Prueba Rápida OnSite HBsAg Combo (Suero / Plasma / Sangre Total) Página 1 de 2

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES

Para uso de Diagnóstico in Vitro

Catálogo Número R0042C 1. Este inserto debe ser leído completamente antes de la realización de la prueba. Si no
se sigue el inserto se pueden generar resultados erróneos.
2. No abra el empaque sellado hasta que no se vaya a realizar la prueba.
3. No use los dispositivos si se encuentran vencidos
Diagnóstico In vitro 4. Atempere los reactivos de 15 a 30°C antes de usarlos.
5. No utilice los componentes de otro tipo de prueba como sustituto de los componentes
USO de este kit.
6. No utilice sangre sangre hemolizada para la prueba.
La prueba rápida OnSite HBsAg Combo es un inmunoensayo de cromatografía lateral 7. Use ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los reactivos del kit y las
para la detección cualitativa del antígeno de superficie de la Hepatitis B (HBsAg) en muestras clínicas. Lave sus manos después de realizar la prueba.
plasma, suero o sangre total humana en un nivel igual o superior a 2 ng/ml. Este 8. Los usuarios de esta prueba deben seguir las precauciones universales del CDC de
método es usado como tamizaje y ayuda diagnostica de infección con el virus Estados Unidos para la prevención de transmisión del VIH, el VHB y otros patógenos
de la Hepatitis B (VHB). Cualquier muestra que de un resultado reactivo con la de transmisión sanguínea.
prueba rápida OnSite HBsAg Combo debe ser confirmada con pruebas alternativas tales 9. No fume, beba ni coma en las áreas donde se manipulen muestras o reactivos del kit.
como el ELISA y la sintomatología clínica. 10. Deseche todas las muestras y los materiales del kit usados como residuos biológicos
peligrosos..
RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA 11. Manipule los controles positivos y negativos de la misma forma como a las muestras de
los pacientes
El virus de la Hepatitis B (VHB) en la causa más común de viremia persistente y la causa más
12. Los resultados de las pruebas pueden ser leídos 15 minutos después de agregar la
importante de enfermedad hepática crónica y carcinoma hepatocelular. Clínicamente la
muestra al pozo de muestra. Leer los resultados después de los 15 minutos puede
infecciones por el VHB han existido durante varios milenios. Se estima que hay cerca de 300 millones
generar resultados erróneos.
de portadores crónicos de VHB en el mundo. Los tipos de portadores varían de un 0.3%
13. No procese la muestra en un lugar con fuerte corriente de aire, con ventiladores o aire
(países del occidente) al 20% (Asia, África)1.
acondicionado.
El VHB es un virus ADN hepatotrópico. El core de este virus contiene ADN polimerasa2, el
PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
antígeno core (HBcAg)3 y el antígeno e (HBeAg)4. El core del VHB está encerrado en una
capa que contiene lípidos, proteínas y carbohidratos que expresan un antígeno en la Todos los reactivos vienen listos para ser usados. El almacenamiento de los dispositivos
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superficie (HBsAg) . cerrados debe ser de 2-30°C. Los controles positivos y negativos deben mantenerse 2-8°C.
Si se almacena de 2-8°C, asegúrese de que el dispositivo de prueba se lleva a temperatura
El HBsAg es el primer marcador que aparece en sangre en la fase aguda de la hepatitis B, ambiente antes de la apertura. El dispositivo de prueba es estable hasta la fecha de caducidad
es detectado 1 semana a 2 meses después de la exposición, y de 2 semana a 2 meses antes impresa en la bolsa. No congele el kit o exponer el kit a más de 30°C.
de la aparición de los síntomas. Tres semanas después del inicio de hepatitis aguda casi la mitad
de los pacientes todavía es positivo para el HBsAg. En la fase crónica, el HBsAg persiste por RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Y MANIPULACION
un largo periodo (6-12 meses) sin seroconversión para los anticuerpos correspondientes. Por
lo tanto, la detección de HBsAg es altamente recomendable para todos los donantes, las Considere todos los materiales de origen humano como infecciosos y manipule usando los
mujeres embarazadas y las personas en grupos de alto riesgo. procedimientos de bioseguridad.

Plasma
La prueba rápida OnSite HBsAg Combo detecta el HBsAg en suero, plasma o sangre total
1. Recolecte la muestra en un tubo tapa lila, azul o verde (que contenga EDTA, Citrato o
humana en 20 minutos por personal mínimamente entrenado sin necesidad de equipo de
Heparina) por venopunción.
laboratorio.
2. Separe el plasma por centrifugación.
3. Cuidadosamente transfiera el plasma a un tubo nuevo.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
Suero
La prueba rápida OnSite HBsAg Combo es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral. 1. Recolecte por venopunción la muestra en un tubo tapa roja (sin anticoagulantes)
La prueba del casete consiste en: 1) una membrana con conjugado coloreado de 2. Espere la formación del coagulo
borgoña que contiene anticuerpos anti-HBsAg conjugados con oro coloidal (conjugado 3. Separe el suero por centrifugación
HBsAg Ab), 2) una membrana de nitrocelulosa que contiene la banda de prueba 4. Cuidadosamente transfiera el suero a un tubo nuevo
(banda T) y una banda de control (banda C). La banda T esta pre-recubierta con anticuerpos
HBsAg no conjugados, y la banda C esta pre-recubierta con anticuerpos de cabra IgG anti- Procesar las pruebas lo más pronto posible a la toma de la muestra. Almacene las muestras
ratón. de 2°C a 8°C si no se van a procesar inmediatamente.

Identificación Banda de Línea de Las muestras son estables almacenadas de 2° a 8°C durante 5 días. Las muestras pueden
Pozo de
de la muestra Control prueba muestra congelarse a -20°Ċ para almacenamientos prolongados.
Evite múltiples ciclos de congelación y descongelación de las muestras. Antes del ensayo,
lleve las muestras congeladas a temperatura ambiente lentamente y mezcle con suavidad.
Las muestras que contengan partículas visibles, deben ser eliminadas por centrifugación
antes de la prueba.
No use muestras lipémicas, hemolizadas o turbias ya que pueden generar interferencia en los
Cuando es dispensado un volume adecuado de la muestra en el pozo de muestra del resultados.
casete, la muestra migra por acción capilar a través del casete. El HBsAg si está
Sangre Total
presente en la muestra se une con el HBsAg Ab. Este inmunocomplejo es capturado en la
Las gotas de sangre total pueden obtenerse por punción digital o venopunción. No use
membrana por el anticuerpo HBsAg no conjugado pre-recubierto, formando una
sangre hemolizada para la prueba.
coloración en la banda T, indicando un resultado positive para HBsAg.
Las muestras de sangre total pueden refrigerarse (2°C-8°C) si no se van a procesar
La ausencia de la banda T indica un resultado negativo. La prueba contiene un control interno inmediatamente. Las muestras deben ser procesadas entre las 24 horas siguientes a su
(banda C) la cual muestra una coloración borgoña por la formación del inmunocomplejo de recolección.
IgG anti-ratón de cabra / HBsAg Ab-oro conjugado, que se forma independientemente de la
banda T. el resultado de la prueba es inválido si la banda C no se colorea y debe ser repetida PROCESAMIENTO
en un nuevo casete de prueba.
Paso 1: Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
REACTIVOS Y MATERIALES SUMINISTRADOS refrigerada o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez
descongelado.
1. Cada kit contiene 25 o 30 dispositivos de prueba, cada uno sellado en una bolsa de Paso 2: Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
aluminio con tres elementos en su interior: dispositivo. Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
a. Un dispositivo de casete
b. Un gotero plástico Paso 3: Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente.
c. Un desecante
2. Diluyente de muestra (1 frasco por 5 mL) Paso 4: Para sangre total
3. Un inserto (instrucciones de uso). Adicione 1 gota de sangre total (45-55 µL) dentro del pozo de muestra.
Inmediatamente agregue 1 gota (35-50 µL) de diluyente de muestra.
MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS

1. Control Positivo
2. Control Negativo

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SE SUMINISTRAN o

Result
1. Reloj o cronómetro
2. Lancetas
1 gota de sangre total 1 gota de diluyente de muestra
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Para suero o plasma LIMITACIONES DE LA PRUEBA

Llene el gotero con la muestra.
1. El procedimiento del análisis y la interpretación de resultados de ensayo debe seguirse
de cerca cuando se prueba la presencia de HBsAg en suero, plasma y sangre total de
Con el gotero en posición vertical, agregue 1 gota (40-50 µL) de muestra en el pozo
los pacientes. Si no se sigue el procedimiento puede dar resultados inexactos.
de muestra asegurándose de que no hayan burbujas de aire.
2. La prueba rápida OnSite HBsAg Combo se limita a la detección cualitativa de HBsAg
en suero, plasma o sangre total humana. La intensidad del color de la banda no indica
Inmediatamente adicione 1 gota (aprox 35-50 µL) de diluyente de la muestra en el
el título de HBsAg en la muestra.
pozo de muestra.
3. Un resultado negativo o no-reactivo no excluye la posibilidad de no haberse expuesto o
estar infectado con el VHB.
4. Un resultado negativo o no-reactivo puede ocurrir si la cantidad de HBsAg presente en
la muestra es menor al límite de detección del ensayo (menor de 2ng/mL), o el HBsAg
Resultado detectado no está presente durante el estado de la enfermedad cuando la muestra es
recolectada.
15 minutos 5. Algunas muestras que contienen alto título inusual de anticuerpos heterófilos o de
factor reumatoideo pueden afectar los resultados.
6. Si los síntomas persisten, y los resultados de la prueba son no-reactivos, es
1 gota de muestra 1 gota de diluyente de muestra
recomendable tomar una nueva muestra días después o realizar una prueba
Paso 5: Contabilice el tiempo. alternativa.
7. Los resultados obtenidos con esta prueba deben ser interpretados junto con otros
Paso 6: Los resultados deben ser leídos a los 15 minutos. Los resultados positivos o procedimientos diagnósticos y la sintomatología clínica.
reactivos se hacen visibles transcurrido 1 minuto.
REFERENCIAS
No lea los resultados después de 15 minutos. Para evitar confusiones 1. Emanuel Rubin and John Farber. The liver and biliary system. Acute viral hepatitis P 721-
descarte el casete después de leer el resultado.
729. Rubin E, Farber JL ed. Pathology 2nd ed. 1994. J.B. Lippincott, Philadelphia
2. Kaplan PM, Greenman RL, Gerin JL, Purcell RH, Robinson WS. DNA polymerase
CONTROL CALIDAD
associated with human hepatitis B antigen. J Virol. 1973 12(5):995-1005.
Usando un casete individual de la prueba rápida OnSite HBsAg Combo, como se describe en 3. Dane DS, Cameron CH, Briggs M. Virus-like particles in serum of patients with Australia-
el procedimiento anterior, correr un control Positivo y uno Negativo en las siguientes antigen-associated hepatitis. Lancet. 1970;1(7649):695-8.
circunstancias para controlar el rendimiento de prueba: 4. Magnius LO, Espmark A. A new antigen complex co-occurring with Australia antigen.
1. Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese las muestras. Acta Pathol Microbiol Scand [B] Microbiol Immunol. 1972;80(2):335-7.
2. Cuando se inicia un nuevo kit.
3. Un nuevo envío de kits es utilizado.
4. Cuando la temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C - 30°C.
5. La temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15°C -30°C.
Índice de Símbolos
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Consulte las Para uso diagnóstico
Utilice por
instrucciones de uso in vitro únicamente
1. RESULTADO NEGATIVO O NO-REACTIVO: Si solo se colorea la banda C, indica
que el nivel de HBsAg en la muestra es indetectable (menor de 2 ng/mL). El resultado Pruebas por
REF Catálogo número Número de Lote N kit
es Negativo o No-reactivo.
Almacenar de 2 a Representante
No reutilizar
30°C Autorizado

Fabricante Fecha de fabricación

2. RESULTADO POSITIVO O REACTIVO: Si se colorean ambas bancas C y T, la prueba

indica que la muestra contienes HBsAg y el valor es igual o mayor a 2 ng/mL. El CTK Biotech, Inc.
resultado es positivo o reactivo. 10110 Mesa Rim Road
San Diego, CA 92121, USA
Tel: 858-457-8698
Fax: 858-535-1739
E-mail: info@ctkbiotech.com

PI-R0042C Rev. C
Effective date: 2011-05-10
Versión en Español
Las muestras con resultados positivos o reactivos deben ser confirmados con métodos
alternativos tales como ELISA y con la sintomatología clínica antes de tomar una For Export Only, Not For Re-sale In the USA
decisión diagnóstica.

3. INVÁLIDO: Si la banda C no se colorea, el ensayo se considera inválido a pesar de

que las otras bandas se tiñan. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.

CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO

Desempeño clínico

Un total de 500 muestras de individuos susceptibles fueron evaluados con la pruebe

rápida OnSite HBsAg Combo y el kit de ELISA HBsAg con una sensibilidad del 0.5
ng/mL. La comapración se encuentra en la siguiente tabla.

Prueba Rápida OnSite HBsAg Combo

HBsAg
ELISA Positivo Negativo Total
Positivo 48 2 50
Negativo 0 450 450
Total 48 452 500
Sensibilidad Relativa: 96%, Especificidad Relativa: 100%, Concordancia: 99.6%