JP4357838B2 - 殺寄生生物組成物および使用方法 - Google Patents

Description

（発明の分野）
本発明は、外寄生生物を制御するための組成物に関する。具体的には、本発明は、グリコールエーテルおよび／またはテルペンを含む溶媒系を含む、寄生生物用のピレスロイドおよびピレトリン含有処方物を提供する。

（発明の背景）
ピレトリンは、菊の花の熱帯性株（Ｐｙｒｅｔｈｒｕｍ ｃｉｎｅｒａｒｉａａｅｆｏｌｉｕｍ）から抽出された天然化合物である。ピレスロイドは、ピレトリンの合成アナログである。ピレトリンおよびピレスロイドの両方は、例えば、米国特許第４，０２０，１８１号に記載されるように、動物に対する外寄生生物（例えば、ノミ、ハエおよびマダニ）外寄生を制御するための殺虫剤として使用されてきた。この目的のための好ましいピレスロイドは、ペルメトリンである。

投与目的のために、ピレスロイドまたはピレトリンは、代表的に、液体キャリア中に処方され、次いでノミまたは他の外寄生生物からの免荷を必要とする動物に局所的に適用される。所望のキャリア物質は、活性な薬剤と混合されて、動物へと注がれ得る処方物を提供する、溶媒である。ピレスロイドおよびピレトリンについてのキャリア物質としては、例えば、芳香族石油生成物（例えば、キシレンおよびトルエン）、シクロヘキサミン、アルコール、コーン油、ユーカリ油、およびアルキルグリコールエーテルが挙げられる。ほとんどの先行技術のピレスロイド含有殺寄生生物処方物は、５０重量％までのピレスロイドのみを含むが、米国特許第５，２３６，９５４号は、ピレスロイド処方物、特にペルメトリン処方物を開示しており、これは、アルキルグリコールエーテル（例えば、ジエチレングリコールモノメチルエーテル）を使用することによって、５０重量％より高い濃度のペルメトリンを含む。このような高い濃度の活性成分を有する殺寄生生物組成物は、小さく、容易に適用され、なお有効な用量を可能にする。

５０重量％より高い濃度の活性成分は、局所的適用をより簡便かつより美的に受容可能にする。濃度が高くなるほど、有効な外寄生生物制御のための用量は少なくなる。小用量は、皮膚の比較的小さい領域に適用され得、従って、宿主が溶媒に覆われることを防止する。この処方および適用方法は、家のコンパニオン動物（例えば、イヌ）の処置に特に有用である。なぜなら、動物は、適用の直後に触っても、溶媒を滴らせも、ねばねばしたりもしないからである。このような小用量は、処置した動物が、気付くことなく適用できるので、投与が容易であり得る。この組成物は、１以上の小用量として、動物の局在した領域に適用され、ピレスロイドは、移動して、動物の比較的全体にわたる外寄生生物の外寄生を有効に制御する。従って、５０重量％より多いピレスロイドを含む処方物は、総処方物の５０重量％までのみの最大濃度を有する処方物には存在しない多くの利点を獲得する。

活性成分のより高い濃度（例えば、６５％以上のペルメトリン溶液）では、処方物中に存在する溶媒は大量ではなく、そしてピレスロイドおよびピレトリンが、より低い温度（例えば、約２０℃未満）で結晶化し得ることが発見されている。このことは、動物への投与のために利用可能な溶液中のピレスロイドまたはピレトリンの濃度が減少することを意味するので、問題である。従って、より低い温度でのピレスロイドまたはピレトリンの結晶化を予防または最小化する溶媒系についての必要性が存在する。

現在市場にある製品から利用可能な効力期間よりも長い効力期間を有する処方物を開発する必要性もまた存在する。より長い期間にわたって有効である製品は、明らかに、所望である。なぜなら、これらは、よりコスト効率がよく、そして有効な保護を提供する時間にわたって、より少ない適用を必要とするからである。

（発明の要旨）
本発明は、外寄生生物の外寄生を制御するための材料および方法を提供することによって、この必要性を満たす。

本発明の１局面は、ピレスロイドまたはピレトリンおよびキャリアを含む、動物に対する局所的適用のための殺寄生生物組成物を提供し、ここで、このキャリアは、テルペン（例えば、ｄ−リモネン）を含む。本発明の別の実施形態において、このキャリアはまた、アルキルグリコールエーテルを含む。好ましいアルキルグリコールエーテルとしては、プロピレングリコールモノメチルエーテル、ジプロピレングリコールモノメチルエーテルおよび／またはジエチレングリコールモノメチルエーテルが挙げられる。特に好ましい組成物は、総組成物の５０重量％より多い量で、ピレスロイドまたはピレトリンを含む。さらにより好ましい組成物は、総組成物の少なくとも約６５重量％より多い量で、ピレスロイドまたはピレトリンを含む組成物である。好ましくは、このピレスロイドは、ペルメトリンである。

（発明の詳細な説明）
本明細書で引用される全ての参考文献は、その全体が参考として本明細書によって援用される。

本発明は、動物、特に家畜（イヌおよびネコ、ウマもまた含む）ならびに食料生産動物（例えば、ウシ、ヒツジおよびブタ）において見出され得る外寄生生物を制御するための組成物を提供する。この組成物は、外寄生生物（ノミ、マダニ、疥癬、ダニ、蚊、有害（ｎｕｉｓａｎｃｅ）なハエおよびカミツキバエ（ｂｉｔｉｎｇ ｆｌｙ）、シラミ、類人猿の（ａｎｔｈｒｏｐｏｄ）疾患媒体動物を含む）ならびに内部寄生生物（例えば、イヌ糸状虫、鉤虫および蠕虫）を処置するために使用され得る。

本発明の組成物は、ピレスロイドまたはピレトリンおよびキャリア（テルペンまたはテルペン誘導体、あるいはテルペンまたはテルペン誘導体と別のキャリア（例えば、アルキルグリコールエーテル）との組み合わせを含む）を含む。驚くべきことに、テルペン（例えば、ｄ−リモネン（ＣＡＳ＃５９８９−２７−５）がキャリアとして使用される場合、結晶化が最小化および／または回避され得る事が見出されている。好ましい実施形態において、このキャリアは、テルペンとプロピレングリコールモノメチルエーテルとの組み合わせまたはテルペンとジプロピレングリコールモノメチルエーテル（ＣＡＳ＃１０７−９８−２）との組み合わせを含む。好ましくは、この組成物は、テルペンまたはテルペン−アルキルグリコールエーテルの組み合わせを、約３０重量％〜約７０重量％含む。

本発明を実行するために使用され得るピレスロイドとしては、ペルメトリン、フェノトリン、アクリナトリン（ａｃｒｉｎａｔｈｒｉｎ）、アレスリン、ビオアレスリン（ｂｉｏａｌｌｅｔｈｒｉｎ）、ビフェントリン（ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ）、ビオレスメトリン、シクロプロトリン（ｃｙｃｌｏｐｒｏｔｈｒｉｎ）、シペルメトリン（ｃｙｐｅｒｍｅｔｈｒｉｎ）、シハロトリン（ｃｙｈａｌｏｔｈｒｉｎ）、λシハロトリン、シフルトリン（ｃｙｆｌｕｔｈｒｉｎ）、シフェノトリン（ｃｙｐｈｅｎｏｔｈｒｉｎ）、トラロメトリン（ｔｒａｌｏｍｅｔｈｒｉｎ）、トラロシトリン（ｔｒａｌｏｃｙｔｈｒｉｎ）、デルタメトリン（ｄｅｌｔａｍｅｔｈｒｉｎ）、エンペントリン（ｅｍｐｅｎｔｈｒｉｎ）、フェンプロパトリン（ｆｅｎｐｒｏｐａｔｈｒｉｎ）、カデトリン（ｋａｄｅｔｈｒｉｎ）、プラレトリン（ｐｒａｌｌｅｔｈｒｉｎ）、ピレトリン（ｐｙｒｅｔｈｒｉｎ）、レスメトリン（ｒｅｓｍｅｔｈｒｉｎ）、スルバリナート（ｓｕｌｖａｌｉｎａｔｅ）、テフルトリン（ｔｅｆｌｕｔｈｒｉｎ）、テトラメスリン、トランスフルトリン（ｔｒａｎｓｆｌｕｔｈｒｉｎ）、フルビナート（ｆｌｕｖｉｎａｔｅ）、フルメスリンおよびフェンバレエート（ｆｅｎｖａｌｅｒａｔｅ）が挙げられる。本発明における使用のための最も好ましいピレスロイドは、ペルメトリン（ＣＡＳ＃５２６４５−５３−１）である。ペルメトリンは、３９１．２８グラム／モルの分子量を有し、そして工業的ペルメトリンは、約２５〜８０重量％のシス異性体、および約２０〜７５重量％のトランス異性体を含む。本発明の殺寄生生物組成物において、工業的ペルメトリンが適切であり、そしてこれは好ましくは、約４５重量％の最小量のトランス異性体、および約３５重量％の最小量のシス異性体を含む。

本発明に従う殺外寄生生物組成物において、ペルメトリンまたは他のピレスロイドの濃度は、代表的に、約３０〜約９５重量％であり、好ましいレベルは、少なくとも約４５重量％であり、さらにより好ましくは５０〜７５重量％である。組成物の残りの部分は、キャリア物質である。

ｄ−リモネンに加えて、特許請求された本発明における使用のために適切な他のテルペンとしては、α−ピネン、β−ピネン、β−ミルセンおよびテルピノレンが挙げられる。さらに、テルペン誘導体すなわちテルペノイドもまた、キャリアとして、またはキャリアの１成分として、使用され得る。本明細書中で使用する場合、用語「テルペン誘導体」すなわち「テルペノイド」は、テルペンアルコール（例えば、ゲラニオール、テルピネオールおよびリナロール）、テルペンアルデヒド（例えば、シトロネラール）およびテルペンケトン（例えば、プレゴン（ｐｕｌｅｇｏｎｅ））が挙げられ、これらの全てが、特許請求された本発明の化合物において、キャリアまたはキャリアの１成分としての使用に適切である。

テルペンまたはテルペンアルコール、テルペンアルデヒドもしくはテルペンケトンは、本発明の組成物中の唯一の液体キャリアとして使用され得る。あるいは、このキャリアは、テルペンまたはテルペン誘導体と他のキャリア（例えば、へキシレングリコールまたはアルキルグリコールエーテル）との組み合わせを含み得る。好ましいアルキルグリコールエーテルとしては、プロピレングリコールモノメチルエーテル、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル（ｅｉｔｈｅｒ）およびジエチレングリコールメチルエーテルが挙げられる。テルペンまたはテルペン誘導体とアルキルグリコールエーテルとの混合物が使用される場合、所望の混合物は、少なくとも約１０重量％のテルペン成分を含む。好ましくは、アルキルグリコールエーテルに対するテルペンの比は、約３：１〜約１：３である。より好ましくは、アルキルグリコールエーテルに対するテルペンの比は、約２：１〜約１：２である。他の従来のキャリアもまた、テルペンまたはテルペン誘導体と組み合わせて使用され得る。

本発明の組成物は、宿主に対して非刺激性かつ非毒性でありながら、外寄生生物に対して有効である。この組成物は、高濃度の活性成分を用いて処方され得るので、この組成物は、少量でなお有効用量にて、容易に適用され得る。特に有効な適用方法は、以下の工程からなる：宿主上の１以上の局在領域に、例えば、動物の肩甲骨の間の領域で、動物に小スポットの組成物を適用することによって、適用する工程。より大きい動物は、尻領域の第二の小スポットの組成物で処置され得る。ピレスロイド成分は、比較的短い時間内に転移して、宿主の身体の全表面を有効に覆うと考えられる。処置を適用するのに特別な専門技術は必要ないので、動物の飼い主は、健康管理の専門家の助けなしに、そして特別な設備なしにこれを行い得る。

他の不活性な成分が、所望される場合、本発明の組成物に添加され得る。このような成分としては、展着剤、共力剤、誘引剤、忌避剤、接着促進剤、界面活性剤、安定剤、皮膚コンディショナー、香料、匂いマスキング剤、なめ防止剤、被覆光沢剤および着色剤が挙げられる。さらなる活性成分（例えば、他の殺寄生生物剤および昆虫成長調節剤）もまた、本発明の組成物中に含まれ得る。

適切な展着剤は、皮膚上で特に容易にそれ自体を分散させる液体である。ミリスチン酸イソプロピルは、一般に使用される展着剤である。展着剤（時々、展着油といわれる）の所望の特性は、一般に、当業者に周知である。誘引剤としては、フェロモン（例えば、２，６−ジクロロフェノール）が挙げられる。忌避剤としては、シトロネロール、ジエチルトルイミド（ｔｏｌｕｉｍｉｄｅ）、ジメチルフタラートなどが挙げられる。

本発明で利用され得る他の不活性成分には、接着促進剤がある。接着促進剤としては、カルボキシメチル−セルロース、メチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、ならびにデンプン誘導体、ポリアクリレート、アルギナート、ゼラチン、アラビアゴム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、メチルビニルエーテルと無水マレイン酸とのコポリマー、ポリエチレングリコール、パラフィン、オイル、サックスおよび水素化ヒマシ油、コロイド状ケイ酸、またはこれらの物質の混合物が挙げられる。

本発明の組成物は、通常は界面活性剤を含まないが、望ましい場合は界面活性剤が含まれ得る。界面活性剤（乳化剤および湿潤剤を含む）としては、（ｉ）アニオン性界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、脂肪アルコールエーテル硫酸塩、およびモノジアルキルポリグリコールエーテルオルソリン酸エステルのモノエタノールアミン塩）、（ｉｉ）カチオン性界面活性剤（例えば、セチルトリメチルアンモニウム塩化物）、（ｉｉｉ）両性界面活性剤（例えば、ジナトリウム−Ｎ−ラウリルアミノジプロピオン酸塩またはレシチン）、および（ｉｖ）非イオン界面活性剤（例えば、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ポリオキシエチル化ソルビタンモノオレイン酸塩、ソルビタンモノステアリン酸塩、エチルアルコール、グリセロールモノステアリン酸塩、ポリオキシエチレンステアリン酸塩、およびアルキルフェノールポリグリコールエーテル）が挙げられる。

いくつかの活性化合物の場合に生じる化学的分解を予防するために、安定化剤もまた使用され得、安定化剤としては、例えば、抗酸化剤（例えば、トコフェロール、ブチル−ヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエンおよびカルボジイミド（例えば、２，２−６，６−テトライソプロピルジフェニルカルボジイミド））、ならびにスカベンジャー（例えば、エピクロロヒドリン（ｅｐｉｃｈｌｏｒｈｙｄｒｉｎ））が挙げられる。着色剤としては、本発明のキャリア中の可溶性である従来の色素（例えば、Ｓｕｄａｎ ＲｅｄまたはＯｉｌ Ｇｏｌｄｅｎ Ｙｅｌｌｏｗ）が挙げられる。

本発明の殺昆虫組成物を調製するために、存在するすべての結晶が液体化するまで、ピレスロイドが、６５〜８０℃まで加熱される。その後、この液体は、均質になるまで混合される。液体キャリア溶媒は、別個の非加熱容器中に配置される。その後、ペルメトリンがこの容器に添加される。その後、このペルメトリンとキャリア溶媒とが、均質になるまで混合される。添加剤（例えば、上記に列挙された添加剤（例えば、皮膚コンディショナー、香料、被覆光沢剤、および分散剤（ｓｐｒｅａｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ））もまた、この容器中に含まれ得、そしてこの処方物中に混合され得る。

本発明の好ましい実施形態において、ペルメトリンが、約６５℃まで加熱される。ｄ−リモネンとプロピレングリコールモノメチルエーテルとの２：１〜１：２混合物が、清浄なタンク中に配置され、そしてペルメトリンが添加され、そして均一になるまで混合される。ペルメトリンがこの単純液体混合物中に処方された後、この混合物は、他の物理的状態の局所処方物の処方のための開始点として役立ち得る。例えば、ゲル化剤が添加されて、ゲルおよびゾルの形態の局所調製物が生成され得る。気体が添加されて、エアロゾルとして送達され得る局所調製物が生成され得る。他の処方剤がこの液体混合物中に添加されて、軟膏およびペーストが生成され得る。

本発明の殺昆虫組成物は、ほとんどの哺乳動物（ヒト、ウマ、ウシ、キリン、および家庭愛玩動物（例えば、イヌ）を含む）に対する使用のために適切である。この組成物はこのように非毒性であるので、この組成物は、若齢動物（例えば、３週齢）ならびに成体動物に対して使用され得る。この組成物はまた、種々の寄生生物（ダニ（ｔｉｃｋ）、ノミ、ハエ、ヒツジシラミバエ、およびダニ（ｍｉｔｅ）を含む）に対して有効である。

本発明に従う組成物は、ウマおよび他の大型哺乳動物に特に有用である。なぜなら、必要な用量は、５０重量％以下の濃度である上記ピレスロイド組成物と比較してかなり小さいからであるからである。本発明の殺昆虫組成物は、節足動物、昆虫、およびダニ外寄生生物（例えば、ノミ、ダニ（ｔｉｃｋ）、ハエ、ヒツジシラミバエ、およびダニ（ｍｉｔｅ））の制御のために有用である。この組成物の最も好ましい用途は、イヌにおけるダニ（ｔｉｃｋ）およびノミの制御である。

この組成物は、組成物の局所適用のための従来の任意の方法によって（例えば、哺乳動物の身体に小量の液体組成物を滴下することによって）、宿主動物に適用され得る。高度に濃縮された組成物の使用の１つの利点は、ほんの小量しか必要ではないことである。この様式で適用される組成物は、移動を示すようであり、そのピレスロイド成分は、動物の身体の他の領域に転流される。この移動効果または分散効果により、該寄生生物制御のために動物の身体表面の比較的すべてに対して、このピレスロイドを投与することが可能である。

５０重量％過剰のピレスロイド濃度を含む処方物が、単一用量パッケージにパッケージングされ得る。例えば、ペルメトリンおよび溶媒エタノールから構成される液体処方物の単一の１立方センチメートル（ｃｃ）用量が、折畳み可能な１ｃｃチューブ中にパッケージングされ得る。この処方物は、強有機溶媒（例えば、キシレン、クロロヘキサノン、およびトルエン）の使用を回避するので、チューブ材料のより多くの選択肢が存在する。単一用量容器は、貯蔵および廃棄を、動物の所有者にとってより簡便にする。多用量液体処方物が、１ｃｃ容量より大きい容器中にパッケージングされ得る。この高濃度組成物はまた、多用量容器についての容器サイズ要件ならびにより大型の動物用の単一用量容器についての容器サイズ要件を減少させる。米国特許第５，３４４，０１８号に記載される型のパッケージアセンブリが、簡便に使用され得る。

この組成物は高濃度のピレスロイドを有するので、この動物に対する小さいスポット適用またはライン適用は、投与後３時間〜２４時間以内および投与後４週間後まで、動物における昆虫感染およびクモ形類寄生生物感染を有効に制御する。この方法は、非毒性であり、そしてこの濃縮組成物は、動物の皮膚を刺激しない。有効な殺昆虫活性のために適用されるに必要な本発明の組成物の必要量は、動物のサイズ、ならびにこの特定の組成物の正確な濃度および送達能力に依存するが、１立方センチメートル（ｃｃ）容量のこの好ましい液体組成物が、１５ｋｇ未満の重量のイヌに対して有効であることが見出されている。１〜２ミリリットル容量の好ましい６５％重量ペルメトリンが、６５〜１３０ｍｇのペルメトリンを送達する。１５ｋｇより大きなイヌに関して、肩甲骨間に１ｃｃの６５重量％ペルメトリン組成物を、尾の先端（ｔａｉｌｈｅａｄ）への１ｍＬの適用と組み合わせて適用することが有効であることが、見出されている。好ましい実施形態において、宿主体重１ｋｇごとに、約３３ｍｇ以上のこの組成物が、適用されるべきである。

本発明は、以下の実施例により詳細に記載される。これらの実施例は、単なる例示として意図される。なぜなら、この実施例における多数の改変および変化が、当業者に明らかであるからである。

（実施例１）

^＊この生成物を、活性成分１００％にて処方した。純度の調整を、この生成物の主要な不活性物質を用いて行った。

ペルメトリンを、この容器中に充填し、その後、溶媒成分を充填した。その後、攪拌を開始し、５分間または溶液が均質に見えるまで、必要ならば加温しながら攪拌し続けて、このペルメトリンを可溶化した。この容器の内容物を、ガラス容器中にパッケージングし、密封し、そして適切に標識した。

（実施例２）

^＊この生成物を、活性成分１００％にて処方した。純度の調整を、ゲラニオールを用いて行った。
^＊＊この生成物を、活性成分１００％にて処方した。純度の調整を、プロピレングリコールモノエチルエーテルを用いて行った。

これらの処方物を、実施例１の方法により調製した。

（実施例３）
特定の溶媒または溶媒混合物が、メチルカルビトールよりもペルメトリンについて良好な溶媒特性を有するか否かを観察するための研究を、行った。

いくつかの溶媒型を評価した。冷蔵庫温度[４℃]および冷凍庫温度[−１０℃]で良好の溶解度を有するようであった溶媒を、評価のために選択した。同様に、動物に対する使用についてＥＰＡにより許可された溶媒（４０ Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１８０．１００１（ｅ））を、評価のために選択した。

溶媒を、基本的製造業者から得るかまたはＡｓｈｌａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌを介して得た。

以下の実施例３Ａ〜３Ｄの各々について、ペルメトリンを、実施例１の方法に従って、上記溶媒または溶媒混合物中に溶解した。これらの溶液を、ネジ蓋付きキャップを備える１００ｍＬチューブに注いだ。これらのチューブを、冷水浴中に配置し、そしてこの浴の温度で平衡にさせた。これらの溶液がこの浴中で平衡に達した後、これらの調製物を、ペルメトリン結晶を用いて密封した。その後、密封した調製物を徹底的に振盪し、この浴中に再配置し、そしてこの浴中に２４時間維持した。その後、これらの調製物を、結晶化について試験し、その後再び、徹底的に攪拌し、そしてさらなる一定時間、この浴中に再配置した。さらなる結晶化が生じた後、その上清サンプルを取り出した。これらの上清サンプルを、そのペルメトリン濃度およびトランス／シス異性体比について分析した。

（実施例３Ａ）
異なる溶媒中でのペルメトリンの相対溶解度を測定するために、冷温度浴を得、そして最初２５℃に設定した。（この水浴は、エチレングリコールと水との混合物を含んだが、−１５℃未満の凍結点を有した。）
ペルメトリンの原液を、７０％ペルメトリンであるようにした。このペルメトリンの純度について補償を行い、溶媒に対する工業（ｔｅｃｈｎｉｃａｌ）ペルメトリンの代表比は、２５．７重量％溶媒に対して７４．３重量％ペルメトリンであった。

結晶化が生じない場合、さらなるペルメトリンをこの溶液に充填して、ペルメトリン濃度を７５％にし、その浴の温度を２０℃まで低下させた。両方の温度にて、これらの溶液に、ペルメトリンの結晶種を入れた。２４時間後、これらのチューブを、これらの溶液各々において生じ得た結晶の相対量について試験した。結晶化が生じた場合、その上清サンプルをバイアルから引き出し、そしてその浴の温度を１５℃まで低下させた。

これらのサンプルを、ペルメトリン濃度およびトランス／シス異性体比を測定するために分析した。これらのサンプルのうちのいくつかが１５℃で完全に固体になった場合、その浴の温度を１７．５℃まで上昇させた。ヘキシレングリコール溶液およびメチルカルビトール（登録商標）（ジエチレングリコールモノメチルエーテル）溶液から、アッセイ用にサンプルを再び採取した。

最初の研究の結果（表１）は、ｄ−リモネンが、このｄ−リモネン溶液中により少ない結晶しか存在しないという点でペルメトリンについての優れた溶媒であることを示した。これらの溶媒プロピレングリコールモノメチルエーテルおよびジプロピレングリコールモノメチルエーテルは、ペルメトリンについて、メチルカルビトール（登録商標）よりも良好な溶解性を有した。これらの２つのグリコールエーテルは、ペルメトリンについて良好な溶解性を示したが、プロピレングリコールモノメチルエーテルは、低温度研究において、ジプロピレングリコールモノメチルエーテルよりも少ない結晶を有した（表３）。

（実施例３Ｂ）
種々のニートな溶媒中でのペルメトリンの相対的な溶解度が決定された後に、より良い溶媒の混合物が溶液中でのペルメトリンの溶解度を向上するか否かを決定するための第２の研究を開始した。試験された溶媒混合物は、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル／ｄ−リモネンおよびプロピレングリコールモノメチルエーテル／ｄ−リモネンであった。

これらの溶媒混合物は、２：１、１：１、１：２、次いで８：２および９：１（第１の数は、グリコールエーテルのうちの１つを言及し、そして第２の数は、ｄ−リモネンを言及する）において、の比で評価した。これらの混合物中のペルメトリンの濃度は、５５％（ｗ／ｗ）〜７５％（ｗ／ｗ）のペルメトリンで変動した。全ての場合において、ペルメトリンの純度が考慮され、その結果、純粋なペルメトリンの実際の濃度は、上記パーセンテージであった。

ペルメトリンのこれらの溶液を、低温（０℃、５℃、１０℃、２０℃、および２５℃）で、水浴中に配置し、そしてシード（ｓｅｅｄ）した。これは、その特定の温度における、所与の溶媒混合物中のペルメトリンの飽和溶液を生じた。次いで、これらのデータを使用して、最も低い温度の溶解度を有するペルメトリンの処方物を決定した。

混合溶媒研究［表２〜表５］は、ｄ−リモネンといずれかのグリコールエーテルとの混合物が、ペルメトリンがこの研究において任意の単一溶媒中よりも低い温度でより良い溶解度を有した溶液を生じたことを明らかにした。このデータはまた、温度が低下した場合、溶液中に残るシス異性体の量が、ｄ−リモネンおよびプロピレングリコールモノメチルエーテル、ならびにｄ−リモネンおよびジプロピレングリコールモノメチルエーテルの溶媒混合物において、これらの溶媒単独のいずれかよりも多いことを示した。

（実施例３Ｃ）
溶媒混合物中において低濃度のペルメトリンの増加した溶解度が存在するか否かを決定するための第３の研究が開始された。この研究は、−１５℃でｄ−リモネンおよびプロピレングリコールモノメチルエーテルの溶媒混合物を用いて行った。３０％ペルメトリンの溶液を、ｄ−リモネンおよびプロピレングリコールモノメチルエーテルの溶媒混合物中で調製し、そして冷温浴中に配置した。

使用した溶媒系は、以下であった：
１００％ ｄ−リモネン；
２：１ ｄ−リモネン／プロピレングリコールモノメチルエーテル；
１：１ ｄ−リモネン／プロピレングリコールモノメチルエーテル；
１：２ ｄ−リモネン／プロピレングリコールモノメチルエーテル；
１：４ ｄ−リモネン／プロピレングリコールモノメチルエーテル；および
１００％ プロピレングリコールモノメチルエーテル。
温度を、−１５℃に調整した。この溶液を、浴に配置し、そして結晶化させ、そして平衡に達しさせた。上清溶液をサンプリングし、そしてペルメトリンの濃度および異性体比を決定するために分析した。

この研究の結果（表６）は、５０％より高いペルメトリン濃度でもって観測された溶解度現象がまた、−１５℃における３０％ペルメトリンのこの初期濃度においても観測されたことを示す。すなわち、−１５℃の低温で溶媒単独のいずれかと同じ初期濃度と比較した場合、混合溶媒中のシス異性体の溶解度が増加している。シス異性体についてのこの増加は、たとえ、この温度におけるペルメトリンの全体の溶解度が最初の３０％未満であることが示されたとしても、これらの溶媒混合物においてペルメトリンの全体の溶解度の増加を生じる。

（実施例３Ｄ）
この研究の目的は、２０℃におけるペルメトリンの溶解度を決定することであった。プロピレングリコールモノメチルエーテル中のペルメトリンの７０％溶液を調製した。技術的なペルメトリンおよび元の７０％溶液を、ペルメトリンの濃度およびトランス／シス比を決定するためにサンプリングした。この溶液を浴中に配置し、そして連続的に攪拌した。浴温度を０℃に下げた。溶液中で生じた結晶化の後に、浴温度設定を、２０℃まで上昇させ、そして攪拌スラリーを、３日間、平衡化させた。この時間の後、上清のサンプルを、数日間続けて吸引した。結晶を、濾過により液体層から分離し、そして結晶を石油エーテルを用いて洗浄した。上清および結晶の両方の全ての残りのサンプルを、全ペルメトリン含有量およびトランス／シス比の両方について分析した。結晶を洗浄して、これらの分析に混入し得る任意の残留溶液を除去した。

この研究の結果を、表７に示した。これらのデータは、ペルメトリンがプロピレングリコールモノメチルエーテルにおいて良好な溶解度を有することを示す。しかし、観測されるペルメトリンの全ての溶液に関して、シス異性体が結晶化し、そして温度が十分低い場合、溶液から沈殿する。この実験の結果は、ペルメトリンが、２０℃において７０％より高い溶解度を有するが、異性体比が、トランス異性体を好んで移動し、シス異性体が、この温度で、溶液から出てくることを示す。

（表７）

実施例３Ａ〜３Ｄの低温での結果は、ペルメトリンがｄ−リモネンにおいて最も大きい溶解度を示すことを実証する。試験した溶媒中で溶解度が低下する順は、以下：
（ａ）ｄ−リモネン
（ｂ）プロピレングリコールモノメチルエーテル
（ｃ）ジプロピレングリコールモノメチルエーテル
（ｄ）ジエチレングリコールモノメチルエーテル
（ｅ）２−メチル−２，４−ペンタンジオール（ヘキシレングリコール）
ペルメトリンシス異性体は、混合溶媒系においてある温度において並外れて予期せぬ増加を示した。５０％未満の濃度において、ペルメトリンは、同じ溶媒中でそれらの溶解度と個々に比較して、混合溶媒中において溶解度の増加を示し続けた。

ペルメトリンは、７０％より高いレベルでプロピレングリコールモノメチルエーテル中で可溶性であったが、そのシス異性体は０℃で結晶化し、そして溶液中で約７０％ペルメトリンの濃度で２０℃において結晶のままであった。

ペルメトリンのトランス異性体は、選択された溶媒中で非常に高い溶解度を有する。シス異性体は、ニートな溶媒の溶液と比較した場合、溶媒混合物中で溶解度が増加した。

（実施例４）
６５％ペルメトリンの効力を５つの溶媒または溶媒混合物中で評価した。６匹のイヌ（３匹は１５ｋｇ未満であり、そして３匹は１５ｋｇ以上）を、以下の７つの処置群の各々に無作為に割当てた。

各処置群は、体重１５ｋｇ未満のイヌ３匹および体重１５ｋｇ以上のイヌ３匹を含んだ。１つの処置適用を、各イヌに対して行った。体重１５ｋｇ未満の各イヌに、首の背部の皮膚に塗布する１．０ｍＬの試験処方物を与えた。体重１５ｋｇ以上の各イヌに、２．０ｍＬの試験処方物を与え、そのうち１．０ｍＬを首の背部の皮膚に塗布し、そして１．０ｍＬを臀部の背部に塗布した。

ノミ（１００匹の餌を与えていない成体ネコノミ、Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ）を、実験日第−６日、第−１日、第４日、第１１日、第１８日、第２５日、および第３２日に各イヌに適用した。ダニ（５０匹の餌を与えていない成体Ａｍｂｌｙｏｍｍａ ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ）を、実験日第−１日、第３日、第９日、第１６日、第２３日、および第３０日に各イヌに適用した。ノミを実験日第３日、第７日、第１４日、第２１日、第２８日、および第３５日に各イヌに適用した。ダニをイヌに寄生させ、そのイヌから回収し計数した。この後、イヌを非常に細かいノミ用コームですき、そして生きているノミを取り出し、そして少なくとも５分間各イヌをすきながらかまたは生きたノミもしくはダニが見つからなくなるまで計数した。

ノミおよびダニの計数を行った個体を、各イヌに対して割当てられた処置群に関して「盲目的（ｂｌｉｎｄｅｄ）」にした。皮膚の炎症の徴候は、いかなる処方物を用いた処置の後でも観察されなかった。

効力を、相乗平均を用いてＡｂｂｏｔｔの式により決定した：

Ｃｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓに対する種々の処方物の効力を、表８に示す。

（表８）

ＰＭ＝Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ（プロピレングリコールモノメチルエーテル）
ｄ−ｌ＝ｄ−リモネン
（）は、寄生虫／コントロールイヌ（ｎ＝６）の相乗平均の数値を示す。

Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭを含む処方物は、処置後３日以内に９０％〜９５％の初期効力を示した。Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭを含む処方物についての高レベルの効力（９３％〜１００％）は、処置後２８日間観察され、その後この効力は、処置後３５日に６３〜８１％に低下した。ノミ／イヌの対数平均数における有意差は、３５日後にＤｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭを含む種々の処方物の間で観察されなかった（ｐ＞０．０５）。

ｄ−リモネンのみを含むペルメトリン処方物は、Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ処方物の効力プロフィールと類似の効力プロフィールを示したが、その効力は、４週間後に８８％まで低下した。ｄ−リモネン処方物中のペルメトリンを受けたノミ／イヌの対数平均数は、処置後５週間でコントロールと有意に異ならなかった（ｐ＞０．０５）。

対照的に、ノミに対するメチルカルビトール中の６５％ペルメトリン（Ｄｅｆｅｎｄ（登録商標）ＥＸｓｐｏｔ（登録商標）イヌに対する殺虫剤）の初期効力は、処置３日後に約９０％であった。ノミに対する効力は、処置後３週間にわたって９６％〜１００％であった。しかし、メチルカルビトール中の６５％ペルメトリンで処理したノミ／イヌの対数平均数は、処置後４週間でコントロールと有意に異ならなかった（ｐ＞０．０５）。

アメリカアムブリオマ（Ａｍｂｌｙｏｍｍａ ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ）を、３日（第３日での計数）、４日（第７日での計数）または５日（第１４日、第２１日、および第２８日での計数）のいずれかでペルメトリン処方物に曝した。表９に示されるように、種々のペルメトリン処方物に曝されたダニの約５８％（範囲：４９％〜６５％）が、３日以内に死滅した。種々の処方物に４日間または５日間曝されたほぼ全てのダニが、イヌを処置した後２週間の期間で死滅した。Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ処方物およびｄ−リモネン処方物の効力は、処置後３週間に約８７％（範囲：７８％〜９４％）に低下し、そしてさらに処置後４週間に約６２％（範囲：４５％〜７２％）に低下した。

アメリカアムブリオマに対するＤｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ、Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ／ｄ−リモネン ２：１およびＤｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ／ｄ−リモネン １：１処方物の効力は、処置後３週間に、それぞれ８８％、９４％、および８８％であった。しかし、Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭおよびＤｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ／ｄ−リモネン １：１処方物の効力は、処置後３週間に９０％と有意に異ならなかった。

イヌの処方物に対するダニ曝露の４日後のアメリカアムブリオマに対するメチルＣａｒｂｉｔｏｌ（登録商標）処方物の効力（７日カウント）は、９８％であった。この効力は、イヌを処置した２週間後で８７％に低下した。しかし、イヌを処置した２週間後に観察されたこの８７％の効力は、９０％と有意に異ならなかった（ｐ＞０．１０）。

（表９）

ＰＭ＝Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ（プロピレングリコールモノメチルエーテル）
ｄ−ｌ＝ｄ−リモネン
（）は、寄生虫／コントロールイヌ（ｎ＝６）の相乗平均の数値を示す。
^＊は、効力（％）が９０％と有意に異ならないこと（ｐ＞０．１０）を示す
（実施例５）
本研究は、イヌに関する、屋外使用条件下でスポットとして塗布した場合の、ネコノミＣｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓおよびクリイロコイタマダニＲｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓに対する種々の殺虫処方物の効力期間を比較した。

体重が２．２ｋｇ〜３１．５ｋｇの範囲でありかつ両方の性別の、種々の血統の４０匹のイヌを、各々１０匹のイヌの４つの群に無作為に割当てた。４つの処置群は以下の通りであった：
３５％Ｄｏｗａｎｏｌ（登録商標）ＰＭ（プロピレングリコールモノメチルエーテル）中の、６５％ペルメトリン
ネガティブコントロール：未処理のイヌ
ポジティブコントロール：Ｄｅｆｅｎｄ（登録商標）ＥＸｓｐｏｔ（登録商標）（メチルＣａｒｂｉｔｏｌ中、６５％ペルメトリン）
３５％Ｄｏｗａｎｏｌ ＰＭ（登録商標）およびｄ−リモネン（１：１）中の、６５％ペルメトリン
１つの処置適用は、実験日第０日に処置群１、３および４中の各イヌに対して行った。体重１５ｋｇ未満の各イヌに、イヌの背中の肩の肩甲骨間の皮膚に塗布する１．０ｍＬの試験処方物（殺虫剤に対して局所的なスポット）を与えた。体重１５ｋｇ以上の各イヌに、２．０ｍＬの試験処方物を与え、そのうち１．０ｍＬはイヌの背中の肩の肩甲骨間の皮膚に塗布し、そして１．０ｍＬはイヌの背中の尾部の根元前に直接、皮膚に塗布した。

イヌを、１００匹の餌を与えていない成体ノミ（両方の性）および５０匹の餌を与えていない成体クリイロコイタマダニ（両方の性）で、実験日第−５日、第−１日、第５日、第１２日、第１９日、第２６日、第３３日および第４０日に寄生させた。

ノミおよびダニを、処置の２日後および各外寄生の２日後から毎週（ｗｅｅｋｌｙ ａｔ ｔｗｏ ｄａｙｓ）、取り出し計数した。ダニをイヌに寄生させ、そのイヌから取り出し計数した。次いで、イヌを非常に細かいノミ用コームですき、そして少なくとも５分間各イヌをすきながらかまたは生きたノミが見つからなくなるまで、生きているノミを取り出し、そしてこれらを計数した。ノミおよびダニの計数を行った個体を、各イヌが割当てられた処置群に関して「盲目的（ｂｌｉｎｄｅｄ）」にした。盲目は、２人の人の使用によって確実にした：１人目の人は、２人目の人（調査者）による観察について処置群からイヌを連れてきた。

イヌの健康は病気の徴候または有害な反応について毎日チェックした。処置部位を、各外寄生において観察し、そして炎症の徴候について計数した。

効力を、Ａｂｂｏｔｔの式を用いて決定した（実施例４を参照のこと）。結果を、表１０および表１１に示す。

ａ−プロピレングリコールモノメチルエーテル
ｂ−ｄ−リモネン
ｃ−メチルカルビトール
組み合わせ溶媒によって生じるノミに対する高度な効力は、処置後２１日間持続し、そして２１日目と２８日目との間で予期せず低下した。この実施例と同様に、組み合わせ溶媒によって生じるクリイロコイタマダニに対する高度な効力は、徐々に低下していく前に、処置後３５日間持続した。表８〜１１に示される結果は、ペルメトリンに対する組み合わせ溶媒が、低温での溶解度における利点に加えて、有効な外寄生生物制御を提供することを示す。

当業者に明らかであるように、本発明の多くの変更およびバリエーションが、本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされ得る。本明細書中に記載される特定の実施形態が、例示目的でのみ提供され、そして本発明は、添付の特許請求の範囲が与える等価物の完全な範囲と共に、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されるべきである。

Claims (23)

1. 動物への局所的適用のための殺寄生生物組成物であって、該組成物は、ピレスロイドまたはピレトリンおよびキャリアから本質的になり、ここで、該キャリアは、テルペン、テルペン誘導体、アルキルグリコールエーテルとテルペンとの混合物、およびアルキルグリコールエーテルとテルペン誘導体との混合物からなる群より選択される、殺寄生生物組成物。
2. 動物への局所的適用のための殺寄生生物組成物であって、該組成物は、（ｉ）ピレスロイドまたはピレトリン、（ｉｉ）テルペンまたはテルペン誘導体、および（ｉｉｉ）アルキルグリコールエーテル、から本質的になる、殺寄生生物組成物。
3. 前記テルペンが、ｄ−リモネンである、請求項２に記載の組成物。
4. 前記アルキルグリコールエーテルが、プロピレングリコールモノメチルエーテル、ジプロピレングリコールモノエチルエーテルおよびジエチレングリコールモノメチルエーテルからなる群より選択される、請求項２に記載の組成物。
5. 前記アルキルグリコールエーテルが、プロピレングリコールモノメチルエーテルである、請求項４に記載の組成物。
6. 前記ピレスロイドが、ペルメトリンである、請求項５に記載の組成物。
7. 前記テルペンが、ｄ−リモネンである、請求項６に記載の組成物。
8. 前記ペルメトリンが、総組成物の５０重量％より多い量で存在する、請求項６に記載の組成物。
9. 前記ペルメトリンが、総組成物の６５重量％の量で存在する、請求項８に記載の組成物。
10. 前記アルキルグリコールエーテルが、ジプロピレングリコールモノメチルエーテルである、請求項４に記載の組成物。
11. 前記ピレスロイドが、ペルメトリンである、請求項１０に記載の組成物。
12. 前記ペルメトリンが、総組成物の５０重量％より多い量で存在する、請求項１１に記載の組成物。
13. 前記テルペンが、ｄ−リモネンである、請求項１２に記載の組成物。
14. 前記ペルメトリンが、総組成物の６５重量％の量で存在する、請求項１３に記載の組成物。
15. 前記キャリアが、前記組成物の３０重量％〜７０重量％の量で存在する、請求項１に記載の組成物。
16. 前記テルペンまたは前記テルペン誘導体が、少なくとも前記キャリアの１０重量％で存在する、請求項２に記載の組成物。
17. 前記キャリアのテルペンの前記アルキルグリコールエーテルに対する比率が３：１〜１：３である、請求項１６に記載の組成物。
18. 動物への局所的適用のための殺寄生生物組成物であって、該組成物は、（ｉ）ペルメトリン、（ｉｉ）ｄ−リモネン、および（ｉｉｉ）プロピレングリコールモノメチルエーテル、から本質的になり、ここで、該ペルメトリンは、総組成物の５０重量％より多い量で存在する、殺寄生生物組成物。
19. 前記ペルメトリンが、総組成物の６５重量％の量で存在する、請求項１８に記載の組成物。
20. 請求項１９に記載の殺寄生生物組成物を含有する、動物に対する外寄生生物の外寄生を制御するための組成物。
21. 前記動物が、イヌである、請求項２０に記載の組成物。
22. 請求項２に記載の殺寄生生物組成物を含有する、動物に対する外寄生生物の外寄生を制御するための組成物。
23. 前記動物が、イヌである、請求項２２に記載の組成物。