PL201165B1 - Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości oraz zastosowanie tych związków - Google Patents
Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości oraz zastosowanie tych związkówInfo
- Publication number
- PL201165B1 PL201165B1 PL363518A PL36351801A PL201165B1 PL 201165 B1 PL201165 B1 PL 201165B1 PL 363518 A PL363518 A PL 363518A PL 36351801 A PL36351801 A PL 36351801A PL 201165 B1 PL201165 B1 PL 201165B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- compounds
- obesity
- treatment
- carboanhydrases
- prophylaxis
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 title claims abstract description 44
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 38
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 32
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 claims description 25
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 19
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 11
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 claims description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 10
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 9
- 230000003556 anti-epileptic effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 8
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 8
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 6
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 5
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 claims description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 4
- 238000010352 biotechnological method Methods 0.000 claims description 3
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 18
- 229960004394 topiramate Drugs 0.000 description 18
- KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N Topiramic acid Chemical compound C1O[C@@]2(COS(N)(=O)=O)OC(C)(C)O[C@H]2[C@@H]2OC(C)(C)O[C@@H]21 KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N 0.000 description 17
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 7
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 7
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- YBADLXQNJCMBKR-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 YBADLXQNJCMBKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 3
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 108010013043 Acetylesterase Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 2
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 235000013367 dietary fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N (aminomethyl)phosphonic acid Chemical compound NCP(O)(O)=O MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003678 AMPA Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000078 AMPA Receptors Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 241000672609 Escherichia coli BL21 Species 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 102000005915 GABA Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010005551 GABA Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- -1 Topiramate compound Chemical class 0.000 description 1
- NEDVJZNVOSNSHF-ZNHDNBJUSA-N [(1r,5s)-8,8-dimethyl-8-azoniabicyclo[3.2.1]octan-3-yl] 3-hydroxy-2-phenylpropanoate;nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O.C([C@H]1CC[C@@H](C2)[N+]1(C)C)C2OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 NEDVJZNVOSNSHF-ZNHDNBJUSA-N 0.000 description 1
- 229960000571 acetazolamide Drugs 0.000 description 1
- BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N acetazolamide Chemical compound CC(=O)NC1=NN=C(S(N)(=O)=O)S1 BZKPWHYZMXOIDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100228 acetyl coenzyme a Drugs 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000021256 carbohydrate metabolism Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003489 carbonate dehydratase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- FLOSMHQXBMRNHR-DAXSKMNVSA-N methazolamide Chemical compound CC(=O)\N=C1/SC(S(N)(=O)=O)=NN1C FLOSMHQXBMRNHR-DAXSKMNVSA-N 0.000 description 1
- 229960004083 methazolamide Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000036403 neuro physiology Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/527—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving lyase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest sposób wykrywania zwi azków, nadaj acych si e do leczenia i/lub profilaktyki oty losci, charakteryzuj acy si e tym, ze wybiera si e zwi azki maj ace zdolno sc hamowania aktywno sci przynajmniej jednej karboanhydrazy wyst epuj acej u ssaków, zw laszcza u ludzi. Ponadto przedmiotem wynalazku jest zastosowanie tych zwi azków do wytwarzania srodka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki oty losci. PL PL PL PL
Description
RZECZPOSPOLITA
POLSKA
Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201165 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 363518 (13) (22) Data zgłoszenia: 12.07.2001 (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
12.07.2001, PCT/EP01/08051 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
31.01.2002, WO02/07821 PCT Gazette nr 05/02 (51) Int.Cl.
A61P 3/04 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Opis patentowy przedrukowano ze względu na zauważ one błędy
Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości oraz zastosowanie tych związków (30) Pierwszeństwo:
20.07.2000,DE,10035227.8 (43) Zgłoszenie ogłoszono:
29.11.2004 BUP 24/04 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
31.03.2009 WUP 03/09 (73) Uprawniony z patentu:
SOLVAY PHARMACEUTICALS GMBH, Hannover,DE (72) Twórca(y) wynalazku:
Johannes Hebebrand,Marburg/Lahn,DE
Jochen Antel,Bad Mϋnder,DE Ulf Preuschoff,Lehrte/Ahlten,DE Samuel David,Hannover,DE Holger Sann,Hannover,DE Michael Weske,Burgdorf,DE (74) Pełnomocnik:
Gugała Barbara, PATPOL Sp. z o.o.
(57) Przedmiotem wynalazku jest sposób wykrywania związków, nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, charakteryzujący się tym, że wybiera się związki mające zdolność hamowania aktywności przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków, zwłaszcza u ludzi. Ponadto przedmiotem wynalazku jest zastosowanie tych związków do wytwarzania środka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości.
PL 201 165 B1
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy sposobu wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub do profilaktyki otyłości. Ponadto wynalazek dotyczy zastosowania związków mających zdolność hamowania aktywności karboanhydrazy u ssaków i zasadniczo pozbawionych działań ukierunkowanych na ośrodkowy układ nerwowy (=OUN), do wytwarzania środków leczniczych dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości.
Otyłość stanowi obecnie, zwłaszcza w krajach uprzemysłowionych, coraz poważniejszy problem dla zdrowia ludności, co przeważnie jest spowodowane przez niewyważone i zbyt bogate w tłuszcz pożywienie. Wraz ze wzrostem udziału ludzi z nadwagą w całej ludności rosną także skutki otyłości sięgające od osobistego niezadowolenia aż do chorób sercowo-naczyniowych lub też do określonych form cukrzycy. Istnieje zatem szereg podejść w terapii ukierunkowanych na leczenie lub profilaktykę otyłości. Jako przykład wymienia się związki hamujące lipazy redukujące rozpad tłuszczy w przewodzie pokarmowym i w ten sposób obniżające wydajność energetyczną przyjętego pożywienia. Tłuszcze z pożywienia są w przypadku tego podejścia terapeutycznego co najmniej częściowo eliminowane w postaci nierozłożonej. Są jednakże pożądane dalsze nowe podejścia terapeutyczne do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, które mogą uzupełnić uprzednio znane formy terapii.
Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, że związki, które mogą hamować de-novo-lipogenezy u ssaków, zwłaszcza ludzi, nadają się w korzystny sposób do skutecznego leczenia i/lub profilaktyki otyłości. Szczególnie dobre wyniki uzyskuje się przy tym, gdy uprzednio wspomniane związki podaje się w dłuższych okresach czasu, np. przez wiele tygodni.
Przedmiotem wynalazku jest sposób wykrywania związków, nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, charakteryzujący się tym, że wybiera się związki mające zdolność hamowania aktywności przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków, zwłaszcza u ludzi.
W sposobie tym korzystnie poddaje się kontaktowi co najmniej jeden zwią zek z co najmniej jedną karboanhydrazą i następnie identyfikuje się związki, które hamują aktywność przynajmniej jednej karboanhydrazy.
Korzystnie stosuje się karboanhydrazy występujące u gryzoni lub u ludzi, korzystnie karboanhydrazy występujące u ludzi.
Korzystnie stosuje się występujące u ssaków, zwłaszcza u ludzi, karboanhydrazy podtypów II i/lub V, korzystnie karboanhydrazy podtypu V.
Korzystnie karboanhydrazy występują jako wyodrębnione enzymy uzyskane sposobem chemicznym lub biotechnologicznym i w którym określa się zmianę aktywności karboanhydraz pod wpływem związków w próbie aktywności enzymu in-vitro.
W sposobie wedł ug wynalazku korzystnie wybiera się jako dogodne takie zwią zki, które mają zdolność zmniejszania ilości produktów przemiany materii utworzonych w cyklu kwasu cytrynowego w wyodrębnionych żyjących komórkach ssaków.
W tym sposobie określa się zmniejszenie w cyklu kwasu cytrynowego w komórkach ilości cytrynianu, maleinianu, fumaranu, α-ketoglutaranu i/lub zmniejszenie tworzenia lipidowych produktów wtórnych cyklu kwasu cytrynowego pod wpływem związków.
Stosuje się wyodrębnione żyjące komórki gryzoni lub ludzi, korzystnie stosuje się adypocyty lub hepatocyty.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wykrywania związków, które nadają się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, charakteryzujący się tym, że wybiera się związki, które w sposobie wyżej opisanym każdorazowo zidentyfikowano jako związki odpowiednie oraz sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, w którym wybiera się związki, które w sposobie wyżej opisanym zidentyfikowano jako odpowiednie związki i które dodatkowo w standardowej próbie dla określenia właściwości przeciwpadaczkowych zidentyfikowano jako zasadniczo nieskuteczne.
Ponadto przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związków mających zdolność hamowania przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków do wytwarzania środka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości, korzystnie karboanhydraz podtypów II i/lub V.
Zastosowanie według wynalazku korzystnie dotyczy związków zasadniczo pozbawionych właściwości przeciwpadaczkowych.
Dalszym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związków, które po raz pierwszy zostały zidentyfikowane sposobem wyżej opisanym jako odpowiednie do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, do wytwarzania środka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości.
PL 201 165 B1
Przez de-novo-lipogenezę (poniżej oznaczaną skrótem DNL) rozumie się syntezę endogennych kwasów tłuszczowych z węglowodanów w organizmie ssaków. Ta reakcja syntezy odbywa się w cytozolu komórek ustroju, w oparciu o tzw. cykl kwasu cytrynowego, inaczej cykl Krebsa-Martiusa.
W endogennej reakcji biochemicznej w tym cyklu z obydwu elementów skł adowych: pirogronianu, pochodzącego z węglowodanów, i wodorowęglanu poprzez różne etapy pośrednie w tym maleinian, fumaran i α-ketoglutaran - jest ostatecznie tworzony cytrynian. Jeśli cytrynian jest tworzony w nadmiarze, może on poprzez etap pośredni acetylo-koenzymu A być przekształcony w wolne kwasy tłuszczowe (= lipidowe produkty wtórne), które tworzą tłuszcze, a następnie mogą być nagromadzone w komórkach tłuszczowych (= adypocyty). Nadmierne nagromadzanie tłuszczów utworzonych z kwasów tłuszczowych w komórkach ustroju może całkiem powszechnie prowadzić do otyłości. W cyklu kwasu cytrynowego uczestniczą różne enzymy. Przemiana materii w cyklu kwasu cytrynowego zależy zasadniczo od ilości dostępnego wodorowęglanu. Ilość dostępnego wodorowęglanu jest z kolei zależne od szybkości tworzenia dwutlenku węgla. Ta reakcja równowagowa dostarczająca wodorowęglan jest katalizowana przez tzw. karboanhydrazy. Z dotychczas znanych karboanhydraz i ich izozymów u ssaków w katalizie reakcji uczestniczą przeważnie izozymy karboanhydraz podtypów II (=CA II) i V (= CA V), które dostarczają wodorowęglan dla cyklu kwasu cytrynowego. Rolę odgrywają zwłaszcza karboanhydrazy podtypu V, ponieważ są one w mitochondriach. Także cykl kwasu cytrynowego odbywa się w mitochondriach.
Są do pomyślenia różne możliwości hamowania DNL w komórkach ssaków, przy czym wszystkie są one ukierunkowane na to, by obniżyć przemianę materii występującą w cyklu kwasu cytrynowego. Wskutek tego można obniżyć stężenie nadmiernie wytworzonego cytrynianu dostępnego dla syntezy kwasów tłuszczowych. Stosownie do niniejszego wynalazku można korzystnie hamować DNL, hamując karboanhydrazy, które katalizują reakcje dostarczające wodorowęglan dla cyklu kwasu cytrynowego. Korzystnie można hamować w celu zgodnym z wynalazkiem karboanhydrazy podtypów II i/lub V, zwłaszcza CA V.
Związki, które mogą niespecyficznie hamować karboanhydrazy (= niespecyficzne lub klasyczne inhibitory CA) są znane per se i są od dłuższego czasu stosowane w różnych obszarach terapii, głównie jako diuretyki lub w oftalmologii. Przegląd obszarów stosowania takich klasycznych inhibitorów CA zawarty jest np. w: C. T. Supuran, Expert Opinion on Therapeutic Patents, 10(5) (2000) 575-600. Przez „specyficzne inhibitory CA” należy rozumieć takie związki, które w dużym stopniu hamują tylko jeden podtyp CA (np. CA V) lub określoną grupę podtypów CA. Zastosowanie klasycznych inhibitorów CA do celowego leczenia i/lub profilaktyki otyłości nie jest dotychczas znane.
Powszechnie przyjmuje się, że przeważającą liczbę znanych przypadków otyłości można wyprowadzić ze względnie przekroczonego udziału obcych dla ustroju tłuszczów w przyjmowanym pożywieniu. W wysoko rozwiniętych krajach, takich jak USA, ludzie otyli przyjmują do 30% swego pożywienia w postaci tłuszczów. Według dzisiejszej wiedzy nagromadzenia tłuszczu prowadzące do otyłości pochodzą przeważnie z nadmiernie przyjmowanych tłuszczów z pożywienia, na które nie wpływa hamowanie DNL ukierunkowanego na metabolizm węglowodanów.
Chociaż zmniejszone odkładanie kwasów tłuszczowych w adypocytach osiąga się także przez hamowanie DNL, hamowanie DNL uważano dotąd za nieodpowiednie podejście do leczenia i/lub profilaktyki otyłości u ludzi z powodu jego per se nieznacznego wkładu do nagromadzania kwasów tłuszczowych w komórkach ustroju. Podsumowanie fachowych opinii wypowiadanych na ten temat można znaleźć np. w: M. K. Hellerstein, Europen Journal of Clinical Nutrition 53(1) (1999) 53-65. Ten pogląd przeważający w kręgach fachowych - był przeszkodą na drodze do celowego poszukiwania środków leczniczych do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, opartych na zasadzie hamowania DNL, lub do ich rozwoju.
W ramach niniejszego wynalazku nieoczekiwanie ustalono, że związki mające zdolność hamowania DNL u ssaków, zwłaszcza ludzi, można skutecznie zastosować do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, zwłaszcza gdy te związki podaje się leczonym pacjentom w dłuższych okresach czasu, np. przez sześć tygodni. Stosownie do tego można w dłuższych okresach czasu osiągnąć znaczące obniżenie wagi ciała osób otyłych przez hamowanie DNL, choć DNL per se ma względnie mały wkład do tłuszczu ustrojowego gromadzonego w adypocytach. Przez hamowanie DNL w dłuższych okresach czasu można ten per se niewielki efekt tak zakumulować, że łącznie uzyska się znaczący wkład do obniżenia wagi ciała.
Na przykładzie związku Topiramat można wykazać, że sposób według wynalazku rzeczywiście jest odpowiedni, by celowo wykrywać związki nadające się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości. Topi4
PL 201 165 B1 ramat jest środkiem przeciwpadaczkowym znanym z opisu patentowego EP 0 138 441 A2. O Topiramacie wiadomo ponadto, ż e wykazuje wieloczynnikowe farmakologiczne spektrum dział ania. Tak więc Topiramat może blokować zależne od napięcia kanały sodowe, a zatem stabilizować potencjał błony komórkowej, aktywować receptory GABA i wzmacniać przez to inhibitowanie pośredniczone przez GABA, działać jako inhibitor karboanhydrazy i - na koniec - może hamować receptory kainan/AMPA, podtyp receptorów glutaminianowych, wskutek czego może hamować występowanie prądów indukowanych przez AMPA. Topiramat wykazuje zatem wyraźne działania na OUN. Nie wiadomo jednak, czy właściwości przeciwpadaczkowe Topiramatu można wyprowadzić z uprzednio wspomnianych odpowiednich czynników farmakologicznych.
Z publikacji WO 98/00130 wiadomo, ż e Topiramat ma tak ż e wł a ś ciwoś ci farmakologiczne, które okazują się odpowiednie do leczenia otyłości. Właściwości te przypadkowo odkryto jako działania towarzyszące w długookresowych badaniach chorych na padaczkę. Do tej pory nie wiadomo, z których właściwości farmakologicznych Topiramatu można wyprowadzić obserwowaną u chorych na padaczkę utratę wagi. Topiramat wchodzi w zakres - nadającej się do leczenia otyłości - grupy związków o wzorze ogólnym I działających przeciwpadaczkowo, podanej w publikacji WO 98/00130.
Według sposobu według wynalazku można było wykazać, że Topiramat jest silnym inhibitorem CA, zwłaszcza silnym inhibitorem występującej u ssaków karboanhydrazy podtypów II i V, i że Topiramat może skutecznie hamować DNL w komórkach ssaków. Zatem z pomocą sposobu według wynalazku można było po raz pierwszy wykazać, że niewyjaśnione dotąd farmakologiczne działania towarzyszące Topiramatu prowadzące do utraty wagi u chorych na padaczkę zasadniczo opierają się na jego zdolności, by skutecznie hamować DNL u ssaków. Zgodnie z tym należy oczekiwać, że z pomocą sposobu według wynalazku w przyszłości bę dzie można znajdować związki nadające się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości. Wraz ze sposobem według wynalazku po raz pierwszy otwiera się możliwość, by stosunkowo szybko i prosto według zasady hamowania DNL znajdować związki działające, wykazujące moc farmakologiczną. Dzięki niniejszemu wynalazkowi można związki działające według uprzednio wspomnianej zasady, nadające się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, przynajmniej w pierwszym orientacyjnym wyborze, wybrać obecnie bez długotrwałych i drogich badań in vivo, takich jak doświadczenia z karmieniem na zwierzętach doświadczalnych.
Wyniki te zaskakują, ponieważ we wcześniejszych badaniach właściwości farmakologicznych Topiramatu jego działanie jako inhibitora CA stale podawano jako nie zwracające uwagi lub nawet jako tylko nieznaczne i terapeutycznie nieznaczące (patrz np. B. E. Maryanoff i in., Journal of Medicinal Chemistry 30 (1987) 880-887; B. E. Maryanoff i in., Journal of Medicinal Chemistry 41 (1998) 1315-1343; S. J. Dodgson i in., Epilepsia 41 (1) (2000) S 35-S 39). W uprzednio wspomnianych wczesnych badaniach w celu określenia aktywności topiramatu jako inhibitora CA każdorazowo stosowano roztwory badane zawierające CA różnych ssaków, które wciąż zawierały różne składniki ciała, takie jak krew lub tkanka narządu.
W pierwszej postaci wykonania sposobu według wynalazku można wykrywać związki dogodne do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, wybierając jako odpowiednie takie związki, które mają zdolność hamowania aktywności przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków. Przykładowo może co najmniej jeden badany związek być doprowadzony do kontaktu z co najmniej jedną karboanhydrazą i można następnie w sposób znany per se identyfikować te związki, które hamują aktywność przynajmniej jednej karboanhydrazy. Korzystne jest w tej postaci wykonania zastosowanie karboanhydraz, występujących u ssaków, jak u ludzi, lub u gryzoni, np. szczurów, myszy lub świnek morskich zwłaszcza karboanhydraz podtypów II i/lub V. Szczególnie korzystne jest zastosowanie karboanhydraz występujących u ludzi. Dogodne karboanhydrazy mogą np. być wyodrębnione z uprzednio wspomnianych ssaków i - jeśli jest to pożądane - mogą być oczyszczone lub mogą korzystnie być wytworzone sposobem chemicznym lub biotechnologicznym znanym per se. W korzystnym wariancie tej pierwszej postaci wykonania można określić zmianę aktywności karboanhydraz pod wpływem badanych związków w znanej per se próbie in-vitro aktywności enzymu, w której karboanhydrazy występują jako enzymy wyodrębnione i przynajmniej w dużym stopniu uwolnione od substancji towarzyszących. Korzystnie stosuje się karboanhydrazy wytworzone sposobem chemicznym lub biotechnologicznym, ponieważ można je stosować w szczególnie czystej postaci. Próby aktywności in vitro dla określenia aktywności karboanhydraz są znane per se. Do prób in vitro aktywności enzymu, które są dogodne w ramach niniejszego wynalazku, by oznaczyć zmiany aktywności karboanhydraz, zaliczają się np.: pomiar zmiany wartości pH pod wpływem karboanhydraz (por. K.M. Wilbur, N.G.Andersen, Journal of Biological Chemistry 176 (1948) 147-154; G.Sanyal, T.H.Maren, Journal of Biological Chemistry
PL 201 165 B1
256 (1981) 608-612), metoda pomiarowa Stop-Flow (por. R. G Khalifah, Journal of Biological Chemistry 246 (1971) 2561-2573) lub metoda z użyciem esterazy i octanu 4-nitro-fenylu (por. Y. Pocker,
J. T. Stone, Journal of the American Chemical Society 87 (1965) 5497-5498). W ostatnio wymienionej próbie określa się szybkość hydrolizy octanu 4-nitro-fenylu pod wpływem badanych karboanhydraz, przy czym wykorzystuje się właściwość działania karboanhydrazy także jako esterazy.
Zgodnie z wynalazkiem dogodna jest w związku z tym korzystnie metoda badania w celu określenia właściwości związków jako inhibitorów CA, opisana przez C.T.Supuran i in., European Journal of Medicinal Chemistry 33 (1998) 577-594 (por. zwłaszcza str. 592; poniżej cytowane jako Supuran i in.) lub przez A. Scozzafava i in., Journal of Medicinal Chemistry 42, (1999) 3690-3700 (por. zwłaszcza str. 3697; poniżej cytowane jako Scozzafava i in.). W ramach ujawnienia niniejszego wynalazku następuje wyraźne powołanie się na uprzednio wspomniane metody prób opisane przez Supurana i in. oraz Scozzafava i in.. Związki, które w jednej z uprzednio wspomnianych prób aktywności standardowej in vitro według Supurana i in. lub według Scozzafavy i in. wykazują wartości stężenia IC50 przynajmniej 10 μmol/l lub poniżej (= wyższa skuteczność), mogą być wybrane jako dogodne związki skuteczne jako inhibitory CA (= inhibitory CA) w sensie niniejszego wynalazku. Jeśli ma być określona aktywność ludzkich podtypów CA, inne metody mogą być bardziej dogodne niż metoda z użyciem esterazy i octanu 4-nitro-fenylu. Szczególnie dogodne mogą być metody umożliwiające śledzenie stosunkowo szybkich przebiegów reakcji.
W próbie aktywności enzymu według metody z użyciem esterazy i octanu 4-nitro-fenylu opisanej przez Scozzafava i in. (patrz wyżej) (pierwotnie opisanej przez Y. Pockera i J.T. Stone, Biochemistry 6 (1967) 668-678) w ramach niniejszego wynalazku udowodniono, że Topiramat wykazuje wyraźne działanie inhibitujące na uzyskaną sposobem biotechnologicznym ludzką karboanhydrazę podtypu II (IC50 = 5 nmol/l), i że to działanie inhibitujące jest wyraźnie silniejsze, niż działanie inhibitujące spowodowane przez użyte jako substancje porównawcze - klasyczne inhibitory CA: acetazolamid lub metazolamid. Ludzką karboanhydrazę podtypu II otrzymano według sposobu podanego przez Scozzafava i in.
W tej samej próbie wykazano, że Topiramat ma także wyraźne działanie inhibitujące na uzyskaną sposobem biotechnologicznym karboanhydrazę podtypu Va z myszy (= mCA Va) (IC50 = 74 nmol/l). Odstępstwem od przepisu na doświadczenie u Scozzafava i in. było w tym przypadku użycie enzymu mCA Va w stężeniu 120 nM. mCA Va otrzymano według metody podanej przez H.R.Hecka i in., Journal of Biological Chemistry 269 (1994) 24742-24746 w sposób znany per se. W tym celu użyto szczep bakterii Escherichia coli BL 21 (DES), który z wektorem plazmidu zawierał sekwencję kodującą mCA Va pod kontrolą promotora T7 indukowanego przez izopropylo-e-D-tiogalaktopiranozyd (IPTG). Hodowlę bakterii zaszczepiono w 37°C podczas mieszania w zawierającej ampicylinę (100 μg/ml) płynnej pożywce Luria-Bertaniego i jej wzrost śledzono spektrofotometrycznie przy 600 nm. Gdy hodowla bakterii weszła w wykładniczą fazę wzrostu, dodano IPTG w końcowym stężeniu 1 mmol/l. Po 3 godz. czasu inkubacji (37°C; mieszanie) hodowlę bakterii odwirowano przy 7000xg przez 15 min i pozostałość odrzucono. Uzyskaną grudkę umieszczono w 0,1 obj. podwójnie destylowanej wody i dodano lizozym (1,00 ^g/ml). Liza komórek nastąpiła w warunkach działania ultradźwięków. W tym celu dodano część próbki 10 ml otrzymanej zawiesiny bakterii do otwartego u góry naczynia szklanego i każdą z tych próbek poddano 4-krotnie przez 3 min działaniu ultradźwięków. Po każdym impulsie dźwiękowym określano absorpcję próbek przy 600 nm, przy czym każde 100 μl próbki rozcieńczano 900 μl wody podwójnie destylowanej. Punkt końcowy osiągnięto jako wartość absorpcji przy 600 nm próbki wynoszącą 1/10 wartości wyjściowej. Po uzyskanej lizie komórek dodano bufor wiążący CaCl2 (firmy Stratagene) i w celu oczyszczenia uzyskany lizat komórkowy wprowadzono na kolumnę z żywicą z powinowactwem do kalmoduliny. Oczyszczanie oparto na wysokim powinowactwie domeny kalmoduliny związanej z żywicą do znacznika peptydu wiążącego się z kalmoduliną, obecnego na N-końcu eksprymowanej proteiny mCA Va. Oczyszczanie nastąpiło sposobem znanym per se (por. Affinity LIC Cloning and Protein Purification Kit Manual firmy Stratagene).
W drugiej postaci wykonania sposobu według wynalazku związki nadające się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości można wykrywać wybierając takie związki, które mają zdolność powodowania zmniejszenia ilości produktów przemiany materii utworzonych w wyodrębnionych żyjących komórkach ssaków w cyklu kwasu cytrynowego lub lipidowych produktów wtórnych cyklu kwasu cytrynowego. Jako produkty przemiany materii w cyklu kwasu cytrynowego, których ilość mierzalnie obniża się pod wpływem badanych związków, nadają się produkty rozpuszczalne w kwasach, takie jak cytrynian,
PL 201 165 B1 maleinian, fumaran, i/lub α-ketoglutaran. Korzystny jest cytrynian. Ponadto jako produkty przemiany materii nadają się lipidowe produkty wtórne cyklu kwasu cytrynowego, takie jak wolne kwasy tłuszczowe. Także w tej drugiej postaci wykonania określa się na koniec zdolność badanych związków do hamowania aktywności przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków, jednak użyty model badania jest ustawiony inaczej niż w pierwszej wymienionej postaci wykonania. U podstaw drugiej postaci wykonania sposobu leży zasada, by w sposób znany per se określić pobieranie radioaktywności z substratów znaczonych izotopem 14C w cyklu kwasu cytrynowego w metabolicznych produktach pośrednich lub produktach wtórnych cyklu kwasu cytrynowego wyodrębnionych, żyjących komórek ssaków i uzyskane wyniki porównać z wynikami uzyskanymi w identycznych warunkach lecz pod wpływem związków działających jako inhibitory CA. Korzystnie w tej odmianie sposobu stosuje się wyodrębnione żyjące komórki gryzoni, takich jak szczury, myszy lub świnki morskie, lub komórki ludzkie. Korzystne są komórki ludzkie. Jeśli stosuje się komórki gryzoni, w rachubę wchodzą adypocyty lub hepatocyty. Korzystne są adypocyty gryzoni. Jeśli stosuje się komórki ludzkie, można stosować adypocyty lub hepatocyty. Korzystne są ludzkie hepatocyty. Komórki ssaków stosowane w tej odmianie sposobu mogą być otrzymane typowymi metodami hodowli i/lub klonowania. Można stosować naturalne lub biotechnologicznie modyfikowane komórki ssaków. Jeśli ma być oznaczone pobieranie radioaktywności do rozpuszczalnych w kwasach produktów pośrednich cyklu kwasu cytrynowego, jako 14C-znaczony substrat korzystnie stosuje się 14C-wodorowęglan (=NaH[14C]O3). Jeśli ma być oznaczone pobieranie radioaktywności w lipidowych produktach wtórnych cyklu kwasu cytrynowego, jako 14C-znaczony substrat korzystnie stosuje się [U-14C] glukozę.
Korzystny wariant tej drugiej postaci wykonania dla określenia zdolności związków do hamowania DNL u ssaków podali S.A.Hazen i in. w: FASEB Journal 10 (4) (1996) 481-490 (poniżej cytowani jako Hazen i in.). W ramach ujawnienia niniejszego wynalazku następuje wyraźne powołanie się na uprzednio wspomnianą metodę badania opisaną przez Hazena i in.. Związki, które w uprzednio wspomnianym badaniu według Hazena i in. znacząco hamują wbudowywanie radioaktywności z substancji znaczonych 14C, które mogą służyć jako etapy wstępne w cyklu kwasu cytrynowego, np. wbudowywanie 14C-wodorowęglanu w cytrynian, maleinian, fumaran i/lub α-ketoglutaran, przy wartości IC50 przynajmniej 10 μmol/l lub poniżej (= wyższa skuteczność), mogą być wybrane jako związki nadające się w sensie niniejszego wynalazku.
W modelu badania odpowiadającym modelowi opisanemu przez Hazena i in., który zrealizowano w ramach niniejszego wynalazku, Topiramat wykazał wyraźne działanie hamujące względem powstawania rozpuszczalnych w kwasach produktów przemiany materii cyklu kwasu cytrynowego w uzyskanych sposobem biotechnologicznym adypocytach szczurzych linii komórkowej 3T3-F442A. To hamujące działanie topiramatu (IC50 = 348 nmol/l) było znacznie wyraźniejsze niż działanie -użytego jako substancja porównawcza - klasycznego inhibitora CA - etoksozolamidu.
W szczególnie korzystnym wariancie sposobu według wynalazku wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości wybiera się takie związki, które w uprzednio wspomnianej pierwszej postaci wykonania sposobu, zwłaszcza w uprzednio wspomnianej próbie aktywności enzymu in-vitro, wybrano jako dogodne do hamowania przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków i które dodatkowo także w uprzednio wspomnianej drugiej postaci wykonania sposobu wybrano jako dogodne, do powodowania zmniejszenia ilości produktów przemiany materii utworzonych w cyklu kwasu cytrynowego w wyodrębnionych żyjących komórkach ssaków. W pierwszej postaci wykonania sposobu można szybko i skutecznie sprawdzić zdolność związków do hamowania karboanhydraz występujących u ssaków. Druga postać wykonania sposobu dostarcza m.in. punktów oparcia co do tego, czy badane związki posiadają także zdolność wnikania w mitochondria żyjących komórek ssaków, gdzie jest umiejscowione CA V. W celu wyboru dogodnych związków można wykonać pierwszą i drugą uprzednio wspomnianą postać wykonania równolegle lub w dowolnym porządku po sobie.
Zgodnie z wynalazkiem związki mające zdolność hamowania DNL u ssaków nadają się do wytwarzania środków leczniczych dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości. Wybiera się przy tym takie związki, które mają zdolność hamowania przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków. Wybrane związki oczywiście muszą być tolerowane fizjologicznie i spełniać ogólne wymagania dotyczące substancji leczniczych np. bezpieczeństwa i tolerancji. Korzystne jest zastosowanie związków, które mogą hamować karboanhydrazy podtypów II i/lub V występujące u ssaków. Szczególnie korzystne są związki, które mogą specyficznie hamować CA II i/lub CA V, zwłaszcza CA V.
PL 201 165 B1
Uprzednio znane związki o działaniu inhibitującym CA, które w przypadku dłuższego podawania powodują obniżenie wagi ciała pacjentów, np. Topiramat, wykazują także wyraźne działania ukierunkowane na OUN, takie jak działania przeciwpadaczkowe. Dla związków zamierzonych w celu podawania w dłuższych okresach czasu dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości, działania ukierunkowane na OUN są często niepożądane jako działania towarzyszące. Związki, które wybrano według uprzednio wspomnianego sposobu według wynalazku jako dogodne do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, mogą zatem dodatkowo być badane na działania, które są ukierunkowane na OUN. Przykładowo związki mogą być badane na występujące - w danym przypadku - właściwości przeciwpadaczkowe. Do badania związków na właściwości przeciwpadaczkowe nadaje się np. tzw. Próba supramaksymalnego elektrowstrząsu (= Próba SES, niekiedy określana jako próba maksymalnego elektrowstrząsu, Próba MES) według G. Chena i in., Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 87 (1954) 334-339 (poniżej cytowany jako Chen i in.) i J.E.P. Toman i in., Journal of Neurophysiology 9 (1946) 231 (poniżej cytowany jako Toman i in.). W ramach ujawnienia niniejszego wynalazku następuje wyraźne powołanie się na uprzednio wspomnianą metodę prób opisaną przez Chena i in. i Tomana i in. Tak więc związki, które w dłuższych okresach czasu podaje się pacjentom w celu leczenia i/lub profilaktyki otyłości, w uprzednio wspomnianej próbie SES według Chena i in. i według Tomana i in. są zasadniczo nieaktywne i nie powinny korzystnie także przy wyższych dawkach przynajmniej 100 mg/kg p.o. wykazywać według żadnych typowych dla tej próby kryteriów - znaczących obserwowanych działań (tzn. Protective Dose [dawka zabezpieczająca] PD50 według G.Chen i in. >100 mg/kg p.o.; wartości PD50 podane przez G. Chena i in. odpowiadają przy tym zasadniczo częstszemu określeniu dawki jako Minimalna dawka skuteczna, MED). Związki, które w uprzednio wspomnianym sposobie wybrano jako dogodne do wykrywania związków i które dodatkowo w uprzednio wspomnianej próbie MES według Chena i in. są zasadniczo nieaktywne, są szczególnie dogodne do wytwarzania środków leczniczych dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości. Uprzednio wspomniane próby SES (wzgl. MES) są standardowymi próbami farmakologicznymi i mogą być wykonane u odpowiednich usługodawców (np. w firmie Panlabs) jako metody rutynowe.
Związki wykryte według sposobu według wynalazku jako dogodne do leczenia i/lub profilaktyki otyłości mogą w typowy sposób być zawarte jako środki lecznicze z typowymi farmaceutycznymi substancjami pomocniczymi w preparatach galenowych, takich jak np. tabletki, kapsułki, czopki lub roztwory. Te preparaty galenowe mogą być wytworzone według metod znanych per se przy użyciu typowych stałych lub płynnych nośników, takich jak laktoza, skrobia lub talk lub płynnych parafin i/lub przy użyciu typowych farmaceutycznych substancji pomocniczych, np. substancji rozsadzających, substancji ułatwiających rozpuszczanie lub konserwantów. Zgodnie z wynalazkiem odpowiednie farmaceutyczne preparaty są np. znane także z opisu patentowego EP 0 138 441 A2 jak i z publikacji WO 98/00130.
Claims (17)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, znamienny tym, że wybiera się związki mające zdolność hamowania aktywności przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków, zwłaszcza u ludzi.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że poddaje się kontaktowi co najmniej jeden związek z co najmniej jedną karboanhydrazą i następnie identyfikuje się związki, które hamują aktywność przynajmniej jednej karboanhydrazy.
- 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się karboanhydrazy występujące u gryzoni lub u ludzi.
- 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że stosuje się karboanhydrazy występujące u ludzi.
- 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się występujące u ssaków, zwłaszcza u ludzi, karboanhydrazy podtypów II i/lub V.
- 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że stosuje się występujące u ssaków, zwłaszcza u ludzi, karboanhydrazy podtypu V.
- 7. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że karboanhydrazy występują jako wyodrębnione enzymy uzyskane sposobem chemicznym lub biotechnologicznym i w którym określa się zmianę aktywności karboanhydraz pod wpływem związków w próbie aktywności enzymu in vitro.PL 201 165 B1
- 8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że wybiera się jako dogodne takie związki, które mają zdolność zmniejszania ilości produktów przemiany materii utworzonych w cyklu kwasu cytrynowego w wyodrębnionych żyjących komórkach ssaków.
- 9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że określa się zmniejszenie w cyklu kwasu cytrynowego w komórkach ilości cytrynianu, maleinianu, fumaranu, α-ketoglutaranu i/lub zmniejszenie tworzenia lipidowych produktów wtórnych cyklu kwasu cytrynowego pod wpływem związków.
- 10. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że stosuje się wyodrębnione żyjące komórki gryzoni lub ludzi.
- 11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że stosuje się adypocyty lub hepatocyty.
- 12. Sposób wykrywania związków, które nadają się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, znamienny tym, że wybiera się związki, które w sposobie według zastrz. 7 i dodatkowo w sposobie według zastrz. 8 każdorazowo zidentyfikowano jako związki odpowiednie.
- 13. Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, w którym wybiera się związki, które w sposobie według zastrz. 1 zidentyfikowano jako odpowiednie związki i które dodatkowo w standardowej próbie dla określenia właściwości przeciwpadaczkowych zidentyfikowano jako zasadniczo nieskuteczne.
- 14. Zastosowanie związków mających zdolność hamowania przynajmniej jednej karboanhydrazy występującej u ssaków do wytwarzania środka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości.
- 15. Zastosowanie według zastrz. 14 związków mających zdolność hamowania występujących u ssaków karboanhydraz podtypów II i/lub V.
- 16. Zastosowanie według zastrz. 14 związków zasadniczo pozbawionych właściwości przeciwpadaczkowych.
- 17. Zastosowanie związków, które po raz pierwszy sposobem według zastrz. 1 zidentyfikowano jako odpowiednie do leczenia i/lub profilaktyki otyłości, do wytwarzania środka leczniczego dla leczenia i/lub profilaktyki otyłości.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10035227A DE10035227A1 (de) | 2000-07-20 | 2000-07-20 | Verfahren zum Auffinden von Verbindungen, welche zur Behandlung und/oder Prophylaxe von Fettleibigkeit geeignet sind |
| PCT/EP2001/008051 WO2002007821A1 (de) | 2000-07-20 | 2001-07-12 | Verfahren zum auffinden von verbindungen, welche zur behandlung und/oder prophylaxe von obesitas geeignet sind |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL363518A1 PL363518A1 (pl) | 2004-11-29 |
| PL201165B1 true PL201165B1 (pl) | 2009-03-31 |
Family
ID=7649538
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL363518A PL201165B1 (pl) | 2000-07-20 | 2001-07-12 | Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości oraz zastosowanie tych związków |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1307262B1 (pl) |
| JP (1) | JP2004504053A (pl) |
| KR (1) | KR100818827B1 (pl) |
| CN (1) | CN1443085B (pl) |
| AR (1) | AR028730A1 (pl) |
| AT (1) | ATE278441T1 (pl) |
| AU (2) | AU7753401A (pl) |
| BR (1) | BR0112547A (pl) |
| CA (1) | CA2416647A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ2003156A3 (pl) |
| DE (2) | DE10035227A1 (pl) |
| DZ (1) | DZ3393A1 (pl) |
| ES (1) | ES2230346T3 (pl) |
| HK (1) | HK1057499A1 (pl) |
| HU (1) | HUP0302309A3 (pl) |
| IL (2) | IL153971A0 (pl) |
| MX (1) | MXPA02012907A (pl) |
| NO (1) | NO20030233L (pl) |
| NZ (1) | NZ523960A (pl) |
| PL (1) | PL201165B1 (pl) |
| PT (1) | PT1307262E (pl) |
| RU (1) | RU2268721C2 (pl) |
| SK (1) | SK287607B6 (pl) |
| TR (1) | TR200402670T4 (pl) |
| TW (1) | TWI274157B (pl) |
| UA (1) | UA74588C2 (pl) |
| WO (1) | WO2002007821A1 (pl) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI0510137A (pt) | 2004-05-19 | 2007-10-02 | Solvay Pharm Gmbh | medicamentos contendo n-sulfamoil-n'-arilpiperazinas para a profilaxia ou tratamento da obesidade e condições relacionadas |
| MY147767A (en) | 2004-06-16 | 2013-01-31 | Janssen Pharmaceutica Nv | Novel sulfamate and sulfamide derivatives useful for the treatment of epilepsy and related disorders |
| CN101754947A (zh) | 2005-05-20 | 2010-06-23 | 詹森药业有限公司 | 磺酰胺衍生物的制备方法 |
| TW200804393A (en) | 2005-11-14 | 2008-01-16 | Solvay Pharm Gmbh | Novel N-sulfamoyl-N'-benzopyranpiperidines for medical use |
| US8492431B2 (en) | 2005-12-19 | 2013-07-23 | Janssen Pharmaceutica, N.V. | Use of benzo-fused heterocycle sulfamide derivatives for the treatment of obesity |
| US8716231B2 (en) | 2005-12-19 | 2014-05-06 | Janssen Pharmaceutica Nv | Use of benzo-fused heterocycle sulfamide derivatives for the treatment of pain |
| US8691867B2 (en) | 2005-12-19 | 2014-04-08 | Janssen Pharmaceutica Nv | Use of benzo-fused heterocycle sulfamide derivatives for the treatment of substance abuse and addiction |
| US8497298B2 (en) | 2005-12-19 | 2013-07-30 | Janssen Pharmaceutica Nv | Use of benzo-fused heterocycle sulfamide derivatives for lowering lipids and lowering blood glucose levels |
| US8937096B2 (en) | 2005-12-19 | 2015-01-20 | Janssen Pharmaceutica Nv | Use of benzo-fused heterocyle sulfamide derivatives for the treatment of mania and bipolar disorder |
| EP2026790A2 (en) | 2006-05-19 | 2009-02-25 | Janssen Pharmaceutica, N.V. | Co-therapy for the treatment of epilepsy and related disorders |
| WO2008089521A1 (en) | 2007-01-25 | 2008-07-31 | Verva Pharmaceuticals Ltd | Insulin sensitisers and methods of treatment |
| PE20110060A1 (es) | 2008-06-23 | 2011-01-31 | Janssen Pharmaceutica Nv | Forma cristalina de (2s)-(-)-n-(6-cloro-2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxin-2-ilmetil)-sulfamida |
| US8815939B2 (en) | 2008-07-22 | 2014-08-26 | Janssen Pharmaceutica Nv | Substituted sulfamide derivatives |
| CA2874513A1 (en) * | 2012-05-24 | 2013-11-28 | Verva Pharmaceuticals Ltd | A method of improving liver function |
| CN106770611B (zh) * | 2016-12-22 | 2019-01-29 | 广西师范大学 | 一种用于细胞原位检测小分子化合物进入线粒体的方法 |
| RU2771430C1 (ru) * | 2021-09-21 | 2022-05-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Способ количественного определения антиконвульсантов в плазме крови больных эпилепсией |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4552897A (en) * | 1983-02-01 | 1985-11-12 | American Cyanamid Company | Salts of 1-(aminodihalophenyl)-2-aminoethanols and antilipogenic compositions prepared therefrom |
| US6288095B1 (en) * | 1987-09-04 | 2001-09-11 | Beecham Group P.L.C. | Compounds |
| US5126324A (en) * | 1990-06-07 | 1992-06-30 | Genentech, Inc. | Method of enhancing growth in patients using combination therapy |
| DK0669832T3 (da) * | 1992-10-29 | 1997-03-17 | Genentech Inc | Fremgangsmåde til behandling eller forebyggelse af fedme |
| AU693478B2 (en) * | 1994-11-10 | 1998-07-02 | Metabolic Pharmaceuticals Limited | Treatment of obesity |
| CN1106193C (zh) * | 1996-06-28 | 2003-04-23 | 奥索·麦克尼尔药品公司 | 抗惊厥剂氨基磺酸酯衍生物用于治疗肥胖的用途 |
| US20030100594A1 (en) * | 2001-08-10 | 2003-05-29 | Pharmacia Corporation | Carbonic anhydrase inhibitor |
-
2000
- 2000-07-20 DE DE10035227A patent/DE10035227A1/de not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-06-15 AR ARP010102883A patent/AR028730A1/es unknown
- 2001-07-12 SK SK61-2003A patent/SK287607B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 PT PT01955345T patent/PT1307262E/pt unknown
- 2001-07-12 RU RU2003104803/14A patent/RU2268721C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 AU AU7753401A patent/AU7753401A/xx active Pending
- 2001-07-12 PL PL363518A patent/PL201165B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 MX MXPA02012907A patent/MXPA02012907A/es active IP Right Grant
- 2001-07-12 ES ES01955345T patent/ES2230346T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-12 NZ NZ52396001A patent/NZ523960A/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 AT AT01955345T patent/ATE278441T1/de active
- 2001-07-12 DE DE50104023T patent/DE50104023D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-12 AU AU2001277534A patent/AU2001277534B9/en not_active Ceased
- 2001-07-12 CA CA002416647A patent/CA2416647A1/en not_active Abandoned
- 2001-07-12 WO PCT/EP2001/008051 patent/WO2002007821A1/de active IP Right Grant
- 2001-07-12 KR KR1020037000620A patent/KR100818827B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 TR TR2004/02670T patent/TR200402670T4/xx unknown
- 2001-07-12 BR BR0112547-8A patent/BR0112547A/pt not_active Application Discontinuation
- 2001-07-12 IL IL15397101A patent/IL153971A0/xx unknown
- 2001-07-12 EP EP01955345A patent/EP1307262B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-12 CN CN018129730A patent/CN1443085B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-12 JP JP2002513551A patent/JP2004504053A/ja active Pending
- 2001-07-12 CZ CZ2003156A patent/CZ2003156A3/cs unknown
- 2001-07-12 HU HU0302309A patent/HUP0302309A3/hu unknown
- 2001-07-12 DZ DZ013393A patent/DZ3393A1/xx active
- 2001-07-16 TW TW090117382A patent/TWI274157B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-12-07 UA UA2003021453A patent/UA74588C2/uk unknown
-
2003
- 2003-01-15 IL IL153971A patent/IL153971A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-01-17 NO NO20030233A patent/NO20030233L/no unknown
-
2004
- 2004-01-15 HK HK04100307.4A patent/HK1057499A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6946243B2 (en) | Method of identifying compounds suitable for treatment and/or prophylaxis of obesity | |
| PL201165B1 (pl) | Sposób wykrywania związków nadających się do leczenia i/lub profilaktyki otyłości oraz zastosowanie tych związków | |
| US20090192120A1 (en) | Inhibitors of nitric oxide synthase | |
| US20060014165A1 (en) | Methods of diagnosis and treatment for asthma and other respiratory diseases based on haplotype association | |
| Murphy et al. | Marked amine and amine metabolite changes in Norrie disease patients with an X‐chromosomal deletion affecting monoamine oxidase | |
| EP1646372A2 (en) | Methods of diagnosis and treatment for asthma based on haplotype association | |
| Reilly et al. | A peroxisomal acyltransferase in mouse identifies a novel pathway for taurine conjugation of fatty acids | |
| WO2000029846A9 (en) | COMPOSITIONS AND METHODS RELATING TO THE PEROXISOMAL PROLIFERATOR ACTIVATED RECEPTOR-α MEDIATED PATHWAY | |
| JP2005508178A (ja) | エネルギー恒常性の調節に関与するＭｅｎタンパク質、ＧＳＴ２、Ｒａｂ−ＲＰ１、Ｃｓｐ、Ｆ−ボックスタンパク質Ｌｉｌｉｎａ／ＦＢＬ７、ＡＢＣ５０、コロニン、Ｓｅｃ６１α、またはＶｈａＰＰＡ１−１、または相同性タンパク質 | |
| ZA200300444B (en) | Method for locating compounds which are suitable for the treatment and/or prophylaxis of obesity. | |
| EP2113030A2 (en) | Genes involved in mitochondrial biogenesis | |
| US20060015951A1 (en) | Proteins involved in the regulation of energy homeostasis | |
| US20060168667A1 (en) | Minibrain homologous proteins involved in the regulation of energy homeostasis | |
| Rabattoni | D-amminoacidi nella malattia Alzheimer (con un focus speciale sul catabolismo del D-aspartato) | |
| WO2003066087A2 (en) | Kinases involved in the regulation of energy homeostasis | |
| JP2005087012A (ja) | マラリア原虫増殖抑制能力の検定方法 | |
| WO2004064856A2 (en) | Proteins involved in the regulation of energy homeostasis | |
| WO2007055325A2 (ja) | 動脈硬化性疾患予防・治療薬および治療手段の評価方法 | |
| WO2003084566A2 (en) | Proteins involved in the regulation of energy homeostasis | |
| WO2004002513A2 (en) | Proteins involved in the regulation of energy homeostasis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20120712 |