High Sensitivity CRP
PCR Ultrasensible
®
For use on the IMMULITE
and IMMULITE® 1000 systems
Dilución de la muestra del paciente:
Todas las muestras deben ser prediluídas
1-en-101 con Diluyente de muestra de
PCR (LCRZ4) por ejemplo añadiendo
10 µl de muestra a 1000 µl de diluyente.
Las muestras con valores superiores a
100 mg/l deben diluirse adicionalmente
utilizando el Diluyente de muestra de PCR
(LCRZ4). Tener en cuenta que los
resultados impresos han sido corregidos
para tener en cuenta la dilución 1-en-101.
La correcion para diluciones adicionales
debe ser calculada de manera manual.
Español
IMMULITE/IMMULITE 1000 PCR
de Ultrasensible
Utilidad del análisis: Para su uso en el
diagnóstico in vitro con los analizadores
IMMULITE e IMMULITE 1000 — para la
cuantificación de la proteína C-reactiva
(PCR) en suero o plasma, como ayuda en
la detección y evaluación de la infección,
daño tisular, desórdenes inflamatorios y
enfermedades asociadas. La medición
puede también ser utilizada como ayuda
en la identificación de los individuos con
riesgo de enfermedad cardiovascular
futura. Las mediciones de PCR de
ultrasensible (hsPCR) cuando son
utilizadas en conjunto con la evaluación
clínica tradicional de laboratorio del
síndrome coronario agudo puede ser útil
como marcado independiente de
acontecimientos recurrentes en pacientes
con enfermedad coronaria estable o
síndrome coronario agudo.
Referencia: LKCRP1 (100 tests)
Código del Test: hsC
Código de Color: Azul oscuro
IMMULITE/IMMULITE 1000 High Sensitivity CRP (PILKCRP-5, 2016-09-27) 13
Resumen y Explicación del acontecimientos coronarios futuros en
9-16
individuos aparentemente sanos .
Test
La proteína-C reactiva (PCR) es una
-globulina de fase aguda con un peso
Principio del análisis
molecular aproximado de 118 000 IMMULITE/IMMULITE 1000 PCR de
Daltons1. La (PCR) está muy conservada, Ultrasensible es un ensayo inmunométrico
se compone de cinco subunidades quimioluminiscente en fase sólida. La fase
globulares cíclicas idénticas y se clasifica sólida (bola) se encuentra recubierta con
como un miembro de la superfamilia de anti-ligando. La fase líquida consiste en
proteínas pentaxinas1,2. ligando marcado con anticuerpo
monoclonal de ratón anti-PCR y fosfatasa
Los niveles de PCR en suero o en plasma alcalina (de intestino de ternera)
podrían elevarse durante la respuesta conjugada con anticuerpo de conejo
general, no específica a una infección y policlonal ant-PCR en solución tampón.
en condiciones inflamatorias no
infecciosas como artritis reumatoide, La muestra del paciente prediluída
enfermedad cardiovascular y manualmente (1-en-101) y el reactivo se
enfermedadad vascular periférica .
3 incuban junto con la bola recubierta
La PCR se sintetiza en el hígado y durante 30 minutos. Durante este tiempo,
normalmente esta presente como la PCR de la muestra forma el complejo
contituyente traza en suero o plasma. sándwich con el antiligando de la bola y el
anticuerpo monoclonal de ratón anti-PCR
Aunque las funciones precisas in vivo de del reactivo. El enzima conjugado con
la (PCR) durante el estado de inflamación anticuerpo policlonal de conejo frente a
no se conocen, existen evidencias PCR entonces se une a la PCR de la
considerables que indican que tiene una muestra inmovilizada. La muestra del
función en el reconocimiento y eliminación paciente y el conjugado enzimático no
de patógenos externos, asistiendo a la unidos son entonces eliminados por
1,4
inmunidad humoral y celular . En lavado y centrifugación. Finalmente, se
individuos normales, las células hepáticas añade el sustrato quimioluminiscente a la
producen (PCR) a niveles constitutivos de unidad de reacción que contiene la bola y
4
menos de 10 mg/L . se genera una señal proporcional a la
De 24 a 48 horas después del daño cantidad de enzima unida.
agudo al tejido, la producción aumenta de Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos
manera espectacular hasta Tiempo hasta el primer resultado:
aproximadamente 1000 veces el nivel 42 minutos
constitutivo. El aumento de concentración
en humanos puede durar varios días
antes de descender a los valores Recogida de la muestra
1,4,5
normales . Se recomienda el uso de una
ultracentrífuga para aclarar las muestras
Como siempre se han asociado valores
lipémicas.
elevados de PCR con cambios
patológicos, el ensayo de PCR Las muestras hemolizadas podrían indicar
proporciona información útil para el una mala manipulación de la muestra
diagnóstico, terapia y monitorización de antes de ser recibida por el laboratorio; en
condiciones inflamatorias y enfermedades este caso, los resultados deben
6-8
asociadas . Está bien establecido que la interpretarse con precaución.
inflamación es un mecanismo patogénico La centrifugacion de las muestras de
clave en la aterosclerosis, la cual lleva a la suero antes de que se forme el coagulo
enfermedad cardiovascular. Los estudios puede ocasionar la presencia de fibrina.
clínicos y epidemiológicos han mostrado Para evitar resultados erroneos debidos a
que la PCR medida mediante ensayos de la presencia de fibrina, asegurarse que se
PCR de alta seensibilidad es el analito de ha formado el coagulo completamente
elección como marcador de inflamación antes de centrifugar las muestras.
en la aterosclerosis. El resultado de Algunas muestras, particularmente
hsPCR tiene utilidad pronóstica en aquellas de pacientes sometidos a terapia
pacientes con syndrome coronario agudo
y es un fuerte predictor independiente de
14 IMMULITE/IMMULITE 1000 High Sensitivity CRP (PILKCRP-5, 2016-09-27)
anticoagulante, pueden requerir mayor que en las muestras no haya
tiempo de coagulacion. estos agentes infecciosos u
otros; por tanto, este material se
Los tubos para recoger sangre de deberá manipular conforme a las
distintos fabricantes pueden producir prácticas recomendables de
valores diferentes, dependiendo del laboratorio y las precauciones
material del tubo y de los aditivos, universales20-22.
incluyendo barreras de gel o barreras
físicas, activadores de la coagulación y/o PRECAUCIÓN: Este dispositivo contiene
anticoagulantes. El IMMULITE/ material de origen animal y debería
IMMULITE 1000 PCR de Ultrasensible no manipularse como potencial portador y
ha sido analizado con todos los distintos transmisor de enfermedades.
tipos de tubos. Para obtener detalles Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desechar
sobre los tipos tubos que se han de acuerdo a la legislación en vigor.
analizado, consulte la sección de Tipos de
Siga las precauciones universales y
Muestras Alternativos.
manipule todos los componentes como si
Volumen requerido: 10 µl muestra fueran capaces de transmitir agentes
prediluida: suero, plasma heparinizado o infecciosos. Los materiales derivados de
EDTA. (El recipiente de la muestre debe sangre humana han sido analizados y son
contener, como mínimo, 100 µl más que negativos para sífilis; para anticuerpos
el volumen total requerido.) frente al HIV 1 y 2; para el antígeno de
Conservación: 3 días a 2–8°C, o superficie de hepatitis B y para los
2 meses a –20°C. anticuerpos de hepatitis C.
Dilución de la muestra del paciente: Se ha usado Azida sódica, en
Todas las muestras deben ser prediluídas concentraciones menores a 0,1 g/dl, como
1-en-101 con Diluyente de muestra de conservante. Para su eliminación, lavar
PCR (LCRZ4) por ejemplo añadiendo con grandes cantidades de agua para
10 µl de muestra a 1000 µl de diluyente. evitar la formación de residuos de azidas
Las muestras con valores superiores a metalicas, potencialmente explosivas, en
100 mg/l deben diluirse adicionalmente las cañerías de cobre y plomo.
utilizando el Diluyente de muestra de PCR Sustrato quimioluminiscente: Evite la
(LCRZ4). Tener en cuenta que los contaminación y exposición a la luz
resultados impresos han sido corregidos directa del sol. (Ver el prospecto.)
para tener en cuenta la dilución 1-en-101.
Agua: Use agua destilada o desionizada.
La correcion para diluciones adicionales
debe ser calculada de manera manual.
Materiales suministrados
Advertencias y precauciones Los componentes representan un juego
completo. Las etiquetas de código de
Para uso diagnóstico in vitro.
barras son necesarias para el ensayo.
¡PRECAUCIÓN! RIESGO
BIOLÓGICO POTENCIAL Unidades de análisis de PCR (LCRP1)
Contiene material de origen Cada unidad etiquetada con código de
humano. Cada donación de
barras contiene una bola recubierta con
sangre humana o componente
sanguíneo ha sido probada por antiligando. Estable a 2–8°C hasta la
métodos aprobados por la FDA fecha de caducidad.
con el fin de detectar la presen- LKCRP1: 100 unidades
cia de anticuerpos de los virus
de inmunodeficiencia humana
Espere a que las bolsas de las unidades
tipo 1 (VIH-1) y tipo 2 (VIH-2), de análisis alcancen la temperatura
así como el antígeno de super- ambiente antes de abrirlas. Ábralas
ficie del virus de la hepatitis B cortando por el extremo superior, dejando
(HBsAg) y el anticuerpo frente al el borde del cierre de cremallera intacto.
virus de la hepatitis C (VHC). Vuelva a cerrar las bolsas
Los resultados de estas pruebas herméticamente para protegerlas de la
fueron negativos (no repetida-
mente reactivos). Ninguna
humedad.
prueba ofrece total garantía de
IMMULITE/IMMULITE 1000 High Sensitivity CRP (PILKCRP-5, 2016-09-27) 15
Vial de reactivo de PCR (LCRP2) Ver el Manual del Operador del
Con código de barras. 7,5 ml de IMMULITE o IMMULITE 1000 para:
anticuerpo monoclonal murino anti-PCR preparación, procesamiento, diluciones,
marcado con ligando y de fosfatasa ajuste, procedimientos de ensayo y
alcalina (de intestino de ternera) control de calidad.
conjugada con anticuerpos policlonales de Inspeccionar visulamente cada unidad de
ratón anti-PCR en solución tampón.
rección para asegurarse de que hay una
Guardar tapado y refrigerado: estable a bola antes de introducirla en el Sistema.
2–8°C hasta la fecha de caducidad. Se
recomienda utilizarlo antes de que pasen Intervalo de ajsute recomendado:
30 días después de abrirlo cuando se 2 semanas
guarda según lo indicado. Muestras de Control de calidad: Use
LKCRP1: 1 vial controles o pools de muestrasro con dos
niveles diferentes, como mínimo, de PCR
Ajustadores de PCR (LCRL, LCRH) (bajo y alto).
Dos viales (bajo y alto) 2 ml cada uno de
PCR en una matriz proteica en solución
tampon, con conservante. Estable a
Valores esperados
2–8°C durante 30 días después de abrise, Los valores esperados de la PCR
o hasta 6 meses (alicuotados) a –20°C. Ultrasensible para individuos sanos han
No prediluya los ajustadores. sido establecidos en la bibliografía como
17
LKCRP1: 1 juego < 3 mg/l .
Un estudio realizado en 100 voluntarios
Diluyente de PCR (LCRZ4) aparentemente sanos dieron una media
Para la dilución manual de las muestras de 1,4 mg/l y un percentil 97.5 de 11 mg/l.
de los pacientes. 100 ml de matriz de 18
El comunicado científico de la AHA/CDC
proteína/tampón libre de PCR, con
relativo a la inflamación y a los
conservante. Estable a 2–8°C durante
marcadores cardiovasculares informa que
30 días después de abrise, o hasta
los valores de hsPCR < 1 mg/l significan
6 meses (alicuotados) a –20°C.
bajo riesgo para enfermedad
LKCRP1: 1 vial
cardiovascular; valores entre 1–3 mg/l son
un riesgo medio en la predicción de
Componentes del kit que se enfermedades cardiovasculares; y valores
suministran por separado > 3 mg/l significan un alto riesgo en la
LSUBX: Sustrato quimioluminiscente predicción de enfermedades
LPWS2: Lavado de sonda cardiovasculares.
LKPM: Kit de limpieza de sonda Los aumentos en los valores de PCR son
LCHx-y: Soportes de recipientes de no-específicos y no deben ser
muestras (con códigos de barras) interpretados sin una historia clínica
LSCP: Recipientes de muestras completa. Ver la sección de limitaciones.
(desechables)
LSCC: Tapas para los recipientes de Estos límites han de considerarse sólo
muestras (opcionales) como una guía. Cada laboratorio deberá
establecer sus propios intervalos de
LCRCM: Controles (PCR) de tres niveles referencia.
También necesarios
Pipettes de transfert à échantillon ; eau Limitaciones
distillée ou désionisée ; Contrôle. Con finalidad diagnóstica, los resultados
de PCR deben ser utilizados en conjunto
Ensayo con otros resultados de pruebas, la
Aviso: para obtener el funcionamiento presentación clínica general al clínico, y
óptimo, es importante realizar todos los toda la información adicional apropiada.
procedimientos del mantenimiento general Cuando se está utilizando para la
según lo definido en el manual del evaluación del riesgo, se deben tener en
operador de IMMULITE o IMMULITE cuenta las siguientes precauciones:
1000.
16 IMMULITE/IMMULITE 1000 High Sensitivity CRP (PILKCRP-5, 2016-09-27)
1 Los aumentos en PCR son no historia médica del paciente y cualquier
específicos y no deberían ser otro dato clínico relevante.
interpretados sin una historia clínica
completa. Características analíticas
2 No se recomienda realizar un cribado Para ver resultados representativos de las
de la población adulta general. cualidades del ensayo, consulte las tablas
3 Las mediciones de PCR no son y los gráficos. Los resultados se expresan
sustitutos de los factores de riesgo en mg/l. (A no ser que se indique lo
cardiovascular tradicionales. contrario, todos los resultados fueron
4 El manejo del síndrome coronario generados en muestras de suero
agudo no debería depender de las recogidas en tubos sin geles o
mediciones de PCR. activadores de la coagulación.)
5 Los pacientes con valores Rango informable: 0,3–100 mg/l
persistentes y no explicados por Estandarizado frente al WHO 1st IS
encima de 10 mg/l deberían ser 85/506 y CRM 470
evaluados para otros orígenes no Sensibilidad analítico: 0,1 mg/l
cardiovasculares.
Functional Sensibilidad: 0,3 mg/l
6 Las pruebas para la evaulación del
riesgo no deberían realizarse mientras Efecto de gancho a altas dosis:
existan indicios de infección, Ninguno hasta 3780 mg/l
inflamación sistémica o trauma. Precision: Las muestras fueron
7 Las mediciones de prevención procesadas en cuadriplicado durante
secundaria deberían basarse en la varios dias, para un total de 20 tandas y
evaluación del riesgo global y no 80 replicados. (Ver la tabla de
dependiente de PCR. "Precision".)
8 Las mediciones seriadas de PCR no Linealidad: las muestras (prediluirse
deben ser utilizadas para monitorizar 1-por-101) fueron analizadas con varias
los efectos del tratamiento. diluciones. (Véase la tabla "Linearity" para
resultados representativos.)
9 La media de los resultados de PCR
repetidos de manera ideal en dos Recuperación: Se han analizado las
semanas, deben ser utilizadas en la muestras cargadas 1 a 19 con dos
evaluación del riesgo en pacientes soluciones de PCR (600, y 1200 mg/l).
metabolicamente estables. (Ver la tabla "Recovery" para resultados
Los anticuerpos heterofílicos en el suero representativos).
humano pueden reaccionar con las Especificidad: El anticuerpo es altamente
inmunoglobulinas de los componentes del específico para CRP. (Véase la tabla
ensayo provocando interferencias con los "Especificidad".)
inmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,
Bilirrubina: La presencia de bilirrubina,
Stuart MC. Heterophilic antibodies: a
en concentraciones hasta 200 mg/l, no
problem for all immunoassays. Clin Chem
tienen ningún efecto sobre los resultados
1988:34:27-33.] Las muestras de los
en términos de precisión.
pacientes que frecuentemente están
expuestos a animales o a productos Hemólisis: La presencia de hemoglobina,
séricos animales pueden presentar este en concentraciones hasta 570 mg/dl, no
tipo de interferencia que potencialmente tienen ningún efecto sobre los resultados
ocasione un resultado anómalo. Estos en términos de precisión.
reactivos han sido formulados para Lipemia: La presencia de triglicéridos en
minimizar el riesgo de interferencia, no concentraciones hasta 3000 mg/dl no
obstante, pueden darse interacciones tiene efecto alguno en los resultados, en
anómalas entre sueros conflictivos y los lo correspondiente a la precisión del
componentes del ensayo. Con fines de ensayo.
diagnóstico, los resultados obtenidos con
este ensayo siempre deben ser usados en
combinación con el examen clínico, la
IMMULITE/IMMULITE 1000 High Sensitivity CRP (PILKCRP-5, 2016-09-27) 17
