PT2414323E - Derivados de aminociclobutano ou aminociclobuteno, o seu processo de preparação e a sua utilização como medicamentos - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

DERIVADOS DE AMINOCICLOBUTANO OU AMINOCICLOBUTENO, O SEU PROCESSO DE PREPARAÇÃO E A SUA UTILIZAÇÃO COMO MEDICAMENTOS A presente invenção refere-se a. novos derivados de aminociclobutano ou aminociclobuteno, ao seu processo de preparação, às composições farmacêuticas que os contêm e à sua utilização como medicamentos. A técnica anterior está representada por milnaciprano [cis-(±)-Ν,Ν-dietil-(1-fenil-2-aminometil) ciclopropanocarbox- amida: Merck Index, 12a Edição, N° 6281] que corresponde à fórmula seguinte:

o \ \

NH,

<· \ \ *

V o milnaciprano é utilizado em muitos países para tratar a depressão (CNS Drugs, 22, 587) e está aprovado nos Estados Unidos para o tratamento da síndrome da fibromialgia. Além disso, nas patentes US 6.992.110 e WO 2003039598 (Cypress Bioscience, Inc. ) , o milnaciprano é reivindicado para ser utilizado no tratamento da dor e da sindrome da fadiga crónica.

Desde a descoberta do milnaciprano que têm sido descritos na literatura muitos seus análogos. Em termos globais, os derivados em causa correspondem à fórmula generrca seguinte: 1

Como exemplos das modificações estruturais realizadas na cadeia principal de milnaciprano, podem citar-se os seguintes trabalhos: Bonnaud et al., J. Med. Chem. 1987, 30, 78; Asahi Kasei Kogyo K. K., WO 9522521; Shuto et al., J. Med. Chem. 1995, 38, 2964; Shuto et al., J. Med. Chem. 1996, 61, 915; Shuto et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 4844; Shuto et al. , J. Med. Chem. 1998, 41, 3507; Perez et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 3423; Shuto et al., Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 1777; Shuto et al., Bioorg. Med. Chem. 2002, 10, 3829; Shuto et al., Chem. Farm. Buli. 2002, O LO 966; Shuto et al., J. . Med. Chem. 2003, 46, 5326; Collegium Pharmaceutical, Inc. , WO 2004039320; Shuto et al., Biorg. Med. Chem. 2008, LO \—1 8875; Hansen et al. ,

Biorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17, 2834; Chen et al. , Biorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 1346; Chen et al. , Biorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 3230; Chen et al., Biorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 3328; Chen et al., J. Med. Chem. 2008, 51, 7265.

Tal como o milnaciprano, estes derivados comportam-se normalmente como inibidores múltiplos de locais de recaptação de monoamina (Expert Opin. Investig. Drugs 2007, 16, 1365); a actividade relativa dos produtos em causa nos diferentes locais varia consoante o tipo dos grupos Ar e R1-R5.

De um ponto de vista estrutural, os compostos da invenção diferem do milnaciprano, e seus produtos derivados, pelo tamanho do ciclo de carbono e pela possível incorporação de 2 uma ligação dupla nesse ciclo. Estas modificações estruturais têm repercussões importantes na actividade farmacológica dos produtos da invenção. A este respeito, os compostos de fórmula (1) distinguem-se do milnaciprano e seus compostos derivados, não só pela sua estrutura química, mas também pelas suas propriedades farmacológicas. Os compostos da presente invenção são de fórmula geral (1): R1R2

Fórmula 1 na qual: - -a- é uma ligação simples ou dupla; - Ar é um grupo aromático, substituído ou não substituído; - RI e R2 são, de forma independente ou em conjunto: um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C6, ramificado ou não ramificado, saturado ou insaturado, substituído ou não substituído; os grupos RI e R2 podem também formar um heterociclo; - R3 e R3' são, de forma independente ou em conjunto, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C6 - X é um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. 0 termo «alquilo» C1-C6 designa cadeias hidrocarboneto alifáticas, lineares ou ramificadas, saturadas ou insaturadas, e que compreendem o número específico de átomos de carbono de, por exemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo ou hexilo. 3 0 termo «alcoxilo» C1-C6 designa uma cadeia hidrocarboneto, linear ou ramificada, que contém 1 a 6 átomos de carbono e um átomo de oxigénio, por exemplo, um radical metoxilo, um radical etoxilo, um radical propoxilo, um radical butoxilo, um radical pentoxilo ou um radical hexoxilo. 0 termo «halogéneo» designa um flúor, cloro, bromo ou iodo. 0 termo «aromático» designa: - um hidrocarboneto aromático que pode ser um monociclo, tal como fenilo, por exemplo, ou biciclo, tal como naftilo, por exemplo; - ou um radical heteroaromático que corresponde a um hidrocarboneto aromático como anteriormente definido, no qual um ou mais átomos de carbono foram substituídos por um heteroátomo, tal como azoto, por exemplo, ou oxigénio ou enxofre; entre eles podem citar-se piridina, pirimidina, imidazol, indol, furano ou tiofeno, por exemplo, e, em particular, tiofen-2-il, tiofen-2-il e piridin-3-il. 0 termo «heterociclo» designa quer um monociclo estável contendo 5 a 7 átomos de carbono, quer um biciclo estável contendo 8 a 11 átomos, sendo possivelmente tanto saturado como insaturado e consistindo em átomos de carbono e de um a quatro heteroátomos escolhidos entre azoto, oxigénio, enxofre e contendo pelo menos um átomo de azoto. Incluídos também na definição de biciclo estão heterociclos monociclo agregados a um núcleo de benzeno. Como exemplo podem referir-se pirrolidona, indolina e tetra-hidro-isoquinolina. 4 0 termo «sais farmceuticamente aceitáveis» designa, por exemplo: fumarato, maleato, cloridrato e todos os outros sais recomendados em: Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, Selection and Use; Stahl, P. H., Wermuth, C. G. Eds.; Wiley-VC, 2002.

De acordo com uma forma de realização da invenção, se o grupo aromático Ar, nos compostos de fórmula geral (1) , estiver substituído, o(s) substituinte (s) são: um ou mais átomos de halogéneo, um ou mais grupos alquilo C1-C6 ou um ou mais grupos alcoxilo C1-C6 ou um grupo ciano.

De acordo com uma forma de realização da invenção, se os grupos RI e/ou R2 forem um grupo alquilo C1-C6 substituído, o substituinte é um átomo de halogéneo.

De acordo com a invenção, os compostos de fórmula (1) são aqueles nos quais Ar é: - um grupo fenilo substituído ou não substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo Ci-C6 ou com um ou mais grupos alcoxilo Ci-C6 ou com um grupo ciano; - um grupo naftilo substituído ou não substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo C1-C6 ou com um ou mais grupos alcoxilo C1-C6 ou com um grupo ciano; - um grupo heteroaromático não substituído ou substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo C1-C6 ou com um ou mais grupos alcoxilo C1-C6 ou com um grupo ciano.

De acordo com uma forma de realização da invenção, os compostos de fórmula (1) são aqueles nos quais Ar é: 5 - um grupo fenilo não substituído ou substituído com um ou dois átomos de halogéneo ou com um ou dois grupos metilo ou com um ou dois grupos metoxilo ou com um grupo ciano; - ou um grupo naftilen-2-il; - ou um grupo heteroaromático escolhido entre o grupo que consiste em: tiofen-2-il, tiofen-3-il e piridin-3-il.

De acordo com a invenção, os compostos de fórmula (1) são aqueles nos quais RI e R2 são, de forma independente ou em conjunto: - um grupo alquilo C1-C3, ramificado ou não ramificado, saturado ou insaturado, substituído opcionalmente com um átomo de flúor; - ou um heterociclo escolhido entre o grupo que consiste em: pirrolidina, indolina e tetra-hidro-isoquinolina.

Entre os compostos de fórmula geral (1) abrangidos pela presente invenção, uma classe de compostos considerada corresponde aos compostos de fórmula geral (1) na qual R3 e R3' representam em conjunto um átomo de hidrogénio ou de forma independente um grupo metilo ou etilo e um átomo de hidrogénio.

Entre os compostos de fórmula geral (1) abrangidos pela presente invenção, uma classe de compostos considerada corresponde aos compostos de fórmula geral (1) na qual X é um átomo de oxigénio.

Entre os compostos de fórmula geral (1) abrangidos pela presente invenção, uma classe de compostos considerada 6 corresponde aos compostos de fórmula geral (1) na qual X é um átomo de oxigénio e R3 e R3' são um átomo de hidrogénio. A invenção abrange igualmente os sais dos compostos de fórmula (1) com ácidos minerais ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis e os enantiómeros dos compostos de fórmula (1). A invenção inclui ainda as formas tautoméricas dos compostos de fórmula geral (1).

Os compostos da invenção compreendem pelo menos dois átomos de carbono assimétricos e podem, por conseguinte, ser obtidos na forma de misturas racémicas ou de enantiómeros. A invenção não só se refere a qualquer enantiómero puro, i.e. associado a menos de 5% de outro enantiómero, mas também à mistura de enantiómeros em todas as proporções. Os compostos da invenção podem portanto ser utilizados enquanto enantiómero puro ou enquanto misturas racémicas ou não racémicas de enantiómeros.

Mais especificamente, a invenção refere-se às misturas e aos enantiómeros puros dos seguintes produtos: - cis-N,N-Dietil-(1-fenil-2-aminometil) ciclobutanocar-boxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminometil)-cilobutenocar-boxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(tiofen-2-il)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(tiofen-3-il)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(piridin-3-il)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(naftalen-2-il)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida 7 cis-N,N-Dietil-(1-(2-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclo butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(2-cianofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclo butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-metoxifenil)-2-aminometil)-ciclo butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-diclorofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-difluorofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-metilenodioxifenil)-2-aminometil) -ciclobutanocarboxamida cis-l-Indolin-l-il-(l-fenil-2-aminometil) -ciclobutanocarboxamida cis-l-Indolin-l-il-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-fenil-2-aminometil) ciclobutanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-fluorofenil) -2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(1-(3-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-2-il-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-2-il-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminoetil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(3-clorofenil)-2-aminoetil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutanotio-carboxamida

PROCESSO DE SÍNTESE A invenção abrange igualmente o processo para preparar derivados de fórmula geral (1).

Os derivados de fórmula geral (1) podem obter-se a partir de um derivado de fórmula (2):

Fórmula 2 9 3

Aplicando um processo semelhante ao descrito em J. Org. Chem. 1996, 61, 915. Nos compostos de fórmula (2), os grupos Ar, Rl, R2, R3, R3' e (-a-) têm a mesma designação que para o derivado de fórmula (1). 0 composto de fórmula (2) pode ele próprio ser preparado a partir de um composto de fórmula (3):

Fórmula 3 por aplicação de um processo convencional em quimica orgânica, tal como descrito, por exemplo, em: J. Med Chem. 1980, 23, 1142; Chem. Ber. 1985, 118, 2266; J. Org. Chem. 2003, 68, 9348; J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 4762. Nos compostos de fórmula (3) , os grupos Ar, Rl, R2, R3, R3' e (-a-) têm a mesma designação que para o composto de fórmula (D · O composto de fórmula (3) pode por sua vez ser preparado a partir da lactona de fórmula (4): ,νν·-ΐ $ Fórmula 4 na qual Ar e (-a-) têm a mesma designação que para o derivado de fórmula (1) . A abertura das lactonas por uma amina é uma reacção bem conhecida dos peritos na técnica e amplamente descrita na literatura: J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 1999, 605; J. Org. Chem. 2005, 70, 9798. 0 composto de fórmula 4 no qual Ar é um grupo fenilo e (-a-) representa uma ligação simples é conhecido [59664-87-8] e relata-se a sua preparação em Buli. Chem. Soc. Jpn. 1976, 10 49, 520. O derivado de fórmula (4) no qual Ar é um grupo fenilo e (-a-) representa uma ligação dupla também é conhecido [38029-37-7], bem como a sua preparação cf. Chem. Lett. 1972, 807 e Buli. Chem. Soc. Jpn. 1976, 49, 520. Por analogia, os derivados de fórmula (4) podem ser preparados por ciclo-adição [2+2] utilizando um processo convencional em quimica orgânica e bem conhecido dos peritos na técnica.

Os compostos de fórmula 1 nos quais X=S podem preparar-se a partir do composto de fórmula 1 correspondente com X=0, por protecção da função amina primária seguida de reacção com um tio-anidrido, seguindo o processo descrito em J. Chem. Res. 2004, 474.

Pode obter-se um enantiómero particular dos compostos de fórmula (1) por resolução da mistura racémica ou de uma mistura enriquecida com um dos enantiómeros, nas etapas da sintese mais adequadas.

Um outro aspecto da invenção compreende novos intermediários de sintese que são utilizados no processo para preparar os compostos de fórmula (1) descritos acima.

Refere-se designadamente ao intermediário de sintese de fórmula (2):

O Fórmula Ξ na qual (-a-) , Ar, Rl, R2, R3 e R3' são como definidos acima, utilizado para a preparação dos compostos de fórmula geral (1).

Refere-se igualmente ao intermediário de fórmula (3): 11

RI \

N /

R2 O HO na qual (-a-), Ar, Rl, R2, R3 e R3' são como definidos previamente, utilizado para a preparação dos compostos de fórmula geral (2).

EXEMPLOS

Os exemplos seguintes ilustram, mas de forma alguma limitam, a invenção.

Nos exemplos e exemplos de referência abaixo: (i) monitoriza-se a evolução das reacções por cromatografia em camada fina (CCF) e portanto os tempos de reacção mencionados são meramente indicativos; (ii) formas cristalinas diferentes podem conduzir a pontos de fusão diferentes; os pontos de fusão referidos no presente pedido de patente são os dos produtos preparados seguindo o processo descrito e não estão corrigidos; (iii) a estrutura dos produtos obtidos de acordo com a invenção é confirmada pelo espectro de ressonância magnética nuclear (RMN) e análise centesimal; verifica-se a pureza dos produtos finais por CCF; determina-se a pureza enantiomérica dos intermediários reaccionais e dos produtos finais por CLAD de fase quiral; 12 (iv) regista-se o espectro RMN no solvente indicado.

Os desvios químicos (δ) são expressos em partes por milhão (ppm) relativamente ao tetrametilsilano. A multiplicidade dos sinais é indicada por: s, singuleto; d, dupleto; t, tripleto; q, quadrupleto; m, multipleto; 1, largo. (v) Os diferentes símbolos das unidades têm a designação habitual: μg (micrograma); mg

(miligrama); g (grama); mL (mililitro); mA (miliampere); °C (grau Celsius); mmol (milimole); nmol (nanomole); cm (centímetro); nm (nanómetro); min (minuto); s (segundo); Hz (Hertz); [a] (rotação específica medida a 589 nm, 25°C e concentração c, na presente invenção a dimensão grau cm2 g_1 está sempre implícita); a pressão é dada em milibares (mb) ; (vi) as abreviaturas têm o seguinte significado: pf (ponto de fusão); (vii) por "temperatura ambiente" entende-se a temperatura entre 20°C e 25°C. (viii)

Exemplo 1: (±)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida (la)

Etapa 1: (±)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-hidroximetil)-ciclo- butanocarboxamida (3a)

Colocam-se 1,6 equ. de dietilamina e THF num frasco de três tubuladuras, em atmosfera de azoto. Arrefece-se a mistura para 0°C e adicionam-se, gota a gota, 1,6 equ. de BuLi. Agita-se a mistura 5 min a 0°C, depois arrefece-se para -78°C. A seguir adiciona-se lactona (1 equ.), gota a gota, em solução em THF (concentração final relativamente à lactona = 0,25 mol/mL). Agita-se a mistura a -78°C durante 13 2 h. Volta-se aos 5°C seguido de hidrólise do meio reaccional com solução saturada de NH4C1. Dilui-se a mistura reaccional com H2O e depois extrai-se com acetato de etilo. Seca-se a fase orgânica sobre MgSCg, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia flash (eluente: heptano/acetato de etilo, 1: 1) Obtém-se 0 produto do título na forma de um óleo amarelo (rendimento=83%). RMN (CDC13, 400 MHz) δ : 0,66 (t, 3H) , 1,07 (t, 3H), 1,54 (m, 1H) , 2,14 (m, 1H) , 2,59-2,71 (m, 3H) , 2,80 (m, 1H) , 2,99 (m, 1H) , 3,21 (m, , 1H) , 3,35 (m, 1H) , 3, 62-3, 68 (m, 1H) , 3, 92-3, 95 (m, 1H) , 5,26 (dd, 1H) , 7,24 (m, 1H) , 7,37 (t, 2H) , 7,44 (d, 2H) .

Etapa 2: (±) -cis-iV,W-dietil- (l-fenil-2-azidometil) - ciclobutanocarboxamida (2a)

Adiciona-se 1 equ. de álcool de (2a) e DMF. Arrefece-se a mistura para 0°C e adiciona-se pela ordem seguinte: 18 equ. de NaN3, 3 equ. de CBr4 e 3 equ. de PPh3. Agita-se a mistura reaccional 5 min a 0°C, depois deixa-se voltar à temperatura ambiente. Agita-se durante 4 h, depois dilui-se o meio reaccional com H2O e extrai-se com acetato de etilo. Seca-se a fase orgânica sobre MgS04, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia flash (eluente: heptano/acetato de etilo, 9:1). Obtém-se o produto do título na forma de um óleo incolor (rendimento=84%). RMN (CDC13, 400 MHz)δ: 0,36 (t, 3H) , 1,09 (t, 3H), 1 ,70 1,77 (m, 1H) , 2,03-2,09 (m, 1H) , 2,19 (m, 1H), 2,78 (m 1H) , 2,90-3,03 (m, 2H) , 3,09-3,19 (m, 2H) , 3,44 (m, 1H) 3, 63 (d, 2H), 7,23-7,26 (m, 1H), 7, 34-7, 39 (m , 4H) .

Etapa 3: (±)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)- ciclobutanocarboxamida (la) 14

Adiciona-se 1 equ. de azida (2a) e o metanol. Desgaseifica-se a solução durante 30 min com azoto, depois adiciona-se Pd/C (10% ponderai). Purga-se o sistema (ciclo em vazio/H2 gasoso) e hidrogena-se a mistura sob baixa pressão de hidrogénio, durante 3 h, à temperatura ambiente, sob agitação. Purga-se o meio reaccional com azoto, remove-se o catalisador por filtração e evapora-se o solvente. Obtém-se o composto do titulo na forma de um pó branco (rendimento=70%).

C16H24N2O

Pf: 95 °C RMN (CDCI3, 400 MHz) δ : 0, 27 (t, 3H) , 1,09 (t, 3H), 1, 29 (s, 1H) , 1, 60- -1, 65 (m, 1H) , 1,81- -1,86 (m, 1H), 2,16 (c , 1H) , 2,77 (m, 1H) , 2,84 -3, 0 0 (m, 4H) , 3, 05 (m, 1H), 3, 24 (q, 1H) , 3, 50 (m, 1H) , 7, 21-7,25 (m, 2H) , 7,33-7,36 (m, 4H). % Teórica C 73,91; H 9,30; N 10,78 % Encontrada C 73,95; H 9,28; N 10,75. A salificação do composto (la) com ácido oxálico conduz à obtenção do oxalato do composto do titulo na forma de cristais brancos.

C16H24N2O.C2H2O4 pf: 175°C RMN (DMSO d6, 400 MHz) δ: 0,33 (t, 3H) , 0,97 (t, 3H) , 1,70 (t, 1H) , 1, 98-2, 04 (m, 2H) , 2,76-3, 04 (m, 7H) , 3,33 (m, 1H), 7,27 (t, 1H), 7,35-7,43 (m, 4H) . % Teórica C 61,70; H 7,48; N 7,99 % Encontrada C 61,74; H 7,56; N 8,12.

Exemplo 2: (+)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida (lai)

Separam-se os enantiómeros de (±)-cis-N,N-dietil-(1-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida (la) por cromatografia de fase quiral (Chiralpack IC), utilizando como solvente de 15 eluição uma mistura de acetonitrilo-etanol-butilamina (90:10:0,1)· (+)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocar-boxamida (lai), [a]o= +0,84° A salificação do composto (lai) com ácido oxálico conduz à obtenção do oxalato do composto do titulo na forma de cristais brancos, pf: 17 0 ° C [α]o= -22,1°. RMN (DMSO d6, 400 MHz)õ: 0,44 (t, 3H) , 0,98 (t, 3H) 1,68 (m, 1H) , 2,08 (c, 1H) , 2,31 (m, 1H) , 2,76- 2, 92 (m 4H), 2,98-3,10 (m, 2H), 3,15 (dd, 1H) , 3,28-3,36 (m, 1H) 7,29 (t, 1H), 7,37-7,45 (m, 4H), 8,00 (s, 2H). % Teórica C 61,70; H 7,48; N 7,99 % Encontrada C 61,85; H 7,22; N 7.77.

Exemplo 3: (-)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida (la2) (-)-cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutano-carboxamida (la2), [cx]d= -0,84° A salificação do composto (lai) com ácido oxálico conduz à obtenção do oxalato do composto do titulo na forma de cristais brancos, pf: 17 0 °C [a]D= -21,7°. % Teórica C 61,70; H 7,48; N 7,99 % Encontrada C 60,62; H 7,37; N 7,83.

Exemplo 4: (±)-cis-l-indolinil-(l-fenil-2-aminometil)-ci- clobutanocarboxamida (lb) 16

Etapa 1: (+)-cis-l-indolinil-(l-fenil-2-hidroximetil)-ci- clobutanocarboxamida (3b)

Obtém-se este composto seguindo as mesmas condições experimentais da sintese do intermediário (3a) , substituindo a dietilamina por indolina. Obtém-se o composto do titulo (3b) após cristalização em éter isopropilico (rendimento=52%). RMN (CDC13, 400 MHz) δ • 1,57· -1,14 (m, 1H) , 2,21 (m, 1H) , 2, 66-2,94 (m, 4H) , 3, 45 (m, 1H) , 3, 62 (m, 1H) , 3, 69 (dd , 1H), 4,07 (dd, 1H) , 4 ,76 (s, 2H) , 7,02 (t, 1H) , 7,12 (d, 1H) , 7,22 (t, 1H) , 7, 24- 7,29 (m, 1H) , 7,39 (t, 2H) , 7,51 (d, 2H) , 8,27 (d, 1H) .

Etapa 2: (±)-1-indolinil-(l-fenil-2-azidometil)-ciclo- butanocarboxamida (2b)

Obtém-se o composto do titulo (2b) seguindo as mesmas condições experimentais da sintese do intermediário (2a) , após purificação por cromatografia flash (eluente: heptano/acetato de etilo, 95:5), rendimento=99%. RMN (CDCI3, 4i 00 MHz) δ : 1, 77- OO < \—1 (m, 1H) , 2,17- •2,31 (m, 2H) , 2,81 -2, 88 (m, 1H) , 2, 91- •2, 99 (m, 1H) , 3, 03- •3, 06 (m, 1H) , 3,12 -3, 21 (m, 2H) , 3, 45 (m, 1H) , 3, 77 (d, 2H) , 7,01 (t , 1H) , 7, . 11 (d, 1H) , 7, . 22 (t, 1H) , 7,26 -7,29 (m, 1H) , 7,36 (m, 4H) , 8 ,28 (d, 1H) . Etapa 3: (±) -1- indolinil - d -fenil- 2-ami: nometi .1) -ci .cio- butanocarboxamida (lb)

Obtém-se o composto do titulo (lb) seguindo as mesmas condições experimentais da sintese do composto (la) , após purificação por cromatografia flash. A salificação do composto (lb) com ácido fumárico conduz à obtenção do 17 fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C20H22N2O. C4H4O4 pf: 156°C 2H RMN (400 MHz, d6 DMSO): 1, 75 (t, J = 11,2 Hz, 1H) , 2,09 (dt, J = 19,6, 8,8 Hz, 1H), 2, r 24 (t, J = 11,2 Hz, 1H) , 2, 87 -3, 09 (m, 6 Hz) , 3,22 (dd, J = 12, 4,4 Hz, 1H) , 3,27 (dt, J = 9,6, 9, 2 H 2 b 1H), 3, 41- -3,48 ! (m, 2H) , 6,4 : (S, 2H) , 7,00 (t ·, J = v, 6 Hz , 1H), 7, 16 (t, J = 7,2 Hz, 2H) , 7,31 (t, J = = 6,8 Hz, 1H) , 7,41 -7, 47 (m, 4H) , 8,1 4 (d, , J = = 8,4

Hz, 1H). % Teórica C 68,23; H 6,20; N 6,63 % Encontrada C 68,05; H 6,41; N 6,64.

Exemplo 5: (±)cis-l-tetra-hidroquinolin-2-il-(l-fenil-2- aminometil)-ciclobutanocarboxamida (lc)

Obtém-se o composto do título (lc) seguindo as mesmas condições experimentais da síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C21H24N2O. C4H4O4 pf: 159 °C 2H RMN (400 MHz, d6 DMSO) : 1,71-1,74 (m, 1H) , 2,04-2,18 (m, 2H) , 2,29-2, 39 (m, 1H), 2, 85 (m, 1 Hz) , 2, ,95-3, 11 (m, 3H) , 3,1- 3,2 (m, 2H) , 3,19 (m, 1H) , 3,6-3,71 (m, 2H) , 4, 08 (s, 1H) , 4,41(d, J = 17,2 Hz, 1H) , 4,79(d, J = 17 ,6 Hz, 1H) , 6, 42 (s, 2H) f 6,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 7,08 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,] .1- 7,16 (m, 2H) , 7,29-7,33 (m, 2H) , 7, 41- -7,434 (m, 3H) . % Teórica C 68, 79; H 6, 47; N 6,42 % Encontrada C 68,57; H 6, 48; N 6,46. 18

Exemplo_6 : (±)cis-N-etil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida (ld)

Obtém-se o composto do titulo (ld) aplicando as mesmas condições experimentais da sintese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do hemifumarato do composto do titulo na forma de cristais brancos.

C14H20N2O. C2H2O2 pf: 174 °C 2H RMN (4 00 MHz, d 6 DMSO) : 0,95 (t, J = 6, 8 Hz , 3H) , 1, 68 (dt, J = 18,4, 9 H z, 1H), 1,97-2,03 (m, 1H) , 2, 21 -2,24 (m, 1H) , 2, 69 -2,75 (m, 1H) , 2, 80-2,83 (m, 1H) , 2, 96 (t , J = 7,6 Hz, 1H) r 3, 04 (dd, J = 14 , 6, 8 Hz, 2H) , 3, 19 -3, 22 (m, 1H) , 6, 37 (s r 1H) , 7,22 (dd, J = 8,4, 4,4 Hz, 1H) , 7, 32 -7,34 (m, 3H) , 7, 79 (s, 1H) . % Teóri ca C 66 , 18; H 7, 55; N 9, 65 % Encontrada C 65,74; H 7,56; N 9,21.

Exemplo 7 : (±)cis-N,N-dialil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida (le)

Obtém-se o composto do titulo (le) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para o composto (la). A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do titulo na forma de cristais brancos.

C18H24N2O. C4H4O4 pf: 95 °C 1H RMN (400 MHz, d6 DMSO) : 1, 68-1,73 (m, 1H) , 2,04 (dt, J = 19,6, 8,8 δ Hz, 1H), 2,19-2,24 (m, 1H), 2,88 (dd, J = 20,4, 9,2 Hz, 1H) , 2,99 (t, J = 12 Hz, 1H) , 3,13 (dd, J = 12,4, 5,6 Hz, 1H) , 3,31 (dd, J = 16, 6,8 Hz, 1H) , 3, 46-3, 56 (m, 2H) , 4,01 (dd, J = 15,2, 5,2 Hz, 1H) , 4,75-4,85 (m, 1H) , 19 4, 92-4, 97 (m, 3H) , 5,06 (d, J = 10,4 Hz, 1H) , 5, 60-5,70 (m, 1H), 6,42 (s, 2H), 7,27-7,32 (m, 1H), 7,38-7,44 (m, 4H). % Teórica C 65,98; H 7,05; N 7,00 % Encontrada C 66,28; H 6,91; N 6,89.

Exemplo 8: (±)cis-N,N-dietil-(1-(tiofen-2-il)-2-aminometil) -ciclobutanocarboxamida (lf)

Obtém-se o composto do título (lf) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C14H22N2OS. C4H4O4 pf: 14 0 ° C RMN (400 MHz, d6 DMSO): 0,! 59 (t, J = 6, 4 Hz, 3H) , 0, 9 (t, J = 6, 8 Hz, 3H) , 1,74 (t, J = 1 0,4 Hz, 1H) , 2,11- 2,2 (m, 2H) , 2, 86-3, 13 (m, 7H), 3,3 1-3 ,45 (m, 1H) , LO (s 2H) , 7, 03 (d, J : = 4, 4 Hz, 1H) , 7 ,06 (s, 1H) , 7, 45 (d, J 5,2 Hz, 1H) . % Teórb ca C 56, 53 b H LO OD LiO N 7 , 32 ; s 8,38 % Encontrada C 56,46; H 6,81; N 7,22, S 8,05.

Exemplo_9: (±)cis-N,N-dietil-(1-(tiofen-3-il)-2-amino- metil)-ciclobutanocarboxamida (lg)

Obtém-se o composto do título (lg) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C14H22N2OS. C4H4O4 pf: 159°C 20 2h RMN (400 MHz, d6 DMSO): 0, 49 (t, J = II Hz, 3H) , 0, 98 (t, J = = 6,8 Hz, 3H) , r 1,69 (t , J = H 0,4 Hz, 1H) , 2,06- 2,14 (m, 2H) , 2, 83-3, 18 (m, 7H), 3,31-3, 45 (m, 1H) , 6, 46 (s, 2H) , 6, 93 (d J = = 4, 8 Hz, 1H) , 7,48 (s, 1H) , 7,56 (dd, J = 4,4 , 2, 8 Hz, 1H) . % Teóri ca C 56, 33 ; H 6, 85; N ' 7,32; S 8,38 % Encontrada C 56 ,72 ; H 6, 86; N 7,43; S 8,34.

Exemplo 10: (±)cis-N,N-dietil-(1-(2-clorofenil)-2-amino- metil)-ciclobutanocarboxamida (lh)

Obtém-se o composto do título (lh) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos. C16H23CIN2O. C4H4O4

pf: 17 0 °C 1H RMN (400 MHz, d6 DMSO) : 0,07 (t, J = 6, 8 Hz, 3H) , 1,02 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,75-1,85 (m, 2H), 1,97 (dt, J = 9,2, 7,6 Hz, 1H) , 2, 67-2,83 (m, 2H) , 2,91-3,06 (m, 3H) , 3,22- 3,45 (m, 3H), 6,48 (s, 2H), 7,32 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,42- 7,47 (m, 2H) , 7,75 (d, J = 7,6 Hz, 1H) . % Teórica C 56,35; H 6,23; N 5,97 % Encontrada C 57,61; H 6,35; N 6,26.

Exemplo 11: (±)cis-N,N-dietil-(1-(3-clorofenil)-2-amino- metil)-ciclobutanocarboxamida (li)

Obtém-se o composto do título (li) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos. 21

C16H23C1N20.C4H404 pf: 160 °C XH RMN (400 MHz, d6 DMSO) : 0,44 (t, J = 6, 8 Hz, 3H) , 0,98 (t, J = 6,8 Hz, 3H) 1,69 (t, J = 10 Hz, 1H), 2,04 (dt, J = 18,1 Hz, 1H), 2,13-2,17 (m, 1H), 2,78-2,86 (m, 2H) , 2,89-2,93 (m, 3H) , 3, 02-3, 08 (m, 2H) , 3,3-3,37 (m, 1H) , 6,43 (s, 2H) , 7,34-7,38 (m, 3H), 7,46 (t, J = 8,4 Hz, 1H) . % Teórica C 58,46; H 6,62; N 6,82 % Encontrada C 59,04; H 6,60; N 6,73.

Exemplo 12: (±)cis-N,N-dietil-(1-(4-fluorofenil)-2-amino- metil)-ciclobutanocarboxamida (1j)

Obtém-se o composto do título (1j) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do di-fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C16H23FN2O. ΟεΗεΟε pf: 183°C XH RMN (400 MHz, d6 DMSO): 0,4 16 (t, J = = 6, 8 Hz, 3H) , 0 , 97 (t, J = 6, 8 Hz , 3H) , 1,66-1,71 (m, 1H), 2,08 (dt, J = 1 7 , 6, 6,4 Hz, 1H) , 2 , 08-2 ,1 (m, 1H), 2,75- 2,88 (m, 4H) , 2,96- 3 ,16 (m, 2H) , 3, 14 (dd, J = 12,4, 5, 6 Hz, 1H) , 3,28 -3, 45 (m, 1H) , 6, 57 (ε d 4H) , 7,25 (t, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,41 (dd, J = 8,4, 5,2 Hz, 2H). % Teórica C 56,47; H 6,12; N 5,49 % Encontrada C 56,61; H 6,81; N 7,29.

Exemplo_1_3 : (±) cis-N,N-dietil - (1- (2,3-diclorofenil) -2- amino-metil)-ciclobutanocarboxamida (lk)

Obtém-se o composto do título (lk) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do 22 composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C16H22CI2N2O. C4H4O4 pf: 184 °C RMN (4 00 MHz, d6 DMSO): 0,0 9 (t , J = 6,8 Hz, 3H) , 1,02 (t, J = 6 ,8 Hz, 3H), 1,76- 1,84 (m, 2H) , 1, 98 -2,02 (m, 1H) , 2,67-2 ,78 (m, 2H) , 2,90-3, 05 (m; 3H) , 3,22- 3,39 (m, 3H) , 6,45 ( s, 2H), 7,47 (t, J = = 8 Hz, 1H) , 7,60 (d, J = 8 Hz, 1H) , 7 ,77 (d, J = 8 Hz, 1H) • % Teór ica C 53,94; H 5,88; N 6, 29 % Encontrada C 54,28; H 5,85; N 6,24.

Exemplo_b4 : (±)cis-N,N-dietil-(1-(3,4-diclorofenil)-2- amino-metil)-ciclobutanocarboxamida (11)

Obtém-se o composto do título (11) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C16H22CI2N2O. C4H4O4 pf: 182 °C XH RMN (4 00 MHz, d6 DMSO) \—1 LO O (t, J = 6, 4 Hz , 3H) , 0, 97 (t, J = 7 ,2 Hz, 3H), 1, 67 (t, J = 10 Hz, 1H) , 1, 99-2,07 (m, 1H) , 2, 21 (t, J = 8, 8 Hz, 1H), 2, 78-2 , 95 (m, 5H) , 3,03- 3, 11 (m, 3H) / 3,33-3,37 ( m, 2H) , 6,43 (s, 2H) , 7, 36 (d, J = 8,4 Hz, 1H) r 7,59 (s, 1H) , 7,69 (d, J = 8 ,41 Hz, 1H) • % Teóri ca C 53,94; H 5,88; N 6,29 % Encontr ada C 54,05 ; H 5, 90; N 6 ,17.

Exemplo 15: (±)cis-N,N-dietil-(1-(3-metoxifenil)-2-amino- metil)-ciclobutanocarboxamida (lm) 23

Obtém-se o composto do título (lm) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos. C17H26N2O2. C4H4O4

pf: 130 °C 1H RMN (400 MHz, d6 DMSO) : 0 ,43 (t, J = 6, 8 Hz, 3H) , 0, 98 (t, J = 6,8 Hz, 3H) , 1,70 (t, J = 9,6 Hz, 1H) , 2, , 05 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 2,08-2 ,14 ( m, 1H) , 2,68-2, 82 (m, 1H) , 2 ,86- 3,09 (m l, 6H) , 3,29- 3, 38 (m, 1H) , 3,76 (s, 3H) , 6 ,48 (s, 2H) , 6, 89 (s, 2H), 1 0, 93 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 7, 33 (t, J = 8,4 Hz, 1H) . % Teórica C 62,05; H 7,44; N 6,89 % Encontrada C 61,77; H 7,23; N 6,71.

Exemplo 16: (±)cis-N,N-dietil-(1-(3,4-metilenodioxifenil)- 2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida (ln)

Obtém-se o composto do título (ln) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C17H24N2O3. C4H4O4 pf: 197 °C XH RMN (4 00 MHz, d( 5 DMSO) : 0 ,51 (t, J = 6.8 Hz, 3H) , 0, 97 (t , J = 6 ,8 Hz, 3H) , 1, 66 (t, J = 10 Hz , 1H), 1, 99 (dt, J = 18 , 8,8 Hz, 1H) , 2 , 10-2, , 14 (m, 1H) r 2,80- 2,87 (m, 5H) , 2, 99-3,10 (m , 2H) , 3 ,32-3, 45 (m, 1H) , 6 , 0 (s, 2H) , 6, 44 (s, 2H) , 6,84 -6, 8 8 (m, 2H) , 6, 94 (d, J = 7, 6 Hz, 1H) . 0 "O Teórica C 5 9, 99; H 6,71; N 6, 66 O "o Encontr ada C 60,0 0 ; H 6, 76; N 6 ,59. 24

Exemplo 17: (±)cis-N,N-dietil-(l-fenil-2-aminoetil)-ciclo-butanocarboxamida (lo)

Obtém-se o composto do título (lo) aplicando as mesmas condições experimentais utilizadas para a síntese do composto (la) . A salificação do composto (lc) com ácido fumárico conduz à obtenção do fumarato do composto do título na forma de cristais brancos.

C17H26N2O. C4H4O4 pf: 178 °C XH RMN (40 0 MHz, d 6 DMSO): 0,51 (t, J = 6, 8 Hz, 3H) , 0, 99 (t, J = 6 ,8 Hz, 3H) , 1,00 (m, 1H), 1, 15 (d, J = = 7,2 Hz, 3H) , 1, ,78- 1,80 (m, 1H), 2, 06 (dt, J = 21, 2; 9,2 Hz, 1H) , 2,49 -2, 51 (m, 1H) , 2,74-2, 80 (m, 3H), 2,8 8-2,96 (m, 1H) , 3,06 -3, 13 (m, 1H), 3,30-3,3 9 (m, 1H) , 3, ,59 (dt, J = 6,8 Hz, 1H) , 6, .40 (s, 2H), 7,28 (t, J = 6,8 Hz, ih; ), 7,41 -7,45 (m, 4H) . % Teórica C 64,60; H 7,74; N 7,17 % Encontrada C 64,66; H 7,67; N 7,02. TESTES BIOLÓGICOS: 1) Avaliação da actividade analgésica

Determinou-se a actividade analgésica dos compostos de fórmula (1) e do milnaciprano, escolhido como composto de referência, utilizando um modelo de dor convencional no qual se injecta formaldeído para provocar uma sensação dolorosa em animais (Eur. J. Pharmacol. 2001, 421, 109).

Protocolo:

Colocam-se os ratos (ratos Sprague Dawley macho (ICO: OFA SD [IOPS], Iffa Credo, França) em caixas de observação em 25 acrílico em cima de um espelho angular para facilitar a observação das suas patas traseiras. Após trinta minutos de habituação, dá-se aos animais uma injecção de formaldeído diluído para 2,5% na superfície plantar da pata traseira direita. A injecção de formaldeído gera respostas comportamentais que ocorrem em duas fases: - uma fase inicial, 0 a 5 min após a injecção de formaldeído, correspondendo ao estímulo dos receptores especializados na transmissão de estímulos nociceptivos; - uma fase posterior que ocorre entre 20 e 30 min após a injecção. Esta fase corresponde ao estímulo de receptores por mediadores inflamatórios e/ou à hiper-excitabilidade do corno dorsal induzida durante a primeira fase. Esta última fase envolve portanto sensibilização central e provoca dor mais representativa da dor neuropática quando comparada com a dor que ocorre na primeira fase. Neste contexto, apenas se tomam em consideração no presente pedido de patente os resultados obtidos nesta fase posterior.

Para estudar os compostos da invenção, seleccionámos duas expressões de comportamento doloroso (lamber e levantar a pata injectada) e escolhemos como período de observação o período que corresponde à fase posterior (i.e., 22,5-27,5 min) . Durante esta fase de 5 min, observam-se os animais todos os 30 s e registam-se os seguintes comportamentos: lamber ou não a pata traseira injectada e levantar ou não a pata traseira injectada. Dez observações conduzem a uma pontuação máxima de 10 para cada parâmetro. Os produtos da invenção são fornecidos por via intraperitoneal 15 min antes da injecção de formaldeído. 26

Resultados :

No teste de formaldeído, o composto de fórmula (la), representando os compostos da invenção, teve uma actividade analgésica notável. 0 composto de fórmula (la) reduz consideravelmente tanto o lamber a pata como o levantar a pata que ocorrem na fase posterior do teste. A vantagem do composto de fórmula (la) quando comparado com o milnaciprano pode ser claramente observada quando se compara a amplitude dos efeitos observados com uma dose de 40 mg/kg.

Composto Pontuação do Pontuação do lamber levantar da pata da pata observada a observada a 40 mg/kg 40 mg/kg la 3,7 ± 1,1 1,0 ± 0,4 milnaciprano 6,3 ± 1,4 2,0 ± 0,8

Para os dois parâmetros, o composto (la) prova ser mais eficaz do que o milnaciprano, em particular em relação ao levantar da pata, parâmetro para a qual a diferença em relação ao milnaciprano é estatisticamente significativa.

Resumindo, numa dose de 40 mg/kg administrada por via intraperitoneal (ip), o composto (la) , representando os compostos de fórmula (1) , produz analgesia superior à produzida pelo milnaciprano num modelo de dor aguda. 2) Avaliação da actividade anti-stress /ansiolítica:

Determinou-se a actividade anti-stress /ansiolítica num modelo convencional utilizando vocalizações ultrassónicas (VUSs) emitidas por um rato adulto quando sujeito a stress (Eur. J. Pharmacol. 2003, 463, 133). 27

Protocolo :

As experiências foram realizadas em gaiolas operativas padrão (250x320x250 mm), isoladas do barulho e da luz. O chão das gaiolas está coberto com uma grelha em aço inoxidável e ligado a um gerador de choques eléctricos com uma intensidade fixada a 0,4 mA. O dispositivo é munido, numa das suas paredes, com uma fonte de luz (2 lux) . Utiliza-se o sistema ULTRAVOX (Noldus, Wageningen, Países Baixos) para registar as vocalizações ultrassónicas a uma frequência definida por um detector de ultra-sons, uma caixa de filtro de áudio e um software de aquisição. Para esta experiência, fixou-se a frequência em 22 kHz. O software permite o registo de todas as vocalizações a 22 kHz emitidas pelos animais, ao longo de um período de 100 ms. 0 teste começa com uma sessão de habituação de 11 min e 25 s, durante a qual os animais são colocados individualmente no dispositivo operativo sem serem sujeitos a condicionamento (nem luz nem choque eléctrico).

Durante a segunda fase, os animais são sujeitos a uma fase de condicionamento de 3 sessões realizadas em 3 dias consecutivos. Cada sessão consiste num período de pré-choque de 160 s, seguido de 15 repetições de estímulo condicionado (EC)/estímulo não condicionado (ENC); de referir que é aplicado um choque inevitável de 0,4 mA (ENC) durante 1 s no último segundo da exibição do sinal luminoso (tempo total de 5 s) . Cada par EC/ENC é separado por um intervalo inter-teste de 30 s. Durante a fase de teste utilizam-se as mesmas condições que durante a fase de condicionamento, com a diferença de que os choques eléctricos não são aplicados 15 vezes. Neste caso, aplica-se um único par EC/ENC no início da sessão, após um período de pré-choque de 160 s. A seguir, só se mantém o sinal 28 luminoso. 0 primeiro dia de teste é utilizado para seleccionar os ratos que emitem VUSs durante 100 s ou mais (os animais que não alcançam este critério estabelecido são portanto excluídos do estudo).

Aos ratos seleccionados dá-se uma injecção subcutânea (volume de 10 mL/kg) de solução salina fisiológica (grupo de controlo) ou dos produtos a testar. São então isolados durante 30 min antes de serem colocados nas gaiolas operativas para registo de VUS.

Proporciona-se um período de descanso de 48 h entre cada teste (período de eliminação completa do produto injectado).

Resultados:

No teste das VUS, o composto de fórmula (la) representando esta série química, e o milnaciprano, têm actividade anti-stress /ansiolítica equivalente.

Composto Duração das VUSs dose mínima significativa (DMS mg/kg) la 10 milnaciprano 10 A dose mínima significativa (DMS) necessária para reduzir as vocalizações ultrassónicas é a mesma para os dois compostos. Resumindo, o composto de fórmula (la), representando compostos pertencentes a esta série química, tem actividade anti-stress /ansiolítica tão fraca quanto a do milnaciprano após administração por via intraperitoneal. 29 3) Avaliação da actividade anti-depressiva:

Evidenciou-se a actividade anti-depressiva dos compostos da invenção pelo teste de natação forçada em ratos (Eur, Pharmacol. 1978, 47, 397). Este modelo é amplamente utilizado por ser preditivo da actividade anti-depressiva em humanos.

Protocolo:

Colocam-se os ratos (ratos Sprague Dawley macho (ICO: OFA SD [IOPS], Iffa Credo, França) num cilindro (altura de 45 cm e diâmetro de 2 0 cm) cheio de água até uma altura de 17 cm, a 25°C ± 0,5. Esta altura permite aos ratos nadar ou flutuar sem que as suas patas toquem no fundo do cilindro. Vinte e quatro horas antes do dia do teste, colocam-se os ratos no cilindro durante 15 min, tempo ao fim do qual eles deixam de tentar escapar e permanecem imóveis. No dia do teste, os animais voltam a ser colocados no cilindro e mede-se e monitoriza-se a duração da imobilidade do animal utilizando registos audiovisuais durante 5 min. Administram-se os produtos da invenção por via ip 30 minutos antes do teste. Considera-se um rato imóvel quando se deixa a si próprio flutuar e faz apenas pequenos movimentos para permanecer à superfície.

Resultados: O teste de natação forçada (Figura 1) mostra que o composto de fórmula (la), representando a série, é capaz de diminuir consideravelmente a duração da imobilidade dos animais numa dose de 40 mg/kg após administração por via ip. Em comparação, a mesma dose de milnaciprano (40 mg/kg) não tem efeito na imobilidade dos animais nestas condições de teste. Resumindo, o composto (la), representando os compostos pertencentes a esta série química, tem propriedades anti-imobilidade, que representam actividade 30 anti-depressiva, que são muito superiores às do milnaciprano, após uma única administração.

Portanto, os compostos da invenção têm um largo espectro de actividades i.e. ansiolitica, analgésica e anti-depressiva. A actividade anti-imobilidade que se obtém após uma única administração dos compostos de fórmula (1) é inesperada na medida em que os inibidores de recaptação de monoamina, tais como o milnaciprano ou o citaloprano, são activos apenas nas condições deste teste após administração repetida. Esta caracteristica dos compostos de fórmula (1) é vantajosa uma vez que se pode traduzir, num paciente deprimido, numa redução do tempo de acção anti-depressiva e/ou numa resposta melhorada ao tratamento e assim proporcionar um melhor serviço terapêutico. A este respeito é útil lembrar que os anti-depressivos que estão normalmente disponíveis em termos clínicos são eficazes apenas após várias semanas de tratamento e a percentagem dos que respondem ao tratamento continua mediana (N. Engl. J. Med. 2006, 354, 1231; Lancet 2006, 367, 153). A importante actividade anti-depressiva que se observa com os produtos da invenção pode também ser vantajosa para o tratamento da dor crónica. É efectivamente conhecido que, juntamente com a componente sensorial (medida por testes de dor aguda), a componente emocional desempenha um papel fundamental na dor crónica. Como os compostos da invenção actuam nas duas dimensões da dor (i.e., sensorial e emocional) podem revelar-se particularmente bem adaptados para o tratamento da dor crónica.

Por este motivo, os compostos de fórmula geral (1), ou um dos seus sais terapeuticamente aceitáveis ou um dos seus enantiómeros, são potencialmente úteis como medicamentos, 31 em particular no tratamento de certas patologias tais como ansiedade, depressão, no tratamento da dor, nomeadamente da dor crónica, áreas nas quais continuam a existir necessidades terapêuticas e para as quais a descoberta de novos tratamentos é altamente desejável.

Os compostos de fórmula (1), ou um dos seus sais terapeuticamente aceitáveis ou um dos seus enantiómeros, podem igualmente ser utilizados para o tratamento de fibromialgia ou de disfunções erécteis, como a ejaculação precoce ou a impotência sexual. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA:

Um outro assunto da invenção refere-se a composições farmacêuticas caracterizadas por conterem, como ingrediente activo, pelo menos um composto de fórmula (1), ou um enantiómero ou um sal farmaceuticamente aceitável de um composto de fórmula (1), associado a um veiculo farmaceuticamente inerte ou a outros veículos farmaceuticamente aceitáveis.

As composições farmacêuticas da invenção podem, por exemplo, ser composições que se podem administrar por via oral, nasal, sublingual, rectal ou parenteral. Como exemplos de composições que se podem administrar por via oral, podem mencionar-se comprimidos, cápsulas, granulados, pós, soluções ou suspensões orais. Formulações adequadas para a via de administração escolhida são conhecidas e descritas, por exemplo, em: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19a edição, 1995, Mack Publishing Company. 32 A dose eficiente de um composto da invenção varia em função de inúmeros parâmetros, tais como a via de administração escolhida, o peso, a idade, o género, o tipo de patologia e a sensibilidade do indivíduo a tratar. Consequentemente, a dosagem óptima será determinada em função dos parâmetros considerados como pertinentes por um especialista na área. Apesar das doses eficientes de um composto da invenção poderem variar em grandes proporções, as doses diárias podem estar entre 0,1 mg e 100 mg por kg de massa corporal da pessoa a tratar. A administração dos compostos da invenção pode fazer-se por via oral, nasal, sublingual, rectal ou parenteral. Como exemplos de formulação não limitativos, descreve-se a seguir uma preparação dos compostos da invenção. Os ingredientes e outros que sejam terapeuticamente aceitáveis podem ser adicionados noutras proporções, sem modificar o âmbito da invenção. O termo "ingrediente activo" refere-se a um composto de fórmula (1), a um dos seus enantiómeros ou a um sal de adição com um ácido mineral ou um ácido orgânico farmaceuticamente aceitável. Fórmula para preparar 100 comprimidos contendo cada um 10 mg do ingrediente activo:

Ingrediente activo 10 g Lactose 100 g Amido de trigo 10 g Estearato de magnésio 3 g Talco 3 g 05-04-2013 33

Claims (20)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Compostos de fórmula geral (1)

   Fórmula 1 na qual: - -a- é uma ligação simples ou dupla; - Ar é um grupo aromático, substituído ou não substituído; - RI e R2 são, de forma independente ou em conjunto: um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C6, ramificado ou não ramificado, saturado ou insaturado, substituído ou não substituído; os grupos RI e R2 podem também formar um heterociclo; - R3 e R3' são, de forma independente ou em conjunto, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci~C6; - X é um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre; e os sais de adição dos compostos de fórmula geral (1) com ácidos minerais ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis.
2. 2. Composto de fórmula geral (1), de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por, quando Ar é substituído, o(s) substituinte(s) serem: um ou mais átomos de halogéneo ou um ou mais grupos alquilo C1-C6 ou um ou mais grupos alcoxilo Ci-C6 ou um grupo ciano. 1
3. 3. Composto de fórmula geral (1), de acordo com as duas reivindicações 1 a 2, caracterizado por, quando o grupo RI e/ou R2 são um grupo alquilo C1-C6 substituído, o substituinte ser um átomo de halogéneo.
4. 4. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por Ar ser: - um grupo fenilo substituído ou não substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo Ci-C6 ou com um ou mais grupos alcoxilo C1-C6 ou com um grupo ciano; - um grupo naftilo substituído ou não substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo C1-C6 ou com um ou mais grupos alcoxilo C1-C6 ou com um grupo ciano; - um grupo heteroaromático não substituído ou substituído com um ou mais átomos de halogéneo ou com um ou mais grupos alquilo Ci-Cô ou com um ou mais grupos alcoxilo Ci-C6 ou com um grupo ciano.
5. 5. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por Ar ser: - um grupo fenilo não substituído ou substituído com um ou dois átomos de halogéneo ou com um ou dois grupos metilo ou com um ou dois grupos metoxilo ou com um grupo ciano; - ou um grupo naftilen-2-il; - ou um grupo heteroaromático seleccionado entre o grupo que consiste em: tiofen-2-il, tiofen-3-il e piridin-3-il. 2
6. 6. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado por RI e R2 serem, de forma independente ou em conjunto: - um grupo alquilo C1-C3, ramificado ou não ramificado, saturado ou insaturado, substituído opcionalmente com um átomo de flúor; - ou um heterociclo seleccionado entre o grupo que consiste em: pirrolidina, indolina e tetra-hidro-isoquinolina.
7. 7. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por R3 e R3' representarem, em conjunto, um átomo de hidrogénio ou, de forma independente, um grupo metilo ou etilo e um átomo de hidrogénio.
8. 8. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado por X ser um átomo de hidrogénio.
9. 9. Composto de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por ser seleccionado entre: - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminometil) - ciclobutanocar-boxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutenocarbox-amida - cis-N,N-Dietil-(1-(tiofen-2-il)-2-aminometil)-ciclobu-tanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(tiofen-3-il)-2-aminometil)-ciclobu-tanocarboxamida 3 cis-N,N-Dietil-(1-(piridin-3-il)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(naftalen-2-il)-2-aminometil)-ciclo- butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(2 — fluorofenil)-2-aminometil)-ciclobu-tanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(2-cianofenil)-2-aminometil)-ciclobu-tanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclobu-tanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-metoxifenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)-ciclo-butanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-diclorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-difluorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-N,N-Dietil-(1-(3,4-metilenodioxifenil) -2-aminometil) -ciclobutanocarboxamida cis-l-Indolin-l-il-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-l-Indolin-l-il-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida 4 - cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il- (1- (3-clorofenil) -2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-l-Tetra-hidroquinolin-2-il-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(1-(3-fluorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-(1-(3-clorofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-2-il-(1-(3-cianofenil)-2-aminometil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dialil-2-il-(1-(3-metilfenil)-2-aminometil)- ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminoetil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(1-(3-clorofenil)-2-aminoetil)-ciclobutanocarboxamida - cis-N,N-Dietil-(l-fenil-2-aminometil)-ciclobutano-tiocarboxamida.
10. 10. Enantiómeros dos compostos de fórmula (1), de acordo com qulquer uma das reivindicações 1 a 9.
11. 11. Processo de preparação dos compostos de fórmula (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado por se fazer reaqir uma amina de fórmula R1R2NH com um composto de fórmula (4) para dar o composto de fórmula (3) que é então convertido na azida de fórmula (2) que, por redução, dá o composto de fórmula (1) na qual (-a-), Ar, Rl, R2, R3 e R3' são definidos como na reivindicação 1 e X é um 5 átomo de oxigénio, sendo os compostos de fórmula (1) obtidos após uma etapa suplementar para proteger a amina primária, seguida de uma reacção com um tio-anidrido. com X=S ÂJ\ \l Fórmula 4 o:-'· 0"

    Fórmula 3
12. 12. Intermediários de sintese de fórmula (2)

    na qual (-a-), Ar, Rl, R2, R3 e R3' são definidos como na reivindicação 1, utilizados para preparar compostos de fórmula geral (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10.
13. 13. Intermediários de sintese de fórmula (3) 6

    Fórmula 3 na qual (-a-) , Ar , Rl, R2, R3 e R3' são definidos como na reivindicação 1, utilizados para preparar compostos de fórmula geral (2) , de acordo com a reivindicação 12.
14. 14. Composto de fórmula geral (D , de acordo com as reivindicações 1 a 10, para ser utilizado como medicamento,
15. 15. Composto de fórmula geral (D , de acordo com a reivindicação 14, como medicamento útil para o tratamento da ansiedade.
16. 16. Composto de fórmula geral (1), de acordo com a reivindicação 14, como medicamento útil para o tratamento da depressão.
17. 17. Composto de fórmula geral (1), de acordo com a reivindicação 14, como medicamento útil para o tratamento da dor.
18. 18. Composto de fórmula geral (D , de acordo com a reivindicação 14, como medicamento útil para o tratamento da fibromialgia.
19. 19. Composto de fórmula geral (1), de acordo com a reivindicação 14, como medicamento útil para c > tratamento das disfunções erécteis, tais como ejaculação precoce ou impotência sexual. 7
20. 20. Composição farmacêutica caracterizada por conter, como ingrediente activo, pelo menos um composto de fórmula (1), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um enantiómero ou um sal farmaceuticamente aceitável, associado a um veiculo farmacêutico inerte ou a outros veiculos farmaceuticamente aceitáveis. 05-04-2013