JPH09238697A - マイタケから抽出した抗腫瘍物質 - Google Patents
マイタケから抽出した抗腫瘍物質Info
- Publication number
- JPH09238697A JPH09238697A JP8051880A JP5188096A JPH09238697A JP H09238697 A JPH09238697 A JP H09238697A JP 8051880 A JP8051880 A JP 8051880A JP 5188096 A JP5188096 A JP 5188096A JP H09238697 A JPH09238697 A JP H09238697A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alcohol
- solution
- maitake
- sugar
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 240000001080 Grifola frondosa Species 0.000 title claims abstract description 25
- 235000007710 Grifola frondosa Nutrition 0.000 title claims abstract description 25
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title abstract description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 11
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000097863 Grifola umbellata Species 0.000 claims description 3
- 235000002897 Grifola umbellata Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 abstract 2
- 230000002434 immunopotentiative effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- 238000010600 3H thymidine incorporation assay Methods 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 238000011735 C3H mouse Methods 0.000 description 1
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N [6-(4-acetyloxy-5,9a-dimethyl-2,7-dioxo-4,5a,6,9-tetrahydro-3h-pyrano[3,4-b]oxepin-5-yl)-5-formyloxy-3-(furan-3-yl)-3a-methyl-7-methylidene-1a,2,3,4,5,6-hexahydroindeno[1,7a-b]oxiren-4-yl] 2-hydroxy-3-methylpentanoate Chemical compound CC12C(OC(=O)C(O)C(C)CC)C(OC=O)C(C3(C)C(CC(=O)OC4(C)COC(=O)CC43)OC(C)=O)C(=C)C32OC3CC1C=1C=COC=1 OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000011869 dried fruits Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/37—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi
- C07K14/375—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi from Basidiomycetes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
分画した高度に免疫賦活化作用を有する抗腫瘍物質を提
供することである。 【解決手段】 アルコ−ルを20〜70%の最終容量濃
度になる様添加(低濃度添加)し、浮遊物又は付着物を
除去することによって、抗腫瘍活性、免疫賦活力を高め
ることができる。
Description
あるいは子実体から抽出、分画した高度に免疫賦活化作
用を有する抗腫瘍物質に関する。
出したβー1,6結合を主鎖とし、1,3の分岐鎖を持
つ多糖体又はβー1,3結合を主鎖とし1,6の分岐鎖
を持つ多糖体が免疫賦活化作用を有することが知られて
いる。(特開昭59−210901号公報参照)
ケのいずれかを熱水にて抽出し、これを減圧にて濃縮し
た後、有機溶媒による沈殿工程、透析工程による低分子
物質の除去及び脂溶性有機溶媒による不純物の抽出除去
工程を組み合わせて行うことを特徴とする制癌物質の製
造法も公知である。(特公昭43−16047号公報参
照)
て、特開昭59−21090号公報記載のもの及び特公
昭43−16047号公報に記載のものは、精製がかな
り繁雑な工程を経なければならず、又免疫賦活化作用を
阻害する物質も含まれるため、限られた資源を用いて効
率よく、できる限り大量に、医薬品や健康食品を供する
には必ずしも適切ではない。
マイタケの抽出方法とその過程で得られる各種抽出物に
ついて種々研究を行った結果、より優れた免疫賦活作用
を有する抗腫瘍物質を効率よく得ることが可能となっ
た。その主たる特徴は、マイタケの菌糸体もしくは子実
体を水で熱抽出処理して得られる抽出水溶性画分にアル
コ−ルを20〜70%の最終容量濃度になる様添加(低
濃度添加)し、浮遊物又は付着物を除去することによっ
て、抗腫瘍活性、免疫賦活力を高めることである。
しくは子実体を水で熱抽出処理する工程と(2)得られ
た抽出水溶性画分にアルコ−ルを20〜70%の最終容
量濃度になる様添加し(低濃度添加)1〜25℃の温度
で放置し、液面もしくは液中に浮遊又は容器の壁面に付
着する物質を除去する工程と(3)その後溶液に最終容
量濃度80〜99%迄アルコ−ルを添加し(高濃度添
加)1〜25℃に放置して析出する沈殿物を採取するか
又は(2)の工程後通常の方法でアルコ−ル溶液を濃縮
して沈殿を析出させるかもしくは濃縮乾固させる工程か
らなる免疫を賦活化する糖−タンパク複合体及びそれを
有効成分とする抗腫瘍剤に関する。
rifora frondosa)、白マイタケ(Gr
ifora albicans Imaz.)、チョレ
イマイタケ(Dendropolyporus umb
ellatus)等いずれも用いることができ、使用形
態としては生のものはそのままもしくは適宜カットした
状態で、乾燥したものは同様そのまま、適宜カットした
状態、もしくは粉末で使用することができる。
℃で15分から3時間行う。短時間で行うには、圧力下
100℃以上、例えば圧力釜を用いて1〜2気圧下12
0℃前後で30分〜1時間前後で抽出を行う。
水、水道水等を使用する。乾燥マイタケ1重量に対して
4〜20倍容量程度を使用する。生マイタケを使用する
場合は、1重量に対して2〜10倍容量程度使用する。
ルとしてはメタノ−ル、エタノ−ル等使用しうる。抽出
液に対して最終容量濃度で20〜70%になるように添
加する。水分含量0〜50%アルコ−ルが使用できる。
添加後は1〜25℃の温度で1〜20時間放置すると液
面もしくは液中に浮遊又は容器の壁面に付着する物質が
現れるので濾過、ピペッティング或いは網状のもので掬
う等により採取除去する。
抗腫瘍活性、免疫賦活力が高まることから、該物質を除
去する工程は極めて重要なプロセスである。そして、そ
のためにはアルコ−ルの最終容量濃度が20〜70%、
好ましくは30〜60%という低濃度にする段階を経る
ことが必須である。
を最終容量濃度80〜99%になる様添加(高濃度添
加)して後1〜25℃に放置して目的物を析出させるか
又は(2)の工程で得られた溶液を加熱濃縮して析出も
しくは乾固させる。
て記載する。 外観: 褐色系色調の吸湿性粉末 溶解性:水、アルカリ性溶液及びジメチルスルフオキシ
ドに溶解 呈色反応:アンスロン反応及びニンヒドリン反応が陽性 水溶液の液性:中性〜弱酸性 分子量:100万前後に分布
糖質とタンパク質からなる。カラムクロマト法で精製し
たところ本発明によって得られる免疫賦活作用を有する
抗腫瘍物質の主たる成分は糖−タンパク複合体であると
認められ、糖とタンパク質の比率は主に80:20〜9
9:1の範囲で、原料マイタケの品質、抽出精製の条件
等により適宜変動する。
60分間熱抽出処理を行い、得られた可溶性画分950
mlにエタノ−ルを最終容量濃度60%になるよう添加
する。該溶液を4℃で12時間静置すると液面もしくは
液中に浮遊または容器の壁面に付着する飴状、茶褐色の
物質が生成した。この物質をピペッティングにより除去
し、次いでエタノ−ルを最終容量濃度が80%以上にな
るように加え、低温下4℃に静置して茶褐色〜黒色の物
質3gを得た。該物質はアンスロン反応及びニンヒドリ
ン反応ともに陽性であり、カラムクロマト法で精製した
ところ、糖−タンパク複合体であることが認められ糖と
タンパク質の比率は96:4であった。
ラムを用いたゲル濾過クロマトグラフィ−により検討し
た結果100万前後に分布していることが分かった。糖
質を加水分解し、高速液体クロマトグラフ法により中性
単糖類の定性試験を行った結果、グルコ−スのみが検出
された。
しトリプトファンは高速液体クロマトグラフ法)により
グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン、ロイシン、
リジン、グリシン、イソロイシン、セリン、バリン、プ
ロリン、スレオニン、アルギニン、フェニルアラニン、
チロシン、ヒスチジン、トリプトファン、メチオニン、
シスチン等から構成されていることが分かった。
〜70%最終容量濃度)添加により液面もしくは液中に
浮遊又は壁面に付着する物質を除去しなかった溶液の乾
固物質をBとし、A、Bそれぞれ生理食塩水に溶かして
MM−46カルシノマを移植したC3Hマウスに体重当
たり0.1mg/kg10回腹腔内投与し、腫瘍の増殖
に及ぼす作用を検討し表1の結果を得た。
/コントロ−ル群の平均腫瘍重量(g))〕×100
に強い腫瘍増殖抑制効果を示した。また、対照群(生理
食塩水のみ)、A物質投与群、B物質投与群から検体投
与終了後5日目にマクロファ−ジ、キラ−T細胞を採取
し細胞性免疫担当細胞の活性を観るため3H−チミジン
の取込量率を測定した結果を表2に示す。
腫瘍活性及び免疫賦活化作用を示すことが認められた。
20〜70%アルコ−ル添加によって生ずる液面もしく
は液中に浮遊、又は容器の壁面に付着する物質を除去す
ることによって、免疫賦活化作用や腫瘍増殖抑制作用の
増強を示すものである。
ンを抽出するものではなく、限られた資源から効率良く
簡便な方法で高度に免疫賦活化作用を有する糖−タンパ
ク複合体を得ることを見出したものである。
く、安全性の高い物質であり、錠剤、カプセル、液剤も
しくはシロップ等の剤形で健康食品、医薬品として経口
投与することができる。
rifola frondosa)、白マイタケ(Gr
ifola albicans Imaz.)、チョレ
イマイタケ(Dendropolyporus umb
ellatus)等いずれも用いることができ、使用形
態としては生のものはそのままもしくは適宜カットした
状態で、乾燥したものは同様そのまま、適宜カットした
状態、もしくは粉末で使用することができる。
Claims (6)
- 【請求項1】(1)マイタケの菌糸体もしくは子実体を
水で熱抽出処理する工程と、(2)得られた抽出水溶性
画分にアルコ−ルを20〜70%の最終容量濃度になる
様添加し、1〜25℃の温度で放置し、液面もしくは液
中に浮遊または容器の壁面に付着する物質を除去する工
程と、(3)その後該溶液に最終容量濃度80〜99%
迄アルコ−ルを添加し、1〜25℃に放置して析出する
沈殿物を採取する工程と、によって製造された糖−タン
パク複合体。 - 【請求項2】(1)マイタケの菌糸体もしくは子実体を
水で熱抽出処理する工程と、(2)得られた抽出水溶性
画分にアルコ−ルを20〜70%の最終容量濃度になる
様添加し、1〜25℃の温度で放置し、液面もしくは液
中に浮遊または容器の壁面に付着する物質を除去する工
程と、(3)その後該溶液を濃縮して沈殿を析出させる
かもしくは濃縮乾固させる工程と、によって製造された
糖−タンパク複合体。 - 【請求項3】 糖とタンパク質の比率が80:20〜9
9:1の割合である請求項1又は2に記載の糖−タンパ
ク複合体。 - 【請求項4】 請求項1または請求項2に記載の糖−タ
ンパク複合体を有効成分として含有する免疫賦活化作用
を有する抗腫瘍剤。 - 【請求項5】 マイタケがマイタケ(Grifora
frondosa)、白マイタケ(Grifora a
lbicans Imaz.)、チョレイマイタケ(D
endropolyporus umbellatu
s)である請求項1又は2に記載の糖−タンパク複合
体。 - 【請求項6】 マイタケの菌糸体もしくは子実体を水で
熱抽出処理して得られる抽出水溶性画分へのアルコ−ル
の添加が最終容量濃度30〜60%になるようにした請
求項1又は2に記載の糖−タンパク複合体。
Priority Applications (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP8051880A JP2859843B2 (ja) | 1996-03-08 | 1996-03-08 | マイタケから抽出した抗腫瘍物質 |
US08/812,795 US5854404A (en) | 1996-03-08 | 1997-03-06 | Antitumor substance extracted from grifola |
AU22329/97A AU2232997A (en) | 1996-03-08 | 1997-03-07 | Antitumor substance extracted from hen-of-the-woods |
DE69730420T DE69730420T2 (de) | 1996-03-08 | 1997-03-07 | Antitumorsubstanz extrahiert aus grifola frondosa |
EP97905467A EP0893449B1 (en) | 1996-03-08 | 1997-03-07 | Antitumor substance extracted from hen-of-the-woods |
CN97192894A CN1120173C (zh) | 1996-03-08 | 1997-03-07 | 从树花菌提取的抗肿瘤物质 |
PCT/JP1997/000728 WO1997032896A1 (fr) | 1996-03-08 | 1997-03-07 | Substance antitumorale extraite de polypore en touffe |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP8051880A JP2859843B2 (ja) | 1996-03-08 | 1996-03-08 | マイタケから抽出した抗腫瘍物質 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH09238697A true JPH09238697A (ja) | 1997-09-16 |
JP2859843B2 JP2859843B2 (ja) | 1999-02-24 |
Family
ID=12899202
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP8051880A Expired - Lifetime JP2859843B2 (ja) | 1996-03-08 | 1996-03-08 | マイタケから抽出した抗腫瘍物質 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5854404A (ja) |
EP (1) | EP0893449B1 (ja) |
JP (1) | JP2859843B2 (ja) |
CN (1) | CN1120173C (ja) |
AU (1) | AU2232997A (ja) |
DE (1) | DE69730420T2 (ja) |
WO (1) | WO1997032896A1 (ja) |
Cited By (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2001097881A (ja) * | 1999-09-28 | 2001-04-10 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケ由来の発がん防止剤及び発がん防止用食品又は飼料 |
JP2001172194A (ja) * | 1999-12-17 | 2001-06-26 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケ由来のno産生誘導剤 |
CN1120173C (zh) * | 1996-03-08 | 2003-09-03 | 株式会社雪国梅泰克 | 从树花菌提取的抗肿瘤物质 |
US6616928B1 (en) | 1998-10-20 | 2003-09-09 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | Active oxygen scavenger and cancer chemopreventer from Grifola |
JP2004331525A (ja) * | 2003-05-01 | 2004-11-25 | Yukiguni Maitake Co Ltd | 神経栄養因子様作用物質 |
JP2005145934A (ja) * | 2003-11-19 | 2005-06-09 | Yukiguni Maitake Co Ltd | 抗インフルエンザウイルス活性化物質 |
KR100501039B1 (ko) * | 2000-08-23 | 2005-07-18 | 한국 한의학 연구원 | 잎새버섯 추출물을 포함하는 화학요법 항암제시스플라틴의 부작용 억제제 |
WO2006095457A1 (ja) * | 2005-03-04 | 2006-09-14 | Michio Tani | 悪性腫瘍治療剤及びそれを含む飲食品 |
JP2007031665A (ja) * | 2005-07-29 | 2007-02-08 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケから抽出した糖―タンパク複合体 |
KR100729213B1 (ko) * | 2005-07-29 | 2007-06-19 | 주식회사 라이벌코리아 | 면역 증강 활성을 갖는 잎새 버섯의 액체배양물로부터분리한 세포외 생체고분자 |
KR100740893B1 (ko) * | 2001-04-19 | 2007-07-19 | 충남대학교산학협력단 | 단백다당체 kgf-1를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물 |
WO2008050910A1 (fr) | 2006-10-27 | 2008-05-02 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | Substance originaire de grifola frondosa ayant une activite contre le virus de la grippe et procede de production de cette substance |
WO2008081607A1 (ja) | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 離乳期子豚における疾病予防方法 |
WO2008081608A1 (ja) | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 母豚の飼育方法 |
JP2008255138A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Kobayashi Pharmaceut Co Ltd | Th1/Th2バランス改善剤 |
WO2009102008A1 (ja) | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 免疫賦活作用および抗腫瘍作用を有するマイタケ由来の低分子物質 |
WO2011108686A1 (ja) * | 2010-03-04 | 2011-09-09 | 株式会社雪国まいたけ | マイタケ属キノコ由来の食後過血糖の上昇を抑制する物質 |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20040213856A1 (en) * | 2000-04-29 | 2004-10-28 | Scheinbart Eric A | Compositions and methods for treatment of multiple myeloma |
US7507724B2 (en) * | 2001-01-16 | 2009-03-24 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Therapy-enhancing glucan |
AU2002322702A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-02-17 | Tanical Therapeutics, Inc. | Grifola extracts and methods of use thereof |
US7354590B2 (en) * | 2003-04-09 | 2008-04-08 | Jarrow Formulas, Inc. | Methods of producing edible fungi containing activated folates and nutritional supplements containing activated folates |
US7214778B2 (en) * | 2003-07-18 | 2007-05-08 | Masaki Shirota | Glycoprotein with antidiabetic, antihypertensive, antiobesity and antihyperlipidemic effects from Grifola frondosa, and a method for preparing same |
CN1322141C (zh) * | 2004-09-22 | 2007-06-20 | 中国食品发酵工业研究院 | 酶解制备灰树花多糖的方法 |
US7597910B2 (en) * | 2005-08-20 | 2009-10-06 | Slgm Medical Research Institute | Compositions and methods for treating prostate disorders |
US20100178279A1 (en) * | 2009-01-15 | 2010-07-15 | Cornell University | Beta-Glucan Enhances Hematopoietic Progenitor Cells Engraftment and Promotes Recovery from Chemotoxicity |
US8597697B2 (en) | 2011-06-24 | 2013-12-03 | Nutragenesis, Llc | Composition of beta-glucan and ashwagandha |
CN103059160B (zh) * | 2011-10-20 | 2015-12-02 | 中国科学院上海药物研究所 | β-葡聚糖GFPBW1及其制备方法和用途 |
CN103304680B (zh) * | 2012-03-09 | 2017-02-08 | 中国科学院上海药物研究所 | 一种β‑葡聚糖、其提取方法及用途 |
CA2877329C (en) | 2012-07-05 | 2020-01-07 | Nutramax Laboratories, Inc. | Compositions comprising sulforaphane or a sulforaphane precursor and magnesium |
CN104825499B (zh) * | 2014-10-28 | 2020-04-03 | 云南大学 | 舞茸提取物在制备抗抑郁症药物中的用途 |
CN104906150A (zh) * | 2015-06-10 | 2015-09-16 | 云南大学 | 灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途 |
WO2016066102A1 (zh) * | 2014-10-28 | 2016-05-06 | 云南大学 | 舞茸及舞茸多糖d组分在制备抗抑郁药物中的用途 |
CN107541533B (zh) * | 2017-06-13 | 2021-03-19 | 湖南民康生物技术研究所 | 一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法 |
CN108586590B (zh) * | 2018-04-26 | 2020-11-10 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 灰树花及灰树花多糖肽在促进体内汞排出上的应用 |
CA3220362A1 (en) | 2021-05-26 | 2022-12-01 | Brian CORNBLATT | Compositions comprising sulforaphane or a sulforaphane precursor and moringa plant components |
CN114230646B (zh) * | 2021-12-07 | 2023-07-04 | 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种抗肿瘤灰树花糖蛋白及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS59210901A (ja) * | 1983-05-17 | 1984-11-29 | Nippon Kinoko Kenkyusho | プロテオグルカン及びそれからなる抗ガン剤 |
JPS60255733A (ja) * | 1984-05-30 | 1985-12-17 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | β−D−グルカン |
JPS62209091A (ja) * | 1986-03-08 | 1987-09-14 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | 抗腫瘍活性多糖 |
JP2753935B2 (ja) * | 1993-04-30 | 1998-05-20 | 株式会社雪国まいたけ | 免疫抑制剤の製造方法 |
JP2905911B2 (ja) * | 1993-09-02 | 1999-06-14 | 株式会社雪国まいたけ | Aidsにおけるヘルパーt細胞数の減少抑制若しくは増加剤 |
JPH08119874A (ja) * | 1994-10-24 | 1996-05-14 | Takumi Sogabe | エイズウィルス・癌細胞の抑制剤の製造方法 |
JPH08131133A (ja) * | 1994-11-09 | 1996-05-28 | Nippon Chrome Kogyo Kk | マイタケエキスを含有した健康飲料の製造方法 |
JPH08291078A (ja) * | 1995-04-21 | 1996-11-05 | M I O:Kk | 高血圧及び高脂血症の予防・治療に有効で且つ抗腫瘍作用を有する飲食用キノコタンパク質、及び肥満の予防・治療に有効で且つ抗腫瘍作用を有する飲食用キノコタンパク質、並びにそれらの抽出方法 |
JP2859843B2 (ja) * | 1996-03-08 | 1999-02-24 | 株式会社雪国まいたけ | マイタケから抽出した抗腫瘍物質 |
-
1996
- 1996-03-08 JP JP8051880A patent/JP2859843B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-03-06 US US08/812,795 patent/US5854404A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-03-07 DE DE69730420T patent/DE69730420T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-03-07 WO PCT/JP1997/000728 patent/WO1997032896A1/ja active IP Right Grant
- 1997-03-07 EP EP97905467A patent/EP0893449B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-03-07 CN CN97192894A patent/CN1120173C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-03-07 AU AU22329/97A patent/AU2232997A/en not_active Abandoned
Cited By (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1120173C (zh) * | 1996-03-08 | 2003-09-03 | 株式会社雪国梅泰克 | 从树花菌提取的抗肿瘤物质 |
US6616928B1 (en) | 1998-10-20 | 2003-09-09 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | Active oxygen scavenger and cancer chemopreventer from Grifola |
JP2001097881A (ja) * | 1999-09-28 | 2001-04-10 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケ由来の発がん防止剤及び発がん防止用食品又は飼料 |
JP2001172194A (ja) * | 1999-12-17 | 2001-06-26 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケ由来のno産生誘導剤 |
KR100501039B1 (ko) * | 2000-08-23 | 2005-07-18 | 한국 한의학 연구원 | 잎새버섯 추출물을 포함하는 화학요법 항암제시스플라틴의 부작용 억제제 |
KR100740893B1 (ko) * | 2001-04-19 | 2007-07-19 | 충남대학교산학협력단 | 단백다당체 kgf-1를 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물 |
JP2004331525A (ja) * | 2003-05-01 | 2004-11-25 | Yukiguni Maitake Co Ltd | 神経栄養因子様作用物質 |
JP4686116B2 (ja) * | 2003-05-01 | 2011-05-18 | 株式会社雪国まいたけ | 神経栄養因子様作用物質 |
JP2005145934A (ja) * | 2003-11-19 | 2005-06-09 | Yukiguni Maitake Co Ltd | 抗インフルエンザウイルス活性化物質 |
JP2006273835A (ja) * | 2005-03-04 | 2006-10-12 | Michishi Tani | 悪性腫瘍治療剤及びそれを含む飲食品 |
WO2006095457A1 (ja) * | 2005-03-04 | 2006-09-14 | Michio Tani | 悪性腫瘍治療剤及びそれを含む飲食品 |
KR100729213B1 (ko) * | 2005-07-29 | 2007-06-19 | 주식회사 라이벌코리아 | 면역 증강 활성을 갖는 잎새 버섯의 액체배양물로부터분리한 세포외 생체고분자 |
JP2007031665A (ja) * | 2005-07-29 | 2007-02-08 | Yukiguni Maitake Co Ltd | マイタケから抽出した糖―タンパク複合体 |
WO2008050910A1 (fr) | 2006-10-27 | 2008-05-02 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | Substance originaire de grifola frondosa ayant une activite contre le virus de la grippe et procede de production de cette substance |
WO2008081607A1 (ja) | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 離乳期子豚における疾病予防方法 |
WO2008081608A1 (ja) | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 母豚の飼育方法 |
JP2008255138A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Kobayashi Pharmaceut Co Ltd | Th1/Th2バランス改善剤 |
WO2009102008A1 (ja) | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Yukiguni Maitake Co., Ltd. | 免疫賦活作用および抗腫瘍作用を有するマイタケ由来の低分子物質 |
WO2011108686A1 (ja) * | 2010-03-04 | 2011-09-09 | 株式会社雪国まいたけ | マイタケ属キノコ由来の食後過血糖の上昇を抑制する物質 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1120173C (zh) | 2003-09-03 |
EP0893449A1 (en) | 1999-01-27 |
DE69730420D1 (de) | 2004-09-30 |
DE69730420T2 (de) | 2005-09-08 |
CN1213378A (zh) | 1999-04-07 |
WO1997032896A1 (fr) | 1997-09-12 |
US5854404A (en) | 1998-12-29 |
EP0893449B1 (en) | 2004-08-25 |
EP0893449A4 (en) | 1999-04-07 |
JP2859843B2 (ja) | 1999-02-24 |
AU2232997A (en) | 1997-09-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH09238697A (ja) | マイタケから抽出した抗腫瘍物質 | |
CA1072034A (en) | Method of producing nitrogen-containing polysaccharides | |
JP2011026525A (ja) | β−グルカンを主体とする多糖類の抽出方法 | |
JP3195937B2 (ja) | アミラーゼ阻害物質の取得方法 | |
JPH0678367B2 (ja) | 食物繊維、その製造法及びその食物繊維を含有する生理活性剤 | |
CN101357952A (zh) | 一种具有降血脂活性的贻贝多糖ma及其制备方法 | |
WO2017005134A1 (zh) | 一种具有抗病毒和免疫活性的亚麻籽多糖的制备及其应用 | |
US20070027069A1 (en) | Glucan-protein complex extracted from grifola (Maitake) | |
EP0058093B1 (en) | Glycoprotein having anti-tumour and lectin-like activity | |
DK145424B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af nitrogenholdige polysaccharider med antitumorigen virkning | |
JPH0539305A (ja) | アストラガルス・メンブラナセウスから抽出した免疫 変調性多糖類及びこれらを含有する薬剤組成物 | |
WO2009102008A1 (ja) | 免疫賦活作用および抗腫瘍作用を有するマイタケ由来の低分子物質 | |
JP4233029B2 (ja) | マイタケ由来の抽出物およびグリコプロテイン並びにその製造方法 | |
DE3881198T2 (de) | Antiviraler wirkstoff. | |
JP2008106018A (ja) | マイタケ由来の抗インフルエンザウイルス活性を有する物質及びその製造方法 | |
JP2014221899A (ja) | β−グルカンを主体とする多糖類の抽出方法 | |
JPH05117303A (ja) | ヤマブシタケ由来の水溶性多糖類及び該水溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 | |
JP2838863B2 (ja) | 血糖上昇抑制剤 | |
CN1123577C (zh) | 海洋真菌炭团菌多糖及其提取方法和用途 | |
JP2838862B2 (ja) | 血糖降下剤 | |
KR970011556B1 (ko) | 장수버섯 추출물의 정제방법 | |
KR0178290B1 (ko) | 담자균류의 자실체로 부터 약효성분의 고농도 추출방법 | |
KR920000486B1 (ko) | 항종양성 다당류의 정제방법 | |
JPH05117304A (ja) | ヤマブシタケ由来の水不溶性多糖類及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 | |
CN111875715B (zh) | 一种脱色枝瑚菌多糖的制备及应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20071204 Year of fee payment: 9 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081204 Year of fee payment: 10 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101204 Year of fee payment: 12 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121204 Year of fee payment: 14 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131204 Year of fee payment: 15 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |