JP5356222B2

JP5356222B2 - シンナモイル−ピペラジン誘導体およびｐａｒ−１拮抗薬としてのそれらの使用

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Publication number: JP5356222B2
Application number: JP2009515860A
Authority: JP
Inventors: ミシェル、ペレ; マリー、ラモト; ブルーノ、ル、グラン; ロベール、ルティエンヌ
Original assignee: ピエール、ファーブル、メディカマン
Priority date: 2006-06-19
Filing date: 2007-06-19
Publication date: 2013-12-04
Anticipated expiration: 2027-06-19
Also published as: NO20090270L; TW200808742A; KR101468752B1; TWI404710B; WO2007147824A1; MA30756B1; KR20090031572A; DE602007008572D1; FR2902426B1; RU2008152247A; IL195972A; MY144461A; EP2041104A1; EP2041104B1; FR2902426A1; CA2655527A1; NZ573764A; NO341389B1; BRPI0713132B8; ES2349324T3

Description

発明の背景

本発明は、シンナモイル−ピペラジン誘導体、それを製造する方法、それからなる医薬組成物ならびに動脈および／または静脈血栓症、急性冠症候群、再狭窄、安定狭心症、心拍障害、心筋梗塞、高血圧症、心不全、卒中、炎症性障害、肺疾患、胃腸疾患、慢性肝疾患患者における繊維症の発症、癌および皮膚疾患の治療および／または予防のための薬物としてのその使用に関する。本発明はまた、本発明の化合物と他の心血管薬との組合せにも関する。

血栓症は、血管閉塞の主な要因と考えられており、数多くの病態生理学的合併症の原因である。このことから、抗血栓薬療法は心血管死亡率および冠動脈イベントの危険性を低下させることができるため、極めて重要である。いくつかの種類の分子はヒトにおいて効果的な抗血栓作用を示すが、新規分子の必要性が残っている。実際には、既存の化合物に改良を行うことはできるが、既存の化合物の一部のものは出血時間に悪影響を及ぼすか、または他の望ましくない副作用（例えば、アスピリンによる潰瘍の危険性など）を伴う。

最近、プロテアーゼ活性化受容体−１（ＰＡＲ−１）がクローニングされ(Vu et al., Cell, 1991, 64: 1057-1068)、その作用機序が解明された(Coughlin et al., J. Clin. Invest. 1992, 89(2): 351-355)。この受容体は、血小板の表面上だけでなく、内皮細胞(O'Brien et al., J. Biol. Chem. 2000, 275: 13502-13509)、平滑筋細胞(Hamilton et al., Br. J. Pharmacol. 2000, 130: 181-188)および繊維芽細胞(Hung et al., J. Cell. Biol. 1992, 116(3): 827-832)の表面上にも著しく存在し、この受容体はトロンビンによって活性化されることからトロンビン受容体とも呼ばれている。このタンパク質のＮ末端はトロンビンによってアルギニン４１とセリン４２との間で切断されて、新しい末端を遊離し、この新しい末端は、活性部位でのホールディング後に、受容体作動薬として働く(Vu et al., Nature, 1991, 353, 674-677)。血小板に関して、この特異的なＰＡＲ−１受容体活性化機構がトロンビンを介した血小板凝集をもたらす。

この活性化を、例えばＰＡＲ−１受容体拮抗薬により遮断することで、トロンビンを介した血小板凝集を阻害することができる(Ahn et al., Drug of the Future, 2001, 26: 1065-1085)。そのため、これらの受容体を遮断することによって、血栓症(Derian et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 2003, 855-861)、急性冠症候群(Ossovskaya et al., Physiol. Rev., 2004, 84: 579-621)および再狭窄(Maryanoff et al., Curr. Med. Chem. Cardiovasc. Hematol. Agents., 2003, 13-36)の治療または予防につなげることができ、梗塞または再潅流時の心筋壊死を減少させることができる(Steinberg et al., Mol. Pharmacol. 2005, 67: 2-11)。肺系統(Moffatt et al., Curr. Op. Pharmacol., 2004, 221-229)および胃腸系統(Vergnolle et al., J. Clin. Invest., 2004, 1444-1456)では、ＰＡＲ−１拮抗薬活性によりある特定の炎症性疾患を予防することができる。ＰＡＲ−１拮抗薬は、慢性肝疾患を有する患者における繊維症の治療にも有用であり得る(Fiorucci et al., Hepatology, 2004, 39: 365-375)。ＰＡＲ−１拮抗薬が細胞増殖および転移を制御するように作用する場合には、そのＰＡＲ−１拮抗薬は抗癌剤としても有用であり得る(Evan-Ram et al., Nat. Med., 1998, 909-914; Boire et al., Cell., 2005, 120: 303-313)。最後に、ＰＡＲ−１拮抗薬は、ある特定の皮膚疾患を治療する皮膚病学において重要であり得る(Schechter et al., J. Cell. Physiol., 1998, 176:365-373; Algermissen et al., Arch. Dermatol. Res., 2000, 292:488-495; Meyer-Hoffert et al., Exp. Dermatol., 2004, 13: 234-241)。

本発明は、異なる化学構造と顕著な生物学的特性によって先行技術と区別される新規クラスのＰＡＲ−１拮抗薬に関する。

本発明の化合物は、一般式（Ｉ）：

〔式中：
Ｒ_１はハロゲン、ＣＮまたはＮＯ_２を表し、
Ｒ_２は水素またはハロゲンを表し、
ｎは１または２を表し、
Ｒ_３は、１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニル；またはシクロヘキシルを表す〕
の化合物またはその治療上許容される塩もしくは溶媒和物である。

上記定義において：
置換基または変数の総ての組合せが可能であるが、それらの組合せが安定な化合物をもたらす限りにおいてである。

用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を表す。

用語「アルキル」は、指定数の炭素原子を含む、直鎖または分岐の、飽和または不飽和脂肪族炭化水素鎖を表す。

本発明の化合物の治療上許容される塩には、本発明の化合物の従来の無毒の塩、例えば有機または無機酸から生成されるものが含まれる。例として、次のものを挙げることができる：塩酸、臭化水素酸、リン酸および硫酸などの無機酸の塩、ならびに酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ステアリン酸および乳酸などの有機酸の塩。

これらの塩は、塩基部分を含む本発明の化合物と対応する酸から、従来の化学的方法に従って合成することができる。

本発明の化合物の治療上許容される溶媒和物には、従来の溶媒和物、例えば、本発明の化合物の最終製造工程中に溶媒が存在する結果として生成されるものが含まれる。水またはエタノールが存在することによる溶媒和物を例として挙げることができる。

本発明による一般式（Ｉ）の化合物のうち、特に有利な一クラスの化合物は、Ｒ_１がハロゲンであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３が１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニルである一般式（Ｉ）の化合物である。

もう１つの特に有利なクラスの本発明による化合物は、Ｒ_１がシアノであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３が１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニルである一般式（Ｉ）の化合物である。

もう１つの特に有利なクラスの本発明による化合物は、Ｒ_１がハロゲンであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３がシクロヘキシルである一般式（Ｉ）の化合物である。

もう１つの特に有利なクラスの本発明による化合物は、Ｒ_１がシアノであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３がシクロヘキシルである一般式（Ｉ）の化合物である。

本発明はまた、次の合成ダイヤグラムに記載される一般的な方法による一般式（Ｉ）の化合物の製造にも関し、この一般的な方法は、場合によっては、文献に記載されているか、当業者に公知であるか、または実験の節に提示されている任意の標準的な技術によって補われる。

ダイヤグラム１は、一般式（Ｉ）の化合物の製造に用いることができる第一の一般的な方法を例示している。上記一般式では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびｎは、一般式（Ｉ）の上記説明のとおりに定義される。Ｐ_１は保護基を表す。Ｘは、塩素などの脱離基を表すことができる。この場合、第一の工程は酸塩化物とアミンとの反応からなる。この反応は、当業者に公知の方法および技術によって行うことができる。特に有利な方法は、これらの２つの存在物を、例えば、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ピリジン、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３またはＫ_２ＣＯ_３などの有機または無機塩基の存在下で、ＴＨＦ、ジクロロメタン、ＤＭＦまたはＤＭＳＯなどの溶媒中において−２０°〜１００℃の温度で反応させることからなる。Ｘはヒドロキシルを表すこともできる。この場合、第一の工程はカルボン酸（ＩＩ）とアミン（ＩＩＩ）との縮合反応である。この反応は、当業者に公知の方法および技術によって行うことができる。特に有利な方法は、これらの２つの存在物を、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）、３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン、およびジイソプロピルエチルアミンなどの第３級アミンの存在下で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中において−１５℃〜４０℃の温度で反応させることからなる。

当業者に公知の方法および技術（"Protective Groups in Organic Synthesis, "T. W. Greene, John Wiley & Sons, 1981および"Protecting Groups, "P.J. Kocienski, Thieme Verlag, 1994）による中間体（ＩＶ）の脱保護の後、得られた中間体を式Ｒ_３（ＣＨ_２）_ｎＹ（式中、Ｙは、例えば、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ_２ＣＨ_３、ＯＳＯ_２ＣＦ_３またはＯ−トシルなどの脱離基を表す）の試薬と反応させることができる。この場合、前記反応は、ＰＳ−ＤＩＥＡまたはＭＰ−カーボネートなどの樹脂上に担持させることができる、例えば、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３またはＫ_２ＣＯ_３などの有機または無機塩基の存在下で、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＤＭＳＯなどの極性無水溶媒中において−２０°〜１００℃の温度で行われる。もう１つの製造方法は、還元アミノ化反応を、式Ｒ_３−（ＣＨ_２）_ｎ−１−ＣＨＯ（式中、Ｒ_３およびｎは上記に定義されるとおりである）のアルデヒドとともに、一般式（ＩＶ）の脱保護されたアミン、およびＭＰ−ＢＨ_３ＣＮなどの樹脂上に担持させることができる、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＨ_３ＣＮまたはＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３などの還元剤を用いて、１，２−ジクロロエタン、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＭｅＯＨなどの極性溶媒中において、酢酸などの酸を加えることにより制御することができるｐＨで−２０℃〜１００℃の温度で行うことからなる。

ダイヤグラム２は、一般式（Ｉ）の化合物の調製に用いることができる第二の一般的な方法を例示している。上記一般式では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびｎは、一般式（Ｉ）の説明のとおりに定義される。Ｘは、塩素などの脱離基を表すことができる。この場合、合成は酸塩化物とアミンとの反応からなる。この反応は、当業者に公知の方法および技術によって行うことができる。特に有利な方法は、これらの２つの存在物を、例えば、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ピリジン、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３またはＫ_２ＣＯ_３などの有機または無機塩基の存在下で、ＴＨＦ、ジクロロメタン、ＤＭＦまたはＤＭＳＯなどの溶媒中において、−２０°〜１００℃の温度で反応させることからなる。

Ｘはヒドロキシルを表すこともできる。この場合、合成はカルボン酸（ＩＩ）とアミン（Ｖ）との縮合からなる。この反応は、当業者に公知の方法および技術によって行うことができる。特に有利な方法は、一般式（ＩＩ）のカルボン酸と一般式（Ｖ）のアミンとを、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）、３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン、およびジイソプロピルエチルアミンなどの第３級アミンの存在下で、ジクロロメタンなどの極性非プロトン性溶媒中において、−１５℃〜４０℃の温度で縮合することからなる。

少なくとも１つの塩基官能基を含む一般式（Ｉ）の化合物を、酸を加えることにより塩状態で単離することが望ましいときには、そのような結果を、（少なくとも１つの塩基官能基が存在する）一般式（Ｉ）の遊離塩基を、好ましくは等量の、好適な酸で処理することにより得ることができる。

次の実施例は本発明を例示するものであり、本発明の範囲を何ら限定するものではない。

実施例１
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン

実施例１Ａ −４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（５．５９ｍｌ，４０．２ｍｍｏｌ）の存在下、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．０ｇ，２６．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍｌ）溶液を、臭化４−フルオロベンジル（３．６８ｍｌ，２９．５ｍｍｏｌ）で室温で処理する。１６時間の攪拌の後、この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、９８／２〜９５／５ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ混合物で溶出する。白色の固体（７．０３ｇ，８８％）として生成物１Ａを単離する。
¹H NMR, DMSO-d₆ (ppm) : 1.38( s , 9H) ; 2 . 2 9 ( t , 4H) ; 3 . 30 (ブロード s , 4H) ; 3 . 45 ( s , 2H) ; 7 . 14 ( t , 2H) ; 7 . 32 ( dd, 2H) .

実施例１Ｂ：−４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン
４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７．０３ｇ，２３．８ｍｍｏｌ）のトルエン（３００ｍｌ）溶液を、トリフルオロ酢酸（５３．２ｍｌ，７１６ｍｍｏｌ）で室温で処理する。２時間の攪拌の後、この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎソーダ、続いて水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。次の反応のために粗生成物を単離する（４．２ｇ，９０％）。

実施例１：−３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン
２−クロロ−桂皮酸（２．４３ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）と４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン（２．１６ｇ，１１．１ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（７０ｍｌ）溶液を、ＤＩＥＡ（３．８６ｍｌ，２２．２ｍｍｏｌ）の存在下、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）塩酸塩（２．５５ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）および３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＨＯＯＢＴ）（２．１７ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）で室温で処理する。４８時間の攪拌の後、この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１Ｎソーダ、続いて水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、９７．７５／２／０．２５ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ混合物で溶出する。黄色の油（３．７７ｇ，９５％）として生成物１を単離する。この生成物を酢酸エチルで溶かし、ＨＣｌのエーテル溶液を加えることにより塩化して、黄色の固体（４．１４ｇ）として対応する塩酸塩を得る。

¹H NMR, DMSO-d₆ (ppm) : 3.02 (m, 2H); 3.21 (t, 1H); 3.63 (t, 1H); 4.05 (ブロード s, 2H); 4.34 (s, 2H); 4.52 (t, 2H); 7.32 (m, 3H); 7.43 (m, 2H); 7.53 (m, 1H); 7.66 (m, 2H); 7.92 (d, 1H); 8.00 (m, 1H); 11.49 (s, 1H).
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３５９（Ｍ＋Ｈ^＋）
元素分析：Ｃ_２０Ｈ_２０Ｎ_２Ｏ_１・ＨＣｌおよび０．５Ｈ_２Ｏ
理論値％：Ｃ５９．４１；Ｈ５．４８；Ｎ６．９３
測定値％：Ｃ５９．３９；Ｈ５．５６；Ｎ６．９２．

実施例２〜４
化合物１の調製について記載された条件に従って、桂皮酸と対応するアミンから化合物２〜４を合成した。

実施例５
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン

実施例５Ａ：４−［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−アクリロイル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＰＳ−ＤＩＥＡ（４．０７ｇ，１３．５ｍｍｏｌ，３．３３ｍｍｏｌ／ｇ）の存在下、塩化３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−アクリロイル（３．０ｇ，１４．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７０ｍｌ）溶液を、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．３ｇ，１２．３ｍｍｏｌ）で室温で処理する。６時間の攪拌の後、この反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで溶かし、１Ｎソーダ、そして水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、９５／４．５／０．５〜９０／９．５／０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ混合物で溶出する。灰白色の固体（３．８７ｇ，８９％）として生成物５Ａを単離する。

¹H NMR, DMSO-d₆ (ppm) : 1.42 (s, 9H); 3.37 (ブロード s, 4H); 3.58 (ブロード s, 4H); 7.22 (m, 2H); 7.50 (m, 1H).

実施例５Ｂ：−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−ピペラジン−１−イル−プロペノン
４−［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−アクリロイル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．８７ｇ，１０．９７ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍｌ）溶液を、トリフルオロ酢酸（３０ｍｌ，３９５ｍｍｏｌ）で室温で処理する。２時間の攪拌の後、この反応混合物を蒸発乾固し、ジクロロメタンで溶かし、１Ｎソーダ、続いて水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。次の反応のために粗生成物を単離する（２．３ｇ，８８％）。

実施例５：−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン
トリエチルアミン（Ｅｔ_３Ｎ）（０．０８８ｍｌ，０．６３ｍｍｏｌ）の存在下、化合物５Ｂ（１００ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍｌ）溶液を、臭化４−フルオロベンジル（０．０７８ｍｌ，０．６３ｍｍｏｌ）で室温で処理する。１５時間の攪拌の後、この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄する。この有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、１００／０〜９０／１０ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ混合物で溶出する。ライトベージュ色の固体（７２ｍｇ，４８％）として生成物５を単離する。
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３６１（Ｍ＋Ｈ^＋）．

実施例６〜１２
化合物５の調製について記載された条件に従って、中間体５Ｂと対応する塩化ベンジルまたは臭化ベンジルから化合物６〜１２を合成した。

実施例１３〜２１
実施例１３Ａ：−３−（２−クロロ−フェニル）−１−ピペラジン−１−イル−プロペノン
化合物５Ｂの調製について記載された条件に従って、塩化３−（２−クロロ−フェニル）−アクリロイルから２段階で化合物１３Ａを調製した。

実施例１３〜２１：化合物５の調製について記載された条件に従って、中間体１３Ａから化合物１３〜２１を合成した。

実施例２２
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン

酢酸（０．０５７ｍｌ，１．０ｍｍｏｌ）の存在下、中間体５Ｂ（６０ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）と２−フルオロ−ベンズアルデヒド（０．０３１ｍｌ，０．３ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロメタン（３ｍｌ）溶液を、ＭＰ−ＢＨ_３ＣＮ（１１７ｍｇ，０．２７５ｍｍｏｌ，２．３５ｍｍｏｌ／ｇ）で室温で処理する。２４時間の攪拌の後、この反応混合物を、予め１ＮＮａＯＨを含浸させたＣｈｅｍＥｌｕｔカートリッジで濾過した後、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、１００／０〜９５／５ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ混合物で溶出する。黄色のシロップ（２３ｍｇ，２５％）として生成物２２を単離する。
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３６１（Ｍ＋Ｈ^＋）．

実施例２３
１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン

実施例２３Ａ：３−（２−ニトロ−フェニル）−１−ピペラジン−１−イル−プロペノン
化合物５Ｂの調製について記載された条件に従って、塩化３−（２−ニトロ−フェニル）−アクリロイルから２段階で化合物２３Ａを調製した。

実施例２３：１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン
化合物２２の調製について記載された条件に従って、化合物２３Ａから化合物２３を合成した。
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３７０（Ｍ＋Ｈ^＋）．

実施例２４
１−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−プロペノン

化合物２２の調製について記載された条件に従って、化合物５Ｂから化合物２４を合成した。
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３４９（Ｍ＋Ｈ^＋）．

実施例２５〜２８
化合物１の調製について記載された条件に従って、１−シクロヘキシルメチル−ピペラジンと対応する桂皮酸から化合物２５〜２８を合成した。

実施例２９〜３３
化合物５の調製について記載された条件に従って、化合物２３Ａと対応する塩化ベンジルまたは臭化ベンジルから化合物２９〜３３を合成した。

実施例３４
１−［４−（２，６−ジメチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン

酢酸（０．０９２ｍｌ，１．６ｍｍｏｌ）の存在下、化合物２３Ａ（７０ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）と２，５−ジメチル−ベンズアルデヒド（４０ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）の混合物のジクロロエタン（３ｍｌ）溶液を、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（６３ｍｇ，０．２９７ｍｍｏｌ）で室温で処理する。２４時間の攪拌の後、この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３（２ｍｌ）で処理し、ＣｈｅｍＥｌｕｔカートリッジで濾過し、蒸発乾固する。得られたシロップをシリカカラムクロマトグラフィーにより精製し、１００／０〜９０／１０ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（＋１０％ＮＨ_４ＯＨ）混合物で溶出する。生成物３４を単離した後、エーテル中のＨＣｌを加えることにより塩化して、白色の固体（４０ｍｇ，４０％）を得る。
質量スペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３８０（Ｍ＋Ｈ^＋）．

実施例３５〜３８
化合物５の調製について記載された条件に従って、化合物５Ｂ、化合物１３Ａおよび化合物２３Ａと、対応する塩化フェネチルまたは臭化フェネチルから、化合物３５〜３８を合成した。

本発明の誘導体は、下記モデルの結果より示されるようにＰＡＲ−１受容体拮抗薬である：
種々の細胞種において、ＳＦＬＬＲペプチド（選択的ＰＡＲ−１作動薬）によるＰＡＲ−１受容体の活性化は、細胞内シグナルカスケードを誘発し、小胞体によるカルシウムの放出をもたらす。チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞はＰＡＲ−１受容体を構成的に発現する。この細胞系統では、ＳＦＬＬＲによる受容体の活性化の結果のカルシウムの放出は、蛍光測定技術（蛍光イメージングプレートリーダー、すなわちＦＬＩＰＲ）によりカルシウムに対する選択的プローブ（Ｆｌｕｏ−３ＡＭ）を用いて測定される。蛍光発光はＰＡＲ−１作動薬の能力やその濃度に薬理学的に比例する。本発明に記載される化合物は、ＰＡＲ−１受容体に拮抗することができることから、前記作動薬によって誘発されるカルシウムの放出を減少させることができることが証明されている。

材料：
培養培地：１０％ウシ胎児血清および抗生物質（プロベネシド、２．５ｍＭ）を補給したハムＦ−１２(Ham, R. G., Proc. Nat. Acad. Sci. 1965, 53: 288)。
蛍光プローブ：Ｆｌｕｏ−３ＡＭ（４μＭ；Teflabs, Austin, Texas, USA）
作動薬：ＳＦＬＬＲ−ＮＨ_２（セリン、フェニルアラニン、ロイシン、ロイシン、アルギニン）。

方法：
ＣＨＯ細胞を９６ウェルプレートに、２００μｌの培養培地の存在下で２４時間接種する（１ウェル当たり６０，０００細胞）。これらの細胞をカルシウム蛍光プローブとともに３７℃で１時間インキュベートする。次いで、これらの細胞を、シグナルを測定する１０分前に洗浄する。その後、ＰＡＲ−１拮抗薬を注入する（０．０１μＭ〜１０μＭ）。これらのプレートをＦＬＩＰＲ(Molecular Devices, UK)に入れて、カルシウム蛍光を２波長で測定する（４８８ｎｍおよび５４０ｎｍ：Sullivan et al., Calcium Calcium Signaling Protocols 1999, 125-136）。拮抗薬を加える前に５分間、その投与の後に１０分間測定する。４つの異なるウェルにおいてベースライン蛍光を引いた最大蛍光を測定する。試験は二連で行う。これらの条件下において、本発明の誘導体はＰＡＲ−１受容体拮抗薬であると確認された（拮抗作用＞１０μＭにおけるカルシウムシグナルの６０％）。ＳＦＬＬＲ作動薬で得られた用量応答曲線（０．０１μＭ〜３２μＭ）により最大効果の５０％をもたらす効果的な濃度（ＥＣ_５０）の決定を可能にした。本発明に記載されるＰＡＲ−１拮抗薬のいくつかの強度（ｐＡ２）は、Arunlakshana and Schild (Brit. J. Pharmacol., 1959, 14: 48-58)の方法を用いて、３つの濃度において認められたＥＣ_５０のシフトから算出した。

結果：
本発明の化合物の中から選択された、次のいくつかの実施例は、これらの化合物の、ＰＡＲ−１受容体に拮抗する全く予期せぬ能力を示している。

ＰＡＲ−１拮抗薬のin vivoでの抗血小板作用および抗血栓作用は、血行力学的剪断応力が非常に高い動脈血栓症のモルモットモデルにおいて示されている。血管床では、内皮病変により多血小板血栓が血管内に形成し、この血栓が血管腔の総てを徐々に閉塞する。血小板凝集過程はＰＡＲ−１受容体を介してトロンビンにより強く活性化される。本発明に記載される化合物は、ＰＡＲ−１受容体に拮抗することができることから、血栓形成を遅らせることができることが証明されている。

材料：
研究はモルモット（ヒトに類似したＰＡＲ−１受容体）を使用して行う。感光剤（静脈内に投与されるローズベンガル）の存在下での緑色レーザー光による照射により頸動脈内皮に損傷を与える。遷音速流プローブを使用して頸動脈の流速を定量する。頸動脈を完全に閉塞するのに要する時間（流速０）を測定する。

方法：
動物に麻酔をかけた後（６０ｍｇ／ｋｇペントバルビタール）、頚動脈５ｍｍを切除し、動脈から４ｍｍ上にレーザーの場所を定める。上流に配置した流れプローブにより閉塞時間を測定する。ローズベンガル（２０ｍｇ／ｋｇ）は、静脈内経路により投与し、５１４ｎｍの波長で血管に照射する（３分間）。ＰＡＲ−１拮抗薬は、（ローズベンガルの投与直前に２分かけて）ボーラスを用いて静脈内経路により投与し、続いて、１５分の灌流を行う。この灌流は、レーザーを作動させたときに開始する。

結果：
本発明に記載されるある特定の化合物は、静脈内経路による０．１６ｍｇ／ｋｇ〜２．５ｍｇ／ｋｇの用量での投与後に、ビヒクル単独を受けた動物と比べて血栓の形成までの時間を５％〜１３５％遅らせることができることを示した。

本発明による誘導体は心房細動の治療にも有用である。

梗塞後心腔容量過負荷の場合、右心耳および左心耳は拡張し、そのため、心房細動発生の基質となる。心房細動に罹患した患者の拡張した心耳の腔における止血障害は、異常濃度のトロンビンにつながる。本発明者らは、このトロンビンの蓄積が繊維芽細胞の増殖だけでなく血小板血栓の形成も誘発し得るＰＡＲ−１のアップレギュレーションに関与することを証明した。

このように、上記作用機序によって、ＰＡＲ−１拮抗薬は、心房細動に罹患した患者の心房拡張、繊維芽細胞増殖および心耳内での血栓形成を防止することができる。

結果として、ＰＡＲ−１拮抗薬は、心房細動に効果的な予防的および／または治療的処置薬となる。本発明に記載される化合物は、ＰＡＲ−１受容体に拮抗することができ、心耳拡張を防止することができることが証明されている。

材料：
研究は雄ラットを使用して行う。手術に最もよく耐えることから、試験には到着時に体重範囲１８０〜２００ｇのラットを選択した。麻酔をかけた動物において心エコー検査法により様々な心筋腔の測定を行った。

方法：
酸素中イソフランの３．５％混合物(Aerrane, Baxter Laboratories)により動物に麻酔をかける。第４肋間において左前足方向に、胸骨に垂直におよそ２ｃｍの開胸を行う。その開始点から１ｍｍの左冠動脈周囲に結紮糸（４−０絹、ＣＣ１針、Ethicon）をかける。左冠動脈周囲に、血管を完全に閉塞するのに十分にきつい外科結びを結ぶ。連続記録心電図により結紮の位置決めが申し分ないことを確認することができる。処置の２ヵ月後、心腔の心エコー測定とパルスドプラーを用いた心筋内血流速度測定のために動物に再度麻酔をかける。最後に、様々な組織学的測定のためにペントバルビタールナトリウム過量（１６０ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ）により動物を安楽死させる。梗塞の２４時間後から動物を犠牲にするまで毎日動物にＰＡＲ−１拮抗製剤を無理やり与える。

結果：
本発明に記載されるある特定の化合物は、経口経路による１０〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で６０日間の投与後に、未処置の動物と比べて心耳表面を２０％〜９０％減少させることができる（心エコー検査法による測定）ことを示した。

本発明はまた、有効成分としての一般式（Ｉ）の化合物、またはその薬学上許容される塩を、好適な賦形剤と混合または組み合わせて含む医薬組成物にも関する。かかる組成物は、例えば、固体もしくは液体組成物、エマルジョン、ローションまたはクリームの形をとることができる。

経口投与用の固体組成物としては、錠剤、丸剤、散剤（ゼラチンカプセルに入れるかもしくは小包に入れる）または顆粒剤を使用することができる。かかる組成物では、本発明による有効成分は、１種以上の不活性希釈剤（デンプン、セルロース、スクロース、ラクトースまたはシリカなど）とアルゴン流下で混合される。かかる組成物には、希釈剤以外の物質、例えば１種以上の滑沢剤（ステアリン酸マグネシウムもしくはタルクなど）、着色剤、コーティング剤（糖衣丸剤用）またはワニスも含めてよい。

経口投与用の液体組成物としては、次のものを使用することができる：不活性希釈剤（水、エタノール、グリセロール、植物油または流動パラフィンなど）を含む薬学上許容される液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤およびエリキシル剤。かかる組成物には、希釈剤以外の物質、例えば湿潤剤、甘味剤、増粘剤、香味剤または安定剤を含めることができる。

非経口投与用の滅菌組成物は、好ましくは、水性もしくは非水性液剤、懸濁剤または乳剤であり得る。溶媒またはビヒクルとしては、次のものを使用することができる：水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特にオリーブ油、注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルまたは他の好適な有機溶媒。かかる組成物には、添加剤、特に湿潤剤、等張剤、乳化剤、分散剤および安定剤も含めることができる。滅菌はいくつかの方法により、例えば滅菌濾過により、組成物に滅菌剤を組み込むことにより、照射によりまたは加熱により、行うことができる。かかる組成物は、使用直前に滅菌水または任意の他の注射可能な滅菌媒質に溶かすことができる滅菌固体組成物の形で調製することもできる。

直腸投与用の組成物は、活性産物の他に、賦形剤（ココア脂、半合成グリセリドまたはポリエチレングリコールなど）を含む坐剤または直腸カプセル剤である。

局所投与用の組成物は、例えば、クリーム剤、ローション剤、点眼剤、口内洗浄剤、点鼻剤またはエアゾール剤であり得る。

用量は望ましい効果、治療期間および投与経路によって決まり、成人の場合、好ましくは経口経路により、一般には１日当たり０．００１ｇ〜１ｇ（好ましくは０．００５ｇ〜０．７５ｇ）であり、単位用量は活性物質０．１ｍｇ〜５００ｍｇの範囲である。

一般には、医師は、その症例の患者の年齢、体重および他の特異的因子に従って好適な投与量を確立するであろう。

特定の実施形態によれば、本発明はまた、一般式（Ｉ）の化合物と、心血管療法において同時に、別個にまたは徐放的に用いる併用製品としてのもう１つの心血管薬とを含む製品にも関し、もう１つの心血管薬は、抗血小板薬、例えばアスピリン、クロピドグレル、チクロピジン、アブシキマブ、チロフィバンまたはエプチフィバチドであり得る。

本発明のさらなる特徴によれば、一般式（Ｉ）の化合物は、平滑筋細胞の増殖（再狭窄）を抑制するための、ならびに／または内皮細胞、繊維芽細胞、心臓繊維芽細胞、グリア細胞、平滑筋細胞もしくは癌細胞の増殖の治療的および／もしくは予防的処置のための薬物の製造において有用である。

Claims

一般式（Ｉ）の化合物ならびにその治療上許容される塩もしくは溶媒和物：

〔式中：
Ｒ_１はハロゲン、ＣＮまたはＮＯ_２を表し、
Ｒ_２は水素またはハロゲンを表し、
ｎは１または２を表し、
Ｒ_３は、１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニル；またはシクロヘキシルを表す〕。
Ｒ_１がハロゲンであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３が１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニルである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１がシアノであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３が１つ以上のハロゲンもしくはＣ_１−Ｃ_６アルキルによって置換されたフェニルである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１がハロゲンであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３がシクロヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１がシアノであり、Ｒ_２が水素であり、ｎが１であり、Ｒ_３がシクロヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−フルオロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−ブロモ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（４−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（４−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（３，４−ジメチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（４−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（３−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（３−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（２−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（３−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（４−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−クロロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（２−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（２−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−クロロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（３−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（３−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−クロロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（２，３−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−［４−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−プロペノン；
１−［４−（２−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−プロペノン；
２−［３−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−３−オキソ−プロペニル］−ベンゾニトリル；
１−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−３−（２−フルオロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−（４−シクロヘキシルメチル−ピペラジン−１−イル）−プロペノン；
１−［４−（４−フルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（４−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（４−クロロ−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（３−メチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
１−［４−（２，６−ジメチル−ベンジル）−ピペラジン−１−イル］−３−（２−ニトロ−フェニル）−プロペノン；
３−（２−クロロ−フェニル）−１−｛４−［２−（４−フルオロ−フェニル）−エチル］−ピペラジン−１−イル｝−プロペノン；
ならびにその治療上許容される塩および溶媒和物
から選択される、請求項１に記載の化合物。
薬物として用いるための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の一般式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、一般式（ＩＩ）：

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は、請求項１に記載の一般式（Ｉ）の説明のとおりに定義され、Ｘは脱離基を表すことができ、あるいはＸはヒドロキシルを表すことができる〕
の中間体と、一般式（ＩＩＩ）：

〔式中、Ｐ_１は保護基を表す〕
のアミンとを縮合することを含んでなり、得られた一般式（ＩＶ）：

〔式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＰ_１は上記のとおりに定義される〕の中間体から、一般式Ｒ_３（ＣＨ_２）_ｎＹ〔式中、Ｒ_３は、上記の説明のとおりに定義され、Ｙは脱離基を表す〕の試薬を用いた、あるいは式Ｒ_３−（ＣＨ_２）_ｎ−１−ＣＨＯ〔式中、Ｒ_３およびｎは上記のとおりに定義される〕のアルデヒドを用いた、アミンの脱保護および反応の後に一般式（Ｉ）の化合物が得られる、方法。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の一般式（Ｉ）の化合物を製造する方法であって、一般式（ＩＩ）：

〔式中、Ｒ_１およびＲ_２は上記のとおりに定義され、Ｘは脱離基またはヒドロキシルを表すことができる〕
の中間体と、一般式（Ｖ）：

〔式中、ｎおよびＲ_３は上記のとおりに定義される〕
のアミンを縮合させて一般式（Ｉ）の化合物を得ることを含んでなる、方法。
活性成分として請求項１〜６のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物を、薬学上許容されるビヒクルと組み合わせて含んでなる、医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、トロンビン−受容体拮抗薬。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、血小板凝集抑制薬。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、動脈および/または静脈血栓症の治療的および／または予防的処置用の医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、安定狭心症、心拍障害、脳血管障害、心不全、高血圧症または心筋梗塞の治療的および／または予防的処置用の医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、心房細動および心筋リモデリングの治療的および／または予防的処置用の医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、急性冠症候群の治療的および／または予防的処置用の医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、平滑筋細胞の増殖（再狭窄）を抑制するための医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、炎症性障害、肺疾患、胃腸疾患、慢性肝疾患患者における繊維症の発症または皮膚疾患の治療的および／または予防的処置用の医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、内皮細胞、繊維芽細胞、心臓繊維芽細胞、グリア細胞、平滑筋細胞または癌細胞の増殖の治療的および／または予防的処置のための医薬組成物。
請求項１〜６のいずれか一項に記載の少なくとも１種の化合物と、心血管療法において同時に、別個にまたは徐放的に用いる併用製品としてのもう１つの心血管薬とを含む、製品。
もう１つの心血管薬が血小板凝集抑制薬である、請求項２０に記載の製品。
Ｘにより表される脱離基が塩素である、請求項８または９に記載の方法。
Ｙにより表される脱離基が、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ_２ＣＨ_３、ＯＳＯ_２ＣＦ_３またはＯ−トシルである、請求項８に記載の方法。
血小板凝集抑制薬が、アスピリン、クロピドグレル、チクロピジン、アブシキマブ、チロフィバンまたはエプチフィバチドである、請求項２１に記載の製品。