CN105051051B

CN105051051B - 用于合成神经鞘磷脂和二氢神经鞘磷脂的方法

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Publication number: CN105051051B
Application number: CN201480015700.6A
Authority: CN
Inventors: D·C·奥尼丘; S·海克霍夫; B·奥斯瓦尔德; P·瑞伯曼恩; A·皮尔; M·冈赞勒兹; P·萦特
Original assignee: Saris Treatment Holdings
Current assignee: Saris Treatment Holdings
Priority date: 2013-03-15
Filing date: 2014-03-14
Publication date: 2021-07-16
Anticipated expiration: 2034-03-14
Also published as: WO2014140787A3; EP2970344A2; KR20150132188A; JP2016511281A; US20170204122A1; CA2900902C; ES3017659T3; EP3363805B1; PH12015501835B1; US20160075634A1; SG11201506456VA; EP3363805A1; EP3842443A1; HK1212705A1; DK3363805T3; AU2014229638B2; EP3842443B1; US20140316154A1; AU2014229638A1; BR112015023558A2

Abstract

本发明包括用于神经鞘磷脂和二氢神经鞘磷脂合成的方法。本发明还包括用于神经鞘氨醇和二氢神经鞘氨醇合成的方法。本发明进一步包括用于神经酰胺和二神经酰胺合成的方法。

Description

用于合成神经鞘磷脂和二氢神经鞘磷脂的方法

在先申请的相关引用

本申请要求保护2013年3月15日提交的美国临时申请号为61/801,641的申请以及2013年7月23日提交的欧洲专利申请号为13306056.6的申请的权益。上述申请的内容已经通过引证全部并入本文。

发明背景

神经鞘磷脂是生物膜和血浆脂蛋白的主要磷脂成分。神经鞘磷脂由神经酰胺中心(通过酰胺键连接到肪酸的神经鞘氨醇)和磷酸胆碱头部基团(如式1中左图所示)构成。二氢神经鞘磷脂是神经鞘磷脂的饱和同系物，并且具有一个饱和的酰胺中心，也就是通过酰胺键连接到脂肪酸的二氢神经鞘磷脂(如式1中右图所示)。

式1

通常在天然存在的神经鞘磷脂中发现的神经鞘氨醇是D-赤型-神经鞘氨醇，一种具有不饱和烃链的18个碳的氨基醇，具有D-赤型的立体化学构型。该神经鞘氨醇的IUPAC名称为(2S，3R，E)-2-氨基十八碳-4-烯基-1，3-二醇(化合物A)。二氢神经鞘磷脂，D-赤型-二氢神经鞘氨醇，是其饱和同系物，IUPAC命名为(2S，3R)-2-氨基十八碳烷-1，3-二醇(化合物B)。

市售的神经鞘磷脂通常是天然的产品，其包括天然存在的神经鞘磷脂的混合物。这些混合物的实际组成会依据生物来源而变化，并且含有多种脂肪酸链长。N-棕榈酰神经鞘磷脂是天然神经鞘磷脂的主要成分。

N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物C)，棕榈酰神经鞘磷脂的异构体之一，其IUPAC命名为N-((2S，R，E)-1，3-二羟基十八碳-4-烯-2-基)棕榈酸酰胺，被认为是主要的天然存在的异构体。其相应的二氢神经鞘磷脂，N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物D)，具有的IUPAC命名为(2S，R)-3-羟基-2-棕榈酸酰胺十八烷基(2-(三甲基铵)乙基)磷酸盐。

现在还没有研发出相关神经鞘磷脂的这种天然来源的工业和经济相关的合成替代品。本领域已知的合成途径还没有用于神经鞘磷脂的大规模合成，尤其是那些含有具有12到25个碳的脂肪酸。

神经酰胺N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物E)和N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物F)分别在N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂和N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的合成中是中间体。

发明概述

在一个实施方式中，本发明提供用于合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法，包括下述步骤：

a)保护具有下述结构的L-丝氨酸酯的氨基基团：

其中R是C1-5烷基或其盐，使用叔丁基羰基基团的，从而产生Boc-保护的L-丝氨酸酯；

b)在有效产生相应的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸的C1-C5烷基酯的条件下，在苯磺酸存在下，使Boc-保护的L-丝氨酸酯与2，2-二甲氧基丙烷进行反应；

c)在有效产生(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷的条件下，在正丁基锂的存在下使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸的相应的C1-C5烷基酯与二甲基膦酸盐进行反应；

d)在有效产生(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的条件下，使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷与1-十四烷醛进行反应；

e)a在有效产生(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的条件下，使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷与硼氢化钠和三氯化铈进行反应；以及

f)在有效产生D-赤型-神经鞘氨醇的条件下，去除(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的叔丁氧基羰基(Boc)保护基团。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的方法，包括步骤：

a)在有效产生(1R，2R，5R)-乙基-((2-羟基蒎烷-3-基乙烯)氨基)乙酸酯的条件下，使((1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮与甘氨酸乙酯进行反应；

b)在有效产生(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸甲酯和(2S，3R，E)-异炳基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸甲酯其中之一或二者的条件下，在三异丙氧基氯化钛和三乙胺存在下使(1R，2R，5R)-乙基-((2-羟基蒎烷-3-二甲苯基)氨基)乙酸乙酯(化合物IIIb)与2-(E)-十六碳烯-1-醛进行反应；

c)在有效产生(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸乙酯和(2R，3R，E-丙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸甲酯的其中之一或二者的条件下，使(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯的其中之一或二者与盐酸进行反应；

d)在有效产生D-赤型-神经鞘氨醇的条件下，使(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯以及(2R，3R，E)-丙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯的其中之一或二者与硼氢化钠进行反应；以及

e)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的条件下，使D-赤型-神经鞘氨醇与棕榈酸进行反应。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，其包括步骤：

a)在有效产生D-赤型-神经酰胺的条件下，使D-赤型-神经鞘氨醇与脂肪酸进行反应；

b)在有效产生1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺的条件下，使D-赤型-神经酰胺与三苯甲基化试剂进行反应；

c)在有效产生1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的条件下，使1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺与苯甲酰试剂进行反应；

d)去除1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的三苯甲基基团，从而得到D-赤型-3-O-苯甲酰基-神经酰胺；

e)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰-D-赤型-神经酰胺与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺与三甲胺进行反应；以及

g)在有效产生N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，去除N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的苯甲酰基基团。

在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于合成D-赤型-3-O-苯甲酰基-神经酰胺的方法，其包括步骤：

a)在有效产生1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺的条件下，使D-赤型-神经酰胺与三苯甲基化试剂进行反应；

b)在有效产生1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的条件下，使1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺与苯甲酰化试剂进行反应；以及

c)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的条件下，去除1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的三苯甲基基团。

a)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺与三苯甲基化试剂进行反应；

b)使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺与三甲胺进行反应，从而产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺；以及

c)在有效产生N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，去除3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的苯甲酰基基团。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法，其包括步骤：

a)在有效产生D-赤型-二氢神经酰胺的条件下，使D-赤型-二氢神经鞘氨醇与脂肪酸进行反应；

b)在有效产生1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经酰胺的条件下，使D-赤型-二氢神经酰胺与三苯甲基化试剂进行反应；

c)在有效产生1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺的条件下，使1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经酰胺与苯甲酰化试剂进行反应；

d)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺的条件下，去除1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺的三苯甲基基团；

e)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)二氢神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)二氢神经酰胺与三甲胺进行反应；以及

g)在有效产生N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，去除N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂中的苯甲酰基基团。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，其包括步骤：

a)在有效产生N-((2S，3R，E)-1-((1，3，2-二氧杂磷环戊基-2-基)氧基)-3-羟基十八碳-4-烯-2-基)棕榈酰胺的条件下，使N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇与乙烯卤代亚磷酸盐进行反应；

b)在有效产生2-溴乙基((2S，3R，E)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八碳-4-烯-1-基)磷酸溴的条件下，使N-((2S，3R，E)-1-((1，3，2-二氧杂磷环戊基-2-基)氧基)-3-羟基十八碳-4-烯-2-基)棕榈酰胺与溴进行反应；以及

c)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，使2-溴乙基((2S，3R，E)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八碳-4-烯-1-基)磷酸溴与三甲胺进行反应。

在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法，其包括步骤：

a)在有效产生N-((2S，3R)-1-((1，3，2-二氧杂磷环戊-2-基)氧基)-3-羟基十八烷-2-基)棕榈酰胺的条件下，使N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇与乙烯氯代磷酸盐进行反应；

b)在有效产生2-溴代乙基((2S，3R)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八烷基)磷酸溴的条件下，使N-((2S，3R)-1-((1，3，2-二氧杂磷环戊-2-基)氧基)-3-羟基十八烷-2-基)棕榈酰胺与溴进行反应；以及

c)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，使2-溴代乙基((2S，3R)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八烷基)磷酸溴与三甲胺进行反应。

在一个进一步的实施方案中，本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，其包括步骤：

a)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

b)在有效产生N-酰基-3-O-D-赤型-苯甲酰基-神经鞘磷脂的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺与三甲胺进行反应；以及

c)在有效产生N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，去除3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)神经酰胺的苯甲酰基基团。

在又一个实施方案中，本发明提供了下述化合物，这些化合物可以作为中间体应用于本发明的方法中：

其中，Ac是具有3-36个碳以及0-6个碳-碳双键的脂肪酸残基；并且R是C1-5烷基。

附图简要说明

附图1是天然存在的蛋神经鞘磷脂的¹H NMR波谱。

附图2是根据本发明所述的方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的¹H NMR波谱。

附图3是根据本发明所述的方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的¹H NMR波谱。

附图4是从R-甲氧基苯乙酸与天然存在的蛋神经鞘磷脂的反应混合物中选取的样本的¹H NMR波谱。

附图5是从R-甲氧基苯乙酸与根据本发明所述的方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的反应混合物中选取的样本的¹H NMR波谱。

附图6是从R-甲氧基苯乙酸与根据本发明所述的方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的反应混合物中选取的样本的¹H NMR波谱。

附图7是一种样本的¹H NMR波谱，该样本取自1当量的蛋神经鞘氨脂以及1.2当量的R-(-)-MPA甲氧基苯乙酸(R-MPA)和S-(+)-甲氧基苯乙酸(S-MPA)的外消旋混合物的反应混合物、1.2当量的二环己基碳二亚胺(DCC)、以及催化剂量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(底部图)、以及1D-TOCSY(1维-全相关谱图)波谱图，其显示了在R-MPA(顶部图)和S-MPA(中间图)脂类中的选择性激发的H2氢峰。

附图8是粗加工N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)的薄层色谱板的照片。在标记“粗加工产物”一栏中，标记为“A”的点是N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物E)，标记为“B”的点是N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)，标记为“C”的点是N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(苯甲酰基基团迁移的产物)，标记为“D”的点是三苯基甲醇(trityl-OH)，以及标记为“E”的点是N-棕榈酰-1，3-O，O-联苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇。

具体实施方式

本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的方法。本发明还提供了用于合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法。本发明还提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法。本发明还提供了用于D-赤型-二氢神经鞘氨醇的合成的方法。本发明还提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇和N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的方法。

本发明也提供了用于以千克量级合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法。在一个具体的实施方案中，所述D-赤型-神经鞘氨醇是N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇。

本发明还提供了以千克量级合成D-赤型-二氢神经鞘氨醇的方法。在一个具体的实施方案中，所述D-赤型-二氢神经鞘氨醇是N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。

本发明提供了用于合成神经鞘磷脂的方法。所述方法提供了大规模合成基本上对映体纯的化合物以及基本上对映体纯的中间体的应用。“基本上对映体纯的”的化合物含由其相应的相反对映体不超过大约10mol％，在另一个实施方案中其相应的相反对映体不超过大约5mol％，在另一个实施方案中其相应的相反对映体不超过大约2mol％，在另一个实施方案中其相应的相反对映体不超过大约1mol％，并且在另一个实施方案中其相应的相反对映体不超过大约0.1mol％。在某些实施方案中，本发明提供了用于制备具有脂肪酸链长度为12到25个碳的神经鞘磷脂的方法。

本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的方法。在本发明的某些实施方案中，所述D-赤型-神经鞘磷脂可以使用一种合适的L-丝氨酸酯(甲基、以及、异丙级、正丁基等)以一种大的、商业上相关的规模被合成。本发明所述的方法对于D-赤型-神经鞘磷脂的制备是有利的。

本发明还提供了有效用于D-赤型-神经鞘氨醇的合成的方法。

本发明还提供了使用本发明在这里所描述的方法可合成的化合物，包括有效作为中间体的化合物。

本发明进一步提供了在这里所描述的方法的每个单独的步骤，其有效用于合成在这里所公开的方法的中间体或产物。

正如在这里所描述的，神经鞘磷脂具有一个连接到极性头部基团的神经酰胺核心。

神经酰胺核心包括通过酰胺键连接到脂肪酸上的神经鞘氨醇。当使用术语“神经酰胺-C_n”时，n是整数，并且指的是在脂肪酸残基中碳(C)的个数，例如，神经酰胺-C16指的是具有16-碳脂肪酸残基的神经酰胺核心，例如棕榈酰，以及神经酰胺-C18指的是具有18-碳的脂肪酸残基的神经酰胺核心，例如十八酰基(硬脂酰)。

当使用“神经酰胺”或者“神经酰胺核心”而没有具体指出脂肪酸碳链长度时，此时应当理解的是所述脂肪酸碳链可以是任意适合的长度。

正如在这里所使用的，术语“神经鞘磷脂”叙述了连接到磷酰胆碱官能团上的神经酰胺核心。

脂肪酸是一种羧酸，具有一种长脂肪族尾部，其可以是饱和的或者是不饱和的。不饱和脂肪酸具有一个或多个碳-碳双键，并且每个碳-碳双键能够以顺式或反式构型存在。一种脂肪酸残基指的是脂肪酸其脂肪酸的羧基中的-OH基团较少。正如在这里所使用的，术语“Ac”指的是脂肪酸残基。

在本发明的实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键。在本发明的具体实施方案中，所述脂肪酸或脂肪酸残基具有4到28个碳以及0到6个碳-碳双键。在本发明的进一步实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有11到25个碳以及0到6个碳-碳双键。在本发明的另一个实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有11到25个碳以及0或2个碳-碳双键。在本发明的进一步实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有14到20个碳以及0-6个碳-碳双键。在本发明的又一个实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有15到17个碳以及0到6个碳-碳双键。在本发明的一个具体实施方案中，脂肪酸或脂肪酸残基具有是棕榈酰团。

适合的脂肪酸还包括，但不限于，ω-脂肪酸例如ω-3脂肪酸、或者ω-6脂肪酸、或者ω-9脂肪酸；以及必须脂肪酸，例如，但不限于，亚油酸(LA)、α-亚麻酸(ALA)、n-3脂肪酸，例如，二十碳五烯酸(EPA)以及二十二碳六烯酸(DHA)。

在本发明中有效的适合的脂肪酸包括，但不限于，丙酸，丁酸，戊酸，己酸，庚酸，辛酸，壬酸，癸酸，十一烷酸，月桂酸，十三烷酸，肉豆蔻酸，十五烷酸，棕榈酸，十七酸，硬脂酸，十九(nonadecylic)酸，花生酸，二十一(heneicosylic)酸，山嵛酸，二十三(tricosylic)酸，木蜡酸，二十五(pentacosylic)酸，蜡酸，二十七(heptacosylic)酸，褐煤酸，二十九烷(nonacosylic)酸，蜂花酸，三十一(henatriacontylic)酸，蜂花酸，三十三(psyllic)酸，三十四(geddic)酸，蜡塑酸，三十六(hexatriacontylic)酸，肉豆蔻脑酸，棕榈油酸，棕榈酸，油酸，反油酸，异油酸，亚油酸，反亚油酸，α-亚麻酸和芥酸。

如果所述脂肪酸是一种单一不饱和脂肪酸，其可以是顺式或者反式的单一不饱和脂肪酸，例如但不限于，油酸、反油酸、肉豆蔻脑酸、棕榈油酸、棕榈酸、油酸、反油酸、异油酸和芥酸

正如在这里所使用的，“C₁₃H₂₇-”以及“C₁₅H₃₁-”分别指的是CH₃(CH₂)₁₂-以及CH₃(CH₂)₁₄-。

正如在这里所使用的，术语“酰基”指的是一种通式为-C(O)R的基团，其中R是一种具有2到35个碳以及0到6个碳-碳双键的烷基。

本发明的某些化合物可以是一种盐的形式。在某些实施方案中，所述盐是一种药学上可接受的盐。药学上可接受的盐包括，例如酸加成盐和碱加成盐。形成一种酸加成盐的酸可以是一种有机酸或者一种无机酸。形成一种碱加成盐的碱可以是一种有机碱或者一种无机碱。在某些实施方案中，药学上可接受的盐是一种金属盐。在某些实施方案中，药学上可接受的盐是一种铵盐。

酸加成盐可以在将一种酸添加至本发明的游离碱型的化合物中形成。在某些实施方案中，所述酸是有机的。在某些实施方案中，所述酸是无机的。适合的酸的非限定的实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、亚硝酸、硫酸、亚硫酸、磷酸、烟酸、异烟酸、乳酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、酒石酸、抗坏血酸、龙胆酸、葡糖酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸、甲酸、苯甲酸、谷氨酸、泛酸、醋酸盐、丙酸、酪酸、延胡索酸、琥珀酸，柠檬酸、乙二酸、马来酸、羟基马来酸、甲基丁烯二酸、乙醇酸、苹果酸、肉桂酸、扁桃酸、2-苯氧基苯甲酸、2-邻乙酰氧基苯甲酸、扑酸、苯乙酸、N-环己氨基磺酸、甲基磺酸、乙二酸、苯磺酸、p-甲苯磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、4-甲基苯磺酸、萘-2-磺酸、萘-1，5-二磺酸、2-磷酸甘油酸、3-磷酸甘油酸、葡萄糖-6-磷酸，以及氨基酸。

合适的酸加成盐的非限制性的实例包括氢氯化物盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、亚硝酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐盐、磷酸二氢盐盐、碳酸盐盐、重碳酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、4-对氨基水杨酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、龙胆根黄素的盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛盐、一种葡萄糖二盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、泛酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、延胡索酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、甲基马来酸盐、甘醇酸酯盐、苹果酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐盐、2-苯氧基苯甲酸盐、2-乙酰氧基苯甲酸盐、双羟萘酸盐、乙酸苯酯盐、N-环已基氨基磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、p-甲苯磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乙烷-1，2-二磺酸盐、4-甲基苯磺酸盐、萘基-2-磺酸盐、萘基-1，5-二磺酸盐、2-磷酸甘油酸盐、3-磷酸甘油酸酯盐、葡萄糖-6-磷酸盐、以及氨基酸盐。

金属盐可以通过将无机碱添加到具有羧基基团的本发明的化合物中形成。所述无机盐由金属阳离子与碱反荷离子相配对而构成，比如，举例来说，氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或磷酸盐。所述金属可以是碱金属、碱土金属、过渡金属、或主族金属。合适的金属的非限制性实例包括锂、钠、钾、铯、铈、镁、锰、铁、钙、锶、钴、钛、铝、铜、镉及锌。

合适的金属盐的非限制性实例包括锂盐、钠盐、钾盐、铯盐、铈盐、镁盐、锰盐、铁盐、钙盐、锶盐、钴盐、钛盐、铝盐、铜盐、镉盐，以及锌盐。

铵盐可以通过将氨或一种有机胺添加到具有羧基基团的本发明所述的化合物中形成。合适的有机胺的非限制性实例包括三乙胺、二异丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、吗啉、N-甲基吗啉、哌啶、N-哌可啉、N-乙基哌啶、二苄胺、哌嗪、吡啶、吡唑、咪唑、吡嗪、哌嗪、乙二胺、N，N′-二苄基乙烯二胺、普鲁卡因、氯普鲁卡因、胆硷、二环己基胺，以及N-甲葡糖胺。

合适的铵盐的非限制性实例包括三乙基铵盐、二异丙基铵盐、乙醇铵盐、二乙醇铵盐、三乙醇铵盐、吗啉盐、N-甲基吗啉盐、哌啶盐、N-甲基哌啶盐、N-乙基哌啶盐、二苄铵盐、哌嗪盐、吡啶盐、吡唑盐、咪唑盐、吡嗪盐、乙基二铵盐、N，N′-二苄基乙基二铵盐、普鲁卡因盐、氯普鲁卡因盐、胆碱盐、二环己基铵盐、和N-甲葡糖铵盐。

术语“大约”当与所引用的数字指示一起使用时，意思是所引用的数字指示加上或减去该引用的数字指示的10％。举例来说，“大约50”的说法涵盖了45到55的范围。

一般方法

“Trt”表示三苯甲基(三苯甲基(triphenylmethyl))保护基团，具有结构：

正如在这里所使用的，三苯甲基化试剂包括，但不限于，三苯甲基卤化物例如三苯甲基氯和三苯甲基溴。

三苯甲基保护基团的脱去通常依据如下所述进行：将三苯甲基保护的神经鞘磷脂溶入到有机溶剂中，并且添加一种酸。在大约22℃的温度下进行反应1到16个小时。反应混合物通过添加一种碱进行中和。所述有机溶剂可以是一种质子极性溶剂、一种非质子极性溶剂、或者它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种质子极性溶剂，并且是甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇。在一个实施方案中，所述有机溶剂是非质子极性溶剂。在一个实施方案中，所述非质子极性溶剂是氯化的，并且是二氯甲烷、氯仿、或者四氯化碳。在另一个实施方案中，所述非质子极性溶剂是非氯化的，并且是乙醚、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述酸可以是本领域普通技术人员已知的适用于三苯甲基保护基团脱去的任意的酸，例如，乙酸、三氟乙酸、盐酸和对甲苯磺酸。在本发明的某些实施方案中，所述酸是对甲苯磺酸。在具体的实施方案中，所述碱是一种有机碱，例如三乙胺或吡啶。

“Bz”表示苯甲酰保护基团，具有结构：

正如在这里所使用的，苯甲酰化试剂包括，例如，但不限于，苯甲酰卤化物例如苯甲酰氯和三苯甲基溴。

苯甲酰保护基团的脱去通常依据如下所述进行：苯甲酰保护的神经鞘磷脂溶入到有机溶剂中，并且添加一种碱。在大约22℃进行反应8到24个小时。在一个实施方案中，所述质子极性溶剂是甲醇、乙醇、正-丙醇、异丙醇、或它们的混合物。在另一个实施方案中，所述碱是甲醇钠、碳酸钾、氢氧化锂。在一个具体的实施方案中，所述碱是甲醇钠。

D-赤型-神经鞘氨醇

在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于使用L-丝氨酸酯合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法，例如在方案I中的化合物Ia，其中R是C1-5烷基。在这里所使用的术语“烷基”，除非另有定义，指的是一种直链、支链、或环状饱和的派生自从链烷烃中去除一个氢原子的基团。代表性的直链烷基包括-甲基、-乙基、-丙基、-正丁基、和-n-戊基。代表性的支链烷基包括-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、-新戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1，1-二甲基丙基和1，2-二甲基丙基。代表性的环烷基包括环戊基和环丙基。

在某些实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丝氨酸甲酯。在另一个实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丝氨酸乙酯。在又一个实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丁酯。

在本发明的一个实施方案中，D-赤型-神经鞘氨醇是通过方案I所示的方法合成的，其包括下述步骤：

a)用叔丁氧基羰基保护L-丝氨酸酯(化合物Ia)的氨基基团，从而产生Boc-保护的L-丝氨酸酯(化合物Ib)；

b)在有效形成相应的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸(化合物Ic)的C1-C5烷基酯的条件下，在苯磺酸的存在中使Boc-保护的L-丝氨酸酯与2，2-二甲氧基丙烷反应；

c)在有效形成(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑(化合物Id)的条件下，在正丁基锂的存在中使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸的C1-C5烷基酯(化合物Ic)与二甲基甲基膦酸酯进行反应；

d)在有效生成(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六烷-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Ie)的条件下，使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑与1-十四烷进行反应；

e)在有效形成(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)的条件下，使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷与硼氢化钠和三氯化铈进行反应；并且

f)脱去(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑的叔丁氧基羰基(Boc)保护基团，从而生成D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)。

方案I

在本发明的一方面，L-丝氨酸酯(方案I的化合物Ia)的氨基基团是在碱(例如三乙胺或吡啶)存在下，用叔丁氧基羰基(Boc)基团进行保护，从而生成Boc-保护的L-丝氨酸酯(化合物Ib)。反应在之后通过加水能够被猝灭，并且从有机层中回收反应产物，化合物Ib。

上述Boc保护基团的添加可以在大约22℃的温度下的非质子有机溶剂中继续进行大约6到24个小时。在一个实施方案中，非质子有机溶剂是一种氯化烃，例如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳。在另一个实施方案中，非质子有机溶剂是非氯化的，并且是例如乙醚、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述碱通常是一种有机碱，例如三乙胺或者吡啶。所得到的反应产物，即化合物Ib，可以从有机层中用有机溶剂进行提取，包括，但不限于，如上文所述的质子有机溶剂。

在本发明的另一个方面，Boc保护的L-丝氨酸酯(化合物Ib)在苯磺酸存在下与2，2-二甲氧基丙烷进行反应，从而生成相应的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸的C1-C5烷基酯(化合物Ic)。上述反应在回流温度下的在有机溶剂中连续进行1-3个小时。在一个实施方案中，有机溶剂是非极性的，并且是甲苯、笨或己烷。在另一个实施方案中，有机溶剂是极性有机物，并且是乙醚、四氢呋喃或乙酸乙酯。然后用碱对所述反应进行中和，并且蒸发溶剂。然后，将水和一种有机溶剂添加到剩下的残留物中，并且将反应产物用一种有机溶剂从有机层中提取出来。所述的碱通常是一种有机碱，例如三乙胺或吡啶。反应产物能够使用一种有机溶剂从有机层中提取出来，所述有机溶剂包括但不限于如上文所述的那些有机溶剂。

在本发明的另一方面，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸酯(化合物Ic)在二甲基甲基膦酸酯的存在下与正丁基锂进行反应，从而产生(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑(化合物Id)。所述反应可以用水进行猝灭，并且通过添加有机酸来调节pH。产物可以从有机相中回收。所述反应在有机溶剂中在大约-70到-80℃的温度下反应大约2到4个小时。在某些实施方案中，所述有机溶剂是一种极性有机溶剂，并且是乙醚、四氢呋喃或者乙酸乙酯。在某些实施方案中，所述酸是柠檬酸或者乙酸。

在本发明的另一个实施方案中，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑(化合物Id)在碱的存在下与十四烷醛进行反应，从而产生(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六烷-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Ie)。在一个实施方案中，所述碱是碳酸钾。所述反应在室温下进行，例如在大约22℃的温度下，并且是在有机溶剂和水的存在下。所述反应搅拌进行8-14个小时。所得产物，即(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六烷-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Ie)，可以从有机相中回收。在某些实施方案中，所述有机溶剂是一种极性有机溶剂，并且是乙腈、四氢呋喃或者乙酸乙酯。

在本发明的又一个实施方案中，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六烷-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Ie)在硼氢化钠和氯化铈七水合物的存在下被还原，从而产生(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)。举例来说，化合物Ie和氯化铈七水合物在一种有机溶剂中搅拌，并且将所述混合物冷却至-20至-15℃。将硼氢化钠在1到6个小时内添加到混合物中。在添加了硼氢化钠之后，继续反应15到90分钟，此时在1到3个小时下将其加热至大约22℃。当达到22℃是，所述混合物可被搅拌大约30到90分钟。在一个实施方案中，有机溶剂是一种质子极性溶解，并且是甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇。在某些实施方案中，所述硼氢化钠作为固体被添加。在另一个实施方案中，所述硼氢化钠作为水溶液被添加。在本发明的某些实施方案中，至少某些溶剂通过蒸发被去除，并且所沉淀的盐被过滤并且用一种有机溶剂进行清洗。产物，即化合物If，何以从所得滤液的有机相回收。

在本发明的一个确定的实施方案中，(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)被去保护，从而产生D-赤型-神经鞘氨醇。所述反应可以下述方式进行：将甲醇冷却至大约0℃，并且在大约15到60分钟过程中添加乙酰氯。然后加热所述溶液，从而产生一种甲醇盐酸盐溶液。(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷溶解到甲醇中，并且在大约15到60分钟过程中添加所述甲醇盐酸盐溶液。所述反应可以添加一种碱来中和。然后将所述溶液去除，并且所产生的D-赤型-神经鞘氨醇可以从残留物中回收。所述碱可以是有机碱，例如，包括但不限于，三乙胺或者吡啶。

在本发明的某些实施方案中，D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)可以通过重结晶、硅胶色谱法、高效液相色谱法或本领域技术人员已知的其它方法进行纯化。

本发明的一个具体的实施方案也提供了一种使用L-丝氨酸甲酯合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法。

在本发明的一个具体实施方案中，L-丝氨酸甲酯(化合物Ia，R＝甲基)被悬浮与乙酸乙酯中，并且冷却至大约2℃，添加大约1.15摩尔当量的三乙胺，随后添加在乙酸乙酯中的大约1.15摩尔当量的二叔丁基二碳酸酯。加热所述反应混合物至大约22℃，并且搅拌8到12个小时。添加净化水，并且分离其中的相。反应产物Boc-L-Ser-OMe(化合物Ib，R＝甲基)可以用乙酸乙酯从有机层中被萃取出来，并且将所得到的部分在真空下干燥。

在本发明的一个具体的实施方案中，将Boc-L-Ser-OMe(化合物Ib，R＝甲基)溶解到四氢呋喃中，并且添加3-4当量的2，2-二甲氧基丙烷，随后加入在四氢呋喃中的大约0.10当量的苯磺酸溶液，并且对反应进行加热回流，同时蒸馏去除一些四氢呋喃。在大约22℃下用三乙胺将反应中和至pH 6.5。蒸馏出所述溶液，并且添加水和己烷。反应产物，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯(化合物Ic，R＝甲基)，可以从己烷层中分离出来。

在本发明的另一方面，将2当量的二甲基甲基膦酸酯溶解到四氢呋喃中，并且将所得到的混合物冷却至大约-70到-80℃。在大约30到90分钟的过程中添加在庚烷中的大约2当量正丁基锂，同事将所述混合物保持在大约-70到-80℃。在约30到60分钟的过程中将混合物加热至大约0℃，并且搅拌15到60分钟。所述反应通过添加在四氢呋喃中的水进行猝灭，并且添加一种柠檬酸溶液将pH调节至pH 6-7。添加一种有机溶剂，包括但不限于乙酸乙酯或乙醚，并且从有机层中回收产物(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Id)。

在本发明的另一个方面，1当量的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Id)和大约2当量的碳酸钾在大约22℃搅拌至乙腈中，随后添加大约0.5当量的十四烷醛和水。将所述反应搅拌进行8-14个小时。滤除其中的盐，并且用己烷清洗，同时从有机相中回收产物，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物1e)。

在本发明的又一个方面，将1当量的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物1e)和大约1.1至1.5当量的氯化铈七水合物搅拌至甲醇中，并且将混合物冷却至-20到-15℃。将大约1.5当量的硼氢化钠和大约0.01当量的NaOH的水溶液冷却至大约0℃，并且在大约4到6个小时期间内添加到S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷混合物中。然后将进一步搅拌大约15到60分钟，将混合物加热到大约22℃持续1到3个小时，之后搅拌30到90分钟。真空条件下去除甲醇，并且过滤所得到的水性悬浮液。用有机溶剂例如甲苯清洗所得到的固体。结合其中的有机层，并且从有机层中回收产物(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)。

在本发明的某个实施方案中，(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)被转化为D-赤型-神经鞘氨醇。所述反应依据下述所示进行：将甲醇冷却至大约0℃，并且在大约15到60分钟内添加大约2当量的乙酰氯化物，形成一种甲醇乙酸溶液。之后将所述溶液加热至室温。将(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷)溶解到甲醇中，并且在大约15到60分钟内添加上述甲醇乙酸溶液。添加三乙胺中和所述反应。然后去除其汇总的溶剂，并且从残留物中回收所产生的D-赤型-神经鞘氨醇。

在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于合成D-赤型-神经鞘氨醇的方法，包括步骤：

a)用叔丁基羰基基团保护L-丝氨酸价值或其盐的氨基基团，从而形成Boc-L-Ser-OMe；

b)在有效生成(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯的条件下，在苯磺酸的存在下使Boc-L-Ser-OMe与2，2-二甲氧基丙烷进行反应；

c)在有效生成(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑的条件下，在正丁基锂的存在下使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯与二甲基甲基膦酸酯进行反应；

d)在有效生成(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的条件下，使(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基-磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑与1-十四烷醛进行反应；

e)在有效生成(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的条件下，使S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷与硼氢化钠和三氯化铈进行反应；以及

f)脱去(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷的叔丁氧羰基(Boc)保护基团，从而形成D-赤型-神经鞘氨醇。

D-赤型-二氢神经鞘氨醇

在一个具体的实施方案中，本法米功能提供了用于使用适当的L-丝氨酸酯(例如化合物Ia所示)合成D-赤型-二氢神经鞘氨醇的方法。在本发明的某个实施方案中，R使具有1到5个碳的烷基基团。术语“烷基”，正如在这里所使用的除非另有定义，指的是从链烷烃中去除氢原子派生形式的直链、支链或环状的饱和基团。典型的直链烷基基团包括-甲基、-乙基、-丙基、-正丁基、-正戊基和正庚基。典型的支链烷基基团包括-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、-新戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1，1-二甲基丙基和1，2-二甲基丙基。典型的环状烷基基团包括环己基、环戊基和环丙基。

在本发明的某个实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丝氨酸甲酯。在另一个实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丝氨酸乙酯。在另一个实施方案中，L-丝氨酸酯是L-丝氨酸丁酯。

在本发明的一个实施方案中通过如方案II所示的方法合成的D-赤型-二氢神经鞘氨醇。所述反应包括下述步骤：

方案II

化合物If与一种还原剂进行反应从而提供其相应的饱和化合物，化合物IIa。所述反应是在一种有机溶剂(例如，包括，但不限于，伯醇或仲醇、THF或2-甲基-THF)中，在H₂和一种催化剂(例如，但不限于一种披钯(0)碳钌(II)催化剂，比方说Ru(OAc)₂(BINAP)、[{RuCl(μ-Cl)(η⁶-C₆Me₆)}₂]、或者Ru(OH)x/Al₂O₃)存在下进行。

在一个具体的实施方案中，在[{RuCl(μ-Cl)(η⁶-C₆Me₆)}₂]存在下，在大约80℃下将化合物If与异丙醇回流反应。当没有更多的烯丙醇时对反应混合物进行淬火，并且进行分离净化试验，化合物If通过使用本领域技术人员所公知的方法进行检测，例如，但不限于，HPLC、薄层色谱法、或IR。在某个实施方案总，以一种气体的形式添加H₂，并且所述反应在压强下在一种氢化容器中进行。

因此，将所得到的化合物IIa，不论是未提纯的还是已经提纯的，在大约0℃下溶解到甲醇中，并且在大约15到60分钟内添加乙酰氯化物，生成盐酸甲醇。当通过一种方法(例如色谱分析法)检测到不再有原始材料(或者不再有转化)时，用碱处理反应物，所述碱可以是一种有机碱，例如，但不限于，三乙胺或者吡啶，或者是一种在水溶液中的无机碱，例如钠、钾、钙、镁和铵的碳酸氢盐或者碳酸盐。进一步，用一种溶剂萃取反应混合物，所述溶剂例如是氯化溶剂、乙酸乙酯或者一种醚(如二乙醚、THF、叔丁基甲基醚、异丙醚等)。然后去除所述溶剂，并且以游离碱的形式回收所得到的D-赤型-二氢神经鞘氨醇。用盐酸对所述碱进行处理从而产生相应的盐酸盐。

D-赤型-神经鞘氨醇D-赤型-神经鞘氨醇

在另一个实施方案中，本发明提供了一种如方案III所示的用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的方法。

a)在有效形成(1R，2R，5R)-乙基-((2-羟基蒎烷-3-基)氨基)乙酸乙酯(化合物IIIb)的条件下，将(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮(化合物IIIa)与甘氨酸乙酯进行反应；

b)在三异丙氧基氯化钛和三乙胺存在下，使(1R，2R，5R)-乙基-((2-羟基蒎烷-3-基)氨基)乙酸乙酯(化合物IIIb)与2-(E)-十六碳烯-1-醇进行反应，从而形成(2S，3R，E)-乙基-3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷基-4-烯酸酯(化合物IIIc)和(2S，3R，E)-异丙基-3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷基-4-烯酸酯(化合物IIIc’)其中之一或二者；

c)在有效形成(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八烷-4-烯酸酯(化合物IIId)和(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八烷-4-烯酸酯(化合物IIId’)其中之一或二者的条件下，使(2S，3R，E)-乙基-3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷基-4-烯酸酯(化合物IIIc)和(2S，3R，E)-异丙基-3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷基-4-烯酸酯(化合物IIIc’)其中之一或二者与盐酸进行反应；

d)在有效产生D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)的条件下，将(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八烷-4-烯酸酯和(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八烷-4-烯酸酯与硼氢酸钠进行反应；并且

e)在有效形成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物E)的条件下，使D-赤型-神经鞘氨醇与棕榈酸进行反应。

方案III

D-赤型-二氢神经鞘氨醇

在另一个实施方案汇总，本发明提供了如在方案IV所示的用于合成D-赤型-二氢神经鞘氨醇的方法，并且所述方法包括下述步骤：

b)在有效形成(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-(((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷酸(化合物IVc)以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-(((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷酸(化合物IVc’)其中之一或二者的条件下，在三异丙氧基氯化钛存在下，使(1R，2R，5R)-乙基-((2-羟基蒎烷-3-基)氨基)乙酸乙酯(化合物IIIb)与十六醛进行反应；

c)在有效形成(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八烷酸(化合物IVd)以及(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八烷酸(化合物IVd’)其中之一或二者的条件下，使(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-(((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷酸(化合物IVc)以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-(((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八烷酸(化合物IVc’)其中之一或二者与盐酸进行反应；

d)在有效形成D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物B)的条件下，使(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八烷酸(化合物IVd)以及(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八烷酸(化合物IVd’)其中之一或二者与硼氢化钠进行反应；

e)在有效形成N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物F)的条件下，使D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物B)与十六烷酸进行反应。

方案IV

N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的合成

在一个进一步的实施方案中，本发明提供了一种如方案V所示的用于合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，该方法包括步骤：

a)在有效形成D-赤型-神经酰胺(化合物Vb)的条件下，使D-赤型-神经鞘氨醇与一种脂肪酸(化合物Va)进行反应；

b)用第一保护基团对D-赤型-神经酰胺(化合物Vb)的伯醇羟基基团进行保护，从而形成化合物Vc；

c)用第二保护基团对化合物Vc的仲醇羟基基团进行保护，从而形成化合物Vd；

d)脱去化合物Vd的第一保护基团，从而形成化合物Ve；

e)在有效形成化合物Vf的条件下，使化合物Ve与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效形成化合物Vg的条件下，使化合物Vf与三甲胺进行反应；

g)用甲醇钠脱去化合物Vg的第二保护基团，从而形成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Vh)。

方案V

HOAc是一种脂肪酸

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键在某些实施方案中，PG1是三苯甲基(Trt)。在某些实施方案中，PG2是苯甲酰基(Bz)。

N-酰基-D-赤型-神经酰胺的合成

在本发明的某些实施方案中，使用脂肪酸的D-赤型-神经鞘氨醇的N-酰化作用从而形成N-酰基-D-赤型-神经酰胺包括在方案V中所示的步骤。所述步骤如下所示：将D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)，脂肪酸(化合物Va)，以及一种酰胺形成试剂悬浮与一种非质子有机溶液中，并且将所述混合物在大约0-5℃的温度下冷却。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃、或者它们的混合物。在本发明的具体实施方案中，所述酰胺形成试剂是O-苯并-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟磷酸盐(HBTU)。

将一种有机碱(例如，但不限于，三乙胺或者吡啶)添加到D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)、脂肪酸(化合物Va)以及酰胺形成试剂的混合物中。在某些实施方案中，所述有机碱是在一种非质子有机溶剂中，并且是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃、或者它们的混合物。在本发明的进一步的实施方案中，所述有机碱是在大约15到90分钟内进行添加的。然后将所述混合物在大约0-22℃的温度下搅拌1到15个小时。在本发明的某些实施方案中，所述反应是在大约0到5℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，所述反应是在大约22℃的温度下进行。在本发明的又一些实施方案中，所述反应是在大约室温的温度下进行。

在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使所得产物(即化合物Vb)沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸是一种有机酸，例如，柠檬酸、乙酸或草酸。在添加是，所述酸可以是在一种水溶液中。当添加所述酸时，所述反应可以在大约22℃的温度下。所产生的悬浮液可在大约0到5℃的温度下搅拌大约30到120分钟。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后，将所产生的产物(即化合物Vb)再悬浮于水中，然后对其进行过滤和清洗。所述再悬浮可以反复进行至少一次。所产生的产物(即D-赤型-神经酰胺(化合物Vb))可以用水、丙酮、或者它们的混合物进行清洗。

保护的D-赤型-神经酰胺的合成

在本发明的某些实施方案中，D-赤型-神经酰胺的伯醇羟基基团被保护，其次是仲醇羟基的保护，并且然后是伯醇羟基的脱保护。在本发明的进一步实施方案中，所述保护和脱保护步骤的进行不需要伯醇羟基保护的D-赤型-神经酰胺的分离或提纯。

在本发明的一个具体实施方案中，通过将D-赤型-神经酰胺于三苯甲基化试剂(例如，但不限于，三苯甲基卤化物如三苯甲基氯和三苯甲基溴)进行反应从而用三苯甲基基团保护伯醇羟基基团。在本发明的某些实施方案中，通过将D-赤型-神经酰胺于一种苯甲酰化试剂(包括，例如，但不限于，苯甲酰卤如苯甲酰氯和三苯甲基溴)进行反应从而用苯甲酰基基团保护仲醇羟基基团。在本发明的进一步实施方案中，用三苯甲基基团对伯醇羟基基团进行保护，并且用苯甲酰基基团对仲醇羟基基团进行保护。

在本发明的某些实施方案中，所述伯醇羟基基团的保护如下述进行：将D-赤型-神经酰胺(化合物Vb)和三苯甲基氯悬浮在一种碱存在的有机溶剂中。所述反应在大约25到55℃的温度下反应大约10到60个小时，从而形成三苯甲基保护的D-赤型-神经酰胺(1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺，化合物Vc，其中PG1＝-Trt)。有机溶剂可以是非极性溶剂或极性溶剂。在本发明的一个实施方案中，有机溶剂是一种非极性溶剂，并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在本发明的一个实施方案中，有机溶剂是一种非质子极性溶剂。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是二氯甲烷，氯仿或四氯化碳。在另一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是非氯化的，并且是乙醚、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述碱通常是一种有机碱，例如三乙胺或吡啶。

在本发明的某些实施方案中，伯醇羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，形成不超过大约10mol％的粗加工产物的1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经酰胺。在本发明的进一步的实施方案中，所述伯醇羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，形成不超过大约7mol％的粗加工产物的1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经酰胺。在本发明的另外的实施方案中，所述伯醇羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，形成不超过大约5mol％的粗加工产物的1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经酰胺。在本发明的另一个的实施方案中，所述伯醇羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，形成不超过大约1mol％的粗加工产物的1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经酰胺。

在本发明的进一步的实施方案中，所述仲醇羟基基团的保护直接如下述进行：将上述反应混合物冷却到大约0-5℃，并且添加苯甲酰氯以及一种碱。所述反应在大约0到5℃的温度下反应大约1到16个小时。所述反应产物，3-苯甲酰基和1-三苯甲基保护的D-赤型式-神经酰胺(化合物Vd；PG1＝-Trt；PG2＝-Bz)可以使用一种有机溶剂(包括，但不限于，上文所述的一种非质子有机溶剂)从有机层中进行萃取。然后，通过本领域普通技术人员所公知的合适的方法去除有机溶剂，所述方法包括，但不限于，蒸发，比方说真空浓缩。在具体的实施方案中，所述碱是一种有机碱，例如三乙胺或吡啶。

在本发明的进一步的实施方案中，伯醇羟基基团的保护直接如下述进行：将上述反应的残留物溶解到一种有机溶剂中，并且添加一种酸。所述反应在大约22℃的温度下进行1到16个小时。所述反应混合物通过添加一种碱进行中和。所述反应溶剂可以是一种质子极性溶剂、一种非质子极性溶剂，或者它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种质子极性溶剂，并且是甲醇、乙醇、正丙醇或者异丙醇。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是氯化的，并且是二氯甲烷、氯仿、或四氯化碳。在另一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是非氯化的，并且是乙醚、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述酸可以是本领域普通技术人员所公知的适用于三苯甲基保护基团的脱去的任何酸，例如乙酸、三氟乙酸、盐酸和对甲苯磺酸。在本发明的某些实施方案中，所述酸是对甲苯磺酸。在具体的实施方案中，所述碱是一种有机碱，例如三乙胺或吡啶。

在本发明的某些实施方案中，上述去保护产物(化合物Ve；PG2＝-Bz)可以通过重结晶法、硅胶色层法、高效液相色谱法或本技术领域的技术人员已知的其它方法进行提纯。

3-苯甲酰-D-赤型式-神经酰胺的磷酸化和氨基化用于形成苯甲酰-保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂

在本发明的进一步的实施方案中，3-苯甲酰-保护的D-赤型式-神经酰胺(化合物Ve；PG2＝-Bz)如下述被磷酸化：将3-苯甲酰-保护的D-赤型式-神经酰胺溶解到一种有机溶剂中，并且添加一种有机碱。在冷却至大约4-9℃之后，添加在有机溶剂中的2-氯-2氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷溶液。所述反应在大约4-22℃的温度下进行大约2到6个小时，从而产生3-O-苯甲酰基-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-神经酰胺(化合物Vf，其中PG2＝Bz)。在本发明的某些实施方案中，所述反应在大约4-9℃的温度下进行大约15分钟到2个小时，并且随后加热至大约22℃，并且在进行反应2到4个小时。所述有机溶剂可以是一种非极性溶剂、一种极性溶剂、或者它们的混合物。在本发明的一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非极性溶剂，并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂，例如乙腈、醋酸乙酯、四氢呋喃，或它们的混合物。所述有机碱通常是四甲基乙二胺或三乙胺。在本发明的某些实施方案中，所述有机碱是四甲基乙二胺。

在某些实施方案中，3-O-苯甲酰基-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-神经酰胺(化合物Vf，其中PG2＝Bz)的氨基化的发生不需要磷酸化的苯甲酰基-保护的D-赤型-神经酰胺起始材料的提纯和分离。在上述反应进行大约2到6个小时之后，添加额外的有机溶剂和三甲胺，将反应混合物加热到60-70℃，并且允许所述反应进行10到16个小时从而形成3-苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Vg，PG2＝-Bz)。所述有机溶剂可以是一种非极性溶剂、一种极性溶剂或者它们的混合物。在本发明的一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非极性溶剂，并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂，例如乙腈、醋酸乙酯、四氢呋喃或它们的混合物。在某些实施方案中，三甲胺以一种液态的形式添加。在另一些实施方案中，三甲胺以一种气态的形式添加。在具体的实施方案中，液态的三甲胺是无水的。在某些实施方案中，三甲胺冷却到其沸点之下，并且以一种液态的形式添加。在某些实施方案中，在添加液态三甲胺之前将所述反应冷却到大约-10℃到0℃。在进一步的实施方案中，在添加液态三甲胺之前将所述反应冷却到大约-10℃。

在本发明的某些实施方案中，3-苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂可以通过重结晶法、硅胶色层法、高效液相色谱法或本技术领域的技术人员已知的其它方法进行纯化。

3-O-苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的去保护从而产生N-酰基-D- 赤型-神经鞘磷脂

从3-O-苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂中脱去苯甲酰保护基团是如下述方式进行：将3-O-苯甲酰基-保护的神经鞘磷脂溶解到一种质子极性溶剂中，并且添加一种碱。将所述反应在大约22℃的温度下进行8到24个小时。在本发明的某些实施方案中，将非质子溶剂和水添加到反应混合物中，并且从有机层中回收N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Vh)。在一个实施方案中，所述质子极性溶剂是甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇或它们的混合物。在又一个实施方案中，所述碱是甲氧基钠。

在本发明进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂可通过重结晶法、硅胶色层法、高效液相色谱法或本技术领域的技术人员已知的其它方法进行纯化。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约85％的对映体纯度，并且含有不少与大约15％的它们的相应的相反对映体。在本发明进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约90％的对映体纯度，并且含有不少与大约10％的它们的相应的相反对映体。在又一些实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约95％的对映体纯度，并且含有不少与大约5％的它们的相应的相反对映体。在另一些实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约98％的对映体纯度，并且含有不少与大约2％的它们的相应的相反对映体。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

c)在有效产生1-O-三苯甲基-3-O-D-赤型-苯甲酰基-神经酰胺的条件下，使1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺与苯甲酰化试剂进行反应；

d)脱去1-O-三苯甲基-3-O-D-赤型-苯甲酰基-神经酰胺的三苯甲基基团，从而产生D-赤型-3-O苯甲酰基-神经酰胺

e)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生N-酰基-D-赤型-3-O-苯甲酰基-神经鞘磷脂的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)神经酰胺与三甲胺进行反应；并且

g)用甲醇钠脱去N-酰基-D-赤型-3-O-苯甲酰基-神经鞘磷脂的苯甲酰基基团，从而产生N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。

N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的合成

在另一个实施方案中，本发明提供了合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

a)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的条件下，在O-苯并三唑-N，N，N′，N′-四甲基-脲阳离子-六氟-磷酸盐以及三乙胺存在的情况中，使D-赤型-神经鞘氨醇与棕榈酸进行反应；

b)用三苯甲基基团保护N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇，从而产生N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇；

c)用苯甲酰基基团保护N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇，从而产生N-棕榈酰-1-O-三苯甲基3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇；

d)在对甲苯磺酸存在下，脱去N-棕榈酰-1-O-三苯甲基3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的三苯甲基基团，从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇；

e)在有效产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-神经鞘氨醇的条件下，使N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨酯的条件下，使N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-神经鞘氨醇与三甲胺进行反应；并且

g)用甲氧基钠脱去N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨酯的苯甲酰基基团，从而形成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。

在本发明的一个具体的实施方案中，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂是依据方案VI中所示进行合成：

将一当量的棕榈酸、一当量的D-赤型-神经鞘氨醇(化合物A)以及1.10当量的O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)悬浮于四氢呋喃四氢呋喃和二甲基甲酰胺中，并且冷却到大约0-5℃。添加2到3当量的三乙胺，并且将所述混合物在大约0-5℃的温度下搅拌大约1到12个小时。将所述混合物加热至大约22℃。添加柠檬酸的水溶液，并且在大约22℃的温度下搅拌素数混合物15到90分钟。在室温下，过滤所得到的悬浮液，并且将块状物悬浮于水中。过滤所述悬浮液，并且用水和丙酮进行清洗。然后干燥所得到的产物，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物E)。

针对第一个羟基保护，将一当量的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物E)悬浮于吡啶和二氯甲烷中。在添加二氯甲烷后，添加在二氯甲烷中的大约1.05当量的三苯基氯甲烷。在大约25℃的温度下，搅拌所述反应混合物大约50到60个小时。

在本发明的某些实施方案中，伯醇羟基基团的保护产生至少10mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇的粗加工产物。在本发明的进一步的实施方案中，伯醇羟基基团的保护产生至少大约7mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇的粗加工产物。仍然在本发明进一步的实施方案中，伯醇羟基基团的保护产生至少大约5mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇的粗加工反应产物。仍然在本发明进一步的实施方案中，伯醇羟基基团的保护产生至少大约1mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇的粗加工产物。

针对第二个羟基保护，将包含化合物VIa的反应混合物冷却到大约2℃。添加在大约0.10当量的N，N-二甲基氨基吡啶、在大约1.50当量的苯甲酰氯以及另外的二氯甲烷。在大约2℃的温度下通过搅拌使反应进行，直到薄层色谱(TLC)分析显示少于大约5％的起始材料N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-神经鞘氨醇的存在时。将乙酸乙酯和柠檬酸水溶液和氯化钠溶液添加到反应混合物中，并且从有机相中回收N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIb)。

为了脱去三苯甲基保护基团，将N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIb)溶解到甲醇和二氯甲烷中，并且冷却到2℃。用在甲醇中的0.57当量的对甲苯磺酸一水合物的溶液将pH调节到2.5。使所述反应在大约22℃的温度下搅拌进行，直到TLC分析显示少于5％的起始材料1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-神经鞘氨醇的存在。添加三乙胺从而将pH调节到大约7.0。将反应混合物蒸发至干，并且在大约40℃的温度下将所得到的粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇悬浮于己烷中，并且冷却降至大约0℃。在大约30到60分钟之后，通过过滤分离固体，并且用己烷进行清洗。然后，通过合适的方法(例如硅胶色谱法)提纯所得到的产物，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)溶解到甲苯中，添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺(TMEDA)，并且将所述混合物冷却到大约4-9℃。添加在乙腈中的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)，然后添加额外的乙腈。将所述反应加热至大约22℃，并且连续搅拌1到3个小时。添加额外的乙腈，并且将温度下降到大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点之下，并且添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。将反应混合物加热到大约60到70℃，并且继续反应10到16个小时，从而形成N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物VIe)。将反应冷却到大约-30℃，并过滤所得到的悬浮液。用硅胶色谱法对所述粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂进一步提纯。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂溶解到甲醇中，添加大约0.2当量的甲醇钠，并且在大约22℃的温度下搅拌所述混合物20到26个小时。添加二氯甲烷和水，并且通过添加盐酸将pH调节到大约7。

在本发明的进一步实施方案中，可通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员公知的其他方法对N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂进行提纯。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且包含不超过大约15％的其相应的相反对映体。在本发明的进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷酯具有至少大约90％的对映体纯度，并且包含不超过大约10％的其相应的相反对映体。在进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷酯具有至少大约95％的对映体纯度，并且包含不超过大约5％的其相应的相反对映体。仍然在进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷酯具有至少大约98％的对映体纯度，并且包含不超过大约2％的其相应的相反对映体。

已经发现，结合本发明所述的方法使用苯甲酰基基团用于保护仲醇基团(3-OH)给出了使保护基团从仲醇(3-OH)到伯醇(1-OH)迁移程度最喜噢阿花的令人惊奇和出乎意料的益处。

附图8使粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)的薄层色谱板的图像。N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇小于大约1％以重量计的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物VIc)，并且小于大约0.5％以重量计的粗加工反应产物。在本发明进一步的实施方案中，N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇与由本发明获得的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的重量比为大约10∶90。在本发明的进一步的实施方案中，N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇与由本发明方法所得到的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的重量比是大约5∶59。在本发明的进一步的实施方案中，N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇与由本发明方法获得的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的重量比是大约2∶98。在本发明的进一步的实施方案中，N-棕榈酰-1-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇与由本发明方法获得的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的重量比是大约1∶99。

本发明的另外实施方案能够大规模合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂，具体来说，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的某些实施方案中，本发明方法能够合成大约1千克规模的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约5千克规模的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的进一步的实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约10千克规模的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的进一步的实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约50千克规模的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。仍然在本发明的进一步实施方案中，本发明方法能够合成大约1千克规模的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的进一步的实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约5千克规模的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的另一些实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约10千克规模的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。在本发明的具体的实施方案中，本发明方法能够合成大约1到大约50千克摩尔的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。

方案VI

N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的合成

在一个进一步的实施方案中，本发明提供了如方案VIII所示的用于合成D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

a)在有效生成D-赤型-二氢神经酰胺(化合物VIIb)的条件下，使D-赤型-二氢神经鞘氨醇与一种脂肪酸(化合物VIIa)进行反应；

b)用第一保护基团对D-赤型-二氢神经酰胺(化合物VIIb)的伯羟基基团进行保护，从而产生化合物VIIc；

c)用第二保护基团对D-赤型-二氢神经酰胺的仲羟基基团进行保护，从而产生化合物VIId；

d)脱去化合物VIId的第一保护基团，从而产生化合物VIIe；

e)在有效产生化合物VIIf的条件下，使化合物VIIe与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生化合物VIIg的条件下，使化合物VIIf与三甲胺进行反应；并且

g)用甲醇钠脱去化合物VIIg的第二保护基团，从而产生D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIh)。

方案VII

HOAc是一种脂肪酸

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键

PG1和PG2是在本发明领域中已知的任何合适的保护基团。

在某些实施方案中，PG1是三苯甲基(Trt)。在某些实施方案中，PG2是苯甲酰基(Bz)。

D-赤型-二氢神经酰胺的合成

在本发明的某些实施方案中，依据方案VII所示的方法进行用脂肪酸对D-赤型-二氢神经鞘氨醇的N-酰化，从而产生D-赤型-二氢神经酰胺。所述步骤如下所示：将D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物B)、脂肪酸(化合物VIIa)和酰胺形成试剂悬浮于非质子有机溶剂中，并且将混合物冷却到大约0-5℃的温度。在一个实施方案中，非质子有机溶剂使四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃、或者它们的混合物。在本发明具体的实施方案中，酰胺形成试剂是O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)。

将有机碱，例如，但不限于三乙胺或者吡啶，添加到D-赤型-二氢神经鞘氨醇、脂肪酸、或者酰胺形成试剂的混合物中。在某些实施方案中，有机碱是一种非质子有机溶剂，并且是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃、或者它们的混合物。在本发明的进一步的实施方案中，将有机碱在大约15到90分钟内进行添加。然后，在大约0-22℃的温度下，搅拌混合物1到15个小时。在本发明的某些实施方案中，所述反应在大约0-5℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，本发明是在大约22℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，本发明在大约室温下进行。

在本发明的某些实施方案中，在22℃下搅拌悬浮液。在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使产物(化合物VIIb)沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸是有种有机酸，例如柠檬酸、乙酸或者草酸。所述酸在添加时时在一种水溶液中。当添加所述酸时，所述反应可以在大约22℃。将所得到的悬浮液在大约0-5℃的温度下搅拌30到120分钟。在本发明的某些实施方案中，将所述悬浮液在大约22℃的温度下搅拌。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后将所得到的产物(化合物VIIb)重悬浮于水中，饭后对其进行过滤和清洗。所述重悬浮可进行至少不少于一次。用水、丙酮或者它们的混合物清洗所得到的产物，D-赤型-二氢神经酰胺(化合物VIIb)。

苯甲酰基-保护的D-赤型-二氢神经酰胺的合成

在本发明的某些实施方案中，D-赤型-神经酰胺的伯羟基基团被保护，然后是仲羟基基团的保护，再之后是仲羟基基团的脱保护。在本发明的进一步的实施方案中，保护步骤和脱保护步骤的进行不需要伯羟基保护的N-酰基-D-赤型-神经酰胺的分离和纯化。

在本发明的具体的实施方案中，伯羟基基团的保护是用三苯甲基基团，通过将D-赤型-二氢神经酰胺与三苯甲基化试剂(例如，但不限于，三苯甲基卤化物例如三苯甲基氯以及三苯甲基溴)进行反应。在本发明的某些实施方案，通过将1-O-保护的D-赤型-二氢神经酰胺与苯甲酰化试剂进行反应从而用苯甲酰基基团保护仲羟基基团，所述苯甲酰化试剂包括，例如，但不限于，苯甲酰卤化物例如苯甲酰氯以及苯甲酰溴。在本发明的进一步的实施方案中，用三苯甲基基团对伯羟基基团进行保护，并且用苯甲酰基基团对仲羟基基团进行保护。

在本发明的某些实施方案中，伯羟基基团的保护如下述步骤进行：将D-赤型-二氢神经酰胺(化合物VIIb)和三苯甲基氯悬浮于碱存在的有机溶剂中。所述反应在大约25到55℃的温度下进行大约10到60个小时，从而产生三苯甲基保护的D-赤型-二氢神经酰胺(1-O-三苯甲基-D-赤型-神经酰胺，化合物VIIc，其中PG1＝-Trt)。所述有机溶剂可以是一种非极性试剂或者一种极性试剂。在本发明的一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非极性试剂，并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是甲烷、三氯甲烷或四氯甲烷。在另一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是非氯化的，并且是二乙醚、四氢呋喃或者乙酸乙酯。所述碱通常是一种有机碱，例如三乙胺或者吡啶。

在本发明的某些实施方案中，伯羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，产生不超过大约10mol％的粗加工产物N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇。在本发明进一步的实施方案中，伯羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，产生不超过大约7mol％的粗加工产物N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇。仍然在本发明进一步的实施方案中，伯羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，产生不超过大约5mol％的粗加工产物N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇。在本发明的另外的实施方案中，伯羟基基团的保护，例如使用三苯甲基氯，产生不超过大约1mol％的粗加工产物N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇。

在本发明的进一步的实施方案中，仲羟基基团的保护是直接根据下述步骤进行：将上述反应混合物冷却到大约0-5℃，并且添加苯甲酰氯和一种碱。所述反应在大约0-5℃的温度下进行大约1到16个小时。所述反应产物(1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺(化合物Vd；PG1＝-Trt；PG2＝-Bz))，可用有机溶剂(包括，但不限于上文所述的非质子有机溶剂)从有机层进行萃取。然后通过本领域技术人员所公知的合适的方法去除其中的有机溶剂，所述方法包括，但不限于，蒸发法，例如在真空中浓缩。在具体的实施方案中，所述碱是一种有机碱，例如三乙胺或者吡啶。

在本发明的进一步实施方案中，伯羟基基团的脱保护可直接依据下述步骤进行：将来自上述反应的残留物溶解到一种有机溶剂中，并且添加一种酸。所述反应在大约22℃的温度下进行1到16个小时。通过添加一种碱中和所述反应混合物。所述有机溶剂可以使一种质子极性溶剂、一种非质子极性溶剂、或者它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种质子极性溶剂，并且是甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是氯化的，并且是二氯甲烷、三氯甲烷或四氯化碳。在另一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是非氯化的，并且是二乙醚、四氢呋喃或者乙酸乙酯。所述酸可以使本领域技术人员公知的适用于三苯甲基保护基团的任意酸，例如醋酸盐、三氟乙酸、盐酸以及p-甲基磺酸。在本发明的某些实施方案中，所述酸是p-甲基磺酸。在具体的实施方案中，所述碱是一种有机碱，例如三乙胺或者吡啶。

在本发明的某些实施方案中，上述脱保护产物(化合物VIIe；PG2＝-Bz)通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法以及本领域普通技术人员所公知的其它方法进行纯化。

苯甲酰基-保护的D-赤型-二氢神经酰胺的磷酸化和氨基化从而产生苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂

在本发明的进一步实施方案中，3-苯甲酰基-保护的D-赤型-二氢神经酰胺，(化合物VIIe；PG2＝-Bz)，依据如下步骤进行磷酸化：将3-苯甲酰基保护的D-赤型-二氢神经酰胺溶解到一种有机溶剂中，并且添加一种酸，在冷却至大约4-9℃，添加在有机溶剂中的2-氯-2-氧的-1，3，2-二氧磷杂环戊烷的溶液。所述反应在大约4-22℃的温度下进行大约2到6个小时，从而产生3-O-苯甲酰基-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-二氢神经酰胺(化合物VIIf；PG2＝-Bz)。在本发明的某些实施方案中，所述反应在大约4-9℃的温度下进行大约15到分钟到2个小时，并且然后加热到大约22℃的温度，并且再进行另外的2个到4个小时。所述有机溶剂可以是一种非极性溶剂、一种极性溶剂或者它们的混合物。在本发明的一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非极性溶解并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂，例如乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃或者它们的混合物。所述胺通常是四甲基乙二胺或者三乙胺。在本发明的某些实施方案中，所述胺是四甲基乙二胺。

在某些实施方案中，3-O-苯甲酰基-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-二氢神经酰胺(化合物VIIf，PG2＝Bz)的氨基化的发生不需要磷酸化的苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经酰胺的纯化和分离。在上述反应进行大约2到6个小时之后，添加额外的有机溶剂，并且将反应冷却到大约-10到0℃。将气态的三甲胺冷却至其沸点之下，并且添加大约40到60当量的上述液态三甲胺。将所述反应混合物加热至大约60-70℃的温度，并且进行大约10到16个小时，从而产生苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIg，PG2＝Bz)。所述有机溶剂可以是非极性溶剂、极性溶剂或者它们的混合物。在本发明的一个实施方案中，所述有机溶剂是非极性溶剂并且是甲苯、苯、己烷或它们的混合物。在一个实施方案中，所述有机溶剂是一种非质子极性溶剂，例如乙腈、乙酸乙酯、四氢呋喃或者它们的混合物。在某些实施方案中，添加一种液态的三甲胺。在另一些实施方案，天际一种气态形式的三乙胺。在具体的实施方案中，所述液态三甲胺是无水的。在某些实施方案中，在添加液态三甲胺之前，将反应冷却到大约-10℃-0℃。在另一些实施方案中，在添加液态三甲胺之前，将所述反应冷却到大约-10℃。

在本发明的某些实施方案中，通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法以及本领域普通技术人员所公知的其它方法对苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂进行纯化。

苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的脱保护从而产生N-酰基-D- 赤型-二氢神经鞘磷脂

从苯甲酰基-保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂中去除苯甲酰基保护基团是依据下述步骤进行：将苯甲酰基-保护的二氢神经鞘磷脂溶解到质子极性溶解中，并且添加一种碱。所述反应在大约22℃的温度下进行8到24个小时。在本发明的某些实施方案中，将非质子溶剂和水添加到反应混合物中，并且从有机层中回收N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIh)。在一个实施方案中，所述质子极性溶剂是甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇或它们的混合物。在有一个实施方案中，所述碱是甲氧基钠。

在本发明的进一步实施方案中，N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法以及本领域普通技术人员所公知的其它方法进行纯化。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约85％的对映体纯度，并且含有不超过大约15％的其相应的相反对映体。在本发明进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约90％的对映体纯度，并且含有不超过大约10％的其相应的相反对映体。在进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约95％的对映体纯度，并且含有不超过大约5％的其相应的相反对映体。仍然在进一步实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约98％的对映体纯度，并且含有不超过大约2％的其相应的相反对映体。

在又一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

a)在有效产生D-赤型-二氢神经酰胺的条件下，使D-赤型-二氢神经鞘氨醇与脂肪酸反应；

d)去除1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺的三苯甲基基团，从而产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺；

e)在有效产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-二氢神经酰胺的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基烷进行反应；

f)在有效产生N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，使3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊基)-二氢神经酰胺与三甲胺进行反应；以及

g)用甲醇钠去除N-酰基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的苯甲酰基基团，从而形成N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的合成

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

a)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的条件下，使D-赤型-二氢神经鞘氨醇与棕榈酸进行反应；

b)在有效产生N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的条件下，使N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇与三苯甲基化试剂进行反应；

c)在有效产生N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的条件下，使N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇与苯甲酰化试剂进行反应；

d)去除N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的三苯甲基基团，从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇；

e)在有效产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)-二氢神经鞘氨醇的条件下，使N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇与2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)进行反应；

f)在有效产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，使N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O(2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷)-二氢神经鞘氨醇与三甲胺进行反应；并且

g)用甲醇钠去除N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的苯甲酰基基团，从而产生N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

在本发明的一个具体的实施方案中，依据方案VIII所述的方法合成N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

将一当量的棕榈酸、一当量的D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物B)以及1.10当量的O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)悬浮于四氢呋喃和二甲基甲酰胺中，并且冷却至大约0-5℃。添加2到3当量的三乙胺，并且将混合物在大约0-5℃的温度下搅拌大约1到12个小时。将所述混合物加热到大约22℃。添加一种柠檬酸的水溶液，并且在大约22℃的温度下搅拌所述混合物15到90分钟。过滤所得到的悬浮液，并且在室温下将所得到的沉淀物悬浮于水中。过滤所述悬浮液，并且用水和丙酮进行清洗。然后，干燥所得到的产物，N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物F).

对于第一个羟基保护，将一当量的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经酰胺(化合物F)悬浮于吡啶和二氯甲烷中。添加大约1.05当量的在二氯甲烷中的三苯甲基氯溶液，然后添加额外的二氯甲烷。在大约25℃的温度下搅拌所述反应混合物50到60个小时。

在本发明的某些实施方案中，伯羟基的保护产生不超过粗加工产物的10mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。在本发明的进一步的实施方案中，伯羟基的保护产生不超过粗加工产物的7mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。在本发明的另外的实施方案中，伯羟基的保护产生不超过粗加工产物的5mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。在本发明的另外的实施方案中，伯羟基的保护产生不超过粗加工产物的1mol％的N-棕榈酰-1，3-O，O-二三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。

对于第二个羟基保护，将来自包含N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIa)的第一个羟基保护的反应混合物冷却到大约2℃。添加大约0.10当量的N，N-二甲基氨基吡啶、大约1.50当量的苯甲酰氯以及额外的二氯甲烷。上述反应允许在大约2℃的温度下搅拌进行，直到薄层色谱(TLC)分析显示起始材料N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIa)的含量少于大约5％。将乙酸乙酯和柠檬酸水溶液和氯化钠溶液添加到反应中，并且从有机相中回收N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIb)。

为了去除三苯甲基保护基团，将N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIb)溶解到甲醇和二氯甲烷中，并且冷却到2℃。用在甲醇中的0.57当量的对甲苯磺酸的溶液将pH调节到2.5。上述反应允许在大约2℃的温度下搅拌进行，直到薄层色谱(TLC)分析显示起始材料N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIb)的含量少于大约5％。添加三乙胺，用于将pH调节到大约7.0。将反应混合物蒸发至干，并且将所得到的粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIc)在大约40℃的温度下悬浮于正己烷中，并且冷却下降至大约0℃。在大约30到60分钟之后，通过过滤分离固体，并且用正己烷进行清洗。然后可以通过合适的方法(例如硅胶色谱法)纯化所得到的产物。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物VIIIc)溶解到甲苯中，并且添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺，并且将所述混合物冷却到大约4-9℃。添加在乙腈中的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷，并且添加额外的乙腈。将所述反应加热到大约22℃，并且连续搅拌1-3个小时。在添加额外的乙腈之后，将温度下降至大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点之下，并且添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。将所述反应加热至大约60-70℃，并且进行10到16个小时，从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIIe)。将所述反应冷却到大约-30℃，并且过滤所得到的悬浮液。通过硅胶色谱法进一步纯化粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIIe)溶解到甲醇中，并且添加大约0.2当量的甲醇钠，并且在大约22℃的温度下搅拌混合物20-26个小时。添加二氯甲烷和水，并且通过添加盐酸将pH调节到大约7。从有机层中回收N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物D)。

在本发明进一步的实施方案中，可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其它方法纯化N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且包含不超过大约15％的其相应的相反对映体。在本发明的进一步的实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约90％的对映体纯度，并且包含不超过大约10％的其相应的相反对映体。在另一实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约95％的对映体纯度，并且包含不超过大约5％的其相应的相反对映体。仍然在进一步实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约98％的对映体纯度，并且包含不超过大约2％的其相应的相反对映体。

方案VIII

(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-羟基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)的保护

在本发明的另一个实施方案中，(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-羟基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(方案I中化合物If)的仲羟基基团被保护，并且神经鞘磷脂的合成根据方案IX中所示进行。

在本发明的具体的实施方案中，如在方案IX中所示的，用苯甲酰基基团对(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-羟基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)进行保护，从而产生(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-苯甲酰基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物IXa)。然后将(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-苯甲酰基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷溶解到甲醇和2到3当量的乙酰氯中，生成盐酸，并且脱去叔-丁氧基羰基(Boc)保护基团，形成3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物IXb)。

在本发明的某些实施方案中，依据方案IX所示用棕榈酸进行的3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的N-酰基化，从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物IXc)。所述步骤如下所示：将3-O苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物IXb)、棕榈酸和酰胺形成试剂悬浮于非质子有机溶剂中，并且将混合物冷却至大约0-5℃的温度。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃、或者它们的混合物。在本发明的具体实施方案中，所述酰胺形成试剂是O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)。

一种有机碱(例如，但不限于三乙胺或者吡啶)添加到3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇、棕榈酸以及酰胺形成试剂的混合物中。在本发明进一步的实施方案中，所述有机碱在大约15到90分钟的过程中添加。然后，在大约0-22℃的温度下搅拌所述混合物1个小时到15个小时。在本发明的某些实施方案中，在大约0-5℃的温度下进行所述反应。在本发明的另一些实施方案中，在大约22℃的温度下进行所述反应。在本发明的又一些实施方案中，在大约室温的温度下进行所述反应。

在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使产物沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸是一种有机酸，例如柠檬酸、乙酸或者乙二酸。所述酸在添加时可以是一种水溶液。当添加所述酸时，所述反应可以是在大约22℃。所得到的悬浮液可以在大约0-5℃的温度下搅拌30到120分钟。在本发明的某些实施方案中，在大约22℃的温度下搅拌所述悬浮液。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后，将所得到的产物重悬浮于水中，然后将其过滤和洗涤。所述重悬浮可发生至少一次以上。然后用水、丙酮或者它们的混合物清洗所得到的产物(N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物IXc))。

在本发明的某些实施方案中，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇或其一种或多种中间体通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其他方法进行纯化。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物IXc)溶解到甲苯中，添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺(TMEDA)，并且将所述混合物冷却至大约4-9℃。添加在乙腈的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)，然后添加额外的乙腈。将所述反应加热到大约22℃，并且连续搅拌1-3个小时，添加额外的乙腈，并且将温度下降至大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点之下，并且添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。加热所述反应混合物至大约about 60-70℃，并且进行10到16个小时，从而形成N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物IXe)。将所述反应冷却到大约-30℃，并且过滤所得到的悬浮液。进一步通过硅胶色谱法纯化粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物IXe)。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物IXe)溶解到甲醇中，添加大约0.2当量的甲醇钠，并且在大约22℃的温度下搅拌所述混合物20-26个小时。添加二氯甲烷和水，并且通过添加盐酸将pH调节到大约7。从有机层中回收N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物C)。

在本发明进一步实施方案中，可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法以及本领域普通技术人员所公知的其他方法纯化N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物C)。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且含有不超过大约15％的其相应的相反的对映体。在本发明进一步的实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约90％的对映体纯度，并且含有不超过大约10％的其相应的相反的对映体。在又一些实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约95％的对映体纯度，并且含有不超过大约5％的其相应的相反的对映体。仍然在进一步的实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约98％的对映体纯度，并且含有不超过大约2％的其相应的相反的对映体。

方案IX

在本发明的某些实施方案中，依据下文的描述合成N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。

在本发明的一个方面，(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-羟基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)的仲羟基基团可用一种保护基团进行保护，所述保护基团例如，但不限于，酯或醚。在本发明的某些实施方案中，所述保护基团是酯，例如，但不限于苯甲酰酯或者芴甲氧羰基酯。在本发明的进一步的实施方案中，所述保护基团是一种醚，例如，但不限于t-丁基二苯基醚。

在本发明的具体的实施方案中，依据方案X中所示，使用苯甲酰基基团对，(2S，3R，4E)-3-(叔-丁氧基羰基)-4-(1-羟基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物If)的仲羟基基团进行保护，从而产生(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-苯甲酰基-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(化合物Xa).然后将化合物Xa溶解到甲醇和2到3当量的乙酰氯中，生成盐酸，并且去除叔丁氧基羰基(BOC)保护基团，产生3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物Xb)。然后，3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇可以通过添加一种合适的脂肪酸和一种酰胺形成试剂而被N-酰基化。所述步骤如下所示：将3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物Xb)、脂肪酸和一种酰胺形成试剂悬浮于一种非质子有机溶剂中，并且将混合物在大约0-5℃的温度下进行冷却。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明具体的实施方案中，所述酰胺形成试剂是O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)。

将有机碱(例如，但不限于三乙胺或者吡啶)添加到3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(化合物Xb)、脂肪酸和酰胺形成试剂的混合物中。在某些实施方案中，所述有机碱是在一种非质子有机溶剂中，并且是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明进一步的实施方案中，在大约15到90分钟的过程内添加有机碱。然后在大约0-22℃的温度下搅拌所述混合物1到15个小时。在本发明的某些实施方案中，所述反应在大约0-5℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，所述反应在大约22℃的温度下进行。在本发明的其他的实施方案中，所述反应在大约是室温的温度下进行。

在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使产物(化合物Xc)沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸是一种有机酸，例如柠檬酸、乙酸或者乙二酸。所述酸在添加时可以在一种水溶液中。当添加所述酸时，所述反应可以在大约22℃下。在大约0-5℃的温度下搅拌所得到的悬浮液30到120分钟。在本发明的实施方案中，在大约22℃的温度下搅拌所述悬浮液。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后，将所得到的产物重悬浮于水中，然后可以进行过滤和清洗。所述重悬浮可以进行至少超过一次。用水、丙酮和它们的混合物清洗所得到的产物(3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经酰胺(化合物Xc))。

在本发明的某些实施方案中，可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或本领域普通技术人员所公知的其他方法纯化化合物Xc或者一种或多种它的中间体。

将一当量的化合物Xc溶解到甲苯中，添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺(TMEDA)，并且将混合物冷却到大约4-9℃。添加在乙腈中的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)，然后添加额外的乙腈。将所述反应加热到大约22℃，并且连续搅拌1-3个小时。添加额外的乙腈，然后将温度下降至大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点以下，并且添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。将所述反应混合物加热到大约60-70℃，并且使反应进行10到16个小时，从而产生N-酰基-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Xe)。冷却所述反应到大约-30℃，并且过滤所得到的悬浮液。进一步通过硅胶色谱法纯化粗加工的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Xe)。

将一当量的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Xe)溶解到甲醇中，添加大约0.2当量的甲醇钠，并且在大约22℃的温度下对所述混合物搅拌20-26个小时。添加二氯甲烷和水，并且添加盐酸将pH调节至大约7。从有机层中回收N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Xf)。

在本发明进一步的实施方案中，N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Xf)可通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或本领域普通技术人员所公知的其他方法进行纯化。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-酰基-D-赤型-神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且包含不少于大约15％的其相对应的相反对映体。在本发明进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约90％的对映体纯度，并且包含不少于大约10％的其相对应的相反对映体。在进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约95％的对映体纯度，并且包含不少于大约5％的其相对应的相反对映体。仍然在进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂具有至少大约98％的对映体纯度，并且包含不少于大约5％的其相对应的相反对映体。

方案X

HOAc是脂肪酸

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键

(S)-叔-丁基4-((R)-1-羟基十六烷基)-2，2-二甲基恶唑烷-3-羧酸甲酯(化合物IIa)的保护

在本发明的另一个实施方案中，对神经鞘氨醇前体(S)-叔-丁基-4-((R)-1羟基十六烷基)-2，2-二甲基恶唑烷-3-羧酸乙酯(方案II中的化合物IIa)的仲羟基基团进行保护，并且如方案XI中所示进行二氢神经鞘磷脂的合成。

在本发明的一个具体实施方案中，如在方案XI中所示，用苯甲酰基基团对(S)-叔-丁基-4-((R)-1羟基十六烷基)-2，2-二甲基恶唑烷-3-羧酸乙酯(化合物IIa)的仲羟基基团进行保护，从而形成(S)-叔-丁基-4-((R)-1-(苯甲酸基)十六烷基)-2，2-二甲基恶唑烷-3-羧酸乙酯(化合物XIa)。然后将化合物Xia溶解到甲醇和2到3当量的乙酰氯中，生成盐酸，并且去除叔丁氧羰基(Boc)保护基团，形成3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIb)。

在本发明的某些实施方案中，用棕榈酸进行的3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇的N-酰化从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIc)如下所述进行：将3-O苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIb)、棕榈酸以及酰胺形成试剂悬浮于非质子有机溶剂中，并且将所述混合物在大约0-5℃的温度下进行冷却。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明具体的实施方案中，所述酰胺形成试剂是O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)。

将有机碱(例如，但不限于三乙胺或者吡啶)添加到3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇、棕榈酸以及酰胺形成试剂的混合物中。在某些实施方案中，所述有机碱是在一种非质子有机溶剂中，并且是四氢呋喃、二甲基甲酰胺、2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明的进一步的实施方案中，在大约15到90分钟的过程中添加所述有机碱。然后在大约0-22℃的温度下搅拌所述混合物1到15个小时。在本发明的某些实施方案中，在大约0-5℃的温度下进行所述反应。在本发明的另一些实施方案中，在大约22℃的温度下进行所述反应。在本发明的另一些实施方案中，在大约室温的温度下进行所述反应。

在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使产物沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸使一种有机酸，例如柠檬酸、乙酸或者乙二酸。所述酸在添加时可以是在一种水溶液中。当添加所述酸时，所述反应可以是在大约22℃的温度下。在大约0-5℃的温度下搅拌所得到的悬浮液30到120分钟。在本发明的实施方案中，在大约22℃的温度下搅拌所述悬浮液。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后将所得到的产物重悬浮于水中，在此之后可以对其进行过滤和清洗。所述重悬浮可以进行至少超过一次。可以用水、丙酮或者它们的混合物清洗所得到的产物(N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIc))。

在本发明的某些实施方案中，通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其他方法对N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇或其中间体的一种或多种进行纯化。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIc)溶解到甲苯中，添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺(TMEDA)，并且将混合物冷却到大约4-9℃。添加在乙腈中的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)，然后添加额外的乙腈。将所述反应加热到大约22℃，并且连续搅拌1-3个小时。添加额外的乙腈，然后将温度下降至大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点以下，并且添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。将所述反应混合物加热到大约60-70℃，并且使反应进行10到16个小时，从而产生N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIe)。冷却所述反应到大约-30℃，并且过滤所得到的悬浮液。进一步通过硅胶色谱法纯化粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIe)。

将一当量的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIe)溶解到甲醇中，添加大约0.2当量的甲醇钠，并且在大约22℃的温度下对所述混合物搅拌20-26个小时。添加二氯甲烷和水，并且添加盐酸将pH调节至大约7。从有机层中回收N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物D)。

在本发明进一步的实施方案中，可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其他方法纯化N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物D)。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且包含不少于大约15％的其相对应的相反对映体。在本发明进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约90％的对映体纯度，并且包含不少于大约10％的其相对应的相反对映体。在进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约95％的对映体纯度，并且包含不少于大约5％的其相对应的相反对映体。仍然在进一步的实施方案中，所述N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约98％的对映体纯度，并且包含不少于大约2％的其相对应的相反对映体。

方案XI

在本发明的某些实施方案中，依据下文所述的内容合成N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂。

在本发明的一个方面，可以用一种保护基团对(S)-叔-丁基-4-((R)-1羟基十六烷基)-2，2-二甲基恶唑烷-3-羧酸乙酯(化合物IIa)的仲羟基基团进行保护，所述保护基团例如，但不限于一种酯或者一种醚。在本发明的某些实施方案中，所述保护基团是一种酯，例如，但不限于，苯甲酰基酯或者芴甲氧羰基酯。在本发明进一步的实施方案中，所述保护基团是一种醚，例如，但不限于，叔丁基二苯基硅醚。

在本发明的具体的实施方案中，如在方案XII中所示的，使用苯甲酰基基团对化合物IIa的仲羟基基团进行保护，从而产生化合物XIIIa。然后将化合物XIIIa溶解到甲醇和2到3当量的乙酰氯中，生成盐酸，并且去除叔丁氧羰基(Boc)保护基团，生成3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIIb)。然后通过添加一种合适的脂肪酸和一种酰胺形成试剂对3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇进行酰计划。所述步骤如下所示：将3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIIb)、脂肪酸和酰基形成试剂悬浮于一种非质子有机溶剂中，并且在大约0-5℃的温度下冷却所述混合物。在一个实施方案中，所述非质子有机溶剂是四氢呋喃，二甲基甲酰胺，2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明具体的实施方案中，所述酰胺形成试剂是O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(HBTU)。

将有机碱(例如，但不限于，三乙胺或者吡啶)添加到3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇(化合物XIIb)、脂肪酸和酰胺形成试剂的混合物中。在某些实施方案中，所述有机碱是在非质子有机溶剂中，并且是四氢呋喃，二甲基甲酰胺，2-甲基四氢呋喃或者它们的混合物。在本发明的进一步实施方案中，在大约15到90分钟内添加所述有机碱。然后在大约0-22℃的温度下搅拌所述混合物1到15个小时。在某些实施方案中，所述反应在大约0-5℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，所述反应在大约22℃的温度下进行。在本发明的另一些实施方案中，所述反应在大约室温的温度下进行。

在搅拌大约1到15个小时之后，通过添加一种酸使产物(化合物XIIc)沉淀。在本发明的某些实施方案中，所述酸是一种有机酸，例如柠檬酸、醋酸盐或乙二酸。所述酸在添加时可以是在一种水溶液中。当添加所述酸时，所述反应是在大约22℃的温度下。在大约0-5℃的温度下搅拌所得到的悬浮液30到120分钟。在本发明的某些实施方案中，在大约22℃的温度下搅拌所述悬浮液。

在搅拌之后，过滤所述悬浮液。然后将所得到的产物重悬浮于水中，在此之后，对其进行过滤和清洗。所述重悬浮可以发生至少一次以上。所得到的产物(3-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经酰胺(化合物XIIc))可以用水、丙酮或者它们的混合物进行清洗。

在本发明的某些实施方案中，通过重结晶法，硅胶色谱法，高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其他方法对化合物XIIc或其中间体的一种或多种进行纯化。

将一当量的化合物XIIc溶解到甲苯中，添加大约0.6到1当量的四甲基乙二胺(TMEDA)，并且将混合物冷却到大约4-9℃。添加在乙腈中的大约1到2当量的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)，然后添加额外的乙腈。将所述反应加热到大约22℃，并且连续搅拌1-3个小时。添加额外的乙腈，然后将温度下降至大约-10到0℃。将气态三甲胺冷却至其沸点以下后，然后添加大约40到60当量的所述液态三甲胺。将所述反应混合物加热到大约60-70℃，并且使反应进行10到16个小时，从而产生N-酰基-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIIe)。将所述反应冷却到大约-30℃，然后过滤所得到的悬浮液。进一步通过硅胶色谱法对粗加工的N-酰基-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIIe)进行纯化。

将一当量的N-酰基-O-苯甲酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIIe)溶解到甲醇中，添加大约0.2当量的甲醇钠，然后在大约22℃的温度下搅拌所述混合物20-26个小时。添加二氯甲烷和水，然后通过添加盐酸将pH调节至大约7。从有机层中回收N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIIf)。

在本发明进一步的实施方案中，可以通过重结晶法、硅胶色谱法、高效液相色谱法或者本领域普通技术人员所公知的其他方法对N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物XIIf)进行纯化。

在本发明的某些实施方案中，所得到的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇具有至少大约85％的对映体纯度，并且包含不少于大约15％的其相对应的相反对映体。在本发明进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约90％的对映体纯度，并且包含不少于大约10％的其相对应的相反对映体。在进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约95％的对映体纯度，并且包含不少于大约5％的其相对应的相反对映体。仍然在进一步的实施方案中，所述N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂具有至少大约98％的对映体纯度，并且包含不少于大约2％的其相对应的相反对映体。

方案XII

HOAc是一种脂肪酸

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键

不需要仲羟基基团保护的N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的合成

在本发明的某些实施方案中，D-赤型-神经酰胺(化合物Vb)被直接用乙烯卤代亚磷酸盐进行磷酸化，如方案XIII所示。所述反应是在大约2.5-3.5当量的乙烯卤代亚磷酸盐的存在下，是在大约4-10当量的在一种非质子极性溶剂的碱的存在下进行的，所述非质子极性溶剂具有一个大的介电常数(＞20)和一个大的偶极矩。在某些实施方案中，所述反应在大约-20至+20℃下进行。在某些实施方案中，所述非质子极性溶剂具有超过20的介电常数。在某些实施方案中，所述非质子极性溶剂是氯仿，硝基甲烷，乙腈，丙酮，二甲基亚砜，或它们的混合物。在某些实施方案中，所述卤化磷酸盐是氯代磷酸盐。在进一步的实施方案中，所述反应在3当量的乙烯氯代磷酸盐下进行。在另一些实施方案中，所述碱是N，N-二异丙基乙胺。在另外的实施方案中，所述反应是在5eq的N，N-二异丙基乙胺下进行。

不受任何具体的机制的限制，可以认为所述这种溶剂阻碍，例如，通过羟基部分的溶剂化，在神经酰胺内连接的分子内氢键。合适的溶剂包括，但不限于：氯仿，硝基甲烷，乙腈，丙酮，或二甲基亚砜。

用醇淬灭没有反应的乙烯卤代亚磷酸盐之后，环状磷酸酯(化合物XIIIa)被氧化，并且在大约-50到10℃之间的温度下溴存在的情况下打开的环，在大约-20℃温度下的实施方案中，从而产生神经酰胺-溴化衍生物(化合物XIIIb)，其中P-Br键通过添加水而被水解。在本发明的进一步的实施方案中，所述醇是甲醇或者乙醇。化合物XIIIb用无水三甲胺分成四份，从而提供N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(化合物Vh)。在本发明进一步的实施方案中，N-酰基-D-赤型-神经鞘磷脂是N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。

方案XIII

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键

在另一个实施方案中，本发明提供了用于合成N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的方法，包括步骤：

a)在有效形成N-((2S，3R，E)-1-((1，3，2-二氧杂亚磷酸-2-基)氧基)-3-羟基十八碳-4-烯-2-基)棕榈酰胺的条件下，使N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇与乙烯氯代磷酸盐进行反应；

b)在有效产生2-溴乙基((2S，3R，E)-3-羟基-2-棕榈酰氨基十八碳-4-烯-1-基)磷酸溴的条件下，使在有效形成N-((2S，3R，E)-1-((1，3，2-二氧杂亚磷酸-2-基)氧基)-3-羟基十八碳-4-烯-2-基)棕榈酰胺与溴进行反应；以及

c)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的条件下，使2-溴乙基((2S，3R，E)-3-羟基-2-棕榈酰氨基十八碳-4-烯-1-基)磷酸溴与三甲胺进行反应。

不需要仲羟基基团保护的N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的合成

在本发明的某些实施方案中，D-赤型-二氢神经酰胺(化合物VIIb)如方案XIV所示，可直接用乙烯卤代亚磷酸盐进行磷酸化。所述反应是在大约2.5-3.5当量的乙烯卤代亚磷酸盐的存在下，在大约4-10当量的在一种非质子极性溶剂中的碱的存在下进行，其中所火速非质子极性溶剂具有一种大的介电常数(＞20)以及一种大的偶极矩。在某些实施方案中，所述反应在大约-20到+20℃的温度下进行。在某些实施方案中，所述非质子极性溶剂具有超过20的介电常数。在某些实施方案中，所述非质子极性溶剂是氯仿、硝基甲烷、乙腈、丙酮、二甲基亚砜、或者它们的混合物。在具体的实施方案中，所述卤代亚磷酸盐是乙烯氯代磷酸盐。在进一步的实施方案中，所述反应在3当量的乙烯氯代磷酸盐下进行。在其它的实施方案中，所述碱是N，N-二异丙基乙胺。在另外的实施方案中，所述反应是在5eq的N，N-二异丙基乙胺下进行。

用醇淬灭非反应的乙烯卤代亚磷酸盐之后，环状磷酸酯(化合物XIIIa)同时被氧化，并且在大约-50到10℃之间的温度溴存在的情况下打开环(优选大约-20℃温度下)，从而产生二氢神经酰胺-溴化衍生物(化合物XIVb)，其P-Br键通过添加水而被水解。在本发明的进一步的实施方案中，所述醇是甲醇或者乙醇。化合物XIVb用无水三甲胺分成四份，用于提供N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘磷脂(化合物VIIh)。在本发明进一步的实施方案中，N-酰基-D-赤型-二氢神经鞘氨醇是N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇。

方案XIV

Ac是脂肪酸残基，具有3到36个碳以及0到6个碳-碳双键

a)在有效产生N-((2S，3R)-1-((1，3，2-二氧磷杂环戊-2-基)氧基)-3-羟基十八烷-2-基)棕榈酰胺的条件下，使N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘氨醇与乙烯氯代磷酸盐进行反应；

b)在有效产生2-溴乙基((2S，3R)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八烷基)磷酸溴的条件下，使N-((2S，3R)-1-((1，3，2-二氧磷杂环戊-2-基)氧基)-3-羟基十八烷-2-基)棕榈酰胺与溴进行反应；以及

c)在有效产生N-棕榈酰-D-赤型-二氢神经鞘磷脂的条件下，使2-溴乙基((2S，3R)-3-羟基-2-棕榈酰胺十八烷基)磷酸溴与三甲胺进行反应。

实施例

实施例1：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的合成

步骤1：2-(E)-十六烯醛的合成

步骤1.1：1-十四烷醛

将在二氯甲烷(1500ml)中的1-十四烷醇(110.0g；0,513mol)和三氟异氰尿酸(178.1g；0,77mol)溶液在-30℃的温度下添加到(2，2，6，6-四甲基哌啶-1-基)-氧基(TEMPO)(800mg；0.051mol)。所述反应混合物在0℃的温度下搅拌1.5h，并且在硅藻土上进行过滤。然后用Na₂CO₃的饱和溶液(800ml)对将所收集的有机相进行清洗，然后用HCl 1N(800mL)进行清洗。然后通过MgSO₄对其进行干燥，然后过滤并且在真空下进行浓缩，从而得到所述标题化合物1-十四烷醛，呈白色固体(99.6g；91％)。

步骤1.2：乙基-2-十六碳烯酸酯

在0℃的温度下，逐滴添加在四氢呋喃(40mL)和膦酰基乙酸三乙酯(9.4mL，0,047mol)的NaH(2.4g，0,059mol)悬浮液。在0℃的温度下搅拌30分钟之后，添加在四氢呋喃(40mL)中的十四烷醛溶液，并且将反应混合物加热到室温并且进一步搅拌3小时。然后添加NaCl(50mL)的饱和溶液，并且用Et₂O(3X 200mL)萃取所得到的水层。然后收集有机层，用MgSO₄进行干燥，并且过滤，然后蒸发其汇总的溶剂。所得到的产物通过在硅胶(庚烷-乙酸乙酯：95/5)上的快速柱色谱进行纯化，从而得到所述标题化合物乙基-2-十六碳烯酸酯，呈无色液体(12.3g；92％)。

Rf＝0.24(己烷/Et₂O：95/5).

GC：tr＝13.13min(膦酰基乙酸三乙酯)；tr＝15.80min(1-十四烷醛)；tr＝20.60min(乙基-2-十六碳烯酸酯)

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：0.87(t，3H，CH₃)；1.25(br，20H)；1.28(t，3H，CH₃)；1.44(m，2H，CH₂)；2.18(qd，2H，CH₂，³J＝6.5Hz，⁴J＝1.5Hz)；4.18(q，2H，CH₂)；5.80(dt，1H，³J＝15.5Hz，⁴J＝1.5Hz)；6.96(dt，1H，CH₂，³J＝15.5Hz，³J＝6.5Hz)。

步骤1.3：2-(E)-十六碳烯-1-醇

在0℃下将二异丁基氢化铝(54.5mL，在环己烷中1M，0,054mol)滴加到在四氢呋喃(20mL)的乙基-2-十六碳烯酸酯(6.4g，0,023mol)溶液中。在0℃的温度下搅拌所述反应混合物，直至通过TLC检测发现起始材料完全消耗完为止。相继添加Et₂O(50mL)和酒石酸钠(50mL)饱和溶液，并且搅拌直至2个分层清晰可见。用Et₂O(2x 50mL)萃取所述水层。收集所得到的有机层，并且通过MgSO₄干燥，然后真空条件下去除其中的溶剂，从而得到标题化合物，2-(E)-十六碳烯-1-醇，呈白色蜡状固体(5.3g；97％)。

Rf＝0.31(己烷/Et₂O：1/1).

GC：tr＝19.1min

¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：0.87(t，3H，CH₃)；1.25(br，22H)；2.03(q，2H，CH₂，³J＝6.0Hz)；4.09(d，1H，³J＝5Hz)；5.66(m，2H)。

步骤1.4：2-(E)-十六碳烯-1-缩醛

添加在氩气气氛条件下的在二氯甲烷(30mL)中的2-(E)-十六碳烯-1-醇(5.2g；0,022mol)溶液，在二氯甲烷(30mL)中的氯铬酸吡啶(PCC)(16,3g；0,043mol)的悬浮液，随后添加硅藻土(20g)。在0℃的温度下搅拌3小时之后，用20mL的二乙醚稀释反应混合物，并且在硅胶垫上进行过滤。蒸发其中的溶剂，并且通过在硅胶(庚烷-乙酸乙酯：95/5)上的快速色谱对粗加工的产物进行纯化，从而得到标题化合物，2-(E)-十六碳烯-1-缩醛，白色固体(2.2g；43％)。

Rf＝0.14(庚烷/Et₂O：95/5)

GC：tr＝18.9min

′H NMR(200MHz，CDCl₃)：0.88(t，3H，CH3)；1.26(br，20H)；1.50(m，2H，CH₂)；2.35(qd，2H，³J＝7Hz，⁴J＝1.5Hz)；6.1(ddt，1H，³J＝15.5Hz，³J＝8Hz，⁴J＝1.5Hz)；6.85(td，1H，³J＝15.5Hz，³J＝7Hz)；9.5(d，1H，³J＝8Hz).

步骤2：(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮的合成

步骤2.1：(1R，2R，3S，5R)-(-)-蒎烷二醇

将S-(-)--蒎烯(24.3g；0,18mol)、二水合锇酸钾(0,13g)、溶解到17.3mL吡啶中的N-甲基吗啉-N-氧化物(在水中60％；0.21mol；41.7g)、107mL的丙酮、以及11.9mL的去离子水添加到250mL的三颈烧瓶中。回流所述反应混合物60个小时，然后用甲基叔丁基醚(MTBE)(300mL)和己烷(60毫升)进行稀释。然后添加水(200mL)，并且轻轻倒出其中的有机层，然后相继用10％的柠檬酸(3x100mL)、NaHCO₃饱和溶液(100mL)、盐水(100mL)进行清洗，然后用MgSO₄进行干燥，并且过滤。在真空下去除其中的溶剂，从而得到标题化合物，(1R，2R，3S，5R)-(-)-蒎烷二醇，暗橙色油(24.5g)。

GC：tr＝12.0min(二醇)；tr＝10.9min(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮；(5-10％)

步骤2.2：(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮

在10℃的温度下，将三乙胺(Et₃N)(80.2mL；0,58mol)添加到在二甲基亚砜/二氯甲烷溶剂混合物(154mL；1/1)中的(1R，2R，3S，5R)-(-)-蒎烷二醇(24.5g；143.9mmol)的溶液中。然后在30分钟内分批添加SO₃·吡啶(68.7g；0,43mol)，在该过程中将温度维持在20℃以下。在10℃的温度下搅拌所述反应混合物2个小时，然后用乙酸乙酯(300mL)稀释。用HCl 0.5N(2*150mL)，brine(150mL)清洗有机层，然后用MgSO₄进行干燥，并且过滤。在真空下去除其中的溶剂，从而得到棕色油。通过在硅胶(甲基环己烷-乙酸乙酯：9/1)上的加速色谱对粗加工的产物进行提纯，从而得到标题化合物，(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮，黄色油(19.2g；两步收率63％)。

GC：tr＝10.9min；

蒸馏：B.p＝100-104℃(3-4mmHg)

′H NMR(400MHz，CDCl₃)：0.90(s，3H)；1.30(s，3H)；1.40(s，3H)；1.70(d，1H，J＝12.0Hz)；2.10(m，2H)；2.30(s，1H)；2.50(m，1H)；2.60(brs，2H).

步骤3：D-赤型-神经鞘氨醇盐酸盐

步骤3.1：(1R，2R，5R)-乙基-((2-hydroxy蒎烷-3-烯基)氨基)乙酸盐

向在甲苯(100mL)中的甘氨酸乙酯盐酸盐(16.6g；0,13mol)中通入NH₃气体1个小时。滤出形成的氯化铵，并且将(1R，2R，5R)-(+)-2-羟基-3-蒎烷酮(步骤2.2)(10.0g；0,59mol)添加到具有几滴BF₃.OEt₂的游离碱甘氨酸乙酯溶液中。然后用迪安-斯塔克设备回流所述反应混合物5个小时。当反应完成之后，蒸发其中的溶剂。通过在用Et₃N(5％在乙醚中)充满的硅胶上的快速色谱对所得到的产物进行纯化，并且用Et₂O洗脱所述标题化合物(1R，2R，5R)-乙基-((2-hydroxy蒎烷-3-烯基)氨基)乙酸盐。

Rf＝0,35(环己烷-乙酸乙酯：1/1)

′H NMR(CDCl₃)：0.88(s，3H，CH₃)；1.30(t，3H，CH₃，J＝7.0Hz)；1.34(s，3H，CH₃)；1.53(s，3H，CH₃)；1.57(d，1H，J＝10.0Hz)；2.07(m，2H)；2.36(dtt，1H，J＝10.0Hz；J＝6.0Hz；J＝1.5Hz)；2.50(d，2H，J＝1.5Hz；J＝1.0Hz)；2.61(s，1H，OH)；4.17(s，2H，＝N-CH₂)；4.23(q，2H，CH₂CH₃，J＝7.0Hz).

NMR ¹³C(CDCl₃)

quat.Ester)；170,2(C-1′quat.amide)；76，5(C-2′quat.)；60,9(CH ₂-CH₃)；52，6(C-2)；50,4(C-3′)；38，6(C quat)；38，3(C-5)；33，7(C-6)；28，2(CH₃)；28，1(C-4′)；27，3(CH₃)；22，8(CH3)；14，2(CH₂-CH ₃).

步骤3.2(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]heptan-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-((E)- ((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯

在氩气气氛下，将二氯甲烷(15mL)的三异丙基氧化氯钛(5.2g；0,02mol)溶液、二氯甲烷(8mL)的2-(E)-十六碳烯-1-醛(4，35g；0,0018)和三乙胺(6.1mL；0,044mol)在0℃温度下添加到二氯甲烷(9.6mL)的(1R，2R，5R)-乙基-((2-hydroxy蒎烷-3-烯基)氨基)乙酸盐(5.0g；0,020mol)中。在0℃下搅拌反应混合物4个小时之后，用盐水(25mL)猝灭。用乙酸乙酯萃取水层，然后用MgSO₄进行干燥；在真空条件下去除其中的溶剂，从而得到淡黄-橘色的油(9.7g)，73/27的异丙基和乙酯的混合物，(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯。

Rf＝0,7(环己烷-乙酸乙酯：1/1)

′H NMR(CDCl₃).

0.88(t，3H，J＝6.5Hz)；1.50-1.10(m，28H，(CH₂)₁₂+2CH₃)；1.50(s，3H，CH₃)；1.53(d，1H)；2.13(q，2H)；2.18-1.95(m，2H)；2.34(dtd，1H)；2.51(m，1H)；3.25(s，1H)；3.75(s，1H)；4.15(d，1H，J＝6.7Hz)；4.20(dt，1H，J＝7.0Hz；J＝4.0Hz)；4.55(t，1H，J＝6.7Hz)；5.05(hept，1H，J＝6.3Hz，CH(CH₃)₂)；5.55(dd，1H，J＝15.4Hz；J＝7.1Hz)；5.70(dt，1H，J＝15.4Hz；J＝6.5Hz).

步骤3.3：(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯以及(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯

将HCl 1.2M(203mL)滴加到在四氢呋喃(51mL)中的由上述步骤得到的异丙基和乙酯(即，(2S，3R，E)-乙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]heptan-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯以及(2S，3R，E)-异丙基3-羟基-2-((E)-((1S，2S，5S)-2-羟基-2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚烷-3-亚基)氨基)十八碳-4-烯酸酯)的粗加工混合物(14.8g；0,030mol)中。然后在室温下搅拌所述混合物72个小时。蒸发掉四氢呋喃，然后用乙酸乙酯萃取水层。在去除了溶剂和(+)-2-羟基-3-蒎烷酮(6.8g)之后，得到有机层。干燥水层，从而得到(2R，3R，E)-乙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯以及(2R，3R，E)-异丙基2-氨基-3-羟基十八碳-4-烯酸酯(5.7g)。

Rf＝0,45(Et₂O-MeOH：96/4)

步骤3.4：D-赤型-神经鞘氨醇盐酸盐

将硼氢化钠(4.40g；0,12mol)添加到在40mL EtOH/H₂O(3/1)溶剂混合物中的上述步骤得到的氨基酯盐酸盐(2.2g；0,0058mol)的悬浮液中。在添加NH₄Cl饱和溶液(40mL)之前，在0℃下搅拌所述混合物72个小时。用二氯甲烷(4*100mL)萃取水层，用盐水进行清洗，通过MgSO₄干燥，并且过滤。在真空条件下去除其中的溶剂，从而得到标题化合物D-赤型-神经鞘氨醇盐酸盐，一种白色固体(1.5g；86％)。

Rf＝0,3(CHCl₃-MeOH-H₂O：13/6/1)

′H NMR(CDCl₃

(t，3H，J＝6.5Hz)；1.50-1.20(m，22H，(CH₂)₁₂)；2.00(q，2H，J＝7.8Hz)；3.15(s，1H，OH)；3.70(m，4H)；4.30(s，1H，OH)；5.40(dd，1H，J＝15.5Hz；J＝6.3Hz)；5.80(dt，1H，J＝15.5Hz；J＝7.8Hz)；8.46(brs，3H).

步骤4：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇

将棕榈酸(1.9g；0,074mol)以及在四氢呋喃中的D-赤型-神经鞘氨醇(2.2g；0,074mol)溶液依次添加到在二甲基甲酰胺(15mL)中的O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸(3.1g；8.1mmol)的悬浮液中。然后将所得到的白色悬浮液冷却到0℃，然后添加三乙胺(2.5mL；0,018mmol)。在室温下搅拌所述反应混合物12个小时。然后添加5％的柠檬酸(400mL)的溶液，并且滤出悬浮液。将白色固体在室温下与水(60mL)混合物，过滤，并且用水进行清洗。然后在真空下在40℃的温度下进行干燥，从而得到标题化合物，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(3.5g；80％)。

¹H NMR(CDCl₃)：0.97(6H，t)；1.10-1.40(m，46H)；1.62(2H，m)；2.04(2H，m，CH ₂-CH)；2.21(t，2H，J＝8.2Hz，CH₂ CONH)；2.71(m，2H)；3.69(m，1H)；3.80-4.00(m，2H)；4.28(m，1H，CH(OH)CH)；5.52(ddt，1H，J＝15.4Hz；J＝6.4Hz；J＝1.0Hz，CH(OH)CH)；5.77(dtd，1H，J＝15.4Hz；J＝6.7Hz；J＝1.1Hz，CH₂ CH)；6.22(d，1H，J＝6.8Hz，NH)。

步骤5：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

步骤5.1：N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇

将在二氯甲烷(14ml)中的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(0.58g，1.08mmol)、三乙胺(1.2ml)、4-二甲基氨基吡啶(5mg)以及三苯甲基氯(0.45g，1.62mmol)加热回流60个小时。蒸发挥发性的物质，将残留物再次溶解与乙酸乙酯中，并且所述混合物依次用1M盐酸、aq.NaHCO₃以及盐水进行清洗。用MgSO₄干燥有机相，并且进行蒸发。所述残留物在庚烷/乙酸乙酯(7∶3)的硅胶上进行色谱分离，从而得到蜡状固体的N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇(0.39g，46％)。

Rf＝0.49(CH₂Cl₂/乙酸乙酯/Et₃N：97/3/0.1)

¹H NMR(CDCl₃)0.88(6H，t)，1.40-1.15(46H，m)，1.64(2H，m)，1.91(2H，m)，2.20(2H，t，J＝8.2Hz)，3.28(1H，dd，J＝9.6Hz，J＝4.0Hz)，3.40-3.35(2H，m)，4.04(1H，m)，4.17(1H，m)，5.24(1H，dd，J＝15.4Hz，J＝6.2Hz)，5.62(1H，dt，J＝15.4Hz，J＝6.6Hz)，6.06(1H，d，J＝7.5Hz，NH)，7.35-7.20(9H，m)，7.35-7.45(6H，m)。

步骤5.2：N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

在氮气气氛下将4-二甲基氨基吡啶(10mg)和苯甲酰氯(0.1ml，0.85mmol)添加到吡啶(5ml)中的N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇(0.39g，0.50mmol)溶液中，并且搅拌所述混合物20个小时。在减压的条件下去除其中的溶剂，并且所述的残留物在aq.NaHCO₃和乙酸乙酯之间分配。用盐水洗涤有机相，然后干燥(MgSO₄)、以及蒸发、然后在庚烷/乙酸乙酯-己烷(85∶15to 1∶1)的硅胶上色谱分离所得残余物，从而得到标题化合物，N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(207mg，60％)，呈蜡状固体。

¹H NMR(CDCl₃)

1.23(46H，m)，1.56(2H，m)，1.99(2H，m)，2.08(2H，t)，3.17(1H，dd，J＝7.4Hz，J＝3.9Hz，CH(H’)OH)，3.43(1H，dd，J＝9.7Hz，3.9Hz，CH(H’)OH]，4.47(1H，m，CH-(NHCOR))，5.43[1H，dd，J＝15.3Hz，J＝7.3Hz，CH(OCOPh)CH＝]，5.75-5.60[2H，m，NH，CH(OCOPh)]，5.86(1H，dt，J＝15.3Hz，J＝7.9Hz，CH₂CH＝)，7.25-7.10(9H，m)，7.40-7.30(8H，m)，7.54(1H，t，J＝7.5Hz)，7.92(2H，d，J＝7.3Hz)。

步骤5.3：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

将在二氯甲烷二氯甲烷(18ml)和甲醇(18ml)中的N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(1.10g，1.24mmol)和甲苯-p-磺酸单水合物(0.23g，1.36mmol)的溶液在氮气气氛下搅拌3个小时。蒸发其中的溶剂，并且将所得残留物在aq.NaHCO₃和乙酸乙酯之间分配。所述有机相用盐水进行洗涤，然后通过MgSO₄干燥、然后蒸发至干燥。所得残留物在硅胶上进行色谱分离，并且用庚烷/乙酸乙酯(1∶1)进行洗脱，从而得到标题化合物，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(0.64g；80％)。

¹H NMR(CDCl₃/CD₃

1.10(46H，m)，1.54(2H，m)，1.96(2H，m)，2.14(2H，m)，2.77(2H，br s)，3.71(2H，m，CH₂O)，4.24(1H，m，CHN)，5.60-5.40[2H，m，CH(OCOPh)CH＝]，5.79(1H，dt，J＝15.0Hz，J＝6.8Hz，CH₂CH＝)，6.18(1H，d，J＝9.6Hz，NH)，7.38(2H，dd，J＝7.6Hz，J＝7.2Hz)，7.52(1H，dd，J＝7.6，J＝7.6Hz)，7.96(1H，d，J＝7.2Hz)。

步骤6：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂

将在干燥的甲苯(5ml)中的of N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(0.2g，0.31mmol)和四甲基乙二胺(TMEDA)

溶液冷却至大约8℃。逐滴滴加在0.1mL的乙腈中的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧杂正膦(82mg，0.57mmol)到所述溶液中。然后将所述混合物加热到室温，并且搅拌4个小时。添加乙腈(5mL)，随后添加无水三甲胺。将烧瓶加热到65-70℃的温度14个小时。然后将所述系统冷却到室温，并且打开所述烧瓶。在减压条件下去除溶剂。

将所得到的产物，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂，溶解到甲醇(1.5mL)中。将甲醇钠(30％in甲醇，15

添加到所述溶液中。在搅拌过夜之后，添加二氯甲烷和水。调节pH，并且蒸发所述有机层至干燥。通过柱色谱纯化所述粗加工的材料，从而得到标题化合物，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(66mg，30％通过3步).

¹H NMR(CDCl₃/CD₃OD)6：0.90(t，J＝7.1Hz，6H)，1.26(m，46H)，1.56(m，(C＝O)CH₂CH₂，2H)，1.99(m，CH＝CHCH₂，2H)，2.14(t，(C＝O)CH₂，2H)，3.24(s，N(CH₃)₃，9H)，)，3.68(m，POCH₂CH₂N，2H)，3.91(m，POCH₂CH，2H)，4.04(t，CHO，4H，J＝7.7Hz)，4.14(m，CHN，2H)，4.28(m，POCH₂CH₂N，2H)，5.44(ddt，J＝15.4Hz，J＝7.6Hz，J＝1.5Hz，2H)，5.71ddt，J＝15.4Hz，J＝6.6Hz，J＝0.5Hz，1H)。

实施例2：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的实验室规模合成

步骤1：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇

将在四氢呋喃(890ml)中的棕榈酸(17.12g，66.8mmol)和D-赤型-神经鞘氨醇(20g，66.8mmol)添加到140ml的二甲基甲酰胺中的O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(27.84g，73.4mmol)的悬浮液中。将所得到的白色悬浮液在0-5℃的温度下进行冷却，在30到60分钟内添加22.5ml(160.7mmol)的三乙胺，并且在室温下搅拌所述混合物12个小时。在薄层色谱(TLC)分析显示＞99％转换为N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇时之后，添加柠檬酸5％(400ml)，在0-5℃的温度下搅拌所述混合物30分钟，并且过滤所得到的悬浮液。在室温下将所述白色块体悬浮于水中(600ml)。过滤所述悬浮液，并且用水进行清洗。在降压下，40℃的温度下干燥12个小时后，得到32.4g的(产率90％)of N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇。通过HPLC的纯化为98.1％，并且通过HPTLC为99.2％。

)：0.97(6H，t)，1.1-1.4(46H，m)，1.62(2H，m)，2.04(2H，m，CH₂CH)，2.21(2H，t，J 8.2Hz，CH₂CONH)，2.71(2H，m)，3.69(1H，m)，3.8-4.0(2H，m)，4.28(1H，m，CH(OH)CH)，5.52(1H，ddt，J 15.4，6.4，1.0Hz，CH(OH)CH))，5.77(1H，dtd，J 15.4，6.7，1.1Hz，CH₂CH)，6.22(1H，d，J 6.8Hz，NH)。

步骤2：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

步骤2.1N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇

将在甲苯(150ml)中的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(16.30g，30.3mmol)，吡啶(250ml)，以及三苯甲基氯(10.15g，36.4mmol)的悬浮液在52℃的温度下加热12个小时。在12个小时之后，TLC分析指示超过90％转化为N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇以及大约2-5％的N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇。将所述悬浮液冷却至0-5℃，并且过滤从而去除某些盐。

步骤2.2：N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

将4-二甲基氨基吡啶(560mg，4.54mmol)和苯甲酰氯(5.8ml，50mmol)添加到上述步骤得到的粗加工反应产物的溶液中，并且在0-5℃的温度下搅拌所述混合物15个小时。在15个小时后，TLC分析显示超过97％转化为N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇。所述反应混合物在水(130ml)和乙酸乙酯(530ml)之间分配。将用水(160ml)清洗4次有机相，以达到pH为7。在减压条件下蒸发有机相，并且在5℃下将所得到的油状黄色残留物(34g)溶解到二氯甲烷(300ml)和甲醇(300ml)，并且直接用于税后的脱三苯甲基步骤。

步骤2.3：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

将甲苯-p-磺酸一水合物(2.88g，15.15mmol)添加到上述在二氯甲烷/甲醇的N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇溶液中。在18-22℃的温度下，搅拌所述混合物3个小时，在3个小时后，TLC分析显示超过97％转化为N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇。在0-5℃的温度下用2。58ml的三乙胺中和混合物，并且蒸发掉二氯甲烷(40℃/340mbar)。所得到的残留物在0-5℃的温度下搅拌1个小时，过滤悬浮液，用甲醇进行清洗，然后在35℃下干燥12个小时，从而得到21.9g(113％)的粗产物(N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇)。

在42℃下用甲醇(500ml)和二氯甲烷(5ml)进行重结晶，所得溶液在20-22℃的温度下搅拌1个小时，然后冷却1小时至0-5℃。过滤后，所得到的块体用甲醇(2x 50ml)进行清洗，然后在35℃的温度下减压干燥12个小时，从而得到13.6g混杂有13％未保护的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇。通过住色谱法在185g硅胶上进一步纯化结晶的材料。用2.2L己烷/乙酸乙酯5/1、2.2L己烷/乙酸乙酯3/1以及最后的4.4L己烷/乙酸乙酯2/1进行洗脱。将包含产物的馏分合并，并且在40℃的温度下蒸干，得到12.1g(产率62％)的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇。通过HPLC的纯度为97.7％，并且通过HPTLC的纯度为99.6％。

：0.87(6H，t)，1.1-1.3(46H，m)，1.54(2H，m)，1.96(2H，m)，2.14(2H，m)，2.77(2H，br s)，3.71(2H，m，CH₂O)，4.24(1H，m，CHN)，5.4-5.6(2H，m，CH(OCOPh)CH＝)，5.79(1H，dt，J 15.0，6.8Hz，CH₂CH＝)，6.18(1H，d，J 9.6Hz，NH)，7.38(2H，dd，J 7.6，7.2Hz)，7.52(1H，dd，J 7.6，7.6Hz)，7.96(1H，d，J 7.2Hz)。

步骤3：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂

步骤3.1：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧杂磷环戊)-神经鞘氨醇

将N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(9.49g，14.8mmol)几乎完全溶解到甲苯(200ml)中，并且充入到密封反应器。将四甲基乙二胺(2.4ml，15.8mmol)添加到混合物中。将混合物冷却到7℃，随后添加在乙腈(5ml)中的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)(3.90g，27.3mmol)溶液。在7℃两个小时之后，将反应加热到21℃两个小时。TLC分析显示超过97％将N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇转化为中间体N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧杂磷环戊)-神经鞘氨醇。

步骤3.2：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂

将乙腈(200ml)导入到反应器中，随后添加气态三甲胺，直到达到0.5-0.7的恒压。在加热到67℃期间，压强上升至1.8-2.0bar。在14个小时后，TLC分析显示中间体N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-1-O-(2-氧-1，3，2-二氧杂磷环戊)-神经鞘氨醇几乎完全反应。在冷却至-5℃之下后，过滤悬浮液。粗加工的3-O-苯甲酰基-N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂在35℃下进行干燥，产率9.1g(76％)。通过住色谱在90g故交上进一步纯化所述粗加工材料。用1.1L二氯甲烷/甲醇6/1；1.1L二氯甲烷/甲醇4/1；以及最后用4.3L二氯甲烷/甲醇3/1进行洗脱。将包含产物的馏分合并，并且在35℃的温度下蒸干，得到8.0g(产率88％)的3-O-苯甲酰基-N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。通过HPLC的纯度为94.8％。

步骤4：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂

将3-O-苯甲酰基-N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(8.0g，9.9mmol)溶解到甲醇(40ml)中。将甲醇钠(在甲醇中30％，5.4M，367μl，2.0mmol)添加到溶液中，从而到至pH为11。在过夜搅拌后，TLC分析指出苯甲酰基酯几乎完全反应。添加二氯甲烷(80ml)，随后添加38ml的水，并且用1.8ml的1M的盐酸将pH调节到6-7。在35℃的温度下将较下的一层蒸干，并且将残余物吸收到8.5ml甲醇和8.5ml二氯甲烷中。将丙酮(95mL)添加到澄清溶液中。在0℃下搅拌悬浮液几个小时，然后过滤。所得到的残余物在30℃下干燥，得到4.3g的标题产物，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂(62％)。通过HPLC的纯度为98.9％。根据NMR分析，顺式异构体的含量和L-苏式异构体的含量分别低于1％。

CD₄OD)：0.88(6H，t，2x CH₃)，1.25(46H，m，23x CH₂)，1.56(2H，m，(C＝O)CH₂CH₂)，1.99(2H，m，CH＝CHCH₂)，2.14(2H，t，(C＝O)CH₂)，3.24(9H，br s，N(CH₃)₃)，3.68(2H，m，POCH₂CH₂N)，3.91(2H，m，POCH₂CH)，4.04(1H，t，CHO，J 7.7Hz)，4.14(1H，m，CHN)，4.28(2H，m，POCH₂CH₂N)，5.42-5.46(2H，dd，CHCH＝CHCH₂，J 15.3，7.4Hz)，5.65-5.70(1H，dt，CHCH＝CHCH₂，J 14.6，7.2Hz)

实施例3：棕榈酰-神经鞘磷脂的小规模合成

步骤1：Boc-L-Ser-OMe

在容器中将32.2kg L-Ser-OMe·HCl(206.97mol)悬浮于288kg乙酸乙酯中，并且冷却到2℃。在大约2℃下添加将液态三乙胺(24.1kg，238.17mol，1.15eq.)，随后添加在24kg乙酸乙酯中的Boc₂O(51.9kg，237.80mol，1.15eq.)溶液。将反应混合物加热到22℃，并且搅拌过夜。TLC分析显示小于1％的L-Ser-OMe·HCl的含量。添加114L净化水，并且分离其中的相。用114L净化水重复清洗两次。合并三个水相，并且用102kg乙酸乙酯萃取。TLC分析显示在水相中没有产物。合并两个有机相，并且在60℃下蒸干。将88kg甲苯添加到残留物中，并且在60℃下进行蒸馏。重复上述过程。TLC分析显示粗加工的Boc-L-Ser-OMe的纯度为95％-97％。

步骤2：(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯

在630L的容器中，在22℃的温度下将粗加工的Boc-L-Ser-OMe(大约45.4kg，206.97mol)溶解到256kg四氢呋喃中。添加71.8kg 2，2-二甲氧基丙烷(689.39mol，3.33eq.)，然后添加在20kg四氢呋喃中3.3kg苯磺酸(20.86mol，0.10eq.)的溶液，然后用20kg四氢呋喃进行清洗。加热回流所述反应混合物，在3个小时内蒸馏出210L的四氢呋喃。TLC分析显示1-2％的Boc-L-Ser-OMe的含量。用1.0kg的三乙胺(9.88mol，0.05eq)在22℃下中和至pH为6.5。在60℃下蒸干反应混合物，随后在25℃下添加82kg己烷和26L净化水。用45L净化水清洗有机相。TLC分析显示在水相中不存在产物。在60℃下蒸干有机相，将甲苯(88kg)添加到残余物中，并且在60℃下蒸馏两次，分离得到的产物，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯(48.89kg，188.55mol，从L-Ser-OMe·HCl收率91％)为黄色液体。通过TLC分析纯度为97％。干燥损失为4.2％，并且水含量为0.1％。通过MS和1H NMR确定其成分。

步骤3：(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷

用15kg四氢呋喃处理100L容器，并且在50℃下真空干燥。将二甲基甲基膦酸酯(4.6kg，37.07mol，2.00eq)倒入容器中，并且溶解到29kg的四氢呋喃。冷却所述混合物酯-75℃之下，并且在2个小时内添加9.4kg在庚烷中25％的正丁基锂(2.34kg正丁基锂，36.58mol，1.98eq)的溶液，同时将混合物维持在-70℃到-75℃温度下，随后用5L庚烷进行清洗。在搅拌一个小时溶液后，在1个小时内添加在4kg四氢呋喃中的4.8kg粗加工的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯(18.51mol)，同时将混合物维持在-70℃到-75℃温度下，随后用5L四氢呋喃进行清洗。加热反应混合物酯0℃持续40分钟，并且搅拌30分钟。

TLC分析显示S)-3-(叔丁氧基羰基)-2，2-二甲基-4-恶唑羧酸甲酯的含量为10-15％。在20℃之下，用在4.8gk四氢呋喃的600mk净化水溶液进行猝灭。在20℃之下，用13L在净化水中20％的柠檬酸一水合物溶液将pH调节到6-7。在添加10L乙酸乙酯之后，分离其中的相。用13kg乙酸乙酯萃取水相。TLC分析显示在水相中没有产物。合并两个有机相，并且在60℃下蒸发20L体积。最后在旋转式汽化器中40℃下进行干燥，得到7.2kg(20.49mol，111％)标题化合物，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷，一种黄色油。通过TLC分析纯度大约为70％。干燥损失为14.4％，并且水含量为1.4％。通过MS确定其身份。

步骤4：(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷

在22℃下，将(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(2-(二甲氧基磷酰基)-1-氧-乙基)-2，2-二甲基恶唑烷(21.6kg，61.48mol)和17.0kg碳酸钾(123.0mol，2.00eq.)添加到在250L容器中的239kg乙腈中，同时搅拌。添加1-十四烷醛(6.35kg，30.75mol，0.50eq)和3.1L净化水，从而得到9.0的pH。在反应进行过夜之后，TLC分析显示1-十四烷醛的含量为5-10％，并且磷酸盐的含量为2％。滤出其中的盐，并且用270L庚烷分批进行清洗。在60℃下蒸干所合并的有机相。将残留物溶解到48kg的己烷中，并且用在18L净化水中的0.9kg氯化钠溶液清洗两次。TLC分析显示在水相中不存在产物。在60℃下蒸干有机相，并且溶解到75kg己烷汇总。最后在旋转式蒸发器40℃下干燥得到16.9kg(38.61mol，63％基于磷酸盐)的标题化合物，(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷，一种棕色油。基于检测方法的TLC分析可知纯度为大约50-86％，并且通过HPLC分析纯度为81％。干燥损失为2.2％，并且水含量为0.05％。通过MS确定其身份。

步骤5：(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷

在1000L的容器中，将粗加工的(S)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-氧-十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(16.9kg，38.61mol)和15.8g的七水合氯化铈(42.49mol，1.10eq.)zai 305kg的甲醇中搅拌，并且冷却到-18℃。将2.19kg的硼氢化钠(57.89mol，1.50eq.)溶液和58g的在8.8L净化水中的30％的氢氧化钠(0.44mol)冷却到0℃，然后在5个小时内添加到酮中。在进一步搅拌30分钟之后，TLC分析显示酮含量少于1％。通过在2个小时内将反应混合物加热到22℃使得过量的硼氢化钠失活，进一步搅拌1个小时。在60℃的温度下，蒸馏去除甲苯(320L)。过滤沉淀的盐，并且用44kg的甲苯分两步进行清洗。滤液分为两相，并且用33g的甲苯分两次萃取水相。TLC分析显示在水相和过滤残留物中不存在产物。用77L的乙酸乙酯稀释所合并的有机相，并且用39L的净化水、3.9千克EDTA和1.9L的30％的碳酸氢钠的混合物进行清洗，随后用在39L净化水中1.9kg的氯化钠进行清洗。TLC分析显示在水相中中不存在产物。在60℃下蒸干有机相，然后溶解到18kg的甲苯中。在旋转蒸干器中在60℃下进行最后干燥，产生15.95kg(36.28mol，94％)的标题化合物，(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷，一种黄色油。通过基于检测方法的TLC分析的纯度为大约70-90％，并且通过HPLC分析的纯度为90％。干燥损失为5.2％，并且水含量为0.05％。通过MS确定其身份。

步骤6：D-赤型-神经鞘氨醇

将在60L容器中的24kg的甲醇冷却至0℃。在30分钟过程内，加入5.69kg的乙酰氯(72.48mol，2.00eq.)。在22℃d的温度下，将粗加工的(2S，3R，4E)-3-(叔丁氧基羰基)-4-(1-羟基十六碳-2-烯基)-2，2-二甲基恶唑烷(15.95kg，36.28mol)溶解到在160L容器中的31kg甲醇中。在30分钟内添加甲醇的盐酸溶液。在7个小时后，TLC分析显示不超过1％的起始材料。用在10kg甲醇中的7.34kg的三乙胺溶液中和所述反应。在60℃下蒸干反应混合物，然后溶解到105kg二氯甲烷，31kg异丙醇，以及40L净化水中。将合并的有机相在60℃下蒸干。所述残留物悬浮与33kg的乙酸乙酯中，并且再次蒸干。从36L的乙酸乙酯以及7.2L己烷中在20℃下进行结晶。过滤所得到的固体，并且分批用7.2L乙酸乙酯和1.4L己烷进行清洗，之后用7.2L纯的乙酸乙酯清洗。在30℃下干燥后，将所得到的6.45kg从24L乙酸乙酯和8L己烷中在-20℃下重结晶。过滤固体，并且分批用4.8L乙酸乙酯和1.6L己烷的混合物进行清洗，之后用6.4L的纯的乙酸乙酯清洗。在30℃下干燥后，将所得到的5.90kg再次从16L乙酸乙酯和16L己烷中-20℃下重结晶。过滤固体，并且分批用3.2L乙酸乙酯和3.2L己烷的混合物进行清洗，随后用6.4L的纯的乙酸乙酯清洗。最后在30℃下干燥，生成5.60kg(18.71mol，52％)的标题化合物，D-赤型-神经鞘氨醇，一种棕色固体。用0.61％L-苏型-神经鞘氨醇，通过HPTLC的纯度是89.2％，并且通过HPLC分析纯度为95.6％。干燥损失为0.4％，并且水含量为0.6％。通过MS和1H NMR确定其身份。

，位置：0.88(3H，t)18，1.2-1.3(20H，m)8，9，10，11，12，13，14，15，16，17；1.37(2H，m)7；2.04(2H，m，CH₂CH)6；3.17(1H，m，CHNH₂)2；3.77(2H，m，CH₂OH)1；4.34(1H，m，CH(OH)CH)3；5.46(1H，ddt，J 15.4，6.4，1.0Hz，CH(OH)CH))4；5.79(1H，dtd，J 15.4，6.7，1.1Hz，CH₂CH)5。

步骤7：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇

将5.50kg的D-赤型-神经鞘氨醇(18.36mol)、4.71kg棕榈酸(18.37mol，1.00eq.)和7.66kg O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯(20.20mol，1.10eq.)悬浮于在250L容器中的36kg的二甲基甲酰胺和118kg四氢呋喃中，并且冷却至2℃。添加在5L四氢呋喃中的三乙胺(5.06kg，50.00mol，2.72eq.)，导致pH为9.0。在90分钟之后，TLC分析显示D-赤型-神经鞘氨醇的含量小于1％，而且棕榈酸的喊来你个小于1.5％。将反应混合物加热到22℃。通过添加在89kg净化水中的4.7kg柠檬酸溶液使产物沉淀。在1个小时之后，在22℃下过滤反应混合物。在22℃下将粗加工的产物悬浮于154L的净化水中1个小时。在三次用28L净化水以及三次用28L丙酮清洗之后进行过滤。重新悬浮在122kg丙酮中，三次用28L丙酮进行清洗。最后在35℃下干燥后得到6.08kg(11.31mol，62％)的标题化合物，N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇，一种淡黄色固体。通过HPTLC分析纯度为96.2％，并且通过HPLC分析纯度为99.2％。干燥损失为0.2％，并且水含量为0.3％。通过MS和1H NMR确定其身份。

¹H NMR(600MHz，ppm，CDCl₃)：0.88(6H，t)18，16‘；1.2-1.4(44H，m)8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，4‘，5‘，6‘，7‘，8‘，9‘，10‘，11‘，12‘，13‘，14‘，15‘；1.37(2H，m)7；1.64(2H，m)3‘；2.04(2H，m，CH₂CH)6；2.23(2H，t，CH₂CO)2’；3.71(1H，dd，CHNH₂)2；3.93(2H，m，CH₂OH)1；4.31(1H，m，CH(OH)CH)3；5.53(1H，ddt，J 15.4，6.4，1.0Hz，CH(OH)CH))4；5.79(1H，dtd，J15.4，6.7，1.1Hz，CH₂CH)5；6.25(1H，d)NH。

步骤8：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇

对于第一次保护，将6.08kg的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇(11.31mol)悬浮于在60L容器中的11.91kg吡啶和2.5kg二氯甲烷中。添加在9.5kg二氯甲烷的三苯甲基氯(3.31kg，11.87mol，1.05eq.)溶液，然后添加2.5kg二氯甲烷。在25℃下搅拌反应混合物56个小时。TLC分析显示N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘氨醇的含量为3-5％。

对于第二个步骤，将反应混合物冷却到2℃。将N，N-二甲基氨基吡啶(0.139kg，1.14mol，0.10eq.)和2.38kg苯甲酰氯(16.93mol，1.50eq.)添加到混合物中，随后添加5kg二氯甲烷。在90分钟之后，在2℃温度下，TLC分析显示中间体N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-D-赤型-神经鞘氨醇的含量小于1％。逐步添加55kg乙酸乙酯和1.7kg柠檬酸溶液和在33L净化水中的3.0kg氯化钠。再次用1.7kg柠檬酸溶液和在33L净化水中的3.0kg氯化钠清洗有机相，并且两次用在33L净化水中的3.0kg氯化钠清洗有机相。TLC分析显示在水相中不存在产物。有机相在50℃下蒸干。将包含产物N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的残留物溶解到27kg的甲苯中，随后在50℃下蒸干。将这个过程重复两次。

对于第三个步骤，将来自上述反应的残留物溶解到67kg甲醇和151kg二氯甲烷中，并且冷却到2℃。用在23kg甲醇中的对甲苯磺酸一水合物(6.41mol 0.57eq.)溶液将pH调节到2.5。在加热至22℃且搅拌14个小时后，TLC分析显示中间体N-棕榈酰-1-O-三苯甲基-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的含量小于1％。添加969g三乙胺(9.58mol，0.85eq.)将pH调节至7.0。在50℃下蒸干反应混合物。将粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇在40℃下悬浮于69kg己烷中，并且冷却到0℃之下。在40分钟好哦个你之后，通过过滤分离固体，并且用20kg己烷进行清洗。在35℃下进行干燥得到的5.40kg溶解与38kg二氯甲烷中。通过色谱法在76kg硅胶上纯化上述溶液，所述硅胶用175kg己烷和49kg乙酸乙酯的混合物进行调节。用12kg二氯甲烷、502kg己烷和137kg乙酸乙酯的混合物以及482kg己烷和647kg乙酸乙酯的混合物进行洗脱。收集的馏分中不包含产物。所述产物用451kg己烷和205kg乙酸乙酯的混合物和802kg己烷和547kg乙酸乙酯的混合物进行洗脱。在50℃下蒸馏去除其中的溶剂。所得到的残留物在40℃温度下悬浮于24L己烷中，并且冷却至0℃以下。在45分钟之后，通过过滤分离出一种固体的所述标题产物，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇，并且用4。8L己烷进行分批清洗。在35℃下干燥得到3.15kg(4.91mol，43％)的标题化合物，一种白色固体。通过HPTLC分析的纯度为100.0％，并且通过HPLC分析的纯度为96.3％。干燥损失为0.05％，并且水含量为0.2％。通过MS和1H NMR确定其身份。

：0.88(6H，t)18，16‘；1.2-1.4(44H，m)8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，4‘，5‘，6‘，7‘，8‘，9‘，10‘，11‘，12‘，13‘，14‘，15‘；1.35(2H，m)7；1.61(2H，m)3‘；2.05(2H，m，CH₂CH)6；2.19(2H，m，CH₂CO)2’；3.71(2H，m，CH₂OH)1；4.27(1H，m，CHNH)2；5.54(1H，t，CH(OCOPh)CH))3；5.62(1H，ddt，J 15.4，6.4，1.0Hz，CH(OCOPh)CH))4；5.85(1H，dtd，J 15.4，6.7，1.1Hz，CH₂CH)5；6.05(1H，d)NH；7.46(2H，dd，J 7.6，7.2Hz)3“，5“；7.59(1H，dd，J 7.6，7.6Hz)4“；8.04(2H，d，J 7.2Hz)2“，6“。

步骤9：N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂

将1.60kg N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(2.50mol)个0.20kg四甲基乙二胺(TMEDA)(1.73mol，0.69eq.)在35℃下溶解到在100L容器的38L甲苯中。在冷却至6℃后，在15分钟期间添加在1L乙腈中的2-氯-2-氧-1，3，2-二氧磷杂环戊烷(CCP)(0.47kg，3.30mol，1.32eq.)溶液，随后添加3L乙腈。将反应混合物加热到22℃。连续搅拌2个小时。TLC分析显示N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇的含量小于0.5％。在添加32L乙腈后，温度下降至-10℃。将气态三甲胺冷却至其沸点之下，并且将所产生的液态三甲胺(7.42kg，125.53mol，50.21eq.)添加其中。.通过加热到65℃是下一步反应步骤进行15个小时。TLC分析显示中间环节的含量小于0.5％。通过冷却到-30℃使产物结晶，并且通过过滤分离，随后用13L乙腈进行清洗。通过在35℃下干燥得到1.85kg的乳白色固体。用1.58kg N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘氨醇(2.45mol)重复反应，得到另外的1.82kg粗加工的N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂。合并两次的粗加工材料，并且溶解到29L二氯甲烷和14.5L甲醇中。通过色谱法用72kg硅胶纯化上述溶液，所述硅胶用337kg二氯甲烷和33kg甲醇的混合物进行调节。用966kg二氯甲烷和95kg甲醇的混合物、1866kg二氯甲烷和223kg甲醇的混合物、328kg二氯甲烷和82kg甲醇的混合物、1345kg二氯甲烷和268kg甲醇的混合物、530kg二氯甲烷和158kg甲醇的混合物以及371kg二氯甲烷和221kg甲醇的混合物进行洗脱。所收集的馏分的体积为140L。馏分17-38的溶剂在50℃下被蒸馏去除。最后在40℃下的旋转蒸发器中干燥得到3.36kg(2.92kg on dry basis，3.61mol，73％)的标题化合物，N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂，一种淡黄色固体。通过HPTLC分析纯度为99.5％并且通过HPLC分析的纯度为98.7％。干燥损失为11.5％，以及水含量为1.7％。通过MS和1H NMR确定其身份。

：0.88(6H，t)18，16‘；1.2-1.3(46H，m)7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，4‘，5‘，6‘，7‘，8‘，9‘，10‘，11‘，12‘，13‘，14‘，15‘；1.56(2H，m)3‘；1.99(2H，m，CH₂CH)6；2.16(2H，m，CH₂CO)2’；3.21(9H，s，N(CH₃)₃)N(CH₃)₃；3.65(2H，m，POCH₂CH₂N(CH₃)₃)CH₂N；3.97(2H，m，CH₂OP)1；4.21(2H，br s，POCH₂CH₂N(CH₃)₃)POCH₂；4.45(1H，m，CHNH)2；5.50(1H，m，CH(OCOPh)CH))3；5.54(1H，m，CH(OCOPh)CH))4；5.82(1H，dt，CH₂CH)5；7.39(1H，d)NH；7.43(2H，t，J 7.2Hz)3“，5“；7.55(1H，t，J 7.2Hz)4“；7.99(2H，d，J7.2Hz)2“，6“。

步骤10：N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂

将3.36kg N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂(2.92kg按干物质计算，3.61mol)溶解到在22℃下的旋转蒸发器中的10L甲醇，并且转移到具有5L甲醇的70L的容器中。使用在甲醇(30％，0.75mol，0.21eq.)中的138mL甲醇钠溶液用于调节pH至11.5。在22℃下连续搅拌23个小时。TLC分析显示N-棕榈酰-3-O-苯甲酰基-D-赤型-神经鞘磷脂的含量小于0.5％。在加入31L二氯甲烷和13L净化水后相分离。用8L甲醇，8L净化水和55mL 1M盐酸将有机相中和至pH为7.0。TLC分析显示在水相中不存在产物。在35℃下蒸干有机相。将残留物与6L异丙醇共蒸发两次，并与12L二氯甲烷共蒸发两次。将粗加工产物溶解到2.6L甲醇和2.6L二氯甲烷中，痛切通过用1.2L甲醇和1.2L二氯甲烷清洗的.0.2μm过滤器进行过滤，通过添加42L丙酮诱导结晶，并且冷却至0℃。在15个小时之后，分离所述沉淀，并且用24L丙酮分四次进行清洗。将湿产物在22℃下悬浮于19L丙酮中2.5个小时。在分离并用12L丙酮分四次清洗后，通过在30℃下干燥46个小时使反应结束。得到白色粉末状的2.29kg(3.25mol，90％)的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂。通HPTLC分析的纯度为99.2％，并且通过HPLC分析的纯度为99.0％。水含量为0.7％.通过MS和1HNMR确定其身份。

：0.88(6H，t)18，16‘；1.2-1.3(46H，m)7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，4‘，5‘，6‘，7‘，8‘，9‘，10‘，11‘，12‘，13‘，14‘，15‘；1.57(2H，m)3‘；1.99(2H，m，CH₂CH)6；2.15(2H，m，CH₂CO)2’；3.23(9H，s，N(CH₃)₃)N(CH₃)₃；3.65(2H，m，POCH₂CH₂N(CH₃)₃)CH₂N；3.91(2H，m，CH₂OP)1；4.05(1H，t，J 7.7Hz，CH(OH)CH))3；4.15(1H，m，CHNH)2；4.26(2H，m，POCH₂CH₂N(CH₃)₃)POCH₂；5.45(1H，dd，J 15.3Hz，7.4Hz，CH(OH)CH))4；5.69(1H，dt，J 14.6Hz，7.2Hz，CH₂CH)5。

表1显示的是在120-g规模下的产量和/中间体/产物特性(实施例2).表2显示的是2-kg规模的结果(实施例3).

表1

LoD＝干燥损失，KF＝水含量

表2

LoD＝干燥损失，KF＝水含量

实施例4：光学纯度、天然产物卵神经鞘磷脂的身份和绝对构型的确认

使用Varian Inova分光计得到HMR光谱，对于¹H在500MHz下操作并且对于¹³C在125MHz下操作，配置有一个5mm的三共振探针和z-轴梯度。溶剂为氚代氯仿-d并且温度为25℃。对于¹H和¹³C的化学位移参考参与溶剂信号，对于¹H为7.27ppm且对于¹³C为77ppm，在四甲基硅烷数值范围。

质子光谱采于4个瞬态，具有90°脉冲，在从18-1ppm到的光谱窗口上。采集时间为5秒，以及5s的驰豫延迟。在FID上的94842个点被转化到在光谱上的131072个点，没有变迹。

¹H-¹³C gHMBCAD光谱由标准Varian脉冲序列获得，使用在¹³C上绝热脉冲，并且这是优化用于8Hz的耦合常数。在质子维度的4096个点使在3755Hz的光谱窗口上获得的，从1.24到8.74ppm并且转变为光谱上相同数量的点，加权移位高斯函数(gf＝0.277，gfs＝0.126)。在碳维度的2*512的增量采于每个瞬间，在从10到190ppm的光谱窗口上，并且转化为4096个点，使用移位高斯函数(gf＝0.019，gfs＝0.005)。驰豫延迟为1s。

在N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂中的化学位移归属.

化学位移归属建立在在DQCOSY光谱中看到的¹H-¹H耦合以及¹H-¹³C耦合、在¹H-¹³CgHSQC和gHMBC光谱中看到的单键和远程。所述归属如方案XV所示。

方案XV：在氚代氯仿-d且在25℃下，在N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂上的¹H和¹³C化学位移的归属

所述归属在谈正为6.80下开始，连接到非碳上，其必定为氨基质子。gDQCOSY光谱显示神经鞘氨醇骨架的序列6.80-3.95-4.05-5.45-5.65-1.97。在gHSQC光谱中看到的三个压价及基团，一个在66.3出具有一个碳，其连接于在3.33处的三甲基氨基质子上。其质子，在3.79处，连接到4.27和4.53处的质子。其余的亚甲基基团的其中一个质子，4.16，却显示的使在3.95处结合。氨基碳显示与在2.14和2.11处的质子的交叉峰。

卵的神经鞘磷脂与合成的神经鞘磷脂的比较

为了最大化积分的准确度，对于三个样品的质子光谱是在64瞬态下采集，具有45°脉冲，在从14到-1ppm的光谱窗口上。采集时间为5s，并且驰豫延迟为15s。在FID上的79872个点转化为在光谱上的131072个点，没有变迹，

对于来自卵的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂以及通过本发明方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂的¹H光谱对应地显示于附图1-3中。所述积分参考的是在3.33(9H)位置的三甲基胺基团的信号。在附图1中2.58处和在附图2和3中3.00处的信号是水。这两个合成样品是相同的，在积分准确度大约1％内。所述天然样品具有较短的平均烷基链，并且针对NH和烯烃型号的某些杂质是显而易见的。

神经鞘氨醇骨架具有两个手性碳，因而有4个立体异构体的可能性。所述合成样品不显示预期对映体的混合物的信号的倍增。这样的评估不可以用于卵神经鞘磷脂制成，因为它是一种混合物。为了确定对映体纯度，在管中用过量的R-甲氧基苯基乙酸(R-MPA)，二环己基(DCC)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)处理来自卵的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂以及通过本发明方法合成的N-棕榈酰-D-赤型-神经鞘磷脂，并且检测区域5.20-5.95ppm，并且对应的显示于附图4-6中。在5.42处的三重峰是H3(参见在表3中的说明)，在5.49处的双峰中的双峰为H4，并且在5.73处的三重峰的双峰为H5。附图4显示当反应混合物完成时在5.53处出现一个峰，并且诶该峰在附图6中也被标出。其它的这些信号，已经确定酯的信号的5％以上是没有信号的，因此样品的对映体纯度被确定出现至少95％，即，样品含有不超过大约5％的其相应的相反对映体。所有三个样品的绝对构型是相同的，因为在它们的R-MPA酯中H3-H5的信号具有相同的化学位移。

绝对构型测定

为了证实绝对构型，就爱你个一当量的来自卵棕榈酰神经鞘磷脂的在NMR管中用1.2当量的R-(-)-α-甲氧基苯基乙酸(R-MPA)和S-(+)-α甲氧基苯基乙酸(S-MPA)的混合物、1.2当量的二环己基碳二亚胺(DCC)以及催化剂量的4-二甲氨基吡啶(DMAP)进行处理。附图7(底部的图)显示所述反应混合物的¹H NMR光谱。附图7还显示了1D-TOCSY(1-维-全相光谱测量)光谱是在顶部的图中，所述光谱显示了在R-MPA(顶部图)和S-MPA(中部图)酯中的H 2氢峰的选择性激发。在1D-TOCSY光谱中测量的DdSs记载于表3中。

表3.在卵神经鞘磷脂中的DdRS.

针对H4-H6的正DdSs值和针对H1a，H1b以及H2的负DdSs值指出在C3上的绝对构型是R。

本发明并不限于实施例中公开的具体实施方案的范围，它们仅打算作为本发明的几个方面的示例性说明，为功能性等价物的任何实施方案均在本发明的范围内。除了此处所示和所述的这些之外的本发明不同的改进对于本领域技术人员而言将是显而易见的，并且目的是落入附加的权利要求的范围内。

在本申请中所公开的每一参考文献都以引用的方式整体并入本文。