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JPH04188041A - Specimen measuring apparatus - Google Patents

Specimen measuring apparatus

Info

Publication number
JPH04188041A
JPH04188041A JP2318978A JP31897890A JPH04188041A JP H04188041 A JPH04188041 A JP H04188041A JP 2318978 A JP2318978 A JP 2318978A JP 31897890 A JP31897890 A JP 31897890A JP H04188041 A JPH04188041 A JP H04188041A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
light
laser
light source
laser light
mode
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2318978A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Atsushi Saito
斉藤 厚志
Yoshiyuki Azumaya
良行 東家
Tatsuya Yamazaki
達也 山崎
Yuji Ito
勇二 伊藤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Canon Inc
Original Assignee
Canon Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Canon Inc filed Critical Canon Inc
Priority to JP2318978A priority Critical patent/JPH04188041A/en
Priority to DE1990628687 priority patent/DE69028687T2/en
Priority to EP19900124242 priority patent/EP0435111B1/en
Publication of JPH04188041A publication Critical patent/JPH04188041A/en
Priority to US08/008,993 priority patent/US5760900A/en
Pending legal-status Critical Current

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  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Abstract

PURPOSE:To provide an apparatus characterized by low power consumption and long life by turning OFF the light source of a beam which is not used in response to a measuring mode. CONSTITUTION:A plurality of modes are changed in response to applications, and a laser light source which is not used is turned OFF. Such a function is provided. In details, the mode can be changed into the first mode wherein two laser lights 2 and 3 are emitted at the same time and the measurement in time series is performed and the second mode wherein either of the laser lights is emitted and the other is not emitted. At this time, a control means 162 independently controls the ON/OFF of the emission from each laser light source in response to the measuring conditions set with an input setting means 160. The laser light source not in use is set in the sleep mode, or the power supply for the laser light source is cut off. In this way, the low power consumption of the system and the elongation of the life of the laser are achieved.

Description

【発明の詳細な説明】 [産業上の利用分野] 本発明は個々の検体に光を照射し光学的測定を行うこと
で検体の解析を行う検体測定の分野に関する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Field of Industrial Application] The present invention relates to the field of specimen measurement, in which specimens are analyzed by irradiating each specimen with light and performing optical measurements.

〔従来の技術] 検体検査装置の一例としてフローサイトメータが従来か
ら知られており、生物学分野や医療分野などで広く用い
られている。
[Prior Art] Flow cytometers have been known as an example of sample testing devices, and are widely used in the biological and medical fields.

このフローサイトメータの典型的な構成を第6図に示す
。血液等のサンプル液を前処理として蛍光試薬等で染色
処理し適切な反応時間及び希釈濃度に調整する。そして
これをサンプル液容器115に入れる。また、蒸留水や
生理食塩水等のシース液はシース液容器114に入れる
。サンプル液容器115及びシース液容器114は各々
不図示の加圧機構により加圧される。そして、シースフ
ロー原理により、フローセル104内でサンプル液がシ
ース液に包まれて細い流れに収斂され、フローセル10
4内の流通部のほぼ中央部を通過する。
A typical configuration of this flow cytometer is shown in FIG. A sample liquid such as blood is pretreated by staining with a fluorescent reagent or the like and adjusted to an appropriate reaction time and dilution concentration. Then, put this into the sample liquid container 115. Further, a sheath liquid such as distilled water or physiological saline is placed in the sheath liquid container 114. The sample liquid container 115 and the sheath liquid container 114 are each pressurized by a pressurizing mechanism (not shown). Then, according to the sheath flow principle, the sample liquid is wrapped in the sheath liquid in the flow cell 104 and converged into a thin flow, and the flow cell 10
It passes through approximately the center of the flow section in 4.

この時、サンプル液に含まれる個々の被検粒子(細胞、
微生物、担体粒子など)すなわち検体は分離されて1粒
或いは1塊ずつ順次流れる。この被検粒子の流れに対し
て、レーザ光源101から出射されたレーザ光が、母線
方向が各々流通部方向、流通部方向と直交したシリンド
リカルレンズ102.103の組によって任意の形状に
収斂され照射される。被検粒子に照射される光ビームの
形状は、一般には流れに対して直交する方向に長径を有
する楕円形状であることが好ましい。これは個々の被検
粒子の流れの位置が流体中で若干変動しても、被検粒子
に均一の強度で光ビームが照射されるようにするためで
ある。
At this time, individual test particles (cells,
(microorganisms, carrier particles, etc.), that is, the specimen is separated and sequentially flows one particle or one lump at a time. A laser beam emitted from a laser light source 101 is converged into an arbitrary shape by a pair of cylindrical lenses 102 and 103 whose generatrix directions are in the direction of the flow section and perpendicular to the direction of the flow section, respectively, and irradiate the flow of the particles to be detected. be done. Generally, it is preferable that the shape of the light beam irradiated onto the test particles is an ellipse having a major axis in a direction perpendicular to the flow. This is to ensure that the light beam is irradiated with uniform intensity onto the test particles even if the flow position of each test particle varies slightly in the fluid.

被検粒子に光ビームが照射されると散乱光が生じる。前
記散乱光の内、光路前方方向に発する前方散乱光は集光
レンズ105、光検出器106によって測光される。な
お照射された光ビームが直接、光検出器106に入射す
るのを防ぐため、光路中集光レンズ105の手前には光
吸収性の微小なストッパ100が設けられ、照射光源か
らの直接光、及び被検粒子を光透過した透過光を除去す
るようになっている。これにより被検粒子からの散乱光
のみを測光することができる。
When a light beam is irradiated onto a particle to be examined, scattered light is generated. Among the scattered lights, the forward scattered lights emitted in the forward direction of the optical path are photometered by a condenser lens 105 and a photodetector 106. In order to prevent the irradiated light beam from directly entering the photodetector 106, a small light-absorbing stopper 100 is provided in the optical path in front of the condensing lens 105, so that the direct light from the irradiation light source, And the transmitted light that has passed through the test particles is removed. This makes it possible to photometer only the scattered light from the test particles.

また前記散乱光の内、レーザ光軸及び被検粒子の流れに
それぞれ直交する側方方向に発する光は集光レンズ10
7で集光される。集光された光はダイクロイックミラー
108で反射され、散乱光の波長即ちレーザ光の波長(
Ar+レーザであれば488nm)を選択的に透過させ
るバンドパスフィルタ121を経て光検出器111にて
側方散乱光が測光される。また被検粒子が蛍光染色され
ている場合には、散乱光と共に発生する複数色の蛍光を
測光するため、集光レンズ107によって集光され、ダ
イクロイックミラー108を通過した蛍光の内、ダイク
ロイックミラー109、緑色蛍光波長用(530nm付
近)のバンドパスフィルタ122、光検出器112の組
によって緑色蛍光が検出され、また全反射ミラー110
、赤色蛍光波長用(57Onm付近)のバンドパスフィ
ルタ123、光検出器113の組によって赤色蛍光が検
出される。光検出器106.111.112.113の
信号は各々演算回路116に入力され、該演算回路11
6において、粒子の種類や性質等の解析、あるいは抗原
抗体反応の測定等の演算が行なわれる。
Of the scattered light, light emitted in the lateral direction perpendicular to the laser optical axis and the flow of the particles to be detected is transmitted through the condenser lens 10.
The light is focused at 7. The focused light is reflected by the dichroic mirror 108, and the wavelength of the scattered light, that is, the wavelength of the laser light (
The side scattered light is measured by the photodetector 111 through a bandpass filter 121 that selectively transmits light (488 nm in the case of an Ar+ laser). In addition, when the test particles are fluorescently dyed, in order to photometer the fluorescence of multiple colors generated together with the scattered light, among the fluorescence that is collected by the condenser lens 107 and passed through the dichroic mirror 108, the dichroic mirror 109 , a bandpass filter 122 for green fluorescence wavelength (around 530 nm), and a photodetector 112, and a total reflection mirror 110 detects the green fluorescence.
, a bandpass filter 123 for red fluorescence wavelength (near 57 Onm), and a photodetector 113 detect red fluorescence. The signals of the photodetectors 106, 111, 112, and 113 are each input to an arithmetic circuit 116, and the arithmetic circuit 11
In step 6, calculations such as analysis of particle types and properties, measurement of antigen-antibody reactions, etc. are performed.

[発明が解決しようとしている課題] しかしながら、従来は複数色の蛍光を測光するのに各蛍
光毎に専用の光検出器を使用している。
[Problems to be Solved by the Invention] However, conventionally, a dedicated photodetector has been used for each fluorescence to measure fluorescence of a plurality of colors.

これまでは赤色蛍光と緑色蛍光の2色、あるいはこれに
黄色蛍光を加えた3色を同時に測光する構成が一般的で
あったが、近年、更なる多色化の要望が高まり、新たな
蛍光剤の開発も進んでいる。
Until now, it was common to have a configuration that simultaneously measured two colors, red fluorescence and green fluorescence, or three colors with yellow fluorescence added, but in recent years there has been an increasing demand for even more colors, and new fluorescence Development of drugs is also progressing.

これにより同時に使用する蛍光チャンネル数が増加する
と、それに応じて光検出器の数も増加してしまうことに
なる。即ち、光学配置が複雑化し、フォトマル等の高価
な光検出器が多数必要となってしまう問題点があった。
As a result, if the number of fluorescence channels used simultaneously increases, the number of photodetectors will also increase accordingly. That is, there is a problem in that the optical arrangement becomes complicated and a large number of expensive photodetectors such as photomultipliers are required.

そこで本願出願人は特願平1−325001号等におい
て、複数の種類の光を共通の光検出器で時系列に検出す
ることで、光検出器の数以上の測定パラメータが得られ
る装置を提案した。本発明は該提案した装置の更なる改
良を目的とする。
Therefore, in Japanese Patent Application No. 1-325001, etc., the applicant proposed a device that can obtain measurement parameters greater than the number of photodetectors by detecting multiple types of light in time series using a common photodetector. did. The present invention aims at further improvements to the proposed device.

[目的を達成するための手段] 上記目的を達成する本発明の検体測定装置は、測定モー
ドを設定する設定手段と、第1の照射光を生成し、検体
が移動する第1の位置に照射する第1照射手段と、第2
の照射光を生成し、前記第1の位置とは異なる第2の位
置に照射する第2照射手段と、前記第1、第2の位置を
通過する検体から発する第1、第2の光学特性の光を同
一光検出器で時系列に検出する光検出手段と、前記設定
された測定モードに応じて、前記第1の照射手段、第2
の照射手段の作動の有無を制御する制御手段とを有する
ことを特徴とする特 [実施例] 以下、本発明の実施例を図面を用いて詳細に説明する。
[Means for Achieving the Object] A sample measuring device of the present invention that achieves the above object includes a setting means for setting a measurement mode, and a first irradiation light for generating and irradiating a first position where the sample moves. a first irradiation means for
a second irradiation means that generates irradiation light and irradiates it to a second position different from the first position; and first and second optical characteristics emitted from the specimen passing through the first and second positions. a light detection means for detecting light of
[Embodiment] Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the drawings.

第1図、第2図は第1の実施例の構成図を表わす。第1
図は実施例の基本的な構成図であり、前方の光学系、流
体系、制御系等を有する全体システムを表わす。同図に
おいて1はサンプル液中の被検粒子(例えば生体細胞や
担体粒子)をシース液で包み込むようにして1個ずつ分
離して順に流す、いわゆるシースフローを形成するだめ
のフローセルで、フローセルl内の流通部を被検粒子が
紙面上方から下方に向けて流れる。シースフローを形成
するための流体系の構成は、血液試料や免疫反応液等の
サンプル液を蓄積するサンプル液容器150、それを加
圧するためのポンプ152、サンプル液の流量を調節す
る電気式レギュレータ154、生理食塩水等のシース液
を蓄積するシース液容器151、それを加圧するポンプ
153、シース液の流量を調節する電気式レギュレータ
155、そしてこれらを流体的に接続しフローセルl内
に導くだめのチューブから成る。サンプル液容器150
内をポンプ152によって加圧してサンプル液を押出し
、一方、シース液容器151内をポンプ153で加圧し
てシース液を押出し、レギュレータ154.155の各
々による流量調節によりフローセルl内での状態、すな
わち流れ速度や個々の粒子の流れ間隔等が設定される。
FIGS. 1 and 2 show configuration diagrams of the first embodiment. 1st
The figure is a basic configuration diagram of the embodiment, and represents the entire system including a front optical system, a fluid system, a control system, etc. In the figure, reference numeral 1 denotes a flow cell that forms a so-called sheath flow in which test particles (such as biological cells or carrier particles) in a sample liquid are separated one by one by being wrapped in a sheath liquid and flowed in sequence. The particles to be tested flow through the internal flow section from above to below the page. The fluid system for forming a sheath flow includes a sample liquid container 150 that accumulates sample liquid such as a blood sample or immune reaction liquid, a pump 152 that pressurizes the container, and an electric regulator that adjusts the flow rate of the sample liquid. 154, a sheath liquid container 151 that accumulates a sheath liquid such as physiological saline, a pump 153 that pressurizes it, an electric regulator 155 that adjusts the flow rate of the sheath liquid, and a reservoir that fluidly connects these and guides them into the flow cell l. It consists of a tube. Sample liquid container 150
The inside of the sheath liquid container 151 is pressurized by the pump 153 to push out the sheath liquid, and the flow rate adjustment by each of the regulators 154 and 155 changes the state inside the flow cell l, i.e. The flow speed, flow interval of individual particles, etc. are set.

なお上記のようなポンプとレギュレータによる加圧機構
に限らず、特開昭2−213744号公報に示されるよ
うなシリンジを用いた構成を採用して、シリンジの押出
し速度を調節するようにしても良い。
In addition to the above-mentioned pressurizing mechanism using a pump and regulator, it is also possible to adopt a configuration using a syringe as shown in Japanese Patent Application Laid-Open No. 2-213744 and adjust the extrusion speed of the syringe. good.

さて、次に前方の光学系について説明する。2゜3は波
長の異なるレーザ光源であり、この分野では一般的なA
r+レーザ、He−Neレーザ、色素レーザ、半導体レ
ーザ等のレーザ、更にはレーザに限らず様々な光源が利
用できる。なお第5図(D)のように、レーザ光源を3
つ以上用意して各光源からのレーザビームを測定条件に
応じて選択的に照射光路に導くようにすれば、更に多目
的な測定が可能な汎用性の高いシステムとなる。第5図
(D)において、74は全反射ミラー、75はハーフミ
ラ−176は光シャッタである。
Now, the front optical system will be explained next. 2゜3 is a laser light source with different wavelengths, which is commonly used in this field.
Lasers such as an r+ laser, a He-Ne laser, a dye laser, and a semiconductor laser, as well as various light sources other than lasers, can be used. As shown in Figure 5(D), the laser light source is
If more than one light source is prepared and the laser beam from each light source is selectively guided to the irradiation optical path according to the measurement conditions, a highly versatile system capable of performing even more versatile measurements can be obtained. In FIG. 5(D), 74 is a total reflection mirror, 75 is a half mirror, and 176 is an optical shutter.

第1図、第2図に戻って、4a、4bは照射光ビームを
フローセル部の被検領域に結像する集光レンズであり、
レーザ光源2及び3からのレーザビームをそれぞれフロ
ーセル中のla、lbの位置に結像する。結像ビームの
形状としては流れに直交する方向に長径を持つ楕円形状
が好ましい。
Returning to FIGS. 1 and 2, 4a and 4b are condenser lenses that image the irradiation light beam onto the test area of the flow cell section,
Laser beams from laser light sources 2 and 3 are imaged at positions la and lb in the flow cell, respectively. The shape of the imaging beam is preferably an ellipse with the major axis in the direction perpendicular to the flow.

ここで両照射位置1a、lbの間の距離は100μm程
度であり、これは測定する粒子のサイズよりは大きく、
順次流れる粒子の流れ間隔よりは十分に短いものである
。ビーム直進方向に配置される部材5a、5bはレーザ
光源2.3がらのレーザビームをそれぞれ遮断し、暗視
野光学系を形成するための光ストッパであり、6は前方
散乱光を集光する集光レンズ、7は視野絞りで、la、
lbの位置に対応する共役位置にそれぞれ開ロアa。
Here, the distance between both irradiation positions 1a and lb is about 100 μm, which is larger than the size of the particles to be measured.
This is sufficiently shorter than the flow interval of particles flowing sequentially. Members 5a and 5b disposed in the straight beam direction are light stoppers for blocking the laser beams from the laser light sources 2 and 3, respectively, to form a dark field optical system, and 6 is a condenser for condensing forward scattered light. Optical lens, 7 is field diaphragm, la,
The open lower a is located at the conjugate position corresponding to the position of lb.

7bが設けられる。8a、8bは1a、lb位置からの
前方散乱光を検知する光検出器である。
7b is provided. 8a and 8b are photodetectors that detect forward scattered light from positions 1a and lb.

なお2本のレーザビームを形成するのに必ずしも2個の
レーザ光源を用意する必要はない。例えば第5図(A)
(B)(C)のように単一レーザ光源からのビームを、
ミラ一部材によって2本に分岐しても良い。この時、第
5図(B)(C)ような形態を取れば波長の異なる複数
のビームが得られる。第5図(A)は短波長のシングル
モードレーザからのレーザビームをハーフミラ−71と
全反射ミラー72によって同一波長の2光束を作り出す
光学系である。又、第5図(B)はレーザビームをハー
フミラ−71と全反射ミラー72によって2光束に分岐
して、それぞれの分岐ビームを波長変換部材772.7
7b (非線形光学素子やAOなど)によって波長変換
することにより異なる波長の2光束を作り出す光学系で
ある。更に第5図(C)は複数波長のマルチモードレー
ザからのレーザビームをダイクロイックミラー73で異
なる波長の2光束に分岐して、異なる波長の2光束を作
り出す光学系である。
Note that it is not necessarily necessary to prepare two laser light sources to form two laser beams. For example, Figure 5 (A)
(B) A beam from a single laser source as in (C),
It may be branched into two by a Mira member. At this time, if a configuration as shown in FIGS. 5(B) and 5(C) is adopted, a plurality of beams with different wavelengths can be obtained. FIG. 5A shows an optical system in which a laser beam from a short wavelength single mode laser is generated into two beams of the same wavelength by a half mirror 71 and a total reflection mirror 72. Further, in FIG. 5(B), the laser beam is split into two beams by a half mirror 71 and a total reflection mirror 72, and each branched beam is sent to a wavelength converting member 772.7.
7b (nonlinear optical element, AO, etc.) is an optical system that generates two beams of different wavelengths by converting the wavelength. Furthermore, FIG. 5(C) shows an optical system that splits a laser beam from a multimode laser having a plurality of wavelengths into two beams of different wavelengths using a dichroic mirror 73 to produce two beams of beams of different wavelengths.

第1図の構成において、レーザ光源2より出射されたレ
ーザ光は集光レンズ4aにより集光され被検領域1aに
照射される。この被検領域1aに被検粒子が通過すると
該被検粒子によって光散乱が起き、この時、被検粒子が
蛍光染色されていれば蛍光も励起されて散乱光と共に発
生する。前記発生する散乱光の内の一部は光路前方方向
に進み前方散乱光となる。この前方散乱光は集光レンズ
6、及び視野絞り7の開口部7aを経て、光検出器8a
により強度検出され第1の前方散乱信号が得られる。同
様にして、レーザ光源3より出射されたレーザ光は集光
レンズ4bにより集光され被検領域1bに照射される。
In the configuration shown in FIG. 1, laser light emitted from the laser light source 2 is focused by a condenser lens 4a and irradiated onto the test area 1a. When the test particles pass through the test region 1a, the test particles cause light scattering, and at this time, if the test particles are fluorescently dyed, fluorescence is also excited and generated together with the scattered light. A part of the generated scattered light travels in the forward direction of the optical path and becomes forward scattered light. This forward scattered light passes through the condensing lens 6 and the aperture 7a of the field stop 7, and then passes through the photodetector 8a.
The intensity is detected and a first forward scattering signal is obtained. Similarly, the laser light emitted from the laser light source 3 is focused by the condenser lens 4b and irradiated onto the test area 1b.

この被検領域1bに被検粒子が通過すると、前方散乱光
は開口部7bを経て、光検出器8bにより強度検出され
第2の前方散乱信号が得られる。
When the test particles pass through the test region 1b, the forward scattered light passes through the opening 7b, and the intensity is detected by the photodetector 8b to obtain a second forward scattered signal.

又、160は入力設定手段であり、システムの各種モー
ド、被検粒子の流速や通過間隔、使用する蛍光剤の種類
、測定項目等、様々な測定条件を入力設定する。161
は記憶演算回路であり、光検出器8a、8bの出力、お
よび後述の側方の光学系の光検出器25.23の出力が
、ゲイン切換え可能な増幅アンプ、ピークホールド回路
、積分回路、A/Dコンバータ等を介して取込まれ、ピ
ーク値や積分値のデジタルデータが記憶手段に記憶され
る。このデータを基に後に粒子解析の演算がなされ、こ
の結果はCRTやプリンタ等の出力手段に出力される。
Reference numeral 160 denotes an input setting means for inputting and setting various measurement conditions such as various modes of the system, flow rate and passing interval of particles to be detected, type of fluorescent agent to be used, and measurement items. 161
is a storage arithmetic circuit, and the outputs of photodetectors 8a and 8b and the outputs of photodetectors 25 and 23 of the side optical system, which will be described later, are connected to a gain-switchable amplification amplifier, a peak hold circuit, an integration circuit, and /D converter etc., and digital data of peak values and integral values is stored in a storage means. Particle analysis calculations are later performed based on this data, and the results are output to output means such as a CRT or printer.

解析方法に関してはヒストグラムやサイトグラムを用い
た統計的処理が一般的であるが、詳細な説明はここでは
省略する。又、該記憶演算手段161は2つの前方散乱
光の検出出力タイミングから流速の算出、誤測定データ
の取込みキャンセル等を行なう機能も備えている。16
2はコントロール手段でありシステムの各種動作手段の
総合的なコントロールを行なう。具体的には、ポンプ1
52,153の駆動、電気式レギュレータ154,15
5の調節、レーザ光源2.3の各々の0N10FF制御
、後述する蛍光検出レベルの切換え等である。
As for the analysis method, statistical processing using histograms and cytograms is common, but detailed explanation will be omitted here. The storage/calculation means 161 also has a function of calculating the flow velocity from the detection output timing of the two forward scattered lights, canceling the acquisition of erroneous measurement data, etc. 16
Reference numeral 2 denotes a control means that performs comprehensive control of various operating means of the system. Specifically, pump 1
52, 153 drive, electric regulator 154, 15
5, 0N10FF control of each of the laser light sources 2 and 3, and switching of the fluorescence detection level to be described later.

次に第2図を用いて側方の光学系の説明を行なう。第2
図は第1図を側方から見た図であり側方の光学系を詳細
に表わしている。図中、11は集光レンズであり、レー
ザ光源2,3からの照射レーザビーム直進方向と直交す
る側方方向に発する光を集光する。13は視野絞りで、
la、lbの両位置に対応した共役位置に開口部13a
、13bが設けられる。14a、14bは平行平板、1
5a、15はレンズであり、両部材の組によってlal
Next, the lateral optical system will be explained using FIG. Second
The figure is a side view of FIG. 1 and shows the side optical system in detail. In the figure, reference numeral 11 denotes a condensing lens, which condenses light emitted from the laser light sources 2 and 3 in a lateral direction perpendicular to the rectilinear direction of the irradiated laser beams. 13 is the field aperture,
An opening 13a is provided at the conjugate position corresponding to both the la and lb positions.
, 13b are provided. 14a and 14b are parallel flat plates, 1
5a and 15 are lenses, and the set of both members allows the lal
.

lbからのそれぞれの光が平行光束に変換される。Each light from lb is converted into a parallel beam of light.

21a、21b、31a、31bは被検粒子より生じた
側方散乱光及び蛍光を色分解するためのダイクロイック
ミラー、22a、22b、32a。
21a, 21b, 31a, and 31b are dichroic mirrors 22a, 22b, and 32a for color-separating the side scattered light and fluorescence generated by the test particles;

32bはそれぞれの蛍光の波長を選択するバンドパスフ
ィルタであり、このダイクロイックミラーとバンドパス
フィルタの組合わせによりそれぞれの検出光波長が選択
される。26a、26b、36a。
Reference numeral 32b represents a bandpass filter that selects the wavelength of each fluorescence, and the wavelength of each detection light is selected by the combination of this dichroic mirror and the bandpass filter. 26a, 26b, 36a.

36bはそれぞれ所定の透過率を有するNDフィルタで
ある。24.34はレンズ、25.35は側方散乱光及
び蛍光を検知するための光検出器であり、該光検出器と
しては検出感度の高いフォトマルチプライヤが好適であ
る。該光検出器25゜35は記憶演算手段61に接続さ
れている。ここで位置1aから発した光は開口部13a
で一旦結像し、ダイクロイックミラー21a、31a、
バンドパスフィルタ22 a、  32 a、 NDフ
ィルタ26a、36aの光路を通って光検出器25.2
5に導かれてここで再結像する。一方、1bから発した
光は開口部13bで一旦結像し、ダイクロイックミラー
21b、31b1バンドパスフイルタ22b、32b、
NDフィルタ26b、36bの光路を通って光検出器2
5.25に導かれて再結像する。
36b are ND filters each having a predetermined transmittance. 24.34 is a lens, 25.35 is a photodetector for detecting side scattered light and fluorescence, and a photomultiplier with high detection sensitivity is suitable as the photodetector. The photodetector 25° 35 is connected to a storage/arithmetic means 61. Here, the light emitted from position 1a is transmitted through opening 13a.
Once the image is formed, dichroic mirrors 21a, 31a,
The photodetector 25.2 passes through the optical path of the bandpass filters 22a, 32a, and the ND filters 26a, 36a.
5 and reimage here. On the other hand, the light emitted from 1b is imaged once at the aperture 13b, and the dichroic mirrors 21b, 31b1 band pass filters 22b, 32b,
The photodetector 2 passes through the optical path of the ND filters 26b and 36b.
5.25 and reimage.

第3図は上記側方光学系の変形例であり、第1図を上方
から見た図である。なお、前方光学系は図では省略しで
ある。図中、先の図と同一の符号は同一あるいは同等の
部材を表わす。
FIG. 3 shows a modification of the above-mentioned side optical system, and is a view of FIG. 1 viewed from above. Note that the front optical system is omitted in the figure. In the figures, the same reference numerals as in the previous figures represent the same or equivalent members.

レーザ光源2からのレーザの照射位置1aから側方に発
する光は一旦、図中上方の光路に引き回され、コーナー
キューブやポロプリズム等の反射部材99を経て、開口
絞り13aで一旦結像し、光検出器25.35で再結像
して入射する。一方レーザ光源3からのレーザの照射位
置1bから側方に発する光は図中下方の光路に導かれ、
開口絞り13bで一旦結像し、共通の光検出器25.3
5で再結像して検出される。本例は基本的には先の第2
図の光学系と同等であるが、1aがらの蛍光と1bから
の蛍光を検出する光路とを明確に分離して光学配置した
ところに特徴がある。
The light emitted laterally from the laser irradiation position 1a from the laser light source 2 is once routed to an optical path in the upper part of the figure, passes through a reflection member 99 such as a corner cube or a porro prism, and is once imaged at the aperture stop 13a. , re-imaged by the photodetector 25.35 and then incident. On the other hand, the light emitted laterally from the laser irradiation position 1b from the laser light source 3 is guided to the optical path in the lower part of the figure.
Once the image is formed by the aperture stop 13b, the common photodetector 25.3
5, the image is re-imaged and detected. This example is basically the same as the second one above.
Although it is equivalent to the optical system shown in the figure, it is distinctive in that the optical path for detecting the fluorescence from 1a and the fluorescence from 1b are clearly separated and optically arranged.

第4図は被検粒子の通過に際して各光検出器で得られる
検出パルスの一例である。第4図(A)、第4図(B)
はそれぞれ光検出器8a、8bで得れれる前方散乱光の
検出出力、第4図(C)、第4図(F)はそれらを所定
閾値と比較して作り出したタイミングパルス、第4図(
E)、第4図(F)はそれぞれ光検出器25.35で得
られる蛍光の検出出力を示す。各光検出器25.35に
よる蛍光の検出出力は被検粒子がla、lb位置を通過
する際に時系列的に得られ、これを先のタイミングパル
スを利用してそれぞれ別々に時系列に取込む。
FIG. 4 is an example of a detection pulse obtained by each photodetector when a particle to be detected passes through. Figure 4 (A), Figure 4 (B)
are the detection outputs of the forward scattered light obtained by the photodetectors 8a and 8b, respectively, FIG. 4(C) and FIG. 4(F) are the timing pulses created by comparing them with a predetermined threshold, and FIG.
E) and FIG. 4(F) respectively show the fluorescence detection outputs obtained by the photodetectors 25 and 35. Fluorescence detection outputs from each photodetector 25.35 are obtained in time series when the test particle passes through the la and lb positions, and these are acquired separately in time series using the previous timing pulse. It's crowded.

以上のように本実施例では側方2個の検出器で4チヤン
ネル検出が可能で、これに2つの前方散乱光を加えた計
6種類の異なる光学特性の光が検出可能となる。
As described above, in this embodiment, four-channel detection is possible with two side detectors, and two forward scattered lights are added to this, making it possible to detect a total of six types of light with different optical characteristics.

なお、以上の説明では側方の光検出器の数が2個の実施
例を示したが、検出器の個数はこれに限定されるもので
は無い。1個であれば一般的な従来例と同様、2色の蛍
光を単一の光検出器で得ることができ  −−一 装置構成が非常に簡略なものとな る。又、光検出器の数が3個以上であれば更に多くのパ
ラメータを得ることができる。又、側方の光検出器で検
出するのは蛍光には限らず側方散乱光を検出するように
しても良い。
In addition, although the above description has shown an example in which the number of side photodetectors is two, the number of detectors is not limited to this. If there is only one, fluorescence of two colors can be obtained with a single photodetector, as in the general conventional example, and the configuration of the device becomes extremely simple. Further, if the number of photodetectors is three or more, even more parameters can be obtained. Furthermore, what is detected by the side photodetectors is not limited to fluorescence, but may also detect side scattered light.

さて以上はシステムの基本的な形態の説明であるが、次
に実施例のシステムの特徴的な機能についてそれぞれ説
明する。
Now, the basic form of the system has been explained above, and next, the characteristic functions of the system of the embodiment will be explained.

(1)1   に、゛たレーザ 本実施例のシステムを多目的に使用する場合、測定目的
や使用する蛍光剤の種類によっては、必ずしも2つのレ
ーザ光波長は必要ではなく片方だけで事足りる場合もあ
る。あるいは第11図(D)のように3種類以上の光源
からのレーザービームを選択的に照射する形態を取った
場合は、使用しないレーザ光波長は不必要である。
(1) 1. Laser When using the system of this embodiment for multiple purposes, two laser light wavelengths may not necessarily be necessary and only one may be sufficient depending on the measurement purpose and the type of fluorescent agent used. . Alternatively, if a configuration is adopted in which laser beams from three or more types of light sources are selectively irradiated as shown in FIG. 11(D), unused laser beam wavelengths are unnecessary.

そこで本実施例のシステムでは、使用用途に応じて複数
の測定モードを切換え、使用しないレーザ光源をOFF
にする機能を有している。具体的には2本のレーザ光を
同時に照射して時系列的な測定を行なう第1のモードと
、どちらが一方のレーザ光を照射して他方を非作動にす
る第2のモードとに切換えることができる。これは入力
設定手段160において設定された測定条件に応じて、
コントロール手段162が各レーザ光源の照射の0N1
0FFを独立して行ない、非使用のレーザ光源をスリー
プモードにするか、あるいはレーザ光源の電源を遮断す
る。これによってシステムの低電力消費化およびレーザ
寿命の延長を達成している。
Therefore, in the system of this embodiment, multiple measurement modes are switched depending on the intended use, and the laser light source that is not in use is turned off.
It has the function of Specifically, switching between a first mode in which two laser beams are irradiated simultaneously to perform time-series measurements, and a second mode in which one of the laser beams is irradiated and the other is inactive. I can do it. This depends on the measurement conditions set in the input setting means 160.
The control means 162 controls the irradiation of each laser light source to 0N1.
0FF is performed independently to put unused laser light sources into sleep mode or to cut off the power to the laser light sources. This results in lower system power consumption and longer laser life.

(2)えl支ユ1上 2つのレーザ照射位置1aとlbの両地点間の距離は一
定値(約100μm)であるので、前方散乱光検出器8
a、8bの出力から作られる第4図(C)、第4図(D
)に示す両タイミングパルスの発生タイミングを比較し
、その時間差がら被検粒子の通過速度すなわち流速を求
めることができる。このタイミングの比較と流速の算出
は記憶演算回路161で行ない、コントロール手段16
2ではこの流速を常時フィードバックして、入力設定手
段160で設定された流速となるように電気式レギュレ
ータ154,155の調節を行なう。
(2) Since the distance between the two laser irradiation positions 1a and lb on the arm support 1 is a constant value (approximately 100 μm), the forward scattered light detector 8
Figures 4 (C) and 4 (D) are created from the outputs of a and 8b.
) The generation timings of both timing pulses shown in FIG. This timing comparison and calculation of the flow velocity are performed by the memory calculation circuit 161, and the control means 16
In step 2, this flow rate is constantly fed back to adjust the electric regulators 154 and 155 so that the flow rate is set by the input setting means 160.

これにより設定された流速に常に正確に保つことができ
、安定性及び測定精度を向上させることができる。
This allows the set flow rate to be maintained accurately at all times, improving stability and measurement accuracy.

なおポンプと電気式レギュレータとによる加圧機構には
限らず、シリンジを用いた加圧機構を用いても良い。そ
の場合シリンジの押出し速度を調節するようにする。
Note that the pressurizing mechanism is not limited to a pump and an electric regulator, and a pressurizing mechanism using a syringe may be used. In that case, adjust the extrusion speed of the syringe.

(3) データの ′みキャンセル 次々と流れる被検粒子の流れ間隔は、2が所の照射位置
1a、lbの間隔(looJ、tm程度)よりは十分に
大きく設定されているが、稀にあまり間隔を置かずに流
れてくる場合もあり、両位置にほぼ同時にそれぞれの粒
子が差し掛かることもあり得る。この場合には両位置か
らそれぞれ散乱光及び蛍光が発生して共通の光検出器に
混在して入射し混在データ検出されてしまう。
(3) Data cancellation The flow interval of the test particles flowing one after another is set to be sufficiently larger than the interval between the irradiation positions 1a and lb (about looJ, tm) in 2. In some cases, particles may flow without any interval, and each particle may approach both positions almost simultaneously. In this case, scattered light and fluorescence are generated from both positions and enter the common photodetector in a mixed manner, resulting in mixed data being detected.

そこでこれを防ぐために本実施例では、la。Therefore, in order to prevent this, in this embodiment, la.

1bの位置に検体がほぼ同時に通過したことを検知して
、はぼ同時に通過したと判断されたら、検出手段からの
データをキャンセルして取込まないような手段を設けて
いる。具体的には、記憶演算手段161において、第4
図(C)、第4図(D)に示すタイミングパルスの発生
タイミングがもし一致あるいは非常に接近している場合
は、la。
A means is provided for detecting that the specimens have passed through the position 1b at almost the same time and canceling the data from the detection means and not capturing it if it is determined that the specimens have passed at the same time. Specifically, in the storage calculation means 161, the fourth
If the generation timings of the timing pulses shown in FIG. 4(C) and FIG. 4(D) match or are very close to each other, la.

1bの両位置に2個の被検粒子がほぼ同時に通過したと
判断して、この時の各光検出器のデータはキャンセルし
て取込まないようにしている。
It is determined that two test particles have passed through both positions of 1b at almost the same time, and the data of each photodetector at this time is canceled and not captured.

あるいは別法として次のような方法でも良い。Alternatively, the following method may be used.

粒子がlaから1bに移行するまでの時間はほぼ一定と
考えられる。そこで粒子が1aを通過する時の検出パル
ス(光検出器8aの出力)が発生してから、その粒子が
lbに移行して通過するだけの所定期間の間に、再びl
a(光検出器8aの出力)から検出パルスが発生したら
、粒子が続けて流れてきたと判断して、データ取込みを
キャンセルする。
It is considered that the time required for particles to move from la to 1b is approximately constant. There, a detection pulse (output of photodetector 8a) is generated when a particle passes through 1a, and then again during a predetermined period of time during which the particle moves to and passes through lb.
When a detection pulse is generated from a (output of photodetector 8a), it is determined that particles have continued to flow, and data acquisition is canceled.

以上のような手段を設けることにより、誤データの取込
みが無いため、より確実な測定が行なえる。
By providing the above means, there is no possibility of capturing erroneous data, so more reliable measurements can be performed.

(4)   レベルの  え l 一般に蛍光と散乱光の強度レベルは大きく異なり、又、
蛍光色素の種類によっても発生する蛍光光量が太き(異
なる。よって、これらを共通の光検出器で時系列に検出
するためには非常にダイナミックレンジの広い検出器が
必要になってしまう。
(4) Intensity levels of fluorescence and scattered light are generally very different, and
The amount of fluorescent light generated differs depending on the type of fluorescent dye. Therefore, in order to detect these in time series with a common photodetector, a detector with an extremely wide dynamic range is required.

そこで本実施例では光検出器に至る各光路中に、使用す
る蛍光の発光量に応じて通過光量を調節する通過光量調
節手段(NDフィルタ26a、26b。
Therefore, in this embodiment, in each optical path leading to the photodetector, there are passing light amount adjusting means (ND filters 26a, 26b) for adjusting the amount of passing light according to the amount of fluorescent light used.

36 a、  36 b)をそれぞれ設け、光検出器に
入射するそれぞれの光量の差が小さくなるようにしてい
る。これにより大きなダイナミックレンジを有する高価
な光検出器を使用する必要がなくなり、よりローコスト
なシステムとすることができる。
36a and 36b) are provided, respectively, so that the difference in the amount of light incident on the photodetector is small. This eliminates the need to use an expensive photodetector with a large dynamic range, resulting in a lower cost system.

なお、NDフィルタには限らず、光路の遮光面積を制限
する光マスクによって通過光量を調節するようにしても
良い。
Note that the amount of passing light may be adjusted not only by the ND filter but also by an optical mask that limits the light-blocking area of the optical path.

又、NDフィルタを交換できる機構を設けるかあるいは
通過光量を自由に可変調節できる機構を用い、使用する
蛍光色素に応じてこれを調節するようにすればより汎用
性の高いシステムとなる。
Furthermore, if a mechanism for replacing the ND filter or a mechanism for freely adjusting the amount of light passing through is provided, and this is adjusted according to the fluorescent dye used, the system becomes more versatile.

(5)   レベルの  え 2 本実施例では上記強度レベルの切換えに関し、NDフィ
ルタの他に更に光検出器の増幅率を測定光の種類によっ
て切換える回路も有している。これは記憶演算回路16
1に光検出器25.35の出力を取込む際に、増幅アン
プのゲインをla、lbの粒子の通過に同期して切換え
る回路を設は光の発光量に応じて検出感度を切換えるよ
うにしている。このゲインは自由に調節することによっ
て幅広い測定に対応することができ、入力設定手段16
0から入力される測定条件に応じて増幅のゲインを決定
するようになっている。 ゛さて、以上の2つの実施例
は本発明の基本的構成の例であるが、より具体的な幾つ
かの使用例を以下説明する。なお、使用できる蛍光色素
の種類及び組合わせがこれらに限定されるものではない
ことは言うまでもない。
(5) Level change 2 In this embodiment, regarding the above-mentioned intensity level switching, in addition to the ND filter, there is also a circuit for switching the amplification factor of the photodetector depending on the type of measurement light. This is the memory calculation circuit 16
When receiving the output of the photodetector 25.35, a circuit is installed to switch the gain of the amplifier in synchronization with the passage of the la and lb particles, so that the detection sensitivity is switched according to the amount of light emitted. ing. This gain can be adjusted freely to accommodate a wide range of measurements, and the input setting means 16
The amplification gain is determined according to the measurement conditions input from 0. Now, although the above two embodiments are examples of the basic configuration of the present invention, some more specific usage examples will be described below. It goes without saying that the types and combinations of fluorescent dyes that can be used are not limited to these.

使」L伝」2 本例では、検体を3種類の蛍光色素で同時染色して、側
方光学系の2個の光検出器で4チヤンネル検出するもの
である。
In this example, a specimen is simultaneously stained with three types of fluorescent dyes, and four channels are detected using two photodetectors in the side optical system.

第1図、第2図において、レーザ光源2及び3に波長4
88nmの2個の同−Ar+レーザ光源を用いる。
In Figures 1 and 2, laser light sources 2 and 3 have a wavelength of 4
Two 88 nm -Ar+ laser light sources are used.

被検粒子を染色する蛍光色素の種類は波長488nmの
励起光で励起される蛍光を選択する。例えばFITC(
530nm)、PE (570nm)、DCH−d=l
÷(610nm)の3種類の蛍光で染色するものとする
と、被検粒子からは488nm、530nm。
As the type of fluorescent dye that stains the test particles, fluorescence excited by excitation light with a wavelength of 488 nm is selected. For example, FITC (
530nm), PE (570nm), DCH-d=l
Assuming that staining is performed using three types of fluorescence: ÷ (610 nm), 488 nm and 530 nm from the test particle.

570nm、610nmの4種類の波長の光が同時に発
生することになる。なお、DCは直接488nmの波長
では励起されないが、−旦PEが励起されて発生する蛍
光(570nm)でDCが励起されるという段階的な励
起過程を有する。
Light of four different wavelengths, 570 nm and 610 nm, is generated simultaneously. Note that the DC is not directly excited by the wavelength of 488 nm, but has a stepwise excitation process in which the DC is excited by the fluorescence (570 nm) generated when PE is excited.

前処理として検体を上記3種の蛍光で染色した後に、本
実施例の装置で測定を行う。ここでダイクロイックミラ
ー21a、21b、31a、31bの光分別波長をそれ
ぞれ、510nm、590nm。
After staining the specimen with the three types of fluorescence described above as pretreatment, measurement is performed using the apparatus of this example. Here, the light separation wavelengths of the dichroic mirrors 21a, 21b, 31a, and 31b are 510 nm and 590 nm, respectively.

450nm、650nm程度に設定し、バンドパスフィ
ルタ22 a、 22 b、  32 a、  32 
bとしてそれぞれ530nm、488nm、570nm
Band pass filters 22 a, 22 b, 32 a, 32 are set to about 450 nm and 650 nm.
b as 530 nm, 488 nm, and 570 nm, respectively.
.

610nm付近の波長の光を選択的に透過させる特性の
ものを用いて、それぞれの光学系でFITC。
FITC is used in each optical system using a material that selectively transmits light with a wavelength around 610 nm.

SS(側方散乱光)、PE、DCの強度検出を行なう。Intensity detection of SS (side scattered light), PE, and DC is performed.

被検粒子が1aの位置を通過する時、上記4種類の光が
発生するが、この時゛ ′、検 出器25においてはバンドパスフィルタ22aで選択さ
れたFITCの蛍光強度が検出され、検出器35におい
てはバンドパスフィルタ32aで選択されたPEの蛍光
強度が検出される。次に同一被検粒子が1bの位置を通
過する時には一≠手す23a、33aが閉じ、23b、
33bが開くよ一一パ、検出器25においてはバン ドパスフィルタ22bで選択されたSS強度が検出され
、検出器35においてはバンドパスフィルタ32bで選
択されたDCの蛍光強度が検出される。
When the test particle passes through the position 1a, the four types of light mentioned above are generated. At this time, the fluorescence intensity of FITC selected by the bandpass filter 22a is detected in the detector 25, and the detector At step 35, the fluorescence intensity of the PE selected by the bandpass filter 32a is detected. Next, when the same test particle passes through the position 1b, the handrails 23a, 33a are closed, 23b,
33b opens, the detector 25 detects the SS intensity selected by the bandpass filter 22b, and the detector 35 detects the DC fluorescence intensity selected by the bandpass filter 32b.

こうして2個の検出器で4種類の異なる光学特性の光の
測定値を得ることができる。これに光検出器8a、8b
で得られる2種類の前方散乱光強度を加えて、計6種類
の測定パラメータが得られる。
In this way, measurements of light with four different optical characteristics can be obtained using two detectors. In this, photodetectors 8a and 8b
By adding the two types of forward scattered light intensities obtained in , a total of six types of measurement parameters can be obtained.

使」目1又 次に側方光学系で4種類の蛍光色素で同時染色した検体
を測定できる、6チヤンネル検出が可能な使用例を説明
する。
An example of use will be described in which 6-channel detection is possible, in which specimens simultaneously stained with four types of fluorescent dyes can be measured using the first and second side optical systems.

第2図の構成に側方検出系をもう一つ付加して3個の光
検出器を宵する光学系において、第2図でレーザ光源2
として波長488nmのAr+レーザ光源を、またレー
ザ光源3として波長600nmの色素レーザ光源を用い
る。
In the optical system that includes three photodetectors by adding another side detection system to the configuration shown in Fig. 2, the laser light source 2 is
An Ar+ laser light source with a wavelength of 488 nm is used as the laser light source 3, and a dye laser light source with a wavelength of 600 nm is used as the laser light source 3.

被検粒子を染色する蛍光色素の種類は、波長488nm
の励起光で励起される蛍光、及び波長600nmで励起
される蛍光を選択する。例えば488nmに適したもの
としてFITC(530nm)、PE(570nm)を
用い、600nmに適したものとしてTR(610nm
)、APC(660nm)を用い、計4種類の蛍光で染
色する。
The type of fluorescent dye that stains the test particles has a wavelength of 488 nm.
The fluorescence excited by the excitation light and the fluorescence excited by the wavelength of 600 nm are selected. For example, FITC (530nm) and PE (570nm) are used as those suitable for 488nm, and TR (610nm) is used as those suitable for 600nm.
) and APC (660 nm), and stain with a total of four types of fluorescence.

前処理として検体を上記4種の蛍光で染色した後に、本
実施例の装置で測定を行う。ここで、ダイクロイックミ
ラー21a、21b、31a、31bの光分別波長をそ
れぞれ、570nm、605nm。
After staining the specimen with the four types of fluorescence described above as pretreatment, measurement is performed using the apparatus of this example. Here, the light separation wavelengths of the dichroic mirrors 21a, 21b, 31a, and 31b are 570 nm and 605 nm, respectively.

550nm、630nm程度に設定し、バンドパスフィ
ルタ22 a、 22 b、  32 a、  32 
b、  42 a。
Band pass filters 22 a, 22 b, 32 a, 32 are set to about 550 nm and 630 nm.
b, 42 a.

42bとしてそれぞれ488nm、600nm。42b is 488 nm and 600 nm, respectively.

530nm、610nm、570nm、660nm付近
の波長の光を選択的に透過させる特性のもの選択する。
A material having a characteristic of selectively transmitting light having wavelengths around 530 nm, 610 nm, 570 nm, and 660 nm is selected.

被検粒子がAr+レーザ光が照射される1aの位置を通
過する時、488 nmの照射光でFITC。
When the test particles pass through position 1a where Ar+ laser light is irradiated, FITC is performed with 488 nm irradiation light.

PEが励起され、488nm、530nm、570nm
の3種類の光が発生する。この時       。
PE is excited, 488nm, 530nm, 570nm
Three types of light are generated. At this time .

−1゜ ゛        検出器25にてSS(488nm)
が、検出器35でFITCが、検出器45でPEがそれ
ぞれ検出される。次に所定時間の後に同一の被検粒子が
色素レーザ光が照射されるlbの位置を通過する時は、
600nmの照射光でTR。
-1゜゛ SS (488nm) at detector 25
However, the detector 35 detects FITC and the detector 45 detects PE. Next, when the same test particle passes the lb position irradiated with the dye laser light after a predetermined time,
TR with 600 nm irradiation light.

APCが励起され、600nm、610nm、660n
mの3種類の光が発生する。この時点では、先造七検出
器25にてSS(600nm)が、検出器35でTRが
、検出器45でAPCがそれぞれ検出される。 以上の
ように本実施例では側方3個の検出器で側方散乱光2チ
ヤンネル、蛍光4チヤンネルの計6チヤンネル検出が可
能で、これに前方散乱光を加えた計7種類の異なる光学
特性の光が検出可能となる。
APC is excited, 600nm, 610nm, 660n
Three types of light are generated. At this point, SS (600 nm) is detected by the detector 25, TR is detected by the detector 35, and APC is detected by the detector 45. As described above, in this example, it is possible to detect a total of 6 channels, 2 channels of side scattered light and 4 channels of fluorescent light, with the 3 side detectors, and a total of 7 types of different optical characteristics including forward scattered light. light becomes detectable.

使」Lガ」− 上記使用例2と同様に、側方光学系で4種類の蛍光色素
で同時染色した検体を測定できる、6チヤンネル検出が
可能な別の使用例を説明する。
Similar to Usage Example 2 above, another usage example will be described in which a sample simultaneously stained with four types of fluorescent dyes can be measured using a side optical system and 6-channel detection is possible.

レーザ光源2として波長633nmのHe−Neレーザ
光源、また光源3として波長488nmのAr+レーザ
光源を用い、被検粒子を染色する蛍光色素の種類は、6
33nmの励起光に適したものとしてAPC(660n
m)、UL     ’i(695nm)を選択し、4
88nmの励起光に適したものとしてFITC(530
nm)、PI(620nm)を選択して、これら4種の
蛍光色素で検体を多重染色する。
A He-Ne laser light source with a wavelength of 633 nm was used as the laser light source 2, and an Ar+ laser light source with a wavelength of 488 nm was used as the light source 3, and the types of fluorescent dyes used to stain the test particles were 6.
APC (660n) is suitable for 33nm excitation light.
m), select UL'i (695nm), 4
FITC (530 nm) is suitable for 88 nm excitation light.
nm) and PI (620 nm), and multiple stain the specimen with these four types of fluorescent dyes.

そしてダイクロイックミラー21a、21b。and dichroic mirrors 21a and 21b.

31a、31bの光分別波長をそれぞれ、640nm。The optical separation wavelength of 31a and 31b is 640 nm, respectively.

500nm、670nm、550nm程度に設定し、バ
ンドパスフィルタ22a、22b、32a。
Bandpass filters 22a, 22b, and 32a are set to approximately 500nm, 670nm, and 550nm.

−32b、42a、42bとしてそれぞれ633nm。-633 nm as 32b, 42a, and 42b, respectively.

488nm、660nm、520nm、695nm。488nm, 660nm, 520nm, 695nm.

62Onm付近の波長の光を選択的に透過させる特性の
もの用いる。
A material having a characteristic of selectively transmitting light with a wavelength around 62 Onm is used.

これにより、上記使用例2と同様に、3個の光検出器を
有する側方光字系で6チヤンネルの検出が行える。
As a result, similarly to Usage Example 2, six channels can be detected with the side optical system having three photodetectors.

[発明の効果] 以上本発明によれば、測定モードに応じて使用しないビ
ームの光源を非作動とすることにより、低消費電力で寿
命の長い装置を提供することができる。
[Effects of the Invention] As described above, according to the present invention, by deactivating the light source of the beam that is not used depending on the measurement mode, it is possible to provide an apparatus with low power consumption and a long life.

【図面の簡単な説明】[Brief explanation of the drawing]

第1図は本発明の実施例の構成図、 第2図は実施例の側方の光学系の構成図、第3図は側方
の光学系の変形例の図、 第4図は実施例の信号波形図、 第5図は照射光学系の変形例の図、 第6図は従来例の構成図、 であり、図中の主な符号は、 1・・・・フローセル、 2.3・・・・レーザ光源、 8・・・・光検出器、 22.32・・・・バンドパスフィルタ、25.35・
・・・光検出器、 26.36・・・・NDフィルタ、 笛5区
Fig. 1 is a configuration diagram of an embodiment of the present invention, Fig. 2 is a configuration diagram of a side optical system of the embodiment, Fig. 3 is a diagram of a modification of the lateral optical system, and Fig. 4 is an embodiment. Figure 5 is a diagram of a modified example of the irradiation optical system, Figure 6 is a configuration diagram of a conventional example, and the main symbols in the diagram are: 1...flow cell, 2.3. ...Laser light source, 8...Photodetector, 22.32...Band pass filter, 25.35.
...Photodetector, 26.36...ND filter, 5th section of whistle

Claims (3)

【特許請求の範囲】[Claims] (1)測定モードを設定する設定手段と、 第1の照射光を生成し、検体が移動する第1の位置に照
射する第1照射手段と、 第2の照射光を生成し、前記第1の位置とは異なる第2
の位置に照射する第2照射手段と、前記第1、第2の位
置を通過する検体から発する第1、第2の光学特性の光
を同一光検出器で時系列に検出する光検出手段と、 前記設定された測定モードに応じて、前記第1の照射手
段、第2の照射手段の作動の有無を制御する制御手段と
、 を有することを特徴とする検体測定装置。
(1) a setting means for setting a measurement mode; a first irradiation means for generating a first irradiation light and irradiating it to a first position where the specimen moves; and a first irradiation means for generating a second irradiation light and for irradiating the first The second position is different from the position of
a second irradiation means that irradiates the position, and a light detection means that detects light having first and second optical characteristics emitted from the specimen passing through the first and second positions in time series using the same photodetector. A control means for controlling whether or not the first irradiation means and the second irradiation means are activated according to the set measurement mode.
(2)前記制御手段は、前記設定手段の設定に応じて、
前記第1、第2の照射手段のいずれか一方を作動させ他
方を非作動とするモードと、前記第1、第2の照射手段
の両方を作動させるモードとに切換える請求項(1)記
載の検体測定装置。
(2) The control means, depending on the settings of the setting means,
The method according to claim (1), wherein the mode is switched between a mode in which one of the first and second irradiation means is activated and the other is inactivated, and a mode in which both the first and second irradiation means are activated. Specimen measurement device.
(3)前記第1照射手段と第2照射手段はそれぞれレー
ザ光源を有し、前記照射手段が非作動の時はレーザ光源
をスリープモードにするか、あるいはレーザ光源の電源
を遮断する請求項(1)記載の検体測定装置。
(3) The first irradiation means and the second irradiation means each have a laser light source, and when the irradiation means is inactive, the laser light source is put into sleep mode or the power of the laser light source is cut off ( 1) The specimen measuring device described above.
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