JPH10175861A - ＮＦ−κＢ活性化抑制剤 - Google Patents
ＮＦ−κＢ活性化抑制剤Info
- Publication number
- JPH10175861A JPH10175861A JP33539696A JP33539696A JPH10175861A JP H10175861 A JPH10175861 A JP H10175861A JP 33539696 A JP33539696 A JP 33539696A JP 33539696 A JP33539696 A JP 33539696A JP H10175861 A JPH10175861 A JP H10175861A
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- Japan
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- agent
- group
- interleukin
- lignan
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 一般式（１）で表されるリグナン類を有
効成分とするＮＦ−κＢ活性化抑制剤、遺伝子発現調節
剤、抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症予防・改善剤、成
人病予防・改善剤及び癌転移抑制剤。 【化１】 （式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 及びＲ4 は同一又は異なって水
素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ヒドロキシアル
キル基又はアルコキシ基を示す） 【効果】 優れたＮＦ−κＢ活性化抑制作用、遺伝子発
現調節作用を有する。
効成分とするＮＦ−κＢ活性化抑制剤、遺伝子発現調節
剤、抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症予防・改善剤、成
人病予防・改善剤及び癌転移抑制剤。 【化１】 （式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 及びＲ4 は同一又は異なって水
素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ヒドロキシアル
キル基又はアルコキシ基を示す） 【効果】 優れたＮＦ−κＢ活性化抑制作用、遺伝子発
現調節作用を有する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、抗ヒト免疫不全ウ
イルス（ＨＩＶ）剤、炎症予防・改善剤、成人病予防・
改善剤、癌転移抑制剤として有用なＮＦ−κＢ（Nuclea
r Factor-Kappa B）活性化抑制剤、遺伝子発現調節剤に
関する。
イルス（ＨＩＶ）剤、炎症予防・改善剤、成人病予防・
改善剤、癌転移抑制剤として有用なＮＦ−κＢ（Nuclea
r Factor-Kappa B）活性化抑制剤、遺伝子発現調節剤に
関する。
【０００２】
【従来の技術】発生、分化、増殖、恒常性の維持などの
高次の生命現象は、ある特定の遺伝的プログラムに従っ
て正確に行われるが、それは個々の細胞における特異的
な遺伝子の発現調節を通した細胞レベルにおける活性
化、分化、増殖によって制御されている。これらの変化
は遺伝情報の発現が起こるべき細胞へ、その外界からサ
イトカインやホルモンなどの刺激が加わり、細胞膜上の
受容体に結合することにより始まり、種々の生化学的反
応を経て最終的に核にシグナルを伝達し、遺伝子発現の
変化を引き起こす。このような遺伝子発現の制御は主と
して遺伝子の転移レベルで行われていることが知られて
いる。
高次の生命現象は、ある特定の遺伝的プログラムに従っ
て正確に行われるが、それは個々の細胞における特異的
な遺伝子の発現調節を通した細胞レベルにおける活性
化、分化、増殖によって制御されている。これらの変化
は遺伝情報の発現が起こるべき細胞へ、その外界からサ
イトカインやホルモンなどの刺激が加わり、細胞膜上の
受容体に結合することにより始まり、種々の生化学的反
応を経て最終的に核にシグナルを伝達し、遺伝子発現の
変化を引き起こす。このような遺伝子発現の制御は主と
して遺伝子の転移レベルで行われていることが知られて
いる。
【０００３】外界からの刺激によって発現誘導される遺
伝子群は、刺激により迅速に再活性化され得る状態にあ
る。どの遺伝子が選択的に活性化されるかは遺伝子の発
現制御領域に存在する特別な塩基配列、及びこれらのシ
スエレメントに特異的に結合する転写調節因子が存在す
るか否かによって決定される。つまり外界からの刺激に
よって転写調節因子が量的又は質的に活性化すれば遺伝
子の発現が起こる。
伝子群は、刺激により迅速に再活性化され得る状態にあ
る。どの遺伝子が選択的に活性化されるかは遺伝子の発
現制御領域に存在する特別な塩基配列、及びこれらのシ
スエレメントに特異的に結合する転写調節因子が存在す
るか否かによって決定される。つまり外界からの刺激に
よって転写調節因子が量的又は質的に活性化すれば遺伝
子の発現が起こる。
【０００４】転写調節因子のうちＮＦ−κＢは、ｐ５０
及びｐ６５の２種類のサブユニットから成る蛋白質であ
り、非刺激時には阻害蛋白質Ｉ−κＢと結合して細胞質
に存在している。この細胞質にＩＬ−１やＴＮＦ−αな
どによる刺激が加わると、この刺激によって活性化され
たキナーゼにより、Ｉ−κＢが不活性化され、放出され
たＮＦ−κＢが核へ移行して転写の活性化が起こると考
えられている。
及びｐ６５の２種類のサブユニットから成る蛋白質であ
り、非刺激時には阻害蛋白質Ｉ−κＢと結合して細胞質
に存在している。この細胞質にＩＬ−１やＴＮＦ−αな
どによる刺激が加わると、この刺激によって活性化され
たキナーゼにより、Ｉ−κＢが不活性化され、放出され
たＮＦ−κＢが核へ移行して転写の活性化が起こると考
えられている。
【０００５】ＮＦ−κＢにより活性化される、すなわち
発現制御配列にＮＦ−κＢの結合するシスエレメントを
持つ遺伝子は、ＩＬ−１（Interleukin-1）、ＩＬ−
２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−β（In
terferon-β）、ｉＮＯＳ（Inducible nitric oxide sy
nthase）、Ｇ−ＣＳＦ（Granulocyte colony stimulati
ng factor）、ＧＭ−ＣＳＦ（Granulocyte macrophage
colony stimulating factor）、ＴＮＦα（Tumor necro
sis factor α）、ＣＯＸ−２（Cyclooxygenase-2）の
ような炎症性サイトカイン、ＥＬＡＭ−１（E-Selecti
n）、ＩＣＡＭ−１（CD54）、ＶＣＡＭ−１（CD106）の
ような細胞接着、細胞浸潤、癌転移の過程に重要な細胞
接着分子などに関するものが多いことが知られている。
また、ＭＭＰ−２，９（Matrixmetalloproteinase）の
ようなガン細胞の血管外への浸潤、転移に深く関与する
酵素の活性化にもＮＦ−κＢの活性化が深く関与してい
ることが知られていることから、ＮＦ−κＢ活性化抑制
物質は抗炎症剤、癌転移抑制剤として期待されている。
従って、ＮＦ−κＢ活性化抑制剤が有効に発現調節しう
る遺伝子として、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ
−８、ＩＬ−１２、ＴＮＦ、ＩＦＮ、ｉＮＯＳ、Ｇ−Ｃ
ＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＯＸ−２、ＥＬＡＭ−１、ＩＣ
ＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、ＭＭＰ−９等が挙げられる。
また、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は宿主細胞のＮ
Ｆ−κＢによりその転写が活性化され、ウイルスの増殖
と感染の拡大が進むと考えられており、従って、ＮＦ−
κＢの活性化抑制物質は、ＨＩＶ感染症（ＡＩＤＳ）の
治療に有効であると期待されている（実験医学：９巻16
号，68-, 199：Annu. Rev. Immunol.:12巻, 141-, 199
4、Advances in Immunology:58巻, 1-、Science:265巻,
956-, 1994）。
発現制御配列にＮＦ−κＢの結合するシスエレメントを
持つ遺伝子は、ＩＬ−１（Interleukin-1）、ＩＬ−
２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＩＦＮ−β（In
terferon-β）、ｉＮＯＳ（Inducible nitric oxide sy
nthase）、Ｇ−ＣＳＦ（Granulocyte colony stimulati
ng factor）、ＧＭ−ＣＳＦ（Granulocyte macrophage
colony stimulating factor）、ＴＮＦα（Tumor necro
sis factor α）、ＣＯＸ−２（Cyclooxygenase-2）の
ような炎症性サイトカイン、ＥＬＡＭ−１（E-Selecti
n）、ＩＣＡＭ−１（CD54）、ＶＣＡＭ−１（CD106）の
ような細胞接着、細胞浸潤、癌転移の過程に重要な細胞
接着分子などに関するものが多いことが知られている。
また、ＭＭＰ−２，９（Matrixmetalloproteinase）の
ようなガン細胞の血管外への浸潤、転移に深く関与する
酵素の活性化にもＮＦ−κＢの活性化が深く関与してい
ることが知られていることから、ＮＦ−κＢ活性化抑制
物質は抗炎症剤、癌転移抑制剤として期待されている。
従って、ＮＦ−κＢ活性化抑制剤が有効に発現調節しう
る遺伝子として、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ
−８、ＩＬ−１２、ＴＮＦ、ＩＦＮ、ｉＮＯＳ、Ｇ−Ｃ
ＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＯＸ−２、ＥＬＡＭ−１、ＩＣ
ＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、ＭＭＰ−９等が挙げられる。
また、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は宿主細胞のＮ
Ｆ−κＢによりその転写が活性化され、ウイルスの増殖
と感染の拡大が進むと考えられており、従って、ＮＦ−
κＢの活性化抑制物質は、ＨＩＶ感染症（ＡＩＤＳ）の
治療に有効であると期待されている（実験医学：９巻16
号，68-, 199：Annu. Rev. Immunol.:12巻, 141-, 199
4、Advances in Immunology:58巻, 1-、Science:265巻,
956-, 1994）。
【０００６】成人病の一つである粥状動脈硬化発生の初
期には、細胞内に大量のエステル化コレステロールを蓄
積した泡沫細胞と呼ばれる単球マクロファージ由来の細
胞の、血管内皮下での局所的な集簇が認められる。ま
た、粥状動脈硬化巣にはＴリンパ球の存在も知られてい
る。このような動脈硬化巣においてもＮＦ−κＢが活性
化されていることが知られており、ＮＦ−κＢの活性化
は動脈硬化発症過程における重要な初期ステップとして
認識されている（J. Clin. Invest., 97, 1715-,199
6）。また、肝炎、腎炎、関節リウマチ組織においても
ＮＦ−κＢの活性化が誘導されていることとも報告され
ている。従って、ＮＦ−κＢ活性化抑制剤は、動脈硬化
や、肝炎、腎炎、関節リウマチ等の成人病の予防・改善
剤として有効である。
期には、細胞内に大量のエステル化コレステロールを蓄
積した泡沫細胞と呼ばれる単球マクロファージ由来の細
胞の、血管内皮下での局所的な集簇が認められる。ま
た、粥状動脈硬化巣にはＴリンパ球の存在も知られてい
る。このような動脈硬化巣においてもＮＦ−κＢが活性
化されていることが知られており、ＮＦ−κＢの活性化
は動脈硬化発症過程における重要な初期ステップとして
認識されている（J. Clin. Invest., 97, 1715-,199
6）。また、肝炎、腎炎、関節リウマチ組織においても
ＮＦ−κＢの活性化が誘導されていることとも報告され
ている。従って、ＮＦ−κＢ活性化抑制剤は、動脈硬化
や、肝炎、腎炎、関節リウマチ等の成人病の予防・改善
剤として有効である。
【０００７】このように、動脈硬化症や肝炎のような多
くの成人病や各種の炎症、ウイルス性疾患、癌の転移に
はＮＦ−κＢの活性化が極めて重要な役割を果している
ことが明らかとなっており、また、理論的にも、細胞実
験レベルにおいても動物実験レベルにおいてもＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制物質がこれら疾患の予防・改善に有効であ
ることが認識されるに至っていることから、本出願人を
含め多くの研究者がこれら疾患の制御を目的にＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制物質の探索を行っている。このような疾病
制御の観点から、これまでにＮＦ−κＢの活性化を抑制
する物質の探索が行われ、本出願人によって先に報告さ
れた没食子酸誘導体（特願平7-215983号）、Ｎ−アセチ
ルシステインやピロリジンジチオカーボネート（The Jo
urnal of Immunology, 1994, 153:2681-）、アスピリン
やサリチル酸ナトリウム（Science, 1994, 265(12):956
-）、ベンゾキノン誘導体（特開平7-297860号、特開平7
-291859号公報）、バナジウムコンプレックス（DE43366
42）、ペルバナデート（J. Biological chem., 270(18)
10631-10639, 1995）、フェニルアルシンオキシド（J.
Biological chem., 270(18)10631-10639, 1995）、サイ
クリックイミド誘導体（WO9501348）、トシルフェニル
クロロメチルケトン、ジイソクマリン、α−トコフェリ
ルサクシネート、ペントキシフィリン、ベンゾキノン誘
導体（特開平7-291860号公報）などが報告されている。
くの成人病や各種の炎症、ウイルス性疾患、癌の転移に
はＮＦ−κＢの活性化が極めて重要な役割を果している
ことが明らかとなっており、また、理論的にも、細胞実
験レベルにおいても動物実験レベルにおいてもＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制物質がこれら疾患の予防・改善に有効であ
ることが認識されるに至っていることから、本出願人を
含め多くの研究者がこれら疾患の制御を目的にＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制物質の探索を行っている。このような疾病
制御の観点から、これまでにＮＦ−κＢの活性化を抑制
する物質の探索が行われ、本出願人によって先に報告さ
れた没食子酸誘導体（特願平7-215983号）、Ｎ−アセチ
ルシステインやピロリジンジチオカーボネート（The Jo
urnal of Immunology, 1994, 153:2681-）、アスピリン
やサリチル酸ナトリウム（Science, 1994, 265(12):956
-）、ベンゾキノン誘導体（特開平7-297860号、特開平7
-291859号公報）、バナジウムコンプレックス（DE43366
42）、ペルバナデート（J. Biological chem., 270(18)
10631-10639, 1995）、フェニルアルシンオキシド（J.
Biological chem., 270(18)10631-10639, 1995）、サイ
クリックイミド誘導体（WO9501348）、トシルフェニル
クロロメチルケトン、ジイソクマリン、α−トコフェリ
ルサクシネート、ペントキシフィリン、ベンゾキノン誘
導体（特開平7-291860号公報）などが報告されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、高い効力を有するＮＦ−κＢの活性化抑制剤及びこ
の作用に基づく優れた遺伝子発現調節剤、抗ヒト免疫不
全ウイルス剤、炎症予防・改善剤、成人病予防剤、癌転
移抑制剤を提供することにある。
は、高い効力を有するＮＦ−κＢの活性化抑制剤及びこ
の作用に基づく優れた遺伝子発現調節剤、抗ヒト免疫不
全ウイルス剤、炎症予防・改善剤、成人病予防剤、癌転
移抑制剤を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】このような実情に鑑み、
本発明者は鋭意研究を行った結果、特定のリグナン類が
優れたＮＦ−κＢ活性化抑制作用を有することを見出
し、本発明を完成した。
本発明者は鋭意研究を行った結果、特定のリグナン類が
優れたＮＦ−κＢ活性化抑制作用を有することを見出
し、本発明を完成した。
【００１０】すなわち、本発明は次の一般式（１）
【００１１】
【化２】
【００１２】（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 及びＲ4 は同一又
は異なって水素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ヒ
ドロキシアルキル基又はアルコキシ基を示す）で表され
るリグナン類を有効成分とするＮＦ−κＢ活性化抑制
剤、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイ
キン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−６（ＩＬ−
６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロ
イキン−１２（ＩＬ−１２）、インターフェロン−β
（ＩＦＮ−β）、ＮＯ合成酵素（ｉＮＯＳ）、腫瘍壊死
因子（ＴＮＦ）、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−
２）、ＥＬＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、マ
トリクスメタロプロテアーゼ−９（ＭＭＰ−９）、Ｇ−
ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦより選ばれる１又は２以上の物質
の遺伝子発現調節剤、抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症
予防・改善剤、成人病予防剤及び癌転移抑制剤を提供す
るものである。
は異なって水素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ヒ
ドロキシアルキル基又はアルコキシ基を示す）で表され
るリグナン類を有効成分とするＮＦ−κＢ活性化抑制
剤、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイ
キン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−６（ＩＬ−
６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロ
イキン−１２（ＩＬ−１２）、インターフェロン−β
（ＩＦＮ−β）、ＮＯ合成酵素（ｉＮＯＳ）、腫瘍壊死
因子（ＴＮＦ）、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−
２）、ＥＬＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、マ
トリクスメタロプロテアーゼ−９（ＭＭＰ−９）、Ｇ−
ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦより選ばれる１又は２以上の物質
の遺伝子発現調節剤、抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症
予防・改善剤、成人病予防剤及び癌転移抑制剤を提供す
るものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】リグナン類は植物においてはヒノ
キ科のアスナロ（Thujopsis dolabrata）（Chem. Phar
m. Bull. 20(6)1150-1155(1972)）などに見出されてい
る他、種々の合成法が報告されており（Natural Produc
t Report, 183-205(1995)）、また、これまでに一部の
リグナンに抗ヘルペスウイルス活性、抗サイトメガロウ
イルス活性や癌細胞（mouse leukemia, human lung car
cinoma, human colon carcinoma）増殖抑制活性（Plant
a Med. 59,246-249(1993)）、血小板へのＰＡＦ（Plate
let activating factor）の結合阻害（Natural Product
Report, 183-205(1995)）などが報告されているが、そ
のＮＦ−κＢ活性化抑制作用については全く知られてい
ない。
キ科のアスナロ（Thujopsis dolabrata）（Chem. Phar
m. Bull. 20(6)1150-1155(1972)）などに見出されてい
る他、種々の合成法が報告されており（Natural Produc
t Report, 183-205(1995)）、また、これまでに一部の
リグナンに抗ヘルペスウイルス活性、抗サイトメガロウ
イルス活性や癌細胞（mouse leukemia, human lung car
cinoma, human colon carcinoma）増殖抑制活性（Plant
a Med. 59,246-249(1993)）、血小板へのＰＡＦ（Plate
let activating factor）の結合阻害（Natural Product
Report, 183-205(1995)）などが報告されているが、そ
のＮＦ−κＢ活性化抑制作用については全く知られてい
ない。
【００１４】本発明で用いられるリグナン類は、前記一
般式（１）で表されるものであり、式中Ｒ1 〜Ｒ4 は同
一又は異なって水素原子、ヒドロキシル基、アルキル
基、ヒドロキシアルキル基又はアルコキシ基を示し、ア
ルキル基としては炭素数１〜１０のものが好ましく、例
えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル
基、ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペ
ンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニ
ル基、デシル基などの直鎖又は分岐鎖のものが挙げられ
る。ヒドロキシアルキル基としては、炭素数１〜１０の
直鎖又は分岐鎖のものが好ましく、例えばヒドロキシエ
チル基などを挙げることができる。また、アルコキシ基
としては炭素数１〜１０の直鎖又は分岐鎖のものが好ま
しく、例えばメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオ
キシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、
ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、
ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、ヘプチルオキシ
基、オクチルオキシ基、ノニルオキシ基、デシルオキシ
基等を挙げることができる。これらのうち、一般式
（１）においてＲ1 が水素原子、ヒドロキシル基又は炭
素数１〜３のアルコキシ基であり、Ｒ2 、Ｒ3 及びＲ4
がヒドロキシル基又はメトキシ基で表されるものが特に
好ましい。
般式（１）で表されるものであり、式中Ｒ1 〜Ｒ4 は同
一又は異なって水素原子、ヒドロキシル基、アルキル
基、ヒドロキシアルキル基又はアルコキシ基を示し、ア
ルキル基としては炭素数１〜１０のものが好ましく、例
えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル
基、ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペ
ンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニ
ル基、デシル基などの直鎖又は分岐鎖のものが挙げられ
る。ヒドロキシアルキル基としては、炭素数１〜１０の
直鎖又は分岐鎖のものが好ましく、例えばヒドロキシエ
チル基などを挙げることができる。また、アルコキシ基
としては炭素数１〜１０の直鎖又は分岐鎖のものが好ま
しく、例えばメトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオ
キシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、
ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、
ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、ヘプチルオキシ
基、オクチルオキシ基、ノニルオキシ基、デシルオキシ
基等を挙げることができる。これらのうち、一般式
（１）においてＲ1 が水素原子、ヒドロキシル基又は炭
素数１〜３のアルコキシ基であり、Ｒ2 、Ｒ3 及びＲ4
がヒドロキシル基又はメトキシ基で表されるものが特に
好ましい。
【００１５】このようなリグナン類（１）は、例えばア
スナロ（主に葉部、小枝部）から抽出することができ
る。抽出は、アスナロ又はその乾燥末を水、有機溶媒
（石油エーテル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、四塩
化炭素、トルエン、ベンゼン、ジクロロメタン、クロロ
ホルム、エーテル、酢酸エチル、ブタノール、アセト
ン、プロパノール、エタノール、メタノール、ピリジ
ン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、
ブチレングリコール等）、水性アルコール等を用い、通
常３〜７０℃で抽出処理することにより行う。
スナロ（主に葉部、小枝部）から抽出することができ
る。抽出は、アスナロ又はその乾燥末を水、有機溶媒
（石油エーテル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、四塩
化炭素、トルエン、ベンゼン、ジクロロメタン、クロロ
ホルム、エーテル、酢酸エチル、ブタノール、アセト
ン、プロパノール、エタノール、メタノール、ピリジ
ン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、
ブチレングリコール等）、水性アルコール等を用い、通
常３〜７０℃で抽出処理することにより行う。
【００１６】アスナロ原体からの好ましい具体的抽出例
としては、アスナロの乾燥粉砕物１００ｇをエタノール
１リットルに浸漬し、室温で時々攪拌しながら７日間抽
出を行い、得られた抽出液をろ過し、ろ液を５℃で３日
間静置した後、再度ろ過して上澄みを得る方法が挙げら
れる。次いで得られた抽出液から溶媒を留去して得られ
た残渣を、適宜メタノール、エタノール、酢酸エチル等
の溶媒に溶解し、更に水、メタノール、エタノール、酢
酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ヘキサン、
アセトン、ベンゼン等を溶出溶媒として、アンバーライ
トＸＡＤ−２、ダイアイオンＨＰ−２０、ＴＳＫゲルＨ
Ｗ−４０等の親水性ポリマーやセファデックスＬＨ−２
０等のセファデックス、逆相系シリカゲルやシリカゲ
ル、セルロース等を担体に用いたカラムクロマトグラフ
ィーに付し、薄層クロマトグラフィーなどで目的成分を
確認しながら分画することにより目的物を得ることがで
きる。また、場合によりベンゼン、エーテル、ヘキサ
ン、アセトン、メタノール、エタノール、水等の適当な
溶媒を用いて再結晶することにより精製してもよい。
としては、アスナロの乾燥粉砕物１００ｇをエタノール
１リットルに浸漬し、室温で時々攪拌しながら７日間抽
出を行い、得られた抽出液をろ過し、ろ液を５℃で３日
間静置した後、再度ろ過して上澄みを得る方法が挙げら
れる。次いで得られた抽出液から溶媒を留去して得られ
た残渣を、適宜メタノール、エタノール、酢酸エチル等
の溶媒に溶解し、更に水、メタノール、エタノール、酢
酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ヘキサン、
アセトン、ベンゼン等を溶出溶媒として、アンバーライ
トＸＡＤ−２、ダイアイオンＨＰ−２０、ＴＳＫゲルＨ
Ｗ−４０等の親水性ポリマーやセファデックスＬＨ−２
０等のセファデックス、逆相系シリカゲルやシリカゲ
ル、セルロース等を担体に用いたカラムクロマトグラフ
ィーに付し、薄層クロマトグラフィーなどで目的成分を
確認しながら分画することにより目的物を得ることがで
きる。また、場合によりベンゼン、エーテル、ヘキサ
ン、アセトン、メタノール、エタノール、水等の適当な
溶媒を用いて再結晶することにより精製してもよい。
【００１７】また、文献記載の方法（Natural Product
Report, 183-205(1995)等）により種々の誘導体を合成
することができ、その由来は特に限定されるものではな
い。
Report, 183-205(1995)等）により種々の誘導体を合成
することができ、その由来は特に限定されるものではな
い。
【００１８】本発明のＮＦ−κＢ活性化抑制剤には、リ
グナン類に加えて、既存の抗炎症剤、抗アレルギー剤、
抗ヒスタミン剤等の薬物を任意に組合わせて配合するこ
とができ、また、通常用いられる賦形剤及びその他の添
加剤とともに任意の形態に製剤化される。かかる賦形
剤、添加剤の例として、固形状のものとしては乳糖、カ
オリン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タ
ルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マ
グネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げられ、
液状のものとしてはグリセリン、落花生油、ポリビニル
ピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコ
ール、プロピレングリコール、水等が挙げられる。
グナン類に加えて、既存の抗炎症剤、抗アレルギー剤、
抗ヒスタミン剤等の薬物を任意に組合わせて配合するこ
とができ、また、通常用いられる賦形剤及びその他の添
加剤とともに任意の形態に製剤化される。かかる賦形
剤、添加剤の例として、固形状のものとしては乳糖、カ
オリン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タ
ルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マ
グネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げられ、
液状のものとしてはグリセリン、落花生油、ポリビニル
ピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコ
ール、プロピレングリコール、水等が挙げられる。
【００１９】本発明の医薬は、その剤型に応じて経口、
経腸、外用、注射、点眼、点鼻、吸入、経粘膜等いずれ
の経路によってもヒトに投与することができる。またそ
の投与量は、年齢、体重、性別、症状、治療効果、投与
方法、処理時間等の種々の要因によって異なり、特に限
定されないが、経口投与の場合は通常大人１人当たり１
回に０．１〜２０００mg、特に１０〜４００mgの範囲を
１日１回〜数回に分けて投与することが好ましい。ま
た、非経口投与の場合は、通常大人１人当たり１回に
０．１〜２０００mg、特に１０〜４００mgの範囲を１日
１回〜数回投与することが好ましい。
経腸、外用、注射、点眼、点鼻、吸入、経粘膜等いずれ
の経路によってもヒトに投与することができる。またそ
の投与量は、年齢、体重、性別、症状、治療効果、投与
方法、処理時間等の種々の要因によって異なり、特に限
定されないが、経口投与の場合は通常大人１人当たり１
回に０．１〜２０００mg、特に１０〜４００mgの範囲を
１日１回〜数回に分けて投与することが好ましい。ま
た、非経口投与の場合は、通常大人１人当たり１回に
０．１〜２０００mg、特に１０〜４００mgの範囲を１日
１回〜数回投与することが好ましい。
【００２０】本発明の医薬の剤型としては特に限定され
ず、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、ト
ローチ剤、シロップ剤、乳液、液剤（ドリンク剤）、軟
ゼラチンカプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレ
ー、注射剤等が挙げられる。錠剤の形態にする場合は、
担体としては、この分野で公知のものを広く使用でき
る。これには、例えば澱粉、乳糖、ショ糖、カルボキシ
メチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類、尿素等
の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロッ
プ、ブドウ糖、澱粉液、ゼラチン溶液、カルボキシメチ
ルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カ
リウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥澱粉、
アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭
酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレ
ンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウ
ム、ステアリン酸モノグリセライド、澱粉、乳糖等の崩
壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等
の崩壊抑制剤；ラウリル硫酸ナトリウム、第４級アンモ
ニウム塩等の吸収促進剤；グリセリン、澱粉等の保湿
剤；澱粉、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状
ケイ酸等の吸着剤；ステアリン酸塩、ホウ酸末、精製タ
ルク、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が挙げられ
る。更に錠剤は必要に応じて通常の剤皮を施した錠剤、
例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶包錠、フィルムコ
ーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができ
る。
ず、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、ト
ローチ剤、シロップ剤、乳液、液剤（ドリンク剤）、軟
ゼラチンカプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレ
ー、注射剤等が挙げられる。錠剤の形態にする場合は、
担体としては、この分野で公知のものを広く使用でき
る。これには、例えば澱粉、乳糖、ショ糖、カルボキシ
メチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類、尿素等
の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロッ
プ、ブドウ糖、澱粉液、ゼラチン溶液、カルボキシメチ
ルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カ
リウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥澱粉、
アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭
酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレ
ンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウ
ム、ステアリン酸モノグリセライド、澱粉、乳糖等の崩
壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等
の崩壊抑制剤；ラウリル硫酸ナトリウム、第４級アンモ
ニウム塩等の吸収促進剤；グリセリン、澱粉等の保湿
剤；澱粉、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状
ケイ酸等の吸着剤；ステアリン酸塩、ホウ酸末、精製タ
ルク、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が挙げられ
る。更に錠剤は必要に応じて通常の剤皮を施した錠剤、
例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶包錠、フィルムコ
ーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができ
る。
【００２１】丸剤の形態にする場合には、担体としては
この分野で公知のものを広く使用でき、これには、例え
ば澱粉、乳糖、ブドウ糖、カカオ脂、硬化植物油、カオ
リン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント
末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナランカン
テン等の崩壊剤等が挙げられる。
この分野で公知のものを広く使用でき、これには、例え
ば澱粉、乳糖、ブドウ糖、カカオ脂、硬化植物油、カオ
リン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント
末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナランカン
テン等の崩壊剤等が挙げられる。
【００２２】坐剤の形態にする場合は、担体としてはこ
の分野で公知のものを広く使用でき、これには例えばカ
カオ脂、ゼラチン、ポリエチレングリコール、高級アル
コール、高級アルコールのエステル類、半合成グリセリ
ド等を挙げることができる。
の分野で公知のものを広く使用でき、これには例えばカ
カオ脂、ゼラチン、ポリエチレングリコール、高級アル
コール、高級アルコールのエステル類、半合成グリセリ
ド等を挙げることができる。
【００２３】注射剤として調製する場合は、液剤及び懸
濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であることが望まし
く、これら液剤、懸濁剤及び乳剤の形態にする場合は、
希釈剤として、この分野において慣用されているものを
利用することができる。例えば水、エチルアルコール、
プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアル
コール、ポリオキシエチレン化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等
を挙げることができる。尚、この場合、等張性の水溶液
を調製するに十分な量の食塩、ブドウ糖、グリセリン等
を医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補
助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更に必要
に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤や他の
医薬品を医薬製剤中に含有せしめてもよい。
濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であることが望まし
く、これら液剤、懸濁剤及び乳剤の形態にする場合は、
希釈剤として、この分野において慣用されているものを
利用することができる。例えば水、エチルアルコール、
プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアル
コール、ポリオキシエチレン化イソステアリルアルコー
ル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等
を挙げることができる。尚、この場合、等張性の水溶液
を調製するに十分な量の食塩、ブドウ糖、グリセリン等
を医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補
助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更に必要
に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤や他の
医薬品を医薬製剤中に含有せしめてもよい。
【００２４】また、噴霧剤の形態にする場合には、分散
剤及び噴射剤はこの分野で公知のものを広く使用でき、
分散剤としては例えば大豆レシチン、卵黄レシチン類、
オレイン酸、リノール酸、リノレン酸等の脂肪酸、ソル
ビタントリオレート、ソルビタンモノオレート等のソル
ビタン類等を用いることができる。また噴射剤として例
えばフレオン１１、フレオン１２、フレオン１１４等の
通常不燃性液化ガスを用いることができる。
剤及び噴射剤はこの分野で公知のものを広く使用でき、
分散剤としては例えば大豆レシチン、卵黄レシチン類、
オレイン酸、リノール酸、リノレン酸等の脂肪酸、ソル
ビタントリオレート、ソルビタンモノオレート等のソル
ビタン類等を用いることができる。また噴射剤として例
えばフレオン１１、フレオン１２、フレオン１１４等の
通常不燃性液化ガスを用いることができる。
【００２５】軟膏の形態にする場合にもこの分野で公知
のものを広く使用でき、例えば水、エタノール、イソプ
ロピルアルコール、グリセリン、ポリエチレングリコー
ル、ソルビトール、ポリビニルアルコール等の多価アル
コール、動物性油脂、植物性油脂、鉱物油、硬化油、ミ
ツロウ等のワックス、液状パラフィン、パラフィンロウ
等の高級炭化水素、ステアリン酸等の脂肪酸、乳化剤、
アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活
性剤といった界面活性剤、キサンタンガム、アルギン酸
ナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセル
ロース、カルボキシビニルポリマー等の水溶性高分子化
合物等を使用することができる。また、色素、保存剤、
香料等も必要に応じて配合してもよい。
のものを広く使用でき、例えば水、エタノール、イソプ
ロピルアルコール、グリセリン、ポリエチレングリコー
ル、ソルビトール、ポリビニルアルコール等の多価アル
コール、動物性油脂、植物性油脂、鉱物油、硬化油、ミ
ツロウ等のワックス、液状パラフィン、パラフィンロウ
等の高級炭化水素、ステアリン酸等の脂肪酸、乳化剤、
アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活
性剤といった界面活性剤、キサンタンガム、アルギン酸
ナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセル
ロース、カルボキシビニルポリマー等の水溶性高分子化
合物等を使用することができる。また、色素、保存剤、
香料等も必要に応じて配合してもよい。
【００２６】リグナン類（１）が製剤中に配合されるべ
き量としては特に限定されず、広範囲に適宜選択される
が、通常製剤中１〜７０重量％、特に１〜３０重量％で
あるのが好ましい。
き量としては特に限定されず、広範囲に適宜選択される
が、通常製剤中１〜７０重量％、特に１〜３０重量％で
あるのが好ましい。
【００２７】
【発明の効果】本発明のリグナン類は優れたＮＦ−κＢ
活性化抑制作用を有し、遺伝子発現調節剤、抗炎症剤、
抗ヒト免疫不全ウイルス剤、癌転移抑制剤、炎症予防・
改善剤、成人病予防剤として有用である。従って、これ
を有効成分として含有する製剤は、そのＮＦ−κＢ活性
化抑制作用、遺伝子発現調節作用に基づき、ヒト免疫不
全感染症（ＡＩＤＳ）、気管支炎、アレルギー性鼻炎、
関節炎、腎炎、肝炎、乾せん、蕁麻疹、接触皮膚炎、ア
トピー性皮膚炎、ＵＶ炎症、関節リウマチ、喘息、動脈
硬化、各種癌転移等の予防・治療に広く用いることがで
きる。
活性化抑制作用を有し、遺伝子発現調節剤、抗炎症剤、
抗ヒト免疫不全ウイルス剤、癌転移抑制剤、炎症予防・
改善剤、成人病予防剤として有用である。従って、これ
を有効成分として含有する製剤は、そのＮＦ−κＢ活性
化抑制作用、遺伝子発現調節作用に基づき、ヒト免疫不
全感染症（ＡＩＤＳ）、気管支炎、アレルギー性鼻炎、
関節炎、腎炎、肝炎、乾せん、蕁麻疹、接触皮膚炎、ア
トピー性皮膚炎、ＵＶ炎症、関節リウマチ、喘息、動脈
硬化、各種癌転移等の予防・治療に広く用いることがで
きる。
【００２８】
【実施例】次に、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。
明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもので
はない。
【００２９】製造例１ アスナロ乾燥粉砕物（１８０ｇ）をエタノール１Ｌに浸
漬し、室温において時々攪拌しながら７日間抽出を行
い、得られた抽出液を濾過し、濾液を５℃において３日
間静置した後、再度濾過し、上澄みを得た。次に溶媒を
留去して得られた残渣（２．４ｇ）をシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル、ＣＨＣｌ
3：ＣＨ3ＯＨ、Ｈ2Ｏ：ＣＨ3ＯＨ）、高速液体クロマト
グラフィー（ＹＭＣ−ＯＤＳ Ｓ−１０、ＹＭＣ社製）
に供し、化合物１（一般式（１）において、Ｒ1＝Ｈ、
Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）２５mgを得た。
漬し、室温において時々攪拌しながら７日間抽出を行
い、得られた抽出液を濾過し、濾液を５℃において３日
間静置した後、再度濾過し、上澄みを得た。次に溶媒を
留去して得られた残渣（２．４ｇ）をシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル、ＣＨＣｌ
3：ＣＨ3ＯＨ、Ｈ2Ｏ：ＣＨ3ＯＨ）、高速液体クロマト
グラフィー（ＹＭＣ−ＯＤＳ Ｓ−１０、ＹＭＣ社製）
に供し、化合物１（一般式（１）において、Ｒ1＝Ｈ、
Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）２５mgを得た。
【００３０】製造例２ 製造例１と同様にして、化合物２（一般式（１）におい
て、Ｒ1＝ＯＨ、Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）１０mgを得
た。
て、Ｒ1＝ＯＨ、Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）１０mgを得
た。
【００３１】製造例３ 製造例１と同様にして、化合物３（一般式（１）におい
て、Ｒ1＝Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）２１mgを得た。
て、Ｒ1＝Ｒ2＝Ｒ3＝Ｒ4＝ＯＣＨ3）２１mgを得た。
【００３２】製造例４ 製造例１と同様にして、化合物４（一般式（１）におい
て、Ｒ1＝Ｈ、Ｒ2＝Ｒ 4＝ＯＣＨ3、Ｒ3＝ＯＨ）１５mg
を得た。
て、Ｒ1＝Ｈ、Ｒ2＝Ｒ 4＝ＯＣＨ3、Ｒ3＝ＯＨ）１５mg
を得た。
【００３３】試験例１ ＮＦ−κＢ活性化抑制試験： （ａ−１）ケラチノサイトの調製 正常ヒトケラチノサイトをＴ−２５フラスコで培養し、
サブコンフルエントに達した時点で成長因子類を含まな
い培地（K-110(-)）（極東製薬（株）製）（５ml）で１
度洗浄し、Ｋ−１１０（−）（５ml）で１日培養する。
その後新たなＫ−１１０（−）に置き換え、刺激物質
（最終濃度IL-1α:1.25ng/ml、TNFα:1.25ng/ml又はLPS
（リポポリサッカライド ):10μg/ml）を添加し、更に
１時間培養する。培養後、細胞をＰＢＳ（−）で洗浄
し、下記の方法により核蛋白質の抽出を行った。尚、被
験物質（最終濃度100nM）はＵＶＢ（紫外線）照射の１
５時間前に細胞に添加した。
サブコンフルエントに達した時点で成長因子類を含まな
い培地（K-110(-)）（極東製薬（株）製）（５ml）で１
度洗浄し、Ｋ−１１０（−）（５ml）で１日培養する。
その後新たなＫ−１１０（−）に置き換え、刺激物質
（最終濃度IL-1α:1.25ng/ml、TNFα:1.25ng/ml又はLPS
（リポポリサッカライド ):10μg/ml）を添加し、更に
１時間培養する。培養後、細胞をＰＢＳ（−）で洗浄
し、下記の方法により核蛋白質の抽出を行った。尚、被
験物質（最終濃度100nM）はＵＶＢ（紫外線）照射の１
５時間前に細胞に添加した。
【００３４】（ａ−２）ＵＶＢ照射ケラチノサイトの調
製 正常ヒトケラチノサイトをＴ−２５フラスコで培養し、
サブコンフルエントに達した後、成長因子類を含まない
培地（K-110(-)で１度洗浄し、Ｋ−１１０（−）（５m
l）で１日培養する。その後ＰＢＳ（−）（５ml）で２
度洗浄し、ＰＢＳ（−）（２ml）存在下、ＵＶＢ（15mJ
/cm2）を照射する。照射後ＰＢＳを除去し、Ｋ−１１０
（−）を５ml添加し、２時間培養する。培養後細胞をＰ
ＢＳ（−）で洗浄し、下記の方法により核蛋白質の抽出
を行った。尚、被験物質（最終濃度100nM）はＵＶＢ照
射の１５時間前に細胞に添加した。
製 正常ヒトケラチノサイトをＴ−２５フラスコで培養し、
サブコンフルエントに達した後、成長因子類を含まない
培地（K-110(-)で１度洗浄し、Ｋ−１１０（−）（５m
l）で１日培養する。その後ＰＢＳ（−）（５ml）で２
度洗浄し、ＰＢＳ（−）（２ml）存在下、ＵＶＢ（15mJ
/cm2）を照射する。照射後ＰＢＳを除去し、Ｋ−１１０
（−）を５ml添加し、２時間培養する。培養後細胞をＰ
ＢＳ（−）で洗浄し、下記の方法により核蛋白質の抽出
を行った。尚、被験物質（最終濃度100nM）はＵＶＢ照
射の１５時間前に細胞に添加した。
【００３５】（ｂ）血管内皮細胞の調製 コラーゲン（Ｉ）コートしたＴ−２５フラスコ内にてＥ
−３００培地（極東製薬（株）製）中でコンフルエント
となった正常ヒト臍帯由来血管内皮細胞に被験物質（10
0nM）を添加する。１５時間後に刺激物質（最終濃度IL-
1a:1.25ng/ml、TNFa:1.25ng/ml又はPMA（ホルボール12
−ミリステート13−アセテート）:10ng/ml ）を添加し
１時間培養する。培養液を除去した後ＰＢＳ（−）にて
洗浄し、下記の方法により核蛋白質の抽出を行った。
−３００培地（極東製薬（株）製）中でコンフルエント
となった正常ヒト臍帯由来血管内皮細胞に被験物質（10
0nM）を添加する。１５時間後に刺激物質（最終濃度IL-
1a:1.25ng/ml、TNFa:1.25ng/ml又はPMA（ホルボール12
−ミリステート13−アセテート）:10ng/ml ）を添加し
１時間培養する。培養液を除去した後ＰＢＳ（−）にて
洗浄し、下記の方法により核蛋白質の抽出を行った。
【００３６】（ｃ）核蛋白質の抽出 培養液除去後ＰＢＳ（−）にて洗浄した細胞に、バッフ
ァーＡ（10mM HEPES-NaOH(pH7.9), 1.5mM MgCl2, 10mM
KCl, 1.0mMジチオスレイトール(DTT), 0.5mMα−フェニ
ルメタンスルホニルフロライド(PMSF), ２μg/mlアプロ
チニン，２μg/mlペプスタチン）１mlを加え、セルスク
レイパーを用いて細胞を剥離回収する。遠心処理（1200
0rpm, 10分間）し、上清を除去した後バッファーＢ（バ
ッファーＡ＋0.1％ Triton X）８０μｌを添加し、ピペ
ッティングにより細胞を懸濁させ、氷上に１０分間放置
する。遠心処理（14000rpm, 10分間）後、上清を除去
し、バッファーＣ（20mM HEPES-NaOH(pH7.9), 1.5mM Mg
Cl2, 420mM NaCl, 1.0mM DTT, 0.5mM PMSF, 0.2mM EDT
A, ２μg/mlアプロチニン，２μg/mlレプスタチン, 25
％グリセロール）７０μｌを加え、ピペッティングによ
り細胞を懸濁させ、氷上に３０分間放置する。遠心処理
（15000rpm, 20分間）後、上清を核蛋白抽出物として回
収する。核蛋白質は、１mg/ml に調整し、ゲルシフトア
ッセイに用いた。ゲルシフトアッセイは基本的にはProm
ega社製のゲルシフトアッセイシステムを用いて行っ
た。１mg/ml の核蛋白質（２μｌ），Ｈ2Ｏ（４又は５
μｌ），結合バッファー（50mM Tris-HCl(pH7.5), 5.0m
M MgCl2, 250mM NaCl, 2.5mM DTT,2.5mM EDTA, 20％グ
リセロール,0.25mg/mlポリ(dI-dC)ポリ(dI-dC)）（２μ
ｌ）、競合物質（NF-κBオリゴヌクレオチド）、非競合
物質（OCT1オリゴヌクレオチド）（１又は０μｌ）を混
合し、室温で１０分間放置する。その後、予めＴ４−ポ
リヌクレオチドキナーゼにより32Ｐラベルした下記32Ｐ
−ＮＦ−κＢコンセンサス オリゴヌクレオチド（１μ
ｌ）を添加、更に室温で２０分間放置し、その後ゲルロ
ーディングバッファー（250mM Tris-HCl(pH7.5), 0.2％
BPB, 40％グリセロール）（１μｌ）を加え反応を停止
させる。
ァーＡ（10mM HEPES-NaOH(pH7.9), 1.5mM MgCl2, 10mM
KCl, 1.0mMジチオスレイトール(DTT), 0.5mMα−フェニ
ルメタンスルホニルフロライド(PMSF), ２μg/mlアプロ
チニン，２μg/mlペプスタチン）１mlを加え、セルスク
レイパーを用いて細胞を剥離回収する。遠心処理（1200
0rpm, 10分間）し、上清を除去した後バッファーＢ（バ
ッファーＡ＋0.1％ Triton X）８０μｌを添加し、ピペ
ッティングにより細胞を懸濁させ、氷上に１０分間放置
する。遠心処理（14000rpm, 10分間）後、上清を除去
し、バッファーＣ（20mM HEPES-NaOH(pH7.9), 1.5mM Mg
Cl2, 420mM NaCl, 1.0mM DTT, 0.5mM PMSF, 0.2mM EDT
A, ２μg/mlアプロチニン，２μg/mlレプスタチン, 25
％グリセロール）７０μｌを加え、ピペッティングによ
り細胞を懸濁させ、氷上に３０分間放置する。遠心処理
（15000rpm, 20分間）後、上清を核蛋白抽出物として回
収する。核蛋白質は、１mg/ml に調整し、ゲルシフトア
ッセイに用いた。ゲルシフトアッセイは基本的にはProm
ega社製のゲルシフトアッセイシステムを用いて行っ
た。１mg/ml の核蛋白質（２μｌ），Ｈ2Ｏ（４又は５
μｌ），結合バッファー（50mM Tris-HCl(pH7.5), 5.0m
M MgCl2, 250mM NaCl, 2.5mM DTT,2.5mM EDTA, 20％グ
リセロール,0.25mg/mlポリ(dI-dC)ポリ(dI-dC)）（２μ
ｌ）、競合物質（NF-κBオリゴヌクレオチド）、非競合
物質（OCT1オリゴヌクレオチド）（１又は０μｌ）を混
合し、室温で１０分間放置する。その後、予めＴ４−ポ
リヌクレオチドキナーゼにより32Ｐラベルした下記32Ｐ
−ＮＦ−κＢコンセンサス オリゴヌクレオチド（１μ
ｌ）を添加、更に室温で２０分間放置し、その後ゲルロ
ーディングバッファー（250mM Tris-HCl(pH7.5), 0.2％
BPB, 40％グリセロール）（１μｌ）を加え反応を停止
させる。
【００３７】ＮＦ−κＢコンセンサス オリゴヌクレオ
チド ５′−ＡＧＴＴＧＡＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣＡＧＧＣ
−３′ ３′−ＴＣＡＡＣＴＣＣＣＣＴＧＡＡＡＧＧＧＴＣＣＧ
−５′
チド ５′−ＡＧＴＴＧＡＧＧＧＧＡＣＴＴＴＣＣＣＡＧＧＣ
−３′ ３′−ＴＣＡＡＣＴＣＣＣＣＴＧＡＡＡＧＧＧＴＣＣＧ
−５′
【００３８】次に０．５Ｘ ＴＢＥ（トリス／ホウ酸／
EDTA）バッファー中、ポリアクリルアミドゲル（５％）
電気泳動に供し、ゲルを乾燥後、オートラジオグラフィ
ーを行い、ＤＮＡプローブの移動度の変化からＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制効果を評価した。評価は、バイオイメージ
ングアナライザーＢＡＳ２０００（フジフィルム社製）
により各バンドの放射活性を測定し、ＩＬ−１無刺激の
ときのＮＦ−κＢの放射活性の値、ＩＬ−１のみで刺激
した場合の放射活性の値から、各被験物質で処理した場
合のＮＦ−κＢの活性化の程度をＮＦ−κＢ活性化抑制
率として算出することにより行った。結果を表１に示
す。尚、シフトしたバンドが目的のものであるか否かを
検証するため、非標識プローブによる競争実験を同時に
行った。
EDTA）バッファー中、ポリアクリルアミドゲル（５％）
電気泳動に供し、ゲルを乾燥後、オートラジオグラフィ
ーを行い、ＤＮＡプローブの移動度の変化からＮＦ−κ
Ｂ活性化抑制効果を評価した。評価は、バイオイメージ
ングアナライザーＢＡＳ２０００（フジフィルム社製）
により各バンドの放射活性を測定し、ＩＬ−１無刺激の
ときのＮＦ−κＢの放射活性の値、ＩＬ−１のみで刺激
した場合の放射活性の値から、各被験物質で処理した場
合のＮＦ−κＢの活性化の程度をＮＦ−κＢ活性化抑制
率として算出することにより行った。結果を表１に示
す。尚、シフトしたバンドが目的のものであるか否かを
検証するため、非標識プローブによる競争実験を同時に
行った。
【００３９】
【表１】
【００４０】この結果、本発明のリグナン類が優れたＮ
Ｆ−κＢ活性化抑制作用を有することが判明した。
Ｆ−κＢ活性化抑制作用を有することが判明した。
【００４１】試験例２ ＲＴ−ＰＣＲによるｍＲＮＡ発
現量の解析： ヒトケラチノサイトに紫外線を照射する実験系において
各種遺伝子のｍＲＮＡの発現に対するリグナン類の効果
について評価した。 （ａ）ケラチノサイトの調製 正常ヒトケラチノサイトをＴ−２５フラスコで培養し、
サブコンフルエントに達した後成長因子類を含まない培
地（K-110(-)）（極東製薬（株）製）で１度洗浄し、Ｋ
−１１０（−）（５ml）で１日培養する。その後ＰＢＳ
（−）（５ml）で２度洗浄し、ＰＢＳ（−）（２ml）存
在下、ＵＶＢ（15mJ/cm2）を照射する。照射後ＰＢＳを
除去、Ｋ−１１０（−）を５ml添加し、４時間培養す
る。４時間後細胞をＰＢＳ（−）で洗浄し、Isogen（１
ml）（和光純薬製）を加え、常法に従いトータルＲＮＡ
を抽出した。尚、被験物質（化合物３）（最終濃度100n
M）はＵＶＢ照射の１５時間前に細胞に添加した。
現量の解析： ヒトケラチノサイトに紫外線を照射する実験系において
各種遺伝子のｍＲＮＡの発現に対するリグナン類の効果
について評価した。 （ａ）ケラチノサイトの調製 正常ヒトケラチノサイトをＴ−２５フラスコで培養し、
サブコンフルエントに達した後成長因子類を含まない培
地（K-110(-)）（極東製薬（株）製）で１度洗浄し、Ｋ
−１１０（−）（５ml）で１日培養する。その後ＰＢＳ
（−）（５ml）で２度洗浄し、ＰＢＳ（−）（２ml）存
在下、ＵＶＢ（15mJ/cm2）を照射する。照射後ＰＢＳを
除去、Ｋ−１１０（−）を５ml添加し、４時間培養す
る。４時間後細胞をＰＢＳ（−）で洗浄し、Isogen（１
ml）（和光純薬製）を加え、常法に従いトータルＲＮＡ
を抽出した。尚、被験物質（化合物３）（最終濃度100n
M）はＵＶＢ照射の１５時間前に細胞に添加した。
【００４２】（ｂ）ｃＤＮＡの合成とＲＴ−ＰＣＲ Takara（株）のＲＮＡ ＰＣＲキットを用いて逆転写及
びＰＣＲを行った。トータルＲＮＡ（500ng/3.5μl）
(3.5μl)，２５mM MgCl2(４μl)，１０×ＰＣＲバッフ
ァー（100mM Tris-HCl(pH8.3), 500mM KCl）(2μl), ｄ
ＮＴＰ混合物(2.5mM)(８μl), ＲＮａｓｅインヒビター
（40U/μl)(0.5μl), リバース トランスクリプターゼ
（５U/μl）(1μl), オリゴ d(T)18(50pmol/μl)(1μl)
をＰＣＲチューブ中で混合し、サーマルサイクラーを用
い、４２℃で６０分間、５２℃で３０分間、９９℃で５
分間、４℃で１０分間反応を行いｃＤＮＡを合成した。
ＰＣＲはｃＤＮＡ（４μｌ），２５mM MgCl2（４μ
ｌ），１０×ＰＣＲバッファー（1.6μl），Ｈ2Ｏ（11.
1μl), Ｔａｑポリメラーゼ（５U/μl）(0.1μl), Ｒｅ
ｄｉ Ｌｏａｄ(2μl), ２０uMプライマーＦ，Ｒ（各0.
2μl)を混合し、サーマルサイクラーを用い、（１）９
４℃で１分間、（２）９４℃で１分間、６０℃で２分
間、７２℃で９０秒間を１サイクルとしこれを所定の回
数（15〜40サイクル）繰り返してＤＮＡを増幅し、
（３）４℃で反応を行った。ＰＣＲ増幅産物は１．５％
アガロース／ＴＡＥゲル電気泳動（200V,30分間）に供
し、０．３μl/ml ＥｔＢｒ／ＴＡＥで３０分染色、Ｈ
2Ｏで１５分間洗浄した後、ＦＭ−ＢＩＯ（日立製）に
より解析した。この時、各バンドの濃さを測定し、ＵＶ
Ｂ未照射の値と、照射時の値から各物質で処理した場合
の各遺伝子の発現の程度をｍＲＮＡを抑制率として算出
した。抑制率は無刺激時を１００、刺激時を０として算
出した。その結果を表２に示す。
びＰＣＲを行った。トータルＲＮＡ（500ng/3.5μl）
(3.5μl)，２５mM MgCl2(４μl)，１０×ＰＣＲバッフ
ァー（100mM Tris-HCl(pH8.3), 500mM KCl）(2μl), ｄ
ＮＴＰ混合物(2.5mM)(８μl), ＲＮａｓｅインヒビター
（40U/μl)(0.5μl), リバース トランスクリプターゼ
（５U/μl）(1μl), オリゴ d(T)18(50pmol/μl)(1μl)
をＰＣＲチューブ中で混合し、サーマルサイクラーを用
い、４２℃で６０分間、５２℃で３０分間、９９℃で５
分間、４℃で１０分間反応を行いｃＤＮＡを合成した。
ＰＣＲはｃＤＮＡ（４μｌ），２５mM MgCl2（４μ
ｌ），１０×ＰＣＲバッファー（1.6μl），Ｈ2Ｏ（11.
1μl), Ｔａｑポリメラーゼ（５U/μl）(0.1μl), Ｒｅ
ｄｉ Ｌｏａｄ(2μl), ２０uMプライマーＦ，Ｒ（各0.
2μl)を混合し、サーマルサイクラーを用い、（１）９
４℃で１分間、（２）９４℃で１分間、６０℃で２分
間、７２℃で９０秒間を１サイクルとしこれを所定の回
数（15〜40サイクル）繰り返してＤＮＡを増幅し、
（３）４℃で反応を行った。ＰＣＲ増幅産物は１．５％
アガロース／ＴＡＥゲル電気泳動（200V,30分間）に供
し、０．３μl/ml ＥｔＢｒ／ＴＡＥで３０分染色、Ｈ
2Ｏで１５分間洗浄した後、ＦＭ−ＢＩＯ（日立製）に
より解析した。この時、各バンドの濃さを測定し、ＵＶ
Ｂ未照射の値と、照射時の値から各物質で処理した場合
の各遺伝子の発現の程度をｍＲＮＡを抑制率として算出
した。抑制率は無刺激時を１００、刺激時を０として算
出した。その結果を表２に示す。
【００４３】
【表２】
【００４４】＊：プライマー配列 ＩＬ−６−Ｆ：ＡＴＧＡＡＣＴＣＣＴＴＣＴＣＣＡＣＡ
ＡＧＣＧＣ ＩＬ−６−Ｒ：ＧＡＡＧＡＧＣＣＣＴＣＡＧＧＣＴＧＧ
ＡＣＴＧ （Nature 324, 73-(1986)） ＩＬ−８−Ｆ：ＡＴＧＡＣＴＴＣＣＡＡＧＣＴＧＧＣＣ
ＧＴＧＧＣＴ ＩＬ−８−Ｒ：ＴＣＴＣＡＧＣＣＣＴＣＴＴＣＡＡＡＡ
ＡＣＴＴＣＴＣ （Cytokine 1,2-(1986)） ｉＮＯＳ−Ｆ：ＣＧＧＴＧＣＴＧＴＡＴＴＴＣＣＴＴＡ
ＣＧＡＧＧＣＧＡＡＧＡＡＧＧ ｉＮＯＳ−Ｒ：ＧＧＴＧＣＴＧＣＴＴＧＴＴＡＧＧＡＧ
ＧＴＣＡＡＧＴＡＡＡＧＧＧＣ （Proc. Natl. Acad. Sci., 90, 3491-(1993)） ＣＯＸ−２−Ｆ：ＴＴＣＡＡＡＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＧ
ＧＡＡＡＡＴ ＣＯＸ−２−Ｒ：ＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＴＧＣＣＴＧＡ
ＧＴＡＴＣＴＴ （J. Biol. Chem., 269, 11769-(1994)）
ＡＧＣＧＣ ＩＬ−６−Ｒ：ＧＡＡＧＡＧＣＣＣＴＣＡＧＧＣＴＧＧ
ＡＣＴＧ （Nature 324, 73-(1986)） ＩＬ−８−Ｆ：ＡＴＧＡＣＴＴＣＣＡＡＧＣＴＧＧＣＣ
ＧＴＧＧＣＴ ＩＬ−８−Ｒ：ＴＣＴＣＡＧＣＣＣＴＣＴＴＣＡＡＡＡ
ＡＣＴＴＣＴＣ （Cytokine 1,2-(1986)） ｉＮＯＳ−Ｆ：ＣＧＧＴＧＣＴＧＴＡＴＴＴＣＣＴＴＡ
ＣＧＡＧＧＣＧＡＡＧＡＡＧＧ ｉＮＯＳ−Ｒ：ＧＧＴＧＣＴＧＣＴＴＧＴＴＡＧＧＡＧ
ＧＴＣＡＡＧＴＡＡＡＧＧＧＣ （Proc. Natl. Acad. Sci., 90, 3491-(1993)） ＣＯＸ−２−Ｆ：ＴＴＣＡＡＡＴＧＡＧＡＴＴＧＴＧＧ
ＧＡＡＡＡＴ ＣＯＸ−２−Ｒ：ＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＴＧＣＣＴＧＡ
ＧＴＡＴＣＴＴ （J. Biol. Chem., 269, 11769-(1994)）
【００４５】この結果、本発明のリグナン類が優れた炎
症性メディエーター遺伝子発現調節作用を有することが
判明した。
症性メディエーター遺伝子発現調節作用を有することが
判明した。
【００４６】試験例３ ノーザンブロットによる細胞接
着分子ｍＲＮＡ発現量の解析： 血管内皮細胞における細胞接着分子ｍＲＮＡの発現とリ
グナン類の効果につきノーザンブロットにより解析し
た。 （ａ）血管内皮細胞の調製 コラーゲン（Ｉ）コートしたＴ−７５フラスコ内にてＥ
−３００培地中でコンフルエントとなった正常ヒト臍帯
由来血管内皮細胞に、被験物質（化合物３：最終濃度10
0nM）を添加する。１５時間後にヒトＴＮＦαを最終濃
度１．２５ng／mlとなるよう添加し、３時間培養する。
培養液除去後ＰＢＳ（−）にて洗浄し、Invitrogen社製
Micro-Fast Track mRNA Isolationキットを用いてPoly
−Ａ+ＲＮＡを単離した。
着分子ｍＲＮＡ発現量の解析： 血管内皮細胞における細胞接着分子ｍＲＮＡの発現とリ
グナン類の効果につきノーザンブロットにより解析し
た。 （ａ）血管内皮細胞の調製 コラーゲン（Ｉ）コートしたＴ−７５フラスコ内にてＥ
−３００培地中でコンフルエントとなった正常ヒト臍帯
由来血管内皮細胞に、被験物質（化合物３：最終濃度10
0nM）を添加する。１５時間後にヒトＴＮＦαを最終濃
度１．２５ng／mlとなるよう添加し、３時間培養する。
培養液除去後ＰＢＳ（−）にて洗浄し、Invitrogen社製
Micro-Fast Track mRNA Isolationキットを用いてPoly
−Ａ+ＲＮＡを単離した。
【００４７】得られたｍＲＮＡはアガロースゲル電気泳
動に供した後、Hybond−Ｎ+ ナイロン膜（アマシャム社
製）に転写、ＵＶ固定を行いフィルターを作成した。次
いで鮭精子ＤＮＡで６時間プレハイブリダイゼーション
を行った後、ELAM-1, ICAM-1GAPDH（Takara（株）製）
の32Ｐ−ｃＤＮＡプローブと４２℃で１８時間ハイブリ
ダイズした。終了後フィルターは２Ｘ−ＳＳＣ−０．２
％ＳＤＳ溶液にて洗浄し、ＢＡＳ２０００によりｍＲＮ
Ａ発現量を解析した。この時、各バンドの濃さを測定
し、ＵＶＢ未照射の値と、照射時の値から各物質で処理
した場合の各遺伝子の発現の程度を抑制率として算出し
た。その結果を表３に示す。
動に供した後、Hybond−Ｎ+ ナイロン膜（アマシャム社
製）に転写、ＵＶ固定を行いフィルターを作成した。次
いで鮭精子ＤＮＡで６時間プレハイブリダイゼーション
を行った後、ELAM-1, ICAM-1GAPDH（Takara（株）製）
の32Ｐ−ｃＤＮＡプローブと４２℃で１８時間ハイブリ
ダイズした。終了後フィルターは２Ｘ−ＳＳＣ−０．２
％ＳＤＳ溶液にて洗浄し、ＢＡＳ２０００によりｍＲＮ
Ａ発現量を解析した。この時、各バンドの濃さを測定
し、ＵＶＢ未照射の値と、照射時の値から各物質で処理
した場合の各遺伝子の発現の程度を抑制率として算出し
た。その結果を表３に示す。
【００４８】
【表３】
【００４９】この結果、本発明のリグナン類が優れた細
胞接着分子遺伝子発現抑制作用を有することが判明し
た。
胞接着分子遺伝子発現抑制作用を有することが判明し
た。
【００５０】以上のように、本発明のリグナンは優れた
ＮＦ−κＢ活性化抑制作用と、炎症及び癌転移に深く関
与する遺伝子の発現調節作用を有しており、それに基づ
き抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症の予防・改善剤、成
人病予防剤、癌転移抑制剤として有効に用いることがで
きる。
ＮＦ−κＢ活性化抑制作用と、炎症及び癌転移に深く関
与する遺伝子の発現調節作用を有しており、それに基づ
き抗ヒト免疫不全ウイルス剤、炎症の予防・改善剤、成
人病予防剤、癌転移抑制剤として有効に用いることがで
きる。
【００５１】実施例１ 注射剤 下記成分を注射用蒸留水５mlに溶解し、加熱滅菌して注
射剤を製造した。 （組成） （mg） 化合物３ １５ ブドウ糖 １００
射剤を製造した。 （組成） （mg） 化合物３ １５ ブドウ糖 １００
【００５２】実施例２ 注射剤 下記成分を注射用蒸留水５mlに溶解し、加熱滅菌して注
射剤を製造した。 （組成） （mg） 化合物３ １５ 没食子酸オクチル １５ ブドウ糖 １００
射剤を製造した。 （組成） （mg） 化合物３ １５ 没食子酸オクチル １５ ブドウ糖 １００
【００５３】実施例３ ローション 下記成分を常法に従って混合し、ローションを製造し
た。 （組成） （ｇ） 化合物１ １ グリセリンモノステアレート １ エタノール １５ プロピレングリコール ４ イソプロピルパルミテート ３ ラノリン １ セラミド ０．５ パラオキシ安息香酸メチル ０．１ ビタミンＣ ０．５ 香料 微 量 色素 微 量 精製水 ７２
た。 （組成） （ｇ） 化合物１ １ グリセリンモノステアレート １ エタノール １５ プロピレングリコール ４ イソプロピルパルミテート ３ ラノリン １ セラミド ０．５ パラオキシ安息香酸メチル ０．１ ビタミンＣ ０．５ 香料 微 量 色素 微 量 精製水 ７２
【００５４】実施例４ 錠剤 下記成分を用い、常法に従って、直径９mm、重量２００
mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） 化合物１ １０００ ヒドロキシプロピルセルロース ８００ 軽質無水ケイ酸 ２００ 乳糖 ５００ 結晶セルロース ５００ タルク ５００
mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） 化合物１ １０００ ヒドロキシプロピルセルロース ８００ 軽質無水ケイ酸 ２００ 乳糖 ５００ 結晶セルロース ５００ タルク ５００
【００５５】実施例５ 硬カプセル剤用充填薬剤 下記成分を用い、常法に従って、硬カプセル剤用充填薬
剤を製造した。 （組成） （ｇ） 化合物２ １０００ 結晶セルロース １０００ 乳糖 １５００ 軽質無水ケイ酸 ２００
剤を製造した。 （組成） （ｇ） 化合物２ １０００ 結晶セルロース １０００ 乳糖 １５００ 軽質無水ケイ酸 ２００
【００５６】実施例６ 顆粒剤 下記成分を用い、常法に従って、顆粒剤を製造した。 （組成） （ｇ） 化合物１ ２００ 乳糖 ２００ ヒドロキシプロピルセルロース ３００ タルク １５
【００５７】実施例７ クリーム 下記成分を常法に従って混合し、クリームを製造した。 （組成） （重量％） 化合物３ １．０ コレステロール ０．５ コレステリルイソステアレート １．０ ポリエーテル変性シリコーン １．５ 環状シリコーン ２０．０ メチルフェニルポリシロキサン ２．０ メチルポリシロキサン ２．０ 硫酸マグネシウム ０．５ ビタミンＣ ０．２ ５５％エタノール ５．０ カルボキシメチルキチン ０．５ 精製水 残 量 計 １００．０
【００５８】実施例８ 軟膏 下記成分を常法に従って混合し、軟膏を製造した。 （組成） （重量％） 化合物３ ３ コレステリルイソステアレート ３ 流動パラフィン １０ α−トコフェロール ０．１ グリセリルエーテル １ グリセリン １０ 白色ワセリン 残 量 計 １００．０
【００５９】実施例９ クリーム 下記成分を常法に従って混合し、クリームを製造した。 （組成） （重量％） 化合物４ １．０ コレステロール ０．５ コレステリルイソステアレート １．０ ポリエーテル変性シリコーン １．５ 環状シリコーン ２０．０ メチルフェニルポリシロキサン ２．０ メチルポリシロキサン ２．０ 硫酸マグネシウム ０．５ ５５％エタノール ５．０ カルボキシメチルキチン ０．５ グリチルリチン酸ジカリウム ０．５ 精製水 残 量 計 １００．０
【００６０】実施例１０ 錠剤 下記成分を用い、常法に従って錠剤を製造した。 （組成） （mg） 化合物３ ２０ デンプン １３０ ステアリン酸マグネシウム １０ 乳糖 ４０ 計 ２００
【００６１】実施例１１ 錠剤 下記成分を均一に混合し、打錠機にて圧縮成型して１錠
２００mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） コーンスターチ ４４．０ 結晶セルロース ４０．０ カルボキシメチルセルロースカルシウム ５．０ 軽質無水ケイ酸 ０．５ ステアリン酸マグネシウム ０．５ 化合物３ １０．０ 計 １００．０
２００mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） コーンスターチ ４４．０ 結晶セルロース ４０．０ カルボキシメチルセルロースカルシウム ５．０ 軽質無水ケイ酸 ０．５ ステアリン酸マグネシウム ０．５ 化合物３ １０．０ 計 １００．０
【００６２】実施例１２ 錠剤 下記処方に従い、（１）、（４）及び（２）の一部を均
一に混合して圧縮成型した後粉砕し、（３）及び（２）
の残量を加えて混合し、打錠機にて圧縮成型して１錠２
００mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） （１）結晶セルロース ８４．５ （２）ステアリン酸マグネシウム ０．５ （３）カルボキシメチルセルロースカルシウム ５．０ （４）化合物１ １０．０ 計 １００．０
一に混合して圧縮成型した後粉砕し、（３）及び（２）
の残量を加えて混合し、打錠機にて圧縮成型して１錠２
００mgの錠剤を製造した。 （組成） （ｇ） （１）結晶セルロース ８４．５ （２）ステアリン酸マグネシウム ０．５ （３）カルボキシメチルセルロースカルシウム ５．０ （４）化合物１ １０．０ 計 １００．０
【００６３】実施例１３ 顆粒剤 下記成分を均一に混合し、捏和し、押出し造粒機により
造粒後、乾燥し、篩別して、顆粒剤を製造した。 （組成） （ｇ） 結晶セルロース ５５ １０％ヒドロキシプロピルセルロース エタノール溶液 ３５ 化合物４ １０ 計 １００
造粒後、乾燥し、篩別して、顆粒剤を製造した。 （組成） （ｇ） 結晶セルロース ５５ １０％ヒドロキシプロピルセルロース エタノール溶液 ３５ 化合物４ １０ 計 １００
【００６４】実施例１４ カプセル剤 下記成分を均一に混合し、２００mgを２号カプセルに充
填した。 （組成） （ｇ） コーンスターチ ８９．５ 軽質無水ケイ酸 ０．５ 化合物３ １０．０ 計 １００．０
填した。 （組成） （ｇ） コーンスターチ ８９．５ 軽質無水ケイ酸 ０．５ 化合物３ １０．０ 計 １００．０
【００６５】実施例１５ 注射剤 下記処方に従い、（５）を（１）及び（３）溶解し、こ
れに（２）と（４）の溶液を加えて乳化し、注射剤を製
造した。 （組成） （ｇ） （１）大豆油 ５．０ （２）注射用蒸留水 ８９．５ （３）大豆リン脂質 ２．５ （４）グリセリン ２．０ （５）化合物３ １．０ 計 １００．０
れに（２）と（４）の溶液を加えて乳化し、注射剤を製
造した。 （組成） （ｇ） （１）大豆油 ５．０ （２）注射用蒸留水 ８９．５ （３）大豆リン脂質 ２．５ （４）グリセリン ２．０ （５）化合物３ １．０ 計 １００．０
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/36 ＡＣＳ Ａ６１Ｋ 31/36 ＡＣＳ ＡＣＶ ＡＣＶ ＡＤＡ ＡＤＡ ＡＤＵ ＡＤＵ ＡＤＹ ＡＤＹ ＡＧＺ ＡＧＺ Ｃ０７Ｄ 493/04 １０１ Ｃ０７Ｄ 493/04 １０１Ａ
Claims (6)
- 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 （式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 及びＲ4 は同一又は異なって水
素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ヒドロキシアル
キル基又はアルコキシ基を示す）で表されるリグナン類
を有効成分とするＮＦ−κＢ活性化抑制剤。 - 【請求項２】 請求項１記載のリグナン類を有効成分と
するインターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイ
キン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−６（ＩＬ−
６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロ
イキン−１２（ＩＬ−１２）、インターフェロン−β
（ＩＦＮ−β）、ＮＯ合成酵素（ｉＮＯＳ）、腫瘍壊死
因子（ＴＮＦ）、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−
２）、ＥＬＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ−１、マ
トリクスメタロプロテアーゼ−９（ＭＭＰ−９）、Ｇ−
ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦより選ばれる１又は２以上の物質
の遺伝子発現調節剤。 - 【請求項３】 請求項１記載のリグナン類を有効成分と
する抗ヒト免疫不全ウイルス剤。 - 【請求項４】 請求項１記載のリグナン類を有効成分と
する炎症予防・改善剤。 - 【請求項５】 請求項１記載のリグナン類を有効成分と
する成人病予防・改善剤。 - 【請求項６】 請求項１記載のリグナン類を有効成分と
する癌転移抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33539696A JP4167733B2 (ja) | 1996-12-16 | 1996-12-16 | ＮＦ−κＢ活性化抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33539696A JP4167733B2 (ja) | 1996-12-16 | 1996-12-16 | ＮＦ−κＢ活性化抑制剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10175861A true JPH10175861A (ja) | 1998-06-30 |
| JP4167733B2 JP4167733B2 (ja) | 2008-10-22 |
Family
ID=18288083
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP33539696A Expired - Fee Related JP4167733B2 (ja) | 1996-12-16 | 1996-12-16 | ＮＦ−κＢ活性化抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4167733B2 (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003011276A1 (fr) * | 2001-07-26 | 2003-02-13 | M's Science Corporation | Inhibiteur nf$g(k)b |
| JP2005162653A (ja) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Kao Corp | 歯周病予防又は治療用組成物 |
| JP2005162654A (ja) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Kao Corp | 歯周病予防又は治療用組成物 |
| JP2005529123A (ja) * | 2002-04-24 | 2005-09-29 | リサーチ ディベロップメント ファンデーション | 核転写調節因子ＮＦ−κＢ抑制剤と抗腫瘍薬の相乗効果 |
| US7320996B2 (en) | 2001-08-15 | 2008-01-22 | Sugen, Inc | Indolinone protein kinase inhibitors and cyclooxygenase inhibitors for use in combination therapy for the treatment of cancer |
| JP2009240327A (ja) * | 1997-08-13 | 2009-10-22 | Mate Hidvegi | 免疫刺激及び転移阻害用の発酵植物性材料 |
| US7790738B2 (en) | 2000-07-20 | 2010-09-07 | Lauras As | Methods of treating and preventing AIDS using of COX-2 inhibitors |
| US7846422B2 (en) | 2003-08-04 | 2010-12-07 | Kao Corporation | Method for prevention or treatment of periodontal diseases and composition for an oral cavity |
| WO2013161821A1 (ja) | 2012-04-24 | 2013-10-31 | 花王株式会社 | Ｃｇｒｐ応答性促進剤 |
| JP2014210753A (ja) * | 2013-04-22 | 2014-11-13 | 花王株式会社 | アスナロエキスの製造方法 |
| WO2017179914A1 (ko) * | 2016-04-15 | 2017-10-19 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 바이오틴이 결합된 카페인산 화합물을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 |
| JP2017227714A (ja) * | 2016-06-21 | 2017-12-28 | コニカミノルタ株式会社 | 画像形成装置 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10064800B2 (en) | 2012-08-29 | 2018-09-04 | Kao Corporation | Transglutaminase activator |
-
1996
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Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009240327A (ja) * | 1997-08-13 | 2009-10-22 | Mate Hidvegi | 免疫刺激及び転移阻害用の発酵植物性材料 |
| US7790738B2 (en) | 2000-07-20 | 2010-09-07 | Lauras As | Methods of treating and preventing AIDS using of COX-2 inhibitors |
| JPWO2003011276A1 (ja) * | 2001-07-26 | 2004-11-18 | 株式会社エムズサイエンス | ＮＦκＢ阻害剤 |
| WO2003011276A1 (fr) * | 2001-07-26 | 2003-02-13 | M's Science Corporation | Inhibiteur nf$g(k)b |
| US7320996B2 (en) | 2001-08-15 | 2008-01-22 | Sugen, Inc | Indolinone protein kinase inhibitors and cyclooxygenase inhibitors for use in combination therapy for the treatment of cancer |
| JP2005529123A (ja) * | 2002-04-24 | 2005-09-29 | リサーチ ディベロップメント ファンデーション | 核転写調節因子ＮＦ−κＢ抑制剤と抗腫瘍薬の相乗効果 |
| US7846422B2 (en) | 2003-08-04 | 2010-12-07 | Kao Corporation | Method for prevention or treatment of periodontal diseases and composition for an oral cavity |
| JP2005162654A (ja) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Kao Corp | 歯周病予防又は治療用組成物 |
| JP2005162653A (ja) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Kao Corp | 歯周病予防又は治療用組成物 |
| WO2013161821A1 (ja) | 2012-04-24 | 2013-10-31 | 花王株式会社 | Ｃｇｒｐ応答性促進剤 |
| JP2013227234A (ja) * | 2012-04-24 | 2013-11-07 | Kao Corp | Ｃｇｒｐ応答性促進剤 |
| JP2014210753A (ja) * | 2013-04-22 | 2014-11-13 | 花王株式会社 | アスナロエキスの製造方法 |
| WO2017179914A1 (ko) * | 2016-04-15 | 2017-10-19 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 바이오틴이 결합된 카페인산 화합물을 유효성분으로 함유하는 통풍 예방 또는 치료용 조성물 |
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