DE69010162T2

DE69010162T2 - Zusammensetzung zur Behandlung von Entzündung.

Info

Publication number: DE69010162T2
Application number: DE69010162T
Authority: DE
Inventors: John Lezdey; Allan Wachter
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1989-12-04
Filing date: 1990-08-29
Publication date: 1994-10-06
Anticipated expiration: 2010-08-30
Also published as: DK0432117T3; JPH03181422A; CA2019974A1; CA2019974C; EP0432117A1; US5008242A; ATE107515T1; DE69010162D1; EP0432117B1; ES2055406T3

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Zusammensetzung zur Behandlung von mit einer bestimmten Entzündungskrankheit befallenen Säugern. Insbesondere enthält die vorliegende Zusammensetzung zur direkten oder prophylaktischen Behandlung von bestimmten Entzündungszuständen in Säugern und Vögeln alpha 1-Antichymotrypsin, seine Salze oder Derivate davon. Insbesondere werden Zusammensetzungen für topische Applikationen und zur Behandlung von Augen- und Ohrenkrankheiten bereitgestellt.
Alpha 1-Antichymotrypsin ist ein natürlich vorkommendes Protein. Wie von Meister P., Nathrath W., "Immunehistochemical Characterization of Histiocytic Tumors" Design Histonathol, 1981; 4:79-87 offenbart, kommt alpha 1-Antichymotrypsin in malignen Makrophagen vor und wurde als nützlicher immunhistochemischer Marker für Zellen der Monozyten/Makrophagenserie vorgeschlagen.
Chandra et al. offenbaren in ihrer Arbeit mit dem Titel "Sequence Homology Between Human Alpha 1-Antichymotrypsin, Alpha 1-Antitrypsin and Antithrombin III", Biochemistry, Vol. 22, Nr. 22, 25. Oktober 1983, S. 5055-5061, ein Verfahren zur Isolierung von alpha 1-Antichymotrypsin zur Anwendung in der Erfindung.
Alpha 1-Antichymotrypsin ist ein in der Leber synthetisierter Plasmaproteaseinhibitor. Es ist eine einzige Glycopeptidkette von etwa 68.000 Dalton und gehört zu einer Klasse von Serinprotease- Inhibitoren mit einer erkennbaren Affinität für Chymotrypsinartige Enzyme. Alpha 1-Antichymotrypsin ist strukturell mit alpha 1-Antitrypsin verwandt.
Das belgische Patent Nr. 830,629 (1975) offenbart und beansprucht immunologisch aktive Zusammensetzungen, die durch ein immunologisch wirksames Mittel gekennzeichnet sind, das in einem negativ geladenen Liposom eingebaut ist. Manche der so verkapselten Mittel beinhalten Virusantigene, bakterielle Antigene und dgl..
Das U.S.-Patent Nr. 4,356,167 von L.A. Kelly offenbart Liposomen- Arzneimittelabgabesysteme, die im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung verwendet werden können.
Das U.S.-Patent Nr. 4,239,754 von Sache et al. offenbart Liposomenzusammensetzungen zur oralen Verabreichung.
Die vorliegende Erfindung betrifft eine Zusammensetzung zur Behandlung von Entzündungskrankheiten in Säugern einschließlich Menschen und umfaßt alpha 1-Antichymotrypsin oder Derivate davon in einem geeigneten pharmazeutischen Träger.
Unter den Entzündungskrankheiten, die mit alpha 1-Antichymotrypsin behandelt werden können, sind die entzündlichen Knochen- und Gelenkerkrankungen, die entzündlichen Darmkrankheiten, Verbrennungen, entzündliche Hautkrankheiten oder dermatologische Erkrankungen, Augen- und Ohrenentzündungen enthalten.
Die Verwendung von alpha 1-Antichymotrypsin eignet sich besonders bei der Behandlung der verschiedenen arthritischen Erkrankungen, einschließlich derjenigen, die durch virale und bakterielle Infektionen induziert werden. Die rheumatoide Arthritis kann unter schneller Befreiung von ihren assoziierten Symptomen mit alpha 1- Antichymotrypsin behandelt werden. Es wurde auch gefunden, daß die Zusammensetzungen eine Blutgefäßverengung bewirken, die bei einer Entzündung die Schwellung und Rötung vermindert.
Unter den anderen Entzündungskrankheiten, die ebenfalls behandelt werden können, sind Augen- und Ohrenentzündungskrankheiten. Solche Krankheiten beinhalten diejenigen, die mit Bindehaut- und Cornealverletzungen assoziiert sind, einschließlich Cornealabrasionen, Blepharitis, Konjunktivitis, externe Otitis und Entzündung der Tynipanmembran.
Die Verwendung von alpha 1-Antichymotrypsin ist besonders bei der Behandlung der verschiedenen Entzündungskrankneiten der Augen und Ohren, einschließlich derjenigen, die durch virale und bakterielle Infektionen induziert werden, nützlich.
Das erfindungsgemäße Arzneimittel kann durch Klonierung mit gebräuchlichen Techniken unter Verwendung einer Oligonucleotidsonde oder einer Antikörpersonde hergestellt werden. Antiseren gegen den Cl-Esterase-Inhibitor oder alpha 1-Antichymotrypsin können als Sonde verwendet werden. Es wurde bei Untersuchungen durch Immundiffusionstests gefunden, daß der Cl-Esterase-Inhibitor nicht mit anderen nativen Proteinen in menschlichem Serum kreuzreagiert. Das erfindungsgemäße rekombinante Genprodukt ist besonders geeignet, da es bei seiner Erzeugung frei von kontaminierenden Viren ist.
Die Aktivität von alpha 1-Antichymotrypsin als entzündungshemmendes Mittel wurde durch Enzymkinetikanalyse unter Verwendung von Assoziierungs- und Kompetitionsexperimenten bestimmt. Bei einem Test gegen Chymase aus Mastzellen wurde gefunden, daß das vorliegende Mittel mindestens 30 % aktiv war. Bei Test gegen Cathepsin-G lag eine Assoziationskonstante von 6 x 10&sup7; vor. In einem kompetitiven Test gegen Chymase aus Mastzellen lag eine Assoziationskonstante von 3 x 10&sup7; vor.
Die Salze und Derivate können unter Verwendung gebräuchlicher Techniken, die bei anderen Proteinen bekannt sind, ohne Beeinträchtigung der Nützlichkeit der Verbindung gebildet werden. Es können ähnlich wie bei anderen Proteinen oder Peptiden die Alkalimetallsalze, Säure-Additionssalze und Ester hergestellt werden.
Bei topischer Applikation eignet sich alpha 1-Antichymotrypsin in einer geeigneten Zusammensetzungsform bei der Behandlung von Verbrennungen und entzündlichen Hautkrankheiten, umfassend Psoriasis, Ekzem und Akne. Es wurde gefunden, daß die Verbindung die Chymase aus menschlichen Hautmastzellen inhibiert.
Die Verwendung eines nicht-wäßrigen, Lipid-mischbaren, z.B. wie etwa mit Liposomen hergestellten Trägers ist besonders vorteilhaft, da für eine verbesserte Aktivität an den Behandlungstellen gesorgt wird.
Es ist daher ein Ziel der Erfindung, eine entzündungshemmende Zusammensetzung bereitzustellen, welche die mit entzündlichen Krankheiten verbundene Schwellung und Rötung mildern kann.
Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, eine entzündungshemmende Zusammensetzung bereitzustellen, die für den menschlichen Körper gut verträglich und frei von Nebenwirkungen ist.
Die Ziele der vorliegenden Erfindung können erreicht werden durch Verabreichung von gereinigtem alpha 1-Antichymotrypsin in geeigneter pharmazeutischer Form an Patienten, die an Entzündungskrankheiten leiden.
Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen beinhalten diejenigen, die in einer zur oralen, topischen oder parenteralen Anwendung geeigneten Form vorgesehen sind und zur Behandlung einer Entzündung in Säugern einschließlich Menschen verwendet werden können.
Die vorliegende Erfindung stellt eine pharmazeutische Zusammensetzung bereit, welche die erfindungsgemäße Verbindung und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger enthält. Die Verbindung kann alleine oder in Kombination mit anderen Serinprotease-Inhibitoren verwendet werden, um ein breites Behandlungsspektrum vorzusehen Vorzugsweise wird alpha 1-Antitrypsin verwendet.
Die oben beschriebenen Verbindungen können wirksam eingesetzt werden, wenn sie topisch dem Auge in einer Konzentration von etwa 0,05 % bis 5 % auf Gewichtsbasis appliziert werden. Die Verbindungen können verschiedenen Arten von ophthalmischen Formulierungen gemäß bekannten Techniken zugesetzt werden. Ophthalmische Lösungen und Suspensionen sind die bevorzugten Dosierungsformen. Typischerweise werden solche Dosierungsformen mit Natriumchlorid auf Isotonie eingestellt. Verdickungsmittel wie etwa Carboxymethylcellulose oder Carbopol können ebenfalls zur Verbesserung der Abgabe verwendet werden. Der pH-Wert solcher Dosierungsformen wird typischerweise auf den Bereich zwischen 6,0 und 8,0 mit HCl oder NaOH eingestellt.
Einheitsdosierungszusammensetzungen, die eine Verbindung dieser Erfindung enthalten und zur oralen Verabreichung vorgesehen sind, bilden einen weiteren vorteilhaften Zusammensetzungaspekt dieser Erfindung. Bei hohen Dosierungen sind oral verabreichbare Zusammensetzungen geeignet, da synergistisch wirksame Blutkonzentrationen erwartet werden können. Bei geringeren Dosierungen können solche Zusammensetzungen zur Behandlung von Entzündungen im Uvealtrakt verwendet werden.
Günstigerweise ist das Gewicht der erfindungsgemäßen Verbindung in einer erfindungsgemäßen Einheitsdosierungsform von 50 bis 500 mg und insbesondere von 50 bis 250 mg.
Im allgemeinen ist die Gesamtmenge von in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung vorhandenem entzündungshemmendem Mittel nicht größer als 1500 mg und üblicherweise zwischen 100 und 1000 mg.
Normalerweise werden zwischen 500 und 3000 mg der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen pro Behandlungstag (einem durchschnittlichen Erwachsenen von 70 kg) verabreicht. Ähnliche Mengen können verabreicht werden, um das Auftreten der Erkrankung zu vermeiden.
Bei der Behandlung von chronischen Fällen einer Entzündung des Uvealtrakts und posteriorer Uveitis, wie etwa im Fall von onteriorer Uveitis, werden dem Patienten typischerweise intravenös 15 bis 90 mg alpha 1-Antichymotrypsin-Verbindung pro kg Körpergewicht wöchentlich mit einer Rate von 2 mg/kg/Minute zusammen mit Augentropfen verabreicht.
Es ist besonders vorteilhaft, die alpha 1-Antichymotrypsin-Verbindung in Liposomen zu verabreichen. Bei Verabreichung des Arzneimittels durch intravenöse Injektion in Form von Liposomen gibt es eine raschere Infusionsaufnahme. Solche Zusammensetzungen können gebräuchliche pharmazeutisch verträgliche Materialien wie etwa Verdünnungsmittel, Binder, Farbstoffe, Aromastoffe, Schutzmittel, Sprengmittel und dgl. gemäß der gebräuchlichen pharmazeutischen Praxis in der einem Fachmann auf dem Gebiet der Formulierung von Antibiotika wohlbekannten Weise enthalten.
Injizierbare oder durch Infusion verabreichbare Zusammensetzungen einer erfindungsgemäßen Verbindung eignen sich besonders, da hohe Blutkonzentrationen der Verbindung nach Verabreichung durch Injektion oder Infusion auftreten können. Ein bevorzugter Zusammensetzungsaspekt dieser Erfindung umfaßt somit eine erfindungsgemäße Verbindung in steriler Form.
Die injizierbare Lösung der erfindungsgemäßen Verbindung kann in einer sterilen, Pyrogen-freien Flüssigkeit, wie etwa Wasser, wäßrigem Ethanol oder dgl. hergestellt werden.
Eine alternative Methode zur Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen ist die Verwendung einer injizierbaren Suspension. Solche Suspensionen können in sterilem Wasser, steriler Salzlösung oder dgl. hergestellt werden und sie können auch Suspendiermittel, wie etwa Polyvinylpyrrolidon, Lecithin oder dgl. (z.B. in der im belgischen Patent Nr. 839109 beschriebenen Weise) enthalten. Alternativ können solche Zusammensetzungen in einem verträglichen öligen Suspendiermittel, wie etwa Arachisöl oder einem Äquivalent davon, hergestellt werden.
Einheitsdosierungszusammensetzungen, die eine erfindungsgemäße Verbindung enthalten und zur oralen Verabreichung vorgesehen sind, bilden einen weiteren bevorzugten Zusammensetzungsaspekt dieser Erfindung. Oral verabreichbare Zusammensetzungen sind geeignet, da bei hohen Dosierungen synergistisch wirksame Blutkonzentrationen erwartet werden können, und bei geringeren Dosierungen können solche Zusammensetzungen zur Behandlung von Entzündungen verwendet werden, die im Gastrointestinaltrakt lokalisiert sind.
Es ist besonders vorteilhaft, das alpha 1-Antichymotrypsin in Liposomen zu verabreichen. Bei Verabreichung des Arzneimittels durch intravenöse Injektion in Liposomenform findet man eine schnellere Aufnahme des Arzneimittels in der Leber und in der Milz sowie im Skelettmuskel. Diese schnelle Aufnahme eignet sich besonders im Zusammenhang mit Leberentzündungen und zur Behandlung am Ort der Arthritis.
Das Arzneimittel in Liposomen kann oral verabreicht werden, um die Magenbarriere zu überwinden und eine Zersetzung im Magen zu verhindern. Die Liposomenform sorgt auch für eine Verzögerungswirkung, um eine verlängerte Aktivität vorzusehen.
Jede nicht-toxische, physiologisch verträgliche, metabolisierbare Flüssigkeit, die zur Bildung von Liposomen in der Lage ist, kann zur Durchführung der Erfindung verwendet werden. Die Liposomen können hergestellt werden, wie von W.R. Hargreaves und D.W. Deamer, "Conference on Liposomes and Their Use in Biology and Medicine", 14.-16. Sept. 1977, N.Y. Academy of Sciences, offenbart, worauf hiermit Bezug genommen wird.
Die folgenden Beispiele veranschaulichen weiterhin die Durchführung dieser Erfindung, sie sollen aber nicht als deren Beschränkung aufgefaßt werden. Es ist ersichtlich, daß die Auswahl der tatsächlichen Mengen an spezifischem alpha 1-Antichymotrypsin, die einem individuellen Patienten (Mensch oder Tier) verabreicht werden sollen, innerhalb des Ermessens des verabreichenden Arztes (oder Tierarztes) liegen und auf eine angemessene Weise verschrieben werden, wobei die geeigneten Dosierungen vom Alter, Gewicht, Geschlecht, Krankheitsstadium des Patienten und ähnlichen Faktoren abhängen, die nur dem behandelnden Arzt bekannt sind. Die Zusammensetzungen können über den G.I.-Trakt, parenteral, z.B. durch IV-Infusion und durch Injektion abhängig von der zu behandelnden Krankheit verabreicht werden.

BEISPIEL I

Gemäß der Prozdur von U.S.-Patent Nr. 4,239,754 wird eine Lipidphase, die aus den drei Komponenten Lecithin, Cholesterin und Dicetylphosphat in einem Molverhältnis von 7:2:1 gebildet ist, mit 2,6 g Lecithin, 0,44 g Cholesterin und 0,31 g Dicetylphosphat durch Auflösen in 50 ml Chloroform und Eindampfen der Lösung hergestellt; 4,0 g alpha 1-Antichymotrypsin werden in 50 ml eines Säurepuffers (Zitronensäure) pH 7,5 - 8,0 aufgelöst und den Phospholipiden zugesetzt. Die Mischung wird dann für 10 Sekunden einer Ultraschallbehandlung ausgesetzt.
Anstelle von Cholesterin können beliebige Sterole, die zur Bildung von Liposomen in der Lage sind, verwendet werden, wie etwa z.B. Desmosterol, Östradiol, B-Sitosterol und dgl..
Die Zusammensetzung ist wirksam zur Behandlung systemischer Krankheiten.

BEISPIEL II

Tabletten werden hergestellt wie folgt:
Alpha 1-Antichymotrypsin 216 mg
Phospholipon 100 400 mg
Aerosil 50 mg
Na-Carboxymethylcellulose 15 mg
Cuttina H 12 mg
Mikrokristalline Cellulose 150 mg
Die oben aufgelisteten Substanzen werden vermischt, gepreßt und die so gepreßten Körper werden auf eine an sich bekannte Weise mit 20 mg Hydroxypropylmethylcellulosephthalat in einer Beschichtungstrommel beschichtet.

BEISPIEL III

Kapseln werden hergestellt wie folgt:
Alpha 1-Antitrpysin 54 mg
Alpha 1-Antichymotrypsin 54 mg
Phospholipon 80 200 mg
Talkum 3 mg
Magnesiumstearat 3 mg
Mikrokristalline Cellulose 100 mg
Aerosil 25 mg
Die oben aufgelisteten Substanzen werden granuliert und in Kapseln (500 mg Hartgelatinekapseln) gefüllt.
Anstelle von alpha 1-Antichymotrypsin können beliebige wasserlösliche Salze davon verwendet werden.

BEISPIEL IV

Es wird eine ophthalmische und otische Lösung einer Borsäure- Natriumborat-Lösung hergestellt und auf einen pH-Wert zwischen 6 und 8 mit Natriumhydroxid neutralisiert. Alpha 1-Antichymotrypsin wird zur Bildung einer 0,5 %igen Lösung zugesetzt.
Die Lösung kann bei der Behandlung von Konjunktivitis und "Schwimmerohr" verwendet werden.
Sofern gewünscht, können andere Serinprotease-Inhibitoren zugegeben werden, z.B. alpha 1-Antitrypsin, um ein breites Behandlungsspektrum vorzusehen.

BEISPIEL V

Eine topische Creme wurde hergestellt wie folgt:
A. Die folgende Mischung wurde hergestellt:
Wirkstoff 1,0 g
Olivenöl 5,0 g
Cetanol 2,0 g
Stearinsäure 5,0 g
Glycerinester einer aliphatischen Säure 12,0 g
Tween 60 5,0 g
B. Die folgende Mischung wurde ebenfalls hergestellt:
Propylenglycol 5,0 g
Methylparaben 0,1 g
Propylparaben 0,02 g
gereinigtes Wasser auf 100 g insgesamt
Die Mischung der Teile A und B wurde auf übliche Weise zusammengemischt, um insgesamt 100 g einer 100 Gew.-%igen topischen Creme zu ergeben, die zur Behandlung von Akne, Ekzem, Psoriasis oder anderen Entzündungskrankheiten der Haut verwendet werden könnte.

BEISPIEL VI

Eine ölhaltige, wasserfreie Salbe wurde mit der folgenden Zusammensetzung hergestellt: Zusammensetzung Wirkstoff Sojaphosphatid Plastibase 50 W Butyliertes Hydroxytoluol
Sofern gewünscht, kann anstelle von alpha 1-Antichymotrypsin als Wirkstoff die Kombination von alpha 1-Antichymotrypsin und alpha 1-Antitrypsin verwendet werden. Andere nicht-wäßrige, Lipidmischbare Träger können ebenfalls verwendet werden.

Claims

1. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Verwendung bei der Behandlung von Entzündungskrankheiten in Säugern einschließlich Menschen, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine wirksame Menge von alpha 1-Antichymotrypsin, seiner Salze oder Derivate und einen pharmazeutischen Träger umfaßt.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine wirksame Menge von mindestens einem anderen Serinprotease-Inhibitor enthält.

3. Zusammensetzung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß der andere Serinprotease-Inhibitor alpha 1-Antitrypsin ist.

4. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß das alpha 1-Antichymotrypsin ein rekombinantes Produkt ist.

5. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Träger eine isotonische Lösung ist.

6. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Träger ein nicht-wäßriger, Lipid-mischbarer Träger ist.

7. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Behandlung von Entzündungskrankheiten des Auges und des Ohrs.

8. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Behandlung von rheumatoider Arthritis.

9. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Behandlung einer Entzündung der Haut.