KR102239690B1

KR102239690B1 - Ｃｃｒ３－억제제의 공－결정 및 염

Info

Publication number: KR102239690B1
Application number: KR1020197025850A
Authority: KR
Inventors: 마르쿠스 프랑크; 한스 해베를레; 마뉘엘 앙리; 토르슈텐 파후르; 마르코 산타고스티노; 우베 슈테르츠; 토마스 트레빙; 울리케 베르트만
Original assignee: 알카헤스트 인코포레이티드
Priority date: 2010-10-07
Filing date: 2011-10-06
Publication date: 2021-04-13
Anticipated expiration: 2031-10-06
Also published as: TW201305134A; ECSP13012600A; JP2013542207A; BR112013008211A2; HUE024540T2; PE20140188A1; TWI546294B; US9233950B2; CN103140486B; JP5794713B2; ES2535264T3; ME02040B; AU2011311530B2; MX2013003785A; CN103140486A; AU2011311530A1; DK2625174T3; KR20130118313A; CO6710910A2; MY167898A

Abstract

본 발명은 화학식 1의 CCR3 억제제의 공-결정 및 염, 이를 함유하는 약제학적 조성물, 및 이를 CCR3-수용체와 관련된 질환의 치료 및/또는 예방용 제제로서 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

ＣＣＲ３－억제제의 공－결정 및 염{CO-CRYSTALS AND SALTS OF CCR3-INHIBITORS}

본 발명은 CCR3 억제제의 공-결정 및 염, 이들 중 하나를 함유하는 약제학적 조성물, 및 이들을 천식 및 알레르기성 질환, 만성 폐쇄성 폐 질환, 병원성 미생물(바이러스 포함)에 의한 감염, 류마티스 관절염 및 죽상경화증과 같은 자가면역 병리학 및 노화-관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 망막병증 및 당뇨병성 황반 부종을 포함하는, 광범위한 각종 염증, 감염, 및 면역조절 장애 및 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 제제로서 사용하는 방법에 관한 것이다.

배경 정보

케모카인(chemokine)은, 매우 다양한 세포에 의해 방출되어 다른 세포 유형들 중에서도 대식구, T 및 B 림프구, 호산구, 호염기구 및 호중구를 끌여들여 활성화시키는, 분자량이 6 내지 15kDa인 화학주성 사이토킨이다[참조: Luster, New Eng. J Med., 338, 436-445 (1998); Rollins, Blood, 90, 909-928 (1997); Lloyd, Curr Opin Pharmacol., 3, 443-448 (2003); Murray, Current Drug Targets., 7, 579-588 (2006); Smit, Eur J. Pharmacol., 533, 277-88 (2006)].

케모카인은, 아미노산 서열내 첫번째 2개의 시스테인들이 단일의 아미노산에 의해 분리되어 있는지(CXC) 또는 상기 2개의 시스테인들이 인접해 있는지(CC)에 따라, 2개의 주요 부류, CXC 및 CC가 존재한다. 인터루킨-8(IL-8), 호중구-활성화 단백질-2(NAP2) 및 흑색종 성장 자극 활성 단백질(MGSA)과 같은 CXC 케모카인은 호중구 및 T 림프구에 대해 주로 화학주성인 반면, RANTES, MIP-la, MIP-1, 단핵구 화학주성 단백질(MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, 및 MCP-5) 및 에오탁신(-1, -2, 및 -3)과 같은 CC 케모카인은 다른 세포 유형들 중에서도 대식구, T 림프구, 호산구, 비만 세포, 수지 세포, 및 호염기구에 대해 화학주성이다. 또한, 주요 케모카인 소계열에 속하지 않는 케모카인 림포탁틴-1, 림포탁틴-2(둘다 C 케모카인), 및 프락탈킨(CXXXC 케모카인)이 존재한다.

케모카인은 "케모카인 수용체"로 명명되는 G-단백질-커플링된 7개의 전이막-도메인 단백질(G-protein-coupled seventransmembrane-domain protein)의 계열에 속하는 특이적인 세포-표면 수용체에 결합한다[참조: Horuk, Trends Pharm. Sci., 15, 159-165 (1994); Murphy, Pharmacol Rev., 54 (2):227-229 (2002); Allen, Annu. Rev. Immunol., 25, 787-820 (2007)]. 이들의 인지체 리간드(cognate ligand)에 결합시, 케모카인 수용체는 관련된 삼합체 G 단백질을 통한 세포내 시그날을 형질유도시켜, 다른 반응들중에서도, 세포내 칼슘 농도에 있어서 급속한 증가, G-단백질의 활성화, 세포 형태에 있어서 변화, 세포 부착 분자의 증가된 발현, 탈과립화, 세포 이주, 생존 및 증식의 촉진을 초래한다. 다음의 특징적인 양식을 갖는 CC 케모카인에 결합하거나 반응하는 적어도 7개의 사람 케모카인 수용체가 존재한다: CCR-1(또는 "CKR-1" 또는 "CC-CKR-1")[MIP-la, MCP-3, MCP-4, RANTES][참조: Ben-Barruch, et al., Cell, 72, 415-425 (1993), Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)]; CCR-2A 및 CCR-2B(또는 "CKR-2A"/"CKR-2B" 또는 "CC-CKR-2A"/"CC-CKR-2B")[MCP-1, MCP2, MCP-3, MCP-4, MCP-5][참조: Charo et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 2752-2756 (1994), Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)]; CCR3(또는 "CKR-3" 또는 "CC-CKR-3")[에오탁신-1, 에오탁신-2, RANTES, MCP-3, MCP-4][참조: Combadiere, et al., J. Biol. Chem., 270, 16491-16494 (1995), Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)]; CCR-4(또는 "CKR-4" 또는 "CC-CKR-4")[TARC, MIP-la, RANTES, MCP-1][참조: Power et al., J. Biol. Chem., 270, 19495-19500 (1995), Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)]; CCR-5(또는 "CKR-5" 또는 "CCCKR-5")[MIP-la, RANTES, MIP-lp][참조: Sanson, et al., Biochemistry, 35, 3362-3367 (1996)]; CCR-6(또는 "CKR-6" 또는 "CC-CKR-6")[LARC][참조: Baba et al., J. Biol. Chem., 272, 14893-14898 (1997)]; CCR-7(또는 "CKR-7" 또는 "CC-CKR-7")[ELC][참조: Yoshie et al., J. Leukoc. Biol. 62, 634-644 (1997)]; CCR-8(또는 "CKR-8" 또는 "CC-CKR-8")[1-309, TARC, MIP-1p][참조: Napolitano et al., J. Immunol., 157, 2759-2763 (1996), Bernardini et al., Eur. J. Immunol., 28, 582-588 (1998)]; CCR-10(또는 "CKR-10" 또는 "CC-CKR-10")[MCP-1, MCP-3][참조: Bonini et al, DNA and Cell Biol., 16, 1249-1256 (1997)]; 및 CCR31(또는 "CKR-11" 또는 "CC-CKR-11")[MCP-1, MCP-2, MCP-4][참조: Schweickart et al., J Biol Chem, 275 9550-9556 (2000)].

포유동물 케모카인 수용체 외에, 데코이(Decoy) 수용체 CCX-CKR, D6 및 DARC/Duffy 또한 포유동물 사이토메갈로바이러스, 헤르페스 바이러스 및 폭스바이러스에 의해 발현된 단백질은 케모카인 수용체의 결합 특성을 나타낸다[참조: Wells and Schwartz, Curr. Opin. Biotech., 8, 741-748 (1997); Comerford, Bioessays., 29(3):237-47 (2007)]. RANTES 및 MCP-3와 같은 사람 CC 케모카인은 이들 바이러스가 암호화하는 수용체를 통해 칼슘의 신속한 이동을 유발시킬 수 있다. 수용체 발현은 정상인 면역계 감시 및 감염에 대한 반응의 파괴를 허용함으로써 감염에 대해 관대해질 수 있다. 또한, CXCR-4, CCR2, CCR3, CCR5 및 CCR8과 같은 사람 케모카인 수용체는, 예를 들면, 사람 면역결핍성 바이러스(HIV)와 미생물이 포유동물 세포를 감염하기 위한 공 수용체로서 작용할 수 있다.

케모카인 수용체는 염증, 감염, 및 천식 및 알레르기병을 포함하는 면역조절 장애 및 질환, 및 류마티스 관절염, 그레이브스병(Grave's disease), 만성 폐쇄성 폐 질환, 및 죽상경화증과 같은 자가면역 병리학의 중요한 매개인자로서 관련되어 왔다. 예를 들면, 케모카인 수용체 CCR3은 다른 것들 중에서도 호산구, 호염기구, TH2 세포, 폐포 대식세포, 비만 세포, 상피 세포, 미세아교 세포, 별아교세포 및 섬유모세포에서 발현된다. CCR3는 호산구를 알레르기성 염증 부위에 끌여들여 후속적으로 이들 세포를 활성화시키는 중심 역할을 한다. CCR3에 대한 케모카인 리간드는 세포내 칼슘 농도에 있어서 신속한 증가, G-단백질의 증가된 GTP 교환, 증가된 ERK 포스포릴화, 향상된 수용체 내재화(internalization), 호산구 형태 변화, 세포 부착 분자의 증가된 발현, 세포 탈과립화, 및 이주의 촉진을 유도한다. 따라서, 케모카인 수용체를 억제하는 제제들은 이러한 장애 및 질환에서 유용할 수 있다. 추가로, 케모카인 수용체를 억제하는 제제는 또한 HIV에 의한 CCR3 발현 세포의 감염을 차단함으로써 감염성 질환에서 유용하거나 사이토메갈로바이러스와 같은 바이러스에 의한 면역 세포 반응의 조절을 방지하는데 있어 유용할 수 있다.

따라서, CCR3은 중요한 표적이며 CCR3의 길항작용은 염증성, 호산구성, 면역조절성 및 감염성 장애 및 질환의 치료시 효과적일 수 있다[참조: Wegmann, Am J Respir Cell Mol Biol., 36(1):61-67 (2007); Fryer J Clin Invest., 116(1):228-236 (2006); De Lucca, Curr Opin Drug Discov Devel., 9(4):516-524 (2006)].

따라서, 본 발명의 밑바탕이 되는 과제는, 강력한 CCR3 억제제일 뿐 아니라 CCR3-수용체의 활성이 관여하는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약을 제조하기 위해서도 유용한, 감소된 부작용으로 인해 바람직한 CCR3-길항제를 제공하는 것이었다.

놀랍게도, 화학식 1의 치환된 피페리딘은, 부작용이 거의 없는, 예를 들면, 문헌[참조: Watson PS, Bioorg Med Chem. Lett., 16(21):5695-5699 (2006)]에 기술된 바와 같은 노르에피네프린(NET), 도파민(DAT) 또는 세로토닌 재흡수 전달체(5-HTT)의 억제, 또는 문헌[참조: De Lucca, J Med Chem., 48(6):2194-2211 (2005)]에 기술된 바와 같은 5HT2A, 5HT2C 또는 도파민 D2 수용체의 억제, 또는 문헌[참조: De Lucca, Curr Opin Drug Discov Devel., 9(4):516-524 (2006)]에 기술된 바와 같은 hERG 채널의 억제, 또는 알파1B 아드레날린성 수용체의 억제를 갖는 CCR3 길항제로서 매우 적합함이 밝혀졌다.

그럼에도 불구하고, 이러한 화합물들은 염기이며, 따라서 이들의 물리적 거동이 적합한 약제학적 형태를 발견하는데 문제점들을 유발할 수 있기 때문에 의약의 제조시 문제가 될 수 있다. 이는 안정성, 광 민감성 또는 흡습용해(deliquescence)와 같은 구조적 문제들일 수 있지만, 또한 예를 들어 화합물이 불용성이거나 분쇄(milling)와 같은 일반적인 제조 공정에 적합하지 않은 경우에는 물리적 문제일 수 있다.

본 발명에 이르러, 놀랍게도, 화학식 1의 화합물의 청구된 공-결정 또는 염이 위에서 기술된 바와 같은 의약을 제조하기 위한 약제학적 개발을 위한 충분한 기준, 예를 들면, 충분한 안정성, 조절가능한 수분흡수용해성, 의약으로서 유용하도록 하기에 충분히 높은 가용성, 표준 제조 공정에 유용한 고체 상태 또는 충분히 정의된 결정형을 충족시킴이 밝혀졌다.

발명의 설명

본 발명의 주제는 오로트산, 히푸르산(hippuric acid), L-피로글루탐산, D-피로글루탐산, 니코틴산, L-(+)-아스코르브산, 사카린, 피페라진, 3-하이드록시-2-나프토산, 점액산(갈락타르산), 팜산(엠본산), 스테아르산, 콜산, 데옥시콜산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, 석신아미드, 우라실, L-라이신, L-프롤린, D-발린, L-아르기닌, 글리신, 바람직하게는 아스코르브산, 점액산, 팜산, 석신아미드, 니코틴산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, L-라이신, L-프롤린으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 공-결정 형성자(co-crystal former)와의 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

[화학식 1]

상기 화학식 1에서,

R¹은 C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, O-C_1-6-할로알킬 또는 할로겐이고;

m은 1, 2 또는 3; 바람직하게는 1 또는 2이며;

R^2a 및 R^2b는 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, COO-C_1-6-알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2b.1R^2b.2, 할로겐으로부터 각각 독립적으로 선택되고;

R^2b.1은 H, C_1-6-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-6-할로알킬이며;

R^2b.2는 H, C_1-6-알킬이거나;

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자로 대체되며;

R³은 H, C_1-6-알킬이고;

X는 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 포스페이트, 메탄설포네이트, 니트레이트, 말레에이트, 아세테이트, 벤조에이트, 시트레이트, 살리실레이트, 푸마레이트, 타르트레이트, 디벤조일타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 벤조에이트 및 p-톨루엔설포네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온; 바람직하게는 클로라이드 또는 디벤조일타르트레이트이며;

j는 0, 0.5, 1, 1.5 또는 2; 바람직하게는 1 또는 2이다.

이들 공-결정들은, CCR3-수용체의 활성이 관여하는 질환의 예방 및/또는 치료용 의약의 제조시 유용하다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2a.1R^2a.2이고;

R^2a.1이 H, C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬이며;

R^2a.2가 H, C_1-6-알킬이고;

R^2b가 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, COO-C_1-6-알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2b.1R^2b.2, 할로겐이며;

R^2b.1이 H, C_1-6-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-6-할로알킬이고;

R^2b.2가 H, C_1-6-알킬이거나;

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자로 대체되며;

나머지 잔기들은 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2a.1R^2a.2이고;

R^2a.1가 C_1-6-알킬이며;

R^2a.2가 H이고;

R^2b가 H, C_1-6-알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1가 C_1-6-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-6-할로알킬이고;

R^2b.2가 H, C_1-6-알킬이거나;

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자로 대체되고;

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬, C_1-4-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, O-C_1-4-알킬, CONR^2a.1R^2a.2이고;

R^2a.1은 C_1-4-알킬이며;

R^2a.2가 H이며;

R^2b가 H, C_1-4-알킬, O-C_1-4-알킬, CONR^2b.1R^2b.2이고;

R^2b.1이 C_1-4-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-4-할로알킬이며;

R^2b.2가 H, C_1-4-알킬이거나;

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환이 산소 원자에 의해 대체되며;

나머지 잔기들이 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬이고,

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-4-할로알킬이고; R^2b.2가 H, C_1-4-알킬이거나;

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자에 의해 대체되며

나머지 잔기는 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R¹이 C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, O-C_1-6-할로알킬, 할로겐이고;

m이 1 또는 2이며;

R^2a가 H, C_1-4-알킬이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬, C_1-4-할로알킬이고;

R^2b.2가 H, C_1-4-알킬이거나;

R³이 H, C_1-6-알킬이고;

X가 클로라이드 또는 디벤조일타르트레이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온이고;

j가 1 또는 2인, 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b.2가 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이며;

나머지 잔기가 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬이고;

R^2b.2가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 H, 메틸, 에틸, 프로필이고;

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1가 C_1-4-할로알킬이고;

본 발명의 다른 국면은, R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자로 대체되고;

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b, R³, X 및 j가 위에서 정의한 바와 같고 공-결정 형성자가 아스코르브산, 점액산, 팜산, 석신아미드, 니코틴산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, L-라이신, L-프롤린, 또는 이들의 수화물 또는 하이드로클로라이드로 이루어진 그룹으로부터 선택된, 화학식 1의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은 화학식 1a의 화합물의 공-결정이다.

[화학식 1a]

상기 화학식 1a에서,

R^2a, R^2b, R³, X 및 j는 위에서 정의한 바와 같다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b.2가 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이며;

나머지 잔기들이 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1a의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬이고;

나머지 잔기가 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1a의 화합물의 공-결정이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1가 C_1-4-할로알킬이고;

R^2b.2가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 H, 메틸, 에틸, 프로필이며;

본 발명의 다른 국면은, R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이며, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자에 의해 대체되고 나머지 잔기는 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1a의 화합물의 공-결정이다.

화학식 1의 화합물의 유리 염기(j=0)는 흔히 무정형이며, 화학식 1의 화합물의 염이 공-결정을 제조하는 공정에 바람직함에도 불구하고, 공-결정을 제조하는 공정을 위해 사용된다. 따라서, 본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 공-결정에 대해서와 같이 정의되고 X가 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 포스페이트, 메탄설포네이트, 니트레이트, 말레에이트, 아세테이트, 벤조에이트, 시트레이트, 살리실레이트, 푸마레이트, 타르트레이트, 디벤조일타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 벤조에이트 및 p-톨루엔설포네이트; 바람직하게는 클로라이드 또는 디벤조일타르트레이트이고, j가 0, 0.5, 1, 1.5 또는 2; 바람직하게는 1 또는 2인 화학식 1의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 공-결정에 대해서와 같이 정의되고 X가 클로라이드 또는 디벤조일타르트레이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온이며 j가 1 또는 2인 화학식 1의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 염에 대해서와 같이 정의되고 X가 클로라이드이며 j가 2인 화학식 1의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 염에 대해서와 같이 정의되고 X가 디벤조일타르트레이트이며 j가 1인 화학식 1의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은, R^2a, R^2b, R³, X 및 j가 위에서 정의한 바와 같은 하기 화학식 1a의 화합물의 염이다.

화학식 1a

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b.2가 C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이며;

나머지 잔기가 상기와 같이 정의되는 화학식 1a의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬이고;

나머지 잔기가 위에서 정의한 바와 같은 화학식 1a의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은,

R^2a가 H, C_1-4-알킬; 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필이고;

R^2b가 H, CONR^2b.1R^2b.2이며;

R^2b.1이 C_1-4-할로알킬이고;

본 발명의 다른 국면은,

R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이며, 상기 C_3-6-알킬렌 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 1개의 탄소 원자 또는 상기 환은 산소 원자로 대체되고;

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 염에 대해서와 같이 정의되고 X가 클로라이드이며 j가 2인 화학식 1a의 화합물의 염이다.

본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 염에 대해서와 같이 정의되고 X가 디벤조일타르트레이트이며 j가 1인 화학식 1a의 화합물의 염이다. 본 발명의 다른 국면은, R¹, m, R^2a, R^2b 및 R³이 상기 염에 대해서와 같이 정의되고 X가 (S)-(S)-(+)-2,3-디벤조일-타르트레이트이고 j가 1인 화학식 1a의 화합물의 염이다.

위에서 언급한 염들은 또한, CCR3-수용체의 활성이 관여하는 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 의약을 제조하는데 유용하다.

본 발명의 다른 국면은 하기 실시예들의 합성-단락으로부터의 실시예 1 내지 36의 화합물과 산 (HX)_j(여기서, X는 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 포스페이트, 메탄설포네이트, 니트레이트, 말레에이트, 아세테이트, 벤조에이트, 시트레이트, 살리실레이트, 푸마레이트, 타르트레이트, 디벤조일타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 벤조에이트 및 p-톨루엔설포네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온, 바람직하게는 클로라이드 또는 디벤조일타르트레이트이고 j는 0, 0.5, 1, 1.5 또는 2; 바람직하게는 1 또는 2이다)의 공-결정 또는 염이며; 공-결정의 경우 공-결정 형성자는 오로트산, 히푸르산, L-피로글루탐산, D-피로글루탐산, 니코틴산, L-(+)-아스코르브산, 사카린, 피페라진, 3-하이드록시-2-나프토산, 점액산(갈락타르산), 팜산(엠본산), 스테아르산, 콜산, 데옥시콜산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, 석신아미드, 우라실, L-라이신, L-프롤린, D-발린, L-아르기닌 및 글리신으로 이루어진 그룹으로부터 선택되며, 바람직하게는 아스코르브산, 점액산, 팜산, 석신아미드, 니코틴산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, L-라이신 및 L-프롤린으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명의 다른 국면은 하기 실시예들의 합성-단락으로부터의 실시예 1 내지 36의 화합물과 산 (HX)_j(여기서, X는 클로라이드 및 디벤조일타르트레이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온이고; j는 1 또는 2이다)의 공-결정 또는 염이고; 공-결정의 경우에 공-결정 형성자는 아스코르브산, 점액산, 팜산, 석신아미드, 니코틴산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, L-라이신 및 L-프롤린으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

특히, 화학식 1, 1a 또는 하기 실시예들의 합성-단락으로부터의 실시예 1 내지 36의 화합물의 디하이드로클로라이드 염 및 (S)-(S)-(+)-2,3-디벤조일-타르트레이트 염이, CCR3-수용체의 활성이 관련되는 질환의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하고/하거나 위에서 기술된 공-결정의 제조/제작에 유용한 본 발명의 바람직한 예들이다.

본 발명의 내용에서 디벤조일타르트레이트가 언급되는 경우 디벤조일타르트레이트의 바람직한 거울상이성체는 항상 (S)-(S)-(+)-2,3-디벤조일-타르트레이트이다.

본 발명의 다른 국면은 화학식 1의 화합물의 제조를 위한 신규 중간체이다. 이들 중간체는 하기 실시예 단락에서 기재한 바와 같은 상업적으로 입수가능한 유리체(educt)로부터 수득가능하다.

상기 아포스트로피(apostrophe) '는, 본 문맥에서, 화합물 명칭이 제공하는 구조, 즉 실시예 단락에 나타낸 구조와 상기 신규 중간체 사이의 구조의 차이를 기호로 나타낸 것이다. 이러한 차이는, R¹이 Cl 및 Me로 한정되고 m이 1이라는 것이다.

사용된 용어들 및 정의들

본원에서 구체적으로 정의되지 않은 용어들은 교시내용 및 문맥의 측면에서 당해 분야의 숙련가가 이들에게 부여할 수 있는 의미를 제공할 수 있다. 그러나, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 달리 정의하지 않는 한, 다음 용어들은 나타낸 의미를 가지며 다음 협약이 이에 적용된다. 하기 정의된 그룹, 라디칼, 또는 모이어티(moiety)에서, 탄소 원자의 수는 흔히 그룹의 앞에 명시되며, 예를 들면, C_1-6-알킬은, 탄소수가 1 내지 6인 알킬 그룹 또는 라디칼을 의미한다. 일반적으로, 2개 이상의 소그룹(subgroup)을 포함하는 그룹의 경우, 첫번째 명명된 소그룹은 라디칼 부착 점이며, 예를 들면, 치환체 "C_1-3-알킬-아릴"은 C_1-3-알킬-그룹에 결합된 아릴 그룹을 의미하며, 상기 치환체 중의 후자가, 상기 치환체가 부착될 그룹 또는 코어(core)에 결합한다.

본 발명의 화합물이 화학명의 형태로 및 화학식으로 묘사되는 경우에 어떠한 불일치의 경우 화학식이 우선할 것이다. 별표는 하위-화학식으로 사용되어 정의된 코어 분자에 연결된 결합을 나타낼 수 있다.

달리 구체적으로 나타내지 않는 한, 본 명세서 및 첨부된 특허청구범위 전체에서, 제공된 화학식 또는 화학명은 이의 토우토머(tautomer) 및 모든 입체, 광학 및 기하 이성체(예를 들면, 거울상이성체, 부분입체이성체, E/Z 이성체 등) 및 이의 라세미체, 및 별개의 거울상이성체들의 상이한 비율들의 혼합물, 부분입체이성체들의 혼합물, 또는 앞서의 형태들 중 어느 것의 혼합물(여기서, 이러한 이성체들 및 거울상이성체들이 존재한다), 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 이의 용매화물, 예를 들면 유리 화합물의 용매화물 또는 상기 화합물의 염의 용매화물을 포함하는 수화물을 포함하는 염을 포함한다.

용어 할로겐은 일반적으로 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 나타낸다.

단독으로의 또는 다른 라디칼과 조합된 용어 "C_1-n-알킬"(여기서 n은 2 내지 n의 정수이다)은, 1 내지 n개 C 원자를 지닌 비환식의(acyclic), 포화된, 분지되거나 선형인 탄화수소 라디칼을 나타낸다. 예를 들면, 용어 C_1-5-알킬은 라디칼 H₃C-, H₃C-CH₂-, H₃C-CH₂-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-, H₃C-CH₂-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-CH(CH₃)-, H₃C-CH(CH₃)-CH₂-, H₃C-C(CH₃)₂-, H₃C-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-CH₂-CH(CH₃)-, H₃C-CH₂-CH(CH₃)-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-CH₂-CH₂-, H₃C-CH₂-C(CH₃)₂-, H₃C-C(CH₃)₂-CH₂-, H₃C-CH(CH₃)-CH(CH₃)- 및 H₃C-CH₂-CH(CH₂CH₃)-를 포함한다.

단독으로의 또는 다른 라디칼과 조합된 용어 "C_1-n-할로알킬"(여기서 n은 2 내지 n의 정수이다)은, 1 내지 n개의 C 원자를 갖는 비환식의, 포화된, 분지되거나 선형인 탄화수소를 나타내며, 여기서 하나 이상의 수소 원자는 불소, 염소 또는 브롬 중에서 선택된 할로겐 원자, 바람직하게는 불소 및 염소, 특히 바람직하게는 불소로 대체된다. 예는 CH₂F, CHF₂, 및 CF₃를 포함한다.

단독으로의 또는 다른 라디칼과 조합된 용어 "C_1-n-알킬렌"(여기서 n은 2 내지 n의 정수이다)는, 1 내지 n개의 탄소 원자를 함유하는 비환식의, 직쇄 또는 분지쇄인 2가 알킬 라디칼을 나타낸다. 예를 들면, 용어 C_1-4-알킬렌은 -CH₂-, -CH₂-CH₂-, -CH(CH₃)-, -CH₂-CH₂-CH₂-, -C(CH₃)₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₃)-CH₂-, -CH₂-CH(CH₃)-, -CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-, -CH₂-CH₂-CH(CH₃)-, -CH(CH₃)-CH₂-CH₂-, -CH₂-CH(CH₃)-CH₂-, -CH₂-C(CH₃)₂-, -C(CH₃)₂-CH₂-, -CH(CH₃)-CH(CH₃)-, -CH₂-CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₂CH₃)-CH₂-, -CH(CH₂CH₂CH₃)-, -CH(CH(CH₃))₂- 및 -C(CH₃)(CH₂CH₃)-를 포함한다.

용어 "C_2-n-알케닐"은, 당해 그룹의 탄소 원자들 중 적어도 2개가 이중 결합에 의해 서로 결합된 경우, 적어도 2개의 탄소 원자를 지닌 "C_1-n-알킬"에 대한 정의에서 정의된 바와 같은 그룹에 대해 사용된다.

용어 "C_2-n-알키닐"은, 당해 그룹의 탄소 원자들 중 적어도 2개가 삼중 결합에 의해 서로 결합된 경우, 적어도 2개의 탄소 원자를 지닌 "C_1-n-알킬"에 대한 정의에서 정의된 바와 같은 그룹에 대해 사용된다.

단독으로의 또는 다른 라디칼과 조합된 용어 "C_3-n-사이클로알킬"(여기서 n은 4 내지 n의 정수이다)은, 3 내지 n개의 탄소 원자를 지닌 환식의, 포화된, 분지되지 않은 탄화수소 라디칼을 나타낸다. 예를 들면, 용어 C_3-7-사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸을 포함한다.

제조

화학식 1의 화합물의 제조

화학식 1로 나타낸, 본 발명의 실시예들은 하기 요약한 바와 같은 방법 1 내지 6을 통해 합성할 수 있으며, 여기서 m, R¹, R^2a 및 R^2b는 위에서 정의한 바와 같고 X^s는 클로로 또는 브로모이며 Y는 메틸 또는 에틸이다. 이들 방법들은 반응식 I에 따라 합성된 중간체 A에 직접 또는 간접적으로 의존한다. 달리 언급하지 않는 한, 출발 물질은 시판된다.

[반응식 I]

중간체 A의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸로 예시됨)

단계 1: 아세토니트릴(300 ml) 중 4-클로로-3-메틸 벤질브로마이드 (20 g)[문헌: J. L. Kelley, J. A. Linn, J. W. T. Selway, J. Med. Chem. 1989, 32(8), 1757-1763에 따라 합성됨], 4-피페리돈(22 g), K₂CO₃ (26 g)를 50℃에서 14시간 동안 가열하였다. 현탁액을 여과하고 여액을 진공하에 농축시켰다. 잔사를 섬광 크로마토그래피(사이클로헥산/EtOAc 1:1)로 정제하여 중간체 I1(17.4 g)을 수득하였다.

단계 2: 중간체 I1 (10 g) 및 D-H-Glu(O^tBu)-OMe (10.8 g)를 DMF (200 ml)와 HOAc(5 ml) 속에 용해한다. 이후에 분자체(molecular sieve)(1.0 g, 4Å, 분말)를 가하고 현탁액을 밤새 교반한다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드(37.5 g)를 가하고 현탁액을, 형성된 중간체 이민의 완전한 전환이 관찰될 때까지 교반한다. 추가의 물과 디클로로메탄(500 mL)을 가하기 전에 NaHCO₃ 수용액을 서서히 첨가하여 염기성 pH를 달성한다. 유기 상을 분리하고 수 상(water phase)을 디클로로메탄(500 ml)으로 추출하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, 건조시키고 진공하에 농축시켜 중간체 (I2) (19.5 g)를 수득한다.

단계 3: 중간체 I2 (19.5 g, 74% 순도)를 디클로로메탄(40 ml)과 트리플루오로아세트산(20 ml) 속에 용해한다. 당해 용액을 25℃에서 14시간 동안 교반한 후 추가의 TFA (40 ml)를 가하고 당해 용액을 추가로 7시간 동안 계속 교반한다. 이후에, 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고, 톨루엔 속에 용해하고 다시 농축시켜 중간체 I3 (29.5 g)을 제공한다.

단계 4: 중간체 I3 (29 g, 순도 55%)을 디클로로메탄 (100 ml)과 DIPEA (22 ml)의 혼합물 속에 용해한다. TBTU (15 g)를 가하고 용액을 30분 동안 교반한다. 이후에, 디클로로메탄 (150 ml), 물(100 ml) 및 NaHCO₃ 포화 용액(100 ml)을 가하고, 유기 상을 분리하고 수 상을 디클로로메탄(100 ml)으로 1회 추출한다. 유기 상을 건조시키고 농축시켜 오일을 제공하고 이후에 이를 역상 HPLC를 통해 분획화한다. 바람직한 분획을 진공하에 농축시킨 후, 염기성 pH를 NaHCO₃ 용액을 첨가하여 조절하고 생성물을 디클로로메탄으로 추출하여 중간체 I4 (8.1 g)를 제공한다.

단계 5: 중간체 I4 (7 g)를 디옥산(50 ml) 속에 용해한다. LiOH (2.5M 수용액, 23 ml) 및 물 (20 ml)을 가하고 실온에서 밤새 교반한다. 용액을 수성 4N HCl로 산성화한 후 진공하에 농축시킨다. 잔사를 물, 아세토니트릴 및 소량의 디옥산 속에 용해하고 동결건조시켜 중간체 A (10.4 g, 71% 순도)를 제공한다.

중간체 A(R¹이 4-클로로-3-메틸로 예시됨)에 대한 대안적인 경로

단계 1: 4-클로로-3-메틸 벤질클로라이드 (85.7 g), 4-피페리돈-하이드레이트-하이드로클로라이드(80.5 g) 및 K₂CO₃ (141.8 g)를 환류하에 3.5시간 동안 디옥산/물의 1:1 혼합물 (600 ml) 속에서 가열한다. 현탁액을 실온으로 냉각시키고 물(200 ml)을 가한다. 이후에, 혼합물을 톨루엔(2x400 ml)으로 추출한다. 합한 유기 상을 염수(2x400 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 여과한다. 증발 건조시킨 후, 중간체 I1 [110.8 g, R_f=0.27 (TLC, 실리카, PE/EtOAc=7:3)]을 수득한다.

단계 2+3+4: D-H-Glu(OMe)-OMe^*HCl (11.4 g) 및 중간체 I1 (11.4 g)을 DMF (35 ml) 속에 용해하고 실온에서 2시간 동안 교반한다. 이후에, DMF(40 ml) 중 NaBH(OAc)₃(36.8 g)의 용액을 15℃ 미만에서 가한다. 혼합물을 실온으로 가온시키고 30분 동안 교반한다. 이제 화학식 I3'-Me의 화합물

[화학식 I3'-Me]

을 분리하거나 AcOH(0.3 ml)를 중간체 생성물의 분리없이 가하고 혼합물을 1.5시간 동안 105℃로 가열한다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 냉수(188 ml)를 가한다. pH를 NaOH(수 중 50% 용액)를 첨가하여 pH=8로 조절한다. 최종적으로, 혼합물을 3급-부틸메틸에테르(3x75 ml)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수(1x50 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 여과한다. 증발 건조시킨 후, 중간체 I4 [15.9 g, ee=98.3%, R_f=0.30 (TLC, 실리카, 톨루엔/EtOH=85:15)]를 수득한다.

단계 5: 중간체 I4(150.3 g)를 MeOH (526 ml) 속에 용해하고, 4N NaOH (145.7 ml)를 가하고 혼합물을 2시간 동안 가열하여 환류시킨다. 이후에, MeOH를 증류시키고 물(500 ml)을 가한다. 혼합물을 3급-부틸메틸에테르(2x300 ml)로 추출한다. 수성 상을 물(402 ml)로 희석시키고 pH를 4N HCl을 가하여 pH=6.5로 조절한다. 현탁액을 5℃로 냉각시키고 추가로 2시간 동안 교반한다. 최종적으로, 혼합물을 여과하고, 잔사를 물로 세척하고 건조시켜 중간체 A[107.8 g, ee ≥ 99.0%, m.p.: 260±3℃, R_f=0.2 (TLC, 실리카, 톨루엔/EtOH=9:1])를 수득한다.

실시예 화합물들의 합성

방법 1을 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 에틸이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도이고; X^S가 브로모이며; Y가 메틸로 예시됨).

단계 1: 이의 N,N-디이소프로필에틸아민 염으로서, 중간체 A(500 mg)를 무수 DMF (7 ml) 속에 불활성 대기하에 현탁시키고 TBTU (836 mg)를 가한 후, N,N-디이소프로필에틸아민 (0.53 ml)을 가한다. 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 헥사메틸디실라잔 (0.44 ml)을 가하고 혼합물을 6시간 동안 교반한다. TBTU (334 mg) 및 헥사메틸디실라잔 (0.22 ml)의 추가의 일부를 가하고 반응물을 추가로 18시간 동안 교반한다. 용매를 감압하에 증발시키고 잔사를 NaHCO₃와 EtOAc의 포화된 수용액 사이에 분배한다. 층들을 분리하고 수성 상을 EtOAc로 추출한다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 감압하에 증발시킨다. 조악한(crude) 생성물을 섬광 크로마토그래피(20 g Isolute^® 실리카 겔 카트릿지; 용출액: 디클로로메탄/MeOH/NH₄OH 95/5/0.5)로 정제하여 화합물 I5(295 mg)를 수득한다. UPLC (R_t)=1.24분(방법 M)

단계 2: 시트라진산(15 g)의 교반 용액에 옥시브롬화인(45 g)을 가하고 혼합물을 140℃로 가열한다. 14시간 후, 혼합물을 0℃로 냉각시키고 MeOH (100 ml)를 격렬하게 교반하면서 조심스럽게 가한다. 이후에 혼합물을 냉각된(0℃) 탄산나트륨 수용액(1M, 500 ml)에 붓고 클로로포름(500 ml)을 가한다. 이상 혼합물(biphasic mixture)을 여과하고 유기 층을 분리한다. 목탄을 통해 여과한 후, 용액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 MPLC(디클로로메탄:MeOH 100:3 내지 100:6)로 정제하여 메틸 2,6-디브로모이소니코티네이트(13.7 g)를 수득한다. HPLC (R_t)=1.62 (방법 D). 아르곤 하에 디옥산(30 ml) 중 화합물 I5 (2.6 g)의 교반 용액에 메틸 2,6-디브로모이소니코티네이트(2.2 g), 팔라듐 아세테이트(167 mg), 잔포스(Xanthphos)(432 mg) 및 Cs₂CO₃ (5.6 g)를 가하고 혼합물을 1시간 동안 환류시킨다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 한 후 물에 가하고 EtOAc로 추출한다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 하에 건조시키고, 여과하며 용매를 감압하에 증발시킨다. 조악한 생성물을 HPLC(방법 E)로 정제하여 화합물 I6(0.6 g)을 수득한다.

단계 3: 아르곤 하에 디옥산(10 ml) 중 화합물 I5 (500 mg)의 교반 용액에 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센디클로로팔라듐(II) (65 mg) 및 디에틸아연(헥산 중 1M, 1.1 ml)을 가한다. 혼합물을 2시간 동안 환류한 후 실온으로 냉각되도록 한다. 이후에, 이를 NH₄Cl(수성)로 퀀칭(quenching)시키고 EtOAc로 추출한다. 이후에, 유기 추출물을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하며, 용매를 감압하에 증발시켜 화합물 I7을 수득한다.

단계 4: (중간체 A의 합성시 단계 5를 위한 과정을 50℃의 반응 온도를 사용하여 이용한다). 화합물 I8을 수득한다(137 mg). HPLC (R_t)=1.32분(방법 D).

단계 5: DMF (10 ml) 중 화합물 I8 (800 mg)의 교반된 용액에 TBTU (772 mg), DIPEA (0.7 ml) 및 디메틸아민 (0.36 g)을 가한다. 2시간 후 반응물을 물로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출한다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, Na₂SO₄하에 건조하며, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜 실시예 25 (410 mg)를 수득한다. HPLC (R_t)=1.32분 (방법 D).

방법 2를 통한 실시예 화합물들의 합성 (R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 수소이며; R^2b가 N-메틸카복스아미도이고; Y가 에틸로 예시됨).

단계 1: 디클로로메탄 (5 ml) 중 중간체 A (0.48 g)의 교반 용액에 옥살릴클로라이드(디클로로메탄 중 2M, 2.5 ml)를 가한다. 2시간 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시킨다. 피리딘(1 ml) 및 디옥산(2 ml) 중 2-아미노-이소니코티닉 에틸 에스테르(0.51 g)의 현탁액을 반응 혼합물에 가하고 이를 10분 동안 교반한다. 혼합물을 감압하에 농축시켜 화합물 I7 (0.3 g)을 수득한다. HPLC (R_t)=1.37분(방법 D).

단계 2: (중간체 A의 합성시 단계 5를 위한 과정을 이용하였다). 화합물 I8을 수득하였다(55 mg). HPLC (R_t)=1.23분(방법 D).

단계 3: 실온에서 화합물 I8(55 mg)의 교반 용액에 HATU(60 mg), DMF (1 ml) 및 DIPEA(0.07 ml)를 가한다. 5분 후 메틸아민(THF 중 2M, 0.2 ml)을 가한다. 추가로 5분 후, 물을 가하고 혼합물을 TFA로 산성화한다. 조악한 생성물을 HPLC로 정제하여 실시예 8 (50 mg)을 수득한다. HPLC (R_t)=1.22분(방법 D).

단계 1과 또한 관련된 2-아미노-6-메틸이소니코틴산 메틸 에스테르를 다음과 같이 제조한다:

단계 a: 2-클로로-6-메틸이소니코틴산 (9 g), 수성 암모니아(44 ml), Cu(II)SO₄(0.9 g) 및 황화나트륨(0.32 g)을 오토클레이브에 가하고 155℃로 밤새 가열한다. 조악한 생성물을 수 중에 현탁시켜 2-아미노-6-메틸이소니코틴산 (3.6 g)을 수득한다. HPLC: R_t=0.37분(방법 D)

단계 b: 50 ml의 MeOH에 아세틸 클로라이드(3 ml)를 실온에서 적가한다. 15분 후, 2-아미노-6-메틸이소니코틴산 (2.3 g)을 가하고 혼합물을 밤새 50℃에서 교반한다. 용액을 농축시킨 후, 수득되는 잔사를 아세톤에 현탁한 후 여과하고 50℃에서 진공하에 건조시켜 2-아미노-6-메틸이소니코틴산 메틸 에스테르(4.1 g)를 수득한다. HPLC: R_t=0.91분(방법 D)

방법 3A를 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 메틸이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도로 예시됨).

단계 1: 중간체 A (8.30 g), 2-아미노-6,N,N-트리메틸이소니코틴아미드(4.24 g) 및 NEt₃ (43 ml)를 THF_abs.(66 ml) 속에서 혼합하고 55℃로 가열한다. T3P(EtOAc 중 50% 용액, 56 ml)를 가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 실온에서 냉각한 후, EtOAc (66 ml) 및 물(50 ml)을 가한다. 상들을 분리하고 수성 상을 EtOAc (1x50 ml)로 추출한다. 합한 유기 상들을 염수로 세척하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨다. 여과한 후, 용매를 진공하에 제거하여 실시예 11을 수득한다[9.78 g, R_f=0.55 (TLC, 실리카, 톨루엔/EtOH=3:2)].

디벤조일타르트레이트 염의 합성

실시예 11(200 mg), EtOH (0.8 ml) 및 물(0.4 ml)을 혼합하고 70℃로 가열한다. EtOH (0.6 ml) 및 물(0.6 ml) 중 (S)-(S)-(+)-2,3-디벤조일-타르타르산(175 mg)의 용액을 가한다. 실온으로 냉각한 후 침전물을 여과하고, EtOH/H₂O(7:3)로 세척하고 건조시켜 실시예 11의 (S)-(S)-(+)-2,3-디벤조일-타르트레이트를 수득한다(200 mg).

방법 3B를 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 메틸이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도로 예시됨).

단계 1: 중간체 A (73.3 g) 및 NEt₃ (117 ml)을 무수 THF (440 ml) 속에서 혼합하고 T3P (EtOAc 중 50% 용액, 246 ml)를 가한다. 혼합물을 50℃로 30분 동안 가온시키고 2-아미노-6-메틸이소니코틴산 메틸 에스테르 (34.7 g)를 가한다. 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(440 ml) 및 4N NaOH (52 ml)를 가한다. 상들을 분리하고 수성 상을 iPrOAc(2x220 ml)로 추출한다. 합한 유기 상들을 물(2x220 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하며 증발 건조시켜 중간체 I11을 수득한다. [99.1 g, m.p.: 155±3℃, R_f= 0.29 (TLC, 실리카, 톨루엔/EtOH=85:15)].

[화학식 I11]

단계 2: 중간체 I11 (138.6 g)을 iPrOH (415 ml) 속에 현탁하고 NaOH (수중 50% 용액, 14.5 ml)을 가한다. 혼합물을 55℃로 1시간 동안 가열한다. 이후에, 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 iPrOH (2x200 ml) 및 MeTHF (1x500 ml)로 공-증류시킨다. 이후에, 무수 MeTHF (701 ml), Me₂NH (THF 중 2M 용액, 208 ml) 및 NEt₃ (117 ml)를 가하고 혼합물을 50℃로 가온한다. T3P (EtOAc 중 50% 용액, 327.4 ml)를 가하고 반응 혼합물을 추가로 1.5시간 동안 50℃에서 교반한다. 실온으로 냉각 후 물(818 ml)을 가한다. 상들을 분리하고 수성 상을 iPrOAc (2x281 ml)로 추출한다. 합한 유기 상들을 물(2x281 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고 증발 건조시킨다. 잔사(조악한 생성물 실시예 11)를 아세톤(1.46 L) 속에 용해하고 HCl (EtOAc 중 2.98 M 용액, 240 ml)을 주입한다. 현탁액을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 침전물을 여과 제거하고, 아세톤(100 ml)으로 세척하고 아세톤(1.53 L)과 EtOH_abs.(180 ml)의 혼합물 속에 30분 동안 50℃에서 현탁한다. 이후에, 현탁액을 10℃로 냉각시키고 30분 동안 교반한다. 침전물을 여과 제거하고, 냉 아세톤(200 ml)으로 세척하고 완전 건조시켜 실시예 11을 디클로라이드 염으로서 수득하며(117 g, ee≥99.9%, m.p.: 194±5℃), 임의로 생성물은 또한 정의된 융점이 없는 실시예 11의 디클로라이드의 수화물로 존재할 수 있다.

2-아미노-6,N,N-트리메틸이소니코틴아미드의 합성

단계 1: 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산[참조: Sperber et al., JACS 1959, 81, 704-707] (96.1 g)을 톨루엔 (480 ml) 속에 현탁시키고 DMF (0.5 ml)를 가한다. 85℃로 가온시킨 후, SOCl₂ (61.5 ml)를 주입한다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 가열하여 환류시킨 후 실온으로 냉각한다. 용매 및 과량의 시약을 진공하에 제거한 후, 잔사를 톨루엔(2x200 ml)으로 공-증류시키고 최종적으로 톨루엔 (300 ml) 속에 용해한다. 이후에, 상기 제조된 용액을 Me₂NH(THF 중 2M 용액, 336 ml) 및 NEt₃ (94 ml)의 혼합물에 10℃ 미만에서 가한다. 혼합물을 실온으로 가온하고 추가로 30분 동안 교반한다. 물(300 ml)을 가하고 혼합물을 톨루엔 (3x200 ml)으로 추출한다. 합한 유기 상들을 염수(1x200 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하며 증발시킨다. 오일성 잔사를 n-헵탄(288 ml)으로 처리하고 종자(seed)를 가한다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, 침전물을 여과제거하고, 세척하며 진공하에 건조시켜 중간체 I12를 수득한다[93.7 g, m.p.: 85±3℃, R_f=0.22 (TLC, 실리카, PE/EtOAc=1:1)].

[화학식 I12]

단계 2: 중간체 I12 (26.7 g), Cs₂CO₃ (70 g), Pd(OAc)₂ (302 mg) 및 (2-비페닐)-디-3급-부틸포스핀(0.92 g)을 디옥산_abs.(270 ml) 속에서 혼합하고 벤질 아민 (22.3 ml)을 가한다. 반응 혼합물을 100℃까지 밤새 가열하고, 실온으로 냉각시키고 여과한다. 수성 HCl(2M, 100 ml)을 가하고 혼합물을 t-부틸메틸에테르(70 ml)로 추출한다. 수성 상에 NaOH (4N, 55 ml)를 가한다. 3급-부틸메틸에테르 (3x70 ml)로 추출한 후 합한 유기 상들을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하며 증발 건조시켜 중간체 I13을 수득한다[23.0 g, m.p.: 124±3℃, R_f=0.20 (TLC, 실리카, PE/EtOAc=2:3)].

[화학식 I13]

단계 3: 중간체 I13 (37.0 g) 및 Pd(OH)₂/C를 EtOH_abs.(185 ml), 및 AcOH (16 ml) 속에 현탁시?d다. 혼합물을 70℃ 및 60 psi에서 완전히 소모될 때까지 수소화한다. 혼합물을 여과하고 여액을 증발건조시킨다. 나머지 잔사를 디클로로메탄 (250 ml) 속에 용해하고, Na₂CO₃-용액(수중 10%, 150 ml)으로 세척하고 Na₂SO₄ 위에서 건조시킨다. 여과 및 증발시킨 후 2-아미노-6,N,N-트리메틸이소니코틴아미드 I14를 분리한다[22.2 g, m.p.: 168±3℃, R_f=0.15 (TLC, 실리카, NEt₃/PE로 불활성화시킴, EtOAc)].

[화학식 I14]

대안: 중간체 I12 (26.6 g), Cs₂CO₃ (48.9 g), 벤조페논이민(25.0 g), Pd(OAc)₂ (0.60 g) 및 라세미 BINAP (4.52 g)를 톨루엔 (266 ml) 속에 현탁시키고 100℃로 2일 동안 가열한다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 여과한다. 4N HCl (67 ml)을 여액에 가하고 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한다. 물(67 ml)을 가하고 상들을 분리한다. 유기 상을 물(50 ml)로 추출한다. 합한 수성 상을 톨루엔 (100 ml)으로 세척한다. 4N NaOH (70 ml)를 첨가한 후 알칼리성 수성 상을 CH₂Cl₂ (4x100 ml)로 추출한다. 합한 유기 상들을 염수(100 ml)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 여과한다. 증발 건조시킨 후, 2-아미노-6,N,N-트리메틸이소니코틴아미드 I14를 분리한다[22.1 g, R_f=0.15 (TLC, 실리카, NEt₃/PE로 불활성화됨, EtOAc)].

위에서 기재한 바와 같은 벤질 아민(단계 1에서와 같음) 또는 벤조페노이민(대안에서와 같음) 대신에 CH₃CONH₂ 또는 CF₃CONH₂와 같은 추가의 N-공급원을 2-아미노-6,N,N-트리메틸이소니코틴아미드의 합성을 위해 사용할 수 있다.

방법 4를 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 3-메틸-4-클로로이고; R^2a가 사이클로프로필이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도이고; X가 브로모이며 Y가 메틸로 예시됨).

단계 1: 실온에서 THF (3 ml) 중 화합물 I6 (90 mg)의 교반 용액에 LiOH(10% 수용액; 0.05 ml)를 가한다. 1시간 후 반응물을 30℃로 가열시키고 추가로 30분 후, 감압하에 농축시켜 화합물 I9(110 mg)를 수득한다. HPLC (R_t)=1.34분(방법 D).

단계 2: 실온에서 소적(a few drops)의 DMF를 함유하는 디클로로메탄 (5 ml) 중 화합물 I9 (80 mg)의 교반 용액에 HATU (110 mg)를 가한다. 45분 후 디메틸아민 (0.014 ml)을 가하고 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 추가의 HATU (110 mg) 및 디메틸아민 (1 ml)을 가하고 2시간 후 반응물을 물/디클로로메탄에 가하고 상을 Isolute HMN 카트릿지를 통해 분리한다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하며, 용매를 감압하에 증발시킨다. 잔사를 HPLC 정제하여 화합물 I10 (20 mg)를 수득한다. HPLC (R_t)=1.32분(방법 D).

단계 3: 아르곤 하에 -78℃에서 THF중 브로모사이클로프로판 (0.039 ml)의 교반 용액에 t-부틸 리튬(0.056 ml)을 적가 방식으로 가한다. 25분 후, 사이클로프로필아연브로마이드 (THF 중 0.5M, 0.096 ml)를 가하고 혼합물을 실온으로 가온되도록 한다. 1시간 후 화합물 I10 (23 mg) 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-디클로로팔라듐(II) (3 mg)을 가한다. 추가로 35분 후, 추가의 사이클로프로필아연브로마이드 (THF 중 0.5M, 0.096 ml)를 가하고 1시간 후 추가의 사이클로프로필 아연 브로마이드(THF 중 0.5M, 0.096 ml)를 가하고 혼합물을 밤새 교반한다. 추가로 사이클로프로필 아연 브로마이드(THF 중 0.5M, 0.24 ml)를 가하고 4시간 후 혼합물을 THF로 희석하고 여과한다. HPLC 정제하여 실시예 32 (7 mg)를 수득한다. HPLC (R_t)=1.34분 (방법 D).

방법 5를 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 메톡시이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도이고; Y가 메틸로 예시됨).

단계 1: MeOH (20 ml) 중 나트륨 메톡사이드(375 mg) 및 메틸 2,6 디브로모-이소니코티네이트(1.0 g)의 용액을 초음파 오븐 속에서 130℃로 30분 동안 가열한다. 이후에, 추가의 나트륨 메톡사이드(281 mg)를 가하고 가열을 추가로 15분동안 130℃에서 지속한다. 이후에, 진한 황산(1.86 ml)을 반응 혼합물에 가하고 수득되는 현탁액을 4시간 동안 80 내지 85℃에서 가열한다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 빙냉 탄산나트륨 수용액(100 mL)에 붓고 디클로로메탄 (100 ml)으로 추출한다. 유기 층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 MPLC(디클로로메탄:MeOH = 100:3 내지 100:5)로 정제하여 2-브로모-6-메톡시이소니코티네이트(497 mg)와 상응하는 트리메틸 시트라진산(213 mg)의 7:3 혼합물 710 mg을 수득한다. HPLC (R_t)=1.66분 (방법 D). 당해 혼합물을 이후에 방법 1에서 단계 2와 유사한 과정에 사용한다.

단계 2+3: (방법 2에서 단계 2, 3 각각과 유사하게 수행함)

실시예 26 (7 mg)을 수득한다. HPLC (R_t)=1.29분 (방법 D).

방법 6을 통한 실시예 화합물들의 합성(R¹이 4-클로로-3-메틸이고; R^2a가 에티닐이며; R^2b가 N,N-디메틸카복스아미도이고; X가 브로모이며; Y가 메틸로 예시됨).

단계 1: 실온에서 아르곤 하에 THF (20 ml) 중 화합물 I6 (3.5 g)의 용액에 TEA (2 ml), 비스트리페닐포스핀팔라듐클로라이드(219 mg) 및 요오드화구리(I)(59 mg)에 이어 트리메틸실릴아세틸렌(1 ml)을 가한다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 빙-수에 가하고 EtOAc로 추출한다. 유기 층을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 진공하에 농축시킨다. 섬광 크로마토그래피(95:5의 디클로로메탄:MeOH)하여 화합물 I15 (3 g)을 수득한다. R_f (95:5의 디클로로메탄:MeOH) 0.22.

단계 2: 실온에서 디옥산(30 ml) 중 화합물 I15 (3 g)의 교반 용액에 LiOH (1M 수용액, 10.4 ml)을 가한다. 2시간 후, HCl(1M 수용액)을 중성 pH에 가하고 수득되는 현탁액을 여과하고 건조한다. HPLC 정제하여 화합물 I8(R^2a는 에티닐이다)(2.3 g)을 수득한다. HPLC (R_t)=1.31분 (방법 D)

단계 3: (방법 2의 단계 3과 유사하게 수행함).

실시예 34 (210 mg)의 제공. HPLC (R_t)=1.23분 (방법 E)

다음 실시예 화합물들은 상기 방법들에 따라 합성할 수 있다:

공-결정들에 대한 실시예

본 발명의 다른 특징 및 장점들은 실시예에 의해 본 발명의 원리를 설명하는 다음의 보다 상세한 실시예들로부터 명백해질 것이다.

화학식 1의 화합물의 디하이드로클로라이드로부터 출발하는 공-결정의 합성: 등몰량의 화학식 1의 하나의 화합물의 디하이드로클로라이드, 바람직하게는 상기 실시예 1 내지 36의 화합물들 중 하나, 및 적절한 공-결정 형성자(오로트산, 히푸르산, L-피로글루탐산, D-피로글루탐산, 니코틴산, L-(+)-아스코르브산, 사카린, 피페라진, 3-하이드록시-2-나프토산, 점액산(갈락타르산), 팜산(엠본산), 스테아르산, 콜산, 데옥시콜산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, 석신아미드, 우라실, L-라이신, L-프롤린, D-발린, L-아르기닌, 글리신으로부터 선택됨)를 적절한 용매(예를 들면, 2-부타논, 아세톤, 아세토니트릴, 이소프로필아세테이트 중에서 선택됨) 속에서 80 내지 50℃에서 배합하였다. 10 내지 60분 교반 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 필요한 경우 추가의 용매를 가하여 혼합물의 교반을 촉진시켰다. 최종적으로, 고체를 여과로 회수하고, 적절한 유기 용매로 세척한 후 진공하에 건조시켜 상응하는 공-결정을 수득하였다.

화학식 1의 화합물의 유리 염기로부터 출발하여 공-결정의 합성: 등몰량의 화학식 1의 하나의 화합물의 유리 염기, 바람직하게는 상기 실시예 1 내지 36의 화합물들 중 하나, 적절한 공-결정 형성자(오로트산, 히푸르산, L-피로글루탐산, D-피로글루탐산, 니코틴산, L-(+)-아스코르브산, 사카린, 피페라진, 3-하이드록시-2-나프토산, 점액산(갈락타르산), 팜산(엠본산), 스테아르산, 콜산, 데옥시콜산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, 석신아미드, 우라실, L-라이신, L-프롤린, D-발린, L-아르기닌, 글리신으로부터 선택됨) 및 염산(1.5 내지 2 당량)을 적절한 용매(예를 들면, 2-부타논, 아세톤, 아세토니트릴, 이소프로필아세테이트 중에서 선택됨) 속에서 배합하고 혼합물을 80 내지 50℃로 고정시켰다. 10 내지 60분 동안 교반한 후 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 필요한 경우 추가의 용매를 가하여 혼합물의 교반능을 촉진시켰다. 최종적으로 고체를 여과로 회수하고, 적절한 유기 용매로 세척한 후 진공하에 건조시켜 상응하는 공-결정을 수득하였다.

예시된 공-결정 및 염의 분석

결정성 공-결정 형태 및 염들을 특정 °2θ(±0.05 °2θ)에서의 피크들을 포함하는, CuK_α1 방사선(radiation)을 사용하여 형성된, X-선 분말 회절 패턴으로 확인하였다.

X-선 분말 회절 패턴을 위치-민감성 검출기(OED) 및 X-선 공급원으로서 Cu-양극이 장착된 전송 방식에서 STOE-STADI P-회절계를 사용하여, 본 발명의 영역내에서 기록한다(CuK_α1 방사선,λ=1.54056Å, 40 kV, 40 mA).

[표 4]

^* L-라이신 공-결정의 동적 진공 흡습-실험(dynamical vapour sorption-experiment) 후 수득된 수화된 L-라이신 공-결정(10 내지 90%의 범위의 상대 습도에 노출)

[표 4]

약리학적 파트

다른 국면에서, 본 발명을 사용하여 G 단백질 커플링된 수용체의 추정되는 특이적인 작용제 또는 길항제를 평가할 수 있다. 본 발명은 케모카인 수용체의 활성을 조절하는 화합물에 대한 스크리닝 검사의 제조 및 실행시 이들 화합물의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 화합물은, 예를 들면, 이의 공지된 활성을 공지되지 않은 활성을 가진 화합물과 비교하기 위한 검사에서 경쟁적 억제에 의해 또는 참조로서, 케모카인 수용체에 대한 다른 화합물의 결합 부위를 확립하거나 측정하는데 유용하다. 신규 검사 또는 프로토콜을 개발하는 경우, 본 발명에 따른 화합물은 이들의 효능을 시험하는데 사용될 수 있다.

구체적으로, 이러한 화합물은 예를 들면, 상술한 질환을 포함하는 약제학적 연구시 사용하기 위한 시판 키트 속에 제공될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 케모카인 수용체의 추정된 특이적인 조절인자의 평가에 유용하다. 또한, 본 발명의 화합물을 이용하여, 상호작용의 특이적인 부위를 정의하는데 도움을 줄 수 있는 이들 수용체 상에서 활성인 화합물의 구조적 변이체로서 제공되거나 또는 결합하지 않는 화합물의 예로서 제공됨으로써, 케모카인 수용체일 것으로 고려되지 않는 G 단백질 커플링된 수용체의 특이성을 시험할 수 있다.

CCR3 수용체 결합 시험은 사람 케모카인 수용체 CCR3(hCCR3-C1 세포)으로 형질감염된 K562 세포주(백혈병 골수모 세포)를 기초로 한다. 세포막은 hCCR3-C1 세포를 질소 분해로 파괴하여 제조하였다. 제제를 400 g에서 4℃로 30분 동안 원심분리하였다. 상층액을 신선한 튜브내로 이전시킨 후 48000 g에서 4℃로 1시간 동안 제2 원심분리하였다. 막을 SPA 항온처리 완충액(25 mM HEPES, 25 mM MgCl₂ 6xH₂O, 1 mM CaCl₂ 2xH₂O) 속에 소 혈청 알부민의 부재하에서 재-현탁시키고 1회용 바늘(Terumo, 23Gx1'')을 통과시켜 균질화하였다. 막을 분취량으로 -80℃에서 저장하였다.

CCR3 수용체 결합 검사를 방사리간드 재조합체 사람 ¹²⁵요오드-에오탁신-1을 사용한 신틸레이션 근접 검사(SPA) 설계로 수행하였다. hCCR3 C1 세포의 세포막을 1회용 바늘(Terumo, 23Gx1'')을 통과시켜 다시 균질화하고 적합한 농도(0.5 내지 10㎍의 단백질/웰)로 96 웰 미세역가 플레이트(1450-514, 제조원: Perkin Elmer)내에서 SPA 항온처리 완충액 속에 희석시켰다. SPA 검사를 SPA 항온처리 완충액 속에서 200μl의 최종 용적 및 25 mM HEPES, 25 mM MgCl₂ 6xH₂O, 1 mM CaCl₂ 2xH₂O 및 0.1% 소 혈청 알부민의 최종 농도로 설정하였다. 60μl의 막 현탁액, 80μl의 밀 배아 아글루티닌 피복된 PVT 비드(bead)(유기 신틸레이터, 제조원: GE Healthcare, RPNQ-0001) 0.2 mg/웰), 40μl의 재조합체 사람 ¹²⁵조딘-에오탁신(Jodine-eotaxin)-1(제조원: Biotrend)을 함유한 SPA 검사 혼합물을 30,000 dpm/웰의 최종 농도로 희석시키고, 20μl의 시험 화합물(DMSO 희석물 속에 용해됨)을 가하였다. SPA 검사 혼합물을 2시간 동안 실온에서 항온처리하였다. 결합된 방사활성을 신틸레이션 계수기(Micro Beta "Trilux", Wallac)로 측정하였다. 총 결합(교체인자, Bo는 첨가되지 않음) 및 비-특이적인 결합(NSB)에 대한 대조군이, 표지되지 않은 재조합체 사람 에오탁신-1(제조원; Biotrend, 제품 번호 300-21) 또는 참조 화합물을 첨가함에 의해 포함되었다.

시험 화합물의 친화성의 측정은 총 결합(Bo)으로부터의 비-특이적인 결합(NSB) 또는 시험 화합물(B)의 존재하에 제공된 화합물 농도에서 결합을 감하여 계산하였다. NSB 값은 100% 억제로 설정하였다. Bo-NSB 값은 0% 억제로 설정하였다.

해리 상수 K_i는 0.1 내지 10000 nM의 용량 범위에 걸쳐 프로그램 "easy sys"[참조: Schittkowski, Num Math 68, 129-142 (1994)]을 기초로 한 질량 작용의 법칙을 사용하여 몇가지 화합물 농도에서 수득한 실험 데이타의 반복적 핏팅(iterative fitting)에 의해 계산하였다.

케모카인 수용체 활성의 억제제로서 본 발명에 따른 화합물의 유용성은 문헌[참조: Ponath et al., J. Exp. Med., 183, 2437-2448 (1996) 및 Uguccioni et al., J. Clin. Invest., 100, 11371143 (1997)]에 기재된 바와 같은, CCR3 리간드 결합에 대한 검사와 같이, 당해 분야에 공지된 방법으로 입증될 수 있다. 목적한 수용체를 발현시키기 위한 세포주는 EOL-3 또는 THP-1와 같은 케모카인 수용체를 천연적으로 발현하는 것들, HL-60과 같은 화학 제제 또는 단백질 제제의 첨가에 의해 케모카인 수용체를 발현하도록 유도된 것들 또는 예를 들면 인터루킨-5가 존재하는 부티르산으로 처리한 AML14.3D10 세포, 또는 재조합체 케모카인 수용체를 발현하도록 가공된 세포, 예를 들면, L1.2, K562, CHO 또는 HEK-293 세포를 포함한다. 최종적으로, 혈액 또는 조직 세포, 예를 들면, 문헌[참조: Hansel et al., J. Immunol. Methods, 145, 105-110 (1991)]에 기술된 바와 같은 방법을 사용하여 분리된, 사람 말초 혈액 호산구를 이러한 검사에서 사용할 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물은 위에서 언급한 검사에서 CCR3 수용체에 대한 결합시 활성을 가지며 에오탁신-1, 에오탁신-2, 에오탁신-3, MCP-2, MCP-3, MCP-4 또는 RANTES를 포함하는 CCR3 리간드에 의해 CCR3의 활성화를 억제한다.

본원에 사용된 것으로서, "활성"은 위에서 언급된 검사에서 측정하는 경우 억제에 있어 1μM 이상에서 50%의 억제를 입증하는 화합물을 의미하는 것으로 의도된다. 이러한 결과는 CCR3 수용체 활성의 억제제로서 화합물의 고유 활성의 지표이다.

Ki 값은 (사람 CCR3-수용체에서 사람 에오탁신-1):

처방

위에서 기재한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정 및 염은, CCR3-수용체의 활성이 관련된 질환의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하는데 유용하다.

매우 다양한 염증, 감염 및 면역조절 장애 및, 호흡기 질환 또는 위장병, 관절의 염증 질환 및, 천식 및 알레르기 질환을 포함하는, 비인두, 눈 및 피부의 알레르기 질환, 호산구병, 병원성 미생물(정의에 의해 바이러스를 포함함)에 의한 감염, 및 또한 류마티스 관절염 및 죽상경화증과 같은 자가면역 병리학, 및 또한 노화-관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 망막병증 및 당뇨병성 황반 부종과 같은 비정상적으로 향상된 신생혈관화와 관련된 질환의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하는 것이 바람직하다. 노화-관련 황반 변성은 전세계적으로 실명의 선도 원인이다. AMD에서 대부분의 실명은 맥락막혈관신생에 의한 망막의 침입으로부터 초래된다. CCR3은 AMD 환자의 맥락막 신생혈관 내피 세포내에서 특이적으로 발현된다. AMD에 대한 흔히 사용된 마우스 동물 모델에서 레이저 손상-유도된 맥락막혈관신생은 CCR3 또는 CCR3 리간드의 유전적 고갈 및 또한 마우스를 항-CCR3 항체 또는 CCR3 길항제로 처리함으로써 약화되었다[참조: Takeda et al, Nature 2009, 460(7252):225-30].

예를 들면, 염증성 또는 알레르기성 질환 및 병태, 예를 들면, 천식, 사계절 및 계절성 알레르기성 비염, 알레르기성 결막염, 고민감성 폐 질환, 고민감성 폐렴, 호산구연조직염[예를 들면, 웰 증후군(Well's syndrome)], 호산구 폐렴[예를 들면, 뢰플러 증후군(Loeffler's syndrome), 만성 호상구성 폐렴], 호산구성 근막염[예를 들면, 슐만스 증후군(Shulman's syndrome)], 지연된 유형의 고민감성, 사이질 폐 질환(ILD)(예를 들면, 특발성 폐섬유증, 또는 류마티스 관절염과 관련된 ILD, 전신홍반루푸스, 강직척추염, 전신경화증, 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 다발근육염 또는 피부근염); 비-알레르기성 천식; 운동 유발성 기관지 수축; 전신 아나필락시스 또는 고민감성 반응, 약물 알레르기(예를 들면, 페니실린, 세팔로스포린에 대한 것), 오염된 트립토판의 섭취로 인한 호산구증가근통증 증후군, 곤충 쏘임 알레르기; 자가면역 질환, 예를 들면, 류마티스 관절염, 건선 관절염, 다발 경화증, 전신 홍반 루푸스, 중증근육무력증, 면역성혈소판감소증(성인 ITP, 신생아혈소판감소증, 소아 ITP), 면역 용혈성 빈혈(자가-면역 및 약물 유도된 것), 에반스 증후군(Evans syndrome)(혈소판 및 적혈구 세포 면역 혈구감소증), 신생아의 Rh병, 굳파스춰 증후군(Goodpasture's syndrome)(항-GBM 질환), 복강, 자가-면역 심근성 유년발병형 당뇨병; 사구체신염, 자가면역 갑상샘염, 베체트병(Behcet's disease); 동종이식거부반응 또는 이식체-대-숙주병을 포함하는 이식 거부(예를 들면, 이식술에서); 크론병(Crohn's disease) 및 궤양대장염과 같은 염증성 창자병; 척추관절병; 공피증; 건선(T 세포 매개된 건선 포함) 및 피부염, 습진, 아토피성 피부염, 알레르기성 접촉성 피부염, 두드러기와 같은 염증성 피부염; 혈관염(예를 들면, 괴사성, 피하, 및 고민감성 혈관염); 결절홍반; 호산구증다성 근염, 호산구성 근막염; 피부 또는 기관의 백혈병 침윤을 지닌 암; 만성 폐쇄성 폐 질환, 노화-관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 망막병증 및 당뇨병성 황반 부종의 예방 및/또는 치료용 의약을 제조하는 것이 가장 바람직하다.

치료 방법

따라서, 본 발명은 매우 다양한 염증, 감염, 및 면역조절 장애 및 질환, 예를 들면, 천식 및 알레르기 질환, 만성 폐쇄성 폐 질환, 병원성 미생물(정의에 의해 바이러스를 포함함)에 의한 감염, 자가면역 병리학, 예를 들면, 류마티스 관절염 및 죽상경화증, 및 또한 노화-관련 망막 변성(AMD), 당뇨병성 망막병증 및 당뇨병성 황반 부종의 예방 및/또는 치료에 유용한 위에서 기재한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정 및 염에 관한 것이다.

예를 들면, 포유동물 케모카인 수용체(예를 들면, 사람 케모카인 수용체)의 하나 이상의 기능을 억제하는 본 발명의 화합물의 공-결정 또는 염을 투여하여 염증, 감염성 질환 또는 비정상적으로 향상된 신혈관형성을 억제할 수 있다(즉, 감소되거나 예방될 수 있다). 그 결과, 백혈구 이주(emigration), 부착, 화학주성, 엑소사이토시스(exocytosis)(예를 들면, 효소, 성장 인자, 히스타민의 것) 또는 염증 매개인자 방출, CCR3 발현 세포의 생존 또는 증식과 같은 하나 이상의 염증 과정이 억제된다. 예를 들면, 염증 부위에 대한 호산구 침윤(예를 들면, 천식 또는 알레르기성 비염에서)이 본 방법에 따라서 억제될 수 있다. 특히, 다음 실시예들의 공-결정 또는 염은 위에서 언급한 검사에서 적절한 케모카인을 사용하여 CCR3 수용체를 발현하는 세포의 활성화 및 이주(migration)를 차단하는데 있어서 활성을 갖는다. 다른 예에서, 내피 증식 및 신생혈관화가 억제될 수 있다(즉, 감소되거나 예방될 수 있다). 그 결과, 즉, 망막의 비정상적으로 향상된 신생혈관화가 억제된다.

사람과 같은 영장류 외에, 다양한 다른 포유동물을 본 발명의 방법에 따라 치료할 수 있다. 예를 들면, 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 기니아 피그, 랫트 또는 다른 소(bovine), 양(ovine), 말(equine), 개(canine), 고양이(feline), 설치류 또는 뮤린(murine) 종(species)을 치료할 수 있다. 그러나, 당해 방법은 또한 양서류 종과 같은 다른 종에서 실시할 수 있다. 상기 방법에서 치료된 대상체는 이들에서 케모카인 수용체 활성의 억제가 바람직한 포유동물, 수컷 또는 암컷이다.

케모카인 수용체 기능의 억제제로 치료될 수 있는 사람 또는 다른 종의 질환 또는 병태는 염증 또는 알레르기 질환 및 병태, 예를 들면, 천식, 알레르기성 비염, 과민성 폐 질환, 과민성 폐렴, 호산구연조직염[예를 들면, 웰 증후군(Well's syndrome)], 호산구폐렴[예를 들면, 뢰플러 증후군(Loeffler's syndrome), 만성 호산구 폐렴], 호산구성근막염[예를 들면, 슐만 증후군(Shulman's syndrome)], 지연형 과민증(delayed-type hypersensitivity), 간질성폐질환(ILD)[예를 들면, 특발성 폐 섬유증 또는, 류마티스 관절염과 관련된 ILD, 전신 홍반루푸스, 강직척추염, 전신경화증, 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 다발근육염 또는 피부근염]; 만성 폐쇄성 폐 질환(리노바이러스-유발된 악화(exacerbation) 포함); 전신 아나필락시스(systemic anaphylaxis) 또는 과민성 반응, 약물 알레르기(예를 들면, 페니실린, 세팔로스포린에 대한 약물 알레르기), 오염된 트립토판의 섭취로 인한 호산구증가근통증후군(eosinophilia-myalgia syndrome), 곤충 쏘임 알레르기(insect sting allergy); 자가면역 질환, 예를 들면, 류마티스 관절염, 건선 관절염, 다발경화증, 전신 홍반루푸스, 중증근육무력증, 유년 발병형 당뇨병; 사구체신염, 자가면역갑상샘염, 베체트병(Behcet's disease); 이식 거부(예를 들면, 이식시), 예를 들면, 동종 이식 거부 또는 이식체 대 숙주병 포함; 염증성 창자병, 예를 들면, 크론병(Crohn's disease) 및 궤양성 대장염; 척추관절증; 공피증; 건선(T 세포 매개된 건선 포함) 및 염증성피부염, 예를 들면, 피부염, 습진, 아토피성 피부염, 알레르기성 접촉성 피부염, 두드러기; 혈관염(예를 들면, 괴사성, 피하 및 고민감성 혈관염); 호산구증다성 근염, 호산성 근막염; 피부 또는 기관의 백혈구 침윤을 갖는 암을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 재관류 손상, 죽상경화증, 특정의 혈액학적 악성암, 사이토킨-유도된 독성(예를 들면, 패혈성 쇼크, 내독성 쇼크), 다발근육염, 피부근염을 포함하나, 이에 한정되지 않는 바람직하지 않은 염증 반응이 억제되어야 하는 다른 질환 또는 병태도 치료될 수 있다. 케모카인 수용체 기능의 억제제로 치료될 수 있는 사람 또는 다른 종의 감염성 질환 또는 병태는 HIV를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

또한, 노화-관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 망막병증 및 당뇨병성 황반 부종과 같은 비정상적인 향상된 신생혈관화와 관련된 질환이 또한 치료될 수 있다.

다른 국면에서, 본 발명은 G 단백질 커플링된 수용체의 추정되는 특이적 작용제 또는 길항제를 평가하는데 사용될 수 있다. 본 발명은 케모카인 수용체의 활성을 조절하는 화합물에 대한 스크리닝 검사의 제조 및 실시에 있어서 이들 화합물의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 화합물은 예를 들면, 경쟁적 억제에 의해 케모카인 수용체에 대한 다른 화합물의 결합 부위를 확립하거나 측정하거나 이의 공지된 활성을 공지되지 않은 활성을 지닌 화합물과 비교하기 위한 검사에서 참조물질로 유용하다. 신규 검사 또는 프로토콜을 개발하는 경우, 본 발명에 따른 화합물은 이들의 효능을 시험하는데 사용될 수 있다.

구체적으로, 이러한 화합물은 예를 들면, 전술한 질환을 포함하는 약제 연구에서 사용하기 위한 시판 키트(kit)로 제공될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 케모카인 수용체의 추정된 특이적 조절인자를 평가하는데 유용하다. 또한, 본 발명의 화합물을, 상호작용의 구체적인 부위를 정의하는데 도움을 줄 수 있는 이들 수용체 상에서 활성인 화합물의 구조적 변이체로서 또는 결합하지 않는 화합물의 예로서 제공함으로써, 케모카인 수용체인 것으로 고려되지 않는 G 단백질 커플링된 수용체의 특이성을 시험할 수 있다.

병용물

위에서 기재한 바와 같은 화학식 1의 화합물의 공-결정 및 염은 이들 자체로 사용되거나 본 발명에 따른 화학식 1의 다른 활성 물질과 병용될 수 있다. 화학식 1의 화합물은 임의로 또한 다른 약리학적으로 활성인 물질과 병용될 수 있다. 이들은 β2-아드레노셉터-작용제(단시간 및 장시간 작용하는 것), 항-콜린제(단시간 및 장시간 작용하는 것), 소염 스테로이드(경구 및 국소 코르티코스테로이드), 크로모글리케이트, 메틸크산틴, 분리된-글루코코르티코이드모방체, PDE3 억제제, PDE4-억제제, PDE7-억제제, LTD4 길항제, EGFR-억제제, 도파민 작용제, PAF 길항제, 리폭신 A4 유도체, FPRL1 조절인자, LTB4-수용체 (BLT1, BLT2) 길항제, 히스타민 H1 수용체 길항제, 히스타민 H4 수용체 길항제, 이중 히스타민 H1/H3-수용체 길항제, PI3-키나제 억제제, 비-수용체 티로신 키나제의 억제제, 예를 들면, LYN, LCK, SYK, ZAP-70, FYN, BTK 또는 ITK, MAP 키나제 억제제, 예를 들면, p38, ERK1, ERK2, JNK1, JNK2, JNK3 또는 SAP, NF-κB 시그날링 경로 억제제, 예를 들면, IKK2 키나제 억제제, iNOS 억제제, MRP4 억제제, 류코트리엔 생합성 억제제, 예를 들면, 5-리폭시게나제(5-LO) 억제제, cPLA2 억제제, 류코트리엔 A4 하이드롤라제 억제제 또는 FLAP 억제제, 비-스테로이드성 소염제(NSAID), CRTH2 길항제, DP1-수용체 조절인자, 트롬복산 수용체 길항제, CCR3 길항제, CCR⁴ 길항제, CCR¹ 길항제, CCR5 길항제, CCR6 길항제, CCR7 길항제, CCR8 길항제, CCR9 길항제, CCR30 길항제, CXCR³ 길항제, CXCR⁴ 길항제, CXCR² 길항제, CXCR¹ 길항제, CXCR5 길항제, CXCR6 길항제, CX3CR³ 길항제, 뉴로키닌(NK1, NK2) 길항제, 스핑고신 1-포스페이트 수용체 조절인자, 스핀고신 1 포스페이트 리아제 억제제, 아데노신 수용체 조절인자, 예를 들면, A2a-작용제, 푸린성 수용체의 조절인자, 예를 들면, P2X7 억제제, 히스톤 데아세틸라제(HDAC) 활성인자, 브래디키닌(BK1, BK2) 길항제, TACE 억제제, PPAR 감마 조절인자, Rho-키나제 억제제, 인터루킨 1-베타 전환 효소(ICE) 억제제, 톨(Toll)-유사 수용체 (TLR) 조절인자, HMG-CoA 리덕타제 억제제, VLA-4 길항제, ICAM-1 억제제, SHIP 작용제, GABAa 수용체 길항제, ENaC-억제제, 멜라노코르틴(Melanocortin) 수용체 (MC1R, MC2R, MC3R, MC4R, MC5R) 조절인자, CGRP 길항제, 엔도텔린 길항제, TNFα 길항제, 항-TNF 항체, 항-GM-CSF 항체, 항-CD46 항체, 항-IL-1 항체, 항-IL-2 항체, 항-IL-4 항체, 항-IL-5 항체, 항-IL-13 항체, 항-IL-4/IL-13 항체, 항-TSLP 항체, 항-OX40 항체, 점액조절인자, 면역치료제, 기도의 팽윤에 대한 화합물, 기침에 대한 화합물, VEGF 억제제 뿐만 아니라, 2개 또는 3개의 활성 물질들의 병용물도 포함한다.

베타 모방체, 항콜린제, 코르티코스테로이드, PDE4-억제제, LTD4-길항제, EGFR-억제제, CRTH2 억제제, 5-LO-억제제, 히스타민 수용체 길항제 및 SYK-억제제가 바람직하나, 또한 2개 또는 3개의 활성 물질들의 병용물, 즉:

·베타모방체와 코르티코스테로이드, PDE4-억제제, CRTH2-억제제 또는 LTD4-길항제,

·항콜린제와 베타모방체, 코르티코스테로이드, PDE4-억제제, CRTH2-억제제 또는 LTD4-길항제,

·코르티코스테로이드와 PDE4-억제제, CRTH2-억제제 또는 LTD4-길항제

·PDE4-억제제와 CRTH2-억제제 또는 LTD4-길항제

·CRTH2-억제제와 LTD4-길항제.

약제학적 형태

화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염을 투여하기에 적합한 제제는 예를 들면, 정제, 캅셀제, 좌제, 액제 및 산제 등을 포함한다. 약제학적 활성 화합물(들)의 성분은 전체 조성물 중의 0.05 내지 90중량%, 바람직하게는 0.1 내지 50 중량%의 범위내이어야 한다. 적합한 정제는 예를 들면, 활성 물질(들)을 공지된 부형제, 예를 들면, 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 락토즈와 같은 불활성 희석제, 옥수수 전분 또는 알긴산과 같은 붕해제, 전분 또는 젤라틴과 같은 결합제, 스테아르산마그네슘 또는 활석과 같은 윤활제 및/또는 카복시메틸 셀룰로즈, 셀룰로즈 아세테이트 프탈레이트 또는 폴리비닐 아세테이트와 같은 방출 지연제와 혼합시켜 수득할 수 있다. 정제는 또한 수개의 층들을 포함할 수 있다.

피복 정제는 정제에 대해 유사하게 생산된 코어를 정제 피복에 일반적으로 사용된 물질, 예를 들면, 콜리돈 또는 쉘락(shellac), 아라비아검(gum arabic), 활석, 이산화티타늄 또는 당으로 피복하여 상응하게 제조할 수 있다. 지연된 방출을 달성하거나 비혼용성을 방지하기 위하여 코어는 또한 다수의 층으로 이루어질 수 있다. 유사하게 정제 피복물은 가능하게는 정제에 대해 위에서 언급한 부형제를 사용하여 지연된 방출을 달성하기 위한 구성원 또는 층으로 이루어질 수 있다.

본 발명에 따른 활성 물질 또는 이의 조합물을 함유하는 시럽제 또는 엘릭서르제(elixir)는 사카린, 사이클라메이트, 글리세롤 또는 당과 같은 감미제 및 풍미 증진제, 예를 들면, 바닐린 또는 오렌지 추출물과 같은 풍미제를 추가로 함유할 수 있다. 이들은 또한 현탁 보조제 또는 나트륨 카복시메틸 셀룰로즈와 같은 증점제, 예를 들면, 지방 알코올과 에틸렌 옥사이드의 축합 생성물과 같은 습윤제, 또는 p-하이드록시벤조에이트와 같은 방부제를 함유할 수 있다.

액제는 예를 들면, 등장성 제제, p-하이드록시벤조에이트와 같은 방부제 또는 에틸렌디아민테트라아세트산의 알칼리 금속 염과 같은 안정화제를 첨가하고, 임의로 유화제 및/또는 분산제를 사용하여 일반적인 방법으로 제조하는 반면, 물이 희석제로 사용되는 경우, 예를 들면, 유기 용매가 가용화제 또는 용해 보조제로 임의 사용될 수 있고, 액제는 주사 바이알(injection vial) 또는 앰플 또는 주입 병내로 이전될 수 있다.

하나 이상의 활성 물질 또는 활성 물질들의 조합물을 함유하는 캅셀제는 예를 들면, 활성 물질을 락토즈 또는 소르비톨과 같은 불활성 담체와 혼합하고 이들을 젤라틴 캅셀내로 패킹(packing)하여 제조할 수 있다.

적합한 좌제는 예를 들면, 당해 목적으로 제공된 담체, 예를 들면, 천연 지방 또는 폴리에틸렌글리콜 또는 이의 유도체와 혼합하여 제조할 수 있다.

사용될 수 있는 부형제는 예를 들면, 물, 약제학적으로 허용되는 유기 용매, 예를 들면, 파라핀(예를 들면, 석유 분획), 식물성 오일(예를 들면, 땅콩 또는 참깨 오일), 단일기능성 또는 다기능성 알코올(예를 들면, 에탄올 또는 글리세롤), 담체, 예를 들면, 천연 미네랄 분말(예를 들면, 카올린, 점토, 활석, 백악), 합성 미네랄 분말(예를 들면, 고 분산된 실릭산 및 실리케이트), 당(예를 들면, 사탕수수 당, 락토즈 및 글루코즈), 유화제(예를 들면, 리그닌, 소비된 설파이트 액(liquor), 메틸셀룰로즈, 전분 및 폴리비닐피롤리돈) 및 윤활제(예를 들면, 스테아르산마그네슘, 활석, 스테아르산 및 나트륨 라우릴 설페이트)를 포함한다.

경구용을 위해, 정제는 명시된 담체 외에, 시트르산나트륨, 탄산칼슘 및 인산이칼슘과 같은 첨가제를 전분, 바람직하게는 감자 전분, 젤라틴 등과 같은 다양한 첨가 물질과 함께 분명히 함유할 수 있다. 스테아르산마그네슘, 나트륨 라우릴설페이트 및 활석과 같은 윤활제를 또한 사용하여 정제를 생산할 수 있다. 수성 현탁제의 경우 활성 물질은 상술한 부형제 외에 각종 풍미 증진제 또는 착색제와 조합할 수 있다.

화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염을 투여하기 위해, 본 발명에 따라 흡입에 적합한 약제학적 제형 또는 제제를 사용하는 것이 특히 바람직하다. 흡입가능한 제제는 흡입가능한 산제, 추진제를 함유하는 계량된 용량의 에어로졸 또는 추진제를 함유하지 않는 흡입가능한 용액을 포함한다. 본 발명의 영역내에서, 용어 '추진제를 함유하지 않는 흡입가능한 용액'은 또한 즉석 농축제 또는 멸균 흡입가능한 용액을 포함한다. 본 발명의 영역내에서 사용될 수 있는 제형은 본 명세서의 다음 부분에서 보다 상세히 기술된다.

본 발명에 따라 사용될 수 있는 흡입가능한 산제는 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염 자체 또는 적합한 생리학적으로 허용되는 부형제와의 혼합물을 함유할 수 있다.

활성 물질 1이 생리학적으로 허용되는 부형제와의 혼합물로 존재하는 경우, 다음의 생리학적으로 허용되는 부형제를 사용하여 본 발명에 따른 이러한 흡입가능한 산제를 제조할 수 있다: 모노사카라이드(예를 들면, 글루코즈 또는 아라비노즈), 디사카라이드(예를 들면, 락토즈, 사카로즈, 말토즈), 올리고- 및 폴리사카라이드(예를 들면, 덱스트란), 다가알코올(예를 들면, 소르비톨, 만니톨, 크실리톨), 염(예를 들면, 염화나트륨, 탄산칼슘) 또는 이들 부형제의 혼합물. 바람직하게는 모노사카라이드 또는 디사카라이드가 사용되는 반면, 락토즈 또는 글루코즈의 사용이 특히 바람직하나, 전적으로 이의 수화물의 형태는 아니다. 본 발명의 목적을 위해, 락토즈는 특히 바람직한 부형제이지만, 락토즈 일수화물이 가장 특히 바람직하다.

본 발명에 따른 흡입가능한 산제의 영역내에서, 부형제는, 최대 평균 입자 크기가 250㎛ 이하, 바람직하게는 10 내지 150㎛, 가장 바람직하게는 15 내지 80㎛이다. 때때로 위에서 언급한 부형제에 대해 평균 입자 크기가 1 내지 9㎛인 미세한 부형제 분획을 가하는 것이 적절한 것으로 여겨질 수 있다. 이들 미세한 부형제는 또한 본원에서 앞서 나열된 가능한 부형제의 그룹으로부터 선택된다. 최종적으로, 본 발명에 따른 흡입가능한 산제를 제조하기 위하여, 바람직하게는 평균 입자 크기가 0.5 내지 10㎛, 보다 바람직하게는 1 내지 5㎛인, 분쇄된 활성 물질 1을 부형제 혼합물에 가한다. 연마(grinding) 및 분쇄(micronising) 및 최종적으로 성분들을 함께 혼합함으로써 본 발명에 따른 흡입가능한 산제를 생산하는 방법은 선행 기술에 공지되어 있다.

본 발명에 따른 흡입가능한 산제는 선행 기술에 공지된 흡입제를 사용하여 투여할 수 있다.

본 발명에 따른 추진제 가스를 함유하는 흡입 에어로졸은 추진제 가스 속에 용해되거나 분산된 형태의 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염을 함유할 수 있다. 화학식 1의 화합물의 공-결정 및/또는 염은 별도의 제형 속에 또는 일반적인 제형 속에 함유될 수 있으며, 여기서 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염은 둘다 용해되거나, 둘다 분산되거나 각각의 경우 단지 하나의 성분이 용해되고 다른 것은 분산된다. 흡입 에어로졸을 제조하는데 사용될 수 있는 추진제 가스는 선행 기술에 공지되어 있다. 적합한 추진제 가스는 n-프로판, n-부탄 또는 이소부탄과 같은 탄화수소 및 메탄, 에탄, 프로판, 부탄, 사이클로프포란 또는 사이클로부탄의 불소화된 유도체와 같은 할로하이드로카본 중에서 선택된다. 위에서 언급한 추진제 가스는 자체로 사용되거나 함께 혼합될 수 있다. 특히 바람직한 추진제 가스는 TG134a 및 TG227 및 이의 혼합물로부터 선택된 할로겐화된 알칸 유도체이다.

추진제-기원한 흡입 에어로졸은 또한 공-용매, 안정화제, 표면활성제, 항산화제, 윤활제 및 pH 조절제와 같은 다른 성분을 함유할 수 있다. 모든 이들 성분은 당해 분야에 공지되어 있다.

위에서 언급한 본 발명에 따른 추진제-기원한 흡입 에어로졸은 당해 분야에 공지된 흡입제를 사용하여 투여할 수 있다(MDI = 계량된 용량 흡입제).

또한, 본 발명에 따른 활성 물질(1)은 추진제를 함유하지 않는 흡입가능한 액제 및 현탁제의 형태로 투여될 수 있다. 사용된 용매는 수성 또는 알코올성, 바람직하게는 에탄올성 용액일 수 있다. 용매는 물 자체 또는 물과 에탄올의 혼합물일 수 있다. 물과 비교하여 에탄올의 상대적인 비는 제한되지 않으나 최대비는 바람직하게 70 용적퍼센트 이하, 보다 특히 60 용적퍼센트 이하 및 가장 바람직하게는 30 용적퍼센트 이하이다. 용적의 나머지는 물로 구성된다. 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염을 함유하는 액제 또는 현탁제는 적합한 산을 사용하여 pH를 2 내지 7, 바람직하게는 2 내지 5로 조절한다. pH는 무기 또는 유기 산으로부터 선택된 산을 사용하여 조절할 수 있다. 특히 적합한 무기 산의 예는 염산, 브롬화수소산, 질산, 황산 및/또는 인산을 포함한다. 특히 적합한 유기 산의 예는 아스코르브산, 시트르산, 말산, 타르타르산, 말레산, 석신산, 푸마르산, 아세트산, 포름산 및/또는 프로피온산 등을 포함한다. 바람직한 무기산은 염산 및 황산이다. 활성 물질들 중 하나와의 산 부가 염을 이미 형성하고 있는 산을 사용하는 것도 또한 가능하다. 유기 산 중에서, 아스코르브산, 푸마르산 및 시트르산이 바람직하다. 필요한 경우, 상기 산들의 혼합물은 특히, 이들의 산성화 품질 외의 다른 특성, 예를 들면, 풍미제, 항산화제 또는 예를 들면, 시트르산 또는 아스코르브산과 같은 착화제로서의 특성을 갖는 산의 경우, 사용될 수 있다. 본 발명에 따라 염산을 사용하여 pH를 조절하는 것이 특히 바람직하다.

필요한 경우, 에디트산(EDTA) 또는 이의 공지된 염 중 하나인, 나트륨 에데테이트를 안정화제 또는 착화제로서 첨가하는 것을 이들 제형에서 생략할 수 있다. 다른 양태는 이러한 화합물 또는 화합물들을 함유할 수 있다. 바람직한 양태에서, 나트륨 에데테이트를 기초로 하는 함량은 100 mg/100 ml 미만, 바람직하게는 50 mg/100 ml 미만, 보다 바람직하게는 20 mg/100 ml 미만이다. 일반적으로, 나트륨 에데테이트의 함량이 0 내지 10 mg/100 ml인 흡입가능한 용액이 바람직하다. 공-용매 및/또는 다른 부형제를 추진제를 함유하지 않은 흡입가능한 액제에 가할 수 있다. 바람직한 공-용매는 하이드록실 그룹 또는 다른 극성 그룹, 예를 들면, 알코올 - 특히 이소프로필 알코올, 글리콜 - 특히 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 글리콜에테르, 글리세롤, 폴리옥시에틸렌 알코올 및 폴리옥시에틸렌 지방산 에스테르를 함유하는 것들이다. 당해 내용에서 용어 부형제 및 첨가제는 활성 물질이 아니지만 활성 물질 또는 물질들과 생리학적으로 적합한 용매속에서 제형화되어 활성 물질 제형의 정성적 특성을 개선시킬 수 있는 어떠한 약리학적으로 허용되는 물질을 나타낸다. 바람직하게는, 이들 물질은 약리학적 효과를 가지지 않거나, 바람직한 치료요법과 관련하여, 주목할 만하지 않거나 적어도 바람직하지 않은 약리학적 효과를 갖지 않는다. 부형제 및 첨가제는 예를 들면, 표면활성제, 예를 들면, 대두 레시틴, 올레산, 소르비탄 에스테르, 예를 들면, 폴리소르베이트, 폴리비닐피롤리돈, 다른 안정화제, 착화제, 항산화제 및/또는 최종 약제학적 제형의 반감기를 보증하거나 연장시키는 방부제, 풍미제, 비타민 및/또는 당해 분야에 공지된 다른 첨가제를 포함한다. 첨가제는 또한 등장성 제제로서 염화나트륨과 같은 약리학적으로 허용되는 염을 포함한다.

바람직한 부형제는 예를 들면, 이것이 pH를 조절하기 위해 이미 사용되었던 것이 아닌 것으로 제공되는, 아스코르브산, 비타민 A, 비타민 E, 토코페롤 및 유사 비타민 및 사람 체내에서 발생하는 프로비타민과 같은 항산화제를 포함한다.

방부제는 병원체의 오염으로부터 제형을 보호하기 위해 사용될 수 있다. 적합한 방부제는 선행 기술에 공지된 농도의 당해 분야에 공지된 것들, 특히 세틸 피리디늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드 또는 벤조산 또는 나트륨 벤조에이트와 같은 벤조에이트이다. 위에서 언급된 방부제는 50 mg/100 ml 이하, 보다 바람직하게는 5 내지 20 mg/100 ml의 농도로 바람직하게 존재한다.

바람직한 제형은 용매 물 및 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염 외에, 염화벤즈알코늄 및 나트륨 에데테이트만을 함유한다. 다른 바람직한 양태에서, 나트륨 에데테이트는 존재하지 않는다.

본 발명에 따른 화합물의 투여량은 자연스럽게 투여 방법 및 치료중인 호소증상에 매우 의존적이다. 흡입에 의해 투여되는 경우 화학식 1의 화합물은 ㎍ 범위의 용량보다도 높은 효능이 확인된다. 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염은 ㎍ 범위 초과에서 효과적으로 또한 사용될 수 있다. 이후에, 투여량은 예를 들면, 그람 범위로 존재할 수 있다.

다른 국면에서 본 발명은 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 염을 함유하는 것으로 확인되는 위에서 언급한 약제학적 제형 자체, 특히 흡입에 의해 투여될 수 있는 위에서 언급한 약제학적 제형에 관한 것이다.

제형의 다음 실시예는 본 발명의 영역을 제한하지 않고 본 발명을 설명한다:

약제학적 제형의 실시예

A) 정제 정제당

활성 물질 1 100 mg

락토즈 140 mg

옥수수 전분 240 mg

폴리비닐피롤리돈 15 mg

스테아르산마그네슘 5 mg

------------------------------------

500 mg

미분된 활성 물질, 락토즈 및, 옥수수 전분 중 일부를 함께 혼합한다. 혼합물을 스크리닝한 후, 수중 폴리비닐피롤리돈의 용액으로 습윤화하고, 반죽하고, 습윤과립화하고 건조시킨다. 과립, 나머지 옥수수 전분 및 스테아르산마그네슘을 스크리닝하고 함께 혼합한다. 혼합물을 적합한 형태 및 크기의 정제로 압착한다.

B) 정제 정제당

활성 물질 1 80 mg

락토즈 55 mg

옥수수 전분 190 mg

미세결정성 셀룰로즈 35 mg

폴리비닐피롤리돈 15 mg

나트륨 카복시메틸 전분 23 mg

스테아르산마그네슘 2 mg

-----------------------------------

400 mg

미분된 활성 물질, 옥수수 전분 중 일부, 락토즈, 미세결정성 셀룰로즈 및 폴리비닐키롤리돈을 함께 혼합하고, 혼합물을 스크리닝하고 나머지 옥수수 전분과 물을 함께 작업하여 과립을 형성시키고 이를 건조시키고 스크리닝한다. 나트륨 카복시메틸 전분 및 스테아르산마그네슘을 가하고 혼합하여 혼합물을 압착시켜 적합한 크기의 정제를 형성시킨다.

C) 앰플제 용액

활성 물질 1 50 mg

염화나트륨 50 mg

주입용 수 5 ml

활성 물질을 물 속에 이의 자체 pH에서 또는 임의로 pH 5.5 내지 6.5에서 용해하고 염화나트륨을 가하여 등장성 용액을 제조한다. 수득되는 용액을 여과하여 발열물(pyrogen)을 제거하고 여액을 무균 조건하에 앰플내로 이전시킨 후 이를 멸균하고 열-밀봉시킨다. 앰플은 5 mg, 25 mg 및 50 mg의 활성 물질을 함유한다.

D) 계량 에어로졸

활성 물질 1 0.005

소르비탄 트리올레에이트 0.1

모노플루오로트리클로로메탄 및

TG134a : TG227 2:1 100이 되는 양

현탁액을 계량 밸브를 사용하여 통상의 에어로졸 용기로 이전시킨다. 바람직하게는 50μl의 현탁액을 각각의 작동시 방출시킨다. 활성 물질을 또한 필요한 경우 고 용량으로 방출시킬 수 있다(예를 들면, 0.02 중량%).

E) 용액(mg/100 ml)

활성 물질 1 333.3 mg

벤즈알코늄 클로라이드 10.0 mg

EDTA 50.0 mg

HCl (1N) pH 2.4가 되도록 하는 양

당해 용액을 통상의 방법으로 제조할 수 있다.

F) 흡입가능한 산제

활성 물질 1 12㎍

락토즈 일수화물 25 mg이 되도록 하는 양

흡입가능한 산제는 개개 성분을 혼합함으로써 통상의 방법으로 제조한다.

Claims

오로트산, 히푸르산, L-피로글루탐산, D-피로글루탐산, 니코틴산, L-(+)-아스코르브산, 사카린, 피페라진, 3-하이드록시-2-나프토산, 점액산(갈락타르산), 팜산(엠본산), 스테아르산, 콜산, 데옥시콜산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, 석신아미드, 우라실, L-라이신, L-프롤린, D-발린, L-아르기닌, 및 글리신으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 공-결정 형성자(co-crystal former)와의 화학식 1의 화합물의 공-결정.
화학식 1

상기 화학식 1에서,
R¹은 C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, O-C_1-6-할로알킬 또는 할로겐이고;
m은 1, 2 또는 3이며;
R^2a 및 R^2b는 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, COO-C_1-6-알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2b.1R^2b.2 및 할로겐으로부터 각각 독립적으로 선택되고;
R^2b.1은 H, C_1-6-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬 또는 C_1-6-할로알킬이며;
R^2b.2는 H 또는 C_1-6-알킬이거나;
R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 이 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 상기 환의 1개의 탄소 원자가 산소 원자로 대체되며;
R³은 H 또는 C_1-6-알킬이고;
X는 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 포스페이트, 메탄설포네이트, 니트레이트, 말레에이트, 아세테이트, 벤조에이트, 시트레이트, 살리실레이트, 푸마레이트, 타르트레이트, 디벤조일타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 벤조에이트 및 p-톨루엔설포네이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온이며;
j는 0, 0.5, 1, 1.5 또는 2이다.
제1항에 있어서,
R^2a가 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, O-C_1-6-알킬 또는 CONR^2a.1R^2a.2이고;
R^2a.1이 H, C_1-6-알킬 또는 C_1-6-할로알킬이며;
R^2a.2가 H 또는 C_1-6-알킬이고;
R^2b가 H, C_1-6-알킬, C_1-6-알케닐, C_1-6-알키닐, C_3-6-사이클로알킬, COO-C_1-6-알킬, O-C_1-6-알킬, CONR^2b.1R^2b.2 또는 할로겐이며;
R^2b.1이 H, C_1-6-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬 또는 C_1-6-할로알킬이고;
R^2b.2가 H 또는 C_1-6-알킬이거나;
R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 이 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 상기 환의 1개의 탄소 원자가 산소 원자로 대체되는, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서,
R¹이 C_1-6-알킬, C_1-6-할로알킬, O-C_1-6-할로알킬 또는 할로겐이고;
m이 1 또는 2이며;
R^2a가 H 또는 C_1-4-알킬이고;
R^2b가 H 또는 CONR^2b.1R^2b.2이며;
R^2b.1이 C_1-4-알킬, C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬 또는 C_1-4-할로알킬이고;
R^2b.2가 H 또는 C_1-4-알킬이거나;
R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 이 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 상기 환의 1개의 탄소 원자가 산소 원자로 대체되며;
R³이 H 또는 C_1-6-알킬이고;
X가 클로라이드 및 디벤조일타르트레이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 음이온이고;
j가 1 또는 2인, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서,
R^2a가 H 또는 C_1-4-알킬이고;
R^2b가 H 또는 CONR^2b.1R^2b.2이며;
R^2b.1이 C_1-4-알킬이고;
R^2b.2가 C_1-4-알킬인, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서,
R^2a가 H 또는 C_1-4-알킬이고
R^2b가 H 또는 CONR^2b.1R^2b.2이며;
R^2b.1이 C_0-4-알킬-C_3-6-사이클로알킬이고;
R^2b.2가 H 또는 C_1-4-알킬인, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서,
R^2a가 H 또는 C_1-4-알킬이고;
R^2b가 H 또는 CONR^2b.1R^2b.2이며;
R^2b.1이 C_1-4-할로알킬이고;
R^2b.2가 H 또는 C_1-4-알킬인, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서, R^2b.1과 R^2b.2는 함께 C_3-6-알킬렌 그룹이고, 이 그룹은 상기 질소 원자와 함께 헤테로사이클릭 환을 형성하며, 여기서 임의로 상기 환의 1개의 탄소 원자가 산소 원자로 대체되는, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
제1항에 있어서, 상기 공-결정 형성자가 아스코르브산, 점액산, 팜산, 석신아미드, 니코틴산, 니코틴아미드, 이소니코틴아미드, L-라이신 및 L-프롤린으로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 이들의 수화물 또는 하이드로클로라이드인, 화학식 1의 화합물의 공-결정.
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제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 I12의 화합물.
화학식 I12
제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 I13의 화합물.
화학식 I13
제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 I14의 화합물.
화학식 I14
제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 I3'-Me의 화합물.
화학식 I3'-Me
제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 I4'의 화합물.
화학식 I4'
제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 또는 이의 염을 제조하기 위한 화학식 A'의 화합물.
화학식 A'
염증, 감염, 면역조절 장애 및 질환, 천식 및 알레르기 질환, 만성 폐쇄성 폐 질환, 병원성 미생물에 의한 감염, 바이러스에 의한 감염, 자가면역 병리, 류마티스 관절염, 죽상경화증, 노화-관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 망막증 및 당뇨병성 황반 부종으로부터 선택되는 질병 또는 질환을 예방 또는 치료하기 위한, 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
의약으로서의, 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 1의 화합물의 공-결정.
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