CN1441806A

CN1441806A - 包含n－环p2部分的丙型肝炎病毒的大环ns3－丝氨酸蛋白酶抑制剂

Info

Publication number: CN1441806A
Application number: CN01810568A
Authority: CN
Inventors: K·X·陈; A·阿拉萨潘; S·文卡特拉曼; T·N·帕雷克; H·古; F·G·恩约罗格; V·M·吉里亚瓦拉布汉; A·甘古利; A·萨克塞纳; E·焦; N·H·姚; A·J·普伦盖; V·S·马迪森; B·维布尔布汉
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2000-04-05
Filing date: 2001-04-03
Publication date: 2003-09-10
Also published as: DE60137207D1; ES2317900T3; WO2001077113A3; CA2405521A1; HUP0400456A3; MXPA02009920A; HK1047947A1; ATE419270T1; US20020107181A1; WO2001077113A2; AU2001253124A1; EP1268525B1; KR20030036152A; SK14192002A3; US6846802B2; JP4748911B2; RU2002129564A; NO20024797L; NO20024797D0; AR029903A1

Abstract

本发明公开具有HCV蛋白酶抑制活性的新的大环化合物以及制备这样的化合物的方法。在另一个实施方案中，本发明公开包含这样的大环的药用组合物以及使用它们治疗与HCV蛋白酶有关疾病的方法。

Description

包含N-环P2部分的丙型肝炎病毒的大环NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂

发明领域

本发明涉及新的丙型肝炎病毒(“HCV”)蛋白酶抑制剂，包含一种或更多种这样的抑制剂的药用组合物、制备这样的抑制剂的方法和使用这样的抑制剂治疗丙型肝炎和相关疾病的方法。本发明特别公开作为HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶抑制剂的新的大环化合物。

发明背景

丙型肝炎病毒(HCV)为一种(+)-有义单链RNA病毒，它作为主要病原体涉及非甲型、非乙型肝炎(NANBH)，尤其是与血液相关的NANBH(BB-NANBH)(参见国际专利申请公布号WO 89/04669和欧洲专利申请公布号EP 381 216)。NANBH区别于其它类型的病毒诱导的肝疾病，例如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丁型(δ)肝炎病毒(HDV)、巨细胞病毒(CMV)和埃-巴二氏病毒(EBV)、以及区别于其它形式的肝疾病，例如酒精中毒和原发性胆汁性肝硬变。

最近，多肽加工和病毒复制所必需的HCV蛋白酶已被鉴定，克隆和表达(参见例如美国专利号5,712,145)。这种约3000个氨基酸的多蛋白，自氨基末端至羧基末端含有核壳蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)以及几种非结构蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3为约68 kda的蛋白，由HCV基因组的约1893个核苷酸编码，并且具有2个不同的功能域：(a)由约200个N-末端氨基酸组成的丝氨酸蛋白酶功能域；和(b)蛋白C-末端依赖RNA的ATP酶功能域。由于蛋白质序列、整体三维结构和催化机制的相似性，NS3蛋白酶被认为是胰凝乳蛋白酶家族的一个成员。其它胰凝乳蛋白酶样酶为弹性蛋白酶、Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、血纤蛋白溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCVNS3丝氨酸蛋白酶担负NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接点的多肽(多蛋白)的蛋白水解，因此在病毒复制期间担负生成四种病毒蛋白。HCV NS3丝氨酸蛋白酶已被作为抗病毒化学治疗学的具有吸引力的靶标。

已经测定NS4a蛋白，约6kda的多肽，为NS3的丝氨酸蛋白酶活性的协同因子。经NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶自动裂解的NS3/NS4a接点分子内(即顺式)发生，同时其它的裂解位点分子间(即反式)进行。

HCV蛋白酶的天然裂解位点的分析揭示P1的半胱氨酸和P1’的丝氨酸的存在，并且这些残基完全保存在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接点内。NS3/NS4a接点包含P1的苏氨酸和P1’的丝氨酸。NS3/NS4a上的Cys→Thr取代被假设解释该接点需要顺式而不是反式加工。参见例如Pizzi等(1994) Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91：888-892，Failla等(1996) Folding & Design 1：35-42。NS3/NS4a裂解位点也比其它的位点更耐受诱变。参见例如Kollykhalov等(1994) J，Virol.68：7525-7533。也已发现裂解位点的区域上游区的酸性残基需要有效的裂解。参见例如Komoda等(1994) J.Virol.68：7351-7357。

已报道的HCV蛋白酶抑制剂包括抗氧化剂(参见国际专利申请公布号WO 98/14181)、某些肽类和肽类似物(参见国际专利申请公布号WO 98/17679，Landro等(1997) Biochem. 36：9340-9348，Ingallinella等(1998) Biochem. 37：8906-8914，Llinàs-Brunet等(1998) Bioorg.Med. Chem.Lett. 8：1713-1718)、基于70-氨基酸多肽水蛭蛋白酶抑制剂c的抑制剂(Martin等(1998) Biochem. 37：11459-11468，选自人胰腺分泌胰蛋白酶抑制剂(hPSTI-C3)和小体所有组成成分(MBip)的抑制剂亲和性(Dimasi等(1997) J.Virol， 71：7461-7469)，cV_HE2(“camelized”变体功能域抗体片段)(Martin等(1997) Protein Eng. 10：607-614)和α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等)(1997) J.Hepat. 27：42-28)。设计用来选择性破坏丙型肝炎病毒RNA的核酶最近已被公开(参见 BioWorld Today9(217)：4(1998年11月10日))。

参考文献也指1998年4月30日公开的PCT公布号WO 98/17679(Vertex Pharmaceuyticals Incorporated)、1998年5月28日公开的WO98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)和1999年2月18日公开的WO99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd)。

HCV已参与肝硬变且参与诱导肝细胞肿瘤。患有HCV感染的患者预后目前是很差的。由于缺乏与HCV感染有关的免疫或者缓解，HCV感染比起其它形式的肝炎更难以治疗。目前数据指明硬变诊断后四年的生存率小于50％。据诊断患有定位可切除肝细胞肿瘤的患者具有10-30％的五年生存率，而那些患有定位不可切除肝细胞肿瘤的患者具有小于1％的五年生存率。

参考文献也指WO 00/09558(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公开)，它公开下式的肽衍生物：

其中各种元素在此定义。该系列的示例性的化合物为：

参考文献也指WO 00/09543(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公开)，它公开下式的肽衍生物：

其中各种元素在此定义。该系列的示例性的化合物为：

丙型肝炎的现在的疗法包括干扰素-α(INF_α)和与利巴韦林和干扰素一起的联合疗法。参见例如，Beremguer等(1998) Proc.Assoc.Am. Physicians 110(2)：98-112。这些疗法经历低的持续应答率和频繁的副作用。参见例如，Hoofnagle等(1997) N.Engl.J.Med.336：347。目前，没有疫苗可用于HCV感染。

对丙型肝炎病毒感染存在需要新的治疗和疗法。因此，本发明一个目的是提供用于治疗或者预防或者改善丙型肝炎的一种或更多种症状的化合物。

在此另一个目的是提供治疗或者预防或者改善丙型肝炎的一种或更多种症状的方法。

本发明另一个目的是使用在此提供的化合物来提供调节丝氨酸蛋白酶，特别是HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶活性的方法。

在此另一个目的是使用在此提供的化合物来提供调节HCV多肽的加工的方法。发明概述

在它的许多实施方案中，本发明提供一类新的大环HCV蛋白酶抑制剂，包含一种或更多种化合物的药用组合物、制备包含一种或更多种这样的化合物的药用制剂的方法、以及治疗、预防或者改善丙型肝炎的一种或更多种症状的方法。也提供调节HCV多肽与HCV蛋白酶相互作用的方法。在此提供的化合物中，抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶活性的化合物为优选。目前所公开的化合物通常包含约三种或者更多种氨基酸残基至少于约十二种氨基酸残基。

在它的基本实施方案中，本发明提供式I大环化合物：

式I其中：

X和Y独立选自：烷基、烷基-芳基、杂烷基、杂芳基、芳基-杂芳基、烷基-杂芳基、环烷基、烷基醚、烷基-芳基醚、芳基醚、烷基氨基、芳基氨基、烷基-芳基氨基、烷基硫、烷基-芳基硫(aryl sulfide)、芳基硫、烷基砜、烷基-芳基砜、芳基砜、烷基-烷基亚砜、烷基-芳基亚砜、烷基酰胺、烷基-芳基酰胺、芳基酰胺、烷基磺酰胺、烷基-芳基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、烷基-芳基脲、芳基脲、烷基氨基甲酸酯、烷基-芳基氨基甲酸酯、芳基氨基甲酸酯、烷基酰肼、烷基-芳基酰肼、烷基羟酰胺(hydroxamide)、烷基-芳基羟酰胺、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂烷基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷基羰基、芳基羰基、杂烷基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、杂芳氧基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、杂芳基氨基羰基或它们的组合，前提是X和Y可由选自以下的基团任选取代，包括：芳族、烷基、烷基-芳基、杂烷基、芳基-杂芳基、烷基-杂芳基、环烷基、烷基醚、烷基-芳基醚、烷基硫、烷基-芳基硫、烷基砜、烷基-芳基砜、烷基酰胺、烷基-芳基酰胺、烷基磺酰胺、烷基胺、烷基-芳基胺、烷基-芳基磺酰胺、烷基脲、烷基-芳基脲、烷基氨基甲酸酯和烷基-芳基氨基甲酸酯；

R¹＝COR⁵或B(OR)₂，其中R⁵＝H、OH、OR⁸、NR⁹R¹⁰、CF₃、C₂F₅、C₃F₇、CF₂R⁶、R⁶、COR⁷，其中R⁷＝H、OH、OR⁸、CHR⁹R¹⁰或NR⁹R¹⁰，其中R⁶、R⁸、R⁹和R¹⁰独立选自H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、环烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、CH(R^1’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)R’、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)CONHCH(R^4’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)CONHCH(R^4’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)CONHCH(R^4’)CONHCH(R^5’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONHCH(R^3’)CONHCH(R^4’)CONHCH(R^5’)CONR¹²R¹³，其中R^1’、R^2’、R^3’、R^4’、R^5’、R¹¹、R¹²、R¹³和R’独立选自H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、烷基-芳基、烷基-杂芳基、芳基-烷基和杂芳烷基；

Z选自O、N或CH；

W可存在或者不存在，且如果W存在，W选自C＝O、C＝S或SO₂；

Q可存在或者不存在，当Q存在时，Q为CH、N、P、(CH₂)_p、(CHR)_p、(CRR’)_p、O、NR、S或SO₂；当Q不存在时，M也不存在，且A直接连接于X；

A为O、CH₂、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p、(CRR’)_p、NR、S、SO₂或键；

E为CH、N或CR，或者朝着A、L或G的双键；

G可存在或者不存在，当Q存在时，G为(CH₂)_p、(CHR)_p或(CRR’)_p’；当G不存在时，J是存在的且E直接连接于G连接的碳原子；

J可不存在或者存在，当J存在时，J为(CH₂)_p、(CHR)_p或(CRR’)_p、SO₂、NH、NR或O；当J不存在时，G存在且E直接连接于N；

L可存在或者不存在，当L存在时，L为CH、CR、O、S或NR；当L不存在时，则M可以不存在或者存在，并且如果

M存在且L不存在时，则M直接且独立连接于E；且J直接且独立连接于E；

M可存在或者不存在，当M存在时，M为O、NR、S、SO₂、(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p或(CRR’)_p；

p为0-6的数目；和

R、R’、R²、R³和R⁴独立选自H、C1-C10烷基、C2-C10链烯基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酸酯、脲、酮、醛、氰基、硝基，氧、氮、硫或磷原子，所述氧、氮、硫或磷原子的数目为0-6；

(环烷基)烷基和(杂环烷基)烷基，其中所述环烷基由3-8个碳原子、以及0-6个氧、氮、硫或磷原子组成，并且所述烷基具有1-6个碳原子；芳基；杂芳基；烷基-芳基和烷基-杂芳基；

所述烷基、杂烷基、链烯基、杂链烯基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基部分可任选被取代，所述术语“取代的”指由1个或者更多个选自以下的部分任选且适当取代，包括：烷基、链烯基、炔基、芳基、芳烷基、环烷基、杂环基、卤素、羟基、硫代、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酸酯、脲、酮、醛、氰基、硝基、氨磺酰基、亚砜、砜、磺酰脲、酰肼和异羟肟酸酯。

除非另外指明，如本发明所属领域的技术人员普遍理解的那样，在此使用的所有的科技术语具有相同的含义。因此，例如，术语烷基(包括烷氧基的烷基部分)指衍生于除去单个原子的具有1-8个，优选1-6个碳原子的直或支链的饱和烃的单价基团；

芳基-表示具有6-14个碳原子且具有至少1个苯型环的碳环基团，具有全部可取代的芳族碳原子的意欲作为可能的连接点的碳环基团。优选芳基包括苯基、1-萘基、2-萘基和茚满基，尤其是苯基和取代的苯基；

芳烷基-表示含有通过低级烷基连接的芳基的部分；

烷基芳基-表示含有通过芳基连接的低级烷基的部分；

环烷基-表示具有3-8个，优选5或6个碳原子的饱和的碳环，可任选被取代；

杂环-表示(除以下定义的杂芳基以外)具有至少1个插入碳环结构(由1个环或者2个稠合的环组成)的O、S和/或N原子的饱和的和不饱和的环状有机基团，其中每环为3至9-元且可具有或者不具有缺乏离域pi电子的双键，其环结构具有2-8个，优选3-6个碳原子，例如2-或3-哌啶基、2-或3-哌嗪基、2-或3-吗啉基，或者2-或3-硫代吗啉基。

卤素-表示氟、氯、溴和碘；

杂芳基-表示具有至少1个插入碳环结构的O、S和/或N原子且具有足够数量的离域pi电子以提供芳族性质的环状有机基团，芳族杂环具有2-14个，优选4或5个碳原子，例如2-、3-或4-吡啶基，2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、2-、4-或5-噻唑基、2-或4-咪唑基、2-、4-或5-嘧啶基、2-吡嗪基，或者3-或4-哒嗪基等。优选杂芳基为2-、3-和4-吡啶基；这样的杂芳基也可被任选取代。

本发明也包括式I化合物的互变异构体、对映体和其它的光学异构体、以及它们的药学上可接受的盐和溶剂合物。

本发明另一个特征是包含与药学上可接受的载体或者赋形剂一起的作为活性成分的式I化合物(或其盐、溶剂合物或异构体)的药用组合物。

本发明也提供制备式I化合物的方法以及治疗例如HCV和相关疾病的方法。用于治疗的方法包括给予患有一种或多种所述疾病的患者治疗有效量的式I化合物，或者包含式I化合物的药用组合物。

式I化合物用于制备治疗HCV和相关疾病的药物的用途也被公开。

优选实施方案的详细描述

在一个实施方案中，本发明公开作为HCV蛋白酶，尤其是HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶抑制剂的式I化合物。在式I包括的化合物中，优选化合物为那些具有式II的化合物或其药学上可接受的衍生物，式II其各种定义如上给出。一些优选实施方案包括(但不限于)以下各种如上提及的通式I和II中的各种官能团的定义。因此，例如，式I中的R²可选自以下部分：

对于下面部分的一些优选代表

为例如以下结构 a、 b或 c：结构 a可选自以下非限制类型的结构：其它另外的优选实施方案为例如，其中部分：有时为以下结构，其中各种位置的定义在该部分以后显示的化合物的结构中举例说明：

在一些更优选的化合物中，部分G和J独立选自(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p和(CRR’)_p，且部分A-E-L-M-Q为由2-8个碳原子、0-6个杂原子组成的芳族环，其中X和J彼此相互为邻位、对位或间位。在其它的优选实施方案中，式I中的R³选自以下结构：

其中R³⁰＝H、CH₃或其它的烷基；R³¹＝OH、O-烷基、NH₂或N-烷基；R³²和R³³可以相同或者不同并且独立选自H、F、Cl、Br和CH₃；和部分X-Y选自以下结构：

由式I表示化合物的以上提到的各种定义的几种另外的和进一步的明确表达在该申请书的权利要求部分中注释。它们也由说明书和权利要求中列出的各种化合物表示。这样的明确表达、定义和限制被认为代表该申请的全部发明。

呈现优良的HCV蛋白酶抑制活性的本发明代表性化合物与它们的活性一并列于下面(K_i值范围以纳摩尔表示，nM)。实施例编号指该申请书以后的部分中发现的实施例部分中的各种结构编号。表1：HCV蛋白酶连续试验结果

实施例编号	Ki^*(nM)
实施例编号	Ki^*(nM)	1A	a
1B	b	1A	a
1B	b	2	b
3	b	2	b
3	b	4A	a
4B	b	4A	a
4B	b	5	b
6	b	5	b
6	b	7A	a
7B	b	7A	a
7B	b	8	a
9	b	8	a
9	b	10A	a
10B	b	10A	a
10B	b	11	a
12A	a	11	a
12A	a	12B	b
13A	a	12B	b
13A	a	13B	b
14	b	13B	b
14	b	15	b
16	b	15	b
16	b	17	b
18	b	17	b
18	b	19	b

20A	a
20A	a	20B	b
21	a	20B	b
21	a	22	b
23	a	22	b
23	a	24	a
25	a	24	a
25	a	26A	a
26B	a	26A	a
26B	a	27A	a
27B	b	27A	a
27B	b	28A	a
28B	b	28A	a
28B	b	29A	a
29B	b	29A	a
29B	b	30	b
31	b	30	b
31	b	37A	a
37B	a	37A	a
37B	a	38A	a
38B	a	38A	a
38B	a	39	a
40	a	39	a
40	a	41	a
42	a	41	a
42	a	43	b
44A	a	43	b
44A	a	44B	a
46	a	44B	a
46	a	53A	a
53B	a	53A	a
53B	a	56A	a
56B	a	56A	a
56B	a	57A	a
57B	b	57A	a
57B	b	58	a
59A	b	58	a
59A	b	59B	b
60	a	59B	b
60	a	61	a
62	a	61	a
62	a	63	a
64	a	63	a

65	b
65	b	66A	a
66B	b	66A	a
66B	b	67A	a
67B	b	67A	a
67B	b	68	b
69A	a	68	b
69A	a	69B	b
70A	a	69B	b
70A	a	70B	b
71	b	70B	b
71	b	72	b
73	a	72	b
73	a	74A	a
74B	b	74A	a
74B	b	75A	a
75B	b	75A	a
75B	b	76	b
77	a	76	b
77	a	78	a
79	a	78	a
79	a	80	b
81	a	80	b
81	a	82	a
83	b	82	a
83	b	84	a
85	a	84	a
85	a	86	a
87	a	86	a
87	a	88	a
89	a	88	a
89	a	90	a
91	a	90	a
91	a	92	b
93	a	92	b
93	a	94	a
95	b	94	a
95	b	96	a
97	a	96	a
97	a	98	b
99	a	98	b
99	a	100	a
101	b	100	a

102	a
102	a	103	a
104	a	103	a
104	a	105	a
106	a	105	a
106	a	107	a
108	a	107	a
108	a	109	a
110	b	109	a
110	b	111	b

HCV连续试验Ki^*范围：b类＝1-100nM；a类＝101nM-100μM

一些本发明化合物和合成各种类型的本发明化合物的方法列于下面，然后作流程描述，之后阐述实施例。

依结构而定，本发明化合物可与有机或无机酸，或者有机或无机碱形成药学上可接受的盐。用于此类盐形成的合适的酸的实例为盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、枸橼酸、草酸、丙二酸、水杨酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和本领域技术人员熟知的其它的矿物酸以及羧酸。对于与碱形成的盐的合适的碱为例如NaOH、KOH、NH₄OH、四烷基氢氧化铵等。

在另一个实施方案中，本发明提供包含作为活性成分的如上描述的本发明大环类的药用组合物。药用组合物通常另外包含药学上可接受的载体稀释剂、赋形剂或载体(在此统称为载体材料)。由于它们的HCV抑制活性，这样的药用组合物具有在治疗丙型肝炎和相关疾病中的用途。

在另一个实施方案中，本发明公开用于制备包含作为活性成分的本发明大环化合物的药用组合物的方法。在本发明的药用组合物和方法中，活性成分一般与适合选自计划的给药形式的载体材料混合给予，包括：例如口服片剂、胶囊剂(或者固体填充、半固体填充或液体填充)、用于构成的散剂、口服凝胶剂、酏剂、可分散颗粒剂、糖浆剂、混悬剂等，并符合常规制药实践。例如，对于以片剂或胶囊剂的形式口服给药，活性药物成分可与任何口服的非毒性的药学上可接受的惰性载体组合，例如乳糖、淀粉、蔗糖、纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、滑石粉、甘露糖醇、乙醇(液体形式)等。此外，当要求或者需要时，也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺和到混合物中。粉剂和片剂也可包含约5-95％的本发明组合物。

合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类、玉米甜味剂、天然和合成胶如阿拉伯胶、藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇和蜡。在润滑剂中可被提及用于这些剂型的有硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、瓜尔胶等。合适时也可包括甜味剂、矫味剂和防腐剂。以下更详细地讨论以上提及的一些术语，即崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂等。

另外，本发明的组合物可配制成持续释放形式以提供速率控制释放任一种或者更多种成分或活性成分来达到最佳治疗作用，即HCV抑制活性等。持续释放的合适的剂型包括含有变化的崩解速率的层或者控释聚合物基质(浸渍有活性成分并以片剂形式成型)的多层片或者包含这样的浸渍或包囊化的多孔聚合物基质的胶囊。

液体形式制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂。作为实例可被提及的有用于非肠道注射的水或者水-丙二醇溶液或者对口服液、混悬剂和乳剂加入甜味剂和pacifiers。液体形式制剂也可包括用于鼻内给药的溶液剂。

适于吸入的气雾剂制剂可包括溶液和以粉末形式存在的固体，它们可与药学上可接受的载体例如惰性压缩气体如氮气组合。

对于制备栓剂，低熔点的蜡例如脂肪酸甘油酯如可可脂的混合物首先熔融，并且通过搅拌或者类似的混合可使活性成分均匀分散于其中。然后将熔融后均匀的混合物倾入到适宜体积的模具中，使之冷却且由此固化。

也可包括临用前转变为用于或者口服或者非肠道给药的液体形式制剂的固体形式制剂。这样的液体形式包括溶液剂、混悬剂和乳剂。

本发明化合物也可经皮传递。经皮组合物可采用霜剂、洗剂、气雾剂和/或乳剂的形式并且可包含在经皮贴剂的基质中或者包含在如对该目的的领域是便利的贮库型中。

化合物优选口服给药。

药物制剂优选以单位剂量形式存在。在这样的形式中，制剂可分为包含合适量的活性成分的合适大小的单位剂量，例如达到所需目的的有效量。

本发明活性组合物在制剂的单位剂量中的量通常可以是变化的或者在约1.0毫克-1,000毫克之间调整，优选约1.0-950毫克，更优选约1.0-500毫克，按照具体的应用，一般为约1-250毫克。所使用的实际剂量可依患者的年龄、性别、体重和待治疗疾病的严重性而变化。这样的技术是本领域技术人员熟知的。

通常，包含活性成分的人口服剂型可每天给药1或2次。给药量和次数应根据主治医师的判断调节。口服给药的一般推荐每天剂量方案可以以单次或分开的剂量，在每天约1.0毫克-1,000毫克的范围内变化。

一些有用的术语描述如下：

胶囊剂-指特殊容器或者由甲基纤维素、聚乙烯醇，或变性明胶或淀粉制成以保持或包括包含活性成分的组合物的包封物。硬壳胶囊一般由相对高的明胶强度骨架和猪皮肤明胶的掺合物制成。胶囊本身可包含小量的染料、不透明剂、增塑剂和防腐剂。

片剂-指包含与合适的稀释剂一起的活性成分的压制或模压固体剂型。通过压制混合物或经湿法制粒、干法制粒或者紧压法得到的颗粒，可制备片剂。

口服凝胶剂-指分散或溶于亲水性半固体基质中的活性成分。

用于构成的粉末指包含活性成分和能够悬浮在水或汁中的适宜稀释剂的粉末掺合物。

稀释剂-指通常组成组合物或者剂型的主要部分的物质。合适的稀释剂包括糖类如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨醇、衍生于小麦、玉米、大米和马铃薯的淀粉、以及纤维素例如微晶纤维素。组合物中稀释剂的量可在总组合物的约10-90％(重量)的范围内，优选约25-75％，更优选约30-60％(重量)，甚至更优选在约12-60％(重量)的范围内。

崩解剂-指加入到组合物中以便使其分裂(崩解)并释放出药物的物质。合适的崩解剂包括淀粉、“冷水可溶的”变性淀粉例如羧甲基淀粉钠、天然和合成胶类如槐树豆胶(locust bean)、卡拉胶、瓜尔胶、黄蓍胶和琼脂、纤维素衍生物如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠、微晶纤维素和交联微晶纤维素如交联羧甲基纤维素钠、藻酸盐如藻酸和藻酸钠、粘土如膨润土、以及泡腾混合物。组合物中崩解剂的量可在组合物约2-15％(重量)的范围内，更优选在约4-10％(重量)的范围内。

粘合剂-指使粉末粘合或者“胶着”在一起并通过使它们形成颗粒粘聚，因此在制剂中用作“粘合剂”的物质。粘合剂可增加已在稀释剂或者增量剂中可以得到的粘聚的强度。合适的粘合剂包括糖类如蔗糖、衍生于小麦、玉米、大米和马铃薯的淀粉、天然胶类如阿拉伯胶、明胶和黄蓍胶、海藻衍生物如藻酸、藻酸钠和藻酸钙铵、纤维素材料如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠和羟基丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、以及无机物例如硅酸镁铝。组合物中粘合剂的量可在组合物的约2-20％(重量)的范围内，更优选在约3-10％(重量)的范围内，甚至更优选在约3-6％(重量)的范围内。

润滑剂-指加入到剂型中以便在其被压制后通过减少摩擦或磨损确保片剂、颗粒剂等自模具或者冲模中脱出的物质。合适的润滑剂包括金属硬脂酸盐如硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸钾、硬脂酸、高熔点蜡、以及水溶性润滑剂如氯化钠、苯甲酸钠、乙酸钠、油酸钠、聚乙二醇和d’1-亮氨酸。压制前通常在很后的步骤中加入润滑剂，因为它们必须存在于颗粒的表面并介于它们与片剂压制的部分之间。组合物中润滑剂的量可在组合物的约0.2-5％(重量)的范围内，优选约0.5-2％，更优选在约0.3-1.5％(重量)的范围内。

助流剂-防止结块并改善颗粒的流动性质以使流动平滑和均匀的物质。合适的助流剂包括二氧化硅和滑石粉。组合物中助流剂的量可在总组合物的约0.1％-5％(重量)，优选约0.5-2％(重量)的范围内。

着色剂-向组合物或者剂型提供着色的赋形剂。这样的赋形剂可包括食品等级染料和吸附到合适的吸附剂例如粘土或氧化铝上的食品等级染料。着色剂的量可在组合物的约0.1-5％，优选约0.1-1％(重量)之间变化。

生物利用度-指活性药物成分或者治疗部分自给药剂型吸收进入到全身循环中与标准物或者对照物比较的速率和程度。

制备片剂的常规方法是人们已知的。这样的方法包括干法例如直接压制和经过紧压法产生的颗粒的压制，或者湿法或其它的特殊的方法。制备其它给药形式例如胶囊剂、栓剂等的常规方法也是人们熟知的。

本发明的另一个实施方案公开用于治疗疾病例如丙型肝炎等的以上公开的药用组合物的用途。方法包括给予患有这样的疾病或者这些疾病和需要这样治疗的患者治疗有效量的本发明药用组合物。

如早先说明的那样，本发明也包括所述化合物的互变异构体、对映体和其它的立体异构体。因此，如本领域技术人员已知的那样，一些本发明化合物可以异构体形式存在。这样的变体包括在本发明的范围内。

本发明另一个实施方案公开制备在此公开的大环化合物的方法。通过本领域已知的几种技术可制备所述化合物。在以下反应流程中概述代表性的示例方法。应该理解，当以下示例的流程描述主要衍生于4-顺式-羟基脯氨酸(“顺式-HYP”)或者7-羟基四氢异喹啉-3-羧酸(“TLC”)的大环的制备时，天然和非天然氨基酸中的任一种的适宜取代将导致基于这样的取代的所需大环形成。

在以下流程、制备和实施例的描述中所使用的缩写为：THF：四氢呋喃DMF：N，N-二甲基甲酰胺EtOAc：乙酸乙酯AcOH：乙酸HOOBt：3-羟基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCl：1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐NMM：N-甲基吗啉ADDP：1，1’-(偶氮二羰基)二哌啶DEAD：二乙基偶氮二羧酸酯MeOH：甲醇EtOH：乙醇Et₂O：乙醚Bn：苄基Boc：叔丁氧基羰基Cbz：苄氧基羰基Cp：环戊二烯基Ts：对-甲苯磺酰基Me：甲基PyBrOP：六氟磷酸三(吡咯烷基)溴代膦鎓DMSO：二甲基亚砜TFA：三氟乙酸HOBt：羟基苯并三唑Hünigs碱：二异丙基乙胺BOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)膦鎓LDA：二异丙基氨化锂Ph₃P：三苯基膦LAH：氢化铝锂DMAP：4-二甲基氨基吡啶DCC：二环己基碳二亚胺MCPBA：间-氯过氧苯甲酸BINAP：2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘酚MeCN：乙腈Pr：丙基Ac：乙酰基Ph：苯基一般制备流程

在流程1中概述式 1h化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R¹为烷基、杂烷基(OR”、SR、NR”R，其中R”和R为烷基)、氧原子的邻、间或对-位的卤代取代基；R为烷基、芳基或烷基芳基；n为0-5；X为其中m为1-5的(CH₂)_m，氧原子，NY，其中Y为氢原子、烷基、芳基；PG¹和PG²为合适的保护基团(PG¹＝t-boc、cbz和PG²＝H、Bn等)。在氢化钠存在下，通过烷基溴在4-位将保护的4-羟基脯氨酸( 1a)烷基化。然后，或者用酸性条件下的醇，或者用三甲基甲硅烷基二氮杂甲烷，将产物 1b转变为酯。脱除保护后，在HOOBt、EDCl·HCl和NMM存在下使生成的胺与Boc保护的氨基酸偶合。自产物 1d除去Boc基团后，使用相同的偶合条件，使二肽与取代的羟基苯基乙酸反应。苄基醚催化氢化得到用于大环化的前体。通过使用三苯基膦和ADDP，在Mitsunobu条件下达到大环化。(Mitsunobu反应由D.L.Hughes综述，Org.Reactions， 42(1992)335，John Wiley & Sons，New York，L.Paquette编辑)。用氢氧化锂将酯水解为酸后，它与胺中间体偶合，得到 1h。

流程1

在流程2中概述式 2e化合物的制备，其中R¹、R²、R³、R和R’如上定义。保护的3，4-去氢脯氨酸 2a经非对映体选择性二羟基化，得到顺式-二醇 2b。在催化量的对-甲苯磺酸存在下，能够实现 2b与醛之间缩醛的形成。将二环脯氨酸衍生物 2c转变为大环酯 2d，随后按照流程1中概述的顺序转变为HCV抑制剂 2e。

流程2

在流程3中概述式 3f化合物的制备，其中R¹、R²、R³、R、R’和n如上定义。当用三氟硼二乙基乙醚化物处理时，使保护的4-羟基脯氨酸 3a和链烯 3b转变为脯氨酸醚 3c，后者经历流程1中概述的相同的转化顺序，得到大环酯 3e，随后得到所需的最终产物 3f。

流程3

在流程4中概述式 4f化合物的制备，其中R¹、R²、R³、R和n如上定义。在MM、HOOBt和EDCl·HCl存在下，实现氨基醚 4a与Boc保护的氨基酸之间的偶合。自 4b除去Boc基团后，使二肽与末端链烯羧酸偶合，得到 4c。然后通过硼氢化将双键转变为醇。通过使用三苯基膦和ADDP，在Mitsunobu条件下实现苯酚醇的大环化。在用氢氧化锂将得到的酯 4e水解为酸后，使酸与胺中间体偶合，得到 4f。

流程4

在流程5中概述式 5h化合物的制备，其中R、R²、R³、R’如在流程1中所定义，R⁴为烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂烷基且R⁵为OR、NR₂或OH。通过 5a与叔丁基膦酰基乙酸酯及NaH的Wittig反应，得到化合物 5b。通过MCPBA的处理使化合物 5b转变为 5c。用NaN₃将环氧化物 5c进一步开环，得到化合物 5d，后者用Pd/C/H₂还原为胺并用Cbz-Cl，Et₃N进行Cbz保护，得到式 5e化合物。用TFA将化合物 5e脱除保护，并进一步加工为 5f。将 5f的Cbz基团氢解，然后使用EDCl、HOOBt、NMM使之与式 1g化合物偶合，得到 5g。用Dess-Martin试剂将类型 5g的化合物氧化，生成式 5h化合物。

流程5

如在流程6中概述的合成式 6m化合物，其中R¹、R²、R’和n如在流程1中定义，R⁶为烷基、芳基、酯、羧酸和羧酰胺。使用Ph₃PCH₃I和BuLi，通过Wittig烯化作用自 6a合成类型 6b的化合物。将化合物 6b进一步氨基羟基化，合成类型 6c的化合物，使用Rh/C和H₂将后者还原，得到类型 6d的合物。使用RuCl₃和H₅IO₆，将化合物 6d氧化为类型 6e的化合物。使用NMM、EDCl和HOOBt，通过使其与脱除保护的 6h偶合，将化合物 6e加工为化合物 6i。使用EDCl、HOOBt和NMM，通过使脱除保护的 6i与合适取代的苯乙酸偶合，再次得到化合物 6i至 6j的扩展。使用Mitsunobu条件，将 6j中的苄基氢解后得到的化合物 6k环合为 6l。如在流程1中概述的，将 6l进一步加工为类型 6m的化合物。

流程6

采用芳烯钌化学可合成类型7d的化合物，其中取代基R¹、R²、R³、R’如在流程1中定义，n为0-3。通过EDCl、HOBt、Hünigs碱偶合，自类型 7a化合物可得到式 7b化合物的合成。用Cs₂CO₃处理7b且光催化除去钌，使类型 7b化合物转变为 7c，如在流程1中所述，将后者进一步加工为化合物 7d。

流程7

在流程8中概述式 8e化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R¹为烷基、杂烷基(OR”、SR、NR”R，其中R”和R为烷基)、氧原子的邻、间或对-位的卤代取代基；R为烷基、芳基或烷基芳基；n为0-5；X为其中m为1-5的(CH₂)_m，氧原子，NY，其中Y为氢原子、烷基、芳基。将保护的顺式-4-羟基脯氨酸衍生物 8a转变为对溴苯磺酸酯(Bs＝4-溴代苯磺酰基)衍生物 8b，后者在氢化钠条件下用合适的巯基醇置换，得到 8c。转变为大环酯 8d，随后如在流程1中概述的，转变为所需目标物 8e。

流程8

在流程9中概述式 9d化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R¹为烷基、杂烷基(OR”、SR、NR”R，其中R”和R为烷基)、氧原子的邻、间或对-位的卤代取代基；R为烷基、芳基或烷基芳基；n为0-5；X为其中m为1-5的(CH₂)_m，氧原子，NY，其中Y为氢原子、烷基、芳基；LG为离去基团(例如，OTs、Br)。通过 1d(这在流程1中描述)的形成，将保护的4-羟基脯氨酸衍生物 1a转变为 9a。除去苄基醚，随后转变为合适的离去基团，并且N保护基团拆开，得到 9b。通过用碳酸钠/碘化钠在回流的丙酮中处理，进行向大环酯9c的转化。随后如在流程1中概述的，加工得到所需的目标物 9d。

流程9

在流程10中概述式 10e化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R¹为烷基、杂烷基(OR”、SR、NR”R，其中R”和R为烷基)、氧原子的邻、间或对-位的卤代取代基；R为烷基、芳基或烷基芳基；n和q为0-5的任何组合；V为氧原子，NY，其中Y为氢原子、烷基、芳基；W为烷基、芳基、烷基芳基、杂芳基；PG¹和PG²为合适的保护基团(PG¹＝t-boc、cbz和PG²＝H、Bn等)。如在流程1中概述的，将保护的4-羟基脯氨酸衍生物 1a转变为 10b。除去保护基团( 10c)，随后用光气等价物处理，得到大环酯 10d。如在流程1中概述的，实现向目标物 10e的转变。

流程10

在流程11中概述式 11g化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R为烷基、芳基或烷基芳基；X为(CH₂)_m、(CH₂)_mO、(CH₂)_mNY，其中m为1-5，Y为氢原子、烷基、芳基；A为氢原子或合适的定位卤原子；PG¹为合适的保护基团(PG¹＝t-boc、cbz等)。用合适的苯磺酰氯和碱处理，将保护的4-氨基脯氨酸衍生物 11a转变为 11b。除去保护基团并与保护的氨基酸衍生物偶合，得到 11c。采用类似的脱除保护、偶合策略，使之转变为 11d。钯(O)催化环合可得到作为异构体混合物的 11e，后者经氢化得到大环酯 11f。如在流程1中概述的，随后转变为所需的目标物 11g。

流程11

在流程12中概述式 12d化合物的制备，其中R¹、R²、R³如上定义，R为烷基、芳基或烷基芳基；n为0-5，X为其中m为1-5的(CH₂)_m，氧原子，NY，其中Y为氢原子、烷基、芳基；A为氢原子或合适的定位卤素原子；PG¹和PG²为合适的保护基团(PG¹＝t-boc、cbz和PG²＝H、Bn等)。如在流程11中所述，将保护的4-氨基脯氨酸衍生物 11a转变为 11c。将 11c转变为大环酯 12c，随后如在流程1中概述的，转变为所需的目标物 12d。

流程12中间体的制备：中间体A：步骤1：

在0℃-5℃下，于2小时内，向1-硝基丁烷(16.5g，0.16mol)和乙醛酸在H₂O(28.1g，0.305mol)和MeOH(122mL)中的搅拌着的溶液中滴加三乙胺(93mL，0.667mol)。把溶液温热至室温，搅拌过夜并浓缩至干，得到油。然后将油溶于H₂O中并用10％HCl酸化至pH＝1，随后用EtOAc提取。用盐水洗涤合并的有机溶液，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干，得到产物ii(28.1g，99％收率)。步骤2：

向起始原料ii(240g，1.35mol)在乙酸(1.25L)中的搅拌着的溶液中加入10％Pd/C(37g)。在59磅/平方英寸下把生成的溶液氢化3小时，然后在60磅/平方英寸下氢化过夜。然后蒸发乙酸并与甲苯共沸3次，然后用MeOH和乙醚研磨。之后过滤溶液并与甲苯共沸2次，得到灰白色固体(131g，0.891mol，66％)。步骤3：

在0℃下，向氨基酸iii(2.0g，13.6mmol)在二噁烷(10mL)和H₂O(5mL)中的搅拌着的溶液中加入1N NaOH溶液(4.3mL，14.0mmol)。把生成的溶液搅拌10分钟，随后加入二碳酸二叔丁酯(0.110g，14.0mmol)，在0℃下搅拌15分钟。然后，将溶液温热至室温，搅拌45分钟，并在冰箱中保持过夜，浓缩至干，得到粗品物质。向该粗品物质在EtOAc(100mL)和冰中的溶液中加入KHSO₄(3.36g)和H₂O(32mL)并搅拌4-6分钟。然后分离有机层，并用EtOAc将水层提取两次，用水、盐水洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干，得到为透明的胶的产物(3.0g，89％收率)。步骤4：

于-20℃下，向起始原料(3.00g，12.0mmol)在DMF(15mL)和CH₂Cl₂(15mL)中的搅拌着的溶液中加入HOOBt(1.97g，12.0mmol)、N-甲基吗啉(4.0mL，36.0mmol)和EDCI(2.79g，14.5mmol)并搅拌10分钟，随后加入HCl H₂N-Gly-OBn(2.56g，13.0mmol)。在-20℃下，将生成的溶液搅拌2小时，然后在冰箱中保持过夜，浓缩至干，随后用EtOAc(150mL)稀释。然后用饱和NaHCO₃、H₂O、5％H₃PO₄、盐水把EtOAc溶液洗涤两次，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干，得到产物(4.5g，94％)。LRMS m/z MH⁺＝395.1。步骤5：

在Pd-C(300mg，10％)存在下，在氢气氛下，于室温下将起始原料v(7.00g，17.8mmol)在无水乙醇(300mL)中的溶液搅拌。经TLC监测反应进展。2小时后，经硅藻土垫过滤混合物，真空浓缩生成的溶液，得到产物vi(5.40g，定量)。LRMS m/z MH⁺＝305.1。步骤6：

在-20℃下，向二甲胺盐酸盐(1.61g，19.7mmol)、N-Boc-苯基甘氨酸(4.50g，17.9mmol)、HOOBt(3.07g，18.8mmol)和EDCI(4.12g，21.5mmol)在无水DMF(200mL)和CH₂Cl₂(150mL)中的溶液中加入NMM(5.90mL，53.7mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持过夜(18h)。然后将其温热至室温，并加入EtOAc(450mL)、盐水(100mL)和5％H₃PO₄(100mL)。分离这些层后，用5％H₃PO₄(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×150mL)、水(150mL)和盐水(150mL)洗涤有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，得到为白色固体的粗品产物viii(4.86g)，它无须进一步纯化即可使用。步骤7：

将N-Boc-苯基甘氨酸二甲基酰胺viii(4.70g，粗品)溶于4N HCl(60mL，240mmol)中并在室温下搅拌生成的溶液。经TLC监测反应进展。4小时后，真空浓缩溶液，得到白色固体，它无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。LRMS m/z MH⁺＝179.0。步骤8：

按照在步骤4中描述的偶合方法，制备所需的化合物x。LRMS m/zMH⁺＝465.1。步骤9：

按照在步骤7中描述的方法，从三肽x制备所需的中间体A。LRMS m/z MH⁺＝365.1。中间体B：步骤1：

通过对中间体A步骤8描述的方法，使用市场上可得到的xi作为偶合配体，得到所需的产物xii。对于进一步研究，该粗品物质是足够纯的。使用97/3二氯甲烷/MeOH，经快速层析纯化一份该产物。HRMS(FAB)C₂₅H₄₀N₃O₇的计算值：494.2866(M+H)⁺。实测值：494.2863。步骤2：

通过对中间体A步骤7描述的方法，得到所需的产物B。该粗品物质无须进一步纯化即可使用。中间体C：步骤1：

以类似于中间体A步骤6中描述的偶合方法，除了用甲胺替代二甲胺，制备所需的化合物xii。步骤2：

按照中间体A步骤7中描述的方法，自xiii制备所需的化合物xiv。步骤3：

按照中间体A步骤6中描述的偶合方法，除了用胺xiv替代胺ix，制备所需的化合物xv。LRMS m/x MH⁺＝451.1。步骤4：

按照中间体A步骤7中描述的方法，制备所需的中间体C。LRMSMH⁺＝351.1。其无须进一步纯化即可使用。中间体D：

按照中间体A步骤7中描述的方法，从化合物v制备所需的中间体D。其无须进一步纯化即可使用。中间体E：步骤1：

向xvi(5g)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入TFA(20mL)并在环境温度下搅拌4小时。加入另一份TFA(10mL)，并使之放置另外3小时。蒸发所有的挥发物，真空干燥，得到定量收率的xvii。该物质用于下一步骤。(注释：通过对B描述的类似方法，使用硝基戊烷作为前体，得到该起始原料xvi)。步骤2：

通过对中间体A步骤3描述的方法，得到所需的化合物xviii。碳酸钠用作碱替代NaOH。该粗品物质xviii无须纯化即可用于下一步骤。步骤3：

向xviii(4.8g，10.7mmol)在二氯甲烷/DMF(4/1，25mL)中的冷的(-20℃)溶液中加入二甲胺盐酸盐(959mg，11.77mmol)、二异丙基乙胺(4.2mL，24.1mmol)和BOP(6.14g，13.89mmol)。在-8℃下，使之放置过夜。用二氯甲烷稀释反应混合物，并用10％枸橼酸溶液、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化残余物，使用97.5/2.5二氯甲烷/MeOH洗脱，得到2.4g的xix(47％收率)。HRMS(FAB)C₂₄H₃₉N₄O₆的计算值：479.2870(M+H)⁺。实测值：479.2862。步骤4：

通过对中间体A步骤7描述的方法，得到所需的产物E。该粗品物质无须进一步纯化即可使用。中间体F步骤1

向xx(20.0g，86.5mmol)在苯(300mL)和MeOH(50mL)中的冷的(0℃)溶液中滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2M在己烷中，56mL，112mmol)直到溶液保持黄色不变。浓缩反应混合物，得到21g的xxi(99％收率)，其纯度足以用于下一步骤。HRMS(FAB)C₁₁H₂₀NO₅的计算值：246.1341(M+H)⁺。实测值：246.1347。步骤2

向三苯基膦(31.97g，121.9mmol)和甲磺酸(7.66mL，118.1mmol)在甲苯中的冷的(～5℃)机械搅拌着的混合物中缓慢加入DEAD(26.47g，152mmol)，期间维持反应物温度低于35℃。加入完成后，将反应混合物冷却至20℃并加入xxi(23.71g，96.8mmol)在甲苯中的溶液，随后加入三乙胺(5.39mL，38.7mmol)。把混合物加热至70-75℃6小时，并冷却至5-10℃1小时。滤除所有的固体物质并用5％KH₂PO₄溶液和盐水洗涤滤液。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析残余物，使用95/5二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到26g的xxii(83％收率)。HRMS(FAB)C₁₂H₂₂NO₇S的计算值：324.1117(M+H)⁺。实测值：324.1115。步骤3

将甲磺酸酯xxii(26g，80.4mmol)溶于DMF中，并真空蒸发所有的挥发物。(小心：必须经该方法除去痕量的二氯甲烷)。向剩余的溶液中加入叠氮化钠(5.75g，88.4mmol)并温热至70℃5小时。冷却反应混合物，用EtOAc稀释并用饱和NaHCO₃洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩，得到18g(83％收率)的xxiii，其对进一步研究是足够纯的。步骤4

通过对中间体A步骤5描述的方法，得到所需的产物F。该粗品物质无须进一步纯化即可使用。实施例实施例1：式1A和1B化合物的制备：步骤A：

在室温、伴随搅拌下，向Boc-Hyp-OH(7.0g，30.3mmol)和苄基3-溴代丙基醚(7.8g，34.0mmol)在无水DMF(400mL)中的溶液中加入氢化钠(3.5g，60％悬浮液在矿物油中，87.5mmol)和碘化钠(0.5g，3.33mmols)。在室温下，把生成的悬浮液剧烈搅拌过夜(18h)。用缓慢加入水(50mL)小心猝灭反应物，并用6N HCl溶液(20mL)酸化。加入乙酸乙酯(800mL)、盐水(150mL)和另外的水(150mL)后，分离所形成的两层，并用5％H₃PO₄(3×200mL)洗涤有机层。然后用MgSO₄将它干燥，过滤，真空浓缩，得到为油的1b，它无须进一步纯化即可用于步骤B中。步骤B：

将得自步骤A的酸1b溶于苯(25mL)和甲醇(28mL)中。在室温下，向该溶液中小心加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷溶液(27mL，2.0M在环己烷中)。在室温下搅拌1小时后，真空浓缩，得到甲基酯。快速层析(8-20％EtOAc-CH₂Cl₂)得到为油的1c(5.15g；13.1mmol，43％，2步)。步骤C：

将Boc-氨基甲基酯1c(5.83g，14.8mmol)溶于在二噁烷中的4NHCl(80mL，320mmol)中并在室温下搅拌生成的溶液。经TLC监测反应进展。5小时后，真空浓缩溶液，并在真空下把残余物保持过夜，得到白色固体，它无须进一步纯化即可用于下一步骤偶合反应。步骤D：

在-20℃下，向氨基酯1d(得自步骤1B)、N-Boc-环己基甘氨酸(4.10g，14.9mmol)、HOOBt(2.60g，15.9mmol)和EDCI(3.41g，17.8mmol)在无水DMF(150mL)和CH₂Cl₂中的溶液中加入NMM(6.50mL，59.1mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持过夜(18h)。然后在空气中搅拌并使之温热至室温1小时。加入EtOAc(450mL)、盐水(100mL)和5％H₃PO₄(100mL)。用5％H₃PO₄(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×150mL)、水(150mL)和盐水(150mL)洗涤分离的有机溶液，经硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。快速层析(10-20％EtOAc-CH₂Cl₂)得到为白色固体的1e(6.60g，84％2步)。¹HNMR(400MHz，d₆-DMSO)δ7.36-7.25(m，5H)，6.87(d，J＝8.9Hz，1H)，4.46-4.40(m，2H)，4.25(t，J＝8.3Hz，1H)，4.11(s，1H)，4.05-4.04(m，1H)，4.03-3.94(m，1H)，3.60(s，3H)，3.50-3.41(m，4H)，2.25-2.20(m，1H)，1.95-1.88(m，1H)，1.77-1.55(m，9H)，1.35(s，9H)，1.19-0.90(m，4H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.0，170.7，155.6，138.8，128.2，127.4，127.3，78.0，77.1，71.9，66.6，65.1，57.4，56.3，51.8，34.5，29.6，28.6，28.2，25.9，25.6，25.5。步骤E：

将Boc-氨基甲酯1e(6.53g，12.3mmol)溶于4N HCl(60mL，240mmol)中并在室温下搅拌生成的溶液。经TLC监测反应进展。4小时后，真空浓缩溶液并把残余物在真空下保持过夜，得到白色固体，其无须进一步纯化即可用于下一步骤偶合反应。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ7.36-7.27(m，5H)，4.43(s，2H)，4.35-4.31(m，1H)，3.88(d，J＝11.7Hz，1H)，3.62(s，3H)，3.62-3.57(m，2H)，3.53-3.41(m，3H)，2.32-2.27(m，1H)，1.97-1.91(m，1H)，1.79-1.60(m，8H)，1.17-1.07(m，5H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ171.5，167.4，138.6，133.3，129.1，128.8，128.2，127.4，77.1，71.9，66.5，65.3，57.8；54.9，52.4，52.0，34.0，29.6，27.7，27.0，25.6，25.5，25.48；HRMS m/z 433.2702[C₂₄H₃₆N₂O₅的计算值：433.2702]。步骤F：

在-20℃下，向胺1f(得自步骤1D)、3-羟基苯乙酸(1.90g，12.5mmol)、HOOBt(2.10g，12.9mmol)和EDCI(2.85g，14.9mmol)在无水DMF(250mL)和CH₂Cl₂(100mL)中的溶液中加入NMM(4.20mL，38.2mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持过夜(18h)。然后在空气中搅拌并使之温热至室温1小时。加入EtOAc(500mL)、盐水(100mL)和5％H₃PO₄(100mL)。用5％H₃PO₄(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×150mL)、水(150mL)和盐水(150mL)洗涤分离的有机溶液，经硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。快速层析(10-20％EtOAc-CH₂Cl₂)得到为白色固体的1g(6.30g，11.1mmol，90％(2步))。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ9.26(s，1H)，8.19(d，J＝8.5Hz，1H)，7.36-7.25(m，5H)，7.05-7.01(m，1H)，6.66-6.64(m，1H)，6.60-6.57(m，1H)，4.46-4.39(m，2H)，4.34(t，J＝8.3Hz，1H)，4.29-4.25(m，1H)，4.09-4.08(m，1H)，3.91(d，J＝11.0Hz，1H)，3.66-3.58(m，1H)，3.61(s，3H)，3.50-3.39(m，5H)，3.30(d，J＝13.7Hz，1H)，2.24-2.18(m，1H)，1.95-1.89(m，1H)，1.74-1.57(m，8H)，1.18-0.89(m，5H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.0，170.3，170.0，157.1，138.6，137.6，128.9，128.2，127.4，127.3，119.6，116.1，113.2，76.9，71.8，66.6，65.2，57.4，54.7，51.9，51.8，41.8，34.4，29.6，28.5，28.0，25.5，25.5；HRMS m/z 567.3073[C₃₂H₄₂N₂O₇的计算值，567.3070]。步骤G：

于室温、氮气下，向苄基醚1g(6.23g，11.0mmol)在乙醇(200mL)中的溶液中小心加入10％Pd-C(1.5g)。在氢气下，于室温下，把生成的悬浮液剧烈搅拌23小时。小心过滤后，真空浓缩溶液。快速层析(2-5％MeOH-CH₂Cl₂)得到为无色油的1h(4.54g，9.52mmol，87％)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ9.26(s，1H)，8.22(d，J＝8.6Hz，1H)，7.06-7.02(m，1H)，6.66-6.58(m，3H)，4.42-4.40(m，1H)，4.35-4.31(s，1H)，4.27(t，J＝8.3Hz，1H)，4.10-4.09(m，1H)，3.92(d，J＝11.2Hz，1H)，3.64(dd，J＝11.2，4.3Hz，1H)，3.61(s，3H)，3.59-3.43(m，5H)，3.40-3.38(m，1H)，2.26-2.21(m，1H)，1.97-1.90(m，1H)，1.74-1.55(m，8H)，1.18-0.89(m，5H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.0，170.3，170.1，157.1，137.6，129.0，119.6，116.0，113.3，76.9，65.2，57.6，57.4，54.8，51.9，51.8，41.7，34.4，32.6，28.5，28.0，25.9，25.52，25.49；HRMS m/z 477.2606[C₂₅H₃₆N₂O₇的计算值，477.2601]。步骤H：

将苯酚醇1h(4.50g，9.43mmol)和ADDP(6.60g，26.2mmol)在无水CH₂Cl₂中的溶液用氩气通过多孔玻璃鼓泡器鼓泡20分钟。向在0℃下的该溶液中加入三苯基膦(4.10g，16.3mmol)。在0℃下搅拌20分钟后，加入第二份三苯基膦(3.40g，13.5mmol)。然后把溶液温热至室温并在氮气下搅拌过夜(24h)，直到TLC表明起始原料完全消耗。真空除去溶剂后，经快速层析部分纯化残余物(1-2％MeOH在CH₂Cl₂中)，得到大环1i和三苯基膦氧化物的混合物。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.47(d，J＝9.7Hz，1H)，7.17-7.13(m，1H)，6.79(s，1H)，6.73(d，J＝1.8Hz，1H)，6.71(d，J＝1.8Hz，1H)，4.50-4.45(m，1H)，4.24(dd，J＝10.3，7.6Hz，1H)，4.17-4.06(m，4H)，3.68(d，J＝15.1Hz，1H)，3.63(s，3H)，3.60-3.51(m，2H)，3.37(d，J＝15.1Hz，1H)，3.35-3.27(m，1H)，2.51-2.43(m，1H)，1.85-1.47(m，9H)，1.22-1.12(m，3H)，0.97-0.88(m，2H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.0，170.0，169.8，158.4，138.1，129.1，121.8，115.4，112.2，77.0，64.9，63.6，57.0，54.3，53.4，51.8，41.3，33.2，28.9，28.5，28.2，26.0，25.2；HRMS m/z 459.2495[C₂₅H₃₄N₂O₆的计算值，459.2495]。步骤I：

将氢氧化锂水溶液(0.45g在30mL H₂O中)加入到甲酯1i在THF(30mL)和甲醇(30mL)中的0℃溶液中。把混合物在冰浴中搅拌并温热至室温维持4小时。经TLC监测反应进展。真空除去挥发物后，加入EtOAc(150mL)和水(30mL)并分离这两层。再次用CH₂Cl₂(150mL)提取水溶液，之后酸化至pH＝1。然后加入EtOAc(200mL)并用固体氯化钠使水溶液饱和。分离各层后，用EtOAc(2×150mL)提取水层。合并有机溶液，经硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩，得到为浅黄色泡沫的1j(1.45g，3.26mmol，35％，2步)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ12.32(bs，1H)，8.45(d，J＝9.5Hz，1H)，7.17-7.13(m，1H)，6.73-6.70(m，1H)，6.79(s，1H)，6.73-6.70(m，2H)，4.47(t，J＝9.7Hz，1H)，4.17-4.00(m，5H)，3.68(d，J＝15.1Hz，1H)，3.58-3.45(m，2H)，3.39-3.21(m，2H)，247-2.41(dd，J＝13.4，7.6Hz，1H)，1.85-1.56(m，9H)，1.19-1.11(m，3H)，0.93-0.87(m，2H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ173.2，170.2，170.0，158.4，138.1，129.3，122.0，115.5，112.2，77.3，65.1，63.8，57.3，54.2，53.7，41.5，33.6，29.0，28.6，28.4，26.1，25.4；HRMS m/z445.2335[C₂₄H₃₂N₂O₆的计算值，445.2339]。步骤J：

在-20℃下，向酸1j(0.59g，1.33mmol)、胺A(H₂N-NVa-CH(OH)-CO-Gly-Phg-NMe₂，0.55g，1.37mmol)、HOOBt(250mg，1.53mmol)和EDCI(315mg，1.64mmol)在无水DMF(50mL)和CH₂Cl₂(50mL)中的溶液中加入NMM(0.50mL，4.55mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，在冰箱中把反应混合物保持40小时。然后加入EtOAc(200mL)、盐水(50mL)和5％H₃PO₄(50mL)。用5％H₃PO₄(80mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×80mL)、水(80mL)和盐水(80mL)连续洗涤分离的有机溶液，经硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩。快速层析(4-7.5％MeOH-CH₂Cl₂)得到为白色固体的四种非对映体的混合物1k(0.59g，0.75mmol，56％)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.54-8.35(m，2H)，7.95-6.98(m，8H)，6.79-6.77(m，1H)，6.72-6.70(m，2H)，5.96-5.73(m，2H)，4.53-4.45(m，1H)，4.35-3.61(m，11H)，3.54-3.41(m，1H)，3.40-3.22(m，1H)，2.93-2.92(m，3H)，2.84(s，3H)，2.42-2.17(m，1H)，1.87-1.55(m，10H)，1.49-1.06(m，7H)，0.98-0.75(m，5H)；¹³C NMR(100 MHz，d₆-DMSO)δ172.1，171.9，171.8，170.8，170.7，170.4，170.4，170.3，170.0，169.8，169.7，169.6，169.2，169.2，167.9，167.8，167.8，158.4，158.3，138.2，138.15，138.11，138.07，137.6，137.50，137.48，129.1，128.5，128.3，127.8，127.7，121.7，121.6，115.4，11 5.3，112.09，112.07，112.0，111.9，76.9，76.8，73.3，72.1，71.9，64.9，64.8，63.2，58.7，58.5，57.9，57.8，54.6，54.5，54.48，53.8，53.78，53.7，53.66，53.0，52.9，51.0，50.8，50.7，41.6，41.5，41.4，41.3，36.6，35.3，33.9，33.86，33.5，32.9，32.1，29.9，29.0，28.9，28.5，28.4，28.3，26.0，25.9，25.3，25.25，25.2，18.6，18.56，18.5，13.8，13.7；HRMS m/z791.4339[C₄₂H₅₈N₆O₉的计算值，791.4344，误差＝1ppm]。步骤K：

在0℃下，向羟基酰胺1k(0.57g，0.72mmol)和Des-Martin试剂(0.76g，1.8mmol)的混合物中加入无水CH₂Cl₂。在0℃下，剧烈搅拌生成的白色悬浮液并温热至室温，在冰浴中保持4小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液和亚硫酸氢钠溶液(各50mL)并把混合物剧烈搅拌10分钟，之后，分离各层。用(2×150mL)提取水溶液。经硫酸镁干燥合并的有机溶液，过滤，真空浓缩。快速层析(2-4％MeOH-CH₂Cl₂)得到为白色固体的两种非对映体1A(250mg，0.32mmol)和1B(217mg，0.28mmol，82％合并后的收率)。实施例2：化合物2的制备：步骤A：

除了用胺B替代胺A以外，按照实施例1步骤J的方法，制备所需的化合物2a。以60％收率得到作为以白色固体形式存在的不可分离的非对映体混合物的羟基酰胺。步骤B：

按照实施例1步骤K的方法，从羟基酰胺2a制备所需的酮酰胺。以78％收率得到作为不可分离的非对映体混合物的产物，为白色固体的形式。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.69-8.57(m，1H)，8.45-8.36(m，1H)，7.95-7.72(m，1H)，7.64-7.53(m，1H)，7.41-7.31(m，5H)，7.16-6.97(m，1H)，6.79-6.70(m，3H)，5.97-5.75(m，1H)，5.31-5.27(m，1H)，4.52-4.44(m，1H)，4.35-3.61(m，11H)，3.54-3.41(m，1H)，3.39-3.21(m，1H)，2.42-2.16(m，1H)，1.85-1.54(m，9H)，1.49-1.05(m，16H)，0.95-0.70(m，5H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.3，172.2，172.0，171.9，170.9，170.7，170.5，170.5，170.4，170.1，169.9，169.7，169.5，168.6，168.5，158.5，158.4，138.2，138.2，138.1，136.7，132.1，131.6，131.5，129.2，129.1，128.8，128.7，128.1，127.7，127.6，127.6，127.5，127.4，127.4，121.7，116.4，115.4，115.4，113.3，112.1，112.1，112.0，81.3，77.0，76.9，76.9，73.4，72.3，72.0，64.9，64.8，63.3，58.8，56.9，56.8，54.7，54.6，54.6，53.9，53.9，53.8，51.1，50.8，41.6，41.4，41.3，34.0，33.9，29.1，29.0，28.6，28.5，28.4，28.4，28.3，27.5，26.0，26.0，25.4，25.3，25.2，18.7，18.6，18.5，13.9，13.8；HRMS m/z 820.4493[C₄₄H₆₁N₅O₁₀的计算值，820.4497]。实施例3：式3化合物的制备如下：

步骤A：

在室温下，将叔丁基酯2(26mg，0.032mmol)在三氟乙酸(2mL)和CH₂Cl₂(2mL)中的溶液搅拌3小时。真空除去挥发物后，将残余物溶于50％MeOH-CH₂Cl₂中，真空浓缩至干，得到灰白色固体(24mg，0.032mmol，定量)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.73-8.65(m，2H)，8.40(dd，J＝9.5，2.6Hz，1H)，8.24-8.05(1H)，7.64-7.55(m，1H)，7.41-7.32(m，5H)，7.15(t，J＝7.8Hz，1H)，6.80-6.71(m，3H)，5.35(dd，J＝7.5，1.9Hz，1H)，5.04-4.96(m，1H)，4.48-4.43(m，1H)，4.37-4.22(m，1H)，4.16-3.27(m，11H)，2.35-2.31(m，1H)，1.84-0.70(m，21H)；¹³C NMR(100MHz，d₆-DMSO)δ196.7，171.7，171.4，171.3，170.0，169.7，167.5，161.0，160.7，158.5，158.5，158.4，138.2，138.2，137.1，137.0，132.1，132.1，131.6，131.5，131.5，129.2，128.8，128.7，128.7，128.6，128.0，127.7，127.5，127.5，121.8，115.4，112.2，76.9，76.8，65.0，64.9，63.4，63.3，58.2，57.4，56.3，56.2，56.2，54.6，54.5，53.8，53.4，53.2，41.5，41.5，41.4，40.2，33.9，33.7，31.9，31.7，29.2，29.0，28.6，28.3，26.1，25.3，18.7，18.6，13.5；HRMS m/z762.3705[C₄₀H₅₁N₅O₁₀的计算值，762.3714]。实施例4：式4A和4B化合物的制备：

步骤A：

通过对实施例1步骤A描述的方法，得到所需的产物4a。可以说，该粗品物质直接用于下一步骤。步骤B：

通过对实施例1步骤B描述的方法，得到所需的产物4b。经快速柱层析纯化该物质，使用80/20-75/25己烷/乙酸乙酯洗脱，以50％收率得到为无色油的4b。步骤C：

通过对实施例1步骤C描述的方法，制备所需的化合物4c。该物质可直接原样向下进行。步骤D：

通过在实施例1步骤D中描述的方法得到所需的产物4d。处理后，该物质足够纯可用于下一步骤。HRMS(FAB)C₃₀H₄₇N₂O₇的计算值：547.3383(M+H)⁺。实测值：547.3372。步骤E：

通过在实施例1步骤E中描述的方法得到所需的产物4e。可以说，该粗品物质可直接用于下一步骤。步骤F：

通过在实施例1步骤F中描述的方法得到所需的产物4f。经快速柱层析纯化该物质，使用80/20-60/40二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以85％收率得到4f。HRMS(FAB)C₃₃H₄₅N₂O₇的计算值：581.3227(M+H)⁺。实测值：581.3222。步骤G：

通过在实施例1步骤G中描述的方法得到所需的产物4g。可以说，该粗品物质可直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₂₆H₃₉N₂O₇的计算值：491.2757(M+H)⁺。实测值：491.2761。步骤H：

通过在实施例1步骤H中描述的方法得到所需的产物4h。经柱层析纯化，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到含有三苯基膦氧化物的4h。该混合物直接用于下一步骤。步骤I：

通过在实施例1步骤I中描述的方法得到所需的产物。4i(2步)的产率＝24％。¹H NMR (DMSO-d₆)δ0.90-0.95(m，2H)，1.10-1.16(m，3H)，1.51-1.79(m，11H)，2.43(dd，1H)，3.29-3.32(m，2H)，3.50-3.54(m，1H)，3.62-3.68(m，2H)，3.91-3.99(m，3H)，4.04-4.08(m，2H)，4.46(t，1H)，6.67-6.72(m，3H)，7.13(app，t，1H)，8.36(d，1H)，12.40(br.s，1H)；¹³CNMR(DMSO-d₆)δ25.26，25.31，25.97，26.62，28.42，33.28，39.75，41.49，53.50，54.28，57.45，67.57，67.98，77.25，111.07，115.23，121.48，129.11，137.99，158.33，170.07，172.92；HRMS(FAB)C₂₅H₃₅N₂O₆的计算值：459.2495(M+H)⁺。实测值：459.2494。步骤J：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，可合成期望的产物4j。处理后，该物质纯度足以用于下一步骤。HRMS(FAB)C₄₃H₆₁N₆O₉的计算值：805.4500(M+H)⁺。实测值：805.4492。步骤K：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物4A和4B。经快速柱层析纯化，使用100/0-99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到分离的异构体4A和4B和一些混合物。合并收率＝34％(2步)。HRMS(FAB)C₄₃H₅₉N₆O₉的计算值：803.4344(M+H)⁺。实测值：803.4339(4A)，803.4347(4B)。实施例5：化合物5的制备：

步骤A：

如先前对实施例2步骤A描述的那样，可合成期望的产物5a。处理后，该物质纯度足以用于下一步骤。HRMS(FAB)C₄₅H₆₄N₅O₁₀的计算值：834.4653(M+H)⁺。实测值：834.4648。步骤B：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物5。经快速柱层析纯化，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，以31％收率(2步)得到为非对映体混合物的5。HRMS(FAB)C₄₅H₆₂N₅O₁₀的计算值：832.4497(M+H)⁺。实测值：832.4497。实施例6：化合物6的制备：

步骤A：

如先前对实施例3步骤A描述的那样，以定量的收率合成期望的产物6。HRMS(FAB)C₄₁H₅₄N₅O₁₀的计算值：776.3871(M+H)⁺。实测值：776.3865。实施例7：化合物7A和7B的制备：步骤A：

按照实施例1步骤A的方法，自1c制备所需的产物7a。该粗品产物无须进一步纯化即可用于步骤B。步骤B：

按照实施例1步骤B的方法，自7a制备所需的化合物7b。步骤C：

按照实施例1步骤C的方法，自7b制备所需的化合物7c。该产物无须进一步纯化即可用于步骤D。步骤D：

按照实施例1步骤D的方法，自7c制备所需的化合物7d。步骤E：

按照实施例1步骤E的方法，自7d制备所需的化合物7e。该产物无须进一步纯化即可用于步骤F。步骤F：

按照实施例1步骤F的方法，自7e制备所需的化合物7f。步骤G：

按照实施例1步骤F的方法，自7f制备所需的化合物7g。步骤H：

将苯酚醇7g(830mg，1.79mmol)和ADDP(1.36g，5.39mmol)在无水CH₂Cl₂(200mL)中的溶液用氩气通过多孔玻璃鼓泡器鼓泡20分钟。向在0℃下的该溶液中加入三苯基膦(1.41g，5.38mmol)。在0℃下搅拌20分钟后，把溶液温热至室温并在氮气下搅拌过夜(20h)。真空除去溶剂后，经快速层析纯化残余物(1-3％MeOH在CH₂Cl₂中)，得到所需的产物7h和三苯基膦氧化物的混合物，其无须进一步纯化即可用于步骤I。步骤I：

按照实施例1步骤I的方法，以36％收率(2步)自7h制备所需的化合物7i。步骤J：

按照实施例1步骤J的方法，以56％收率自7I和A制备所需的化合物7j。步骤K：

按照实施例1步骤K的方法，自7j制备所需的化合物7A和7B。实施例8：式8化合物的制备：步骤A：

除了用胺B替代胺A以外，按照实施例1步骤J的方法，制备所需的化合物8a。以57％收率得到不可分离的非对映体混合物的产物，为白色固体的形式。步骤B：

按照实施例1步骤K的方法，以72％收率自8a制备所需的化合物8。实施例9：式9化合物的制备：步骤A：

按照实施例3步骤A的方法，自8定量制备所需的化合物9。实施例10：式10A和10B化合物的制备：

向10a(10g，41mmol)在二氯甲烷(60mL)中的0℃的溶液中缓慢加入三乙胺(28.68mL，204mmol)。然后加入4-溴代苯磺酰氯(20.91g，82mmol)和DMAP(几粒结晶)并将温度维持在0℃30分钟。把反应混合物在冰箱中(～5℃)放置过夜，随后于2小时内缓慢温热至环境温度。此时，TLC分析显示起始原料完全消耗。用二氯甲烷稀释反应混合物，用饱和碳酸氢钠溶液和10％枸橼酸水溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化粗品混合物，使用100/0-95/5二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到18.4g(97％收率)为白色固体的对溴苯磺酸酯10b。¹H NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ1.41和1.45(2s，9H)，2.40-2.50(m，2H)，3.59-3.69(m，5H)，4.33-4.37和4.46(2dd，1H)，5.11(m，1H)，7.72-7.74(m，4H)；¹³C NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ28.18，28.27，36.01，36.98，51.59，52.03，52.20，52.35，56.95，57.22，57.28，78.35，79.53，80.66，129.10，129.26，132.66，135.66，135.81，153.25，153.64，171.45，171.78；HRMS(FAB)C₁₇H₂₃NO₇SBr的计算值：464.0379(M+H)⁺。实测值：464.0375。步骤B：

在氩气氛下，于0℃向氢化钠(60％悬浮液在矿物油中，187mg，4.68mmol)在DMF中的悬浮液中加入3-巯基丙醇(0.42mL，4.85mmol)。把混合物搅拌30分钟，期间维持该温度。缓慢加入对溴苯磺酸酯10b(1.5g，3.23mmol)在DMF(总体积＝10mL)中的溶液，并把混合物温热至环境温度2小时。通过倾入到冷的10％枸橼酸溶液中猝灭反应物。用乙酸乙酯提取水层，干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化粗品物质，使用85/15二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到800mg(78％收率)为油的硫化物10c；¹H NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ1.41和1.47(2s，9H)，1.83-1.89(m，2H)，2.13-2.34(m，2H)，2.69(t，2H)，3.23-3.49(m，2H)，3.73-3.78(m，5H)，3.86-3.95(m，1H)，4.33-4.37和4.42-4.46(2dd，1H)；¹³C NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ28.21，28.30，32.15，32.23，36.65，37.27，40.45，40.89，52.16，52.35，52.50，52.84，58.32，58.55，61.22，61.41，80.35，153.49，153.99，173.05，173.23；HRMS(FAB)C₁₄H₂₆NO₅S的计算值：320.1532(M+H)⁺。实测值：320.1528。步骤C：

通过对实施例1步骤C描述的方法，制备所需的化合物10d。反应条件为0℃，1小时。该物质可原样直接用于下一步骤。步骤D：

通过对实施例1步骤D描述的方法，制备所需的化合物10e。在-8℃下，该偶合反应进行2天。处理后，经TLC检测，以80％收率得到足够纯的产物10e；HRMS(FAB)C₂₂H₃₉N₂O₆S的计算值：459.2529(M+H)⁺。实测值：459.2523。步骤E：

通过对实施例1步骤E描述的方法，制备所需的化合物10f。该物质可原样直接向下进行。步骤F：

通过对实施例1步骤F描述的方法，制备所需的化合物10g。经快速柱层析纯化粗产物，使用98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，以40％收率得到为白色固体的10g；¹H NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ0.90-1.26(m)，1.66-1.88(m)，2.22-2.31(m，2H)，2.73(t，2H)，3.47(s)，3.5-3.55(m)，3.65-3.75(m)，3.88-3.94(dd，1H)，4.07-4.12(dd，1H)，4.53(t，1H)，4.62(t，1H)，6.73-6.80(m，4H)，7.17(t，1H)；¹³C NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ25.80，25.89，26.14，27.71，28.55，29.22，31.88，35.46，40.58，42.44，43.16，52.32，52.90，55.49，58.46，60.30，114.59，116.27，121.01，130.02，135.90，156.73，171.25，171.87，171.96；HRMS(FAB)C₂₅H₃₇N₂O₆S的计算值：493.2372(M+H)⁺。实测值：493.2364。步骤G：

通过对实施例1步骤G描述的方法，制备所需的化合物10h。将粗品产物悬浮于80/20乙酸乙酯/己烷中，并滤除固体物质。浓缩滤液，经快速柱层析纯化，使用80/20己烷/丙酮洗脱，得到22％的为固体的10h。¹H MR(CDCl₃)δ0.98-1.30(m)，1.64-1.90(m)，2.06-2.14(m，1H)，2.16-2.21(dd，2H)，2.62-2.70(m，2H)，3.38-3.46(m，2H)，3.60-3.66(m，3H)，3.71(s，3H)，3.88-3.94(dd，1H)，4.07-4.15(m，1H)，4.22-4.29(m，1H)，4.48(t，1H)，4.60(t，1H)，5.97(br t，1H)，6.76-6.81(m，2H)，6.99(br s，1H)，7.20(dd，1H)；HRMS(FAB)C₂₅H₃₅N₂O₅S的计算值：475.2267(M+H)⁺。实测值：475.2260。步骤H：

如对实施例1步骤H描述的那样，以定量收率合成为白色固体的在前的(advanced)中间体10i。¹H NMR(DMSO-d₆)δ0.88-0.96(m，2H)，1.10-1.14(m，3H)，1.59-1.76(m，7H)，1.88-1.94(m，1H)，2.09(app.t，1H)，2.61(dd，1H)，3.32(app.d，1H)，3.40-3.45(m，2H)，3.61(app.d，1H)，3.83(q，1H)，4.13(app.t，1H)，4.19(t，J＝7.32Hz，1H)，4.40(t，J＝9.52Hz，1H)，6.76-6.79(m，2H)，6.89(s，1H)，7.16(app.t，1H)，8.39(d，1H)，12.5(br.s，1H)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ25.33，25.41，26.01，26.44，28.09，28.62，29.24，34.90，39.50，41.40，42.30，53.18，54.44，58.06，66.94，114.88，115.25，122.28，129.20，137.84，157.90，169.25，170.29，172.59；HRMS(FAB)C₂₄H₃₃N₂O₅S的计算值：461.2110(M+H)⁺。实测值：461.2104。步骤I：

如先前对实施例1步骤I描述的那样，以定量收率制备为浅黄色固体的所需的化合物10j，处理后，经TLC检测所得到的物质的纯度足以用于进一步操作；HRMS(FAB)C₄₂H₅₉N₆O₈S的计算值：807.4115(M+H)⁺。实测值：807.4103。步骤J：

向10j(180mg，0.22mmol)在二氯甲烷中的溶液中连续加入DMSO(0.313mL，4.4mmol)、DCC(908mg，4.4mmol)和二氯乙酸(36.4μL，0.44mmol)。在环境温度下，把反应混合物搅拌过夜。通过加入5％枸橼酸水溶液(5mL)和MeOH(1mL)猝灭并搅拌30分钟。滤除固体物质，并用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤滤液。经Na₂SO₄干燥有机层，真空除去溶剂。经快速柱层析纯化粗品物质，使用100/0-98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，得到105mg(60％)为非对映体混合物的10A和10B。使一部分混合物(36mg)再次经历柱层析，得到纯的异构体10A(较高极性，白色固体，8mg)和纯的异构体10B(较低极性，白色固体，6mg)，其余为混合物。HRMS(FAB)C₄₂H₅₇N₆O₈S的计算值：805.3959(M+H)⁺。实测值：805.3958(10A)，805.3950(10B)。实施例11：式11化合物的制备：步骤A：

向10h(200mg，0.42mmol)在二氯甲烷(10mL)中的冷(0℃)的溶液中加入MCPBA(60％，364 mg，1.26mmol)。将反应混合物缓慢温热至环境温度16小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，并用饱和碳酸氢钠和亚硫酸氢钠溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化，使用98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，得到11a(138mg，65％收率)。HRMS(FAB)C₂₅H₃₅N₂O₇S的计算值：507.2165(M+H)⁺。实测值：507.2158。步骤B：

如对实施例1步骤I描述的那样，以90％收率合成为白色固体的期望的产物11b；HRMS(FAB)C₂₄H₃₃N₂O₇S的计算值：493.2008(M+H)⁺。实测值：493.2012。步骤C：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，以定量收率制备所需的化合物11c。处理后，经TLC检测所得到的物质纯度足以用于进一步操作。HRMS(FAB)C₄₂H₅₉N₆O₁₀S的计算值：839.4013(M+H)⁺。实测值：839.4019。步骤D：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物11。经快速柱层析纯化，使用98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，以4％收率(2步)得到11。HRMS(FAB)C₄₂H₅₇N₆O₁₀S的计算值：837.3857(M+H)⁺。实测值：837.3865。实施例12：式12A和12B化合物的制备：

步骤A：

通过对实施例1步骤D描述的方法，使用N-Boc-叔丁基甘氨酸作为偶合配体，得到所需的产物12a。经快速柱层析纯化该物质，使用90/10二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以73％收率得到12a。¹³C NMR(旋转异构体的混合物，CDCl₃)δ26.20，28.31，29.07，30.06，34.94，35.86，37.06，51.21，52.16，52.84，57.78，58.33，65.95，66.92，72.97，75.48，79.45，127.55，127.66，128.35，138.45，155.62，165.06，171.13，172.54；HRMS(FAB)C₂₇H₄₃N₂O₇的计算值：507.3070(M+H)⁺。实测值：507.3077。步骤B：

通过对实施例1步骤E描述的方法，制备所需的化合物12b。该物质直接用于下一步骤。步骤C：

通过对实施例1步骤F描述的方法，得到所需的产物12c。经快速柱层析纯化该物质，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，以91％收率得到12c。¹³C NMR(CDCl₃)δ26.24，29.93，34.95，35.96，43.48，52.18，53.09，57.06，58.06，66.10，66.92，72.93，77.43，114.59，116.14，120.87，127.58，127.64，127.74，128.37，130.02，135.95，138.39，156.90，170.65，171.06，172.38；HRMS(FAB)C₃₀H₄₁N₂O₇的计算值：541.2914(M+H)⁺。实测值：541.2921。步骤D：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物12d。滤除催化剂后，所得到的产物纯度足以进行随后的处理。¹³C NMR(CDCl₃)δ26.27，32.09，35.44，35.67，43.19，52.21，52.74，57.60，58.21，58.75，65.78，77.74，114.74，116.02，120.68，130.07，135.66，157.11，170.59，172.05，172.51；HRMS(FAB)C₂₃H₃₅N₂O₇的计算值：451.2444(M+H)⁺。实测值：451.2436。步骤E：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物12e。将该粗品物质悬浮于乙酸乙酯/己烷(大约1/1)中，并滤除不溶的固体物质。再重复该方法一次，浓缩滤液并作为二氯甲烷溶液应用到柱上。用75/25己烷/丙酮洗柱，得到29％的12e。HRMS(FAB)C₂₃H₃₃N₂O₆的计算值：433.2339(M+H)⁺。实测值：433.2339。步骤F：

如对实施例1步骤I描述的那样，以定量收率合成在前的中间体12f；¹H NMR(DMSO-d₆)δ0.96(s，9H)，1.66-1.70(m，1H)，1.75-1.82(m，2H)，2.43(dd，1H)，3.32-3.36(m，2H)，3.48-3.52(m，1H)，3.55(dd，1H)，3.84(app.d，1H)，3.99(app.d，1H)，4.06-4.10(m，3H)，4.16(dd，1H)，4.69(d，1H)，6.70-6.72(m，3H)，7.15(app.t，1H)，8.42(d，1H)，12.43(br.s，1H)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ26.25，28.54，33.31，34.97，41.22，53.96，56.11，56.97，63.36，64.96，76.84，111.94，115.25，121.73，129.13，138.36，158.27，169.85，170.15，173.04；HRMS(FAB)C₂₂H₃₁N₂O₆的计算值：419.2182(M+H)⁺。实测值：419.2180。步骤G：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物12g。处理后，该物质具有足够的纯度以直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₄₀H₅₇N₆O₉的计算值：765.4187(M+H)⁺。实测值：765.4175。步骤H：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物12A和12B。经快速柱层析纯化，使用98/2-96/4二氯甲烷/甲醇洗脱，得到分离的异构体12A和12B和一些混合物。合并收率＝57％(2步)。HRMS(FAB)C₄₀H₅₅N₆O₉的计算值：763.4031(M+H)⁺。实测值：763.4040(12A)，763.4047(12B)。实施例13：式13A和13B化合物的制备：步骤A：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物13a。处理后，该物质具有足够的纯度直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₄₁H₅₉N₆O₉的计算值：779.4344(M+H)⁺。实测值：779.4350。步骤B：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物13A和13B。使用100/0-96/4二氯甲烷/甲醇洗脱，经快速柱层析纯化，得到分离的异构体13A和13B和一些混合物。合并收率＝50％(2步)。HRMS(FAB)C₄₁H₅₇N₆O₉的计算值：777.4187(M+H)⁺。实测值：777.4177(13A)，777.4185(13B)。实施例14：化合物14的制备：步骤A：

用DMF的二叔丁基乙缩醛(69g，340mmol，5.0当量)处理乙烯基苯甲酸14a(10g，68mmol)在干燥甲苯(150mL)中的溶液并在回流下加热4小时。真空浓缩反应混合物，并用NaOH水溶液(1M，300mL)稀释。用乙醚(3×100mL)提取反应混合物。用NaOH水溶液(1M，100mL)、H₂O(2×100mL)、盐水(1×100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩。减压蒸馏残余物，得到为无色油的14b 9.2g(66.2％)。步骤B：

将氨基甲酸叔丁酯(5.96g，50.9mmol)在1-PrOH(68mL)中的溶液用NaOH水溶液(128mL，0.41M)和次氯酸叔丁酯(5.5g，50.9mmol)处理。把反应混合物冷却至0℃并加入在1-PrOH(64mL)中的(DHQ)₂Phal(780mg，1.00mmol)。加入4-乙烯基苯甲酸叔丁酯14b在1-PrOH(119mL)中的溶液，随后加入K₂OsO₄·H₂O(248mg，0.7mmol)并在0℃下将反应混合物搅拌4-5小时。反应物变为绿色并且所有的起始原料消失，伴随形成一个新的产物。真空浓缩反应混合物，并用H₂O(300mL)稀释残余物，用EtOAc(3×100mL)提取。用HCl水溶液(200mL)、盐水(100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，真空过滤，浓缩，经层析(SiO₂，EtOAc/己烷1∶2)纯化，得到为无色固体的14c(4.6g，82％)。¹H NMR(CD₃OD，δ)7.90(d，2H，J＝6.0Hz)，7.40(d，2H，J＝6.3Hz)，7.22(bd，1H，J＝5.7Hz)，4.69(bs，1H)，3.71-3.62(m，2H)，1.58(s，9H)，1.39(s，9Hz)；¹³C NMR(CD₃OD，75MHz)169.7，160.5，149.8，134.5，132.9，130.4，84.7，82.9，68.7，60.7，31.25，30.9 MS(FAB)675.2([2M+1]⁺，15)，338([M+1]⁺，15)，282(65)，225(50)，165(100)；HRMS C₁₈H₂₈NO₅(M+1)的计算值：338.1887(M+H)⁺。实测值：338.1967。步骤C：

将芳族化合物14c(1.0g，2.96mmol)在CH₃OH(20mL)中的溶液用Rh/C(10％ w/w 100mg)处理并氢化(60磅/平方英寸)2天。通过硅藻土垫过滤反应混合物，真空浓缩残余物，得到14d。并经层析(SiO₂，EtOAc/己烷2∶3)纯化粗品产物，得到顺式化合物14d(830mg，83％)，将其从己烷中结晶进一步纯化。¹H NMR(CD₃OD，δ)6.31(d，1H，J＝6.9Hz)，3.58-3.49(s，2H)，3.40(bd，1H，J＝4.8Hz)，2.48-2.46(m，1H)，2.1-1.98(m，2H)，1.61-1.2(m，7H)，1.45(s，9H)，1.42(s，9H)；¹³C NMR(CD₃OD，75MHz)176.2，158.5，81.2，79.8，63.1，57.2，41.8，38.8，28.8，28.3，27.7，27.5，25.9。MS(FAB)687.2([2M+1]⁺，5)，344([M+1]⁺，20)，232(40)，188(100)，107(13)；C₁₈H₃₄NO₅(M+1)的HRMS计算值：344.2437；实测值：344.2444。C₁₈H₃₃NO₅的CHN计算值C＝64.07％，H＝8.07％，N＝4.15％，实测值C＝64.32％，H＝8.21％，N＝4.32％。步骤E：

将氨基醇14d(3.3g，11.08mmol)在干燥THF(200mL)中的溶液冷却至-78℃(干冰/丙酮，内温-68℃)，用LDA(44mL，2M溶液在庚烷中，88mmol，8.0当量)处理。在-78℃下，把反应混合物搅拌2小时并用CH₃OH(20mL)猝灭。用HCl水溶液(150mL，1M)处理反应混合物并用乙醚(3×100mL)提取。用盐水(50mL)提取合并的乙醚层，干燥(MgSO₄)，真空浓缩，并通过从沸腾的己烷中结晶纯化。从母液中分离出的固体主要为顺式立体异构体，而浓缩母液得到纯的反式异构体。以上程序重复另外两次，得到2.7g的反式化合物和600mg的顺式/反式混合物。¹³C NMR(CDCl₃，75MHz)175.3，156.6，79.8，63.6，57.0，44.1，38.3，37.7，28.9，28.6，28.4，28.1，26.6，26.1。MS(电喷雾)344(M⁺，50)，288(50)，232(90)，188(100)。步骤F：

用H₂O(22mL)处理醇14e(2.6g，7.6mmol)在CH₃CN(150mL)和CCl₄(150mL)中的溶液，冷却至0℃，用高碘酸(7.05g，30.92mmol，4.0当量)和RuCl₃·3H₂O(60mg，03mmol，4mol％)处理。在室温下，将反应混合物搅拌3小时，真空浓缩。用水(150mL)稀释残余物，并用EtOAc(3×100mL)提取。用H₂O(100mL)和NaOH水溶液(1M，3×100mL)提取合并的有机层。用HCl(6M，pH～1)酸化合并的水层并用EtOAc(3×100mL)提取。合并乙酸乙酯层，用盐水(100mL)提取，干燥(Na₂SO₄)，真空过滤，浓缩，得到酸14f(1.8g，66％)，它无须进一步纯化即可用于进一步的偶合。MS(FAB)380.2([M+Na]⁺，30)358([M+1]⁺，5)，302(20)，258(20)，246(100)，202(70)，200(20)步骤G：

用脯氨酸化合物1d(1.92g，5.85mmol，1.1当量)处理Boc-反式-4-叔丁基羧基-环己基甘氨酸14f(1.9g，5.3mmol)在CH₂Cl₂(30mL)中的溶液并冷却至0℃。用Hünigs碱(1.51g，11.7mmol，2.2当量，2.15mL)处理反应混合物，随后加入BOP试剂溶液(2.6g，5.85mmol，1.1当量)。在室温下，将反应混合物搅拌12小时，用HCl水溶液(1M，100mL)稀释，并用EtOAc(3×100mL)提取。用NaOH水溶液(1M，100mL)、盐水(100mL)提取合并的乙酸乙酯层，干燥(Na₂SO₄)，真空过滤，浓缩，并经层析(SiO₂，EtOAc/己烷2∶3)纯化，得到为无色泡沫的14g(1.8g，54％)；¹H NMR(CD₃OD，δ，旋转异构体的混合物)7.32-7.23(m，5H)，6.64(d，1H，J＝9.0Hz)，4.47-4.39(m，3H)，4.19-4.04(m，3H)，3.74(s，3H)，3.66-3.56(m，4H)，2.55-2.10(m，2H)，1.99-1.00(m，12H)，1.42(s，9H)，1.40(s，9H)。¹³C NMR(CD₃OD，δ，旋转异构体的混合物)175.6，174.6，172.4，172.0，156.4，138.5，128.1，127.5，127.4，127.3，79.8，79.7，79.0，77.5，72.5，66.7，65.4，58.1，56.6，52.1，51.3，43.9，40.4，39.4，38.6，34.6，29.8，28.4，27.9，27.3，26.1，25.4，24.5；MS(FAB)633([M+1]+，11)，533(55)，477(24)，428(5)，294(100)，234(12)，156(40)，128(39)；C₃₄H₅₂NO₉的CHN计算值C64.53％H8.28％N4.43％；实测值C64.41％H8.00％N4.19％步骤H：

在室温下，将Boc-反式-4-叔丁基羧基环己基甘氨酸14g(1.8g)在HCl(4M的二噁烷溶液，60mL)中的溶液搅拌4-5小时。经TLC跟踪(EtOAc/己烷3∶7)用于起始原料消失和基线产物出现的反应物。真空浓缩反应混合物，并用泵干燥残余物过夜。固体14h无须进一步纯化即可用于偶合。步骤I：

在0℃下，将3-羟基苯乙酸14i(501mg，3.29mmol，1.8当量)和胺盐酸盐14h(1.79g，2.99mmol)在干燥CH₂Cl₂(30mL)中的溶液用Hünigs碱(850mg，6.59mmol，2.20当量，1.2mL)和BOP试剂(1.5g，3.29mmol，1.1当量)处理并在室温下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并用HCl水溶液(1M，250mL)稀释。用EtOAc(3×100mL)提取水层。用NaOH水溶液(1×100mL)、盐水(1×100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩并经层析(EtOAc/己烷1∶1)纯化，得到为无色固体的14j(710mg，36％)。步骤J：

用Pearlmans催化剂(10％Pd(OH)₂/C)处理偶合的化合物14j(710mg，1.1mmol)在CH₃OH(50mL)中的溶液并氢化(H₂，40磅/平方英寸)12小时。通过硅藻土垫滤除Pd/C，并浓缩滤液，无须进一步纯化即可用于下一步骤结晶。R_f0.12(丙酮/己烷3∶7)；¹H MR(CD₃OD，δ，旋转异构体的混合物)8.25(bs，1H)，7.01(bt，1H，J＝7.2Hz)，6.72(bs，1H)，6.65(d，2H，J＝7.8Hz)，4.79-4.70(bs，3H)，4.55-4.41(bs，2H)，4.20-4.12(bs，2H)，3.77(s，3H)，3.66-3.44(bm，6H)，2.43-1.04(bm，14H)，1.40(s，9H)；¹³C NMR(CD₃OD，δ，旋转异构体的混合物)175.5，174.6，172.6，172.4，171.3，161.1，157.3，136.8，136.7，129.3，120.0，115.7，113.6，100.0，94.8，79.9，79.8，77.5，65.1，58.5，58.2，55.6，55.5，54.3，52.2，51.5，43.9，42.1，39.4，35.0，32.4，28.6，28.4，27.5，27.2，27.1，26.1，25.2，25.0；MS(FAB)：577([M+1]⁺，70)，521(10)，443(10)，387(10)，374(10)，318(15)，290(100)，248(30)；C₃₀H₄₅N₂O₉(M+H)⁺的HRMS计算值：577.3125；实测值：577.3133。步骤K：

在0℃下，于正压的干燥N₂下，用Ph₃P(818mg，3.12mmol，3.0当量)处理醇14k(600mg，1.05mmol)和ADDP(787mg，3.12mmol，3.0当量)在CH₂Cl₂(30mL)中的溶液。在室温下，把反应混合物搅拌24小时，真空浓缩，并经层析(SiO₂，丙酮/己烷2∶3)纯化残余物，得到环状产物的无色固体141(120mg，22％)；R_f0.73(丙酮/己烷1∶1)；¹HNMR(CD₃OD，δ)7.13(t，1H，J＝7.8Hz)，6.76(s，1H)，6.71(t，2H，J＝8.1Hz)，4.58(d，1H，J＝9.9Hz)，4.37(dd，1H，J＝7.8，2.7Hz)，4.23-4.11(m，4H)，3.74-3.61(m，2H)，3.66(s，3H)，3.59-3.40(m，2H)，2.54-2.41(m，1H)，2.19-2.10(m，1H)，1.98-1.42(m，10H)，1.43(s，9H)；¹³C NMR(CD₃OD，δ)175.6，172.4，172.1，170.8，159.0，137.0，129.1，121.7，115.7，112.2，94.8，79.8，77.4，65.2，64.0，57.6，55.2，53.8，51.3，44.0，41.5，39.1，33.3，28.7，28.1，26.9；MS(电喷雾)559([M+1]⁺，100)327(10)，189(20)；C₃₀H₄₃N₂O₈(M+1)⁺的HRMS计算值：559.3019；实测值：559.3025；C₃₀H₄₂N₂O₈·0.5H₂O的CHN计算值C＝63.47％，H＝7.63％，N＝4.93％；实测值C＝63.57％H＝7.46％，N＝4.93％。步骤L：

用LiOH(20mg，0.5mmol，2.0当量)处理甲酯141(120mg，0.22mmol)在THF(5.0mL)和H₂O(1.0mL)中的溶液。在室温下，把反应混合物搅拌3小时，加入CH₃OH(1.0mL)且搅拌另外1小时。把反应混合物与HCl(4.0M在二噁烷中，1mL)一起搅拌，真空浓缩且冷冻干燥除水，得到无色固体14m，可直接用于下一步骤偶合。步骤M：

将羧酸14m(110mg，0.21mmol)在DMF(3.0mL)和CH₂Cl₂(5.0mL)中的溶液用Hünigs碱(109mg，0.84mmol，4.0当量，155.0μL)和HOOBt(52mg，0.315mmol，1.5当量)处理。把反应混合物冷却至0℃并用EDCI(61mg，0.31mmol，1.5当量)处理。在0℃下，将反应混合物搅拌并在30分钟后用胺盐酸盐A处理。在室温下，把反应混合物搅拌24小时，真空浓缩以除去DMF和CH₂Cl₂。用HCl水溶液(100mL)稀释残余物，并用CH₂Cl₂(3×75mL)提取。用NaOH水溶液(1M，3×50mL)、盐水(100mL)提取合并的有机层，真空浓缩。残余物14n(79mg)无须进一步纯化即可氧化。步骤N：

用Dess-Martin试剂(110mg，0.25mmol，2.5当量)处理醇14n(79mg，88μmol)在CH₂Cl₂(4.0mL)中的溶液。在室温下，把反应混合物搅拌3小时，真空浓缩混合物。经层析(SiO₂，丙酮/己烷1∶1)纯化残余物，得到为无色固体的氧化产物14(29mg，38％)；MS(FAB)889[(M+1)⁺，100]844(20)，833(60)，788(30)，760(10)，655(10)，527(20)；C₄₇H₆₅N₆O₁₁的HRMS计算值：889.4711；实测值：889.4732。实施例15：化合物15的制备：

步骤A：

用TFA/CH₂Cl₂(1∶1，4mL)处理叔丁基酯14溶液(20.0mg，22.0μmol)并在室温下搅拌4小时。经TLC(CH₃OH/CH₂Cl₂ 1∶24)跟踪酯消失至基线。完成脱除保护后，真空浓缩反应混合物，并用CH₂C1₂/己烷反复处理残余物，浓缩，得到白色固体15(19mg，100％)；MS(电喷雾)833([M+1]⁺，60)661(10)，530(40)，391(75)，279(100)。实施例16：化合物16的制备：

步骤A：

按照实施例14步骤F的方法，自14d以70％收率制备所需的化合物16a。它无须进一步纯化即可用于偶合；MS(FAB)：380.2([M+Na]⁺，30)358([M+1]⁺，5)，302(20)，258(20)，246(100)，202(70)，200(20)；C₁₈H₃₂NO₆(M+1)⁺的HRMS计算值：358.2230；实测值：358.2237。步骤B：

按照实施例14步骤G的方法，自16a制备所需的化合物16b，收率41％；[α]_D-52.7(c0.3 CHCl₃，25)；¹H NMR(CDCl₃，δ)7.35-7.21(m，5H)，6.63(d，1H，J＝9.3Hz)，4.46(d，2H，J＝4.3Hz)，4.41(t，1H，J＝9.3Hz)，4.38-4.07(m，3H)，3.68(s，3H)，3.66-3.43(m，5H)，2.45(p，1H，J＝4.2Hz)，2.32(dd，1H，J＝7.8，5.7Hz)，2.02-1.90(m，3H)，1.90-1.56(m，3H)，1.56-1.24(m，24H)；¹³C NMR(CD₃OD，δ)174.7，172.4，172.0，156.4，138.4，128.0，127.5，127.4，79.8，79.0，77.5，72.5，66.6，65.3，58.0，55.3，52.1，51.3，40.4，38.6，34.7，29.7，27.4，27.03，26.1，24.5。MS(FAB)633.2[(M+1)⁺，100]；C₃₄H₅₃N₂O₉(M+1)⁺的HRMS计算值：633.3751；实测值：633.3759。步骤C：

按照实施例14步骤H的方法，从16b制备所需的化合物16c。该产物无须进一步纯化即可使用。步骤D：

按照实施例14步骤I的方法，自16c制备所需的化合物16d，收率41％。¹H NMR(CHCl₃，δ)7.34-7.26(m，5H)，7.12(t，1H，J＝7.5Hz)，6.72-6.67(m，3H)，4.76-4.64(m，1H)，4.47(s，2H)，4.51-4.42(m，1H)，4.11-4.02(m，2H)，3.68(s，3H)，3.70-3.65(m，1H)，3.55-3.43(m，6H)，2.54-2.42(m，1H)，2.28-2.39(m，1H)，2.1-1.9(m，3H)，1.86-164(4H)，1.50-1.38(m，14H)；¹³C NMR(CDCl₃，δ)175.0，172.4，171.5，171.1，157.1，138.5，136.0，130.1，128.5，127.9，127.7，121.0，116.0，114.8，80.5，77.6，73.0，66.9，66.2，58.2，54.3，52.5，52.3，43.4，39.4，39.9，34.9，30.0，28.2，26.8，26.6，26.0，24.0；MS(FAB)689[(M+Na)⁺，35]，667[(M+H)⁺，23]，633(5)，294(100)，204(39)，156(63)。步骤E：

按照实施例14步骤J的方法，由16d制备所需的化合物16e。该产物无须进一步纯化即可使用。步骤F：

按照实施例14步骤K的方法，自16e制备所需的化合物16f，收率20％。¹H NMR(CDCl₃，δ)8.56(d，1H，J＝7.2Hz)，7.14(t，1H，J＝6Hz)，6.86(s，1H)，6.66(d，1H，J＝6Hz)，6.73(dd，1H，J＝6.3，15Hz)，4.86-4.77(m，1H)，4.40(dd，1H，J＝3.0，2.7Hz)，4.24-4.13(m，4H)，3.70(s，3H)，3.70-3.66(m，2H)，3.66-3.32(m，3H)，2.53(dd，1H，J＝5.7，3.9Hz)，2.45-2.42(m，1H)，1.99-1.80(m，6H)，1.60-1.57(m，4H)，1.45-1.43(m，11H)；¹³C NMR(CDCl₃，δ)175.8，173.3，173.0，171.7，160.0，138.0，130.1，122.7，116.8，113.3，81.0，78.6，66.3，65.2，58.8，55.1，52.5，42.6，42.4，38.9，34.6，30.0，28.2，28.0，27.0，26.9，26.8，26.2；MS(FAB)559(M⁺，33)，327(33)，225(100)步骤G：

按照实施例14步骤H的方法，自16f制备所需的化合物16g。该产物无须进一步纯化即可使用。步骤H：

按照实施例14步骤L的方法，从16g和A制备所需的化合物16h。该产物无须进一步纯化即可使用。步骤I：

按照实施例14步骤N的方法，自16h以40％收率制备为无色固体的所需的化合物16。MS(电喷雾)889[(M+1)⁺，85)，637(20)，530(75)，265(100)；C₄₇H₆₅N₆O₁₁的HRMS计算值：889.4711；实测值：889.4699。实施例17：化合物17的制备：步骤A：

按照实施例15步骤A的方法，自16定量制备所需的化合物17。MS(FAB)833[(M+1)⁺，100)，788(10)，723(5)，308(100)。实施例18：式18化合物的制备：

步骤A：

向18a(15.0g，90mmol)在二噁烷(100mL)、水(100mL)和饱和碳酸氢钠(100mL)中的冷的(0℃)浆状物中加入叔丁氧基羰基酐(7.2g，33mmol)在二噁烷(100mL)中的溶液。把反应混合物缓慢温热至环境温度6小时。真空浓缩反应混合物。用水稀释残余物并用乙醚(2×150mL)提取。弃去醚层。用固体枸橼酸缓慢酸化水层(pH～4)，并用乙酸乙酯(3×150mL)提取。干燥(Na₂SO₄)有机层，真空浓缩，得到为白色泡沫的18b(14.6g，61％收率)。步骤B：

于2小时内，向18b(14.6g，54.68mmol)在甲苯(230mL)中的80℃溶液中滴加DMF-二叔丁基乙缩醛(53mL，218.72mmol)。加入完成后，在相同温度下把反应混合物维持1小时。然后冷却至环境温度，浓缩。经快速柱层析纯化残余物，使用96/4-90/10二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到所需的化合物18c(7.53g，43％收率)。HRMS(FAB)C₁₇H₂₆NO₅的计算值：324.1811(M+H)⁺。实测值：324.1807。步骤C：

向18c(7.5g，23.22mmol)在二氯甲烷(100mL)中的冷的(0℃)溶液中加入三乙胺(7.12mL，51.08mmol)，随后滴加三氟甲磺酸酐(4.30mL，25.54mmol)。把反应混合物缓慢温热至环境温度4小时。用饱和碳酸氢盐溶液猝灭，并提取进入二氯甲烷中。用饱和碳酸氢盐和盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，浓缩。经快速柱层析纯化棕色残余物，使用二氯甲烷洗脱，得到7.74g的18d(73％收率)。步骤D：

在氩气氛下，向烘箱干燥的烧瓶中加入THF(75mL，通过鼓泡氩气预先除氧)、乙酸钯(74mg，0.33mmol)、R-(+)-BINAP(311mg，0.495mmol)和碳酸铯(5.38g，16.5mmol)。向该混合物中先后加入18d(5.0g，11mmol)和二苯基酮亚胺(2.77mL，16.5mmol)。用氩气冲洗烧瓶并加热至回流12小时(过夜)。把反应混合物冷却至环境温度并用乙醚(500mL)稀释。用饱和氯化铵溶液(2×300mL)洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，浓缩。经快速层析纯化，使用100/0-90/10二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以67％收率得到所需的产物18e(3.58g)。步骤E：

向18e(3.0g，6.17mmol)在甲醇(62mL)中的溶液中加入乙酸钠(1.218g，14.8mmol)和羟胺盐酸盐(0.774g，11.11mmol)。在环境温度下，把反应混合物搅拌3小时。浓缩反应混合物，用二氯甲烷稀释并用0.1N NaOH溶液洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化，使用95/5-92/8二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以66％收率得到18f(1.31g)。步骤F：

向二氯甲烷(2mL)的冷的(-20℃)溶液中加入氯代磺酰基异氰酸酯(0.16mL，1.87mmol)。向其中加入在二氯甲烷(2mL)中的叔丁醇(0.18mL，1.87mmol)并缓慢温热至0℃2.5小时。此时，滴加18f(0.6g，1.87mmol)在含有三乙胺(0.52mL，3.73mmol)的二氯甲烷(6mL)中的溶液。把反应混合物温热至环境温度12小时(过夜)。加入饱和的碳酸氢盐和二氯甲烷，分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，浓缩。经快速层析纯化，使用95/5-90/10二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以63％收率得到18g(0.59g)。步骤G：

如先前对实施例1步骤C描述的那样，合成期望的产物18h。该物质可原样直接用于下一步骤。步骤H：

如先前对实施例1步骤D描述的那样，合成期望的产物18i。经快速层析纯化该粗品物质，使用98/2-90/10二氯甲烷/甲醇洗脱，以34％收率得到18i。步骤I：

如先前对实施例1步骤C描述的那样，合成期望的产物18j。该物质可原样直接用于下一步骤。步骤J：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物18k。处理后，该物质纯度足以用于下一步骤。步骤K：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物18。经快速柱层析纯化，使用98/2-92/8二氯甲烷/MeOH洗脱，以13％收率(2步)得到为非对映体混合物的11。实施例19：式19化合物的制备：

步骤A：

如先前对实施例3步骤A描述的那样，以定量收率合成期望的产物19。实施例20：式20A和20B化合物的制备：

步骤A：

通过对实施例1步骤F描述的方法，得到所需的产物20a。经快速柱层析纯化该物质，使用98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，以97％收率得到20a。HRMS(FAB)C₃₂H₄₃N₂O₇的计算值：567.3070(M+H)⁺。实测值：567.3073。步骤B：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物20b。经快速柱层析纯化该物质，使用98/2-96/4二氯甲烷/甲醇洗脱，以81％收率得到20b。HRMS(FAB)C₂₅H₃₇N₂O₇的计算值：477.2601(M+H)⁺。实测值：477.2606。步骤C：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物20c。经柱层析纯化，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到含有三苯基膦氧化物的20c。该混合物直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₂₅H₃₅N₂O₆的计算值：459.2495(M+H)⁺。实测值：459.2490。步骤D：

通过对实施例1步骤I描述的方法，得到所需的产物20d。20d的收率(2步)＝23％。¹HNMR(DMSO-d₆)0.84(m，2H)，1.10(m，3H)，1.56-1.67(m，6H)，1.75-1.81(m，1H)，2.32-2.49(m，3H)，2.55-2.59(m，1H)，2.94(dt，1H)，3.50(dd，1H)，3.56-3.65(m，2H)，3.99(dd，1H)，4.06-4.23(m，4H)，4.37(t，1H)，6.64-6.74(m，3H)，7.08(app.t，1H)，7.95(d，1H)，12.30(br.s，1H)；¹³C NMRδ(DMSO-d₆)25.25，25.97，28.30，28.55，30.61，33.77，36.04，39.41，52.52，54.02，57.22，66.38，68.03，77.49，114.75，115.37，121.14，128.86，142.66，158.92，169.87，170.83，172.99；HRMS(FAB)C₂₄H₃₃N₂O₆的计算值：445.2339(M+H)⁺。实测值：445.2343。步骤E：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物20e。处理后，该物质纯度足以直接用于下一步骤。步骤F：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物20A和20B。经快速柱层析纯化，使用100/0-98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，得到分离的异构体20A和20B和一些混合物。合并收率＝50％(两步)。HRMS(FAB)C₄₂H₅₇N₆O₉的计算值：789.4187(M+H)⁺。实测值：789.4179(20A)和789.4187(20B)。实施例21：式21化合物的制备：步骤A：

如先前对实施例2步骤A描述的那样，合成期望的产物21a。处理后，该物质纯度足以直接用于下一步骤。步骤B：

通过先前对实施例2步骤B描述的氧化方法，得到所需的产物21。经快速柱层析纯化，使用100/0-98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，以38％收率得21。HRMS(FAB)C₄₄H₆₀N₅O₁₀的计算值：818.4340(M+H)⁺。实测值：818.4329。实施例22：式22化合物的制备：步骤A：

如先前对实施例3步骤A描述的那样，以定量收率合成期望的产物22。HRMS(FAB)C₄₀H₅₂N₅O₁₀的计算值：762.3714(M+H)⁺。实测值：762.3722。实施例23：式23化合物的制备：

步骤A：

按照实施例1步骤J的方法，自1l和D制备所需的产物23a，收率58％。步骤B：

按照实施例1步骤K的方法，自23a制备所需的化合物23，收率79％。实施例24：式24化合物的制备：

步骤A：

在氢气下，于披钯碳(50mg)存在下，在室温下，将苄基酯23(80mg，0.11mmol)在乙醇(30mL)和甲醇(15mL)中的溶液搅拌3小时。经TLC监测反应进展。通过硅藻土垫小心过滤后，真空除去溶剂，得到白色固体(67mg，定量)。实施例25：式25化合物的制备：步骤A：

除了用苄基胺替代胺A外，按照实施例1步骤J的方法，以53％收率，从24制备所需的化合物25。实施例26：式26A和26B化合物的制备：步骤A：

向26a(4.0g，20mmol)在THF/MeCN(35/5mL)中的冷的(0℃)溶液中加入4-硝基苯基氯代甲酸酯(4.86g，24mmol)，然后加入吡啶(1.9mL，24mmol)。把反应混合物温热至环境温度4.5小时。监测反应直到26a消耗完全(需要加入一些更多的其它两种试剂)。通过加入水猝灭反应物，分离有机物，用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并真空蒸发，得到产物26b。该物质纯度足以用于进一步研究。步骤B：

在0℃下，向1f(2.3g，5.1mmol)在二氯甲烷/DMF(25/5mL)中的溶液中先后加入26b(2.24g，6.1mmol)和三乙胺(0.86mL，6.1mmol)。加入几粒咪唑结晶并在-8℃下把反应混合物储存16小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用饱和碳酸氢钠、10％枸橼酸水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，真空浓缩。经快速柱层析纯化粗品物质，使用100/0-70/30二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到26c(1.2g，38％收率)。HRMS(FAB)C₃₈H₄₈N₃O₇的计算值：658.3492(M+H)⁺。实测值：658.3483。步骤C：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物26d。该粗品物质可原样直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₂₄H₃₆N₃O₇的计算值：478.2553(M+H)⁺。实测值：478.2547。步骤D：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物26e。经柱层析纯化，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到含有三苯基膦氧化物的26e。该混合物可直接用于下一步骤。步骤E：

通过对实施例1步骤I描述的方法，得到所需的产物26f。HRMS(FAB)C₂₃H₃₂N₃O₆的计算值：446.2291(M+H)⁺。实测值：446.2290。步骤F：

通过对实施例1步骤J描述的方法，得到所需的产物26g。经快速柱层析纯化粗品物质，使用98/2二氯甲烷/甲醇洗脱，以31％收率(3步)得到26g。HRMS(FAB)C₄₁H₅₈N₇O₉的计算值：792.4296(M+H)⁺。实测值：792.4284。步骤G：

通过对实施例1步骤K描述的方法，得到所需的产物26A和26B。经柱层析纯化，使用99/1-95/5二氯甲烷/甲醇洗脱，得到26A(为混合物)和26B(纯的较低R_f异构体)。合并收率＝25％。实施例27：化合物27的制备：步骤A：

在室温下，向Boc-3，4-二脱氢脯氨酸-OMe(27a，5.30g，23.4mmol)、N-甲基吗啉-N-氧化物(4.75g，35.1mmol)在丙酮(10mL)和水(15mL)中的混合物中加入四氧化锇在叔丁醇中的溶液(2.5％w/w，3.5mL，0.344mmol)。向该混浊溶液中加入THF直到混合物变得几乎均匀。在室温下搅拌过夜后，加入饱和的硫代硫酸钠水溶液(30mL)，并在10分钟后，加入EtOAc(300mL)和盐水(80mL)。分离这些层后，用EtOAc(2×100mL)提取水溶液。合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，得到深色液体。快速层析(4-8％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为油的27b(4.73g，18.1mmol，77％)。步骤B：

在0℃下，向二醇27b(1.6g，6.12mmol)、硫酸镁(4.0g，33.2mmol)和3-苄氧基丙醛(2.32g，13.0mmol)在无水CH₂Cl₂(60mL)中的悬浮液中加入对甲苯磺酸(150mg，1.01mmol)。剧烈搅拌生成的混合物并伴随用冰浴温热至室温过夜(18h)。加入饱和碳酸氢钠溶液(60mL)、水(30mL)和CH₂Cl₂(100mL)，分离各层。用CH₂Cl₂(2×100mL)提取水溶液，干燥(MgSO₄)合并的有机溶液，过滤，真空浓缩，得到无色油。快速层析(5-15％EtOAc/CH₂Cl₂)，得到为油的27c(2.35g，5.57mmol，91％)。步骤C：

按照实施例1步骤C的方法，自27c制备所需的化合物27d。它无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。步骤D：

按照实施例1步骤D的方法，自27d制备所需的化合物。快速层析(8-20％EtOAc/CH₂Cl₂)，得到27e。步骤E：

按照实施例1步骤E的方法，自27e制备所需的化合物27f。它无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。步骤F：

按照实施例1步骤F的方法，自27f制备所需的化合物。快速层析(8-20％EtOAc/CH₂Cl₂)，得到27g(36％，4步)。HRMS m/z 595.3014[C₃₃H₄₂N₂O₈的计算值：595.3019]。步骤G：

按照实施例1步骤G的方法，自27g定量制备所需的化合物。快速层析(3-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为白色固体的27h。HRMS m/z595.2553[C₂₆H₃₆N₂O₈的计算值：595.2550]。步骤H：

按照实施例1步骤H的方法，自27h制备所需的化合物。快速层析(3-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为含有三苯基膦氧化物的混合物的27i，它可被水解。步骤I：

按照实施例1步骤I的方法，从27i制备所需的化合物(72％，两步)。步骤J：

按照实施例1步骤J的方法，从27j制备所需的化合物。快速层析(3-6％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为非对映体混合物的27k(69％)。步骤K：

按照实施例1步骤K的方法，从27k制备所需的化合物。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到纯的27A和27B。实施例28：化合物28的制备：

步骤A：

按照实施例2步骤A的方法，从27j制备所需的化合物。快速层析(3-6％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为不可分离的非对映体混合物的28a(50％)。步骤B：

按照实施例2步骤B的方法，从28a制备所需的化合物。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到28A和28B。实施例29：化合物29的制备：

步骤A：

按照实施例3步骤A的方法，从28A制备所需的化合物29A。步骤B：

按照实施例3步骤A的方法，从28B制备所需的化合物29B。实施例30：化合物30的制备：步骤A：

在0℃下，向Cbz-HYP-OMe(30a)(3.0g，10.7mm0l)和4-苄氧基-2-甲基-1-丁烯30b(5.30g，30.0mmol)在无水CH₂Cl₂(80mL)中的溶液中加入三氟化硼二乙基醚化物(0.25mL，1.97mmol)。在室温下，把生成的混合物搅拌过夜(18h)。加入饱和碳酸氢钠溶液(30mL)、盐水(50mL)和EtOAc(300mL)，分离各层。用EtOAc(2×100mL)提取水溶液，干燥(MgSO₄)合并的有机溶液，过滤，真空浓缩，得到黄色的油。快速层析(5-20％EtOAc/CH₂Cl₂)，得到为油的30c(2.00g，4.39mmol，41％)。步骤B：

按照实施例1步骤G的方法，从30c定量制备所需的化合物30d。步骤C：

按照实施例1步骤D的方法，从30d和Boc-环己基甘氨酸-OH制备所需的化合物30e。快速层析(3-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到30e(61％)。步骤D：

在室温下，将30e和2 N HCl在二噁烷和EtOAc(1∶1)中的溶液搅拌3小时，之后，真空浓缩。该产物无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。步骤E：

按照实施例1步骤F的方法，自30f制备所需的化合物30g。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到30g(48％，2步)。步骤F：

在室温下，剧烈搅拌30g(700mg，1.28mmol)和碳酸钾(530mg，3.84mmol)在无水甲醇(80mL)中的混合物。经TLC监测反应进展。3小时后，真空浓缩，之后，加入EtOAc(200mL)和水(100mL)，并分离各层。用EtOAc(2×100mL)提取水溶液。合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。该产物无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。步骤G：

按照实施例1步骤H的方法，从30h制备所需的化合物30i。步骤H：

按照实施例1步骤I的方法，从30i制备所需的化合物30j(23％，3步)。步骤I：

按照实施例1步骤J的方法，从30j制备所需的化合物。快速层析(3-6％MeOH/CH₂Cl₂)，得到30k(58％)。步骤J：

按照实施例1步骤K的方法，从30k制备所需的化合物30。快速层析(3-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为不可分离的非对映体混合物的30。实施例31：化合物31的制备：步骤A：

按照实施例1步骤J的方法，从30j和B制备所需的化合物。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到31a(73％)。步骤B：

按照实施例1步骤K的方法，从31a制备所需的化合物。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为不可分离的非对映体混合物的31。实施例32：化合物32的制备：

步骤A：

按照实施例3步骤A的方法，从31制备所需的化合物32。实施例33：化合物33的制备：

步骤A：

将3，5-二羟基苯基乙酸甲酯(33a)(5.0g，27.4mmol)、碘甲烷(4.6g，32.9mmol)、碳酸钾(5.69g，41.2mmol)在DMF(30mL)中的悬浮液加热至55℃并搅拌过夜。冷却至室温后，加入饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和EtOAc(200mL)，并分离各层。用EtOAc(2×100mL)提取水溶液。干燥(MgSO₄)合并的有机溶液，过滤，真空浓缩。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为白色液体的33b(1.11g，29％)。步骤B：

在室温下，将氢氧化锂水溶液(0.342g在10mL H₂O中)加入到甲酯33b在THF(10mL)和甲醇(10mL)中的溶液中。经TLC监测反应进展。4小时后，真空除去挥发物，加入EtOAc(150mL)和水(30mL)并把水溶液酸化至pH＝1，用固体氯化钠饱和。分离这些层后，用EtOAc(2×150mL)提取水层。合并有机溶液，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到33c(1.6g)。步骤C：

按照实施例1步骤F的方法，从33c和1f制备所需的化合物33d。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，以90％收率得到33d。步骤D：

按照实施例1步骤G的方法，从33d制备所需的化合物33e。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，以56％收率得到33e。步骤E：

按照实施例1步骤H的方法，从33e制备所需的化合物33f。快速层析(2-5％MeOH/CH₂Cl₂)，得到为含有三苯基膦氧化物的混合物的33e，无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。步骤F：

按照实施例1步骤I的方法，自33f制备所需的化合物33g，收率45％(2步)。步骤G：

按照实施例1步骤J的方法，自33g和A制备所需的化合物33h。步骤H：

按照实施例1步骤K的方法，自33h制备所需的化合物。实施例34：化合物34的制备：步骤A：

除了用胺B替代胺A以外，按照实施例1步骤J的方法，制备所需的化合物34a。该产物作为不可分离的非对映体混合物得到。步骤B：

按照实施例1步骤K的方法，从34a制备所需的化合物。实施例35：化合物35的制备：

步骤A：

按照实施例3步骤A的方法，从34制备所需的化合物35。实施例36：化合物36的制备：步骤A：

将膦酰基乙酸叔丁酯(15.1g，50.0mmol)在干燥THF中的溶液冷却至0℃，并用NaH(60％，2.5g，62.5mmol，1.25当量)处理且搅拌20分钟。用2-戊酮(4.3g，50mmol)处理反应混合物并在室温下搅拌24小时。用NaHCO₃水溶液稀释反应混合物并提取进入乙醚(3×100mL)中。用盐水提取合并的乙醚层，干燥(MgSO₄)，真空浓缩，蒸馏，得到8.2g(88％)的36b(立体化学比率2∶1)。步骤B：

将36b(5.0g，27.1mmol)的溶液溶于二氯甲烷中，并用4，4’-硫代双-(2-叔丁基-5-甲基苯酚)(100mg)和MCPBA(60-80％，7.76g，27.1mmol)处理且在回流下加热4小时。真空浓缩反应混合物并用乙醚(200mL)稀释残余物。用饱和Na₂S₂O₃水溶液、NaOH水溶液和盐水(100mL)把醚层洗涤两次。真空浓缩反应混合物，得到4.2g(77％)的36c，它可原样直接用于下一步骤。步骤C：

用NaN₃(12g，184mmol)和NH₄Cl(9.6g，184mmol)处理环氧化物(4.0g，18.4mmol)在干燥乙醇(100mL)中的溶液并在回流下加热36小时。用水稀释反应混合物，并用乙醚(300mL)提取反应混合物。用Na₂SO₄干燥合并的有机层，浓缩。经SiO₂层析(EtOAc/己烷1∶19)纯化残余物，得到为无色液体的1.1g(28％)的36d和731mg(18％)的36d’。步骤D：

将叠氮化物36d(2.1g，8.7mmol)的溶液溶于CH₃OH(100mL)中，用Pd/C(50mg)处理且氢化(40磅/平方英寸)24小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物，真空浓缩滤液。残余物无须进一步纯化即可用于下一步骤反应。

在-78℃下，将Cbz-Cl(1.48g，8.7mmol，1.23mL)的溶液滴加到胺和Et₃N(878mg，1.25mL)在CH₂Cl₂(30mL)中的混合物中。把反应混合物温热至室温，真空浓缩。将残余物在SiO₂上(EtOAc/己烷8∶2)层析为无色固体的36e(450mg，15％)。步骤E：

在室温下，将36e(450mg，1.29mmol)在CH₂Cl₂/TFA(10mL，1∶1)中的溶液搅拌4小时。真空浓缩反应混合物，得到酸(250mg)，它无须进一步纯化即可用于下一步骤。

在-20℃下，将通过水解36e所得到的酸溶于CH₂Cl₂(10mL)中并用H-甘氨酰基-苯基甘氨酰基(glycycl)-N(CH₃)₂(281mg，0.93mmol)、HOOBt(208mg，1.27mmol，1.25当量)、EDCI(244mg，1.27mmol)和NMM(343mg，3.4mmol，490μL)处理。把反应混合物在冰箱中贮存24小时并用HCl水溶液(1M，50mL)稀释。用CH₂Cl₂(3×50mL)提取反应混合物。用HCl水溶液(1M，100mL)、NaHCO₃水溶液(1M，100mL)、盐水(100mL)提取合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，且在SiO₂上层析(丙酮/己烷1∶3)，得到为无色固体的36f(330mg，75％)。步骤F：

将36f的溶液溶于CH₃OH(20mL)中并用Pd/C(10mol％，20mg)处理。在40磅/平方英寸下，氢化反应混合物12小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物，真空浓缩滤液，并且直接用于下一步骤。步骤G：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物36h。该偶合的物质可直接用于下一步骤用来合成36A和36B。步骤H：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物36A和36B。实施例37：化合物37的制备：步骤A：

向F(2.3g，9.43mmol)在二氯甲烷(20mL)中的冷的(0℃)溶液中加入三乙胺(3.97mL，28.28mmol)、DMAP(几粒结晶)和3-溴代苯磺酰氯(3.61g，14.14mmol)。把反应混合物在冰箱中(0-5℃)放置过夜。用饱和NaHCO₃和10％枸橼酸溶液洗涤反应混合物。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速层析纯化残余物，使用95/5-90/10二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到2.7g(62％收率)的37a。HRMS(FAB)C₁₇H₂₄N₂O₆SBr的计算值：465.0518(M+H)⁺。实测值：465.0497。步骤B：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物37b。该粗品物质无须纯化即可用于下一步骤。步骤C：

通过对实施例1步骤D描述的方法，以97％收率得到所需的产物37c。处理后，该物质纯度足以进行下面的步骤。步骤D：

通过对实施例1步骤E描述的方法，得到所需的产物37d。该粗品物质无须纯化即可用于下一步骤。步骤E：

通过对实施例1步骤F描述的方法，使用戊烯酸作为偶合配体，得到所需的产物37e。经柱层析纯化残余物，使用90/10-80/20二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到35％收率的37e。HRMS(FAB)C₂₅H₃₅N₃O₆SBr的计算值：586.1409(M+H)⁺。实测值：586.1423。步骤F：

在氮气氛下，向37e(660mg，1.13mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(3.61mL，32.77mmol)、碳酸钾(780mg，5.65mmol)、溴化四丁基铵(730mg，2.26mmol)和乙酸钯(II)(33mg，0.15mmol)。在100℃下，把混合物加热2小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释并用5％磷酸溶液洗涤。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到280mg(49％收率)为非对映体混合物的37f。该物质纯度足以直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₂₅H₃₄N₃O₆S的计算值：504.2168(M+H)⁺。实测值：504.2155。步骤G：

通过对实施例1步骤G描述的氢化方法，以73％收率得到所需的产物37g。该物质纯度足以直接用于进一步研究。HRMS(FAB)C₂₅H₃₆N₃O₆S的计算值：506.2325(M+H)⁺。实测值：506.2314。步骤H：

通过对实施例1步骤H描述的方法，以84％收率得到所需的产物37h。HRMS(FAB)C₂₄H₃₄N₃O₆S的计算值：492.2168(M+H)⁺。实测值：492.2175。步骤I：

通过对实施例2步骤A描述的方法，以90％收率得到期望的产物37i。该粗品物质纯度足以直接用于进一步研究。HRMS(FAB)C₄₄H₆₃N₆O₁₀S的计算值：867.4326(M+H)⁺。实测值：867.4342。步骤J：

通过对实施例2步骤B描述的氧化方法，合成所需的物质37A和37B。纯化残余物，使用98/2-96/4二氯甲烷/MeOH洗脱，得到为非对映体混合物的37A(61％，较低极性)和37B(15％，较高极性)。HRMS(FAB)C₄₄H₆₁N₆O₁₀S的计算值：865.4170(M+H)⁺。实测值：865.4190(37A)，865.4181(37B)。实施例38：化合物38的制备：

步骤A：

如对实施例3步骤A描述的那样，合成所需的物质38A，收率91％。步骤B：

如对实施例3步骤A描述的那样，合成所需的物质38B，收率83％。HRMS(FAB)C₄₀H₅₃N₆O₁₀S的计算值：809.3544(M+H)⁺。实测值：809.3547。实施例39：化合物39的制备：步骤A：

通过对实施例37步骤A描述的方法，使用4-碘苯磺酰氯替代3-溴代苯磺酰氯，得到所需的产物39a。经柱层析纯化残余物，使用95/5-90/10二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到75％收率的39a。HRMS(FAB)C₁₇H₂₄N₂O₆SI的计算值：511.0400(M+H)⁺。实测值：511.0386。步骤B：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物39b。该粗品物质无须纯化可直接用于下一步骤。步骤C：

通过对实施例1步骤D描述的方法，得到所需的产物39c。经柱层析纯化残余物，使用90/10-80/20二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到68％收率的39c。HRMS(FAB)C₂₅H₃₇N₃O₇SI的计算值：650.1397(M+H)⁺。实测值：650.1398。步骤D：

通过对实施例1步骤E描述的方法，得到所需的产物39d。该粗品物质无须纯化可直接用于下一步骤。步骤E：

通过对实施例1步骤F描述的方法，使用戊烯酸作为偶合配体，得到所需的产物39e。经柱层析纯化残余物，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，得到76％收率的39e。步骤F：

通过对实施例37步骤F描述的方法，得到所需的产物39f。经柱层析纯化残余物，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，得到28％收率的39f，为非对映体混合物。HRMS(FAB)C₂₅H₃₄N₃O₆S的计算值：504.2168(M+H)⁺。实测值：504.2160。步骤G：

通过对实施例1步骤G描述的氢化方法，以84％收率得到所需的产物39g。该物质纯度足以用于进一步研究。HRMS(FAB)C₂₅H₃₆N₃O₆S的计算值：506.2325(M+H)⁺。实测值：506.2314。步骤H：

通过对实施例1步骤H描述的方法，以定量收率得到所需的产物39h。HRMS(FAB)C₂₄H₃₄N₃O₆S的计算值：492.2168(M+H)⁺。实测值：492.2175。步骤I：

通过对实施例2步骤A描述的方法，以36％收率得到期望的产物39i。该物质纯度足以用于进一步研究。HRMS(FAB)C₄₄H₆₃N₆O₁₀S的计算值：867.4326(M+H)⁺。实测值：867.4342。步骤J：

通过对实施例2步骤B描述的氧化方法，得到所需的物质39。使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，纯化残余物，以24％收率得到为非对映体混合物的39。HRMS(FAB)C₄₄H₆₁N₆O₁₀S的计算值：865.4170(M+H)⁺。实测值：865.4181。实施例40：化合物40的制备：步骤A：

通过对实施例3步骤A描述的方法，已93％收率得到为非对映体混合物的所需的物质40。HRMS(FAB)C₄₀H₅₃N₆O₁₀S的计算值：809.3544(M+H)⁺。实测值：809.3544。实施例41：化合物41的制备：

步骤A：

向25mL加料漏斗中加入苯(5mL)、DMF(0.32mL，4.1mmol)和亚硫酰氯(0.33mL，4.5mmol)。5分钟后，分离两层。分离较低的层并缓慢加入到丙烯酸(0.19mL，2.8mmol)在二氯甲烷中的冷的(0-5℃)溶液中。在该温度下，把混合物维持10分钟。然后加入三乙胺(0.77mL，5.5mmol)，随后加入39d(1.13g，2.1mmol)。把反应混合物温热至环境温度5小时，并用饱和NaHCO₃猝灭。分离有机层，用5％H₃PO₄溶液和盐水洗涤。干燥(Na₂SO₄)二氯甲烷层，浓缩。经快速柱层析纯化粗品物质，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，得到870mg的41a(67％收率)。HRMS(FAB)C₂₃H₃₁N₃O₆SI的计算值：604.0978(M+H)⁺。实测值：604.0964。步骤B：

通过对实施例37步骤F描述的方法，得到所需的产物41b。使用97/3二氯甲烷/MeOH纯化残余物，以26％收率得到41b。HRMS(FAB)C₂₃H₃₀N₃O₆S的计算值：476.1855(M+H)⁺。实测值：476.1858。步骤C：

通过对实施例1步骤D描述的氢化方法，以75％收率得到所需的产物41c。该物质纯度足以用于进一步研究。步骤D：

通过对实施例1步骤E描述的方法，得到所需的产物41d。该粗品物质无须纯化即可直接用于下一步骤。步骤E：

通过对实施例2步骤A描述的方法，以63％收率得到期望的产物41e。该粗品物质纯度足以用于进一步研究。步骤F：

通过对实施例2步骤B描述的氧化方法，得到所需的物质41。使用98/2-95/5二氯甲烷/MeOH纯化残余物，以52％收率得到为非对映体混合物的41。实施例42：化合物42的制备：步骤A：

通过对实施例3步骤A描述的方法，以定量收率得到为非对映体混合物的所需的物质42。HRMS(FAB)C₃₈H₄₉N₆O₁₀S的计算值：781.3231(M+H)⁺。实测值：781.3233。实施例43：化合物43的制备：步骤A：

向F(5.4g，22.1mmol)在二氯甲烷(50mL)中的冷的(0℃)溶液中加入三乙胺(6.8mL，48.6mmol)、DMAP(几粒结晶)和苯磺酰氯(3.29g，24.1mmol)。把反应混合物在冰箱中(0-5℃)放置过夜。用饱和NaHCO₃和10％枸橼酸溶液洗涤反应混合物。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速层析纯化残余物，使用95/5二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到5.0g(59％收率)的43a。步骤B：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物43b。该粗品物质无须纯化即可直接用于下一步骤。步骤C：

通过对实施例1步骤D描述的方法，得到所需的产物43c。经柱层析纯化残余物，使用99/1二氯甲烷/MeOH洗脱，得到60％收率的43c。步骤D：

将氩气鼓泡通入43c(1.72g，3.28mmol)在二氯甲烷(40mL)中的冷的(0℃)溶液中20-30分钟。加入ADDP(2.5g，9.84mmol)，随后加入三苯基膦(2.6g，9.84mmol)和3-苄氧基丙醇(0.57mL，3.61mmol)。把反应物温热至环境温度并放置2天。浓缩反应混合物并加入Et₂O(50mL)。滤出沉淀的固体物质。重复该操作两次以除去大多数的副产物。浓缩滤液，经快速层析纯化，使用90/10-85/15二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到330mg的43d。回收起始原料，以及三苯基膦氧化物，使其经历以上描述的条件，得到另外420mg的43d。合并收率＝34％。HRMS(FAB)C₃₅H₅₀N₃O₈S的计算值：672.3319(M+H)⁺。实测值：672.3330。步骤E：

通过对实施例1步骤E描述的方法，得到所需的产物43e。该粗品物质可直接用于下一步骤。步骤F：

通过对实施例1步骤F描述的方法，制备所需的化合物43f。通过快速层析，用60/40-50/50二氯甲烷/EtOAc进行纯化，以定量收率得到43f。HRMS(FAB)C₃₈H₄₈N₃O₈S的计算值：706.3162(M+H)⁺。实测值：706.3157。步骤G：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物43g。该物质纯度足以用于进一步研究。步骤H：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物43h。反应完成后，蒸发溶剂。加入Et₂O(50mL)并滤除固体。浓缩滤液，加入Et₂O/EtOAc(50mL/50mL)。滤出沉淀的固体，浓缩滤液。经快速层析纯化残余物，使用85/15-80/20二氯甲烷/EtOAc洗脱，以20％收率得到纯的43h。HRMS(FAB)C₃₁H₄₀N₃O₇S的计算值：598.2587(M+H)⁺。实测值：598.2581。步骤I：

通过对实施例1步骤I描述的方法，以92％收率得到期望的产物43i。步骤J：

如对实施例1步骤J所述，合成所需的物质43j。该粗品物质纯度足以直接用于下一步骤。步骤K：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到期望的产物43。经快速柱层析纯化，使用97/3二氯甲烷/MeOH洗脱，得到为非对映体混合物的43。合并收率＝60％(2步)。HRMS(FAB)C₄₈H₆₂N₇O₁₀S的计算值：928.4279(M+H)⁺。实测值：928.4290。实施例44：化合物44的制备：

步骤A：

通过对实施例1步骤D描述的方法，使用N-Boc-叔丁基甘氨酸作为偶合配体，得到所需的产物44a。处理后，该物质纯度足以直接用于下一步骤。步骤B：

通过对实施例1步骤E描述的方法，得到所需的产物44b。该粗品物质无须纯化即可继续使用。步骤C：

通过对实施例1步骤F描述的方法，使用3-羟基苯甲酸得到所需的产物。该物质经快速柱层析纯化，使用85/15-65/35二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，以81％收率得到44c。步骤D：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物44d。处理后，该物质纯度足以用于进一步操作。步骤E：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物44e。浓缩后，用己烷/EtOAc(1/1)处理粗品残余物并滤出固体物质。再次进行该操作以除去一些副产物。经柱层析纯化，使用80/20二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到含有三苯基膦氧化物的44e。该混合物可用于下一步骤。步骤F：

通过对实施例1步骤I描述的方法，得到所需的产物44f。44f的收率(2步)＝11％。步骤G：

如先前对实施例1步骤J所述，合成期望的产物44g。处理后，该物质用于下一步骤。步骤H：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物44A和44B。经快速柱层析纯化，使用97/3-96/4二氯甲烷/甲醇洗脱，得到等量的分离的异构体44A和44B。合并收率＝58％(2步)。实施例45：化合物45的制备：

步骤A：

使用对实施例1步骤A描述的方法，进行45a与45b的烷基化。使用85/0/15-85/5/10己烷/EtOAc/二氯甲烷纯化粗产物，以37％收率得到45c。HRMS(FAB)C₁₈H₂₉O₄的计算值：309.2066(M+H)⁺。实测值：309.2060。步骤B：

向45c(4.8g，15.5mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸吡啶鎓(780mg，3.1mmol)，当所有的起始原料消耗完全时回流3小时。浓缩反应混合物。把残余物溶于EtOAc中，用饱和NaHCO₃洗涤，干燥(Na₂SO₄)，浓缩有机层，得到3.2g的45d(92％收率)。该物质的纯度足以用于进一步研究。HRMS(FAB)C₁₃H₂₁O₃的计算值：225.1491(M+H)⁺。实测值：225.1486。步骤C：

通过对实施例10步骤A描述的方法，使用45d作为起始原料，得到所需的产物45e。使用90/10己烷/EtOAc纯化粗产物，以70％收率得到45e。HRMS(FAB)C₁₉H₂₄O₅SBr的计算值：443.0528(M+H)⁺。实测值：443.0552。步骤D：

通过对实施例1步骤A描述的方法，使用45e作为起始原料，得到所需的产物45f。该粗产物无须纯化即可继续使用。步骤E：

通过对实施例18步骤B描述的方法，使用45f作为起始原料，得到所需的产物45g。经快速层析纯化残余物，使用90/10二氯甲烷/EtOAc洗脱，以61％收率(2步)得到45g。HRMS(FAB)C₂₇H₄₄NO₇的计算值：494.3118(M+H)⁺。实测值：494.3107。步骤F：

通过对实施例1步骤C描述的方法，制备所需的化合物45h。该物质直接向下进行。步骤G：

通过对实施例1步骤D描述的方法，得到所需的产物45i。经快速层析纯化残余物，使用90/10-85/15二氯甲烷/EtOAc洗脱，以41％收率得到45i。步骤H：

通过先前对实施例1步骤G描述的氢化方法，得到所需的产物45j。步骤I：

通过先前对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物45k。步骤J：

向45k在二氯甲烷中的冷的(0℃)溶液中先后加入三乙胺和羰基二咪唑。缓慢温热至环境温度过夜，得到所需的产物45l。使用常规快速柱层析可纯化该产物，得到纯的45l。步骤K：

通过先前对实施例3步骤A描述的产物，得到所需的产物45m。步骤L：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物45n。步骤M：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物45。经快速柱层析纯化，得到纯的45。实施例46：化合物46的制备：

步骤A：

向46a(10.0g，42.9mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中加入BOP(22.75g，51.5mmol)并在室温下搅拌10分钟。然后加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐(4.18g，42.9mmol)，随后加入三乙胺(18.1mL，128.7mmol)。在环境温度下，把反应混合物搅拌3小时，然后用3N HCl、饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。粗品物质46b无须纯化即可用于以下步骤。步骤B：

在氮气氛下，向46b在THF(60mL)中的冷的(0℃)溶液中加入LAH溶液(1M在THF中，50mL，50mmol)。在该温度下把反应物保持30分钟。用10％磷酸氢钾水溶液(30mL)(缓慢加入)猝灭反应混合物。用EtOAc提取混合物两次。用3N HCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤合并的有机层。经硫酸钠干燥EtOAc层，浓缩。经快速柱层析纯化残余物，使用10/90-30/70 EtOAc/二氯甲烷洗脱，得到4.2g的46c(45％收率-2步)。HRMS(FAB)C₁₀H₂₀NO₃S的计算值：234.1164(M+H)⁺。实测值：234.1168。步骤C：

向46c(4.2g，19.4mmol)在二氯甲烷中的冷的(-15℃)溶液中先后加入乙酸(2.14mL，38.8mmol)和异氰基乙酸甲酯(1.76mL，19.4mmol)。把反应混合物温热至室温并放置16小时。用EtOAc稀释反应物，用饱和NaHCO₃、盐水和水洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，浓缩。经快速柱层析纯化，使用30/70 EtOAc/二氯甲烷洗脱，以92％收率得到为白色固体的纯的46d(6.5g)。HRMS(FAB)C₁₆H₂₉N₂O₇S的计算值：393.1695(M+H)⁺。实测值：393.1692。步骤D：

向46d(6.5g，16.6mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中加入氢氧化锂(1.19g，50mmol)在水(30mL)中的溶液。45分钟后，浓缩反应混合物。加入枸橼酸水溶液直到酸性pH(3)，并将产物提取到EtOAc中。浓缩有机层，得到酸46e(5.6g，90％收率)。HRMS(FAB)C₁₃H₂₅N₂O₆S的计算值：337.1433(M+H)⁺。实测值：337.1430。步骤E：

通过对中间体A步骤3描述的方法，得到所需的产物46f。经柱层析纯化残余物，使用20/0/80-50/5/45的在MeOH/二氯甲烷中的EtOAc/NH₃洗脱，得到3.0g的46f(51％)。HRMS(FAB)C₂₃H₃₇N₄O₆S的计算值：497.2434(M+H)⁺。实测值：497.2439。步骤F：

通过对中间体A步骤4描述的方法，制备所需的化合物46g。该物质可用于进一步的研究。步骤G：

通过对实施例1步骤J描述的方法，得到所需的产物46h。该粗品物质纯度足以用于进一步操作。HRMS(FAB)C₄₀H₅₇N₆O₉S的计算值：797.3908(M+H)⁺。实测值：797.3896。步骤H：

通过先前对实施例10步骤J描述的氧化方法，得到所需的产物46。该反应耗时4天完成。经快速柱层析(两次)和制备型TLC纯化残余物，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，以12％收率(2步)得到为非对映体混合物的46。HRMS(FAB)C₄₀H₅₅N₆O₉S的计算值：795.3751(M+H)⁺。实测值：795.3761。实施例47：化合物47的制备：步骤A：

通过先前对实施例11步骤A描述的氧化方法，得到所需的产物47。实施例48：化合物48的制备：步骤A：

通过对实施例1步骤J描述的方法，得到所需的产物48b。该粗品物质纯度足以用于进一步操作(注意：通过对46g描述的类似方法，从市售获得的N-Boc-S-甲基半胱氨酸得到前体48a)。步骤B：

通过先前对实施例10步骤J描述的氧化方法，得到所需的产物48。经快速柱层析纯化，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，以21％收率得到为非对映体混合物的48(2步)。实施例49：化合物49的制备：

步骤A：

通过先前对实施例11步骤A描述的氧化方法，得到所需的产物49。实施例50：化合物50的制备：步骤A：

通过对实施例1步骤F描述的方法，使用咪唑-4-乙酸作为偶合配体，得到所需的产物50a。步骤B：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物50b。步骤C：

通过对实施例10步骤A描述的方法，使用对甲苯磺酰氯作为起始原料，得到所需的产物50c。步骤D：

在环境温度下通过用在THF中的HOBt处理50c几小时，得到所需的产物50d。步骤E：

通过将50d与碳酸钠和碘化钠在丙酮中于50℃下加热几小时，合成期望的产物50e。可经常规快速层析纯化该产物。步骤F：

通过先前对实施例1步骤I描述的水解方法，得到所需的产物50f。步骤G：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物50g。步骤M：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物50。经快速柱层析纯化得到纯的50。实施例51：化合物51的制备：

步骤A：

如先前对实施例2步骤A描述的那样，合成期望的产物51a。步骤B：

通过先前对实施例2步骤B描述的氧化方法，得到所需的产物51。经快速柱层析纯化得到纯的51。实施例52：化合物52的制备：

步骤A：

通过先前对实施例3步骤A描述的方法，得到所需的产物52。实施例53：式53A和53B化合物的制备：

步骤A：

通过在实施例1步骤F中描述的方法，得到所需的产物53a。经快速柱层析纯化该物质，使用80/20-60/40二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到53a。步骤B：

通过在实施例1步骤G中描述的方法，得到所需的产物53b。该粗品物质可原样直接用于下一步骤。步骤C：

通过在实施例1步骤H中描述的方法，得到所需的产物53c。经柱层析纯化，使用99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到53c以及三苯基膦氧化物。该混合物直接用于下一步骤。步骤D：

通过在实施例1步骤I中描述的方法，得到所需的产物。步骤E：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物53e。处理后，该物质纯度足以用于下一步骤。步骤F：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物53A和53B。经快速柱层析纯化，使用100/0-99/1二氯甲烷/甲醇洗脱，得到分离的异构体53A和53B，和一些异构体。实施例54：化合物54的制备：步骤A：

使用对中间体A步骤3描述的方法，以定量收率将市售获得的54a转化为所需的产物54b。步骤B：

向54b(8g，26.8mmol)在DMF(100mL)中的冷的(0℃)溶液中加入氢化钠(60％悬浮液在油中，1.3g，32.16mmol)。10分钟后，加入碘甲烷(2.8mL，42.8mmol)并把反应物温热至环境温度反应2小时。用NH₄Cl水溶液猝灭反应混合物，并用EtOAc提取。分离有机层，干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到54c，其纯度足以用于进一步研究。步骤C：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物54d。该粗产物无须进一步纯化即可使用。步骤D：

通过对实施例26步骤A描述的方法，使用54e作为起始原料，得到所需的产物54f。经快速层析纯化该粗产物，使用80/20-100/0二氯甲烷/己烷洗脱，得到54f。步骤E：

通过对实施例26步骤B描述的方法，使用54d和54f作为起始原料，得到所需的产物54g。该反应在氯仿中于50℃下进行。经快速层析纯化残余物，使用85/15己烷/EtOAc洗脱，以56％收率得到54g。HRMS(FAB)C₂₅H₃₃N₂O₄的计算值：425.2440(M+H)⁺。实测值：425.2424。步骤F：

通过先前对实施例1步骤I描述的方法，使用EtOH作为溶剂，得到所需的化合物54h。步骤G：

通过对实施例18步骤B描述的方法，制备所需的化合物54i。步骤H：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物54j。该粗品物质无须纯化即可使用。步骤I：

通过先前对实施例1步骤D描述的偶合方法，得到所需的产物54k。步骤J：

通过先前对实施例1步骤G描述的氢化方法，得到所需的产物54l。步骤K：

通过对实施例1步骤H描述的环合方法，得到所需的产物54m。步骤L：

通过先前对实施例3步骤A描述的生产方法，得到所需的产物54n。步骤M：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物54o。步骤N：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物54。经快速柱层析纯化得到纯的54。实施例55：化合物55的制备：步骤A：

使用对实施例26步骤A描述的方法，将市售获得的55a转化为所需的产物55b，收率41％。步骤B：

通过先前对实施例1步骤D描述的偶合方法，使用N-Boc-叔丁基甘氨酸作为偶合配体，得到所需的产物55c。使用95/5二氯甲烷/EtOAc纯化，以57％收率得到55c。步骤C：

通过先前对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物55d。该粗品物质可直接向下进行。步骤D：

通过对实施例26步骤B描述的方法，得到所需的产物55e。使用80/20二氯甲烷/EtOAc纯化，以20％收率得到55e。HRMS(FAB)C₃₂H₄₅N₂O₈的计算值：585.3176(M+H)⁺。实测值：585.3177。步骤E：

通过先前对实施例1步骤G描述的生产方法，得到所需的产物55f。HRMS(FAB)C₂₅H₃₉N₂O₈的计算值：495.2706(M+H)⁺。实测值：495.2704。步骤F：

如先前对实施例1步骤H描述的那样，合成期望的产物55g。经快速层析纯化，使用85/15二氯甲烷/EtOAc洗脱，以10％收率得到55g。步骤G：

通过先前对实施例3步骤A描述的方法，得到所需的产物55h。该粗品物质无须纯化即可直接向下进行。步骤H：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物55i。该粗品物质无须纯化即可直接向下进行。步骤I：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物55。经快速柱层析纯化，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，得到55。实施例56：化合物56的制备：

步骤A：

向市售获得的甲酯10a(5.0g，20.4mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入LiOH(730mg，30.6mmol)在水(20mL)中的溶液。在环境温度下，将反应混合物搅拌2小时。TLC表明起始原料消耗完全。浓缩反应混合物并用10％枸橼酸溶液酸化。加入固体NaCl并用EtOAc把水层提取几次。干燥(Na₂SO₄)合并的EtOAc层，浓缩，以定量收率得到56a。HRMS(FAB)C₁₀H₁₈N₁O₅的计算值：232.1185(M+H)⁺。实测值：232.1189。步骤B：

通过对实施例1步骤A描述的方法，得到所需的产物56b。无须纯化将该粗品物质转化为甲基酯。步骤C：

通过对实施例1步骤B描述的方法，得到所需的产物56c。经柱层析纯化残余物，先后使用80/20-50/50己烷/EtOAc和70/30-40/60二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到13％的56c。HRMS(FAB)C₂₁H₃₁NO₆的计算值：394.2230(M+H)⁺。实测值：394.2224。步骤D：

通过对实施例1步骤C描述的方法，得到所需的产物56d。该粗品物质无须纯化即可直接使用。步骤E：

通过对实施例1步骤D描述的方法，使用N-Boc-叔丁基甘氨酸作为偶合配体，得到所需的产物56e。经柱层析纯化残余物，使用90/10二氯甲烷/EtOAc洗脱，得到86％的56e。HRMS(FAB)C₂₇H₄₃N₂O₇的计算值：507.3070(M+H)⁺。实测值：507.3072。步骤F：

通过对实施例1步骤E描述的方法，制备所需的产物56f。该物质可原样直接向下进行。步骤G：

通过对实施例1步骤F描述的方法，得到所需的产物56g。经快速柱层析纯化该物质，使用98/2二氯甲烷/MeOH洗脱，以78％得到为白色泡沫的56g。HRMS(FAB)C₃₀H₄₁N₂O₇的计算值：541.2914(M+H)⁺。实测值：541.2916。步骤H：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物56h。滤除催化剂后，所得到的产物纯度足以用于随后的操作。HRMS(FAB)C₂₃H₃₅N₂O₇的计算值：451.2444(M+H)⁺。实测值：451.2449。步骤I：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物56i。使用75/25己烷/丙酮纯化粗品残余物，得到产物56i及三苯基膦氧化物的混合物。HRMS(FAB)C₂₃H₃₃NO₆的计算值：433.2339(M+H)⁺。实测值：433.2343。步骤J：

如对实施例1步骤I描述的那样，合成期望的产物56j。两步收率＝16％。HRMS(FAB)C₂₂H₃₁N₂O₆的计算值：419.2182(M+H)⁺。实测值：419.2176。步骤K：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物56k。处理后，该物质纯度足以直接用于下一步骤。HRMS(FAB)C₄₀H₅₇N₆O₉的计算值：765.4187(M+H)⁺。实测值：765.4198。步骤L：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物56A和56B。经快速柱层析纯化，使用98/2-96/4二氯甲烷/MeOH洗脱，得到分离的异构体56A和56B以及一些混合物。合并收率＝35％(2步)。HRMS(FAB)C₄₀H₅₅N₆O₉的计算值：763.4013(M+H)⁺。实测值：763.4025(56A)和763.4040(56B)。实施例57：式57A和57B化合物的制备：步骤A：

向市售的氨基酸二水合物(3S)-7-羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸57a(5.0g，21.8mmol)在甲醇(180mL)中的溶液中加入浓盐酸(5.0mL，60mmol)。然后，在油浴中将生成的透明溶液加热至回流18小时。真空除去溶剂，得到为白色固体的甲酯57b，它无须进一步纯化可直接用于下一步骤反应。步骤B：

在-20℃下，向胺盐酸盐57b、N-Boc-环己基甘氨酸(5.95g，21.8mmol)、HOOBt(3.73g，22.9mmol)和EDCI(5.00g，26.1mmol)在无水DMF(200mL)和CH₂Cl₂(200mL)中的溶液中加入NMM(7.20mL，65.5mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持过夜(18h)，之后，加入EtOAc(600mL)、盐水(150mL)和5％H₃PO₄(150mL)。用5％H₃PO₄(200mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×200mL)、水(200mL)和盐水(200mL)洗涤分离的有机溶液，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到为白色固体的57c(10.3g，定量，2步)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ9.32(s，1H，8.35-8.32(m，1H)，6.99(d，J＝8.3Hz，1H)，6.65-6.54(m，1H)，4.92(d，J＝15.5Hz，1H)，4.50(d，J＝15.5Hz，1H)，4.43-4.36(m，1H)，4.29-4.19(m，1H)，3.53(s，3H)，3.02-2.81(m，2H)，1.98-1.62(m，8H)，1.42-1.11(m，14H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ171.6，171.2，162.3，156.0，133.7，128.8，125.3，114.1，112.6，78.0，54.8，52.4，51.9，45.0，29.5，28.1，28.0，25.9，25.6，25.5；HRMS m/z 447.2492[C₂₄H₃₄N₂O₆的计算值，447.2495]。步骤C：

将Boc-氨基甲酯57c(7.20g，16.1mmol)溶于4N HCl(100mL，400mmol)中并在室温下搅拌生成的溶液。经TLC监测反应进展。4小时后，真空浓缩溶液并将残余物在真空下过夜，得到为白色固体的57d，它无须进一步纯化即可用于下一步骤偶合反应。步骤D：

在-20℃下，向胺盐酸盐57d(来自步骤D)、6-庚烯酸(2.90g，22.6mmol)、HOOBt(3.70g，22.7mmol)和EDCI(4.80g，25.0mmol)在无水DMF(250mL)和CH₂Cl₂(150mL)中的溶液中加入NMM(7.50mL，68.2mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持2天。然后在空气中搅拌并使之温热至室温1小时。加入EtOAc(500mL)、盐水(100mL)和5％H₃PO₄(100mL)。用5％H₃PO₄(100mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×150mL)、水(150mL)和盐水(150mL)洗涤分离的有机溶液，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速层析(5-30％EtOAc-CH₂Cl₂)得到为白色固体的57e(2.30g，5.04mmol，31％(2步))。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ9.32(s，1H)，8.06-8.01(m，1H)，7.00-6.6.96(m，1H)，6.63-6.54(m，2H)，5.78-5.70(m，1H)，5.04-4.89(m，4H)，4.73-4.69(m，1H)，4.53(d，J＝15.5Hz，1H)，3.54(s，3H)，3.01-2.91(m，2H)，2.15-1.93(m，4H)，1.76-0.97(m，15H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.0，171.5，171.1，156.0，138.6，134.0，128.7，122.5，114.6，114.1，112.5，52.9，52.2，51.9，45.0，34.5，32.8，32.7，29.4，28.7，28.1，27.7，25.9，25.5，25.5，24.8；HRMS m/z 457.1[C₂₆H₃₆N₂O₅的计算值，456.6]。步骤E：

在0℃、氮气下，向57e(2.20g，4.82mmol)在无水THF(100mL)中的溶液中小心加入硼烷-THF溶液(20mL，1.0M，20mmol)。在0℃下，于氢气下，把生成的溶液搅拌1小时40分钟。然后加入乙醇(10mL)和pH7缓冲液(15mL)，随后加入30％H₂O₂溶液(15mL)。在0℃下搅拌20分钟后，温热至室温并搅拌2小时。加入EtOAc(400mL)和盐水(200mL)并分离各层。用EtOAc(2×150mL)提取水溶液。用硫酸镁干燥合并的有机溶液，过滤，真空浓缩。快速层析(3-5％MeOH-CH₂Cl₂)得到为白色固体的57f(2.18g，4.47mmol，93％)。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ9.32(s，1H)，8.04-8.00(m，1H)，6.99-6.96(m，1H)，6.63-6.51(m，2H)，5.05-5.00(m，1H)，4.73-4.21(m，3H)，4.51(d，J＝15.5Hz，1H)，3.54(s，3H)，3.03-2.90(m，2H)，2.15-2.00(m，2H)，1.75-1.56(m，6H)，1.49-0.97(m，13H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.2，171.6，171.2，156.0，134.1，128.7，122.6，114.2，112.5，60.7，52.9，52.3，51.9，45.1，34.8，32.4，29.5，28.7，28.53，28.47，28.10，25.9，25.6，25.5，25.4，25.2；HRMS m/z 475.2812[C₂₆H₃₈N₂O₆的计算值，475.2808]。步骤F：

将苯酚醇57f(2.08g，4.38mmol)和ADDP(3.00g，11.9mmol)在无水CH₂Cl₂中的溶液用氩气通过多孔玻璃鼓泡器鼓泡20分钟。向在0℃下的该溶液中加入三苯基膦(3.45g，13.2mmol)。在0℃下搅拌20分钟后，把溶液温热至室温并在氮气下搅拌过夜(18h)。TLC表明存在相当多的起始原料。加入第二批ADDP(3.00g，11.9mmol)和三苯基膦(3.45g，13.2mmol)，并在氮气下把混合物搅拌2天16小时。TLC显示完全消耗起始原料。真空除去溶剂后，经快速层析部分纯化残余物(1-2％MeOH在CH₂Cl₂中)，得到大环57g和三苯基膦氧化物的混合物。将大环57g水解为相应的酸，无须进一步纯化。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.00(d，J＝10.0Hz，1H)，7.17(d，J＝8.2Hz，1H)，6.82-6.76(m，2H)，5.14(d，J＝14.5Hz，1H)，4.79-4.74(m，1H)，4.39(dd，J＝11.5，6.4Hz，1H)，4.25(d，J＝14.7Hz，1H)，4.22-4.18(m，1H)，4.08-4.02(m，1H)，3.68(s，3H)，3.18(dd，J＝15.1，6.4Hz，1H)，2.85(dd，J＝14.7，11.5Hz，1H)，2.07-2.04(m，2H)，1.81-1.40(m，10H)，1.32-0.85(m，9H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ171.9，171.5，170.2，157.1，137.0，131.5，126.4，115.9，112.6，66.5，54.4，52.2，51.9，46.8，44.9，44.4，33.6，29.4，29.1，28.0，27.3，27.0，26.0，25.3，25.2，24.3，24.2，23.9；HRMS m/z 457.2707[C₂₆H₃₆N₂O₅的计算值，457.2702]。步骤G：

将氢氧化锂水溶液(0.21g，30mL H₂O，8.75mmol)加入到甲酯57g(来自步骤1F)在THF(30mL)和甲醇(30mL)中的0℃的溶液中。在冰浴中搅拌混合物并温热至室温并搅拌4小时。经TLC监测反应进展。真空除去挥发物后，加入EtOAc(100mL)和水(30mL)并分离这两层。再次用CH₂Cl₂(100mL)提取水溶液，之后酸化至pH＝1。然后加入EtOAc(150mL)并用固体氯化钠饱和水溶液。分离这些层后，用EtOAc(2×100mL)提取水层。合并有机溶液，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到为白色固体的57h(1.23g，2.78mmol，63％(2步))。步骤H：

在-20℃下，向酸57h(0.390g，0.881mmol)、胺A(0.360g，0.898mmol)、HOOBt(160mg，0.981mmol)和EDCI(210mg，1.10mmol)在无水DMF(50mL)和CH₂Cl₂(30mL)中的溶液中加入NMM(0.40mL，3.64mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，把反应混合物在冰箱中保持66小时。然后加入EtOAc(200mL)、盐水(50mL)和5％H₃PO₄(50mL)。连续用5％H₃PO₄(80mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(2×80mL)、水(80mL)和盐水(80mL)洗涤分离的有机溶液，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。快速层析(2-5％MeOH-CH₂Cl₂)得到为四种非对映体混合物的57i(0.340g，0.431mmol，49％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.56-8.46(m，1H)，7.96-7.82(m，2H)，7.40-7.25(m，6H)，7.15-6.99(m，2H)，6.81-6.74(m，2H)，6.05-5.71(m，2H)，5.11-5.02(m，1H)，4.85-4.68(m，1H)，4.40-3.70(m，8H)，3.14-3.02(m，1H)，2.95-2.73(m，7H)，2.06-2.05(m，2H)，1.81-1.39(m，10H)，1.30-1.05(m，11H)，0.89-0.75(m，5H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ172.24，172.21，171.87，171.81，171.78，171.7，170.8，170.77，170.74，170.5，170.4，170.0，169.97，169.24，169.22，169.1，169.0，168.0，167.9，167.82，167.78，157.2，156.9，137.61，137.57，137.54，137.47，137.43，137.38，133.2，132.2，128.9，128.44，128.41，128.37，128.0，127.96，127.6，127.4，127.3，127.19，127.16，115.7，115.6，115.5，112.8，112.77，112.7，112.6，73.6，73.39，73.37，72.4，71.7，66.9，66.7，55.8，55.6，55.09，55.07，53.02，52.95，52.9，52.6，51.0，50.96，50.91，50.86，50.76，45.6，45.5，45.44，45.36，41.7，41.6，41.5，41.4，36.6，36.55，36.49，35.3，33.7，33.6，33.5，33.0，32.4，30.7，30.3，30.1，30.0，29.8，29.48，29.45，29.41，28.3，28.2，28.1，27.3，27.2，27.13，27.09，27.0，26.9，26.85，26.82，26.1，25.4，25.2，24.1，24.08，24.03，24.0，23.9，23.8，18.8，18.7，18.6，18.4，13.9，13.8，13.7；HRMS m/z 789.4560[C₄₃H₆₀N₆O₈的计算值，789.4551，误差＝1ppm]。步骤I：

在0℃下，向羟基酰胺57i(0.320g，0.406mmol)和Des-Martin试剂(0.400g，0.943mmol)的混合物中加入无水CH₂Cl₂(80mL)。在0℃下，剧烈搅拌生成的白色悬浮液并温热至室温，同时放置在冰浴中4小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液和亚硫酸氢钠溶液(各30mL)并把混合物剧烈搅拌10分钟，之后分离各层。用CH₂Cl₂(2×80mL)提取水溶液。用硫酸镁干燥合并的有机溶液，过滤并真空浓缩。快速层析(2-5％MeOH-CH₂Cl₂)，得到为白色固体的两个立体异构体57A(109mg，0.139mmol)和57B(102mg，0.130mmol，66％合并收率)。实施例58：式58化合物的制备步骤A：

除了用胺盐酸盐B替代A外，按照实施例1步骤J的方法，制备所需的化合物58a。以53％收率得到为以白色固体形式存在的不可分离的非对映体混合物的羟基酰胺58a。步骤B：

按照实施例2步骤B的方法，从羟基酰胺58a制备所需的化合物58。以88％收率得到为以白色固体形式存在的不可分离的非对映体混合物。实施例59：式59A和59B化合物的制备步骤A：

在室温下，将叔丁基酯58(18mg，0.022mmol)在三氟乙酸(2mL)和CH₂Cl₂(2mL)中的溶液搅拌3小时。真空除去挥发物后，将残余物溶于50％MeOH-CH₂Cl₂(3mL)中，真空浓缩至干，得到灰白色固体。快速层析(8-15％MeOH，0.3-0.5％AcOH在CH₂Cl₂中)，得到为白色固体的两个立体异构体59A(6.5mg，0.0086mmol)和59B(6.1mg，0.008mmol，75％合并收率)。对59A的分析数据：¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.75-8.72(m，1H)，8.60-8.57(m，1H)，8.10-8.08(m，1H)，7.91-7.88(m，1H)，7.38-7.27(m，5H)，7.12(d，J＝8.14Hz，1H)，6.81-6.73(m，2H)，5.24-5.22(m，1H)，5.06-5.01(m，1H)，4.77-4.73(m，1H)，4.39-4.17(m，3H)，4.07-4.01(m，1H)，3.92-3.79(m，3H)，3.15-3.05(m，1H)，2.78-2.72(m，1H)，2.08-2.05(m，1H)，1.78-1.45(m，13H)，1.41-1.22(m，4H)，1.18-1.03(m，4H)，0.93-0.81(m，5H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ196.6，171.8，171.5，171.9，170.3，167.2，161.0，157.1，137.4，128.4，128.1，127.7，127.5，127.4，126.9，115.6，112.6，66.8，56.6，55.1，53.4，52.7，52.6，45.4，41.6，33.5，31.7，30.0，29.6，28.2，27.2，27.1，26.1，25.42，25.36，24.0，23.8，18.7，13.5；HRMS m/z 760.3915[C₄₁H₅₃N₅O₉的计算值，760.3922]。对59B的分析数据：¹H NMR(400MHz，d₆-DMSO)δ8.76-8.73(m，1H)，8.55(dd，J＝6.9，3.2Hz，1H)，8.24(d，J＝7.11Hz，1H)，7.93-7.88(m，1H)，7.37-7.25(m，1H)，7.15-7.11(m，1H)，6.82-6.74(m，2H)，5.23-5.20(m，1H)，5.09-5.01(m，1H)，4.75-4.71(m，1H)，4.38-4.29(m，1H)，4.24-4.17(m，2H)，4.07-4.02(m，1H)，3.92-3.78(m，2H)，3.13-3.08(m，1H)，2.78-2.70(m，1H)，2.08-2.05(m，2H)，1.75-1.13(m，21H)，0.89-0.85(m，5H)；¹³CNMR(100MHz，d₆-DMSO)δ196.7，171.6，171.2，169.9，167.1，160.8，157.0，137.5，128.3，128.2，128.0，127.97，127.9，127.4，127.3，127.1，115.7，115.6，112.7，112.6，66.7，56.8，54.8，53.3，45.5，41.6，33.6，31.8，29.5，28.1，27.3，27.0，26.1，25.4，24.2，23.9，18.6，13.5；HRMS m/z 760.3915[C₄₁H₅₃N₅O₉的计算值，760.3922]。实施例60：化合物60的制备：步骤A：

用HOBt(1.69g，12.54mmol，1.5当量)和Hünigs碱(6.47g，9.20mL，50.16mmol，6.0当量)处理[CpRu(η⁶-4-氯代苯基丙酸)]PF₆(4.14g，8.36mmol)在干燥DMF(20mL)中的溶液。把反应混合物冷却至0℃并用EDCI(2.39g，12.54mmol，1.5当量)处理。在0℃下，将反应混合物搅拌30分钟并加入Tic-铵盐57d(2.90g，7.6mmol，1.0当量)。在室温下，将反应混合物搅拌12小时，真空蒸馏出DMF。用HCl水溶液(1M，100mL)稀释残余物，并提取到CH₂Cl₂(3×100mL)中。用NaHCO₃水溶液(1×100mL)、盐水(100mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩，得到棕色固体60a(5.2g，83％)，该固体被用于环合。MS：(电喷雾)：647[(M-CH₃OH-PF₆)⁺，100]。HRMSC₃₂H₃₄ClN₂O₄Ru[(M-CH₃OH-PF₆)]⁺的计算值647.1256；实测值：647.1241。步骤B：

在室温下，将钌复合物60a(5.0g，6.01mmol)在干燥DMF(300mL)中的溶液用干燥N₂脱气，并加入Cs₂CO₃(10.0g，30mmol，5.0当量)且在室温下搅拌24小时。蒸馏出溶剂DMF，并用水(100mL)稀释残余物，用CH₂Cl₂(3×100mL)和丙腈(3×100mL)提取。用盐水(100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩，且真空干燥过夜，得到棕色固体(5.1g)。它无须进一步纯化即可用于光解以除去Ru。MS：(电喷雾)：643[(M-PF₆)⁺，100]。

将来自前面步骤的环合化合物溶于CH₃CN(50mL)中并将它过滤到石英管中。使溶液脱气并在Raynot仪器(λ＝350nm)中光解48小时。真空浓缩反应混合物，经层析(SiO₂，EtOAc/己烷3∶2)纯化残余物，得到褐色固体60b(289mg，20％)。R_f：0.73(丙酮/己烷3∶7)¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ7.18(d，2H，J＝8.1Hz)，7.20-7.09(m，2H)，6.92(d，2H，J＝7.8Hz)，6.86(dd，1H，J＝2.1，7.2Hz)，6.76(s，1H)，5.41(d，1H，J＝17.4Hz)，4.23-4.18(m，2H)，4.00(bs，1H)，3.68(s，3H)，3.41(dd，1H，J＝12，3.9Hz)，3.01-2.86(m，1H)，1.9-1.62(m，4H)，1.52(bd，1H，J＝9.3Hz)，1.36-1.07(m，5H)；¹³CNMR(CDCl₃，100MHz，δ)173.2，167.2，163.8，156.5，155.1，135.8，132.7，130.2，129.6，126.2，119.1，117.5，115.8，60.2，55.5，51.6，44.2，42.0，35.7，30.2，29.3，26.5，26.2，25.8，25.7 MS：(电喷雾)：477[(M+1)⁺，100]，315(20)；HRMS C₂₈H₃₃N₂O₅(M+1)⁺的计算值：477.2389；实测值：477.2375；C₂₈H₃₂N₂O₅ 0.5H₂O的CHN计算值：C 69.26％H 6.85％N 5.77％；实测值：C69.62％H 6.59％N 5.77％。步骤C：

用LiOH·H₂O(41mg，1.0mmol，2.0当量)处理Tic-大环的甲酯60b(235mg，0.5mmol)在二噁烷(10.0mL)、H₂O(10.0mL)、CH₃OH(50.0mL)中的溶液并在室温下搅拌3小时。用(4M HCl在二噁烷中)使反应混合物酸化。真空浓缩反应混合物并把剩余的水冷冻且冻干，得到用于偶合的无色固体60c。步骤D：

用HOOBt(132mg，0.75mmol，1.5当量)处理水解的酸60c(0.5mmol)在干燥DMF(5.0mL)和CH₂Cl₂(5.0mL)中的溶液并冷却至0℃，加入Hünigs碱(258mg，2.0mmol，4.0当量，369μL)。向该混合物中连续加入EDCI(143mg，0.75mmol，1.5当量)和胺盐酸盐B(214mg，0.5mmol，1.0当量)。把反应混合物在冰箱中贮存48小时并真空浓缩以除去DMF和CH₂Cl₂。用HCl水溶液(2M，50mL)稀释残余物并用CH₂Cl₂(3×30mL)提取。用HCl水溶液(1M，2×50mL)、NaOH水溶液(2M，2×30mL)、盐水提取合并的有机层，干燥(MgSO₄)并真空浓缩。氧化残余物60d(172mg)无须进一步纯化；MS：(电喷雾)：838[(M+1)⁺，50]，490(100)；HRMS C₄₇H₆₀N₅O₉(M+1)⁺的计算值：838.4391；实测值：838.4398。步骤E：

用Dess-Martin试剂(175mg，0.41mmol，2.0当量)处理醇60d(171mg，0.20mmol)在CH₂Cl₂(6.0mL)中的溶液。在室温下，把反应混合物搅拌4小时并用NaHCO₃水溶液和Na₂S₂O₃水溶液稀释。在室温下，把反应混合物搅拌20分钟，并用CH₂Cl₂(3×30mL)提取反应混合物。用Na₂CO₃水溶液提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩，经层析(SiO₂，CH₃OH(2M-NH₃)/CH₂Cl₂1∶20)纯化残余物，得到为无色固体的酮酰胺60(56mg，32％)。R_f：0.35(CH₃OH(2M NH₃)/CH₂Cl₂1∶18)MS：(电喷雾，m/z相对密度)：836[(M+1)⁺，90]，490(100)。HRMSC₄₇H₅₈N₅O₉(M+1)⁺的计算值：836.4235；实测值：836.4269。实施例61：化合物61的制备步骤A：

用TFA(10.0mL)处理叔丁酯60(50mg，0.059mmol)在干燥CH₂Cl₂(10.0mL)中的溶液并在室温下搅拌4小时。经TLC(CH₃OH/CH₂Cl₂，1∶19)跟踪酯消失为基线。真空浓缩反应混合物，并把残余物重复溶于庚烷/CH₂Cl₂中且真空浓缩几次，得到细的无色固体61(51mg)，将其真空干燥；MS(FAB)780[(M+1)⁺，85]，516(20)，417(20)，403(100)；321(20)，248(40)，236(40)；HRMS C₄₃H₅₀N₅O₉(M+1)⁺的计算值：780.3609；实测值：780.3618。实施例62：化合物62的制备步骤A：

用Hünigs碱(9.1mg，0.076mmol，2.0当量，15μL)、PyBrOP(35mg，0.076mmol，2.0当量)处理酸61(30mg，0.038mmol)、二甲胺盐酸盐(6.2mg，0.076mmol，2.0当量)在CH₂Cl₂(1.0mL)中的溶液并在室温下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物，经层析(SiO₂，丙酮/己烷1∶1)纯化，得到为无色固体的二甲基酰胺62(14mg，46％)；R_f(0.31丙酮/己烷1∶1)。MS(FAB)807[(M+1)⁺，100]，805(60)，794(60)，747(40)，629(40)，589(62)。实施例63：化合物63的制备

步骤A：

用HOBt(810mg，5.99mmol，1.5当量)和Hünigs碱(2.58g，3.6mL，19.9mmol，5.0当量)处理[CpRu(η⁶-4-氯代苯基戊酸)]PF₆(2.2g，4.0mmol)在干燥DMF(10mL)中的溶液。把反应混合物冷却至0℃并用EDCI(1.14g，6.0mmol，1.5当量)处理。在0℃下，将反应混合物搅拌30分钟并加入Tic-铵盐57d(1.60g，4.0mmol，1.0当量)。在室温下，将反应混合物搅拌12小时，真空蒸出DMF。用HCl水溶液(1M，100mL)稀释残余物并提取到CH₂Cl₂(3×100mL)中。用NaHCO₃水溶液(1×40mL)、盐水(100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩，得到用于环合的棕色固体63a(2.41g，75％)。步骤B：

在室温下，将钌复合物63a(2.40g，2.8mmol)在干燥DMF(250mL)中的溶液用N₂脱气并加入Cs₂CO₃(4.6g，14.0mmol，5.0当量)且在室温下搅拌14小时。蒸馏出溶剂DMF并用水(100mL)稀释残余物且用CH₂Cl₂(3×100mL)提取。用HCl水溶液(1M，100mL)、NaHCO₃(100mL)、盐水(100mL)提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，真空浓缩并真空干燥过夜，得到棕色固体(1.9g，79％)。无须进一步纯化将其用于光解除去Ru。MS：(电喷雾)：671[(M-PF₆)⁺，40]。

将来自先前步骤的环合化合物溶于CH₃CN(60mL)中并过滤到石英管中。把溶液脱气并在Raynot(λ＝350nm)中光解48小时。真空浓缩反应混合物并经层析(SiO₂，丙酮/己烷3∶7)纯化残余物，得到褐色固体63b(140mg，13％)；R_f：0.73(丙酮/己烷3∶7)；MS：(FAB)：505[(M+1)⁺，80]232(40)；HRMS C₃₀H₃₇N₂O₅(M+1)⁺的计算值：505.2702；实测值：505.2698。步骤C：

将Tic-大环的甲酯63b(235mg，0.5mmol)在二噁烷(10.0mL)、H₂O(10.0mL)、CH₃OH(50.0mL)中的溶液用LiOHH₂O(41mg，1.0mmol，2.0当量)处理并在室温下搅拌3小时。把反应混合物酸化(4MHCl在二噁烷中)。真空浓缩反应混合物并把剩余的水冷冻且冻干，得到用于偶合的无色固体63c。步骤D：

将水解的酸63c(100mg，0.21mmol)在干燥DMF(4.0mL)和CH₂Cl₂(2.0mL)中的溶液冷却至0℃并用HOOBt(53mg，0.32mmol，1.5当量)、Hünigs碱(122mg，0.95mmol，4.5当量，175μL)、EDCI(61.0mg，0.32mmol，1.5当量)处理并搅拌0.5小时，用胺盐酸盐A(100mg，0.25mmol，1当量)处理。在室温下，把反应混合物搅拌16小时并真空浓缩以除去DMF和CH₂Cl₂。用HCl水溶液(2M，50mL)稀释残余物并用CH₂Cl₂(3×50mL)提取。用HCl水溶液(1M，100mL)、NaOH水溶液(2M，100)、盐水提取合并的有机层，干燥(Na₂SO₄)并真空浓缩。氧化残余物63d(72mg)，无须进一步纯化。步骤E：

将醇63d(72mg，0.86μmol)在CH₂Cl₂(5.0mL)中的溶液用Dess-Martin试剂(125mg，0.28mmol，3.2当量)处理。在室温下，把反应混合物搅拌3小时并真空浓缩，经层析(SiO₂，CH₃OH/CH₂Cl₂1∶1 9)纯化残余物，得到为无色固体的酮酰胺63(11mg，15％)；MS(FAB)：835[(M+1)⁺，90]，490(100)。实施例64：化合物64的制备步骤A：

通过对实施例1步骤F描述的方法，得到所需的产物64a。经快速柱层析纯化该物质，使用EtOAc/Hex(7∶3)洗脱，以80％产率得到64a；¹H NMR(CDCl₃，δ)：7.35-7.29(m，5H)，7.02(d，2H，J＝8.4Hz)，6.72(d，2H，J＝6.9Hz)，6.01(d，1H)，4.60(t，1H)，4.52(s，1H)，3.8-3.61(m，2H)，3.72(s，3H)，3.54-3.51(m，4H)，2.83(t，2H，J＝7.5Hz)，2.39(t，2H，J＝8.1Hz)，2.41-2.20(m，1H)，2.05-1.83(m，1H)，1.85-1.58(m，8H)，1.26-1.24(m，5H)；¹³CNMR(CDCl₃，δ)：172.2，171.9，171.0，154.4，138.3，132.2，129.4，128.4，127.7，127.6，115.4，73.0，66.9，66.2，57.9，54.9，52.5，52.3，41.0，38.5，34.7，30.8，30.0，29.4，27.9，26.1，26.0，25.9。步骤B：

通过对实施例1步骤G描述的方法，得到所需的产物64b。滤出催化剂后，所得到的产物纯度足以用于下一步骤。步骤C：

通过对实施例1步骤H描述的方法，得到所需的产物64c。经SiO₂硅胶层析(丙酮/己烷3∶7)纯化粗品反应混合物，得到为无色固体的64c(64mg，16％)。¹³CNMR(CDCl₃)172.1，171.1，171.0，157.7，131.0，129.9，114.3，78.1，64.7，63.3，58.7，55.3，52.2，52.0，42.1，37.9，36.1，30.8，30.7，29.7，28.7，28.5，26.2，26.0；MS(FAB)473(M+1)⁺，(100)，327(20)。步骤D：

如对实施例1步骤I描述的那样，以定量收率合成所述酸。蒸发后，该粗品混合物直接用于下一步骤。步骤E：

如先前对实施例1步骤J描述的那样，合成期望的产物64e。该偶合的物质直接用于下一步骤以合成64。步骤F：

通过先前对实施例1步骤K描述的氧化方法，得到所需的产物。实施例65：化合物65的制备：

除了用3-乙烯基苯甲酸开始合成外，实施例65的合成与实施例14的合成相同。苯基部分的还原类似于实施例14步骤C。然而，得到非对映体的混合物。实施例66：式66A和66B化合物的制备：

使用适宜的起始原料及适宜的改进，实施例66的合成顺序按照对实施例54描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析分离异构体66A和66B。LCMS数据：818.2(M+H)⁺(对66A和66B)。实施例67：式67A和67B化合物的制备：

使用适宜的起始原料及适宜的改进，实施例67的合成顺序按照对实施例54描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析分离异构体67A和67B。HRMS(FAB)C₄₅H₆₄N₇O₉的计算值：846.4766(M+H)⁺。实测值：846.4782(对67A)和846.4774(对67B)。实施例68：式68化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例68的合成顺序按照对实施例30描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析得到为异构体混合物的所需的产物68。HRMS(FAB)C₄₇H₅₉N₆O₉的计算值：851.4344(M+H)⁺。实测值：851.4149。实施例69：式69A和69B化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例69的合成顺序按照对实施例1描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析分离异构体69A和69B。LCMS数据：829.2(M+H)⁺(对69A和69B)。实施例70：式70A和70B化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例70的合成顺序按照对实施例4描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析分离异构体70A和70B。LCMS数据：843.2(M+H)⁺(对70A和70B)。实施例71：式71化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例71的合成顺序按照对实施例5描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析得到为异构体混合物的所需的产物71。LCMS数据：818.2(M+H)⁺。实施例72：式72化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例72的合成顺序按照对实施例6描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析得到为异构体混合物的所需的产物72。LCMS数据：762.2(M+H)⁺。实施例73：式73化合物的制备：

使用适宜的起始原料和适宜的改进，实施例73的合成顺序按照对实施例10描述的合成顺序进行。氧化后，使用柱层析得到为异构体混合物的所需的产物73。LCMS数据：659.2(M+H)⁺。实施例74：化合物74A和74B的制备：

除了用5-甲基-3-羟基苯基乙酸替代步骤F中的3-羟基苯基乙酸以外，通过与在实施例1中制备化合物1A和1B的描述相同的方法，制备所需的化合物74A和74B。LRMS(M+H)⁺m/z 803.1[对C₄₃H₅₈N₆O₉的计算值，802.4]。实施例75：化合物75A和75B的制备：

除了用4-甲基-3-羟基苯基乙酸替代步骤F中的3-羟基苯基乙酸以外，通过与在实施例1中制备化合物1A和1B的描述相同的方法，制备所需的化合物75A和75B。LRMS(M+H)⁺m/z 803.1[对C₄₃H₅₈N₆O₉的计算值，802.4]。实施例76：化合物76的制备：

除了用胺E替代步骤J中的胺A以外，通过与在实施例27中制备化合物27A和27B的描述相同的方法，制备所需的化合物76。LRMS(M+H)⁺m/z 831.1[对C₄₄H₅₈N₆O₁₀的计算值，830.4]。实施例77：化合物77的制备：

除了用不同的胺中间体替代步骤J中的胺A以外，通过与在实施例27中制备化合物27A和27B的描述相同的方法，制备所需的化合物77。LRMS(M+H)⁺m/z761.1[对C₄₁H₅₂N₄O₁₀的计算值，760.4]。实施例78：化合物78的制备：

除了用不同的胺中间体替代步骤J中的胺A以外，通过与在实施例27中制备化合物27A和27B的描述相同的方法，制备所需的化合物78。LRMS(M+H)⁺m/z 653.1[对C₃₅H₄₈N₄O₈的计算值652.4]。实施例79：化合物79的制备：

除了用不同的胺中间体替代步骤I中的胺A以外，通过与在实施例30中制备化合物30的描述相同的方法，制备所需的化合物79。LRMS(M+H)⁺m/z 746.1[对C₄₁H₅₅N₅O₈的计算值745.4]。实施例80：化合物80的制备：

除了用胺D替代步骤I中的胺A以外，通过与在实施例30中制备化合物30的描述相同的方法，制备所需的化合物80。LRMS(M+H)⁺m/z 746.1[对C₄₁H₅₅N₅O₈的计算值745.4]。实施例81：化合物81的制备：

通过与中间体A步骤5的制备中描述相同的方法，制备所需的化合物81。LRMS(M+H)⁺m/z 657.1[对C₃₄H₄₈N₄O₉的计算值，656.3]。实施例82：化合物82的制备：

除了用不同的胺替代步骤I中的胺A以外，通过与制备实施例30中化合物30的描述相同的方法，制备所需的化合物82。LRMS(M+H)⁺m/z 639.1[对C₃₅H₅₀N₄O₇的计算值，638.4]。实施例83：化合物83的制备：

除了用胺E替代步骤I中的胺A以外，通过与制备实施例30中化合物30的描述相同的方法，制备所需的化合物83。LRMS(M+H)⁺m/z 831.1[对C₄₅H₅₂N₆O₉的计算值，830.5]。实施例84：化合物84的制备：

除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外，通过与在实施例30中化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物84。LRMS(M+H)⁺m/z 653.1[对C₃₆H₅₂N₄O₇的计算值，652.4]。实施例85：化合物85的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物85。但用适宜的胺替代步骤I中的胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 613.1[对C₃₃H₄₈N₄O₇的计算值，612.4]。实施例86：化合物86的制备：

除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物86。LRMS(M+H)⁺m/z 651.1[对C₃₆H₅₀N₄O₇的计算值，650.4]。实施例87：化合物87的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物87。但用适宜的胺于替代步骤I中的胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 611.1[对C₃₃H₄₆N₄O₇的计算值，610.3]。实施例88：化合物88的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物88。但用适宜的胺替代步骤I中的胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 611.1[对C₃₃H₄₆N₄O₇的计算值，610.3]。实施例89：化合物89的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物88。除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外。LRMS(M+H)⁺m/z 637.1[对C₃₅H₄₈N₄O₇的计算值，636.4]。实施例90：化合物90的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物90。除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外。LRMS(M+H)⁺m/z 725.1[对C₃₉H₅₆N₄O₉的计算值，724.4]。实施例91：化合物91的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物91。除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外。LRMS(M+H)⁺m/z 727.1[对C₃₉H₅₈N₄O₉的计算值，726.4]。实施例92：化合物92的制备：

除了用Boc-叔丁基甘氨酸替代步骤C中的Boc-环己基甘氨酸以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物92。LRMS(M+H)⁺m/z 791.1[对C₄₂H₅₈N₆O₉的计算值，790.4]。实施例93：化合物93的制备：

通过与在实施例92中的化合物92的制备描述相同的方法，制备所需的化合物93。除了用适宜的胺替代胺A外。LRMS(M+H)⁺m/z613.1[对C₃₃H₄₈N₄O₇的计算值，612.4]。实施例94：化合物94的制备：

通过与在实施例92中的化合物92的制备描述相同的方法，制备所需的化合物94。但用适宜的胺替代胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 573.1[对C₃₀H₄₄N₄O₇的计算值，572.3]。实施例95：化合物95的制备：

除了用Boc-缬氨酸替代步骤C中的Boc-环己基甘氨酸以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物95。LRMS(M+H)⁺m/z 777.1[对C₄₁H₅₆N₆O₉的计算值，776.4]。实施例96：化合物96的制备：

通过与在实施例95中的化合物95的制备描述相同的方法，制备所需的化合物96。除了用适宜的胺替代胺A。LRMS(M+H)⁺m/z599.1[对C₃₂H₄₆N₄O₇的计算值，598.3]。实施例97：化合物97的制备：

通过与在实施例95中的化合物95的制备描述相同的方法，制备所需的化合物97。但用适宜的胺替代胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 559.1[对C₂₉H₄₂N₄O₇的计算值，558.3]。实施例98：化合物98的制备：

除了用Boc-苯基甘氨酸替代步骤C中的Boc-环己基甘氨酸以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物98。LRMS(M+H)⁺m/z 811.1[对C₄₄H₅₄N₆O₉的计算值，810.4]。实施例99：化合物99的制备：

通过与在实施例98中的化合物98的制备描述相同的方法，制备所需的化合物99。除了用适宜的胺替代胺A外。LRMS(M+H)⁺m/z633.1[对C₃₅H₄₄N₄O₇的计算值，632.3]。实施例100：化合物100的制备：

通过与在实施例98中的化合物98的制备描述相同的方法，制备所需的化合物100。但用适宜的胺替代胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 593.1[对C₃₅H₄₀N₄O₇的计算值，592.3]。实施例101：化合物101的制备：

除了用Boc-异亮氨酸替代步骤C中的Boc-环己基甘氨酸以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物101。LRMS(M+H)⁺m/z 791.1[对C₄₂H₅₆N₆O₉的计算值，790.4]。实施例102：化合物102的制备：

通过与在实施例101中的化合物101的制备描述相同的方法，制备所需的化合物102。除了用适宜的胺替代胺A外。LRMS(M+H)⁺m/z613.1[对C₃₃H₄₈N₄O₇的计算值，612.4]。实施例103：化合物103的制备：

通过与在实施例101中的化合物101的制备描述相同的方法，制备所需的化合物103。但用适宜的胺替代胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 573.1[对C₃₀H₄₄N₄O₇的计算值，572.3]。实施例104：化合物104的制备：

除了用Boc-环戊基甘氨酸替代步骤C中的Boc-环己基甘氨酸，并且用适宜的胺替代步骤I中的胺A以外，通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物104。LRMS(M+H)⁺m/z 625.1[对C₃₄H₄₈N₄O₇的计算值，624.4]。实施例105：化合物105的制备：

通过与在实施例104的化合物104的制备中描述相同的方法，制备所需的化合物105。但用适宜的胺替代胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 585.1[对C₃₁H₄₄N₄O₇的计算值，584.3]。实施例106：化合物106的制备：

通过与在实施例30中的化合物30的制备描述相同的方法，制备所需的化合物106，但以下例外：(a)用5-苄氧基-2-甲基-1-戊烯替代步骤A中的4-苄氧基-2-甲基-1-戊烯；(b)用适宜的胺替代步骤I中的胺A。LRMS(M+H)⁺m/z 653.1[对C₃₆H₅₂N₄O₇的计算值，652.4]。实施例107：化合物107的制备：

通过与在实施例106的化合物106的制备中描述相同的方法，制备所需的化合物107。但用适宜的胺替代步骤I中的胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化。LRMS(M+H)⁺m/z 613.1[对C₃₃H₄₈N₄O₇的计算值，612.4]。实施例108：化合物108的制备：

除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A外，通过与在实施例106的化合物106的制备中描述相同的方法，制备所需的化合物108。LRMS(M+H)⁺m/z 665.1[对C₃₇H₅₂N₄O₇的计算值，664.4]。实施例109：化合物109的制备：

通过与在实施例106中化合物106的制备描述相同的方法，制备所需的化合物109，但除了用适宜的胺替代步骤I中的胺A，并且按照实施例10步骤J的方法进行氧化外。LRMS(M+H)⁺m/z 625.1[对C₃₄H₄₈N₄O₇的计算值，624.4]。实施例110：化合物110的制备：

通过与在实施例1中的化合物1A和1B的制备描述相同的方法，制备所需的化合物110，但用Boc-3-羟基脯氨酸替代步骤A中的脯氨酸1a，并且用Boc-叔丁基甘氨酸替代步骤D中的Boc-环己基甘氨酸。LRMS(M+H)⁺m/z 763.1[对C₄₀H₅₄N₆O₉的计算值，762.4]。实施例111：化合物111的制备：

通过与在实施例4中的化合物4A和4B的制备描述相同的方法，制备所需的化合物111，但用Boc-3-羟基脯氨酸替代步骤A中的脯氨酸1a，并且用Boc-叔丁基甘氨酸替代步骤D中的Boc-环己基甘氨酸。LRMS(M+H)⁺m/z 777.1[对C₄₁H₅₆N₆O₉的计算值，776.4]。HCV蛋白酶抑制活性试验分光光度试验：按照由R.Zhang等，Analytical Biochemistry， 270(1999)268-275描述的方法，其公开通过引用结合到本文中，对本发明化合物进行HCV丝氨酸蛋白酶的分光光度试验。基于显色酯底物的蛋白水解试验可适用于HCV NS3蛋白酶活性的连续监测。底物衍生于NS5A-NS5B接合序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或者P)的P侧，其C-末端羧基用4种不同的显色醇(3-或4-硝基苯酚、7-羟基-4-甲基香豆素或4-苯基偶氮苯酚)中的一种酯化。下面提出这些新的分光光度显色酯底物的合成、特征鉴定和对高通量筛选和HCV NS3蛋白酶抑制剂的详细的动力学评价的应用。材料与方法：

材料：用于与试验有关的缓冲液的化学试剂得自Sigma ChemicalCompany(St.Louis，Missouri)。用于肽合成的试剂得自AldrichChemicals，Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。肽由人工合成或者在型号431A的自动ABI合成仪(得自Applied Biosystems)上合成。型号LAMBDA12的UV/VIS分光机得自Perkin Elmer(Norwalk，Connecticut)和96孔UV板得自Corning(Corning，New York)。预温热阻断剂得自USA Scientific(Ocala，Florida)和96孔板旋涡仪得自Labline Instruments(Melrose Park，lllinois)。具有单色光源的Spectramax Plus微量滴定板读数器得自MolecularDevices(Sunnyvale，California)。酶制备：通过采用先前公开的方法(D.L.Sali等，Biochemistry， 37(1998)3392-3401)，可制备重组异源二聚体(heterodimeric)的HCV NS3/NS4A蛋白酶(株1a)。使用先前经氨基酸分析定量的重组HCV蛋白酶标准物，通过Biorad染色法测定蛋白浓度。试验开始前，采用BioradBio-Spin P-6预装柱，将酶储备缓冲液(50mM磷酸钠pH 8.0，300mMNaCl，10％甘油，0.05％十二烷基麦芽糖苷和10mM DTT)交换为试验缓冲液(25mM MOPS pH6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％十二烷基麦芽糖苷，5μM EDTA和5μM DTT)。底物合成和纯化：如由R.Zhang等(同上)报道的那样进行底物的合成并且使用标准方法(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.， 37(1991)，513-520)，通过将Fmoc-Nva-OH固定到2-chlorotrityl氯化物树脂上启动。随后，或者人工或者在型号431的自动ABI肽合成仪上，采用Fmoc化学装配肽。或者通过在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)30分钟，或者通过在DCM中的2％三氟乙酸(TFA)10分钟，自树脂裂解N-乙酰化和充分保护的肽片段。共沸蒸发(或者经Na₂CO₃水溶液反复提取)合并的滤液和DCM洗液，除去在裂解中所用的酸。经Na₂SO₄干燥DCM相并且蒸发。

采用标准酸-醇偶合方法(K.Holmber等，Acta.Chem.Scand， B33(1979)，410-412)装配酯底物。将肽片段溶于无水吡啶(30-60 mg/ml)中，向其中加入10摩尔等价物的发色团和催化量(0.1eq.)的对-甲苯磺酸(pTSA)。加入二环己基碳二亚胺(DCC，3eq.)以启动偶合反应。经HPLC监测产物形成并发现反应在室温下12-72小时后完成。真空蒸发吡啶溶剂并经用甲苯共沸蒸发进一步除去。用95％在DCM中的TFA将肽酯脱除保护2小时并用无水乙醚提取3次以除去过量的发色团。经反相HPLC在C3或C8柱上纯化脱除保护的底物，用30％-60％乙腈(使用6个柱体积)梯度洗脱。HPLC纯化后总收率为约20-30％。经电喷雾离子质谱证实分子量。在干燥下，以干燥粉末形式贮存底物。底物和产物的波谱：在pH6.5的试验缓冲液中可得到底物和相应显色产物的波谱。采用多倍稀释，在最佳脱峰波长下，1-cm比色杯(340nm对3-Np和HMC，370nm对PAP和400nm对4-Np)下测定消光系数。最佳脱峰波长定义为在底物与产物之间得到吸收度最大分部差异的波长(产物OD-底物OD/底物OD)。蛋白酶试验：在96孔微滴板上，采用200μl反应混合物在30℃下进行HCV蛋白酶试验。试验缓冲液条件(25mM MOPS pH6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％十二烷基麦芽糖苷、5μM EDTA和5μMDTT)对NS3/NS4A异源二聚体最佳化(D.L.Sali等，同上)。一般，将150μl缓冲液、底物和抑制剂的混合物加入到孔(DMSO最终浓度，4％v/v)中并且在30℃下使之预孵育约3分钟。然后将50μl在试验缓冲液中的预温热的蛋白酶(12nM，30℃)用于启动所述反应(最终体积200μl)。采用配有单色光源的Spectromax Plus微量滴定板读数器(使用截断滤膜的板读数器可得到可以接受的结果)，在试验全程(60分钟)监测板在合适的波长(340nm对3-Np和HMC，370nm对PAP和400nm对4-Np)下吸收度的变化。在合适的波长下监测Nva与发色团之间的酯键的蛋白水解裂解，相对于作为非酶促水解的对照组的非酶空白组。于30倍底物浓度范围(～6-200μM)内进行底物动力学参数的评价。采用线性回归测定最初速度，并且采用非线性回归分析(Mac Curve Fit1.1，K.Raner)，通过将数据拟合到Michaelis-Menten方程式中获得动力学常数。假设酶完全活化，以计算转化数(K_cat)。抑制剂和灭活剂的评价：按照竞争抑制作用动力学的重排Michaelis-Menten方程式：v_o/v_i＝1+[1]_o/(K_i(1+[S]_o/K_m))，其中v_o为未抑制的初始速度，V_i为在任何给出的抑制剂浓度([1]_o)下，在抑制剂存在下的初始速度，且[S]_o为所使用的底物浓度，通过v_o/v_i对抑制剂浓度([1]_o)作图，在固定的酶和底物的浓度下，可实验测定竞争性抑制剂Ac-D-(D-Gla)-L-1-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常数(K_i)。采用线性回归拟合所得到数据，以及所得到的斜率1/(K_i(1+[S]_o/K_m)被用于计算K_i值。

在以上提及的表1中给出所得到的本发明各种大环的K_i值，其中按K_i值的范围的顺序排列化合物。从这些试验结果，技术人员应该意识到本发明化合物作为NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂具有优良的用途。

细胞生物测定方法：按照由S.Agrawal等，Development andCharacterization of Hepatitis C Virus Serine Protease Cell-based Trans-Cleavage Assay(丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶细胞-基反式切割测定法的开发和鉴定)，Hepatology Supplement to Volume 30(No.4，第2部分，1999年10月)，Abstract No.615(Proceedings of AASLD 50^th AnnualMeeting，Dallas，Texas，1999年11月5-9日)描述的方法，其公开通过引用结合到本文中，对本发明化合物可进行HCV丝氨酸蛋白酶的细胞生物测定。在用质粒(可表达包含NS5A/5B裂解识别序列和1BNS4A_21-32GS-GSNS_3-81117K表达载体和YFPn1作为控制细胞毒性的内标蛋白的报道基因蛋白底物)共转染的Hela/Huh7细胞中进行所述测定。通过总细胞溶胞产物的SDS-PAGE随后通过蛋白质印迹检测，采用直接对抗报道基因底物的单克隆抗体，可测量蛋白酶活性。通过在磷酸图像仪上扫描免疫印迹，可进行底物裂解的定量。材料：质粒DNAspBFP-5A/5B-GFP：表达底物的报道基因将融合蛋白编码，后者由N’末端蓝色荧光蛋白(BFP)功能域和C’末端绿色荧光蛋白(GFP)功能域组成，通过衍生于NS5A/5B裂解识别序列的25个氨基酸分开。当经合适波长的UV光激发时，GFP和BFP两者为分别发射绿光或蓝光的基本上均匀的自动荧光蛋白。在GFP的发色团中的四种氨基酸取代改变发射波长并把蛋白转变为BFP。

采用识别两种蛋白的单克隆抗体，通过免疫学方法在细胞溶胞产物中可检测底物和得到的GFP和BFP的产物。

BFP-5A/5B-GFP报道基因包含BFP和GFP自动荧光蛋白编码序列(Quantum Biotechnologies，Inc.，Montreal，Canada)，所述序列通过NS5A/5B裂解识别序列分离，在pQB125克隆载体(QuantumBiotechnologies，Inc.)的Nhe I和Bam HI限制内切核酸酶位点之间被克隆。融合蛋白的表达处于CMV IE启动子增强剂的控制下。载体的牛生长激素p(A)序列提供mRNA的聚腺苷酸化的信号。NS5A/5B裂解序列为：SSGADTEDVVCCSMSYTWTGALVTP。DNA测序被用来证实克隆。P1BOO2：1bNS4A21-32GS-GS NS3-81l17K：将亚型1b蛋白酶克隆为结合于在载体pClneo中的CMV启动子后的Xbal/Notl片段。YFPn1：YFPnl购自CLONTECH(Palo Alto，California)。将第三种质粒加入到转染提供控制细胞毒性的内标蛋白且不影响蛋白酶裂解的百分率。

在合适的抗生物素选择下，于LB培养基中，在DH5α细胞(得自Life Technologies)中维持和繁殖质粒DNAs，并且采用QiAfilter质粒试剂盒(Qiagen，Valencia，California)纯化。细胞培养：Hela细胞在经10％胎牛血清(FCS)、2mM谷氨酰胺和100u/ml青霉素-链霉素(BioWhitaker)、2％NaHCO₃补充的Eagle氏极限必需培养基(EMEM；BioWhittaker，Walkersville，Maryland)中维持和繁殖。Huh7细胞在经10％胎牛血清(FCS)、100u/ml青霉素-链霉素(BioWhitaker)和5ml NEAA(100x；BioWhittaker)/L补充的Dulbecco氏修饰的Eagle氏培养基(DMEM；BioWhittaker)中维持和繁殖。SOP方法日前位转染：

Hela细胞以6×10⁴细胞/孔的密度被接种到24孔板(Falcon3047板)上并且在5％CO₂孵育器中于37℃下生长过夜。转染日：

将质粒DNAs在不含有水的核酸酶中稀释至最终浓度0.05μg/μl(Promega，Madison，Wisconsin，分类号P119C)。合并0.75μgBFP-5A/5B-GFP并与0.175μg P1B002(0.23X)和0.02μg的YFPn1混合。用不含有FBS、谷氨酰胺和抗生素的EMEM将DNAs稀释至最终体积60μl。加入每总μgs的DNA的5μl体积比例的SuperFectReagent(Qiagen，目录号301305)，并在室温下将混合物涡旋约10秒钟且孵育10分钟以使复合物形成。

当复合物形成发生时，得自细胞培养板的生长培养基被吸出，并用1ml不含有Ca²⁺、Mg²⁺的PBS(BioWhitaker)洗涤细胞1次。将350μl EMEM(用合适的补充-完全培养基补充)加入到包含转染复合物的试管中并将混合物移液上下2-3次。将总体积转移至24孔培养板的一个孔中。在37℃下和5％CO₂中，将Hela细胞与转染复合物孵育约3小时。通过吸出从细胞中除去包含转染复合物的培养基。

以约1mlPBS洗涤细胞一次，将PBS吸出，加入495μl完全EMEM随后加入5μl化合物/孔。在37℃下和5％CO₂中，将细胞孵育22-24hr。细胞溶胞产物的制备

自每孔吸出培养基并用DPBS洗涤1次。在100μl的1x Tris-SDS-BME样品缓冲液(OWL分离系统，Portsmouth，New Hampshire，编号ER33)中收获细胞，并且转移至微量离心管中。然后，将其煮沸3-5分钟以溶解细胞。在SDS-PAGE凝胶中，于10μl/孔下，进行填充。在10cm×10cm 12.5％SDS-PAGE(Owl Scientific，编号OG-0125B)上，在Tris-Glycine-SDS缓冲液(Owl Scientific)中，于30mamp运转下经电泳将溶胞产物溶解。临用前，在100％甲醇中浸泡PVDF膜(Immobilon-P；45μm孔径；Millipore，Bedford，Massachusetts)10秒钟，然后将印迹放入到蒸馏水中。在每凝胶108mamp下，采用半-干燥电印迹将蛋白转移至PVDF滤膜(0.45μm，Millipore)90分钟。经ECF蛋白印迹的蛋白的检测(Amersham Pharmacia Biotech，LittleChalfont，England)，目录号RPN5780)。在冰箱中，于2-4℃下，通过在～10ml的包含0.05％吐温20 pH7.4(Sigma Chemicals，St.Louis，Missouri，目录号3563)的PBS中的5％阻断剂(得自试剂盒)，将PVDF滤膜阻断过夜。次日，用包含0.05％吐温20洗涤缓冲液的TPBS短暂冲洗膜两次，然后在包含0.05％吐温20(pH7.4)的PBS中冲洗三次，每次5分钟。在包含0.05％吐温20(pH7.4)的PBS中，将膜在12mls抗-GFP单克隆抗体的1∶3000稀释液中孵育30分钟(Clontech，PaloAlto，California)，而在同时加入1％BSA(Albumin，得自Sigma的牛目录号A-2153)以减少背景。用TPBS短暂冲洗膜两次，然后用TPBS洗涤缓冲液冲洗三次，每次5分钟。将膜在12mls在TPBS中的1∶600稀释抗荧光-连接的抗小鼠Ig中孵育30分钟。用TPBS短暂冲洗膜两次，然后5分钟内用TPBS洗涤缓冲液冲洗三次。为用ECF信号扩增，将底物膜在10ml的1∶2500抗荧光生物碱磷酸酶接合中孵育30分钟。用TPBS短暂冲洗膜两次，然后5分钟内用TPBS洗涤缓冲液冲洗三次。按照每个制造商的说明书(等分试样和冷冻)，制备ECF底物溶液，将膜孵育2-3分钟，排出过量的试剂，然后用滤纸印迹，空气干燥9-10分钟，然后扫描。扫描膜：将印迹放入Storm860磷酸图像仪(phosphoimager)的玻璃中蓝色化学发光免疫测定法被建立，200象素大小，700PMT伏特。在ImageQuant中打开文件并经过建立围绕表示底物(S)、产物(P)和内标对照物(IC)的带的面积定量化。底物的裂解百分率可被作为P/(S+P)×100测量。比较包括在每个印迹上的药物对照品的重复试验，可测量在由于药物的裂解中的抑制作用。在Excel上建立报告。结果显示在表2中。从这些试验结果，本领域技术人员应该意识到本发明化合物作为NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂具有优良的用途。表2：基于HCV细胞的测定结果：

实施例编号	基于细胞的试验(μM)
实施例编号	基于细胞的试验(μM)	1B	2
2	2	1B	2
2	2	4A	2.5
4B	1.8	4A	2.5
4B	1.8	5	0.6
7B	7	5	0.6
7B	7	8	3.5
12B	5.2	8	3.5
12B	5.2	21	2
23	3	21	2
23	3	30	1
57B	1.5	30	1
57B	1.5	58	2

本领域技术人员应该意识到对本公开、对材料和方法两者的许多改进、变体和变化可被实践。这样的改进、变体和变化打算处于本发明的精神和范围内。

Claims

1.一种大环化合物，包括所述化合物的对映体、立体异构体、外消旋体和互变异构体、所述化合物的药学上可接受的盐或溶剂合物，所述化合物具有在式I中显示的通式结构：式I其中：

X和Y独立选自以下部分：烷基、烷基-芳基、杂烷基、杂芳基、芳基-杂芳基、烷基-杂芳基、环烷基、烷基醚、烷基-芳基醚、芳基醚、烷基氨基、芳基氨基、烷基-芳基氨基、烷基硫、烷基-芳基硫、芳基硫、烷基砜、烷基-芳基砜、芳基砜、烷基-烷基亚砜、烷基-芳基亚砜、烷基酰胺、烷基-芳基酰胺、芳基酰胺、烷基磺酰胺、烷基-芳基磺酰胺、芳基磺酰胺、烷基脲、烷基-芳基脲、芳基脲、烷基氨基甲酸酯、烷基-芳基氨基甲酸酯、芳基氨基甲酸酯、烷基-酰肼、烷基-芳基酰肼、烷基羟酰胺(hydroxamide)、烷基-芳基羟酰胺、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂烷基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷基羰基、芳基羰基、杂烷基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、杂芳氧基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、杂芳基氨基羰基或它们的组合，前提是X和Y可另外由选自以下的部分任选取代，包括：芳族、烷基、烷基-芳基、杂烷基、芳基-杂芳基、烷基-杂芳基、环烷基、烷基醚、烷基-芳基醚、烷基硫、烷基-芳基硫、烷基砜、烷基-芳基砜、烷基酰胺、烷基-芳基酰胺、烷基磺酰胺、烷基胺、烷基-芳基胺、烷基-芳基磺酰胺、烷基脲、烷基-芳基脲、烷基氨基甲酸酯和烷基-芳基氨基甲酸酯；

Z选自O、N或CH；

W可存在或者不存在，如果W存在，W选自C＝O、C＝S或SO₂；

A为O、CH₂、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p、(CRR’)_p、NR、S、SO₂或键；

E为CH、N或CR，或者朝着A、L或G的双键；

G可存在或者不存在，当Q存在时，G为(CH₂)_p、(CHR)_p或(CRR’)_p；当G不存在时，J是存在的且E直接连接于G连接的碳原子；

L可存在或者不存在，当L存在时，L为CH、CR、O、S或NR；当L不存在时，则M可以不存在或者存在，并且如果M存在而L不存在时，则M直接且独立连接于E，J直接且独立连接于E；

p为0-6的数目；和

R、R’、R²、R³和R⁴独立选自H、C1-C10烷基、C2-C10链烯基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酰基、脲、酮、醛、氰基、硝基，氧、氮、硫或磷原子，所述氧、氮、硫或磷原子的数目为0-6；(环烷基)烷基和(杂环烷基)烷基，其中所述环烷基由3-8个碳原子、以及0-6个氧、氮、硫或磷原子组成，并且所述烷基具有1-6个碳原子；芳基；杂芳基；烷基-芳基和烷基-杂芳基；所述烷基、杂烷基、链烯基、杂链烯基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基部分可被任选取代，所述术语“取代的”指由1个或者更多个选自以下的部分任选且适宜取代：烷基、链烯基、炔基、芳基、芳烷基、环烷基、杂环基、卤素、羟基、硫代基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酸酯、脲、酮、醛、氰基、硝基、氨磺酰基、亚砜、砜、磺酰脲、酰肼和异羟肟酸酯。

2.权利要求1的化合物，其中R¹＝COR⁵，且R⁵为H、OH、COOR⁸、CONR⁹R¹⁰。

3.权利要求2的化合物，其中R¹＝COCONR⁹R¹⁰，且R⁹为H，R¹⁰为H、CH(R^1’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)R’。

4.权利要求3的化合物，其中R¹⁰＝CH(R^1’)CONHCH(R^2’)COOR¹¹、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)CONR¹²R¹³、CH(R^1’)CONHCH(R^2’)(R’)，其中R^1’为H或烷基，且R^2’为苯基、取代的苯基、杂原子取代的苯基、苯硫基、环己基、环戊基、环丙基、哌啶基、吡啶基和2-茚满基。

5.权利要求4的化合物，其中R^1’为H。

6.权利要求5的化合物，其中R^2’＝苯基、苯硫基、环己基、2-茚满基、环戊基、吡啶基、苯基(4-HNSO₂NH₂)，R¹¹为H或叔丁基，R¹²和R¹³为甲基，且R^1’为羟基甲基或叔丁氧基甲基。

7.权利要求1的化合物，其中R²选自以下部分：

8.权利要求7的化合物，其中R¹＝COR⁵，且R⁵为H、OH、COOR⁸、CONR⁹R¹⁰。

9.权利要求8的化合物，其中L和M不存在，J直接连接于E。

10.权利要求8的化合物，其中L、J和M不存在，E直接连接于N。

11.权利要求8的化合物，其中G和M不存在。

12.权利要求8的化合物，其中所述部分：

选自以下结构 a、 b或 c：

13.权利要求12的化合物，其中结构 a选自以下结构：

14.权利要求8的化合物，其中

是其中M可存在或不存在，并且如果M不存在，则Q连接于E。

15.权利要求8的化合物，其中是

其中G和J独立选自(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p和(CRR’)_p；A和M独立选自O、S、SO₂、NR、(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p和(CRR’)_p；且Q为CH、CR或N。

16.权利要求8的化合物，其中G和J独立选自(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p和(CRR’)_p，且部分A-E-L-M-Q为由2-8个碳原子、0-6个杂原子组成的芳族环，其中X和J彼此相互为邻位、对位或间位。

17.权利要求16的化合物，其中：是

其中R¹⁴选自H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、烷基-芳基、烷基-杂芳基、芳基-烷基和杂芳烷基。

18.权利要求1的化合物，其中R³选自：

其中R³⁰＝H、CH₃或其它烷基；R³¹＝OH、O-烷基、NH₂、N-烷基；及R³²和R³³可以相同或者不同并且独立选自H、F、Cl、Br和CH₃。

19.权利要求8的化合物，其中R³选自：

其中R³⁰＝H、CH₃或其它烷基；R³¹＝OH、O-烷基、NH₂、N-烷基；及R³²和R³³可以相同或者不同并且独立选自H、F、Cl、Br和CH₃，和部分：

选自以下结构 a、 b、 c、 d、 e和 f之一：

其中M可存在或不存在，并且如果M不存在，则Q连接于E；其中G和J独立选自(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p和(CRR’)_p，A和M独立选自O、S、SO₂、NR、(CH₂)_p、(CHR)_p、(CHR-CHR’)_p或(CRR’)_p，Q为CH、CR或N；和

20.一种权利要求19的化合物，其中Z＝N和R⁴＝H。

21.一种权利要求20的化合物，其中W为C＝O。

22.一种权利要求21的化合物，其中部分X-Y选自C1-C6烷基、O-烷基、NR-烷基。

23.一种权利要求21的化合物，其中：

其中如果Q存在，则R^b直接连接于Q，或者如果Q不存在则直接连接于A；R^c连接于W；U¹至U⁶可为6元碳环，或者含有一个或更多个杂原子的五元或六元环的一部分；R^a＝H、烷基、烷氧基、羟基、硫代基、卤素、硝基、氰基、羧酸、酯、酰胺、氨基、腈或CF₃；R^b为键、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、O、S、SO₂、NH、O(烷基)、S(烷基)、SO₂(烷基)或N(烷基)；和R^c为键、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、O、S、SO₂、NH、O(烷基)、S(烷基)、SO₂(烷基)、N(烷基)或CH₂-N(烷基)，其中CH₂连接于芳族环。

24.一种权利要求21的化合物，其中所述部分X-Y选自以下结构：

25.一种药用组合物，它包含作为活性成分的权利要求1的化合物。

26.用于治疗与HCV相关的疾病的权利要求25的药用组合物。

27.权利要求25的药用组合物，它还包含药学上可接受的载体。

28.一种治疗与HCV蛋白酶相关的疾病的方法，所述方法包括给予需要这样治疗的患者包含治疗有效量的权利要求1的化合物的药用组合物。

29.权利要求1的化合物在制备治疗与HCV蛋白酶相关的疾病的药物中的用途。

30.一种制备用于治疗与HCV蛋白酶相关的疾病的药用组合物的方法，所述方法包括使权利要求1的化合物与药学上可接受的载体紧密接触。

31.一种显示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，包括所述化合物的对映体、立体异构体和互变异构体、所述化合物的药学上可接受的盐或溶剂合物，所述化合物选自以下列出的结构的化合物：