TP N°1 : l’Hémolyse
Introduction
Les cellules du sang, les hématies qui forment avec d’autres cellules un tissu visqueux
important pour les êtres vivants, dans des conditions expérimentales comme l’hémolyse,
s’éclatent due à l’entrée d’eau dans la cellule en détruisant les liaisons hémoglobines
protéines. C’est de ça que nous parle ce TP.
1- Matériels utilisés
- 14 tubes à essais
- 14 tubes colorimétriques
- Solution de NaCl à 10‰ en ml
- Solution d’eau distillée en ml
- Sang non coagulé
- Une centrifugeuse
- Matériel de pèse de la densité optique
2- Protocole expérimental
Ce TP a consisté en la mise en évidence du comportement du sang dans différentes
concentrations de NaCl. Nous avons introduit dans 14 tubes à essais différents des
solutions de NaCl diluées avec de l’eau distillée, à différentes concentrations puis nous
avons ajouté une goutte de sang dans chaque tube et centrifugé.
Nous avons observé le comportement du sang dans chaque tube et pesé pour voir sa
densité optique.
Résultats et discussion
1- L’objectif de ce TP est d’étudier le comportement des hématies en présence de
concentrations différentes de NaCl et le comportement des différents phénomènes
osmotiques lors des expériences.
2- Calculons la concentration finale de NaCl dans chaque tube :
𝐶𝑖 𝑉𝑖
𝐶𝐼 𝑉𝑖 = 𝐶𝑓 𝑉𝑓 ⟹ 𝐶𝑓 =
𝑉𝑓
1×9 4,25 × 5,75
𝑇1 = = 0,81 𝑇8 = = 2,22
11 11
2×8 4,5 × 5,5
𝑇2 = = 1,45 𝑇9 = = 2,25
11 11
3×7 5×5
𝑇3 = = 1,90 𝑇10 = = 2,27
11 11
3,25 × 6,75 6×4
𝑇4 = = 1,99 𝑇11 = = 2,18
11 11
3,5 × 6,5 7×3
𝑇5 = = 2,06 𝑇12 = = 1,90
11 11
3,75 × 6,25 8×2
𝑇6 = = 2,13 𝑇13 = = 1,45
11 11
4×6 9 × 11
𝑇7 = = 2,18 𝑇14 = = 0,81
11 11
3- Reproduisons le tableau ci-dessus en complétant avec les valeurs de la
concentration finale :
Concentration
Volume de NaCl Volume d’eau
N° du tube finale de NaCl (en
10‰ (en ml) distillée (en ml)
g/mol)
1 1 9 0,81
2 2 8 1,45
3 3 7 1,90
4 3,25 6,75 1,99
5 3,5 6,5 2,06
6 3,75 6,25 2,13
7 4 6 2,18
8 4,25 5,75 2,22
9 4,5 5,5 2,25
10 5 5 2,27
11 6 4 2,18
12 7 3 1,90
13 8 2 1,45
14 9 1 0,81
4- Explication de la présence du culot ou non et l’aspect du surnageant dans les
différents tubes :
- Du tube T1 à T2 : on a constaté qu’il n’y a pas eu dépôt du culot et le surnageant s’est
coloré en rouge. Cela est dû à l’éclatement total des hématies contenues dans T1 et
T2.
- Dans le tube T3 on constate qu’il y a un surnageant coloré plus un culot de petite
taille : ceci est dû à l’éclatement de certaines hématies et la présence du culot est dû
au fait de la densité des hématies en bas du tube.
- Du tube T4 à T8 on constate qu’il y a un surnageant plus ou moins coloré et un amas
important du culot : ceci est dû à l’éclatement partiel des hématies et un dépôt au
fond du tube en vue de leur densité.
- Du tube T9 à T14 on observe un surnageant clair plus un culot (hématies disposées
en bas du tube). Ce surnageant clair s’explique par le fait que les hématies n’ont pas
été hémolysé (pas d’entrée d’eau dans la cellule) donc aucune hématie éclatée.
5- Je reproduis la courbe :
6- Reproduisons le tableau :
Points d’hémolyse Commençante Moyenne Total
Concentration en
2,13 g/mol 1,90 g/mol 0,81 g/mol
NaCl
Quantité
d’hémoglobine Faible Moyenne Elevé
libérée
Résistance des
Elevé Moyenne Faible
hématies
Quantité des
hématies Faible Moyenne Elevé ou Total
Hémolysés
