JPH1129467A

JPH1129467A - プロテアーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH1129467A
Application number: JP19932397A
Authority: JP
Inventors: Masahiro Ota; 正弘大田; Yuzo Yoshida; 雄三吉田
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1997-07-09
Filing date: 1997-07-09
Publication date: 1999-02-02

Abstract

(57)【要約】【課題】優れたプロテアーゼ阻害作用を有し、種々の
皮膚疾患、肌荒れ、荒れ性等の改善に優れた効果を有す
るプロテアーゼ阻害剤を提供する。【解決手段】ウルソール酸（Ursolic acid）またはそ
の塩を有効成分として配合する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はプロテアーゼ阻害剤
に関し、さらに詳しくは、患部においてプロテアーゼの
活性変化が認められる接触性皮膚炎、乾癬、尋常性天疱
瘡、先天性水疱瘡等の種々の皮膚疾患の他、乾燥や洗浄
剤等によって惹起される肌荒れ、荒れ性の改善・予防、
および止血剤としても利用可能なセリンプロテアーゼ阻
害活性を有するプロテアーゼ阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】従来
より、皮膚疾患や肌荒れに対して改善・予防効果を有す
るものとして種々の治療薬、皮膚外用剤、化粧料等が知
られている。これら従来の薬剤や化粧料等における有効
成分としては、抗炎症作用を有する、あるいは保湿効果
の高いアミノ酸や、多糖、脂質、抽出エキス等が皮膚の
炎症や角質層の水分の消失を防ぐ能力に優れているため
に用いられてきた。しかしながらいずれにおいてもその
肌荒れ改善・予防効果は必ずしもすべての事例において
十分であるとは限らず、疾患の原因に応じてより優れた
薬効剤の開発が期待されていた。

【０００３】一方、近年種々の皮膚疾患の病像形成には
プロテアーゼが関与していることが明らかにされつつあ
る。例えば炎症性異常角化性疾患の代表である乾癬で
は、その患部表皮において高いプラスミノーゲンアクチ
ベーター（Plasminiogen activator:ＰＡ）活性が認め
られている。ＰＡはセリンプロテアーゼの一つである
が、Ｈａｕｓｔｅｉｎは、乾癬表皮の特に錯角化部位に
強いＰＡ活性が存在することを報告し（Arch.Klin.Exp.
Dermatol;234,1969）、ＦｒａｋｉとＨｏｐｓｕ−Ｈａ
ｖｕは、乾癬鱗屑から高濃度の塩溶液を用いてＰＡを抽
出した(Arch.Dermatol.Res;256,1976)。また、尋常性天
疱瘡においては、表皮細胞内で多量に合成されたＰＡ
が、細胞外に存在するプラスミノーゲン（plasminoge
n）をプラスミン（plasmin）に転換し、これが細胞間結
合物質を消化することにより細胞間に組織液が貯留して
表皮内水疱が形成されることが、インビトロ（in vitr
o）の実験系において明らかにされている(Morioka S. e
t al: J.Invest.Dermatol; 76, 1981)。

【０００４】またプロテアーゼは、角質層形成など表皮
の正常な角化過程においても重要な役割を果たしている
と考えられており(Ogawa H.,Yoshiike T.:Int.J.Dermat
ol;23,1984)、肌改善あるいは皮膚疾患の治療薬とし
て、プロテアーゼ阻害剤を用いる試みがなされるように
なってきている。

【０００５】

【課題を解決するための手段】上述のような現況に鑑
み、本発明者らはプロテアーゼに起因する種々の皮膚疾
患、肌荒れ、荒れ性等の改善・予防に有効なプロテアー
ゼ阻害物質を得るべく、広く種々の物質についてプロテ
アーゼ阻害活性を調べた結果、ウルソール酸（Ursolic
acid）がプロテアーゼ阻害活性を有していることを見い
出し、これに基づき本発明を完成するに至った。

【０００６】すなわち本発明は、ウルソール酸（Ursoli
c acid）またはその塩を有効成分とすることを特徴とす
るプロテアーゼ阻害剤である。

【０００７】ウルソール酸（Ursolic acid）について
は、特開平５−２８６８３５号公報によると女貞子から
抽出される成分として養毛化粧料として知られ、特開昭
６２−９３２１５号公報によるとレダクターゼ活性の阻
害による優れた養毛効果が知られている。また特開平２
−１７１２１号公報では、皮膚上皮細胞のガン化を予防
するのに有用な安全性の高い外用剤として、また特開昭
５８−５７３０７号公報では、皮膚の黒化を効果的に防
止し、かつ変色、変臭、分解失活等の経時変化を起こさ
ない安定な美白化粧料として用いることが知られてい
る。さらには口腔用組成物として知られ、特開平１−２
９０６１９号公報によると抗う蝕性効果を示すことが公
表され、特開昭６１−３６２１３号公報によるとストレ
プトコッカスミュウタンス（S.Mutans）に対し特異的抗
菌作用を示し、う蝕予防用に有効であることが知られて
いる。しかしながら、ウルソール酸（Ursolic acid）類
のプロテアーゼ阻害作用に関する報告はこれまでにな
く、今回はじめて見い出されたものである。

【０００８】以下、本発明について詳述する。本発明に
用いられるウルソール酸（Ursolic acid）は公知の物質
であり、ウワウルシの葉、実に、またカキ、サンザシ、
タイソウ等にも含まれる。また、市販品としては、和光
純薬工業株式会社、東京化成工業株式会社、シグマ・ア
ルドリッチ社等から販売されており、容易に入手するこ
とができる。

【０００９】更に本発明のウルソール酸（Ursolic aci
d）は、所望によりナトリウム塩、カリウム塩、アンモ
ニウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等の無機塩、
あるいはモノエタノールアミン、ジエタノールアミン
、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン等
の有機塩の形で用いることもできる。

【００１０】本発明のプロテアーゼ阻害剤は主として外
用剤として用いられ、その場合のウルソール酸またはそ
の塩の配合量は、外用剤全量中乾燥物として０．００５
〜２０．０重量％、好ましくは０．０１〜１０．０重量
％である。０．００５重量％未満であると、本発明でい
う効果が十分に発揮されず、２０．０重量％を超えると
製剤化が難しいので好ましくない。また、１０．０重量
％以上配合してもさほど大きな効果の向上はみられな
い。

【００１１】本発明において、プロテアーゼ阻害剤のプ
ロテアーゼとは、ペプチド結合の加水分解を触媒する酵
素の総称であり、このプロテアーゼはペプチダーゼおよ
びプロテイナーゼに分類される。前者はペプチド鎖のア
ミノ基末端やカルボキシル基末端の外側より、ペプチド
結合を切り離していく酵素で、後者はペプチド鎖内部の
特定の結合を切断する酵素である。後者のプロテイナー
ゼは、その活性触媒基の種類により、さらにセリン系、
システイン系、アスパラギン酸系、金属系の４つに大別
され、それぞれに特異的な阻害剤が存在している。本発
明におけるプロテアーゼ阻害剤とは、このうちの特にセ
リンプロテアーゼに対して阻害活性を示すことを特徴と
している。

【００１２】本発明のプロテアーゼ阻害剤には、上記必
須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用
いられる成分、例えば、美白剤、保湿剤、酸化防止剤、
油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコ
ール類、粉末成分、色材、水性成分、水、各種皮膚栄養
剤等を必要に応じて適宜配合することができる。

【００１３】その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸
三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリ
ウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖
剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム
酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、カリ
ンの果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロー
ル、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等
の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウ
ム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸
等の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、
ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合すること
ができる。

【００１４】本発明のプロテアーゼ阻害剤は、例えば軟
膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、
従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれの形で適用
することもでき、剤型は特に問わない。

【００１５】

【実施例】以下に実施例によって本発明をさらに詳細に
説明する。なお、本発明はこれにより限定されるもので
はない。配合量は重量％である。実施例に先立ち、本発
明のウルソール酸のプロテアーゼ阻害活性に関する試験
方法およびその結果について説明する。代表的な２種類
のセリンプロテアーゼとして、プラスミンとトリプシン
に対する阻害活性を評価した。

【００１６】１．試料の調製東京化成工業株式会社のウルソール酸（Ursolic acid）
をエタノールに１％溶かし、この溶液を希釈して濃度を
調整し、これを用いて以下の実験を行った。

【００１７】２．プラスミン阻害活性の測定フィブリン平板法にて阻害率（％）を求めた。すなわち
Ａｓｔｒｕｐら（Arch.Biochem.;40,346,1952）の方法
にならいフィブリン平板を作成し、上記のように調製し
た試料を０．１％と０．０１％にまでエタノールにて希
釈して使用した。結果を表１に示した。

【００１８】３．トリプシン阻害活性の測定カゼインを基質としたＭｕｒａｍａｔｓｕら（J.Bioche
m.;58,214,1965）の方法にならい阻害率を求めた。試料
は同じく０．１％と０．０１％にまで希釈したものを使
用し、結果を表１に示した。

【００１９】

【表１】 ────────────────────────────── 阻害率（％）試料添加濃度 ───────────── （％）プラスミントリプシン ────────────────────────────── ウルソール酸 0.1 36.8 35.1 0.01 15.0 16.3 ──────────────────────────────

【００２０】表１から分かるように、ウルソール酸は、
顕著なプロテアーゼ阻害効果が認められた。

【００２１】実施例１クリーム（処方）重量％ステアリン酸５．０ステアリルアルコール４．０イソプロピルミリステート１８．０グリセリンモノステアリン酸エステル３．０プロピレングリコール１０．０ウルソール酸０．０１苛性カリ０．２亜硫酸水素ナトリウム０．０１防腐剤適量香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にプロピレングリコールとウルソ
ール酸と苛性カリを加え溶解し、加熱して７０℃に保つ
（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ
（油相）。水相に油相を徐々に加え、全部加え終わって
からしばらくその温度に保ち反応を起こさせる。その
後、ホモミキサーで均一に乳化し、よくかきまぜながら
３０℃まで冷却する。

【００２２】（製法）イオン交換水にプロピレングリコールを加え、
加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱
融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備
乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくか
きまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２３】実施例３クリーム（処方）重量％固形パラフィン５．０ミツロウ１０．０ワセリン１５．０流動パラフィン４１．０グリセリンモノステアリン酸エステル２．０ポリオキシエチレン（20モル）ソルビタンモノラウリル酸エステル２．０石けん粉末０．１硼砂０．２ウルソール酸０．１亜硫酸水素ナトリウム０．０３エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水に石けん粉末と硼砂を加え、加熱
して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解
して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかきまぜなが
ら徐々に加え反応を行う。その後、ホモミキサーで均一
に乳化し、よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２４】実施例４乳液（処方）重量％ステアリン酸２．５セチルアルコール１．５ワセリン５．０流動パラフィン１０．０ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０ポリエチレングリコール１５００３．０トリエタノールアミン１．０カルボキシビニルポリマー０．０５（商品名：カーボポール941,B.F.Goodrich Chemical company）ウルソール酸０．０１亜硫酸水素ナトリウム０．０１エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）少量のイオン交換水にカルボキシビニルポリマ
ーを溶解する（Ａ相）。残りのイオン交換水にポリエチ
レングリコール１５００とトリエタノールアミンを加
え、加熱溶解した７０℃に保つ（水相）。他の成分を混
合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を
加え予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一に
乳化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却す
る。

【００２５】実施例５乳液（処方）重量％マイクロクリスタリンワックス１．０ミツロウ２．０ラノリン２０．０流動パラフィン１０．０スクワラン５．０ソルビタンセスキオレイン酸エステル４．０ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル１．０プロピレングリコール７．０ウルソール酸塩１０．０亜硫酸水素ナトリウム０．０１エチルパラベン０．３香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にプロピレングリコールを加え、
加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱
融解して７０℃に保つ（油相）。油相をかきまぜながら
水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化した後、
よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。

【００２６】実施例６ゼリー（処方）重量％９５％エチルアルコール１０．０ジプロピレングリコール１５．０ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテル２．０カルボキシビニルポリマー１．０（商品名：カーボポール940,B.F.Goodrich Chemical company）苛性ソーダ０．１５Ｌ−アルギニン０．１ウルソール酸７．０ 2-ヒドロキシ-4-メトキシベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム０．０５エチレンジアミンテトラアセテート・3ナトリウム・2水０．０５メチルパラベン０．２香料適量イオン交換水残余（製法）イオン交換水にカーボポール９４０を均一に溶
解し、一方、９５％エタノールにウルソール酸、ポリオ
キシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテル
を溶解し、水相に添加する。次いで、その他の成分を加
えた後苛性ソーダ、Ｌ−アルギニンで中和させ増粘す
る。

【００２７】実施例７美容液（処方）重量％（Ａ相）エチルアルコール（95%）１０．０ポリオキシエチレン（20モル）オクチルドデカノール１．０パントテニールエチルエーテル０．１ウルソール酸１．５メチルパラベン０．１５（Ｂ相）水酸化カリウム０．１（Ｃ相）グリセリン５．０ジプロピレングリコール１０．０亜硫酸水素ナトリウム０．０３カルボキシビニルポリマー０．２（商品名：カーボポール940，B.F.Goodrich Chemical company）精製水残余（製法）Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ
相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えたのち充填を
行う。

【００２８】実施例８パック（処方）重量％（Ａ相）ジプロピレングリコール５．０ポリオキシエチレン（60モル）硬化ヒマシ油５．０（Ｂ相）ウルソール酸塩０．０１オリーブ油５．０酢酸トコフェロール０．２エチルパラベン０．２香料０．２（Ｃ相）亜硫酸水素ナトリウム０．０３ポリビニルアルコール１３．０（ケン化度９０、重合度２，０００）エタノール７．０精製水残余（製法）Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ
相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加え
たのち充填を行う。

【００２９】実施例９固形ファンデーション（処方）重量％タルク４３．１カオリン１５．０セリサイト１０．０亜鉛華７．０二酸化チタン３．８黄色酸化鉄２．９黒色酸化鉄０．２スクワラン８．０イソステアリン酸４．０モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン３．０オクタン酸イソセチル２．０ウルソール酸１．０防腐剤適量香料適量（製法）タルク〜黒色酸化鉄の粉末成分をブレンダーで
十分混合し、これにスクワラン〜オクタン酸イソセチル
の油性成分、ウルソール酸、防腐剤、香料を加え良く混
練した後、容器に充填、成型する。

【００３０】実施例１０乳化型ファンデーション（クリームタイプ）（処方）重量％（粉体部）二酸化チタン１０．３セリサイト５．４カオリン３．０黄色酸化鉄０．８ベンガラ０．３黒色酸化鉄０．２（油相）デカメチルシクロペンタシロキサン１１．５流動パラフィン４．５ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン４．０（水相）精製水５０．０１，３−ブチレングルコール４．５ウルソール酸１．５ソルビタンセスキオレイン酸エステル３．０防腐剤適量香料適量（製法）水相を加熱攪拌後、十分に混合粉砕した粉体部
を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油
相を加えてホモミキサー処理した後、攪拌しながら香料
を添加して室温まで冷却する。

【００３１】

【発明の効果】以上説明したように、本発明のプロテア
ーゼ阻害剤は、優れたプロテアーゼ阻害作用を有してお
り、種々の皮膚疾患、肌荒れ、荒れ性等の改善に優れた
効果を有するものである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ウルソール酸（Ursolic acid）またはそ
の塩を有効成分とすることを特徴とするプロテアーゼ阻
害剤。
【請求項２】ウルソール酸（Ursolic acid）またはそ
の塩の配合量が０．００５〜２０．０重量％である請求
項１記載のプロテアーゼ阻害剤。