CS213659B1 - Means for protection the sugar beet against the scarlet fever on the base of cospor mykroparazita pythium oligandrum - Google Patents

Description

Předměte autorského osvědčeni Č. 199 906 a 204 208 byl prostředek stimulující při aplikaci na semena řepy cukrové růst vzcházejících rostlin a chránící je proti spále.

U obou prostředků jsou účinnou složkou oospory, popřípadě další fruktifikační orgány mykoparazita Pythium oligandrum Drechsler. Odlišují se od sebe chemickým složením živného média a způsobem výroby. Oba prostředky však mají charakter kapaliny a umožňují ošetření semen řepy cukrové vlhkou cestou, s případným následným dosušením.

Oba prostředky se osvědčily jak v nádobových, tak v polních pokusech.

Předmětem vynálezu je prostředek na ochranu řepy cukrové proti spále, na bázi oospor mikaparazita Pythium oligandrum, obsahující jako účinnou látku vysušený, rozemletý a homogenizovaný porost mykoparaziza Pythium oligandrum na substrátu ze zrnin nasycených živným médiem. Při vhodném způsobu fermentace se dosáhne takové koncentrace oospor, že v 1 ml vodné suspenze prostředku je nejméně 4,000 000 oospor. Prostředek se vyrábí výhodně tak, že se v semisterilním prostředí hliníkové mísy pokryjí vrstvou vysterilizováných zrnin, silnou 1,5 cm. Tato vrstva se nasytí vhodným tekutým živným médiem. Takto připravený substrát je sterilizován v parním autoklávu při teplotě 120 °C po dobu 30 minut. Poté následuje inokulace substrátu vodnou suspenzí oospor mykoparazita Pythium oligandrum, zálivkou nebo rozstřikem rovnoměrně po celé ploše substrátu, V průměru připadne na 1 kg zrnin 200 ml suspenze (oospory + sterilizovaná destilovaná H^O). Takto inokulovaný substrát je

213 659

213 659 po dobu 14 dní kultivován při teplotě 25 °C. Kultivace je prováděna ve speciálních kultivačních prostorách se semisterilním prostředím a klimttzací. V průběhu tailtivace je nutno provést mikroskopické vyšetření vypěstovaného porostu ^^^pardta na stupeň friktifikace. Během tultivcce- se zároveň sleduje nárůst porostu a jeho sterilita. Po ukončení kultivace se provádí biologická kontrola vitality a stupeň fгlttifit:cce modla. Ukončení kultivace - je v podstatě závvslé na dosažení optiminí produkce oospor m^^opa^Zta. Za optimum - je možno považovat koncentraci 4,000 000 - 5,000 000 oospor v 1 g prostředku. Popsaná mmtoda stacionární kultivace je pro produkci oospor velmi příznivá a zaručuje jejich dostatečné mnOžtt^v;. Vzhledem k tomu je pak možno pro účely finálního výrobku tuto koncentraci podle potřeby upravovat. Následujícím procesem je usušení bioMsy mykcparadta i s Živným substrátem. Sušení se provádí buď 1co!^2L1Llzcc^, nebo sušením v pásové sušárně př:i dodržení teplot do 30 - 35 - °0. Vysušená hmota je meta a homogennzována. Tímto procesem se získá velmi jemný prášek, který snadno ulpívá na semenech řepy - cukrové, jež maí členitý povrch. Výstupní biologická kontrola zjišťuje - vitalitu a konnennra- i ci oospor přípravku.

KκnccnCгace oospor v přípravku mmí být taková, aby po ošetření semen tímto přípravkem nebylo na 1 semenu měně než 100 000 oospor mCtcаarcitc Pythium oligandrim. - Tato . koncentrace zaručuje, že po vykkíčení semen řepy cukrové bude povrch kořenů vzchááejících го^1:11с pokryt vrstvou zárodků m^^opa^zta. Osídlení rhizoplánu a tm i rhizoeféry vzcház^jcí řepy cukrové mrkocaaraitem Pythium oliginidrim v uvedené hustotě, znemožňuje jednak vztahy jednak přímou pаггcetаcí na ostatních hostitelkých mkro\ mcdách, které osídlují semena a rhizosféru vzcháázjící řepy cukrové, aby rostliny řepy cukrové byly napadeny patogeny vyvolávajícími ochoření,- jež je označováno jako řepná-spá- ^; la. ;

iechnnOogii výroby uvedeného prostředku proti ápále řepy cukrové je možno vyznaait následujícím schématem:

Sterilizace hlinkových mís se substrátem (zrniny * živné médium) v parních -------* skříňových, tutotlávech

------* Inok^jLace - substrátu vodnou suspenzí oospor m^,CtoParceta Pythium oligandrim

------> Vstupní biologická kontrola vitdiyyζ

--Kκltivtce kultur na hliníkových - mísách v kultivačních- prostorách se - semste- riL^nm nebo ster^ním - prostředím a klimaCízccí

Sušení produkce porostu mУto*aгceУa a substrátu - Hco^Iízccí nebo v pásové ' *“ sušárně;

------->> Mlítí a hoiooβeczаce produktu

------► Výstupní biologická kontrola vitality a koncentrace účinné složky ; ------> Bdění práškovitého bLopreparátu

------> Distribuce

Pro zvýšení sporulace je možno vprůběhu stacionární - kultivace - kultury ozařovat výhodně v oblasti spektra viSiteCného záření s pomocí filtrů v rozmezí:

modré 440 - - 490 nm, zelené 490 - 550 nm.

* 213 659

Pro nasycení substrátu vhodného pro stacionární kultivaci (zrniny, zejména prosa), jsou vhodná některá tekutá média, uvedená ' již v autorském osvědčení č. 204 208 v souvislosti se submerzní kuLtivací* V dalším jsou uvedeny 2 příklady vhodných médii:

1. Kukuřičný výluh zahuštěný	3 %
sacharóza	3 %
chlorid vápenatý	2,5 %
PH	5,5 - 6,0
2. Kukuřičný výluh zahuštěný	3 %
sacharóza	3 %
chlorid vápenatý	2,5 %
síran zinečnatý	0,05 %
síran manganatý	0,02 %
ph	5,5 - 6,0
Příklad provedení
Proso vysterioované při 120	°C se rozprostře ve vrstvě asi 1,5 cm tlusté na hliníko-

vých mísách, nasytí se tekutým·živrým médiem shora uvedeného složení a inokuluje se suspenzí oospor Pythium oligandrum připravenou způsobem popsaným v příkladu 1 autorského osvědčení č. 204 208. Kultivuje se 14 dnů při 25 °C v semisterilním prostředí* Po provedení biologické . kontroly vitality a stupně sporulace se vyfermentované médium vysuší v pásové sušárně při 30 až 35 °C, suchá půda se rozemele opatrně tak, aby teplota nepřestoupila 35 °C, a někooik šarží se dobře zhomogerizujr.

Suchý prášek uložený v suchu a chladu vydrží bez podstatného snížení účinnooti po dobu nejméně 2 až 3 měsíců. Snadno ulpívá na semenech řepy, přičemž se dosahuje v průměru kolem.100 000 oospor na jednom semenu, kdežto při použití kapalné suspenze je počet ulpělých oospor značně nižší. Uvedený vysoký počet oospor na 1 semenu zaručuje účinnou ochranu vzcházeeících . rostlinek řepy cukrové i při iluuhoUrvajícím chladném počasí po výsevu, kdy je stadium růstu, v němž jsou ro^^^Hny nejvíce vydány působení parazitů, značně prodlouženo.

Prášková forma prostředku pro ochranu vzcháze^cí řepy cukrové proti spále lépe ulpívá na semenech než přípravky tekuté a umoožuje, aby se na nich udržel potřebný počet oospor. Významnou vlastností práěkovitého preparátu je jeho trvanlivost. Preparát připravený ▼ práškovité formě podle ..vynálezu může být i ’ dlouhodobě skladován, aniž se sníží počet aaspor naneseních na semena. Oospory nepoUiédájí autolýze, . nerookláadjl se. Preparátem je nežna . ošetřit semena a vysévat je i po několikaměsíčním skladování, aniž je tím snížena joho účinnost.

Claims (2)

1. Prostředek na octíranu řepy cukrové proti spále · na bázi oospor myooparzěta Pythium oligandrum, vyznačený tím, že jako účinnou látku obsahuje vysušený, rozemletý a zhomiuenizuvaný porost mУ:ouaaazZta na substrátu ze zrnin nasycených živxým indiem.

213 Θ39

2. Způsob přípravy účinné látky podle bodu 1, vyznačený tím, že se mykoparazit pěstuje ve stacionárních kulturách v semisterilním prostředí na zrninách prosycených živným médiem obsahujícím kromě obvyklých složek, jako jsou cukry, kukuřičný výluh a minerální soli, 2 až 3 % chloridu vápenatého, za ozařování světlem v oblasti viditelného záření, výhodně 8 použitím modrého nebo zeleného filtru, načež se vyfermentovaný substát vysuší za teplot nepřesahujících 35 °C, rozemele a zhomogenizuje.