до приблизительно 24 часов.8. Способ в соответствии с п. 1, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют при температуре от приблизительно 2°C до приблизительно 60°C.9. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой 10 мМ цистеин, и инкубацию осуществляют в течение ночи при приблизительно комнатной температуре.10. Способ в соответствии с п. 1, где отделение recA1PI от красящего агента включает хроматографию.11. Способ в соответствии с п. 10, где хроматография включает ионообменную хроматографию, гидрофобное взаимодействие, гель-фильтрацию, аффинную и иммуноаффинную хроматографию или их комбинации.12. Способ в соответствии с п. 1, включающий снижение концентрации железа.13 Способ в соответствии с п. 12, гд�
Claims (54)
1. Способ устранения количества красящего агента в растворе, содержащем ингибитор альфа1 протеиназы (recA1PI), полученном из культуры клеток, включающий инкубирование раствора, содержащего recA1PI, с восстанавливающим агентом и отделение recA1PI от красящего агента.
2. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин или DTT.
3. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин.
4. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет от приблизительно 1 мМ до приблизительно 100 мМ.
5. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 10 мМ.
6. Способ в соответствии с п. 1, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 1 мМ.
7. Способ в соответствии с п. 1, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют в течение времени от приблизительно 1 до приблизительно 24 часов.
8. Способ в соответствии с п. 1, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют при температуре от приблизительно 2°C до приблизительно 60°C.
9. Способ в соответствии с п. 1, где восстанавливающий агент представляет собой 10 мМ цистеин, и инкубацию осуществляют в течение ночи при приблизительно комнатной температуре.
10. Способ в соответствии с п. 1, где отделение recA1PI от красящего агента включает хроматографию.
11. Способ в соответствии с п. 10, где хроматография включает ионообменную хроматографию, гидрофобное взаимодействие, гель-фильтрацию, аффинную и иммуноаффинную хроматографию или их комбинации.
12. Способ в соответствии с п. 1, включающий снижение концентрации железа.
13 Способ в соответствии с п. 12, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 2-100 раз.
14. Способ в соответствии с п. 12, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 5-50 раз.
15 Способ в соответствии с п. 12, где концентрация железа составляет 10 мкМ или менее.
16. Способ в соответствии с п. 12, где концентрация железа составляет 1 мкМ или менее.
17. Способ очистки человеческого A1PI, полученного из культуры клеток, из водного раствора, содержащего recA1PI, включающий:
(a) проведение этапа вирусной инактивации раствора, содержащего recA1PI;
(b) пропускание раствора, подвергнутого вирусной инактивации, через анионообменник так, что recA1PI связывается с анионообменником;
(c) элюирование recA1PI из анионообменной смолы с получением анионообменного элюата, содержащего recA1PI;
(d) прибавление восстанавливающего агента к анионообменному элюату, содержащему recA1PI, с получением восстанавливающего раствора;
(e) инкубирование восстанавливающего раствора;
(f) пропускание восстанавливающего раствора через хроматографическую смолу гидрофобного взаимодействия (HIC) так, что recA1PI связывается с HIC смолой; и
(g) элюирование recA1PI из HIC смолы с получением HIC элюата, который содержит recA1PI.
18. Способ в соответствии с п. 17, где вирусная инактивация включает инкубацию с растворителем/детергентом.
19. Способ в соответствии с п. 18, где растворитель прибавляют в количестве, которое находится в интервале от 0,01% до приблизительно 0,5%.
20. Способ в соответствии с п. 18, где детергент прибавляют в количестве от приблизительно 0,5% до приблизительно 2,0% веса на объем полученной смеси.
21. Способ в соответствии с п. 18, где инкубация с растворителем/детергентом включает прибавление приблизительно 0,5% полисорбата 20 и приблизительно 0,03% три(н-бутил фосфата) при pH приблизительно 8 и температуре приблизительно 30°C.
22. Способ в соответствии с п. 17, где анионообменник представляет собой смолу на основе четвертичного аммония.
23. Способ в соответствии с п. 22, где смола на основе четвертичного аммония представляет собой Capto™ Q.
24. Способ в соответствии с п. 17, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин (Cys); цистеамин; дитиотреитол (DTT); дитиоэритритол (DTE); глутатион (GSH); 2-меркаптоэтанол (2-ME); 2-меркаптоэтиламин (2-MEA); трис(2-карбоксиэтил)фосфин (TCEP); щавелевую кислоту; муравьиную кислоту, аскорбиновую кислоту; никотинамид аденин динуклеотид (NADH); никотинамид аденин динуклеотид фосфат (NADPH); или их комбинации.
25. Способ в соответствии с п. 17, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин или DTT.
26. Способ в соответствии с п. 17, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин.
27. Способ в соответствии с п. 17, где концентрация восстанавливающего агента составляет от приблизительно от 1 мМ до 100 мМ.
28. Способ в соответствии с п. 17, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 10 мМ.
29. Способ в соответствии с п. 17, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 1 мМ.
30. Способ в соответствии с п. 17, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют в течение приблизительно от 1 до 24 ч.
31 Способ в соответствии с п. 17, где этап восстанавливающего инкубирования осуществляют при температуре от приблизительно 2°C до 60°C.
32. Способ в соответствии с п. 17, где восстанавливающий агент представляет собой 10 мМ цистеин, и инкубацию осуществляют в течение ночи при приблизительно комнатной температуре.
33. Способ в соответствии с п. 17, где HIC смола представляет собой Octyl Sepharose™ или Capto™ Octyl.
34. Способ в соответствии с п. 17, включающий снижение концентрации железа.
35. Способ в соответствии с п. 34, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 2-100 раз.
36. Способ в соответствии с п. 34, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 5-50 раз.
37. Способ в соответствии с п. 34, где концентрация железа составляет 10 мкМ или менее.
38. Способ в соответствии с п. 34, где концентрация железа составляет 1 мкМ или менее.
39. Способ очистки ингибитора альфа1 протеиназы (recA1PI), полученной из культуры клеток, включающий инкубирование раствора, включающего recA1PI, с восстанавливающим агентом и отделение recA1PI от восстанавливающего агента и восстановленных компонентов.
40. Способ в соответствии с п. 39, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин или DTT.
41. Способ в соответствии с п. 39, где восстанавливающий агент представляет собой цистеин.
42. Способ в соответствии с п. 39, где концентрация восстанавливающего агента составляет от приблизительно 1 мМ до приблизительно 100 мМ.
43. Способ в соответствии с п. 39, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 10 мМ.
44. Способ в соответствии с п. 39, где концентрация восстанавливающего агента составляет приблизительно 1 мМ.
45. Способ в соответствии с п. 39, где этап инкубации осуществляют в течение времени от приблизительно 1 до приблизительно 24 ч.
46. Способ в соответствии с п. 39, где этап инкубации осуществляют при температуре от приблизительно 2°C до приблизительно 60°C.
47. Способ в соответствии с п. 39, где восстанавливающий агент составляет приблизительно 10 мМ цистеина, и инкубацию осуществляют в течение ночи при приблизительно комнатной температуре.
48. Способ в соответствии с п. 39, где отделение recA1PI от восстанавливающего агента и восстановленных компонентов включает хроматографию.
49. Способ в соответствии с п. 48, где хроматография включает ионообменную хроматографию, хроматографию на основе гидрофобного взаимодействия, гель фильтрацию, аффинную, иммуноаффинную хроматографию или их комбинации.
50. Способ в соответствии с п. 39, где восстановленные компоненты включают железо.
51. Способ в соответствии с п. 50, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 2-100 раз.
52. Способ в соответствии с п. 50, где концентрацию железа снижают (то есть, уменьшают) в 5-50 раз.
53. Способ в соответствии с п. 50, где концентрация железа составляет 10 мкМ или менее.
54. Способ в соответствии с п. 50, где концентрация железа составляет 1 мкМ или менее.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261675560P | 2012-07-25 | 2012-07-25 | |
| US61/675560 | 2012-07-25 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013132132A true RU2013132132A (ru) | 2015-01-20 |
| RU2617960C2 RU2617960C2 (ru) | 2017-04-28 |
Family
ID=48748028
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013132132A RU2617960C2 (ru) | 2012-07-25 | 2013-07-11 | Очистка ингибитора альфа1 протеиназы, полученного из культуры клеток |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9353165B2 (ru) |
| EP (1) | EP2690110B1 (ru) |
| JP (1) | JP6096613B2 (ru) |
| KR (1) | KR101877352B1 (ru) |
| CN (1) | CN103570828B (ru) |
| AR (1) | AR091712A1 (ru) |
| AU (1) | AU2013203772B2 (ru) |
| BR (1) | BR102013016279B1 (ru) |
| CA (1) | CA2821384C (ru) |
| CL (1) | CL2013002024A1 (ru) |
| ES (1) | ES2628914T3 (ru) |
| HU (1) | HUE033582T2 (ru) |
| IL (1) | IL227409A (ru) |
| MX (1) | MX341733B (ru) |
| MY (1) | MY161395A (ru) |
| NZ (1) | NZ613080A (ru) |
| PL (1) | PL2690110T3 (ru) |
| PT (1) | PT2690110T (ru) |
| RU (1) | RU2617960C2 (ru) |
| SG (1) | SG196723A1 (ru) |
| TW (1) | TWI593702B (ru) |
| UY (1) | UY34915A (ru) |
| ZA (1) | ZA201305247B (ru) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016106291A1 (en) * | 2014-12-22 | 2016-06-30 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Methods of purifying recombinant proteins |
| MX2020004151A (es) | 2017-10-30 | 2020-08-13 | Takeda Pharmaceuticals Co | Detergentes compatibles con el medio ambiente para la inactivacion de virus envueltos en lipidos. |
| BR112022016234A2 (pt) * | 2020-02-25 | 2022-10-11 | Grifols Worldwide Operations Ltd | Método para obtenção de inibidor de proteinase alfa-1 |
| KR102284800B1 (ko) * | 2020-12-30 | 2021-08-03 | 주식회사 하플사이언스 | 재조합 세포외 기질 단백질의 생산을 위한 동물세포 배양용 배지 조성물 및 이를 이용한 방법 |
Family Cites Families (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60186290A (ja) * | 1983-08-10 | 1985-09-21 | チモ−ジエネテイツクス インコ−ポレ−テツド | アルフア−１−アンチトリプシンを細菌に表現させる方法 |
| US4931373A (en) | 1984-05-25 | 1990-06-05 | Zymogenetics, Inc. | Stable DNA constructs for expression of α-1 antitrypsin |
| US5134119A (en) | 1990-10-16 | 1992-07-28 | Lezdey John | Treatment of inflammation using 358 substituted alpha-antitrypsin |
| US6284874B1 (en) | 1994-06-17 | 2001-09-04 | Alpha Therapeutic Corporation | Process for separating α1-proteinase inhibitor from cohn fraction IV1 and IV4 paste |
| CA2170610C (en) * | 1994-06-27 | 2007-05-22 | Ioannis Stavridis | Removal of noxious oxidants and carcinogenic volatile nitrosocompounds from cigarette smoke using biological substances |
| US5616693A (en) | 1996-07-01 | 1997-04-01 | Alpha Therapeutic Corporation | Process for seperating alpha-1-proteinase inhibitor from COHN IV1 +1V4 paste |
| US6093804A (en) | 1998-09-24 | 2000-07-25 | American National Red Cross | Method for purification of alpha-1 proteinase inhibitor |
| US6462180B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-08 | Bayer Corporation | Method of preparing α-1 proteinase inhibitor |
| CA2432641A1 (en) | 2000-12-14 | 2002-06-20 | Bayer Corporation | Method of preparing alpha-1 proteinase inhibitor |
| EP1366062B1 (en) * | 2001-02-23 | 2011-07-27 | Immunex Corporation | Efficient recovery of correctly refolded proteins |
| US7777006B2 (en) * | 2002-12-31 | 2010-08-17 | Csl Behring L.L.C. | Method for purification of alpha-1-antitrypsin |
| WO2005014655A2 (en) * | 2003-08-08 | 2005-02-17 | Fresenius Kabi Deutschland Gmbh | Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein |
| WO2005014648A1 (en) | 2003-08-12 | 2005-02-17 | Octapharma Ag | Process for preparing an alpha-1-antitrypsin solution |
| EP1664123B2 (en) | 2003-09-22 | 2011-11-30 | Kamada Ltd. | Large scale preparation of alpha-1 proteinase inhibitor and use thereof |
| EP1685160A1 (en) | 2003-11-10 | 2006-08-02 | Arriva-Prometic Inc. | Dry recombinant human alpha 1-antitrypsin formulation |
| US7807435B2 (en) * | 2005-08-11 | 2010-10-05 | Baxter International Inc. | Method for the purification of alpha-1 proteinase inhibitor (a1PI) |
| US20070218535A1 (en) | 2005-11-28 | 2007-09-20 | Xinli Lin | Methods for production of recombinant alpha1-antitrypsin |
| GB0524432D0 (en) | 2005-11-30 | 2006-01-11 | Nhs Blood & Transplant | Method |
| ES2395667T3 (es) | 2006-03-30 | 2013-02-14 | Baxter International Inc. | Proceso para la purificación de alfa-1-antitripsina recombinante que implica un paso de cromatografía de intercambio aniónico |
| NZ582170A (en) * | 2007-08-17 | 2012-02-24 | Csl Behring Gmbh | Methods for purification of alpha-1-antitrypsin and apolipoprotein a-i |
| CN101835799A (zh) * | 2007-08-24 | 2010-09-15 | 麦莱克萨有限公司 | 超敏反应调节剂 |
| WO2009129558A1 (en) * | 2008-04-24 | 2009-10-29 | Newsouth Innovations Pty Limited | Cyanobacteria saxitoxin gene cluster and detection of cyanotoxic organisms |
| NZ590257A (en) * | 2008-07-18 | 2012-08-31 | Grifols Therapeutics Inc | Method of preparing alpha-1 proteinase inhibitor |
| JP5711215B2 (ja) | 2009-04-23 | 2015-04-30 | クルセル ホランド ベー ヴェー | 組換えヒトアルファ１−アンチトリプシン |
| JP2011205932A (ja) * | 2010-03-29 | 2011-10-20 | Sysmex Corp | トロンビンの製造方法 |
| WO2011150284A2 (en) * | 2010-05-26 | 2011-12-01 | Baxter International Inc. | Removal of serine proteases by treatment with finely divided silicon dioxide |
| AU2012262428C1 (en) * | 2011-05-27 | 2018-10-11 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Therapeutic proteins with increased half-life and methods of preparing same |
-
2013
- 2013-03-14 US US13/828,374 patent/US9353165B2/en active Active
- 2013-04-11 AU AU2013203772A patent/AU2013203772B2/en active Active
- 2013-06-25 BR BR102013016279-5A patent/BR102013016279B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-07-09 TW TW102124470A patent/TWI593702B/zh not_active IP Right Cessation
- 2013-07-09 JP JP2013143326A patent/JP6096613B2/ja active Active
- 2013-07-09 SG SG2013052857A patent/SG196723A1/en unknown
- 2013-07-09 KR KR1020130080176A patent/KR101877352B1/ko active Active
- 2013-07-10 HU HUE13175879A patent/HUE033582T2/hu unknown
- 2013-07-10 CA CA2821384A patent/CA2821384C/en active Active
- 2013-07-10 ES ES13175879.9T patent/ES2628914T3/es active Active
- 2013-07-10 IL IL227409A patent/IL227409A/en active IP Right Grant
- 2013-07-10 MY MYPI2013701208A patent/MY161395A/en unknown
- 2013-07-10 PL PL13175879T patent/PL2690110T3/pl unknown
- 2013-07-10 EP EP13175879.9A patent/EP2690110B1/en active Active
- 2013-07-10 AR ARP130102440 patent/AR091712A1/es active IP Right Grant
- 2013-07-10 ZA ZA2013/05247A patent/ZA201305247B/en unknown
- 2013-07-10 NZ NZ613080A patent/NZ613080A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-07-10 PT PT131758799T patent/PT2690110T/pt unknown
- 2013-07-11 MX MX2013008103A patent/MX341733B/es active IP Right Grant
- 2013-07-11 CL CL2013002024A patent/CL2013002024A1/es unknown
- 2013-07-11 RU RU2013132132A patent/RU2617960C2/ru active
- 2013-07-15 CN CN201310295645.8A patent/CN103570828B/zh active Active
- 2013-07-17 UY UY0001034915A patent/UY34915A/es active IP Right Grant
-
2016
- 2016-04-26 US US15/138,682 patent/US9957315B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AR121861A2 (es) | MÉTODO PARA PREPARAR UNA COMPOSICIÓN DE IgG ENRIQUECIDA A PARTIR DE PLASMA | |
| RU2013132132A (ru) | Очистка ингибитора альфа1 протеазы, полученного из культуры клеток | |
| Mavri‐Damelin et al. | Cells for bioartificial liver devices: The human hepatoma‐derived cell line C3A produces urea but does not detoxify ammonia | |
| EA201270214A1 (ru) | Способы очистки рекомбинантного adamts13 и других белков и их композиции | |
| JP2017521389A5 (ru) | ||
| HRP20160490T4 (hr) | Pripravak i oblik koji sadrže rekombinantnu humanu iduronat-2-sulfatazu te postupci njihove pripreme | |
| RU2013156669A (ru) | Промывочный раствор и способ аффинной хроматографии | |
| BR112015031196A2 (pt) | “processo de purificação de anticorpo monoclonal” | |
| EA201391282A1 (ru) | Клеточные линии с низким содержанием фукозы и их применение | |
| RU2007132851A (ru) | Способ мягкой распределительной хроматографии | |
| PE20120342A1 (es) | Formulacion de anticuerpo | |
| MX343087B (es) | Aislamiento y purificacion de anticuerpos usando la cromatografia de afinidad de proteina a. | |
| SG157346A1 (en) | Improved purification of collagenases from clostridium histolyticum liquid culture | |
| BR112012009289B8 (pt) | método para purificar um anticorpo anti-il-13 a partir de uma mistura de amostra que compreende um anticorpo anti-il-13 e pelo menos uma proteína de célula hospedeira (hcp) | |
| RU2012146084A (ru) | Способ очистки витамин-к-зависимых белков, таких как коагуляционный фактор ix | |
| BRPI0514340A (pt) | formulações de estabilização | |
| ATE547521T1 (de) | Verfahren zur reinigung von nukleinsäure | |
| RU2013123899A (ru) | Оптимизированный метод захвата антител хроматографией смешанного типа | |
| DK1568709T3 (da) | Oprensning af fibrinogen | |
| EA201400273A1 (ru) | Способ снижения тромбоэмболического потенциала композиции, содержащей полученный из плазмы иммуноглобулин | |
| Strzelecki et al. | Sites of action of glucagon and other Ca2+ mobilizing hormones on the malate aspartate cycle | |
| Macioszek et al. | Isolation of chloroplastic phosphoglycerate kinase: kinetics of the two-enzyme phosphoglycerate kinase/glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase couple | |
| MX2022001166A (es) | Metodo para inactivacion viral. | |
| CN107505422B (zh) | 一次性分离检测三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、一酸腺苷、腺苷和脱氧核苷酸五种化合物的方法 | |
| Pedro et al. | Purification of membrane-bound catechol-o-methyltransferase by arginine-affinity chromatography |