JP2003528135A

JP2003528135A - 糖尿病のランゲルハンス島シグナリングの改善方法及びその防止方法

Info

Publication number: JP2003528135A
Application number: JP2001570251A
Authority: JP
Inventors: デームスハンス−ウルリッヒ; グルントコンラード
Original assignee: プロバイオドラッグアーゲー
Priority date: 2000-03-31
Filing date: 2001-04-02
Publication date: 2003-09-24
Also published as: ES2582376T3; PT2055302E; KR20080067009A; NO20024643L; WO2001072290A3; ES2320630T3; BR0109553A; CN1420797A; US20020198242A1; EP2055302A1; IL151368A0; US20050222221A1; PT1283735E; EP2055302B1; US20030008905A1; CA2400226C; HK1130015A1; DE60137216D1; ZA200206460B; CZ20023234A3

Abstract

(57)【要約】本発明は、内因性の膵臓β細胞の相対的インスリン産生能を増強するとともに、膵臓上皮細胞をインスリン産生β細胞に分化させる、ヒトに限定されない哺乳動物を治療するための方法を開示するものである。ＤＰＩＶ阻害剤の経口投与により、活性化型ＧＬＰ−１の生理条件下での寿命が延びる。特に膵臓組織においてＧＬＰ−１が長期にわたって存在することにより、修復を要する既存のβ細胞の分化、再生が促進される。このような修復されたインスリン産生細胞は、生理学的に正常な血糖値への修正及び正常な血糖値の維持に寄与することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

（発明の背景）膵臓は２種類の分泌組織を有する。第１の組織は、膵臓の外分泌機能を与える
細胞の集合であり、これらの外分泌細胞は消化酵素を合成して腸内に放出する。
第２の組織は、膵臓の内分泌機能を与えるものであり、ホルモンを合成して血液
循環中に放出する。膵臓の内分泌機能において極めて重要なのがβ細胞である。
この細胞は、ホルモンであるインスリンを合成、分泌する。インスリンは、生理
学的に正常な血糖値を維持するうえで重要な役割を担っている。膵臓の内分泌細
胞のエフェクターとして機能する分子が存在する。こうした分子の例としてイン
クレチンがある。インクレチンは、グルコースによって誘導される膵臓からのイ
ンスリン分泌を促進するものである。グルカゴン様ペプチド−１（７−３６）アミド（“ＧＬＰ−１”；またはトカ
ゲにおける類似化合物であるエキセンジン−４）及び胃抑制ポリペプチド（ＧＩ
Ｐ）などのインクレチン類は、インスリン分泌増強作用を有する。すなわち、イ
ンクレチンの存在もしくは安定化により、そのインスリン分泌増強効果によって
速やかな血糖降下作用が持続する（Demuth, H.U., et al., DE 196 16 486:1-6,
1996; Pauly, R.P. et al., Regul. Pept. 64 (1-3): 148, 1996 これらの教
示の全体を参照し援用する）。更に、ＧＬＰ−１は、β細胞の増殖を刺激して細
胞量を増加させ、未分化膵臓細胞のランゲルハンス島の特定機能細胞への分化を
促進することにより、ラ氏島増殖ホルモンとして作用することが示されている。
こうした細胞ではインスリン及びグルカゴンの分泌が昂進する（Yaekura, K. et
al., IN: VIP, PACAP, and Related Peptides, W.G. Forssmann and S.I. Said
(eds.), New York: New York Academy of Sciences, 1998, p. 445-450; Butea
u, J. et al., Diabetologia 42(7): 856-864, 1999 これらの教示の全体を参
照し援用する）。ラ氏島細胞の再生をｉｎｖｉｖｏで刺激する目的、あるいは、糖尿病患者か
ら膵臓細胞を採取し、生理活性ＧＬＰ−１を用いた組織培養においてこの細胞を
ｅｘｖｉｖｏにて処理する目的で、外因性の生理活性ＧＬＰ−１またはその類
似化合物を用いることが以前より提案されている。このｅｘｖｉｖｏでの処理
によってラ氏島細胞の再生及び／または分化が促進され、この細胞がインスリン
やグルカゴンを合成、分泌すると考えられている（Zhou, J. et al., Diabetes,
48(12): 2358-2366, 1999; Xu, G. et al., Diabetes, 48(12): 2270-2276, 19
99 これらの教示の全体を参照し援用する）。しかしながら、こうした処置レジメンは、患者への生理活性ＧＬＰ−１の腸内
投与や腸管外投与を必要とし、これには手術の可能性をともなう。外科的処置に
よる生理活性ＧＬＰ−１の腸内、腸管外投与の必要をなくすことには、一定の意
義がある。（発明の概要）本発明は、酵素のエフェクターによって誘導される、哺乳動物の血中の酵素ジ
ペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＩＶまたはＣＤ２６）活性またはＤＰＩＶ様
酵素活性の低下によって、結果的に胃腸ポリペプチドであるグルカゴン様ペプチ
ドアミド−１７−３６（ＧＬＰ−１_7-36）（またはこのペプチドと構造的に関
連し且つ機能性を有する類似化合物（ＧＬＰ−１_7-37など）や、切断されている
が生物学的な活性を有するＧＬＰ−１_7-36の断片）の、ＤＰＩＶ及びＤＰＩ
Ｖ様酵素による分解が遅くなるという新規な方法に関するものである。こうした
処置により、機能的に活性なＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１により誘導されるものを含
む）循環ペプチドホルモンまたはその類似化合物の濃度の低下が減少するかまた
は遅くなる。ＤＰＩＶ活性の阻害によって内因性ＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１により誘導され
るものを含む）循環ペプチドの安定性が向上する結果、ＧＬＰ−１活性が持続し
、これにより、機能的に活性なＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１により誘導されるものを
含む）循環ペプチドホルモンが、膵臓細胞の増殖ホルモン様の刺激を促し、膵臓
細胞が増殖してランゲルハンス島の機能的に活性な細胞となる。更に、ＧＬＰ−
１の作用によって、無反応性膵臓細胞や機能不全膵臓細胞が、機能的に活性なラ
ンゲルハンス島の細胞へと変化する。無反応性膵臓細胞や機能不全膵臓細胞が、機能的に活性なランゲルハンス島の
細胞に変化することにより、インスリンの分泌が増加し、血漿中のインスリン濃
度が上昇することが予想された。しかし、予想に反し、健康なヒト被験者及び糖
尿病Ｚｕｃｋｅｒ肥満ラットにおける研究では、ＤＰＩＶ阻害剤であるイソロ
イシルチアゾリジンヘミフマレート（Ｐ３２／９８）による処置後、インスリン
濃度が低下した（実施例１及び２をそれぞれ参照）。それにも関わらず、ランゲ
ルハンス島の再生によって内因性のインスリン及びグルカゴンなどの他のラ氏島
ホルモンの効果が変化し、処置動物の炭水化物代謝が刺激された。この結果、実
施例１及び２に示すように、血糖値は高血糖症の目安となるグルコース濃度以下
に低下した。これらの効果を引き起こす機序については、詳しくは理解されてい
ない。しかしながら、こうしたラ氏島細胞の再生は、更に、重篤な代謝性アシド
ーシスや糖尿病だけでなく、糖尿、高脂血症などの代謝異常にも、防止または緩
和などの効果がある。膵臓細胞や膵臓組織の移植、または、ＧＬＰ−１やエキセンジン−４により膵
臓細胞をｅｘｖｉｖｏにて処理した後、処理細胞を再移植するなどの従来提案
されている方法と異なり、本発明は、複雑でコストのかかる手術を必要とせず、
経口的に可能な治療法を提供するものである。本発明は、上昇した血糖値を低下
させるための新規な解決策である。本発明は、特に長期に亘る高血糖値によって
その多くが引き起こされるヒトの病気の治療レジメンにおいて、商業的に有用か
つ好適に使用されるものである。（発明の詳細な説明）本発明は、膵臓細胞の分化及び／または再構成のための新規な方法に関するも
のである。ランゲルハンス島の細胞の再生が、内因性インスリンや他のラ氏島ホ
ルモンの合成及び放出に積極的に影響して、炭水化物の代謝が刺激される。グルコースによって誘導されるインスリン分泌は、多くのホルモンや神経伝達
物質によって調節されている。特に興味深いのは、グルカゴン様ペプチド−１（
ＧＬＰ−１）及び胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）の２種類の消化管ホルモンであり、
これらはいずれもインスリン分泌増強剤である。インスリン分泌増強剤は、イン
スリンの合成及び発現を刺激するかまたは刺激を誘発することが可能である。ＧＬＰ−１は、インスリン分泌を増加させ、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病においてみ
られるレベルの血糖値をも速やかに低下させる、強力な腸管インスリン分泌増強
剤である。ＧＬＰ−１は、腸のＬ細胞、膵臓内分泌腺のα細胞、及び脳の神経細
胞において、選択的に組織特異的に切断されることによって生成する。ＧＩＰは
、十二指腸及び近位空腸において、食後に合成されて放出される。その放出は、
食事内容やその時の健康状態など幾つかの因子に依存する。ＧＩＰは、最初に発
見された際、その胃酸分泌阻害作用に因んで命名された。しかし、このホルモン
の研究が進むにつれ、関連する更なる生理学的役割が解明されてきた。詳細には
、ＧＩＰは、インスリンの合成及び放出を刺激する作用を有するインスリン分泌
増強剤である。ＤＰＩＶは、ペプチドをＮ末端から２番目のプロリンとアラニン残基の後で
選択的に切断するエキソペプチダーゼとして働く酵素である。この酵素の内因性
の基質としては、ＧＩＰやＧＬＰ−１のようなグルコース依存型インスリン分泌
増強ポリペプチドなどのインクレチン類がある。ＤＰＩＶの存在下では、これ
らのホルモンは不活性型に酵素的に還元される。不活性型のＧＩＰ及びＧＬＰは
インスリン分泌を誘導することはできないため、特に高血糖状態において血糖値
が上昇する。高血糖値は、糖尿病（Ｉ型及びＩＩ型）や糖尿病にともなう続発症
などの多くの様々な疾患に関連している。ＤＰＩＶは、更に臓器移植などにおいて見られるＴ細胞介在性の免疫応答に
関与していることが明らかになっている。ＤＰＩＶの阻害により、移植心の生
着期間が延長することが示されている。更に、ＤＰＩＶの阻害によって慢性関
節リウマチが抑制される。ＤＰＩＶは、更にＴ細胞（ヘルパーＴ細胞）へのＨ
ＩＶの進入に関与している。Ｎ−（Ｎ’−置換グリシル）−２−シアノピロリジン類、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イ
ソロイシルチアゾリジン（Ｐ３２／９８）、Ｌ−ａｌｌｏ−イソロイシルチアゾ
リジン、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イソロイシルピロリジン、及びＬ−ａｌｌｏ−イソロ
イシルピロリジンなどの、ＤＰＩＶの酵素活性を阻害する薬剤が開発されてお
り、米国特許第６，００１，１５５号、国際特許出願公開公報第ＷＯ９９／６１
４３１号、同第ＷＯ９９／６７２７８号、同第ＷＯ９９／６７２７９号、ドイツ
特許出願公開公報第ＤＥ１９８３４５９１号、国際特許出願公開公報第ＷＯ
９７／４０８３２号、ドイツ特許第ＤＥ１９６１６４８６Ｃ２号、国際特許
出願公開公報第ＷＯ９８／１９９９８号、同第ＷＯ００／０７６１７号、同第Ｗ
Ｏ９９／３８５０１号、及び同第ＷＯ９９／４６２７２号に開示されている。な
おこれらの教示の全体を参照して援用するものである。これらの薬剤の目的は、
ＤＰＩＶの阻害であり、それにより血糖値を低下させて高血糖症ならびに高血
糖に関連する疾患を効果的に治療することにある。しかし、本発明者等は、これ
らの薬剤が従来当業者に知られるものとは全く異なる治療目的に有利に使用でき
ることを、予期せずして発見した。高血糖症を主徴とする疾患としては、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病などの疾患が挙げ
られる。糖尿病は、一般に膵臓のβ細胞によるホルモンの分泌不全を特徴とする
。通常、これらの細胞はインスリンを合成、分泌する。Ｉ型糖尿病では、こうし
た分泌不全は、自己免疫によってβ細胞が破壊されることによるものである。Ｉ
Ｉ型糖尿病は、主としてβ細胞の不足と末梢インスリン抵抗性との組み合わせに
よって引き起こされる。糖尿病患者ではβ細胞の数が減少しているため、β細胞
の生理活性インスリンを合成、放出する能力だけではなく、これらのインスリン
産生膵臓細胞の絶対量も問題となる。糖尿病の発症によって、β細胞が失われる
ことが知られている。こうしたインスリン産生細胞の損失によって、インスリン
などを産生する膵臓の内分泌機能に支障をきたす。インスリン分泌量の減少によ
って、高血糖症による病態が増悪する。ＧＬＰ−１は、β細胞の増殖、細胞量増加を刺激し、未分化膵臓細胞のランゲ
ルハンス島の特定機能細胞への分化を促進することによって、ラ氏島増殖ホルモ
ンとして作用する。このようにＧＬＰ−１が膵臓細胞に作用することによって、
膵臓細胞のインスリン及びグルカゴン分泌が向上する（Yaekura, K. et al., IN
: VIP, PACAP, and Related Peptides, W. G. Forssmann and S. I. Said (eds.
), New York: New York Academy of Sciences, 1998, p.445-450; Buteau, J. e
t al., Diabetologia 42(7): 856-864, 1999）。本発明者等は、ＧＬＰ−１の半
減期を遅らせることによって膵臓β細胞の再形成を促進することが望ましいこと
を見出した。本発明者等はまた、膵臓細胞の再形成を改善すべくＧＬＰ−１の異
化を遅らせる方法を見出した。ヒトに限定されない哺乳動物における高血糖症を治療するための本発明の方法
は、ＤＰＩＶまたは関連酵素の活性を酵素阻害剤によって阻害することによっ
て、ＧＬＰ−１の効果を増強するものである。多くの場合、ＤＰＩＶの阻害剤
を経口投与することが好ましいが、本発明は他の投与経路をも包含するものであ
る。ＤＰＩＶの酵素活性を阻害することにより、活性化型ＧＬＰ−１の半減期
を大幅に延ばして、該活性化型ＧＬＰ−１を生理学的条件下に保持することが可
能である。特に膵臓組織における活性ＧＬＰ−１の存在時間が延長されることに
より、膵臓上皮細胞の、インスリン産生β細胞のような膵臓エフェクター細胞へ
の分化が促進される。更に、膵臓組織における生理活性ＧＬＰ−１の存在時間が
延長されることにより、修復を要する既存のβ細胞の再生が促される。驚くべき
ことに、この効果は、投与を反復した場合にのみ観察される（実施例２を参照）
。投薬を中止すると治療前の代謝状態に戻ることから、達成された血糖値の改善
状態を維持するためには、ＤＰＩＶエフェクターを亜慢性もしくは慢性投与す
る必要がある。このように修復されたインスリン産生細胞は、血糖値の正常値化
及びその維持に効果的に寄与することが可能である。本発明においては、内因性ＧＬＰ−１は、通常の生理学的経路にて合成され、
放出される。食餌の摂取によりＧＬＰ−１の放出を刺激することが可能である。
あるいは、グルコースまたはその類似化合物を薬学的に許容される担体（例えば
糖衣錠）の形態で経口投与して、内因性ＧＬＰ−１の放出を刺激することも可能
である。こうしたグルコースは、ＤＰＩＶ阻害剤の投与前、投与と同時、ある
いは投与後に与えることが可能である。本発明は更に薬学的組成物を提供するものである。この組成物は、治療上（ま
たは予防上）有効量の阻害剤（及び／またはＤＰＩＶ阻害剤とともに投与され
る糖衣錠）と、薬学的に許容される担体もしくは賦形剤とからなる。担体及び組
成物は良好な実験環境下にて製造され、無菌である。該製剤は、従来の方法にも
とづき投与形態に合わせて選択されることが理想的である。薬学的に許容される適当な担体としては、これらに限定されるものではないが
、水、塩類溶液（例えばＮａＣｌ）、アルコール、アラビアガム、植物油、ベン
ジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭水化物（ラクトース、
アミロース、デンプンなど）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、液体パラフ
ィン、香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリ
ドンなどが挙げられる。この薬学的製剤は滅菌され、必要に応じ、潤滑剤、保存
料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧を変化させるための塩類、緩衝剤、着色料
、香料、芳香剤などの、有効成分と反応して悪影響を及ぼすことはないが、安定
性、製造性、及び／または外観を向上させる助剤と混合される。必要に応じ、該組成物は、少量の湿潤剤または乳化剤やｐＨ緩衝剤を含むこと
が可能である。更に該組成物は、溶液、懸濁液、乳液、錠剤、丸剤、カプセル剤
、徐放剤や散剤とすることが可能である。更に該組成物は、従来知られる結合剤
やトリグリセリドなどの担体とともに座剤として調合することも可能である。経
口投与用製剤は、医薬品水準のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリ
ン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルロース
、炭酸マグネシウムなどの担体を含有することが可能である。更に該組成物は、ヒトへの静脈内投与に適した薬学的組成物分野における周知
の方法にもとづいて調合することができる。一般に、静脈内投与のための組成物
は、滅菌された等張緩衝水溶液である。必要に応じて、該組成物は、更に可溶化
剤ならびに注射部位の痛みを緩和するための局部麻酔剤を含むことが可能である
。一般に、各成分は、有効成分量を表示したアンプルやサシェなどの密封容器に
入れられた例えば凍結乾燥粉末または無水濃縮物として、単位投与量を与えるよ
うに個別でまたは混合して提供される。組成物を輸液投与する場合、無菌状態の
医薬品水準の水、塩類溶液又はデキストロース／水混合物が入れられた輸液ビン
にて投薬することが可能である。組成物を注射投与する場合には、注射用の滅菌
水または塩類溶液のアンプルを用い、投与の直前に各成分を混合することが可能
である。最後に、本発明の組成物は、中性もしくは塩の形態として調合することが可能
である。薬学的に許容可能な塩類としては、塩酸、リン酸、酢酸、蓚酸、酒石酸
などと遊離アミノ基との塩、及び、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カル
シウム、水酸化鉄（III）、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチ
ルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来する塩、ならびに当業
者に周知の他の塩類が挙げられる。特定の疾患または病態の治療に有効な本発明の組成物の量は、疾患または病態
の性質によって異なり、標準的な臨床的手法によって求めることが可能である。
更に場合によりｉｎｖｉｖｏ及び／またはｉｎｖｉｔｒｏのアッセイを行っ
て、最適な投与量の範囲を特定することが可能である。製剤中に用いる正確な投
与量もやはり、投与経路、及び病気または疾患の重篤度に応じて異なる。投与量
は、各患者の状態を考慮し、医師の判断に基づいて決定されるべきである。当該技術分野における熟練者であれば、本発明の精神もしくは範囲から逸脱す
ることなく、異なるＤＰＩＶ阻害剤及び代替的治療用組成物を製造するなど、
本明細書に記載される例及び指示に対して多くの変更が行われ得る点は直ちに了
承されるであろう。以下に述べる実施例は本発明の範囲を限定するものとして解
釈されるべきものではない。実施例実施例１ＤＰＩＶ阻害剤であるＰ３２／９８は、ＰｅｐＴ１腸ペプチドトランスポー
ターによって能動的に輸送される。Ｐ３２／９８の速やかな効果は、Ｐ３２／９
８が腸粘膜を通じて高速度で能動輸送されることによるものである。ジペプチジ
ルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＩＶ）の効率的ターゲティングには、ｔ_maxである
ことが必要条件である。Ｐ３２／９８の経口投与により、ラット及びヒトにおい
て、それぞれ摂取後１５〜２０分及び３０〜４０分に最大ターゲット阻害が見ら
れた。したがって、ＤＰＩＶ阻害剤は、グルコースまたは食餌摂取前の１０〜
２０分前に投与すべきである。ヒト被験者を使ったＰ３２／９８の第１の実験では、血漿インスリン濃度や血
漿ＧＬＰ−１濃度、及び血糖値などの薬力学的パラメータを、３６人の健康な男
性被験者について調べた。Ｐ３２／９８は以下の濃度にて経口投与した。すなわ
ち、７．５ｍｇ、１５ｍｇ、３０ｍｇ、６０ｍｇ、１２０ｍｇ及び２４０ｍｇで
ある。上記の薬力学的パラメータについての結果を下記表１にまとめる。３６人の健康な被験者は１２人づつ３群の個別の群に分けた。各群の９人の被
験者には有効な薬剤としてＰ３２／９８を、３人にはプラシーボを与えた。有効
薬剤を与えた被験者には、異なる期間かつ異なる強度にて２回投薬した。各群の
Ｐ３２／９８投与強度は以下の通りである。第Ｉ群では、７．５ｍｇと６０ｍｇ
を与えた。第ＩＩ群では１５ｍｇと１２０ｍｇを与えた。第ＩＩＩ群では３０ｍ
ｇと２４０ｍｇを与えた。プラシーボを与えた各群の被験者には両投与間隔でプ
ラシーボを与えた。実験参加の３〜１４日前に被験者の予備試験を行った。試験の後半は、実験的
フェーズであり、Ｐ３２／９８の濃度が６段階で漸増する１回投与処理を行い（
期間１〜６、表２）、更に追試験を行った。各被験者は、少なくとも５日間の洗
流フェーズをはさんで、予備試験及び実験的フェーズの両方に参加した。追試験
は、試験薬剤の最終投与後少なくとも７日以内に行った。調査する投与量を除き
、実験方法は６つの期間について同様である。方法経口グルコース耐性試験（ＯＧＴＴ）：被験者を少なくとも１２時間の絶食状
態におき、各ＯＧＴＴ前の３日前に炭水化物を豊富に含んだ食餌を給餌した。各
グルコース耐性試験において、被験者は、グルコース（Ｄｅｘｔｒｏ（登録商標
名）Ｏ．Ｇ．−Ｔ，ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ，ＦＲＧ）７５ｇ
に相当する単糖／二糖溶液３００ｍＬを摂取した。グルコース摂取の直前並びに
摂取後３０、６０、９０及び１２０分に血液サンプルを採取した（フッ化ナトリ
ウム試験管に１．２ｍＬづつ）。０分及び１２０分において１２６ｍｇ／ｄｌ（
７．０ｍｍｏｌ／Ｌ）を上回るグルコース濃度は、病理的グルコース耐性状態と
みなした。各投与期間の１日目に期間延長ＯＧＴＴを行った。被験者にグルコース７５ｇ
に相当する単糖／二糖溶液３００ｍＬを摂取させた。次の時間間隔で血液サンプ
ル（１．２ｍＬ）を採取した。１）グルコース摂取の５分前、２）グルコース摂
取後、５、１５、３０、４５、６０、７５、９０、１２０、１５０及び１８０分
、３）グルコース摂取後４、１２、２４、及び４８時間後。更に当該技術分野に
おいて周知の他の薬力学的評価を行った。インスリン：４．９ｍｌのＥＤＴＡ試験管に４．７ｍｌの血液を採取した。サ
ンプルを遠心し（１５００ｇで１０分間）、分析時まで−７０℃にて凍結保存し
た。グルコース：１．２ｍｌのフッ化ナトリウム試験管に１．２ｍｌの血液を採取
した。血漿サンプルを１５００ｇにて１０分間遠心し、分析時まで−７０℃にて
凍結保存した。ＧＬＰ−１：ＥＤＴＡ試験管に２．７ｍｌの血液を採取して、氷浴もしくは冷
蔵庫に入れ、これにジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤を加えた。阻害剤は予
め研究者等が調製したものを用いた。血液は試験管に採取し、直ぐに冷却遠心管
中１０００ｇにて１０分間遠心するか、あるいは、血液を氷浴に入れ、１時間以
内の時間で遠心して、等分量のサンプルに分取した。血液を適当なアリコートに
分けて、分析時まで−７０℃にて保存した（複数回の凍結／解凍サイクルを行う
ことを避けるため）。結果活性ＧＬＰ−１濃度プラシーボと比較して用量依存的なＰ３２／９８の効果が
認められた。個々の濃度は２〜６８ｐｍｏｌ／ｌの間にあった。予備投与群の平
均は、３．７７±２．６２ｐｍｏｌ／ｌ〜６．６７±９．４３ｐｍｏｌ／ｌの間
であり、プラシーボの使用後には４．２２〜７．６６ｐｍｏｌ／ｌだけ増加し、
阻害剤の使用後には１１．６ｐｍｏｌ／ｌ（１５ｍｇ）〜１５．９９ｐｍｏｌ／
ｌ（２４０ｍｇＰ３２／９８）だけ増加した。相対的な平均値の増加を絶対濃
度から推定した場合、活性ＧＬＰ−１の濃度は、プラシーボによる処理後およそ
２００〜３００％増大したが、Ｐ３２／９８による処理後ではおよそ３００〜４
００％増大した。１５〜２４０ｍｇのＰ３２／９８による処理後の中央値の絶対
増加は、プラシーボ及び７．５ｍｇ投与のそれと比較して２〜３倍高く（表１）
、投与量におよそ対応した関係が見られた。Ｐ３２／９８投与群に関しては、予
備投与群の値を上回る増加が、最大で約３〜４時間見られた。インスリン濃度個々のインスリン濃度の値は、３．４０〜１５５．１μＩＵ／
ｍｌの範囲の値を示した。予備投与群の濃度の平均値（±ＳＤ）は、７．９６±
１．９２μＩＵ／ｍｌ（３０ｍｇ）〜１１．９３±２．９１μＩＵ／ｍｌ（６０
ｍｇＰ３２／９８）の間にあった。Ｐ３２／９８／プラシーボ投与後１０分に
おける７５ｇのグルコースの摂取後、平均のインスリン濃度は、４０〜５５分以
内に３０．１２μＩＵ／ｍｌ（１２０ｍｇのＰ３２／９８）〜５６．９２μＩＵ
／ｍｌ（３０ｍｇの群）だけ増加した。プラシーボ群とＰ３２／９８投与群との
間に著明な差は見られず、Ｐ３２／９８の用量依存的な効果を示す結果もやはり
見られなかった。興味深いことに、インスリン濃度の絶対増加は、Ｐ３２／９８
投与群の内で投与量が最も大きな２つの群において最も低かった（表１参照）。
プラシーボを含むすべての実験群において、インスリン濃度の上昇が３〜４時間
見られた。グルコース濃度絶食状態、ＯＧＧＴの間、または食餌後のグルコース濃度は、
すべての被験者において２．４７〜１１．７ｍｍｏｌ／ｌの間の範囲の値を示し
た。予備投与群の平均濃度は、４．５５±０．４１（１５ｍｇ）〜４．８３±０
．３０ｍｍｏｌ／ｌ（７．５ｍｇのＰ３２／９８）の間であって、互いに近い値
であり、変化はほとんど見られなかった。投与後４０〜５５分後、すなわち７５
ｇのグルコース投与後３０〜４５分以内に、平均最大濃度に達した。絶対平均濃
度は、２つのプラシーボ投与群及び７．５ｍｇのＰ３２／９８投与群において最
も高かった。１５ｍｇ、６０ｍｇ、及び２４０ｍｇの投与群において、最も低い
絶対平均が得られた。対応する平均の変化は、それぞれ３．４４〜４．２１ｍｍ
ｏｌ／ｌ及び１．７１〜３．４１ｍｍｏｌ／ｌの範囲であり、表１に示す中央値
に近い値であった。完全な用量依存性は見られなかったが、これらの結果によっ
て、Ｐ３２／９８の投与量が１５〜２４０ｍｇへと増加する際のグルコース濃度
の増加は、プラシーボと比較して低いことが示された。

【表１】

【表２】ベースライン補正したグルコース濃度の平均ピーク（Ｃ_max）は、２つのプラ
シーボ投与群及び７．５ｍｇのＰ３２／９８投与群においてのみ、４．０ｍｍｏ
ｌ／ｌを上回った。また、これらの値は、１５ｍｇ及び２４０ｍｇのＰ３２／９
８処理群において、３．０ｍｍｏｌ／ｌを下回った。プラシーボ処理群と比較し
た場合の差は、１５ｍｇ、６０ｍｇ、１２０ｍｇ及び２４０ｍｇのＰ３２／９８
投与群では統計的に有意であったが、７．５ｍｇ及び３０ｍｇの投与群では有意
な差は認められなかった。ベースライン補正した平均のＡＵＣ値は、プラシーボ
及び７．５ｍｇのＰ３２／９８による処理後では２００ｍｍｏｌ＊分／ｌを上回
ったが、１５ｍｇ及び２４０ｍｇのＰ３２／９８の投与の後では明らかに２００
ｍｍｏｌ＊分／ｌを下回った。ＯＧＴＴ後の全身のグルコース暴露の低下は、１
５ｍｇ、６０ｍｇ、１２０ｍｇ及び２４０ｍｇのＰ３２／９８投与群では統計的
に有意であったが、７．５ｍｇ及び３０ｍｇの投与群では有意ではなかった（表
２参照）。ベースライン補正された値の評価は、補正しないデータから得られた
ものに極めて近かった。したがって、これらのデータは、Ｐ３２／９８処理した
健康な被験者においてＯＧＴＴ後のグルコース暴露が明らかに低下したことを示
すものであり、このグルコース暴露の低下には、完全ではないがおおよそ用量依
存的な兆候が見られた。結論この実験の結果から次の薬力学的結論が導かれる。ＯＧＴＴの１０分前のＰ３
２／９８処理の後、活性ＧＬＰ−１は約３００〜４００％増加したが、７．５ｍ
ｇの投与量ではプラシーボ処理と比較して著明な効果は見られなかった（図１及
び２を参照）。７５ｇのグルコースによる刺激の後、１２０〜２４０ｇの投与量
においてインスリン濃度は低下した。健康な被験者に行ったＯＧＴＴにおいて、
Ｐ３２／９８処理（１５〜２４０ｍｇ）後のグルコース濃度の増加は、プラシー
ボと比較して大幅に低下し、Ｐ３２／９８の投与量と相関が見られた。実施例２Ｚｕｃｋｅｒ肥満ラットにおいては、Ｐ３２／９８栄養依存によって初期のイ
ンスリン分泌が支持される。しかしながら、亜慢性処置の間、Ｐ３２／９８によ
ってインスリンの一日の合計分泌量は減少する。コントロールとして使用した、
インスリン分泌を２７％増加させるグリベンクラミドと比較すると、Ｐ３２／９
８はインスリンを４５％節約し、その有効利用が図られる。Ｐ３２／９８が、インクレチンＧＩＰとＧＬＰ−１の循環半減期を延ばすこと
によって、ｉｎｖｉｖｏでのグルコース耐性に影響を及ぼす有力な候補物質で
あることを調べるために、試験を行った。グリベンクラミド（Ｍａｎｉｎｉｌ（
登録商標名）Ｂｅｒｌｉｎ−Ｃｈｅｍｉｅ，ベルリン、ドイツ）を基準物質とし
て、比較実験を行った。グリベンクラミドは、２型糖尿病患者において血糖値を
低下させる最も有効な薬の１つであり、もっとも多く処方されているスルホニル
尿素誘導体である。グルコース代謝に異常を有する、２型糖尿病の動物モデルとして確立されてい
る雄のＺｕｃｋｅｒｆａ／ｆａラットについて、以下の方法により試験を行
った。Ｐ３２／９８及びグリベンクラミドを食餌前に１日１回２１日間にわたって与
えた。早朝血糖値及び血漿中インスリン濃度をパラメータとして監視した。１６
日目から１７日目にかけて血糖値及びインスリン値を昼夜変動特性として監視し
た。最後に２１日目にＯＧＴＴを行って、血糖及び血漿中のインスリンの動態を
監視し、グルコース耐性の変化を評価した。グリベンクラミド（ＤＡＢ１９９
６；Ｒ０１１１５０／３３３７２）は、Ｂｅｒｌｉｎ−Ｃｈｅｍｉｅ社（ベルリ
ン、ドイツ）より提供された。３００ｇの体重クラスの雄Ｚｕｃｋｅｒ（ｆａ／
ｆａ）ラットは、ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒ社（シュルツフェルド、ドイツ）
より購入した。方法飼育条件：管理温度（２２±２℃）下、１２／１２時間の明／暗サイクル（午
前６時に照明を点灯）の通常の条件で、１個の飼育ケージで動物を飼育した。標
準ペレット（ｓｓｎｉｆｆ（登録商標名）、ソースト、ドイツ）及びＨＣｌにて
酸性化した水道水を無制限に与えた。頸動脈へのカテーテル挿入：飼育１週間後に、全身麻酔下（０．２５ｍｌ／ｋ
ｇｉ．ｐ．のＲｏｍｐｕｎ（登録商標名）［２％］、（バイエル、ドイツ）、及
び０．５ｍｌ／ｋｇｉ．ｐ．のＶｅｌｏｎａｒｋｏｎ（登録商標名）（アルツ
ナイミッテルベルクドレスデン、ドイツ）を注射）で、ラットに頸動脈カテー
テルを挿入した。動物を１週間回復させた。カテーテルは、ヘパリン−生理食塩
水（１００ＩＵ／ｍｌ）にて週３回洗浄した。反復投与：３０匹の糖尿病を罹患していないＷｉｓｔａｒラットと３０匹の糖
尿病の雄Ｚｕｃｋｅｒラットを、ＲＰ（基準物質：グリベンクラミド）群、ＴＰ
（試験製品：Ｐ３２／９８）群、ＣＯ（コントロール）群の各群にランダムに分
けた（Ｎ＝１０／群）。この後、２１日間にわたり、午後５時（暗フェーズにお
ける給餌前）に、糖尿病を罹患していないＷｉｓｔａｒラットにはＲＰ（５ｍｇ
／ｋｇｂ．ｗ．）またはＴＰ（２１．６１ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．）を毎日１回経口
投与し、糖尿病のＺｕｃｋｅｒラットにはＲＰ（１ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．）または
ＴＰ（２１．６１ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．）を毎日１回経口投与した。コントロール
には１％セルロース溶液を口から与えた（５ｍｌ／ｋｇ）。毎朝７時３０分に、
尾の静脈から、血糖値及び血漿インスリンを測定するための血液サンプルを採取
した。実験プログラムおける最後の血液サンプルは、１５日目の朝７時３０分に
採取し、血糖値及び血漿中のインスリンを測定した。この経口薬療法を１週間継
続した。上記療法下の昼夜変動特性を記録し、血糖値（Δｔ＝３ｈ）及び血漿イ
ンスリン濃度（Δｔ＝３〜６ｈ）を１６日目（午後５時開始）から１７日目（午
後２時終了）にかけて監視した。ＯＧＴＴ：２１日目に最後のＯＧＴＴを行って、尾の静脈から血液サンプルを
採取した。尾の静脈からの血液サンプルは、−１２ｈ（２１日目の前夜）、０分
（ＯＧＴＴの開始直前）、１０、２０、３０、４０、５０、６０、８０、１００
及び１２０分に採取した。血液サンプルは、血糖値測定用の２０μｌガラス毛管
及びエッペンドルフ管（１００μｌ）に採取した。エッペンドルフ管は直ちに遠
心し、インスリン分析のため血漿分画を−２０℃に保存した。血糖値：血糖値はグルコースオキシダーゼ法によって測定した（スーパーＧグ
ルコゼメッシュゲラート、Ｄｒ．ＭｕｌｌｅｒＧｅｒａｔｅｂａｕ、フライタ
ル、ドイツ）。血漿インスリン濃度：インスリン濃度は抗体ＲＩＡ法によって検定した（ＬＩ
ＮＣＯＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ. セントチャールズ、ミズーリ州、米国
）。結果血糖値の昼夜変動特性（図４Ａ参照）：１６日目におけるＣＯ群の平均血糖値
は、午後５時の投薬前において７．７８±０．８３ｍｍｏｌ／ｌであった。暗フ
ェーズにおけるプラシーボ経口摂取及び食餌の後、午後１１時に血糖値は１２．
１８±１．３４ｍｍｏｌ／ｌの最高値に上昇した。この後、血糖値は極めてゆっ
くりと低下し、翌日午前１１時に７．２７±０．６１ｍｍｏｌ／ｌの最低値に達
した後、午後２時には８．９０±０．９２ｍｍｏｌ／ｌに上昇した。ＲＰ群では
、血糖値は同様に変化したが、午後５時における平均値はコントロール動物と同
等の７．９６±１．１３ｍｍｏｌ／ｌであったのに比べ、１４．８０±１．４６
ｍｍｏｌ／ｌ（午後１１時）へとより速やかに上昇した後、７．６６±１．２２
ｍｍｏｌ／ｌ（午前１１時）へと低下し、翌日の午後２時には７．３４±０．７
７ｍｍｏｌ／ｌへと更に若干低下した。ＴＰ群では、Ｚｕｃｋｅｒラットの平均
血糖値は、午後５時には５．２５±０．１６ｍｍｏｌ／ｌの正常な値であり、各
個体の値は４．３４〜６．０７ｍｍｏｌ／ｌの範囲であった。血糖値は、午後１
１時には８．３４±０．４７ｍｍｏｌ／ｌへと約３ｍｍｏｌ／ｌ上昇した。この
後、血糖値は低下を続け、翌日午前８時に最低値（５．６４±０．２３）に達し
た。この値は午前１１時（５．３３±０．１４ｍｍｏｌ／ｌ）、更に午後２時（
５．５１±０．１９ｍｍｏｌ／ｌ）まで維持された。インスリン濃度の昼夜変動特性（図４Ｂ参照）：ＣＯ群及びＲＰ群のＺｕｃｋ
ｅｒラットの血漿インスリン濃度は、高インスリン血症を示す値であった。ＣＯ
群のインスリン濃度の平均値は、午後５時（４７．０±８．７ｎｇ／ｍｌ）、午
後８時（４５．５±７．７ｎｇ／ｍｌ）、翌日午前５時（５４．２±５．７ｎｇ
／ｍｌ）、及び午後２時（６１．０±１０．２ｎｇ／ｍｌ；有意差なし）と変化
し、血糖値の変動と相関は見られなかった。ＲＰ群では、午後６時から午前６時
までの暗フェーズにおいて、血漿インスリン濃度は大幅に上昇し、午前５時に最
大値を示した。このパラメータは、高インスリン血症を示す値である５０．０±
８．２ｎｇ／ｍｌ（午後５時）から５７．３±８．２ｎｇ／ｍｌ（午後８時）を
経て７６．３±８．６ｎｇ／ｍｌ（午前５時；初期値とｐ＜０．０１で比較）へ
と変化した後、５８．３±７．３ｎｇ／ｍｌ（翌日午後２時）へと低下した。こ
のＲＰ群では、インスリン濃度は血糖値の変動に連動して変化した。ＴＰ群では
、Ｚｕｃｋｅｒラットの血漿インスリン濃度は、やはり高インスリン血症の値を
示した。午後５時における血漿インスリン濃度は、ＲＰ群よりも大幅に低かった
（ＲＰとｐ＜０．０５で比較）。血糖値の増加（図ＩＶ／３Ａ）と並行して、午
後８時に血漿インスリン濃度は上昇した（４１．９±８．５ｎｇ／ｍｌ）。午前
５時にはインスリン濃度は最高値を示した（５７．１±８．６ｎｇ／ｍｌ；初期
値とｐ＜０．０１で比較）。血漿インスリン濃度は翌日午後２時に基底値（２４
．３±３．７ｎｇ／ｍｌ）に低下し、その値はＣＯ及びＲＰ群よりも大幅に低か
った（ＣＯまたはＴＰとｐ＜０．０１で比較）。２１日間の処置後のＯＧＴＴにおける血糖値曲線（図５Ａ参照）：２１日目の
午後５時の最後の投薬ならびに一晩の絶食後、血糖値は、ＣＯ群では８．６８±
１．２６ｍｍｏｌ／ｌ（午後５時）から５．０８±０．２４ｍｍｏｌ／ｌ（ｐ＜
０．０５）に、ＲＰ群では８．８１±１．２１ｍｍｏｌ／ｌから４．９１±０．
３７ｍｍｏｌ／ｌ（ｐ＜０．０１）に、ＴＰ群では５．７５±０．２３ｍｍｏｌ
／ｌから４．８８±０．１３ｍｍｏｌ／ｌ（ｐ＜０．０１）へと有意に低下した
。したがって、経口グルコース負荷試験は、朝（午前７時３０分）に３つの実験
群のすべてにおいて見られた同等の基底血糖値を起点として行った。ＣＯ群では、血糖値は、経口グルコース投与後４０分以内に、１４．６４±１
．４２ｍｍｏｌ／ｌのピーク値に上昇した。この後、試験終了（１２０分）時点
での９．７５±０．４６ｍｍｏｌ／ｌへと若干量だけ有意に低下した。ＲＰ群で
は、５０分後及び８０分後にそれぞれ、１６．３３±０．９８ｍｍｏｌ／ｌ及び
１６．２４±１．０９ｍｍｏｌ／ｌの高い血糖値へと速やかに上昇した。この高
血糖値は、１２０分後の実験終了まで持続した（１００分：１５．１３±０．７
６ｍｍｏｌ／ｌ、１２０分：１４．８１±０．６６ｍｍｏｌ／ｌであり、ピーク
値との差は有意ではない）。ＴＰ群の平均血糖値曲線は、ＣＯ群と同様の変化を
示した。血糖値は、５０分後に１４．５４±０．６５ｍｍｏｌ／ｌに上昇した後
、１０．６７±０．６２ｍｍｏｌ／ｌ（１２０分；ＣＯと比較して有意差でない
）へと有意に低下した。ＣＯ群及びＴＰ群における曲線の下のグルコース面積（Ｇ−ＡＵＣ_0-120分）
は、それぞれ８２３±４１ｍｍｏｌ・ｍｉｎ／ｌ及び８９５±５０ｍｍｏｌ・ｍ
ｉｎ／ｌであった（有意差なし）。ＲＰ群では、このパラメータの値は、１０９
６±７６ｍｍｏｌ・ｍｉｎ／ｌであり、ＣＯ群（ｐ＜０．０１）またはＴＰ群（
ｐ＜０．０５）と比較して有意に高かった。２１日間の処置後のＯＧＴＴにおける血漿インスリン濃度（図５Ｂ参照）：一
晩絶食させることにより、Ｚｕｃｋｅｒラットの血漿インスリン濃度は、ＣＯ群
では１４．６±３．７ｎｇ／ｍｌへ、ＲＰ群では１１．８±１．５ｎｇ／ｍｌへ
、ＴＰ群では９．３±１．５ｎｇ／ｍｌへとそれぞれ低下した。各実験群間に有
意差は認められなかった。グルコースによる刺激後、血漿インスリン濃度は、Ｃ
Ｏ、ＲＰ及びＴＰ各群においてほぼ一定であった。ＣＯ群のみに１２０分の時点
で２１．３±３．０ｎｇ／ｍｌと若干高い値が見られ、この値はＴＰ群と比較し
て（ｐ＜０．０５）有意に高い値である。Ｉ−ＡＵＣ_0-120分は全体的に小さかった。このパラメータは、ＴＰ群ではＣ
Ｏ群またはＲＰ群よりも低かった（有意差なし）。要約早朝血糖値：プラシーボを与えたコントロールは高血糖値を示した（約７．５
ｍｍｏｌ／ｌ）。平均濃度は実験の間変化しなかった。ＲＰ療法によって、血糖
値は２日以内に約１．５ｍｍｏｌ／ｌ上昇した。血糖値は高値に留まった。ＴＰ
投薬によって、血糖値は５日以内に正常値まで減少した。血糖値は実験終了まで
正常域に留まった。血漿インスリン濃度：コントロール群のＺｕｃｋｅｒラットは、高インスリン
血症を示す高い血漿インスリン濃度を示し、１４日間の観察期間に更にインスリ
ン濃度が上昇した。インスリン濃度は、ＲＰを与えたＺｕｃｋｅｒラットでは、
コントロール群と比較して大幅に上昇した。インスリン濃度は、ＴＰの投与によ
り、コントロール群と比較して１４日間の間に若干低下した。２１日間の処置後のＯＧＴＴにおける血糖値：一晩の絶食により、各実験群に
おいて、血糖値は正常値に低下した。プラシーボを与えた動物では、グルコース
負荷を与えた後４０分以内に、血糖値は約９ｍｍｏｌ／ｌ上昇し、その後若干低
下した。ＲＰを投与したＺｕｃｋｅｒラットでは、グルコース負荷の後、血糖値
は約１１ｍｍｏｌ／ｌ上昇し、試験の間低下しなかった。ＴＰ投与群における平
均血糖値曲線には、コントロール群のものと差が認められなかった。プラシーボ
投与の場合と比較して、ＲＰの投与した場合にはＧ−ＡＵＣ値は増加したが、Ｔ
Ｐを投与した場合にはＧ−ＡＵＣ値は増加しなかった。２１日間の処置後のＯＧＴＴにおける血漿インスリン濃度：絶食後の血漿イン
スリン濃度は、３つの実験群の内、コントロール群のＺｕｃｋｅｒラットにおい
て、約１５ｎｇ／ｍｌの最も高い値を示した。グルコース負荷後、試験終了時点
（１２０分後）にのみ、インスリン濃度は有意に上昇した。ＲＰを投与したラッ
トでは、ＯＧＴＴの開始時点での空腹時インスリン濃度は、〜１２．５ｎｇ／ｍ
ｌとやや低い値であり、４０分までの早期に上昇し、試験終了まで低下しなかっ
た。ＴＰを投与したラットでは、ＯＧＴＴ開始時の空腹時インスリン濃度は、〜
９ｎｇ／ｍｌと最も低く、血糖値の上昇にともなって２０分までの早期にやや上
昇し、４０分〜１００分の間に低下した。Ｉ−ＡＵＣ値は、ＴＰ投与群のラット
では若干低かった。結論ＤＰＩＶの阻害剤であるＰ３２／９８（ＴＰ）を毎日１回投与することによ
り、早朝血糖値は正常化し、高インスリン血症が緩和され、昼夜変動特性におけ
る血糖値は（糖尿病患者にとっての）臨界値である８．３ｍｍｏｌ／ｌ未満に保
たれる。こうした代謝上の利点は、Ｐ３２／９８の投与中止後、限られた時間維
持された。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、ヒト被験者（ｎ＝３６）における、血液循環中の生理活
性ＧＬＰ−１の、経口投与されたＤＰＩＶ阻害剤Ｐ３２／９８に対する時間依
存性を表したグラフである。

【図２】図２は、ヒト被験者（ｎ＝３６）における、血液循環中の生理活
性ＧＬＰ−１のＡＵＣの、経口投与されたＤＰＩＶ阻害剤Ｐ３２／９８に対す
る依存性を表したグラフである。

【図３】図３は、糖尿病ｆａ／ｆａ肥満ラットへの８．７ｍｇ／ｋｇ／ｄ
のＰ３２／９８の亜慢性単独投与後の、該ラットの早朝血糖値（ＭＢＧ）の改善
を示すグラフである。

【図４】図４（ａ）は、肥満糖尿病ラットにおける、１６日間のＤＰＩ
Ｖ阻害剤による治療後のグルコース調節の改善を示すグラフである。図４（ｂ）
は、肥満糖尿病ラットにおける、１６日間のＤＰＩＶ阻害剤による治療後のイ
ンスリン分泌の低下を示すグラフである。

【図５】図５（ａ）は、ＤＰＩＶ阻害剤Ｐ３２／９８製剤による、糖尿
病ｆａ／ｆａ肥満ラットの２１日間の亜慢性治療後の改善血糖値の持続において
、血糖値を時間の関数として示したグラフである。図５（ｂ）は、ＤＰＩＶ阻
害剤Ｐ３２／９８製剤による、糖尿病ｆａ／ｆａ肥満ラットの２１日間の亜慢性
治療後の改善血糖値の持続において、血漿インスリン濃度を時間の関数として示
すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 29/00 １０１Ａ６１Ｐ 29/00 １０１ 31/18 31/18 37/06 37/06 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ０７Ｄ 277/04 Ｃ０７Ｄ 277/04 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C033 AB01 AB20 4C084 AA17 MA01 MA52 MA65 MA66 NA14 ZA962 ZB152 ZB332 ZC032 ZC202 ZC352 ZC552 4C086 AA01 AA02 BC82 MA01 MA04 MA52 MA65 MA66 NA14 ZA96 ZB15 ZB33 ZC03 ZC20 ZC35 ZC55

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】動物のインスリン産生細胞の能力を増強する薬剤を製造する
ための少なくとも１種類のＤＰＩＶ酵素活性エフェクターの使用。
【請求項２】前記インスリン産生細胞の能力を増強することが、内因性の
インスリン産生細胞をより効果的なインスリン産生細胞とすることを含む請求項
１に記載の使用。
【請求項３】前記インスリン産生細胞の能力を増強することが、膵臓中に
存在する細胞をインスリン産生細胞に分化させることを含む請求項１または２に
記載の使用。
【請求項４】前記ＤＰＩＶエフェクターが、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イソロイ
シルチアゾリジン（Ｐ３２／９８）、Ｌ−ａｌｌｏ−イソロイシルチアゾリジン
、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イソロイシルピロリジン及びＬ−ａｌｌｏ−イソロイシルピ
ロリジンなどの、Ｎ−（Ｎ’−置換グリシル）−２−シアノピロリジン類、Ｎ−
アミノアシルチアゾリジン類、及びＮ−アミノアシルピロリジン類、ならびにこ
れらの薬学的塩からなる群から選択される請求項１乃至３のいずれか１項に記載
の使用。
【請求項５】前記エフェクターが、前記ＤＰＩＶに結合可能な、自然に
存在するＤＰＩＶの基質と競合する基質からなる請求項１乃至４のいずれか１
項に記載の使用。
【請求項６】前記エフェクターが、前記ＤＰＩＶの阻害能を有する阻害
物質である請求項１乃至５のいずれか１項の使用。
【請求項７】前記投与が、経口投与である請求項１乃至６のいずれか１項
に記載の使用。
【請求項８】前記投与が、静脈内注射または筋内注射である請求項１乃至
７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】前記投与が、慢性経口投与である請求項１乃至７のいずれか
１項に記載の使用。
【請求項１０】前記投与が、慢性静脈内注射または慢性筋内注射である請
求項１乃至７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】前記ＤＰＩＶ活性エフェクターの投与前、投与中もしく
は投与後に、グルコースを投与するかまたは食餌を摂取させることを更に含む請
求項１乃至１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】前記ＤＰＩＶ活性エフェクターの前記投与が、前記グル
コース投与または前記食餌摂取の前に行われる請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】請求項１乃至１２のいずれか１項に記載のＤＰＩＶ酵素
活性エフェクターの少なくとも１種類の治療上の有効量の使用。
【請求項１４】動物のインスリン産生細胞の能力を増強するための方法で
あって、前記動物に少なくとも１種類のＤＰＩＶ酵素活性エフェクターの治療
上の有効量を投与することを含む方法。
【請求項１５】インスリン産生細胞の能力を増強することが、内因性のイ
ンスリン産生細胞をより効果的なインスリン産生細胞とすることを含む請求項１
４に記載の方法。
【請求項１６】インスリン産生細胞の能力を増強することが、膵臓中に存
在する細胞をインスリン産生細胞に分化させることを含む請求項１４または１５
に記載の方法。
【請求項１７】前記ＤＰＩＶエフェクターが、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イソロ
イシルチアゾリジン（Ｐ３２／９８）、Ｌ−ａｌｌｏ−イソロイシルチアゾリジ
ン、Ｌ−ｔｈｒｅｏ−イソロイシルピロリジン及びＬ−ａｌｌｏ−イソロイシル
ピロリジンなどの、Ｎ−（Ｎ’−置換グリシル）−２−シアノピロリジン類、Ｎ
−アミノアシルチアゾリジン類、及びＮ−アミノアシルピロリジン類、ならびに
これらの薬学的塩からなる群から選択される請求項１４乃至１６のいずれか１項
に記載の方法。
【請求項１８】前記エフェクターが、前記ＤＰＩＶに結合可能な、自然
に存在するＤＰＩＶの基質と競合する基質からなる請求項１４乃至１７のいず
れか１項に記載の方法。
【請求項１９】前記エフェクターが、前記ＤＰＩＶの阻害能を有する阻
害物質である請求項１４乃至１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】前記投与が、経口投与である請求項１４乃至１９のいずれ
か１項に記載の方法。
【請求項２１】前記投与が、静脈内注射または筋内注射からなる請求項１
４乃至１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】前記投与が、慢性経口投与である請求項１４乃至１９のい
ずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】前記投与が、慢性静脈内注射または慢性筋内注射からなる
請求項１４乃至１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】前記ＤＰＩＶ活性エフェクターの投与前、投与中もしく
は投与後に、グルコースを投与するかまたは食餌を摂取させる請求項１４乃至２
３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】前記ＤＰＩＶ活性エフェクターの前記投与が、前記グル
コース投与または前記食餌摂取の前に行われる請求項２４に記載の方法。