DE19845798A1

DE19845798A1 - Verwendung von Neoangiogenese-Markern für Diagnose und Therapie von Tumoren, diese enthaltende Mittel, sowie Verfahren zu deren Herstellung

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Publication number: DE19845798A1
Application number: DE19845798A
Authority: DE
Inventors: Werner Krause; Peter Muschick
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1998-09-29
Filing date: 1998-09-29
Publication date: 2000-04-13
Also published as: AU1264200A; WO2000018439A2; WO2000018439A3

Abstract

Die Erfindung betrifft die Verwendung von Konjugaten aus Neoangiogenese-Markern und Wirkgruppen zur Diagnose und/oder Therapie von Tumoren sowie neue Neoangiogenese-Marker-Konjugate, diese Verbindungen enthaltende Mittel und Verfahren zu ihrer Herstellung.

Description

Die Erfindung betrifft den in den Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand, das heißt die Verwendung von Konjugaten aus Neoangiogenese-Markern bzw. Teilsequenzen von Neoangionese-Markern und Wirkgruppen zur Diagnose und Therapie von Tumoren.

Benigne und maligne Tumoren sind eine der weitverbreitesten Krankheiten in den Industrienationen. Maligne Formen stellen eine der häufigsten Todesursachen dar. Eine Behandlung von Tumoren erfolgt derzeit auf drei unterschiedlichen Wegen. Diese sind chirurgische Entfernung des Tumors, Chemotherapie und Strahlentherapie. Die genannten Methoden sind jedoch mit einer Vielzahl von Nachteilen behaftet und führen nur in einer sehr begrenzten Anzahl von Fällen zum Erfolg. Bei der chirurgischen Entfernung eines Tumors sind wesentliche Voraussetzungen die eindeutige Lokalisierung der Läsion und die gute Zugänglichkeit des zu operierenden Bereiches. Bei der Chemotherapie sind in aller Regel gravierende systemische Nebenwirkungen in Kauf zu nehmen. In der Strahlentherapie tritt häufig der Fall ein, daß hypoxische Tumoren nicht auf die Therapie ansprechen bzw. daß nicht-hypoxische Läsionen im Verlauf der Therapie hypoxisch werden und nicht vollständig zerstört werden können. Es kommt dann in aller Regel zu einem Rezidiv.

Stand des Wissens ist, daß Tumore für ihre Versorgung auf Blutgefäße angewiesen sind (J. Folkman, Ann. Intern. Med. 1975, 82: 96-100; J. Folkman, R.S. Cotran, Int. Rev. Exp. Path. 1976, 16 : 53-65). Um schneller wachsen zu können, sezernieren Tumore Substanzen, die zu Gefäßneubildung (Neovaskularisierung) führen (M.A.J. Gimbrone et al., J. Exp. Med. 1972, 136: 261-276). Bekannte Inhibitoren des Gefäßwachstums sind Angiostatin (M.S. O'Reilly et al., Cell 1994, 79: 315-328) und Endostatin (M.S. O'Reilly et al., Cell 1997, 88: 277-285). Die Therapie von Tumoren mit diesen Wachstumsinhibitoren führte in Tiermodellen zu gewissen Erfolgen, die aber noch nicht als ausreichend anzusehen sind (M.S. O'Reilly et al., Nat. Med. 1996, 2: 689-692). Taxol (Paclitaxel) hat sich in Tierversuchen als sehr wirksamer Angiogeneshemmer erwiesen, vor allem für Brusttumoren. Epothilone binden noch besser an Rezeptoren, die im Angiogeneseprozeß eine Rolle spielen und können sogar Taxol aus seiner Bindung verdrängen (D.M. Bollag et al., Cancer Res. 1995, 55: 2325-2333). Epothilone zeichnen sich durch eine hohe cytotoxische Aktivität aus (G. Höfle et al., Angew. Chem. 1996, 108: 1671-1673; M.R. Grever et al., Semin. Oncol. 1992, 35: 1567-1569). Ein Beispiel für einen Rezeptor, der ausschließlich in neu gebildeten Gefäßen exprimiert wird und nicht in Gefäßen, die während des normalen Wachstums entstehen, ist Thy-1 (Lee et al., Circ. Res. 1998, 82: 845-851). Antikörper gegen Thy-1 sind daher spezifische Marker für Neoangiogenese. Der natürliche Ligand für Thy-1 ist bisher nicht bekannt. Weiterhin wurden gentherapeutische Ansätze beschrieben, die auf die Unterbindung der Neovaskularisierung abzielen (F. Griselli et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95: 6367-6372). Aber auch diese Verfahren haben bislang jedoch nicht zu überzeugenden Erfolgen geführt.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung war es daher, Verbindungen zu finden, die zur therapeutischen Behandlung von Tumoren geeignet sind und die die Nachteile der Vorgehensweise des Standes der Technik überwinden.

Diese Aufgabe wird durch die vorliegende Erfindung gelöst.

Es wurde gefunden, daß Konjugate aus Neoangiogenese-Markern, und einer oder mehrerer Wirkgruppen hervorragend zur Diagnose und Therapie von Tumoren geeignet sind.

Die Erfindung betrifft somit neue Konjugate aus Neoangiogenese-Markern und mindestens einer Diagnose- und/oder Wirkgruppe, Verfahren zu deren Herstellung, diese Konjugate enthaltende Mittel, sowie deren Verwendung in der Diagnostik und Therapie.

Es wurde gefunden, daß Konjugate aus Neoangiogenese-Markern, und einer Wirk- bzw. Diagnostikgruppe sich nach systemischer (intravenöser oder intraarterieller) oder lokaler (intersititieller oder intratumoraler) Injektion in Geweben anreichern, in denen vermehrt Neoangiogenese stattfindet. Neoangiogenese-Marker sind Verbindungen, die sich speziell in Gebieten von Gefäßneubildungen anreichern, die nicht mit Bereichen der natürlichen Gefäßbildung in der embryonalen Phase (Angiogenese) identisch sind. Neoangiogenese findet praktisch ausschließlich in Tumoren statt (Lee et al., Circ. Res. 1998; 82: 845-851).

Überraschenderweise behalten die Neoangiogenese-Marker trotz Kopplung an eine Wirkgruppe ihre hohe Spezifität, so daß auch bei geringer Dosierung eine therapeutisch wirksame Anreicherung der Wirkgruppe am Zielort erreicht werden kann. Auch ist die Verweilzeit der Konjugate lang genug, um den gewünschten therapeutischen Effekt zu erzielen. Die Konzentration in anderen Geweben erreicht bei dieser Dosierung keine toxische Konzentrationen, insbesondere auch deswegen, weil die nicht an die Rezeptorzellen bindenden Wirkgruppen enthaltenden Konjugate überraschend schnell aus dem Körper eliminiert werden und damit die durch ungebundenes Konjugat verursachte Belastung für den Patienten minimal ist. Die beobachteten systemischen Nebenwirkungen sind daher gering.

Überraschenderweise werden darüber hinaus einige der erfindungsgemäßen Konjugate nach Bindung an die Rezeptoren als Substanz-Rezeptor Komplex in die Zelle aufgenommen. Somit gelingt es nicht nur, die Wirkgruppen gezielt an den Krankheitsherd zu transportieren, sondern auch intrazellulär zu deponieren. Vor allem bei solchen Wirkgruppen, welche weniger gut verträglich sind und vornehmlich intrazellulär ihre Wirkungen erzielen, ist dies für eine Therapie von entscheidendem Vorteil.

Als Neoangiogenese-Marker seien beispielhaft die folgenden Verbindungen genannt: VEGF, bFGF, MoAB BC-1, Paclitaxel und Derivate, Bcl2, Epothilon und Derivate und gegen den auf dem Endothel neu gebildeter Gefäße exprimierten Rezeptor Thy-1 gerichtete Antikörper oder Antikörperfragmente bzw. am Rezeptor bindende Substrate. Außerdem kommen in Frage die angiogenen Faktoren SF (Scatter-Factor; HGF), TGFα (Transforming Growth Factor), EGF (Epidermal Growth Factor), B61, IL-8, Angiopoietin-1, Angiogenin sowie die antiangiogenen Faktoren TGF-β, Lymphotoxin, Interferon-γ, Plättchen-Faktor-4-Fragment, Fumagillin (AGM 1470), SCE (Shark Cartilage Extract), 16-kDa Prolactin-Fragment, Angiopoietin-2, Thrombospondin, Angiostatin, Endostatin, Interferon-γ-induzierbares Protein 10 (IP-10), 2-Methoxyestradiol und Genistein.

Als Wirkgruppen kommen in Frage Chemotherapeutika, radio- oder photosensibilisierende Wirkgruppen wie z. B. Nitroimidazol oder Porphyrine, Antikörper, Antikörperfragmente, Peptide, Kohlehydrate oder Oligonukleotide. Die Wirkgruppen können aber auch radioaktive Metallisotope und deren Metallkomplexe sowie radioaktive Isotope verschiedener Nichtmetalle sein, wobei letztere entweder direkt oder über einen geeigneten Rest an den Neoangiogenese-Marker gebunden sind.

Erfindungsgemäß verwendbar sind Konjugate mit einer oder mehreren Wirkgruppen, die über geeignete Träger, z. B. Polymere, gebunden sein können.

Als Chemotherapeutika seien beispielhaft genannt Vinblastin, Doxorubicin, Bleomycin, Methotrexat, 5-Fluoruracil, 6-Thioguanin, Cytarabin, Cyclophosphamid und Cisplatin, sowie weitere konventionelle Chemotherapeutika (siehe z. B. Cancer: Principles and Practice of Oncology, 2nd ed., V.T. De Vita, Jr., S. Hellman, S.A. Rosenberg, J.B. Lippincot Co., Philadelphia, PA, 1985, Kapitel 14). Unter den genannten bevorzugt ist Cisplatin bzw. Platinderivate.

Als Wirkgruppe geeignet sind weiterhin in experimentellen Studien verwendeten Arzneimittel, wie z. B. Mercaptopurin, N-Methyl-Formamid, 2-Amino-1,3,4-thiadiazol, Melphalan, Hexamethylmelanin, Galliumnitrat, 3% Thymidin, Dichlormethotrexat, Mitoguazon, Sumarin, Bromdeoxyuridin, Ioddeoxyuridin, Semustin, 1-(2-Chlorethyl)-3-(2,6-di oxo-3-piperidyl)-1-nitrosoharnstoff, N,N'-Hexamethylen-bis-acetamid, Azacitidin, Dibromdulcitol, Erwinia-Asparaginase, Ifosfamid, 2-Mercaptoethansulfonat, Teniposid, 3-Deazauridin, löslicher Baker's Folsäureantagonist, Homoharringtonin, Cyclo-Cytidin, Acivicin, ICRF-187, Spiromustin, Levamisol, Chlorozotocin, Aziridinylbenzochinon, Spirogermanium, Aclarubicin, Pentostatin, PALA, Carboplatin, Amsacrin, Caracemid, Iproplatin, Misonidazol, Dihydro-5-azacytidin, 4'-Deoxy-doxorubicin, Menogaril, Triciribinphosphat, Fazarabin, Tiazofurin, Teroxiron, Ethiofos, N-(2-Hydroxyethyl)-2-ni tro-1H-imidazol-1-acetamid, Mitoxantron, Acodazol, Amonafid, Fludarabinphosphat, Pibenzimol, Didemnin B, Merbaron, Dihydrolenperon, Flavon-8-essigsäure, Oxantrazol, Ipomeanol, Trimetrexat, Deoxyspergualin, Echinomyzin und Dideoxycytidin (vgl., NCl Investigational Drugs, Pharmaceutical Data 1987, NIH Publicatin No. 88-2141, Revised November 1987).

Als Wirkgruppe geeignet sind weiterhin Antisense-Oligonukleotide; Aptamer- Oligonukleotide; PTK-Blocker wie z. B. Quercetin, Genistein, Erbstatin, Lavendustin A, Herbimycin A oder Aeoplysinin-1 oder synthethische PTK-Blocker wie z. B. Tyrphostine, S-Aryl-Benylidenmalononitril-Verbindungen oder Benzylidenmalononitril (BMN)-Verbindungen.

Als Wirkgruppen kommen auch in Frage Radionuklide enthaltende Gruppen. Erfindungsgemäß einsetzbare Radionuklide umfassen Alpha-, Beta- und/oder Gamma-Strahler, Positronen-Strahler, Auger-Elektronen-Strahler, Röntgen-Strahler und Fluoreszenz-Strahler, wobei beta- oder alpha-Strahler für therapeutische Zwecke bevorzugt sind.

Entsprechende Radionuklide sind dem Fachmann bekannt und umfassen Radionuklide der Elemente Ag, As, At, Au, Ba, Bi, Br, C, Co, Cr, Cu, F, Fe, Ga, Gd, Hg, Ho, I, In, Ir, Lu, Mn, N, O, P, Pb, Pd, Pm, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y.

Da bei β-Emittern der Dosisabfall sehr steil ist, sind Isotope die sowohl β- als auch γ-Strahlung emittieren (z. B. Rhenium-, Yttrium- oder Indiumisotope) besonders bevorzugt.

Die Bindung des Radionuklids und den Neoangiogenese-Marker-Rest erfolgt entweder direkt oder - insbesondere bei metallischen Radionukliden, wie z. B. einem Nuklid der Elemente Ag, As, Au, Bi, Cu, Ga, Gd, Hg, Ho, In, Ir, Lu, Pb, Pd, Pm, Pr, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y - über einen entsprechenden Komplexbildner, der an den Neoangiogenese-Marker gekoppelt ist.

Auf Grund ihrer leichten Detektierbarkeit eignen sich Konjugate mit Radionukliden besonders gut, da der Therapieerfolg leicht mit radiodiagnostischen Methoden überwacht werden kann.

Als radiosensibilisierende Wirkgruppen kommen bevorzugt in Frage Nitroimidazolderivate oder andere Verbindungen, die in der Lage sind, bei Bestrahlung mit Röntgenstrahlen freie Radikale abzuspalten.

Als photosensibilisierende Wirkgruppen kommen bevorzugt in Frage Porphyrinderivate oder andere Verbindungen, die in der Lage sind, bei Bestrahlung mit Licht freie Radikale abzuspalten.

Somit betrifft die Erfindung neue Neoangiogenese-Marker-Konjugate der Formel I

N-(L-W)_n (I)

oder der Formel II

(N-L¹)_n-P-(L²-W)_m (II)

worin N für einen Neoangiogenese-Marker-Rest abgeleitet von Neoangiogenese- Markern, Neoangiogenese-Marker-Teilsequenzen, Neoangiogenese-Rezeptor- Agonisten oder Antagonisten steht, L¹ und L² für eine direkte Bindung oder ein Brückenglied, P für ein Polymer und W für eine Wirkgruppe steht, die ein Radionuklid der Elemente Ag, As, At, Au, Ba, Bi, Br, C, Co, Cr, Cu, F, Fe, Ga, Gd, Hg Ho, I, In, Ir, Lu, Mn, N, O, P, Pb, Pd, Pt, Pm, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y enthält oder die abgeleitet ist von einem Arzneimittel, Chemotherapeutikum, PTK- Blocker, Wachstumsfaktorenhemmer, einem Anti-Proliferativum oder einem Antikörper, Antikörperfragment, Peptid, Kohlenhydrat, Oligonucleotid, und n für die Ziffern 1 bis 100 steht.

Als Neoangiogenese-Marker-Rest seien bevorzugt die folgenden Verbindungen bzw. Derivate von diesen Verbindungen genannt: VEGF, bFGF, MoAB BC-1, Paclitaxel und Derivate, Bcl2, Epothilon und Derivate und gegen den auf dem Endothel neu gebildeter Gefäße exprimierten Rezeptor Thy-1 gerichtete Antikörper oder Antikörperfragmente bzw. am Rezeptor bindende Substrate. Außerdem kommen in Frage die angiogenen Faktoren SF (Scatter-Factor; HGF), TGFα (Transforming Growth Factor), EGF (Epidermal Growth Factor), B61, IL-8, Angiopoietin-1, Angiogenin sowie die antiangiogenen Faktoren TGF-β, Lymphotoxin, Interferon-γ, Plättchen-Faktor-4-Frag ment, Fumagillin (AGM 1470), SCE (Shark Cartilage Extract), 16-kDa Prolactin- Fragment, Angiopoietin-2, Thrombospondin, Angiostatin, Endostatin, Interferon-γ-in duzierbares Protein 10 (IP-10), 2-Methoxyestradiol und Genistein.

Als Brückenglieder kommen in Frage Kohlenwasserstoffketten, evtl. unterbrochen durch oder substituiert mit Heteroatomen, Zucker, Peptide oder Oligonucleotide.

Als Polymere geeignet sind dendritische Polymere mit reaktiven Gruppen in der Außenschale, z. B. Aminogruppen, wie sie in WO 93/14147, WO 93/12073, WO 95/02008, WO 95/20619, WO 95/24221, WO 96/02588, EP 684044, EP 672703 und US 5,530,092 beschrieben sind, Polysaccharide wie z. B. Dextran (vgl. EP 0 326 226), Hydroxyethylstärke, Polypeptide wie z. B. Polylysin, das linear oder dendritisch aufgebaut sein kann oder Polynucleotide.

Als Wirkgruppe W seien genannt die Radionuklide der Elemente Ag, As, At, Au, Ba, Bi, Br, C, Co, Cr, Cu, F, Fe, Ga, Gd, Hg, Ho, I, In, Ir, Lu, Mn, N, O, P, Pb, Pd, Pt, Pm, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y.

Für die Wirkgruppe W kommen auch in Frage radio- oder photosensibilisierende Wirkgruppen wie z. B. Nitroimidazole oder Porphyrine.

Als Arzneimittel seien beispielhaft genannt Mercaptopurin, N-Methyl-Formamid, 2-Amino-1,3,4-thiadiazol, Melphalan, Hexamethylmelanin, Galliumnitrat, 3% Thymidin, Dichlormethotrexat, Mitoguazon, Sumarin, Bromdeoxyuridin, Ioddeoxyuridin, Semustin, 1-(2-Chlorethyl)-3-(2,6-dioxo-3-piperidyl)-1-nitrosoharnstoff, N,N'-Hexamethylen-bis-acet amid, Azacitidin, Dibromdulcitol, Erwinia-Asparaginase, Ifosfamid, 2-Mercaptoethansulfonat, Teniposid, Taxol, 3-Deazauridin, löslicher Baker's Folsäureantagonist, Homoharringtonin, Cyclo-Cytidin, Acivicin, ICRF-187, Spiromustin, Levamisol, Chlorozotocin, Aziridinylbenzochinon, Spirogermanium, Aclarubicin, Pentostatin, PALA, Carboplatin Amsacrin, Caracemid, Iproplatin, Misonidazol, Dihydro-5-azacytidin, 4'-Deoxy-doxorubicin, Menogaril, Triciribinphosphat, Fazarabin, Tiazofurin, Teroxiron, Ethiofos, N-(2-Hydroxyethyl)-2-nitro-1H-imidazol-1-acetamid, Mitoxantron, Acodazol, Amonafid, Fludarabinphosphat, Pibenzimol, Didemnin B, Merbaron, Dihydrolenperon, Flavon-8-essigsäure, Oxantrazol, Ipomeanol, Trimetrexat, Deoxyspergualin, Echinomyzin oder Dideoxycytidin.

Als Chemotherapeutika seien beispielhaft genannt Vinblastin, Doxorubicin, Bleomycin, Methotrexat, 5-Fluoruracil, 6-Thioguanin, Cytarabin, Cyclophosphoamid und vorzugsweise Cisplatin.

Als Wirkgruppe geeignet sind weiterhin Wachstumsfaktorenhemmer wie z. B. Anti- PDGF [z. B. Triazolopyrimidin (Trapidil®)]; Angiostatin, Endostatin, Anti-Proliferativa wie z. B. Colchizin, Angiopeptin, Estradiol oder Antisense-Oligonukleotide; Aptamer- Oligonukleotide; PTK-Blocker wie z. B. Quercentin, Genistein, Erbstatin, Lavendustin A, Herbimycin A oder Aeoplysinin-1 oder synthethische PTK-Blocker wie z. B. Tyrphostine, S-Aryl-BenyIidenmalononitril-Verbindungen oder Benzylidenmalononitril (BMN)-Verbindungen.

Die Verknüpfung der Wirkgruppen mit den Neoangiogenese-Markern erfolgt je nach Wirkgruppe in an sich bekannter Weise. Dabei können auch geeignete Brückenglieder eingebaut sein, wie z. B. Diamine oder Polyamine, Alkohole, Carbonsäuren oder gemischte Brückengliedern aus Aminen, Alkoholen und/oder Carbonsäuren.

So können Tyrosin-Kinase-Hemmer (PTK-Blocker) vom Typ der Tyrphostine z. B. über ihre phenolischen OH-Gruppen an die Peptide von Neoangiogenese-Markern gebunden werden, indem diese zunächst mit cyclischen Anhydriden von aliphatischen und aromatischen Dicarbonsäuren verestert werden und anschließend mit dem N- Terminus des Peptids amidverknüpft werden.

Die Verknüpfung von Cisplatin an Neoangiogenese-Marker erfolgt analog zu der von Bogdanov et al. (Bioconjugate Chem. 7 (1996) 144-149) beschriebenen Methode.

Die zur Einführung von Wirkstoffen durchgeführte Addition oder Acylierung wird mit Derivaten durchgeführt, die das gewünschte Chelat eventuell gebunden an eine Fluchtgruppe enthalten, oder aus denen der gewünschte Substituent durch die Reaktion generiert wird. Als Beispiele für Additionsreaktionen seien die Umsetzung von Isocyanaten und Isothiocyanaten genannt, wobei die Umsetzung von Isocyanaten bevorzugt in aprotischen Solventien, z. B. THF, Dioxan, DMF, DMSO, Methylenchlorid bei Temperaturen zwischen 0 und 100°C, bevorzugt zwischen 0 und 50°C, gegebenenfalls unter Zusatz einer organischen Base wie Triethylamin, Pyridin, Lutidin, N-Ethyldiisopropylamin, N-Methylmorpholin, durchgeführt wird. Die Umsetzung mit Isothiocyanaten wird in der Regel in Lösungsmitteln wie z. B. Wasser oder niederen Alkoholen wie z. B. Methanol, Ethanol, Isopropanol oder deren Mischungen, DMF, oder Mischungen aus DMF und Wasser bei Temperaturen zwischen 0 und 100°C, bevorzugt zwischen 0 und 50°C, gegebenenfalls unter Zusatz einer organischen Base wie Triethylamin, Pyridin, Lutidin, N-Ethyldiisopropylamin, N-MethylmorphoIin oder Erdalkali-, Alkalihydroxyden wie z. B. Lithium-, Natrium-, Kalium-, Calciumhydroxyd oder deren Carbonate, wie z. B. Magnesiumcarbonat, durchgeführt.

Beispiele für Acylierungsreaktionen sind die Umsetzung von freien Carbonsäuren nach den dem Fachmann bekannten Methoden (z. B. J.P. Greenstein et al., Chemistry of the Amino Acids, John Wiley & Sons, N.Y., 1961, S. 943-5). Als vorteilhaft hat sich jedoch erwiesen, die Carboxylgruppe vor der Acylierungsreaktion in eine aktivierte Form wie z. B. Anhydrid, Aktivester oder Säurechlorid zu überführen (z. B. E. Gross et al., The Peptides, Academic Press, N.Y. 1979, vol. 1, S. 65-314; N.F. Albertson, Org. React. 1962, 12: 157).

Im Falle der Umsetzung mit Aktivester sei auf die dem Fachmann bekannte Literatur (z. B. Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Band E5, 1985, S. 633) verwiesen. Sie kann unter den oben für die Anhydridreaktion angegebenen Bedingungen durchgeführt werden. Es können aber auch aprotische Lösungsmittel wie z. B. Methylenchlorid oder Chloroform verwendet werden.

Bei Säurechlorid-Umsetzungen werden nur aprotische Lösungsmittel wie z. B. Methylenchlorid, Chloroform, Toluol oder THF bei Temperaturen zwischen -20 bis 50°C, bevorzugt zwischen 0 und 30°C, verwendet. Weiterhin sei auf die dem Fachmann vertraute Literatur (z. B. Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Band 15/2, 1974, S. 355-364) verwiesen.

Schutzgruppen für Carboxylgruppen, die nicht reagieren sollen und während der Umsetzung mit Wirkgruppen oder Neoangiogenese-Markern kurzzeitig geschützt werden sollen, sind Ester mit niederen Alkoholen wie Alkyl-, Aryl- oder Aralkylalkoholen, z. B. Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Phenyl-, Benzyl-, Diphenylmethyl-, Triphenylmethyl-, bis-(p-Nitrophenyl)-methylalkohol sowie Trialkylsilylgruppen.

Die gegebenenfalls gewünschte Abspaltung der Schutzgruppen erfolgt nach den dem Fachmann bekannten Verfahren, z. B. durch Hydrolyse, Hydrogenolyse, alkalische Verseifung der Ester mit Alkali in wäßrig-alkoholischer Lösung bei Temperaturen von 0 bis 50°C oder im Fall von tert.-Butylestern mit Hilfe von Trifluoressigsäure.

Die Einführung der gewünschten Metallionen in Chelate, bei denen die Wirkstoffe einen Metallkomplex enthalten, erfolgt wie z. B. in DE 34 01 052 beschrieben, indem man das Metalloxid oder ein Metallsalz (z. B. das Nitrat, Acetat, Carbonat, Chlorid oder Sulfat) des Elements in Wasser und/oder einem niederen Alkohol (z. B. Methanol, Ethanol oder Isopropanol) löst oder suspendiert und mit der Lösung oder Suspension der äquivalenten Menge des komplexbildenden Liganden umsetzt und anschließend, falls gewünscht, vorhandene acide Wasserstoffatome der Säuregruppen durch Kationen von anorganischen und/oder organischen Basen, Aminosäuren oder Aminosäureamiden substituiert.

Die Einführung der gewünschten Metallionen kann sowohl auf der Stufe der Komplexbildner, d. h. vor der Kopplung an P oder W, als auch nach der Kopplung der unmetallierten Liganden erfolgen.

Die Herstellung der Verbindungen aus Formel II erfolgt dadurch, daß man Polymere, die reaktive Gruppen, z. B. Aminogruppen, Hydroxylgruppen oder Carboxylgruppen enthalten, die zusätzlich noch aktiviert sein können, zunächst mit Neoangiogenese- Markern, die ebenfalls aktiviert sein können und anschließend mit evtl. aktivierten Wirkstoffen umsetzt. Beispiele für aktivierte Carboxylgruppen sind Anhydride, p-Nitophenylester, N-Hydroxysuccinimidester, Pentafluorphenylester und Säurechloride. Ihre Herstellung und Umsetzung zu den Endprodukten ist dem Fachmann geläufig.

Die Herstellung der für die Kopplung an N und W benötigten und terminale reaktive Gruppen, z. B. Aminogruppen, tragenden Polymere kann im allgemeinen von käuflichen bzw. nach oder analog literaturbekannter Methoden herstellbaren Polymeren, z. B. stickstoffhaltigen Kaskadenstartern, wie z. B. Ethylendiamin oder Butylendiamin, erfolgen. Die Einführung nachfolgender Generationen erfolgt nach literaturbekannten Methoden (z. B. J. March, Advanced Organic Chemistry, 3^rd ed., John Wiley & Sons, 1985, S. 364-381) durch Acylierungs- bzw. Alkylierungsreaktionen mit die gewünschten Strukturen aufweisenden geschützten Aminen, die zur Bindung an den Kaskadenkern befähigte funktionelle Gruppen wie z. B. Carbonsäuren, Isocyanate, Isothiocyanate oder aktivierte Carbonsäuren (wie z. B. Anhydride, Aktivester, Säurechloride) bzw. Halogenide (wie z. B. Chloride, Bromide, Iodide), Aziridin, Mesylate, Tosylate oder andere dem Fachmann bekannte Fluchtgruppen enthalten.

Die Reinigung der Endverbindungen nach Formel II erfolgt, gegebenenfalls nach Einstellung des pH-Wertes durch Zusatz einer Säure oder Base auf pH 6 bis 8, bevorzugt pH 7, vorzugsweise durch Ultrafiltration mit Membranen geeigneter Porengröße (z. B. Amicon®XM30, Amicon®Ym10, Amicon®YM3) oder Gelfiltration an z. B. geeigneten Sephadex®-Gelen.

Ein weiterer Aspekt der Erfindung betrifft Mittel enthaltend ein in Wasser gelöstes, suspendiertes oder emulgiertes Neoangiogenese-Marker-Konjugat und die in der Galenik üblichen Zusätze und Stabilisatoren. Die Konzentration des Konjugats im Mittel beträgt je nach Anwendung 0,0001 bis 1,0 Mol/l. Sofern das Neoangiogenese- Marker-Konjugat als Wirkgruppe einen Komplex mit einem kurzlebigen Radioisotop trägt, werden die entsprechenden Mittel als Kit bereitgestellt, wobei in einem Behälter der Neoangiogenese-Marker gekoppelt an den metallfreien Komplexbildner vorliegt. Zu diesem wird unmittelbar vor der Verabreichung das gewünschte Radioisotop gegeben.

Die Mittel werden bevorzugt systemisch, d. h. intravenös oder intraarteriell appliziert. So erlaubt diese Applikationsart, daß auch Metastasen oder solche Läsionen, die noch sehr klein sind und diagnostisch nicht erfaßt werden können, aber besonders gut z. B. auf die Therapie mit Tyrosinkinasehemmern, Antimetaboliten oder ionisierender Strahlen ansprechen, gezielt erreicht werden können.

Alternativ können die Mittel auch über einen speziellen Katheter lokal an die Läsion verbracht werden. Dadurch wird kurzfristig eine mehr als 1000fach höhere Konzentration am gewünschten Ort als nach intravenöser Applikation erreicht (Levitzki 1992, FASEB 6, 3275-3282) und eine weitere Steigerung der Selektivität erzielt.

Weitere Möglichkeiten ergeben sich durch lokale Verabreichungsarten, wie z. B. interstitelle Injektion oder die Verabreichung direkt in einen Tumor.

Die jeweils applizierte Menge richtet sich nach der jeweiligen Wirkgruppe und der Größe der Läsion. Als orientierender oberer Grenzwert kann ein Wert angenommen werden, wie er auch bei Verabreichung des reinen Wirkstoffs verwendet werden würde. Aufgrund des wirkungsverstärkenden Effekts sowie der Möglichkeit den Wirkstoff spezifisch (über einen Katheter) einzubringen, liegt die erforderliche Dosis im allgemeinen jedoch weit unter diesem oberen Grenzwert.

Die nachfolgenden Beispiele dienen der näheren Erläuterung des Erfindungsgegenstandes, ohne ihn auf diese beschränken zu wollen.

Beispiel 1 Verknüpfung von Erbstatin mit Paclitaxel

Erbstatin wird umgesetzt mit Bernsteinsäureanhydrid in aprotischen Solventien wie THF unter Zusatz einer nukleophil-freien Base wie Diispropyl-ethylamin. Das entstandene Ammoniumsalz des Bernsteinsäure-monophenylesters wird ohne weitere Aufreinigung mit Paclitaxel unter Zusatz von DCCl und N-Hydroxysuccinimid umgesetzt. Nach Abtrennung des ausgefallenen Dicyclohexylharnstoffs werden die flüchtigen Komponenten abgetrennt und das Produkt durch Chromatographie gereinigt.

Beispiel 2 Verknüpfung von Carboxylgruppen enthaltenden Wirkstoffen mit Thy-1-Antikörpern a) Herstellung von Antikörpern gegen Thy-1

Die Herstellung von Antikörpern gegen Thy-1 erfolgt wie in der Literatur beschrieben (Lee et al., Circ. Res. 1998; 82: 845-851).

b) Verknüpfung von Carboxylgruppen enthaltenden Wirkstoffen mit Thy-1-Antikörpern

Carboxylgruppen enthaltende Wirkstoffe werden in DMF mit dem Thy-1-Antikörper unter Zusatz von DCCl und N-Hydroxysuccinimid (NHS) umgesetzt. Nach Abtrennung des ausgefallenen Dicyclohexylharnstoffs wird NHS durch Extraktion mit Bicarbonatlösung abgetrennt, das DMF abgezogen und das Produkt chromatographisch gereinigt.

Beispiel 3 Verknüpfung von N',N',N''',N'''-Tetrakis(tert.-butyloxycarboxy-methyl)-N''-(hydroxy carboxy-methyl)-diethylen-triamin mit Thy-1-Antikörpern a) Herstellung von Antikörpern gegen Thy-1

b) NHS-Ester des N',N',N''',N'''-Tetrakis(tert.-butyloxycarboxy-methyl)-N''-(hydroxy carboxy-methyl)-diethylen-triamins

10 mmol N',N',N''',N'''-Tetrakis(tert.-butyloxycarboxy-methyl)-N''-(hydroxy-carboxy methyl)-diethylen-triamin und 10 mmol N-Hydroxy-succinimid werden in 90 ml absolutem Dimethylformamid gelöst. Anschließend tropft man 10 mmol Dicyclohexylcarbodiimid, gelöst in 10 ml absoluten Dimethylformamid, zum Reaktionsgemisch. Man rührt 30 min bei Raumtemperatur, filtriert und erhält eine 0.1 molare Lösung des NHS-Esters. Diese wird für die folgenden Kopplungsreaktionen ohne weitere Aufreinigung eingesetzt.

c) N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydmxy-carboxy-methyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylin triamino]-Thy-1-Antikörper

10 mg Thy-1-Antikörper werden in 100 ml DMF in Lösung gebracht. Unter Argonatmosphäre tropft man 10 ml einer 0.1 molaren Lösung des NHS-Esters des N',N',N''',N'''-Tetrakis(tert.-butyloxycarboxy-methyl)-N''-(hydroxy-carboxy-methyl)-di ethylen-triamins (hergestellt wie unter Beispiel 3a beschrieben) hinzu und rührt das Reaktionsgemisch 6 h bei Raumtemperatur. Anschließend wird filtriert und das Lösungsmittel im Vakuum verdampft. Zur Spaltung der tert.-Butylester wird der weiße Rückstand mit 150 ml eines Gemisches aus Trifluoressigsäure: Anisol: Ethandithiol (95 : 2,5 : 2,5) behandelt. Anschließend wird im Vakuum bei Raumtemperatur aufkonzentriert (ca. 15-20 ml) und auf 150 ml absoluten Diethylether gegossen. Der weiße Niederschlag wird abgesaugt und durch Chromatographie an Kieselgel RP-18 aufgereinigt.

c) In-111-Komplex des N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis-(hydrnxycarboxy-me thyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylen-triamino]-Thy-1-Antikörper

1 mg N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydroxy-carboxy-methyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylin-tri amino]-Thy-1-Antikörper (Beispiel 3b) wird in 1 ml 0.1 molarer Natriumacetat-Lösung (pH = 6) gelöst und mit 1 mCi Indium-111-tri-chlorid-Lösung (Amersham) versetzt. Man läßt das Reaktionsgemisch 10 min bei Raumtemperatur stehen. Die Markierungsausbeute wird durch HPLC-Analytik bestimmt und ist größer als 95%.

d) Y-90-Komplex des N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydroxy-carboxy-me thyl)-N'-(carboxy-methyl)-diethylen-triamino]-Thy-1-Antikörper

1 mg N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydroxy-carboxy-methyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylen-tri amino]-Thy-1-Antikörner (Beispiel 3b) wird in 1 ml 0.1 molarer Natriumacetat-Lösung (pH = 6) gelöst und mit 1 mCi Yttrium-90-trichlorid (Amersham) versetzt. Man läßt das Reaktionsgemisch 10 min bei Raumtemperatur stehen. Die Markierungsausbeute wird durch HPLC-Analytik bestimmt und ist größer 94%.

e) Rhenium-186-N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis (hydroxy-carboxy-me thyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylen-triamino]-Thy-1-Antikörper

1 mg N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydroxy-carboxy-methyl)-N''-(carboxy-methyl)-diethylen-tri amino]-Thy-1-Antikörper in 600 µl Phosphatpuffer (Na₂HPO₄, 0,5 mol/l, pH = 8,5) werden mit 100 µl einer 0.15 molaren Trinatriumcitratdihydrat-Lösung, 500 µCi 186-Perrhenat-Lösung und abschließend mit 5 µl einer 0.2 molaren Zinn(II)chlorid-Di hydratlösung versetzt. Man inkubiert 10 min bei Raumtemperatur. Die Analytik der Markierung erfolgt mittels HPLC.

Beispiel 4 Technetium-99m-markierter Thy-1-Antikörper Herstellung von Antikörpern gegen Thy-1

b) DTPA-Thy-1

Eine Lösung von 50 mg Thy-1-Antikörper in 50 ml Wasser wird mit 1 N Natronlauge auf einen pH-Wert von 9,5 eingestellt. Anschließend gibt man DTPA-Monoanhydrid monoethylester hinzu, wobei der pH-Wert der Reaktionslösung durch Zugabe von 1 N Natronlauge konstant bei 9,5 gehalten wird. Nach beendeter Zugabe wird noch 15 Minuten bei Raumtemperatur nachgerührt und anschließend der pH-Wert der Reaktionslösung durch Zugabe von 32%iger Natronlauge auf 11,5 eingestellt. Nach einer Reaktionszeit von 12 Stunden bei Raumtemperatur wird mit destilliertem Wasser auf ein Gesamtvolumen von 200 ml aufgefüllt. Die so erhaltene Produktlösung wird dreimal mittels einer YM3-Ultrafiltrationsmembran (cut-off 3000 Da; Amicon®) gegen destilliertes Wasser ultrafiltriert. Der verbleibende Rückstand wird mit entionisiertem Wasser auf ein Volumen von 500 ml aufgefüllt und die wäßrige Produktlösung gefriergetrocknet.

c) Technetium-99m-DTPA-Thy-1-Antikörper

1 mg DTPA-Thy-1-Antikörper in 600 µl Phosphatpuffer (Na₂HPO₄, 0,5 mol/l, pH = 8,5) werden mit 100 µl einer 0.15 molaren Trinatriumcitratdihydrat-Lösung, 500 µCi 99m-Pertechnetat-Lösung und abschließend mit 5 µl einer 0.2 molaren Zinn(II)chlorid-Di hydratlösung versetzt. Man inkubiert 10 min bei Raumtemperatur. Die Analytik der Markierung erfolgt mittels HPLC.

Beispiel 5 Jodmarkierter Thy-1-Antikörper a) Herstellung von Antikörpern gegen Thy-1

b) Jodmarkierung von Thy-1-Antikörpern

Die Markierung von Antikörpern mit radioaktivem Jod (I-123, I-125 oder anderen Jodisotopen) ist dem Fachmann geläufig.

Beispiel 6 Polymer mit Metallkomplex und Thy-1-Antikörper a) Herstellung des Polymers

Ein Kaskadenpolymer erhalten aus Diaminobutan und nachfolgender Umsetzung mit Vinylcyanid mit 32 terminalen Aminogruppen wird in WO 93/14147, WO 93/12073, WO 95/02008, WO 95/20619, WO 95/24221, WO 96/02588, EP 684044, EP 672703 oder US 5,530,092 beschrieben hergestellt oder - alternativ - käuflich erworben (Firma DSM, Niederlande).

b) Kopplung des Metallkomplexes

Ein aktiviertes Chelat auf der Basis von Cyclen, Gly-Me-DOTA (10-[1-Car boxymethylcarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyclododecan-1,4,7-triessigsäure-tri-tert-bu tylester) mit drei durch tert.-Butylgruppen geschützten Carboxylgruppen wird wie in DE 39 38 992 beschrieben mit dem Polymer umgesetzt. Die Reaktion der Aminogruppen mit der Carboxylgruppe von Gly-Me-DOTA erfolgt dabei durch Vermittlung von Dicyclohexylcarbodiimid. Es wird darauf geachtet, daß die molare Menge an Gly-Me-DOTA so gewählt wird, daß nicht alle derivatisierbaren Aminogruppen des Polymers umgesetzt werden.

c) Kopplung des Thy-1-Antikörpers

Der in Beispiel 2a hergestellte Thy-1-Antikörper wird mit der in Beispiel 6b erhaltenen Verbindung unter Vermittlung von Dicyclohexylcarbodiimid in Analogie zur Umsetzung mit dem Chelatbildner umgesetzt.

Alternativ können der Chelatbildner und der Thy-1-Antikörper auch in einem Schritt mit dem Polymer umgesetzt werden, wobei darauf zu achten ist, daß die molaren Mengen der beiden Reaktanden so gewählt werden, daß sie kleiner sind als die Summer der molaren Menge an derivatisierbaren Aminogruppen des Polymers.

d) Technetium-99m-Gly-Me-DOTA-Thy-1-Antikörper-Polymer-Konjugat

Die Markierung der in Beispiel 6c erhaltenen Verbindung mit radioaktivem Technetium-99m erfolgt wie in Beispiel 4c beschrieben. Dabei werden 1 mg Gly-Me-DOTA-Thy-1-An tikörper-Polymer-Konjugat in 600 µl Phosphatpuffer (Na₂HPO₄, 0,5 mol/l, pH = 8,5) mit 100 µl einer 0.15 molaren Trinatriumcitratdihydrat-Lösung, 500 µCi 99m-Pertechnetat-Lösung und abschließend mit 5 µl einer 0.2 molaren Zinn(II)chlorid-Di hydratlösung versetzt. Man inkubiert 10 min bei Raumtemperatur. Die Analytik der Markierung erfolgt mittels HPLC.

Beispiel 7 Diagnose von Tumoren mittels Gammakamera

Narkotisierte weiße Neuseeländer-Kaninchen (3-4 kg) mit implantierten Tumoren (VX2) erhalten eine intravenöse Injektion einer Lösung von Rhe nium-186-N-[N',N',N''',N'''-Tetrakis(hydroxy-carboxy-methyl)-N''-(carboxy-methyl)-di ethylen-triamino]-Thy-1-Antikörper mit einer Aktivität von 10 MBq in einem Volumen von 1 ml. Über einen Zeitraum von 1 h, nach 2, 4, 6, 8,12 und 24 Stunden werden Szintigramme mit einer handelsüblichen Gammakamera angefertigt. Die Tumoren werden anhand der erhöhten Strahlungsintensität identifiziert.

Claims

1. Verwendung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I)
N-(L-W)_n (I)
worin
N für einen Neoangiogenese-Marker und
L für eine direkte Bindung oder ein Brückenglied und
W für eine Wirkgruppe steht, die ein Radionuklid ist oder die abgeleitet ist von einem Komplex mit radioaktivem Metallisotop oder für eine Verbindung steht, die radio- oder photosensibilisierende Wirkgruppen enthält, oder für ein Arzneimittel steht, und
n für die Ziffern 1 bis 100 steht,
oder der allgemeinen Formel (II)
(N-L¹)_n-P-(L²-W)_m (II)
worin
N für einen Neoangiogenese-Marker und
L¹ für eine direkte Bindung oder ein Brückenglied und
L² gleich L¹ ist oder für eine direkte Bindung oder ein Brückenglied steht und
W für eine Wirkgruppe steht, die ein Radionuklid ist oder die abgeleitet ist von einem Komplex mit radioaktivem Metallisotop oder für eine Verbindung steht, die radio- oder photosensibilisierende Wirkgruppen enthält, oder für ein Arzneimittel steht,
P für ein Polymer steht,
n für die Ziffern 1 bis 100 steht und
m für die Ziffern 1 bis 100 steht,
als Diagnostikum und/oder als Therapeutikum zur Behandlung von Tumoren.

2. Verwendung nach Anspruch 1, worin der Neoangiogenese-Marker VEGF, bFGF, MoAB BC-1, Paclitaxel, Bcl2, Epothilon und Derivate dieser Marker oder gegen den auf dem Endothel neu gebildeter Gefäße exprimierten Rezeptor Thy-1 gerichtete Antikörper oder Antikörperfragmente bzw. am Rezeptor bindende Substrate ist.

3. Verwendung nach Anspruch 1, worin der Neoangiogenese-Marker die angiogenen Faktoren SF (Scatter-Factor; HGF), TGFα (Transforming Growth Factor), EGF (Epidermal Growth Factor), B61, IL-8, Angiopoietin-1, Angiogenin sowie die antiangiogenen Faktoren TGF-β, Lymphotoxin, Interferon-γ, Plättchen-Fak tor-4-Fragment, Fumagillin (AGM 1470), SCE (Shark Cartilage Extract), 16-kDa Prolactin-Fragment, Angiopoietin-2, Thrombospondin, Angiostatin, Endostatin, Interferon-γ-induzierbares Protein 10 (IP-10), 2-Methoxyestradiol und Genistein umfaßt.

4. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin die Wirkgruppe einen Alpha-, Beta- und/oder Gamma-Strahler, Positronen-Strahler, Auger-Elektronen- Strahler, Röntgen-Strahler und/oder einen Fluoreszenz- oder Phosphoreszenz- Strahler enthält.

5. Verwendung nach Anspruch 4, worin die Wirkgruppe ein Radionuklid der Elemente Ag, As, At, Au, Ba, Bi, Br, C, Co, Cr, Cu, F, Fe, Ga, Gd, Hg, Ho, I, In, Ir, Lu, Mn, N, O, P, Pb, Pd, Pt, Pm, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y enthält.

6. Verwendung nach Anspruch 4, worin die Wirkgruppen sich ableitet von einem Metallkomplex eines Radionuklids der Elemente Ag, As, Au, Bi, Cu, Ga, Gd, Hg, Ho, In, Ir, Lu, Pb, Pd, Pm, Pr, Re, Rh, Ru, Sb, Sc, Se, Sm, Sn, Tb, Tc oder Y.

7. Verwendung nach einem der Ansprüche 4 bis 6, worin das Radionuklid ¹⁸⁸Re, ⁹⁰Y oder ¹¹¹In ist.

8. Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Wirkstoff W eine radiosensibilisierende Verbindung darstellt.

9. Verwendung nach Anspruch 8, wobei der Wirkstoff W ein Nitroimidazolderivat darstellt.

10. Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Wirkstoff W eine photosensibilisierende Verbindung darstellt.

11. Verwendung nach Anspruch 10, wobei der Wirkstoff W ein Porphyrinderivat darstellt.

12. Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel ein Chemotherapeutikum, PTK-Blocker, Wachstumsfaktorenhemmer, Anti-Proliferativum, Oligonucleotid, Antikörper, Antikörperfragment, Peptid oder Kohlenhydrat ist.

13. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe Vinblastin-, Doxorubicin-, Bleomycin-, Methotrexat-, 5-Fluoruracil-, 6-Thioguanin-, Cytarabin-, Cyclophosphamid- oder ein Cisplatin-Rest ist.

14. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe sich ableitet von einem Quercentin-, Genistein-, Erbstatin-, Lavendustin A-, Herbimycin A-, Aeoplysinin-1-Tyrphostine-, S-Aryl-Benylidenmalononitril- oder Benzylidenmalononitril-Rest.

15. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe sich ableitet von einem Mercaptopurin-, N-Methyl-Formamid-, 2-Amino-1,3,4-thiadiazol-, Melphalan-, Hexamethylmelanin-, Galliumnitrat-, 3% Thymidin-, Dichlormethotrexat-, Mitoguazon-, Sumarin-, Bromdeoxyuridin-, Ioddeoxyuridin-, Semustin, 1-(2-Chlor ethyl)-3-(2,6-dioxo-3-piperidyl)-1-nitrosoharnstoff-, N,N'-Hexamethylen-bis-acet amid-, Azacitidin-, Dibromdulcitol-, Erwinia-Asparaginase-, Ifosfamid, 2-Mercaptoethansulfonat-, Teniposid-, Taxol-, 3-Deazauridin-, Folsäureantagonist, Homoharringtonin-, Cyclo-Cytidin-, Acivicin-, ICRF-187-, Spiromustin-, Levamisol-, Chlorozotocin-, Aziridinylbenzochinon-, Spirogermanium-, Aclarubicin-, Pentostatin-, PALA-, Carboplatin-, Amsacrin-, Caracemid-, Iproplatin-, Misonidazol-, Dihydro-5-azacytidin-, 4'-Deoxy-doxorubicin-, Menogaril-, Triciribinphosphat-, Fazarabin-, Tiazofurin-, Teroxiron-, Ethiofos-, N-(2-Hy droxyethyl)-2-nitro-1H-imidazol-1-acetamid-, Mitoxantron-, Acodazol-, Amonafid-, Fludarabinphosphat-, Pibenzimol-, Didemnin B-, Merbaron-, Dihydrolenperon-, Flavon-8-essigsäure-, Oxantrazol-, Ipomeanol-, Trimetrexat-, Deoxyspergualin-, Echinomyzin oder einem Dideoxycytidin-Rest.

16. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe sich ableitet von einem Anti- PDGF oder einem Triazolopyrimidin.

17. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe sich ableitet von Colchizin, Angiopeptin, Estradiol oder einem ACE-Hemmer.

18. Verbindung nach Anspruch 1, worin die Wirkgruppe sich ableitet von Simvastatin oder Probucol.

19. Therapeutische Mittel enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 18 gelöst, emulgiert oder suspendiert in einem Medium, bevorzugt einem wäßrigen Medium und die in der Galenik üblichen Hilfsstoffe, Zusätze und/oder Stabilisatoren.

20. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I) dadurch gekennzeichnet, daß ein Neoangiogenese-Marker an einen Wirkstoff gekoppelt wird.

21. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I), dadurch gekennzeichnet, daß ein Neoangiogenese-Marker über ein Brückenglied an einen Wirkstoff gekoppelt wird.

22. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (II), dadurch gekennzeichnet, daß ein oder mehrere Neoangiogenese-Marker und ein oder mehrere Wirkstoffe an ein gemeinsames Trägermolekül gekoppelt werden.