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CN111349093B - 5,6-双环化合物作为wnt信号通路抑制剂及其医学应用 - Google Patents

5,6-双环化合物作为wnt信号通路抑制剂及其医学应用 Download PDF

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CN111349093B CN201811573629.XA CN201811573629A CN111349093B CN 111349093 B CN111349093 B CN 111349093B CN 201811573629 A CN201811573629 A CN 201811573629A CN 111349093 B CN111349093 B CN 111349093B
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Abstract

本发明提供一种5,6‑双环结构的化合物，或药学上可接受的盐,溶剂化物,或立体异构体。本发明的5,6‑双环结构化合物具有WNT信号通路的抑制活性，可以用于WNT信号通路相关疾病的治疗。相关疾病包括但不限于：肿瘤、畸形综合症、骨或软骨疾病、糖尿病或其并发症、组织纤维化等。

Description

5,6-双环化合物作为WNT信号通路抑制剂及其医学应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及一种具有WNT信号通路抑制活性的5,6-双环化合物及其应用。
背景技术
WNT信号通路在胚胎发生和成体的稳态调节中都起着重要作用。Wnt基因家族负责编码一大类与Int1/Wnt1原癌基因及无翅果蝇(Wg，对应果蝇Wnt1)相关的分泌型WNT配体(Cadigen and Nusse.,(1997)Genes&Development 11：3286-3305)。多种Wnt-激发的通路协同调节关键的发育过程，以及成人组织的稳态及修复过程，不同疾病中均存在Wnt通路调节失调，例如癌症、畸形综合症、骨质疏松症、糖尿病视网膜病变以及肺纤维化(MacDonaldet al(2009)Dev.Cell 17：9-26；Williams and Insogna(2009)J.Bone Miner.Res.24：171-178；Polaskis(2007)Curr.Opin.Genet.Dev.17：45-51；Chen et al.,(2009)Am.J.Pathol.175：2676-2685)。WNT配体决定了WNT信号通路的活性。WNT蛋白合成的第一步是在内质网(ER)完成翻译，接着由ER固有的酶Porcupine(PORCN，一种膜结合的O-酰基转移酶(MBOAT))介导翻译后酰化(棕榈酰化)(Proffitt and Virshup.,(2012)J ofBiol.Chem.287：34167-34178)，WNT蛋白在1或2个高度保守位点上存在棕榈酰化(Zhai etal.,(2004)J.Biol.Chem.279：33220-33227；Takada et al.,(2006)Dev Cell 11：791-801)。WNT蛋白转运、分泌以及蛋白活性与WNT蛋白翻译后酰化紧密相关，而PORCN对于Wnt的翻译后酰化具有高选择性及精密调节作用(Proffitt and Virshup.,(2012)J ofBiol.Chem.287：34167-34178)，这一修饰过程是WNT蛋白分泌以及连接载体蛋白WLS所必须。除此之外，棕榈酰化对于WNT蛋白与细胞表面的Frizzled受体间的相互作用至关重要(Coombs et al.,(2010)J.Cell Sci 123：3357-3367；Herr and Basler(2012)Dev.Biol.361：392-402；Janda et al.,(2012)Dev.Biol.361：392-402)。
典型的WNT通路由WNT配体与细胞表面Frizzled受体结合而活化(Bhanot et al.,(1996)Nature 382：225-230)，继而激活胞浆蛋白Dishevelled(Boutros,et al.,(1999)Mech.Dev.83：27-37)以及LRP5/6的磷酸化，导致β-catenin在细胞核内的聚集并与TCF/LCF家族转录因子相互作用，促进特定基因的转录过程(Uthoff et al.,(2001)Mol.Carcinog.,31：56-62)。WNT通路非活化状态下，游离的胞浆β-catenin进入支架蛋白Axin、结肠腺瘤样息肉蛋白APC以及糖原合成激酶(GSK)-3β组成的复杂体系中。Axin、APC以及β-catenin被GSK-3β接连磷酸化，最终导致β-catenin进入泛素化途径，并被蛋白酶体降解(Uthoff et al.,(2001)Mol.Carcinog.,31：56-62；Matsuzawa et al.,(2001)Mol.Cell,7：915-926)。
众所周知，WNT信号通路对于多种类型的细胞的存活起到有利作用(Orford etal.,(1999)J.Cell Bio,146：855-868；Satoh et.al.,(2000)Nat.Genet,24：245-250；Ioannidis et al.,(2001)Nat.Immunol,2：691-697)。WNT通路活性的改变与肿瘤的发生发展紧密相关。例如，经典WNT通路高活性会导致细胞生长异常(Reya and Clevers,(2005)Nature 434：843-850)。另外，90％的结直肠癌有APC基因(其是WNT/β-catenin信号通路抑制剂)的缺失(Kinzler and Vogelstein,(1996)Cell 87：159-170)。再比如，WNT信号通路的活性异常与多种人体肿瘤相关，同时伴随C-Myc过度表达(Polakis et al.,(2000)GenesDev,14：1837-1851；Bienz et al.,(2000)Cell：311-320)。C-Myc现已证实为结直肠癌β-caternin/TCF通路中的一个翻译靶点(He et al.,(1998)Science,281：1509-1512；de LaCoste et al.,(1998)Proc Natl Acad Sci USA,95：8847-8851；Miller et al.,(1999)Oncogene,18：7860-7872；Uoi et al.,(2002)J.Cell Biol,157：429-440)。除此之外，WNT蛋白表达增强以及细胞外WNT蛋白功能抑制剂的缺失，可能会导致WNT依赖的肿瘤产生(Polaskis(2007)Curr.Opin.Genet.Dev.17：45-51)。近期研究发现，WNT信号通路在肿瘤干细胞中发挥作用(Takahashi-Yanaga and Kahn,(2010)Clin.Cancer Res16：3153-62)，并与干细胞自我更新相关(Kretzachmar and Clevers,(2017)Dev.Biol.428：273-282；Prieur et al.,(2017)Clin.Cancer Res.23：5267-5280)。
应用基因或化学方法，阻断多种肿瘤中的WNT信号通路，能够使异常的细胞生长停滞(Herbst and Kolligs,(2007)Methods Mol.Biol 361：63-91)。此外，抑制此信号通路可能直接影响支持肿瘤细胞生长和转移的细胞，其中肿瘤转移被认为是肿瘤细胞对传统化疗药耐药的重要因素。异常的WNT信号通路还与多种紊乱相关，包括但不限于骨和软骨疾病，例如骨质疏松症、骨关节炎、肥胖相关的II型糖尿病等(Hoeppner,(2009)ExpertOpin.Ther.Targets 13：485-96；Ouchi et al.,(2010)Science 329：454-457；Blom etal.,(2010)Curr.Drug Targets 11：620-629)。因此，调节WNT信号通路的物质或方法，具有潜在的治疗、预防以及改善WNT通路相关疾病的疗效。
发明内容
本发明提供一种结构式I的化合物，或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体
Figure BDA0001916144120000021
其中：B为-CONH-，或-NHCO-，
R1，R2分别代表H，D，F，Cl，Br，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3亚烷基羟基，或者R1和R2连接形成一个包含0-1个杂原子的取代的或未取代3-6元饱和环，其中所述杂原子选自O，S或N之一；
R3，R4，R’3，R’4可在所在环的任意取代位置，其中R3，R4，R’3，R’4独立代表H，D，F，Cl，Br，I，NH2，NO2，CN，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，取代或非取代的C3-C7环烷基，OR5，COR5，CONR5R6，NR5R6，NR5COR6，NR5CONHR6，NHSO2R5，SO2NHR5，SO2(C1-C6烷基)，取代或非取代的C3-C7杂环烷基，所述C3-C7杂环烷基为含O，S，N的杂环烷基，以C原子与环相连接；
R5，R6可独立代表H，D，C1-C6烷基，C2-C4亚烷基羟基，C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基，氨基C1-C6烷基，或取代氨基C1-C6烷基，或R5和R6与所连接的基团可连接形成包含1-2个杂原子的取代或未取代的3-6元饱和环，其中，所述杂原子进一步选自O，S或N原子；
上述“取代的”表示所述基团进一步被F，Cl，Br，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基或C1-C6亚烷基羟基所取代；
X，Y，Z，X1，Y1，Z1可独立代表C，N；
A选自下列结构式代表的芳基或杂芳基，
Figure BDA0001916144120000031
Figure BDA0001916144120000032
等,
其中R3，R4在所连接环的任意可取代位置，R3，R4的定义和上述相同；
R7可选自H，F，Cl，Br，I，C1-C6烷基。
进一步，本发明保护一种结构式I的化合物，其中，B为-CONH-结构，X为C，Y为N，Z为C，即为式Ia结构化合物
Figure BDA0001916144120000033
或，本发明保护一种式I结构化合物，其中B为-CONH-结构，X为N，Y为N，Z为C，即为式Ib结构化合物：
Figure BDA0001916144120000034
或，本发明保护一种式I结构化合物，其中B为-CONH-结构，X为C，Y为C，Z为N，即为式Ic结构化合物：
Figure BDA0001916144120000041
其中，所述R1，R2分别代表H，D，F，Cl，Br，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3亚烷基羟基；
R3，R4，R’3，R’4可在所在环的任意取代位置，其中R3，R4，R’3，R’4独立代表H，D，F，Cl，Br，I，NH2，NO2，CN，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，取代或非取代的C3-C7环烷基，OR5，COR5，CONR5R6，NR5R6，NR5COR6，NR5CONHR6，NHSO2R5，SO2NHR5，SO2(C1-C6烷基)，取代或非取代的C3-C7杂环烷基，所述C3-C7杂环烷基为含O，S，N的杂环烷基，以C原子与环相连接；
R5，R6可独立代表H，D，C1-C6烷基，C2-C4亚烷基羟基，C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基，氨基C1-C6烷基，或取代氨基C1-C6烷基，或R5和R6与所连接的基团可连接形成包含1-2个杂原子的取代或未取代的3-6元饱和环，其中，所述杂原子进一步选自O，S或N原子；
所述“取代的”表示所述基团进一步被F，Cl，Br，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基或C1-C6亚烷基羟基所取代；
A选自下列结构式代表的芳基或杂芳基,
Figure BDA0001916144120000042
Figure BDA0001916144120000043
其中R3，R4在所连接环的任意可取代位置，R3，R4的定义和上述相同；
R7可选自H，F，Cl，Br，I，C1-C6烷基。
进一步，本发明保护一种结构式I的化合物，其中，B为-NHCO-结构，X为C，Y为N，Z为C，即为式IIa结构化合物
Figure BDA0001916144120000044
或，B为-NHCO-结构，X为N，Y为N，Z为C，即为式IIb结构化合物
Figure BDA0001916144120000051
或，B为-NHCO-结构，X为C，Y为C，Z为N，即为式IIc结构化合物
Figure BDA0001916144120000052
其中，所述R1，R2分别代表H，D，F，Cl，Br，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3亚烷基羟基；
R3，R4，R’3，R’4可在所在环的任意取代位置，其中R3，R4，R’3，R’4独立代表H，D，F，Cl，Br，I，NH2，NO2，CN，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，取代或非取代的C3-C7环烷基，OR5，COR5，CONR5R6，NR5R6，NR5COR6，NR5CONHR6，NHSO2R5，SO2NHR5，SO2(C1-C6烷基)，取代或非取代的C3-C7杂环烷基，所述C3-C7杂环烷基为含O，S，N的杂环烷基，以C原子与环相连接；
R5，R6可独立代表H，D，C1-C6烷基，C2-C4亚烷基羟基，C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基，氨基C1-C6烷基，或取代氨基C1-C6烷基，或R5和R6与所连接的基团可连接形成包含1-2个杂原子的取代或未取代的3-6元饱和环，其中，所述杂原子进一步选自O，S或N原子；
所述“取代的”表示所述基团进一步被F，Cl，Br，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基或C1-C6亚烷基羟基所取代；
A选自下列结构式代表的芳基或杂芳基,
Figure BDA0001916144120000053
其中R3，R4在所连接环的任意可取代位置，R3，R4的定义和上述相同；
R7可选自H，F，Cl，Br，I，C1-C6烷基。
进一步，本发明保护如下式I具体化合物，该具体化合物选自：
Figure BDA0001916144120000061
Figure BDA0001916144120000071
Figure BDA0001916144120000081
上述所述化合物中B为-CONH-结构，或，
Figure BDA0001916144120000082
Figure BDA0001916144120000091
Figure BDA0001916144120000101
Figure BDA0001916144120000111
上述所述化合物中B为-NHCO-结构。
优选保护如下具体化合物：
N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基甲基)-7-乙酰基-咪唑[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺，或
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺。
进一步，保护上述通式I化合物或具体化合物，其中原子相应的同位素是2H，3H，11C，13C，14C，15N，17O，18O，35S，18F和36Cl的同位素化合物。
本发明进一步保护式I化合物的制备方法，其包括：有机酸化合物及其衍生物与有机胺化合物反应得到式I结构的酰胺化合物，所述有机酸化合物及其衍生物选自下式化合物：
Figure BDA0001916144120000121
所述有机胺化合物选自下式化合物：
Figure BDA0001916144120000131
其中M选自-OH，卤素，C1-C6烷氧基，C3-C7环烷氧基，金属离子或类似结构基团，取代基团X，Y，Z，X1，Y1，Z1，R1，R2，R3，R4，R’3，R’4，R5，R6，R7，A定义参照上述定义。
本发明的式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体具有WNT信号通路的抑制活性，可以用于WNT信号通路相关疾病的治疗。
本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体在制备治疗WNT信号通路相关疾病的药物中的用途。
所述WNT信号通路相关疾病包括但不限于：肿瘤、畸形综合症、骨或软骨疾病、糖尿病或其并发症、组织纤维化等。
所述骨或软骨疾病包括但不限于：骨质疏松症、骨关节炎、骨软骨病。
所述糖尿病或其并发症包括但不限于：II型糖尿病、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性肾病、糖尿病性脑血管病。
所述肿瘤包括但不限于：实体瘤或非实体瘤。所述实体瘤包括但不限限于：结肠直肠癌、结肠癌、胃癌、食道癌、骨肉瘤、乳腺癌、宫颈鳞状细胞癌、子宫内膜癌、间皮瘤、胰腺癌、膀胱癌、前列腺癌、肺癌、肝细胞癌、髓母细胞瘤、肝母细胞瘤、胃肠类癌、卵巢癌、黑色素瘤、头颈部鳞状细胞癌、甲状腺癌、肾母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、胶质瘤。所述非实体瘤包括但不限于：白血病，例如慢性粒细胞性白血病；淋巴瘤。
组织纤维化可发生于多种器官，主要病理改变为器官组织内纤维结缔组织增多，实质细胞减少，持续进展可致器官结构破坏和功能减退。其包括但不限于：肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化、骨髓纤维化等。
本发明提供一种药物组合物，其特征在于包括式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体。
所述药物组合物可以用于治疗WNT信号通路相关疾病。所述WNT信号通路相关疾病的定义如前文所述。
所述药物组合物进一步含有药学上可接受的载体。
所述药学上可接受的载体是制药领域中常用或已知的各种辅料，包括但不限于：稀释剂、粘合剂、抗氧化剂、pH调节剂、防腐剂、润滑剂、崩解剂等。
所述稀释剂例如：乳糖、淀粉、纤维素衍生物、无机钙盐、山梨醇等。所述粘合剂例如：淀粉、明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮等。所述抗氧化剂例如：维生素E、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、丁羟基茴香醚等。所述pH调节剂例如：盐酸、氢氧化钠、柠檬酸、酒石酸、Tris、乙酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等。所述防腐剂例如：对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、间甲酚、苯扎氯铵等。所述润滑剂例如：硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等。所述崩解剂例如：淀粉、甲基纤维素、黄原胶、交联羧甲基纤维素钠等。
所述药物组合物中含有式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的量为0.1-1000mg，优选1-500mg，更优选为5-100mg。
所述药物组合物中式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体占药物组合物的质量百分比为10％-90％，优选为20％-80％，更优选为30％-70％。
所述药物组合物的剂型可以是口服剂的形式，例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、悬浮剂、糖浆剂等；也可以是注射给药的剂型，例如注射液、粉针剂等，通过静脉内、腹膜内、皮下或肌肉内的途径注射给药。所有使用的剂型形式都是药学领域普通技术人员所熟知的。
所述药物组合物的施用途径包括但不限于：口服的；含服的；舌下的；透皮的；经黏膜的；鼻内的；眼用的；肺的；直肠的；阴道的；肠胃外的，例如，通过注射，包括皮下的、真皮内的、肌内的、静脉内的、动脉内的、心内的、鞘内的、脊柱内的、囊内的、囊下的、眼眶内的、腹膜内的、气管内的、表皮下的、关节内的、蛛网膜下的和胸骨内的；通过植入储库或储液器。
式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的施用剂量将取决于接受者的年龄、健康和体重，联用药物的种类，治疗频率，给药途径等。药物可以单一日剂量施用，每天给药一次、每两天给药一次、每三天给药一次、每四天给药一次，或者总日剂量以每天两次、三次或四次的分开剂量施用。剂量可以施用一次或多次，施药时间可以单日至几个月或更长时间。式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的用药量为0.01-1000mg/kg/天，优选为0.1-100mg/kg/天，例如为0.5mg/kg/天，1mg/kg/天、2mg/kg/天、5mg/kg/天等等。
所述药物组合物可以和其他的治疗WNT信号通路相关疾病的药物或治疗手段联合应用。
所述药物组合物可以进一步含有第二种治疗剂，所述第二种治疗剂是其他的治疗WNT信号通路相关疾病的药物。
本发明提供一种治疗WNT信号通路相关疾病的方法，其特征在于，对有需要的患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体。
所述式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的施用途径包括但不限于：口服的；含服的；舌下的；透皮的；经黏膜的；鼻内的；眼用的；肺的；直肠的；阴道的；肠胃外的，例如，通过注射，包括皮下的、真皮内的、肌内的、静脉内的、动脉内的、心内的、鞘内的、脊柱内的、囊内的、囊下的、眼眶内的、腹膜内的、气管内的、表皮下的、关节内的、蛛网膜下的和胸骨内的；通过植入储库或储液器。
式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的施用剂量将取决于接受者的年龄、健康和体重，联用药物的种类，治疗频率，给药途径等。药物可以单一日剂量施用，每天给药一次、每两天给药一次、每三天给药一次、每四天给药一次，或者总日剂量以每天两次、三次或四次的分开剂量施用。剂量可以施用一次或多次，施药时间可以单日至几个月或更长时间。式I化合物或其药学上可接受的盐，溶剂化物，或立体异构体的用药量为0.01-1000mg/kg/天，优选为0.1-100mg/kg/天，例如为0.5mg/kg/天，1mg/kg/天、2mg/kg/天、5mg/kg/天等等。
所述方法进一步包括，对有需要的患者给予其他的治疗WNT信号通路相关疾病的药物，或者联合使用其他的治疗手段。
其他的治疗WNT信号通路相关疾病的药物包括但不限于：破坏DNA结构和功能的药物、核苷酸合成酶抑制剂、DNA多聚酶抑制剂、二氢叶酸还原酶抑制剂、核苷酸还原酶抑制剂、抑制RNA合成的药物，拓扑异构酶抑制剂、微管蛋白抑制剂、影响激素平衡的药物、酪氨酸激酶抑制剂、表皮生长因子受体抑制剂、血管内皮生长因子受体抑制剂、免疫调节剂等。
所述破坏DNA结构和功能的药物包括但不限于：氮芥、环磷酰胺、顺铂、卡铂、奥沙利铂。
所述核苷酸合成酶抑制剂包括但不限于：5-氟尿嘧啶、卡培他滨、雷替曲塞、6-巯嘌呤。
所述DNA多聚酶抑制剂包括但不限于：阿糖胞苷、吉西他滨。
所述二氢叶酸还原酶抑制剂包括但不限于：氨甲喋呤、培美曲塞。
所述核苷酸还原酶抑制剂包括但不限于：羟基脲。
所述抑制RNA合成的药物包括但不限于：阿霉素、柔红霉素、表柔比星、吡柔比星。
所述拓扑异构酶抑制剂包括但不限于：羟喜树碱、伊立替康、拓扑替康。
所述微管蛋白抑制剂包括但不限于：长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇。
所述影响激素平衡的药物包括但不限于：托瑞米芬、依西美坦、来曲唑、比卡鲁胺、恩杂鲁胺、甲羟孕酮、甲地孕酮、丙酸睾丸酮、戈舍瑞林、亮丙瑞林。
所述酪氨酸激酶抑制剂包括但不限于：伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、索拉菲尼、舒尼替尼、拉帕替尼、阿帕替尼。
所述表皮生长因子受体抑制剂包括但不限于：曲妥珠单抗、帕尼单抗、西妥昔单抗、帕妥珠单抗。
所述血管内皮生长因子受体抑制剂包括但不限于：贝伐单抗、雷莫芦单抗。
所述免疫调节剂包括但不限于：利妥昔单抗、派姆单抗、伊匹单抗。
所述其他治疗手段包括但不限于：放疗、手术切除。
具体实施方式
实施例中使用的化学试剂均为市售化合物，其中
DMF：N,N-二甲基甲酰胺；
HATU：N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸盐，英文名O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate
DIEA：N,N-二异丙基乙胺；
TFAA：三氟乙酸酐
DCM：二氯甲烷
THF：四氢呋喃
Pyridine：吡啶
Pd(PPh3)4：四(三苯基膦)钯
Et：乙基，Ac：乙酰基；如EtOAc为乙酸乙酯或醋酸乙酯，ETOH为乙醇。
中间体合成实施例
2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酸乙酯(I-1)的制备
Figure BDA0001916144120000161
室温下，2-(4-溴苯基)乙酸乙酯(0.50克,2.06毫摩尔)溶解在20毫升无水THF，然后加入2-甲基-4-(4,4,5,5-甲基1,3,2-二杂氧戊硼烷-2基)吡啶
(2-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridine)(0.45克，2.06毫摩尔)，Pd(PPh3)4(0.58克，0.1毫摩尔)和碳酸铯(1.34克，4.0毫摩尔)。反应混合物通氮气5分钟，然后在75℃搅拌过夜。反应冷却后，用饱和NaHCO3稀释并用EtOAc(3×100毫升)提取。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤，并减压下浓缩。硅胶色谱纯化提供0.4克(76％)的I-1。
2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酸(I-2)的制备
Figure BDA0001916144120000162
室温下，10mL LiOH(0.19克，7.92毫摩尔)水溶液加到20毫升I-1(0.40克，1.57毫摩尔)的THF溶液中。反应混合物搅拌过夜，浓缩。残留物用1N盐酸中和到pH值6，EtOAc(3×100毫升)提取。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。硅胶色谱纯化提供0.2克(56％)的I-2。ESIMS发现：m/z 228.0(M+1)。
2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酸(I-3)的制备.
Figure BDA0001916144120000171
I-3的合成和I-2的合成方法一致。ESIMS发现：m/z 242.4(M+1)。
7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(I-4)的制备
Figure BDA0001916144120000172
4-甲氧基吡啶-2-胺用O-乙基三异硫氰酸酯处理，得到的中间体用氨水处理得到7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(I-4)，ESIMS发现：m/z 165.3(M+1)。
6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(I-5)的制备
Figure BDA0001916144120000173
I-5的合成参考了I-4的合成。ESIMS发现：m/z 165.4(M+1)
5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(I-6)的制备.
Figure BDA0001916144120000174
在0℃下，3mL二氯甲烷中，依次加入2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺和2-(4-甲氧基吡啶-2-)乙腈，搅拌一小时。除掉溶剂，并加入了10ml的甲醇。在0℃下加入碳酸钾，搅拌1小时，去除溶剂后，用清水清洗残渣，提取到乙酸乙酯中，干燥浓缩。硅胶色谱纯化得到I-6。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：7.98(d,1H,J＝3hz),7.18(d,1H,J＝5hz),6.82(d,1H,J＝5Hz),5.56(s,1H),5.03(s,2H),3.74(s,3H)
7-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-胺(I-7)的制备
Figure BDA0001916144120000181
在15mL吡啶中，依次加入1g 2-氨基-4-甲氧基吡啶和1.7g对甲苯磺酰氯，加热到50℃14小时。冷却后，加入30mL水，过滤得到的固体干燥后溶解在DMF中，依次加入0.5g碘乙酰胺和0.4g DIEA，室温搅拌过夜。硅胶柱纯化得到中间体E溶解在20mL二氯甲烷中，加入1mL三氟乙酸酐，回流14小时，冷却后硅胶柱纯化后得中间体F。碱性条件下水解得到中间体I-7。ESIMS发现：m/z 164.4(M+1)。
6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-胺(I-8)的制备
Figure BDA0001916144120000182
I-8的合成和I-7类似。ESIMS：m/z 164.4(M+1)。1H NMR(DMSO,400MHz)：8.04(d,1H,J＝3Hz),7.07(d,1H,J＝5Hz),6.94(s,1H),6.76(d,1H,J＝5Hz),4.90(bs,2H),3.73(s,3H).
实施例1：N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物1)的制备
Figure BDA0001916144120000191
在0℃下2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酸(I-2)(0.04克,0.18毫摩尔)溶解在2mL无水DMF。然后依次加入7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2胺(I-4)(0.035克，0.21毫摩尔)，HATU(0.074克，0.19毫摩尔)和DIEA(0.068克，0.53毫摩尔)。混合物室温搅拌1小时。用饱和NaHCO3稀释，并提取到EtOAc。有机层用盐水洗两次，Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。硅胶色谱纯化得到12毫克(18％)的化合物1。ESIMS发现：m/z 374.3(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：δ10.95(s,1H),8.64(d,1H,J＝5Hz),8.50(d,1H,J＝5Hz),7.77(d,2H,j＝5Hz),7.64(s,1H),7.55(d,1H,j＝5hz),7.47(d,2H,j＝5hz),7.07(d,1H,J＝3hz),6.75(d,1H,J＝5Hz),3.89(s,3H),3.83(s,2H),2.55(s,3H)
实施例2：N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物2)的制备
Figure BDA0001916144120000192
在0℃下2-(3-甲基,4-(2-甲基吡啶-4基)苯基)乙酸(I-3)(0.06克，0.25毫摩尔)溶解在2mL无水DMF。然后依次加入7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2胺(I-4)(0.049克，0.30毫摩尔)，HATU(0.104克，0.27毫摩尔)和DIEA(0.097克，0.75毫摩尔)。混合物室温搅拌1小时。用饱和NaHCO3稀释，并提取到EtOAc。有机层用盐水洗两次,Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。硅胶色谱纯化得到18毫克(19％)化合物2。ESIMS发现：m/z 388.2(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：δ10.93(s,1H),8.64(d,1H,J＝5Hz),8.57(d,1H,J＝3Hz),7.45(s,1H),7.38(s,1H),7.30(m,3H),7.07(d,1H,J＝3hz),6.75(d,1H,J＝5hz),3.89(s,3H),3.78(s,2H),2.58(s,3H),2.33(s,3H)。
实施例3：N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物3)的制备
Figure BDA0001916144120000201
化合物3的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 373.3(M+1)。
实施例4：N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物4)的制备
Figure BDA0001916144120000202
化合物4的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 374.0(M+1)。
实施例5：N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物5)的制备
Figure BDA0001916144120000203
化合物5的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 388.5(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.92(s,1H),8.61(s,1H),8.49(d,1H,J＝3Hz),7.60(d,1H,J＝5Hz),7.40(d,1H,J＝5Hz),7.26(m,3H),7.19(d,2H,J＝5Hz),3.85(s,3H),3.79(s,2H),2.52(s,3H),2.25(s,3H)。
实施例6：N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物6)的制备
Figure BDA0001916144120000204
化合物6的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 387.3(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.92(s,1H),8.47(d,1H,J＝3Hz),8.20(s,1H),7.49(d,1H,J＝5Hz),7.16–7.49(m,5H),7.01(d,1H,J＝3Hz),6.76(s,1H),3.81(s,3H),3.71(s,2H),2.51(s,3H),2.25(s,3H)。
实施例7：N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物7)的制备
Figure BDA0001916144120000211
化合物7的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 387.3(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.87(s,1H),8.48(s,1H),8.27(d,1H,J＝3Hz),8.00(s,1H),7.25–7.35(m,3H),7.18(d,2H,J＝5Hz),6.98(d,1H,J＝5Hz),3.76(s,3H),3.70(s,2H),2.52(s,3H),2.25(s,3H)。
实施例8：N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物8)的制备
Figure BDA0001916144120000212
化合物8的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 373.0(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.91(s,1H),8.48(s,1H),8.27(S,1H),8.01(s,1H),7.73(d,2H,J＝5Hz),7.32–7.56(m,4H),6.97(d,1H,J＝7.5Hz),3.76(s,5H),2.52(s,3H)。
实施例9：N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物9)的制备
Figure BDA0001916144120000213
化合物9的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 373.1(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.92(s,1H),8.49(d,1H,J＝3Hz),8.38(d,1H,J＝5Hz),7.75(d,2H,J＝5Hz),7.60(s,1H),7.52(d,1H,J＝3Hz),7.40(d,1H,J＝5Hz),7.12(d,1H,J＝3Hz),6.63(d,1H,J＝5Hz),6.48(s,2H),4.25(s,2H),3.91(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例10：N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物10)的制备
Figure BDA0001916144120000214
化合物10的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 387.4(M+1).1H NMR(二甲亚枫,400MHz)：δ10.92(s,1H),8.47(d,1H,J＝3Hz),8.38(d,1H,J＝5Hz),7.13–7.24(m,5H),6.63(d,1H,J＝5Hz),6.48(s,2H),4.19(s,2H),3.91(s,3H),2.52(s,3H),2.24(s,3H)。
中间体化合物制备
(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)甲胺(I-9)的制备
Figure BDA0001916144120000221
室温下(4-溴苯基)甲胺(0.74克,4.0毫摩尔)溶解在40毫升无水THF中。依次加入2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)吡啶(0.90克，4.0毫摩尔)，Pd(PPh3)4(0.95克，1.0毫摩尔)和碳酸铯(2.68克，8.0毫摩尔)。反应混合物氮气下脱氧5分钟，氮气保护下加热到75℃搅拌过夜。反应冷却后，饱和NaHCO3稀释并提取成到EtOAc(3×100毫升)。有机层用盐水洗涤,Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。硅胶色谱纯化得到0.4克(49％)的I-9。ESIMS发现：m/z 199.2(M+1)。
(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)甲胺(I-10)的制备
Figure BDA0001916144120000222
室温下(4-溴-3-甲基苯基)甲胺(1.00克，5.0毫摩尔)溶解在无水THF中，依次加入2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)吡啶(1.10克，5.0毫摩尔)，Pd(PPh3)4(1.16克,1.0毫摩尔)和碳酸铯(3.26克,10.0毫摩尔)。反应混合物氮气下脱氧5分钟，氮气保护下加热到75℃搅拌过夜。反应冷却后，饱和NaHCO3稀释并提取成到EtOAc(3×100毫升)。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。硅胶色谱纯化得到0.45克(42％)的I-10。ESIMS发现：m/z 213.0(M+1)。
7-乙酰基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-11)的制备
Figure BDA0001916144120000231
4-乙酰基-2-氨基吡啶(1.2克，9.0毫摩尔)溶解在无水四氢呋喃(60毫升)中，慢慢滴加3-溴-2-氧代丙酸乙酯(2.5克，13.0毫摩尔)。产生的悬浊液回流加热6小时，冷却到室温，过滤干燥得到粗产物。酯(0.5克，2.0毫摩尔)溶解在THF(10毫升)。然后滴加氢氧化锂(0.5g，22.0毫摩尔)水溶液(10毫升)。室温搅拌过夜，浓缩。残渣酸化至pH 5。固体过滤收集，然后干燥，得到I-11。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.60(d,1H,J＝5Hz),8.46(s,1H),8.30(s,1H),7.36(d,1H,J＝3Hz),2.65(s,3H)。
7-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-12)的制备
Figure BDA0001916144120000232
I-12的制备同I-11。ESIMS发现：m/z 193.2(M+1)。
7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-羧酸(I-13)的制备
Figure BDA0001916144120000233
冷却2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺(0.87g，4mmol)的二氯甲烷溶液到0℃。然后分批慢慢加入4-甲氧基吡啶-2-胺(0.5g，4mmol)。1小时后，用乙醚稀释悬浮液，过滤收集，用乙醚清洗干燥。然后将0.5g的白色固体与2-氯-2-氧乙酸乙酯混合在吡啶中，在100℃加热18h。冷却后加入饱和碳酸钾(sat.)溶液，搅拌2小时。过滤收集固体，然后用水清洗干燥，得到产品0.3g。然后碱性条件下水解，得到中间体I-13。ESIMS发现：m/z 194.1(M+1)。6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-14)的制备
Figure BDA0001916144120000241
I-14的制备同I-11。ESIMS发现：m/z 193.2(M+1).。
6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-羧酸(I-15)的制备
Figure BDA0001916144120000242
I-15的制备同I-13。ESIMS发现：m/z 194.1(M+1)。
6-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-16)的制备
Figure BDA0001916144120000243
I-16的制备同I-11。ESIMS发现：m/z 188.2(M+1)。
7-氰基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-17)的制备
Figure BDA0001916144120000244
I-17的制备同I-11。ESIMS发现：m/z 188.2(M+1)。
实施例11：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物11)的制备
Figure BDA0001916144120000251
由I-10与上式化合物反应制备得到化合物11，其制备方法操作步骤类似化合物1的制备方法。ESIMS发现：m/z 387.0(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.74(s,1H),8.47(m,2H),8.20(s,1H),7.16-7.28(m,4H),6.86(d,1H,J＝3hz),6.70(d,1H J＝5hz),4.48(d,2H,J＝3Hz),3.86(s,3H),2.52(s,3H),2.23(s,3H)。
实施例12：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物12)的制备
Figure BDA0001916144120000252
化合物12的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 388.2(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.26(t,1H,J＝3hz),8.83(d,1H,J＝5hz),8.47(s,1H),7.15-7.29(m,5H),6.97(d,1H,J＝5hz),4.49(d,2H,J＝5hz),3.93(s,3H),2.52(s,3H),2.24(s,3H)。
实施例13：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物13)的制备
Figure BDA0001916144120000253
化合物13的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 373.4(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.31(t,1H,J＝3hz),8.83(d,1H,J＝3hz),8.48(s,1H),7.75(d,2H,J＝5Hz),7.58(s,1H),7.47(m,3H),7.22(s,1H),6.97(d,1H,J＝5Hz),4.54(d,2H,J＝3hz),3.94(s,3H),2.53(s,3H)。
实施例14：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物14)的制备
Figure BDA0001916144120000261
化合物14的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 373.2(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.92(t,1H,J＝3Hz),8.47(d,1H,J＝5Hz),8.28(d,2H J＝5hz),7.73(d,2H,J＝5hz),7.47(m,4H),7.13(d,1H,J＝3hz),4.51(d,2H,J＝3hz),3.81(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例15：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物15)的制备
Figure BDA0001916144120000262
化合物15的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 387.2(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.51(d,1H,J＝3Hz),8.13(s,1H),7.65(d,1H J＝5Hz),7.64(s,1H),7.42(d,1H,J＝5hz),7.28(d,1H,J＝3hz),7.15(d,1H,J＝5hz),7.03(m,3H),4.66(d,2H,J＝5Hz),3.84(s,3H),2.60(s,3H),2.25(s,3H)。
实施例16：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物16)的制备
Figure BDA0001916144120000263
化合物16的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 388.4(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.29(t,1H,J＝3Hz),8.72(d,1H,J＝3hz),8.47(d,1H,J＝3hz),7.82(d,2H,J＝5hz),7.54(d,1H,J＝5Hz),7.20(m,4H),4.50(d,2H,J＝3Hz),3.90(s,3H),2.51(s,3H),2.24(s,3H)。
实施例17：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物17)的制备
Figure BDA0001916144120000271
化合物17的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 374.3(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.34(t,1H,J＝3 Hz),8.72(d,1H,J＝3 hz),8.48(d,1H,J＝3 hz),7.82(d,2H,J＝5hz),7.75(d,2H,J＝5 Hz),7.48(m,4H),4.54(d,2H,J＝5 Hz),3.90(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例18：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物18)的制备
Figure BDA0001916144120000272
化合物18的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 399.2(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.85(s,1H),8.51(d,1H,J＝5 Hz),8.29(s,1H),7.79(d,1H,J＝5 Hz),7.74(s,1H),7.57(d,1H,J＝5 hz),7.30(d,1H,J＝3 hz),7.16(d,1H,J＝5 hz),7.03(m,2H),4.68(d,2H,J＝5 Hz),2.65(s,3H),2.61(s,3H),2.26(s,3H)。
实施例19：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物19)的制备
Figure BDA0001916144120000273
化合物19的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 384.4(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.87(s,1H),8.53(d,1H,J＝3 Hz),8.30(s,1H),7.79(d,1H,J＝5 Hz),7.40-7.62(m,5H),7.35(s,1H),7.29(d,1H,J＝3 hz),4.73(d,2H,J＝3 hz),2.65(s,3H),2.62(s,3H)。
实施例20：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物20)的制备
Figure BDA0001916144120000281
化合物20的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 382.3(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.64(s,1H),8.52(d,1H,J＝3Hz),8.28(s,1H),7.68(s,1H),7.64(d,1H,J＝5hz),7.35(d,1H,J＝5hz),7.29(m,1H),7.17(d,1H J＝5Hz),7.10(s,1H),7.04(d,1H,J＝5hz),4.68(d,2H,J＝5Hz),2.61(s,3H),2.26(s,3H)。
实施例21：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物21)的制备
Figure BDA0001916144120000282
化合物21的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 368.1(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.39(s,1H),9.18(t,1H,J＝5Hz),8.45(m,2H),7.75(m,3H),7.61(d,1H,J＝5Hz),7.56(s,1H),7.45(d,2H,J＝5hz),4.53(d,2H,J＝5hz),3.17(s,3H)。
2-(4-(2-甲基吡啶)-3-甲基吡啶)-乙酸(I-18)的制备.
Figure BDA0001916144120000283
I-18的合成和I-2的合成方法一致。ESIMS发现：m/z 243.2(M+1)。
实施例22：2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺(化合物22)的制备
Figure BDA0001916144120000291
化合物22的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 389.0(M+1).
实施例23：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物23)的制备
Figure BDA0001916144120000292
化合物23的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 368.2(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.22(t,1H,J＝3Hz),8.75(d,1H,J＝5Hz),8.59(s,1H),8.49(d,1H,J＝3Hz),8.41(s,1H),7.73(d,2H,J＝5Hz),7.57(s,1H),7.46(m,2H),7.30(d,1H,J＝3Hz),4.53(d,2H,J＝5hz),3.17(d,3H,J＝3hz)。
实施例24 2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺(化合物24)的制备
Figure BDA0001916144120000293
化合物24的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 389.4(M+1)。
实施例25：2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺(化合物25)的制备
Figure BDA0001916144120000294
化合物25的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 388.3(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.52(d,1H,J＝5Hz),8.33(m,2H),8.58(s,1H),7.51(s,1H),7.45(s,1H),7.12(d,1H,J＝3hz),6.59(d,1H,J＝5hz),6.38(bs,2H),4.22(s,2H),3.86(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例26：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物26)的制备
Figure BDA0001916144120000301
化合物26的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 382.3(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.65(d,1H,J＝5Hz),8.31(s,1H),8.27(d,1H,J＝3Hz),7.98(s,1H),7.77(s,1H),7.29(m,3H),7.18(d,1H J＝5Hz),7.01(d,1H,J＝5hz),4.70(d,2H,J＝3Hz),2.72(s,3H),2.26(s,3H)。
实施例27：2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙酰胺(化合物27)的制备
Figure BDA0001916144120000302
化合物27的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 388.0(M+1).1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：11.01(s,1H),8.60(m,1H),8.25(s,1H),7.70(s,1H),7.62(d,1H,J＝3Hz),7.33(m,3H),7.07(d,1H,J＝5Hz),3.90(s,3H),3.80(s,2H),2.64(s,3H),2.36(s,3H)。
实施例28：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基甲基)-7-乙酰基-咪唑[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物28)的制备
Figure BDA0001916144120000303
化合物28的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 388.0(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.09(t,1H,J＝3Hz),8.65(d,1H,J＝5Hz),8.56(s,1H),8.50(d,1H,J＝3Hz),8.27(s,1H),7.76(d,2H,J＝5Hz),7.62(s,1H),7.53(d,1H,J＝3Hz),7.48(d,1H,J＝5hz),7.40(d,1H,J＝5hz),4.55(d,2H,J＝5hz),2.67(s,3H),2.54(s,3H)。
实施例29：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物29)的制备
Figure BDA0001916144120000304
化合物29的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 398.0(M+1).1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.03(t,1H,J＝3Hz),8.65(d,1H,J＝5Hz),8.56(s,1H),8.52(d,1H,J＝3Hz),8.27(s,1H),7.40(d,1H,J＝5Hz),7.31(m,4H),4.51(d,2H,J＝5Hz),2.67(s,3H),2.55(s,3H),2.25(s,3H)。
5-甲氧基吡唑[1,5-a]吡啶-2-甲酸(I-19)的制备
Figure BDA0001916144120000311
在3mL二氯甲烷中加入4-甲氧基吡啶(0.51克，5mmol)，在0℃下加入2,4,6-三甲基苯磺酰羟胺(1g，5mmol)。搅拌1小时。去除溶剂，并添加5ml DMSO。将反应液冷却至0℃后慢慢加入K2CO3。然后滴加丁炔二酸二乙酯(0.66g，5mmol)。由此产生的红色悬浮物在通入空气的情况下强烈搅拌3个小时。用冰水稀释，提取到乙酸乙酯中。有机相用盐水清洗，干燥，浓缩得到粗产品。然后加入5mL硫酸/水(1:1)加热到80℃ 3小时。用冰水冷却后，30％的NaOH中和后，用1N HCl酸化至pH 2～3。过滤和干燥得到固体酯。酯在LiOH中水解，得到中间体I-19。ESIMS发现：m/z 193.2(M+1)。
6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-羧酸(I-20)的制备
Figure BDA0001916144120000312
I-20的合成和I-19的合成方法一致。ESIMS发现：m/z 193.2(M+1)。
7-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-羧酸(I-21)的制备
Figure BDA0001916144120000321
I-21的合成和I-19的合成方法一致。ESIMS发现：m/z 231.2(M+1)。
5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸(I-22)的制备
Figure BDA0001916144120000322
I-22的合成和I-16的合成方法一致。ESIMS发现：m/z 231.2(M+1)。
实施例30：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物30)的制备
Figure BDA0001916144120000323
化合物30的制备同化合物1。ESIMS找到：m/z 387.0(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.93(t,1H,J＝3hz),8.52(d,1H,J＝5hz),8.47(d,1H,J＝3hz),7.11-7 28(m,6H),6.80(s,1H),6.72(dd,1H,J＝5hz),4.47(d,2H,J＝5hz),3.85(s,3H),2.67(s,3H),2.52(s,3H),2.23(s,3H)。
实施例31：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物31)的制备
Figure BDA0001916144120000324
化合物31的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 373.0(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：8.97(t,1H,J＝3Hz),8.52(d,1H,J＝5hz),8.47(d,1H,J＝5hz),7.74(d,2H,J＝5hz),7.48(m,4H),7.11(d,1H,J＝3Hz),6.80(s,1H),6.70(d,1H,J＝5Hz),4.52(d,2H,J＝3Hz),3.85(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例32：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物32)的制备
Figure BDA0001916144120000331
化合物32的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 425.4(M+1)。1H核磁共振(CDCl3,400兆赫)：8.62(d,1H,J＝5hz),7.83(d,1H,J＝8Hz),7.69(m,2H),7.37(m,2H),7.28(m,3H),4.74(d,2H,J＝5Hz),2.96(s,3H),2.35(s,3H)。
实施例33：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物33)的制备
Figure BDA0001916144120000332
化合物33的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 387.0(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.02(t,1H,J＝3Hz),8.47(d,1H,J＝5hz),8.31(d,1H,J＝5Hz),7.22(m,4H),6.98(m,3H),6.71(d,1H,J＝5hz),4.48(d,2H,J＝3Hz),3.97(s,3H),2.52(s,3H),2.23(s,3H)。
实施例34：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物34)的制备
Figure BDA0001916144120000333
化合物34的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 372.7(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.06(t,1H,J＝3Hz),8.47(d,1H,J＝5hz),8.31(d,1H,J＝5Hz),7.74(d,2H,J＝5Hz),7.56(s,1H),7.46(m,3H),6.98(m,2H),6.72(d,1H,J＝3Hz),4.52(d,2H,J＝3Hz),3.97(s,3H),2.52(s,3H)。
实施例35：N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物35)的制备
Figure BDA0001916144120000341
化合物35的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 425.0(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.16(t,1H,J＝3Hz),8.46(d,1H,J＝5hz),8.31(d,1H,J＝5hz),7.99(d,1H,J＝7hz),7.69(d,1H,J＝5Hz),7.54(m,1H),7.22(m,5H),4.52(d,2H,J＝3Hz),2.52(s,3H),2.23(s,3H)。
实施例36：N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺(化合物36)的制备
Figure BDA0001916144120000342
化合物36的制备同化合物1。ESIMS发现：m/z 411.1(M+1)。1H核磁共振(亚砜,400兆赫)：9.21(t,1H,J＝3Hz),8.47(d,1H,J＝5Hz),8.31(s,1H),8.00(d,1H,J＝75hz),7.74(d,2H,J＝5hz),7.69(d,1H,J＝5hz),7.54(m,5H),4.55(d,2H,J＝3Hz),2.52(s,3H)。
生物学活性试验
WNT通路活性研究
为证实本发明化合物对WNT通路活性是否有抑制作用，选择荧光素酶报告基因系统完成检测。以下实验采用L-Wnt3a细胞和HEK293/STF细胞共培养，其中L-Wnt3a细胞是WNT蛋白生成细胞，HEK293/STF细胞为WNT蛋白响应细胞。
经典的WNT信号通路需要β-catenin入核，进而与转录因子TCF/LEF结合形成复合物，共同起始下游调控基因的转录。HEK293/STF细胞株携带SuperTopflash(STF)报告基因(在报告基因中7个LEF/TCF串联DNA结合位点驱动萤火虫荧光素酶表达)，能够在Wnt/Norrin信号诱导下表达荧光素酶，因此可以通过检测荧光素酶表达水平方便地检测Wnt/Norrin-β-catenin信号通路的活化程度。
材料和方法：
依据用户手册，人胚胎肾脏293细胞(HEK293)(美国培养收集,ATCC,Mansassas,VA)，共转染STF-reporter 5-8xTCF/Lef-luc plus pcDNA3.1-Neo(Invitrogen,Carlsbad,CA)以及FuGENE6(Roche Diagnostics,Indianapolis,IL)。HEK293/STF细胞系于加有10％FBS(Hyclone)、50unit/ml青霉素、50ug/ml链霉素(Invitrogen,Carlsbad,CA)的Dulbecco’s modified Eagle’s完全培养基(DMEM)(Gibco/Invitrogen,Carlsbad,CA)中，在37摄氏度，5％CO2下，经G418筛选，获得稳定细胞系。为验证WNT信号通路的作用，HEK293/STF稳定细胞系与L-Wnt3a细胞(
Figure BDA0001916144120000351
CRL-2647TM)以1：1比例混合，在37摄氏度，5％CO2条件下，于96孔板中共培养(20K+20K)过夜。化合物用DMEM培养基稀释成不同浓度，与新鲜培养基一同以100ul/孔更换培养过夜的培养基，细胞在化合物处理下培养24小时。按50ul/孔从细胞培养板中取出培养基，加入50ul/孔的Bright-Glo试剂(Bright-Glo荧光素酶检测试剂盒，Promega，Madison，WI)，混匀60秒并常温避光孵育10分钟。在Envision上读板，剂量反应的IC50值由GraphPad Prism 6软件计算获得。
测试化合物以及它们的IC50值。
化合物 IC50(nM)
6 56.02
7 1.45
8 10.78
15 39.79
18 16.21
27 25.53
根据所示结果，共培养L-Wnt3a细胞诱导的STF报告基因活性会被化合物所抑制，这一现象不出现在单独培养的HEK293/STF细胞中，提示所述化合物具有抑制WNT信号通路的活性，且抑制作用发生在L-Wnt3a和受体作用的上游。
抑制作用与细胞死亡无关：
为证实STF报告分子的抑制作用并非源于细胞死亡，化合物使用CellTiter-Glo(CTG)(Promega,Madison,WI)进行测试。CTG实验采用HEK293/STF细胞与L-Wnt 3a细胞共培养，培养方法如上所述。实验中，直接加入50ul/孔CTG试剂，混匀60秒并常温避光孵育10分钟。用Envision读板。STSP(星形孢菌素，staurosporine)作为本实验参照化合物使用。实验使用Evision读板系统监测，重复样本的值用均数±标准误表示。剂量反应的IC50值由GraphPad Prism 6计算获得。结果显示，化合物浓度在10-11～10-6mol/L逐渐上升过程中，STSP处理的细胞存活率由100％逐渐降至80％，而测试的本发明化合物处理的细胞存活率能够保持在100％～120％之间，说明测试的本发明化合物对WNT信号通路的抑制作用与细胞死亡无关。

Claims (12)

1.一种结构式I的化合物，或药学上可接受的盐，
Figure FDA0003056451830000011
其中：
Figure FDA0003056451830000012
具有选自如下Ia、Ib、Ic、IIa、IIb或IIc的结构，其中：
式Ia结构化合物
Figure FDA0003056451830000013
式Ib结构化合物：
Figure FDA0003056451830000014
式Ic结构化合物：
Figure FDA0003056451830000015
式IIa结构化合物
Figure FDA0003056451830000016
式IIb结构化合物
Figure FDA0003056451830000021
或，式IIc结构化合物
Figure FDA0003056451830000022
其中，R1，R2分别代表H，F，Cl，Br，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3亚烷基羟基；R3，R4，R’3，R’4可在所在环的任意取代位置，其中R3，R4，R’3，R’4独立代表H，F，Cl，Br，I，CN，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，OR5，COR5；
R5代表H，C1-C6烷基，C2-C4亚烷基羟基；
所述“取代的”表示所述基团进一步被F所取代；
X1为C，Y1为C或N，Z1为C；
A选自下列结构式代表的芳基或杂芳基，
Figure FDA0003056451830000023
其中R3，R4在所连接环的任意可取代位置，R3，R4的定义和上述相同。
2.如权利要求1所述化合物，或药学上可接受的盐，其中，
R1，R2分别代表H；
R3，R4可在所在环的任意取代位置，独立代表H，F，C1-C6烷基，OR5，COR5；
R’3，R’4可在所在环的任意取代位置，独立代表H，C1-C6烷基；
R5代表H，C1-C6烷基；
X1为C，Y1为N，Z1为C。
3.如权利要求1或2所述化合物，或药学上可接受的盐，其中，选自式Ia结构化合物
Figure FDA0003056451830000031
式Ic结构化合物：
Figure FDA0003056451830000032
式IIa结构化合物
Figure FDA0003056451830000033
或，式IIc结构化合物
Figure FDA0003056451830000034
A为
Figure FDA0003056451830000035
4.如权利要求1或2所述化合物，或药学上可接受的盐，所述化合物选自：
Figure FDA0003056451830000036
Figure FDA0003056451830000041
Figure FDA0003056451830000051
Figure FDA0003056451830000061
Figure FDA0003056451830000071
Figure FDA0003056451830000081
5.如权利要求1或2所述化合物，或药学上可接受的盐，所述化合物选自：
N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)-2-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-6-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-氰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
2-(2',3-二甲基-[2,4'-联吡啶]-5-基)-N-(6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基甲基)-7-乙酰基-咪唑[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-乙酰基-咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-7-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-4-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-甲酰胺、
N-(3-甲基-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺，或
N-(4-(2-甲基吡啶-4-基)苯甲基)-5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺。
6.权利要求1-5任一项所述的式I化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗WNT信号通路相关疾病的药物中的用途。
7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述WNT信号通路相关疾病选自肿瘤、畸形综合症、骨或软骨疾病、糖尿病或其并发症、组织纤维化。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述骨或软骨疾病选自：骨质疏松症、骨关节炎、骨软骨病；所述糖尿病或其并发症选自：II型糖尿病、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性肾病、糖尿病性脑血管病；所述肿瘤选自：结肠直肠癌、结肠癌、胃癌、食道癌、骨肉瘤、乳腺癌、宫颈鳞状细胞癌、子宫内膜癌、间皮瘤、胰腺癌、膀胱癌、前列腺癌、肺癌、肝细胞癌、髓母细胞瘤、肝母细胞瘤、胃肠类癌、卵巢癌、黑色素瘤、头颈部鳞状细胞癌、甲状腺癌、肾母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、胶质瘤，白血病；所述组织纤维化选自：肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化、骨髓纤维化。
9.一种药物组合物，其包含权利要求1-5任一项所述的式I化合物或其药学上可接受的盐。
10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物进一步含有药学上可接受的载体。
11.如权利要求9或10所述的药物组合物，其特征在于，进一步含有第二种治疗剂，所述第二种治疗剂是其他的治疗WNT信号通路相关疾病的药物。
12.如权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述第二种治疗剂选自氮芥、环磷酰胺、顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、卡培他滨、雷替曲塞、6-巯嘌呤、阿糖胞苷、吉西他滨、氨甲喋呤、培美曲塞、羟基脲、阿霉素、柔红霉素、表柔比星、吡柔比星、羟喜树碱、伊立替康、拓扑替康、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇、托瑞米芬、依西美坦、来曲唑、比卡鲁胺、恩杂鲁胺、甲羟孕酮、甲地孕酮、丙酸睾丸酮、戈舍瑞林、亮丙瑞林、伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、索拉菲尼、舒尼替尼、拉帕替尼、阿帕替尼、曲妥珠单抗、帕尼单抗、西妥昔单抗、帕妥珠单抗、贝伐单抗、雷莫芦单抗、利妥昔单抗、派姆单抗、伊匹单抗。
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