KR100303634B1

KR100303634B1 - 자기면역질환치료약

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Publication number: KR100303634B1
Application number: KR1019930022299A
Authority: KR
Inventors: 이도오준뻬이; 미야자끼오사무; 에끼모도하사오; 고야마미찌노리; 사이노다쓰시; 라우리강가스; 안니에리
Original assignee: 다께다 가즈히꼬; 니폰 가야꾸 가부시끼가이샤; 마티 리보빈, 올라비 라마; 오리온-이티메 오와이
Priority date: 1992-10-27
Filing date: 1993-10-26
Publication date: 2001-11-22
Anticipated expiration: 2013-10-26
Also published as: US20020107231A1; EP0667768A1; US6355688B1; DE69323759T2; CN1053337C; DE69323759D1; EP0776661A1; NO314533B1; ATE177008T1; NO951596D0; NO20025179D0; DK0667768T3; CN1100930A; EP0667768B1; WO1994009764A1; NO951596L; ES2128441T3; KR940008677A; US6458848B1; NO20025179L

Abstract

본 발명은 비스테로이드계 항에스트로겐, 예를 들자면 시트르산 토레미펜등을 유효성분으로 하는 자가 면역 질환 치료약에 관한 것이다.

항에스트로겐제, 예를 들자면 시트르산 토레미펜은 자가 면역 질환등의 변성성 질환에 대하여 우수한 치료효과를 나타낸다.

Description

자가 면역 질환 치료약

제1도는 NZB/NZW의 F1 마우스의 토레미펜 투여군 및 대조군의 생존율의 비교

본 발명은 자가 면역 질환 치료약으로 기대되는 비스테로이드계 항에스트로겐, 예를 들자면 토레미펜(Toremifene)의 사용에 관한 것이다.

자가 면역 질환으로서는 교원병(膠原病)등을 들수 있는데, 질환부위의 관점에서는 지지조직과 결합 조직의 변성성(變性性)질환, 타액선(唾液腺)의 자가 면역성 질환, 특히 세-그렌병, 신장의 자가 면역성 질환, 특히 전신성 에리테마 토오데스와 사구체(絲球體)신염, 관절의 자가 면역성 변성 질환, 특히 만성 관절 류머티즘, 혈관의 자가 면역성 변성질환, 예컨대 전신성 괴사성 및 육아종성(肉芽腫性)혈관염이 있고, 또한 다발성 경화증도 들 수 있다.

오늘날 자가 면역 질환의 약물치료에는 면역 억제제, 핵산 길항제, 대사 길항제 등이 사용되고 있다.

그리고 대중요법으로서 항염증제, 혈액 응고 길항제 등도 사용되고 있다. 그러나 이들 약물의 효과는 충분한 것은 아니었다.

또한 면역 억제제에 대해서는 당뇨병, 신장 장해, 감염증의 유발등의 부작용이 알려져 있고, 핵산 길항제, 대다 길항제의 사용에 대해서는 간(肝)장해, 골수 장해 등의 부작용이 다발(多發)하고 있다.

이와 같이 자가 면역 질환의 약물치료의 현상은 극히 불만족한 것이었다. 본 발명은 면역계에 작용하여 종래의 약제와는 작용 매카니즘이 상이하고 심각한 부작용이 적은 자가 면역 질환의 치료약을 제공하기 위한 것이다.

본 발명자등은 이러한 치료약을 발견하고자 예의 연구를 거듭한 결과 비스테로이드계 항에스트로겐이 자가 면역 질환에 대하여 우수한 치료효과를 가진다는 것을 발견하였고, 이 발견에 근거하여 본 발명을 완성하게 이르렀다.

즉 본 발명은 비스테로이드계 항에스트로겐 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 하는 자가 면역 질환 치료약에 관한 것이다.

본 발명에서 사용되는 비스테로이드계 항에스트로겐은 트리페닐 C₂∼C₅알켄 또는 트리페닐 C₂∼C₅알칸 골격을 가진 화합물인데, 바람직하게는 1 위치 및 2 위치의 탄소에 세 개의 페닐기에 의한 치환을 가진 C₂∼C₅알켄 또는 C₂∼C₅알칸류이다. 이 화합물은 페닐기에 모노 또는 디 저급 알킬(C₁∼C₃)아미노 저급 알콕시(C₁∼C₃)기, 히드록실기 등의 치환기를 가지고 있어도 좋고, 또한 상기 알켄 또는 알칸 골격중의 알킬기에 할로겐 등의 치환기를 가지고 있어도 좋다.

비스테로이드계 항에스트로겐제(濟)의 구체적인 예로서는 토레미펜(toremifene)(일본국 특허 공고 평 4-19973), 타목시펜(일본국 특허 공고 소 59-21861), 4-히드록시타목시펜(일본국 특허 공개 소 54-44644), 3-히드록시타목시펜(일본국 특허 공개 소 57-122049), N-데메틸토레미펜 또는 4-히드록시토레미펜(일본국 특허 공개 평 3-163015)등을 들 수 있는데, 특히 토레미펜이 바람직하다. 이들은 어느 것이나 그 항종양 효과가 간행물에 개시(開示)되어 있다(Cancer Chemotherapy and Pharmacology 17 ; 109∼113, 1986 및 위에 나온 특허 공보 참조).

약리학상 허용되는 염으로서 특히 적당한 것은, 예컨대 염산염, 황산염, 시트르산염, 타르타르산염, 인산염이다.

자가 면역 질환의 치료에 있어서 본 발명의 비스테로이드계 항에스트로겐과 병용할 수 있는 약제로서는 프레드니솔론, 프레드니손, 코르티솔등의 당질 코르티코이드를 들 수 있는데, 특히 이중에서 프레드니솔론이 바람직하다.

당질 코르티코이드는 그 자체가 항염증 작용등에 기인한 자가 면역 질환 치료효과를 가지고 있는데, 본 발명에 의한 비스테로이드계 항에스트로겐 또는 그 약리학상 허용되는 염과 병용하면 그 치료효과가 상승적으로 향상됨을 확인하였다.

본 발명의 치료약은 특히 전신성 에리테마토오데스에 대하여 우수한 작용효과를 나타낸다.

따라서 본 발명은 아래의 치료에 관한 것이다.

(1)비스테로이드계 항에스트로겐 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 자가 면역 질환 치료약.

(2)비스테로이드계 항에스트로겐이 트리페닐(C₂∼C₅)알켄 또는 트리페닐(C₂∼C₅)알칸 골격을 가진 화합물인(1)의 자가 면역 질환 치료약.

(3)토레미펜 또는 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 하는 자가 면역 질환 치료약.

(4)위희(1)또는(2)에 있어서 자가 면역 질환이 교원병, 신장변성성 질환, 예컨대 신염, 특히 사구체 신염, 자가 면역 장해에 따른 혈관염, 타액선염 또는 관절염인 치료약.

(5)위의(1)또는(2)에 있어서 자가 면역 질환이 전신성 에리테마토오데스인 치료약.

(6)당질 코르티코이드와 병용하기 위한 위의(1)또는(2)의 치료약.

본 발명의 자가 면역 질환 치료약은 경구 또는 비경구 또는 정맥주사로 투여된다. 일반적으로는 위에 나온 유효 성분의 효과를 발휘하는 양을 적당한 의료용의 담체 및 기타 보조제와 조합하여 사용한다. 여기서 말하는 「효과를 발휘하는 양」이라 함은 바람직하지 않은 부작용을 일으키지 않고 목적으로 하는 약리활성을 발휘하는 양을 뜻한다. 각각의 경우에서의 정확한 투여량은 여러 가지 인자, 예를 들자면 투여 방법, 투여되는 환자의 개체차, 화합물을 투여할 때의 상태등에 따라 달라지는데, 물론 투여하는 유도체의 구조에 의해서도 달라진다.

통산, 위의 유효성분의 투여량은 성인 1 일당 10∼1000mg, 바람직하게는 20∼500mg, 보다 바람직하게는 30∼300mg 정도이다.

당질 코르티코이드를 병용할 경우는 당질 코르디코이드를 성인 1 일당 1∼100mg, 바람직하게는 2∼60mg 정도, 비스테로이드계 항에스트로겐을 성인 1 일당 10∼700mg, 바람직하게는 20∼500mg, 보다 바람직하게는 30∼300mg 정도 투여하는 것이 바람직하다.

본 발명에 의한 유효 성분과 더불어 일반적으로 사용되는 의약용의 담체 및 기타의 보조제는 고체상이어도 좋고 액체상이어도 좋은데, 보통 투여경로를 고려하여 선택된다. 예를 들자면 고체 담체로서는 락토오스, 수크로오스, 젤라틴, 한천등이 있고, 액체 담체로서는 물, 시럽, 땅콩 기름, 올리브유 등이 있다. 그 밖에도 이 분양의 숙련자에게 공지된 적당한 담체를 사용하여도 좋다. 본 발명에서의 유효 성분은 담체와 조합하여 여러가지 허용되는 제형, 예를 들자면 정제, 캡슐제, 좌제, 액제, 에멀젼제, 파우더제 등의 형태이어도 좋다.

본 발명의 치료약의 제제중에 있어서의 비스테로이드계 항에스트로겐 또는 그 약학적으로 허용되는 열의 함량은 제제의 형태등에 따라 광범위하게 변화시킬 수 있는데, 일반적으로는 0.01∼100%(중량), 바람직하게는 0.1∼70%(중량)이고, 제제중의 나머지는 통상 의약용의 담체 및 기타 보조제로 되어 있다.

MRL/Mp-1pr/1pr 마우스는 연령이 많아질수록 면역 복합체의 침착을 수반하는 사구체 신염이나 혈관염, 타액선염, 다발성 관절염 등을 자연발증한다.

따라서 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스는 사람의 전신성 에리테마토오데스, 세-그렌병, 만성 관절 류머티즘, 또는 다발성 동맥염등의 자가 면역성 혈관염의 실험 모델로서 널리 이용되고 있다.

이어서 본 발명을 비스테로이드계 항에스트로겐제의 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 임파조직종대(組織腫大), 사구체 신염, 혈관염, 타액선염, 관절염에 대한 억제 효과의 시험에 의거하여 설명한다.

본 발명의 치료약의 유효 성분인 비스테로이드계 항에스트로겐, 예를 들자면 토레미펜 및 그 약리학적으로 허용되는 염등은 자가 면역 질환등의 변성성 질환, 예컨대 전신성 에리테마토오데스의 치료약으로서 우수한 효과를 나타낸다.

[실시예 1]

2-[4-(Z)-4-클로로-1,2-디페닐-1-부테닐]페녹시-N,N-디메틸에틸아민시트레이트(시트르산 토레미펜) 투여에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스에 자연 발증하는 자가 면역 질환의 치료

(1)시험방법

시험에는 8 주령의 암컷 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스(일본국의 쿠레아)를 사용하였다. 시트르산 토레미펜(일본국 특허 공고 평 4-19973)을 0.5% 카르복시메틸 셀롤로오스에 현탁하여 현탁액을 제조하고 유효 성분 100mg/kg 에 상당하는 양을 1 일 1 회씩 13 주간 계속하여 경구 투여하였다.

(2)시트르산 토레미펜에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 비장 및 임파절종창(腫脹)의 억제

시트르산 토레미펜 100mg/kg 의 1 일 1 회, 13 주간 연속 경구투여는 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 비장 및 임파절 종창을 현저하게 억제하였다(표 1 참조)

MRL/Mp-1pr/1pr 마우스에서는 1pr 유전자(임파증식 유전자)의 존재에 의하여 연령증가에 따라 비장과 전신의 임파절이 현저하게 종대(腫大)한다.

이 1pr 유전자는 마우스의 Fas 항원을 코우드하고 있고 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스에서는 이 유전자에 얼마간의 이상이 존재함으로서 Fas 항원이 발현하지 않는다.

이로 인하여 자기 반응성의 T세포가 흉선(胸線)에서 Fas 항원을 통한 네가티브 실렌션(negative selection)을 받지 않고 말초조직에 출현하여 임파 조직의 종대(腫大)와 자가 면역 증상을 야기한다. 만성 관절 류머티즘등의 사람의 자가 면역 질환에 있어서도 자기 반응성 T 세포의 존재가 확인된다.

이 시험결과는 시트르산 토레미펜등의 비스테로이드계 항에스트로겐제가 자기 반응성 T 세포의 출현을 억제하고, 그 결과 비장과 임파절 종창을 억제하여 자가 면역 질환을 치료할 수 있는 가능성을 나타내고 있다.

[표 1]

시트르산 토레미펜¹⁾의 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스에 있어서의 비장과 임파절 종창의 억제효과

(주)1)시트르산 토레미펜은 100mg/kg을 1 일 1 회, 8 주령부터 13 주간 연속 경구 투여하였음.

2)대조군에는 0.5% 카르복시메틸셀룰로오스만을 마찬가지로 투여하였음.

3)표준편차

4)

5)

(3)시트르산 토레미펜에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 신(腎)기능장해의 억제

대조군과 시트르산 토레미펜 투여군의 마우스를 투여 종료후에 부검(剖檢)하여 신장을 병리 조직학적으로 검색하였다.

그리고 각 군의 혈청을 사용하여 BUN(혈중 뇨소 질소)을 측정함으로써 신장 기능의 변화를 측정하였다(표 2 참조).

표 2에 있는 바와 같이 시트르산 토레미펜은 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 사구체 신염과 사구체 신염에 의한 신장기능 장해를 현저히 개선하였다.

MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 사구체 신염은 면역 복합체의 침착에 의하여 발증한다. 한편, 사람의 전신성 에리테마토오데서(SLE)등의 자가 면역성 질환에 있어서도 면역 복합체의 침착을 수반하는 사구체 신염이 발현한다.

이 시험 결과는 이들 SLE 신증(腎症), 사구체 신염등의 신장의 변성성 질환에 시트르산 토레미펜등의 비스테로이드계 항에스트르겐이 유용한 치료약이 된다는 것을 나태낸다.

[표 2]

시트르산 토레미펜에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 사구체 신염 억제 및 신장 기능 개선 효과

(주) 1)신장을 10% 완충 포르말린에 고정한 후 통상의 방법에 따라 파라핀 절편을 제조하여 HE, PAS 염색 표본을 제조하였음. 신(腎)사구체의 장해 정도는 0(장해없음), 1(가벼운 장해), 2(중(中)정도의 장해), 3(심한 장해)으로 하여 스코어화 하였음. 각 마우스의 신장당 25개의 사구체를 관찰하여 평균치를 구하였음.

2)BUN은 일본국의 富士드라이켐 아날라이저를 사용하여 측정하였음.

3)표준편차

(4)시트르산 토레미펜에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 타액선염, 혈관염, 관절염 발증의 억제

대조군과 시트르산 토레미펜 투여군의 마우스의 타액선(唾液腺), 신(腎)혈관, 무릎관절에 대하여 병리조직학적 검색을 하였다.

표 3에 있는 바와 같이 시트르산 토레미펜은 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스 타액선염, 혈관염, 관절염의 발증을 억제하였다.

이 결과는 시트르산 토레미펜 또는 시트르산 타목시펜 등의 비스테로이드계 항에스트르겐제가 자가 면역성의 타액선염(세-그렌병), 자가 면역성의 관절염(만성 관절 류머티즘), 자가 면역성의 혈관염(괴사성 및 육아종성 혈관염)등의 치료약이 될 수 있음을 나타낸다.

[표 3]

시트르산 토레미펜에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 타액선염, 신(腎)혈관염 및 관절염에 대한 개선 효과

(주)1)타액선, 신장 무릎관절을 10% 완충 포르말린에 고정한 후 통상의 방법에 따라 파라핀 절편을 제조하여 HE, PAS 염색표본을 제조하였음, 장해의 정도는 0(장해없음), 1(가벼운 장해), 2(중(中)정도의 장해), 3(심한 장해)으로 하여 스코어화 하였음.

2)표준편차

[실시예 2]

시트르산 토레미펜 및 당질 코르티코이드의 병용투여에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스에 자연 발증하는 자가 면역 질환에 대한 효과

(1)시험방법

12주령의 암컷 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스를 사용하였다.

30mg/kg 및 15mg/kg 의 시트르산 토레미펜(TOR)을 12 주령부터 21 주령까지 9 주간, 1일 2 회 계속 경구 투여하였다.

양성(陽性)대조약으로서 당질 코르티코이드(프레드니솔론)8, 4 및 2mg/kg/day을 마찬가지로 1 일 1 회 피하 투여하였다.

그리고 마찬가지 방법으로 토레미펜과 당질 코르티코이드를 병용 투여하였다. 전체 투여기간 종료 이튿날에 신장을 적출하고 PLP 고정액에 고정후 동결절편을 제조하였다.

이 동결절편을 사용하여 항(抗)Mac-2 모노클로날 항체(미합중국의 하이브리테크사)에 의한 면역 염색을 실시하였다. 각 신장당 10∼20 개의 사구체에 대하여 각 사구체에 침윤되어 있는 Mac-2 양성(陽性)세포(활성화 매크로파아지)의 수를 현미경으로 세어 사구체 1 개당의 평균 Mac-2 양성 세포수를 구하여 사구체 신염의 장해 정도로서 평가하였다(각 n=13). 그 결과는 표 4에 나와 있다.

[표 4]

시트르산 토레미펜 및 당질 코르티코이드의 병용투여에 의한 MRL/Mp-1pr/1pr 마우스의 사구체 신염에 대한 개선효과

프레드니솔론(P)과 시트르산 토레미펜(TOR)의 병용군은 어느것이나 대조군 또는 프레드니솔론 단독 투여군에 비하여 Mac2 양성 세포수가 유의(有意)하게 감소하고 있는 반면, 프레드니솔론과 시트르산 토레미펜 단독은 대조군에 비하여 Mac2양성 세포수에 있어서 큰 감소가 없었다. 이들 결과로부터 두가지 제(濟)의 병용에 의하여 사구체 신명의 장해가 상승적으로 억제되는 효과가 있음을 확인하였다.

[실시예 3]

생존율 비교 시험

자가 면역 질환의 병태 모델로서 NZB/NZW의 F1 마우스(전신성 에리테마토오데스의 병태모델)를 사용하여 시트르산 토레미펜 투여에 의한 생존율의 비교시험을 구하였다.

(1)시험 방법

실험동물

NZB(암컷)/NZW(수컷)의 F1-하이브리드 마우스를 사용하였다. 이들은 5주령의 것을 덴마크국의 봄홀트가아드(Bomholtgaard)사로부터 수입한 것이었다.

시험군 및 용량

ㅇ 대조(수컷): 폴리에틸렌 글리콜을 주 3회 경구 투여.

ㅇ 대조(암컷): 폴리에틸렌 글리콜을 주 3회 경구 투여.

ㅇ 시트르산 토레미펜 30mg/kg/day : 70mg/kg을 폴리에틸렌 글리콜에 용해하여 주 3 회 암컷 NZB/NZW 의 F1 마우스에 경구 투여

ㅇ 시트르산 토레미펜 3mg/kg/day : 7mg/kg을 폴리에틸렌 글리콜에 용해하여 주 3 회 암컷 NZB/NZW 의 F1 마우스에 경구 투여

(2)결과

각 시험군의 마우스의 생존율을 제 1 도에 나타내었다.

2 마리를 제외하고 모든 암컷 대조 마우스는 2 년간의 추적 기간중에 사망하였다.

이 군의 50%의 마우스는 40 주령전에 사망하였고 20%(4/20)가 1 년후에도 생존하였다.

한편, 수컷 대조군에서는 5 마리가 최초 24 주간(도면에서는 나타나 있지 않음)에 증상이 악화하여 감염증을 나타내었기 때문에 이들 5 마리는 결과로부터 제외하였다. 수컷 대조 마우스의 47%는 2 년후에도 생존하여 있었다.

이들 두가지 토레미펜 투여군에서는 마우스의 생존율은 명확히 암컷 대조에 비하여 상승되어 있다. 40 주령시에 3mg/kg 토레미펜 투여군에서는 1 마리(1/20)가 사망했을 뿐이고 30mg/kg 토레미펜군에서는 3 마리(3/20)가 사망하였다.

1 년후에는 3mg/kg 과 30mg/kg 토레미펜 투여군에서 각각 80% 및 85%의 마우스가 생존하고 있고 이들의 값은 암컷 대조군(20%)보다도 수컷 대조군(≒90%)의 값에 근사한 것이었다.

그리고 저용량 및 고용량의 토레미펜군에 있어서 각각 25%(5/20)와 10%(2/20)의 마우스가 2년 후에도 생존하고 있었다.

이상의 60마리의 암컷 및 15마리의 수컷 NZB/NZW 의 F1 마우스의 추적 데이터에 의하여 토레미펜은 명확히 암컷 마우스의 생존율을 높여주는 작용이 있음을 나타내었다.

[실시예 4]

[제제예]

비스테로이드계 항에스트로겐 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효 성분으로 하는 본 발명의 자가 면역 질환 치료제의 제제예를 아래에 나타낸다.

그런데 본 발명에서의 제제예는 이들에 한정되는 것은 아니다.

[제제예 1]

아래의 성분을 함유하는 200mg 정제를 제조하였다.

시트르산 토레미펜 20mg

전분 85mg

락토오스 90mg

스테아르산 마그네슘 5mg

[제제예 2]

아래의 성분을 함유하는 200mg 정제를 제조하였다.

시트르산 타목시펜 20mg

전분 85mg

락토오스 90mg

스테아르산 마그네슘 5mg

Claims

토레미펜(toremifene) 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 사구체 신염 치료약.
제 1항에 있어서, 당질 코르티코이드와 병용하기 위한 사구체 신염 치료약.
토레미펜 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는, 자가면역 장해에 따른 타액선염 치료약.
토레미펜 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는, 자가면역 장해에 따른 혈관염 치료약.
토레미펜 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는, 전신성 에리테마토오데스 치료약.
토레미펜 또는 그 약리학상 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는, 다발성 관절염 또는 만성 관절 류머티즘 치료약.