TWI720250B

TWI720250B - 利用tlr7促效劑及hbv蛋白殼組裝抑制劑之組合治療

Info

Publication number: TWI720250B
Application number: TW106130951A
Authority: TW
Inventors: 戴略; 高璐
Original assignee: 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司
Priority date: 2016-09-13
Filing date: 2017-09-11
Publication date: 2021-03-01
Also published as: TW201811371A; IL287545B2; AU2017326400B2; IL264926B; CN109715214A; KR102497701B1; JP2019526610A; WO2018050571A1; AU2017326400A1; ES2894605T3; IL287545B; KR20190053219A; JP7101663B2; US20190298726A1; US11337982B2; PL3512556T3; EP3512556B1; JP2022130672A; CN109715214B; EP3970750A1

Abstract

本發明係有關用於治療B型肝炎病毒感染之組合物及方法。具體言之，本發明係有關一種用於治療慢性B型肝炎患者之組合療法，其包含投與TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑。

Description

利用TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑之組合治療

B型肝炎病毒(Hepatitis B virus；HBV)之慢性感染係世界性嚴重公共衛生問題，全世界有超過2.4億人係慢性感染。HBV屬於肝DNA病毒科病毒。病毒進入肝細胞之後，其病毒基因組會遞送至細胞核中，在其中藉由部分雙鏈病毒基因組之DNA修復而形成共價閉合環形DNA(covalently closed circular DNA；cccDNA)，cccDNA係作為病毒RNA轉錄作用之模板。病毒前基因組RNA與其他兩種病毒組份，即蛋白殼蛋白及聚合酶相互作用以形成蛋白殼粒子，在其中發生病毒DNA複製。HBV具有包含蛋白殼(或核心)蛋白之240個複本之二十面體核。蛋白殼蛋白之主要生物功能係充當結構蛋白以用蛋白殼包裹前基因組RNA且在細胞質中形成未成熟之蛋白殼粒子。此步驟係病毒DNA複製之前提條件。當藉由病毒前基因組RNA之逆轉錄來形成接近全長之鬆環DNA時，未成熟之蛋白殼變為成熟蛋白殼。經蛋白殼包裹之基因組之大多數複本與細胞脂質及病毒包膜蛋白(S、M及L)有效結合以進行病毒粒子組裝及分泌。然而，亦產生數量遠多於感染性病毒粒子之非感染性粒子。此等空的包膜粒子稱為次病毒粒子(SVP)。S、M及L包膜蛋白係由含有三個不同起始密碼子之單個開放閱讀框架(open reading frame，ORF)表現。全部三種蛋白質在其C末端共用226胺基酸序列，即S域。S域含有HBsAg抗原決定基(Lambert, C.及R. Prange.Virol J , 2007, 4, 45)。許多觀測結果顯示，若干HBV病毒蛋白可藉由干擾病毒識別信號傳導系統抵抗初始宿主細胞反應且隨後抵抗干擾素(IFN)抗病毒活性。其中，過量分泌HBV空次病毒粒子可參與維持在慢性感染患者(CHB)中所觀測到的免疫耐受狀態。持續暴露於HBsAg及其他病毒抗原可導致HBV特異T細胞缺失或進行性功能減弱(Kondo等人,Journal of Immunology 1993, 150, 4659-4671；Kondo等人,Journal of Medical Virology 2004, 74, 425-433；Fisicaro等人,Gastroenterology , 2010, 138, 682-93)。此外，已報告HBsAg藉由直接相互作用抑制免疫細胞，諸如單核球、樹突狀細胞(DC)及自然殺手(NK)細胞之功能(Op den Brouw等人,Immunology , 2009b, 126, 280-9；Woltman等人,PLoS One , 2011, 6, e15324；Shi等人,J Viral Hepat . 2012, 19, e26-33；Kondo等人,ISRN Gasteroenterology , 2013, 文章編號935295)。 HBsAg定量係慢性B型肝炎之預後及治療反應之生物標記。HBsAg損失及血清轉化係臨床治癒之目標，但很少在慢性感染患者中觀測到。當前療法，諸如抑制HBV DNA合成之核苷(核苷酸)類似物不能直接影響HBsAg含量。即使使用長期療法，核苷(核苷酸)類似物亦展示極低之HBsAg清除速率，與自然觀測到的清除速率相當(Janssen等人,Lancet , 2005, 365, 123-9；Marcellin等人,N . Engl . J . Med ., 2004, 351, 1206-17；Buster等人,Hepatology , 2007, 46, 388-94)。鐸樣受體(Toll-like receptor；TLR)會偵測到眾多的保守性病原體相關分子模式(pathogen-associated molecular pattern；PAMP)。其在感測侵入之病原體及隨後起始先天性免疫反應中起重要作用。在人體中存在著TLR家族之10個已知成員，其為具有細胞外富白胺酸域及含有保守性鐸/介白素(IL)-1受體(TIR)域之細胞質尾的I型跨膜蛋白。在此家族內，TLR3、TLR7、TLR8及TLR9位於胞內體(endosomes)中。TLR7可藉由與特定小分子配位體(亦即，TLR7促效劑)或其天然配位體(亦即，單鏈RNA，即ssRNA)結合而活化。在ssRNA與TLR7結合後，咸信呈二聚形式之受體經歷結構改變，導致隨後在其細胞質域處募集轉接頭蛋白(adapter proteins)，包括髓樣分化初反應基因88 (MyD88)。在經由MyD88通路起始受體信號傳導級聯後，細胞質轉錄因子，諸如干擾素調節因子7 (IRF-7)及核因子κB (NF-κB)經活化。隨後此等轉錄因子易位至細胞核且起始例如IFN-α及其他抗病毒細胞介素基因之各種基因之轉錄。TLR7主要在漿細胞樣細胞以及B細胞上表現。改變免疫細胞之反應性會導致在慢性病毒感染期間先天性免疫反應減低。因此，經促效劑誘導之TLR7活化代表一種用於治療慢性病毒感染之新穎方法。(D. J Connolly及L. AJ O'Neill, Current Opinion in Pharmacology 2012, 12:510-518；P. A. Roethle等人, J. Med. Chem. 2013, 56, 7324-7333)。利用口服TLR7促效劑之治療代表一種提供更強功效及更好耐受性的有前景之解決方案。當前使用聚乙二醇化IFN-α (PEG-IFN-α)治療慢性HBV，且是為利用抗病毒核苷(核苷酸)類似物之潛在長期治療的替代方案。在一小群慢性HBV患者中，PEG-IFN-α療法在有限的治療持續時間後可誘導對病毒之持續免疫控制。然而，用干擾素療法實現血清轉化之HBV患者之百分比較低(對於HBeAg陽性患者，至多27%)，且該治療通常耐受性較差。此外，在利用PEG-IFN-α及核苷(核苷酸)兩者治療之情況下，功能性治癒(定義為HBsAg損失及血清轉化)亦極其罕見。鑒於此等侷限，迫切需要用以治療慢性HBV及誘導慢性HBV功能性治癒的改良之治療選擇。利用口服小分子TLR7促效劑之治療係一種有前景的方法，其具有提供更強功效及耐受性的可能性(T. Asselah等人, Clin Liver Dis 2007, 11, 839-849)。 HBV蛋白殼蛋白在HBV複製中起重要作用。在基於組織培養之篩選中發現了雜芳基二氫嘧啶或HAP，包括稱為Bay 41-4109、Bay 38-7690及Bay 39-5493之化合物(Deres K.等人,Science 2003 , 893)。此等HAP類似物可作為合成性異位活化劑且能夠誘導引起核心蛋白降解之異常蛋白殼形成。HAP類似物亦將來自預組裝蛋白殼之核心蛋白重組織成非蛋白殼聚合物，此可能藉由HAP與蛋白殼『呼吸』期間釋放之二聚體相互作用，『呼吸』係指個別次單元間鍵結的暫時性斷裂。向感染HBV之轉殖基因小鼠或人類化小鼠模型投與Bay 41-4109且利用HBV DNA減少展示活體內功效(Deres K.等人,Science 2003 , 893；Brezillon N.等人,PLoS ONE 2011 , e25096)。亦展示小分子bis-ANS，其充當分子『楔』且干擾正常蛋白殼蛋白幾何形狀及蛋白殼形成(Zlotnick A.等人,J . Virol . 2002 , 4848-4854)。目前，HBV感染之臨床治癒標準為HBsAg之損失及/或血清轉化。即使有PEG-IFN-α及核苷(核苷酸)可供HBV患者使用，但大多數(約或超過90%)經治療患者仍無法實現此目標，此主要歸因於以下事實：在大多數慢性感染患者中，當前療法無法引出針對HBsAg之中和抗體(抗HBs)的出現，而該等抗體之出現是HBV感染得到解決的標誌。因此，無疑地，提高誘導HBsAg損失及/或血清轉化之成功率及促進抗HBs產生的治療存在醫學需求。

本發明係關於一種醫藥組合物，其包含在醫藥學上可接受之載劑中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑。「TLR7促效劑」在本文中為式(I)或(II)化合物，具體言之，本文中之「TLR7促效劑」為6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。HBV蛋白殼組裝抑制劑在本文中為式(III)化合物或專利WO2014/037480、WO 2014/184328及WO2015/132276中所揭示之化合物中之任一種，具體言之，HBV蛋白殼組裝抑制劑在本文中為3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。

除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域的一般技術者通常所理解相同的含義。如本文所用，術語「C₁ _- ₆ 烷基」係指具有1至6個碳原子之單價直鏈或分支鏈飽和烴基。在特定實施例中，C₁ _- ₆ 烷基具有1至6個碳原子，且在更特定之實施例中具有1至4個碳原子。C₁ _- ₆ 烷基之實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基。如本文所用，術語「C₁ _- ₆ 烷氧基」係指C₁ _- ₆ 烷基-O-基團，其中「C₁ _- ₆ 烷基」如上所定義；例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、2-丁氧基、第三丁氧基及其類似基團。特定「C₁ _- ₆ 烷氧基」為甲氧基及乙氧基。如本文所用，術語「鹵基」或「鹵素」在本文中可互換地使用且係指氟、氯、溴或碘。術語「鹵基C₁ _- ₆ 烷基」係指烷基之至少一個氫原子已經相同或不同鹵素原子，尤其氟原子置換的烷基。鹵基C₁ _- ₆ 烷基之實例包括單氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基、二氟乙基或三氟甲基。單獨或組合形式之術語「羰基」係指基團-C(O)-。術語「C₁ _- ₆ 烷基羰基」係指基團C₁ _- ₆ 烷基-C(O)-，其中「C₁ _- ₆ 烷基」如上文所定義。特定「C₁ _- ₆ 烷基羰基」為乙醯基。術語「C₁ _- ₆ 烷氧羰基」係指基團C₁ _- ₆ 烷氧基-C(O)-，其中「C₁ _- ₆ 烷氧基」如上文所定義。單獨或組合形式之術語「C₃ _- ₇ 環烷基」係指含有3至7個碳原子，尤其3至6個碳原子之飽和碳環，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及其類似基團。特定「C₃ _- ₇ 環烷基」為環丙基、環戊基及環己基。單獨或組合形式之術語「-C_m H_2m -」表示含有m (m≠0)個碳原子或一個鍵(m=0)之飽和直鏈或分支鏈烷基。特定言之，單獨或組合形式之術語「-C_m H_2m -」表示含有1至4個碳原子之飽和直鏈或分支鏈烷基。術語「羧基-C_m H_2m -」係指基團「-C_m H_2m -COOH」，其中「-C_m H_2m -」如上文所定義。術語「C₃ _- ₇ 環烷基-C_m H_2m -」係指「C₃ _- ₇ 環烷基」之一個氫原子經「-C_m H_2m -」置換的如上文所定義之「C₃ _- ₇ 環烷基」。術語「雜環基」表示具有3至10個環原子之單價飽和或部分不飽和單環或雙環系統，該等環原子包含1至5個選自N、O及S之環雜原子，其餘環原子為碳。在特定實施例中，雜環基係具有4至7個環原子之單價飽和單環系統，該等環原子包含1、2或3個選自N、O及S之環雜原子，其餘環原子為碳。單環飽和雜環基之實例為氮丙啶基、環氧乙烷基、吖丁啶基、環氧丙烷基、吡咯啶基、二甲基吡咯啶基、乙氧基羰基吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡唑啶基、咪唑啶基、噁唑啶基、異噁唑啶基、噻唑啶基、哌啶基、四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氧硫代嗎啉基、氮雜環庚烷基、二氮雜環庚烷基、高哌嗪基或氧氮雜環庚烷基。單環飽和雜環基可另外經一至三個獨立地選自鹵素、C_1-6 烷基及C₁ _- ₆ 烷氧羰基之取代基取代。經取代之單環飽和雜環基之實例為4-甲基哌嗪基、二甲基吡咯啶基、乙氧基羰基吡咯啶基、二氟吡咯啶基、氟(甲基)吡咯啶基。雙環飽和雜環基之實例為氮雜雙環[3.2.1]辛基、

啶基、氧氮雜雙環[3.2.1]辛基、氮雜雙環[3.3.1]壬基、氧氮雜雙環[3.3.1]壬基、硫氮雜雙環[3.3.1]壬基、氮雜螺[3.3]庚基及氧氮雜螺[3.3]庚基。部分不飽和雜環基之實例為二氫呋喃基、咪唑啉基、二氫噁唑基、四氫吡啶基及二氫哌喃基。如本文所用，術語「非對映異構體」係指具有兩個或超過兩個對掌性中心且分子不互為鏡像之立體異構體。非對映異構體具有不同物理特性，例如熔點、沸點、光譜特性、活性及反應性。如本文所用，術語「對映異構體」係指一種化合物之互為不可重疊之鏡像的兩個立體異構體。如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指並非生物學上或在其他方面不合需要之鹽。醫藥學上可接受之鹽包括酸加成鹽及鹼加成鹽。如本文所用，術語「前藥」係指在投與後在活體內例如由個體之生物流體或酶代謝成化合物之藥理學活性形式以便產生所需藥理學作用的化合物形式或衍生物。前藥描述於例如Richard B. Silverman之Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, Academic Press, San Diego, 2004, 第8章, Prodrugs and Drug Delivery Systems,第497-558頁中。術語「醫藥學上可接受之酸加成鹽」係指用無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸；及用選自脂族、環脂族、芳族、芳脂族、雜環、羧酸及磺酸類有機酸之有機酸，諸如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、天冬胺酸、抗壞血酸、麩胺酸、鄰胺基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、杏仁酸、恩波酸(embonic acid)、苯乙酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、對甲苯磺酸及水楊酸形成的醫藥學上可接受之鹽。術語「醫藥學上可接受之鹼加成鹽」係指用有機鹼或無機鹼形成的醫藥學上可接受之鹽。可接受之無機鹼之實例包括鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽及鋁鹽。衍生自醫藥學上可接受之無毒有機鹼之鹽包括一級胺、二級胺及三級胺、經取代之胺(包括天然存在之經取代之胺)、環胺及鹼性離子交換樹脂，諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙胺基乙醇、三羥甲基胺基甲烷、二環己胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡鹼、普魯卡因(procaine)、海卓胺、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可豆鹼、嘌呤、哌嗪、哌啶、N -乙基哌啶及聚胺樹脂之鹽。含有一個或數個對掌性中心之通式(I)之化合物可呈外消旋體、非對映異構體混合物或光學活性單一異構體形式存在。如本文所用，「combo」係指組合。如本文所用，「RT-PCR」係指逆轉錄聚合酶鏈反應。如本文所用，「CLIA」係指化學發光免疫分析。如本文所用，「AAV」係指腺相關病毒。如本文所用，「AAV-HBV」係指攜帶包裝於AAV蛋白殼中之HBV基因組之1.3個複本的重組病毒。可藉由經尾靜脈注射向小鼠注射AAV-HBV來建立慢性HBV感染小鼠模型。在此小鼠模型中，活躍HBV複製持續產生HBV病毒標記物(例如，HBV DNA、HBsAg、HBeAg等)。如本文所用，「HBsAg」係指B型肝炎表面抗原。如本文所用，「HBeAg」係指B型肝炎e抗原。如本文所用，「抗HBs」係指針對HBsAg之抗體。如本文所用，「HBV特異性引子」係指充當HBV DNA區域特異性擴增之起點及終點的一對單鏈核酸。如本文所用，「TLR7」係指任何來源之物種(例如人類、鼠類、土撥鼠等)之鐸樣受體7。如本文所用，「TLR7促效劑」係指充當TLR7之促效劑之化合物。除非另外指示，否則TLR7促效劑可包括呈任何醫藥學上可接受之形式之化合物，包括任何異構體(例如非對映異構體或對映異構體)、鹽、溶劑合物、多晶型物及類似形式。可以任何合適之方式測定特定化合物之TLR促效作用。舉例而言，用於偵測測試化合物之TLR促效作用之分析描述於例如2002年12月11日申請之美國臨時專利申請案序列號60/432,650中，且適用於此類分析之重組細胞株描述於例如2002年12月11日申請之美國臨時專利申請案序列號60/432,651中。本發明係關於一種醫藥組合物，其包含在醫藥學上可接受之載劑中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑。在本發明之一個實施例中，「TLR7促效劑」係式(I)化合物：

，其中 R¹ 係C₁ _- ₆ 烷基； R² 係苯甲基，該苯甲基未經取代或經一個、兩個或三個獨立地選自鹵素及C_1-6 烷基之取代基取代； R³ 係-NR⁴ R⁵ ，其中 R⁴ 係C₁ _- ₆ 烷基或C₁ _- ₆ 烷氧基C₁ _- ₆ 烷基； R⁵ 係(C₁ _- ₆ 烷基)₂ NCOOC₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧基C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧羰基(C₁ _- ₆ 烷基)胺基C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧羰基(苯基)C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧羰基C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧羰基氧基C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷基羰基(C₁ _- ₆ 烷基)胺基C₁ _- ₆ 烷基或吡咯啶基胺甲醯基氧基C₁ _- ₆ 烷基；或 R⁴ 及R⁵ 與其所連接之氮一起形成雜環基；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。在本發明之另一實施例中，「TLR7促效劑」係式(II)化合物：

，其中 R⁴ 係C₁ _- ₆ 烷基、鹵基C₁ _- ₆ 烷基、C₃ _- ₇ 環烷基C₁ _- ₆ 烷基、C₁ _- ₆ 烷氧基C₁ _- ₆ 烷基或吡咯啶基C₁ _- ₆ 烷基； R⁵ 係C_1-6 烷基、苯基C_1-6 烷基、吡啶基C_1-6 烷基或嘧啶基C_1-6 烷基，該苯基C_1-6 烷基、吡啶基C_1-6 烷基及嘧啶基C_1-6 烷基未經取代或經一個、兩個或三個獨立地選自鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、氰基、羧基、胺甲醯基、鹵基C_1-6 烷基、C_1-6 烷基磺醯基、C_1-6 烷氧羰基、C_1-6 烷氧基C_1-6 烷基胺基羰基、吡咯啶基羰基及哌啶基羰基之取代基取代； R⁶ 係H；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。更具體而言，根據本發明之TLR7促效劑係指6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。在投與之後，式(I)化合物代謝成為其活性形式，該等活性形式係有用之TLR7促效劑。如本文所用，「B型肝炎病毒」或「HBV」係指肝DNA病毒科之成員，其具有含約3,200個鹼基對之較小雙鏈DNA基因組及肝臟細胞向性。「HBV」包括感染多種哺乳動物(例如人類、非人類靈長類等)及禽類(鴨等)宿主中之任一者的B型肝炎病毒。「HBV」包括任何已知之HBV基因型，例如血清型A、B、C、D、E、F及G；任何HBV血清型或HBV亞型；任何HBV分離株；HBV變異體，例如HBeAg陰性變異體、耐藥性HBV變異體(例如耐拉米夫定(lamivudine)變異體；耐阿丹弗(adefovir)突變體；耐田諾弗(tenofovir)突變體；因提弗(entecavir)突變體等)；以及其類似物。如本文所用，「HBV蛋白殼組裝抑制劑」係指抑制及/或破壞及/或加速及/或阻礙及/或延遲及或減少及/或改變正常HBV蛋白殼組裝(例如在成熟期間)及/或正常蛋白殼分解(例如在感染性期間)及/或擾亂蛋白殼穩定性，進而誘導異常蛋白殼形態及功能之化合物。在本發明之一個實施例中，HBV蛋白殼組裝抑制劑係式(III)化合物：

，其中 R⁷ 係氫、鹵素或C₁ _- ₆ 烷基； R⁸ 係氫或鹵素； R⁹ 係氫或鹵素； R¹⁰ 係C₁ _- ₆ 烷基； R¹¹ 係氫、羥基C₁ _- ₆ 烷基、胺基羰基、C₁ _- ₆ 烷氧羰基或羧基； R¹² 係氫、C₁ _- ₆ 烷氧羰基或羧基-C_m H_2m -； X 係羰基或磺醯基； Y 係-CH₂ -、-O-或-N(R¹³ )-，其中R¹³ 係氫、C_1-6 烷基、鹵基C_1-6 烷基、C_3-7 環烷基-C_m H_2m -、C_1-6 烷氧羰基-C_m H_2m -、-C_t H_2t -COOH、-鹵基C_1-6 烷基-COOH、-(C_1-6 烷氧基)C_1-6 烷基-COOH、-C_1-6 烷基-O-C_1-6 烷基-COOH、-C_3-7 環烷基-C_m H_2m -COOH、-C_m H_2m -C_3-7 環烷基-COOH、羥基-C_t H_2t -、羧基螺[3.3]庚基或羧基苯基-C_m H_2m -、羧基吡啶基-C_m H_2m -； W 係-CH₂ -、-C(C₁ _- ₆ 烷基)₂ -、-O-或羰基； n 為0或1； m 為0至7； t 為1至7；或其醫藥學上可接受之鹽，或對映異構體或非對映異構體。更具體而言，根據本發明之HBV蛋白殼組裝抑制劑係指3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。在另一實施例中，「HBV蛋白殼組裝抑制劑」為專利WO2015/132276、WO 2014/184328及WO2014/037480中所揭示之化合物中之任一者。在本發明之一個實施例中，醫藥組合物包含TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑，其中TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑獨立地選自表1。(化合物5及6揭示於專利WO2015/132276中)。表1.TLR7促效劑及HBV蛋白殼之清單

更具體而言，本發明係關於一種包含TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑之醫藥組合物，其選自以下組合中之任一者：化合物1與化合物5；化合物1與化合物6；化合物2與化合物5；化合物2與化合物6；化合物3與化合物5；化合物3與化合物6；化合物4與化合物5；化合物4與化合物6；化合物1e-A與化合物5；化合物1e-A與化合物6；化合物1e-B與化合物5；化合物1e-B與化合物6；化合物4f-A與化合物5；化合物4f-A與化合物6。以上該組合之化合物1至6、1e-A、1e-B及4f-A可經其對應醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體置換，其為本發明之另一態樣。在本發明之一個實施例中，醫藥組合物由在醫藥學上可接受之載劑中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑組成。更具體而言，組合物由在醫藥學上可接受之載劑中之以下組成： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸； 6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或 6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。本發明之另一實施例係關於一種醫藥組合物，其係由在醫藥學上可接受之載劑中之以下組成之： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或 6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。在本發明之另一實施例中，醫藥組合物可另外包含一或多種其他抗病毒劑，其包括但不限於拉米夫定、阿丹弗、田諾弗、替比夫定(telbivudine)及因提弗。 TLR7促效劑及/或HBV蛋白殼組裝抑制劑之典型劑量可在製造商所推薦之範圍內，且在由動物模型中之活體外反應指示之情況下，該劑量可減少多達約一個數量級之濃度或量。因此，實際劑量將取決於醫師之判斷、患者病況及基於適當動物模型之活體外反應性之治療方法的有效性。本發明之另一實施例係關於一種用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於將TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑用於該藥劑中。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑係以相同調配物或不同調配物共投與。出於本發明之目的，「共投與」係指TLR7促效劑與HBV蛋白殼組裝抑制劑作為兩種活性劑分開或共同投與中之任一種，其中該兩種活性劑係作為經設計以獲得組合療法益處之適當劑量方案的一部分投與。因此，該兩種活性劑可作為同一醫藥組合物之一部分或以分開之醫藥組合物投與。此外，該兩種活性劑可同時或依序投與。 TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑可在各種醫藥學上可接受之惰性載劑存在下呈以下形式投與：錠劑、膠囊、口含錠、糖衣錠、硬糖果、散劑、噴霧劑、乳膏、油膏、栓劑、凍膠、凝膠、糊劑、洗劑、軟膏、酏劑、糖漿及類似物。可以單次或多次劑量進行此類劑型之投與。載劑包括之固體稀釋劑或填充劑、無菌水性介質及各種無毒有機溶劑。可藉由但不限於經口投與、非經腸投與、獸醫投與進行此類劑型之投與。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑意欲藉由相同途徑或不同途徑向個體投與。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑意欲藉由非經腸或經口投與向個體投與。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於同時或依序向個體投與TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑。在本發明之任何方法中，可藉由在同時或以固定組合形式共同地分開或依序投與試劑來進行試劑之同時投與。此外，在本發明之任何方法中，可以任何順序分開或依序投與試劑。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於其TLR7促效劑係式(I)或式(II)之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。具體言之，TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於其HBV蛋白殼組裝抑制劑係式(III)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。具體言之，HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其特徵在於該藥劑另外包含一或多種其他抗病毒劑，包括但不限於，拉米夫定、阿丹弗、田諾弗、替比夫定及因提弗。本發明之另一實施例係關於用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的方法，其中用於該藥劑中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑係在醫藥學上可接受之載劑中之： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或 6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。本發明之另一實施例係關於一種包含容器之套組，該容器包含TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑，該套組可另外包含無菌稀釋劑。本發明之另一實施例係關於該套組，其中該套組可另外包含藥品仿單，該藥品仿單包含印刷說明書，其指導作為治療或預防B型肝炎病毒感染之方法的TLR7促效劑與HBV蛋白殼組裝抑制劑之組合治療的使用。本發明之另一實施例係關於該套組，其中TLR7促效劑係： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或 6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。本發明之另一實施例係關於該套組，其中用於容器中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑係在醫藥學上可接受之載劑中之： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或 6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。本發明之另一實施例係關於一種用於治療或預防B型肝炎病毒感染之方法，其包含向個體投與有效第一量之TLR7促效劑，或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；及第二量之HBV蛋白殼組裝抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；其中TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N -乙基-2[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；且HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。本發明之另一實施例係關於上文中提及之醫藥組合物作為抗病毒藥劑，尤其作為供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的用途。本發明之另一實施例係關於TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑之用途，其係用於製造上文中提及的作為抗病毒藥劑，尤其作為供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的醫藥組合物。實例參考以下實例將更充分地理解本發明。然而，其不應解釋為限制本發明之範疇。實例 1 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 -[ S ( S )- 乙基磺醯亞胺醯基 ]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 1 ) 及6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 -[ S ( R )- 乙基磺醯亞胺醯基 ]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 2 )

步驟 1 ： 4 - 胺基 - 3 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 - 側氧基 - 1H - 咪唑 - 5 - 甲腈之製備

在-80℃下，向三光氣(5.9 g)於無水THF(40 mL)中之溶液中添加於無水THF(80 mL)中之(4-氯苯基)甲胺(8.5 g，Accela ChemBio Inc，目錄號：SY004062-25g)及DIPEA (12.4 g)。在-80℃下攪拌溶液15分鐘。在 -80℃下添加胺基丙二腈對甲苯磺酸酯(15.2 g，TCI，目錄號：A1119-25G)及DIPEA (6.2 g)於無水THF(40 mL)中之溶液。在室溫下攪拌24小時之後，真空濃反應物縮且使殘餘物在EtOAc (300 mL)與水(150 mL)之間分配。用鹽水(50 mL)洗滌分離之有機層兩次，且用氫氧化鈉溶液(50 mL，1N )萃取兩次。用10 wt%硫酸氫鈉溶液中和合併之氫氧化鈉溶液層且用EtOAc(50 mL)萃取兩次。合併之有機層用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。用乙醚濕磨殘餘物且收集並乾燥所得沈澱物，獲得呈黃色固體狀之4-胺基-3-[(4-氯苯基)甲基]-2-側氧基 -1H -咪唑-5-甲腈(8.0 g，化合物 1a )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 249。步驟 2 ： 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 - 巰基 - 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

向4-胺基-3-[(4-氯苯基)甲基]-2-側氧基 -1H -咪唑-5-甲腈(8.0 g，32.0 mmol，化合物 1a )於THF (100 mL)中之溶液中逐滴添加苯甲醯基異硫氰酸酯(11.5 g，70.4 mmol，TCI，目錄號：A11596-100G)。在室溫下攪拌12小時之後，真空濃縮反應混合物。在乙醚(100 mL)中濕磨殘餘物且藉由過濾收集所得沈澱物。向所獲得之沈澱物於THF (300 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉(30 mL，2N )。使反應混合物回流50小時，且隨後用10 wt%硫酸氫鈉水溶液酸化至pH 3。藉由過濾收集所得沈澱物，獲得呈黃色固體狀之粗產物6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-巰基-7H -嘌呤-8-酮(6.4 g，化合物 1b )，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 308。步驟 3 ： 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 - 乙基硫基 - 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

在0℃下，向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-巰基-7H -嘌呤-8-酮(4.40 g，化合物 1b )於DMF (50 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(3.95 g，28.59 mmol)，隨後添加碘乙烷(2.68 g，17.16 mmol)。在室溫下攪拌12小時之後，將反應混合物傾入水(200 mL)中，且用10 wt%硫酸氫鈉水溶液酸化。藉由過濾收集所得沈澱物且乾燥，獲得呈白色固體狀之6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-乙基硫基-7H-嘌呤-8-酮(2.50 g，化合物 1c )，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 336.0。步驟 4 ： 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 - 乙基亞磺醯基 - 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

在0℃下，向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-乙基硫基-7H -嘌呤-8-酮(2.2 g，化合物 1c )於THF (100 mL)中之懸浮液中添加m -CPBA (1.36 g，7.86 mmol)。在0℃下將反應混合物攪拌30分鐘之後，在真空中將反應混合物之體積減少至約50 mL。藉由過濾收集所得沈澱物，用甲醇洗滌且乾燥，獲得呈白色固體狀之6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-乙基亞磺醯基-7H -嘌呤-8-酮(1.94 g，化合物 1d )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 352.0。步驟 5 ： 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 -( 乙基磺醯亞胺醯基 )- 7H - 嘌呤 - 8 - 酮

在60℃下，向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-乙基亞磺醯基-7H -嘌呤-8-酮(1.94 g，5.51 mmol)於伊頓試劑(Eaton's reagent)(30 mL)中之溶液中分數份添加NaN₃ (1.08 g)且在此溫度下將混合物攪拌30分鐘。冷卻後，將反應混合物傾入冰與氫氧化銨(100 mL，1 M)之混合物中。藉由過濾收集所得沈澱物。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(乙基磺醯亞胺醯基)-7H -嘌呤-8-酮(217 mg，化合物 1e )。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )d ppm: 10.61 (s, 1 H), 7.42 - 7.35 (m, 4 H), 6.98 (s, 2 H), 4.96 (s, 2 H), 4.05 (s, 1 H), 3.42 - 3.37 (m, 2 H), 1.16 (t,J = 7.4 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 367.0。使用甲醇5%-40% (0.05% DEA)/CO₂ 於ChiralPak IC-3管柱上藉由對掌性HPLC分離化合物 1e (100 mg)，得到呈白色固體狀之化合物 1e - A (較快溶離，31.8 mg)及化合物 1e - B (較慢溶離，10 mg)。

6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-(乙基磺醯亞胺醯基)]-7H -嘌呤-8-酮( 化合物 1e - A ) ： ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )δ ppm: 10.76 (s, 1 H), 7.45 - 7.33 (m, 4 H), 7.01 (s, 2 H), 4.96 (s, 2 H), 4.03 (s, 1 H), 3.40 - 3.34 (m, 2 H), 1.17 (t,J = 7.4 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 367.0。

6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基)]-7H -嘌呤-8-酮( 化合物 1e - B ) ： ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )δ ppm: 10.70 (s, 1 H), 7.46 -7.28 (m, 4 H), 7.01 (s, 2 H), 4.96 (s, 2 H), 4.03 (s, 1 H), 3.44 - 3.36 (m, 2 H), 1.17 (t,J = 7.4 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 367.0。步驟 6 ： 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 -[ S ( S )- 乙基磺醯亞胺醯基 ]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 1 ) 及6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- 2 -[ S ( R )- 乙基磺醯亞胺醯基 ]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 2 ) 之製備

向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-(乙基磺醯亞胺醯基)]-7H -嘌呤-8-酮(100 mg，化合物 1e - A )於DIPEA/吡啶(v/v，1/12，2.0 mL)中之懸浮液中逐滴添加N -丙基-N -甲基-胺甲醯氯(148 mg，1.09 mmol)之溶液。在25℃下攪拌2小時之後，用MeOH (5 ml)淬滅反應混合物且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺(78.0 mg，化合物 1 )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 466.2。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz)d ppm: 7.43 - 7.41 (m, 4 H), 6.90 (s, 2 H), 5.00 (s, 2 H), 4.20 (s, 1 H), 3.46 - 3.41 (m, 2 H), 3.40 - 3.39 (m, 2 H), 3.10 - 3.00 (m, 3 H), 1.69 - 1.50 (m, 2 H), 1.24 - 1.12 (m, 3 H), 0.93 - 0.73 (m, 3 H)。

向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-(乙基磺醯亞胺醯基)]-7H -嘌呤-8-酮(100 mg，化合物 1e - B )於DIPEA/吡啶(v/v，1/12，2.0 mL)中之懸浮液中逐滴添加N -丙基-N -甲基-胺甲醯氯(148 mg，1.09 mmol)之溶液。在25℃下攪拌2小時之後，用MeOH (5 ml)淬滅反應混合物且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-嘌呤-7-甲醯胺(38.6 mg，化合物 2 )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 466.1。¹ H NMR (DMSO-d₆ , 400 MHz)d ppm: 7.43 - 7.41 (m, 4 H), 6.90 (s, 2 H), 5.00 (s, 2 H), 4.19 (s, 1 H), 3.46-3.39 (m, 2 H), 3.39 - 3.38 (m, 2 H), 3.09-2.99 (m, 3 H), 1.69 - 1.52 (m, 2 H), 1.19 (t,J = 7.28 Hz, 3 H), 0.95 - 0.66 (m, 3 H)。化合物 1 之立體化學係藉由圖1所示之單晶X射線繞射圖測定。實例 2 6 - 胺基 - 9 -[( 4 - 氯苯基 ) 甲基 ]- N - 乙基 - 2 -[ S ( S )-( 乙基磺醯亞胺醯基 )]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 3 )

向6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-(乙基磺醯亞胺醯基)]-7H -嘌呤-8-酮(100 mg，化合物 1e - A )於DIPEA/吡啶(v/v=1/12，2.0 mL)中之懸浮液中逐滴添加N -丙基-N -甲基-胺甲醯氯(132 mg，1.09 mmol)之溶液。在25℃下攪拌2小時之後，用MeOH (5 ml)淬滅反應混合物且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -乙基-8-側氧基 -N -甲基-嘌呤-7-甲醯胺(31.9 mg，化合物 3 )。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )d ppm: 7.43 - 7.41 (m, 4 H), 6.90 (s, 2 H), 4.99 (s, 2 H), 4.18 (s, 1 H), 3.48 - 3.40 (m, 2 H), 3.39 (s, 2 H), 3.05 - 3.01 (m, 3 H), 1.20 - 1.14 (m, 6 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 452.2。化合物 3 之立體化學係藉由圖2所示之單晶X射線繞射圖測定。實例 3 6 - 胺基 - 2 -[ S ( R )-( 乙基磺醯亞胺醯基 )]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 9 -( 對甲苯基甲基 ) 嘌呤 - 7 - 甲醯胺 ( 化合物 4 )

步驟 1 ： 1 -( 異氰酸酯基甲基 )- 4 - 甲基苯之製備

在氮氣下，在-78℃下向三光氣(40.5 g，136.3 mmol)於無水DCM (1.2 L)之溶液中逐滴添加對甲苯基甲胺(50.0 g，413.2 mmol)及Et₃ N(83.4 g，826.4 mmol)於DCM(800 mL)中之溶液。在攪拌1小時之後，使反應混合物升溫至20℃且再攪拌12小時。用DCM(2.0 L)稀釋混合物且藉由過濾移除固體。真空濃縮濾液。藉由蒸餾(沸點150℃，10 mmHg)純化殘餘物，獲得呈無色油狀之1-(異氰酸酯基甲基)-4-甲基苯(30.0 g，化合物 4a )。步驟 2 ： 5 - 胺基 - 1 -( 4 - 甲基苄基 )- 2 - 側氧基 - 2 , 3 - 二氫 - 1H - 咪唑 - 4 - 甲腈之製備

在室溫下，向胺基丙二腈4-甲基苯磺酸酯(32.7 g，129.5mmol)於無水THF(800 mL)之溶液中添加1-(異氰酸酯基甲基)-4-甲基苯(20.0 g，化合物 4a )及DIPEA (12.2 g，94.2 mmol)。在20℃下攪拌16小時之後，真空濃縮反應物且將殘餘物傾入水(500 mL)中且藉由過濾收集所得灰色固體。用EtOAc (300 mL)萃取濾液3次。分離之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物與灰色固體合併。向合併之固體中添加THF(200 mL)及氫氧化鈉水溶液(300 mL，1N )。在50℃下將混合物攪拌1小時，冷卻至室溫，用15%硫酸氫鈉中和且用EtOAc (500 mL)萃取3次，分離之有機層用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮，獲得呈灰色固體狀之5-胺基-1-(4-甲基苄基)-2-側氧基 -2,3-二氫-1H -咪唑-4-甲腈(26.6 g，化合物 4b )，其不經進一步純化即用於下一步驟。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 229.2。步驟 3 ： 6 - 胺基 - 9 -( 對甲苯基甲基 )- 2 - 巰基 - 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

向5-胺基-1-(4-甲基苄基)-2-側氧基 -2,3-二氫-1H -咪唑-4-甲腈(27.0 g，化合物 4b )於THF(500 mL)中之溶液逐滴添加苯甲醯基異硫氰酸酯(48.3 g)。在20℃下攪拌16小時之後，真空濃縮反應混合物。用THF (200 mL)濕磨殘餘物且藉由過濾收集所得沈澱物。向所獲得之沈澱物於THF (200 mL)中之溶液中添加氫氧化鈉水溶液(70 mL，2N )。使混合物在80℃下回流20小時，且隨後使用15%硫酸氫鉀水溶液酸化至pH 5且藉由過濾收集所得沈澱物，獲得呈黃色固體狀之6-胺基-9-(對甲苯基甲基)-2-巰基-7H -嘌呤-8-酮(20.0 g，化合物 4c )。產物不經進一步純化即用於下一步驟。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 288。步驟 4 ： 6 - 胺基 - 2 - 乙基硫基 - 9 -( 對甲苯基甲基 )- 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

向6-胺基-9-(對甲苯基甲基)-2-巰基-7H -嘌呤-8-酮(19.0 g，化合物 4c )於DMF (150 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(13.7 g，99.3 mmol)，隨後添加碘乙烷(7.2 g，46.3 mmol)。在25℃下攪拌16小時之後，將混合物傾入水(800 mL)中，分離出所得沈澱物且乾燥，獲得呈黃色固體狀之粗產物6-胺基-2-乙基硫基-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(13.0 g，化合物 4d )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]： 316.1。步驟 5 ： 6 - 胺基 - 2 - 乙基亞磺醯基 - 9 -( 對甲苯基甲基 )- 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

在0℃下，向6-胺基-2-乙基硫基-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(8.8 g，化合物 4d )於DMF (100 mL)中之溶液中逐滴添加於DMF (20.0 mL)中之m-CPBA (8.7 g，50.0 mmol)。在此溫度下攪拌2小時之後，將反應混合物傾入水(400 mL)中。過濾所得黃色沈澱物，用MTBE (50 mL)洗滌且乾燥，獲得呈黃色固體狀之6-胺基-2-乙基亞磺醯基-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(3.5 g，化合物 4e )。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 332.2。步驟 6 ： 6 - 胺基 - 2 -( 乙基磺醯亞胺醯基 )- 9 -( 對甲苯基甲基 )- 7H - 嘌呤 - 8 - 酮之製備

在55℃下，向6-胺基-2-乙基亞磺醯基-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(4.3 g，化合物 4e )於伊頓試劑(30.0 mL)中之溶液中分數份添加NaN₃ (2.1 g，32.0 mmol)。在55℃下攪拌30 min之後，在0℃下將反應混合物傾入2 M氫氧化銨溶液(200 mL)中，過濾所得黃色沈澱物。藉由製備型HPLC純化粗產物，得到呈白色固體狀之6-胺基-2-(乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(2.0 g，化合物 4f )。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )d ppm: 10.53 (s, 1 H), 7.24 (d,J = 8.03 Hz, 2 H), 7.13 (d,J = 8.03 Hz, 2 H), 6.94 (br. s., 2 H), 4.91 (s, 2 H), 4.03 (s, 1 H), 3.36 - 3.41 (m, 2 H), 2.26 (s, 3 H), 1.18 (t,J = 7.28 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 347。使用甲醇5%-40% (0.05% DEA)/CO₂ 於ChiralPak AD-3管柱上藉由對掌性HPLC分離化合物 4f ，得到呈白色固體狀之化合物 4f - A (較快溶離，56.8 mg)及化合物 4f - B (較慢溶離，56.7 mg)。

化合物 4f-A ：¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )d ppm: 10.52 (br. s., 1 H), 7.23 (d,J = 8.0 Hz, 2 H), 7.13 (d,J = 7.9 Hz, 2 H), 6.94 (br. s., 2 H), 4.90 (s, 2 H), 4.03 (s, 1 H), 3.42 - 3.33 (m, 2 H), 2.25 (s, 3 H), 1.17 (t,J = 7.3 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 347。

化合物 4f-B ：¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )d ppm: 10.56 (br. s., 1 H), 7.23 (d,J = 8.0 Hz, 2 H), 7.13 (d,J = 8.0 Hz, 2 H), 6.95 (br. s., 2 H), 4.90 (s, 2 H) 4.03 (s, 1 H), 3.44 - 3.29 (m, 2 H), 2.25 (s, 3 H), 1.17 (t,J = 7.3 Hz, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 347。步驟 6 ： 6 - 胺基 - 2 -[ S ( R )- 乙基磺醯亞胺醯基 ]- N - 甲基 - 8 - 側氧基 - N - 丙基 - 9 -( 對甲苯基甲基 ) 嘌呤 - 7 - 甲醯胺之製備

向(R )-6-胺基-2-(乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮(200.0 mg，化合物 4f - A )於DIPEA/Py (v/v=1/1，3.0 mL)中之懸浮液中逐滴添加N -甲基-N -丙基-胺甲醯氯(308 mg，2.28 mmol)。在25℃下攪拌2小時之後，用水稀釋反應混合物，用EtOAc (10 mL)萃取3次。用硫酸鈉乾燥合併之有機層，過濾且濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，獲得呈白色固體狀之甲基(丙基)胺基甲酸6-胺基-2-[S(R )-(乙基磺醯亞胺醯基)]-9-(4-甲基苄基)-9H -嘌呤-8-基酯(58.1 mg，化合物 4 )。¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )δ ppm: 7.28 (d,J = 7.8 Hz, 2 H), 7.15 (d,J = 7.8 Hz, 2 H), 6.88 (br. s., 2 H), 5.03 - 4.87 (m, 2 H), 4.19 (s, 1 H), 3.61 - 3.36 (m, 4 H), 3.11 - 2.96 (m, 3 H), 2.26 (s, 3 H), 1.72 - 1.45 (m, 2 H), 1.20 (t,J = 7.2 Hz, 3 H), 0.97 - 0.65 (m, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 446。

化合物 4 - a 係以類似於化合物 4 步驟 6 之方式，藉由使用6-胺基-2-(乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮( 化合物 4f - B ) 代替((R )-6-胺基-2-(乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H -嘌呤-8-酮( 化合物 4f - A ) 來製備。獲得呈白色固體狀之6-胺基-2-[S(S )-乙基磺醯亞胺醯基]-N -甲基-8-側氧基 -N -丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺(化合物 4 - a ，40.1 mg)：¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d₆ )δ ppm: 7.28 (d,J = 7.5 Hz, 2 H), 7.15 (d,J = 7.5 Hz, 2 H), 6.89 (br. s., 2 H), 5.03 - 4.86 (m, 2 H), 4.19 (s, 1 H), 3.49 - 3.37 (m, 4 H), 3.08 - 3.00 (m, 3 H), 2.27 (s, 3 H), 1.70 - 1.48 (m, 2 H), 1.20 (t,J = 7.2 Hz, 3 H), 0.95 - 0.71 (m, 3 H)。MS觀測值(ESI⁺ ) [(M+H)⁺ ]: 446.3。化合物 4 - a 之立體化學係藉由圖3所示之單晶X射線繞射圖測定。實例 4 HEK293 - Blue - hTLR - 7 細胞分析 ：穩定的HEK293-Blue-hTLR-7細胞株係購自InvivoGen (目錄號：hkb-htlr7，San Diego, California, USA)。此等細胞經設計以藉由監測NF-κB之活化來研究人類TLR7之刺激。將分泌之胚胎鹼性磷酸酶(SEAP)的報導基因置於與五個NF-κB及AP-1結合位點融合之IFN-β最小啟動子之控制下。在用TLR7配位體刺激HEK-Blue hTLR7細胞後，藉由活化NF-κB及AP-1來誘導SEAP。使用QUANTI-Blue™套組(目錄號：rep-qb1, Invivogen, San Diego, Ca, USA)在640 nm波長下測定細胞培養物上清液中之SEAP活性。此類報導子分析已廣泛用於評估TLR7促效作用(Tsuneyasu Kaisho及Takashi Tanaka, Trends in Immunology, 第29卷, 第7期, 2008年7月, 第329頁.sci；Hiroaki Hemmi等人, Nature Immunology 3, 196 - 200 (2002))。具體而言，在96孔盤中含有4.5 g/L葡萄糖、50 U/mL青黴素(penicillin)、50 mg/mL鏈黴素(streptomycin)、100 mg/mL Normocin、2 mM L-麩醯胺酸、10% (v/v)熱滅活胎牛血清之杜爾貝科氏改良型伊格爾培養基(Dulbecco's Modified Eagle's medium；DMEM)中，將密度為250,000至450,000個細胞/毫升且體積為180 µL之HEK293-Blue-hTLR7細胞培育24小時。隨後，在37℃下，將細胞與20 μL測試化合物之連續稀釋液一起在CO₂ 恆溫箱中培育20小時。隨後，在37℃下，將20 µL來自各孔之上清液與180 µL Quanti-Blue受質溶液一起培育2小時且使用分光光度計在620至655 nm下讀取吸光度。化合物 4 及化合物 3 分別有效轉化為活性部分化合物 4f - A 及化合物 1e - A 。如表1中所示，在HEK293-hTLR7分析中化合物 4f - A 及化合物 1e - A 針對活性TLR7之效力分別為0.11 µM及0.071 µM。化合物 1 及化合物 2 分別有效轉化為活性部分化合物 1e - A 及化合物 1e - B ，且在HEK293-hTLR-7分析中化合物 1e - A 及化合物 1e - B 針對活性TLR7之效力分別為0.071 µM及0.085 µM。因為ASIP化合物之活性部分在活體外活化hTLR7需要低於微莫耳濃度，所以此類格外高之效力允許進行評估且使得意外地發現每週或每兩週單獨或與蛋白殼抑制劑組合投與此等化合物之活體內抗病毒功效。表1：在HEK293-hTLR-7分析中化合物(活性形式及前藥)之活性

實例 5 TLR7 促效劑 ( 化合物 4 ) 與 HBV 蛋白殼組裝抑制劑 ( 化合物 5 ) 之組合強力地減少 AAV - HBV 小鼠模型中之 HBV DNA 及 HBsAg 動物模型 4週齡之雄性C57BL/6小鼠(無特定病原體)係購自中國科學院上海實驗動物中心(Shanghai Laboratory Animal Center of Chinese Academy of Sciences；SLAC)且遵循機構動物護理準則(Institutional Animal Care guideline)，在動物護理設施中單獨通氣之籠子中於控制溫度及光條件下圈養。AAV-HBV病毒係購自北京五加和分子醫學研究所(Beijing FivePlus Molecular Medicine Institute) (Beijing, China)。此重組病毒攜帶包裝在AAV血清型8 (AAV8)蛋白殼中之HBV基因組之1.3個複本。經由尾靜脈注射，向C57BL/6小鼠注射200 µL在生理食鹽水緩衝液中稀釋之重組病毒。在3至4週之後，對動物抽血以監測血清中之HBV基因組DNA及表面抗原(HBsAg)，且隨後根據此等HBV生物標記物隨機分組。HBV 生物標記物之量測 使用CLIA套組(Autobio Diagnostics Co., Ltd, Zhengzhou, China)，根據製造商之說明書量測血清HBsAg。HBsAg之偵測下限(LLOQ)係0.05 IU/mL。將血清稀釋500倍用於獲得在標準曲線之線性範圍內之值。使用MagNA Pure 96 DNA及Viral NA小體積套組(Roche)，遵循製造商之說明書，提取血清HBV DNA。藉由即時定量PCR (qPCR)，使用特異性擴增及偵測自核苷酸2969至3096之128bp HBV基因組區域的HBV特異性引子及探針集來分析DNA樣品。引子及探針之序列如下所示：正向引子：AAGAAAAACCCCGCCTGTAA (SEQ ID 1)；反向引子：CCTGTTCTGACTACTGCCTCTCC (SEQ ID 2)； HBV探針：5'TAMRA-CCTGATGTGATGTTCTCCATGTTCAGC-BHQ2-3' (SEQ ID 3)。使用抗HBs CLIA套組(Antobio, Zhengzhou, China)，根據製造商之說明書且略加修改，檢查小鼠血清中之抗HBs抗體。在室溫下，將約15 μL經稀釋(1:3)之小鼠血清樣品解凍10分鐘。用30 μL PBS進一步稀釋6 μL樣品以製備最終稀釋液1:18進行抗體測試。在經稀釋之未處理小鼠血清(用PBS以1:18稀釋)中，使用單株小鼠抗體抗B型肝炎病毒表面抗原(Ad/Ay)抗體[S35] (Abcam ab20402)製作標準曲線。將1 μL之1 mg/ml抗HBs抗體添加至500 μL經稀釋之小鼠血清以製備最終濃度為2000 ng/ml之標準1。隨後將50 μL標準品1添加至150 μL經稀釋之小鼠血清中以製備標準2 (1:4稀釋)。該測試需要7點標準。標準7之最終濃度為(0.488 ng/ml)。空白血清用作背景對照。將25 μL經稀釋之血清樣品/標準/空白轉移到96孔盤中。在室溫下將樣品培育1小時，隨後用300 μL PBST洗滌3次。將0.5 mg/ml經生物素標記之山羊抗小鼠IgG (Mabtech 3825-6-250) 在PBS中稀釋至最終濃度1 μg/ml (1:500稀釋)。將50 μl經稀釋之抗小鼠IgG Bio添加至盤中，在室溫下培育1小時，隨後用300 μL PBST洗滌3次。將抗生蛋白鏈菌素-HRP (Mabtech 3310-9)在PBS中稀釋(1:250)。將50 μL經稀釋之抗生蛋白鏈菌素-HRP在室溫下培育1小時，隨後用300 μL PBST洗滌3次。混合受質A與受質B (AntuBio)。將50 μL混合物添加至盤中且培育10分鐘，隨後使用Envision微量盤讀取器進行發光讀取。抗HBsAb之偵測下限係36 ng/mL。利用SoftMax Pro (v5.4.1)軟體，藉由將發光原始資料擬合於抗HBsAb標準曲線上來計算抗HBsAb結果。使用小鼠IgG ELISPot Basic (HRP)套組(Mabtech 3825-2H)，利用脾細胞進行ELISPOT分析以偵測抗HBs分泌性B細胞。將50 μg (1 mg/ml) HBsAg (AYW) (Abcam Ab7374)在PBS中稀釋100倍至10 μg/ml。用15 μL之35%乙醇/孔處理PVDF板(Millipore, MSIP型)，持續最多1分鐘，隨後用200 μL ddH2O洗滌5次。將100 μL經稀釋之HBsAg添加至孔中且在4至8℃下培育隔夜。用200 μL無菌PBS洗滌板以移除過量抗體。添加200 μL含有10% FBS之RPMI1640且在37℃下培育2小時以阻斷板。將含新鮮脾臟之PBS轉移至含有5 ml 2% RPMI1640之gentle MACS C管(Milterny 130-096-334)中。隨後使樣品在程式m_spleen_03_02下經歷gentleMacs分離器處理。隨後使分離之混合物經由70 μM細胞過濾器過濾。使用15 ml之2% RPMI1640洗滌細胞過濾器。細胞在室溫下以300 xg離心5分鐘。添加1 ml ACK溶解緩衝液且在室溫下培育5分鐘以使紅血球溶解。添加15 ml之2% RPMI1640以洗滌細胞。細胞在室溫下以300 xg離心5分鐘且隨後再懸浮於5 ml完全RPMI1640中，隨後經由70 μM細胞過濾器過濾。藉由BioRad細胞計數器對細胞計數。將2×10⁶ 個細胞/200 μL添加至孔中且在37℃下培育隔夜。將細胞移至板中，隨後用200 μL PBS洗滌5次。將0.5 mg/ml經生物素標記之山羊抗小鼠IgG (Mabtech 3825-6-250)在含有0.5% FBS之PBS中稀釋至最終濃度為1 μg/ml (1:500稀釋)。將100 μl經稀釋之抗小鼠IgG Bio添加至板中，在室溫下培育2小時，隨後用200 μL PBS洗滌5次。將抗生蛋白鏈菌素-HRP(Mabtech 3310-9)在含有0.5% FBS之PBS中稀釋(1:200)。將100 μL經稀釋之抗生蛋白鏈菌素-HRP在室溫下培育1小時，隨後用300 μL PBS洗滌5次。將100 μL AEC受質溶液(BD 551951)添加至孔中且使其顯色直至出現明顯斑點(不到10分鐘)。藉由用ddH2O充分洗滌來停止顯色。使板乾燥且在顯微鏡AID ELISPOT下描畫斑點並計數。實驗設計及結果 如表2中所示，將總計20隻小鼠分為4組以進行研究。在第01組中，每隔一天(QOD)用媒劑治療動物，為期42天，且充當安慰劑對照組。在第02組中，每週一次(QW)給與10 mg/kg化合物 4 ，為期42天。化合物 5 在第03組中每日一次(QD)以20 mg/kg單獨給與，為期42天，或在第04組中與每週一次10 mg/kg化合物 4 組合給與。所有測試物均藉由經口管飼(PO)投與10 mL/kg之總給藥體積。在42天治療之後為42天之停止治療期。每週一次對動物下頜下抽血以收集血清直至研究結束。對血清樣品進行HBV生物標記物分析。在第84天研究結束時，亦收集小鼠脾臟以進行ELISPOT分析以偵測產生抗HBs抗體之B細胞。表2. 在AAV-HBV小鼠模型中化合物4及5之組合研究設計

註釋：Tx Grp=治療組；Vol=體積；p.o.=經口管飼；QD=每日一次；QOD=每隔一天一次；QW=每週一次；No. An=動物數目如圖4中所示，單獨每週一次10 mg/kg化合物 4 及每日一次20 mg/kg化合物 5 之單藥療法在治療42天之後導致HBV DNA及HBsAg顯著減少。此外，化合物 4 及化合物 5 之組合展現甚至更多的抗病毒益處及更大的HBsAg減少。在所有接受組合療法之動物中，在治療42天之後，血清中之HBsAg減少至低於定量下限(LLOQ)之不可偵測含量，且此類HBsAg損失可持續整個42天之停止治療期。除HbsAg減少外，所有此等動物所產生之抗HBs抗體含量亦顯著高於其他組。在停止治療期結束時，在來自接受組合治療之動物之脾臟中仍可偵測到活躍地產生抗HBs抗體之B細胞(如圖4-D中所示)。因此，此類組合療法在慢性HBV感染患者中可能實現HBsAg損失及抗HBs血清轉化。實例 6 TLR7 促效劑 ( 化合物 3 ) 與 HBV 蛋白殼組裝抑制劑 ( 化合物 5 ) 之組合強力地減少 AAV - HBV 小鼠模型中之 HBV DNA 及 HBsAg 使用與實例5中所描述相同的AAV-HBV小鼠模型及HBV生物標記物量測方法評估化合物 3 及化合物 5 之組合，以及其單藥療法。如表3中所示，將總計24隻小鼠分為4組進行研究。在第01組中，每日一次(QD)用媒劑治療動物，歷時42天，且充當安慰劑對照組。在第02組中，每隔一週一次(QOW)給與1 mg/kg化合物 3 ，為期42天。化合物 5 在第03組中每日一次(QD)以20 mg/kg單獨給與，為期42天，或在第04組中與每隔一週一次1 mg/kg化合物 3 組合給與。所有測試物均藉由經口管飼(PO)投與10 mL/kg之總給藥體積。在42天治療之後為45天之停止治療期。每週一次對動物下頜下抽血以收集血清直至研究結束。對血清樣品進行HBV生物標記物分析。表3. 在AAV-HBV小鼠模型中化合物3及5之組合研究設計

縮寫：Tx Grp=治療組；Vol=體積；p.o.=經口管飼；QD=每日一次；QOD=每隔一天一次；QW=每週一次；No. An=動物數目如圖5中所示，單獨每隔一週一次1 mg/kg化合物 3 及每日一次20 mg/kg化合物 5 之單藥療法在治療42天之後導致HBV DNA及HBsAg顯著減少。化合物 3 及化合物 5 之組合展現身之更多的抗病毒益處及更大的HBsAg減少。在組合療法組中，在治療42天之後，6隻動物中有4隻之血清中具有不可偵測之HBsAg含量(低於LLOQ)，且此類HBsAg損失可持續整個45天之停止治療期。除HBsAg減少外，用組合療法治療之組亦展現抗HBs抗體之含量顯著高於其他組。因此，此類組合療法在慢性HBV感染患者中可能實現HBsAg損失及抗HBs血清轉化。

圖 1 化合物1之單晶X射線繞射圖。圖 2 化合物3之單晶X射線繞射圖。圖 3 化合物4-a之單晶X射線繞射圖。圖 4 展示感染AAV-HBV之小鼠之HBV DNA(圖4A)、HBsAg(圖4B)及抗HBs抗體含量(圖4C)，該等小鼠用媒劑、每週一次之10 mg/kg化合物4、每日一次之20 mg/kg化合物5、及組合療法治療，為期42天，隨後為42天之停止治療期。結果展示為平均值±SEM。LLOQ：定量下限。圖 4 - D 展示在實例5中在第84天收集之脾臟，用以藉由ELISPOT鑑別產生抗HBs抗體之B細胞。Combo組中之斑點表示存在活躍地產生抗HBs抗體之B細胞。圖 5 展示感染AAV-HBV之小鼠之HBV DNA(圖5A)、HBsAg(圖5B)及抗HBs抗體含量(圖5C)，該等小鼠用媒劑、每隔一週一次之1 mg/kg化合物3、每日一次之20 mg/kg化合物5、及組合療法治療，為期42天，隨後為45天之停止治療期。結果展示為平均值±SEM。LLOQ：定量下限。

Claims

一種醫藥組合物，其包含在醫藥學上可接受之載劑中之TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑，其中該TLR7促效劑係式(I)化合物：
其中R¹係C_1-6烷基；R²係苯甲基，該苯甲基未經取代或經一個、兩個或三個獨立地選自鹵素及C_1-6烷基之取代基取代；R³係-NR⁴R⁵，其中R⁴係C_1-6烷基或C_1-6烷氧基C_1-6烷基；R⁵係(C_1-6烷基)₂NCOOC_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧羰基(C_1-6烷基)胺基C_1-6烷基、C_1-6烷氧羰基(苯基)C_1-6烷基、C_1-6烷氧羰基C_1-6烷基、C_1-6烷氧羰基氧基C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基(C_1-6烷基)胺基C_1-6烷基或吡咯啶基胺甲醯基氧基C_1-6烷基；或R⁴及R⁵與其所連接之氮一起形成雜環基；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；或其中該TLR7促效劑係式(II)化合物：
其中R⁴係C_1-6烷基、鹵基C_1-6烷基、C_3-7環烷基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基或吡咯啶基C_1-6烷基；R⁵係C_1-6烷基、苯基C_1-6烷基、吡啶基C_1-6烷基或嘧啶基C_1-6烷基，該苯基C_1-6烷基、吡啶基C_1-6烷基及嘧啶基C_1-6烷基未經取代或經一個、兩個或三個獨立地選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、氰基、羧基、胺甲醯基、鹵基C_1-6烷基、C_1-6烷基磺醯基、C_1-6烷氧羰基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基胺基羰基、吡咯啶基羰基及哌啶基羰基之取代基取代；R⁶係H；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；以及其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係式(III)化合物：
其中R⁷係氫、鹵素或C_1-6烷基；R⁸係氫或鹵素；R⁹係氫或鹵素；R¹⁰係C_1-6烷基；R¹¹係氫、羥基C_1-6烷基、胺基羰基、C_1-6烷氧羰基或羧基；R¹²係氫、C_1-6烷氧羰基或羧基-C_mH_2m-；X係羰基或磺醯基；Y係-CH₂-、-O-或-N(R¹³)-，其中R¹³係氫、C_1-6烷基、鹵基C_1-6烷基、C_3-7環烷基-C_mH_2m-、C_1-6烷氧羰基-C_mH_2m-、-C_tH_2t-COOH、-鹵基C_1-6烷基-COOH、-(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基-COOH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-COOH、-C_3-7環烷基-C_mH_2m-COOH、-C_mH_2m-C_3-7環烷基-COOH、羥基-C_tH_2t-、羧基螺[3.3]庚基或羧基苯基-C_mH_2m-、羧基吡啶基-C_mH_2m-；W係-CH₂-、-C(C_1-6烷基)₂-、-O-或羰基；n為0或1；m為0至7；t為1至7；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項1之醫藥組合物，其中該TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺；或6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項1之醫藥組合物，其中該TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項1之醫藥組合物，其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項1之醫藥組合物，其中該組合物由在醫藥學上可接受之載劑中之以下組成： 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫- 1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4- 二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。
如請求項1之醫藥組合物，其中該組合物由在醫藥學上可接受之載劑中之以下組成：6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基- 1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。
如請求項1至6中任一項之醫藥組合物，其中該組合物另外包含一或多種其他抗病毒劑。
如請求項7之醫藥組合物，其中該等其他抗病毒劑係選自拉米夫定(lamivudine)、阿丹弗(adefovir)、田諾弗(tenofovir)、替比夫定(telbivudine)及因提弗(entecavir)。
一種TLR7促效劑用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑的用途，其中該藥劑係用於與HBV蛋白殼組裝抑制劑一起投與，以及其中該TLR7促效劑係如請求項1所定義之式(I)或式(II)之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體，以及其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係如請求項1所定義之式(III)化合物或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項9之用途，其中該藥劑係用於與該HBV蛋白殼組裝抑制劑以相同調配物或不同調配物共投與。
如請求項9或10之用途，其中該該藥劑係用於與該HBV蛋白殼組裝抑制劑藉由相同途徑或不同途徑向個體投與。
如請求項9或10之用途，其中該藥劑係用於與該HBV蛋白殼組裝抑制劑藉由非經腸或經口投與向個體投與。
如請求項9或10之用途，其中該藥劑係用於與該HBV蛋白殼組裝抑制劑同時或依序投與。
如請求項9或10之用途，其中該TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項9或10之用途，其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項9或10之用途，其中該藥劑另外包含一或多種其他抗病毒劑。
如請求項16之用途，其中該等其他抗病毒劑係選自拉米夫定、阿丹弗、田諾弗、替比夫定及因提弗。
如請求項9或10之用途，其中該TLR7促效劑及該HBV蛋白殼組裝抑制劑係在醫藥學上可接受之載劑中之：6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。
一種套組，其包含容器，該容器包含TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑，其中該TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；且其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項19之套組，其進一步包含無菌稀釋劑。
如請求項19或20之套組，其進一步包含藥品仿單，該藥品仿單包含印刷說明書，其指導用以治療或預防B型肝炎病毒感染之方法的TLR7促效劑與HBV蛋白殼組裝抑制劑之組合治療的使用。
如請求項19或20之套組，其中該容器中所用的該TLR7促效劑及該HBV蛋白殼組裝抑制劑係在醫藥學上可接受之載劑中之：6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。
一種TLR7促效劑或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體及HBV蛋白殼組裝抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體的用途，其係用於製造供治療或預防B型肝炎病毒感染用之藥劑，其中該藥劑包含有效第一量之TLR7促效劑或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；以及有效第二量之HBV蛋白殼組裝抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；或反之亦然，其中該TLR7促效劑係6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺； 6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮；或6-胺基-2-(S(R)-乙基磺醯亞胺醯基)-9-(對甲苯基甲基)-7H-嘌呤-8-酮；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體；且其中該HBV蛋白殼組裝抑制劑係3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或其醫藥學上可接受之鹽、對映異構體或非對映異構體。
如請求項23之用途，其中該TLR7促效劑及該HBV蛋白殼組裝抑制劑係在醫藥學上可接受之載劑中之：6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-N-乙基-2[S(S)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；6-胺基-2-[S(R)-乙基磺醯亞胺醯基]-N-甲基-8-側氧基-N-丙基-9-(對甲苯基甲基)嘌呤-7-甲醯胺及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸；或6-胺基-9-[(4-氯苯基)甲基]-2-(S(S)-乙基磺醯亞胺醯基)-7H-嘌呤-8-酮及3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-乙氧羰基-4-(3-氟-2-甲基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-3-側氧基-5,6,8,8a-四氫-1H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-2,2-二甲基-丙酸。
如請求項1至6中任一項之醫藥組合物，其係用作供治療或預防B型肝炎病毒感染用之抗病毒藥劑。
一種TLR7促效劑及HBV蛋白殼組裝抑制劑用於製造如請求項1至8中任一項之醫藥組合物之用途，其中該醫藥組合物係用於作為供治療或預防B型肝炎病毒感染用之抗病毒藥劑。