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ES2553253T3 - Uso de una composición inmunogénica de PCV2 para reducir los síntomas clínicos en cerdos - Google Patents

Uso de una composición inmunogénica de PCV2 para reducir los síntomas clínicos en cerdos Download PDF

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ES2553253T3
ES2553253T3 ES11164850.7T ES11164850T ES2553253T3 ES 2553253 T3 ES2553253 T3 ES 2553253T3 ES 11164850 T ES11164850 T ES 11164850T ES 2553253 T3 ES2553253 T3 ES 2553253T3
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ES
Spain
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rorf2
day
pcv2
dose
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Active
Application number
ES11164850.7T
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English (en)
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Michael B. Roof
Marc Allan Eichmeyer
Greg Nitzel
Phillip Wayne Hayes
Merrill Lynn Schaeffer
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Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc
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Publication date
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Abstract

Una composición inmunogénica capaz de provocar o reforzar una respuesta inmune contra PCV2 y que comprende proteína ORF2 de PCV2 producida de forma recombinante, para uso en la prevención de la linfadenopatía, agotamiento linfoide y/o histiocitos multinucleados/gigantes en cerdos, en donde la proteína ORF2 de PCV2 se ha de administrar una vez a cerdos.

Description

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45 minutos a 37°C antes de lavarla tres veces con el tampón de lavado. 100 µL de sustrato (Sustrato TMB Peroxidasa, Kirkgaard and Perry Laboratories (KPL), Gaithersberg, MD), mezclados con un volumen igual de Sustrato Peroxidasa B (KPL) se añadieron a cada uno de los pocillos. La placa se incubó a temperatura ambiente durante 15 minutos. 100 µL de solución de HCl 1 N se añadieron luego a todos los pocillos para detener la reacción. La placa se hizo pasar luego a través de un lector ELISA. Los resultados de este ensayo se proporcionan en la Tabla 1 que figura a continuación:
Tabla 1:
Día
Matraz ORF2 en el sedimento (µg) ORF2 en el sobrenadante (µg)
3
1 47,53 12
3
2 57,46 22
3
3
53,44 14
3
4 58,64 12
4
1 43,01 44
4
2 65,61 62
4
3 70,56 32
4
4
64,97 24
5
1 31,74 100
5
2 34,93 142
5
3 47,84 90
5
4 55,14 86
6
1 14,7 158
6
2 18,13 182
6
3 34,78 140
6
4 36,88 146
7
1 6,54 176
7
2 12,09 190
7
3 15,84 158
7
4 15,19 152
Estos resultados indican que cuando se prolonga el tiempo de incubación, la expresión de ORF2 en el
10 sobrenadante de las células centrifugadas y los medios es mayor que la expresión en el sedimento de las células centrifugadas y los medios. Por consiguiente, al permitir que la expresión de ORF2 prosiga durante al menos 5 días y que se recupere en el sobrenadante más que permitir que la expresión prosiga durante menos de 5 días y recuperar ORF2 de las células, proporciona un gran aumento en los rendimientos de ORF2 y una mejora significativa frente a los métodos anteriores.
15 Ejemplo 2
Este ejemplo proporciona datos en cuanto a la eficacia de la invención reivindicada en esta memoria. Un matraz de centrifugación de 1000 mL se sembró con aproximadamente 1,0x106 células Sf+/ml en 300 mL de medio Excell 420. El matraz se incubó luego a 27°C y se agitó a 100 rpm. Subsiguientemente, el matraz se sembró con 10 mL de siembra de virus ORF2 de PCV2/Bac p+6 (el baculovirus recombinante que contiene el gen ORF2 de PCV2 ORF2
20 pasó 6 veces adicionales en las células de insectos Sf9) con 0,1 MOI después de 24 horas de incubación.
El matraz se incubó después a 27°C durante un total de 6 días. Después de la incubación, el matraz se centrifugó después y se recogieron e inactivaron tres muestras del sobrenadante resultante. El sobrenadante se inactivó
imagen14
Tabla 4. Diseño de Estudio General
Grupo
Nº de Cerdos Tratamiento Día de Tratamiento KLH/ICFA el Día 21 y el Día 27 Enfrentados con PCV2 Virulento el Día 24 Necropsia el Día 49
1
12 Vacuna de PCV2 nº 1 (vORF2 16 µg) 0 + + +
2
12 Vacuna de PCV2 nº 2 (vORF2 8 µg) 0 + + +
3
12 Vacuna de PCV2 nº 3 (vORF2 4 µg) 0 + + +
4
12 Vacuna de PCV2 nº 4 (rORF2 16 µg) 0 + + +
5
12 Vacuna de PCV2 nº 5 (rORF2 8 µg) 0 + + +
6
12 Vacuna de PCV2 nº 6 (rORF2 4 µg) 0 + + +
7
12 Vacuna de PCV2 Nº 7 (mató virus de células completos) 0 + + +
8
12 Ninguno -Controles de Enfrentamiento N/A + + +
9
12 Ninguno -Grupo Control Negativo Estricto N/A + - +
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Siete de los grupos (Grupos 1 -7) recibieron dosis de polipéptido ORF2 de PCV2, uno de los grupos actuó como control de enfrentamiento y no recibió ORF2 de PCV2 y otro grupo actuó como el grupo control negativo estricto y 5 tampoco recibió ORF2 de PCV2. El Día 0, los Grupos 1 a 7 fueron tratados con vacunas asignadas. A los cochinillos del Grupo 7 se les dio un tratamiento de refuerzo el Día 14. Los cochinillos fueron observados en cuanto a sucesos adversos y las reacciones del sitio de inyección después de la vacunación, y el Día 19, los cochinillos se trasladaron al segundo sitio de estudio. En el segundo sitio de estudio, los Grupos 1-8 fueron alojados en grupo en un edificio, mientras que el Grupo 9 fue alojado en un edificio separado. Todos los cerdos recibieron hemocianina
10 de lapa bocallave (KLH)/adyuvante incompleto de Freund (ICFA -siglas en inglés) los Días 21 y 27 y el Día 24, a los Grupos 1-8 se les enfrentó con un PCV2 virulento.
Antes y después del enfrentamiento se tomaron muestras de sangre para la serología del PCV2. Después del enfrentamiento se recogieron datos del peso corporal para la determinación de la ganancia de peso media diaria (ADWG -siglas en inglés) y los síntomas clínicos, así como muestras de torunda nasal para determinar la secreción
15 nasal de PCV2. El Día 49, se practicó necropsia a todos los cerdos supervivientes, se anotaron los pulmones en cuanto a lesiones, y los tejidos seleccionados se conservaron en formalina para el ensayo de Inmunohistoquímica (IHC -siglas en inglés) para una fecha posterior.
Materiales y Métodos:
Este era un estudio de capacidad de enfrentamiento frente a la vacunación parcialmente ciego realizado en cerdos
20 CDCD, de 9 a 14 días de edad el Día 0. Para ser incluidos en el estudio, los títulos IFA de PCV2 de cerdas eran ≤ 1:1000. Adicionalmente, el estado serológico de cerdas procedía de una piara PRRS-negativa conocida. Se sometió a ensayo a ventiocho (28) cerdas en cuanto al estado serológico de PCV2. Catorce (14) cerdas tenían un título de PCV2 de ≤ 1000 y fueron transferidas al primer sitio de estudio. Ciento diez (110) cochinillos fueron proporcionados mediante cirugía por sección cesárea y estaban disponibles para este estudio el Día -4. El Día -3 se pesaron 108
25 cerdos CDCD en el primer sitio de estudio, se identificaron con etiquetas de oreja, se bloquearon por el peso y se asignaron al azar a 1 de 9 grupos, según se recoge antes en la tabla 4. Si cualquier animal de ensayo que cumplía
5
10
15
20
25
30
35
los criterios de inclusión fue enrolado en el estudio y posteriormente fue excluido por cualquier motivo, el Investigador y Monitor consultó con el fin de determinar el uso de datos recogidos del animal en el análisis final. Se documentó la fecha en la que se excluyó a los cerdos enrolados y el motivo de la exclusión. Inicialmente no se excluyó a ninguna cerda. Un total de 108 de 110 cerdos disponibles fue asignado a uno de 9 grupos el Día -3. Los dos cerdos más pequeños (nºs 17 y 19) no fueron asignados a un grupo y estaban disponibles como extras, en caso necesario. Durante el transcurso del estudio, se retiró a varios animales. Cada uno de Cerdo nº 82 (Grupo 9) el Día -1, Cerdo nº 56 (Grupo 6) el Día 3, Cerdo nº 53 (Grupo 9) el Día 4, Cerdo nº 28 (Grupo 8) el Día 8, Cerdo nº 69 (Grupo 8) el Día 7 y Cerdo nº 93 (Grupo 4) el Día 9, fue encontrado muerto antes del enfrentamiento. Estos seis cerdos no fueron incluidos en los resultados del estudio final. El cerdo nº 17 (uno de los cerdos extra) fue asignado al Grupo 9. El restante cerdo nº 19 extra fue excluido del estudio.
Las formulaciones dadas a cada uno de los grupos eran como sigue: el Grupo 1 fue diseñado para administrar 1 ml de ORF2 viral (vORF2) que contenía 16 µg de ORF2/ml. Esto se hizo mezclando 10,24 ml de ORF2 viral (256 µg/25 µg/ml = 10,24 ml de vORF2) con 3,2 ml de Carbopol al 0,5% y 2,56 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 16 ml de formulación para el grupo 1. El Grupo 2 fue diseñado para administrar 1 ml de vORF2 que contenía 8 µg de vORF2/ml. Esto se hizo mezclando 5,12 ml de vORF2 (128 µg/25 µg/ml = 5,12 ml de vORF2) con 3,2 ml de Carbopol al 0,5% y 7,68 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 16 ml de formulación para el grupo 2. El Grupo 3 fue diseñado para administrar 1 ml de vORF2 que contenía 4 µg de vORF2/ml. Esto se hizo mezclando 2,56 ml de vORF2 (64 µg/25 µg/ml = 2,56 ml de vORF2) con 3,2 ml de Carbopol al 0,5% y 10,24 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 16 ml de formulación para el grupo 3. El Grupo 4 fue diseñado para administrar 1 ml de ORF2 recombinante (rORF2) que contenía 16 µg de rORF2/ml. Esto se hizo mezclando 2,23 ml de rORF2 (512 µg/230 µg/ml = 2,23 ml de rORF2) con 6,4 ml de Carbopol al 0,5% y 23,37 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 32 ml de formulación para el grupo 4. El Grupo 5 fue diseñado para administrar 1 ml de rORF2 que contenía 8 µg de rORF2/ml. Esto se hizo mezclando 1,11 ml de rORF2 (256 µg/230 µg/ml = 1,11 ml de rORF2) con 6,4 ml de Carbopol al 0,5% y 24,49 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 32 ml de formulación para el grupo 5. El Grupo 6 fue diseñado para administrar 1 ml de rORF2 que contenía 8 µg de rORF2/ml. Esto se hizo mezclando 0,56 ml de rORF2 (128 µg/230 µg/ml = 0,56 ml de rORF2) con 6,4 ml de Carbopol al 0,5% y 25,04 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4. Esto produjo 32 ml de formulación para el grupo 6. El Grupo 7 fue diseñado para administrar 2 ml de vacuna de células enteras muertas contra PCV2 (PCV2 KV -siglas en inglés) que contenían la MAX PCV2 KV. Esto se hizo mezclando 56 ml de PCV2 KV con 14 ml de Carbopol al 0,5%. Esto produjo 70 ml de formulación para el grupo 7. Finalmente, el grupo 8 fue diseñado para administrar KLH a razón de 0,5 µg/ml ó 1,0 µg/ml por cada 2 ml de dosis. Esto se hizo mezclando 40,71 ml de KLH (7,0 µg de proteína/ml a 0,5 µg/ml = 570 ml (7,0 µg/ml)(x) = (0,5)(570 ml)), 244,29 ml de solución salina tamponada con fosfato a un pH de 7,4, y 285 ml de adyuvante de Freund. La Tabla 5 describe los intervalos de tiempo para las actividades clave de este Ejemplo.
Tabla 5. Actividades de Estudio
Día de Estudio
Actividad de Estudio
-4, 0 a 49
Observaciones generales para la salud global y síntomas clínicos
-3
Pesado; distribuidos al azar en grupos; muestras de sangre tomadas de todos los cerdos
0
Examen de salud; administrados IVP Nºs 1-7 a los Grupos 1-7, respectivamente
0-7
Cerdos observados en cuanto a reacciones en los sitios de inyección
14
Grupo 7 reforzado con Vacuna nº 7 contra PCV2; muestras de sangre de todos los cerdos
14-21
Grupo 7 observado en cuanto a reacciones en los sitios de inyección
16-19
Tratados todos los cerdos con antibióticos (falta de datos)
19
Cerdos transportados desde el primer sitio de ensayo a un segundo sitio de ensayo
21
Grupos 1-9 tratados con KLH/ICFA
24
Muestras de sangre y de torunda nasal recogidas procedentes de todos los cerdos; pesados todos los cerdos; Grupos 1-8 enfrentados con material de enfrentamiento de PCV2
25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 47
Muestras de torunda nasal recogidas procedentes de todos los cerdos
27
Grupos 1-9 tratados con KLH/ICFA
imagen15
imagen16
Los resultados de la ganancia de peso media diaria (ADWG) se presentan a continuación en la Tabla 6. El Grupo 9, el grupo control estricto negativo, tenía la ADWG más alta (0,48 ± 0,09 kg/día), seguido del Grupo 5 (0,43 ± 0,10 kg/día), que recibieron una dosis de 8 µg de rORF2. El Grupo 3, que recibió una dosis de 4 µg de vORF2, tenía la ADWG más baja (0,22 ± 0,09 kg/día), seguido del Grupo 7 (0,23 ± 0,07 kg/día), que recibieron 2 dosis de vacuna matada.
Tabla 6. Sumario de la Ganancia de Peso Media Diaria (ADWG)
Grupo
Tratamiento N ADWG -kg/día (Día 24 a Día 49) o ajustada para cerdos muertos antes del Día 29
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 0,39 ± 0,13 kg/día
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 0,32 ± 0,14 kg/día
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 0,22 ± 0,09 kg/día
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 0,38 ± 0,14 kg/día
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 0,43 ± 0,09 kg/día
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 0,33 ± 0,11 kg/día
7
KV (2 dosis) 12 0,23 ± 0,07 kg/día
8
Controles de Enfrentamiento 10 0,34 ± 0,09 kg/día
9
Controles Estrictos Negativos 11 0,48 ± 0,08 kg/día
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Los resultados de la serología de PCV2 se presentan a continuación en la Tabla 7. Todos los nueve grupos eran seronegativos para PCV2 el Día -3. El Día 14, los Grupos que recibieron vacunas de vORF2 tenían los títulos más 10 elevados, que oscilaban entre 187,5 y 529,2. Los cerdos que recibieron vacunas virales matadas tenían los títulos siguientes más altos, seguidos de los grupos que recibieron vacunas de rORF2. Los Grupos 8 y 9 permanecieron seronegativos en este momento. El Dia 24 y el Día 31 los cerdos que recibieron vacunas de vORF2 continuaban demostrando una fuerte respuesta serológica, seguida de cerca del grupo que recibía dos dosis de una vacuna viral matada. Los cerdos que recibían vacunas de rORF2 respondían serológicamente más lentamente y los Grupos 8 y
15 9 continuaban siendo seronegativos. El Día 49, los cerdos que recibían vacuna de vORF2, 2 dosis de la vacuna viral matada y la dosis más baja de rORF2 demostraron las respuestas serológicas más fuertes. Los cerdos que recibieron 16 µg y 8 µg de vacunas de rORF2 tenían títulos IFA ligeramente más altos que los controles de enfrentamiento. El Grupo 9 el Día 49 mostró una fuerte respuesta serológica.
Tabla 7. Sumario del Grupo de Títulos IFA de PCV2
20 Título IFA medio
Grupo
Tratamiento Día -3 Día 14 Día 24 Día 31** Día 49***
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 50,0 529,2 4400,0 7866,7 11054,5
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 50.0 500,0 3466,7 6800,0 10181.8
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 50,0 187,5 1133,3 5733,3 9333,3
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 50,0 95,5 1550,0 3090,9 8000,0
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 50,0 75,0 887,5 2266,7 7416,7
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 50,0 50,0 550,0 3118,2 10570,0
7
KV (2 dosis) 50,0 204,2 3087,5 4620,8 8680,0
8
Controles de Enfrentamiento 50,0 55,0 50,0 50,0 5433,3
9
Controles Estrictos Negativos 50,0 59,1 59,1 54,5 6136,4
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células
completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado *Para fines de cálculo, un título IFA ≤100 se designó como un título de “50"; un título IFA ≥ 6400 se designó como un título de “12.800".
**Día de Enfrentamiento ***Día de la Necropsia
Los resultados de las observaciones clínicas post-enfrentamiento se presentan a continuación en la Tabla 8. Este sumario de resultados incluye observaciones del Comportamiento Anormal, Respiración Anormal, Tos y Diarrea. La Tabla 9 incluye los resultados del Sumario de Incidencia de los Síntomas Clínicos Globales del Grupo y la Tabla 10 5 incluye los resultados del Sumario de Tasas de Mortalidad del Grupo Post-enfrentamiento. El síntoma clínico más común señalado en este estudio era el comportamiento anormal, el cual se clasificó como letargia de suave a grave. Los cerdos que recibían las 2 dosis más bajas de vORF2, los cerdos que recibían 16 µg de rORF2 y los cerdos que recibían 2 dosis de vacuna KV tenían tasas de incidencia de = 27,3%. Los cerdos que recibían 8 µg de rORF2 y el grupo control estricto negativo no tenían un comportamiento anormal. Ninguno de los cerdos en este
10 estudio mostró respiración anormal. El acceso de tos se observó con frecuencia en todos los grupos (0 a 25%), al igual que la diarrea (0-20%). Ninguno de los síntomas clínicos señalados era patonómico para PMWS.
La incidencia global de los síntomas clínicos varió entre grupos. Los grupos que recibían cualquiera de las vacunas de vORF2, el grupo que recibía 16 µg de rORF2, el grupo que recibía 2 dosis de vacuna KV y el grupo control de enfrentamiento tenían la incidencia más alta de síntomas clínicos globales (≥ 36,4%). El grupo control estricto
15 negativo, el grupo que recibía 8 µg de rORF2 y el grupo que recibía 4 µg de rORF2 tenían tasas de incidencia globales de síntomas clínicos de 0%, 8,3% y 9,1%, respectivamente.
También variaban las tasas de mortalidad global entre grupos. El grupo que recibía 2 dosis de vacuna de KV tenía la tasa de mortalidad más alta (16,7%); mientras que los grupos que recibían 4 µg de vORF2, 16 µg de rORF2 u 8 µg de rORF2 y el grupo control estricto negativo tenían todos tasas de mortalidad del 0%.
20 Tabla 8. Sumario de Observaciones del Grupo para el Comportamiento Anormal, Respiración Anormal, Tos y Diarrea
Grupo
Tratamiento N Comportamiento Anormal1 Comportamiento Anormal2 Tos3 Diarrea4
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 2/12 (16,7% 0/12 (0%) 3/12 (25%) 2/12 (16/7%)
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 4/12 (33,3%) 0/12 (0%) 1/12 (8,3% 1/12 (8,3%)
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 8/12 (66,7%) 0/12 (0%) 2/12 (16,7%) 1/12 (8,3%)
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 3/11 (27,3%) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 2/11 (18,2%)
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 0/12 (0%) 0/12 (0%) 1/12 (8,3%) 0/12 (0%)
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 1/11 (9,1%) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0/12 (0%)
7
KV (2 dosis) 12 7/12 (58.3) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 1/12 (8,3%)
8
Controles de Enfrentamiento 10 1/10 (10%) 0/10 (0%) 2/10 (20%) 2/10 (20%)
9
Controles Estrictos Negativos 11 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0/11 (0%)
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado 1Número total de cerdos en cada grupo que mostró algún comportamiento anormal durante al menos un día 2Número total de cerdos en cada grupo que mostró alguna respiración anormal durante al menos un día 3Número total de cerdos en cada grupo que mostró tos durante al menos un día 4Número total de cerdos en cada grupo que mostró diarrea durante al menos un día
Tabla 9. Sumario de la Incidencia Global del Grupo de Síntomas Clínicos
Grupo
Tratamiento N Incidencia de cerdos con Síntomas Clínicos1 Tasa de Incidencia
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 5 41,7 %
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 5 41,7 %
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 8 66,7 %
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 4 36,4 %
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 1 9,1 %
7
KV (2 dosis) 12 7 58,3 %
8
Controles de Enfrentamiento 10 4 40 %
9
Controles Estrictos Negativos 11 0 0 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado 1Número total de cerdos en cada grupo que mostró cualquier síntoma clínico durante al menos un día

Tabla 10. Sumario de las Tasas de Mortalidad del Grupo Post-enfrentamiento
Grupo
Tratamiento N Muertes Postenfrentamiento Tasa de Mortalidad
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 0 0 %
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 0 0 %
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 0 0 %
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 1 9,1 %
7
KV (2 dosis) 12 2 16,7 %
8
Controles de Enfrentamiento 10 1 10 %
9
Controles Estrictos Negativos 11 0 0 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Los resultados de la secreción nasal de PCV2 se presentan a continuación en la Tabla 11. Después del enfrentamiento el Día 24, 1 cerdo en el Grupo 7 comenzó a secretar PCV2 el Día 27. Ninguno de los otros grupos experimentó la secreción hasta el Día 33. La cuantía de secreción nasal se anotó desde el Día 35 al Día 45. Grupos que recibían cualquiera de las tres vacunas de vORF2 y grupos que recibían 4 u 8 µg de rORF2 tenían la incidencia más baja de secreción nasal de PCV2 (≤ 9,1%). El grupo control de enfrentamiento (Grupo 8) tenía la tasa de secreción más alta (80%), seguido del grupo control estricto negativo (Grupo 9), que tenía una tasa de incidencia de 63,6%.

Tabla 11. Sumario de la Incidencia de Secreción Nasal de PCV2 en el Grupo
Grupo
Tratamiento N Nº de cerdos que secretó durante al menos un día Tasa de Incidencia
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 2 18,2 %
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 1 8,3 %
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 1 9,1 %
7
KV (2 dosis) 12 5 41,7 %
8
Controles de Enfrentamiento 10 8 80 %
9
Controles Estrictos Negativos 11 7 63,6 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
10
El Sumario de la Incidencia de Íctero del Grupo, la Incidencia de Úlceras Gástricas en el Grupo, las Anotaciones de Lesiones Pulmonares Medias del Grupo y la Incidencia de Lesiones Pulmonares en el Grupo se muestran a continuación en la Tabla 12. Seis cerdos murieron en el primer sitio de ensayo durante la fase de post-vacunación del estudio (Grupo 4, N = 1; Grupo 6, N = 1; Grupo 8, N = 2; Grupo 9, N = 2). Cuatro de seis cerdos tenían lesiones
15 fibrosas en una o más cavidades corporales, un cerdo (Grupo 6) tenía lesiones consistentes con una enfermedad clostridial, y un cerdo (Grupo 9) no tenía lesiones burdas. Ninguno de los cerdos que murieron durante la fase postvacunación del estudio tenía lesiones consistentes con PMWS.
Se realizó una necropsia a cerdos que murieron post-enfrentamiento y a cerdos sometidos a eutanasia el Día 49. En la necropsia, no estaban presentes en ningún grupo íctero ni úlceras gástricas. Con respecto a % medio en las 20 lesiones pulmonares, el Grupo 9 tenía el % medio más bajo en las lesiones pulmonares (0%), seguido del Grupo 1 con 0,40 ± 0,50% y del Grupo 5 con 0,68 ± 1,15%. Los Grupos 2, 3, 7 y 8 tenían el % medio más alto en las lesiones pulmonares (≥ 7,27%). Cada uno de estos cuatro grupos contenía un cerdo con un % de lesiones pulmonares ≥ 71,5%, que sesgó más altos los resultados para estos cuatro grupos. Con la excepción del Grupo 9 con un 0% de lesiones pulmonares observadas, los restantes 8 grupos tenían un ≤ 36% de lesiones pulmonares.
25 Casi todas las lesiones pulmonares observadas se describieron como rojas/púrpura y se consolidaron.

Tabla 12. Sumario de la Incidencia de Íctero en el Grupo, Incidencia de Úlceras Gástricas en el Grupo, % Medio de Anotaciones de Lesiones Pulmonares en el Grupo e Incidencia de Lesiones Pulmonares en el Grupo Anotados
Grupo
Tratamiento Íctero Úlceras Gástricas % Medio de Lesiones Pulmonares Incidencia de Lesiones Pulmonares Anotadas
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 0,40 ± 0,50% 10/12 (83%)
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 7,41 ± 20,2% 10/12 (83%)
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 9,20 ± 20,9% 10/12 (83%)
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 1,5 ± 4,74% 4/11 (36%)
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 0,68 ± 1,15% 9/12 (75%)
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 2,95 ± 5,12% 7/11 (64%)
7
KV (2 dosis) 0/12 (0%) 0/12 (0%) 7,27 ± 22,9% 9/12 (75%)
8
Controles de Enfrentamiento 0/10 (0%) 0/10 (0%) 9,88 ± 29,2% 8/10 (80%)
9
Controles Estrictos Negativos 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0/11 (0%)
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
El Sumario de los Resultados de la Incidencia IHC Positiva en el Grupo se muestra en la Tabla 13. El Grupo 1 (vORF2 -16 µg) y el Grupo 5 (rORF2 -8 µg) tenían la tasa más baja de los resultados IHC positivos (16,7%). El Grupo 8 (Controles de Enfrentamiento) y el Grupo 9 (Controles Estrictos Negativos) tenían la tasa más alta de los resultados IHC positivos, 90% y 90,9%, respectivamente.
Tabla 13. Sumario de la Tasa de Incidencia IHC Positiva en el Grupo
Grupo
Tratamiento N Nº de cerdos que tenían al menos un tejido positivo para PCV2 Tasa de Incidencia
1
vORF2 -16 µg (1 dosis) 12 2 16,7 %
2
vORF2 -8 µg (1 dosis) 12 3 25,0 %
3
vORF2 -4 µg (1 dosis) 12 8 66,7 %
4
rORF2 -16 µg (1 dosis) 11 4 36,3 %
5
rORF2 -8 µg (1 dosis) 12 2 16,7 %
6
rORF2 -4 µg (1 dosis) 11 4 36,4 %
7
KV (2 dosis) 12 5 41,7 %
8
Controles de Enfrentamiento 10 9 90,0 %
9
Controles Estrictos Negativos 11 10 90,9 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Post-enfrentamiento, el Grupo 5, que recibió una dosis de 8 µg de antígeno rORF2, superó a los otros 6 grupos de vacuna. El Grupo 5 tenía la ADWG más alta (0,43 ± 0,10 kg/día), la incidencia más baja de comportamiento anormal (0%), la segunda incidencia más baja de tos (8,3%), la incidencia más baja de síntomas clínicos globales
5 (8,3%), la tasa de mortalidad más baja (0%), la tasa más baja de secreción nasal de PCV2 (8,3%), la segunda tasa más baja del % medio de lesiones pulmonares (0,68 ± 1,15%) y la tasa de incidencia más baja para tejidos positivos (16,7%). Grupos que recibían diversos niveles de antígeno rORF2 superó globalmente a grupos que recibían diversos niveles de vORF2 y el grupo que recibía 2 dosis de vacuna contra PCV2 de células enteras matadas se manifestó el peor. Las Tablas 14 y 15 contienen sumarios de datos post-enfrentamiento del grupo.
10 Tabla 14. Sumario de Datos Post-Enfrentamiento en el Grupo -Parte 1
Grupo
N Tratamiento ADWG (kg/día) Comportamiento Anormal Tos Incidencia Global de Síntomas Clínicos
1
12 vORF2 -16 µg (1 dosis) 0,39 ± 0,13% 2/12 (16,7%) 3/12 (25%) 41,7 %
2
12 vORF2 -8 µg (1 dosis) 0,32 ± 0,14% 4/12 (33,3% 1/12 (8,3% 41,7 %
3
12 vORF2 -4 µg (1 dosis) 0,22 ± 0,09% 8/12 (66,7%) 2/12 (16,7% 66,7 %
4
11 rORF2 -16 µg (1 dosis) 0,38 ± 0,14% 3/11 (27,3%) 0/11 (0%) 36,4 %
5
12 rORF2 -8 µg (1 dosis) 0,43 ± 0,10% 0/12 (0%) 1/12 (8,3% 8,3 %
6
11 rORF2 -4 µg (1 dosis) 0,33 ± 0,11% 1/11 (9,1% 0/11 (0%) 9,1 %
7
12 KV (2 dosis) 0,23 ± 0,07% 7/12(58,3) 0/12 (0%) 58,3 %
8
10 Controles de Enfrentamiento 0,34 ± 0,09% 1/10 (10%) 2/10 (20% 40 %
9
11 Controles Estrictos Negativos 0,48 ± 0,07% 0/11 (0%) 0/11 (0%) 0 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado

Tabla 15. Sumario de Datos Post-Enfrentamiento en el Grupo -Parte 2
Grupo
N Tratamiento Tasa de Mortalidad Secreción Nasal % Medio de Lesiones Pulmonares Tasa de Incidencia de al menos un tejido IHC positivo para PCV2
1
12 vORF2 -16 µg (1 dosis) 8,3 % 8,3 % 0,40 ± 0,50% 16,7 %
2
12 vORF2 -8 µg (1 dosis) 8,3 % 8,3 % 7,41 ± 20,2% 25,0 %
3
12 vORF2 -4 µg (1 dosis) 0 % 8,3 % 9,20 ± 20,9% 66,7 %
4
11 rORF2 -16 µg (1 dosis) 0 % 18,2 % 1,50 ± 4,74% 36,3 %
5
12 rORF2 -8 µg (1 dosis) 0 % 8,3 % 0,68 ± 1,15% 16,7 %
6
11 rORF2 -4 µg (1 dosis) 9,1 % 9,1 % 2,95 ± 5,12% 36,4 %
7
12 KV (2 dosis) 16,7 % 41,7 % 7,27 ± 22,9% 41,7 %
8
10 Controles de Enfrentamiento 10 % 80 % 9,88 ± 29,2% 90,0 %
9
11 Controles Estrictos Negativos 0 % 63,6 % 0/11 (0%) 90,9 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Los resultados de este estudio indican que todos los esfuerzos adicionales de vacunas deberían dirigirse a una vacuna de rORF2. En general, la secreción nasal de PCV2 fue detectada post-enfrentamiento y la vacunación con 5 una vacuna contra PCV2 dio como resultado una reducción de la secreción. La inmunohistoquímica de tejidos linfoides seleccionados servía también como un buen parámetro de la eficacia de la vacuna, mientras que grandes diferencias en la ADWG, los síntomas clínicos y las grandes lesiones no se detectaron entre grupos. Este estudio se complicó por el hecho de que PCV2 extraño se introdujo en el mismo punto durante el estudio, según se evidencia por la secreción nasal de PCV2, seroconversión de PCV2 y tejidos IHC positivos en el Grupo 9, el grupo
10 control estricto negativo.
Discusión
Siete vacunas contra PCV2 fueron evaluadas en este estudio, que incluía tres niveles de dosis diferentes de antígeno vORF2 administrada una vez al Día 0, tres niveles de dosis diferentes de antígeno rORF2 administrados una vez el Día 0 y un nivel de dosis de vacuna contra PCV2 de células enteras matadas, administrada el Día 0 y el 15 Día 14. En general, el Grupo 5, que recibía 1 dosis de vacuna que contenía 8 µg de antígeno rORF2, tenía los mejores resultados. El Grupo 5 tenía la ADWG más alta, la incidencia más baja de comportamiento anormal, la incidencia más baja de respiración anormal, la segunda incidencia más baja de tos, la incidencia más baja de síntomas clínicos globales, la tasa de mortalidad más baja, la tasa más baja de secreción nasal de PCV2, la segunda tasa más baja del % medio de lesiones pulmonares y la tasa de incidencia más baja para tejidos IHC
20 positivos.
De manera interesante, el Grupo 4, que recibió una dosis más alta de antígeno rORF2 que el Grupo 5, no se comportó tan bien ni mejor que el Grupo 5. El Grupo 4 tenía una ADWG ligera menor, una mayor incidencis de comportamiento anormal, una mayor incidencia de síntomas clínicos globales, una mayor tasa de secreción nasal
imagen17
comportamiento anormal (58,3%), la segunda incidencia global más alta de síntomas clínicos (58,3%), la tasa de mortalidad más alta (16,7%), la segunda incidencia más alta de secreción nasal (41,7%), el % medio más alto de lesiones pulmonares (9,88 ± 29,2%), una alta incidencia de lesiones pulmonares anotada (75%) y una tasa moderada de incidencia de IHC en tejidos (41,7%). Sin embargo, seguía siendo eficaz para crear una respuesta
5 inmune.
Todavía en otro aspecto de la presente invención, la secreción nasal de PCV2 se verificó como un parámetro de eficacia y se re-confirmaron a partir de estudios previos los parámetros de eficacia contra PCV2 previos. Los resultados de este estudio indican que la secreción nasal de PCV2 se produce tras un enfrentamiento intranasal y que las vacunas contra PCV2 reducen la secreción nasal de PCV2 post-enfrentamiento. Además, los resultados de
10 este estudio y los informes en la bibliografía indican que debería continuar IHC para ser evaluado también en futuros ensayos de la vacuna contra PCV2.
Algunas conclusiones adicionales que surgen de este estudio son que la linfoadenopatía es un distintivo de PMWS. Otro de los distintivos de PMWS es el agotamiento linfoide e histiocitos multinucleados/gigantes. Adicionalmente, no se observaron sucesos adversos ni reacciones en el sitio de inyección para ninguna de las 7 vacunas contra
15 PCV2, y las 7 vacunas contra PCV2 parecían ser seguras cuando se administraban a cerdos jóvenes.
Ejemplo 5
Este ejemplo somete a ensayo la eficacia de ocho vacunas candidatas contra PCV2 y reconfirma los parámetros de enfrentamiento a PCV2 de estudios de enfrentamiento anteriores después de la exposición a una cepa virulenta de PCV2. Ciento cincuenta (150) cochinillos desprovistos de calostro derivado de la cesárea (CDCD), de 6-16 días de
20 edad, se bloquearon en peso y se dividieron al azar en 10 grupos de igual tamaño. La Tabla 16 recoge el Diseño de Estudio General para este Ejemplo.

Tabla 16. Diseño de Estudio General
Grupo
Nº de Cerdos Tratamiento Día de Tratamiento KLH/ICFA el Día 22 y el Día 28 Enfrentamiento con PCV2 Virulento el Día 25 PRRSV MLV el Día 46 Necropsia el Día 50
1
15 Vacuna 1 contra PVC2 16 µg rORF2 – IMS 1314 0 y 14 + + + +
2
15 Vacuna 2 contra PVC2 16 µg vORF2 – Carbopol 0 y 14 + + + +
3
15 Vacuna 3 contra PCV2 16 µg rORF2 – Carbopol 0 y 14 + + + +
4
15 Vacuna 2 contra PCV2 16 µg vORF2 – Carbopol 0 + + + +
5
15 Vacuna 3 contra PVC2 4 µg rORF2 – Carbopol 0 y 14 + + + +
6
15 Vacuna 3 contra PVC2 1 µg rORF2 – Carbopol 0 y 14 + + + +
7
15 Vacuna 3 contra PVC2 0,25 µg rORF2 – Carbopol 0 y 14 + + + +
8
15 Vacuna 4 contra PVC2 > 8,0 log KV – Carbopol 0 y 14 + + + +
9
15 Controles de Enfrentamiento N/A + + + +
10
15 Ninguno -Grupo Control Negativo Estricto N/A + - + +
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
La formulación de vacuna dada a cada uno de los grupos era como sigue. La vacuna nº 1 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 1, era una dosis elevada (16 µg/2 ml de dosis) de antígeno ORF2 recombinante inactivado con adyuvante IMS 1314 (16 µg de rORF2 – IMS 1314). La vacuna nº 2 contra PCV2, 5 administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 2, era una dosis elevada (16 µg/2 ml de dosis) de un antígeno ORF2 de PCV2 generado por VIDO R-1 y parcialmente purificado adyuvado con Carbopol (16 µg de vORF2 – Carbopol). La vacuna nº 3 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 3, era una dosis elevada (16 µg/2 ml de dosis) de antígeno ORF2 recombinante inactivado con adyuvante Carbopol (16 µg de rORF2 – Carbopol). La vacuna nº 4 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 1 ml al Grupo 4, era una dosis elevada (16 µg/1 ml de 10 dosis) de un antígeno ORF2 de PCV2 generado por VIDO R-1 y parcialmente purificado adyuvado con Carbopol (16 µg de vORF2 – Carbopol). La vacuna nº 5 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 5, era una dosis elevada 4 µg/2 ml de dosis de un antígeno ORF2 recombinante inactivado con adyuvante Carbopol (4 µg de rORF2 – Carbopol). La vacuna nº 6 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 6, era una dosis elevada 1 µg/2 ml de dosis de un antígeno ORF2 recombinante inactivado con adyuvante Carbopol (1 µg de rORF2 15 – Carbopol). La vacuna nº 7 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 7, era una dosis baja (0,25 µg/2 ml de dosis) de antígeno ORF2 recombinante inactivado con adyuvante Carbopol (0,25 µg de rORF2 – Carbopol). La vacuna nº 8 contra PCV2, administrada a una dosis de 1 x 2 ml al Grupo 8, era una dosis elevada (título de pre-inactivación > 8,0 log/2 ml de dosis) de un antígeno Struve de PCV2 generado por VIDO R-1 inactivado convencional adyuvado con Carbopol (>8,0 log KV – Carbopol). El Día 0, los Grupos 1 -8 fueron tratados 20 con sus vacunas asignadas. Los Grupos 1-3 y 5-8 recibieron refuerzos de sus vacunas respectivas de nuevo el Día
14. La eficacia de una dosis única de 16 µg de vORF2 – Carbopol se sometió a ensayo en el Grupo 4 que no recibió un refuerzo el Día 14. Los cochinillos fueron observados en cuanto a sucesos adversos y las reacciones del sitio de inyección después de las dos vacunaciones. El Día 21 los cochinillos fueron trasladados a un segundo sitio de estudio en donde los Grupos 1-9 fueron alojados agrupados en un edificio y el Grupo 10 fue alojado en un edificio
separado. Todos los cerdos recibieron hemocianina de lapa bocallave emulsionada con adyuvante de Freund incompleto (KLH/ICFA) los Días 22 y 28. El Día 25, los Grupos 1-9 fueron enfrentados con aproximadamente 4 logs de virus PCV2 virulento. Hacia el Día 46 se habían producido muy pocas muertes en el grupo control de enfrentamiento. En un intento de inmunoestimular los cerdos y de aumentar la virulencia del material de
5 enfrentamiento de PCV2, todos los Grupos fueron tratados con INGELVAC® PRRSV MLV (Vacuna Reproductora y Respiratoria Porcina, Virus Vivo Modificado) el Día 46.
Antes y después del enfrentamiento se tomaron muestras de sangre para la serología del PCV2. Postenfrentamiento, se recogieron los datos de peso corporal para la determinación de la ganancia de peso media diaria (ADWG) y observaciones de síntomas clínicos. El Día 50, se realizó una necropsia a todos los cerdos
10 supervivientes, se registraron lesiones burdas, se puntuó a los pulmones en cuanto a la patología, y tejidos seleccionados fueron conservados en formalina para su examen por inmunohistoquímica (IHC) para la detección posterior de antígeno de PCV2.
Materiales y Métodos:
Este era un estudio de capacidad de enfrentamiento frente a la vacunación parcialmente ciego realizado en cerdos
15 CDCD, de 6 a 16 días de edad el Día 0. Para ser incluidos en el estudio, los títulos IFA de PCV2 de cerdas eran ≤ 1:1000. Adicionalmente, el estado serológico de cerdas procedía de una piara PRRS-negativa conocida. Se sometió a ensayo a dieciseis (16) cerdas en cuanto al estado serológico de PCV2 y las dieciseis (16) tenían un título de PCV2 de ≤ 1000 y fueron transferidas al primer sitio de estudio. Ciento cincuenta (150) cochinillos fueron proporcionados mediante cirugía por sección cesárea y estaban disponibles para este estudio el Día -3. El Día -3,
20 se pesaron 150 cerdos CDCD en el primer sitio de estudio, se identificaron con etiquetas de oreja, se bloquearon por el peso y se asignaron al azar a 1 de 10 grupos, según se recoge antes en la tabla 16. Muestras de sangre fueron tomadas de todos los cerdos. Si cualquier animal de ensayo que cumplía los criterios de inclusión fue enrolado en el estudio y posteriormente fue excluido por cualquier motivo, el Investigador y Monitor consultó con el fin de determinar el uso de datos recogidos del animal en el análisis final. Se documentó la fecha en la que se
25 excluyó a los cerdos enrolados y el motivo de la exclusión. No se excluyeron cerdas que cumplían con los criterios de inclusión, seleccionadas para el estudio y fueron transportadas al primer sitio de estudio. No se excluyeron cochinillos del estudio, y antes de terminar no se retiró del estudio a ningún animal de ensayo. La Tabla 17 describe los intervalos de tiempo para las actividades clave de este Ejemplo.

Tabla 17. Actividades de Estudio
Día de Estudio
Fechas Reales Actividad de Estudio
-3
04-4-03 Cerdos pesados; exam. de salud; distribuidos al azar en grupos; muestras tomadas de sangre
-3 0-21
04-4-03 07-4-03 a 27-5-03 Observados en cuanto a la salud general y en cuanto a sucesos adversos postvacunación
0
07-4-03 Administrados IVPs respectivos a los Grupos 1-8
0-7
07-4-03 14-4-03 Cerdos observados en cuanto a reacciones en los sitios de inyección
14
21-4-03 Grupos 1-3, 5-8 reforzados con IVPs respectivos; tomadas muestras de sangre de todos los cerdos
14-21
21-4-03 a 28-4-03 Cerdos observados en cuanto a reacciones de inyección
19-21
26-4-03 a 28-4-03 Todos los cerdos tratados con antibióticos
21
28-4-03 Cerdos transportados desde Struve Labs, Inc. a Veterinary Resources, Inc. (VRI)
22-50
28-4-03 a 27-5-03 Cerdos observados en cuanto a síntomas clínicos post-enfrentamiento
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inyección después de cualquier vacunación.
Los resultados de la ganancia de peso media diaria (ADWG) se presentan a continuación en la Tabla 18. De los resultados del grupo se excluyó a los Cerdos nºs 46 y 98 que murieron de hemorragia. El Grupo 4, que recibía una dosis de 16 µg de vORF2 – Carbopol, tenía la ADWG más alta (0,52 ± 0,12 kg/día), seguido de los Grupos 1, 2, 3, 5, 6 y 10 que tenían ADWGs que oscilaban entre 0,48 ± 0,10 kg/día a 0,50 ± 0,12 kg/día. El Grupo 9 tenía la ADWG más baja (0,40 ± 0,13 kg/día), seguido de los Grupos 8 y 7, que tenían ADWGs de 0,42 ± 0,14 kg/día y 0,41 ± 0,19 kg/día, respectivamente.

Tabla 18. Sumario de las Ganancias de Peso Medias Diarias (ADWG)
Grupo
Tratamiento N ADWG kg/día (Día 25 a Día 50) o ajustada para cerdos muertos antes del Día 50
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 14 0,48 ± 0,14 kg/día
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0,50 ± 0,07 kg/día
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0,48 ± 0,09 kg/día
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 0,52 ± 0,12 kg/día
5
rORF2 – 4 µg – Carbopol 1 dosis 15 0,48 ± 0,12 kg/día
6
rORF2 – 1 µg – Carbopol 2 dosis 15 0,50 ± 0,12 kg/día
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 0,45 ± 0,20 kg/día
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 0,42 ± 0,15 kg/día
9
Controles de Enfrentamiento 14 0,36 ± 0,13 kg/día
10
Controles Estrictos Negativos 15 0,48 ± 0,10 kg/día
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
10 Los resultados de la serología de PCV2 se presentan a continuación en la Tabla 19. Todos los diez (10) grupos eran seronegativos para PCV2 el Día -3. El Día 14, los títulos de PCV2 seguían bajos para los diez (10) grupos (intervalo de 50-113). El Día 25, el Grupo 8, que recibía la vacuna de virus matado de células completas tenía el título de PCV2 más alto (4617), seguido del Grupo 2, que recibía 16 µg de vORF2 – Carbopol, el Grupo 4, que recibía como dosis única 16 µg de vORF2 – Carbopol, y el Grupo 3, que recibía 16 µg de rORF2 – Carbopol, que
15 tenían títulos de 2507, 1920 y 1503, respectivamente. El Día 32 (una semana post enfrentamiento), los títulos para los Grupos 1-6 y el Grupo 8 oscilaban entre 2360 y 7619; mientras que los Grupos 7 (0,25 µg de rORF2 – Carbopol), 9 (Control de Enfrentamiento) y 10 (control estricto negativo) tenía títulos de 382, 129 y 78, respectivamente. El Día 50 (día de la necropsia), los diez (10) grupos mostró altos títulos de PCV2 (= 1257).
Los Días 25, 32 y 50, el Grupo 3, que recibía dos dosis de 16 µg de rORF2 – Carbopol tenía títulos de anticuerpos
20 mayores que el Grupo 1, que recibía dos dosis de 16 µg de rORF2 – IMS 1314. Los Días 25, 32 y 50, Grupo 2, que recibía dos dosis de 16 µg de vORF2 tenía títulos mayores que el Grupo 4, que recibía solamente una dosis de la misma vacuna. Los Grupos 3, 5, 6, 7, que recibían niveles decrecientes de rORF2 – Carbopol, de 16, 4, 1 y 0,25 µg, respectivamente, mostró títulos de anticuerpos correspondientemente decrecientes los Días 25 y 32.

Tabla 19. Sumario del Grupo de Títulos IFA de PCV2
Grupo
Tratamiento Día -3 Día 14** Día 25*** Día 32 Día 50****
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 50 64 646 3326 4314
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 50 110 2507 5627 4005
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 50 80 1503 5120 6720
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 50 113 1920 3720 1257
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 50 61 1867 3933 4533
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 50 70 490 2360 5740
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 50 73 63 382 5819
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 50 97 4617 7619 10817
9
Controles de Enfrentamiento 50 53 50 129 4288
10
Controles Estrictos Negativos 50 50 50 78 11205
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado *Para fines de cálculo, un título IFA ≤100 se designó como un título de “50"; un título IFA ≥ 6400 se designó como un título de “12.800". **Día de Enfrentamiento ***Día de la Necropsia
Los resultados de las observaciones clínicas post-enfrentamiento se presentan a continuación. La Tabla 20 incluye observaciones para el Comportamiento Anormal, Respiración Anormal, Tos y Diarrea. La Tabla 21 incluye los resultados del Sumario de Incidencia de los Síntomas Clínicos Globales del Grupo y la Tabla 22 incluye los 5 resultados del Sumario de Tasas de Mortalidad del Grupo Post-enfrentamiento. La incidencia del comportamiento anormal, respiración anormal y tos post-enfrentamiento era baja en cerdos que recibían 16 µg de rORF2–IMS 1314 (Grupo 1), 16 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 3), 1 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 6), 0,25 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 7), y en cerdos en el Grupo Control de Enfrentamiento (Grupo 9). La incidencia del comportamiento anormal, respiración anormal y tos post-enfrentamiento era cero en cerdos que recibían 16 µg de vORF2–Carbopol
10 (Grupo 2), una dosis única de 16 µg de vORF2–Carbopol (Grupo 4), 4 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 5), >8 log de KV–Carbopol (Grupo 8), y en cerdos en el Grupo Control Estricto Negativo (Grupo 10).
La incidencia global de los síntomas clínicos varió entre grupos. Los cerdos que recibían de 16 µg de vORF2– Carbopol (Grupo 2), una dosis única de 16 µg de vORF2–Carbopol (Grupo 4), y los cerdos en el grupo control estricto negativo (Grupo 10) tenía tasas de incidencia de 0%; cerdos que recibían 16 µg de rORF2–Carbopol (Grupo
15 3),y1 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 6) tenía tasas de incidencia de 6,7%; cerdos que recibían 16 µg de rORF2– IMS 1314 (Grupo 1) tenían una tasa de incidencia global de 7,1%; cerdos que recibían 4 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 5), 0,25 µg de rORF2–Carbopol (Grupo 7) y vacuna KV >8 log tenía tasas de incidencia de 13,3%; y cerdos en el Grupo Control de Enfrentamiento (Grupo 9) tenía una tasa de incidencia de 14,3%.
También variaban las tasas de mortalidad global entre grupos. El grupo 8, que recibía 2 dosis de vacuna de KV
20 tenía la tasa de mortalidad más alta de 20,0%; seguido del Grupo 9, el grupo control de enfrentamiento, y el Grupo 7, que recibía 0,25 µg de rORF2–Carbopol y tenía tasas de mortalidad de 14,3% y 13,3%, respectivamente. El Grupo 4, que recibía una dosis de 16 µg de vORF2–Carbopol tenía una tasa de mortalidad de 6,7%. Todos los otros Grupos 1, 2, 3, 5, 6 y 10 tenían una tasa de mortalidad del 0%.

Tabla 20. Sumario de Observaciones del Grupo para el Comportamiento Anormal, Respiración Anormal y Tos Post-Enfriamiento
Grupo
Tratamiento N Comportamiento Anormal1 Comporta-miento Anormal2 Tos3
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 14 0/14 (0%) 0/14 (0%) 1/14 (7,1 %)
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0/15 (0%) 0/15 (0%) 0/15 (0%)
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0/15 (0%) 0/15 (0%) 1/15 (6,7 %)
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 0/15 (0%) 0/15 (0%) 0/15 (0%)
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 15 1/15 (6,7 %) 1/15 (6,7 %) 0/15 (0%)
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 15 0/15 (0%) 0/15 (0%) 1/15 (6,7 %)
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 0/15 (0%) 1/15 (6,7 %) 1/15 (0,67 %)
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 1/15 (6,7 %) 1/15 (6,7 %) 0/15 (0%)
9
Controles de Enfrentamiento 14 1/14 (7,1 %) 1/14 (7,1 %) 2/14 (14/3%)
10
Controles Estrictos Negativos 15 0/15 (0%) 0/15 (0%) 0/15 (0%)
1Número total de cerdos en cada grupo que mostró algún comportamiento anormal durante al menos un día 2Número total de cerdos en cada grupo que mostró alguna respiración anormal durante al menos un día 3Número total de cerdos en cada grupo que mostró tos durante al menos un día
Tabla 21. Sumario de la Incidencia Global del Grupo de Síntomas Clínicos Post-Enfrentamiento
Grupo
Tratamiento N Incidencia de cerdos con Síntomas Clínicos1 Tasa de Incidencia
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 14 1 7,1 %
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0 0,0 %
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 1 6,7 %
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 0 0,0 %
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 15 2 13,3 %
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 15 1 6,7 %
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 2 13,3 %
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 2 13,3 %
9
Controles de Enfrentamiento 14 2 14,3 %
10
Controles Estrictos Negativos 15 0 0,0 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado 1Número total de cerdos en cada grupo que mostró cualquier síntoma clínico durante al menos un día

Tabla 22. Sumario de las Tasas de Mortalidad del Grupo Post-enfrentamiento
Grupo
Tratamiento N Muertes Postenfrentamiento Tasa de Mortalidad
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 14 0 0,0 %
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0 0,0 %
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 0 0,0 %
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 1 6,7 %
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 15 0 0,0 %
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 15 0 0,0 %
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 2 13,3 %
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 3 20,0 %
9
Controles de Enfrentamiento 14 2 14,3 %
10
Controles Estrictos Negativos 15 0 0,0 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
El Sumario del Porcentaje Medio de Lesiones Pulmonares y la Diagnosis Tentativa se da a continuación en la Tabla
5 23. El Grupo 9, el grupo control de enfrentamiento, tenía el porcentaje más alto de lesiones pulmonares con una media de 10,81 ± 23,27%, seguido del Grupo 7, que recibía 0,25 µg de rORF2–Carbopol y tenía una media de 6,57 ± 24,74%, el Grupo 5, que recibía 4 µg de rORF2–Carbopol y tenía una media de 2,88 ± 8,88%, y el Grupo 8, que recibía la vacuna de KV y tenía una media de 2,01 ± 4,98%. Los restantes seis (6) grupos tenían un porcentaje medio de lesiones pulmonares que oscilaba entre 0,11 ± 0,38% y 0,90 ± 0,15%.
10 El diagnóstico tentativo de neumonía variaba entre los grupos. El Grupo 3, que recibía dos dosis de 16 µg de rORF2–Carbopol, tenía el diagnóstico tentativo de neumonía más bajo, con 13,3%. El Grupo 9, el grupo control de enfrentamiento, tenía al 50% del grupo diagnosticado tentativamente de neumonía, seguido del Grupo 10, el grupo control estricto negativo y el Grupo 2, que recibieron dos dosis de 16 µg de vORF2–Carbopol, con 46,7% de 40%,
respectivamente, diagnosticado tentativamente de neumonía.
Los Grupos 1, 2, 3, 5, 9 y 10 tenían el 0% del grupo diagnosticado tentativamente como infestado con PCV2; mientras que el Grupo 8, que recibía dos dosis de vacuna KV, tenía la más alta tasa en el grupo del diagnóstico tentativo de infección por PCV2, con el 20%. El Grupo 7, que recibía dos dosis de 0,25 µg de rORF2–Carbopol, y el Grupo 4, que recibía una dosis de 16 µg de vORF2–Carbopol tenían diagnósticos de grupo tentativos de infección por PCV2 en el 13,3% y 6,7% de cada grupo, respectivamente.
Úlceras gástricas fueron sólo diagnosticadas en un cerdo en el Grupo 7 (6,7%); mientras que los otros 9 grupos permanecieron exentos de úlceras gástricas.

Tabla 23. Sumario del % Medio de Lesiones Pulmonares y Diagnóstico Tentativo en el Grupo
Grupo
Tratamiento N Nº de cerdos que secretó durante al menos un día Tasa de Incidencia
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 15 0 0 %
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 1 6,7 %
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 3 20,0 %
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 2 13,3 %
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 15 3 20,0 %
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 15 6 40,0 %
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 7 46,7 %
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 12 80 %
9
Controles de Enfrentamiento 14 14 100,0 %
10
Controles Estrictos Negativos 15 14 93,3 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
10
El Sumario de los Resultados de la Incidencia IHC Positiva en el Grupo se muestra a continuación en la Tabla 24. El Grupo 1 (16 µg de rORF2 – IMS 1314) tenía la tasa de grupo más baja de resultados IHC positivos con 0% de los cerdos positivos para PCV2, seguido del Grupo 2 (16 µg de vORF2 – Carbopol) y del Grupo 4 (dosis única de 16 µg de vORF2 – Carbopol), que tenía tasas IHC del grupo de 6,7% y 13,3%, respectivamente. El Grupo 9, el grupo
15 control de enfrentamiento, tenía la tasa de incidencia IHC positiva más alta con un 100% de los cerdos positivos para PCV2, seguido del Grupo 10, el grupo control estricto negativo, y el Grupo 8 (vacuna de KV), con 93,3% y 80% de los cerdos positivos para PCV2, respectivamente.

Tabla 24. Sumario de la Tasa de Incidencia IHC Positiva en el Grupo
Grupo
Tratamiento N Nº de cerdos que secretó durante al menos un día Tasa de Incidencia
1
rORF2 -16 µg – IMS 1314 2 dosis 15 0 0 %
2
vORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 1 6,7 %
3
rORF2 – 16 µg – Carbopol 2 dosis 15 3 20,0 %
4
vORF2 – 16 µg – Carbopol 1 dosis 15 2 13,3 %
5
rORF2 -4 µg – Carbopol 1 dosis 15 3 20,0 %
6
rORF2 -1 µg – Carbopol 2 dosis 15 6 40,0 %
7
rORF2 – 0,25 µg – Carbopol 2 dosis 15 7 46,7 %
8
KV > 8,0 log – Carbopol 2 dosis 15 12 80 %
9
Controles de Enfrentamiento 14 14 100,0 %
10
Controles Estrictos Negativos 15 14 93,3 %
vORF2 = ORF2 viral aislado; rORF2 = ORF2 expresado en baculovirus recombinante; KV o mató virus de células completos = virus PCV2 desarrollado en un cultivo celular adecuado
Discusión
En este ejemplo se evaluaron siete vacunas contra PCV2, que incluían una alta dosis (16 µg) de antígeno rORF2
5 adyuvado con IMS 1314 administrado dos veces, una alta dosis (16 µg) de antígeno vORF2 adyuvado con Carbopol administrado una vez a un grupo de cerdos y dos veces a un segundo grupo de cerdos, una alta dosis (16 µg) de antígeno rORF2 adyuvado con Carbopol administrado dos veces, una dosis de 4 µg de antígeno rORF2 adyuvado con Carbopol administrado dos veces, una dosis de 1 µg de antígeno rORF2 adyuvado con Carbopol administrado dos veces, una baja dosis (0,25 µg) de antígeno rORF2 adyuvado con Carbopol administrado dos veces, y una alta
10 dosis (> 8 log) de vacuna contra PCV2 de células enteras matadas, adyuvada con Carbopol. En general, el Grupo 1, que recibía dos dosis de 16 µg de rORF2 – IMS 1314, se comportaba ligeramente mejor que los Grupos 2 a 7, que recibían vacunas que contenían diversos niveles de antígeno vORF2 o rORF2 adyuvado con Carbopol y mucho mejor que el Grupo 8, que recibía dos dosis de vacuna contra PCV2 de células enteras matadas. El Grupo 1 tenía la tercera ADWG más alta (0,81 ± 0,14 kg/día), la incidencia más baja de comportamiento anormal (0%), la
15 incidencia más baja de respiración anormal (0%), una incidencia baja de tos (7,1%), una baja incidencia de síntomas clínicos globales (7,1%), estaba empatado con otros tres grupos en cuanto a la más baja tasa de mortalidad (0%), la segunda tasa más baja del % medio de lesiones pulmonares (0,15 ± 0,34%), la segunda tasa más baja de neumonía (21,4%) y la tasa de incidencia más baja para tejidos IHC positivos (0%). Sin embargo, el Grupo 1 era el único grupo en el que se observaban reacciones en el sitio de inyección, que incluía el 50% de los
20 vacunados 1 día después de la segunda vacunación. Las otras vacunas administradas a los Grupos 2 a 7 se comportaban mejor que la vacuna matada y casi tan bien como la vacuna administrada al Grupo 1.
El Grupo 8, que recibía dos dosis de vacuna contra PCV2 matada, adyuvada con Carbopol, tenía el peor conjunto de resultados para cualquier grupo de vacuna. El Grupo 8 tenía la ADWG más baja (0,42 ± 0,15 kg/día), la segunda tasa más alta de comportamiento anormal (6,7%), la tasa más alta de respiración anormal (6,7%), estaba empatada 25 con otros tres grupos en cuanto a la tasa de incidencia global más alta de síntomas clínicos (13,3%), tenía la más alta tasa de mortalidad de todos los grupos (20%), y tenía la tasa IHC positiva más alta (80%) de cualquier grupo de vacuna. Había preocupación que la vacuna contra PCV2 de células enteras matadas pudiera no haber sido totalmente inactivada antes de la administración al Grupo 8, que puede explicar los pobres resultados de este grupo. Desgraciadamente, los datos definitivos no estaban disponibles para confirmar esta preocupación. En
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Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2772047B1 (fr) * 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
US7700285B1 (en) 2005-12-29 2010-04-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions
US7833707B2 (en) * 2004-12-30 2010-11-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2
UA95602C2 (ru) 2004-12-30 2011-08-25 Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции
US8834891B2 (en) 2005-03-14 2014-09-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis
PT2275132T (pt) 2005-12-29 2021-05-21 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Composições imunogénicas de pcv2 multivalentes e métodos para produzir composições deste tipo
MX2008008311A (es) * 2005-12-29 2009-03-04 Boehringer Ingelheim Vetmed Uso de una composicion inmunogenica de pcv2 para reducir los sintomas clinicos en cerdos.
US20100136060A1 (en) * 2006-11-22 2010-06-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks
EP2101815A4 (en) 2006-12-11 2010-10-06 Boehringer Ingelheim Vetmed EFFICIENT PROCESS FOR THE TREATMENT OF PORCINE CIRCOVIRUS AND LAWSONIA INTRACELLULARIS INFECTIONS
EP2094872B2 (en) * 2006-12-15 2020-02-19 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Treatment of anti-PCV2 antibody seropositive pigs with PCV2 antigen
EP1941903A1 (en) 2007-01-03 2008-07-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prophylaxis and treatment of PRDC
EP1958644A1 (en) 2007-02-13 2008-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prevention and treatment of sub-clinical pcvd
US7829274B2 (en) * 2007-09-04 2010-11-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen
CL2008003813A1 (es) * 2007-12-21 2009-03-20 Zoetis W Llc Circovirus porcino; molecula de acido nucleico que lo codifica; composicion inmunogenica que lo comprende; metodo para inmunizar un cerdo contra la infeccion virica o para prevenir el sindrome postdestete de desgaste multi-sistemico (pmsw);y metodo para determinar si un mamifero tiene o esta en riesgo de desarrollar pmsw.
EP2231182A4 (en) * 2007-12-31 2012-08-22 Boehringer Ingelheim Vetmed PCV2-ORF2-VIRUSELY PARTICLES WITH FREMDAMINO-ACID INSERTION
AU2009234345B2 (en) 2008-01-23 2013-08-22 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions
US20110033495A1 (en) * 2008-02-15 2011-02-10 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods and compositions for reducing the impact of enteric diseases
TWI449533B (zh) 2008-04-18 2014-08-21 Intervet Int Bv 防備胞內勞森菌（Ｌａｗｓｏｎｉａ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ）、豬肺炎黴漿菌（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）及豬環狀病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏ ｖｉｒｕｓ）用疫苗
AR078253A1 (es) 2009-09-02 2011-10-26 Boehringer Ingelheim Vetmed Metodos para reducir la actividad antivirica en composiciones pcv-2 y composiciones pcv-2 con mejor inmunogenicidad
AU2010357208A1 (en) 2010-07-08 2013-02-21 United Biomedical, Inc. Designer peptide-based PCV2 vaccine
TWI508974B (zh) 2010-12-22 2015-11-21 Sbc Virbac Ltd 豬第二型環狀病毒(Porcine Circovirus Type 2)、含彼之免疫組合物、檢測套組及其應用
UA114503C2 (uk) 2012-04-04 2017-06-26 Зоетіс Сервісіз Ллс Комбінована вакцина pcv та mycoplasma hyopneumoniae
KR102319843B1 (ko) 2013-09-25 2021-10-29 조에티스 서비시즈 엘엘씨 Pcv2b 분지형 백신 조성물 및 사용 방법
MX373884B (es) 2013-10-02 2020-03-26 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Variante de la proteína pcv2 orf2 y partículas similares al virus compuestas por ésta.
JP6488304B2 (ja) 2013-12-03 2019-03-20 インターベット インターナショナル ベー． フェー． ローソニア・イントラセルラリス（ｌａｗｓｏｎｉａ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ）及びブタサーコウイルス（ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ）２に対するワクチン
ES2771899T3 (es) 2013-12-03 2020-07-07 Intervet Int Bv Vacuna contra circovirus porcino de tipo 2
BR112018007525A2 (pt) * 2015-10-16 2018-10-30 Kansas State University Research Foundation composições imunogênicas de circovírus suíno tipo 3 e métodos de produzir e usar as mesmas
CA3009903C (en) * 2015-12-28 2021-02-23 Agricultural Technology Research Institute Method of preparing porcine circovirus type 2 capsid protein and pharmaceutical composition comprising same
US10953084B2 (en) 2016-03-23 2021-03-23 Intervet Inc. Combination vaccine against PCV2 and PRRS virus infection comprising albumin
US11654191B2 (en) * 2016-03-23 2023-05-23 Intervet Inc. Vaccine for intradermal application against PCV2 and PRRS virus infection
WO2017162741A1 (en) 2016-03-23 2017-09-28 Intervet International B.V. A combination vaccine against pcv2 virus and mycoplasma hyopneumoniae infection
US11622872B2 (en) 2016-05-16 2023-04-11 Elixir Medical Corporation Uncaging stent
CN109561955B (zh) 2016-05-16 2021-04-16 万能医药公司 撑开支架
EA201991041A1 (ru) 2016-11-03 2019-11-29 Вакцина против свиного парвовируса и вируса свиного репродуктивного и респираторного синдрома и способы ее получения
US11311614B2 (en) 2017-04-13 2022-04-26 Intervet Inc. Vaccines containing swine pathogens for associated non-mixed use
CN109010818B (zh) * 2017-06-09 2021-11-09 普莱柯生物工程股份有限公司 一种预防和/或治疗猪圆环病毒感染的二联疫苗组合物及其制备方法和应用
EP3661548B1 (en) 2017-08-03 2024-06-26 Intervet International B.V. A vaccine comprising a pcv2 orf2 protein of genotype 2b
EP3664752B1 (en) 2017-08-11 2024-07-03 Elixir Medical Corporation Uncaging stent
CA3082033A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novo Nordisk A\S Glp-1 compositions and uses thereof
JP7162072B2 (ja) 2018-03-26 2022-10-27 ベーリンガー インゲルハイム アニマル ヘルス ユーエスエイ インコーポレイテッド 免疫原性組成物を製造する方法
KR20220004967A (ko) 2019-04-04 2022-01-12 뵈링거 잉겔하임 애니멀 헬스 유에스에이 인코포레이티드 돼지 써코바이러스 3형 (pcv3) 백신, 및 이의 제조 및 용도
BR112022004256A2 (pt) 2019-09-12 2022-06-21 Intervet Int Bv Vacina de combinação para administração intradérmica
BR112022013746A2 (pt) 2020-02-18 2022-10-11 Novo Nordisk As Formulação aquosa de cagrilintida, formulação aquosa de semaglutida, dispositivo médico, e, combinação de dose fixa
FR3107454B1 (fr) 2020-02-20 2023-02-10 Soc Dexploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic Adjuvant de vaccin comprenant un microlatex inverse
JP2023523405A (ja) 2020-04-20 2023-06-05 インターベット インターナショナル ベー． フェー． 予防的にブタを治療するワクチンの組み合わせ
BR112023001324A2 (pt) 2020-07-24 2023-02-14 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Combinação de vacina de suíno
WO2022090357A1 (en) 2020-10-29 2022-05-05 Intervet International B.V. Combination vaccine for protecting swine against various disorders

Family Cites Families (117)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US755016A (en) 1903-06-08 1904-03-22 Charles Herschel Koyl Coal-separating apparatus.
US829809A (en) 1906-04-10 1906-08-28 Arthur H Swan Peel-blade tip.
US2909462A (en) 1955-12-08 1959-10-20 Bristol Myers Co Acrylic acid polymer laxative compositions
US3479705A (en) 1966-12-15 1969-11-25 Miami Brick & Stone Inc Of Mia Molding apparatus
NL7903764A (nl) 1979-05-14 1980-11-18 Shell Int Research Werkwijze ter bereiding van calcium-houdend lood, daarmee verkregen lood en daaruit verkregen accuplaten of -roosters.
CA1247080A (en) 1983-03-08 1988-12-20 Commonwealth Serum Laboratories Commission Antigenically active amino acid sequences
ES2052685T3 (es) 1987-03-17 1994-07-16 Akzo Nv Metodo para producir un adyuvante libre.
US5069901A (en) 1988-02-03 1991-12-03 Jones Elaine V Preparation of a recombinant subunit vaccine against pseudorabies infection
WO1990007935A1 (en) 1989-01-23 1990-07-26 Auspharm International Ltd. Vaccine composition
US5155037A (en) 1989-08-04 1992-10-13 The Texas A&M University System Insect signal sequences useful to improve the efficiency of processing and secretion of foreign genes in insect systems
US5202430A (en) 1990-01-16 1993-04-13 University Of Tennessee Transmissible gastroenteritis virus genes
WO1991018627A1 (en) 1990-05-29 1991-12-12 Smithkline Beecham Corporation Swine pneumonia vaccine and method for the preparation thereof
JP3046332B2 (ja) * 1990-08-02 2000-05-29 協和醗酵工業株式会社 発酵法によるアミノ酸の製造法
US5565205A (en) * 1990-08-16 1996-10-15 Solvay Animal Health, Inc. Inactivated Mycoplasma hypopneumoniae bacterin and method of use thereof
NL9301272A (nl) 1993-07-20 1995-02-16 Aesculaap Bv Chicken Anemia Virus mutanten en vaccins en toepassingen gebaseerd op de virale eiwitten VP1, VP2 en VP3 of daarvoor coderende sequenties van dat virus.
GB9023111D0 (en) 1990-10-24 1990-12-05 Wellcome Found Expression system
CA2094515C (en) 1990-11-01 1998-09-01 Theodore T. Kramer Bacterial attenuation method and vaccine
MX9204885A (es) 1991-08-26 1994-05-31 Boehringer Animal Health Inc Composicion de vacuna que comprende virus del sindrome de infertilidad y respiratorio de los cerdos.
US6042830A (en) 1992-08-05 2000-03-28 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Viral agent associated with mystery swine disease
US5580557A (en) * 1991-10-09 1996-12-03 Iowa State University Research Foundation, Inc. Live, avirulent salmonella choleraesuis vaccine used for inducing an immune response in animals
US5338543A (en) 1992-02-27 1994-08-16 Ambico, Inc. Thimerosal inactivated mycoplasma hyopneumoniae vaccine
CN1070078C (zh) * 1993-11-24 2001-08-29 中国农科院兰州兽医研究所 口蹄疫疫苗的生产工艺
EP1820512B1 (en) * 1994-05-10 2013-07-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Improved modified live brsv vaccine
US5885823A (en) * 1995-06-05 1999-03-23 Nobl Laboratories, Inc. Lawsonia intracellularis cultivation, anti-Lawsonia intracellularis vaccines and diagnostic agents
AU4231897A (en) 1996-08-16 1998-03-06 Southwest Foundation For Biomedical Research Compositions and methods for delivery of nucleic acids to hepatocytes
EP0835930B1 (en) 1996-10-09 2001-01-31 Akzo Nobel N.V. European vaccine strains of the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)
US7211379B2 (en) * 1997-10-03 2007-05-01 Merial Sas Prevention of myocarditis, abortion and intrauterine infection associated with porcine circovirus-2
AU2002302120B2 (en) * 1997-10-03 2006-01-19 Merial Porcine circoviruses, vaccines and diagnostic reagents
US6391314B1 (en) * 1997-10-03 2002-05-21 Merial Porcine circoviruses vaccines diagnostic reagents
US6517843B1 (en) 1999-08-31 2003-02-11 Merial Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2
US7192594B2 (en) 1997-10-03 2007-03-20 Merial Limited Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine circovirus from pigs
FR2781159B1 (fr) 1998-07-06 2000-10-06 Merial Sas Vaccin circovirus et parvovirus porcin
UA78180C2 (uk) 1997-10-03 2007-03-15 Меріаль Кільцевий вірус свині типу ii, вакцини та діагностичні реагенти
US20060029617A1 (en) 1997-10-03 2006-02-09 Charreyre Catherine E Porcine circovirus and Helicobacter combination vaccines and methods of use
US20040062775A1 (en) * 1997-12-05 2004-04-01 Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD)
FR2772047B1 (fr) 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
ATE364624T1 (de) 1997-12-11 2007-07-15 Univ Saskatchewan Multisystemisches kümmerwuchssyndrom durch viren in schweine
WO1999045956A1 (en) 1998-03-13 1999-09-16 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Vaccines against circovirus infections
US6294176B1 (en) * 1998-07-10 2001-09-25 Schering-Plough Veterinary Corp. Recombinant raccoonpox virus and uses thereof as a vaccine in mammalian and avian species
DE19836659A1 (de) 1998-08-13 2000-02-17 Hoechst Schering Agrevo Gmbh Herbizide Mittel für tolerante oder resistente Baumwollkulturen
DE69933647T2 (de) 1998-11-19 2007-08-23 Azwell Inc. Rekombinante lysophosphatidsäure - phosphatase.
FR2789695B1 (fr) * 1999-02-11 2003-03-07 Merial Sas Vecteurs et vaccins viraux a base d'adenovirus porcins recombines et replicatifs
US6943152B1 (en) * 1999-06-10 2005-09-13 Merial DNA vaccine-PCV
US6497883B1 (en) * 1999-06-10 2002-12-24 Merial Porcine circovirus recombinant poxvirus vaccine
WO2001017556A1 (fr) 1999-09-07 2001-03-15 Shionogi & Co., Ltd. Préparations vaccinales administrables par les muqueuses
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921147D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
US6656478B1 (en) 1999-11-12 2003-12-02 Samuel D. Charles Cross-protective salmonella vaccines
JP2003518073A (ja) 1999-12-21 2003-06-03 メリアル クリプトスポリジウムパルヴァムと他の腸内病原体の抗原を含む組成物およびワクチン
US6808900B2 (en) 2000-06-15 2004-10-26 Manitoba, University Of Cryptosporidium parvum antigens, antibodies thereto and diagnostic and therapeutic compositions thereof
EP1290016A2 (en) 2000-06-15 2003-03-12 Purdue Research Foundation Vaccine for congenital tremors in pigs
US7018638B2 (en) 2000-12-19 2006-03-28 Wyeth Mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
MY129765A (en) 2000-12-19 2007-04-30 Wyeth Corp Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
JP2002247979A (ja) 2001-02-23 2002-09-03 Nippon Biologicals Inc マレック病ワクチンおよびその製造方法
JP4038127B2 (ja) 2001-03-27 2008-01-23 ユニバーシティ オブ サスカチュワン サーコウイルスの培養方法
US20030096377A1 (en) * 2001-06-28 2003-05-22 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Differential PCR-RFLP assay for detecting and distinguishing between nonpathogenic PCV-1 and pathogenic PCV-2
DK2027873T3 (en) 2001-07-02 2015-11-09 Zoetis Services Llc Single Dose Vaccination with Mycoplasma hyopneumoniae
US7361352B2 (en) * 2001-08-15 2008-04-22 Acambis, Inc. Influenza immunogen and vaccine
US7276353B2 (en) 2001-12-12 2007-10-02 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof
US7279166B2 (en) 2001-12-12 2007-10-09 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof
US6841364B2 (en) 2002-01-22 2005-01-11 Protatek International, Inc. Infectious cDNA clones of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and expression vectors thereof
WO2003068993A1 (en) 2002-02-14 2003-08-21 Novavax, Inc. Method for isolation and purification of expressed gene products in vitro
US20030199581A1 (en) 2002-03-13 2003-10-23 Seligson Allen L. Boswellin compositions enhanced with 3-beta-acetyl-11-keto-beta-boswellic acid ("AKBA") industrial manufacture and uses
US20030215455A1 (en) * 2002-05-14 2003-11-20 Bailey Reynolds Vaccine stabilizer and method of use
US7194472B2 (en) * 2002-07-05 2007-03-20 Sun Microsystems Inc. Extending role scope in a directory server system
US7335362B2 (en) * 2002-07-19 2008-02-26 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods of treating pre-eclampsia or eclampsia
US7223207B1 (en) 2002-09-13 2007-05-29 Simon Basyuk Exercise and massage device
AU2002951692A0 (en) 2002-09-23 2002-10-17 Vital Biotech (Hong Kong) Limited Improvements in or relating to vaccines
EP1599164B1 (en) 2003-02-03 2015-04-08 Cerebus Biologicals, Inc. Methods for treating, preventing and detecting helicobacter infection
US7563449B2 (en) 2003-04-21 2009-07-21 Pfizer Inc, Methods for reducing cattle reproductive diseases
CN1458167A (zh) 2003-06-02 2003-11-26 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 截短表达的猪圆环病毒ⅱ型衣壳蛋白抗原及其应用
US7335361B2 (en) 2003-06-09 2008-02-26 Animal Technology Institute Taiwan Fusion antigen used as vaccine
NO321276B1 (no) 2003-07-07 2006-04-18 Elkem Materials Fremgangsmate for fremstilling av triklorsilan og silisium for bruk ved fremstilling av triklorsilan
RU2354399C2 (ru) 2003-07-24 2009-05-10 Мериал Лимитед Вакцинная композиция и способ индуцирования иммунологического ответа у животного
DK1651260T4 (en) 2003-07-25 2018-10-08 Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc Lawsonia intracellularis of European origin and vaccines, diagnostic agents and methods for their use
FR2861731B1 (fr) 2003-10-30 2006-02-24 Centre Nat Rech Scient Nouvelle proteine de fixation du phosphate, compositions pharmaceutiques la contenant et ses utilisations
WO2005112995A1 (en) 2004-04-26 2005-12-01 Choongang Vaccine Laboratory Co., Ltd. Inactivated mixed vaccine for porcine respiratory disease and the method of manufacturing thereof
CN1579553A (zh) * 2004-05-18 2005-02-16 浙江大学 Ii型猪圆环病毒核酸疫苗的制备方法及其应用
KR100478845B1 (ko) 2004-06-22 2005-03-24 채찬희 돼지 이유자돈 전신성 소모성 증후군 예방 및 치료용 생물학적 조성물
JP2008505114A (ja) 2004-06-30 2008-02-21 アイディー バイオメディカル コーポレイション オブ ケベック コロナウイルス感染を処置するためのワクチン組成物
US7258075B1 (en) * 2004-08-13 2007-08-21 World Factory, Inc. Collapsible bird feeder
US7833707B2 (en) 2004-12-30 2010-11-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2
US7700285B1 (en) 2005-12-29 2010-04-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions
UA95602C2 (ru) 2004-12-30 2011-08-25 Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции
CA2587321A1 (en) * 2005-01-13 2006-07-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Improved prrs vaccines
US7300785B2 (en) 2005-02-03 2007-11-27 Universiteit Ghent Culturing circular ssDNA viruses for the production of vaccines
US8834891B2 (en) 2005-03-14 2014-09-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis
US7358075B2 (en) * 2005-04-13 2008-04-15 Merial Limited Assay for porcine circovirus production
US7691368B2 (en) 2005-04-15 2010-04-06 Merial Limited Vaccine formulations
AU2006289102C1 (en) * 2005-09-09 2017-11-30 Intervet International B.V. PCV-2 vaccine
MX2008008311A (es) * 2005-12-29 2009-03-04 Boehringer Ingelheim Vetmed Uso de una composicion inmunogenica de pcv2 para reducir los sintomas clinicos en cerdos.
PT2275132T (pt) 2005-12-29 2021-05-21 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Composições imunogénicas de pcv2 multivalentes e métodos para produzir composições deste tipo
WO2007094983A2 (en) 2006-02-03 2007-08-23 Tanox, Inc. Methods and compositions for the inhibition of hiv infection of t cells
US20100136060A1 (en) 2006-11-22 2010-06-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks
EP2101815A4 (en) 2006-12-11 2010-10-06 Boehringer Ingelheim Vetmed EFFICIENT PROCESS FOR THE TREATMENT OF PORCINE CIRCOVIRUS AND LAWSONIA INTRACELLULARIS INFECTIONS
EP2094872B2 (en) 2006-12-15 2020-02-19 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Treatment of anti-PCV2 antibody seropositive pigs with PCV2 antigen
EP1941903A1 (en) 2007-01-03 2008-07-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prophylaxis and treatment of PRDC
EP1958644A1 (en) 2007-02-13 2008-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prevention and treatment of sub-clinical pcvd
GB0712160D0 (en) 2007-06-22 2007-08-01 Univ Ghent Methods and compositions in the treatment of procine circoviral infection
US20090017064A1 (en) 2007-07-10 2009-01-15 Wyeth Methods and Compositions for Immunizing Pigs Against Porcine Circovirus
US7829274B2 (en) 2007-09-04 2010-11-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen
AU2009234345B2 (en) 2008-01-23 2013-08-22 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions
US20110033495A1 (en) 2008-02-15 2011-02-10 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods and compositions for reducing the impact of enteric diseases
US8444989B1 (en) 2008-04-18 2013-05-21 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh One dose vaccination against mycoplasma infections of pigs
US20100150959A1 (en) 2008-12-15 2010-06-17 Vectogen Pty Ltd. PCV 2-Based Methods and Compositions for the Treatment of Pigs
AR078253A1 (es) 2009-09-02 2011-10-26 Boehringer Ingelheim Vetmed Metodos para reducir la actividad antivirica en composiciones pcv-2 y composiciones pcv-2 con mejor inmunogenicidad
WO2011075379A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Multivalent vaccine against porcine teschovirus and other disease causing organisms in swine
ES2773722T3 (es) 2010-03-16 2020-07-14 Virginia Tech Intellectual Properties Inc Vacuna de circovirus porcino quimérico atenuado vivo
US9580474B2 (en) 2010-09-08 2017-02-28 The Johns Hopkins University Polyionic papilloma virus-like particle (VLP) vaccines
CN103122352B (zh) 2012-09-27 2015-02-11 华中农业大学 一种猪圆环病毒2型重组杆状病毒及制备方法和应用
US9624527B2 (en) 2013-03-01 2017-04-18 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Quantification of vaccine compositions
WO2014179200A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Orf2 protein of pcv2 subtype a (pcv2a) for use in cross-protection
US20140348874A1 (en) 2013-05-22 2014-11-27 Boehringer Ingelheim Espana, S.A. Method for the reduction of pcv-2 in a herd of swine
CN105451765A (zh) 2013-08-23 2016-03-30 勃林格殷格翰动物保健公司 猪圆环病毒2型(pcv2)亚单位疫苗
MX373884B (es) 2013-10-02 2020-03-26 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Variante de la proteína pcv2 orf2 y partículas similares al virus compuestas por ésta.
CN106255554B (zh) 2014-05-07 2021-05-04 勃林格殷格翰国际有限公司 容器、喷雾器及用途
US10555994B2 (en) 2015-03-30 2020-02-11 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. PCV2 ORF2 carrier platform

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US20160193320A1 (en) 2016-07-07
CN104474541B (zh) 2019-08-23
US20080279876A1 (en) 2008-11-13
PT3127551T (pt) 2020-10-09
US9987349B2 (en) 2018-06-05
EP2371386A1 (en) 2011-10-05
US7838214B2 (en) 2010-11-23
KR20140019479A (ko) 2014-02-14
MX356667B (es) 2018-06-08

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