CN1270589A

CN1270589A - 环氧噻酮衍生物

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Publication number: CN1270589A
Application number: CN98806906A
Authority: CN
Inventors: G·D·维特; R·M·波尔兹勒里; S·H·金; J·A·约翰森
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1997-07-08
Filing date: 1998-06-16
Publication date: 2000-10-18
Anticipated expiration: 2018-06-16
Also published as: USRE41893E1; ES2251088T3; CN100384834C; AU7972098A; IL133613A; US20070255055A1; JP2002512634A; PL197404B1; NZ501198A; BRPI9810555A8; US20130331564A1; GEP20032897B; AR013358A1; ATE426598T1; EE04566B1; CZ200058A3; US6605599B1; TW562802B; NO322494B1; EP1019389A2

Abstract

本发明涉及式(Ⅰ)化合物及其药学上可接受的盐和任何水合物,溶剂化物或几何、光学和立体异构体,Q选自式(Ⅱ)基团,G选自烷基,取代烷基,取代或未取代的芳基,杂环基,式(Ⅲ)基团,W为O或NR₁₅;X为O或H,H;Y选自O;H,OR₁₆;OR₁₇,OR₁₇;NOR₁₈;H,NOR₁₉;H,NR₂₀R₂₁;H,H;或CHR₂₂;OR₁₇OR₁₇可以为环缩酮;Z₁和Z₂选自CH₂O,NR₂₃,S或SO₂,其中Z₁和Z₂中仅有一个可为杂原子;B₁和B₂选自OR₂₄,或OCOR₂₅,或O₂CNR₂₆R₂₇;当B₁为H而Y为OH,H时,它们可形成六元环缩酮或缩醛;D选自NR₂₈R₂₉,NR₃₀R₃₁或饱和杂环;R₁,R₂,R₃,R₄,R₅R₆,R₇,R₈R₁₄,R₁₈,R₁₉,R₂₀,R₂₁,R₂₂,R₂₆和R₂₇选自H,烷基,取代烷基,或芳基,并且当R₁和R₂为烷基时,可合起来形成环烷基;当R₃和R₄为烷基时,也可合起来形成环烷基;R₉,R₁₀,R₁₆,R₁₇,R₂₄,R₂₅,和R₃₁选自H,烷基,或取代烷基;R₈,R₁₁,R₁₂,R₂₈,R₃₀,R₃₂,R₃₃,和R₃₀选自H,烷基,取代烷基,芳基,取代芳基,环烷基,或杂环基;R₁₅,R₂₃和R₂₉选自H,烷基,取代烷基,芳基,取代芳基,环烷基,杂环基,R₃₂C=O,R₃₃SO₂,羟基,O－烷基或O－取代烷基。条件是不包括其中:W和X都为0;R₁,R₂,R₇为H;R₃,R₄,R₆为甲基;R₈为H或甲基;Z₁和Z₂为CH₂;以及G为1－甲基－2－(取代的－4－噻唑基)乙烯基;Q定义如上的上述化合物。

Description

环氧噻酮衍生物

发明领域

本发明涉及环氧噻酮(Epothilone)衍生物，该衍生物制备方法及其中间体。

发明背景

环氧噻酮(Epothilone)衍生物为可用于制药领域的大环内酯化合物。例如，环氧噻酮(Epothilone)A和B结构如下：I环氧噻酮A R＝HII环氧噻酮B R＝Me目前已发现它具有与紫杉醇相似的微管-稳定作用，因此对迅速增生的细胞，如，肿瘤细胞或其他过度增生细胞疾病具有细胞毒性，参见Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(应用化学，国际英文版)，

1996，35，No.13/14。

发明概述

本发明涉及下式化合物及其任何盐，溶剂化物或水合物

Q选自

G选自烷基，取代烷基，取代或未取代的芳基，杂环基，

W为O或NR₁₅；

X为O或H，H；

Y选自O；H，OR₁₆；OR₁₇，OR₁₇；NOR₁₈；H，NOR₁₉；H，NR₂₀R₂₁；H，H；或CHR₂₂；

OR₁₇OR₁₇可以为环缩酮；

Z₁和Z₂选自CH₂，O，NR₂₃，S，或SO₂，其中Z₁和Z₂中仅有一个可为杂原子；

B₁和B₂选自OR₂₄，或OCOR₂₅，或O₂CNR₂₆R₂₇；当B₁为H而Y为CH，H时，它们可形成六元环缩酮或缩醛；

D选自NR₂₈R₂₉，NR₃₀COR₃₁或饱和杂环；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₁₃，R₁₄，R₁₈，R₁₉，R₂₀，R₂₁，R₂₂，R₂₆和R₂₇选自H，烷基，取代烷基或芳基，并且当R₁和R₂为烷基时，可参与形成环烷基；当R₃和R₄为烷基时，也可参与形成环烷基；

R₉，R₁₀，R₁₆，R₁₇，R₂₄，R₂₅和R₃₁选自H，烷基，或取代烷基；

R₈，R₁₁，R₁₂，R₂₈，R₃₀，R₃₂，R₃₃和R₃₀选自H，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，环烷基，或杂环基；

R₁₅，R₂₃和R₂₉选自H，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，环烷基，杂环基，R₃₂C＝O，R₃₃SO₂，羟基，O-烷基或O-取代烷基。

附带条件

本发明不包括其中

W和X都为O；以及

R₁，R₂，R₇为H；以及

R₃，R₄，R₆为甲基；以及

R₈为H或甲基；以及

Z₁和Z₂为CH₂；以及

G为1-甲基-2-(取代的-4-噻唑基)乙烯基；

Q定义如上的式(V)化合物。

发明详述

下列各种术语的定义用于描述本发明。除非另外特别限定，下列术语的定义用于本申请的全文，无论是对于单独的基团，还是对于大基团的某一部分。

术语“烷基”指具有1到20个碳原子，优选1到7个碳原子的直链或支链未取代烃基。词语“低级烷基”指具有1到4个碳原子的未取代烷基。

术语“取代的烷基”指被，例如，一到四个取代基，如卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，羟基，烷氧基，环烷氧基，杂环基氧基，氧代基，烷酰基，芳氧基，烷酰氧基，氨基，烷氨基，芳氨基，芳烷基氨基，环烷基氨基，杂环基氨基，二取代的氨基，其中2个氨基取代基选自烷基、芳基、或芳烷基，烷酰基氨基，芳酰基氨基，芳烷酰基氨基，取代烷酰基氨基，取代的芳酰基氨基，取代的芳烷酰基氨基，巯基，烷硫基，芳硫基，芳烷硫基，环烷硫基，杂环硫基，烷基硫羰基，芳基硫羰基，芳烷基硫羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，芳烷基磺酰基，磺酰胺基(例如，SO₂NH₂)，取代的磺酰胺基，硝基，氰基，羧基，氨基甲酰基(例如，CONH₂)，取代的氨基甲酰基(例如，CONH烷基，CONH芳基，CONH芳烷基，或氮上有两个选自烷基，芳基或芳烷基的取代基)，烷氧羰基，芳基，取代的芳基，胍基和杂环基，如吲哚基，咪唑基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，吡咯烷基，吡啶基，嘧啶基等取代的烷基。需要注意的是，上述取代基可进一步被卤素，烷基，烷氧基，芳基或芳烷基取代。

术语“卤素”或“卤”指氟，氯，溴和碘。

术语“芳基”指环上具有6到12个碳原子的单环或双环芳香烃基，如苯基，萘基，联苯基和二苯基，各可被取代。

术语“芳烷基”指芳基直接与烷基键合，如苄基。

术语“取代的芳基”指被，例如，一到四个取代基，如烷基，取代的烷基，卤素，三氟甲氧基，三氟甲基，羟基，烷氧基，环烷氧基，杂环基氧基，烷酰基，烷酰氧基，氨基，烷氨基，芳烷基氨基，环烷基氨基，杂环基氨基，二烷基氨基，烷酰基氨基，巯基，烷硫基，环烷硫基，杂环硫基，脲基，硝基，氰基，羧基，羧基烷基，氨基甲酰基，烷氧羰基，烷基硫羰基，芳基硫羰基，烷基磺酰基，磺酰胺基，芳氧基等取代的芳基。上述取代基可进一步被卤素，羟基，烷基，烷氧基，芳基，取代的芳基，取代的烷基或芳烷基取代。

术语“环烷基”指可任意被取代的、饱和的环烃环系统，它优选含有1到3个环，每个环具有3到7个碳原子，它可进一步与不饱和的C₃-C₇碳环稠合。该基团的例子包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基，环癸基，环十二烷基和金刚烷基。取代基的例子包括一个或多个上述烷基，或一个或多个上述烷基取代基。

术语“杂环”，“杂环的”和“杂环基”指可任意被取代的，完全饱和的或不饱和的芳香或非芳香环基，它为，例如，4到7元单环，7到11元双环，或10到15元三环系统，它至少在一个含碳原子的环中具有至少一个杂原子。在每个含杂原子的杂环基环中可以有1，2或3个选自氮，氧和硫的杂原子，其中氮和硫杂原子也可任意被氧化，而氮原子也可任意被季铵化。杂环基可在任何杂原子或碳原子上连接。

单环杂环基的例子包括吡咯烷基，吡咯基，吲哚基，吡唑基，氧杂环丁基，吡唑啉基，咪唑基，咪唑啉基，咪唑烷基，噁唑基，噁唑烷基，异噁唑啉基，异噁唑基，噻唑基，噻二唑基，噻唑烷基，异噻唑基，异噻唑烷基，呋喃基，四氢呋喃基，噻吩基，噁二唑基，哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，2-氧杂氮杂基，氮杂基，4-哌啶酮基，吡啶基，N-氧代吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，四氢吡喃基，四氢噻喃基，四氢噻喃基砜，吗啉基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜，1，3-二氧杂环戊基和四氢-1，1-二氧代噻吩基，二氧杂环己基，异噻唑烷基，硫杂环丁基，硫杂环丙基，三嗪基，三唑基，等。

双环杂环基的例子包括苯并噻唑基，苯并噁唑基，苯并噻吩基，奎宁环基，喹啉基，喹啉基-N-氧化物，四氢异喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯并吡喃基，中氮茚基，苯并呋喃基，色酮基，香豆素基，1，2-二氮杂萘基，喹喔啉基，吲唑基，吡咯并吡啶基，呋喃并吡啶基(如呋喃并[2，3-c]吡啶基，呋喃并[3，1-b]吡啶基，或呋喃并[2，3-b]吡啶基)，二氢异吲哚基，二氢喹唑啉基(如3，4-二氢-4-氧代喹唑啉基)，苯并异噻唑基，苯并异噁唑基，苯并二嗪基，苯并呋咱基，苯并噻喃基，苯并三唑基，苯并吡唑基，二氢苯并呋喃基，二氢苯并噻吩基，二氢苯并噻喃基，二氢苯并噻喃基砜，二氢苯并吡喃基，二氢吲哚基，异色酮基，异二氢吲哚基，1，5-二氮杂萘基，2，3-二氮杂萘基，胡椒基，嘌呤基，吡啶并吡啶基，喹唑啉基，四氢喹啉基，噻吩并呋喃基，噻吩并吡啶基，噻吩并噻吩基，等。

取代基的例子包括一个或多个如上所述的烷基或一个或多个如上所述的烷基取代基。也包括较小的杂环，如，环氧化物和1-氮杂环丙烷。

术语“杂原子”包括氧，硫和氮。

式(V)化合物可与碱金属如钠，钾和锂，与碱土金属如钙和镁，与有机碱如二环己基胺、三丁基胺、吡啶，和氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成盐。如果式(V)化合物含有羧基，则用所需的离子交换羧酸质子可得到上述盐，此反应可在盐于其中沉淀的介质中进行，或在水介质中进行随后蒸发。使用本领域技术人员已知技术可制备其他盐。

式(V)化合物可与各种有机酸和无机酸形成盐。这样的盐包括与盐酸，氢溴酸，甲磺酸，羟基乙磺酸，硫酸，乙酸，三氟乙酸，马来酸，苯磺酸，甲苯磺酸形成的盐和其他盐(例如，硝酸盐，磷酸盐，硼酸盐，酒石酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐，苯甲酸盐，抗坏血酸盐，水杨酸盐等)。通过在盐可在其中沉淀的介质中或在可蒸发的含水介质中使式(V)化合物与一当量的酸反应，可得到上述盐。

另外，可形成两性离子(“内盐”)。

式(V)化合物也可具有前药形式。任何能在体内转化成生物活性试剂(即，式(V)化合物)的化合物都是本发明范围内并符合本发明精神的前药。

例如，式(V)化合物可形成羧酸酯。通过将所公开的环结构上发现的羧酸官能基酯化，可方便地得到羧酸酯。

各种形式的前药都是本领域已知的。这样的前药衍生物的例子可参见：

a)Design of Prodrugs(前药设计)，H.Bundgaard，(Elsevier，1985)编，和Methods in Enzymology(酶学方法)，Vol.42，p.309-396，K.Widder等编(Acamedic Press，1985)；

b)A Textbook of Drug Design and Development(药物设计与开发教程)，Krosgaard-Larsen和H.Bundgaard编，p.113-191(1991)；

c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews(先进药物释放评论)，8，1-38(1992)；

d)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences(药物科学杂志)，77，285(1988)；和

e)N.Kakeya等，Chem Phar Bull(化学与药学通报)，32，692(1984)。

显然，式(V)化合物的溶剂化物(例如水合物)也包括在本发明范围内。溶剂化方法通常为已知技术。

使用和效用

式(V)化合物为微管稳定剂。因此，可使用它们治疗多种癌症或其他异常增生疾病，包括(但不限于)下列：

- 癌，包括膀胱，乳腺，结肠，肾，肝，肺，卵巢，胰，胃，子宫颈，甲状腺和皮肤癌；包括鳞状细胞癌；

- 淋巴细胞谱系造血肿瘤，包括白血病，急性淋巴细胞性白血病，急性成淋巴细胞性白血病，B-细胞淋巴组织瘤，T-细胞淋巴组织瘤，Hodgkins淋巴组织瘤，非-Hodgkins淋巴组织瘤，毛状细胞淋巴组织瘤和Burketts淋巴组织瘤；

- 髓细胞谱系造血肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病和前髓细胞性白血病；

- 间质产生的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；

- 其他肿瘤，包括黑素瘤，精原细胞瘤，tetratocarcinoma，成神经细胞瘤和神经胶质瘤；

- 中枢和外周神经系统肿瘤，包括星型细胞瘤，成神经细胞瘤，神经胶质瘤和神经鞘瘤；

- 间质产生的肿瘤，包括纤维肉瘤，横纹肌肉瘤和骨肉瘤；以及

- 其他肿瘤，包括黑素瘤，xenoderma pigmentosum，角化棘皮瘤，精原细胞瘤，甲状腺滤泡癌和tetratocarcinoma。

式(V)化合物也可抑制肿瘤血管生成，因此可影响异常细胞增生。式(V)化合物抗血管生成性质也可用于治疗与视网膜血管化有关的各种形式的失明，关节炎，特别是炎性关节炎，多发性硬化，再狭窄和牛皮癣。

式(V)化合物可引发或抑制编程性细胞死亡，这是一种对正常发育和体内平衡很重要的生理细胞死亡过程。编程性细胞死亡的途径的变化与人类多种疾病的发病机理很有关系。作为编程性细胞死亡的调节剂，式(V)化合物可用于治疗伴有编程性细胞死亡畸变的各种人类疾病，其中包括癌症(特别是，但不限于滤泡性淋巴瘤，与p53基因突变有关的癌，与激素有关的乳腺、前列腺和卵巢肿瘤，以及癌前期损伤如家族腺瘤息肉病)，病毒感染(包括但不限于疱疹病毒，痘病毒，Epstein-Barr病毒，Sindbis病毒和腺病毒)，自体免疫疾病(包括但不限于系统性红斑狼疮，免疫介导的肾小球性肾炎，类风湿性关节炎，牛皮癣，肠炎和自体免疫糖尿病)，神经变性疾病(包括但不限于Alzheimer氏病，与艾滋病有关的痴呆，Parkinson氏病，肌萎缩外侧硬化，视网膜炎色素沉着，脊柱肌肉萎缩和小脑退化)，艾滋病，脊髓发育不良综合症，再生障隘性贫血，与心肌梗塞形成有关的局部缺血性损伤，中风和再灌注损伤，心律失常，动脉粥样硬化，毒素诱导的或酒精诱导的肝病，血液病(包括但不限于慢性贫血和再生障碍性贫血)，阿司匹林-敏感的鼻窦炎，囊肿性纤维化，多发性硬化，肾病，和癌痛。

本发明的该化合物也可与已知的抗癌和细胞毒性药物及治疗，包括放射疗法结合使用。如果配制固定剂量的制剂，该结合产物使用下文所述的剂量范围的本发明化合物和允许剂量范围内的其他药学活性试剂。当结合制剂不合适时，式(V)化合物可与已知的抗癌和细胞毒性药物及治疗顺序使用。特别有用的是细胞毒素药物结合制剂，其中，式(V)化合物在G₂-M阶段产生作用，而第二种药物在细胞循环的不同阶段，例如S阶段，产生作用。

例如胸苷酸酯合酶抑制剂

DNA交联剂

拓扑异构酶I和II抑制剂

DNA烷基化剂

核苷还原酶抑制剂

细胞毒性因子，例如TNF-alpha，或

生长因子抑制剂，例如HER 2受体MAB

本发明化合物可以大量光学、几何和立体异构体形式存在。所有这些异构体及其混合物都包括在本发明的范围内。

本发明化合物可与药学上可接受的载体或稀释剂配制成用于口服，静脉给药或皮下给药的制剂。可按标准方法，使用适于所需的给药方式的固体或液体载体，稀释剂和添加剂，配制药物组合物。对于口服制剂，本发明化合物可以片剂、胶囊、颗粒、粉末等形式给药。本发明化合物的剂量范围为约0.05到200mg/kg/天，优选低于100mg/kg/天，可以单剂量形式或2到4分剂量形式给药。

优选化合物

特别优选的式(V)化合物中

X为O

Y为O

Z₁和Z₂为CH₂，以及

W为NR₁₅。

制备方法

式(V)化合物可按下列流程制备。

流程1

其中R₃，R₄，R₅，R₆，R₈和R₁₅定义如上，P₁为氧保护基。

其中W为NR₁₅及X为O的式(V)化合物可按流程1所述制备。其中P₁为氧保护基如叔丁基二甲基甲硅烷基的式XII化合物可按已知方法(即，Nicolaou，K.C.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(应用化学，国际英文版)，(1997)36，166-168)由式VI化合物制备。式XII化合物和式XIV化合物的醛醇缩合反应可得到式XIII化合物。式XIV化合物可按已知方法(即，Schinzer，D等，Eur.Chem.Chron.(欧洲化学记事)，(1996)1，7-10)制备。式XVIII醛可按流程1所示或通过使用已知方法(即，Taylor，R.E.等，Tetrahedron lett.(四面体快报)，(1997)，38，2061-2064)由式XV化合物制备。通过使用脱水条件如催化量的对甲苯磺酸及共沸除去水，可用胺处理化合物XVIII制备式XIX化合物。通过用烯丙化试剂如烯丙基溴化镁处理式XIX化合物可制备式XX化合物。通过使用标准的酰胺键偶合试剂(即，DCC，BOP，EDC/HOBT，PyBrOP)，可由式XIII和XX化合物制备式XXI化合物。通过使用Grubbs(RuCl₂(＝CHPh)(PCY₃)₂；见Grubbs，R.H.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(应用化学，国际英文版)，(1995)34，2039)或Schrock催化剂(见Schrock，R.R等，J.Am.Chem.Soc.(美国化学会志)，(1990)112，3875)，进行闭环复分解反应，可由式XXI化合物制备式XXII化合物。例如，当P₁为叔丁基二甲基甲硅烷基时，在乙腈中使用氟化氢或在THF中使用四正丁基氟化铵，使式XXI化合物脱保护，可得到其中Q为亚乙基，W为NR₁₅，X为O，而R₃、R₄、R₅、R₆定义如上的式V化合物。使用二甲基二环氧乙烷使其中Q为亚乙基的式V化合物进行区域选择性环氧化，可得到其中Q为环氧乙烷基，W为NR₁₅，X为O，而R₃、R₄、R₅、R₁₅定义如上的式V化合物。

流程2

另一种方法是，如流程2所示，通过式XXIII化合物与镁和酰氯(R₅CH₂COCl)反应，得到式XXIV化合物(例如，见Heathcock，C.；et al.，J.Org.Chem.(有机化学杂志)，1990，55，1114-1117)，接着臭氧分解，得到式VIII化合物。

流程3

另一种方法是，按流程3所示可制备式XIV化合物。式XXV化合物和假麻黄碱反应得到式XXVI化合物。通过按Meyers的方法(即，Meyers，A.等，J.Am.Chem.Soc.(美国化学会志)，1994，116，9361-9362)，用戊烯基卤化物如5-溴戊烯使式XXVI化合物烷基化可制备式XXVII化合物。使用还原剂如吡咯烷基硼氢化锂可由式XXVII化合物制备式XXVIII化合物。使用，例如，氯铬酸吡啶鎓，氧化式XXVIII化合物可得到式XIV化合物。使用还原剂如三乙氧基氢化铝锂，可将式XXVII化合物直接转化为式XIV化合物。

流程4

另一种作法是，按流程4可由烯丙基甘氨酸制备式XX化合物。按本领域已知方法将烯丙基甘氨酸N-保护可得到式XXIX化合物，其中P₂为适于N-保护的基团如叔丁氧羰基。任选地，当R₂₉不为氢时，通过在碱如氢化钠的存在下用卤代烷使式XXIX化合物烷基化，可制备式XXX化合物。使用N，O-二甲基羟胺和标准的偶合试剂如EDCI和HOBT，可由式XXX化合物制备式XXXI化合物。用有机金属试剂如烷基或芳基卤化镁处理，可由异羟肟酸酯XXXI制备式XXXII化合物。式XXXII化合物的Wittig烯化作用可得到式XXXIII化合物(Wittig试剂可按Danishefsky，S.E.等，I.Org.Chem.(有机化学杂志)，1996，61，7998-7999所述制备)。按本领域已知方法使式XXXIII化合物N-脱保护可得到式XX化合物。

流程5

按流程5所示可制备其中W为NR₁₅，X为氧，而G为1，2-二取代的链烯的式V化合物。通过式XXXII化合物的Wittig烯化作用可得到式XXXV化合物。按本领域已知方法可制备式XXXIV化合物。按本领域已知方法使式XXXV化合物N-脱保护可制备式XXXVI化合物。使用标准的偶合试剂如EDCI和HOBT，使式XXXVI化合物和XIII化合物偶合，可制备式XXXVII化合物。按流程1中制备式XXII化合物的方法，可由式XXXVII化合物制备式XXXVIII化合物。按流程1所述方法(步骤o和p)，可将式XXXVIII化合物转化成其中W为NR₁₅，X为氧，和G为1，2-二取代的链烯的式V化合物。

流程6

按流程6所示可制备其中W和X为氧，G为1，2-二取代的链烯的式V化合物。通过用烯丙基化试剂如烯丙基溴化镁处理式XXXIX化合物可制备式XXXX化合物。使用手性试剂可制备对映纯的式XXXX化合物(参见，例如：Talor，R.E.等，Tetrahedron Lett.(四面体快报)，1997，38，2061-2064；Nicolaou，K.C.等，Angew.Chem. Int.Ed.Engl.(应用化学，国际英文版)，1997，36，166-168；Keck，G.等，J.Am.Chem.Soc.(美国化学会志)，1993，115，8467)。通过使用标准的酯化剂如DCC和DMAP，可由式XXXX和XIII化合物制备式XXXXI化合物。按流程1中所述的制备式XXII化合物的方法，进行链烯闭环复分解反应，可由式XXXXI制备式XXXXII化合物。通过脱保护(当Q为亚乙基)以及，如果需要，按上述环氧化(当Q为环氧乙烷基)，可由式XXXXII化合物制备其中W和X为氧，而G为1，2-二取代的链烯的式V化合物。

流程7

按流程7所示可制备其中W和X为氧，而G为烷基、取代烷基、芳基、杂芳基、二环芳基或二环杂芳基的式V化合物。通过与烯丙基化试剂如烯丙基溴化镁反应，使其中G为烷基、取代烷基、芳基、杂芳基、二环芳基或二环杂芳基的式XXXXIII化合物烯丙基化，可制备式XXXXIV化合物。通过使用例如DCC和DMAP，使式XIII化合物与式XXXXIV化合物酯化，可制备式XXXXV化合物。通过上述闭环复分解，可由式XXXXV化合物制备式XXXXVI化合物。按流程1所述的方法，通过脱保护和随后的环氧化，可将式XXXXVI化合物转化成式V化合物。

流程8

按流程8所示可制备其中W为NR₁₅，X为氧，而G为烷基、取代烷基、芳基、杂芳基、二环芳基、或二环杂芳基的式V化合物。通过其中G为烷基、取代烷基、芳基、杂芳基、二环芳基或二环杂芳基的式XXXXIII化合物与胺在脱水条件下反应，可制备式XXXXVII化合物。通过用烯丙基化试剂如烯丙基溴化镁处理，可由式XXXXVII化合物制备式XXXXVIII化合物。通过使用标准的酰胺偶合剂，例如，EDCI和HOBT，可由式XXXXVIII化合物和式XIII化合物制备式XXXXIX化合物。通过上述闭环复分解，可由式XXXXIX化合物制备式L化合物。按流程1所述的方法，通过脱保护和随后的环氧化，可将式L化合物转化成式V化合物。

流程9

按流程9所示可制备其中W为NR₁₅，X为氧，G为

而D选自NR₂₈R₂₉，NR₃₀COR₃₁，以及标准的杂环(即，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，等)的式V化合物。通过使用伯胺和仲胺和还原剂如三乙酰氧基硼氢化钠使式XXXII化合物还原氨化，可制备式LI化合物。然后按流程1所述的方法，可制备式LIII，LIV，和V化合物。

流程10

另一种作法是，按流程10所示可由式V化合物制备其中X为氧，W为氧或NR₁₅或氧，G为而D选自NR₂₈R₂₉，NR₃₀COR₃₁，以及标准的杂环(即，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，等)的式V化合物。通过用合适的保护基如叔丁基二甲基甲硅烷基保护羟基，可将式V化合物转化成式LV化合物。通过臭氧分解可由式LV化合物制备式LVI化合物。用胺和还原剂如三乙酰氧基硼氢化钠处理式LVI化合物得到式LVII化合物。用例如，氟化氢除去式LVII化合物的保护基，得到其中X为氧，W为NR₁₅或为氧，G为的式V化合物。

流程11

按流程11所示可制备其中W为NR₁₅，X为氧，G为的式V化合物。通过用胺和标准的酰胺键偶合试剂如EDCI和HOBT处理，可由式XXX化合物制备式LVIII化合物。当P₂为叔丁氧羰基时，使用例如三氟乙酸进行N-脱保护，随后使用标准的酰胺键偶合试剂如EDCI和HOBT使式LIX和XIII化合物偶合，可由式LVIII化合物制备式LX化合物。通过闭环复分解可由式LX化合物制备LXI化合物。按流程1所述的方法，可由式LXI化合物制备式V化合物。

流程12

按流程12所示可制备其中W为氧，X为氧，G为

的式V化合物。通过用硝酸处理烯丙基甘氨酸可制备式LXII化合物。通过用胺和标准的酰胺键偶合试剂如EDCI和HOBT处理，可由式LXII化合物制备式LXIII化合物。使用标准的酰胺键偶合试剂如EDCI和HOBT可由式LXIII和XIII化合物制备式LXIV化合物。通过闭环复分解可由式LXIV化合物制备LXV化合物。按流程1所述的方法，可由式LXV化合物制备式V化合物。

流程13

按流程13所示，通过用催化剂如钯/碳氢化其中G为1，2-二取代的亚乙基的式V化合物可制备其中G为1，2-二取代的乙基的式V化合物。另外，按流程4所述，通过使用二碘甲烷和锌-铜偶合剂环丙烷化，可由其中G为1，2-二取代的亚乙基的式V化合物制备其中G为1，2-二取代的乙基的式V化合物。

流程14

按流程14所示，可制备其中Z₁为氧的式V化合物。由α-羟基酯LXVI与3-丁烯-1-基-三氟甲磺酸酯(或与3-丁烯基溴化物和三氟甲磺酸银silver triflate)反应可制备式LXVII化合物。可用还原剂如二异丁基氢化铝还原式LXVII化合物，得到式LXVIII化合物。或者是，通过包括用硼氢化锂还原和用氯铬酸吡啶鎓氧化的两步反应，可由式LXVII化合物得到式LXVIII化合物。式LXVIII化合物可取代流程1中的式XIV化合物，得到式LXIX化合物。按上述使LXIX进一步反应，得到其中Z1为氧的式V化合物。

流程15

相似地，按流程15所示，可制备其中Z₁为NR₂₃的式V化合物。由α-氨基酯LXX与3-丁烯-1-基溴化物反应可制备式LXXI化合物。可用还原剂如二异丁基氢化铝还原式LXXI化合物，得到式LXXII化合物。或者是，通过包括用硼氢化锂还原和用氯铬酸吡啶鎓氧化的两步反应，可由式LXXI化合物得到式LXXII化合物。式LXXII化合物可代替流程1中的式XIV化合物，得到式LXXIII化合物。按上述使LXXIII进一步反应，得到其中Z₁为NR₂₃的式V化合物。

流程16

按流程16所示，可制备其中Z₂为氧的式V化合物。由β-羟基酯LXXIV与烯丙基化试剂如烯丙基溴化物(或与烯丙基溴化物和三氟甲磺酸银silver triflate)可制备式LXXV化合物。可用还原剂如二异丁基氢化铝还原式LXXV化合物，得到式LXXVI化合物。或者是，通过包括用硼氢化锂还原和用氯铬酸吡啶鎓氧化的两步反应，可由式LXXV化合物得到式LXXVI化合物。式LXXVI化合物可代替流程1中的式XIV化合物，得到式LXXVII化合物。按上述使LXXVII进一步反应，得到其中Z2为氧的式V化合物。

流程17

相似地，按流程17所示，可制备其中Z₂为NR₂₃的式V化合物。由β-氨基酯LXXVIII与烯丙基化试剂如烯丙基溴化物可制备式LXXIX化合物。可用还原剂如二异丁基氢化铝还原式LXXIX化合物，得到式LXXX化合物。或者是，通过包括用硼氢化锂还原和用氯铬酸吡啶鎓氧化的两步反应，可由式LXXIX化合物得到式LXXX化合物。式LXXX化合物可代替流程1中的式XIV化合物，得到式LXXXI化合物。按上述使LXXXI进一步反应，得到其中Z₂为NR₂₃的式V化合物。

流程18

按流程18所示可制备其中W为氧或NR₁₅而Y为H，H的式V化合物。通过用试剂如叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯处理可将式V化合物转化成其中P₄和P₅为羟基保护基的式LXXXII化合物。用Lawesson’s试剂处理式LXXXII化合物可制备式LXXXIII化合物。当W为氧时用还原剂如三正丁基氢化锡还原，或当W为NR₁₅时用碘甲烷和硼氢化钠处理，可由式LXXXIII化合物制备式LXXXIV化合物。当P₄和P₅为甲硅烷基时，用例如氟化氢除去式LXXXIV化合物的保护基，得到其中W为氧或NR₁₅而Y为H，H的式V化合物。

流程19

按流程19所示可制备其中W和Y为氧，而R₁为烷基或取代烷基的式V化合物。通过用试剂如叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯处理，保护式V化合物，可得到其中P₅和P₆为羟基保护基的式LXXXV化合物。通过用还原剂如硼氢化钠处理，可由式LXXXV化合物制备式LXXXVI化合物。通过使用对甲氧苄基三氯乙酰亚氨酸酯保护羟基，可由式LXXXVI化合物制备其中P₇为对甲氧基苄基的式LXXXVII化合物。当P₅和P₆为叔丁基二甲基甲硅烷基时，在吡啶中使用例如氟化氢除去式LXXXVII化合物的保护基P₅和P₆，可得到式LXXXVIII化合物，然后使用例如叔丁基二甲基氯硅烷选择性地保护，可得到其中P₈为叔丁基二甲基甲硅烷基的式LXXXIX化合物。通过用碱如二异丙基氨化锂处理，接着用烷基化试剂如碘甲烷处理，可由式LXXXIX化合物制备式C化合物。通过用试剂如叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯处理，可将式C化合物保护，得到其中P₉为羟基保护基的式CI化合物。当P₇为对甲氧基苄基时，通过使用例如DDQ除去P₇基团可由式CI化合物制备式CII化合物。当P₈和P₉为甲硅烷基时，通过使用例如TPAP/NMO氧化，接着使用例如氟化氢除去保护基，可由式CII化合物制备其中W和Y为氧，而R₁为烷基或取代烷基的式V化合物。按流程1所述，可使用二甲基二环氧乙烷进一步氧化上述式V化合物，得到相应的式V环氧化合物。

流程20

按流程20所示，通过用活性金属茂如钛茂，锌茂或铌茂处理，可由其中X为氧而Q为环氧乙烷环的式V化合物制备其中X为氧而Q为链烯的式V化合物(参见，例如R.Schobert and U.Hohlein，Svnlett(合成快报)(1990)，465-466)。

流程21

按流程21所示，可由其中X和W都为氧的式V化合物制备其中X为氧而W为NR₁₅，其中R₁₅为氢的式V化合物。通过使用例如四(三苯膦)合钯形成烯丙基钯π配合物，接着用叠氮化钠处理，可由可由其中X和W都为氧的式V化合物制备式CIII化合物(参见，例如：Murahshi，S.-I.等J.Org.Chem.(有机化学杂志)1989，54，3292)。随后用还原剂如三苯膦还原式CIII化合物，得到式CIV化合物。通过使用二苯基磷酰基叠氮化物或溴代三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐(PyBroP)进行大环内酰胺化，可由式CIV化合物制备其中X为氧而W为NR₁₅其中R₁₅为氢的式V化合物。

流程22

按流程22所示，可由其中X和W都为氧的式V化合物制备其中X为氧而W为NR₁₅，其中R₁₅为烷基、取代的烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、O-烷基、O-取代烷基的式V化合物。通过使用例如四(三苯膦)合钯形成烯丙基钯π配合物，接着用伯胺处理，可由可由其中X和W都为氧的式V化合物制备式CV化合物。通过使用二苯基磷酰基叠氮化物或溴代三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐(PyBroP)进行大环内酰胺化，可由式V化合物制备其中X为氧而W为NR₁₅其中R₁₅为烷基、取代的烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、羟基、O-烷基、O-取代烷基的式V化合物。当R₁₅为OH时，可能需要从其中R₁₅为例如O-叔丁基二甲基甲硅烷基的中间体除去保护基如叔丁基二甲基甲硅烷基。

式(V)化合物生物活性的体外测定按下述进行：

微管蛋白体外聚合

按Williams和Lee的方法(参见Williams，R.C.，Jr.和Lee，J.C.Preparation of tubulin from brain.Methods in Enzymology(由大脑制备微管蛋白，酶学方法)85，Pt.D：376-385，1982)制备二次循环(2X)小牛大脑微管蛋白，在使用前储存在液氮中。按Swindell等的改进方法(参见Swindell，C.S.，Krauss，N.E.，Horwitz，S.B.和Ringel，I.Biologically active taxol analogues with deleted A-ring sidechain substituents and variable C-2’configurations.(带有缺失的A-环侧链取代基及可变的C-2’构型的生物活性紫杉醇类似物)J.Med.Chem.(医学化学杂志)34：1176-1184，1991)定量分析微管蛋白的聚合能力。这些改进，在某种程度上，可归纳为用给定化合物有效浓度表示微管蛋白聚合能力。在该方法中，在37°下，在Beckman(BeckmanInstrument)Model DU 7400 UV分光光度计的微量样品池中，将聚合缓冲液(0.1M MES，1mM EGTA，0.5mM MgCl₂，pH6.6)中的不同浓度的化合物加入到含微管蛋白的聚合缓冲液中。通常使用的最终微管蛋白浓度为1.0mg/ml，化合物浓度为2.5，5.0和10μM。在人工确定至少包括3个时间点的线性区域的最初和最终时间后，通过仪器所附的程序计算每10秒测定的OD变化的最初斜率。在这些条件下，线性差一般＜10^-6，斜率范围为0.03到0.002吸收度单位/分钟，最大吸收度为0.15吸收度单位。有效浓度(EC_0.01)的定义为能导致0.01 OD/分钟比率的最初斜率的插入浓度，使用下式计算：EC_0.01＝浓度/斜率。EC_0.01值用由3种不同的浓度得到的平均值及标准偏差值表示。本发明化合物的EC_0.01值的范围为0.01-1000μM。

细胞毒性(体外)

按T.L.Riss等的报道(“Comparison of MTT，XTT，and a noveltetrazolium compound MTS for in vitro proliferationchemosensitivity assays.，”(MTT、XTT和一种新型器唑鎓化合物MTS的体外增殖感化性分析比较)Mol.Biol.Cell(细胞的分子生物学)3(Suppl.)：184a，1992)通过MTS(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-亚磺酰)-2H-四唑，内盐)测定，评价在HCT-116人类结肠癌细胞内的细胞毒性。将细胞以4,000细胞/孔的量置于96孔微量滴定板中，24小时后，加入药物并按顺序稀释。将该细胞在37°培养72小时，此时加入与25μM(最终浓度)的电子偶合剂吩嗪硫酸甲酯结合的333μg/ml(最终浓度)的四唑染料MTS。活细胞中的脱氢酶将MTS还原成对492nM光有吸收的形式，它可通过分光光度计定量地测定。吸收度越大，活细胞数量越大。结果由IC₅₀表示，它为将细胞增殖(即，在450nM的吸收度)抑制到未处理细胞的50％时所需的药物浓度。本发明化合物的IC₅₀值的范围为0.01-1000nM。

下列实施例用于说明本发明。

实施例1

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(E)-环十六烯-2，6-二酮

A.N-[(2-甲基)-1-丙烯基]吗啉

搅拌下，将吗啉(165.5g，1.9mol)以不使反应温度超过30℃的速度加入异丁醛(173mL，1.9mol)。加完后，将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后在装有Dean-Stark分水器的烧瓶中，在160℃下加热20小时。然后将反应温度冷却至室温，在该烧瓶上装上vigreux蒸馏柱。真空蒸馏，得到135g(50％)透明无色油状化合物A。MS(M+H，142)。

B.2，2-二甲基-3-氧代戊醛

在0℃及搅拌下，在45分钟内，将丙酰氯(44mL，0.50mol)的乙醚(135mL)溶液于氮气下加入化合物A(69g，0.50mol)的乙醚(135mL)溶液。加完后，将反应混合物搅拌回流2小时，然后在室温下搅拌16小时。过滤反应混合物，用乙醚(50mL)洗涤滤饼。真空除去挥发性物质。将残留物转入水(80mL)中，将该溶液调节至pH4。加入乙醚(80mL)，将两相化合物搅拌16小时。将反应化合物倒入分液漏斗分层，用乙醚(5×100mL)萃取水层。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，真空蒸发。在高真空下蒸馏残留物，得到10.4g(16％)透明无色油状化合物B。MS(M-H，127)。

C.4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5，5-二甲基-6-氧代-1-辛烯

在0℃及氮气氛下，在1.5小时内，在(-)-B-甲氧基二异松莰烯基甲硼烷(25.7g，81mmol)的乙醚(80mL)溶液中加入1.0M烯丙基溴化镁的乙醚溶液(77mL，77mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时，真空浓缩。用戊烷(2×150mL)萃取残留物，在氮气氛下，用Celite过滤萃取液。将合并的萃取液真空蒸发，得到B-烯丙基二异松莰烯基甲硼烷。在氮气氛下，将该物质转入乙醚(200mL)中，冷却至-100℃。然后，在-78℃下，在1小时内，加入化合物B(11.42g，89mmol)的乙醚(90mL)溶液。将反应混合物再搅拌0.5小时，加入甲醇(1.5mL)。将反应混合物温热至室温，用3N NaOH(32mL)和30％H₂O₂(64mL)处理，然后回流2小时。将反应混合物冷却至室温，分层，用水(500mL)洗涤有机相。将合并的水相用乙醚(2×100mL)萃取。将合并的有机萃取液用饱和NaCl(100mL)水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩。将该残留物转入CH₂Cl₂(250mL)，冷却至0℃，加入二异丙基乙基胺(93mL，535mmol)。然后，在搅拌下，以不使温度超过10℃的速度，慢慢地加入叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(69g，260mmol)。加完后，将反应混合物倒入水(650mL)中，分层，用二氯甲烷(2×650mL)萃取水层。。将合并的有机层干燥(NaSO₄)，过滤，真空浓缩。通过快速层析纯化残留物，先用己烷洗脱，再用10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到17.2g(78％)透明无色油状化合物C。通过醇的Mosher酯的¹H NMR分析测定发现对映体过量94％。¹³CNMR(CDCl₃，80MHz)d 215.8，136.1，116.5，52.8，39.0，31.9，26.0，22.4，20.1，18.1，7.6，-3.6，-4.4.

D.3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-4，4-二甲基-5-氧代庚醛

在-78℃下，在化合物C(10.8g，38.0mmol)的二氯甲烷溶液中鼓入O₃，直到溶液保持蓝色(1小时)。然后鼓入O₂15分钟，接着鼓入N₂30分钟，最后溶液变得透明。然后，加入三苯膦(10g，38mmol)，将反应混合物温热至-35℃，放置16小时。真空除去挥发性物质，通过快速层析纯化，用8％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到8.9g(74％)透明无色油状化合物D。

¹H NMR(CDCl₃，300MHz)d 9.75(m，H)，4.53(t，J＝4.8Hz，1H)，3.40-

3.60(m，4H)，1.10(s，3H)，1.07(s，3H)，0.98(t，J＝7.0 Hz，3H)，0.83(s，9H)，

0.07(s，3H)，0.04(s，3H).

E.3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-4，4-二甲基-5-氧代庚酸

室温下，在化合物D(3.90g，13.6mmol)的叔丁醇(75mL)溶液中，加入2-甲基-2-丁烯(5.85mL，55.2mmol)，然后加入亚氯酸钠(4.61g，40.8mmol)和磷酸-钠(2.81g，20.4mmol)的水(15mL)溶液。将反应混合物搅拌0.5小时然后真空除去溶剂。在残留物中加水(150mL)，接着用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(Mg₂SO₄)，过滤，真空除去溶剂。通过快速层析纯化，用20％乙酸乙酯/己烷/1％乙酸洗脱，得到3.97g(92％)透明无色粘性油状化合物E。MS(M+H，303)。

F.(R，R)-N-(2-羟基-1-甲基-2-苯乙基)-N，2-(S)-二甲基-6-庚烯酰胺

-78℃下，10分钟内，滴加(R，R)-N-(2-羟基-1-甲基-2-苯乙基)-N-甲基丙酰胺(6.0g，27mmol，Meyers，A.G.等J.Am.Chem.Soc.(美国化学会志)1994，116，9361)的THF(30mL)溶液处理LiCl(6.9g，0.16mol)和另加THF(70mL)的预形成的二异丙基氨化锂(Aldrich，2.0M庚烷/乙苯/THF溶液，27.6mL，55mmol)的悬浮液。将亮黄色反应混合物在-78℃搅拌1小时，在0℃搅拌15分钟，在25℃搅拌5分钟，然后再冷却至0℃，用5-溴-1-戊烯(4.8mL，40mmol)的THF(5mL)溶液处理。将反应混合物在0℃搅拌24小时，倒入NH₄Cl饱和水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)中。分离两相，将水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将有机萃取液合并，用饱和氯化钠水溶液(200mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，真空浓缩。快速层析(SiO₂，4.0×25cm，2％MeOH-CHCl₃)，得到淡黄色油状化合物F(6.9g，88％)。MS(ESI⁺)：290(M+H)⁺；MS(ESI^-)：288.2(M-H)^-。

G.(S)-2-甲基-6-庚烯醇

在0℃下，在250mL圆底烧瓶中依次加入吡咯烷(2.6mL，30mmol)和BH₃-THF配合物(1.0M，THF中，31mL，30mmol)。将硼烷-吡咯烷配合物温热至25℃(1小时)，再冷却至0℃，在小心保持内部温度低于5.5℃的同时，在30分钟内滴加正丁基锂(1.6M，己烷中，19mL，30mmol)处理。将反应混合物在0℃再搅拌30分钟，然后，在10分钟内滴加化合物F(3.0g，10mmol)的THF(23mL)溶液。将反应混合物在25℃搅拌(6小时)，然后滴加3N HCl水溶液(25mL)猝灭。然后将反应混合物倒入1NHCl水溶液(200mL)，并用乙醚(4×80mL)萃取。将合并的有机相用1∶1的NaCl饱和水溶液-1N HCl水溶液(2×150mL)洗涤，真空浓缩。在残留物中加入NaOH水溶液(1N，200mL)，将该悬浮液搅拌30分钟。将该混合物乙醚(3×100mL)萃取，将合并的乙醚层用1∶1的NaCl饱和水溶液-1N NaOH水溶液(2×200mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，4.0×25cm，15-25％乙醚-戊烷梯度洗脱)，得到无色油状混合物G(1.26g，95％)。[a]²⁵ _D-11(c12，CH₂Cl₂)。

H.(S)-2-甲基-6-庚醛

用氯铬酸吡啶鎓(0.61g，2.8mmol)处理化合物G(0.24g，1.9mmol)的CH₂Cl₂(6mL)溶液，并在25℃将反应混合物搅拌5小时。使所得黑棕色粘稠浆状物通过硅胶-Celite柱(Celite 1.0×1cm，在SiO₂ 1.0×5cm上，用50mL二氯甲烷洗脱)。真空除去溶剂，得到无色油状粗品化合物H(0.15g，63％)，它的纯度可以满足随后的反应。¹H NMR(300MHz，CD₂Cl₂)d 9.62(s，1H)，5.88-5.68(m，1H)，5.13-4.92(m，2H)，2.37-2.24(m，1H)，2.15-2.05(m，2H)，1.62-1.78(m，1H)，1.51-1.32(m，3H)，1.07(d，3H，J＝7.0Hz).

I.(3S，6R，7S，8S)-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-4，4，6，8-四甲基-7-羟基-5-氧代-12-十三烯酸

在-78℃下，在3分钟内，在另加THF(25mL)的预形成的LDA溶液(Aldrich，2.0M庚烷/乙苯/THF溶液，3.8mL，7.6mmol)中滴加化合物E(1.0g，3.4mmol)的THF(5mL)溶液。将反应混合物在-78℃搅拌(10分钟)，温热至-40℃(20分钟)，再冷却至-78℃，然后加入在THF(5mL)中的化合物H(0.56g，4.4mmol)。将反应混合物温热至-40℃，搅拌1小时，用氯化铵饱和水溶液(50mL)稀释。分层，用乙酸乙酯(4×50mL)萃取水层。将合并的有机层用氯化钠饱和水溶液(100mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。快速层析(SiO₂，2.5×20cm，2-5％甲醇-氯仿梯度洗脱)，随后HPLC(YMC S-10，ODS，30×500mm柱，用甲醇以20毫升/分钟的流速洗脱)分离，得到所需的顺式缩醛产物化合物I(0.60g，43％)和不需要的非对映体(0.32g，22％)以及原料化合物E(～10％)。MS(ESI^*)：879.3(2M+Na)⁺，451.2(M+Na)⁺，429.2(M+H)⁺；MS(ESI^-)：427.3(M-H)^-.

通过将随后的酯衍生物(用于Epothilone C的合成)的¹³C和¹H NMR与K.C.Nicolaou等Angew.Chem.Int.Ed.Engl.(应用化学，国际英文版)，1997，36，166所述的相同的中间体直接比较，可证明其立体化学结构。

J.(S)-2-[N-[叔丁氧基)羰基]氨基]-4-戊烯酸

在0℃下，依次用碳酸氢钠(6.6g，78mmoL)和二叔丁基二碳酸酯(10.4g，1.8mmol)处理L-2-氨基-4-戊烯酸(NovaBiochem，3.0g，26mmol)的THF-H₂O(1∶1，200mL)溶液。将反应混合物温热至25℃，搅拌16小时。通过在0℃仔细加入柠檬酸饱和水溶液将该混合物的pH调节至4，用乙酸乙酯(4×50mL)萃取该混合物。将合并的有机层用氯化钠饱和水溶液(75mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，4.0×6cm，5-10％甲醇-氯仿梯度洗脱)，得到无色油状化合物J(5.5g，99％)。MS(ESI^-)：429.3(2M-H)^-，214.1(M-H)^-。

K.(S)-2-[N²-[(叔丁氧基)羰基]氨基]-N-甲氧基-N-甲基-4-戊烯酰胺

在0℃下，依次用N，O-二甲基羟胺盐酸盐(1.4g，15mmol)，1-羟基苯并三唑(2.0g，15mmol)，4-甲基吗啉(4.4mL，40mmol)，和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(3.4g，18mmol)处理化合物J(2.9g，13mmol)的氯仿(55mL)溶液。将反应混合物逐渐温热至25℃，搅拌16小时，用水(100mL)稀释。分离两相，用乙酸乙酯(3×75mL)萃取水相。将合并的有机层用5％盐酸水溶液(100mL)，碳酸氢钠饱和水溶液(100mL)，氯化钠饱和水溶液(100mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，3.0×20cm，25-50％乙酸乙酯-己烷梯度洗脱)，得到无色油状化合物K(2.5g，71％)。MS(ESI⁺)：258.9(M+H)⁺，202.9(M-异丁烯)，158.9(M-BOC)；MS(ESI^-)：257.2(M-H)^-。

L.(S)-3-[N-[(叔丁氧基)羰基]氨基]-5-己烯-2-酮

在0℃下，用甲基溴化镁(3.0M，乙醚中，8.1mL，2.4mmol)处理化合物K(2.5g，1.0mmol)的THF(65mL)溶液。将反应混合物在0℃搅拌(2.5小时)，仔细地倒入氯化铵饱和水溶液(100mL)中。分离两相，用乙酸乙酯(3×75mL)萃取水相。将合并的有机层用氯化铵饱和水溶液(75mL)，水(75mL)，氯化钠饱和水溶液(75mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，3.0×20cm，10-25％乙酸乙酯-己烷梯度洗脱)，得到无色油状(S)-2-[N-[(叔丁氧基)羰基]氨基]-5-己烯-2-酮(2.2g，67％)。MS(ESI⁺)：213.9(M+H)⁺，157.9(M-异丁烯)，113.9(M-BOC)；MS(ESI^-)：212.2(M-H)^-。

M.(S)-4-[3-[N-[(叔丁氧基)羰基]氨基]-2-甲基-1(E)，5-己二烯基]-2-甲基噻唑

在-78℃下，在5分钟内，滴加正丁基锂(1.6M，己烷中，5.2mL，8.4mmol)以处理2-甲基-4-噻唑基甲基二苯基膦氧化物(2.5g，8.0mmol，Danishefsky等J.Org.Chem.(有机化学杂志) 1996，61，7998)的THF(38mL)溶液。将所得亮橙色化合物在-78℃搅拌15分钟，用化合物L(0.81g，3.8mmol)的THF(5mL)溶液处理。在-78℃放置10分钟后，除去冷浴，将反应混合物温热至25℃(2小时)。将该混合物倒入氯化铵饱和水溶液(50mL)中，分离两相。用乙酸乙酯(3×50mL)萃取水相，将合并的有机层依次用水(75mL)，碳酸氢钠饱和水溶液(75mL)，氯化钠饱和水溶液(75mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，4.0×30cm，10-20％乙酸乙酯-己烷梯度洗脱)，得到无色油状化合物M(0.23g，18％)以及回收的原料酮(20-30％)。MS(ESI⁺)：309.1(M+H)⁺，253.0(M-异丁烯)；MS(ESI^-)：307.3(M-H)^-。

N.(S)-4-(3-氨基-2-甲基-1(E)，5-己二烯基)-2-甲基噻唑

在0℃和氩气下，用4.0N盐酸1，4-二噁烷溶液(5mL)处理化合物M(0.15g，0.49mmo)(30分钟)。真空除去挥发物，将得到的白色泡沫状物质溶于冷的碳酸氢钠饱和水溶液(3mL)。将该溶液用乙酸乙酯(4×10mL)萃取，将合并的乙酸乙酯层干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，1.0×5cm，5-10％甲醇-氯仿梯度洗脱)，得到无色油状化合物N(88mg，88％)。MS(ESI⁺)：209.0(M+H)⁺；MA(ESI^-)：207.2(M-H)^-。

O.(3S，6R，7S，8S)-N-(S)-[1-(2-甲基-4-噻唑基)-2-甲基-1(E)，5-已二烯-3-基]-3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-4，4，6，8-四甲基-7-羟基-5-氧代-12-十三烯酰胺

在0℃下，依次用化合物I(0.15g，0.35mmol)，1-羟基苯并三唑(49mg，0.36 mmol)，和1(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.10g，0.52mmol)处理在DMF(1.3ml)中化合物M(88mg，0.42mmol)。将反应混合物逐渐温热至25℃，搅拌15小时，用水(3mL)稀释。将该混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，将合并的有机层用5％盐酸水溶液(10mL)，碳酸氢钠饱和水溶液(10mL)，氯化钠饱和水溶液(10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，1.5×20cm，2.5％甲醇-氯仿)，得到白色泡沫状化合物O(0.17g，77％)。MS(ESI⁺)：619.3(M+H)⁺。

P.[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-8-羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(E)-环十六烯-2，6-二酮

在氩气下，用Grubb’s催化剂[二(三环己基膦)次苄基二氯化钌(Strem Chemicals，11mg，14mmol)处理化合物O(17mg，27mmol)的脱气苯(8.0mL)溶液。将反应混合物在25℃搅拌15小时，再用另一部分催化剂(5.0mg，4.5mmol)处理。再过7小时后，真空除去苯，使黑色粘稠残留物通过硅胶垫(1.0×3cm)，用乙醚洗脱。将洗脱液真空浓缩，得到可分离的几何异构体混合物5∶1(E/Z)。通过PTLC(SiO₂，1mm板，用己烷-甲苯-乙酸乙酯1∶1∶1溶液洗脱两次)，得到化合物P的E-异构体(5.1mg，34％)和相应的Z-异构体(1.0mg，6.7％)。对于化合物P：MS(ESI⁺)：1181.7(2M+H)⁺，591.4(M+H)⁺。对于Z-异构体：MS(ESI⁺)：1181.5(2M+H)⁺，613.2(M+Na)⁺，591.2(M+H)⁺；MS(ESI^-)：589.3(M-H)^-。

Q.[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(E)-环十六烯-2，6-二酮

在0℃下，在装有化合物P(2.3mg，3.9mmol)的二氯甲烷(0.4mL)溶液的1打兰小瓶中加入三氟乙酸(0.1mL)。将反应混合物在Ar气氛下密封，在0℃下搅动。4小时后，在0℃下在恒定的氩气流下除去挥发物。在残留物中加入碳酸氢钠饱和水溶液(1mL)和乙酸乙酯(1mL)，分离两层。将水相用乙酸乙酯(4×1mL)萃取，将合并的乙酸乙酯层干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过PTLC(SiO₂，20×10×0.025cm，5％甲醇-氯仿洗脱)，得到白色薄膜状[4S-[4R^*，7S^*，8S^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(E)-环十六烯-2，6-二酮(1.3mg，68％)。MS(ESI⁺)：953.5(2M+H)⁺，477.3(M+H)⁺；MS(ESI^-)：475.5(M-H)^-。

实施例2

按照上述反应流程可制备下列化合物：

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，13，17-三氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，13，17-三氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1，10-二氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1，10-二氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，14，17-三氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，14，17-三氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1，11-二氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1，11-二氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-9-酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-9-酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-3，8，8，10，12，16-六甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-3，8，8，10，12，-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13，16-六甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，16-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-6，8，8，10，12，16-六甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-6，8，8，10，12，-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-4，8，8，10，12，16-六甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-4，8，8，10，12，-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-1，5，5，7，9，13-六甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-1，5，5，7，9-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-13-氮杂-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-13-氮杂-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-10-氮杂-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-10-氮杂-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-14-氮杂-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-14-氮杂-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-11-氮杂-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-11-氮杂-1-氧杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-N-苯基-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-5，9-二氧代-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-3-甲酰胺；

[1S-[1R^*，3R^*，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-N-苯基-7，11-二羟基-8，8，10，12-四甲基-5，9-二氧代-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-3-甲酰胺；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*]]-N-苯基-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-2，6-二氧代-1-氧杂-13-环十六烯-16-甲酰胺；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*]]-N-苯基-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-2，6-二氧代-1-氧杂-13-环十六烯-16-甲酰胺；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)环丙基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)环丙基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮。

实施例3[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

A.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-叠氮基-12，13-环氧-4，4，6，8，12，16-六甲基-7-羟基-17-(2-甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16-十七烯酸

用催化量的四(三苯膦)合钯(O)(80mg，69mmol)处理epothiloneB(0.35g，0.69mol)的脱气THF(4.5mL)溶液，并将该悬浮液在25℃及Ar下搅拌30分钟。将所得的亮黄色均相溶液立即用叠氮化钠(54mg，0.83mmol)的脱气水(2.2mL)溶液处理。将反应混合物在45℃温热1小时，用水(5mL)稀释，用乙酸乙酯(4×7mL)萃取。将有机萃取液用氯化钠饱和水溶液(15mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，3.0×15cm，95∶5.0∶0.5氯仿-甲醇-乙酸乙酯洗脱)纯化残留物，得到无色油状化合物A(0.23g，61％)。MS(ESI⁺)：551(M+H)⁺；MS(ESI^-)：549(M-H)^-。

B.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-氨基-12，13-环氧-4，4，6，8，12，16-六甲基-7-羟基-17-(2-甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16-十七烯酸

在25℃用水(23mL，1.25mmol)和聚合物上的三苯膦(Aldrich，与2％DVB交联的聚苯乙烯，0.28g，0.84mmol)处理化合物A(0.23g，0.42mol)的THF(4.0mL)溶液。将该悬浮液在25℃及Ar下搅拌(32小时)，用Celite垫过滤，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，1.5×10cm，95∶5.0∶0.5到90∶10∶1.0氯仿-甲醇-乙酸乙酯梯度洗脱)纯化残留物，得到无色油状化合物B(96mg，44％)。MS(ESI⁺)：525.2(M+H)⁺；MS(ESI^-)：523.4(M-H)^-。

或者是，在Ar下，在装有化合物A(0.26g，0.47mol)和PtO₂(0.13g，50wt％)的25mL圆底烧瓶中加入无水乙醇。将所得黑色混合物在一个大气压的H₂下搅拌10小时，然后用N₂清洗系统，加入另一部分PtO₂(65mg，25wt％)。将反应混合物再在一个大气压的H₂下搅拌10小时。然后用N₂清洗系统，用Celite垫过滤反应混合物，用二氯甲烷(3×25mL)洗脱。真空除去溶剂，按上述纯化残留物，得到化合物B(0.19g，75％)。

或者是，在Ar下，用三苯膦(19mg，73mmol)处理化合物A(20mg，36mmol)的THF(0.4mL)溶液。将反应混合物温热至45℃，搅拌14小时，冷却至25℃。用氢氧化铵(28％，0.1mL)处理所得的亚氨基磷烷，再将反应混合物温热至45℃。4小时后，真空除去挥发物，按上述纯化残留物，得到化合物B(13mg，70％)。

C.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

在0℃及Ar下，用固体碳酸氢钠(0.42g，5.0mol)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.54mL，2.5mmol)处理化合物B(0.33g，0.63mmol)的脱气DMF(250mL)溶液。将所得悬浮液在4℃搅拌24小时，在0℃用磷酸盐缓冲液(250mL，pH＝7)稀释，用乙酸乙酯(5×100mL)萃取。将有机萃取液用10％氯化锂水溶液(2×125mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。残留物首先通过快速层析(SiO₂，2.0×10cm，2-5％甲醇-氯仿梯度洗脱)纯化，然后通过Chromatotron(2mmSiO₂，CF rotor，2-5％甲醇-氯仿梯度洗脱)纯化，得到无色油状标题化合物(0.13g，40％)。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ6.98(s，1H)，6.71(d，1H，NH，J＝8.1Hz)，6.56(s，1H)，4.69-4.62(m，1H)，4.18-4.12(m，1H)，4.01-3.96(m，1H)，3.86(s，1H)，3.38-3.34(m，1H)，2.82(dd，1H，J＝5.6，6.0Hz)，2.71(s，3H)，2.58(s，1H)，2.43(dd，1H，J＝9.0，14.5Hz)，3.34(dd，1H，J＝3.0，14.5Hz)，2.14(s，3H)，2.05-1.92(m，2H)，1.82-1.41(一系列

重峰，7H)，1.35(s，3H)，1.28(s，3H)，1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，1.14(s，3H)，1.00(d，3H，J＝6.8Hz)；MS(ESI⁺)：507.2(M+H)⁺；MS(ESI^-)：505.4(M-H)^-.

实施例4

环氧噻酮和环氧噻酮类似物环氧乙烷环还原方法

在一个两颈烧瓶中加入镁屑碎片(24mg，1.0mmol)。将该烧瓶在真空下火焰干燥，并在氩气下冷却。先加入二(环戊二烯基)二氯化钛(250mg，1.0mmol)，再加入无水THF(5mL)。搅拌下将该悬浮液抽成低真空，并在反应烧瓶中再充入氩气。红色悬浮液变黑，1.5小时后变成均匀的深绿色，几乎所有的镁金属都已消耗。取出一份等分试样(3.5mL，0.70mmol，3.5eq)，在氩气下冷却至-78℃。在该溶液中加入环氧噻酮A(99mg，0.20mmol，1.0eq)。将反应混合物温热至室温，搅拌15分钟。真空除去挥发物，残留物用硅胶(25g)层析两次，用35％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到76mg(80％)淡黄色粘稠油状环氧噻酮C。

实施例5

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

A.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-叠氮基-3，7-二羟基-12，13-环氧-4，4，6，8，16-五甲基-17-(2-甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16(E)-十七烯酸

在室温下，将四(三苯膦)合钯(O)(1.17g，1.01mmol，0.10eq)加入环氧噻酮A(4.97g，10.1mmol，1.0eq)的脱气THF(100mL)溶液中，并将该混合物在氢气下搅拌30分钟。在上述反应混合物中加入叠氮化钠(0.980g，15.1mmol，1.5eq)，再加入脱气水(10mL)。将反应混合物在45℃温热1小时，冷却至室温，用乙酸乙酯(300mL)稀释，再用水(150mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水(150mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤，真空浓缩。通过硅胶快速层析(用含0.1％乙酸的0-5％甲醇/氯仿洗脱)纯化油状残留物，得到玻璃固体状化合物A(1.84g，34.0％产率)。MS(ESI⁺)：537(M+H)⁺；MS(ESI^-)：535(M-H)^-。

B.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-氨基-3，7-二羟基-12，13-环氧-4，4，6，8，16-五甲基-17-(2-甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16-十七烯酸

将氧化铂(0.980g，4.30mmol，1.25eq)加入化合物A(1.85g，3.44mmol，1.0eq)的无水乙醇(137mL)溶液。室温下将反应混合物在氢气罩中剧烈搅拌16小时。将反应混合物过滤，真空浓缩滤液。通过制备型HPLC(YMC S-15 ODS 50×500mm柱45分钟/梯度，0-100％B，50毫升/分钟，保留时间＝17分钟，A＝0.1％乙酸/5％乙腈/95％水，B＝0.1％乙酸/5％水/95％乙腈)纯化油状残留物。真空浓缩合适的级份，在含水乙腈中将残留物冷冻干燥，得到无色固体状化合物B(1.33g，76.0％产率)。MS(ESI⁺)：511(M+H)⁺；MS(ESI^-)：509(M-H)^-。

C.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

将化合物B(0.860g，1.68mmol，1.0eq)溶于无水DMF(0.00250M，672mL)，并在室温下脱气一小时。将该溶液冷却至0℃，在氩气下，加入固体碳酸氢钠(1.13g，13.4mmol，4.0eq)和二苯基磷酰基叠氮化物(1.85g，6.72mmol，8.0eq)。将反应混合物在4℃及氩气下搅拌16小时。然后将反应混合物冷却至-60℃，缓慢地加入pH 7磷酸缓冲液猝灭反应。将温度保持在-30℃。将上述混合物缓慢地温热至室温，用乙酸乙酯(1升)萃取。将水层用乙酸乙酯(4×300mL)洗涤。将有机萃取液合并，用10％氯化锂水溶液(500mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤，真空浓缩。通过制备型HPLC(YMC S-15 ODS 50×500mm柱45分钟/梯度，0-100％B，50毫升/分钟，保留时间＝35分钟，A＝5％乙腈/95％水，B＝5％水/95％乙腈)纯化油状残留物。真空浓缩合适的级份，在含水乙腈中将残留物冷冻干燥，得到无色固体状标题化合物(0.220g，26.0％产率)。MS(ESI⁺)：493(M+H)⁺；MS(ESI^-)：491(M-H)^-。

实施例6

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(Z)-环十六烯-2，6-二酮；

将六氯化钨(0.19g，0.49mmol，0.5equiv)溶于THF(5.0mL)，并将该溶液冷却至-78℃。一次加入己烷中的正丁基锂(1.6M，0.63mL，1.0mmol，1.0equiv)，20分钟内将反应混合物温热至室温(温热至室温时溶液变成深绿色)。室温下，将所制备的钨试剂的0.1M溶液(0.79mL，0.079mmol，2.0equiv)加入化合物4C(0.020g，0.039mmol，1.0equiv)中。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用饱和碳酸氢钠(2.0mL)猝灭。用水(10mL)稀释猝灭溶液，将该溶液用二氯甲烷(4×20mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(硫酸钠)，过滤，真空浓缩。使残留物通过硅胶柱除去无机物(用19/1氯仿/甲醇洗脱)。真空浓缩洗脱液。通过phplc(YMC S5 ODS 30-100％B，A＝5％含水乙腈，B＝95％含水乙腈，3毫升/分钟，220nm.，30分钟梯度洗脱)纯化残留物，真空浓缩合适的级份。在含水乙腈中将粘稠固体冷冻干燥，得到白色固体状标题化合物(4.3mg，29％)。TLC：Rf＝0.57(9/1氯仿/甲醇，通过UV观测)；HRMS：(M+H)⁺计算值＝491.29436，实测值＝491.2934。

实施例7[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-羟甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

A.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮，N-氧化物

在25℃及Ar下，用3-氯过氧苯甲酸(1.0g，5.9mmol)处理环氧噻酮B(2.0g，3.9mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液2小时。再加入0.5g(3.0mmol)3-氯过氧苯甲酸，然后将反应混合物搅拌2小时。将反应混合物过滤，真空浓缩滤液。将残留物溶于乙酸乙酯(100mL)，用碳酸氢钠饱和水溶液(75mL)，5％亚硫酸钠水溶液(75mL)，水(75mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过快速层析(SiO₂，4.5×30cm，2-10％甲醇-氯仿梯度洗脱)纯化残留物，得到白色固体状化合物A(1.04g，50％)。MS(ESI⁺)：524.3(M+H)⁺；MS(ESI^-)：522.5(M-H)^-。

B.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-羟基甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮，[环氧噻酮F]

在Ar下，在装有化合物A(0.46g，0.88mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液的可反复封口的试管中加入2，6-二甲基吡啶(0.82mL，7.0mmol)和三氟乙酸酐(0.87mL，6.2mmol)。将反应容器在Ar下封口，加热至75℃(12分钟)，冷却至25℃，在恒定的氮气流下除去挥发物。将反应试管在高真空泵内放置15分钟。将所得残留物溶于甲醇(10mL)，用氢氧化铵(28-30％NH₄，水中，1.0mL)处理。将该混合物加热至45℃(10分钟)，真空除去挥发物。通过HPLC(YMC S-15 ODS 30×500mm柱，50％乙腈-水无梯度洗脱，流速＝20毫升/分钟，保留时间＝28分钟)将粗品反应混合物纯化。真空浓缩合适的级份，在含水乙腈中将残留物冷冻干燥，得到白色固体状标化合物B(0.22g，48％产率)。MS(ESI⁺)：524.3(M+H)⁺，1047.6(2M+H)⁺；MS(ESI^-)：522.5(M-H)^-。

C.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-叠氮基-3，7-二羟基-12，13-环氧-4，4，6，8，12，16-六甲基-17-(2-羟基甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16(E)-十七烯酸

用催化量四(三苯膦)合钯(O)(40mg，3.4×10^-2mmol)处理化合物B(0.18g，0.34mmol)的脱气THF(3.0mL)溶液，将该悬浮液在25℃及氩气下搅拌30分钟。一次加入叠氮化钠(27mg，0.41mmol)的脱气水(1.5mL)溶液处理所得淡黄色均相溶液。将反应混合物在45℃温热1小时，用水(5mL)稀释，用乙酸乙酯(4×10mL)萃取。将合并的有机萃取液用氯化钠饱和水溶液(15mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过硅胶快速层析(SiO₂，2.5×15cm，95∶5氯仿-甲醇到95∶5.0∶0.5氯仿-甲醇-乙酸梯度洗脱)纯化残留物，得到无色油状化合物C(39mg，20％产率)。MS(ESI⁺)：567.4(M+H)⁺，1133.6(2M+H)⁺；MS(ESI^-)：565.5(M-H)^-，1131.8(2M-H)^-。

D.(3S，6R，7S，8S，12R，13S，15S)-15-氨基-3，7-二羟基-12，13-环氧-4，4，6，8，12，16-六甲基-17-(2-羟基甲基-4-噻唑基)-5-氧代-16(E)-十七烯酸

Ar下，在装有化合物C(40mg，71mmol)和PtO₂(12mg，30wt％)的10mL圆底烧瓶中加入无水乙醇(3mL)。将所得黑色混合物在一个大气压氢气下搅拌10小时。然后用氮气清洗系统，通过尼龙膜过滤反应混合物(用25mL甲醇洗涤)。真空除去溶剂，得到泡沫状化合物D(29mg，76％)。其纯度足以用于下一步反应。LCMS：541.3(M+H)⁺。

E.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-羟基甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

在0℃及氩气下，用固体碳酸氢钠(36mg，0.43mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(46mL，0.21mmol)处理化合物D(29mg，54mmol)的脱气DMF(21mL)溶液。将所得悬浮液在4℃搅拌19小时，冷却至-40℃，用25mLpH 7磷酸盐缓冲液稀释(缓慢地加入，使内部温度保持低于-30℃)，用乙酸乙酯(4×10mL)萃取，将有机萃取液用冷的10％氯化锂水溶液(25mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过Chromatotron(1mmSiO₂，GFrotor，2-5％甲醇-氯仿梯度洗脱)纯化残留物，得到无色油状化合物E(9.1mg，34％)。MS(ESI⁺)：523.2(M+H)⁺；MS(ESI^-)：521.5(M-H)^-。

实施例8[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-羟甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(Z)-环十六烯-2，6-二酮

A.[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮

在0℃及氩气下，用三乙胺(2.7mL，20mmol)，4-N，N-二甲氨基吡啶(0.2mg，1.3mmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(3.7mL，14mmol)处理化合物7E(6.8mg，13mmol)的二氯甲烷(0.5mL)溶液。将反应混合物逐渐温热至25℃(1小时)，冷却至0℃，加入碳酸氢钠饱和水溶液(1mL)猝灭，用乙酸乙酯(4×2mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水(5mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过硅胶快速层析(SiO₂，1.0×5cm，2-5％甲醇-氯仿梯度洗脱)纯化残留物，得到无色油状化合物A(7.0mg，71％产率)。MS(ESI⁺)：761.5(M+H)⁺；MS(ESI^-)：759.7(M-H)^-。

B.[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-羟甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(Z)-环十六烯-2，6-二酮

在-78℃及Ar下，用正丁基锂(1.6M，己烷中，0.32mL，0.50mmol)处理氯化钨(IV)(0.10g，0.25mmol)的无水THF(5.0mL)溶液。40分钟内将反应混合物温热至25℃，然后冷却至0℃。在0℃及Ar下，将所得深绿色均相溶液的等分试样(0.2mL，20mmol)加入装有化合物A(7.0mg，9.2mmol)的1打兰小瓶中。将反应混合物温热至25℃，搅拌30分钟，加入饱和碳酸氢钠(0.5mL)猝灭，用乙酸乙酯(4×1mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(硫酸钠)，真空浓缩。通过制备型TLC(SiO₂，20×20×0.025cm，用5％甲醇-氯仿展开)纯化残留物，得到甲硅烷基保护的化合物B(13Z)异构体与少量(＜10％)次要(13E)异构体的未分离的混合物，直接将其进行下一步脱保护。

在25℃下，用0.3ml HF-吡啶在THF中的缓冲溶液(2∶1∶0.5THF/吡啶/HF-吡啶溶液，Aldrich Chemical Co.)处理化合物B的甲硅烷基保护的异构体混合物(2.3mg，3.1mmol)。1小时后，将反应混合物用碳酸氢钠饱和水溶液(0.5mL)中和，用用乙酸乙酯(4×1mL)萃取。将合并的有机萃取液用碳酸氢钠饱和水溶液(1mL)洗涤，干燥(硫酸钠)，真空除去挥发物。通过制备型TLC(SiO₂，20×20×0.025cm，用5％甲醇-氯仿展开)纯化残留物，得到薄膜状的标题化合物(13Z异构体)与少量未分离的(＜10％)次要(13E)异构体的混合物(0.96mg，20％，相对于两步)。MS(ESI⁺)：507.3(M+H)⁺；MS(ESI^-)：505.6(M-H)^-。

Claims

1.一种下式化合物及其可药用的盐以及任何水合物、溶剂化物或几何、旋光及立体异构物

Q选自

G选自烷基，取代烷基，取代或未取代的芳基，杂环基，

W为O或NR₁₅；

X为O或H，H；

OR₁₇OR₁₇可以为环缩酮；

Z₁，和Z₂选自CH₂，O，NR₂₃，S，或SO₂，其中Z₁和Z₂中仅有一个可为杂原子；

B₁和B₂选自OR₂₄，或OCOR₂₅，或O₂CNR₂₆R₂₇；当B₁为H而Y为OH，H时，它们可形成六元环缩酮或缩醛；

D选自NR₂₈R₂₉，NR₃₀COR₃₁或饱和杂环；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₁₃，R₁₄，R₁₈，R₁₉，R₂₀，R₂₁，R₂₂，R₂₆和R₂₇选自H，烷基，取代烷基或芳基，并且当R₁和R₂为烷基时，可以合起来形成环烷基；当R₃和R₄为烷基时，也可合起来形成环烷基；

R₉，R₁₀，R₁₆，R₁₇，R₂₄，R₂₅，和R₃₁选自H，烷基，或取代烷基；

R₈，R₁₁，R₁₂，R₂₈，R₃₀，R₃₂，R₃₃，和R₃₀选自H，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，环烷基，或杂环基；

R₁₅，R₂₃和R₂₉选自H，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，环烷基，杂环基，R₃₂C＝O，R₃₃SO₂，羟基，O-烷基或O-取代烷基，条件是不包括其中

W和X都为O；以及

R₁，R₂，R₇为H；以及

R₃，R₄，R₆为甲基；以及

R₈为H或甲基；以及

Z₁和Z₂为CH₂；以及

G为1-甲基-2-(取代的-4-噻唑基)乙烯基；以及

Q定义如上的上述化合物。

2.权利要求1的化合物，其中

Q为

X为O

Y为O

Z₁和Z₂为CH₂，以及

W为NR₁₅。

3.一种化合物及其药学上可接受的盐，溶剂化物和水合物，选自

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，8，10，12-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-8，8，10，12，-四甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13-环十六烯-2，6-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*(E)，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-7，11-二羟基-4，8，8，10，12-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮杂-17-氧杂双环[14.1.0]十七烷-5，9-二酮；

[1S-[1R^*，3R^*，7R^*，10S^*，11R^*，12R^*，16S^*]]-N-苯基-7，11-二羟基-8，8，10，12，16-五甲基-5，9-二-氧代-4，17-二氧杂双环[14.1.0]十七烷-3-甲酰胺；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*]]N-苯基-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-2，6-二氧代-1-氧杂-13-环十六烯-16-甲酰胺；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*]]N-苯基-4，8-二羟基-5，5，7，9-四甲基-2，6-二氧代-1-氧杂-13-环十六烯-16-甲酰胺；

[4S-[4R^*，7S^*，8R^*，9R^*，15R^*(E)]]-4，8-二羟基-5，5，7，9，13-五甲基-16-[1-甲基-2-(2-羟基甲基-4-噻唑基)乙烯基]-1-氮杂-13(Z)-环十六烯-2，6-二酮。

4.一种治疗患者的癌症的方法，其中包括给上述患者提供有效量的权利要求1化合物。

5.一种治疗患者的细胞过度增生疾病的方法，其中包括给上述患者提供有效量的权利要求1化合物。

6.一种提供抗血管增生作用的方法，其中包括给需要此种治疗的患者提供有效量的权利要求1化合物。