BRPI0907135B1 - uso de um anticorpo antagonista anti-cgrp para a prevenção e/ou tratamento de dor de câncer crônica - Google Patents

Abstract

PROCESSO DE TRATAMENTO DE DOR CRÔNICA. A invenção refere-se a um anticorpo anti-CGRP para uso na prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica , e a um processo de tratamento e/ou prevenção de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica usando um anticorpo anti-CGRP.

Description

Campo da Invenção

[001] A invenção refere-se a um anticorpo anti-CGRP para uso na prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica, e a um processo de tratamento e/ou prevenção de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica usando um anticorpo anti-CGRP.

Antecedentes da Invenção

[002] Dor crônica é uma dor de longa duração que persiste mais longa que o curso temporal de cura natural do dano ou doença causadora subjacente. Ela não tem função benéfica ou protetora e é estimado que 2,7 milhões de pessoas no UK são invalidas devido a condições de dor crônica.

[003] Dor de câncer é um dos tipos mais comuns de dor crônica e demonstra componentes nociceptivos devido ao crescimento de tumor e componentes neuropá- ticos devido a dano de nervo induzido por tumor. Ela ainda envolve dano estrutural, captura e dano de nervo, processos inflamatórios que conduzem à interrupção de metabolismo de tecido normal, a produção de prostaglandinas inflamatórias e citoci- nas, e dano de tecido.

[004] Atualmente, os principais analgésicos empregados para tratamento de dor crônica são opiatos e drogas anti-inflamatórias não-esteroidais (NSAIDs). Ambas classes de drogas podem produzir severos efeitos colaterais; NSAIDs podem causar ulceração gástrica e dano renal, opiatos podem causar náusea, constipação, confu-são e problemas de dependência. Opioides falham em produzir alívio de dor em to-dos os indivíduos sofrendo de dor crônica, mesmo em altas doses e desenvolvimento de resistência analgésica a opioides complica sua utilidade para terapia de longo termo. Em particular, tratamento de dor de câncer requer o uso de níveis inaceita- velmente altos de opioides trazendo com isto efeitos colaterais e pelo menos 20% de pacientes tratados ainda têm dor descontrolada.

[005] Da mesma maneira, há uma crítica necessidade médica de identificar novos compostos farmaceuticamente ativos que interfiram com etapas chaves do processo de dor crônica e particularmente para o tratamento e/ou prevenção de dor nociceptiva crônica e/ou sintomas de dor nociceptiva crônica.

[006] Surpreendentemente nós verificamos que administração de um anticor-po anti-CGRP é efetiva, com um sítio periférico de ação, na prevenção e/ou trata-mento de dor crônica e em particular dor nociceptiva crônica tal como dor de câncer.

[007] CGRP (peptídeo relacionado com gene calcitonina) é um neuropeptí- deo de 37 aminoácidos que atua como um neurotransmissor no sistema nervoso central. Ele liga-se com alta afinidade ao receptor de CGRP, receptor semelhante a receptor de calcitonina (CRLR), ativando produção de adenilato ciclase e proteína quinase A.

[008] Administrados penetrando centralmente na espinha, antagonistas de CGRP seletivos de molécula pequena foram mostrados serem úteis no tratamento de condições de dor neuropática e nociceptiva (Adwanikar et al., Pain 2007) sugerindo que remoção de CGRP endógeno no cordão espinhal tem um efeito antinoci- ceptivo. Adicionalmente administração intratecal de antissoro contra CGRP foi mos-trada reduzir comportamento nociceptivo em modelos roedores de artrite (Kuraishi, Y., et. al Neurosci. lett (1998) 92, 325 - 329).

[009] Surpreendentemente nós verificamos que administração de um anticor-po anti-CGRP é efetiva, com um sítio periférico de ação, na prevenção e/ou trata-mento de dor crônica e em particular dor nociceptiva crônica quando administrado perifericamente. Esta rota de administração periférica provê uma vantagem distinta sobre o requisito para administrar anticorpos intratecalmente ou espinhalmente, um procedimento de mais alto risco e inconveniente.

Breve Descrição da Invenção

[0010] A presente invenção provê o uso de um anticorpo antagonista anti- CGRP para a fabricação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica, onde o medicamento é preparado para ser administrado perifericamente.

[0011] A presente invenção ainda provê um processo de prevenção e/ou tra-tamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica, em um indivíduo, que compre-ende administração periférica ao dito indivíduo de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um anticorpo antagonista anti-CGRP.

[0012] Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP atua periferi-camente com administração.

Descrição das Figuras

[0013] Figura 1 .Efeito de anticorpo G2 sobre hiper-sensitividade mecânica para estímulos von Frey de 8 gramas em um modelo de dor de câncer de osso. Ratos injetados com MRMT-1 foram tratados com anticorpo G2 ou veículo (PBS + Tween 20 0,01%) em dia 9 após cirurgia. Grupos foram saudáveis por todo o período pós-operativo em todos os momentos, mostrado por crescente ganho de peso pós-operativo (dados não mostrados). Dados são média ± SEM de 7-9 ratos por grupo. *p<0,05 versus grupo tratado com veículo em cada ponto de tempo.

[0014] Figura 2.Efeito de anticorpo G2 sobre hiper-sensitividade mecânica para estímulos von Frey de 15 g no modelo de dor de câncer de osso. Ratos injetados com MRMT-1 foram tratados com G2 ou veículo (PBS + Tween 20 0,01%) em dia 9 após cirurgia. Dados são média ± SEM de 7-9 ratos por grupo. *p<0,05 versus grupo tratado com veículo em cada ponto de tempo.

[0015] Figura 3.Efeito de anticorpo G2 sobre capacidade de caminhar medida por bastão rota. Dois pontos finais foram explorados. A latência para cair como me-didas de prejuízos induzidos por composto em coordenação motora (A), e escore de bastão rota, como medições de dor evocada por capacidade de caminhar (B) no modelo de dor de câncer de osso. Ratos injetados com MRMT-1 foram tratados com anticorpo G2 ou veículo (PBS + Tween 20 0,01%) no dia 9 após cirurgia. Dados são média ± SEM de 7-9 ratos por grupo. *p<0,05 versus grupo tratado com veículo em cada ponto de tempo.

[0016] Figura 4.Dados de ensaio de ligação demonstrando que anticorpo G1 inibe a ligação de a-CGRP ao receptor de C\grp1.

[0017] Figura 5a.Nível em soro de concentração de anti-CGRP (pg/mL) vs. tempo após administração IV de 10 mg/kg, medido por ELISA anti-lgG.

[0018] Figura 5b.Nível em soro de concentração de anti-CGRP (pg/mL) vs. tempo após administração IV de 10, 30, 100 mg/kg, medido por ELISA anti-lgG.

[0019] Figura 6.Exploração alanina usando fragmento CGRP terminal-C (CGRP 25-37). A mudança em afinidade é expressa em vezes de perda de afinidade e a qual mostra que anticorpo G1 anti-CGRP liga-se à região terminal-C de a-CGRP humano.

[0020] Figura 7.Competição de solução por Biacore: CGRP, fragmentos de CGRP ou peptídeos relacionados sem sequência para CGRP foram usados para determinar a especificidade de anticorpo G1.

[0021] Figura 8.Sequências de CGRP de humano, macaco cynomolgus, rato, camundongo, cão e coelho. Resíduos não-conservados entre espécies são subli-nhados, o epítopo de anticorpo G1 está em negrito.

[0022] Figura 9.Dados mostrando que G1 inibe rubor neurogênico na pele partindo de 90 minutos pós-tratamento. G1 foi administrado através de administração intravenosa (1 mL/kg). Dados são de 6-8 ou 13 ratos por grupo. *p=0,05, **p=0,01 vs. grupo tratado com veículo (solução salina tamponada com fosfato) em cada ponto de tempo (AVOVA).

[0023] Tabela 1.Kd e IC50 de anticorpos anti-CGRP medidas a 25°C contra a-CGRP humano [muMab7E9 = precursor murino de G1. Sua KD para β-CGRP de rato = 1 nM. RN4901 = ferramenta murina, reconhecendo o mesmo epítopo como G1 mas mostrou as mesmas afinidades e seletividade em ratos (β-CGRP KD = 17 nM); G1 = anticorpo humanizado a partir de muMab7E9 (KD para β-CGRP de rato = 0,1 nM)].

[0024] Tabela 2.Afinidades de ligação de G1 como determinadas por Biacore.

Descrição da Invenção Técnicas Genéricas

[0025] A prática da presente invenção empregará, a menos que de outro mo-do indicado, técnicas convencionais de biologia molecular (incluindo técnicas re- combinantes), microbiologia, biologia celular, bioquímica e imunologia, que estão dentro do conhecimento da técnica. Tais técnicas são inteiramente explicadas na literatura, como, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press; Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.l. Fresh- ney, ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-1998) J. Wiley and Sons; Methods in En-zymology (Academic Press, Inc.); Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987); Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, eds., Harwood Academic Publish-ers, 1995); and Cancer: Principles and Practice of Oncology (V.T. DeVita et al., eds., J.B. Lippincott Company, 1993).

Definições:

[0026] Um “anticorpo” é uma molécula de imunoglobulina capaz de ligação específica a um alvo tal como um carboidrato, polinucleotídeo, lipídeo, polipeptídeo, etc., através de pelo menos um sítio de reconhecimento de antígeno, localizado na região variável da molécula de imunoglobulina. Como aqui usado, o termo abrange não somente anticorpos monoclonais ou policlonais intactos, mas também seus fra-gmentos (como Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv, dAb), anticorpos de cadeia simples (ScFv), seus mutantes, anticorpos quiméricos, diacorpos, proteínas de fusão compreenden-do uma porção de anticorpo, e qualquer outra configuração modificada da molécula de imunoglobulina que compreende um sítio de reconhecimento de antígeno. Um anticorpo inclui um anticorpo de qualquer classe, tal como IgG, IgA, ou IgM (ou suas subclasses), e o anticorpo não precisa ser de qualquer classe particular. Dependen-do da sequência de aminoácidos de anticorpo do domínio constante de suas cadeias pesadas, imunoglobulinas podem ser designadas para classes diferentes. Existem cinco principais classes de imunoglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG, e IgM, e várias destas ainda podem ser divididas em subclasses (isotipos), por exemplo, lgG1, lgG2, lgG3, lgG4, lgA1, e lgA2. Os domínios constantes de cadeia pesada que correspondem às diferentes classes de imunoglobulinas são chamados alfa, delta, épsilon, gama e um, respectivamente. As estruturas de subunidades e configurações tridimensionais de diferentes classes de imunoglobulinas são bem conhecidas.

[0027] “Fv” é um fragmento de anticorpo que contém um sítio completo de reconhecimento e ligação de antígeno. Em uma espécie Fv de duas cadeias, esta região consiste em um dímero de domínio variável de uma cadeia pesada e uma leve em associação não-covalente, firme. Em espécies Fv de cadeia única, domínio variável de uma cadeia pesada e uma leve pode estar covalentemente ligado através de um ligante peptídeo flexível de modo que as cadeias leve e pesada podem se associar em uma estrutura dimérica análoga àquela em uma espécie Fv de duas cadeias. É nesta configuração que as três CDRs de cada domínio variável interagem para definirem uma especificidade de ligação de antígeno sobre a superfície do dí- mero VH-VL. Entretanto, mesmo um único domínio variável (ou metade de um Fv compreendendo somente 3 CDRs específicas para um antígeno) tem a habilidade para reconhecer e ligar antígeno, embora genericamente em uma afinidade menor que o inteiro sítio de ligação.

[0028] O fragmento Fab também contém o domínio constante da cadeia leve e o primeiro domínio constante (CH1) da cadeia pesada. Fragmentos Fab’ diferem de fragmentos Fab pela adição de uns poucos resíduos na terminação carbóxi do domínio CH1 de cadeia pesada incluindo uma ou mais cisteínas a partir das regiões de articulação de anticorpo. Um fragmento F(ab)2 é um fragmento bivalente compre-endendo dois fragmentos Fab ligados por uma ponte dissulfeto na região de articu-lação.

[0029] Um anticorpo pode ter um ou mais sítios de ligação (para combinação com antígeno). Se há mais de um sítio de ligação, os sítios de ligação podem ser idênticos uns aos outros ou podem ser diferentes. Por exemplo, uma imunoglobulina ocorrendo naturalmente tem dois sítios de ligação idênticos, um anticorpo de cadeia simples ou fragmento Fb tem um sítio de ligação, enquanto um anticorpo “biespecífi- co” ou “bifuncional” (diacorpo) tem dois diferentes sítios de ligação, em termos de sequências e/ou reconhecimento de antígeno / epítopo.

[0030] Um “anticorpo isolado” é um anticorpo que (1) não está associado com componentes associados naturalmente, incluindo outros anticorpos associados naturalmente, que acompanham o mesmo em seu estado nativo, (2) é livre de outras proteínas das mesmas espécies, (3) é expresso por uma célula de uma diferente espécie, ou (4) não ocorre em natureza.

[0031] Um “anticorpo monoclonal” refere-se a uma população homogênea de anticorpos onde o anticorpo monoclonal é compreendido por aminoácidos (ocorren-do naturalmente e ocorrendo não-naturalmente) que estão envolvidos na ligação seletiva de um antígeno. Uma população de anticorpos monoclonais é altamente específica, sendo direcionada contra um único sítio antigênico. O termo “anticorpo monoclonal” abrange não somente anticorpos monoclonais intactos e anticorpos monoclonais de comprimento inteiro, mas também seus fragmentos ((tais como Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv), de cadeia única (ScFv), seus mutantes, proteínas de fusão com-preendendo uma porção de anticorpo, e qualquer outra configuração modificada da molécula de imunoglobulina que compreende um sítio de reconhecimento de antíge-no da requerida especificidade e a habilidade para ligar-se a um antígeno. Ele não é pretendido ser limitado com relação à fonte do anticorpo ou a maneira na qual ele é fabricado (por exemplo, através de hibridoma, seleção de fago, expressão recombi- nante, animais transgênicos, etc.).

[0032] Como aqui usado, anticorpos “humanizados” refere-se a formas de an-ticorpos não-humanos (por exemplo, murinos) que são imunoglobulinas quiméricas específicas, cadeias de imunoglobulina, ou seus fragmentos (como Fv, Fab, Fab’, F(ab’)2 ou outras subsequências de ligação de antígeno de anticorpos) que contêm sequência mínima derivada de imunoglobulina não-humana. Para a maior parte, an-ticorpos humanizados são imunoglobulinas humanas (anticorpos receptores) nas quais resíduos de uma região determinante de complementaridade (CDR) do recep-tor são substituídos por resíduos de uma CDR de uma espécie não-humana (anti-corpo doador) tal como camundongo, rato, ou coelho tendo a desejada especificida-de, afinidade, e atividade biológica. Em alguns exemplos, resíduos de região de es-trutura de Fv (FR) da imunoglobulina humana são substituídos por correspondentes resíduos não-humanos. Além disso, o anticorpo humanizado pode compreender re-síduos que não são encontrados nem no anticorpo receptor nem na CDR importada ou sequências de estrutura, mas são incluídos para ainda refinar o otimizar desem-penho de anticorpo. Em geral, o anticorpo humanizado compreenderá substancial-mente todo de pelo menos um, e tipicamente dois, domínios variáveis, onde todas ou substancialmente todas as regiões CDR correspondem àquelas de uma imuno- globulina não-humana e todas ou substancialmente todas as regiões FR são aque-las de uma sequência consenso de imunoglobulina humana. O anticorpo humaniza-do otimamente também compreenderá pelo menos uma porção de uma região ou domínio constante de imunoglobulina (Fc), tipicamente aquela de uma imunoglobuli-na humana. Anticorpos podem ter regiões Fc modificadas como descrito em WO 99/58572. Outras formas de anticorpos humanizados têm uma ou mais CDRs (uma, duas, três, quatro, cinco, seis) que são alteradas com relação ao anticorpo original, as quais são chamadas uma ou mais CDRs “derivadas de” uma ou mais CDRs do anticorpo original.

[0033] Como aqui usado, “anticorpo humano” significa um anticorpo tendo uma sequência de aminoácidos correspondendo àquela de um anticorpo produzido por um humano e/ou tendo sido obtido usando qualquer uma das técnicas para ob-tenção de anticorpos humanos conhecidas ou aqui mostradas. Esta definição de um anticorpo humano inclui anticorpos compreendendo pelo menos um polipeptídeo de cadeia pesada humano ou pelo menos um polipeptídeo de cadeia leve humano. Um tal exemplo é um anticorpo compreendendo polipeptídeos de cadeia pesada humana e cadeia leve murina. Anticorpos humanos podem ser produzidos usando-se várias técnicas conhecidas. Em uma realização, o anticorpo humano é selecionado de uma biblioteca de fagos, onde esta biblioteca fago expressa anticorpos humanos (Vaughan etal., 1996, Nature Biotechnology, 14:309-314; Sheets et al., 1998, PNAS, (USA) 95:6157-6162; Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol., 227:381; Marks et al., 1991, J. Mol. Biol., 222:581). Anticorpos humanos também podem ser obtidos através de introdução de loci imunoglobulina humana em animais transgênicos, por exemplo, camundongos nos quais os genes de imunoglobulina endógenos foram parcial ou completamente inativados. Esta abordagem é descrita nas patentes US Nos . 5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; e 5,661,016. Alternati- vamente, o anticorpo humano pode ser preparado através de imortalização de linfó- citos B humanos que produzem um anticorpo direcionado contra um antígeno alvo (tais linfócitos B podem ser recuperados de um indivíduo ou podem ter sido imuniza-dos in vitro). Ver, por exemplo, Cole et al., Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., 1991, J. Immunol., 147 (1 ):86-95; e U.S. Patent No. 5,750,373.

[0034] Um anticorpo de cadeia única (scFc) é um anticorpo no qual regiões VL e VH são emparelhadas para formação de uma molécula monovalente via um ligante sintético que permite as mesmas serem obtidas como uma cadeia de proteína única (Bird et al Science, 242: 423-426 (1988) e Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 85:5879-5883 (1988)).

[0035] Diacorpos são anticorpos biespecíficos, bivalentes nos quais domínios VH e VL são expressos em uma cadeia de polipeptídeo simples, mas usando um ligador que é muito curto para permitir emparelhamento entre os dois domínios sobre a mesma cadeia, pelo que forçando os domínios a emparelhamento com domínios complementares de uma outra cadeia e criando dois sítios de ligação de antígeno.

[0036] “Anticorpos quiméricos” refere-se àqueles anticorpos onde uma porção de cada uma das sequências de aminoácidos de cadeias pesada e leve é homóloga às correspondentes sequências em anticorpos derivados de uma particular espécie ou pertencendo a uma classe particular, enquanto o segmento restante das cadeias é homólogo a correspondentes sequências em uma outra. Tipicamente, nestes anticorpos quiméricos, a região variável de ambas cadeias leve e pesada imita as regiões variáveis de anticorpos derivados de uma espécie de mamíferos, enquanto as porções constantes são homólogas às sequências em anticorpos derivados uma outra. Uma clara vantagem para tais formas quiméricas é que, por exemplo, as regiões variáveis podem ser convenientemente derivadas de fontes presentemente conhecidas usando hibridomas facilmente disponíveis ou células B de organismos hospedeiros não-humanos em combinação com regiões constantes derivadas de, por exemplo, preparações de células humanas. Embora a região variável tenha a vantagem de facilidade de preparação, e a especificidade não seja afetada por sua fonte, a região constante sendo humana, é menos provável de elicitar uma resposta imune de um sujeito humano quando os anticorpos são injetados do que pode a região constante de uma fonte não-humana. Entretanto, a definição não é limitada a este exemplo particular.

[0037] Uma “região Fc funcional” possui pelo menos uma função efetora de uma região Fc de sequência nativa. “Funções efetoras” exemplares incluem ligação C1q; citotoxidez dependente de complemento (CDC); ligação de receptor de Fc; cito- toxidez mediada por célula dependente de anticorpo (ADCC); fagocitose; regulação descendente de receptores de superfície de célula (por exemplo, receptor de célula B; BCR), etc. Tais funções efetoras genericamente requerem que a região Fc seja combinada com um domínio ligante (por exemplo, um domínio variável de anticorpo) e possa ser avaliada usando vários ensaios conhecidos na técnica para avaliação de tais funções efetoras de anticorpo.

[0038] Uma “região Fc de sequência nativa” compreende uma sequência de aminoácidos idêntica à sequência de aminoácidos de uma região Fc encontrada em natureza. Uma “região Fc variante” compreende uma sequência de aminoácidos que difere daquela de uma região Fc de sequência nativa em virtude de pelo menos uma modificação de aminoácido, ainda retendo pelo menos uma função efetora da região Fc de sequência nativa. Preferivelmente, a região Fc variante tem pelo menos uma substituição de aminoácido comparada a uma região Fc de sequência nativa ou à região Fc de um polipeptídeo parente, por exemplo, de cerca de uma a cerca de dez substituições de aminoácidos, e preferivelmente de cerca de uma a cerca de cinco substituições de aminoácidos em uma região Fc de sequência nativa ou na região Fc do polipeptídeo parente. Aqui a região Fc variante preferivelmente possuirá pelo menos cerca de 80% de identidade de sequência com uma região Fc de sequência nativa e/ou com uma região Fc de um polipeptídeo parente , e mais preferivelmente pelo menos cerca de 90% de identidade de sequência, mais preferivelmente pelo menos cerca de 95% de identidade de sequência com a mesma.

[0039] Como aqui usado “citotoxidez mediada por célula dependente de anti-corpo” e “ADCC” referem-se a uma reação mediada por célula na qual células citotó- xicas não-específicas que expressam receptores de Fc (FcRs) (por exemplo, células assassinas naturais (NK), neutrófilos, e macrófagos) reconhecem anticorpo ligado sobre uma célula alvo e subsequentemente causam lise da célula alvo. Atividade ADCC de uma molécula de interesse pode ser avaliada usando um ensaio ADCC in vitro, tal como aquele descrito na patente US 5 500 362 ou 5 821 337. Células efeto- ras úteis para tais ensaios incluem células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e células NK. Alternativamente, ou adicionalmente, atividade ADCC da mo-lécula de interesse pode ser avaliada in vivo, por exemplo, em um modelo animal tal como aquele mostrado em Clynes et al., 1998, PNAS (USA), 95:652-656.

[0040] Como aqui usado, “receptor de Fc” e “FcR” descreve um receptor que se liga à região Fc de um anticorpo. O FcR preferido é um FcR humano de sequên-cia nativa. Além disso, um FcR preferido é um que se liga a um anticorpo IgG (um receptor gama) e inclui receptores das subclasses FcyRI, FcyRII, e FcyRIII, incluindo variantes alélicas e formas unidas alternativamente destes receptores. Receptores de FcyRII incluem FcyRIIA (um “receptor ativante”) e FcyRIIB (um “receptor inibi- dor”), que têm similares sequências de aminoácidos que diferem primariamente em seus domínios citoplásmicos. FcRs são revistos em Ravetch and Kinet, 1991, Ann. Ver. Immunol., 9:457-92; capei et al., 1994, Immunomethods, 4:25-34; e de Haas et al., 1995, J. Lab. Clin. Med., 126:330-41. “FcR” também inclui o receptor neonatal, FcRn, que é responsável pela transferência de IgGs maternal para o feto (Guyer et al., 1976, J. Immunol., 117:587; e Kim et al., 1994, J. Immunol., 24:249).

[0041] “Citotoxidez dependente de complemento” e “CDC” referem-se à lise de um alvo na presença de complemento. O caminho de ativação de complemento é iniciado através de ligação do primeiro componente do sistema complemento (C1q) a uma molécula (por exemplo, um anticorpo) complexado com um antígeno cognato. Para avaliar ativação de complemento, um ensaio CDC, por exemplo, como descrito em Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods, 202:163 (1996), pode ser realizado.

[0042] Como aqui usados, os termos “G1” e “anticorpo G1” são usados inter- cambiavelmente para referirem-se a um anticorpo produzido pelos vetores de ex-pressão tendo números de depósito ATCC-PTA-6867 e ATCC-PTA-6866. A sequên-cia de aminoácidos das regiões variáveis de cadeia leve e cadeia pesada são mos-tradas em SEQ ID Nos. 1 e 2. As porções de CDR de anticorpo G1 (incluindo CDRs Chothia e Kabat) são mostradas diagramaticamente na Figura 5 de W02007/054809, o conteúdo do qual é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Os polinucleotídeos codificando as regiões variáveis de cadeia leve e pesada são mostradas em SEQ ID Nos. 9 e 10. A caracterização de anticorpo G1 é descrita nos Exemplos de WQ2007/054809, o inteiro conteúdo do qual é aqui incorporado por referência. G1 é um anticorpo de bloqueio monoclonal humanizado (lgG2) que bloqueia ligação e atividade do neuropeptídeo CGRP (a e b) e seu efeito de vasodi- latação neurogênica causado por liberação de CGRP. G1 é um anticorpo antagonista anti-CGRP monoclonal lgG2Δa derivado do precursor de anticorpo antagonista anti-CGRP murino, representado muMAb7E9 como identificado em uma seleção usando células de baço preparadas de um camundongo imunizado com CGRP de rato e humano que foram fundidas com células plasmacitoma murinas. G1 foi criado através de enxerto de CDRs derivadas de muMAb 7E9 de cadeia leve e pesada na sequência de linha germe humana mais próxima seguido pela introdução de pelo menos uma mutação em cada CDR e 2 mutações de estrutura em VH. Duas mutações foram introduzidas no domínio Fc de G1 para suprimir ativação de receptor de Fc humano. G1 e muMAb7E9 foram mostrados reconhecerem o mesmo epítopo.

[0043] Como aqui usados, os termos, “G2” e “anticorpo G2” são usados inter- cambiavelmente para referirem-se a um anticorpo monoclonal camundongo CGPR anti-rato como descrito em Wong et al., Hybridoma 12:93-106 (1993). A sequência de aminoácidos das regiões variáveis de cadeia pesada e cadeia leve são mostradas em SEQ ID Nos 19 e 20. Os polinucleotídeos codificando as regiões variáveis de cadeia pesada e cadeia leve são mostrados em SEQ ID Nos. 27 e 28. As porções de CDR de anticorpo G2 são providas em SEQ ID Nos. 21 a 26. G2 foi mostrado reconhecer o mesmo epítopo como G1.

[0044] Como aqui usado, ligação “imunoespecífica” de anticorpos refere-se a interação de ligação específica de antígeno que ocorre entre o sítio de combinação de antígeno de um anticorpo e o específico antígeno reconhecido por aquele anti-corpo (isto é, o anticorpo reage com a proteína em um ELISA ou outro ensaio imune, e não reage detectavelmente com proteínas não-relacionadas).

[0045] Um epítopo que “liga especificamente”, ou “liga preferencialmente” (aqui usados intercambiavelmente) a um anticorpo ou um polipeptídeo é um termo bem entendido na técnica, e processos para determinar tal ligação específica ou pre-ferencial são bem conhecidos na técnica. Uma molécula é dita exibir “ligação especí-fica” ou “ligação preferencial” se ela reage ou associa mais frequentemente, mais rapidamente, com maior duração e/ou com maior afinidade com uma particular célu- la ou substância que o faz com células ou substâncias alternativas. Um anticorpo “liga-se especificamente” ou “liga-se preferencialmente” a um alvo se ele se liga com maior afinidade, avidez, mais facilmente, e/ou com maior duração do que se liga a outras substâncias. É também entendido através de leitura desta definição que, por exemplo, um anticorpo (ou metade ou epítopo) que liga-se especificamente ou ou preferencialmente a um primeiro alvo pode ou não ligar-se especificamente ou prefe-rencialmente a um segundo alvo. Como tal, “ligação específica” ou “ligação prefe-rencial” não requer necessariamente (embora possa incluir) ligação exclusiva. Gene-ricamente, mas não necessariamente, referência a ligação significa ligação prefe-rencial.

[0046] Os termos “polipeptídeo”, “oligopeptídeo”, “peptídeo” e “proteína” são aqui usados intercambiavelmente para referirem-se a polímeros de aminoácidos de qualquer comprimento. O polímero pode ser linear ou ramificado, ele pode compre-ender aminoácidos modificados, e pode ser interrompido por não-aminoácidos. Os termos também abrangem um polímero de aminoácidos que foi modificado natural- mente ou através de intervenção; por exemplo, formação de ligação dissulfeto, gli- cosilação, lipidação, acetilação, fosforilação, ou qualquer outra manipulação ou mo-dificação, tal como conjugação com um componente de marcação. Também incluídos na definição são, por exemplo, polipeptídeos contendo um ou mais análogos de um aminoácido (incluindo, por exemplo, aminoácidos não-naturais, etc.), assim como outras modificações conhecidas na técnica. É entendido que, devido os polipeptí-deos desta invenção serem baseados em um anticorpo, os polipeptídeos podem ocorrer como cadeias simples ou cadeias associadas.

[0047] “Polinucleotídeo”, ou “ácido nucléico”, como aqui usados intercambia-velmente, referem-se a polímeros de nucleotídeos de qualquer comprimento, e in-cluem ADN e ARN. Os nucleotídeos podem ser desoxirribonucleotídeos, ribonucleo- tídeos, nucleotídeos modificados ou bases, e/ou seus análogos, ou qualquer subs-trato que possa ser incorporado em um polímero por ADN ou ARN polimerase. Um polinucleotídeo pode compreender nucleotídeos modificados, tais como nucleotídeos metilados e seus análogos. Se presente, modificação para a estrutura de nucleotí- deo pode ser proporcionada antes ou após montagem do polímero. A sequência de nucleotídeos pode ser interrompida por componentes não-nucleotídeos. Um polinu-cleotídeo ainda pode ser modificado após polimerização, tal como através de conju-gação com um componente de marcação. Outros tipos de modificações incluem, por exemplo, ‘capas’, substituição de um ou mais dos nucleotídeos ocorrendo natural- mente com um análogo, modificações internucleotídeos tais como, por exemplo, aquelas com ligações não-carregadas (por exemplo, fosfonatos de metila, fosfo triés- teres, fosfoamidatos, carbamatos, etc.) e com ligações carregadas (por exmeplo, fósforotioatos, fósforoditioatos, etc.), aquelas contendo metades pendentes, como, por exemplo, proteínas (por exemplo, nucleases, toxinas, anticorpos, peptídeos si-nais, ply-L-lisina, etc.), aquelas com intercaladores (por exemplo, acridina, psorale- no, etc.), aquelas contendo quelantes (por exemplo, metais, metais radioativos, boro, metais oxidantes, etc.), aquelas contendo alquilantes, aquelas com ligações modifi-cadas (por exemplo, ácidos nucléicos alfa anoméricos, etc.), assim como formas não-modificadas do polinucleotídeo(s). Ainda, qualquer um dos grupos hidroxila co- mumente presentes nos açúcares pode ser substituído, por exemplo, por grupos fos- fonato, grupos fosfato, protegidos por grupos protetores padrões, ou ativados para preparação de adicionais ligações a adicionais nucleotídeos, ou pode ser conjugado a suportes sólidos. O OH terminal 3’ e 5’ pode ser fosforilado ou substituído com aminas ou metades de grupos de capeamento orgânicos de 1 a 20 átomos de car-bono. Outras hidroxilas também podem ser derivadas para grupos de proteção pa-drões. Polinucleotídeos também podem conter formas análogas de açúcares ribose ou desoxirribose que são genericamente conhecidas na técnica, incluindo, por exemplo, 2’-O-metila, 2’-O-alila, 2’-flúor-, ou 2’-azido ribose, análogos de açúcar car- boxílicos, açúcares alfa anoméricos, açúcares epiméricos como arabinose, xiloses ou lixoses, açúcares piranose, açúcares furanose, sedoheptuloses, análogos acícli- cos e análogos de nucleosídeo abásico como metil ribosídeo. Uma ou mais ligações fosfodiéster podem ser substituídas por grupos ligantes alternativos. Estes grupos ligantes alternativos incluem, mas não são limitados a, realizações onde fosfato é substituído com P(O)S (“tioato”), P(S)S (“ditioato”), “(O)NR2 (“amidato”), P(O)R, P(O)OR’, CO ou CH2 (“formacetal”), onde cada R ou R’ é independentemente H ou alquila substituído ou não-substituído (1-20 C) opcionalmente contendo uma ligação éter (-O-), arila, alquenila, ciclo alquila, ciclo alquenila ou araldila. Nem todas as liga-ções em um polinucleotídeo precisam ser idênticas. A descrição precedente aplica- se a todos os polinucleotídeos aqui referidos, incluindo ARN e ADN.

[0048] Uma “região variável” de um anticorpo refere-se à região variável da cadeia leve de anticorpo ou a região variável da cadeia pesada de anticorpo, tanto sozinha como em combinação. As regiões variáveis das cadeias pesada e leve con-sistem em quatro regiões de estrutura (FR) conectadas por três regiões determinantes de complementaridade (CDRs) também conhecidas como regiões hiper- variáveis. As CDRs em cada cadeia são mantidas juntas em proximidade pelas FRs e, com as CDRs da outra cadeia, contribuem para formação de sítio de ligação de antígeno de anticorpos,Existem pelo menos duas técnicas para determinação de CDRs: (1) uma abordagem baseada em variabilidade de sequência de espécies cruzadas (isto é, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda MD)); e (2) uma abordagem baseada em estudos cristalográficos de complexos de antígeno - anticorpo (Chothia et al. (1989) Nature 342:877; Al-lazikani et al. (1997) J. Molec. Biol. 273:927-948)). Como aqui usado, uma CDR pode referir-se a CDRs definidas por qualquer abordagem ou por uma combinação de ambas abordagens.

[0049] Uma “região constante” de um anticorpo refere-se à região constante da cadeia leve de anticorpo ou a região constante da cadeia pesada de anticorpo, tanto sozinha como em combinação.

[0050] Como aqui usado, um “anticorpo antagonista anti-CGRP” (intercambi- avelmente chamado “anticorpo anti-CGRP”) refere-se a um anticorpo que é capaz de ligar-se a CGRP e inibir atividade biológica de CGRP e/ou caminho(s) à jusante. Um anticorpo antagonista anti-CGRP abrange anticorpos que bloqueiam, antagonizam, suprimem ou reduzem (incluindo significantemente) atividade biológica de CGRP. Para propósito da presente invenção, será explicitamente entendido que o termo “anticorpo antagonista anti-CGRP” abrange todos os termos previamente identificados, títulos, e estados funcionais e características pelo que o próprio CGRP, uma atividade biológica de CGRP, ou as consequências da atividade biológica, são substancialmente anuladas, diminuídas, ou neutralizadas em qualquer grau significante. Exemplos de anticorpos antagonistas de anti-CGRP são aqui providos.

[0051] Como aqui usado, “substancialmente puro” refere-se a material que é pelo menos 50% puro (isto é, livre de contaminantes), mais preferivelmente pelo menos 90% puro, mais preferivelmente pelo menos 95% puro, mais preferivelmente pelo menos 98% puro, mais preferivelmente pelo menos 99% puro.

[0052] Uma “célula hospedeira” inclui uma célula individual ou cultura de cé-lulas que pode ser ou tem sido um receptor para vetor(es) para incorporação de in-serções de polinucleotídeos. Células hospedeiras incluem progénie de uma única célula hospedeira, e a progénie pode não ser necessariamente completamente idên-tica (em morfologia ou em complemento de ADN genômico) à célula parente original devido a mutação natural, acidental ou deliberada. Uma célula hospedeira inclui cé-lulas transfectadas in vivo com um polinucleotídeo(s) desta invenção.

[0053] Como aqui usado, “tratamento” é uma abordagem para obtenção de resultados clínicos desejados ou benéficos. Para os propósitos desta invenção, re-sultados clínicos desejados ou benéficos incluem, mas não são limitados a, um ou mais do seguinte: aperfeiçoamento ou alívio de qualquer aspecto de dor crônica e/ou sintoma de dor crônica. Para propósitos desta invenção, resultados clínicos benéfi-cos ou desejados incluem, mas não são limitados a, um ou mais dos seguintes: in-cluindo diminuição de severidade, alívio de dor e/ou um sintoma associado com dor crônica.

[0054] Uma “quantidade efetiva” de droga, composto, ou composição farma-cêutica é uma quantidade suficiente para efetuar resultados desejados ou benéficos incluindo resultados clínicos como alívio ou redução em sensação de dor. Uma quantidade efetiva pode ser administrada em uma ou mais administrações. Para os propósitos desta invenção, uma quantidade efetiva de droga, composto, ou compo-sição farmacêutica é uma quantidade suficiente para tratar, melhorar, reduzir a in-tensidade de e/ou prevenir dor crônica ou sintoma associado com dor crônica. Como é entendido no contexto clínico, uma quantidade efetiva de uma droga, composto, ou composição farmacêutica pode ou não ser obtida em conjunção com uma outra dro-ga, composto ou composição farmacêutica. Assim, uma “quantidade efetiva” pode ser considerada no contexto de administração de um ou mais agentes terapêuticos, e um agente simples pode ser considerado ser dado em uma quantidade efetiva se, em conjunção com um ou mais outros agentes, um resultado desejável pode ser ou é obtido.

[0055] Em uma realização, “preparado para” significa aqui que o medicamento está na forma de uma dosagem unitária ou semelhante apropriadamente embalada e/ou marcada para uso em administração periférica.

[0056] “Reduzindo incidência” de dor crônica e/ou um sintoma associado com dor crônica significa qualquer de redução de severidade (que pode incluir redução de necessidade de e/ou quantidade de (por exemplo, exposição a) outras drogas e/ou terapias genericamente usadas para estas condições), duração e/ou freqüên- cia.

[0057] “Melhora” de dor crônica e/ou um sintoma associado com dor crônica significa uma diminuição ou aperfeiçoamento de um ou mais sintomas de dor crônica e/ou sintomas associados com dor crônica comparada a não administração de um anticorpo antagonista anti-CGRP. “Melhora” também inclui encurtamento ou redução em duração de um sintoma.

[0058] “Aliviando” dor crônica e/ou um sintoma associado com dor crônica significa diminuição de extensão de uma ou mais indesejáveis manifestações clíni-cas de dor crônica em um indivíduo ou população de indivíduos tratados com um anticorpo antagonista anti-CGRP de acordo com a invenção.

[0059] Como aqui usado, “retardando” o desenvolvimento de dor crônica sig-nifica adiar, impedir, tomar mais lenta, retardar, estabilizar e/ou adiando progressão de dor crônica e/ou um sintoma associado com dor crônica. Este retardo pode ser de vários comprimentos de tempo, dependendo da história da doença e/ou indivíduos sendo tratados. Como é evidente para aqueles versados na técnica, um retardo sufi-ciente ou significante pode, de fato, abranger prevenção, em que o indivíduo não desenvolve dor crônica. Um processo que “retarda” o desenvolvimento do sintoma é um processo que reduz probabilidade de desenvolvimento de sintoma em uma dada estrutura de tempo e/ou reduz extensão dos sintomas em uma dada estrutura de tempo, quando comparado a não utilização de processo Tais comparações são tipi-camente baseadas em estudos clínicos, usando um número de sujeitos estatistica-mente significante.

[0060] Uma “amostra biológica” abrange uma variedade de tipos de amostras obtidos de um indivíduo e pode ser usada em um ensaio diagnóstico ou de monito-ração. A definição abrange sangue e outras amostras líquidas de origem biológica, amostras de tecido sólido tal como um espécime de biopsia ou culturas de tecidos ou células derivadas das mesmas, e sua progénie. A definição também inclui amostras que foram manipuladas em qualquer maneira após sua obtenção, tal como através de tratamento com reagentes, solubilização, ou enriquecimento para certos componentes, como proteínas ou polinucleotídeos, ou sendo embutidas em uma matriz semi - sólida ou sólida para propósitos de secção. O termo “amostra biológica” abrange uma amostra clínica, e também inclui células em cultura, sobrenadantes de células, lisados de células, soro, plasma, fluido biológico, e amostras de tecidos.

[0061] Um “indivíduo” ou “sujeito” é um vertebrado, preferivelmente um ma-mífero, mais preferivelmente um humano. Mamíferos incluem, mas não são limitados a, animais de fazenda (tais como vacas), animais de esporte, animais domésticos (como gatos, cães e cavalos), primatas, camundongos e ratos.

[0062] Como aqui usado, “vetor” significa uma construção, que é capaz de li-berar, e preferivelmente expressar, um ou mais genes ou sequências de interesse em uma célula hospedeira. Exemplos de vetores incluem, mas não são limitados a, vetores virais, vetores de expressão de ARN ou ADN nu, plasm ideo, vetores cosmí- deo ou fago, vetores de expressão de ARN ou ADN associados com agentes de condensação catiônicos, vetores de expressão de ARN ou ADN encapsulados em lipossomas, e certas células eucarióticas, tais como células produtoras.

[0063] Como aqui usado, “sequência de controle de expressão” significa uma sequência de ácidos nucléicos que dirige transcrição de um ácido nucléico. Uma se-quência de controle de expressão pode ser um promotor, tal como um promotor constitutivo ou um induzível, ou um aperfeiçoador. A sequência de controle de ex-pressão está operavelmente ligada à sequência de ácido nucléico a ser transcrita.

[0064] Como aqui usado, “carreador farmaceuticamente aceitável” inclui qualquer material que, quando combinado com um ingrediente ativo, permite que o ingrediente retenha atividade biológica e seja não-reativo com o sistema imune do sujeito. Exemplos incluem, mas não são limitados a, qualquer um dos carreadores farmacêuticos padrões tais como solução salina tamponada com fosfato, água, emulsões como emulsão de óleo / água, e vários tipos de agentes umectantes. Dilu- entes preferidos para administração de aerossol ou parenteral são solução salina tamponada com fosfato ou solução salina normal (0,9%). Composições compreen-dendo tais carreadores são formuladas através de processos convencionais bem conhecidos (ver, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990; e Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000).

[0065] O termo “administrado perifericamente” como aqui usado refere-se à rota através da qual uma substância, medicamento e/ou anticorpo antagonista anti- CGRP é para ser liberado, em particular ele significa não centralmente, não espi-nhalmente, não intratecalmente, não liberado diretamente no CNS. O termo refere- se a rotas de administração outras que não aquelas imediatamente anteriores e in-clui via uma rota que é oral, sublingual, bucal, tópica, retal, via inalação, transdérmi- ca, subcutânea, intravenosa, intraarterial, intramuscular, intracardíaca, intraóssea, intradérmica, intraperiotoneal, transmucosa, vaginal, intravitreal, intraarticular, periar-ticular, local ou epicutânea.

[0066] O termo “atua perifericamente” como aqui usado refere-se ao sítio de ação de uma substância, composto, medicamento e/ou anticorpo antagonista anti- CGRP o dito sítio estando dentro de sistema nervoso periférico como oposto ao sis-tema nervoso central, o dito composto, medicamento e/ou anticorpo antagonista anti-CGRP sendo limitado por incapacidade de cruzar a barreira para o CNS e cérebro quando administrado perifericamente. O termo “penetrando centralmente” refere-se à habilidade de uma substância cruzar a barreira para o cérebro ou CNS.

[0067] O termo “Koff”, como aqui usado, é pretendido referir-se à constante de taxa fora para dissociação de um anticorpo a partir do complexo de anticorpo / antí-geno.

[0068] O termo “Kd”, como aqui usado, é pretendido referir-se à constante de dissociação de uma interação de anticorpo - antígeno.

[0069] A presente invenção é direcionada a um medicamento para a preven-ção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica e processos para prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica em um indi-víduo.

[0070] Em um primeiro aspecto, a invenção provê o uso de um anticorpo an-tagonista anti-CGRP para a fabricação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica, onde o medicamento é pre-parado para administração periférica ou onde o medicamento é administrado perife- ricamente.

[0071] Em um segundo aspecto, a invenção provê um anticorpo antagonista anti-CGRP para uso na prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica onde o anticorpo é preparado para administração periférica ou onde o anticorpo é administrado perifericamente.

[0072] Em um terceiro aspecto, a invenção provê o uso de um anticorpo an-tagonista anti-CGRP para a fabricação de um medicamento parta melhora, controle, redução de incidência de, ou retardo de desenvolvimento ou progressão de dor crô-nica e/ou sintomas de dor crônica, onde o medicamento é preparado para adminis-tração periférica ou onde o medicamento é administrado perifericamente. Na alterna-tiva deste aspecto a invenção provê um anticorpo antagonista anti-CGRP para uso em melhora, controle, redução de incidência de, ou retardo de desenvolvimento ou progressão de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica, onde o anticorpo é prepa-rado para administração periférica ou onde o anticorpo é administrado periferica-mente.

[0073] Em um quarto aspecto, a invenção provê um processo de prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica em um indivíduo, com-preendendo administração periférica para o indivíduo de uma quantidade efetiva de um anticorpo antagonista anti-CGRP.

[0074] Em um quinto aspecto, a invenção provê um processo de melhora, controle, redução de incidência de, ou retardo de desenvolvimento ou progressão de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica em um indivíduo, compreendendo adminis-tração periférica ao indivíduo de uma quantidade efetiva de um anticorpo antagonista anti-CGRP.

[0075] De acordo com uma realização preferida da presente invenção o indi-víduo é preferivelmente um mamífero, por exemplo, um animal de companhia tal como um cavalo, gato ou cão ou um animal de fazenda como ovelha, vaca ou porco. Mais preferivelmente o mamífero é um humano.

[0076] De acordo com uma realização preferida da presente invenção o me-dicamento e/ou anticorpo antagonista anti-CGRP é preparado para administração oral, sublingual, bucal, tópica, retal, inalação, intraóssea, intradérmica, intraperitone-al, transmucosal, vaginal, intravitreal, intraarticular, periarticular, local ou epicutânea.

[0077] Ainda de acordo com uma realização preferida o medicamento é pre-parado para administração periférica antes de e/ou durante e/ou após o desenvolvi-mento de dor crônica.

[0078] Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP atua periferi-camente na administração. Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP não é administrado centralmente , espinhalmente ou intratecalmente.

[0079] De acordo com uma realização preferida da presente invenção a dor crônica compreende uma ou mais de dor nociceptiva crônica, dor neuropática crôni-ca, dor inflamatória crônica, fibromialgia, avanço de dor e dor persistente. A dor crô-nica pode compreender uma ou mais de hiperalgesia, alodinia, sensibilização cen-tral, sensibilização periférica, desinibição e facilitação aumentada.

[0080] De acordo ainda com uma realização preferida da presente invenção a dor crônica é dor de câncer, preferivelmente dor de câncer surgindo de malignidade ou de câncer preferivelmente selecionado de um ou mais de: adenocarcinoma em tecido glandular, blastoma em tecido embriônico de órgãos, carcinoma em tecido epitelial, leucemia em tecidos que formam células de sangue, linfoma em tecido lin-fático, mieloma em medula óssea, sarcoma em tecido conjuntivo ou de suporte, cân-cer adrenal, câncer de mama, tumores carcinóides, câncer cervical, quimioterapia, câncer de cólon, citopenia, câncer endometrial, câncer esofageal, câncer gástrico, câncer de cabeça, câncer de pescoço, câncer hepatobiliar, câncer de rim, leucemia, câncer de fígado, câncer de pulmão, linfoma, doença de Hodgkin, linfoma não- Hodgkin, tumores de sistema nervoso, câncer oral, câncer de ovário, câncer pan- creático, câncer de próstata, câncer retal, câncer de pele, câncer de estômago, câncer de testículo, câncer de tiróide, câncer de uretra, câncer de osso, câncer de sarcomas do tecido conjuntivo, câncer de tecido ósseo, câncer de células formando sangue, câncer de medula óssea, mieloma múltiplo, leucemia, câncer de osso primário ou secundário, tumores que sofrem metástase para o osso, tumores infiltrando o nervo e vísceras ocas, tumores próximos de estruturas neurais. Ainda preferivelmente a dor de câncer compreende dor visceral, preferivelmente dor visceral que surge de câncer pancreático e/ou metástase no abdome. Ainda preferivelmente a dor de câncer compreende dor somática, preferivelmente dor somática devido a um ou mais de câncer de osso, metástase no osso, dor pós-cirúrgica, câncer de sarcomas do tecido conjuntivo, câncer de tecido ósseo, câncer de células formadoras de sangue da medula óssea, mieloma múltiplo, leucemia, câncer ósseo primário ou secundário.

[0081] De acordo com uma realização preferida da presente invenção o anti-corpo antagonista anti-CGRP se liga a CGRP, mais preferivelmente liga-se a CGRP e inibe a habilidade de CGRP ligar-se ao receptor de CGRP. Preferivelmente o anti-corpo antagonista anti-CGRP se liga a ambos, CGRP de humanos e roedores, pre-ferivelmente CGRP de rato e humano. Mais preferivelmente o anticorpo se liga a CGRP humano, ainda preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP se liga a alfa-CGRP humano ou a alfa-CGRP e/ou beta-CGRP humanos. Mais preferivelmen-te o anticorpo antagonista anti-CGRP é um anticorpo que exibe qualquer uma ou mais das seguintes características funcionais: (a) liga-se a CGRP; (b) bloqueia CGRP de ligação a seu receptor(es); (c) bloqueia ou diminui ativação de receptor de CGRP, incluindo ativação de cAMP; (d) inibe, bloqueia, suprime ou reduz atividade biológica de CGRP, incluindo caminhos à jusante mediados por sinalização CGRP, como ligação de receptor e/ou elicitação de uma resposta celular para CGRP; (e) previne, melhora, ou trata qualquer aspecto de dor crônica; (f) aumenta depuração de CGRP; e (g) inibe (reduz) síntese , produção ou liberação de CGRP. Anticorpos da invenção incluindo G1 e G2, são conhecidos ligarem-se a CGRP e removerem sua disponibilidade biológica, por exemplo, no soro assim evitando acesso de CGRP ao seu receptor e respostas celulares à jusante e efeitos biológicos de CGRP tais como rubor e vasodilatação.

[0082] inda em uma realização preferida da invenção o anticorpo antagonis-ta anti-CGRP se liga a um fragmento de CGRP, mais preferivelmente a um fragmento de CGRP assim como ao CGRP de inteiro comprimento. Preferivelmente, o anticorpo antagonista anti-CGRP se liga à região ou fragmento terminal-C de CGRP. A região ou fragmento terminal-C de CGRP preferivelmente compreende aminoácidos 19-37 ou 25-37 ou 29-37 ou alternativamente 30-37, ainda alternativamente 31-37 de CGRP. Ainda em uma realização, a região ou fragmento terminal-C de CGRP preferivelmente compreende aminoácidos 32-37 mais preferivelmente 33 a 37 de CGRP. Preferivelmente o CGRP é tanto alfa-CGRP como beta-CGRP, ainda preferi-velmente alfa-CGRP ou beta-CGRP humano ou de roedor, ainda preferivelmente humano ou rato, mais preferivelmente humano, ainda preferivelmente humano, mais preferivelmente alfa-CGRP humano.

[0083] Ainda em uma realização preferida da invenção o anticorpo antagonis-ta anti-CGRP liga-se especificamente à sequência de aminoácidos GSKAF. Preferi- velmente a sequência GSKAF de CGRP é o epitopo ao qual o anticorpo antagonista anti-CGRP se liga, preferivelmente na posição 33 a 37, mais preferivelmente a se-quência é GXXXF onde X pode ser qualquer aminoácido, preferivelmente em posi-ções 33 a 37 de CGRP, as extremidades definidas por aminoácidos G33 e F37 de CGRP.

[0084] Em uma realização, a presente invenção provê um anticorpo antago-nista anti-CGRP que se liga especificamente a um epítopo definido por aminoácidos G33 a F37 de CGRP. O anticorpo antagonista anti-CGRP pode especificamente li-gar-se ao epítopo definido pela sequência de aminoácidos GSKAF. Em uma realiza-ção, a presente invenção provê o uso de um tal anticorpo no usos e processos defi-nidos nos vários aspectos da presente invenção.

[0085] Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP inibe ou evita ativação do receptor de CGRP. Preferivelmente o anticorpo anti-CGRP tem uma IC50 de entre 0,0001 (0,1 nM) a 500 pM. Em algumas realizações preferidas, a IC50 está entre 0,0001 pM e, ou está em cerca de qualquer um de 250 pM, 100 pM, 50 pM, 10 pM, 1 pM, 500 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 1 nM, ou 0,5 nM como medida emum ensaio de ligação in vitro. Ainda em algumas realizações preferidas, IC50 é menos que qualquer um de 500 pM, ou 100 pM, ou 50 pM, como medida em um ensaio de ligação in vitro. Ainda em uma realização mais preferida a IC50 é 1,2 nM ou 31 nM.

[0086] Ainda em uma realização preferida, o anticorpo antagonista anti- CGRP usado é capaz de competir com um anticorpo descrito aqui acima para a liga-ção de CGRP ou para um fragmento de CGRP assim como o CGRP de inteiro com-primento, preferivelmente para a região ou fragmento terminal-C de CGRP, preferi-velmente a região ou fragmento terminal-C de CRGP compreende aminoácidos 19- 37 ou 25-37 ou 29-37 ou alternativamente 30-37, ainda alternativamente 31-37 de CGRP. Ainda em uma realização, a região ou fragmento terminal-C de CRGP prefe- rivelmente compreende aminoácidos 32-37, mais preferivelmente 33 a 37 de CGRP.

[0087] Ainda em uma realização preferida, o anticorpo antagonista anti- CGRP ou sua porção alvejando antígeno como usado na invenção é um anticorpo capaz de competir com um anticorpo antagonista anti-CGRP aqui descrito acima, em particular G1 ou G2 como aqui descritos, para: (a)a ligação de CGRP ou um fragmento de CGRP, ou um fragmento de CGRP assim como o CGRP de inteiro comprimento, preferivelmente a região ou fra-gmento terminal-C de |CRGP, preferivelmente a região ou fragmento terminal-C de CRGP compreendendo aminonácidos 19-37 ou 25-27 ou 29-37 ou alternativamente 30-37, ainda alternativamente 31-37, preferivelmente aminoácidos 32-37, mais pre-ferivelmente 33 a 37 de CGRP, preferivelmente o CGRP é alfa ou beta, preferivel-mente beta, mais preferivelmente roedor ou humano, mais preferivelmente humano, (b)a ligação da sequência epítopo GSKAF, preferivelmente em posição de aminoácido 33 a 37 de CGRP como definido em (a), mais preferivelmente para a sequência GXXXF, onde X é qualquer aminoácido, preferivelmente GXXXF em posi-ção de aminoácido 33 a 37 de CGRP como definido em (a), (c)a ligação como descrito em (a) ou (b) com substancialmente a mesma Kd e/ou substancialmente a mesma Koff, e/ou (d)ligação a CGRP e inibição / antagonização de atividade biológica de CGRP e/ou caminho(s) à jusante, preferivelmente o CGRP é alfa ou beta, preferi-velmente beta, mais preferivelmente roedor ou humano, mais preferivelmente huma-no.

[0088] O anticorpo antagonista anti-CGRP liga-se preferivelmente a CGRP, região de CGRP ou fragmento de CGRP com uma afinidade de ligação (Kd) de entre 0,000001 pM (0,001 nM) ou 0,00001 pM (0,01 nM) a 500 pM. Em algumas realizações preferidas, a afinidade de ligação (Kd) está entre cerca de 0,000001 pM ou 0,00001 pM e, ou está em cerca de, qualquer um de of 250 pM, 100 pM, 50 pM, 10 pM, 1 pM, 500 nM, 250 nM, 100 nM, 50 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 1 nM, 0.5 nM, 1 nM, 0.05 nM, ou 0.01 nM, 0,005 nM, 0,001 nM, como medida em um ensaio de ligação in vitro. Em algumas realizações ainda preferidas, afinidade de ligação (Kd) é menos que qualquer um de 500 pM, ou 100 pM, 50 pM, ou 10 pM, 5 pM, 1 pM, como medida em um ensaio de ligação in vitro. Ainda em uma realização mais preferida afinidade de ligação (Kd) é 0,04 nM ou 16 nM.

[0089] O anticorpo antagonista anti-CGRP como usado na presente invenção pode ser selecionado do grupo de: anticorpos monoclonais, anticorpos policlonais, fragmentos de anticorpos (por exemplo, Fab, F(ab’)2, Fv, Fc, ScFv, etc.), anticorpos quiméricos, anticorpos biespecíficos, anticorpos heteroconjugados, anticorpos de cadeia única (ScFv), seus mutantes, proteínas de fusão compreendendo uma porção de anticorpo (por exemplo, um anticorpo domínio), anticorpos humanizados, e qualquer outra configuração modificada da molécula de imunoglobulina que compreenda um sítio de reconhecimento de antígeno da especificidade requerida, incluindo variantes de glicosilação de anticorpos, variantes de sequência de aminoácidos de anticorpos, e anticorpos modificados covalentemente. O anticorpo antagonista anti- CGRP pode ser murino, rato, humano, ou qualquer outra origem (incluindo anticorpos quiméricos ou humanizados). Em algumas realizações, o anticorpo antagonista anti-CGRP pode ser humanizado mas é mais preferivelmente humano. Preferivelmente, o anticorpo antagonista anti-CGRP é isolado, ainda preferivelmente ele é substancialmente puro. Onde o anticorpo antagonista anti-CGRP é um fragmento de anticorpo o fragmento preferivelmente retém as características funcionais do anticorpo original, isto é, a atividade antagonista e/ou ligante de CGRP como descrito nas características funcionais acima.

[0090] Exemplos dos anticorpos antagonistas de anti-CGRP são conhecidos na técnica. Portanto de acordo com uma realização preferida da presente invenção o anticorpo antagonista anti-CGRP como usado na presente invenção é preferivelmen-te um anticorpo anti-CGRP como genericamente ou especificamente mostrado em qualquer um de (i) W02007/054809, (ii) W02007/076336, (iii) Tan et al., Clin. Sei. (Lond.) 89:565-73, (iv) Sigma (Missouri, US), product number C7113(clone #4901), (v) Plourde et al., Peptides 14:1225-1229, 1993 ou que compreende ou consiste em: (a) um fragmento do dito anticorpo (por exemplo, Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv, Fc, ScFv, etc.), (b) uma cadeia leve do dito anticorpo, (c) uma cadeia pesada do dito anticorpo, (d) uma ou mais regiões variáveis de uma ceia leve e/ou uma cadeia pesada do dito anticorpo, (e) uma ou mais CDR(s) (uma, duas, três, quatro, cinco ou seis CDRs) do di-to anticorpo, (f) CDR H3 da cadeia pesada do dito anticorpo, (g) CDR L3 da cadeia leve do dito anticorpo, (h) três CDRs da cadeia leve do dito anticorpo (i) três CDRs da cadeia pesada do dito anticorpo, (j) três CDRs da cadeia leve e três CDRs da cadeia pesada do dito anticorpo, (k) qualquer um ou mais de (a) até (j).

[0091] De acordo com uma realização preferida da presente invenção o anti-corpo antagonista anti-CGRP é anticorpo G2 ou anticorpo G1. De acordo com uma realização mais preferida da presente invenção o anticorpo antagonista anti-CGRP é o anticorpo anti-CGRP G1 como especificamente mostrado no pedido de patente W02007/054809, ou compreendendo suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809, também incluindo anticorpos funcionalmente equivalentes a G1, isto é, compreendendo substituições conservatives de resíduos de aminoácidos ou uma ou mais adições ou supressões de aminoácidos que não afetam significante- mente suas características funcionais, por exemplo, atividade antagonista ou de li-gação de CRGP e variantes que têm atividade e/ou ligação aperfeiçoada ou diminu-ída. Como aqui usados, os termos “G1” e “anticorpo G1” são usados intercambia- velmente para referirem-se a um anticorpo produzido por vetores de expressão tendo números de depósitos de ATCC PTA-6867 e ATCC PTA-6866 como mostrado no pedido de patente W02007/054809.

[0092] Ainda de acordo com uma realização da presente invenção, o anticor-po antagonista anti-CGRP compreende ou consiste em um polipeptídeo selecionado de: (a) anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (b) um fragmento ou uma região de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (c) uma cadeia leve de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (d) uma cadeia pesada de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (e) uma ou mais regiões variáveis de uma cadeia leve e/ou uma cadeia pesada de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (f) uma ou mais CDRs (uma, duas, três, quatro, cinco, ou seis CDRs) de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (g) CDR H3 da cadeia pesada de anti-corpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (h) CDR L3 da cadeia leve de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (i) três CDRs da cadeia leve de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (j) três CDRs da cadeia pesada de anti-corpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; (k) três CDRs da cadeia leve e/ou três CDRs da cadeia pesada, de anticorpo G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809; e (i) um anticorpo compreendendo qualquer um ou mais do acima. Em algumas realizações, a pelo menos uma, duas, três, quatro, cinco, ou seis CDR(s) são pelo menos cerca de 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, ou 99% idênticas a pelo menos uma, duas, três, quatro, cinco ou seis CDRs de G1 ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de WQ2007/054809.

[0093] Determinação de regiões CDR está bem dentro da habilidade daqueles versados na técnica. É entendido que em algumas realizações, CDRs podem ser uma cvombinação da CDR de Kabat e Chothia. Em algumas realizações, as CDRs são as CDRs de Kabat. Em outras realizações, as CDRs são as CDRs de Chothia.

[0094] Q anticorpo antagonista anti-CGRP compreende ou consiste em um fragmento ou uma região do anticorpo G1 (por exemplo, Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv, Fc, ScFv, etc.) ou suas variantes mostradas na Tabela 6 de W02007/054809. Preferi-velmente o dito fragmento ou região tem as características funcionais de um anticor-po antagonista anti-CGRP, por exemplo, atividade de ligação e/ou atividade antago-nista de CGRP e compreende ou consiste em um ou mais de uma cadeia leve, ca-deia pesada, fragmento contendo uma ou mais regiões variáveis de uma cadeia leve e/ou uma cadeia pesada, ou uma ou mais CDRs de uma cadeia leve e/ou uma ca-deia pesada do anticorpo G1.

[0095] Ainda de acordo com uma realização preferida da invenção o anticorpo antagonista anti-CGRP compreende uma região variável de cadeia leve, LCVR, compreendendo um peptídeo com uma sequência selecionada do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 28-32 e/ou uma região variável de cadeia pesada, HCVR, compre-endendo um peptídeo com uma sequência selecionada do grupo consistindo em SEQW ID Nos: 34-38 de pedido de patente WQ2007/076336.

[0096] Ainda preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP compreende um polipeptídeo de LCVR de uma SEQ ID NO como mostrado na Tabela 1 de WQ2007/076336 e ainda compreende um polipeptídeo de HCVR de uma SEQ ID NO como mostrada na Tabela 1 de pedido de patente WQ2007/076336.

[0097] Ainda de acordo com uma realização da invenção o anticorpo antago-nista anti-CGRP usado compreende uma CDR de cadeia leve (CDRL) selecionada do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 8-13 e/ou uma CDR de cadeia pesada (CDRH) selecionada do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 14-22 de pedido de patente WQ2007/076336.

[0098] Processos de fabricação e isolamento de anticorpos antagonistas de anti-CGRP de pedido WQ2007/076336 e dados demonstrando a caracterização an-tagonista e ligante de CGRP dos mesmos são descritos no pedido WQ2007/076336.

[0099] Preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP para uso na pre-sente invenção compreende um domínio VH que é pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% idêntico em sequência de aminoácidos a SEQ ID NO: 1 ou SEQ ID NO: 19 aqui apresentada.

[00100] Preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP compreende um domínio VL que é pelo menos é pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% idêntico em sequência de aminoácidos a SEQ ID NO: 2 ou SEQ ID NO: 20 aqui apresentada.

[00101] Q anticorpo antagonista anti-CGRP compreende um domínio VH e um domínio VL que são pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% idêntico em sequência de amino-ácidos a SEQ ID NO: 1 e 2 respectivamente ou SEQ ID NO: 19 e 20 aqui apresenta-das, respectivamente.

[00102] Preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP compreende um domínio VH que é pelo menos 90% idêntico em sequência de aminoácidos a SEQ ID NO: 1 e um domínio VL que é pelo menos 90% idêntico em sequência de aminoácidos a SEQ ID NO: 2 aqui apresentada.

[00103] Alternativamente, o anticorpo antagonista anti-CGRP preferivelmente compreende um domínio VH que é pelo menos 90% idêntico em sequência de ami-noácidos a SEQ ID NO: 19 e um domínio VL que é pelo menos 90% idêntico em se-quência de aminoácidos a SEQ ID NO: 20 aqui apresentada.

[00104] Q anticorpo antagonista anti-CGRP preferivelmente compreende pelo menos uma CDR selecionada do grupo consistindo em: (a) CDR H1 como mostrada em SEQ ID NO: 3 ou 21; (b) CDR H2 como mostrada em SEQ ID NO: 4 ou 22; (c) CDR H3 como mostrada em SEQ ID NO: 5 ou 23; (d) CDR L1 como mostrada em SEQ ID NO: 6 ou 24; (e) CDR L2 como mostrada em SEQ ID NO: 7 ou 25; (f) CDR L3 como mostrada em SEQ ID NO: 8 ou 26; e (g) variantes de CDR L1, CDR L2 e CDR H2 como mostradas na Tabela 6 de WQ2007/054809.

[00105] De acordo com uma realização preferida da presente invenção a re-gião constante de cadeia pesada de anticorpo antagonista anti-CGRP pode ser de quaisquer tipos de regiões constantes, tais como IgG, IgM, IgD, IgA, e IgE; e quais-quer isotipos, tais como IgGI, lgG2, lgG3, e lgG4.

[00106] Ainda preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP compreen-de uma região pesada produzida pelo vetor de expressão com número de acesso ATCC PTA-6867. Ainda preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP compre-ende uma cadeia leve produzida pelo vetor de expressão com número de acesso ATCC PTA-6866. Ainda preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP é produ-zido pelos vetores de expressão com números de acesso ATCC PTA-6867 e PTA- 6866.

[00107] Preferivelmente, o anticorpo antagonista anti-CGRP para uso na pre-sente invenção é anticorpo G1 ou anticorpo G2 aqui definidos.

[00108] Ainda de acordo com uma realização da invenção, o anticorpo anta-gonista anti-CGRP compreende uma região constante modificada como, por exem-plo, descrito em W02007/054809. Preferivelmente a região constante modificada é imunologicamente inerte, incluindo parcialmente imunologicamente inerte, de modo que ela não dispara lise mediada por complemento, não estimula citotoxidez mediada por célula dependente de anticorpo (ADCC), não ativa microglia. Preferivelmente a região constante modificada é reduzida em uma ou mais destas atividades. Mais preferivelmente a região constante é modificada como descrito em Eur. J. Immunol. (1999) 29:2613-2624; pedido PCT/GB99/01441; e/ou pedido de patente GB 9809951.8. De acordo com uma realização preferida da invenção o anticorpo anta-gonista anti-CGRP compreende uma região constante lgG2 de cadeia pesada hu-mana compreendendo as seguintes mutações: A330, P331 para S330, S331 (nume-ração de aminoácidos com referência à sequência de lgG2 tipo selvagem). Eur. J. Immunol. (1999)29:2613-2624.

[00109] Processos de fabricação e isolamento de anticorpos antagonistas de anti-CGRP de pedido W02007/054809 e dados demonstrando a caracterização de antagonista e ligação de CGRP dos mesmos são descritos no pedido W02007/054809. Sequências de SEQ ID NO 1 a 14 do dito pedido são aqui providas como SEQ ID Nos: 1 a 14, respectivamente.

[00110] Ainda de acordo com uma realização da presente invenção o medi-camento é preparado para administração periférica entre uma vez a 7 vezes por se-mana, ainda preferivelmente entre uma vez a quatro vezes por mês, ainda preferi-velmente entre uma a seis vezes por período de 6 meses, ainda preferivelmente uma vez a doze vezes por ano. Preferivelmente o medicamento é preparado para ser administrado perifericamente em um período selecionado de: uma vez diariamente, uma vez cada dois, três, quatro, cinco ou seis dias, semanalmente, uma vez cada duas semanas, uma vez cada três semanas, mensalmente, uma vez cada dois meses, uma vez cada três meses, uma vez cada quatro meses, uma vez cada cinco meses, uma vez cada seis meses, uma vez cada sete meses, uma vez cada oito meses, uma vez cada nove meses, uma vez cada dez meses, uma vez cada onze meses ou anualmente. De acordo com realizações preferidas o medicamento é pre-parado para ser administrado perifericamente via uma rota selecionada de um ou mais de; oralmente, sublingualmente, bucalmente, topicamente, retalmente, via ina-lação, transdermicamente, subcutaneamente, intravenosamente, intraarterialmente, ou intramuscularmente, via administração intracardíaca, intraosseamente, intrader- micamente, intraperitonealmente, transmucosalmente, vaginalmente, intravitrealmen- te, epicutaneamente, intraarticularmente, periarticularmente ou localmente.

[00111] Ainda de acordo com uma realização da presente invenção o medi-camento é preparado para administração periférica com uma concentração de anti-corpo de entre 0,1 a 200 mg/mL; preferivelmente em cerca de, ou entre 0,1 e cerca de, qualquer um de 0,5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 ou 200 mg/mL +/- 10% de erro, mais preferivelmente em 50 mg/mL.

[00112] Ainda de acordo com uma realização da presente invenção o medi-camento é preparado para administração periférica com uma concentração de anti-corpo de entre 0,1 a 200 mg/kg de peso de corpo; preferivelmente em cerca de , ou entre 0,1 e cerca de, qualquer um de 0.5, 1, 5, 10,15 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 ou 200 mg/kg de peso de corpo +/-10% de erro, mais preferivelmente em 10 mg/kg.

[00113] De acordo com uma realização preferida da presente invenção o anticorpo antagonista anti-CGRP tem uma meia-vida in vivo de mais que qualquer um de 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152,154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 200, 202, 204, 206, 208 or 210 dias +/-1 dia, ainda preferivelmente mais que um de 7, 8, 9, 10, 11, ou 12 meses.

[00114] Preferivelmente o anticorpo antagonista anti-CGRP tem uma meia- vida in vivo de mais que 6 dias.

[00115] Ainda de acordo com uma realização preferida da presente invenção, o medicamento e/ou o anticorpo antagonista anti-CGRP não produz efeitos sobre o sistema nervoso central e/ou prejuízo cognitivo. Preferivelmente o medicamento e/ou o anticorpo antagonista anti-CGRP não induz qualquer uma ou mais das seguintes: amnésia, confusão, despersonalização, hipestesia, pensamento anormal, trismo, vertigem, acatisia, apatia, ataxia, parestesia circumoral, estimulação de CNS, instabi-lidade emocional, euforia, alucinações, hostilidade, hiperestesia, hipercinesia, hipo- tonia, falta de coordenação, aumento de libido, reação maníaca, mioclonia, neural-gia, neuropatia, psicose, convulsão, fala anormal, estupor, ideação suicida; tontura, sonolência, insônia, ansiedade, tremor, depressão ou parestesia. Mais preferivel-mente o medicamento e/ou o anticorpo antagonista anti-CGRP não induz prejuízo de coordenação motora ou atenção.

[00116] Ainda de acordo com uma realização da presente invenção o medi-camento e/ou o anticorpo antagonista anti-CGRP não produz prejuízos respiratórios, renais ou gastrointestinais.

[00117] Ainda de acordo com uma outra realização da presente invenção o medicamento e/ou o anticorpo antagonista anti-CGRP não produz efeitos de depen-dência física e/ou psicológica. Preferivelmente o medicamento e/ou o anticorpo an-tagonista anti-CGRP não demonstra afinidade para receptores de ácido N-metil-D- aspártico (NMDA) ou fenciclidina (PCP),benzodiazepínicos, opiato, ou estimulante de CNS, ou produz qualquer efeito sedante ou eufórico.

[00118] Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP, com admi-nistração, melhora, controla, reduz incidência de, ou retarda o desenvolvimento ou progressão de sensação de dor central.

[00119] Em uma outra realização o efeito do anticorpo antagonista anti- CGRP é igual e/ou superior aos efeitos de NSAIDS e/ou opiatos nos mesmos mode-los de dor crônica. Em uma realização, o anticorpo antagonista anti-CGRP é efetivo no tratamento de populações de dores refratárias.

[00120] Ainda de acordo com um aspecto da presente invenção é provido o uso ou processo de acordo com qualquer outro aspecto da invenção onde o anticor-po antagonista anti-CGRP é administrado separadamente, sequêncialmente ou si-multaneamente em combinação com um ou mais ainda agentes ou composto farma- cologicamente ativos, preferivelmente compostos ou agentes úteis para tratamento de dor crônica. Preferivelmente o agente(s) adicional é/são selecionado de um ou mais de: (i) um analgésico opióide, por exmeplo, morfina, heroína, hidromorfona, oxi- morfona, levorfanol, levalorfan, metadona, meperidina, fentanil, cocaína, codeína, dihidrocodeína, oxicodona, hidrocodona, propoxifeno, nalmefeno, nalorfina, naloxo- na, naltrexona, buprenorfina, butorfanol, nalbufina ou pentazocina; (ii) uma droga antiinflamatória não-esteroidal (NSAID), por exemplo, aspirina, diclofenaco, diflusinal, etodolac, fenbufeno, fenoprofeno, flufenisal, flurbiprofeno, ibubrofeno, indometacina, cetoprofeno, cetorolac, ácido meclofenâmico, nabumeto- na, naproxeno, oxaprozino, fenil butazona, piroxicam, sulindac, tolmetin ou zomepi- rac, inibidores de ciclooxigenase-2 (COX-2), celecoxibe; rofecoxibe; meloxicam; JTE- 522; L-745, 337; NS398 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; (iii) um sedativo barbitúrico, por exemplo, amobarbital, aprobarbital, butabar-bital, butabital, mefobarbital, metarbital, metohexital, pentobarbital, fenobarbital, secobarbital, talbutal, teamilal ou tiopental ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel; (iv) um benzodiazepinico tendo uma ação sedativa, por exemplo, clordiaze- póxido, clorazepato, diazepam, flurazepam, lorazepam, oxazepam, temazepam, ou triazolam ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; (v) um antagonista de Hi tendo uma ação sedativa, por exemplo, difenidra- mina, pirilamina, prometazina, clorfeniramina ou clorciclizina ou um seu sal farma-ceuticamente aceitável; (vi) um sedativo tal como glutetimida, meprobamato, metaqualona ou diclo- ralfenazona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; (vii) um relaxante de músculo esquelético, por exemplo, baclofeno, cariso-prodol, clorzoxazona, ciclobenzaprina, metocarbamol ou orfenadrina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; (viii) um antagonista de receptor de NMDA, por exemplo, dextrometorfan ((+)-3-hidroxi-N-metil morfinam) ou seu metabolito dextrorfan ((+)-3-hidroxi-N-metil morfinam), cetamina, memantina, pirroloquinolino quinona ou ácido cis-4-(fosfono metil)-2-piperidino carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; (ix) um alfa adrenérgico, por exemplo, doxazosina, tamsulosina, clonidina ou 4-amino-6,7-dimetoxi-2-(5-metano sulfonamido-1,2,3,4-tetrahidro isoquinol-2-il)-5-(2- piridil) quinazolina; (x) um antidepressivo tricíclico, por exemplo, desipramina, imipramina, ami- triptilina ou nortriptilina; (xi) um anticonvulsivo, por exemplo, carbamazepina ou valproato; (xii) um antagonista de taquicinina (NK), particularmente um antagonista de NK-3, NK-2 ou NK-1, por exemplo, (aR,9R)-7-[3,5-bis(triflúor metil) benzil]-8,9,10,11- tetrahidro-9-metil-5-(4-metil fenil)-7H-[1,4] diazocino[2,1-g] [1,7] naftiridino-6-13-diona (TAK-637), 5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis-(triflúor metil) fenil] etoxi-3-(4-flúor fenil)-4- morfolinil] metil]-1,2-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona (MK-869), lanepitante, dapitante ou 3-[[2-metoxi-5-(triflúor metóxi) fenil] meti lamino]-2-fenil piperidina (2S,3S); (xiii) um antagonista muscarínico, por exemplo, oxibutin, tolterodina, propive- rina, cloreto de tropsium ou darifenacina; (xiv)um inibidor de COX-2, por exemplo, celecoxibe, rofecoxibe ou valdeco- xibe; (xv)um inibidor de COX não-seletivo (preferivelmente com proteção Gl), por exemplo, nitroflurbiprofeno (HCT-1026); (xvi)um analgésico de alcatrão de hulha, em particular paracetamol; (xvii)um neuroléptico, tal como droperidol; (xviii)um agonista de receptor de vanilóide (por exemplo, resinferatoxina) ou antagonista (por exemplo, capsazepina); (xix)um beta adrenérgico tal como propranolol; (xx)um anestésico local, tal como mexiletina; (xxi)um corticosteróide, tal como dexametasona; (xxii)um agonista ou antagonista de receptor de serotonina; (xxiii)um analgésico colinérgico (nicotínico); (xxiv)Tramadol (marca registrada); (xxv)um inibidor de PDEV, tal como sildenafil, vardenafil, ou taladafil; (xxvi)um ligante alfa-2-delta tal como gabapentina ou pregabalina; (xxvii)um canabinóide; e (xxviii)um antidepressivo, tal como amitriptilina (Elavil), trazodona (Desyrel), e imipramina (Tofranil) ou anticonvulsivos como fenitoína (Dilantin) ou carbamazepi- na (Tegretol).

[00121] Ainda de acordo com um aspecto da presente invenção é provida uma composição farmacêutica para a prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica ou para melhora, controle, redução de incidência de, ou re-tardando o desenvolvimento ou progresso de dor crônica e/ou sintomas de dor crô-nica em um indivíduo, compreendendo um anticorpo antagonista anti-CGRP e um carreador e/ou excipiente farmaceuticamente aceitável, onde a composição é prepa-rada para ser administrada perifericamente.

[00122] Ainda de acordo com um aspecto da presente invenção é provido um kit compreendendo: (a)uma composição farmacêutica como definida acima; e (b)instruções para a administração periférica de uma quantidade efetiva da dita composição farmacêutica a um indivíduo para a prevenção e/ou tratamento de dor crônica e/ou sintomas de dor crônica ou para melhora, controle, redução de inci-dência de, ou retardo de desenvolvimento ou progressão de dor crônica e/ou sinto-mas de dor crônica.

[00123] O kit pode incluir um ou mais recipientes contendo um anticorpo an-tagonista anti-CGRP ou polipeptídeo aqui descrito e instruções para uso de acordo com qualquer um dos processos e usos da invenção. O kit ainda pode compreender uma descrição de seleção de um indivíduo apropriado para tratamento baseado em identificação de se aquele indivíduo tem dor crônica ou está em risco de ter dor crô-nica. As instruções para a administração periférica da composição farmacêutica po-dem incluir informação para dosagem, esquema de dosagem e rotas de administra-ção para o tratamento pretendido.

[00124] Características preferidas de cada aspecto da invenção são aplicadas igualmente a cada outro aspecto mutatis mutandis.

Exemplos

[00125] A presente invenção é agora descrita com referência aos exemplos que se seguem, os quais são pretendidos ilustrarem mas não limitarem a invenção.

[00126] Os exemplos e figuras que se seguem são feitos com referência a anticorpo G1, um anticorpo monoclonal humano CGRP anti-humano; e a anticorpo G2, um anticorpo monoclonal de camundongo CGRP anti-rato (Wong HC et al. Hybridoma 12:93-106 (1993)). Exemplo 1:Estabelecimento do modelo de dor mecanístico de câncer de ro-edor

[00127] Células de tumor usadas são células de carcinoma de glândula ma-mária de rato MRMT-1 singenéicas doadas do Novartis Institute (London). As células são cultivadas em RPMI 1640 (Gibco) com soro bovino fetal 10% (FCS), L-glutamina 1%, penicilina / streptomicina 2% (Gibco). Duas breves lavagens são realizadas com tripsina 0,1% peso / volume para liberar aquelas células que aderem ao frasco, e então rapidamente resfriadas com um igual volume de FCS 10%, seguido por centri-fugação da solução por 3 minutos em 1200 rpm. A pelota é lavada e re-suspensa em meio Hanks, e a concentração de células calculada usando um Hemocitômetro, com manchamento de azul trypan para determinar o número de células MRMT-1 mortas. A concentração final de 3x103 células foi então obtida através de diluição de solução de acordo com o número de células vistas. A solução final foi mantida sobre gelo até o momento de injeção.

[00128] Ratos Sprague-Dawley machos pesando perto de 170 g no momento de cirurgia foram usados para gerar o modelo de câncer. Anestesia foi induzida nos ratos usando halotano ou isoflurano (1,5-2%), 66% N2O e 33% O2, a perna foi ras-pada sobre a área apropriada e desinfetada com clorexidina (Animalcare Ltd, UK.). Uma pequena incisão de modo a expor a superfície anterior - medial da extremidade distai da tíbia foi feita. Um orifício foi perfurado no periósteo usando uma broca dental de 0,7 mm, através do qual uma tubulação de politeno de 2 cm foi alimentada 1 cm na cavidade intramedular da tíbia. Usando uma seringa Hamilton os 10 pL pré- preparados de 3x103 células MRMT-1 foram injetados através da tubulação na cavi-dade. A tubulação foi então removida e o orifício tampado usando material restaura-dor de osso (IRM, Dentsply, USA). O ferimento foi então irrigado com solução salina 0,9% e fechado com um grampo de metal. Os animais falsos foram operados usan- do o mesmo procedimento mas injetados com 10 pL de solução de Hank sozinha. Os animais foram colocados em uma caixa de recuperação termo-regulada até o momento em que foram capazes de serem colocados de volta em suas gaiolas de alojamento. Exemplo 2:Avaliação de anticorpo anti-CGRP de roedor G2 no modelo de dor de câncer

[00129] Testes de comportamento na direção de estímulos mecânicos usam filamentos von Frey (North Coast Medical Inc., USA) para a superfície planar de am-bas, pata traseira ipsilateral e contralateral. Os ratos foram colocados em um cubículo Perspex com um piso de tela e deixados em aclimatação por 10 minutos. Cada von Frey foi aplicado 10 vezes a cada pata traseira alternando entre a ipsilateral e contralateral, para duração de 2-3 segundos cada vez. Filamentos von Frey usados têm forças de curvatura de 1, 5, 9 e 15 g, e um período de 5 minutos foi deixado entre ascensão de forças von Frey. Uma resposta nocifensiva (um levantamento) é definida como uma retirada vigorosa da pata traseira e o número de levantamentos para cada pata em cada von Frey são anotados (máximo de 10) e expressos como uma porcentagem de resposta.

[00130] Uma avaliação da eficácia do anticorpo anti-CGRP de roedor G2 em atenuação de hiper-sensitividade para uma ampla variedade de estímulos mecânicos estáticos, de resfriamento e integrados foi realizada assim como os comportamentos de dor basal de fundo neste modelo validado de dor de osso induzida por câncer. As respostas medidas são atenuadas através de tratamentos analgésicos padrões tais como morfina e gabapentina. Todas as medidas foram feitas pelo mesmo cientista em uma maneira cega - cegado para a identidade do composto / controle e para o tratamento do animal.

[00131] G2 foi dado IV em 10 mg/kg no dia 9 e ratos foram testados em 2 horas e então em dias 10, 11, 12 e então 14-18 dias após tratamento (Figura 1).

[00132] G2 teve marcado efeito sobre as respostas comportamentais para os estímulos mecânicos de maior intensidade. Freqüências de retirada para von Frey de 8 g foram reduzidas duas horas após injeção e foram significantemente reduzidas sobre aquela vista no grupo tratado com veículo nos dias 11 e 12 (dias 2 3 após in-jeção, p = 0,0164 e 0,0311, respectivamente). De fato, os animais tratados com G2 agora tiveram escores de dor semelhantes aos valores de linha base. No dia 14(dia 5 após injeção de G2) não houve diferença discernível entre os grupos tratados com veículo e G2. Ambos os grupos atingiram um nível similar de hiper-sensitividade para von Frey 8 g no dia 18 após injeção de MRMT-1 (dia9 após tratamento).

[00133] Uma similar reversão em hiper-sensitividade para von Frey 15 g tam-bém foi aparente. Uma redução em hiper-sensitividade para von Frey 15 g a partir de grupo tratado com veículo foi evidente em 2 horas após injeção com significância vista em 2 e 3 dias após administração de droga (p = 0,02 e 0,03, respectivamente). As reduções foram perdidas por 6 dias após administração de G2 e ambos grupos agora atingiram freqüências de retirada máxima similares em 18 dias após injeção de MRMT-1 (Figura 2).

[00134] Os resultados indicam que G2 reduz dor nociva experimentada no modelo de rato de câncer de osso metastático. Exemplo 3:Teste de bastão Rota para prejuízo motor

[00135] Ainda um ponto final no modelo de dor de câncer de osso foi capaci-dade de caminhar (por rotarod). O teste é para obter uma medição de prejuízo loco-motor comparando animais controles com tratados com anticorpo, cada um submetido ao mesmo teste sob as mesmas condições. O teste de bastão rota consiste em 4 tambores rotatórios divididos por flanges com um tambor acionado por motor acele-rado (Ugo Basile, Comerio, VA, laly). Para um dado experimento, um rato é colocado sobre o bastão rotatório e a velocidade de rotação é acelerada de 4 a 16 rpm em 12 minutos. O tempo de performance máxima é tipicamente fixado em 120 segun- dos. Cada animal genericamente recebe três experimentos por dia, em intervalos de 1 hora, por vários dias consecutivos após cirurgia. A latência para cair do bastão é representada como média dos três experimentos. Nenhuma diferença foi verificada entre o grupo de anticorpo G2 e o grupo de veículo na latência para cair do bastão rotatório durante caminhada forçada (Figura 3). Isto sugere que G2 não prejudica caminhos envolvidos em coordenação motora, ou atenção e aponta para uma falta de efeitos colaterais em CNS produzidos pelo anticorpo. Exemplo 4:Ensaio de ligação

[00136] O ensaio de ligação foi realizado para medir a ICso de anticorpo anti- CGRP G1 e G2 no bloqueio de alfa-CGRP humano ligando ao receptor-CGRP1 em células SK-N-MC. Curvas de dose resposta foram plotadas e valores Ki foram de-terminados usando a equação: Ki = ICso/(1 +([ligante]/Ko); Figura 4, onde a constante de dissociação de equilíbrio KD = 8 pM para alfa-CGRP humano para receptor CGRP1 como presente em células SK-N-MC. O valor ICso reportado (em termos de moléculas IgG) foi convertido para sítios ligantes de modo que ele possa ser comparado com as afinidades (KD) determinadas por Biacore, usando alfa-CGRPs de rato e humano N-biotinilados foram capturados sobre células de fluxo individuais em baixos níveis (tipicamente 100 unidades de resposta) para prover as superfícies de reação, enquanto uma célula de fluxo não-modificado serviu como um canal de referência. G1 foi titulado sobre a superfície de chip, afinidades de ligação foram deduzidas do quociente das constantes de taxa cinética (KD = koff/kon) ver tabela 1.

Tabela 2

[00137] Afinidade de ligação de G1 para alfa e beta CGRP humano foi equi-valente (Kd = 0,155 e 0,152 nM, respectivamente). Afinidade de ligação de G2 para alfa e beta CGRP de rato foi equivalente (16 e 17 nM, respectivamente). Adicional-mente afinidade de ligação de G1 é 40 vezes mais potente em humano que rato para alfa-CGRP (Kd = 0,042 e 1,22 nM, respectivamente) e equi-potente em humano e rato para beta-CGRP (Kd = 0,155 e 0,152 nM, respectivamente). Anticorpo G1 tam-bém demonstrou boa seletividade de espécies cruzadas e liga alfa-CGRP de rato com a mesma afinidade como anticorpo G2 (ao redor de 1,2 nM) Tabela 2.

[00138] G1 liga alfa e beta-CGRP de humano e macaco cynomolgus com alta afinidade (KD = 63 e 155 pM, respectivamente). G1 mostra seletividade de espécies para CGRP humano / cyno e liga alfa- e beta-CGRP de outras espécies, por exemplo, rato com menor afinidade (KD = 2,57 nM e 152 pM, respectivamente). Exemplo 5:Meia-vida de anti-CGRP in vivo

[00139] Medições em soro de anti-CGRP em rato, Figura 5, indicam que a meia-vida é da ordem de 7 dias. O anticorpo é restrito perifericamente tendo um peso molecular de ao redor de 150 000, Figuras 5a, 5b, isto é, ele não cruza no sistema nervoso central ou cruza a barreira de sangue cérebro. Exemplo 6:Seletividade de anticorpo anti-CGRP

[00140] Nós determinamos a especificidade de anticorpo G1 para CGRP hu-mano ou de rato através de uso de chip Biacore para “sondar” a concentração livre de um complexo pré-misturado de mAb + peptídeo. Como esperado quando nós pré- incubamos anticorpo G1 com CGRP humano ou de rato a resposta foi inteiramente bloqueada. Em contraste, pré-incubação de G1, com um excesso de amilina, calci- tonina ou adrenomedulina foi comparável à resposta controle (G1 plus tampão) de-monstrando que G1 não forma um complexo com estes peptídeos (Figura 7). Exemplo 7:Identificação de epítopo de ligação de anticorpo G1

[00141] Análise de interação foi conduzida a 25°C sobre um sistema Biacore 3000 equipado com chips sensores revestidos com streptavidina (AS) (Biacore AB, Uppsala, Sweden) usando um tampão de corrida Biacore padrão (HBS-P). Primeiro nós confirmamos que um fragmento de alfa-CGRP humano 25-37 N-biotinilado ligou com a mesma afinidade a anticorpo G1, como alfa-CGRP humano N-biotinilado de inteiro comprimento. Cada aminoácido entre posição 27-37 foi então submetido a mutação individualmente para alanina e expressou as vezes de perda em afinidade comparado ao fragmento tipo selvagem. Fragmentos N-biotinilados foram capturados sobre células de fluxo individuais em baixos níveis (tipicamente 100 unidades de resposta) para prover as superfícies de reação, enquanto uma célula de fluxo não- modificada serviu como um canal referência. Fragmentos Fab purificados de anti-corpo G1 foram gerados. Fragmentos Fab foram titulados sobre o chip usando 1 pM como a concentração superior de uma série de diluição de duas-vezes. Fases de associação e dissociação foram monitoradas em 100 pL / minuto por 1 minuto e 5 minutos, respectivamente. Superfícies foram regeneradas com uma mistura de 35% etanol + 25 mM NaOH + 0,5 M NaCI.

[00142] Os resultados de exploração de alanina mostram que anticorpo G1 liga-se à região terminal-C de alfa-CGRP humano, particularmente resíduos 25 a 37, e mostra ligação específica para uma região (isto é, perda de afinidade é acentua- damente aumentada quando a região de ligação específica sofre mutação) que pode ser definida como o epítopo e que está dentro de últimos 5 aminoácidos de terminal- C, isto é, de G33A a F37A. Mudanças mais profundas em afinidade são causadas através de mutação G33A e F37A (Figura 6). Phe terminal-C é importante para sele-tividade de anticorpo G1 para CGRP vs peptídeos relacionados e membros de família de gene (Figura 8).

[00143] Assim, em uma realização, a presente invenção provê um anticorpo antagonista anti-CGRP que se liga especificamente a um epítopo definido por ami-noácidos G33 a F37 de CGRP. O anticorpo antagonista anti-CGRPpode ligar-se es-pecificamente ao epítopo definido pela sequência de aminoácidos GSKAF, mais es-pecificamente ao epítopo de CGRP é definido como GXXXF onde X pode ser qual-quer aminoácido, o G33 e F37 sendo os resíduos mais importantes do epítopo para definição de ligação de alta afinidade do anticorpo antagonista anti-CGRP. Exemplo 8:Análises de indicadores de dependência física ou psicológica

[00144] Nem anticorpo G1 nem anticorpo G2 demonstram penetração em CNS. Adicionalmente, observação de longo termo de animais (ratos) dosados com qualquer anticorpo para níveis usados nos exemplos anteriores não revela eventos de CNS adversos tais como sedação ou estimulação / comportamento eufórico em comparação a animais controles. Estas observações indicam uma ausência de risco de dependência para os anticorpos e portanto uma segurança significantemente aperfeiçoada dos anticorpos sobre correntes opiatos usados em correntes terapias de dor. Exemplo 9:Análises de indicadores de efeitos adversos gastrointestinais

[00145] Um estudo em rato in vivo de 1 mês com anticorpo G2 e estudo comparativo de 1 semana com anticorpo G1 demonstraram que nenhum efeito ad-verso gastrointestinal foi observado sobre comportamento, tomada de alimento, pro-dução de fezes, ou histopatologia em comparação a animais controles. Estas obser-vações indicam uma ausência de risco gastrointestinal para os anticorpos e portanto uma segurança significantemente aperfeiçoada dos anticorpos sobre NSAIDs cor-rentes usadas em atuais terapias de dor. Exemplo 10:G1 e G2 como anticorpos antagonistas de anti-CGRP

[00146] Uma consequência conhecida de atividade biológica de CGRP é a geração de rubor neurogênico quando liberado in vivo. G1 e G2 são demonstrados serem anticorpos antagonistas de anti-CGRP em que eles previnem o desenvolvi-mento de rubor neurogênico in vivo.

[00147] Usando um modelo rato de rubor de pele neurogênico a eficácia de G1 foi testada para sua habilidade para bloquear efeito de CGRP in vivo. O nervo safenoso no rato é estimulado eletricamente causando liberação de CGRP de ex-tremidades de nervos e conduzindo a vasodilatação, as resultantes alterações em fluxo de sangue podem ser medidas usando processo de Doppler de laser.

[00148] Mudanças em parâmetros de fluxo de sangue foram expressas como a área sob a curva (AUC, mudança em unidade de fluxo Dopplerarbitrárias multipli-cadas por tempo). Antagonista de receptor de CGRP CGRPs-37 (400 nmoles/kg, i.v.) foi usado como um controle positivo para validar a especificidade do modelo (dados não mostrados). Para determinar o efeito de G1 antes de dosagem para cada animal, a resposta de fluxo de sangue de linha base para estimulação foi estabelecida com duas estimulações de nervo safenoso cada uma separada por 30 minutos. Ratos foram tratados com G1 após a resposta de fluxo de sangue da segunda estimulação ter retomado para níveis de linha base (aproximadamente 10 minutos após estimulação) e quatro adicionais estimulações em intervalos de 30 minutos foram realizadas.

[00149] Resultados (Figura 9) demonstraram que em animais tratados com veículo não houve nenhuma significante mudança em resposta de fluxo de sangue mas ratos tratados com G1 mostraram uma significante diminuição em resposta de fluxo de sangue partindo em 90 e 120 minutos após dose para 10 mg/kg e 1 mg/kg, respectivamente. Atividade similar foi obtida usando D2. Adicionalmente ainda em testes modelos de vasodilatação e rubor neurogênico, G1 mostrou marcado efeito em 7 dias após dosagem IV (prevista EDso = 6 ug/mL em modelo de estimulação de nervo safenoso). As conclusões a partir dos testes feitos é que G1 e G2 demonstram atividade antagonista anti-CGRP. Similar habilidade de bloqueio de função de CGRP para os anticorpos é também mostrada na publicação Zeller J, et al. Br J Pharmacol. 2008 Dec; 155(7): 1093-103. Epub 2008 Sep 8.

[00150] São dadas abaixo sequências de anticorpos úteis para prática de presente invenção. Sequências de Anticorpos Sequência de aminoácidos de região variável de cadeia pesada de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 1) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWISWVRQAPGKGLEWVAEIRSESDA SATHYAEAVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCLAYFDYGLAIQNYWGQG TLVTVSS Sequência de aminoácidos de região variável de cadeia leve de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 2) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKASKRVTTYVSWYQQKPGQAPRLLIYGASNRYLGIP ARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCSQSYNYPYTFGQGTKLEIK CDR H1 de anticorpo G1 (CDR estendida) (SEQ ID NO: 3) GFTFSNYWIS CDR H2 de anticorpo G1 (CDR estendida) (SEQ ID NO: 4) EIRSESDASATHYAEAVKG CDR H3 de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 5) YFDYGLAIQNY CDR L1 de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 6) KASKRVTTYVS GASNRYL CDR L3 de anti∞rpo G1 (SEQ ID NO: 8) SQSYNYPYT Sequência de nucleotídeos de região variável de cadeia pesada de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 9) GAAGTTCAGCTGGTTGAATCCGGTGGTGGTCTGGTTCAGCCAGGTGGTTCCCTGC GTCTGTCCTGCGCTGCTTCCGGTTTCACCTTCTCCAACTACTGGATCTCCTGGGTT CGTCAGGCTCCTGGTAAAGGTCTGGAATGGGTTGCTGAAATCCGTTCCGAATCCG ACGCGTCCGCTACCCATTACGCTGAAGCTGTTAAAGGTCGTTTCACCATCTCCCGT GACAACGCTAAGAACTCCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGTGCTGAAGACA CCGCTGTTTACTACTGCCTGGCTTACTTTGACTACGGTCTGGCTATCCAGAACTAC TGGGGTCAGGGTACCCTGGTTACCGTTTCCTCC Sequência de nucleotídeos de região variável de cadeia leve de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 10) GAAATCGTTCTGACCCAGTCCCCGGCTACCCTGTCCCTGTCCCCAGGTGAACGTGCT ACCCTGTCCTGCAAAGCTTCCAAACGGGTTACCACCTACGTTTCCTGGTACCAGCAGA AACCCGGTCAGGCTCCTCGTCTGCTGATCTACGGTGCTTCCAACCGTTACCTCGGTAT CCCAGCTCGTTTCTCCGGTTCCGGTTCCGGTACCGACTTCACCCTGACCATCTCCTCC CTGGAACCCGAAGACTTCGCTGTTTACTACTGCAGTCAGTCCTACAACTACCCCTACA CCTTCGGTCAGGGTACCAAACTGGAAATCAAA Sequência de aminoácidos de anticorpo inteiro de cadeia pesada de anticor po G1 (incluindo lgG2 modificada como aqui descrito) (SEQ ID NO: 11) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWISWVRQAPGKGLEWVAEIRSESDA SATHYAEAVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCLAYFDYGLAIQNYWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVH TFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPC PAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAK TKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKTKGQPREP QVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGS FFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK Sequência de aminoácidos de anticorpo inteiro de cadeia leve de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 12) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKASKRVTTYVSWYQQKPGQAPRLLIYGASNRYLGIP ARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCSQSYNYPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIF PPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYS LSSTLTLS KADYE KH KVYACEVTHQG LSSPVTKS FN RG EC Sequência de nucleotídeos de anticorpo inteiro de cadeia pesada de anticorpo G1 (incluindo lgG2 modificada como aqui descrito) (SEQ ID NO: 13) GAAGTTCAGCTGGTTGAATCCGGTGGTGGTCTGGTTCAGCCAGGTGGTTCCCTGC GTCTGTCCTGCGCTGCTTCCGGTTTCACCTTCTCCAACTACTGGATCTCCTGGGTT CGTCAGGCTCCTGGTAAAGGTCTGGAATGGGTTGCTGAAATCCGTTCCGAATCCG ACGCGTCCGCTACCCATTACGCTGAAGCTGTTAAAGGTCGTTTCACCATCTCCCGT GACAACGCTAAGAACTCCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGTGCTGAAGACA CCGCTGTTTACTACTGCCTGGCTTACTTTGACTACGGTCTGGCTATCCAGAACTAC TGGGGTCAGGGTACCCTGGTTACCGTTTCCTCCGCCTCCACCAAGGGCCCATCTG TCTTCCCACTGGCCCCATGCTCCCGCAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGG GCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCAGAACCTGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGG CGCTCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCAGCTGTCCTGCAGTCCTCAGGTCTC TACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCATCCAGCAACTTCGGCACCCAGACCT ACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCAAGCAACACCAAGGTCGACAAGACCGTGGA GAGAAAGTGTTGTGTGGAGTGTCCACCTTGTCCAGCCCCTCCAGTGGCCGGACCA TCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCAAAGGACACCCTGATGATCTCCAGAACCCC AGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCACGAGGACCCAGAGGTGCAGTT CAACTGGTATGTGGACGGAGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCAAGAGA GGAGCAGTTCAACTCCACCTTCAGAGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGGTGCACCAG GACTGGCTGAACGGAAAGGAGTATAAGTGTAAGGTGTCCAACAAGGGACTGCCAT CCAGCATCGAGAAGACCATCTCCAAGACCAAGGGACAGCCAAGAGAGCCACAGGT GTATACCCTGCCCCCATCCAGAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACC TGTCTGGTGAAGGGATTCTATCCATCCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACG GACAGCCAGAGAACAACTATAAGACCACCCCTCCAATGCTGGACTCCGACGGATC CTTCTTCCTGTATTCCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGCAGGGAAAC GTGTTCTCTTGTTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTATACCCAGAAGAG CCTGTCCCTGTCTCCAGGAAAGTAA Sequências de nucleotídeos de anticorpo inteiro de cadeia leve de anticorpo G1 (SEQ ID NO: 14) GAAATCGTTCTGACCCAGTCCCCGGCTACCCTGTCCCTGTCCCCAGGTGAACGTG CTACCCTGTCCTGCAAAGCTTCCAAACGGGTTACCACCTACGTTTCCTGGTACCAG CAGAAACCCGGTCAGGCTCCTCGTCTGCTGATCTACGGTGCTTCCAACCGTTACC TCGGTATCCCAGCTCGTTTCTCCGGTTCCGGTTCCGGTACCGACTTCACCCTGAC CATCTCCTCCCTGGAACCCGAAGACTTCGCTGTTTACTACTGCAGTCAGTCCTACA ACTACCCCTACACCTTCGGTCAGGGTACCAAACTGGAAATCAAACGCACTGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCTCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCCGGAACTGC CTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCGCGCGAGGCCAAAGTACAGTGGA AGGTGGATAACGCCCTCCAATCCGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGA CAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAAGCAGAC TACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGTTCTC CAGTCACAAAGAGCTTCAACCGCGGTGAGTGCTAA

[00151] Comparação de sequência de aminoácidos de CGRP humano e rato (alfa-CGRP humano (SEQ ID NO: 15); beta-CGRP humano (SEQ ID NO: 16); alfa- CGRP rato (SEQ ID NO: 17); e beta-CGRP rato (SEQ ID NO: 18)): NH2-AC|TATCVTHRLAGLLSRSGGWK|NFVPTNVGSKAF-CONH2 (SEQ ID NO:15) NH2-ACNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTNVGSKAF-CONH2 (SEQ ID NO:16) NH2-SCNTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKDNFVPTNVGSEAF-CONH2 (SEQ ID NO:17) NH2-SCNTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKDNFVPTNVGSKAF-CONH2 (SEQ ID NO:18) Sequência de aminoácidos de região variável de cadeia pesada de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 19) EVQLQQSGPELVKPGASVKMSCKASGYTFTSSVMHWVKQKPGQGLEWIGYINPYND GTKYNEKFKGKATLTSDKSSSTAYMELSSLTSEDSAVYYCAKGGNDGYWGQGTTLTV SS Sequência de aminoácidos de região variável de cadeia leve de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 20) EIVLTQSPTTMAASPGEKITITCSASSSISSIYLHWYQQKPGFSPKVLIYRASNLASGVPA RFSGSGSGTSYSLTIGTMEAEDVATYYCQQGSTIPFTFGSGTKLEIK CDR H1 de anticorpo G2 (CDR estendida) (SEQ ID NO: 21) SSVMH CDR H2 de anticorpo G2 (CDR estendida) (SEQ ID NO: 22) YINPYNDGTKYNEKFKG GGNDGY CDR L1 de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 24) SASSSISSIYLH CDR L2 de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 25) RASNLAS CDR L3 de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 26) QQGSTIPFT Sequência de nucleotídeos de região variável de cadeia pesada de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 27) GAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTAAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAG ATGTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTAGCTCTGTTATGCACTGGGTGAAGC AGAAGCCTGGGCAGGGCCTTGAGTGGATTGGATATATTAATCCTTACAATGATGGTAC TAAGTACAATGAGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGACTTCAGACAAATCCTCCAGC ACAGCCTACATGGAACTCAGCAGCCTGACCTCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTG CAAAAGGGGGTAACGATGGCTACTGGGGCCAAGGCACTACTCTCACAGTCTCCTCA Sequência de nucleotídeos de região variável de cadeia leve de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 28) GAAATTGTGCTCACCCAGTCTCCAACCACCATGGCTGCATCTCCCGGGGAGAAGATC ACTATCACCTGTAGTGCCAGCTCAAGTATAAGTTCCATTTACTTGCATTGGTATCAGCA GAAGCCAGGATTCTCCCCTAAAGTCTTGATTTATAGGGCATCCAATCTGGCTTCTGGA GTCCCAGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACCTCTTACTCTCTCACAATTGGCA CCATGGAGGCTGAAGATGTTGCCACTTACTACTGCCAGCAGGGTAGTACTATACCATT CACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAAA Sequência de aminoácidos de anticorpo inteiro de cadeia pesada de anticorpo G2 (não incluindo domínio Fc) (SEQ ID NO: 29) EVQLQQSGPELVKPGASVKMSCKASGYTFTSSVMHWVKQKPGQGLEWIGYINPYNDGT KYN EKFKG KATLTSDKSSSTAYM ELSS LTS E DSAVYYCAKGG N DG YWGQGTTLTVSSAK TTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLY TLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRD Sequência de aminoácidos de anticorpo inteiro de cadeia leve de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 30) EIVLTQSPTTMAASPGEKITITCSASSSISSIYLHWYQQKPGFSPKVLIYRASNLASGVPARF SGSGSGTSYSLTIGTMEAEDVATYYCQQGSTIPFTFGSGTKLEIKRADAAPTVSIFPPSSEQ LTSGGASVVCFLNNFYPRDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKD EYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC Sequência de nucleotídeos de anticorpo inteiro de cadeia pesada de anticorpo G2 (não incluindo domínio Fc) (SEQ ID NO: 31) GAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTAAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAG ATGTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTAGCTCTGTTATGCACTGGGTGAAGC AGAAGCCTGGGCAGGGCCTTGAGTGGATTGGATATATTAATCCTTACAATGATGGTAC TAAGTACAATGAGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGACTTCAGACAAATCCTCCAGC ACAGCCTACATGGAACTCAGCAGCCTGACCTCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTG CAAAAGGGGGTAACGATGGCTACTGGGGCCAAGGCACTACTCTCACAGTCTCCTCAG CCAAAACGACACCCCCATCTGTCTATCCACTGGCCCCTGGATCTGCTGCCCAAACTAA CTCCATGGTGACCCTGGGATGCCTGGTCAAGGGCTATTTCCCTGAGCCAGTGACAGT GACCTGGAACTCTGGATCCCTGTCCAGCGGTGTGCACACCTTCCCAGCTGTCCTGCA GTCTGACCTCTACACTCTGAGCAGCTCAGTGACTGTCCCCTCCAGCACCTGGCCCAG CGAGACCGTCACCTGCAACGTTGCCCACCCGGCCAGCAGCACCAAGGTGGACAAGA AAATTGTGCCCAGGGAT Sequência de nucleotídeos de anticorpo inteiro de cadeia leve de anticorpo G2 (SEQ ID NO: 32) GAAATTGTGCTCACCCAGTCTCCAACCACCATGGCTGCATCTCCCGGGGAGAAGA TCACTATCACCTGTAGTGCCAGCTCAAGTATAAGTTCCATTTACTTGCATTGGTATC AGCAGAAGCCAGGATTCTCCCCTAAAGTCTTGATTTATAGGGCATCCAATCTGGCT TCTGGAGTCCCAGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACCTCTTACTCTCTCA CAATTGGCACCATGGAGGCTGAAGATGTTGCCACTTACTACTGCCAGCAGGGTAG TACTATACCATTCACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAAACGGGCTGATG CTGCACCAACTGTATCCATCTTCCCACCATCCAGTGAGCAGTTAACATCTGGAGGT GCCTCAGTCGTGTGCTTCTTGAACAACTTCTACCCCAGAGACATCAATGTCAAGTG GAAGATTGATGGCAGTGAACGACAAAATGGTGTCCTGAACAGTTGGACTGATCAG GACAGCAAAGACAGCACCTACAGCATGAGCAGCACCCTCACATTGACCAAGGACG AGTATGAACGACATAACAGCTATACCTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCA CCCATCGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGTTAA

Claims (17)

1. Uso de um anticorpo antagonista anti-CGRP, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de dor de câncer crônica, em que a dor de câncer crônica é devido a uma ou mais das seguintes condições: adenocarcinoma em tecido glandular, blastoma em tecido embriônico de órgãos, carcinoma em tecido epitelial, leucemia em tecidos que formam células de sangue, linfoma em tecido linfático, mieloma em medula óssea, sarcoma em tecido conjuntivo ou de suporte, câncer adrenal, linfoma relacionado com AIDS, câncer de bexiga, câncer de osso, câncer de mama, tumores carcinóides, câncer cervical, câncer de cólon, câncer endometrial, câncer de esôfago, câncer gástrico, câncer de pescoço, câncer hepatobiliar, câncer de rim, leucemia, câncer de fígado, câncer de pulmão, linfoma (doença de Hodgkin), linfoma (não-Hodgkin), câncer oral, câncer de ovário, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer retal, câncer de pele, câncer de estômago, câncer de testículo, câncer de tireoide, câncer de uretra, câncer de tecido ósseo, câncer de células formadoras de sangue, câncer de medula óssea, mieloma múltiplo, câncer ósseo primário ou secundário, tumores que sofrem metástase para os ossos e tumores infiltrando o nervo e víscera oca, e em que o anticorpo antagonista anti-CGRP compreende as seguintes regiões determinantes de complementariedade (CDRs): (a) CDR H1 como apresentada na SEQ ID NO: 3; (b) CDR H2 como apresentada na SEQ ID NO: 4; (c) CDR H3 como apresentada na SEQ ID NO: 5; (d) CDR L1 como apresentada na SEQ ID NO: 6; (e) CDR L2 como apresentada na SEQ ID NO: 7; e (f) CDR L3 como apresentada na SEQ ID NO: 8.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo antagonista anti-CGRP atua perifericamente na administração.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que a dor de câncer crônica compreende uma ou mais de dor nociceptiva crônica, dor neuropática crônica, dor inflamatória crônica, fibromialgia, avanço de dor e dor persistente.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que a dor de câncer crônica ainda compreende uma ou mais de hiperalgesia, alodi- nia, sensibilização central, sensibilização periférica, desinibição e facilitação aumentada.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a dor de câncer crônica é devido à câncer ósseo.

6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo antagonista anti-CGRP: (a) se liga a CGRP; (b) bloqueia ligação de CGRP ao seu receptor; (c) bloqueia ou diminui ativação de receptor de CGRP; (d) inibe bloqueios, supressões ou reduz atividade biológica de CGRP; (e) aumenta depuração de CGRP; e/ou (f) inibe síntese, produção ou liberação de CGRP.

7. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo antagonista anti-CGRP: (i) é um anticorpo humano; (ii) é um anticorpo humanizado; (iii) é um anticorpo monoclonal; e/ou (iv) tem uma meia-vida in vivo de pelo menos 7 dias.

8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo antagonista anti-CGRP se liga es-pecificamente à região C-terminal de CGRP.

9. Uso, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo antagonista anti-CGRP reconhece especificamente o epítopo definido pela sequência GSKAF.

10. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende um domínio VH que é idêntico em sequência de aminoácidos à SEQ ID NO: 1.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende um domínio VL que é idêntico em sequência de aminoácidos à SEQ ID NO: 2.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende ainda um domínio VH que é idêntico em sequência de aminoácidos à SEQ ID NO: 1.

13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende um domínio VH que é idêntico em sequência de aminoácidos à SEQ ID NO: 1, e um domínio VL que é idêntico em sequência de aminoácidos à SEQ ID NO: 2.

14. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende uma cadeia pesada produzida pelo vetor de expressão com No. de acesso ATCC PTA-6867.

15. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP compreende uma cadeia leve produzida pelo vetor de expressão com No. de acesso ATCC PTA-6866.

16. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de que o anticorpo anti-CGRP é produzido pelos vetores de expressão com Nos. de acesso ATCC PTA-6867 e PTA-6866.

17. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, CARACTERIZADO pelo fato de que o medicamento não produz comprometimento ao sistema nervoso central (CNS) de coordenação motora ou atenção.

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