HUT77282A - Peptidvegyületek és gyógyászati alkalmazásuk metalloproteáz inhibitorokként - Google Patents

Description

A találmány tárgya a peptidilszármazékok egy új csoportja, az előállításukra szolgáló eljárás és gyógyszerként történő felhasználásuk.

A normális szövetekben a sejtekben végbemenő kötőszövetszintézist a mátrix (sejten kívüli állomány) lebomlása ellensúlyozza, Így a két, ellentétes irányú hatás dinamikus egyensúlyban van egymással. A mátrix lebomlását a megmaradt kötőszövetsejtekből felszabaduló proteináz hatása okozza, és ebben a metalloproteinázoknak legalább három csoportja játszik szerepet. Ezek a kollagenázok (szövetközi kollagenáz, MMP-1; PMN kollagenáz, MMP-8, kollagenáz-3, MMP13), a zselatinázok (zselatináz

A, MMP-2, 72 kDa-zselatináz, IV. típusú kollagenáz; zselatináz

Β, MMP-9, 92 kDa-zselatináz, IV. típusú kollagenáz) és a stromelizinek (proteoglikanáz, MMP-3, stromelizin-1, tranzin; stromelizin-2, MMP:10; stromelizin-3, MMP:11). Normális esetben ezeknek a katalitikus enzimek a szintézise, kiválasztása és sejten kívüli aktivitása szigorúan szabályozott. A sejten kívüli aktivitást specifikus inhibitorok, például a metalloproteinázokkal inaktív komplexeket képző TIMP-k (a metalloproteináz szövetinhibitorai) továbbá általánosabb inhibitorok, például az a₂ ^_ -makroglobulinok szabályozzák.

A kötőszövetek felgyorsult, szabályozatlan leépülése, amit a sejten kívüli állománynak a metalloproteináz által katalizált reszorpciója okoz, sokféle kóros állapot jellemzője. Ilyen például a reumatoid arthritis, az osteoarthritis, a septicus arthritis, a szaruhártya, bőr és gyomor fekélyesedése; a tumor metasztázisok (áttételek) vagy invázió; a periodontális betegsé• · gek, a proteinuria (fehérjevizelés), az atherosclerosisos plakkok lehasadásával kapcsolatos koronáriás trombózis és az osteopathia (csontbántalom). A találmány szerinti inhibitorok használhatók egy baleseti sérülés utáni patológiás sqaelae megelőzésésére is, amely tartós gyengélkedést okozhat. Továbbá ezek a vegyületek a peteérés vagy -beágyazódás gátlása révén születésszabályozásra is használhatók. Várható, hogy az ilyen betegségek patogenézise (kórfejlődése) a metalloproteináz inhibitorok beadásának hatására kedvezően változik; e célra sokféle vegyület alkalmazását javasolták, ezekről áttekintést nyújtanak R.C. Wahl és munkatársai [Ann. Rep, Med. Chem. 25: 17 5-184

Academic Press Inc., San Diego (1990)].

Sok olyan kis molekulájú, peptidszerű vegyületet írtak le, amely a metalloproteinázokat inhibiálja. Ezek közül talán a legfigyelemreméltóbbak azok, amelyek az angiotenzin konvertáló enzimmel (ACE) kapcsolatosak, éspedig úgy, hogy ezek a vegyületek blokkolják az angiotenzin I dekapeptidnek angiotenzin II-vé, egy hatásos vérnyomásfokozó szerré történő átalakulását. Ilyen vegyületek leírása megtalálható az EP-A-0012401 számon nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentésben, továbbá Η. N.

Weller és munkatársai [Biochem. Biophys: Rés. Comm. 125(1): 82-89 (1984)] kimutatták hasonló merkaptoamid peptidilszármazékok in vitro és in vivő ACE inhibitor hatását.

A TNFa egy citokin, amely eredetileg egy sejthez kötött, kD-os prekurzorként termelődik. D-M. Jue és munkatársai [Biochemistry 29 : 8371-8377 (1990)] leírják, hogy ez a prekurzor aktív, 17 kD-os formában szabadul fel, amely in vivő sokféle káros hatást közvetíthet. Állatoknak vagy embereknek beadva • ·

- 4 gyulladást, lázat, kardiovaszkuláris effektusokat, vérzést, koagulációt valamint olyan fázisreakciókat idéz elő, amilyenek akut fertőzések és sokkos állapotok esetén láthatók. A szer krónikus alkalmazása cachexiát (leromlás) és anorexiát (étvágytalanság) is okozhat. A TNFa feleslegének felgyülemlése halálos lehet. Állatmodellek vizsgálataiból számottevő bizonyék van arra, hogy ha a TNFa-t specifikus antitestekkel blokkoljuk, ez akut fertőzések, sokkos állapotok, transzplantációnál fellépő reakciók és autoimmun betegségek esetén kedvező hatást válthat ki. Továbbá a TNFa bizonyos myelomák és lymphomák autokrin növekedési faktora, így az ilyen daganatos betegekben a normális vérképződést gátolhatja.

Ezért a TNFa képződésének vagy hatásának megelőzés hatásos kezelési stratégia lehet sokféle gyulladásos, fertőzéses, immunológiai vagy rosszindulatú betegség esetén. Ilyenek például a szepsziszes sokk, a hemodinamikus sokk vagy a szepszis szindróma {lásd: Mathison és munkatársai [J. Clin. Invest. 81: 1925-1937 (1998)]}, az isémia utáni reperfúziós károsodás, a malária {Grau és munkatársai [Immunoi. Rév. 122: 49-70 (1989)]}; a mycobakteriális infekció (Barnes és munkatársai { [Infect. Imm. 60: 1441-6 (1992)]}, a meningitis, psoriais, a pangásos szívelégtelenség, fibrózis (rostos elfajulás), cachexia, a transzplantátum kilökődése, rák, autoimmun betegségek, reumatoid arthritis, sclerosis multiplex, sugárfertőzés, az immunszuppersszív monoklonális antitestek, például OKT3 vagy CAMPATH-1 beadása után fellépő mérgezés és a hiperoxiás alveoláris sérülések.

A TNFa ellen jelenleg alkalmazott klinikai stratégiákban kortikoszteriodokat, például dexamethasont és cyclosporin-A-t vagy FK506-ot használnak, ezek a citokin gén-transzkripció nem’ .......

. · · · · · ···· ···· ··· ·· · ·

- 5 specifikus inhibitorai. Enderes S. és munkatársai [Immunoi. 72:

56-60 (1991)], Schandene és munkatársai [Immunoi. 7 6: 30-34 (1992)], Alegre ML és munkatársai [Transplantation 52: 674-679 (1991)] valamint Bianco és munkatársai [Blood 78: 1205-1221 (1991)] kimutatták, hogy a foszfodiészteráz inhibitorok — például a pentoxifillin — a TNFa specifikusabb inhibitorai. Sampajo és munkatársai [J. Exp. Med. 173: 699-703 (1991)] szerint a thalidomid is inhibiálja a leukociták TNFa-termelését. Bagby és munkatársai [J. Infect. Dis. 163: 83-88 (1991)] , Charpentier és munkatársai [Presse-med. 20: 2009-2011 (1991)], Silva és munkatársai [J. Infect. Dis. 162: 421-427 (1990)], Franks és munkatársai [Infect. Immun. 59: 2609-2614 (1992)], Tracey és munkatársai [Natúré 330: 662-664 (1987)] Fischer és munkatársai [PNAS

USA, nyomtatvány (1992)], Lesslauer és munkatársai Eur. J. Immunoi. 21: 2883-2886 (1991)] valamint Ashkenazi és munkatársai [PNAS USA, .88: 10535-10539 (1992)] leírják, hogy anti-TNFa monoklonális antitestek, oldható TNF-receptorok és oldható TNF-receptor/immunadhezinek a TNFa hatását kísérleti körülmények között specifikusan gátolják.

Nemrégiben mutatták ki, hogy a TNF hatásait két peptid, a

TNFa és TNFE mediálja. Annak ellenére, hogy ez a két peptid egymással csak 30 %-ban homológ, ugyanazokat a receptorokat aktiválják, és egymással közvetlenül szomszédos gének kódolják őket. Ezért a leírásban a tumor nekrózis faktor vagy TNF az a tumor nekrózis faktort és a vele szekvenciálisán nagy mértékben homológ, vagy a TNFa-val lényegében azonos fiziológiai hatású peptideket, például a TNFE-t jelenti.

A találmány egyik tárgyát olyan vegyületek képezik, amelyek • · lényegében meggátolják a sejtek TNF-kibocsátását, ezért felhasználhatók a TNF által médiáit állapotok kezelésére. Ilyen felhasználási területek például a gyulladás, láz, kardiovaszkuláris effektusok, vérzés, koaguláció, akut fázisreakciók, cachexia, anorexia, akut fertőzések és sokkos állapotok, a transzplantátum kilökődése és autoimmun betegségek.

AJH Gearing és munkatársai [Natúré, 370: 555-557 (1994)],

GM McGeehan és munkatársai [Natúré, 370: 558-561 (1994)] valamint MJ Crimmin és munkatársai a WO 93/20047 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben kimutatták, hogy azok a vegyületek, amelyek a kötőszövetek leépülésében szerepet játszó metalloproteinázok hatását gátolják — mint a kollagenáz, a stromelizin és a zselatinázok —, in vitro és in vivő egyaránt inhibiálják a TNF-kibocsátást. Mindezek az inhibitorok egy hidroxámsavas cinkkötő csoportot tartalmaznak.

Ezért a találmány további tárgyát olyan vegyületek képezik, amelyek a TNF-kibocsátás gátlásán kívül az MMP-k hatását is inhibiálják, és így a TNF és/vagy az MMP-k által médiáit kóros állapotokban szenvedő paciensek kezelésére használhatók.

Az átlagosan művelt szakember tudja, hogy a humán fibroblaszt kollagenáz, a stromelizin és a zselatináz között fennálló jelentős homológia azt eredményezi, hogy egy vegyület, amely az egyik enzimet inhibiálja, bizonyos mértékig mindegyiküket inhibiálhatj a.

A 4,511,504 és a 4,568,666 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás olyan, a kollagenázt inhibiáló vegyületeket ismertet, amelyek a találmány szerinti vegyületekhez hasonló szerkezeti részeket tartalmaznak.

• · · ·

A találmány szerinti, stromelizint inhibiáló vegyületekhez (proteoglikanáz) hasonló szerkezetűeket ismertet a 4,771,037 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás.

Úgy véljük, hogy a stromelizin és a kollagenáz inhibitorai felhasználhatók az izületi porcoknak a septicus arthritis folytán bekövetkező károsodásának megelőzésére. Az ízületek bakteriális fertőzése gyulladásos reakciót idézhet elő, ez a gyulladás a fertőző ágens eltávolítása után is fennmaradhat, és a szerkezeti elemeket tartósan károsíthatja. J.P. Case és munkatársai [J. Clin. Invest. , 84: 1731-40 (1989)] valamint R.J. Williams és munkatársai [ Arth. Rheum. , 3.3: 533-41 (1990)] állatmodellekben bakteriális ágensekkel arthritises választ idéztek elő, és ezzel együtt proteolítikus (fehérjeoldó) hatás is fellépett.

Továbbá L. M. Matrisian és munkatársai [Proc. Natl. Acad.

Sci., USA 83: 9413-7 (1986)]; S. M. Wilhelm és munkatársai [ugyanott, 84 : 6725-29 (1987)]; Z. Werb és munkatársai [J. Cell.

Bioi., 109: 872-889 (1989)]; L. A. Liotta és munkatársai [Láb.

Invest., 49 : 636-649 (1983)]; valamint R. Reich és munkatársai [Ciba Foundation Symposium, Wiley, Chicester 193-210 (1988)] eredményei alapján Úgy véljük, hogy a stromelizin, a kollagenáz és a zselatináz inhibitorai — adott esetben korszerű kemoterápiával és/vagy besugárzással együtt - felhasználhatók a tumoros metasztázisok kontollálására.

A szervezet által kiválasztott proteinázok — mint a stromelizin, kollagenáz és zselatináz — fontos szerepet játszanak a sejtek mozgásában a metasztázisos tumor-invázió során. Valóban bebizonyították, hogy bizonyos metasztázisos tumor sejtvonalakbán a metalloproteinázok túltermelődnek. Az enzimek itt úgy működnek, hogy behatolnak az alapmembránokba, és lehetővé teszik, hogy a tumorsejtek az elsődleges tumorkézpődés helyéről kiszabadulva bekerüljenek a vérkeringésbe. Miután a véredények falán megtapadtak, a tumorsejtek ugyanezeket a metalloproteinázokat használják arra, hogy az alapmembránokon áthatolva bejussanak más szövetekbe, és ezáltal tumoros áttételeket hoznak létre. Ennek a folyamatnak a gátlásával a metasztézis megelőzhető, és fokozható a jelenleg alkalmazott kemoterápiás és/vagy besugárzásos kezelések hatásossága. Ezek az inhibitorik a periodontálls betegségek, például a fogínygyulladás kezelésében is hasznosak lehetnek. V. J. Uitto és munkatársai [J. Periodontal Rés., 16:

417-424 (1981) begyulladt fogínyből származó fibroblasztokból mind kollagenéz, mind pedig stromelizin aktivitást izoláltak.

S. I. Brown és munkatársai [Arch. Opthalmol. , 81: 370-373 (1969)] a szaruhártya lúgos marást követő fekélyesedése során proteolitikus folyamatokat észleltek. F. R. Burns és munkatársai [Invest. Opthalmol., 3.0: 1569-1575 (1989)] kimutatták, hogy merkaptocsoportot tartalmazó peptidek valóban inhibiálják a lúgmarásos nyúl-szaruhártyából kinyert kollagenázt. Ha a lúgmarásos vagy fertőzés következtében szaruhártya-fekélyesedést mutató szemet az ilyen metalloproteinázok inhibitoraival és nátrium-citráttal vagy nátrium-aszkorbáttal és/vagy mikroba ellenes szerekkel kezeljük, ez hatásos lehet a szaruhártya-degradáció megelőzésében.

W. H. Baricos és munkatársai [Biochem. J. 254: 609-612 (1989)] szerint a stromelizin részt vesz a vese gromeruláris alapmembrán (GMB) szerkezeti részeinek degradációjában: ebben a *· · • ¢. · « * • · · « « * • » «·« · folyamatban legfőbb funkciója, hogy korlátozza a plazmafehérjék bejutását a vizeletbe. A gromeruláris (érgomolyos) betegség következtében fellépő proteinuria abban áll, hogy a GMB áteresztőképessége a plazmafehérjékkel szemben megnövekszik, és ezáltal a vizeletben nagyobb mennyiségű fehérje jelenik meg. Nem tudjuk, hogy mi okozza a GMB áteresztőképességének növekedését, de a proteinázok — köztük a stromelizin — fontos szerepet játszhatnak a gromeruláris betegségekben. Ennek az enzimnek az inhibíciója enyhítheti a nem kielégítő veseműködés miatt fellépő proteinuriát.

Feltételezzük, hogy a stromelizin hatásának gátlása megelőzheti az atherosclerosisos plakkok lehsadésát, ami koronáriás trombózishoz vezethet. A koronáriás trombózist a legtöbb esetben az atherosclerosisos plakkok lehsadása idézi elő. A plakkok hasadásának egyik okaként említik az ilyen plakkokat körülvevő kötőszövet destabilizációját és degradációját, amit a proteolítikus enzimek vagy a beszűrődő gyulladásos sejtekből felszabaduló citokinek okoznak. A plakkok lehsadása akut trombózisos eseményt idézhet elő, amint a vér nagy sebességgel kifolyik a véredényből. A. M. Henney és munkatársai [Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8.8: 8154-8158 (1991)] a betegekből szívátültetési műtét során eltávolított atherosclerosisos plakkokban nagy mennyiségű stromelizin messenger RNS-t találtak az egyedi sejtekhez lokalizálva. Ha a stromelizint a találmány szerinti vegyületekkel inhi biáljuk, ez elősegítheti az atherosclerosisos plakkokat stabilizáló kötőszövetek degradációjának megelőzését vagy késleltetését, és ezáltal megelőzhetjük az akut koronáriás trombózishoz vezető eseményeket.

Továbbá úgy véljük, hogy a stromelizin és a kollagenáz specifikus inhibitorai hasznosak lehetnek a születésszabályozásban is. C. A. Brenner és munkatársai [Genes & Develop., 2’ 848-59 (1989)] bebizonyították, hogy megtermékenyítetlen petesejtekben és zigótákban valamint a további hasadási állapotokban a metalloproteinázok — köztük a stromelizin és kollagenáz — expressziója figyelhető meg, és ez a magzati fejlődés blasztocita stádiuméban és az entoderm differenciálódás során még fokozódik.

A tumor-invázióhoz hasonlóan feltehetően a blasztociták is expresszálnak metalloproteinázokat, hogy azok a beágyazódás során behatoljanak a méhfal sejtközi állományába. A stromelizin és kollagenáz inhibíciója ezen korai fejlődési folyamatok során feltehetőleg meggátolja a normális embrionális fejlődést és/vagy a méhbe történő beágyazódást. Ez a beavatkozás a születésszabályozás egyik új módszere lehet. Ez esetben a tüsző csúcs-régiójában a petének bizonyára át kell hatolnia egy kollagén-bevonaton ahhoz, hogy kijuthasson. J. F. Woessener és munkatársai [Steroids,, 54: 491-499 (1989)] e folyamatok során kollagenáz jelenlétét figyelték meg, és kimutatták, hogy egy inhibitor gátolja az ovulációt (peteérés, peteleválás). C. K. K. Too és munkatársai [Endocrin., 115: 1043-1050 (1984)] szerint a stromelizinnek az ovulációban is szerepe lehet.

A. Kronberger és munkatársai [J. Invest. Dermatol., 79:

208-211 (1982)] valamint D. Sawamura és munkatársai [Biochem.

Biophys: Rés. Commun. 184: 1003-8 (1991)] kollagenolíst és stromelizin aktivitást tapasztaltak a disztrófiás epidermolysis bullosa esetén is. A metalloproteinázok inhibíciója bizonyára korlátozza a bor kötőszövet-elemeinek gyors lebomlását.

P. G. Winyard és munkatársai [FEBS Letts., 279.1: 91-94 (1991) kimutatták, hogy a stromelizin a szervezet sejtközi anyagot tartalmazó szerkezeti elemein kívül más in vivő szubsztrátumokat, például az a-j_-proteináz inhibitort is lebonthatja, és így más proteinázok, például az elasztáz aktivitását is befolyásolhatja. A metalloproteinázok inhibiciója az ilyen endogén inhibitorok antiproteináz hatását potenciálhatja.

Az utóbbi időkben megjelent közleményekből kiderül, hogy az MMP-családban több új enzimet azonosítottak, ezek közül néhánynak fontos szerepe lehet a betegségekben. JMP Freije és munkatársai [J. Bioi. Chem., 269 (24): 16766-16773 (1994)] szerint a kollagenáz 3, amely csak a mell karcinómasejtjeiben fordul elő, felhasználható lehet a mellrák kezelésében, míg H. Sato és munkatársai [Natúré, 370: 61-65 (1994)] kimutatták, hogy a zselatináz A aktiválásában kulcsszerepet játszik az MMP-család egy másik tagja, az MT-MMP. A zselatináz A a tumorok növekedésének és (fent definiált) metasztázis-képzésének egyik fontos enzime.

Kimutatták, hogy a β-amiloid prekurzor protein (APP) amiloid plakkokat képez, ez az öregedéssel járó plakkok egyik főkomponense, amelyet Alzheimer-kórban szenvedő pacienseknél találtak. A közelmúltban megjelent két közleményben CR Abraham és munkatársai [Biochemistry, 3.3: 192-199 (1994)] valamint G. Huber és munkatársai [Biochem. Biophys: Rés. Commun., 201 (1): 45-53 (1994)] leírják azt a felfedezésüket, hogy az APP-t a metalloproteináz enzimek tapasztják az amiloid plakkokhoz.

Az átlagosan művelt szakember tudja, hogy az ezen új enzimek és a többi MMP-k között fennálló jelentős homológra azt eredményezi, hogy egy vegyület, amely az egyik enzimet inhibiál12 ja, bizonyos mértékig az új enzimeket is inhibiálhatja. Tehát a találmány szerinti vegyületek hasznosak lehetnek az olyan betegségek kezelésében, amelyekben ezek az új enzimek szerepet játszanak .

Tehát a találmány tárgya új (I) általános képletű merkapto-peptidilszármazékok, amelyek a mátrix metalloproteinázok és/vagy a TNFa által médiáit betegségek, például a fent felsorolt degeneratív betegségek és bizonyos rákok inhibitoraiként használhatók.

A találmány egyik elsődleges tárgya egy szabad állapotban, só, szolvát vagy hidrát alakjában jelenlévő (I) általános képletű vegyület — a képletben

R·'· jelentése 1-6 szénatomos alkil-, 2-6 szénatomos alkenil-, -(1-6 szénatomos alkil)-aril-, aril-, -(1-6 szénatomos alkil)-heteroaril-, heteroaril- vagy -(1-6 szénatomos alkil)-AR⁹ általános képletű csoport, amelyben A jelentése oxigénatom, NR_9 vagy S(0)_m általános képletű csoport, ahol m értéke 0 és 2 közötti, és R⁹ jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-, aril-, heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril- vagy -(1-4 szénatomos alkil)-heteroaril-csoport; ha A jelentése NR⁹ általános képletű csoport, akkor az R⁹ csoportok jelentése lehet azonos vagy különböző;

R² jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport; R² jelentése [Alk]_nR^ általános képletű csoport, amelyben

Alk jelentése 1-6 szénatomos alkil- vagy 2-6 szénatomos alkenilcsoport, és n értéke 0 vagy 1;

X jelentése NR^R^ általános képletű csoport, amelyben R^ • ·· ·· · · · • · · · ····· ·· ··· ·· · · jelentése hidrogénatom, vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben amino- (-NH₂), aril-, aril-amino-, védett amino-, di(l-6 szénatomos alkil)-amino-, 1-6 szénatomos monoalkil-amino-, karboxil-, védett karboxil-, karbamoil-, 1-6 szénatomos monoalkil-karbamoil- vagy di(l-6 szénatomos alkil)-karbamoil-csoporttal szubsztituált, és jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport; vagy az NR^r5 általános képletű csoport egy gyűrűt, például pirrolidino-, piperidino- vagy morfolinogyűrűt képez;

R⁷ jelentése hidrogénatom vagy R^CO általános képletű csoport, amelyben R-'-θ jelentése 1-4 szénatomos alkil-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril-, -(1-4 szénatomos alkil) -heteroaril- , 3-6 szénatomos cikloalkil-, -(1-4 szénatomos alkil)-(3-6 szénatomos cikloalkil)-, 2-6 szénatomos alkenil-, -(2-6 szénatomos alkenil)-aril-, aril- vagy heteroarilcsoport;

r8 jelentése R-¹-¹ általános képletű csoporttal szubsztituált aril-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-R¹¹, R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 szénatomos alkil)-aril-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 szénatomos alkil) -heteroaril- , adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált 3-6 szénatomos cikloalkil-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsz1 1 tituált 3-6 szénatomos cikloalkeml-, adott esetben R általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 széna14 tomos alkil)-(3-6 szénatomos cikloalkil)-csoport vagy (a), (b) vagy (c) általános képletű csoport, amelyekben p értéke 1 vagy 2, és B és C jelentése egymástól függetlenül oxigénatom, kénatom, C(R⁹)₂ vagy NR⁹ általános képletű csoport;

r6 jelentése AR⁹ általános képletű csoport, 3-6 szénatomos cikloalkil-, 3-6 szénatomos cikloalkenil-, 1-6 szénatomos alkil-, -(1-6 szénatomos alkoxi)-aril-, benzil-oxi-aril-, aril-, heteroaril-, -(1-3 szénatomos alkil) -heteroaril- , -(1-3 szénatomos alkil)-aril-csoport, vagy -(1-6 szénatomos alkil)-COOR⁹, -(1-6 szénatomos alkil)-NHR, CONHR, NHCO₂R, NHSO₂R vagy NHCOR általános képletű csoport, amelyekben R jelentése megegyezik az R¹⁰-re megadottal;

R¹¹ jelentése S02R¹³, SR⁷, SR⁹ , COR¹³, N(R⁹)2, NR⁹R¹², OR⁹ általános képletű csoport, szukcinimido- vagy ftálimidocsöpört;

R¹² jelentése hidrogénatom, COR⁹ általános képletű csoport, CO2R⁹ általános képletű csoport, amelyben R⁹ hidrogénatomtól eltérő jelentésű, CONHR⁹ általános képletű csoport, vagy SO2R⁹ általános képletű csoport, amelyben R⁹ hidrogénatomtól eltérő jelentésű; és

R¹³ jelentése hidroxilcsoport, -0-(1-4 szénatomos alkil)-, -0-(1-4 szénatomos alkil)-aril-csoport, N(R⁹)₂ általános képletű csoport — amelyben az R⁹ szubsztituensek jelentése lehet azonos vagy különböző —, 1-4 szénatomos alkil-, aril-, heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril- vagy -(1-4 szénatomos alkil)-heteroaril-csoport.

A találmány szerinti vegyületek közül előnyösek azok, amelyekben egymástól függetlenül vagy bármely kombinációban r! jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy -(1-4 szénatomos alkil)-AR⁹ általános képletű csoport, amelyben A jelentése S (0)_m vagy NR.9 általános képletű csoport vagy oxigénatom, és m értéke 0, 1 vagy 2, és R⁹ jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport;

R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport;

R⁸ jelentése [Alk]_nR⁸ általános képletű csoport, amelyben n értéke 0 vagy 1, Alk jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport, és R⁶ jelentése 1-4 szénatomos alkil-, -(1-3 szénatomos alkil)-aril-, -(1-3 szénatomos alkil)-heteroaril-csoport vagy AR^ általános képletű csoport;

R⁴ jelentése hidrogénatom;

R⁵ jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport; az NR⁴R⁵ általános képletű csoport egy 5-7 tagú gyűrű például pirrolidino-, piperidino- vagy morfolinogyűrűt képezhet;

R⁷ jelentése hidrogénatom vagy R⁴⁸CO általános képletű csoport, amelyben R·'·⁸ jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport ;

R⁸ jelentése (1-4 szénatomos alkil)-R¹¹, (1-4 szénatomos alkenil)-R¹¹, (3-6 szénatomos cikloalkil)-R¹¹ általános képletű csoport;

rH jelentése COR⁴⁸, NR⁹R⁴2, n(R^)2 általános képletű csoport, szukcinimido- vagy ftálimidocsoport;

R jelentese COR²⁷ vagy CO₂R általános kepletu csoport, • · · · · · · amelyekben hidrogénatomtól eltérő jelentésű, vagy

SO₂r9 általános képletű csoport, amelyben R^ hidrogénatomtól eltérő jelentésű; és

R¹³ jelentése hidroxilcsoport, -0-(1-4 szénatomos alkil)csoport vagy N(r9)₂ általános képletű csoport.

A találmány szerinti vegyületek 50 mM alatti IC^q értékeket mutatnak az MMP enzimekkel szemben, és ugyancsak 50 mM alatti értékeket a TNF-inhibíció egész-sejtes vizsgálatában.

Látható, hogy a találmány szerinti vegyületek tartalmazhatnak egy vagy több aszimmetriás szénatomot, ilyenek például azok, amelyeket az (I) általános képleten *-gal jelöltünk. Az egy vagy több aszimmetriacentrum jelenléte egy (I) általános képletű vegyületben sztereoizomereket eredményezhet, és a találmány oltalmi köre minden esetben kiterjed minden ilyen sztereoizomerre, az enantiomereket és diasztereomereket valamint keverékeiket, így racém keverékeiket is beleértve.

A leírásban szereplő képletekben a hullámvonalat (~) egy potenciális aszimmetria-centrumban az R- és S-konfiguráció lehetőségének jelölésére, a < és pontozott (...) vonalat pedig az adott aszimmetria-centrumban fennálló egyedi konfigurációk jelölésére használjuk.

A leírásban önállóan vagy más csoportok részeként szereplő 1-6 szénatomos alkilcsoport kifejezés egyenes vagy elágazó Ián cú, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, például metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, terc-butil-, pentil-, hexil- vagy hasonló csoportot jelent.

Az 1-4 szénatomos alkilcsoport kifejezés egyenes vagy elágazó láncú, 1-4 szénatomot tartalmazó alkil-, például metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, terc-butil-csoportot vagy hasonló csoportot jelent.

A 2-6 szénatomos alkenilcsoport egyenes vagy elágazó láncú, 2-6 szénatomot és egy kettős kötést tartalmazó - ahol ennek lehetősége fennál, ott E vagy Z konfigurációjú — alkneil·-, például vinil-, 1-propenil-, 1- vagy 2-butenil-, 2-metil-2-propenil- vagy hasonló csoportot jelent.

A 3-6 szénatomos cikloalkilcsoport egy 3-6 szénatomot tartalmazó telített aliciklusos csoportot, például ciklopropil-, ciklobutil-, ciklopentil-, ciklohexil- vagy hasonló csoportot j elent.

A 3-6 szénatomos cikloalkenilcsoport 3-6 szénatomot és egy kettős kötést tartalmazó aliciklusos csoportot, például ciklopentenil-, ciklohexenil- vagy hasonló csoportot jelent.

Az arilcsoport kifejezés egy adott esetben például halogénatommal, trifluor-metil-, 1-6 szénatomos alkil-, alkoxi-fenilvagy hasonló csoporttal szubsztituált fenil- vagy naftilcsoportot jelent. A halogénatom lehet fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom.

A védett aminocsoport vagy védett karboxicsoport olyan amino- vagy karboxicsoportot jelent, amelyek az átlagosan művelt szakember számára ismert módon védettek. Az aminocsoport például védhető benzil-oxi-karbonil-, terc-butoxi-karbonil-, acetil- és hasonló csoportokkal, vagy ftálimido- és hasonló csoportok alakjában. A karboxicsoport védhető valamilyen könnnyen bontható észter, például metil-, etil-, benzil- vagy terc-butil-észter alakj ában.

Az alkoxicsoport kifejezés egyenes vagy elágazó láncú, legfeljebb 6 szénatomot tartalmazó alkoxi-, például metoxi-, • · etoxi-, propoxi-, izopropoxi-, butoxi-, terc-butoxi- vagy hasonló csoportot jelent.

A 0-4 szénatomos alkilcsoport kifejezés egyenes vagy elágazó láncú, legfeljebb 4 szénatomot tartalmazó alkil-, például metil-, etil·-, propil-, izopropil- vagy hasonló csoportot jelent.

A heteroarilcsoport kifejezés egy 5-10 atomból álló aromás rendszert jelent, amelynek legalább egy atomja oxigén-, kén- vagy nitrogénatom.

Az (I) általános képletű vegyületek sói közé tartoznak a gyógyászatilag elfogadható sók, például a szervetlen vagy szerves savakkal képzett savaddiciós sók, így a hidrogén-kloridok, hidrogén-bromidok, p-toluolszulfonátok, foszfátok, szulfátok, perklorétok, acetátok, trifluor-acetátok, propionátok, cifrátok, malonátok, szukcinátok, laktátok, oxalátok, tartarátok és benzoátok.

A vegyületek bázisokkal is képezhetnek sókat. Ilyenek például a szervetlen vagy szerves bázisokkal képzett, például alkálifémsók — így a kalcium-vagy magnézium-sók —, továbbá a szerves aminok — mint morfolin, piperidin, dimetil-amin vagy dietil-amin — sói.

Ha a találmány szerinti vegyületekben a védett karboxicsoport egy észterezett csoportot jelent, ez lehet egy metabolikusan labilis CO₂R¹⁴ általános képletű észtercsoport, amelyben R¹⁴ jelentése lehet például etil-, benzil-, fenetil-, fenil-propil-, a- vagy β-naftil-, 2,4-dimetil-fenil-, 4-terc-butil-fenil-,

2,2,2-trifluor-etil-, 1-(benzil-oxi)-benzil-, 1-(benzil-oxi)-etil-, 2-metil-1-propionil-oxi-propil-, 2,4,6-trimetil-benzil-oxi-metil- vagy pivaloil-oxi-metil-csoport.

Az (I) általános képletű vegyületek előállíthatok bármely alkalmas, a szakmában ismert módszerrel és/vagy az alábbi, a találmány oltalmi körébe tartozó eljárásokkal.

Tehát a találmány további tárgya eljárás a fenti (I) általános képletű vegyületek előállítására. Ha az (I) általános képletű vegyületnek egy adott sztereoizomerjét kívánjuk előállítani, a találmány szerinti szintézist alkalmazhatjuk úgy, hogy a megfelelő homokirális anyagból indulunk ki, és/vagy a keverékekből az izomereket a hagyományos elválasztási módszerekkel, például nagynyomású folyadékkromatográfiával rezolválhatjuk.

A találmány szerinti vegyületeket az alábbi eljárásokkal állíthatjuk elő. A leírásban és a képletekben — hacsak másképp nem jelöljük - R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, r12, _r13, a, B, C és X jelentése a fenti. Látni fogjuk, hogy a különböző alábbi vegyületekben szereplő funkciós csoportoknak, amelyeket meg is kívánunk tartani — például amino-, hidroxil- vagy karboxilcsoport — egyes esetekben valamely reakció megkezdése előtt védett alakban kell jelen lenniük. Ilyen esetekben az adott reakció utolsó lépése lehet a védőcsoport eltávolítása. Az alkalmas védőcsoportokat az átlagosan művelt szakember jól ismeri. Részletesebb adatok az alábbi szakirodalmi helyen találhatók: Protective Groups in The Organic Synthesis [Wiley Interscience, T.W. Greene, P. G. M. Wutts].

Tehát az (I) általános képletű vegyületek előállítására egy (II) általános képletű vegyületből — amelyben R⁷ jelentése egy alkalmas védőcsoport, például terc-butil- vagy acetátcsoport — a védőcsoportot (például hidrolízissel) eltávolítjuk.

Ha az (I) általános képletű vegyületnek egy adott sztereo• · * ·

- 20 izomerjét kívánjuk előállítani, ezt megoldhatjuk a hagyományos rezolválási módszerekkel, például nagynyomású folyadékkromatográfiával. Kívánt esetben azonban a kapcsolási reakcióhoz használhatjuk a megfelelő homokirális kiindulási anyagokat, amelyek az (I) általános képletű vegyület kívánt sztereoizomerjét eredményezik. Ezt az alábbiakban példákon mutatjuk be.

A (II) általános képletű közbenső terméket úgy állítjuk elő, hogy egy (III) általános képletű savat — amely képletben R⁷ és r8 jelentése a fenti — vagy valamely aktív származékát egy (IV) általános képletű aminnal reagáltatjuk.

A (III) általános képletű sav aktív származékai lehetnek például savanhidridek vagy savhalogenidek, például savkloridok.

A kapcsolási reakciót az aminálási reakcióknál szokásosan alkalmazott körülmények között hajtjuk végre. így végezhetjük valamilyen, például inért szerves oldószerben, például egy éterben, így valamilyen ciklikus éterben — mint tetrahidrofurán -, egy amidban, például valamilyen szubsztituált amidban — mint dimetil-formamid — vagy egy halogénezett szénhidrogénben, például metilén-dikloridban, alacsony, például -30°C és szobahőmérséklet közötti, így -20 és 0°C közötti hőmérsékleten, adott esetben egy bázis, például egy szerves bázis, így valamilyen amin — mint tri etil-amin vagy egy ciklikus amin, például N-metil-morfolin — jelenlétében. Ha egy (III) általános képletű savat használunk, akkor egy kondenzálószert, például N,Ν'-diciklohexil-karbodiimidet is alkalmazhatunk, előnyösen egy triazol, például 1-hidroxi-benz triazol jelenlétében. Egy másik megoldás szerint a savat a (IV) általános képletű vegyülettel végbemenő reakció előtt egy klór-hangyasav-észterrel, például etil-klór-formiáttal reagáltatjuk.

*· ’ *

- 21 A (IV) általános képletű amint úgy állítjuk elő, hogy egy (V) általános képletű savat vagy valamely aktív származékát egy (VI) általános képletű aminnal kapcsoljuk, majd adott esetben a védocsoporto(ka)t eltávolítjuk.

A (IV) általános képletű sav aktív származékai lehetnek például savanhidridek vagy savhalogenidek, így a fent említett savkloridok.

Az (V) vagy (VI) általános képletű aminosavakat megkaphatjuk királis vagy racém alakban. Királis alakjukban aszimmetriás építőköveket szolgáltatnak az (I) általános képletű vegyületek királis szintéziséhez. Sok ilyen származék a kereskedelmi forgalomban kapható anyagokból könnyen előállítható a szakmában ismert, például az M. Bodanszk és munkatársai [The Practice of Peptide Synthesis, Spronger Verlag, New York, (1984)] vagy a P.L. Durette által, a WO92/21360 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírt módszerekkel.

A találmány további tárgyaként (II) általános képletű vegyületek úgy is előállíthatok, hogy egy (VII) általános képletű vegyületen — amely képletben R¹⁵ jelentése valamilyen alkalmas lehasítható csoport, például halogénatom, így brómatom vagy egy alkilszulfonát-észter, például metánszulfonát — egy (VIII) általános képletű vegyülettel — amely képletben R⁷ jelentése egy alkalmas védőcsoport, például terc-butil- vagy acetátcsoport - a szokásosan használt, például a WO 90/05719 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírt körülmények között nukleofil szubsztitúciót hajtunk végre.

A (VIII) általános képletű tiolok a kereskedelmi forgalomban kapható anyagokból a szakmában ismert módszerekkel előállít22 hatók. Sok (VIII) általános képletű tiol a kereskedelmben is kapható.

A (VII) általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy egy (IX) általános képletű savat — amelyben R-¹-⁵ és R⁸ jelentése a fenti — vagy annak egy alkalmas módon védett változatát vagy aktív származékát a (II) általános képletű vegyületek előállításánál leírtakhoz hasonló körülmények között egy (IV) általános képletű aminnal kapcsoljuk.

A (III) és (IX) általános képletű karbonsavakat előállíthatjuk királis vagy racém alakban. E vegyületek többsége előállítható a kereskedelmi forgalomban kapható anyagokból a szakmában ismert módszerekkel például azzal, amelynek leírása a WO

90/05719 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben szerepel.

A találmány további tárgyaként a (II) általános képletű vegyületeket úgy is előállíthatjuk, hogy egy (X) általános képletű savat — amelyben R¹, R⁷ és R⁸ jelentése a fenti — vagy egy aktív származékát egy (VI) általános képletű aminnal kapcsoljuk.

A (X) általános képletű savakat pedig úgy állítjuk elő, hogy egy (III) általános képletű savat vagy egy aktív származékát egy (VI) általános képletű aminnal — amelyben X jelentése hidroxilcsoport - vagy annak egy alkalmas módon védett változatával kapcsoljuk, majd adott esetben a védőcsoportot eltávolítjuk.

Az (V) általános képletű savszármazékok lehetnek például savanhidridek vagy savhalogenidek, így savkloridok, amint azt a fentiekben leírtuk.

Az (I) általános képletű vegyületek más (I) általános kép···· ··· ·· · · letű vegyületek. átalakításával is előállíthatók. így például egy olyan (I) általános képletű vegyületet, amelyben R^· jelentése

1- 6 szénatomos alkilcsoport, előállíthatunk egy olyan (I) általános képletű vegyület hidrogénezésével, amelyben R¹ jelentése

2- 6 szénatomos alkenilcsoport. Ezt a reakciót valamilyen alkalmas oldószerben, például egy alkoholban — mint etanol — aktívszénen megkötött palládium alkalmazásával hajtjuk végre. További példaként egy olyan (I) általános képletű vegyületet, amelyben R⁷ jelentése R¹°CO általános képletű csoport, egy olyan (I) általános képletű vegyület acilezésével állíthatunk elő, amelyben R⁷ jelentése hidrogénatom. A reakciót egy alkalmas, például klórozott oldószerben — mint metilén-diklorid — egy bázis, például trietil-amin jelenlétében egy alkalmas R^COCl általános képletű savkloriddal hajtjuk végre.

A kapott vég- vagy közbenső termékek bármely keveréke a komponensek fiziko-kémiai eltérései alapján, ismert módszerekkel — például kromatográfiával, desztllációval, frakcionált kristályosítással vagy pedig alkalmas, illetve az adott körülmények között lehetséges esetben sóképzéssel — a tiszta vég- vagy közbenső termékekre szétválasztható.

A találmány szerinti vegyületek a stromelizinnel, kollagenázzal és zselatinázzal szemben in vitro inhibitor aktivitást mutatnak. Továbbá a találmány szerinti vegyületek in vitro inhibiálják a TNFa felszabadulását. A vegyületek aktivitása és szelektivitása a megfelelő enzim-inhibíciós vizsgálatokkal — például a későbbi A példában leírt módon — határozható meg. találmány további tárgya eljárás a fentiek szerint a mátrix metalloproteinázoknak és/vagy a TNFa-nak tulajdonítható rendel• · · ·· β· · • ······· • · · ·· ····· ···· · · · ·· · · lenességekben vagy betegségekben szenvedő paciensek — köztük az ember és/vagy a tej-, hús- vagy szőrmeiparban vagy háziállatként tenyésztett emlős állatok — kezelésére, közelebbről olyan kezelési eljárás, amelynek során hatóanyagként (I) általános képletű mátrix metalloproteináz-inhibítorokat adunk be.

Tehát az (I) általános képletű vegyületek felhasználhatók többek között az osteoarthritis és reumatoid arthritis kezelésében, valamint olyan betegségek és indikációk esetén, amelyeket a mátrix metalloproteinázok túltermelése idéz elő, amint azt például bizonyos metasztázisos tumor sejtvonalakkal kapcsolatban kimutatták.

Mint mondottuk, az (I) általános képletű vegyületek felhasználhatók a humán- és állatgyógyászatban, minthogy a TNFa és az MMP-k hatásos inhibitorai. Tehát a találmány további tárgyát képezi

- egy eljárás emlősökben, különösen emeberekben a TNFa és/vagy az MMP-k által médiáit betegségek vagy kóros állapotok kezelésére vagy megelőzésére, ami abból áll, hogy az emlősnek a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületből vagy egy gyógyászatilag elfogadható sójából hatásos mennyiséget adunk be;

- egy (I) általános képletű vegyület humán- és állatgyógyászati felhasználás — különösen a TNFa és/vagy az MMP-k által médiáit betegségek vagy kóros állapotok kezelése vagy megelőzése — céljára; és

- az (I) általános képletű vegyületek felhasználása a TNFa és/vagy az MMP-k által médiáit betegségek vagy kóros állapotok kezelésére vagy megelőzésére szolgáló gyógyszer előállítására.

A fent említett betegségek illetve kóros állapotok közé ·· · · · ··· • ·· · · ··· • · · · · ····· • · · ··· ·· · · tartozik például a gyulladás, láz, kardiovaszkuláris effektusok, vérzés, koaguláció, akut fézisreakciók, cachexia, anorexia, akut fertőzések és sokkos állapotok, a transzplantátummal szemben fellépő reakciók és autoimmun betegségek; a kötőszövetek leépülésével járó állapotok, például csont-reszorpció, gyulladásos betegségek, kóros dermatológiai állapotok, daganatképződés, angiogenesis (ereződés) és a másodlagos áttételek inváziója, különösen a reumatoid arthritis, az osteoarthritis, periodontitis (foggyökérhártya-gyulladás), a gingivitis (fogínygyulladás), a szaruhártya fekélyesedése, daganatképződés, angiogenesis és a metasztázisok inváziója.

A reumatoid arthritis, osteoarthritis valamint olyan betegségek kezelésére, amelyeket — mint azt bizonyos metasztázisos tumor sejtvonalakban kimutatták — a mátrix metalloproteinázok túltermelése idéz elő, vagy egyéb, a mátrix metalloproteinázok vagy a TNFa megnövekedett termelése által médiáit betegségek kezelésére a találmány szerinti vegyületeket beadhatjuk orális, helyi, parenterális, belégző-spray vagy rektális egységdózisformákban, amelyek nem toxikus, gyógyászatilag elfogadható hordozó-, segéd- és töltőanyagokat tartalmaznak. A parenterális kifejezés a leírásban jelenti többek között a szubkután injekciókat, az intravénás, intramuszkluráis, intrasternális injekciókat és az infúziós módszereket is. A melegvérű állatok, például egerek, patkányok, szarvasmarhák, juhok, kutyák, macskák kezelésén kívül a találmány szerinti vegyületek emberek kezelésében is hatásosak.

A hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények lehetnek orális beadásra alkalmas alakban, például tabletták, pirulák, • ·· ····· • · · · · cukorkák, vizes vagy olajos szuszpenziók, diszpergélható porok vagy granulátumok, emulziók, lágy vagy kemény kapszulák, szirupok vagy elixírek alakjában. Az orális beadásra szánt készítményeket a gyógyszerkészítmények gyártásában használatos módszerek bármelyikével előállíthatjuk, és ezek a készítmények tartalmazhatnak egy vagy több segédanyagot — éspedig édesítő-, ízesítőszereket, színezékeket, tartósítószereket —, hogy gyógyászatilag elegáns és jóízű készítményt kapjunk. A tabletták a hatóanyagot a tablettagyártáshoz szükséges nem-toxikus, gyógyászatilag elfogadható segédanyagokkal összekeverve tartalmazzák. Ezek a segédanyagok lehetnek például inért hígítószerek — mint kalcium-karbonát, nátrium-karbonát, laktóz, kalcium-foszfát vagy nátrium-foszfát granuláló- és dezintegráló (a tabletta szétesését elősegítő) szerek, például kukoricakeményitő vagy alginsav; kötőanyagok, például keményítő, zselatin vagy akácia; lubrikánsok (síkosító szerek), például magnézium-sztearát, sztearinsav vagy talkum. A tabletták készülhetnek bevonat nélkül, vagy ismert módszerekkel elláthatók olyan bevonattal, amely a tabletta szétesését és a gyomor/bél-traktusban történő felszívódását késlelteti, ezáltal hosszab időn át tartós hatást eredményez. Késleletető anyagként használhatunk például gliceril-monosztearátot vagy gliceril-disztearátot. Továbbá a tabletták bevonására alkalmazhatjuk a 4,256,108, a 4,166,452 vagy a 4,265,874 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismerteit, a késleltett hatóanyagleadású ozmotikus gyógyszertabletták készítésére szolgáló módszert.

Az orális beadásra szánt gyógyszerkészítmények lehetnek továbbá kemény zselatinból készült kapszulák, amelyek a ható27 anyagot egy inért szilárd hordozóanyaggal — mint kalcium-karbonát, kalcium-foszfát vagy kaolin — összekeverve tartalmazzák, vagy lágy zselatinkapszulák, amelyekben a hatóanyag vízzel vagy valamilyen olajos közeggel, például mogyoró-olajjal, folyékony paraffinnal vagy olívaolajjal van összekeverve.

A vizes szuszpenziók a hatóanyagokat a szuszpenziók készítéséhez szükséges segédanyagokkal összekeverve tartalmazzák.

Ilyen segédanyagok a szuszpendálószerek, például a nátrium-karboxi-metίl·-cel·l·uóz, a metil-celluoz, hidroxi-propil-metil-cellulóz, nátrium-alginát, poli(vinil-pirrolidon), tragakantgumi, akácmézga; a diszpergáló- vagy nedvesítőszerek lehetnek természetes foszfatidok — például lecitin —, vagy egy alkilén-oxidnak zsírsavakkal képzett kondenzációs termékei, például poli(oxi-etilén-sztearát), vagy etilén-oxidnak hosszú szénláncú alifás aloholokkal képzett kondenzációs termékei, például heptadekaetilén-oxi-cetanol, vagy etilén-oxidnak zsírsavakból és valamilyen hexitből származó félészterekkel· képzett kondenzációs termékei, például a polioxi-etilénnnek zsírsavakból és hexitanhidridekbőlből származó félészterekkel képezett termékei, mint a polioxi-etilén-szorbitán-monooleát. A vizes szuszpenziók tartalmazhatnak továbbá egy vagy több tartósítószert — mint például etil- vagy propil-p-hidroxi-benzoát —, egy vagy több színezéket, egy vagy több ízesítőszert és egy vagy több édesítőszert, például szacharózt vagy szacharint.

Az olajos szuszpenziókat úgy formulálhatjuk, hogy a hatóanyagot valamilyen növényi olajban — például arachis-, olíva-, szezám- vagy kókuszolajban — vagy ásványi olajban, például folyékony parafinban szuszpendáljuk. Az olajos szuszpenzió tartalmazhat sűrítőszert, például méhviaszt, kemény parafint vagy cetil-alkoholt. Édesítőszerként a fent felsoroltakat használjuk, és ízesítőszert is alkalmazhatunk, hogy jó ízű orális készítményt kapjunk. Ezek a készítmények egy antioxidáns, például aszkorbinsav hozzáadásával tartósíthatok.

A diszpergálható porok és granulátumok, amelyekből víz hozzáadásával vizes szuszpenzió készíthető, a hatóanyagot egy diszpergáló- vagy nedvesítőszerrel, szuszpendálószerrel és egy vagy több tartósítószerrel elkeverve tartalmazzák. Az alkalmas diszpergáló- és nedvesítőszereket már felsoroltuk, ezeken kívül a készítmény például édesítő-, ízesítőszereket és színezékeket is tartalmazhat.

A találmány szerinti gyógyszerkészítmények lehetnek olajos-vizes emulziók is. Az olajos fázis lehet egy növényolaj — például olíva- vagy arachisolaj — ásványi olaj, például folyékony parafin vagy ezek keverékei. Emulgeálószerként alkalmazhatunk a természetben előforduló gumikat — például akácmézgát vagy tragakant-gumit —, természetes foszfatidokat — mint szójabab vagy lecitin —, zsírsavakból és hexitanhidridekbőlből származó észtereket és félésztereket, például szorbitán-monooleátot, vagy az ilyen félésztereknek etilén-oxiddal képzett kondenzációs termékeit, például polioxi-etilén-szorbitán-monooleátot. Az emulziók édesítő- és ízesítőszereket is tartalmazhatnak.

A szirupok és elixirek készíthetők édesítőszerekkel, amilyen például a glicerin, propilénglikol, szorbit vagy szacharóz. Az ilyen készítmények tartalmazhatnak továbbá demulcenst (fájdalomcsillapító/gyulladáscsökkentő/lágyító), tartósítószert, valamint ízesítőszereket és színezékeket. A gyógyszerkészítmények lehetnek steril, injektálható vizes vagy olajos szuszpenziók.

Az ilyen szuszpenziókat a szakmában ismert módszerekkel, a fent említett diszpergáló- vagy nedvesítőszerek és szuszpendálószerek alkalmazásával formulálhatjuk. A steril, injektálható készítmény lehet továbbá egy nem toxikus, gyógyászatilag elfogadható hígító- vagy oldószerrel, például 1,3-butándiollal készített steril, injektálható oldat vagy szuszpenzió. Hordozóanyagként és oldószerként használhatunk vizet, Ringer-oldatot vagy izotóniás nátrium-klorid—oldatot. Ezen kívül oldó vagy szuszpendáló közegként fixált olajokat is szoktak használni. E célra fixált olajok bármely keverékét alkalmazhatjuk, beleértve a mono- és digilicerideket. Az injektálható készítmények zsírsavakat, például olaj savat is tartalmazhatnak.

Az (I) általános képletű vegyületeket végbélen át, kúpok alakjában is beadhatjuk. Ezek a készítmények úgy állíthatók elő, hogy a hatóanyagot egy alkalmas, nem irritáló segédanyaggal keverjük, amely normál hőmérsékleten szilárd, de a rektális hőmérsékleten folyékony, így a végbélben megolvad, és leadja a hatóanyagot. Ilyen anyag például a kakaóvaj és a polietilénglikolok.

Helyi alkalmazáshoz a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó krémekeket, kenőcsöket, zseléket, oldatokat vagy szuszpenziókat használunk. A leírásban a száj- és toroköblítő szerek használatát is helyi alkalmazásnak tekintjük.

A fent felsorolt kóros állapotok kezeléséhez körülbelül

0,05 és körülbelül 140 mg/testtömegkilogrammg/nap közötti dózist alkalmazunk, ez paciensenként körülbelül 2,5 mg és körülbelül 7 g ·· « ·· ·· «

közötti napi dózist jelent. Például egy gyulladás hatásosan kezelhető körülbelül 0,01-50 mg vegyület/testtömegkilogramm/nap dózis beadásával (vagyis paciensenként körülbelül 0,5 mg és körülbelül 3,5 g közötti napi dózissal).

A kezelendő pacienstől és a beadás módjától függ, hogy mennyi hatóanyagot keverünk össze a hordozóanyagokkal az egységdózisforma előállítására. Például humángyógyászati célra szánt orális készítményben ez a mennyiség a készítménynek körülbelül 5 - körülbelül 95 %-a között változik. Az egységdózisforrnak általában körülbelül 1 - körülbelül 500 mg hatóanyagot tartalmaznak.

Az egyes pacienseknél használandó dózisok nagysága azonban egy sor tényezőtől, köztük az alkalmazott vegyület aktivitásától, a beteg életkorától, testtömegétől, általános egészségi állapotától, nemétől, az adagolás időtartamától és módjától, a kiválasztás mértékétől, az alkalmazott gyógyszerkombinációtól és a kezelendő betegség súlyosságától függ.

Az alábbi példák a találmány szerinti vegyületek és közbenső termékeinek előállításának bemutatására szolgálnak.

1. Közbenső termék: (RS)-2-Bróm-4-metoxi-karbonil-butánsav

6,0 g, a Hanby és munkatársai [J. Chem. Soc., 51: 3239 (1950)] által leírt módon előállított d-metil-D,L-glutámsavat és 15,5 g kálium-bromidot 100 ml 1,25M vizes kénsav-oldatban oldunk, 0°C-on több részletben hozzáadunk 4,0 g nátrium-nitritet, és ezzel 1 órán át kezeljük. Ezután hagyjuk, hogy az oldat szobahőmérsékletre felmelegedjék, 2 órán át keverjük, majd kétszer

100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk, így 4,5 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC (vékonyréteg-kromatográfia) Rf = 0,14 (25 % etil-acetátot tartalmazó hexánban).

2. Közbenső termék: (RS)-2-Bróm-5-metoxl-karbonil-pentánsav

1,8 g, a Hanby és munkatársai [J. Chem. Soc., 51: 3239 (1950)] szerinti észterezési módszerrel kapott (RS)-2-amino-5-metoxi-karbonil-pentánsavból állítjuk elő 1,95 g halványbarna olaj alakjában.

TLC Rf = 0,30 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

3. Közbenső termék: (RS)-2-Bróm-6-metoxi-karbonil-hexánsav

3,93 g, a Hanby és munkatársai [J. Chem. Soc., 51: 3239 (1950)] szerinti észterezési módszerrel kapott (RS)-2-amino-6-metoxi-karbonil-hexánsavból állítjuk elő 4,39 g színtelen olaj alakj ában.

TLC Rf = 0,26 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

4. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-3-metoxi-karbonil-propionsav

Az alábbi szakirodalmi helyen: [J. Am. Chem. Soc., 108: 3 (1986)] példákkal illusztrált módszerrel monométil-maleátot ál» ·· · • · · ···· lítunk elő, ebből 1,64 g-ot feloldunk, hozzáadunk 1,48 g kélium-tiolacetátot 2 ml metanolban oldva, és a keveréket egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldatot bepároljuk, a maradékot 30 ml víz és 30 ml metilén-diklorid között megosztjuk, és a vizes réteget 2N sósav-oldattal pH = 3-ra megsavanyítjuk. A rétegeket elválasztjuk, és a vizes réteget kétszer 30 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az így kapott barna olajat gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (ehhez eluensként 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridot használunk), így 0,48 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC R_f = 0,30 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

5. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-4-metoxi-karbonll-butánsav

Az 1. közbenső termékből 3,0 g-ot 30 ml etanolban oldunk, hozzáadunk 2,0 g kálium-tiolacetátot, és a reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot 30 ml etil-acetát és 30 ml víz között megosztjuk. A szerves réteget 30 ml telített nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk, így 1,83 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC R_f = 0,46 (etil-acetátban)

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

·· · ·· ·· ·

- 33 • ······· • · · ·· ····· ···· ··· ·· · ·

6. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-5-metoxi-karbonil-pentánsav

1,89 g 2. közbenső termékből kapjuk 0,87 g sárga olaj alakj ában.

TLC Rf = 0,30 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

7. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-6-metoxi-karbonil-hexánsav

4,3 g 3. közbenső termékből kapjuk 2,78 g sárga olaj alakj ában.

TLC Rf = 0,23 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

8. Közbenső termék: (RS)-(1,1-dimetil-etil)-2,4-dibróm-butirát

100 g (0,54 mól) 4-bróm-butil-kloridhoz 100°C-on 4 óra alatt cseppenként hozzáadunk 31,3 ml (0,54 mól) brómot, közben a reakcióelegyet mindig kitisztulásig keverjük. Az így kapott savkloridot lehűtjük, majd 0°C-on, keverés közben cseppenként hozzáadjuk 240 ml terc-butanolnak és 64 ml (0,461 mól) trietil-aminnak 600 ml vízmentes metilén-dikloriddal készített oldatához. Ezután a reakcióelegyhez 2M sósav-oldatot adunk, és a rétegeket elválasztjuk. A szerves részt kétszer 500 ml 10 %-os nátrium-metadiszulfit—oldattal, 500 ml vízzel, majd 500 ml nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, azután vákuumban bepároljuk, így 120 g barna olaj alakjában • «· ·· ··· • ·· · · ··«·· ···· ·»· ♦ · · megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 86 %.

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃), Ref., TMS) 1,50 (9H,s), 2,45 (2H, q) , 3,55 (2H, t) és 4,40 (1H, dd).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

9. Közbenső termék: (RS)-(1,1-dimetil-etil)-2,5-dibróm-pentanoát g (0,37 mól) 5-bróm-valeril-kloridból kapjuk 81 g barna olaj alakjában; kihozatal: 68 %.

¹HNMR (250 MHz, CDCI3), Ref., TMS) 1,50 (9H,s), 1,8-2,2 (4H, m) , 3,45 (2H, t) és 4,18 (1H, dd) .

10. Közbenső termék: (RS)-(1,1-dimetil-etil)-2,6-dibróm-hexanoát

100 g (0,47 mól) 6-bróm-hexanoil-kloridból kapjuk 133 g barna olaj alakjában; kihozatal: 87 %.

¹HNMR (250 MHz, CDCI3), Ref., TMS) 1,50 (9H,s), 1,6-2,1 (6H, m) , 3,4 (2H, t) és 4,1 (1H, dd).

11. Közbenső termék: (RS)-(1.1-dlmetll-etll)-2,4-bisz(acetil-merkapto)-butirát

A 8. közbenső termékből 2 g-ot (6,6 mmol) 25 ml metanolban oldunk, keverés közben hozzáadunk 1,51 g kálium-tiolacetátot, és a reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük.

• · · · · »* · • » · ·«··· • 9 9 9 9 9*999

999 9 9 99 9 9 9 9

Ezután a keveréket 100 ml metilén-dikloriddal hígítjuk, kétszer 50 ml nátrium-klórid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az így kapott sárga olajat gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (ehhez eluensként 30 % metilén-dikloridot tartalmazó hexánt használunk), így 1,1 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet;

kihozatal: 57 %.

TLC R_f = 0,57 (metilén-dikloridban)

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

12. Közbenső termék: (RS)-(1,1-dimetil-etil)-2,5-blsz[(acetil-merkapto)-pentanoát] g (6,32 mmol) 9. közbenső termékből kapjuk 1,12 g szinte len olaj alakjában; kihozatal·: 57 %.

TLC Rf = 0,57 (metilén-dikloridban)

13. Közbenső termék: (RS)-(1,1-dimetil-etil)-2,6-blsz[(acetil-merkapto)-hexanoát] g (6,32 mmol) 10. közbenső termékből kapjuk 1,09 g színtelen olaj alakjában; kihozatal: 57 %.

TLC Rf = 0,57 (metilén-dikloridban).

14. Közbenső termék: (RS)-2,3-Bisz[(acetil-merkapto)-propionsav] fc* · » > ·>· * . + 4 4· · »

- 36 1,71 g 2,3-dibróm-propánsavat 7,35 ml 1M kálium-hidroxid— —oldatban oldunk, cseppenként hozzáadunk 1,12 g tioecetsavat, és a reakcióelegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük.

Ezután a keverék pH-ját 1M kálium-hidroxid—oldat további hozzáadásával 8 és 9 közötti értékre állítjuk, a reakcióelegyet további 2 órán át keverjük, majd tömény sósav-oldattal pH = 1-2-re megsavanyítjuk, és kétszer 25 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk, így sárga olajat kapunk. A reakció kétszeri futtatásával kapott termékfrakciókat összeöntjük, gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (ehhez eluensként 4 % ecetsavat tartalmazó toluolt használunk), így 0,422 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,15 (5 % ecetsavat tartalmazó toluolban).

15. Közbenső termék: (RS)-2,4-Bisz[(acetil-merkapto)-vaj sav]

1,1 g (3,7 mmol) 11. közbenső terméket 50 ml metilén-dikloridban oldunk, az oldatot 2,9 ml (37 mmol) trifluor-ecetsavval kezeljük, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután 50 ml vizet adunk hozzá, és a kapott keveréket háromszor 40 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 50 ml vízzel és 50 ml nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 870 mg halványsárga olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 98 %.

TLC Rf = 0,12 (25 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

16. Közbenső termék: (RS)-2,5-Bisz[(acetil-merkaoto)-vaj sav]

1,1 g (3,6 mmol) 12. közbenső termékből kapjuk 906 mg színtelen olaj alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC R_f = 0,12 (25 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

17. Közbenső termék: (RS)-2,6-Bisz[(acetil-merkaoto)-hexánsav]

1,1 g (3,6 mmol) 13. közbenső termékből kapjuk 895 mg színtelen olaj alakjában; kihozatal: 98 %.

TLC Rf = 0,12 (25 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

18. Közbenső termék: 4-Ftálimido-butánsav

5,16 g 4-amino-vaj savat és 5,35 g nátrium-karbonátot 150 ml vízben oldunk, és szobahőmérsékleten, erőteljes keverés közben egyszerre hozzáadunk 10,96 g N-karboetoxi-ftálimidet. A reakcióelegyet addig keverjük, míg lényegében az összes szilárd anyag fel nem oldódik (30 perc), majd leszűrjük. A szűrletet körülbelül 22 ml 6M sósav-oldat hozzáadáséval pH = 1-re megsavanyítjuk, a kapott fehér csapadékot leszűrjük, és 150 ml vízzel alaposan átmossuk. A szilárd anyagot levegőn, majd vákuumban szárítjuk, így 7,35 g színtelen szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

• · · · · ····· ···« ··· ·· · · ^NMR (250 MHz, CDCI3), Ref., TMS) d 2,03 (2H, pent.), 2,42 (2H, t), 7,65-7,77 (2H, m) és 7,81-7,90 (2H, m).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

19. Közbenső termék: 5-Ftállmido-pentánsav

5,0 g 5-Amino-pentánsavból kapjuk 6,8 g színtelen szilárd anyag alakjában.

^NMR (250 MHz, CDCI3) , Ref., TMS) d 1,6-1,8 (4H, m) , 2,20 (2H, t) , 3,85 (2H, t) , 7,70-7,75 (2H, m) , 7,85-7,95 (2H, m) , 10,2 (1H, széles s).

20. Közbenső termék: 6-Ftálimido-hexánsav

5,0 g 6-Amino-hexánsavból kapjuk 5,8 g színtelen szilárd anyag alakjában.

¹HNMR (250 MHz, CDCI3), Ref., TMS) d 1,5-2,4 (6H, m), 2,3 (2H, t), 3,80 (2H, t), 7,8-8,1 (4H, m), 10,4 (1H, széles s).

21. Közbenső termék: 2-(3-Ftálimido-fenil)-ecetsav

3,0 g 2-(3-Amino-fenil)-ecetsavból kapjuk 4,0 g piszkosfehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 72 %.

TLC Rj = 0,36 (7,5 % metanolt és 0,5 % ecetsavat tartalmazó metilén-dikloridban).

22. Közbenső termék: cisz - 3-Amino-4,5-ciklopenténkarbonsav g (0,458 mól) racém laktámot 1000 ml 2M sósav-oldatban oldva 1 órán át visszafolyató hűtő alatt forralunk. Ezután a keveréket vákuumban bepároljuk, a maradékot acetonból átkristályosítjuk, így 73 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyület hidrokloridját; kihozatal: 97 %.

Ebből a sósavas sóból 20 g-ot (0,122 mól) 300 ml vízben oldunk, és az oldatot keverés közben addig kezeljük amberlit (IRA-67) ioncserélő gyanátval, míg pH-ja el nem éri a 7-es értéket. Ezután a gyantát szűréssel, az oldószert pedig vákuumbepárlással eltávolítjuk, a maradékot acetonból átkristályosítjuk, így 13,7 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal·; 88 %.

23. Közbenső termék: cisz-Ftálimido-4,5-ciklopenténkarbonsav

A 22. közbenső termék hidrokloridjából (22,3 g, 0,136 mól) kapjuk 13,7 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 39 %. TLC Rf = 0,37 (1 % ecetsavat és 5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

24. Közbenső termék: transz-Ftálimido-4,5-ciklopenténkarbonsav-metil-észter

23,2 g (0,183 mól) 23. közbenső terméket 27,03 g (0,183 mól) ftálsavanhidriddel együtt elporítunk, a keveréket 190°C-on, nitrogénáramban, keverés közben megolvasztjuk, majd hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, és a maradékot 120 ml etil-acetáttal • · · · » ··· • · · ·· ····· ···· ··· ·· · · kezeljük. Ezután 1,0 g aktívszenet adunk hozzá, visszafolyató hűtő alatt 30 percig forraljuk, majd celiten leszűrjük. A szűrletet vákuumban bepároljuk, így 45,7 g halványsárga szilárd anyag alakjában megkapjuk a ftálimido-sav közbenső terméket, amely a cisz- és transz-izomer 1:1 arányú keveréke.

A savat 300 ml metanolban oldva 0,5 ml tömény sósav-oldattal kezeljük, a reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt 30 percig forraljuk, majd szobahőmérsékletre lehűlni hagyjuk, és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 400 ml etil-acetátban oldjuk, az olatot kétszer 100 ml 8 %-os nétrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 100 ml vízzel, majd 100 ml nátrium-klorid oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így megkapjuk a ftélimido-észtert a cisz- és transz-izomer 1:1 arányú keverékeként. Ezeket gyors oszlopkromatográf iával szétválasztva (eluensként 60 % étert tartalmazó pentán alkalmazásával) 9,72 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 20 %.

TLC R_f = 0,46 (40 % pentánt tartalmazó éterben).

25. Közbenső termék: transz-3-Ftállmldo-4,5-ciklopenténkarbonsav

9,72 g (35,8 mmol) 24. közbenső terméket 100 ml 0,5M sósav-oldat és 100 ml jégecet elegyében oldunk, az oldatot visszafolyató hűtő alatt 30 percig forraljuk, majd 200 ml vízzel hígítjuk, és háromszor 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 100 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az • · · · · így kapott a nyers terméket dietil-éterből átkristályosltva 7,56 g fehér szilárd anyagot kapunk; kihozatal: 82 %.

TLC Rf = 0,48 (1 % ecetsavat és 5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

26. Közbenső termék: cisz-3-Ftálimido-ciklopenténkarbonsav

15,1 g (58,7 mmol) 23. közbenső terméket 700 ml etil-acetátban, 2 g 5 %-os, aktívszénen megkötött palládium jelenlétében szobahőmérsékleten, atmoszferikus nyomáson egy éjszakán át hidrogénezünk. A katalizátort celiten leszűrve eltávolítjuk, a szürletet vákuumban bepároljuk, így 15 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 98 %. TLC Rf = 0,37 (1 % ecetsavat és 5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületet:

27. Közbenső termék: transz-3-Ftálimido-ciklopenténkarbonsav

5,55 g (29,3 mmol) 25. közbenső termékből kapjuk 7,04 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 93 %.

TLC R_f = 0,47 (1 % ecetsavat és 5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

28. Közbenső termék: cisz-(1,1-Dimetil-etil)-3-ftálimido-ciklopentil-acetát

5,09 g (19,6 mmol) 26. közbenső terméket 60 ml vízmentes metilén-dikloridban oldva 3,4 ml (39,3 mmol) oxalil-kloriddal, majd 1 csepp dimetil-formamiddal kezelünk. Ezután a reakcióelegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, igy megkapjuk a savklorid közbenső terméket.

A maradékot 30 ml tetrahidrofuránban oldjuk, majd 0°C-on 200 ml éteres diazometán—oldattal (körülbelül 80 mmol) kezeljük. A reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd vákuumban bepároljuk, így sárga szilárd anyag alakjában megkapjuk a diazoketont.

Ezt 100 ml terc-butanolban oldjuk, és visszafolyató hűtő alatt forraljuk, miközben 2 óra alatt kis részletekben hozzáadjuk 438 mg (1,9 mmol) ezüst-benzoátnak 5 ml trietil-aminnal készített oldatát. A reakcióelegyet további 1 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd szobahőmérsékletre hűtjük, celiten leszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepéroljuk, igy egy sárga szilárd anyagot kapunk. Ezt a maradékot 75 ml metilén-dikloridban oldjuk, és az oldatot 50 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 50 ml vízzel, majd 50 ml nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így megkapjuk a nyers terméket. Ebből gyors oszlopkromatográf iával , eluensként dietil-éter és pentán 50%-os elegyét alkalmazva 3,8 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 60 %.

TLC Rf = 0,52 (dietil-éter és pentán 50%-os elegyében).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületet:

• · · · ·

29. Közbenső termék: transz-(l,l-Diinetil-etil)-3-ftáliinido-ciklopentil-acetát

1,41 g (5,44 mmol) 27. közbenső termékből kapjuk 1,22 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 70 %.

TLC Rf = 0,58 (dietil-éter és pentán 50%-os elegyében).

30. Közbenső termék: cisz-3-Ftálimido-ciklopentil-ecetsav

1,78 g (5,4 mmol) 28. közbenső terméket 20 ml metilén-dikloridban oldva 2,1 ml (27 mmol) trifluor-ecetsavval kezelünk, és a keveréket szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az oldószer és a trifluor-ecetsav feleslegét vákuumban eltávolítva

1,41 g fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 96 %.

TLC Rf = 0,58 (30 % pentánt tartalmazó dietil-éterben).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületet:

31. Közbenső termék: transz-3-Ftálimido-ciklopentil-ecetsav

1,18 g (3,58 mmol) 29. közbenső termékből kapjuk 842 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 86 %.

TLC Rf = 0,41 (30 % pentánt tartalmazó dietil-éterben).

32. Közbenső termék: (RS)-2-Bróm-5-ftálimido-pentánsav

5,0 g (20,2 mmol) 19. közbenső terméket 10 ml tionil-kloriddal 65°C-on 30 percig melegítünk. Ezután 5,4 g N-bróm-szukcinimidet, további tionil-kloridot és 1 csepp 48 %-os vizes hid• ·· ·· ··· • · · · · ····· ···· ··· · · · · rogén-bromid—oldatot adunk hozzá. Az így kapott oldatot 10 percig 60°C-on, majd 2 óra 15 percen át 70°C-on melegítjük, azután újabb 850 mg N-bróm-szukcinimidet adunk hozzá, és a keveréket 70°C-on 2 órám át melegítjük. A tionil-klorid feleslegét csökkentett nyomáson elpárologtatjuk, az olajos maradékot 200 ml vízmentes tetrahidrofurán és 200 ml víz elegyével hígítjuk.

Ezután szilárd nátrium-hidrogén-karbonát óvatos hozzáadáséval a keverék pH-ját 7 és 8 közé állítjuk, majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. A tetrahidrofurán feleslegét vákuumban eltávolítjuk, a maradékot háromszor 300 ml metilén-dikloriddal mossuk. A vizes részt 6M sósav-oldattal pH = 1-re óvatosan megsavanyítjuk, majd négyszer 200 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat kétszer 400 ml vízzel és 400 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 4,7 g világosbarna szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet;

kihozatal: 71 %.

TLC R_f = 0,47 (etil-acetátban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

33. Közbenső termék: (RS)-2-Bróm-2-(3-ftálimido-fenil)-ecetsav

A 21. közbenső termékből kapjuk 588 mg színtelen szilárd anyag alakjában; kihozatal: 75 %.

TLC Rf = 0,19 (5 % metanolt és 0,1 % ecectsavat tartalmazó metilén-dikloridban).

• «

- 45 ···· ···

34. Közbenső termék: cisz-a-Bróm-3-Ftálimldo-ciklopentil-ecetsav

1,41 g (5,16 mmol) 30. közbenső termékből kapjuk 1,59 g laza hab alakjában; kihozatal: 87 %.

TLC Rf = 0,46 (2 % metanolt tartalmazó dietil-éterben).

35. Közbenső termék: transz-a-Bróm-3-Ftálimido-ciklopentil-ecetsav

815 mg (2,98 mmol) 31. közbenső termékből kapjuk 805 mg sárgásbarna hab alakjában; kihozatal: 77 %.

TLC Rf = 0,48 (2 % metanolt tartalmazó dietil-éterben).

36. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-5-ftálimido-pentánsav

3,0 g (9,2 mmol) 33. közbenső terméket 30 ml metanolban oldva 1,05 g kálium-tioacetáttal kezelünk, és a reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a keveréket vákuumban bepároljuk, és a maradékot 100 ml metilén-dikloridban oldjuk. Az oldatot kétszer 50 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 2,4 g terméket kapunk halványsárga hab alakjában; kihozatal: 81 %.

TLC Rf = 0,47 (etil-acetátban).

37. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-2-(3-ftálimido)-fenil-ecetsav

A 33. közbenső termékből kapjuk 722 mg színtelen szilárd anyag alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,15 (5 % metanolt és 0,1 % ecetsavat tartalmazó metilén-dikloridban).

38. Közbenső termék: cisz-a-(Acetil-merkapto)-3-ftálimido-ciklopentil-ecetsav

2,01 g (5,71 mmol) 34. közbenső termékből kapjuk 1,44 g barna hab alakjában; kihozatal: 73 %.

TLC R_f = 0,42 (dietil-éterben) .

39. Közbenső termék: transz-a-(Acetil-merkapto)-3-ftálimido-ciklopentil-ecetsav

774 mg (2,2 mmol) 35. közbenső termékből kapjuk 329 mg bézs színű hab alakjában; kihozatal: 43 %.

TLC Rf = 0,45 (dietil-éterben).

40. Közbenső termék: (RS)-N-[2-Bróm-4-ftálimido-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

2,33 g 18. közbenső terméket 2,92 ml tionil-kloriddal 65°C

-on 30 percig melegítünk. Ezután 2,51 g N-bróm-szukcinimidet, további tionil-kloridot és 1 csepp 48 %-os vizes hidrogén-bromid—oldatot adunk hozzá. Az így kapott oldatot 10 percig 60°C-on, majd 2 óra 15 percen át 70°C-on melegítjük, azután újabb 850 mg N-bróm-szukcinimidet adunk hozzá, és a keveréket 70°C-on órám át melegítjük. A tionil-klorid feleslegét csökkentett nyomáson elpárologtatjuk, az olajos maradékot 10 ml vízmentes metilén-dikloriddal hígítjuk. A felső réteg egy részét (4,0 ml) 0°C-on hozzáadjuk 500 mg L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidnak és 0,24 ml trietil-aminnak 10 ml vízmentes metilén-dikloriddal készített oldatához. Az így kapott reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd metilén-dikloriddal hígítjuk, azután 50 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 50 ml 1M vizes sósav-oldattal és 50 ml telített nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A kapott barna szilárd anyagot 4 x 18 cm-es oszlopon gyorskromatográfiával tisztítjuk (eluens: metanol 2%-os metilén-dikloridos oldata), így 530 mg piszkosfehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,44 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban). Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

41. Közbenső termék: (RS)-N-[2-Bróm-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

4,0 g 19. Közbenső termékből és 1,18 g L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 1,2 g rózsaszínű szilárd anyag alakj éban.

TLC Rf = 0,34 (metanol 5 %-os metilén-dikloridos oldatában).

42. Közbenső termék: (RS)-N-[2-Bróm-6-ftállmido-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

4,0 g 20. Közbenső termékből és 1,18 g L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 1,0 g, csaknem színtelen szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,52 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában)

43. Közbenső termék: (RS)-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]- 5 -ftálimldo-pentánsav

22,45 g (0,1 mól) kálium-terc-butoxidot 215 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, keverés közben 11,3 ml (0,1 mól) terc-butil-tiolt adunk hozzá, és szobahőmérsékleten 20 percig keverjük, majd hozzáadunk 32,6 mg (0,1 mól) 13. közbenső terméket 80 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldva, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután 300 ml vizet adunk hozzá, 1M sósav-oldattal pH = 1-re megsavanyítjuk, és háromszor 200 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott sárga olajat gyors oszlopkromatográf iával tisztítjuk (eluens: 5-15 % metilén-diklorid etil-acetátban), majd metilén-diklorid és hexán elegyéből átkristályosítjuk, így 22 g halványsárga szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 66 %.

TLC Rf = 0,48 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

44. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetll-etil)-merkapto]-5-ftálimido-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

8,06 g (24 mmol) 43. közbenső terméket és 7,0 g (24 mmol)

L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidot 250 ml metilén-dikloridban oldunk, az oldatot 3,9 g (28,9 mmol) N-hidroxi-benzotriazollal, majd 5,06 g (26,4 mmol) 1-(3-dmietil-amino-propil)-3-etll-karbodiimid-hidrokloriddal (EDC) kezeljük, és a reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a keveréket

300 ml 1M sósav-oldattal mossuk, és a vizes részt kétszer 100 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 300 ml 1M sósav-oldattal, 300 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, majd 300 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott halványsárga szilárd anyagot gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (eluens: metilén-diklorid 5 %-os metilén-dikloridos oldata), így 12,8 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 88 %.

TLC Rf = 0,55 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában)

45. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto] -5-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metilamid

2,56 g (4,2 mmol) 44. közbenső terméket 10 ml tetrahidrofurán és 50 ml etanol elegyében oldva 10 ml hidrazin-hidráttal kezelünk, és a keveréket visszafolyató hűtő alatt 2 órán ét forraljuk. Miután szobahőmérsékletre lehűlt, 30 ml vizet adunk hozzá, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a maradékot 1M sósav-oldattal pH = 1-re megsavanyítjuk, és kétszer 100 ml metilén-dikloriddal mossuk. Az egyesített szerves extraktumokat

100 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szá50 rítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott halványsárga szilárd anyagot gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (eluens:

10-25 % metanol metilén-dikloridban), igy 9,2 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 91 %. TLC Rf = 0,23 (metanol 30 %-os metilén-dikloridos oldatéban)

46. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(acetil-amino)-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

1,14 g (2,38 mmol) 45. közbenső terméket és 2 ml (14,4 mmol) trietil-amint 45 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk,

0,5 ml (7 mmol) acetil-kloridot adunk hozzá, és a keveréket szobahő-mérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután 75 ml metilén-dikloriddal hígítjuk, és 100 ml 1M sósav-oldattal,

100 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 100 ml vízzel, majd 100 ml nátrium-klorid oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott halványsárga szilárd anyagot gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (eluens:

metanol 5 %-os metilén-dikloridos oldata), így 1,2 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 95 %.

TLC Rf ~ 0,31 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában). Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

47. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(benzoil-amino)-pentanoil}-L-leucll-L-fenil-ala51 nin-N-metil-amid

2,86 g (5,97 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,84 ml (7,2 mmol) benzoil-kloridból kapjuk 3,43 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 99 %.

TLC Rf = 0,41 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

48. Közbenső termék: (RS)-N-(2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-szukcinimido-pentanoll}-L-leucil-L-fenil-alanln-N-metll-amld

1,14 g (2,38 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,33 g (3,3 mmol) borostyánkősavanhidridből kapjuk 0,54 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 40 %.

TLC Rf = 0,58 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

49. Közbenső termék: (RS)-N-{2-Γ(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-metánszulfonil-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

2,03 g (4,24 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,35 ml (4,6 mmol) metánszulfonil-kloridból kapjuk 1,78 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 77 %.

TLC Rf = 0,46 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

50. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]- 5-benzolszulfonil-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

2,03 g (4,24 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,59 ml (4,6 mmol) benzolszulfonil-kloridból kapjuk 2,18 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 85 %.

TLC Rf = 0,54 (metanol 10 %-os metilén-dlkloridos oldatában).

51. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(metoxi-karbonil)-amino-pentanoll}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,43 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,03 ml (0,41 mmol) klór-hangyasav-metil-észterből kapjuk 196 mg csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 89 %.

TLC Rf = 0,54 (metanol 5 %-os metilén-dikloridos oldatában).

52, Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(benzil-oxi-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,43 mmol) 45. Közbenső termékből és 0,06 ml (0,41 mmol) klór-hangyasav-benzil-észterből kapjuk 230 mg csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 93 %.

TLC Rf = 0,44 (metanol 5 %-os metilén-dikloridos oldatában).

53. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(4-piridil-karbonil)-amino-pentanoil·}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

2,03 g (4,24 mmol) 45. Közbenső termékből és 834 mg (4,66 mmol) izonikotinoil-kloridból kapjuk 1,81 g csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 77 %.

TLC R_f = 0,22 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

54. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(3-piridll-karbonil)-amino-pentanoll}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,42 mmol) 45. Közbenső termékből és 83 mg (0,47 mmol) nikotinoil-klorídból kapjuk 130 mg csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 56 %.

TLC Rf = 0,26 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

55. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto]-5-(2-piridil-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,42 mmol) 45. Közbenső termékből és 83 mg (0,47 mmol) pikolinoil-kloridból kapjuk 145 mg csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 62 %.

TLC Rf = 0,21 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

56. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(1,1-Dimetil-etil)-merkapto] -5-(2-plrazinll-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,42 mmol) 45. Közbenső termékből és 85 mg (0,47 mmol) pirazinoil-kloridból kapjuk 145 mg csaknem fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 62 %.

TLC R_f = 0,18 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

57. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(acetil-amino)-pentanoil}-L-leucil-L-feníl-alanln-N-metil-amld

1,23 g (6,49 mmol) 46. közbenső terméket 75 ml jégecetben oldunk, keverés közben 3,26 g (6,26 mmol) 2-nitro-szulfenil-kloridot adunk hozzá, és szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot gyors oszlopkromatográfiával tisztítjuk (eluens: metanol %-os metilén-dikloridos oldata), így 3,74 g sárga szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal:

%.

TLC Rf = 0,34 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában)

58. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(benzoil-amino)-pentanoil)-L-leucil-L-fenil -alanin-N-metil-amid

1,08 g (5,67 mmol) 47. Közbenső termékből kapjuk 3,43 g sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 99 %.

TLC Rf = 0,54 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

59. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-szukcinimido)-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

618 mg (1,1 mmol) 48. Közbenső termékből kapjuk 665 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 92 %.

TLC Rf = 0,25 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

60. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nltro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-metánszulfonil)-amino-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

1,78 g (3,27 mmol) 49. Közbenső termékből kapjuk 1,84 g sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 88 %.

TLC Rf = 0,32 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

61. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil) -merkapto]- 5-benzolszulfonil-amino-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

2,25 g (3,71 mmol) 50. Közbenső termékből kapjuk 1,6 g sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 68 %.

TLC Rf = 0,37 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

62. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(metoxi-karbonil)-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

196 mg (0,31 mmol) 51. Közbenső termékből kapjuk 86 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 38 %.

TLC Rf = 0,25 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatéban).

63. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(benzil-oxi-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

229 mg (0,32 mmol) 52. Közbenső termékből kapjuk 155 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 60 %.

TLC Rf = 0,37 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

64. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(4-piridil-oxi-karbonil)-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

1,92 g (3,29 mmol) 53. Közbenső termékből kapjuk 1,66 g sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 74 %.

TLC Rf = 0,29 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

65. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]- 5 -(3-píridil-oxi-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-feni1-alanin-N-metil-amid

190 mg (0,33 mmol) 54. Közbenső termékből kapjuk 85 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal·: 38 %.

TLC Rf = 0,24 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

66. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(2-piridil-oxi-karbonil)-amino-pentanoil}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

210 mg (0,36 mmol) 55. Közbenső termékből kapjuk 120 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal·: 54 %.

TLC R_f = 0,21 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

67, Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(2-pirazlnil-oxi-karbonil)-amino-pentano11}-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

300 mg (0,51 mmol) 56. Közbenső termékből kapjuk 110 mg sárga szilárd anyag alakjában; kihozatal: 42 %.

TLC Rf = 0,18 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

68. Közbenső termék: (RS)-N-{2-[(2-Nitro-fenil-szulfanil)-merkapto]-5-(amino-pentanoil)-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

TLC Rf = 0,16 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

69. Közbenső termék: (R)-N-(Fenil-metoxi)-karbonil-(S-metil)-L-cisztein g (75 mmol) (S-metil)-L-ciszteint 50 ml 2M vizes nátrium -hidroxid-oldatban oldunk, cseppenként hozzáadunk 11,1 ml (65 mmol) benzil-klór-formiátot, és a keveréket 4 órán át vissza folyató hűtő alatt forraljuk. Ezután az oldatot további 2M vizes nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával pH = 14-re meglúgositjuk, majd négyszer 50 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist tömény sósav-oldattal pH = 3-ra megsavanyítjuk, majd négyszer 70 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 16,8 g halványsárga olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal·: 84 %.

TLC Rf ~ 0,21 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

70. Közbenső termék: (R)-N-(1,1-Dlmetil-etoxl)-karbonil-(S~

-metil)-L-cisztein g (37 mmol) (S-metil)-L-ciszteint és 7,8 g (92,5 mmol) nátrium-hidrogén-karbonátot 150 ml víz és 100 ml dioxán elegyében oldunk, és 0°C-on, keverés közben hozzáadunk 8,88 g (40,7 mmol) diterc-butil-dikarbonátot. A keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, egy éjszakán át keverjük, majd 100 ml vízzel hígítjuk, 1M sósav-oldattal pH = 3-ra megsavanyítjuk, majd háromszor 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 6,64 g színtelen olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 76 %. TLC Rf = 0,55 (metanol és víz elegyében).

71. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-(S~

-metll)-propll-qlicln g (42,7 mmol) (S)-norvalinból kapjuk 6,3 g színtelen olaj alakjában; kihozatal: 68 %.

TLC Rf = 0,50 (metanol és víz elegyében).

72. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-(0-metil)-szerin g (48,7 mmol) (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-szerint

250 ml vízmentes dimetil-formamidban oldunk, és 0°C-on, keverés közben több részletben hozzáadunk 4,3 g (0,107 mmol) 60 %-os nátrium-hidrid-diszperziót, majd cseppenként hozzáadjuk 6,1 ml (0,1 mmol) jód-meténnak 10 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített oldatát. A keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, egy éjszakán át keverjük, majd a pH-ját 1M sósav-oldattal végzett hígítással 3-ra állítjuk be, és az oldatot vákuumban 200 ml-re bepároljuk. A keveréket 200 ml vízzel hígítjuk, és háromszor 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 100 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium -szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 7,48 g sárga olaj alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal·:

%.

TLC Rf = 0,39 (metanol és metilén-diklorid elegyében).

73. Közbenső termék: (RS)-N-Benzoil-[b-(4-piridil)]-alanin-metil-észter

a) 2-(4-piridil)-1-(N-benzoil)-amino-etilén-l-karbonsavhidroklorid g (0,195 mól) nátrium-acetátot és 150 g (0,84 mól) hippursavat 360 ml ecetsavanhidridben szuszpendálunk, és a jéggel hűtött szuszpenzióhoz keverés közben hozzáadunk 85 g (0,79 mól)

4-piridil-karboxaldehidet; exoterm reakció megy végbe, a belső hőmérséklet 30-40°C-ra emelkedik. A keveréket szobahőmérsékletre hűtjük, majd 1500 ml vízbe öntjük. A kapott szilárd anyagot leszűrjük, kétszer 500 ml vízzel mossuk, így 74 g barna szilárd anyag alakjában, 37 %-os kihozatallal megkapjuk az azlakton közbenső terméket.

g (0,28 mól) azlaktont 210 ml tömény sósav-oldatban oldunk — gyors csapadékképződés megy végbe, a csapadékot leszűrjük, kétszer 500 ml acetonnal mossuk, és vákuumban szárítjuk, így 71 g halványzöld szilárd anyag alakjában, 78 %-os kihozatallal megkapjuk a terméket.

b) (RS)-N-Benzoil-[b-(4-piridil)]-alanin-hidroklorid

A kapott olefin-hidrokloridból 70 g-ot (0,23 mól) 700 ml vízben, 7 g 5 %-os, aktívszénen megkötött palládium jelenlétében szobahőmérsékleten, atmoszferikus nyomáson egy éjszakán ét hidrogénezünk. A katalizátort celiten végzett szűréssel eltávolítjuk, és az oldatot körülbelül 100 ml-re bepároljuk. A maradékhoz 1000 ml acetont adunk, a kivált csapadékot leszűrjük, és vákuumban szárítjuk, így 53 g piszkosfehér szilárd anyag alakjában, %-os kihozatallal megkapjuk a terméket.

c) (RS)-N-Benzoil-[b-(4-piridil)]-alanin-metil-észter

A b) pont szerint előállított savból 53 g-ot (0,17 mól)

200 ml metanolban oldunk, és jeges hűtés közben 15 ml (0,21 mól) tionil-kloridot adunk hozzá. A keveréket 30 percig hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így egy piszkosfehér félszilárd anyagot kapunk. A maradékot 500 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldatban szuszpendáljuk, és a terméket négyszer 400 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 1000 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 46 g piszkosfehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 94 %.

^c16^h16ⁿ2°3 [284,3]; [MH]⁺ 285],

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

74. Közbenső termék: (RS)-N-Benzoil-[b-(3-piridil)]-alanin-metil-észter

Plridin-3-karboxaldehidből három lépésben állítjuk elő; fehér szilárd anyag.

^C16^H16^N2°3 [284,3]; [MH]⁺285].

75. Közbenső termék: (RS)-N-Benzoil-2-metoxi-alanin-metil-észter

2-Metoxi-benzaldehidből három lépésben állítjuk elő; fehér szilárd anyag.

^C17^H19^N2°4 [301,3] ; [MH] ⁺ 302].

76. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-[b-(4-piridil)]-alanln g (0,104 mmol) 73. közbenső terméket 50 ml forró acetonban oldva hozzáadunk 500 ml 0,03M, pH = 7,2-es kálium-dihidrogén

-foszfáthoz. Ezután erőteljes keverés közben 1 ml alkanázt adunk hozzá, és az oldat pH-ját 1M nátrium-hidroxid—oldat adgolásával (körülbelül 20 ml) 30 percen át 7,2-n tartjuk. A feloldatlanul maradt észtert leszűrjük, a szűrletet négyszer 250 ml etil-acetáttal mossuk. Az oldószerr vákuumban elpárologtatjuk, a maradékot 100 ml 6M sósav-oldatban oldjuk, majd visszafolyató hűtő alatt 5 órán át forraljuk. Miután szobahőmérsékletre lehűlt, a kicsapódott benzoesavat szűréssel eltávolítjuk, és a szűrletet kétszer 100 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes részt vákuumban bepárolva 9,48 g-ot kapunk az optikailag tiszta aminosav dihidroklorid-sójából; kihozatal: 81 %.

A dihidroklorid-sót 150 ml vízben oldjuk, és amberlit (IRA-67) ioncserélő gyanétval pH = 8-ig kezeljük. Ezután a gyantát szűréssel eltávolítjuk, és az oldatot vákuumban bepároljuk, így 6,7 g fehér szilárd anyag alakjában, 100 %-os kihozatallal megkapjuk a szabad aminosavat.

Az aminosavat 100 ml terc-butanol és 50 ml víz elegyében szuszpendáljuk, és keverés közben 13 g (60 mmol) diterc-butil-dikarbonátot adunk hozzá, miközben pH-ját 55 ml IM nátrium-hidroxid—oldat hozzáadásával 40 percig 8,5-ön tartjuk. Ezután 50 ml vizet adunk hozzá, a keveréket kétszer 100 ml heptánnal mossuk, majd szilárd kálium-hidrogén-szulfát hozzáadásával pH = 3,5-re megsavanyitjuk. Ezután a keveréket szárazra bepároljuk, és a maradékot a termék kinyerésére háromszor 150 ml metanollal eldörzsöljük. Az oldószert vákuumban elpárologtatva fehér szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; ezt etanol és víz elegyébol étkristályosítjuk, így 3,27 g optikailag tiszta anyagot kapunk; kihozatal: 61 %.

ct_D = +24,3° (c = 1, trifluor-ecetsav) .

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

77. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-[b-(3-piridil)]-alanin

A 74. közbenső termékből kapjuk fehér szilárd anyag alakjában .

a_D = +16,1° (c = 1, trifluor-ecetsav).

78. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-2-metoxi-fenil-alanin

A 75. közbenső termékből kapjuk 11,1 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 97 %. a_D = +16,1° (c = 1, trifluor-ecetsav).

79. Közbenső termék: (S)-N-Acetil-[b-(2-piridil)]-alanin

65,8 g (1,22 mól) nátrium-metoxidot 300 ml metanolban oldunk, és több részletben hozzáadunk 132,3 g (0,61 mól) dietil-acetamido-malonátot, miközben a hőmérsékletet körülbelül 45°C-on tartjuk. A reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt 15 percig forraljuk, majd 50°C-ra hűtjük, azután lassan hozzáadunk 100 g (0,61 mól) 2-klór-metil-piridin-hidroklorid-szuszpenziót. Az így kapott rózsaszín szuszpenziót visszafolyató hűtő alatt 6 órán át forraljuk, azután 500 ml vizet, majd 122 ml (1,22 mól) 10 M nátrium-hidroxid—oldatot adunk hozzá, és a keverék pH-ját 11 körüli értéken tartjuk, miközben egy éjszakén át 0°C-on melegítjük. Ezután szobahőmérsékletre hűtjük, és a metanolt vákuumban eltávolítjuk. A vizes maradékot kétszer 500 ml etil-acetáttal mossuk, ·· * 9 9 ·· 9 • 9 · »···« • · · ·· 9 a 9 · 9

9 9 9 9 9 9 9« 9 9 majd pH = 5-re megsavanyítjuk., további kétszer 500 ml etil-acetáttal mossuk, és vákuumban bepároljuk. A félszilárd maradékot 500 ml forró etanollal eldörzsöljük, és a nátrium-kloridot szűréssel eltávolítjuk. A szűrletet vákuumban bepéroljuk, a maradékot metanol és etil-acetát elegyébol átkristályosítjuk, így 70 g sárga szilárd anyag alakjában, 66 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,5 (butanol, ecetsav, piridin és víz 15:3:10:12 arányú elegyében).

80. Közbenső termék: (RS)-N-Acetil-[b-(4-tiazolil)]-alanin

4-(Klór-metil)-tiazolból kapjuk 6,7 g fehér hab alakjában;

kihozatal: 73 %.

TLC Rf = 0,37 (1 % ecetsavat és 20 % hexánt tartalmazó etil-acetátban).

81. Közbenső termék: (S)-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-[b-(2-piridil)]-alanin g (0,31 mól) 79. Közbenső terméket 650 ml 10 mM vizes kálium-dihidrogén-ortofoszfát—oldatban szuszpendálunk, és az így kapott pH = 4-es keveréket 10 ml 10M nátrium-hidroxid-oldattal pH = 8-ra meglúgosítva feloldjuk. Ezután 1,3 g Acylase 30,000-et adunk hozzá, és a keveréket egy éjszakán át 40°C-on inkubáljuk. A szuszpenziót szobahőmérsékletre hűtjük, a szilárd anyagot szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet 2M sósav-oldattal pH = 1-re megsavanyítjuk, és kétszer 300 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes ·» »

- 65 » · • * *··· részt vákuumban bepároljuk, a kapott félszilárd maradékot 300 ml forró etanollal eldörzsöljük, és a szilárd anyagot szűréssel eltávolítjuk. A lehűtött oldathoz pH = 10 eléréséig 5M nátrium-hidroxid—oldatot, azután 28,6 g (0,131 mól) diterc-butil-dikarbonátot adunk, és az oldatot 5M nátrium-hidroxid-oldattal (44 ml) 6 órán át pH = 10-en tartjuk. Ezután a metanolt vákuumban eltávolítjuk, a vizes részt kétszer 500 ml etil-acetáttal mossuk, majd 1M kálium-hidrogén-szulfát—oldattal pH = 3-ra megsavanyítjuk. A keveréket négyszer 500 ml etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat 500 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A nyers terméket etil-acetátból átkristályosítva 11,6 g fehér szilárd anyag alakjában, 23 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

a_D = -16,0° (c = 1, metanol).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

82. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-[b-(4-tiazolil)]-alanin

A 80. Közbenső termékből kapjuk 11 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 94 %.

Nagynyomású folyadékkromatográfia: Chirex (D)-penicill-amin;

2mM réz-szulfát; 0,7 ml/perc; retenciós idő: 3,25 perc; 99 % ee.

83. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-[b-(2-piridin)]-N-metil-amid • · 9 ···*

5,0 g (18,8 mmol) 81. Közbenső terméket és 2,27 g (19,7 mmol)

N-hidroxi-szukcinimidet 200 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, és jeges hűtés közben 4,07 g (19,7 mmol) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 6,8 ml (79 mmol) 40 tömeg/térfogat-%os vizes metil-amin—oldatot adunk hozzá, és további 2 órán át keverjük. A kicsapódott szilárd anyagot leszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot 100 ml metilén-dikloridban oldjuk. Az oldatot kétszer 100 ml vízzel, kétszer 100 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, majd 100 ml nátrium-klorid— —oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így megkapjuk a nyers terméket. Ezt oszlopkromatográfiával, eluensként metanol és metilén-diklorid 2-5 %-os elegyeit alkalmazva tisztítjuk, így 2,7 g vörös hab alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet; kihozatal: 51 %.

TLC Rf = 0,38 (1 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban). Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

84. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-L-[b-(4-tiazolil)]-alanin-N-metil-amid

A 82. Közbenső termékből kapjuk 3,0 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal; 64 %.

TLC Rf = 0,46 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

85. Közbenső termék: (R)-N-(l,l-Dimetil-etoxi)-karbonil-penicill-amin-N-metil-amid g (56,1 mmol) (R)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-penicill-amint, 7,6 g (56,1 mmol) N-hidroxi-benzotriazolt, 18,9 g (280 mmol) metil-amin-hidrokloridot, 34 ml (308 mmol) N-metil-morfolint, 685 mg (5,6 mmol) 4-(dimetil-amino)-piridint és

11,8 mg (62 mmol) 1-(3-dmietil-amino-propil)- 3-etil-karbodiimid-hidrokloridot 300 ml vízmentes dimetil-formamidban oldva szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverünk, majd a keveréket 750 ml 10 tömeg/térfogat-%-os citromsav-oldatba öntjük, és háromszor 500 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat kétszer 500 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, majd 500 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 12,3 g-ot kapunk a cím szerinti vegyületbol; kihozatal: 83 %.

TLC R_f = 0,47 (etil-acetát és hexán 50 %-os elegyében).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

86. Közbenső termék: (1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-5-metil-L-glutámsav-N-metil-amid (1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-5-metil-L-glutámsavból kapj uk 5,4 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 94 %.

TLC Rf = 0,21 (2 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

87. Közbenső termék: (S)-N^-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-N_a~(benzil-oxi)-karbonil-ornitin-N-metil-amid

11,5 g (31,4 mmol) (S)-N^-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-N_a-(benzil-oxi)-karbonil-ornitinből kapjuk 11,0 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 94 %.

TLC R_f = 0,65 (3 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

88, Közbenső termék: (S)-N-(l,l-Dimetil-etoxi)-karbonil-2-metoxi-fenil-alanin-N-metil-amid

500 mg (1,69 mmol) 78. Közbenső termékből kapjuk 380 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 73 %.

TLC Rf = 0,55 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

89. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-b-(3-piridil)-alanin-N-metil-amid

2,0 g (7,5 mmol) 77. Közbenső termékből kapjuk 1,0 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 48 %.

TLC Rf = 0,42 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

90. Közbenső termék: (S)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-b-(4-piridil)-alanin-N-metil-amid

2,0 g (7,5 mmol) 76. Közbenső termékből kapjuk 1,7 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 81 %.

TLC Rf = 0,38 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban)

91. Közbenső termék: (R)-N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-(S-metil)-penicill-amin-N-metil-amid

500 mg (1,51 mmol) 85. Közbenső terméket 5 ml 2M nátrium69

-hidroxid—oldat és 15 ml metanol elegyében oldunk, és keverés közben cseppenként hozzáadjuk 0,59 ml jód-metán 5 ml metanollal készített oldatát. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük, azután a metanolt vákuumban eltávolítjuk, a maradékot 50 ml vízzel hígítjuk, és háromszor 50 ml dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 540 mg színtelen olaj alakjában, 99 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC = 0,47 (etil-acetát és hexán 50 %-os elegyében).

92. Közbenső termék: (R)-N-(1,l-Dimetil-etoxi)-karbonil-2,2-dlmetll-2-metánszulfonil-alanin-N-metil-amid

153 mg (0,55 mmol) 91. közbenső terméket 5 ml metanolban oldunk, és 0°C-on, keverés közben hozzáadunk 1,02 g Oxozont 5 ml vízben szuszpendálva. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, majd 4 órán át keverjük. Ezután 50 ml vízzel hígítjuk, és háromszor 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 50 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 101 mg színtelen olaj alakjában, 59 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,35 (etil-acetát és hexán 50 %-os elegyében).

93. Közbenső termék: (R)-N-(1,l-Dimetil-etoxi)-karbonil-2,2-dimetil-2-metánszulfinil-alanin-N-metil-amid

800 mg (2,89 mmol) 91. Közbenső terméket 25 ml metilén-dikloridban oldunk, és 0°C-on, keverés közben hozzáadunk 670 mg 3-klór-perbenzoesavat 25 ml metilén-dikloridban oldunkva. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, majd egy éjszakán át keverjük. Ezután kétszer 50 ml 10 tömeg/térfogat%-os nátrium-hidrogén-szulfit—oldattal, kétszer 50 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, majd 50 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így színtelen olaj alakjában megkapjuk a nyers terméket. Ezt gyors oszlopkromatográfiával, eluensként 10 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid alkalmazvásával tisztítjuk, így 470 mg színtelen olaj alakjában, 55 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,05 (etil-acetát és hexán 50 %-os elegyében).

94. Közbenső termék: (R)-2,2-Dlmetil-2-metánszulflnll-alanin-N-metil-amid-hidroklorid

470 mg (1,61 mmol) 93. Közbenső terméket 25 ml dioxán és ml 2M sósav-oldat elegyében oldunk, és egy éjszakén ét szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldatot vákuumban szárazra bepároljuk, majd egy éjszakán ét fagyasztószekrényben tároljuk, így 370 mg színtelen gumi alakjában, 100 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,06 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

95. Közbenső termék: (R)-2,2-Dimetil-2-metánszulfonil-alanin-N-metil-amld-hidroklorld

300 mg (0,97 mmol) 92. Közbenső termékből kapjuk 210 mg színtelen hab alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,10 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

96. Közbenső termék: (R)-penicill-amin-N-metil-amid-hidroklorld

300 mg (1,14 mmol) 85. Közbenső termékből kapjuk 230 mg színtelen hab alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,13 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

97. Közbenső termék: (S)-b-(3-Plridll)-alanln-N-metll-amid-dihidroklorid

1,2 g (4,29 mmol) 89. Közbenső termékből kapjuk 1,1 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,05 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban) .

98. Közbenső termék: (S)-b-(4-Plridil)-alanln-N-metll-amld-dihidroklorld

1,6 g (5,73 mmol) 90. Közbenső termékből kapjuk 1,45 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,08 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

99. Közbenső termék: (S)~b~(2-Piridil)-alanln-N-metll-amld-dlhldroklorld

1,4 g (5,01 mmol) 83. Közbenső termékből kapjuk 1,27 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,13 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

100. Közbenső termék: (S)-b-(4-Tiazolil)-alanin-N-metil-amid-hidroklorid

1,0 g (3,5 mmol) 84. Közbenső termékből kapjuk 730 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 94 %.

TLC Rf = 0,21 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

101. Közbenső termék: (R)-(S-Metil)-penicill-amin-N-metilamid-trifluor-acetát ml Trifluor-ecetsavat tartalmazó 4 ml metilén-dikloridban

200 mg (0,72 mmol) 91. közbenső terméket oldunk, és az oldatot egy éjszakán ét szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a trifluor-ecetsavból esetleg jelenlévő felesleget háromszor 20 ml hepténnal végzett azeotrop desztil-

lációval eltávolítjuk, így 196 mg színtelen hab alakjában, 94 %os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,32 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

102. Közbenső termék: (S)-2-(Metoxi-fenil)-alanin-N-metilamid-trifluor-acetát

200 mg (0,65 mmol) 88. Közbenső termékből kapjuk 209 mg halványsárga hab alakjában; kihozatal: 100 %.

TLC Rf = 0,25 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó rtietilén-dikloridban).

103. Közbenső termék: (S)-5-Metil-glutámsav-N-metll-amid-trlfluor-acetát

707 mg (2,58 mmol) 86. Közbenső termékből kapjuk 728 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 98 %.

TLC Rf = 0,37 (1 % trietil-amint és 10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

104. Közbenső termék: (S)-N_d~ (1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-ornitin-N-metil-amld g (29 mmol) 87. Közbenső terméket etanolban, 1 g 10 %-os, aktívszénen megkötött palládium jelenlétében, szobahőmérsékleten, atmoszferikus nyomáson egy éjszakán át hidrogénezünk. A katalizá74 tort hyflo betéten végzett szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban bepároljuk, így 2,6 g színtelen olaj alakjában, 36 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,37 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

105. Közbenső termék: N-(Fenil-metoxi)-karbonil-(S-metil)-L-ciszteinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

8,9 g (50 mmol) L-Fenil-alanin-N-metil-amidot, 13,8 g (50 mmol) 69. közbenső terméket és 8,1 g (60 mmol) N-hidroxi-benzotriazolt 100 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, keverés közben hozzáadunk 10,5 g (55 mmol) EDC-t, és egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a keveréket 300 ml 1M sósav-oldattal kezeljük, majd négyszer 200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat kétszer 200 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 200 ml vízzel, majd 200 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 16,5 g fehér szilárd anyag alakjában, %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,47 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

106. Közbenső termék: N-(l,l-Dimetil-etoxi)-karbonil-(S)-propil-glicinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid g (23 mmol) 71. Közbenső termékből és 4,1 g (23 mmol) L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 7,72 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 89 %.

TLC Rf = 0,48 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

- 75 107. Közbenső termék: N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-L-leucil-L-tere-leucln-N-metil-amid

13,07 g (56 mmol) N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-L-leucinból és 8,11 g (56 mmol) L-terc-leucin-N-metil-amidból kapjuk 15,77 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 79 %.

TLC Rf = 0,25 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

108. Közbenső termék: N-(1,1-Dlmetll-etoxi)-karbonil-(S)-(S-metil)-clsztelnll-L-tere-leucln-N-metil-amid

6,64 g (28 mmol) 70. Közbenső termékből és 4,07 g (28 mmol) L-terc-leucin-N-metil-amidból kapjuk 4,26 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 42 %.

TLC Rf = 0,40 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

109. Közbenső termék: N-(1,1-Dimetil-etoxi)-karbonil-(S)-(0-metil)-szerinil-L-tere-leucin-N-metil-amid

7,48 g (34 mmol) 72. Közbenső termékből és 4,92 g (34 mmol) L-terc-leucin-N-metil-amidból kapjuk 4,26 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 42 %.

TLC Rf = 0,40 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

110. Közbenső termék: N-(Fenil-metoxi)-karbonil-L-vallnll-N^-(1,1-dimetil-etoxi)-karbonil-L-ornitin-N-metil-amid

2,6 g (10,6 mmol) 104. Közbenső termékből és 2,82 g (11,2

- 76 mmol) N-(Fenil-metoxi)-karbonil-L-valinból kapjuk 3,0 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 61 %.

TLC Rf = 0,32 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

111. Közbenső termék: (S-Metil)-L-ciszteinil-L-fenil-alanln-N-metil-amid

2,0 g (4,65 mmol) 105. közbenső terméket 10 ml metilén-dikloridban oldva 18,6 ml 25 %-os ecetsavas hidrogén-bormid—oldattal kezelünk, és szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük. Ezután 10 ml vizet adunk hozzá, és a keveréket háromszor 15 ml metllén-dikloriddal átmossuk. A vizes fázist 5M nátrium-hidroxid—oldattal pH = 14-re meglúgosítjuk, majd négyszer 30 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 30 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk, így 1,22 g fehér szilárd anyag alakjában, %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,31 (metanol 10 %-os metilén-dikloridos oldatában).

112. Közbenső termék: L-Vanilil-N^-(1,1-dlmetil-etoxi)-karbonil-L-ornitln-N-metil-amid

3,0 g (6,5 mmol) 110. Közbenső terméket 100 ml etanolban, 300 mg 10 %-os, aktívszénen megkötött palládium jelenlétében szobahőmérsékleten, atmoszferikus nyomáson egy éjszakán át hidrogénezünk. A katalizátort hyflo betéten végzett szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban bepároljuk, így 2,2 g fehér szilárd anyag alakjában, 99 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,26 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

113. Közbenső termék: (S)-Propil-glicinil-L-fenil-alanln-N-metil-amid

5,36 g (14,2 mmol) 106. Közbenső terméket 250 ml dioxán és 250 ml 2M sósav-oldat elegyében oldunk, és az oldatot egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd szárazra bepároljuk. A maradékként kapott fehér szilárd anyagot 200 ml vízben oldjuk, háromszor 100 ml metilén-dikloriddal extraháljuk, azután 2M nátrium-hidroxid—oldattal pH = 10-re meglúgosítjuk, és négyszer

100 ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 100 ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, és vákuumban bepároljuk, így 1,45 g fehér szilárd anyag alakjában, 37 %-os kihozatallal megkapjuk a cim szerinti vegyületet.

TLC Rf = 0,29 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

114. Közbenső termék: (S)-(S-metil)-ciszteinil-L-terc-leucin-N-metil-amid

A 108. Közbenső termékből kapjuk 3,5 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 97 %.

TLC Rf = 0,45 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

115. Közbenső termék: (S)-(Q-metil)-szerinil-L-terc-leucin-N-metil-amid

A 109. Közbenső termékből kapjuk 2,7 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 98 %.

TLC Rf = 0,40 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

116. Közbenső termék: L-Leucll-L-terc-leucin-N-metil-amid

A 107. Közbenső termékből kapjuk 11,2 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 998 %.

TLC Rf = 0,57 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

117. Közbenső termék: (R)-2-Bróm-5-ftálimido-pentánsav g (0,208 mól) D-orintin-hidrokloridot 350 ml vízben oldunk, és az oldatot 16,6 g (0,104 mól) réz(II)-szulfáttal kezeljük. Ezután pH = 3-ig 5M kálium-hidroxid—oldatot (körülbelül ml), majd 45,5 g (0,208 mól) N-karboetoxi-ftálimidet adunk hozzá, és a pH-t 5M kálium-hidroxid-oldattal (körülbelül 55 ml) 9 és 10 közötti értéken tartjuk. Két óra múlva pH = 0,4-ig 48 %-os hidrogén-bromid—oldatot (körülbelül 77 ml) adunk hozzá, és a kivált csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A szűrletet 5°C alatti hőmérsékletre hűtjük, további 152 ml hidrogén-bromid—oldatot és 59 g (0,5 mól) kálium-bromidot adunk hozzá, majd 45 perc alatt cseppenként hozzáadunk 28,6 g nétrium-nitritet 175 ml vízben oldva, miközben a hőmérsékletet továbbra is 5°C alatt tartjuk. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután a kivált csapadékot leszűrjük, 400 ml etil-acetátban oldjuk, kétszer 200 ml vízzel és 200 ml telített nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepá• t

- 79 roljuk. ily módon 40,6 g krémszínű szilárd anyag alakjában, 47 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC R_f = 0,80 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

118. Közbenső termék: (S)-2-Bróm-5-ftállmido-pentánsav g (0,118 mól) L-orintin-hidrokloridból kajpuk 22 g krémszínű szilárd anyag alakjában; kihozatal: 57 %.

TLC Rf = 0,80 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

119. Közbenső termék: (S)-Acetil-merkapto-5-ftálimido-pentánsav

A fenti módon állítjuk elő 39,9 g (0,11 mól) 117. közbenső termékből. 35,6 g halvány narancsszínű olajat kapunk; kihozatal:

%.

TLC Rf = 0,24 (heptán és etil-acetát 50 %-os elegyében).

120. Közbenső termék: (R)-Acetil-merkapto-5-ftálimido-pentánsav

A fenti módon állítjuk elő 20 g (56 mmol) 118. közbenső termékből. 17,7 g halvány narancsszínű olajat kapunk; kihozatal:

%.

TLC Rf = 0,24 (heptán és etil-acetát 50 %-os elegyében).

121. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-5~ftálimido-pentanoil-L-leucin-1,1-dimetil-etil-észter • ·

- 80 3,64 g (19 mmol) L-Leucin-1,1-dimetil-etil-észtert, 2,62 g (19,4 mmol) N-hidroxi-benzotriazolt, 2,51 ml (18 mmol) trietil-amint és 5,94 g (18,5 mmol) 15. közbenső terméket 200 ml vízmen tes tetrahidrofuránban oldunk. A reakcióelegyet egy éjszakán át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 100 ml víz és 100 ml etil-acetát között megosztjuk. A vizes részt kétszer 50 ml etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített szerves extraktumokat kétszer 100 ml vízzel, majd 100 ml nátrium

-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékként kapott színtelen olajat oszlopkromatográf iával , eluensként hexán és etil-acetát 2:1 arányú elegyét alkalmazva tisztítjuk, így 6,6 g fehér szilárd anyag alakjában, 77 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyüle tét, amely a diasztereomerek 1:1 arányú keveréke.

TLC R_f = 0,42 (hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyében).

122. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkaoto-5-ftálimido-pentanoil-L-leucin

3,0 g (6,1 mmol) 121 Közbenső terméket 40 ml metilén-dikloridban oldunk, keverés közben 9,0 ml (115 mmol) trifluor-ecetsavat adunk hozzá, és reakcióelegyet egy éjszakán át keverjük.

Ezután vákuumban bepároljuk, a trifluor-ecetsav feleslegét heptánnal végzett azeotrop desztillációval eltávolítjuk, így 2,48 g színtelen hab alakjában, 94 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet, amely a diasztereomerek 1:1 arányú keveréke TLC Rf = 0,42 (etil-acetát és hexán 3:2 arányú elegyében).

• ·· ·

123. Közbenső termék: (RS)-2-Acetil-merkapto-4-szukcinimido-butánsav

A 36. közbenső termékre leírt módon állítjuk elő.

TLC R_f = 0,42 (ecetsav, etil-acetát és hexán 0,1:1:1 arányú elegyében) .

124. Közbenső termék: (S-metil)-L-ciszteinil-L-triptofán-N-metil-amid

A 111. közbenső termékre leírt módon állítjuk elő.

TLC Rf = 0,45 (etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyében).

125. Közbenső termék: (RS)-2-[(1,1-dimetil-etil)-merkapto]-3-ftálimido-propánsav

A 43. közbenső termékre leírt módon állítjuk elő.

TLC Rf = 0,48 (ecetsav, etil-acetát és hexán 0,1:1:1 arányú elegyében) .

Az itt következő példákban a találmány szerinti késztermékek előállítását mutatjuk be.

1. Példa: (RS)-N-[2,3-bisz(acetll-merkapto)-propanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

209 mg 14. Közbenső terméket, 274 mg L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidot és 153 mg N-hidroxi-benzotriazolt 10 ml vízmen ·» w ·<- *· * * > «· · ·» · ·

4 · · · ···· »··> ·«· · ⁹ tes tetrahidrofuránban oldunk, 0°C-on 198 mg EDC-t adunk hozzá, és ezen a hőmérsékleten addig keverjük, míg az 5% metanolt tartalmazó metilén-dikloridban végzett TLC azt nem mutatja, hogy az összes kiindulási anyag elfogyott (72 óra). Ezután az oldószert elpárologtatjuk, és a maradékot 35 ml 1M sósav-oldat és 50 ml etil-acetát között megosztjuk. A szerves réteget elválasztjuk, kétszer 200 ml nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, majd kétszer ml nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott a nyers terméket oszlopkromatográfiával, eluensként metanol 2-5 %-os metilén-dikloridos oldatait alkalmazva tisztítjuk, így 264 mg színtelen szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC R_f = 0,25 (2 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

2. Példa: (RS)-N-[2,4-bisz(acetil-merkapto)-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

870 mg (3,7 mmol) 15. Közbenső termékből és 1,07 g (3,7 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 1,4 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 74 %.

^C24^H35^N3°5^S2 [509,7]; [MH⁺=510].

3. Példa: (RS)-N-[2,5-bisz(acetil-merkapto)-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid • * · ····

906 mg (3,6 mmol) 16. Közbenső termékből és 1,06 g (3,6 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 1,5 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 74 %.

^c25^H37^N3°5^s2 [523,7]; [MH⁺=524].

4. Példa: (RS)-N-[2,6-bisz(acetil-merkapto)-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

895 mg (3,4 mmol) 17. Közbenső termékből és 991 mg (3,4 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 1,4 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 74 %.

^C26^H39^N3°5^S2 [537,75]; [MH⁺=538] .

5. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-3-metoxi-karbonil-propanoil]-L-leucil-L-feni!-alanin-N-metil-amid

0,26 g 4. Közbenső termékből kapjuk 0,33 g színtelen szilárd anyag alakjában.

^C23^H33^N3°6^S [479,6]; [MH⁺=480].

6. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-4-metoxl-karbonil-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,40 g 5. Közbenső termékből kapjuk 0,67 g színtelen szilárd anyag alakjában.

^C24^H35^N3°6^S [493,6]; [MH⁺=494].

7. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-metoxi-karbonil84

-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,9 g 6. Közbenső termékből kapjuk 1,1 g színtelen szilárd anyag alakjában. ^c25^H37^N3°6^S [507,6]; [MH⁺=508].

8. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-4-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,95 g 7. Közbenső termékből kapjuk 1,0 g színtelen szilárd anyag alakjában.

^C26^H39^N3°6^S [521,6]; [MH⁺=522].

9. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)- 5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid

730 mg 36. Közbenső termékből és 700 mg L-leucil-L-triptof án-N-metil-amidból kapjuk 1,0 g halványsárga hab alakjában;

kihozatal: 74 %.

^C33^H39^N5°6^S [633,7]; [MH⁺=634].

10. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-6-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-leucil-triptofán-N-metil-amid

375 mg 7. Közbenső termékből és 500 mg L-leucil-L-triptofán-N-metil-amidból kapjuk 440 mg halványsárga hab alakjában;

kihozatal: 52 %.

^C28^H40^N4°6^S [560,7]; [MH⁺=561].

11. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)- 5-ftálimido-pentanoll]-L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

232 mg 36. Közbenső termékből és 200 mg L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 230 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 55 %.

^c30^H36^N4°6^S [580,7]; [MH⁺=581].

12. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-6-metoxl-karbonil-hexanoil]-L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

179 mg 7. Közbenső termékből és 200 mg L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 200 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 562 %.

^C25^H37^N3°6^S [507,6]; [MH⁺=508].

13. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-2-(3-ftálimldo-fenil)-acetil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

690 mg 37. Közbenső termékből és 200 mg L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 927 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 88 %.

^C34^H36^N4°6^S [628,8] ; [MH⁺ = 629].

14. Példa: (RS)-N-{2-(Acetil-merkapto)-2-[3-cisz-(ftálimldo-ciklopentil)]-acetil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid • · · · ·

140 mg (0,4 mmol) 38. Közbenső termékből és 117 mg (0,4 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidből kapjuk 197 mg őzbarna hab alakjában a négy diasztereomer 1:1:1:1 arányú keverékeként; kihozatal: 79 %.

^C33^H40^N4°6^S [620,8]; [MH⁺=621].

15. Példa: N-{2-(Acetil-merkapto)-2-[3-transz-(ftálimido-ciklopentil)]-acetil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

235 mg (0,7 mmol) 39. Közbenső termékből és 197 mg (0,7 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 358 mg barna hab alakjában a négy diasztereomer 1:1:1:1 arányú keverékeként;

kihozatal: 79 %.

^C33^H40^N4°6^S [620,8]; [MH⁺=621].

16. Példa: (S)-N-[2-(Acetil-merkapto)- 5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-(S)-terc-leucin-N-metil-amid

13,8 g (43 mmol) 119. és 116 mg (44 mmol) 116. közbenső termékből kapjuk 11,6 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 48 %.

^C28^H40^N4°6^S [660,7]; [MH⁺=561].

17. Példa: (S)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid g (31 mmol) 119. Közbenső termékből és 9,0 g (31 mmol) * · · · · · ·

L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 10,5 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 57 %.

^C31^H38^N4°6^S [594,7]; [MH⁺=595].

18. Példa: (R)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil -L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

1,0 g (3,1 mmol) 120. Közbenső termékből és 900 mg (3,1 mmol) L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból kapjuk 885 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 48 %.

^C31^H38^N4°6^S [594,7]; [MH⁺=595].

19. Példa: (S)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftállmldo]-pentanoil -L-leucil- triptof án-N-me tll- amid

411 mg (1,28 mmol) 119. Közbenső termékből és 423 mg (1,28 mmol) L-leucil-L-triptofán-N-metil-amidból kapjuk 330 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 41 %.

C₃₃H₃₉N₅O₆S [633,7]; [MH⁺=634].

20. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil- (S-metil)-L-ciszteinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

326 mg (1 mmol) 36. és 350 mg (1 mmol) 114. közbenső termékből kapjuk 380 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 64 %. ^C29^H34^N4°6^S2 [698,7]; [MH⁺=599],

21. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-penta·· · · · ·« · « · · · · «···« ···· ··· ·· · · noil-(S)-propil-glicinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

145 mg (0,52 mmol) 113. és 168 mg (0,52 mmol) 36. közbenső termékből kapjuk 160 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal:

%.

^C30^H36^N4°6^S 1580,7]; [MH⁺=581].

22. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-valinil-N_d-(1,1-dimetil-etoxi)-karbonil-L-ornitln-N-metll-amld

508 mg (1,47 mmol) 112. és 491 mg (1,53 mmol) 36. közbenső termékből kapjuk 687 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 72 %.

^C31^H45^N5°8^S [647,8] ; [MH⁺=648] .

23. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil)-L-valinil-L-ornitin-N-metil-amid-trifluor-acetát ml Ecetsavat tartalmazó 20 ml metilén-dikloridban 585 mg (0,90 mmol) 22. közbenső terméket oldunk, és az oldatot egy éjszakán át keverjük. Ezután az oldatot vákuumban bepároljuk, a trifluor-ecetsav feleslegét háromszor 20 ml heptánnal végzett azeotrop desztillációval eltávolítjuk, így 596 mg piszkosfehér szilárd anyag alakjában, 99 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

^C26^H38^N5°6^S2 [548,7]; [MH⁺=549].

• · · ·· ·· · « ······ ···· ··· ·· ·

24. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil) -L-valinil-Nd- (acetil-L-ornitin) -N-metil-araid

205 mg (0,31 mmol) 23. példa szerinti vegyületet és 0,134 ml (0,31 mmol) N-metil-morfolint 20 ml vízmentes metilén-dikloridban oldunk, és 0°C-on, keverés közben 0,024 ml (0,34 mmol) acetil-kloridot adunk hozzá. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, 1 órán át keverjük, majd 20 ml metilén-dikloriddal hígítjuk, és 20 ml 2M sósav-oldattal, 20 ml 8 %-os nátrium-hidrogén-karbonát—oldattal, 20 ml vízzel, majd 20 ml nátrium-klorid—oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban színtelen habbá bepároljuk. Ezt oszlopkromatográfiával, eluensként metanol 3-5 %-os metilén-dikloridos oldatait alkalmazva tisztítjuk, így 30 mg fehér szilárd anyag alakjában, 17 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

^C28^H41^N5°7^S [647,8]; [MH⁺=648].

25. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-4-ftálimido-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

A 40. közbenső termékből 0,5 g-ot 10 ml metanolban szuszpendálunk, keverés közben hozzáadunk 98 mg kálium-tiolacetátot 2 ml metanolban oldva, a reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd visszafolyató hűtő alatt 6 órán át forraljuk. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a maradékot 50 ml víz és 150 ml metilén-diklorid között megosztjuk. A rétegeket elválasztjuk, a szerves réteget nátrium-szulfáton szárítjuk, leszűrjük, és bepároljuk. Az így kapott nyers • · · ·· · · · • · · ·· ····· ···· ··· ·· · · terméket oszlopkromatográfiával, eluensként etil-acetát és metilén-diklorid 1:1 arányú elegyét alkalmazva tisztítjuk, így 270 mg színtelen szilárd anyag alakjában megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

TLC R_f = 0,30 (etil-acetát és metilén-diklorid 50 %-os elegyében).

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

26. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-4-ftálimido-butanoll]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,50 g 41. Közbenső termékből kapjuk 0,42 g csaknem színtelen szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,20 (etil-acetát és metilén-diklorid 50 %-os elegyében).

27. Példa: (RS)-N-(2-(Acetil-tio)-6-ftálimido-hexanoin-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,50 g 42. Közbenső termékből kapjuk 0,39 g halványsárga szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,31 (etil-acetát és metilén-diklorid 50 %-os elegyében).

28. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-L-[β-(4-tiazolil)]-alanin-N-metil-amid

222 mg (0,51 mmol) 122. Közbenső terméket, 76 mg (0,56 mmol)

N-hidroxi-benzotriazolt, 75 ml (0,53 mmol) trietil-amint és 113 mg (0,51 mmol) 100. közbenső terméket 30 ml vízmentes tetra• · · ·· ····· ···· ··· · · · · hidrofuránban oldunk, és keverés közben 107 mg (0,56 mmol) EDC-t adunk hozzá. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 20 ml víz és 20 ml etil-acetát között megosztjuk. A vizes részt kétszer 20 ml etil-acetáttal extrahéljuk, az egyesített extraktumokat kétszer 50 ml vízzel, majd 50 ml nátrium-klorid— —oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott halványsárga olajat oszlopkromatográf iával, eluensként metilén-diklorid és metanol 98:2 arányú elegyét alkalmazva tisztítjuk, így 170 mg fehér szilárd anyag alakjában, 55 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

^28^35^5^6^2 (501,7] ; [ MH =602]

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

29. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-L-[β-(2-piridil)]-alanin-N-metil-amid

122. és 99. közbenső termékből kapjuk 277 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 67 %.

^c30^H37^N5°6^S [595,7]; [MH⁺=596].

30. Példa: (RS)~N~[2-(Acetil-merkapto)-5-ftállmido]-pentanoil-L-leucll-L- [β-(3-piridil)]-alanin-N-metil-amid

122. és 97. közbenső termékből kapjuk 50 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 12 %.

^C30^H37^N5°6^S [595,7]; [MH⁺=596].

31. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)- 5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-L-[S-(4-piridil)]-alanin-N-metil-amid

122. és 98. közbenső termékből kapjuk 310 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 77 %.

^C30^H37^N5°6^S [595,7]; [MH⁺=596].

32. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-5-metil-L-glutámsav-N-metil-amid

122. és 103. közbenső termékből kapjuk 201 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 49 %.

^C28^H38^N4°8^S [590,3]; [MH⁺=591],

33. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)- 5-ftálimido]-pentanoll-L-leucil- (S)- (2-metoxi-fenil)]-alanin-N-metil-amid

122. és 102. közbenső termékből kapjuk 150 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 37 %.

^C32^H40^N4°7^S [624,8]; [MH⁺=625].

34. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucll-(R)-penicill-amin-N-metil-amid

122. és 96. közbenső termékből kapjuk 230 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 35 %.

^C27^H38^N4°6^S2 [578,8]; [MH⁺=579].

35. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-(R)-(S-metil)-penicill-amin-N-metil-amid

122. és 101. közbenső termékből kapjuk 400 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 35 %.

^C28^H40^N4°6^S2 [592,8]; [MH⁺=593].

36. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil -L-leucil- (R)-(2,2-dlmetll-2-metánszulfonll)-alanin-N-metil-amid

122. és 95. közbenső termékből kapjuk 380 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 66 %.

^C28^H40^N4°8^S2 [624,8]; [MH⁺=625].

37. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil -L-leucll- (R)-(2,2-dimetil-2-metánszulfinil)-alanin-N-metil -amid

122. és 94. közbenső termékből kapjuk 360 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 37 %. ^c28^H40^N4°7^s2 [608,8]; [MH⁺=609].

38. Példa: (RS)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido]-pentanoil-L-leucil-(S)-terc-leucln-N-metil-amld

122. Közbenső termékből és terc-leucin-N-metil-amid-hidrokloridból kapjuk 120 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal:

%.

^C28^H40^N4°6^S2 [560,7]; [MH⁺=561].

39. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-acetil-amino-pentanoll)-L-leucil-(S)-terc-leucin-L-fenil-alanin-N-metil-amid

203 mg (0,328 mmol) 57. Közbenső terméket és 0,23 ml (3,28 mmol) 2-merkapto-etanolt metanolban oldva 0°C-ra hűtünk, és keverés közben hozzáadunk 0,82 ml 0,4M nátrium-hidroxid—oldatot.

perc múlva 0,5 ml ecetsavat adunk hozzá, majd az oldószereket vákuumban eltávolítjuk. A sárga olajos maradékhoz 20 ml dietil-étert adunk, és a kivált csapadékot leszűrjük. Az így kapott nyers tiolszármazékot oszlopkromatográfiával, eluensként 5 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid alkalmazásával tisztítjuk, így 86 mg fehér szilárd anyag alakjában, 56 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

^c23^h36^N4°4^s [464,6]; [MH⁺=465].

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

40. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-benzoll-amlno-pentanoll)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

400 mg (0,59 mmol) 58. Közbenső termékből kapjuk 175 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 59 %. ^c28^H38^N4°4^S [526,7]; [MH⁺=527].

41. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-szukcinimido-pentanoil)-L·· · ·· ·· ·

-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

600 mg (0,91 mmol) 59. Közbenső termékből kapjuk 147 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 32 %.

^C25^H36^N4°5^S [504,7]; [MH⁺=505].

42. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-metánszulfonil-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

600 mg (1,0 mmol) 60. Közbenső termékből kapjuk 262 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 57 %.

^C22^H36^N4°5^S2 [500,7]; [MH⁺=501].

43. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-benzolszulfonil-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

500 mg (0,7 mmol) 61. Közbenső termékből kapjuk 221 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 56 %.

^C27^H36^N4°5^S2 [500,7]; [MH⁺=501],

44. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-5-(4-piridil-karbonil)-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

330 mg (0,48 mmol) 61. Közbenső termékből kapjuk 115 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal·: 22 %.

^C27^H37^N5°4^S [527,7]; [MH⁺=528],

45. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-5-(3-piridil-karbonil)-amino• · · ····· • *· · >

-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

200 mg (0,29 mmol) 65. Közbenső termékből kapjuk 34 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 22 %.

^C27^H37^N5°4^S (527,7]; [MH⁺=528],

46. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-5-(2-piridil-karbonil)-amino-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metll-amid

150 mg (0,22 mmol) 66. Közbenső termékből kapjuk 60 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 52 %.

^C27^H37^N5°4^S (527,7] ; [MH⁺=528].

47. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-5-(3-pirazinil-karbonil)-amino-pentanoil) -L-leucil-L-fenil-alanln-N-metll-amid

0 mg (0,15 mmol) 67. Közbenső termékből kapjuk 30 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 38 %.

^C26^H36^N6°4^S (528,7]; [MH⁺=529].

48. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto~5-(3-pirazinil-karbonil)-amino-pentanoil )-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

110 mg (0,18 mmol) 28. példa szerinti vegyületet 10 ml metanolban oldunk, 0°C-on hozzáadunk 0,5 ml tömény ammónium-hidrοχιά—oldatot, majd 3 órán át keverjük. Ezután a keveréket 10 ml vízzel hígítjuk, 2M sósav-oldattal megsavanyítjuk, és háromszor ml metilén-dikloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves ex·« · · · ··· • ·· ·· ··· • « · ·· ····· • · · · «·· ·· · * traktumokat nátrium-szulfáton szárítjuk, majd leszűrjük. Az így kapott nyers terméket oszlopkromatográfiával, eluensként 2 % metanolt tartalmazó metilén-diklorid alkalmazásával tisztítjuk, így 71 mg színtelen szilárd anyag alakjában, 71 %-os kihozatallal megkapjuk a cím szerinti vegyületet.

^C26^H33^N5°5^S2 [559,7]; [MH⁺=558].

Hasonlóképpen állítjuk elő az alábbi vegyületeket:

49. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido)-pentanoil-L-leucil-L-[β- (2-piridil)]-alanin-N-metil-amid

A 29. példa szerinti vegyületbol kapjuk 75 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 80 %.

^C28^H35^N5°5^S [553,7]; [MH⁺=554].

50. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido)-pentanoil-L-leucil-5-metil-L-glutámsav-N-metil-amid

A 32. példa szerinti vegyületbol kapjuk 68 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 68 %.

^C26^H36^N4°7^S [548,6]; [MH+-549].

51. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido)-pentanoil-L-leucil-(R)-S-metil-penicill-amin-N-metil-amid

A 35. példa szerinti vegyületbol kapjuk 160 mg fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 70 %.

^C26^H38^N4°5^S2 [550,8]; [MH⁺=551].

·· «« ·· · * · · · · ····· ·«·· ··· ·· · »

52. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido)-pentanoil-L-leucil-(S)-terc-leucin-N-metil-amid

A 16. példa szerinti vegyületbol kapjuk 8,12 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 80 %.

^C26^H38^N4°5^S [518,7]; [MH⁺=519].

53. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido)-pentanoil-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

A 17. példa szerinti vegyületbol kapjuk 2,7 g fehér szilárd anyag alakjában; kihozatal: 67 %.

^C29^H36^N4°5^S [552,7]; [MH⁺=553].

54. Példa: (RS)-N-(2,3-Dimerkapto-propanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

Az 1. példa szerinti vegyületbol kapjuk 76 mg színtelen szilárd anyag alakjában.

C₁₉H₂₉N₃O₃S₂ [411,5]; [MH⁺=412].

55. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-3-(metoxi-karbonll)-propanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,16 g 5. példa szerinti vegyületbol kapjuk 0,14 g színtelen szilárd anyag alakjában.

^C21^H31^N3°5^S2 [437,5]; [MH⁺=438].

• ···«

- 99 56. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-4-(metoxi-karbonil)-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,18 g 6. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,16 g színtelen szilárd anyag alakjában.

C₂₂H₃₃N₃O₅S [451,5]; [MH⁺=452].

57. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-5-(metoxi-karbonil)-pentánon ]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,32 g 7. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,15 g színtelen szilárd anyag alakjában.

TLC R_f = 0,29 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

58. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto~6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucll-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,31 g 8. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,22 g színtelen szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,30 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

59. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-ftálimido-butanoil)-L-leucil-L -fenil-alanin-N-metil-amid

0,20 g 25. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,12 g halványsárga szilárd anyag alakjában.

^C28^H34^N4°5^s [538,6]; [MH⁺=540].

- 100 60. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

0,2 g 26. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,18 g színtelen szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,41 (5 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

61. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-6-ftálimido-hexanoil)-L-leucll-L-fenil-alanln-N-metll-amld

0,15 g 27. példa szerinti vegyületből kapjuk 0,12 g halvány sárga szilárd anyag alakjában.

TLC Rf = 0,25 (10 % metanolt tartalmazó metilén-dikloridban).

62. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid

250 mg 9. példa szerinti vegyületből kapjuk 222 mg halványsárga hab alakjában; kihozatal: 96 %.

^C31^H37^N5°5^S [591,7]; [MH+-592].

63. Példa: (S)-N-[2-Merkapto-6-(metoxl-karbonll)-hexanoll]-L-leucil-L-triptofán-N-metll-amld

330 mg 10. példa szerinti vegyületből kapjuk 300 mg színtelen hab alakjában; kihozatal: 98 %.

^C26^H38^N4°5^S [518,7] ; [MH⁺ = 519].

<»· ·

- 101

64. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-(S-metil-ciszteinil-L-triptofán-N-metil-amid

A fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő 119. és

124. közbenső termékből.

^C29^H32^N5°5^S2 [595,7]; [MH⁺=596].

65. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-3-ftálimido-propanoil)-L-leucil-L- fenil -alanin-N-metil -amid

125. Közbenső termékből és L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból a fenti 39. példánál leírt módon, 43. közbenső terméken keresztül állítjuk elő.

^C27^H32ⁿ4°5^S [524,6]; [MH⁺=525].

66. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinimido-butanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

123. Közbenső termékből és L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amidból a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő. ^C24^H34^N4°5^S [490,6]; [MH⁺=491].

67. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinimido-butanoil)-(S)-propil-qilcinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

123. és 113. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő.

^C23^H31^N4°5^S [475,6]; [MH⁺=476].

* ·ν> · ·· · · · w * • · · · · · · • · · * · ···· • ·» « c

102

68. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinlmldo-butanoil)-L-(S-metil)-ciszteinil-L-tere-leucin-N-metil-amid

123. és 114. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő.

^C19^H32^N4°5^S2 [460,6]; [MH⁺=461].

69. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinimido-butanoil)-L-(S-metil)-ciszteinil-L-triptofán-N-metil-amid

123. és 124. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő.

^C24^H31^N5°5^S2 [533,7]; [MH⁺=534]

70. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinimido-butanoil)-L-(S-metil)-ciszteinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

123. és 111. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő. ^c23^H3o^N4°5^s2 [506,61; [MH⁺=507].

71. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukclnimldo-butanoll)-L-(0-metil)-szerlnil-L-tere-leucin-N-metil-amid

123. és 115. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő.

^C19^H32^N4°5^S2 [460,61; [MH⁺=461].

- 103 72. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-4-szukcinimido-butanoil)-L-leucil-L-tere-leucin-N-metil-amid

123. és 116. Közbenső termékből a fenti 28. és 48. példánál leírt módon állítjuk elő.

^C21^H36^N4°5^S [456,6]; [MH⁺=457].

73. Példa: (RS)-N-(2-Merkapto-6-karboxi-hexanoil)-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid

A 10. példa szerinti vegyület hidrolízisével állítjuk elő. ^C25^H36^N4°5^S [504,7]; [MH⁺=505].

74. Példa: (R)-N-[2-(Acetil-merkapto)-6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid

A 10. példában kapott 1:1 arányú diasztereomer-keverék gyors oszlopkromatográfiás szétválasztásával állítjuk elő.

^C26^H38^N4°5^S [518,7]; [MH⁺=519],

75. Példa: (S)-N-[2-Acetil-merkapto-6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid

A 10. példában kapott 1:1 arányú diasztereomer-keverék gyors oszlopkromatográfiás szétválasztásával állítjuk elő.

^C26^H38^N4°5^S [518,7]; [MH⁺=519].

76. Példa: (R)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentano104 il]-L-triptofán-N-metil-amid

A 9. példában kapott 1:1 arányú diasztereomer-keverék gyors oszlopkromatográfiás szétválasztásával állítjuk elő.

^C31^H37^N5°5^S2 [591,7]; [MH⁺=592].

77. Példa: (R)-N-[2-(Acetil-merkapto)-5-(metoxi-karbonil)-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

A 7. példában kapott 1:1 arányú diasztereomer-keverék gyors oszlopkromatográfiás szétválasztásával állítjuk elő.

^C25^H36^N4°5^S [504,7]; [MH⁺=505].

78. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-6 -(metil-amino)-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

A 8. példa szerinti vegyület hidrolízisével állítjuk elő. ^C24^H38^N4°4^S [478,6]; [MH⁺=479].

79. Példa: (RS)-N-[2-Merkapto-6-amino-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

A 8. példa szerinti vegyület hidrolízisével állítjuk elő. ^C23^H36^N4°4^S ί⁴®⁴-®]-' [MH⁺=465] .

A. Példa: Kollagenáz-inhibíciós aktivitás

Az (I) általános képletű vegyületeknek a kollagenázt inhi• ·

- 105 biáló képességét a Cawtson és Barrett [Anal. Biochem., 99: 340345 (1979)] által leírt módon, vagyis a következőképpen határoztuk meg: a vizsgált inhibitor 1 mM-os oldatát vagy annak hígításait 50 mM pH = 7,6-os Tris-oldattal — amely 5 mM kalcium-kloridot, 0,05 % Brij 35-öt, 60 mM nátrium-kloridot és 0,02 % nátrium-azidot tartalmaz - pufferolva 37°C-on 16 órán át kollagénnel és kollagenázzal inkubáltuk. Kollagénként a Cawtson és Murphy [Methods in Enzymology, .80: 711 (1981)] által leírt módon előállított acetilezett ^H- vagy ¹⁴C-kollagént használtunk. A kollagenáznak a kollagén szubsztrátot lebontó aktivitását nem befolyásolta az, hogy milyen radioaktív jelölési módot alkalmaztunk. A mintákat a megemésztetlenül maradt kollagén kiülepítésére lecentrifugáltuk, és a radioaktív felülúszóból aliquot mintákat vettünk, amelyekből szcintilléciós számlálóval meghatároztuk a hidrolízis mértékét. Az inhibitor ImM-os oldatának vagy valamely hígításának jelenlétében mért kollagenáz-aktivitást összehasonlítottuk egy inhibitort nem tartalmazó kontrollminta aktivitásával, és eredményként a kollagenáz 50 %-os inhibíciójához szükséges inhibitor-koncentrációt (IC₅q) adtuk meg.

B. Példa: Stromelizin-inhibíciós aktivitás

Az (I) általános képletű vegyületeknek a stromelizint inhibiáló képességét a Nagase és munkatársai [Methods in Enzymology, Vol 254 (1994)] által leírt módon, vagyis a következőképpen határoztuk meg: a vizsgált inhibitor 0,1 mM-os oldatát vagy annak hígításait 50 mM pH = 7,6-os Tris-oldattal — amely 10 mM kalcium-kloridot, 150 mM nátrium-kloridot, 0,05 % Brij 35-öt, és 0,02 %

106 nátrium-azidot tartalmaz — pufferolva 37°C~on 16 órán át stromelizinnel és 3H-jód-ecetsavval karboxi-metilezett transzferrinnel inkubáltuk. Az inhibitor ImM-os oldatának vagy valamely hígításának jelenlétében mért stromelizin-aktivitást összehasonlítottuk egy inhibitort nem tartalmazó kontroilminta aktivitásával, és eredményként a stromelizin 50 %-os inhibiciójához szükséges inhibitor-koncentrációt (IC5Q) adtuk meg.

C. Példa: Zselatináz-inhibíciós aktivitás

Az (I) általános képletű vegyületeknek a zselatinázt inhibiáló képességét a Harris és Krane [Biochem. Biophys. Acta, 258: 566-576 (1972)] által leírt módon, vagyis a következőképpen határoztuk meg: a vizsgált inhibitor 1 mM-os oldatét vagy annak hígításait 50 mM pH = 7,6-os Tris-oldattal — amely 5 mM kalcium-kloridot, 0,05 % Brij 35-öt és 0,02 % nátrium-azidot tartalmaz — pufferolva 37°C-on 16 órán át zselatinázzal valamint hőhatással denaturált, acetilezett 3*H- vagy 14*C-kollagénnel inkubáltuk. A ⁹H- vagy ⁴⁴C-kollagént a Cawtson és Murphy [Methods in Enzymology, 80: 711 (1981)] által leírt módon, 60°C-on végzett 30 perces inkubálással állítottuk elő. A megemésztetlenül maradt zselatint triklór-ecetsav hozzáadásával kicsaptuk, és lecentrifugáltuk. Az inhibitor ImM-os oldatának vagy valamely hígításénak jelenlétében mért zselatináz-aktivitást összehasonlítottuk egy inhibitort nem tartalmazó kontroilminta aktivitásával, és eredményként a zselatináz 50 %-os inhibiciójához szükséges inhibitor-koncentrációt (IC₅q) adtuk meg.

• ·

- 107 D. Példa: A TNFa termelésének gátlása

Az (I) általános képletű vegyületeknek a TNFa termelésének gátlását inhibiáló képességét a következő módon határozzuk meg: A vizsgált inhibitor 1 mM-os oldatát vagy annak hígításait 5 % szén-dioxidot tartalmazó atmoszférában 20 μΜ β-merkapto-etanolt tartalmazó RPM1 1640 közegben lxl06*/ml sejtsűrűséggel szuszpendált és 5 μg/ml végkoncentrációjú LPS-sel stimulált THP-1 sejtekkel (humán monociták) 37°C-on inkubáltuk. 18 óra elteltével a felülúszóban a kereskedelemben kapható ELISA kittel (R & D Sysrems) meghatároztuk a TNFa-koncentrációt.

Az inhibitor 0,1 mM-os oldatának vagy valamely hígításának jelenlétében mért aktivitást összehasonlítottuk egy inhibitort nem tartalmazó kontrollminta aktivitásával, és eredményként a

TNFa termelésének 50 %-os inhibiciójához szükséges inhibitorkoncentrációt (IC₅g) adtuk meg.

E, Példa: Adiuváns arthritis patkánymodell

Az (I) általános képletű vegyületeket egy adjuvéns arthritis patkánymodellben vizsgáltuk a B.B. Newbold [Br.J.Pharmacol, 21,

127-136 (1963)] valamint a C.M. Pearson és F.D. Wood [Arthritis

Rheum, 2, 440-459 (1959)] által leírt módokon, amelyeket az alábbiakban röviden ismertetünk. 180 - 200 g testtömegű hím Wistar patkányok faroktövébe Freund-féle adjuvánst injektáltunk be. 12 nap múlva a reagáló patkányokat véletlenszerű kiválasztással kísérleti csoportokba soroltuk be. Az (I) általános képletű vegyületeket orálisan, 1 %-os metil-cellulózos szszuszpen- 108 zió alakjában vagy intraperitoneálisan, 0,2 %-os karboxi-metil-celluózban adtuk be a 12. naptól a kísérleti időszak végéig, vagyis a 22. napig. A 12. naptól kezdve minden második nap mértük a hátsó mancsok térfogatát, és a kísérlet kiegészítéseként röntgenfelvételeket is készítettünk. Eredményként a lábfej térfogat százalékos növekedését adtuk meg a 12. napon mért értékhez viszonyítva .

F, Példa: Egér petefészek-karcinoma xenograft modell

Az (I) általános képletű vegyületeket egy egér petefészekkarcinoma xenograft rákmodellben vizsgáltuk a B. Davies és munkatársai [Cancer Research, 53, 2087-2091 (1969)] által leírt módszer alapján. Ez röviden abból áll, hogy nőstény nu/nu egerek peritoneális üregébe 1 x 10^ 0VCAR3-icr sejtet oltunk be. Az (I) általános képletű vegyületeket orálisan, 1 %-os metil-cellulózos szszuszpenzió alakjában, vagy intraperitoneálisan, 0,01 % Tween-20-at tartalmazó, foszfáttal pufferolt nátrium-klorid-oldattal készített szszuszpenzió alakjában adjuk be. A kísérleti időszak végén, vagyis a 4-5 hét múlva a peritoneális sejteket megszámoljuk, és az adott esetben fellépő kemény tumorok tömegét megmérjük. Egyes vizsgálatok során a tumorok kifejlődését tumorspecifikus antigének mérésével követjük nyomon.

G. Példa: Patkányemlő karcinoma modell

Az (I) általános képletű vegyületeket egy HOSP.l patkányemlő karcinoma rákmodellben vizsgáltuk az S. Eccles és munkatársai

- 109 [Cancer Research, (1995) (nyomtatás alatt)] által leírt módszerrel. Ez abból áll, hogy nőstény CBH/cbi patkányok nyaki vénájába 2 x 10^ tumorsejtet oltunk be. Az (I) általános képletű vegyületeket orálisan, 1 %-os metil-cellulózos szszuszpenzió alakjában, vagy intraperitoneálisan, 0,01 % Tween-20-at tartalmazó, foszfáttal pufferolt nátrium-klorid-oldattal készített szszuszpenzió alakjában adjuk be. A kísérleti időszak végén, vagyis a 4-5 hét múlva az állatokat megöljük, tüdejüket eltávolítjuk, és Metachrannal 20 órán át végzett fixálás után a tumorokat megszámoljuk.

Claims (23)

1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK

   1. Szabad állapotban, só, szolvát vagy hidrát alakjában jelenlévő (I) általános képletű vegyület — a képletben

   R¹ jelentése 1-6 szénatomos alkil-, 2-6 szénatomos alkenil-(1-6 szénatomos alkil)-aril-, aril-, -(1-6 szénatomos alkil)-heteroaril-, heteroarilcsoport vagy -(1-6 szénatomos alkil)-ARáltalános képletű csoport, amelyben A jelentése oxigénatom, NR9. vagy S(O)_m általános képletű csoport, ahol m értéke 0 és 2 közötti, és R^ jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-, aril-, heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril- vagy -(1-4 szénatomos alkil)-heteroaril-csoport; ha A jelentése NR^ általános képletű csoport, akkor az R^ csoportok jelentése lehet azonos vagy különböző;

   R^ jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport; R³ jelentése [Alk]_nR⁶ általános képletű csoport, amelyben

   Alk jelentése 1-6 szénatomos alkil- vagy 2-6 szénatomos alkenilcsoport, és n értéke 0 vagy 1;

   X jelentése NR^R^ általános képletű csoport, amelyben R^ jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben amino- (-NH₂), aril-, aril-amino-, védett amino-, di(l-6 szénatomos alkil)-aminő-, 1-6 szénatomos monoalkil-amino-, karboxil-, védett karboxil-, karbamoil-, 1-6 szénatomos monoalkil-karbamoil- vagy di(l-6 szénatomos alkil)-karbamoil-csoporttal szubsztituált, és R³ jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport; vagy az NR^R³

   111 általános képletű csoport egy gyűrűt, például pirrolidino-, piperidino- vagy morfolinogyurűt képez;

   R⁷ jelentése hidrogénatom vagy R¹⁹CO általános képletű csoport, amelyben R¹⁹ jelentése 1-4 szénatomos alkil-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril-, -(1-4 szénatomos alkil)-heteroaril-, 3-6 szénatomos cikloalkil-, -(1-4 szénatomos alkil)-(3-6 szénatomos cikloalkil)-, 2-6 szénatomos alkenil-, -(2-6 szénatomos alkenil)-aril-, arilvagy heteroarilcsoport;

   R⁸ jelentése R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált aril-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-R¹¹, R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 szénatomos alkil)-aril-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 szénatomos alkil ) -heteroaril- , adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált 3-6 szénatomos cikloalkil-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált 3-6 szénatomos cikloalkenil-, adott esetben R¹¹ általános képletű csoporttal szubsztituált -(1-4 szénatomos alkil)-(3-6 szénatomos cikloalkil)-csoport vagy (a), (b) vagy (c) általános képletű csoport, amelyekben p értéke 1 vagy 2, és B és C jelentése egymástól függetlenül oxigénatom, kénatom, C(R⁹)₂ vagy NR⁹ általános képletű csoport;

   R⁶ jelentése AR⁹ általános képletű csoport, 3-6 szénatomos cikloalkil-, 3-6 szénatomos cikloalkenil-, 1-6 szénatomos alkil-, -(1-6 szénatomos alkoxi)-aril-, benzilIh *········· ’ ··········«

   - 112 -οχί-aril-, aril-, heteroaril-, -(1-3 szénatomos alkil)-heteroaril-, -(1-3 szénatomos alkil)-aril-csoport, vagy -(1-6 szénatomos alkil)-COOR⁹, -(1-6 szénatomos alkil)-NHR, CONHR, NHCO₂R, NHSO₂R vagy NHCOR általános képletű csoport, amelyekben R jelentése megegyezik az R¹⁹-re megadottal;

   R¹¹ jelentése SO2R¹³, SR⁷, SR⁹ , COR¹³, N(R⁹)2, NR⁹R¹², OR⁹ általános képletű csoport, szukcinimido- vagy ftálimidocsoport;

   R¹² jelentése hidrogénatom, COR⁹ általános képletű csoport, CO2R⁹ általános képletű csoport, amelyben R⁹ hidrogénatomtól eltérő jelentésű, CONHR⁹ általános képletű csoport, vagy SO2R⁹ általános képletű csoport, amelyben R⁹ hidrogénatomtól eltérő jelentésű; és

   R¹³ jelentése hidroxilcsoport, -0-(1-4 szénatomos alkil)-, -0-(1-4 szénatomos alkil)-aril-csoport, N(R⁹)₂ általános képletű csoport — amelyben az R⁹ szubsztituensek jelentése lehet azonos vagy különböző, — 1-4 szénatomos alkil-, aril-, heteroaril-, -(1-4 szénatomos alkil)-aril- vagy -(1-4 szénatomos alkil)-heteroaril-csoport.
2. 2. Egy 1. igénypont szerinti vegyület, amelyben R¹ jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy -(1-6 szénatomos alkil)-AR⁹ általános képletű csoport, amelyben A jelentése S(0)_m vagy NR9. általános képletű csoport vagy oxigénatom; m értéke 0, 1 vagy 2, és R⁹ jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport.

   ' * .... .:. *..· · .· ··;·

   - 113
3. 3. Egy 1. vagy 2. igénypont szerinti vegyület, amelyben R³ jelentése [Alk]_nR^ általános képletű csoport, és ebben n értéke 0 vagy 1, Alk jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, és R® jelentése 1-6 szénatomos alkil-, -(1-3 szénatomos alkil)-aril-, -(1-3 szénatomos alkil)-heteroaril- vagy AR^ általános képletű csoport.
4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben R^ jelentése hidrogénatom.
5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben X jelentése pirrolidino-, piperidino- vagy morfolinocsoport.
6. 6. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben R jelentese hidrogénatom vagy (1-6 szénatomos alkil)-karbonil-csoport.
7. 7. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben R³ jelentése -(1-4 szénatomos alkil)-R¹¹ vagy (3-6 szénatomos cikloalkil)-R¹¹ általános képletű csoport, és ezekben R¹¹ jelentése COR¹³, NR⁹R¹², N(r9)2 általános képletű csoport, szukcinimido- vagy ftálimidocsoport; R¹² jelentése COR^ általános képletű csoport, CO2R⁹ általános képletű csoport — amelyben R^ hidrogénatomtól eltérő jelentésű —, vagy SO⁹ általános képletű csoport — amelyben R⁹ hidrogénatomtól eltérő jelentésű —; és R ¹³ jelentése hidroxilcsoport, -0-(1-4 szénatomos alkil)- vagy N(R^)₂ általános képletű csoport.
8. 8. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyI

   - 114 * · · · ····· • · · · · · * ben R³ jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport.
9. 9. Egy 8. igénypont szerinti vegyület, amelyben

   R¹ jelentése alkil-, alkenil-, alkil-aril-, aril- vagy alkil-AR⁹ általános képletű csoport, és ebben R⁹ jelentése alkil-, aril- vagy heteroarilcsoport;

   R⁷ jelentése hidrogénatom vagy R¹⁹CO általános képletű csoport, amelyben R¹^ jelentése alkil-, alkil-aril-, cikloalkil-, cikloalkil-alkil, alkenil- vagy alkenil-aril-csoport;

   r8 jelentése adott esetben szubsztituált aril-, heteroaril-, alkil-aril-, cikloalkil-, cikloalkenil-, alkil-cikloalkil-csoport, alkil-R¹¹ vagy (a) , (b) vagy (c) általános képletű csoport;

   jelentése cikloalkil-, cikloalkenil-, alkil-, benzil-, alkoxi-benzil-, benzil-oxi-benzil- vagy 3-indolil-metil-csoport;

   R¹¹ jelentése SR⁷, SR⁹, COR¹³, N(R⁹)₂, NR⁹R¹², OR⁹ általános képletű csoport, szukcinimido- vagy ftálimidocsoport;

   és

   R¹³ jelentése hidroxil-, -Ο-alkil-, -O-alkil-aril-csoport, N(R⁹)₂ általános képletű csoport, alkil-, aril- vagy alkil-aril-csoport.
10. 10. Egy 1. igénypont szerinti vegyület, éspedig

    N-[2,3-bisz(acetil-merkapto)-propanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-3-metoxi-karbonil-propanoil]-L-leucil-L115

    -fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-4-metoxi-karbonil-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-metoxi-karbonil-pentanoil] -L-leucil-L

    -fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-6-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-4-ftálimido-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-fenil -alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto-6-ftálimido-hexanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-(2,3-dimerkapto-propanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-3-(metoxi-karbonil)-propanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-4-(metoxi-karbonil)-butanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-5-(metoxi-karbonil)-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-4-ftálimido-butanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N

    -metil-amid vagy

    N-(2-merkapto-6-ftálimido-hexanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N• ·· ·9 • · · · · · • · · · · • · « · • · · · · ·

    116

    -metil-amid.
11. 11. Egy 1. igénypont szerinti vegyület, éspedig N-[2-(acetil-merkapto)- 5-metoxi-karbonil-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-6-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-6-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid

    N-[2-(acetil-merkapto)-6-metoxi-karbonil-hexanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-valinil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-[β-(4-tiazolil)]-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-[β-(2-piridil)]-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-5-metil-L-glutámsav-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-6-ftálimido-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-(acetil-merkapto)-2-(3-ftálimido)-fenil-acetil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-5-(metoxi-karbonil)-pentanoil]-L-leucil-L-fenil-

    117

    -alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-[2-merkapto-6-(metoxi-karbonil)-hexanoil]-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-triptofán-N-metil-amid,

    N-[2-(merkapto)- 5-ftálimido-pentanoil]-L-leucil-L-[β-(4-tiazolil)]-alanin-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-5-ftálimido-pentanoil)-L-leucil-L-[β-(2-piridil)]-alanin-N-metil-amid,

    N-(2-merkapto-5 -ftálimido-pentanoil)-L-leucil-5-metil-L-glutámsav-N-metil-amid vagy

    N-(2-merkapto-6-ftélimido-hexanoil)-L-leucil-L-fenil-alanin-Nmetil-amid.
12. 12. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben R¹ jelentése -CH2SCH3 képletű csoport.
13. 13. Egy 12. igénypont szerinti, a 20., 64., 68., 69. vagy 70. példában megadott vegyület.
14. 14. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, amelyben R³ jelentése trec-butil- vagy -C(CH3)₂S(0)o-2^CH3 általános képletű csoport.

    - 118 ·· • fc ·

    38., 51

    Egy 14. igénypont szerinti, a 16., 34., 35

    52. vagy 72. példában megadott vegyület.

    36., 37.,
15. 16. Az 1-15. igénypontok bármelyike enantiomer vagy diasztereomer vagy ilyen j éban.

    szerinti vegyület egyedi izomerek keveréke alak
16. 17. Terápiás célra szolgáló gyógyszerkészítmény, amely egy, a fenti igénypontok bármelyike szerinti vegyületet és egy gyógyászatilag elfogadható hígító- vagy hordozóanyagot tartalmaz.
17. 18. Az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyület felhasználása a mátrix metalloproteinázokkal kapcsolatos vagy a TNFa által médiáit kóros állapotok kezelésére vagy megelőzésére szolgáló gyógyszerkészítmény előállítására.
18. 19. A 18. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot rák, gyulladásos vagy fertőzéses betegségek, szövet-degeneráció, periodontitális és szemészeti betegségek, bőrrendellenességek, láz, kardiovaszkuláris effektusok, vérzés, koaguláció, akut fázisreakciók, cachexia, anorexia, akut fertőzés, HlV-fertőzés, sokkos állapotok, a transzplantátummal szemben fellépő reakciók, autoimmun betegségek, reperfúziós károsodás, agyhártyagyulladás, vagy migrén.
19. 20. A 19. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot tumorfejlődés, angiogenesis, tumor-invázió és -szétterjedés, metasztázisok, rosszindulatú ascites (hasvízkór), vagy

    119 rosszindulatú mellhártyaizzadmány.
20. 21. A 19. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot reumatoid arthritis, osteoarthritis, asztma, sclerosis multiplex, neurodegeneráció, Alzheimer-kór, atherosclerosis, stroke, érgyulladás, Crohn-féle betegség, vagy colitis ulcerosa (fekélyes vastagbélgyulladás).
21. 22. A 19. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot a szaruhártya fekélyesedése, retinopathia, vagy műtét utáni sebgyógyulás.
22. 23. A 19. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot psoriasis, atopiás dermatitis, krónikus fekély, vagy epidermolysis bullosa.
23. 24. A 19. igénypont szerinti felhasználás, ahol a kóros állapot foggyökérhártya-gyulladás vagy fogínygyulladás.