KR100845450B1

KR100845450B1 - 약학적 제형물로서의 세로토닌 아고니스트 (5에이치티2)및 안타고니스트 (5에이치티6) 의 새로운 조합

Info

Publication number: KR100845450B1
Application number: KR1020037000321A
Authority: KR
Inventors: 요산수크윈데르; 닐손비에른엠; 사카리아센셸에스; 스바르텡렌얀
Original assignee: 바이오비트럼 에이비(피유비엘)
Priority date: 2000-07-21
Filing date: 2001-07-19
Publication date: 2008-07-10
Anticipated expiration: 2023-01-09
Also published as: KR20030036599A; IL154057A0; EA200300183A1; HK1057536A1; HUP0301346A2; MXPA03000548A; AU8273401A; BR0112661A; JP2004504376A; HUP0301346A3; CN1221254C; CA2411192A1; PL360309A1; ZA200210234B; CN1443162A; AU2001282734B2; EA006604B1; WO2002008178A1; YU2603A; SE0002754D0

Abstract

본 발명은 5-HT_2c수용체 및 5-HT₆수용체 관련 질환의 예방 또는 치료방법으로, 치료효과를 나타내는 충분한 양의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트를 필요로 하는 인간 또는 동물에 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 조합의 유효량, 및 필요에 따라 약학적으로 허용가능한 운반체를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

약학적 제형물로서의 세로토닌 아고니스트 (5에이치티2) 및 안타고니스트 (5에이치티6) 의 새로운 조합 {NEW COMBINATION OF SEROTONIN AGONIST (5HT2) AND ANTAGONIST (5HT6) AS PHARMACEUTICAL FORMULATION}

본 발명은 5-HT_2C 및 5-HT₆수용체 관련 질환의 예방 또는 치료에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 5-HT_2C수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트를 포함하는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

세로토닌 (5-히드록시트립타민 또는 5-HT) 은 말초 및 중추 신경계 (PNS 및 CNS) 의 중요한 신경전달물질이며, 식이, 수면, 체온, 혈압, 감정 및 인지 조절 등의 다양한 감각, 운동 및 행동 기능에 관련되어 있다. 14개 이상의 특이한 세로토닌 수용체 아유형이 포유동물 PNS 및 CNS 에서 발현되며, 형식적으로 분류되어 있다 (Glennon 등, Neurosci. Biobehav. Rev. 1990, 14, 35-37; 및 D. Hoyer 등, Pharmacol. Rev. 1994, 46, 157-203 참조). 세로토닌 아고니스트 및 안타고니스트는 불안증, 우울증, 고혈압, 편두통, 비만, 약물남용 및 중독, 강박장애, 정신분열증, 자폐증, 퇴행성 신경질환 (예를 들면, 알츠하이머질환, 파킨슨병, 및 헌팅톤 무도병), 및 화학요법 유발성 구토증을 포함하는 광범위한 질환의 치료에 제안되어 왔다.

5-HT₂수용체아류는 3개의 아유형, 즉, 5-HT_2A, 5-HT_2B및 5-HT_2C 수용체로 이루어져 있다. 세로토닌 5-HT_2C수용체는 많은 뇌 부위에서 발현되며 식이 섭취의 조절에 관련되어 있다 (Dourish, C.T. Obes. Res, 1995, 3, Suppl. 4, 449S-462S; Bickerdike, M.J. 등, Diabetes, Obes. Metab. 1999, 1, 207-214). 5-HT_2C수용체를 선호하는 비특이적 5-HT_2C수용체 아고니스트 m-클로로페닐피페라진 (m-CPP) 이 정상적인 5-HT_2C수용체를 발현하는 마우스에서 식이 섭취를 감소시키는 반면, 5-HT_2C수용체의 돌연변이 불활성 형태를 발현하는 마우스에서 활성이 결여됨이 밝혀졌다 (Tecott, L.H 등, Nature 1995, 374, 542-546).

게다가, m-CPP 및 최근 5-HT_2C수용체 아고니스트로 확인 (미공개 자료) 된 아제피노인돌 U-22394A 가 인간에서 각각 2주 및 9주 치료 후 체중을 감소시키는 것이 보고되었다 (Walsh, A.E.S., Psychopharmacology 1994, 116, 120-122; Sargent, P.A. 등, Psychopharmacology 1997, 133, 309-312 및 Gallant, D.M. 등, Curr. Ther. Res. 1967, 9, 579-581).

최근, 일련의 피롤로 [3,2,1-ij]퀴놀린 유도체가 5-HT_2A수용체에 비하여 선택성을 가지는 5-HT_2C수용체 아고니스트로 확인되었다 (Isaac M. 등, Bioorg, Med. Chem. Lett. 2000, 10, 919-921). 상기 화합물은 비만 및 간질 치료에 새로운 시도로 제안되었다.

또한, 5-HT_2C수용체 아유형은 우울증 및 불안증과 같은 CNS 질환에 관련되는 것으로 제안되어 왔다 (Jenck, F. 등, Expert Opin. Invest. Drugs 1998, 7, 1587-1599; Leysen, D.C.M. IDrugs 1999, 2, 109-120). 나아가, 5-HT_2C수용체 아유형은 요실금과 같은 비뇨기계 질환에 관련되는 것으로 제안되어 왔다 (Leysen, D.C.M. IDrugs 1999, 2, 109-120).

5-HT₆수용체 (1993년에 확인됨 - Monsma 등, Mol. Pharmacol. 1993, 43, 320-327 및 Ruat, M. 등, Biochem, Biophys. Res. Commun. 1993, 193, 269-276) 또한 식이 섭취 및 CNS 질환에 관련되어 있다.

따라서, 예를 들면, [Bentley J.C. 등, Br. J. Pharmacol. 1999, 126, 66P] 에 5-HT₆안타고니스트의 투여에 의해 래트에서 식이 섭취 감소가 나타남이 기재되어 있다. 또한, 수개의 항우울제 및 비전형적인 항정신병약은 5-HT₆수용체에 대한 높은 친화력을 나타내며, 이는 정신분열증에서 5-HT₆수용체의 관련을 제안한다 (Roth 등, J. Pharmacol. Exp. Ther, 1994, 268, 1403-1410; Sleight 등, Expert Opin. Ther. Patents 1998, 8, 1217-1224; Bourson 등, Br. J. Pharm. 1998, 125, 1562-1566; Boess 등, Mol. Pharmacol. 1998, 54, 577-583; Sleight 등. Br.J. Pharmacol. 1998, 124, 556-562). 또한, 5-HT₆수용체는 일반적인 스트레스 및 불안상태와 관련되어 있다 (Yoshioka 등, Life Sci. 1998, 17/18, 1473-1477).

발명의 요약

본 발명에 따라, 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 조합 투여가 아고니스트 또는 안타고니스트의 단독 투여에 비하여 식이 섭취를 더욱 감소시킨다는 예기치 않은 사실을 발견하였다. 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 이러한 조합 투여는 아고니스트 또는 안타고니스트의 단독 처치에 비하여 치료적 이점을 제공할 수 있다.

따라서, 본 발명의 한 측면은 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 조합의 유효량, 및 필요에 따라 약학적으로 허용가능한 운반체를 함유하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 5-HT_2c수용체 및 5-HT₆수용체 관련 질병, 특히 비만의 예방 또는 치료 방법으로, 치료 효과를 나타내는 충분한 양의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 (동시에 또는 순차적으로) 를 필요로 하는 동물 또는 사람에게 투여하는 것을 포함하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 측면은 5-HT_2c수용체 및 5-HT₆수용체 관련 질병의 치료용 약물 제조를 위한 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 약학적 조성물의 제조방법으로, 조합된 치료양의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트가 약학적으로 허용가능한 운반체와 직접 혼합되는 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 측면은 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트를 포함하는 제품을 5-HT_2c수용체 및 5-HT₆수용체 관련 질병, 특히 비만 치료에 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 사용하기 위한 조합된 제제로서 제공한다.

도 1 은 5-HT_2c수용체 아고니스트 (PNU-183933F; 50 mg/kg 경구) 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 (PNU-186053A; 50 mg/kg 피하) 의 조합 투여 후 ob/ob 마우스에서의 식이 섭취 효과 및 각각의 아고니스트 및 안타고니스트의 단독 효과를 나타낸다.

도 2 는 5-HT_2c수용체 아고니스트 (BVT.2938F; 5 mg/kg 피하) 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 (BVT.5182C; 3 mg/kg 피하) 의 조합 투여 후 ob/ob 마우스에서의 식이 섭취 효과 및 각각의 아고니스트 및 안타고니스트의 단독 효과를 나타낸다.

상술한 바와 같이, 본 발명은 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 조합 투여가 아고니스트 또는 안타고니스트의 단독 투여에 비하여 식이 섭취를 더욱 감소시킨다는 예기치 않은 발견에 기인한다. 또한 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 이러한 조합 투여는 아고니스트 또는 안타 고니스트의 단독 치료에 비하여 여러 가지 이점, 예를 들면 비만 치료에 있어서의 이점을 제공할 수 있다.

첫째, 조합 투여는 단독 투여보다 식이 섭취의 유사한 또는 진보된 감소를 나타내기 위해 각각의 화합물의 더욱 적은 복용량을 요구한다.

둘째, 조합 투여에 요구되는 더욱 적은 복용량은 부작용의 위험을 감소시킬 수 있다.

셋째, 조합 투여에 요구되는 더욱 적은 복용량은 내성 진전 및 남용 경향의 위험성을 감소시킬 수 있다.

넷째, 두개의 목표에 기재된 치료는 하나의 목표에 기재된 것에 비하여 개인적인 치료 효능을 증대시킬 수 있다. 또한, 비반응성 효능 (비반응자) 의 위험이 감소될 수 있다.

본 발명의 조합 투여의 이점은 식이 행동의 조정, 과체중 및 비만치료에 유용할 뿐만 아니라 우울증, 조병 (mania), 정신분열증, 불안증, 기억장애 (알츠하이머 질환 등), 편두통, 약물중독, 강박장애, 성격장애, 외상 후 스트레스장애, 수면장애 등의 중추신경계 질환은 물론 요실금 (또는 보다 일반적인 과활성 방광), 성적 기능장애, 위장관 질환 및 녹내장의 치료에 유용할 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 "5-HT_2c수용체 아고니스트" 라는 용어는 세로토닌 5-HT_2c수용체를 활성화시키는 화합물을 칭한다. 바람직하게는, 5-HT_2c수용체 아고니스트는 50 nM 미만, 바람직하게는 20 nM 미만의 친화력 상수(K_i) 를 가지며, 세포 내 Ca²⁺수준으로 측정되는 시험관내 고유 활성은 5-HT (1 μM) 에 비하여 20% 초과, 바람직하게는 50 % 초과이다.

본 명세서에서 사용되는 "5-HT₆수용체 안타고니스트" 라는 용어는 세로토닌 5-HT₆수용체 매개 반응을 방해하는 화합물을 칭한다. 바람직하게는, 5-HT₆수용체 안타고니스트는 50 nM 미만, 바람직하게는 20 nM 미만의 친화력 상수(K_i) 를 가지며, 세포내 cAMP 수준으로 측정되는 시험관내 고유 활성이 5-HT (1 μM) 에 비하여 50% 미만, 바람직하게는 20% 미만이다.

5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 각각의 친화력 및 고유 활성을 결정하기 위해 사용될 수 있는 시험관내 분석법은 공지되어 있으며, 또한 하기 실시예 부분에 주어져 있고, 5-HT_2A및 5-HT_2B수용체에 대한 친화력을 결정하는 분석법도 마찬가지이다.

일반적으로, 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트는 어떠한 실질적인 부작용도 일으키지 않도록 충분히 선택적이어야 한다. 그러나, 본 명세서의 "선택적" 및 "실질적인" 이란 용어는 광범위하게 반복되며, 따라서 그 의미는 당업자에게 명백하다.

바람직하게는, 5-HT_2c수용체 아고니스트는 5-HT_{2A ,} 5-HT_2B및5-HT₆수용체 각각에 비하여 5 이상, 바람직하게는 10 이상, 보다 바람직하게는 20 이상의 5-HT_2c 수용체에 대한 선택성을 가진다 (5-HT_2A/5-HT_2c, 5-HT_2B/5-HT_2c및 5-HT₆/5-HT_2c의 친화력 비로 측정됨).

5-HT₆수용체 안타고니스트는 5-HT_{2A ,} 5-HT_2B및5-HT_2c수용체 각각에 비하여 5 이상, 바람직하게는 10 이상, 보다 바람직하게는 20 이상의 5-HT₆수용체에 대한 선택성을 가진다 (5-HT_2A/5-HT₆, 5-HT_2B/5-HT₆및 5-HT_2c/5-HT₆의 친화력 비로 측정됨).

화합물이 선택적인 5-HT_2c수용체 아고니스트인지 선택적인 5-HT₆수용체 안타고니스트인지를 결정하는 상대적인 시험은 공지되어 있으며, 상술한 바와 같이, 하기 실시예 부분에 나타나 있다.

5-HT_2c수용체 아고니스트로 알려진 화합물은, 예를 들면 EP-A-0863136 에 기재된 유형의 아제티딘 및 피롤리딘 유도체; EP-A-0657426 에 기재된 유형의 삼환 피롤 유도체; EP-A-0655440 에 기재된 유형의 1-아미노에틸인돌; EP-A-0572863 에 기재된 유형의 피라지노인돌; US 4,081,542 에 기재된 유형의 피페라지닐피라진; WO 00/12475 에 기재된 유형의 인돌린 유도체; WO 00/12510 에 기재된 유형의 피롤로인돌, 피리도인돌 및 아제피노인돌; WO 00/12482 에 기재된 유형의 인다졸 유도체; WO 00/12502 에 기재된 유형의 피롤로퀴놀린; WO 00/35922 에 기재된 유형의 2,3,4,4a-테트라히드로-1H-피라지노[1,2-a]퀴녹살린-5(6H)온; WO 00/12481 에 기재된 유형의 인다졸릴프로필아민; WO 00/17170에 기재된 유형의 인다졸; WO 00/76984 및 2000년 11월 20일에 출원된 스웨덴 특허 출원 제0004244-0호 및 제0004245-7호에 기재된 유형의 피페라지닐피라진; WO 00/77001, WO 00/77002 및 WO 00/77010 에 기재된 유형의 헤테로환 융합 γ-카르볼린; WO 01/09111 및 WO 01/09123 에 기재된 유형의 벤조푸릴피페라진; WO 01/09122 에 기재된 유형의 벤조푸란; WO 01/09126 에 기재된 유형의 벤조티오펜; EP 370560 에 기재된 유형의 피리디닐피페라진; [Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 919-921] 에 기재된 유형의 피롤로퀴놀린; WO 98/30548 에 기재된 유형의 아미노알킬인다졸; WO 01/12603 에 기재된 유형의 인돌; WO 01/12602 에 기재된 유형의 인돌린; WO 00/44753 에 기재된 유형의 피라지노(아자)인돌; WO 98/56768 에 기재된 유형의 삼환 피롤 또는 피라졸이다.

현재 바람직한 5-HT_2c수용체 아고니스트는 아릴피페라진 및 피페라지닐피라진 화합물류, 특히 WO 00/76984 및 2000년 11월 20일에 출원된 스웨덴 특허 출원 제0004244-0호 및 제0004245-7호에 개시된 화합물이다.

5-HT₆수용체 안타고니스트로 알려진 화합물은 예를 들면, WO 99/37623 에 기재된 유형의 피페라지닐벤젠술폰아미드; EP-A-0930302 에 기재된 유형의 술포닐벤젠 유도체; WO 99/02502 에 기재된 유형의 술폰아미드 유도체; WO 99/42465 에 기재된 유형의 술폰아미드 유도체; WO 98/27081 에 기재된 유형의 술폰아미드 유도체; WO 98/27058 에 기재된 유형의 카르복사미드 유도체; EP-A-0815861 에 기재된 유형의 술폰아미드 유도체; WO 99/47516 에 기재된 유형의 피롤리도노메틸인돌 유도체; WO 99/65906 에 기재된 유형의 이환 피페리딘 및 피레라진 유도체; EP-A- 0941994 에 기재된 유형의 피라졸로피리미딘 및 피라졸로트리아진 유도체; WO 01/05793 에 기재된 유형의 아릴술폰 치환 헥사히드로아제피노인돌; WO 01/09142 에 기재된 유형의 옥사지노카르바졸; WO 01/17963 에 기재된 유형의 아미노알콕시카르바졸; 국제특허출원 PCT/US00/30177 (2000년 6월 20일 출원) 에 기재된 유형의 디페닐술폰; 및 스웨덴 특허출원 (2000년 10월 20일 출원) 제0003810-9호에 기재된 아릴술포닐인돌이다.

현재 바람직한 5-HT₆수용체 안타고니스트는 아제피노인돌 화합물류, 예를 들면 WO 01/05793 에 개시된 아릴술폰치환 헥사히드로아제피노인돌화합물류를 포함한다. 다른 바람직한 5-HT₆수용체 안타고니스트는 아릴술포닐인돌화합물류, 예를 들면 스웨덴 특허출원 제0003810-9호에 기재된 화합물을 포함한다.

5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트는 그 화합물 또는 그 화합물의 약학적으로 허용가능한 염 (산 또는 염기 첨가염) 또는 그 입체이성질체 (거울상이성질체 및 라세미체와 같은 광학 이성질체 포함) 일 수 있다.

상기 약학적으로 허용가능한 첨가염은 화합물이 형성할 수 있는 치료학적으로 활성인 비독성 산 및 염기 첨가염의 형태을 포함한다. 염기성을 가지는 화합물은 염기형태를 적당한 산으로 처리함으로써 약학적으로 허용가능한 산첨가염으로 변환될 수 있다. 예시되는 산은 염화수소, 브롬화수소, 요오드화수소, 황산, 인산과 같은 무기산; 및 아세트산, 프로파노산, 히드록시아세트산, 락트산, 피루브산, 글리콜산, 말레산, 말론산, 옥살산, 벤젠술폰산, 톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 트리플루오로아세트산, 푸마르산, 숙신산, 말산,타르타르산, 시트르산, 살리실산, p-아미노살리실산, 파모산, 벤조산, 아스코르브산 등과 같은 유기산을 포함한다. 예시되는 염기 첨가염 형태로는 나트륨, 칼륨, 칼슘염, 및 약학적으로 허용가능한 아민을 가지는 염, 예를 들면 암모니아, 알킬아민, 벤자틴, 및 아르기닌 및 라이신과 같은 아미노산이 있다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "첨가염" 은 또한 화합물 및 그 염이 형성할 수 있는 솔베이트, 예를 들면, 하이드레이트, 알코올레이트 등을 포함한다.

5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트는 또한 생체내에서 대사적 전환 후 활성 성분을 방출시킬 수 있는 형태 또는 프로드럭일 수 있다. 적합한 프로드럭 유도체의 제조 및 선택에 대한 통상적인 과정은 예를 들면, "Design of Prodrugs" [H. Bundgaard, Elsevier 편저, 1985] 에 기재되어 있다.

5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트는 투여 목적의 다양한 약학적 형태, 동일한 정제와 같은 동일한 약학적 투약 형태 또는 별개의 약학적 투약 형태로 제형화될 수 있다. 그러나, 후자의 경우, 5-HT_2c수용체 아고니스트 유니트 투약 형태 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 유니트 투약 형태를 동일한 포장, 예를 들면, 동일한 블리스터 내에 두는 것이 유리할 수 있다.

유리 염기 또는 염 형태의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트는 허용되는 약제학적 과정에 따라, 예를 들면 경구용, 주사용, 비강 스프레이 투여용 등의 조성물과 같은 적합한 갈렌 형태로 할 수 있다. 본 발명에 따른 이러한 약학적 조성물은 공지된 배합가능한 약학적으로 허용가능한 운반체 물질, 또는 희석제와 함께 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트를 유효량 함유할 수 있다. 운반체는 경구, 장, 직장, 경피, 피하 또는 주사 투여에 적합한 임의의 불활성, 유기 또는 무기 물질일 수 있으며, 예를 들면 물, 젤라틴, 검 아라비쿰, 락토스, 미세결정 셀룰로스, 전분, 소듐 스타치 글리콜레이트, 칼슘 히드로겐 포스페이트, 마그네슘 스테아레이트, 탈쿰, 콜로이달 실리콘 디옥시드 등일 수 있다. 이러한 조성물은 또한 약리학적으로 활성인 물질, 및 통상적인 첨가제, 예를 들면 안정화제, 습윤제, 유화제, 착향제, 버퍼 등을 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 정제, 알약, 캡슐제, 산제, 시럽제, 엘릭실제, 분산형 과립제, 카세제, 좌제 등과 같은 경구 투여용 고체 또는 액체 형태, 그리고, 비경구 투여용 에멀션, 현탁액, 멸균 용액의 형태, 비강 스프레이와 같은 스프레이, 패치제와 같은 경피제제 등으로 제조될 수 있다.

5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 각각의 구체적인 복용량 수준, 및 특이적인 조합의 투여 빈도는 각각의 구체적인 사용 화합물의 효능, 그 화합물의 대사 안정성 및 작용 기간, 환자의 나이, 체중, 일반적인 건강상태, 성, 식이, 투여 방법 및 시간, 배설율, 약물 조합, 치료 상태의 심각성을 포함하는 다양한 요인에 따라 변화할 것이다. 1일 투여량은 예를 들면 단독으로, 또는 함께 투여되는 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 각각에 대하여 체중 1 킬로당 약 0.001 mg 내지 약 150 mg, 바람직하게는 체중 1 킬로당 약 0.01 mg 내지 약 100 mg, 특히 체중 1 킬로당 약 0.1 내지 약 50 mg, 예를 들면, 각각 0.01 mg 내지 1 g 의 양일 수 있다. 일반적으로, 이러한 조합된 투여량은 경구적으로 주어지지만, 예를 들면 비경구 또는 직장 투여도 선택될 수 있다. 예시되는 정제 조합 제형물은 (A) 두 개의 별개의 정제, 즉 5-HT_2c수용체 아고니스트를 10 mg, 20 mg 또는 50 mg 포함하는 하나의 정제, 및 5-HT₆수용체 안타고니스트를 10 mg, 20 mg 또는 50 mg 포함하는 다른 하나의 정제; 또는 (B) 10 mg, 20 mg 또는 50 mg 의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 10 mg, 20 mg 또는 50 mg 의 5-HT₆수용체 안타고니스트를 포함하는 조합 정제일 수 있다,

본 발명은 하기의 비제한 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명될 것이다.

A. 시험 화합물의 제조

WO 00/76984 에 기재된 바와 같이 5-HT_2c수용체 아고니스트 (2R)-메틸-1-{3-[2-3-피리디닐옥시에톡시]-2-피라지닐}피페라진, 푸마레이트 ("PNU-183933F") 의 유리 염기를 제조하였다. 상기 유리 염기를 그 푸마레이트염으로 변환시켰다.

m.p. 126-129℃, MS m/z 315 (M)⁺. Anal. (C₁₆H₂₁N₅O ₂·C₄H₄O₄) C,H,N.

WO 01/05793 에 기재된 바와 같이 5-HT₆수용체 안타고니스트 6-메틸-9-(페닐술포닐)-1,2,3,4,5,6-헥사히드로아제피노[4,5-b]인돌, 히드로클로라이드 ("PNU-186053A") 를 제조하였다.

WO 00/76984 에 기재된 바와 같이 5-HT_2c수용체 아고니스트 (2R)-1-(3-{2-[2-에톡시-3-피리디닐)옥시]에톡시}-2-피라지닐)-2-메틸피페라진,푸마레이트 ("BVT,2938F) 를 제조하였다.

스웨덴 특허출원 제0003810-9호 (2000년 10월 20일 출원) 에 기재된 바와 같이 5-HT₆수용체 안타고니스트 1-(페닐술포닐)-4-(1-피페라지닐)-1H-인돌, 히드로클로라이드 ("BVT.5182C") 를 제조하였다. 간단히 말하면, BVT.5182C 는 하기 도식 1 에 묘사된 일반적 과정에 따라 제조되며, 시판되는 4-피페라지노인돌 (화합물 1) 을 출발물질로 하여 단계 (a) 내지 (c) 를 거쳐 1-(페닐술포닐)-4-(1-피페라지닐)-1H-인돌, 히드로클로라이드를 수득하였다 (수득율 80%). HPLC 순도> 95%; ¹H NMR (DMSO-d6)δ9.64 (br s, 2H), 8.00-7.85 (m, 3H), 7.79 (d, J=3.77 Hz, 1H), 7.70-7.65 (m, 1H), 7.63-7.60 (m, 3H), 7.27-7.22 (m, 1H), 6.95 (d, J=3.76 Hz, 1H), 6.81-6.77 (m, 1H), 3.30-3.20 (m, 4H); ¹³C NMR (DMSO-d6)δ144.79, 137.02, 135.22, 134.62, 129.82, 126.85, 125.63, 125.54, 123.49, 111.15, 107.87, 107.76, 47.81, 42.86; MS (posES-FIA) m/z 342 (M+H).

도식 1

단계 (a) : 피페라진 N4 질소의 BOC 보호

4-피페라지노인돌 (1당량), DMAP (0.1 당량) 및 Et₃N (4당량) 을 DMF 에 용해시켰다. (BOC)₂O (1.1 당량) 을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다 (12 시간). DMF 를 증발시키고 잔사를 용출액으로 클로로포름, 메탄올 및 암모니아 혼합물을 사용하여 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. HPLC: 100 % 순도. MS m/z 302.2 (M+H).

단계 (b) : 중간체 3 의 제조

중간체 2 (1 당량) 를 DMF 에 용해시키고 NaH (1.3 당량) 를 첨가한 후, 현탁액을 질소대기하에서 0.5 시간 교반하였다. 벤젠술포닐 클로라이드 (1.2 당량) 를 첨가하고 실온에서 반응물을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 증발시켰다. 잔사를 DCM 에 용해시키고, NaHCO₃ 포화용액으로 세척하고 건조 (MgSO₄) 후, 여과하고 농축하여 유성 잔사를 얻은 후, 용출액으로 헥산 및 에틸아세테이트 혼합물 (7:3) 을 사용하여 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-[1-(벤젠술포닐)-1H-인돌-4-일)]-1-피페라진카르복실레이트 (3) 를 수득하였다. HPLC 100%. NMR (¹H 및 ¹³C) 및 MS 분석으로 상기 구조를 확인하였다.

단계 (c) : BOC 보호기의 제거

중간체 3 을 메탄올 중에 용해시키고 HCl 가스로 포화된 에테르를 첨가하여 중간체 3 의 BOC 기를 제거하였다. HCl 염 (4) 을 여과하고 건조시켰다.

B. 약학적 조성물의 제조

정제

성분 mg/정제

1. 5-HT_2c수용체 아고니스트 10.0

2. 5-HT₆수용체 안타고니스트 10.0

3. 셀룰로스, 미세결정 57.0

4. 칼슘 히드로겐 포스페이트 15.0

5. 소듐 스타치 글리콜레이트 5.0

6. 실리콘 디옥시드, 콜로이드성 0.25

7. 마그네슘 스테아레이트 0.75

활성 성분 1 및 2 를 성분 3,4,5 및 6 과 10 분간 혼합하였다. 그 후, 마그네슘 스테아레이트 (7) 를 첨가하고, 생성되는 혼합물을 5분간 혼합한 후, 필름-코팅을 하거나 하지 않고 정제 형태로 압축하였다.

C. 수용체 친화력 및 효능 분석

5-HT _2c 수용체 친화력 분석

5-HT_2c수용체 친화력을 경쟁 실험에서 측정하였는 바, 단계적으로 희석된 화합물이 인간 5-HT_2c수용체 단백질을 안정하게 발현시키는 형질전환된 HEK293 세포주로부터 제조된 막에 결합된 ³H-표지 5-HT 를 대체하는 능력을 섬광근접검색법 (SPA: Scintillation Proximity Assay) 기술에 의해 모니터하였다. 5 μM 미안세린 (mianserin) 을 사용하여 비특이적 결합을 정의하였다.

5-HT _2A 수용체 친화력 분석

5-HT_2A수용체 친화력을 경쟁 실험에서 측정하였는 바, 단계적으로 희석된 화합물이 인간 5-HT_2A수용체 단백질을 안정하게 발현시키는 형질전환된 CHO 세포주로부터 제조된 막에 결합된, ³H-표지 케탄세린 또는 리세르그산 디에틸아미드 (LSD) 를 대체하는 능력을 섬광계수기 (Scintillation Counter) 내의 유리 섬유 여과기 상의 여과된 막 균질화액의 방사능을 측정함으로써 모니터하였다. 5 μM 미안세린을 사용하여 비특이적 결합을 정의하였다.

5-HT _2B 수용체 친화력 분석

5-HT_2B수용체 친화력을 경쟁 실험에서 측정하였는 바, 단계적으로 희석된 화합물이 인간 5-HT_2B수용체 단백질을 안정하게 발현시키는 형질전환된 CHO 세포주로부터 제조된 막에 결합된 ³H-표지 5-HT 를 대체하는 능력을 섬광근접검색법 기술에 의해 모니터하였다. 5 μM 미안세린을 사용하여 비특이적 결합을 정의하였다.

5-HT _2C 수용체 효능 분석

칼슘-킬레이팅 형광 염료 FLUO-3 (Sigma, St. Louis, MO, U.S.A.) 을 사용하여, 5-HT_2c수용체에 대한 아고니스트 효능을 인간 5-HT_2c수용체 단백질을 안정하게 발현시키는 형질전환된 HEK293 세포 중 세포내 칼슘을 이동시키는 화합물의 능력에 의해 측정하였다. 세로토닌 1 μM 의 효능에 대한 상대적 효능 (%) 을 측정하였다.

5-HT ₆ 수용체 친화력 분석

[³H]-리세르그산 디에틸아미드 (LSD) 를 사용하여 방사성리간드 결합 분석을 실시하였다. 96웰 시료 플레이트에 적당히 희석된 시험 화합물 (상기 분석에서는 11 단계 농도의 시료를 이중으로 사용하였음) 11㎕, 방사성리간드 11㎕, 및 복제된 인간 5-HT₆수용체를 포함하는 HEK293 세포로부터 제조된 결합 버퍼 중의 막 및 WGA-피막 SPA 비드의 세척 혼합물 178 ㎕ 를 첨가하여 분석을 수행하였다. 플레이트를 5분간 진탕한 다음, 실온에서 1시간 배양하였다. 그 후, 플레이트를 카운팅 카세트에 넣고 섬광계수기로 카운트하였다. 수득된 특이 결합 cpm 은 GraphPad Prism ver.2.0 을 사용하는 단일-부위 결합 모델에 적용하였다.

Cheng-Prusoff 식 (Cheng, Y.C. 등, Biochem. Pharmacol. 1973, 22, 3099-3108) 을 사용하여 추정 IC₅₀ 값을 K_i (친화력 상수) 값으로 전환시켰다.

5-HT ₆ 수용체 효능 분석

cAMP SPA 직접 검색 분석 시스템 (RPA559, Amersham Pharmacia Biotech, Uppsala, Sweden) 을 사용하여, 5-HT₆수용체에 대한 안타고니스트 효능을 인간 5-HT₆수용체 단백질을 안정하게 발현시키는 HEK293 세포 중 5-HT 에 의해 유도되는 cAMP 증가를 상쇄시키는 화합물의 능력에 의해 측정하였다.

D. 식이 섭취 시험

시험 화합물

5-HT_2c수용체 아고니스트 (2R)-메틸-1-{3-[2-(3-피리디닐옥시)에톡시]-2-피라지닐}피레라진, 푸마레이트 ("PNU-183933F") 및 (2R)-1-(3-{2-[2-에톡시-3-피리디닐)옥시]에톡시}-2-피라지닐)-2-메틸피페라진, 푸마레이트 ("BVT,2938F) 를 식염수 (0.9% NaCl) 에 용해시키고 동일한 매체에서 적당한 농도로 희석시켰다.

5-HT₆수용체 안타고니스트 6-메틸-9-(페닐술포닐) -1,2,3,4,5,6-헥사히드로아제피노[4,5-b]인돌, 히드로클로라이드 ("PNU-186053A") 및 1-(페닐술포닐)-4-(1-피페라지닐)-1H-인돌, 히드로클로라이드 ("BVT.5182C") 를 25% 시클로덱스트린에 용해 및 희석시켰다.

처리 당일에 프레쉬 용액을 제조하였다.

동물

평균 체중 45g 의 8-9 주령 수컷 마우스 (C57BL/6JBom-Lep^ob (ob/ob), Bomholtsgaard, Denmark) 를 사용하였다. 동물들은 케이지당 1 마리씩 수용하여, 23 ±1℃, 40-60 % 습도에서 사육하였으며, 물 및 표준 실험실 음식을 자유롭게 공급하였다. 12/12 시간 명/암 주기는 오후 5시에 어두워지게 설정하였다. 동물들은 연구 시작 전 1 주일 이상 컨디션을 조정하였다. 실험 기간동안, 특이 음식을 동물들에게 공급하였다 (BioServ, Frenchtown, NJ, USA 각각 20 mg 의 더스트 프리 정밀 펠렛).

실험 부분

먼저, 동물을 특이 케이지 "작동 시험 케이지" (Habitest Modular Animal Behavior Test System; Colbourn Instr, Allentown, PA, USA) 로 옮겼다. 상기 케이지는 식이 섭취의 측정을 위해 센서가 부착된 사료통, 수분 섭취를 표시하기 위한 광학 릭코미터 (lickometer) 및 전체적인 일반 운동 활성을 기록하기 위한 적외선 기재 모니터로 구성되어 있다. 모니터가 컴퓨터에 연결되어 있으며, 계속적으로 결과를 제어 및 모니터하였다. 식이 펠렛은 1회의 전체 연구에 필요한 양만큼 무게를 재고 물병을 신선한 수도물로 채우고 무게를 재었다. 동물들은 새로운 환경에 대해 3일간 컨디션을 조정하여 기본값을 확보할 수 있도록 하였다. 동물들은 연구 시작 및 마지막 오후 3시에 무게를 재었다. 어두워지기 전인 오후 4시 20분 내지 5시에 화합물을 투여하였다. 3군의 동물들에게 각각 (ⅰ) 25% 시클로덱스트린 중 5-HT₆안타고니스트; (ⅱ) 식염수 중 5-HT_2C아고니스트; 및 (ⅲ) 5-HT_2C아고니스트/5-HT₆안타고니스트 조합을 투여하였다. 조합시, 5-HT₆안타고니스트 또는 식염수를 5-HT_2C아고니스트 또는 25% 시클로덱스트린 투여 30 분전에 투여하였다. 사용된 매체를 동일한 방법으로 제4군에 각각 투여하였다. 제5일에 연구를 마쳤다. 컴퓨터가 보조 장치된 Mettler-Toledo PR5002/PR802 저울을 사용하여 무게를 재었다.

결과의 평가

각각의 투여군을 12-16 마리의 동물로 구성하였다. 22시간 동안 칭량 손실 에 기재한 식이 손실에 대해 데이타를 보정하였으며, 시간에 대해 비례하는 것으로 가정하였다. 처리 전 및 처리 후 데이타에 대해 계산을 수행하였다. 처리 전 과 3 시간 (오후 5시 - 오후 8시), 6 시간 (오후 5시 - 오후 11시), 12 시간 (오후 5시 - 오전 5시), 21 시간 (오후 5시 - 오후 2시) 의 식이 섭취의 차이에 대한 기본 식이 섭취의 % (평균 ±SEM) 로 값을 나타내었다.

도 1 에서 보여주는 결과는 5-HT₆수용체 안타고니스트 "PNU-186053A" (50 mg/kg 피하) 및 5-HT_2c수용체 아고니스트 "PNU-183933F" (50 mg/kg 경구) 의 조합 처리가 화합물을 단독으로 투여한 것에 비하여 식이 소비를 현저히 감소시키는 것을 나타낸다. 이와 상응하게, 도 2 에서 보여주는 결과는 5-HT_2c수용체 아고니스트 "BVT.2938F" (5 mg/kg 피하) 및 5-HT₆수용체 안타고니스트 "BVT.5182C" (3 mg/kg 피하) 의 조합 처리가 화합물을 단독으로 투여한 것보다 투여 후 12 및 21 시간에서 식이 소비를 현저히 감소시키는 것을 나타낸다. 따라서, 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트의 조합 치료는 아고니스트 또는 안타고니스트의 단독 처리에 비하여 식이 섭취를 더욱 효율적으로 감소시키는 것이 명백하다.

Claims

(2R)-메틸-1-{3-[2-(3-피리디닐옥시)에톡시]-2-피라지닐}피페라진 푸마레이트 및 (2R)-1-(3-{2-[(2-에톡시-3-피리디닐)옥시]에톡시}-2-피라지닐)-2-메틸피페라진 푸마레이트로부터 선택되는 5-HT_2c수용체 아고니스트와 6-메틸-9-(페닐술포닐)-1,2,3,4,5,6-헥사히드로아제피노[4,5-b]인돌 히드로클로라이드 및 1-(페닐술포닐)-4-(1-피페라지닐)-1H-인돌 히드로클로라이드로부터 선택되는 5-HT₆수용체 안타고니스트의 조합의 유효량, 및 필요에 따라 약학적으로 허용가능한 운반체를 함유하는, 과체중, 비만, 우울증, 불안증, 기억장애, 수면장애, 위장관 장애, 요실금 또는 녹내장의 치료를 위한 약학적 조성물.
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제 1 항에 따른 약학적 조성물의 제조방법으로, 조합된 치료양의 5-HT_2c수용체 아고니스트 및 5-HT₆수용체 안타고니스트가 약학적으로 허용가능한 운반체와 직접 혼합되는 방법.
과체중, 비만, 우울증, 불안증, 기억장애, 수면장애, 위장관 장애, 요실금 및 녹내장으로부터 선택되는 질환의 치료에 있어서 동시, 개별적 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서, (2R)-메틸-1-{3-[2-(3-피리디닐옥시)에톡시]-2-피라지닐}피페라진 푸마레이트 및 (2R)-1-(3-{2-[(2-에톡시-3-피리디닐)옥시]에톡시}-2-피라지닐)-2-메틸피페라진 푸마레이트로부터 선택되는 5-HT_2c수용체 아고니스트, 및 6-메틸-9-(페닐술포닐)-1,2,3,4,5,6-헥사히드로아제피노[4,5-b]인돌 히드로클로라이드 및 1-(페닐술포닐)-4-(1-피페라지닐)-1H-인돌 히드로클로라이드로부터 선택되는 5-HT₆수용체 안타고니스트를 포함하는 제품.
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