TWI634110B - ２-（５-溴-４-（４-環丙基萘-１-基）-４ｈ-１，２，４-三唑-３-基硫基）乙酸之製備 - Google Patents

Abstract

本發明描述合成式(I)之化合物的某些方法：

Description

2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸之製備

尿酸是黃嘌呤氧化之產物。尿酸代謝疾病包括(但不限於)紅血球增多症、骨髓化生、痛風、復發性痛風發作、痛風性關節炎、高尿酸血症、高血壓、心血管疾病、冠心病、勒-奈二氏症候群(Lesch-Nyhan syndrome)、Kelley-Seegmiller症候群、腎病、腎結石、腎衰竭、關節發炎、關節炎、尿石症、鉛中毒、副甲狀腺機能亢進、銀屑病或類肉瘤病。

化學化合物之大規模試驗工廠合成通常需要有效合成程序。本發明提供用於合成式(I)之化合物的某些規模可擴展的製程及方法： 其中：R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、-C₃-C₁₀環烯基、或R為抗衡離子；及Y為H、OH、NH₂、F、Cl、Br、或I。

本文所述之式(I)之化合物適用於治療尿酸代謝疾病。

於一態樣中，本文提供一種製備以下之方法(方法1)：

該方法包括使式(II)之化合物、或其鹽， 其中R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基，與N-溴琥珀醯亞胺(NBS)及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物：

於上述方法之一些實施例中，R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。於上述方法之一些實施例中，R為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基或香葉草基。

於上述方法之某些實施例中，R為甲基或乙基。於上述方法之一些具體實施例中，R為甲基。

於上述方法之一些實施例中，在介於約室溫與約32℃之間之溫度下攪拌該反應混合物持續至少12小時。

於上述方法之一些實施例中，該反應混合物檢測顯示式(II)之化合物1.5%之HPLC面積。

於上述方法之一些實施例中，該反應混合物檢測顯示式(II)之化合物0.2%之HPLC面積。

於上述方法之一實施例中，該方法進一步包括：(i)使該式(III)之化合物與氫氧化鈉溶液接觸以提供化合物4；及(ii)視情況使化合物4與酸接觸以提供化合物1。

於上述方法之其他實施例中，步驟(i)進一步包括視情況使化合物4自氫氧化鈉水溶液結晶。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括：(a)將化合物4溶解於水中並添加乙酸乙酯至該混合物；(b)使步驟(a)之雙相混合物與酸接觸並分離出有機相以提供化合物1。

於某些實施例中，步驟(b)之酸為鹽酸、氫溴酸、乙酸、硫酸、或磷酸。於一些具體實施例中，步驟(b)之酸為氫溴酸。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括使化合物1自乙酸乙酯再結晶。於此一實施例中，該方法進一步包括視情況添加正庚烷至該混合物。

本文提供化合物3，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

本文提供化合物3-A，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

本文提供可藉由上述方法獲得之化合物4。於一些實施例中，化合物4為特徵峰位於4.90、9.83、及25.29°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於一些實施例中，化合物4為結晶多晶型A型。

本文提供可藉由上述方法獲得之化合物1。

於一態樣中，本文提供化合物2之HPLC檢測面積不超出0.1%之化合物1

於一實施例中，藉由上述方法獲得化合物2不超出0.1%之化合物1。

於另一態樣中，本文提供化合物3 HPLC檢測面積不超出0.1%之化合物1。

於一實施例中，藉由上述方法獲得化合物3不超出0.1%之化合物1。

於另一態樣中，本文提供化合物2 HPLC檢測面積不超出0.1%、且化合物3 HPLC檢測面積不超出0.1%之化合物1。

於一些實施例中，化合物1為特徵峰位於10.32、18.84、及20.75°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於某些實施例中，化合物1為結晶 多晶型1型。於其他實施例中，化合物1為特徵峰位於10.46、18.76、及19.83°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於某些實施例中，化合物1為結晶多晶型2型。

於本文一些實施例中提供一種反應混合物，其包含式(II)之化合物、或其鹽 其中R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；溴化劑；及溶劑。

於上述反應混合物之一些實施例中，R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。於某些實施例中，溴化劑為N-溴琥珀醯亞胺(NBS)。於一些實施例中，溶劑為THF、DMF、乙腈、或MTBE。於某些實施例中，溶劑為THF。於上述反應混合物之其他或額外實施例中，製得式(III)之化合物， 其中R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；溶劑；及鹼。

於一些實施例中，製得式(III)之化合物，其中R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。

本文中所提供的一些實施例描述一種反應混合物，其包含式(III)之化合物 其中R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。

於上述反應混合物之一些實施例中，R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。於一些實施例中，溶劑為水。於其他或額外實施例中，酸為氫溴酸。於上述反應混合物之其他或額外實施例中，製得化合物4。

本文所提供的其他實施例描述一種反應混合物，其包含化合物4 溶劑；及酸。

於上述反應混合物之一些實施例中，酸為氫溴酸。於一些實施例中，溶劑為水。於上述反應混合物之其他或額外實施例中，製得化合物1。

於一態樣中，用於上述方法1中之式(II)之化合物係由方法(方法2)製得，該方法2包括使以下結構式之化合物：

與鹼、溶劑及式(IV)之化合物接觸： 其中X為鹵素、甲苯磺酸基、甲磺酸基、三氟甲磺酸基、或苯磺酸基，及R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；以提供式(II)之化合物：

於上述方法之一些實施例中，式(IV)之化合物係選自溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、氯乙酸甲酯、及氯乙酸乙酯。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括在介於約25℃與約40℃之間之溫度下攪拌反應混合物持續至少1小時。

於上述方法之一些實施例中，利用經冷卻之乙酸乙酯(EtOAc)與異丙醇之混合物洗滌包含式(II)之化合物之反應粗產物。

本文提供一種以下結構式之化合物：

本文提供具有至少98%之HPLC純度之化合物2。本文提供具有至少99%之HPLC純度之化合物2。

於一實施例中，化合物2、具有至少98%之HPLC純度之化合物2、或具有至少99%之HPLC純度之化合物2係由上述方法獲得。

本文提供一種以下結構式之化合物：

於一實施例中，化合物2-A係由上述方法獲得。

於本文一些實施例中提供一種反應混合物，其包含式(IV)之化合物：

其中X為離去基團；R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；化合物5；鹼；及溶劑。於上述反應混合物之一些實施例中，式(IV)之化合物為溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、氯乙酸甲酯、或氯乙酸乙酯。於一些實施例中，於上述反應混合物中製得式(II)之化合物 其中R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。於某些實施例中，於上述反應混合物中製得化合物2或2-A。

於一態樣中，用於上述方法2中之化合物5係由方法(方法3)製得，該方法3包括：(5-i)使以下結構式之化合物：

與硝酸、水及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-ii)使化合物7與氫、木炭載鈀、及一或多種溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-iii)使化合物8與酸接觸以提供化合物8之鹽； (5-iv)使步驟(5-iii)之化合物8之鹽與鹼、硫光氣及溶劑接觸且於約5℃下攪拌該混合物以提供以下結構式之化合物： (5-v)使化合物9與甲醯肼及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-vi)使化合物10與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物5：

於上述方法之一些實施例中，步驟(5-iii)中之酸係選自鹽酸、草酸及酒石酸。於上述方法之一具體實施例，步驟(5-iii)中之酸為草酸。

於上述方法之一實施例中，步驟(5-iv)中之化合物8之鹽為草酸鹽。

本文提供一種化合物8草酸鹽，其具有以下結構式：

於一種情況中，化合物8-A係由上述方法獲得。

於本文一些實施例中提供一種反應混合物，其包含化合物9、親核試劑及溶劑。

於上述反應混合物之一些實施例中，親核試劑為甲醯肼。於某些實施例中，於上述反應混合物中製得化合物10。

本文亦提供一種包含化合物10、鹼及溶劑之反應混合物。於一些實施例中，鹼為碳酸氫鉀、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸鈉、或碳酸銫。於某些實施例中，於本文所述反應混合物中製得化合物5。

於一態樣中，用於上述方法2中之化合物5係由方法(方法4)製得，該方法4包括： (5-i)使以下結構式之化合物：

與硝酸、水及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-ii)使化合物7與氫、木炭載鈀、及一或多種溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-iii-A)使化合物8與硫氰酸鈉、水及溶劑接觸，及於至少130℃之溫度下加熱該混合物以提供以下結構式之化合物： (5-iv-A)使步驟(5-iii-A)之化合物9與甲醯肼及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (5-vi)使步驟(5-iv-A)之化合物10與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物5：

本文提供一種以下結構式之化合物：

本文提供可藉由上述方法3或方法4獲得之化合物5。

本文提供可藉由上述方法3或方法4獲得之化合物9。

本文提供可藉由上述方法3或方法4獲得之化合物10。

本文提供具有以HPLC檢測面積計至少98%純度之化合物1。

本文提供具有以HPLC檢測面積計至少98%純度且由上述方法獲得之化合物1。於一實施例中，利用上述方法1、方法2及方法3製得化合物1。於另一實施例中，利用上述方法1、方法2及方法4製得化合物1。

於一態樣中，本文提供一種製備以下各者之方法(方法5)， 或該方法5包括：(i)使以下結構式之化合物

與鹼、溶劑及式(IV)之化合物接觸： 其中X為鹵素、甲苯磺酸基、甲磺酸基、三氟甲磺酸基、或苯磺酸基，及R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；以提供式(V)之化合物： (ii)在介於約14℃與約22℃之間之溫度下使式(V)之化合物與溴化銅(II)、亞硝酸鉀及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (iii)使在溶劑中之步驟(ii)之式(III)化合物溶液與氫氧化鈉水溶液接觸以提供以下結構式之化合物： (iv)視情況使步驟(iii)之化合物4之水溶液與酸接觸以提供含化合 物1之混合物。

於上述方法之一些實施例中，R為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基或香葉草基。

於上述方法之某些實施例中，R為甲基或乙基。於上述方法之一些具體實施例中，R為甲基。

於上述方法之一些實施例中，步驟(i)之式(IV)之化合物係選自溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、氯乙酸甲酯、及氯乙酸乙酯。

於上述方法之一些實施例中，步驟(iv)之酸為鹽酸、氫溴酸、乙酸、硫酸、或磷酸。於上述方法之一些具體實施例中，步驟(iv)之酸為氫溴酸。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括過濾步驟(iv)之混合物以提供呈固體之化合物1。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括以乙酸乙酯萃取步驟(iv)之混合物及移除乙酸乙酯以提供呈固體之化合物1。

於上述方法之一些實施例中，該方法進一步包括使化合物1自乙酸乙酯再結晶。

本文提供可藉由上述方法獲得之化合物1。

本文提供化合物3，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

本文提供化合物3-A，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

本文提供可藉由上述方法獲得之化合物4。

本文提供化合物12，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

本文提供化合物12-A，其可藉由上述方法獲得，且具有以下結構式：

於另一態樣中，上述任何方法適用於合成任何式(I)之化合物。

於一態樣中，本文提供一種製備式(III)之化合物的方法(方法1a)： 該方法包括使式(II)之化合物： 其中R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；與N-溴琥珀醯亞胺(NBS)及溶劑接觸。於一些實施例中，R為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基或香葉草基。於某些實施例中，R為甲基或乙基。於一些實施例中，攪拌式(II)之化合物、NBS及溶劑持續至少12小時，且係在介於約室溫與約32℃之間之溫度下攪拌。

於上述方法1a之一些實施例中，該方法進一步包括使式(III)之化合物與氫氧化鈉溶液接觸以提供化合物4：

於某些實施例中，該方法包括使化合物4自氫氧化鈉水溶液結晶。於替代實施例中，該方法進一步包括使化合物4與酸接觸以提供化合物1：

於某些實施例中，酸為氫溴酸。於另一替代實施例中，該方法進一步包括(a)將化合物4溶解於水中且添加乙酸乙酯至該混合物；及 (b)使步驟(a)之雙相混合物與酸接觸且分離出有機相以提供化合物1。

本文提供一種藉由根據上述方法1a之方法獲得之化合物3或化合物3-A：

本文提供藉由根據上述方法1a之方法獲得之化合物4：

本文提供藉由根據上述方法1a之方法獲得之化合物1：。於一些實施例中，化合物1為特徵峰位於10.46、18.76、及19.83°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於某些實施例中，化合物1為結晶多晶型2型。

於另一態樣中，本文提供一種反應混合物，其包含式(II)之化合物： 其中R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環 烯基；溴化劑；及溶劑。於一些實施例中，溴化劑為N-溴琥珀醯亞胺(NBS)。

於本文另一態樣中，提供一種反應混合物，其包含式(III)之化合物 其中R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基；鹼；及溶劑。於一些實施例中，鹼為氫氧化鈉。

於另一態樣中，本文提供一種反應混合物，其包含化合物4： 酸；及溶劑。於一些實施例中，酸為氫溴酸。

於一態樣中，本文提供一種方法(方法2a)，其中用於上述方法1a中之式(II)之化合物係由一種方法製得，該方法包括：使化合物5： 與鹼、溶劑、及式(IV)之化合物接觸： 其中：X為鹵素、甲苯磺酸基、甲磺酸基、三氟甲磺酸基、或苯磺酸基；及R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、或-C₃-C₁₀環烯基。

於一些實施例中，式(IV)之化合物係選自溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、氯乙酸甲酯、及氯乙酸乙酯。於某些實施例中，以經冷卻之乙酸乙酯與異丙醇之混合物洗滌包含式(II)之化合物之反應粗產物。

本文亦提供化合物2或化合物2-A：

於某些實施例中，化合物2或化合物2-A係由根據上述方法2a之方法獲得。

於另一態樣中，本文提供一種反應混合物，其包含化合物5： 式(IV)之化合物： 其中：X為離去基團；及R為-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基或-C₃-C₁₀環烯基； 鹼；及溶劑。於一些實施例中，式(IV)之化合物為溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、氯乙酸甲酯、或氯乙酸乙酯。

於另一態樣中，本文提供一種方法(方法3a)，其中用於上述方法2a中之化合物5係由一種方法製得，該方法包括：(5-i)使化合物6： 與硝酸、水及溶劑接觸以提供化合物7： (5-ii)使化合物7與氫、木炭載鈀、及一或多種溶劑接觸以提供化合物8： (5-iii)使化合物8與酸接觸以提供化合物8之鹽；(5-iv)使步驟(5-iii)之化合物8之鹽與鹼、硫光氣及溶劑接觸以提供化合物9： (5-v)使化合物9與甲醯肼及溶劑接觸以提供化合物10： (5-vi)使化合物10與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物5：

本文亦提供一種選自化合物I-X之化合物：2-(4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物I)；2-(4-(4-環丙基萘-1-基)-5-羥基-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物II)；2-(5-胺基-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物III)；2-(5-溴-4-(1-環丙基萘-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物IV)；2-(5-溴-4-(4-甲基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物V)；2-(5-溴-4-(4-丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物VI)；2-(5-溴-4-(5-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物VII)；2-(5-溴-4-(萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物VIII)；2-(5-氯-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(化合物IX)；及4-(5-(羧甲基硫基)-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基胺基)-4-側氧基丁酸(化合物X)。於一些實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸之一試樣包含小於約2%、小於約1.5%、小於約1.0%、小於約0.5%、小於約0.4%、小於約0.3%、小於約0.2%、小於約0.1%、小於約0.05%、小於0.02%之任一種化合物I-X。於較佳之實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H- 1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸之一試樣包含小於約0.5%之任一種化合物I-X。

以引用的方式併入

於本說明書中提及的所有公開案、專利案、及專利申請案係以引用方式併入，該引用的程度就如同已特定地及個別地將各個公開案、專利案或專利申請案以引用的方式併入一般。

在隨附申請專利範圍中陳述本發明之新穎特徵之特殊性。藉由參考以下陳述其中利用本發明原理之例示性實施例之具體說明、及以下附圖將更佳地明瞭本發明之特徵及優點，附圖為：圖1顯示多晶型1型之例示性X射線粉末繞射圖樣(原始數據)。

圖2顯示多晶型1型之例示性X射線粉末繞射圖樣(減去背景且剝離Kα2)。

圖3顯示多晶型1型之例示性示差掃描熱量分析圖。

圖4顯示多晶型1型之例示性熱重分析(a)代表1及(b)代表2。

圖5顯示多晶型2型之例示性X射線粉末繞射圖樣(原始數據)。

圖6顯示多晶型2型之例示性X射線粉末繞射圖樣(減去背景且剝離Kα2)。

圖7顯示多晶型1型(較下方)及2型(較上方)之例示性X射線粉末繞射圖樣輪廓圖。

圖8顯示多晶型2型之例示性示差掃描熱量分析圖。

圖9顯示多晶型2型之例示性¹H NMR(DMSO-d₆)光譜。

圖10顯示多晶型2型之例示性HPLC跡線。

圖11顯示多晶型2型之例示性熱重分析跡線。

圖12顯示多晶型1型及2型之例示性重力蒸氣吸附研究。

圖13顯示多晶型A型之例示性X射線粉末繞射圖樣。

圖14顯示多晶型A型之例示性示差掃描熱量分析圖。

圖15顯示多晶型A型之例示性紅外光譜。

圖16顯示多晶型A型之例示性拉曼光譜(Raman spectrum)。

圖17顯示多晶型B型之例示性X射線粉末繞射圖樣。

圖18顯示多晶型B型之例示性示差掃描熱量分析圖。

圖19顯示多晶型B'型之例示性X射線粉末繞射圖樣。

圖20顯示多晶型B'型之例示性示差掃描熱量分析圖。

大規模製造臨床上有用的候選藥物通常要求優良製造規範(Good manufacturing practice)。本文提供製備式(I)之化合物的某些製程及方法： 其中：R為H、-C₁-C₂₀烷基、-C₁-C₂₀烯基、-C₃-C₁₀環烷基、-C₃-C₁₀環烯基，或R為抗衡離子；及Y為H、OH、NH₂、F、Cl、Br、或I。

本文所提供的合成製程及方法克服某些製造缺陷且容許合成高純度化合物同時減少廢棄物及/或副產物，及減少腐蝕性物質之使用。合成本文所述之式(I)化合物之改良製程及方法容許符合優良製造規範(GMP)指導方針之大規模生產。

某些化學術語

除非另外定義，否則本文中所用的所有技術及科學術語具有與為熟習所主張標的所屬技藝者通常所明瞭相同的含義。假若本文之術 語存有複數種定義，則以此部分中之其等定義為準。

應明瞭前述一般說明及以下具體說明僅係例示性及說明性而不限制所主張的任何標的。於本申請案中，除非明文另作規定，否則使用單數時包括複數。必須注意的是，如本說明書及隨附申請專利範圍中所用，除非本文清楚地另作指明，否則單數形式「一」、「一個」及「該」包括複數指示物。亦應注意除非另作敘述，否則使用「或」時意指「及/或」。此外，使用術語「包括(including)」以及其他形式(諸如「包括(include)」、「包括(includes)」、及「包括於(included)」)係非限制性地。

標準化學術語之定義可參見參考文獻(包括Carey與Sundberg之「ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY第4版」第A(2000)及B(2001)卷，Plenum Press，紐約)。除非另作指明，否則採用屬於本技藝所習知的質譜分析、NMR、HPLC、IR及UV/Vis光譜及藥理學方法。除非提供特殊定義，否則本文中所採用的命名法為標準定義。標準技術可用於化學合成、化學分析、醫藥製造、調配、及輸送、及個體之治療。可例如使用製造商規格之套組或如通常在本技藝中所完成或如本文所述進行反應及純化技術。前述技術及程序一般可以為相關技藝所熟知且如本說明書全文所引用及論述之各種一般及較具體參考文獻中所述之習知方法進行。於本說明書全文中，可由熟習相關領域者選擇基團及其取代基以提供穩定部分及化合物。

在取代基由其從左到右書寫之習知化學式指示之情況下，其等取代基同等地包含由從右到左書寫結構所獲得之化學上相同的取代基。作為一非限制性實例，-CH₂O-等同於-OCH₂-。

除非另外注明，否則使用一般化學術語(諸如(但不限於)「烷基」、「胺」、「芳基」)係等同於其視情況經取代之形式。例如，如本文所用「烷基」包括視情況經取代之烷基。

於一些實施例中，本文中提出的化合物具有一或多個立構中心。於一些實施例中，立構中心係在R組態、S組態、或其組合中。於一些實施例中，本文中提出的化合物具有一或多個雙鍵。於一些實施例中，本文中提出的化合物具有一或多個雙鍵，其中各雙鍵以E(反式)或Z(順式)組態、或其組合存在。應理解一特定立體異構體、區域異構體、非對映異構體、對映異構體或差向異構體之陳述包括所有可能的立體異構體、區域異構體、非對映異構體、對映異構體或差向異構體及其混合物。因此，本文中提出的化合物包括所有不同組態之立體異構體、區域異構體、非對映異構體、對映異構體、及差向異構體以及其對應混合物。用於反轉或留下未改變特定立構中心之技術、及用於解析立體異構體之混合物之其等技術參見例如Furniss等人(編輯)之VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY最新第5版，Longman Scientific and Technical Ltd.，Essex，1991，809-816；及Heller之Acc.Chem.Res. 1990,23,128。

本文所用術語「部分」、「化學部分」、「基團」及「化學基團」係指分子之特定片段或官能基。化學部分通常視為包埋於或附接至分子之化學實體。

如本文所用，術語「反應物」係指用於建立共價鍵聯之親核試劑或親電子劑。

術語「鍵」或「單鍵」係指在藉由鍵結合之原子被認為是較大子結構之一部分時介於兩原子、或兩部分之間之化學鍵。

術語「視需要」或「視情況」意指於隨後描述之事件或情況可能發生或可能不會發生，及該描述包括其中該事件或情況發生之實例及其中該事件或情況不發生之實例。例如，「視情況經取代之烷基」意指如下文定義之「烷基」或「經取代之烷基」中任何一者。此外，視情況經取代之基團可為未經取代(例如，-CH₂CH₃)、完全取代(例 如，-CF₂CF₃)、經單取代(例如，-CH₂CH₂F)或介於完全取代及單取代之間之任何水平的取代(例如，-CH₂CHF₂、-CH₂CF₃、-CF₂CH₃、-CFHCHF₂等)。熟習此項技藝者將會明瞭，就含有一或多個取代基之任何基團而言，該等基團不欲引入空間上不切實際及/或合成上不可行之任何取代或取代模式(例如，經取代之烷基包括視情況經取代之環烷基，其繼而定義為包括潛在無限地視情況經取代之烷基)。因此，所述任何取代基一般應理解為具有約1,000道耳頓，且更通常至多約500道耳頓之最大分子量(但不包括其等明確意在大分子取代基之實例，例如，多肽、多醣、聚乙二醇、DNA、RNA等)。

如本文所用，C₁-C_x包括C₁-C₂、C₁-C₃...C₁-C_x。僅舉例言之，指定為「C₁-C₄」之基團指示該部分中存有1至4個碳原子，亦即，含有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子或4個碳原子之基團、以及範圍C₁-C₂及C₁-C₃之基團。因此，僅舉例言之，「C₁-C₄烷基」指示烷基中存有1至4個碳原子，亦即，烷基係選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、及第三丁基。在其出現在本文中之任何情況下，數值範圍諸如「1至10」係指於指定範圍中之各個整數；例如，「1至10個碳原子」意指該基團可具有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子、6個碳原子、7個碳原子、8個碳原子、9個碳原子、或10個碳原子。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「烷基」係指具有1至約10個碳原子，更佳1至6個碳原子之視情況經取代之直鏈、或視情況經取代之分支鏈飽和烴單基。實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、正丁 基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、第三戊基及己基、及更長鏈烷基(諸如庚基、辛基等)。在其出現在本文中之任何情況下，數值範圍諸如「C₁-C₆烷基」或「C_1-6烷基」意指該烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成，然而，該定義亦涵蓋在未指定數值範圍之情況下術語「烷基」的出現。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「伸烷基」係指衍生自上文所定義單基烷基之雙基。實例包括(但不限於)亞甲基(-CH₂-)、伸乙基(-CH₂CH₂-)、伸丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、伸異丙基(-CH(CH₃)CH₂-)等。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「烯基」係指具有一或多個碳-碳雙鍵且具有2至約10個碳原子，更佳2至約6個碳原子之視情況經取代之直鏈、或視情況經取代之分支鏈烴單基。該基團關於該(等)雙鍵可呈順式或反式組態中任何一者，且應理解為包括兩種異構體。實例包括(但不限於)乙烯基(-CH=CH₂)、1-丙烯基(-CH₂CH=CH₂)、異丙烯基[-C(CH₃)=CH₂]、丁烯基、1,3-丁二烯基等。在其出現在本文中之任何情況下，數值範圍諸如「C₂-C₆烯基」或「C_2-6烯基」意指該烯基可由2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成，然而，該定義亦包括在未指定數值範圍之情況下術語「烯基」之出現。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「伸烯基」係指衍生自以上所定義單基烯基之雙基。實例包括(但不限於)伸乙烯基(-CH=CH-)、伸丙烯基異構體(例如，-CH₂CH=CH-及-C(CH₃)=CH-)等。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「脂族」係指視情況經取代之直鏈或分支鏈非環狀飽和、部分不飽和、或完全不飽和非芳香烴。因此，該術語共同包括烷基、烯基及炔基。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「碳鏈」係指為線性、環 狀、或其任何組合之任何烷基、烯基、炔基、雜烷基、雜烯基或雜炔基。若該鏈為鍵聯基之一部分且該鍵聯基包含一或多個作為一部分核心主鏈之環，則出於計算鏈長度之目的，「鏈」僅包括其等組成指定環底部或頂部及非兩者之碳原子，且在該(等)環之頂部及底部之長度不相等之情況下，應使用較短距離來確定鏈長度。若鏈包含作為一部分主鏈之雜原子，則不將其等原子算作碳鏈長度之一部分。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「環(cycle)」、「環狀」、「環(ring)」及「員環」係指任何共價封閉結構，包括本文中所述的脂環族、雜環、芳族、雜芳族及多環稠合或非稠合環系統。環可視情況經取代。環可形成稠環系統之一部分。術語「員」意欲指示構成環之主鏈原子的數目。因此，僅舉例言之，環己烷、吡啶、哌喃及嘧啶為六員環及環戊烷、吡咯、四氫呋喃及噻吩為五員環。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「稠合」係指其中兩個或更多個環共享一或多個鍵之環狀結構。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「環烷基」係指含有3至約15個環碳原子或3至約10個環碳原子之視情況經取代之飽和烴單基環，但可包含額外非環碳原子作為取代基(例如，甲基環丙基)。在其出現在本文中之任何情況下，數值範圍諸如「C₃-C₆環烷基」或「C_3-6環烷基」意指該環烷基可由3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子或6個碳原子組成，亦即，為環丙基、環丁基、環戊基或環己基，然而，該定義亦包括在未指定數值範圍之情況下術語「環烷基」之出現。該術語包括稠合基、非稠合基、橋接基及螺基。稠合環烷基可包含2至4個稠環，其中附接環為環烷基環，及其他個別環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。實例包括(但不限於)環丙基、環戊基、環己基、十氫萘基、及雙環[2.2.1]庚基及金剛烷基環系統。例示性實例包括(但不限於)以下部分：

單獨或以組合方式用於本文中之術語「環烯基」係指具有一或多個碳-碳雙鍵及3至約20個環碳原子、3至約12個環碳原子、或3至約10個環碳原子之視情況經取代之烴非芳香單基環。該術語包括稠合基、非稠合基、橋接基及螺基。稠合環烯基可包含2至4個稠環，其中附接環為環烯基環，及其他個別環可為脂環族、雜環、芳族、雜芳族或其任何組合。稠環系統可跨過為碳-碳單鍵或碳-碳雙鍵之鍵稠合。環烯基之實例包括(但不限於)環己烯基、環戊二烯基及雙環[2.2.1]庚-2-烯環系統。例示性實例包括(但不限於)以下部分：

單獨或以組合方式用於本文中之術語「脂環基」或「脂環族」係指含有3至約20個環碳原子、3至約12個環碳原子、或3至約10個環碳原子之視情況經取代之飽和、部分不飽和、或完全不飽和非芳香烴環系統。因此，該等術語共同包括環烷基及環烯基。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「碳環基」共同係指脂環基及芳基；亦即，可為飽和、部分不飽和、完全不飽和或芳族之所有碳以共價方式封閉的環結構。碳環可由三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個、或九個以上碳原子形成。碳環可視情況經取代。該術語區分碳環與雜環，雜環主鏈包含至少一個不同於碳之原子。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「鹵素」、「鹵基」或「鹵化物」係指氟、氯、溴及碘。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「羥基」係指單基-OH。

單獨或以組合方式用於本文中之術語「羧基」(carboxy或carboxyl)係指-C(O)OH部分，其亦可寫為-COOH。「羧酸根陰離子」為去質子化羧基部分且寫為-COO或-COO^-。

應明瞭在依序使用兩個或更多個基團來定義附接至一結構之取代基的實例中，先命名的基團被認為是末端及最後命名的基團被認為是附接至所述結構。因此，例如，基團芳基烷基係藉由烷基附接至所述結構。

如本文所用，「經3,5-二取代之4-(4-R^C-萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑」係指：

如本文所用，「經3取代之5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑」係指：

術語「多晶型1型」係指展現實質上與圖1、及/或圖2中所顯示者相同的x射線粉末繞射圖樣及/或實質上與圖3中所顯示者相同的示差掃描熱量分佈之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸之結晶形式。

術語「多晶型2型」係指展現實質上與圖5、及/或圖6中所顯示者相同的x射線粉末繞射圖樣及/或實質上與圖8中所顯示者相同的示差掃描熱量分佈之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸之結晶形式。

術語「多晶型A型」係指展現實質上與圖13中所顯示者相同的x射線粉末繞射圖樣、及/或實質上與圖14中所顯示者相同的示差掃描熱量分佈之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶形式。

術語「多晶型B型」係指展現實質上與圖17中所顯示者相同的x射線粉末繞射圖樣、及/或實質上與圖18中所顯示者相同的示差掃描熱量分佈之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶形式。

術語「多晶型B'型」係指展現實質上與圖19中所顯示者相同的x射線粉末繞射圖樣、及/或實質上與圖20中所顯示者相同的示差掃描熱量分佈之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶形式。

如本文所用，「抗衡離子」為其之存在容許形成總體電中性物質之離子。因此，於一實例中，抗衡離子為帶正電荷的離子，例如，就式(I)之化合物而言，其平衡與式(I)化合物之羧酸根陰離子相關聯之負電荷且容許形成總體電中性物質。就式(I)之化合物而言之抗衡離子實例包括(但不限於)Na⁺、K⁺、Li⁺、Cs⁺、Mg⁺⁺、Fe⁺⁺⁺、Al⁺⁺⁺、或任何其他醫藥上可接受之有機或無機陽離子。在陽離子具有超過一個單位電荷之情況下(例如，Mg⁺⁺)，應理解將需要一或多個羧酸根陰離子部分(例如，式(I)之化合物之羧酸根部分)來形成總體電中性物質。於另一實例中，抗衡離子為帶負電荷的離子。例如，就化合物8而言，帶負電荷的抗衡離子平衡與化合物8之質子化形式相關聯之正電荷。該等帶負電荷之抗衡離子之實例包括(但不限於)草酸根、檸檬酸根、酒石酸根、乙酸根、氯離子、溴離子、氟離子、或任何其他醫藥上可接受之有機或無機陰離子。

最初嘗試

確定合成式(I)之化合物(包括(例如)化合物1及化合物4)之最佳條件之最初努力專注於化合物11(3-胺基-4-(4-環丙基萘-1-基)-1H-1,2,4-三唑-5(4H)-硫酮)作為起始物質。反應圖1顯示化合物1及化合物4之例示性合成法。

始於化合物11，於作為溶劑之DMF的存在下與式(IV)之化合物反應提供式(V)之化合物。可使用任何式(IV)之試劑。於一實施例中， 化合物11與乙酸溴甲酯或乙酸氯甲酯進行反應以提供式(V)之化合物(其中R為甲基(化合物2))。於一不同實施例中，化合物 11與乙酸溴乙酯或乙酸氯乙酯進行反應以提供式(V)之化合物(其中R為乙基(化合物2-A))。於另一實施例中，化合物11 與溴乙酸進行反應以提供式(V)之化合物(其中R為H)。使用任何適宜之溶劑。於一實施例中，溶劑為DMF。於替代實施例中，溶劑為二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、四氫呋喃(THF)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、二甲亞碸(DMSO)等。

接著使式(V)之化合物在硝酸鉀及溶劑存在下與溴化銅(II)反應，且維持反應溫度在約室溫或以下，以提供式(III)之化合物。於一些實施例中，使式(V)之化合物與CuCl₂/KNO₂、CuCl₂/NaNO₂、 CuBr₂/NaNO₂、pTsOH/NaNO₂/KBr、或Br₂反應。於一實施例中，反應溫度介於約14℃與約22℃之間。於另一實施例中，反應溫度介於約12℃與約25℃之間。使用任何適宜之溶劑。於一實施例中，溶劑為乙腈。於一不同實施例中，溶劑為二氯甲烷、NMP、二噁烷、THF等。於一實施例中，反應提供為化合物3之式(III)化合物，。於另一實施例中，反應提供為化合物3-A之式(III)化合物。於其中R為H之另一實施例中，反應可提供化合物1。

式(III)之化合物之範疇內涵蓋作為化合物1之前藥的酯化合物。該等酯之實例包括(但不限於)甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基及/或香葉草基酯。

使用任何適宜之酸(包括(但不限於)乙酸、三氟乙酸、硫酸、硝酸、磷酸、鹽酸或氫溴酸)水解式(III)化合物之酯基，提供化合物1。

化合物1接著轉化成鹽。於一實施例中，於氫氧化鈉水溶液中攪拌化合物1以提供化合物4。於一些實施例中，化合物4為特徵峰位於4.90、9.83、及25.29°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於一些實施例中，化合物4為結晶多晶型A型。於替代實施例中，於氫氧化鉀、氫氧化鋰、氫氧化銫水溶液或任何其他適宜鹼性溶液中攪拌化合物1以提供式(I)之化合物(其中R為抗衡離子)。於一些該等實施例中，使用醇(例如，甲醇、乙醇、異丙醇)作為用於包括化合物1轉化成鹽之反應步驟之共溶劑。

使用適宜酸(諸如氫溴酸)酸化化合物4(或式(I)之化合物，其中R為抗衡離子)水溶液。適用於此步驟之其他酸包括(但不限於)乙酸、三氟乙酸、硫酸、硝酸、磷酸、鹽酸等。以適宜有機溶劑(諸如乙酸乙酯)萃取該混合物。適用於萃取之其他溶劑包括(但不限於)二氯甲烷、第三丁基甲基醚、第三丁醇等。接著視情況使化合物1自EtOAc再結 晶。於一些實施例中，使化合物1自乙酸乙酯且使用正庚烷作為反萃溶劑再結晶。應瞭解任何其他適宜溶劑或溶劑之組合可用於化合物1之再結晶。

於一些實施例中，化合物1為特徵峰位於10.32、18.84、及20.75°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於某些實施例中，化合物1為結晶多晶型1型。於其他實施例中，化合物1為特徵峰位於10.46、18.76、及19.83°2θ(±0.1°2θ)處之結晶多晶型。於某些實施例中，化合物1為結晶多晶型2型。

化合物11之合成法-第一方法

於一例示性實施例中，採用反應圖2中所描述反應之順序實現反應圖1中所描述之化合物11之合成。

始於1-溴萘，與適宜格林鈉試劑(Grignard reagent)反應提供化合物6。

接著藉由包括以下之方法(方法6)製備化合物11：(11-i)於一或多種適宜溶劑中使化合物7與氫、木炭載鈀接觸以提 供以下結構式之化合物： (11-ii)使化合物8與草酸接觸以提供化合物8之草酸鹽；(11-iii)使步驟(11-i)之化合物8之草酸鹽與鹼、硫光氣及溶劑接觸且於低於室溫之溫度下攪拌該混合物以提供以下結構式之化合物： (11-iv)使來自步驟(11-iii)之化合物9與胺基胍鹽酸鹽、及鹼及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (11-v)使步驟(11-iv)之化合物13與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物11。

本文提供藉由上述方法6製得之化合物9。本文提供藉由上述方法6製得之化合物11。本文提供藉由上述方法6製得之化合物13。

於一實施例中，適用於上述方法6步驟(11-i)中之溶劑為甲醇、乙醇、或二氯苯、或其任何組合。於一實施例中，適用於方法6步驟(11-i)中之溶劑為甲醇。於另一實施例中，適用於方法6步驟(11-i)中之溶劑為乙醇。於本文所提出之實施例之範疇內亦涵蓋替代溶劑，諸如(例如)THF。

於本文所提出實施例之範疇內涵蓋在上述方法6步驟(11-ii)及(11-iii)中使用其他酸及/或酸鹽，包括(但不限於)將檸檬酸、酒石酸、乙酸、鹽酸等來製備化合物8之對應酸鹽。

於一實施例中，適用於方法6步驟(11-iii)中之溶劑為甲苯。於替代實施例中，適用於方法6步驟(11-iii)中之溶劑為二氯苯、二氯甲烷、二甲苯、或任何其他適宜溶劑。於一些情況中，在介於約0℃與約10℃之間、介於約5℃與約15℃之間、或介於約5℃與約25℃之間之溫度下攪拌方法6步驟(11-iii)之反應混合物。於一些情況中，於約5℃下攪拌方法6步驟(11-iii)之反應混合物。於一些情況中，於約室溫下攪拌方法6步驟(11-iii)之反應混合物。

於其他實施例中，適用於方法6步驟(11-iii)中反應之鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一些實施例中，適用於方法6步驟(11-iii)中反應之鹼為氫氧化鉀。

於其他實施例中，適用於方法6步驟(11-iv)中反應之鹼為有機或無機鹼。非限制性實例包括三乙胺、二異丙胺、二異丙基乙胺、氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一實施例中，在二異丙基乙胺(DIEA)或氫氧化鈉的存在下進行上述方法6步驟(11-iv)中之反應。針對於方法6步驟(11-iv)中之反應選擇任何適宜溶劑，包括(例如)DMF、THF、乙腈、二噁烷、NMP等。於一實施例中，於DMF中進行方法6之步驟(11-iv)中之反應。

於一實施例中，適用於方法6步驟(11-v)中之溶劑為DMF。於替代實施例中，適用於方法6步驟(11-v)中之溶劑為甲苯、二氯苯、二甲苯、NMP、乙腈、二噁烷、或任何其他適宜溶劑。於其他實施例中，適用於方法6步驟(11-v)中之反應之鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一些實施例 中，適用於方法6步驟(11-v)中之反應之鹼為氫氧化鈉。

化合物11之合成法-第二方法

於一不同例示性實施例中，採用反應圖3中所述之反應順序實現反應圖1中所述之化合物11之合成。

始於1-溴萘，與適宜格林鈉試劑反應提供化合物6。

接著藉由包括以下之方法(方法7)製備化合物11：(11-i-A)使化合物7與水合肼及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (11-ii-A)使化合物8與鹽酸及溶劑接觸以提供化合物8之鹽酸鹽； (11-iii-A)保護步驟(11-ii-A)之鹽中之胺基以提供以下結構式之化合物： (11-iv-A)使化合物14與鹽酸及乙醇接觸以提供化合物8之鹽酸鹽；(11-v-A)使來自步驟(11-iv-A)之化合物8之鹽酸鹽與鹼、硫光氣及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (11-vi-A)使來自步驟(11-v-A)之化合物9與胺基胍鹽酸鹽、鹼、及溶劑接觸以提供以下結構式之化合物： (11-vii-A)使來自步驟(11-vi-A)之化合物13與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物11。

本文提供藉由上述方法7製得之化合物9。本文提供藉由上述方法7製得之化合物11。本文提供藉由上述方法7製得之化合物13。本文提供藉由上述方法7製得之化合物14。

本文提供化合物8之鹽酸鹽，其可藉由上述方法7獲得且具有以 下結構式：

於一實施例中，適用於上述方法7步驟(11-i-A)中之溶劑為甲醇、乙醇、或二氯苯、或其任何組合。於一實施例中，適用於方法7步驟(11-i-A)中之溶劑為甲醇。於另一實施例中，適用於方法7步驟(11-i-A)中之溶劑為乙醇。於本文所提出實施例之範疇內亦涵蓋替代溶劑，諸如(例如)THF。

於本文所提出實施例之範疇內涵蓋在上述方法7步驟(11-ii-A)、(11-iii-A)及(11-v-A)中使用其他酸及/或酸鹽，包括(但不限於)使用檸檬酸、酒石酸、乙酸、鹽酸等以製備化合物8之對應酸鹽。於本文所提出實施例之範疇內涵蓋在方法7步驟(11-ii-A)中使用適宜溶劑，包括THF、二噁烷、乙醚、甲基第三丁基醚(MTBE)等。於一實施例中，用於方法7步驟(11-ii-A)中之溶劑為MTBE。

於一實施例中，用於方法7步驟(11-iii-A)中之保護基為第三丁氧基羰基。可使用任何其他適宜之胺保護基。於一實施例中，在丁氧基羰基酐、乙醇、三乙胺、及MTBE的存在下進行方法7步驟(11-iii-A)中之反應以提供化合物14。

於一實施例中，適用於方法7步驟(11-v-A)中之溶劑為二氯甲烷。於替代實施例中，適用於方法7步驟(11-v-A)中之溶劑為甲苯、二氯苯、二甲苯、或任何其他適宜溶劑。於一些情況中，在介於約0℃與約10℃之間、介於約5℃與約15℃之間、或介於約5℃與約25℃之間之溫度下攪拌方法7步驟(11-v-A)之反應混合物。於一些情況中，於約5℃下攪拌方法7步驟(11-v-A)之反應混合物。於一些情況中，在約室溫下攪拌方法7步驟(11-v-A)之反應混合物。

於其他實施例中，適用於方法7步驟(11-v-A)中反應之鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一些實施例中，適用於方法7步驟(11-v-A)中反應之鹼為氫氧化鉀。

於其他實施例中，適用於方法7步驟(11-vi-A)反應之鹼為有機或無機鹼。非限制性實例包括三乙胺、二異丙胺、二異丙基乙胺、氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一實施例中，在二異丙基乙胺(DIEA)或氫氧化鈉的存在下進行上述方法7步驟(11-vi-A)之反應。針對於方法7步驟(11-vi-A)中之反應選擇任何適宜溶劑，包括(例如)DMF、THF、乙腈、二噁烷、NMP等。於一實施例中，在DMF中進行方法7步驟(11-vi-A)中之反應。

於一實施例中，適用於方法7步驟(11-vii-A)中之溶劑為DMF。於替代實施例中，適用於方法7步驟(11-vii-A)中之溶劑為甲苯、二氯苯、二甲苯、NMP、乙腈、二噁烷、或任何其他適宜溶劑。於其他實施例中，適用於方法7步驟(11-vii-A)中反應之鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一些實施例中，適用於方法7步驟(11-vii-A)中反應之鹼為氫氧化鈉。

最初嘗試之缺陷

反應圖1中所描述之反應順序需要使用溴化銅(II)，其產生廢棄物從而需要額外的用於處置該廢棄物之費用。此程序之另一缺陷係要單離化合物1兩次才達到期望的純度水平。

此外，化合物11之合成需要如以上反應圖2及反應圖3中所描述之冗長順序步驟，且需要使用胺基胍鹽酸鹽。化合物13之移除亦需要額外純化步驟。此外，如反應圖3中所顯示，單離化合物8-B兩次以達到期望的化合物11之純度水平。

改良之方法

為了避免以上及反應圖1-3中所描述程序之缺陷，研究用於合成式(I)之化合物(包括化合物1及化合物4)之替代程序。述於下文之改良程序具有特定的優點。該等改良程序減少製備式(I)之化合物(包括化合物1或化合物4)時所需步驟數。該等改良方法容許目標化合物比較容易純化而不需要同一化合物之重複單離。該等改良方法避免使用胺基胍鹽酸鹽及移除化合物13時所需之接續額外純化步驟。此外，下文所述改良方法避免使用腐蝕性化學品且減少廢棄物(諸如，來自以上反應圖1中所描述溴化銅反應之廢棄物)。

因此，如下文及本發明概述部分中所述設計某些用於合成式(I)之化合物(包括化合物1及化合物4）之新穎方法。該等新穎方法中之改善處係使用式(II)之化合物作為合成式(I)之化合物之中間物。該新穎方法中之另一改善處係就三唑之合成而言改用甲醯肼替代胺基胍。使用甲醯肼避免半卡肼(諸如舊方法之化合物13)之形成且減少移除中間物半卡肼(諸如舊方法之化合物13)時需要的純化步驟。

式(II)之化合物之合成法

於一實施例中，以下反應圖4描述式(II)之化合物之例示性合成法。

於本文一些實施例中提供一種合成式(II)之化合物之方法。於一些實施例中，將化合物6轉化成式(II)之化合物(例如，化合物2)。於一些實施例中，將化合物6轉化成化合物7。於一些實施例中，將化合物7轉化成化合物8。於其他或額外實施例中，將化合物8轉化成化合物9。於其他及額外實施例中，將化合物9轉化成化合物10。於其他或額外實施例中，將化合物10轉化成化合物5。於一些實施例中，將化合物5轉化成式(II)之化合物。

於一些實施例中，在一或多種硝化劑的存在下將化合物6轉化成化合物7。適宜硝化劑之非限制性實例包括HNO₃、HNO₃與酸(例如，H₂SO₄)、NH₄NO₃/三氟乙酸、硝酸異戊酯/BF₃‧Et₂O、硝酸異戊酯/TfOH、Cu(NO₃)/TFAA、AgNO₃/Tf₂O、及Hg(NO₃)₂/HNO₃。硝化反應使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，用於該反應之適宜溶劑為鹵代苯(例如，1,2-二氯苯)、甲苯、水、離子液體、或其組合。

於一些實施例中，在一或多種還原劑的存在下還原化合物7以提供化合物8。於一些實施例中，適宜之還原劑包括鈀(例如，碳載鈀、碳載5%鈀、碳載10%鈀、硫酸鋇載鈀、碳載氯化鈀)、氧化鉑、阮內鎳(Raney nickel)、於乙酸中之金屬鐵(例如，於乙醇水溶液中之Fe/HCl)、FeCl₃/HCl、於酸中之氯化錫(II)、金屬鋅、連二亞硫酸鈉、氫化鋰鋁、氫化二異丁基鋁、超級氫化物(super hydride)、二碘化釤、金屬釤(例如，於甲醇中之Sm(4當量)/NH₄Cl)、硫化鈉(例如，於NH₄OH水溶液中之硫化鈉/NH₄Cl)、硫化氫/鹼、氯化鈦(III)或任何其他適宜還原法。還原可使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於一實施例中，將含胺基之化合物8視情況轉化成酸鹽。可用於 合成化合物8之酸鹽的酸的非限制性實例包括草酸、酒石酸、檸檬酸、甲酸、丙二酸、馬來酸、己二酸、甲酸、氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、苯甲酸、鹽酸或任何其他適宜酸。於一些實施例中，於進一步步驟中使用化合物8之游離胺。

於一些實施例中，在亞硫醯基轉移試劑的存在下將化合物8轉化成化合物9。於一些實施例中，該亞硫醯基轉移試劑為硫光氣。於一些實施例中，在硫光氣及適宜鹼的存在下將化合物8、或其酸鹽轉化成異硫氰酸鹽。於一些實施例中，鹼為碳酸氫鉀、碳酸鉀、乙酸鉀、氫氧化鉀、乙酸鈉、苯甲酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、偏矽酸鈉、倍半碳酸鈉、磷酸三鈉、碳酸鈣、氫氧化鈣、氫氧化亞鐵、氫氧化鋰、氫氧化鋇、氫氧化銫、氫氧化鍶、氫氧化銣、碳酸銫、第三丁醇鉀、或磷酸鉀。於某些實施例中，鹼為丁基鋰、二異丙基醯胺鋰、二乙醯胺鋰、鈉胺、氫化鈉、雙(三甲基矽烷基)醯胺鈉鋰、雙(三甲基矽烷基)醯胺鋰。於其他實施例中，鹼為氨、三乙胺、丙胺、甲胺、二甲胺、三甲胺、甲基二乙胺、二異丙基乙胺、苯胺、哌啶、吡啶、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、或吡咯啶。親核加成轉化可使用任何適宜溶劑。

於一些實施例中，亞硫醯基轉移試劑為二硫化碳、硫氰酸鈉、硫羰基二咪唑、硫氰酸鉀、硫氰酸鋅、硫氰酸銀、或硫氰酸銨。於一些實例中，在二硫化碳(CS₂)的存在下將化合物8、或其鹽轉化成異硫氰酸鹽。於其他或額外實施例中，該反應進一步包括添加NH₄OH水溶液，接著添加硝酸鉛(Pb(NO₃)₂)。於替代實施例中，化合物8或其酸鹽與CS₂之反應進一步包括添加鹼及溶劑(例如，THF)接著添加TsCl。於替代實施例中，在硫羰基二咪唑及溶劑(例如，DMF)的存在下將化合物8、或其酸鹽(例如，化合物8-A)轉化成異硫氰酸鹽。於其他實施例中，在硫氰酸鹽(例如，硫氰酸鈉)的存在下將化合物8、或其鹽轉 化成異硫氰酸鹽。於某些實施例中，化合物8與硫氰酸鹽(例如，硫氰酸鈉)之反應提供硫脲中間物。於其他或額外實施例中，自該硫脲中間物移除氨提供化合物9。於某些實施例中，將該硫脲中間物加熱至高溫(例如，100℃、110℃、120℃、130℃、140℃、150℃、160℃、170℃、180℃、190℃、或200℃)以提供化合物9。於一些實施例中，用於將化合物8轉化成化合物9之任何轉化之溶劑為乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於一些實施例中，在親核試劑的存在下將化合物9轉化成化合物10。於一些實施例中，親核試劑為甲醯肼。親核加成轉化可使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於一些實施例中，在一或多種鹼的存在下將化合物10環化以提供化合物5。於環化反應中可使用任何適宜鹼。於一些實施例中，鹼為碳酸氫鉀、碳酸鉀、乙酸鉀、氫氧化鉀、乙酸鈉、苯甲酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、偏矽酸鈉、倍半碳酸鈉、磷酸三鈉、碳酸鈣、氫氧化鈣、氫氧化亞鐵、氫氧化鋰、氫氧化鋇、氫氧化銫、氫氧化鍶、氫氧化銣、碳酸銫、第三丁醇鉀、或磷酸鉀。於某些實施例中，鹼為丁基鋰、二異丙基醯胺鋰、二乙醯胺鋰、鈉胺、氫化鈉、雙(三甲基矽烷基)醯胺鈉鋰、雙(三甲基矽烷基)醯胺鋰。於其他實施例中，鹼為氨、三乙胺、丙胺、甲胺、二甲胺、三甲胺、甲基二乙胺、二異丙基乙胺、苯胺、哌啶、吡啶、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、或吡咯啶。親核加成轉化可使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁 醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於一些實施例中，在親電子劑的存在下化合物5經歷親核取代以提供式(II)之化合物。於一些實施例中，親電子劑具有結構式。於一些實施例中，X為離去基團。於某些實施例中，X為鹵素(例如，溴、碘、或氯)、甲苯磺酸基、甲磺酸基、苯磺酸基、三氟甲磺酸基、九氟丁磺酸基、氟磺酸基、或OH。於一些實施例中，R為烷基。於其他實施例中，R為C_1-20烷基、C_1-10烷基、C_1-6烷基、或C_1-3烷基。於一些實施例中，R為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基、及/或香葉草基醚。於一些實施例中，R為H。任何適宜溶劑可用於親核取代轉化。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於上述方法(反應圖4)之一些實施例中，單離出化合物或中間物且無需任何進一步純化步驟即可用於接續之合成步驟。於某些實施例中，無需中間物單離或純化步驟地使用化合物或中間物(例如，化合物7、8、9、10、5、或式II之化合物)。於一些實施例中，該等化合物或中間物在用於進一步合成步驟之前進行純化。於某些實施例中，藉由結晶純化該等化合物或中間物。於一些實施例中，藉由蒸餾、管柱層析、逆相層析、製備型薄層層析、或其組合純化該等化合物或中間物。

於另一實施例中，以下反應圖5描述式(II)之化合物之另一例示性合成法。

參照以上述反應圖5，始於化合物6，進行硝化反應提供化合物7。採用任何適宜還原法將化合物7中之硝基還原成胺(化合物8)。於一實施例中，在適宜溶劑的存在下使用氫氣及木炭載鈀進行該還原。於一些實施例中，使用催化量的鈀(例如，0.001%、0.005%、0.01%、0.02%、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1%、2%、3%、4%、5%或10%)。於一些實施例中，使用化學計量量的木炭載鈀。於一實施例中，適用於催化氫化之溶劑係選自甲醇、乙醇、第三丁醇、THF、二氯苯、或其任何組合。

於一實施例中，將含胺基之化合物8轉化成酸鹽(例如，草酸鹽)。於一實施例中，於進一步步驟中使用胺之酸鹽(化合物8)(例如，如反應圖5所顯示5)。

於一實施例中，如反應圖5中所顯示，化合物8、或其酸鹽(例如，化合物8-A)在硫光氣及適宜鹼的存在下轉化成異硫氰酸鹽(化合物9)。於一些該等實施例中，適於自化合物8、或其鹽合成化合物9之溶劑為甲苯。於替代實施例中，適於根據反應圖4自化合物8、或其鹽合成化合物9之溶劑為二氯苯、二甲苯、二氯甲烷、或任何其他適宜溶劑。於一些情況中，在介於約0℃與約10℃之間、介於約5℃與約 15℃之間、或介於約5℃與約25℃之間之溫度下攪拌反應混合物。於一些情況中，在介於約5至約100℃之間攪拌反應混合物。於一些情況中，在約5℃下攪拌反應混合物。於一些情況中，在約室溫下攪拌反應混合物。於其他實施例中，適於自化合物8、或其鹽合成化合物9之鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一些實施例中，適於自化合物8、或其鹽合成化合物9之鹼為氫氧化鉀。

於另一實施例中，在硫氰酸鈉及水的存在下將化合物8之游離鹼轉化成異硫氰酸鹽化合物9。於一實施例中，用於該反應之溶劑為丁醇、乙醇、水、乙腈、二噁烷、甲苯、二甲苯、DCB、DMF、NMP或任何其他適宜溶劑。於一實施例中，在至少100℃、110℃、120℃、130℃、140℃或150℃之溫度下攪拌反應混合物。於一些具體實施例中，化合物8之游離鹼與硫氰酸鈉之反應係在水及二甲苯的存在下於至少130℃之溫度進行。於本文所提出實施例之範疇內亦涵蓋使用其他硫氰酸鹽(諸如硫氰酸鉀、硫氰酸鋅、硫氰酸銀、硫氰酸銨)、或其他適宜試劑。

在甲醯肼及適宜溶劑的存在下將異硫氰酸鹽化合物9轉化成化合物10。於一實施例中，溶劑為DMF。於替代實施例中，溶劑為乙腈、THF、二噁烷、二氯甲烷、二氯苯、NMP或任何其他適宜溶劑。有利地，此步驟避免以上在反應圖2及反應圖3中所描述之化合物13之形成。

使用適宜鹼、水及溶劑將化合物10環化成化合物5。於一實施例中，鹼為碳酸氫鉀。於替代實施例中，鹼係選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鋰、碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀或任何其他適宜鹼。於一實施例中，用於化合物10轉化成化合物5之溶劑為DMF。於其他實施例中，用於化合物10轉化成化合物5之溶劑為THF、乙腈、 DCM、DCB、乙醇、甲醇、二噁烷、NMP或任何其他適宜溶劑。

在任何適宜鹼及含離去基之式(IV)之乙酸酯的存在下，將化合物5轉化成式(II)之化合物。於一實施例中，化合物5與乙酸溴甲酯 或乙酸氯甲酯進行反應以提供式(II)之化合物(其中R為甲基(化合物2))。於一不同實施例中，化合物5與乙酸溴乙酯 或乙酸氯乙酯進行反應以提供式(II)之化合物(其中R為乙基(化合物2-A))。使用任何適宜溶劑。於一實施例中，溶劑為DMF。於替代實施例中，溶劑為二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、四氫呋喃(THF)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、二甲亞碸(DMSO)等。於一實施例中，單離出呈濕濾餅之式(II)化合物，視情況以經冷卻之乙酸乙酯與異丙醇及/或其組合洗滌該濕濾餅。

由式(II)之化合物合成式(I)之化合物

反應圖6a描述式(I)之化合物之例示性合成法。

於本文一些實施例中提供一種合成化合物1之方法。已於上文(例如，反應圖1、4、及5)描述式(II)之化合物之合成。於一些實施例中，將式(II)之化合物轉化成化合物1。於一些實施例中，將式(II)之化合物轉化成式(III)之化合物。於一些實施例中，將式(III)之化合物轉化成式(I-A)之化合物。於其他或額外實施例中，將式(I-A)之化合物轉化形成化合物1。

於一些實施例中，在溴化劑的存在下將式(II)之化合物溴化以提 供式(III)之化合物。於一些實施例中，式(II)之化合物(其中R=H)之溴化提供化合物1。於某些實施例中，該溴化劑為N-溴琥珀醯亞胺(NBS)、Br₂、BrCl/Br₂、三溴化四丁基銨、溴化銨/發氧方(oxone)(含於甲醇及/或水中)、二溴化硒、FeBr₃/Br₂、AlCl₃/Br₂、FeCl₃/Br₂、ZnCl₂/Br₂、三溴化1,2-二吡啶鎓-乙烷、NBS/酸(三氟甲磺酸及BF₃-H₂O)、NBS/濃硫酸、NBS/溴化四丁基銨、LiBr/PhI/間氯過苯甲酸/TsOH、AuCl₃/NBS、NBS/Pd(OAc)₂、N,N,N',N'-四溴苯-1,3-二磺胺/聚[N-溴苯-1,3-二磺胺]、LiTMP/ZnCl₂/Br₂、[Ir(COD)(OMe)]₂/B₂pin₂/dtbpy/CuBr₂或[Ir(COD)(OMe)]₂/B₂pin₂/dtbpy/CuCl₂。就溴化而言，可使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。

於一些實施例中，視情況在鹼存在下將式(III)之化合物水解以提供式(I-A)之化合物，其中M為陽離子。於某些實施例中，M係選自Na⁺、Li⁺、K⁺、Cs⁺、Ba⁺、Ca⁺或任何其他適宜陽離子。於一些實施例中，鹼為氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀、氫氧化銫、氫氧化鋇、氫氧化亞鐵、氫氧化鈣、氨、或任何其他適宜鹼。於某些實施例中，鹼為碳酸氫鉀、碳酸鉀、乙酸鉀、氫氧化鉀、乙酸鈉、苯甲酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、偏矽酸鈉、倍半碳酸鈉、磷酸三鈉、碳酸鈣、氫氧化鈣、碳酸銫、或磷酸鉀。就溴化而言，可使用任何適宜溶劑。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。於一些實施例中，溶劑為水。

於一些實施例中，視情況以酸處理式(I-A)之化合物以提供化合 物1。於一些實施例中，酸為氫溴酸、硫酸、鹽酸、氫碘酸、硝酸、磷酸、氟銻酸、氟硼酸、六氟磷酸、三氟乙酸、乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、三氟甲磺酸、檸檬酸、甲酸、葡萄糖酸、乳酸、草酸、馬來酸、丙二酸、酒石酸、或任何適宜酸。任何適宜溶劑可用於提供游離酸化合物1。於一些實施例中，溶劑為水、乙腈、DMF、THF、甲苯、二甲苯、二噁烷、丁醇、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、己烷、戊烷、庚烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷、二氯苯、NMP或其組合。於一些實施例中，溶劑為乙酸乙酯及庚烷。

於上述方法(反應圖6a)之一些實施例中，單離出化合物(例如，式(III)、(I-A)之化合物及化合物1)且無需任何進一步純化步驟即可用於接續之合成步驟中。於某些實施例中，無中間物單離或純化步驟地使用化合物(例如，式(III)、(I-A)之化合物及化合物1)。於一些實施例中，化合物(例如，式(III)、(I-A)之化合物及化合物1)係在用於進一步合成步驟之前進行純化。於某些實施例中，藉由結晶純化化合物(例如，式(III)、(I-A)之化合物及化合物1)。於一些實施例中，藉由蒸餾、管柱層析、逆相層析、製備型薄層層析、或其組合純化化合物(例如，式(III)、(I-A)之化合物及化合物1)。

反應圖6b描述式(I)之化合物(包括化合物1及化合物4)之例示性合成。

於適宜溶劑中式(II)之化合物與N-溴琥珀醯亞胺(NBS)反應提供 式(III)之化合物。適用於由NBS介導之反應之溶劑包括DMF、乙腈、MTBE或任何其他適宜溶劑。式(III)之化合物中之酯基視情況水解以提供式(I)之化合物之酸鹽，即，式(I-A)之化合物，其中M係選自Na⁺、Li⁺、K⁺、Cs⁺或任何其他適宜陽離子。視情況單離出且/或結晶該酸鹽。在酸的存在下將式(I-A)之化合物轉化成化合物1。視情況自適宜溶劑或溶劑之混合物使化合物1結晶。

於一具體實施例中，反應圖7描述化合物1及化合物4之合成法。

因此，本文提供一種製備具有以下結構式之化合物1之方法(方法8)： 該方法之改善處係使以下結構式之化合物

與溴化劑(例如，N-溴琥珀醯亞胺(NBS))及溶劑接觸。

於一實施例中，溶劑為THF。於替代實施例中，溶劑為DMF、乙腈或任何其他適宜溶劑。

於一實例中，將NBS加至含化合物2之THF溶液中同時將THF溶 液維持在介於約室溫與約32℃之間之溫度。於一實施例中，接著在介於約室溫與約32℃之間之溫度下攪拌該反應混合物持續至少12小時。於替代實施例中，攪拌該反應混合物持續至少2小時、4小時、6小時、8小時、10小時、12小時、14小時、20小時、24小時或更長。於一種情況中，若反應混合物檢測中化合物2含量1.5%高效液相色譜(HPLC)面積，則另添加一些NBS至該反應混合物。於一實施例中，於攪拌反應混合物至少12小時、及/或視情況另添加一些NBS之後，反應混合物檢測顯示1.5% HPLC面積之化合物2。於另一實施例中，於攪拌反應混合物至少12小時、及/或視情況另添加一些NBS之後，反應混合物檢測顯示0.2% HPLC面積之化合物2。

於一實施例中，一種合成化合物1之方法進一步包括：(1-i)以溶劑(例如，甲苯)萃取反應混合物同時維持該混合物在介於約2℃與約7℃之間之溫度；(1-ii)以亞硫酸氫鈉溶液反萃取來自步驟(1-i)之有機相一次或多次直到藉由HPLC檢測於水相中檢測不到NBS；(1-iii)用水洗滌來自步驟(1-ii)之該有機相，(1-iv)用碳酸氫鈉溶液洗滌來自步驟(1-iii)之該有機相一次或多次直到水相具有至少8之pH；然後(1-v)收集包含以下結構式之化合物之有機相：

於一種情況中，該方法進一步包括視情況於減壓下濃縮步驟(1-v)之有機相以獲得化合物3。

於一種情況中，該方法進一步包括以下步驟： (1-vi)使技術方案7步驟(1-v)中之有機相與鹼溶液(例如，氫氧化鈉)接觸直到藉由HPLC檢測到該有機相中化合物3之峰值面積低於50mAU；然後(1-vii)收集包含以下結構式之化合物之水相：

於一種情況中，該方法進一步包括以下步驟：(1-viii)於減壓下濃縮技術方案8步驟(1-vii)中之水相；(1-ix)添加水以調整步驟(1-viii)中混合物體積至步驟(1-viii)水相中化合物1之HPLC檢測重量計算值之約5.5±5%；(1-x)使步驟(1-ix)之混合物冷卻獲得包含結晶化合物4之懸浮液；然後(1-xi)過濾步驟(1-x)之該懸浮液而獲得包含結晶化合物4之濕濾餅。

於一種情況中，該方法進一步包括視情況乾燥步驟(1-xi)之該濕濾餅而獲得化合物4。

於一種情況中，該方法進一步包括以下步驟：(1-xii)將技術方案10步驟(1-xi)之包含化合物4之濕濾餅溶解於水中；(1-xiii)添加溶劑(例如，乙酸乙酯)至步驟(1-xii)之溶液；(1-xiv)添加酸(例如，24%氫溴酸)同時維持反應混合物溫度低於35℃，且維持該反應混合物之pH介於約2.0與約4.0之間；及(1-xv)分離出包含化合物1之有機相。

於一種情況中，該方法進一步包括： (1-xvi)於減壓下濃縮技術方案10步驟(1-xv)之有機相；(1-xvii)在介於約32℃與約38℃之間攪拌步驟(1-xvi)之該混合物持續至少8小時；(1-xviii)添加共溶劑(例如，正庚烷)至步驟(1-xvii)之混合物且使該混合物冷卻；然後(1-xix)過濾步驟(1-xviii)之該懸浮液而獲得化合物1。

於一實施例中，以上步驟(1-xix)獲得結晶化合物1。化合物1之結晶多晶型述於PCT國際申請案第PCT/US11/20233號、及PCT國際申請案第PCT/US11/6765號中，及述於PCT國際申請案第PCT/US11/20233號、及第PCT國際申請案第PCT/US11/67657號中之化合物1及/或化合物4之多晶型之揭示內容係以引用的方式併入本文中。

於一態樣中，本文提供化合物3 HPLC檢測面積不超過0.1%之化合物1。於一實施例中，藉由上述方法獲得其中化合物3不超過0.1%之化合物1。於另一態樣中，本文提供化合物2 HPLC檢測面積不超過0.1%、及化合物3 HPLC檢測面積不超過0.1%之化合物1。於本文又一態樣中提供具有98%純度之化合物1。於本文另一態樣中提供具有99%純度之化合物1。於任一前述實施例中，藉由HPLC檢測測定純度。於任一前述實施例中，藉由方法1、方法2、方法3、方法4、方法5、方法6、方法7、或方法8、或其任何組合製得化合物1。

本文所揭示化合物之其他化合物形式

異構體

於一些實施例中，本文所述化合物係呈幾何異構體存在。於一些實施例中，本文所述化合物具有一或多個雙鍵。於本文中所提出的化合物包括所有順、反、順式、反式、異側(entgegen)(E)、及同側(zusammen)(Z)異構體以及其對應混合物。於一些情況中，化合物係呈互變異構體存在。本文所述化合物包括屬於本文所述式範圍內之所 有可能的互變異構體。於一些情況中，本文所述化合物具有一或多個對掌性中心且各中心係呈R組態、或S組態存在。本文所述化合物包括所有非對映異構體、對映異構體、及差向異構體形式以及其對應混合物。於本文中提供的化合物及方法之其他實施例中，由於單一製備步驟、組合、或互變所致之對映異構體及/或非對映異構體之混合物係適用於本文所述之應用。於一些實施例中，藉由使化合物之消旋混合物與光學活性解析劑反應形成一對非對映異構體化合物、分離該等非對映異構體及回收光學上純對映異構體製成呈其個別立體異構體形式之本文所述化合物。於一些實施例中，較佳為可解離複合物(例如，結晶非對映異構體鹽)。於一些實施例中，該等非對映異構體具有不同物理性質(例如，熔點、沸點、溶解度、反應性等等)及利用該等歧異分離。於一些實施例中，藉由對掌性層析、或較佳藉由基於溶解度差異之分離/解析技術分離該等非對映異構體。於一些實施例中，接著藉由將不會導致消旋化之任何實用方式回收光學上純對映異構體與解析劑。

經標記之化合物

於一些實施例中，本文所述化合物以其同位素標記形式存在。於一些實施例中，本文所揭示方法包括投與該等經同位素標記之化合物來治療疾病之方法。於一些實施例中，本文所揭示方法包括投與呈醫藥組合物形式之該等經同位素標記之化合物來治療疾病之方法。因此，於一些實施例中，本文所揭示的化合物包括經同位素標記之化合物，彼等與本文中例舉的其等相同，但事實上一或多個原子係經具有與實際上天然原子質量或質量數不同的原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟及氯之同位素，分別為諸如²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F、及³⁶Cl。包含前述同位素及/或其他原 子之其他同位素之本文所述化合物、及其代謝產物、醫藥上可接受之鹽、酯、前藥、溶劑合物、水合物或衍生物屬於本發明範疇內。某些經同位素標記之化合物(例如，併入放射性同位素(諸如³H及¹⁴C)之其等)適用於藥物及/或基質組織分佈檢測。氚化(即³H)及碳-14(即¹⁴C)同位素就其製備容易度及可檢測性而言係特別佳。此外，改為重同位素(諸如氘(即²H))替代獲得一些由於更大代謝穩定性所致之治療優點，例如，活體內半衰期增加或對劑量的要求降低。於一些實施例中，藉由任一適宜方法製得經同位素標記之化合物、其醫藥上可接受之鹽、酯、前藥、溶劑合物、水合物或衍生物。

於一些實施例中，藉由其他方法標記本文所述之化合物，包括(但不限於)使用發色團或螢光部分、生物發光標記物、或化學發光標記物。

醫藥上可接受之鹽

於一些實施例中，本文所述化合物係呈其醫藥上可接受之鹽存在。於一些實施例中，本文所揭示之方法包括投與該等醫藥上可接受之鹽來治療疾病之方法。於一些實施例中，本文所揭示之方法包括投與呈醫藥組合物之該等醫藥上可接受之鹽來治療疾病之方法。

於一些實施例中，本文所述化合物具有酸性或鹼性基團且因此與大量之無機或有機鹼、及無機及有機酸中任一者反應形成醫藥上可接受之鹽。於一些實施例中，該等鹽係於本發明化合物之最終單離及純化期間在原位製得，或係藉由分別使呈其游離形式之純化化合物與適宜酸或鹼反應、且單離出如此形成之鹽製得。

醫藥上可接受之鹽之實例包括藉由本文所述化合物與礦物質、有機酸或無機鹼反應所製得之其等鹽，該等鹽包括乙酸鹽、丙烯酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、丁炔-1,4-二酸鹽、樟腦酸鹽、樟 腦磺酸鹽、己酸鹽、辛酸鹽、氯苯甲酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、癸酸鹽、雙葡萄糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯甲酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、乙醇酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、己炔-1,6-二酸鹽、羥基苯甲酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、碘化物、異丁酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、扁桃酸鹽、偏磷酸鹽、甲磺酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、磷酸氫鹽、1-萘磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、巴莫酸鹽(palmoate)、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、焦硫酸鹽、焦磷酸鹽、丙炔酸鹽、酞酸鹽、苯乙酸鹽、苯丁酸鹽、丙磺酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、亞硫酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽及二甲基苯磺酸鹽。

此外，本文所述之化合物可藉由使化合物之游離鹼形式與包括(但不限於)以下之醫藥上可接受之無機或有機酸反應製成醫藥上可接受之鹽形式：無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、偏磷酸等；及有機酸，諸如乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、對甲苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、芳基磺酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲基雙環[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4,4'-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、麩胺酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸及黏康酸。於一些實施例中，其他酸(諸如草酸)雖然本身係醫藥不可接受但仍可用於製備適於作為獲得本發明化合物及其醫藥上可接受之酸加成鹽中之中間物之鹽。

於一些實施例中，於本文中所述包含游離酸基之其等化合物係與諸如以下之適宜鹼：醫藥上可接受之金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸鹽、與氨、或與醫藥上可接受之有機一級、二級或三級胺發生反應。代表性鹼或鹼土金屬鹽包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、及鋁鹽等。鹼之例示性實例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化膽鹼、碳酸鈉、N⁺(C_1-4烷基)₄等。

適用於形成鹼加成鹽之代表性有機胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。應明瞭本文所述之化合物亦包括其所含任何鹼性含氮基團之季銨化。於一些實施例中，藉由此季銨化獲得水或油-可溶性或可分散性產物。本文所述化合物可於存在於母體化合物中之酸質子或經金屬離子(例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子、或鋁離子)置換；或與有機鹼配位時製成醫藥上可接受之鹽形式。鹼加成鹽亦可藉由使本文所述化合物之游離酸形式與包括(但不限於)以下之醫藥上可接受之無機或有機鹼製得：有機鹼，諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、N-甲基葡糖胺等，及無機鹼，諸如氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉等。此外，可使用起始物質或中間物之鹽製得所揭示化合物之鹽形式。

溶劑合物

於一些實施例中，本文所述之化合物係呈溶劑合物存在。本發明提供藉由投與該等溶劑合物來治療疾病之方法。本發明進一步提供藉由投與呈醫藥組合物之該等溶劑合物來治療疾病之方法。

溶劑合物包含化學計量或非化學計量量中任何一種量的溶劑，且於一些實施例中，係在藉由醫藥上可接受之溶劑(諸如水、乙醇等)進行結晶過程中形成。水合物係在溶劑為水之情況下形成，或醇化物係在溶劑為醇時形成。可簡便地於本文所述製程期間製得或形成本文所述化合物之溶劑合物。僅舉例言之，可簡便地使用有機溶劑(包括 (但不限於)二噁烷、四氫呋喃或甲醇)由水性/有機溶劑混合物再結晶製得本文所述化合物之水合物。此外，於本文中提供的化合物可呈非溶劑化及溶劑化形式存在。一般而言，出於本文中提供的化合物及方法之目的，該等溶劑化形式被認為是等同於非溶劑化形式。

多晶型

於一些實施例中，本文所述化合物係呈多晶型存在。本發明提供藉由投與該等多晶型來治療疾病之方法。本發明進一步提供藉由投與呈醫藥組合物之該等多晶型來治療疾病之方法。

因此，本文所述之化合物包括其所有結晶形式(稱為多晶型)。多晶型包括一化合物之相同元素組成之不同結晶包裝配置。於某些實例中，多晶型具有不同之X射線繞射圖樣、紅外光譜、熔點、密度、硬度、結晶形狀、光學及電特性、穩定性及溶解度。於某些實例中，多種因素諸如再結晶溶劑、結晶速率、及貯藏溫度導致單一晶體形式為主。

多晶型1型

於一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型1型展現特徵為概述於表1A或表1B中之繞射圖樣之x射線粉末繞射圖樣。於一些實施例中，本文提供包含表1A或1B中至少3個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型。於某些實施例中，本文提供包含表1A或1B中至少4個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少5個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少6個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少8個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少10個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少15個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少20個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少25個峰(±0.1°2θ)、或表1A中至少30個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型。

於本文所提供之一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型1型之特徵係位於10.32、18.84、及20.75°2θ(±0.1°2θ)處之x射線粉末繞射圖樣峰。於其他實施例中，該多晶型1型之特徵進一步為出現在6.80、21.54、24.97、25.53、27.28及27.60°2θ(±0.1°2θ)處之至少一個峰。於其他實施例中，該結晶型體1型之特徵進一步為出現在6.80、21.54、24.97、25.53、27.28及 27.60°(2θ±0.1°2θ)處之至少兩個峰。又於其他實施例中，該多晶型展現實質上與圖1中所顯示x射線粉末繞射圖樣相同之x射線粉末繞射圖樣。

多晶型2型

於一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型2型展現特徵為概述於表2A或表2B中之繞射圖樣之x射線粉末繞射圖樣。於一些實施例中，本文提供包含表2A或2B中至少3個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型。於一些實施例中，本文提供包含表2A或2B中至少4個峰(±0.1°2θ)、表2A或2B中至少5個峰(±0.1°2θ)、表2A或2B中至少6個峰(±0.1°2θ)、表2A或2B中至少8個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少10個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少15個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少20個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少25個峰(±0.1°2θ)、或表2A中至少30個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型。

於本文所提供之一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽之多晶型2型之特徵為位於10.46、18.76、及19.83°2θ(±0.1°2θ)處之x射線粉末繞射圖樣峰。於其他實施例中，該多晶型2型之特徵進一步為出現在18.21、或23.08°2θ(±0.1°2θ)處之至少一個峰。於其他實施例中，該多晶型2型之特徵進一步為出現在18.21、或23.08°2θ(±0.1°2θ)處之兩個峰。又於其他實施例中，該多晶型2型展現實質上與圖5中所顯示x射線粉末繞射圖樣相同的x射線粉末繞射圖樣。

於某些實例中，觀察到2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽之結晶多晶型展現相較羧酸之非晶型固態形式增加之穩定性。於一些實例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽結晶多晶型之改良穩定性提供用以製得相較由羧酸之非晶型固態形式製得之醫藥劑型展現存於給定劑型中之劑量可變性減小、最終醫藥產品中雜質存在量減少、及調配劑型存放期改良 之醫藥劑型。於一些實施例中，本文所述之多晶型(例如，1型或2型)於加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少3個月、於加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少4個月、於加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少5個月、加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少6個月、於加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少9個月、於加速條件(例如，40℃-75% RH)下貯存至少12個月、及/或(ii)於長期條件(例如，25℃-60% RH)下貯存至少12個月、於長期條件(例如，25℃-60% RH)下貯存至少18個月、於長期條件(例如，25℃-60% RH)下貯存至少24個月顯示無降解(例如，降解量小於0.01重量%、小於0.1重量%、小於0.5重量%)。

另外，於某些實例中，藉由重力蒸氣吸附(GVS)研究測定，觀察到2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽之結晶多晶型相較其他固態形式展現降低的吸濕性。圖12繪示1型及2型之GVS研究。觀察到1型於高濕度下<0.2% w/w之吸收及2型於高濕度下<0.1% w/w之吸收。吸濕性降低之此特性極大程度上有助於固體醫藥劑型之製備。

多晶型A型

於一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型A型展現特徵為概述於表1A或表1B中之繞射圖樣之x射線粉末繞射圖樣。於一些實施例中，本文提供包含表1A或1B中至少3個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型。於某些實施例中，本文提供包含表1A或1B中至少4個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少5個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少6個峰(±0.1°2θ)、表1A或1B中至少8個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少10個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少15個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少20個峰(±0.1°2θ)、表1A中至少25個峰(±0.1°2θ)、或表1A中至少30個峰 (±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型。

於本文所提供之一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型A型之特徵為位於4.90、9.83、及25.29°2θ(±0.1°2θ)處之x射線粉末繞射圖樣峰。於其他實施例中，該多晶型A型之特徵進一步為出現在6.86、8.41、10.13、17.92、及23.10°2θ(±0.1°2θ)處之至少一個峰。於其他實施例中，該多晶型A型之特徵進一步為出現在6.86、8.41、10.13、17.92、及23.10°2θ(±0.1°2θ)處之至少兩個峰。又於其他實施例中，該多晶型展現實質上與圖13中所顯示x射線粉末繞射圖樣相同的x射線粉末繞射圖樣。

多晶型B型

於一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基 硫基)乙酸鈉多晶型B型展現特徵為概述於表2A或2B中之繞射圖樣之x射線粉末繞射圖樣。於本文一些實施例中提供包含表2A或2B中至少2個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型。於某些實施例中，本文提供包含表2A或2B中至少3個峰(±0.1°2θ)、表2A或2B中至少4個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少5個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少6個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少8個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少10個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少12個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少14個峰(±0.1°2θ)、表2A中至少16個峰(±0.1°2θ)之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)乙酸鈉多晶型。

於本文所提供之一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型B型之特徵為位於4.22、8.51、及16.95°(2θ±0.1°2θ)處之x射線粉末繞射圖樣峰。於另一實施例中，該多晶型B型之特徵進一步為出現在12.80°2θ(±0.1°2θ)處之峰。又於其他實施例中，該多晶型展現實質上與圖17中所顯示x射線粉末繞射圖樣相同的x射線粉末繞射圖樣。

多晶型B'型

於一實施例中，2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉多晶型B'型展現特徵為概述於圖19中之繞射圖樣之x射線粉末繞射圖樣。

與非晶型固態形式之混合物

於某些實施例中，本文所述任何多晶型(例如，1型)視情況包含(或係混雜或組合)特定量的非晶型2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽。於一些實施例中，多晶型(例如，1型)或多晶型組合之非晶型組分佔多晶型或多晶型組合小於50重量%、佔多晶型或多晶型組合小於25重量%、佔多晶型或多晶型組合小於15重 量%、佔多晶型或多晶型組合小於10重量%、或佔多晶型或多晶型組合小於5重量%。

於某些實施例中，本文所述任何多晶型(例如，A型)視情況包含(係混雜或組合)特定量的非晶型2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉。於一些實施例中，多晶型(例如，A型)或多晶型組合之非晶型組分佔多晶型或多晶型組合小於50重量%、佔多晶型或多晶型組合小於25重量%、佔多晶型或多晶型組合小於15重量%、佔多晶型或多晶型組合小於10重量%、或佔多晶型或多晶型組合小於5重量%。

粒度

於一些實施例中，本文提供2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型顆粒(例如，結晶，或包括結晶組分)。於一些實施例中，本文提供具有約5-50微米粒度之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽多晶型(例如，結晶，或包括結晶組分)。於一些實施例中，平均粒度為至少10微米、15-50微米、15-35微米、35-45微米、35-40微米、約40微米、或類似。於一些實施例中，具有大5或10微米平均粒徑之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽(例如，結晶，或包含結晶組分，諸如多晶型1型)顆粒相較較小粒徑者具有改良的穩定性參數。

前藥

於一些實施例中，本文所述之化合物係呈前藥形式存在。本發明提供藉由投與該等前藥來治療疾病之方法。本發明進一步提供藉由投與呈醫藥組合物之該等前藥來治療疾病之方法。

前藥一般為在投與個體及隨後之吸收之後經由一些過程(諸如代謝途徑之轉化)轉化成活性、或更具活性種類之藥物前驅體。一些前藥具有存在於前藥上以致該前藥活性減小及/或賦予藥物溶解度或一 些其他性質之化學基團。自前藥裂解及/或修飾化學基團時即可產生活性藥物。前藥通常係有用的，因為於一些情況中，彼等相較母體藥物更容易投與。例如，前藥具口服之生物可利用性然而母體藥物則不然。於某些實例中，前藥亦具有優於母體藥物之於醫藥組合物中之改良溶解度。前藥之一實例為(但不限於)如本文所述呈酯(「前藥」)形式投與之化合物以利於跨越細胞膜傳送，其中水溶解性不利於遷移率，但活性實體一進入水溶解性係有益之細胞內後該化合物則經過代謝水解為羧酸。前藥之另一實例可為鍵結酸基之短肽(聚胺基酸)，於該酸基處肽經代謝以顯示活性部分。(參見：例如，Bundgaard之A Textbook of Drug Design and Development中之「Design and Application of Prodrugs」，Krosgaard-Larsen與Bundgaard編輯，1991年，第5章，113-191，其係以引用的方式併入本文中)。

於一些實施例中，前藥設計成可逆型藥物衍生物，作為用於促進藥物輸送至特定部位組織之改良劑。前藥之設計迄今已增加治療化合物之有效水溶解性，供靶向以水為主要溶劑之區域。

另外，本文所述化合物之前藥衍生物可藉由本文所述方法但亦係相關技藝熟知之方法製備(更多細節請參見Saulnier等人，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，1994，4，1985)。僅舉例言之，適宜之前藥可藉由使未衍化之化合物與適宜之胺基甲醯化劑(諸如(但不限於)1,1-醯氧基烷基氯甲酸酯、碳酸對硝基苯酯等)反應製得。其中前藥經活體內代謝產生本文所述衍生物之本文所述化合物之前藥形式包含於申請專利範圍之範疇內。實際上，有些本文所述化合物係另一衍生物或活性化合物之前藥。

於一些實施例中，前藥包括其中胺基酸殘基、或兩個或更多個(例如，兩個、三個或四個)胺基酸殘基之多肽鏈經醯胺或酯鍵共價結合至本發明化合物之游離胺基、羥基或羧酸基團之化合物。該等胺基 酸殘基包括(但不限於)20種天然胺基酸且亦包括4-羥基脯氨酸、羥基離胺酸、鎖鏈素(demosine)、異鎖鏈素(isodemosine)、3-甲基組胺酸、正纈胺酸、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、瓜胺酸、高半胱胺酸、高絲胺酸、鳥胺酸及甲硫胺酸碸。於其他實施例中，前藥包括其中核酸殘基、或兩個或更多個(例如，兩個、三個或四個)核酸殘基之寡核苷酸共價結合至本發明化合物之化合物。於一些實施例中，前藥包括包含呈烷基酯之化合物。於一些該等實施例中，烷基酯於活體內裂解而提供化合物1。酯前藥之非限制性實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、萜烯基、冰片基、烯丙基、沉香基或香葉草基酯。

本文所述化合物之醫藥上可接受之前藥亦包括(但不限於)酯、碳酸酯、硫代碳酸酯、N-醯基衍生物、N-醯氧基烷基衍生物、三級胺之四級衍生物、N-曼尼希鹼(Mannich base)、席夫鹼(Schiff base)、胺基酸共軛物、磷酸酯、金屬鹽及磺酸酯。具有游離胺基、醯胺基、羥基或羧基之化合物可轉化形成前藥。例如，游離羧基可衍生為醯胺或烷基酯。於某些實例中，所有該等前藥部分併有包括(但不限於)醚、胺及羧酸官能基之基團。

如Advanced Drug Delivery Reviews 1996,19,115中所概述，羥基前藥包括酯，諸如(但不限於)醯氧基烷基(例如，醯氧基甲基、醯氧基乙基)酯、烷氧羰氧基烷基酯、烷基酯、芳基酯、磷酸酯、磺酸酯、硫酸酯及含二硫基之酯；醚、醯胺、胺基甲酸酯、半琥珀酸酯、二甲胺基乙酸酯及磷醯氧基甲氧基羰基化合物。

由胺衍生之前藥包括(但不限於)以下基團及基團之組合：

以及磺醯胺及磷醯胺。

實例

於下文提供之實例及製法進一步說明及例示本發明之化合物及製備該等化合物之方法。應明瞭本發明之範疇不以任何方式受限於以下實例及製法之範疇。

實例1A：化合物2之合成法

將二甲基甲醯胺(2.63kg±5%<>2.8 l±5%)加至反應器。加熱該二甲基甲醯胺至介於27℃與35℃之間之溫度。小份將化合物5(1.0kg±1%)加至同一反應器同時維持溫度在27℃與35℃之間。將溴乙酸甲酯(0.6008/M×100kg±1%<>0.3620/M×100 l±1%)加至該反應混合物同時維持溫度在27℃與35℃之間(例如，在28℃與33℃之間)，其中M為溴乙酸甲酯之藉由GC之面積%計的純度。溴乙酸甲酯之添加係少許放熱的。

在介於27℃與35℃之間(例如，在28℃與33℃之間)之溫度下攪拌該混合物持續至少10分鐘但不超過20分鐘。

歷時至少30分鐘但不超過70分鐘時間小份將碳酸氫鈉(0.314kg±1%)加至該反應混合物同時維持溫度在27℃與35℃之間。於小份 添加碳酸氫鈉期間釋放出二氧化碳氣體。

在介於27℃與35℃之間(例如，介於28℃與33℃之間)之溫度下攪拌該混合物持續至少1小時但不超過4小時。使該反應混合物冷卻至介於5℃與10℃之間之溫度，且接著獲得試樣以供HPLC分析。

若化合物5含量低於0.50% HPLC面積，較佳低於0.20% HPLC面積，則該反應被認為係完全。若在第二次取樣之後未達成反應完全，則加熱該反應混合物至介於27℃與35℃之間之溫度。將溴乙酸甲酯(0.0172/M×100kg±1%<>0.0103/M×100 l±1%)加至該反應混合物同時維持溫度在27℃與35℃之間(例如，在28℃與33℃之間)。在介於27℃與35℃之間(例如，介於28℃與33℃之間)之溫度下攪拌該混合物持續至少30分鐘但不超過2小時，接著獲得試樣以供HPLC分析。

若反應係完全，則歷時至少15分鐘時間將臭氧去離子水(9.0 l±5%)加至該反應混合物同時維持溫度在5℃與20℃之間。於添加期間，可釋放出二氧化碳氣體。臭氧去離子水之添加係少許放熱的。攪拌該混合物持續至少30分鐘同時維持溫度在5℃與10℃之間。

歷時至少10分鐘時間將預先藉由將碳酸氫鈉(0.105kg±1%)溶解於臭氧去離子水(1.47 l±5%)中所製得之溶液加至該混合物同時維持溫度在5℃與20℃之間直到該混合物之pH在6.7與8.0之間(例如，在6.9與7.3之間)。攪拌該懸浮液至少60分鐘同時維持溫度在5℃與10℃之間。過濾該懸浮液。以預先已冷卻至介於5℃與10℃之間之溫度的臭氧去離子水(2.0 l±5%)洗滌濕濾餅兩次。

以預先已冷卻至介於0℃與5℃之間之溫度的乙酸乙酯(0.09kg±5%<>0.1 l±5%)與異丙醇(0.79kg±5%<>1.0 l±5%)之混合物洗滌該濕濾餅兩次。

於真空在低於45℃之溫度下乾燥該濕濾餅直到水含量(藉由卡爾費歇爾分析(Karl Fischer analysis)測得)低於或等於0.5% w/w、較佳低 於或等於0.1% w/w，乙酸乙酯含量(藉由GC測得)低於或等於200ppm，異丙醇含量(藉由GC測得)低於或等於600ppm及二甲基甲醯胺含量(藉由GC測得)低於或等於10000ppm。

實例1B：化合物2之合成法

2-((4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯之大規模製法

2-((4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯大規模製法之批量大小為1.0kg。化學計量產率計算值為126.95% w/w，預期產率為120±6% w/w(95±5%莫耳)。

步驟1

將二甲基甲醯胺(2.86kg±5%；3.05L±5%)加至反應器，且加熱至15-23℃。小份將4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-硫醇(1.0kg±1.5%)加至該反應器，維持溫度在15℃與23℃之間。將碳酸氫鈉(0.161kg±1%)加至該反應器，維持溫度在15℃與23℃之間。將溴乙酸甲酯(0.6095kg±1%；0.3672L±1%)加至該反應器，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。

若溴乙酸甲酯純度<99.0%(藉由GC測得)則遵照公式：0.6065/M×100kg±1%；0.3654/M×100L±1%，其中M為溴乙酸甲酯之純度(藉由GC以面積%測得)，添加數量。溴乙酸甲酯之添加係少許放熱的。用二甲基甲醯胺(0.19kg±5%；0.2L±5%)沖洗加料線，將沖洗液加至該反應器，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。

攪拌該混合物至少20分鐘但不超過40分鐘，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。歷時至少20分鐘但不超過120分鐘時間小份將碳酸氫鈉(0.161kg±1%)加至該反應器，維持溫度在15℃與30℃之間。請注意碳酸氫鈉之添加係吸熱的，且釋放出二氧化碳氣 體。攪拌該混合物至少1小時但不超過8小時，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。

當4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-硫醇含量藉由HPLC以面積%計低於1.0%，較佳藉由HPLC以面積%計低於0.50%時，則該反應被認為係完全。若反應係完全，則繼續步驟3。若反應不完全，則取另一試樣進行HPLC分析；若反應仍舊不完全，則繼續步驟2。

步驟2

將溴乙酸甲酯(0.01146kg±1%；0.00683L±1%)加至該反應器，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。

若溴乙酸甲酯純度<99.0%(藉由GC計)則遵照公式：0.0114/M×100kg±1%；0.0068/M×100L±1%，其中M為溴乙酸甲酯之純度(藉由GC計，單位為面積%)，添加數量。以二甲基甲醯胺(4.7kg±5%；5L±5%-定量)沖洗加料線，將沖洗液加至該反應器，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。

攪拌該混合物至少30分鐘但不超過2小時，維持溫度在15℃與30℃之間(較佳在17℃與21℃之間)。當4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-硫醇含量藉由HPLC以面積%計低於1.0%，較佳藉由HPLC以面積%計低於0.50%時，則該反應被認為係完全。

若反應係完全，則繼續步驟3。若反應不完全，則取另一試樣進行HPLC分析。若在第二次取樣之後反應仍舊不完全，則重複步驟2。

步驟3

歷時至少15分鐘時間將臭氧去離子水(0.5L±5%)加至該反應混合物，維持溫度在10℃與30℃之間。該添加係少許放熱的且可釋放出二氧化碳氣體。攪拌該混合物至少30分鐘，維持溫度在10℃與30℃之間，於此段時間期間可形成沉澱，該沉澱形成係少許放熱的。

歷時至少30分鐘時間將第二份臭氧去離子水(8.5L±5%)加至該反 應混合物，維持溫度在10℃與30℃之間，於此時段期間沉澱出產物。該添加係放熱的且可釋放出二氧化碳。

使該懸浮液冷卻至5-10℃。測量該懸浮液之pH。若需要，則藉由歷時至少10分鐘時間添加預先製得之含碳酸氫鈉(0.105kg±1%)之臭氧去離子水(1.47L±5%)溶液將pH調整至介於6.3與8.3之間(較佳介於6.9與7.3之間)，維持溫度在5℃與10℃之間。

歷時至少10分鐘時間添加臭氧去離子水(1.0L±5%)，維持溫度在5℃與10℃之間。攪拌該懸浮液至少60分鐘，維持溫度在5℃與10℃之間。

步驟4

過濾該懸浮液。以預先已冷卻至介於5℃與10℃之間之臭氧去離子水(2.0L±5%)洗滌濕濾餅。以預先已冷卻至5-10℃之臭氧去離子水(2.0L±5%)第二次洗滌該濕濾餅。以預先已冷卻至0-5℃之乙酸乙酯(0.09kg±5%；0.1L±5%)及異丙醇(0.79kg±5%；1.0L±5%)之溶液洗滌該濕濾餅。以預先已冷卻至0-5℃之乙酸乙酯(0.09kg±5%；0.1L±5%)及異丙醇(0.79kg±5%；1.0L±5%)之溶液洗滌該濕濾餅。

於真空低於60℃下乾燥該濕濾餅直到水含量(藉由卡爾費歇爾分析測得)0.2% w/w，較佳0.1% w/w；乙酸乙酯含量(藉由GC測得)200ppm；異丙醇含量(藉由GC測得)600ppm；及二甲基甲醯胺含量(藉由GC測得)10000ppm。

實例2A：化合物1及化合物4之合成法

將化合物2(1.0kg±1%)加至反應器。四氫呋喃(100960；6.2kg±1%<>7.0 l±1%)加至同一反應器。加熱該混合物至介於35℃與42℃之間之溫度。在介於35℃與42℃之間之溫度下攪拌該混合物至少10分鐘獲得透明溶液。使該反應混合物冷卻至介於27℃與32℃之間之溫度。

將N-溴琥珀醯亞胺(0.734kg±1%)加至該反應混合物同時維持溫度在27℃與32℃之間(例如，在27℃與30℃)之間。在介於27℃與32℃之間(例如，介於27℃與30℃之間)之溫度下攪拌該混合物直到反應完全。

當化合物2含量藉由HPLC以面積%計低於1.5%，較佳藉由HPLC以面積%計低於0.2%時，該反應被認為係完全。

於攪拌20至40分鐘之後取該反應之試樣進行HPLC分析以測定化合物2含量。基於HPLC分析，視情況添加額外量的N-溴琥珀醯亞胺(0.105kg±1%)同時維持溫度在27℃與32℃(例如，27℃與30℃)之間。或者，在介於27℃與32℃之間(例如，介於27℃與30℃之間)之溫度下繼續攪拌直到反應完全。

使該反應混合物冷卻至介於2℃與7℃之間(例如，介於2℃與5℃之間)之溫度。將甲苯(4.33kg±5%)加至該混合物，同時維持溫度在2℃與7℃之間(例如，在2℃與5℃之間)。

歷時至少10分鐘時間將臭氧去離子水(5.0 l±5%)加至該反應混合物，同時維持溫度在2℃與7℃之間(例如，在2℃與5℃之間)。臭氧去離子水之添加係放熱的且在添加期間可出現氣體釋放。攪拌該混合物至少30分鐘同時維持溫度在2℃與7℃之間(例如，在4℃與6℃之間)。

停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出水相(下層相)。歷時至少10分鐘時間將預先藉由將亞硫酸氫鈉(0.112kg±1%)溶解於臭氧去離子水(5.0 l±5%)製得之溶液加至有機相，同時維持溫度在2℃與7℃之 間。亞硫酸氫鈉溶液之添加係放熱的。於添加期間可出現氣體釋放。

攪拌該懸浮液至少30分鐘同時維持溫度在2℃與7℃之間。取該混合物之一試樣。若該試樣之水相為淺黃色，則另以亞硫酸氫鈉進行洗滌步驟。若該試樣之水相為無色，則將取該試樣進行HPLC分析。若藉由HPLC檢測到N-溴琥珀醯亞胺之峰則另以亞硫酸氫鈉進行洗滌並重複該HPLC分析直到藉由HPLC不再可檢測到NBS。

停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)並與前面的水相合併。加熱包含化合物3之有機相至介於18℃與25℃之間之溫度。將臭氧去離子水(5.0 l±5%)加至該有機相同時維持溫度在18℃與25℃之間。攪拌該混合物至少15分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)。

將預先藉由將碳酸氫鈉(0.35kg±1%)溶解於臭氧去離子水(5.0 l±5%)中製得之溶液加至有機相同時維持溫度在18℃與25℃之間。攪拌該混合物至少15分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)。

若所排出水相之pH低於8.0，則重複碳酸氫鈉之洗滌步驟直到水相之pH高於8.0。

歷時至少10分鐘時間將預先藉由將氫氧化鈉(純)(0.1473kg±1%)溶解於臭氧去離子水(3.61 l±5%)中製得之溶液加至包含化合物3之有機相同時維持溫度在18℃與25℃之間。

在介於18℃與25℃之間之溫度下攪拌該混合物至少2小時直到反應完全。當有機相中化合物3之HPLC峰面積低於50mAU時，則該反應被認為係完全。若反應不完全則在再次取樣之前另攪拌該反應混合物2小時。若在6小時攪拌之後未達成反應完全，則添加額外量的氫氧化鈉水溶液且在該添加3小時後再次取樣。在此時該反應混合物具有兩個相。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出水相(下層相)至反 應器或接收器。重複此步驟且合併水層。排出有機相(上層相)以廢棄處置。

於真空在低於或等於40℃之溫度下濃縮該等水相直到利用不低於75毫巴之真空壓力收集不到蒸餾物。

取該水相之一試樣以測定該濃縮水相中之化合物4含量。調整濃縮水相之體積至約5.5×W l±5%之體積，其中W為自分析試樣計算得之化合物1的含量(單位為Kg)。

歷時至少2小時使該混合物冷卻至介於5℃與0℃之間之溫度。攪拌該混合物至少2小時同時維持溫度在0℃與5℃之間。在此時發生該鈉鹽(即化合物4)之結晶。

加熱該懸浮液至介於17℃與19℃之間之溫度。攪拌該混合物至少1小時同時維持溫度在17℃與19℃之間。在此攪拌時段之後化合物4鈉鹽仍保持結晶。

歷時至少4小時使該混合物冷卻至介於15℃與13℃之間之溫度。歷時至少2小時使該混合物冷卻至介於5℃與0℃之間之溫度。攪拌該混合物至少2小時且較佳不超過4小時，同時維持溫度在0℃與5℃之間。

過濾該懸浮液。於氮流結合真空下以預先已冷卻至介於0℃與5℃之間之溫度之臭氧去離子水(0.50 l±5%)洗滌濕濾餅多達3次。

在不高於35℃之溫度下以臭氧去離子水(4.5 l±5%)溶解包含化合物4之濕濾餅，且將該溶液轉移至反應器或接收器。取該水溶液之一試樣以測定化合物1含量(W2)。W2為自分析試樣計算得之化合物1的含量(單位為Kg)。

將乙酸乙酯(9.0×W2 kg±5%<>10.0×W2 l±5%)加至該水溶液。將24%氫溴酸水溶液(可變量)加至該混合物，同時維持溫度低於或等於35℃，直到該混合物之pH在2.0與4.0之間(例如，在3.0與4.0之間)。在 pH降至2.0以下之情況下添加氫氧化鈉水溶液至該混合物。攪拌該混合物至少30分鐘同時維持溫度在30℃與35℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。

排出有機相(上層相)至反應器或接收器且取該水相之一試樣進行HPLC分析。若化合物1之HPLC峰面積高於500mAU，則重複氫溴酸之洗滌並合併包含化合物1之該等水相。

將乙酸乙酯(0.9×W2 kg±5%<>1.0×W2 l±5%)加至該水相同時維持溫度在30℃與35℃之間。攪拌該混合物至少30分鐘同時維持溫度在30℃與35℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。

排出有機相(上層相)至反應器或接收器且取該水相之一試樣進行HPLC分析。若化合物1之HPLC峰面積高於500mAU則重複乙酸乙酯之萃取。

排出水相(下層相)以廢棄處置。將臭氧去離子水(2.0×W2 lI±5%)加至已合併之有機相，同時維持溫度在30℃與35℃之間。攪拌該混合物至少30分鐘同時維持溫度在30℃與35℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出水相(下層相)以廢棄處置。

透過孔隙度不大於1微米之過濾器過濾該有機相，且將濾液轉移至反應器或接收器。於真空在低於或等於38℃之溫度下(例如，在介於18℃與25℃之間之溫度下)濃縮經過濾之有機相直到最終體積在7.3×W2 I及7.7×W2 I之間。化合物1可在此時結晶。

加熱該混合物至介於35℃與42℃之間(例如，介於38℃與40℃之間)之溫度且攪拌至少3小時但不超過8小時(例如，介於3與5小時之間)同時維持該溫度。

視情況添加化合物1之游離酸晶種之固體或其懸浮於預先透過孔隙度不大於1微米之過濾器過濾之正庚烷(0.5×W2 I-定量)中之懸浮液。

於真空在低於或等於38℃之溫度(例如，介於18℃與25℃之間之溫度)下濃縮經過濾之有機相直到最終體積在3.8×W2 I與4.2×W2 I之間。

將預先透過孔隙度不大於1微米之過濾器過濾之正庚烷(0.68×W2 kg±5%<>1.0×W2 l±5%)加至該懸浮液，同時維持溫度在35℃與42℃之間(例如，在38℃與40℃之間)。攪拌該混合物至少1小時同時維持溫度在35℃與42℃之間(較佳在38℃與40℃之間)。歷時至少2小時使該混合物冷卻至介於10℃與5℃之間之溫度。過濾該懸浮液。

以預先已冷卻至介於5℃與10℃之間之溫度之乙酸乙酯(0.63×W2 kg±5%<>0.7×W2 l±5%)及正庚烷(0.48×W2 kg±5%<>0.7×W2 l±5%)之溶液洗滌濕濾餅且透過孔隙度不大於1微米之過濾器過濾。於真空在低於或等於50℃之溫度下乾燥該濕濾餅，直到正庚烷含量(藉由GC測得)低於或等於5000ppm，乙酸乙酯含量(藉由GC測得)低於或等於2500ppm，及水含量(藉由卡爾費歇爾分析測得)低於或等於0.5% w/w。

實例2B：化合物1及化合物4之合成法

2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸酯之大規模製法

2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽大規模製法之批量大小為1.0kg。化學計量產率計算值為119.1% w/w，預期產率為89±24% w/w(75±20%莫耳)。

步驟1

將2-((4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯(1.0kg±2%)加至反應器。將四氫呋喃(6.0kg±1%；6.8L±1%)加至該反應器。加熱該混合物至介於25℃與35℃之間(較佳介於29℃與31℃之間)之溫度。

在<3小時內將N-溴琥珀醯亞胺(0.8128kg±1%)加至反應器，維持溫度在25℃與40℃之間(較佳在31℃與34℃之間)。以四氫呋喃(0.18kg±1%；0.20L±1%)沖洗加料線，將沖洗液加至該反應器同時維持溫度在25℃與40℃之間(較佳在31℃與34℃之間)。

在介於25℃與40℃之間(較佳在31℃與34℃之間)之溫度下攪拌該混合物直到反應完全。當2-((4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯含量藉由HPLC以面積計<1.5%、較佳藉由HPLC以面積計<0.2%時，該反應被認為係完全。若在3小時後反應為不完全，則考量於25-40℃(較佳在31℃與34℃之間)再添加N-溴琥珀醯亞胺(0.052kg±1%)，以四氫呋喃(0.18kg±1%；0.20L±1%)沖洗加料線且將沖洗液加至該反應器同時維持溫度在25至40℃(較佳在31℃與34℃之間)。在另添加N-溴琥珀醯亞胺之後於再次取樣之前，熟化。

步驟2

使該反應混合物冷卻至2至7℃(較佳在2℃與5℃之間)。添加甲苯(5.20kg±5%；6.0L±5%)至該反應器同時維持溫度在2℃與7℃之間(較佳在2℃與5℃之間)。

歷時至少10分鐘時間將臭氧去離子水(5.0L±5%)加至該反應器同時維持溫度在2℃與7℃之間(較佳在2℃與5℃之間)。該添加係放熱的且可出現氣體釋放。攪拌至少30分鐘同時維持溫度在2℃與7℃之間(較佳在4℃與6℃之間)。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。若獲得乳液則添加甲苯(0.43kg±5%；0.5L±5%)同時維持溫度在2℃與7℃之間(較佳在4℃與6℃)之間，且在再次沉降該等相之前攪拌該混合物15分鐘。排出水相(下層相)。

歷時至少10分鐘時間將預先製得之含亞硫酸氫鈉(0.154kg±1%)之臭氧去離子水(5.0L±5%)溶液加至有機相同時維持溫度在2℃與7℃之間。該添加係放熱的且可出現氣體釋放。於製備亞硫酸氫鈉溶液期 間，針對於溴化反應期間每次所添加額外量之N-溴琥珀醯亞胺(0.052kg±1%)添加額外量之亞硫酸氫鈉(0.028kg±1%)多至最大添加量之亞硫酸氫鈉(0.196kg±1%)。

攪拌該懸浮液至少30分鐘同時維持溫度在2℃與7℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)且與前面所排出之水相合併。

加熱有機相至18至25℃。添加臭氧去離子水(5.0L±5%)至該有機相同時維持溫度在18℃與25℃之間。攪拌至少15分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)。

將預先製得之含碳酸氫鈉(0.42kg±1%)之臭氧去離子水(6.0 l±5%)溶液加至該有機相，同時維持溫度在18℃與25℃之間。於該添加期間可出現氣體釋放。攪拌至少15分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)。測量所排出水相之pH。若該pH低於8.0則繼續步驟3。若pH高於8.0則繼續步驟4。

步驟3

將預先製得之含碳酸氫鈉(0.42kg±1%)之臭氧去離子水(6.0L±5%)溶液加至該有機相，同時維持溫度在18℃與25℃之間。於該添加期間可出現氣體釋放。攪拌至少15分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少15分鐘。排出水相(下層相)。測量所排出水相之pH。若pH低於8.0則重複步驟3。若pH高於8.0則繼續步驟4。

步驟4

歷時至少10分鐘時間將預先製得之含純氫氧化鈉(0.1473kg±1%)之臭氧去離子水(3.61L±5%)溶液加至該有機相，同時維持溫度在20℃ 與30℃之間。在介於20℃與30℃之間之溫度下攪拌該混合物至少2小時直到反應完全。當該有機相中2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯之HPLC峰面積低於150mAU*(於292nm處)時，該反應被認為係完全。在攪拌2小時後測量pH。若pH12.0，則藉由HPLC分析試樣之有機相中2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯之峰面積。若該反應混合物之pH12.0，則添加預先製得之含純氫氧化鈉(0.0118kg±1%)之臭氧去離子水(0.29L±5%)溶液，且在攪拌2小時後再次取樣用於pH測定及/或HPLC分析。重複氫氧化鈉溶液之額外添加直到2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸甲酯之HPLC峰面積12.0。

在此時該反應混合物具有兩個相；停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出水相(下層相)至反應器或接收器。

將預先製得之含純氫氧化鈉(0.002kg±1%)之臭氧去離子水(2.0L±5%)溶液加至該有機相，同時維持溫度在18℃與25℃之間。攪拌至少30分鐘同時維持溫度在18℃與25℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出下層水相且與前面的水相合併。排出上層有機相以廢棄處置。

取該等合併水相之一試樣以測定2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸含量。於真空50℃(較佳介於35℃與45℃之間)下濃縮該等水相直到最終體積在5.0與5.6×W L之間，(其中W為自分析試樣計算得之2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸(「游離酸」)的含量，單位為kg)。反應器之夾套溫度不應超過55℃。

步驟5

歷時至少2小時冷卻至0至5℃，且再攪拌至少2小時，同時維持溫度在0℃與5℃之間。在此時應發生2-((4-(4-環丙基萘-1-基)-4H- 1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸鈉之結晶。加熱該懸浮液至17至19℃，且再攪拌至少1小時，同時維持溫度在17℃與19℃之間。於此攪拌時期該Na鹽應保持結晶。歷時至少4小時冷卻至13至15℃。歷時至少2小時進一步冷卻至0至5℃。攪拌至少2小時且較佳不超過4小時，同時維持溫度在0至5℃。

步驟6

於0至5℃下過濾該懸浮液。部分的母液可用於沖洗反應器壁上之產物。若需要，則以預先已冷卻至0至5℃之臭氧去離子水(0.45×W L±5%)洗滌濕濾餅多達三次。使用氮流結合真空。於轉移時，在過濾之前物質應靜置於過濾器中最少30分鐘。

步驟7

於50℃(較佳介於35℃與45℃之間)之溫度下將該濕濾餅溶解於臭氧去離子水(4.0×W L±5%)中，且將該溶液轉移至反應器或接收器。反應器及/或過濾器之夾套溫度應<55℃。以臭氧去離子水(0.5×W L±5%)洗滌該反應器及過濾器且將洗液與前面的水溶液合併。再次以臭氧去離子水(0.5×W L±5%)洗滌該反應器及過濾器且將洗液與前面的水溶液合併。

移取經溶解之鈉鹽溶液之一試樣以測定2-((5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫基)乙酸(「游離酸」；W2)含量。若W2比W低5%，則在步驟10及11中改用W2替代W。

添加乙酸乙酯(9.9×W kg±5%；11.0×W L±5%)。添加24%氫溴酸水溶液(可變量)，以達成介於2.0與4.0之間(較佳介於2.5與3.5之間)之pH，同時維持溫度38℃(較佳介於28℃與33℃之間)。所需的預期量為約0.80×W kg；0.66×W L氫溴酸溶液。若pH降至2.0以下則添加氫氧化鈉水溶液。

攪拌至少30分鐘同時維持溫度38℃(較佳在28℃與33℃之間)。 停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出上層有機相至反應器或接收器且移取該水相之一試樣以進行HPLC分析。若游離酸之HPLC峰面積>500mAU*(292nm)，則繼續步驟8。若游離酸之HPLC峰面積<500mAU*(292nm)，則繼續步驟9。

步驟8

將乙酸乙酯(0.9×W2 kg±5%；1.0×W2 L±5%)加至水相，同時維持溫度38℃(較佳介於28℃與33℃之間)。攪拌該混合物至少30分鐘同時維持溫度38℃(較佳介於28℃與33℃之間)。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出上層有機相至反應器或接收器，與前面的有機相合併，且移取該水相之一試樣以進行HPLC分析。若游離酸之HPLC峰面積>500mAU*(292nm)，則重複步驟8。若游離酸之HPLC峰面積>500mAU*(292nm)，則繼續步驟9。

步驟9

將臭氧去離子水(2.0×W l±5%)加至已合併之有機相，同時維持溫度在30℃與35℃之間。攪拌至少30分鐘同時維持溫度在30℃與35℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出下層水相以廢棄處置。

將臭氧去離子水(2.0×W l±5%)加至該有機相，同時維持溫度在30℃與35℃之間。攪拌至少30分鐘同時維持溫度在30℃與35℃之間。停止攪拌且容許層分離至少30分鐘。排出下層水相以廢棄處置。過濾有機相(過濾器孔隙度<1μm)且將濾液轉移至反應器或接收器。以乙酸乙酯(0.45×Wkg±5%；0.5×W L±5%)洗滌該反應器及該過濾器且將濾液轉移至一反應器或接收器。

步驟10

於真空38℃(較佳介於18℃與25℃之間)(反應器之夾套溫度不應超過42℃)下濃縮經過濾之有機相，至最終體積7.3-7.7×W L，於此時段期間可結晶出產物。加熱至35至42℃維持至少3小時(較佳3至5小 時)。攪拌該混合物至少4小時(較佳<8小時)，同時維持溫度在35℃與42℃之間(較佳在38℃與40℃之間)。產物應在此步驟開始時即已結晶。若在35至42℃下攪拌1小時後未觀察到結晶，則可對該批料接晶種，呈固體(可變量)或懸浮於預先過濾(過濾器孔隙度<1μm)之正庚烷(0.5×W L-定量)中之懸浮液添加。

於真空38℃(較佳在介於18℃與25℃之間之溫度)(夾套溫度<42℃)下濃縮經過濾之有機相，至最終體積在3.5×W L與3.8×W L之間。加熱至35至42℃維持至少1小時(較佳不超過4小時)。歷時至少1小時將預先過濾(過濾器孔隙度<1μm)之正庚烷(0.85×W kg±5%；1.25×W L±5%)加至該懸浮液，同時維持溫度在35℃與42℃之間(較佳在38℃與40℃之間)。攪拌至少1小時同時維持溫度在35℃與42℃之間(較佳在38℃與40℃之間)。歷時至少2小時冷卻至5至10℃。於5至10℃下攪拌至少2小時。

步驟11

過濾該懸浮液。若需要則使用部分的母液沖洗反應器壁上之產物，再進行正庚烷之洗滌。以預先已冷卻至介於-5與10℃之間(較佳0-5℃)之乙酸乙酯(0.63×W kg±5%；0.7×W L±5%)及正庚烷(0.48×W kg±5%；0.7×W L±5%)之溶液洗滌濕濾餅，然後過濾(過濾器孔隙度<1μm)。於真空60℃下乾燥該濕濾餅，直到正庚烷含量(藉由GC測得)5000ppm；乙酸乙酯含量(藉由GC測得)2500ppm；及水含量(藉由卡爾費歇爾分析測得)0.5% w/w。

實例2C：化合物1及化合物4之合成法

溴化步驟：溴化化合物2以獲得化合物3之最佳化

嘗試溴化劑、溶劑、反應時間及溫度之若干組合以確定用於溴化步驟之最佳條件。結果概述於下表中。

實例3：由化合物8製備化合物5-硫氰酸酯法

將化合物8與硫氰酸鈉一起懸浮於二甲苯中且添加水。將該混合物加熱至90℃直到消耗化合物8。將該混合物進一步加熱至140℃同時蒸餾除去水，直到形成異氰硫酸鹽化合物9。添加矽膠並過濾該懸浮液。利用二甲苯洗滌固體且以HCl水溶液萃取濾液兩次。於隨後在真空中儘量多地濃縮該溶液且將殘餘物溶解於DMF中。添加含甲醯肼之DMF溶液。於50至55℃下攪拌該混合物及添加碳酸鉀之水溶液。於隨後攪拌該混合物直到完全轉化，冷卻接著藉由添加硫酸將pH調整至6至7。藉由過濾單離出產物，利用異丙醇及水洗滌。於乾燥之後，單離出呈淡黃色固體之產物5。視情況，藉由溶解於回流下及經木炭處理之異丙醇中進一步純化化合物5。過濾該混合物及藉由於真空中濃縮來再次使產物結晶。

實例4：由化合物8-A製備化合物5-硫光氣法

強力攪拌化合物8(44g)、200mL甲苯、及475g 20%草酸二鉀及 使包含化合物8-A之該混合物冷卻至5℃。歷時1小時添加硫光氣(1.5L)。透過矽藻土過濾該混合物且利用甲苯洗滌濾餅。收集濾液且於真空中移除甲苯。將殘餘物溶解於16：1己烷：乙酸乙酯中且透過矽膠過濾該混合物。收集濾液且於真空中移除溶劑以提供呈固體之化合物9(69g)。

將6g化合物9懸浮於12mL乙腈中且將該混合物加熱至35℃。歷時20分鐘分三次添加1.68g甲醯肼且於35℃下攪拌該混合物2小時，接著冷卻至4℃並攪拌過夜。過濾該反應混合物，利用5：1己烷：乙酸乙酯洗滌濾餅且於40℃下乾燥以提供5.85g化合物5。

實例5：由化合物11合成化合物1

將化合物11及溴乙酸甲酯溶解於DMF中且在介於14與22℃之間之溫度下攪拌可提供化合物12。藉由使該反應混合物冷卻至10至15℃之溫度接著利用碳酸氫鈉水溶液調整pH，單離出產物。過濾所得固體(化合物12)且先用水洗滌，接著用冷(0至5℃)乙酸乙酯洗滌。

於乙腈中將化合物12與溴化銅(II)及亞硝酸鉀混合且在介於14與20℃之間之溫度下攪拌直到反應完全。在添加氫氧化鈉水溶液及檸檬酸至該反應混合物之後，使用甲苯萃取產物(化合物3)且以氫氧化銨及檸檬酸鈉之水溶液洗滌有機層若干次以移除銅鹽。

粗製化合物3溶液藉由添加氫氧化鈉水溶液經歷鹼介導之水解。於18至25℃下攪拌該雙相混合物直到酯完全水解，然後使用氫溴酸水溶液將水層之pH調整至介於8與9之間。在兩個相之分離之後，添加乙酸乙酯至該水層，然後將pH調整至介於5.15與5.35之間以萃取產物(化合物1)至有機層中。重複此製程序若干次直到萃取得所有化合物1。於30至35℃下加熱已合併之有機層然後循環穿過活性碳床且接著穿過孔隙度小於0.5微米之過濾器。添加碳酸氫鈉水溶液以萃取化合物1至水層中，於減壓在低於40℃之溫度下濃縮該水層繼而添加乙酸同時維持溫度在40及60℃之間。

將該混合物加熱至介於73與77℃之間之溫度繼而結晶出粗製化合物1之游離酸，於此時間點添加水。於7至13℃下過濾粗製游離酸，利用乙酸與水之冷混合物洗滌，且於減壓在低於50℃之溫度下乾燥。

藉由添加等莫耳氫氧化鈉水溶液至於18至25℃下攪拌之含粗製化合物1之水懸浮液，形成鈉鹽(化合物4)。在使水性混合物冷卻時結晶出化合物4，過濾且利用冷水洗滌，接著溶解於溫水中繼而透過孔隙度不大於1微米之過濾器過濾。添加乙酸乙酯，將該雙相混合物加熱至30至35℃接著添加氫溴酸之水溶液。在添加乙酸乙酯之後萃取化合物1於有機層中。利用水洗滌包含產物之該有機層然後於減壓下濃縮。自該溶液中結晶出化合物1。添加不同量的正庚烷以完成結晶。晶型化合物1經過濾且利用乙酸乙酯與正庚烷之混合物洗滌，然後於減壓下乾燥同時維持乾燥器之溫度低於50℃。

實例6：化合物11之合成法-方法1

依照此途徑，在催化量的[1,3-雙(二苯基膦基)丙烷]二氯鎳(II)存在下，將溴化環丙基鎂加至於0至5℃下攪拌之含溴萘之四氫呋喃溶液以形成環丙基萘，以乙酸乙酯稀釋該溶液然後洗滌。

將環丙基萘(化合物6)溶解於二氯甲烷或1,2-二氯苯中，然後於0℃下添加硝酸且讓該反應混合物升溫至環境溫度。於反應完全之後，以碳酸氫鈉中和該混合物接著利用水洗滌，及無需進一步純化地將1-環丙基-4-硝基萘(化合物7)用於下一步驟中。

將化合物7溶解於乙醇或甲醇中，且在木炭載鈀存在下氫化。所得1-胺基-4-環丙基萘(化合物8)結晶呈草酸鹽形式(化合物8-A)，然後溶解於二氯甲烷或甲苯中且在氫氧化鉀存在下利用硫光氣處理而產生對應的異硫氰酸鹽中間物(化合物9)。

將1-環丙基-4-異氰硫基萘(化合物9)以DMF進行溶劑交換且與胺基胍鹽酸鹽縮合以產生對應的經取代之硫基半卡肼(化合物13)。在氫氧化鈉水溶液存在下加熱該中間物化合物13以形成化合物11，藉由自乙醇與水之混合物或甲醇、DMF及水之混合物結晶來純化該化合物11。

實例7：化合物11之合成法-方法2

在催化量的[1,3-雙(二苯基膦基)丙烷]二氯鎳(II)存在下將溴化環丙基鎂加至0至5℃下攪拌之含溴萘之四氫呋喃溶液以形成環丙基萘，利用乙酸乙酯稀釋該溶液並洗滌。

將環丙基萘(化合物6)溶解於二氯甲烷中，接著於0℃下添加硝酸且讓該反應混合物升溫至環境溫度。於反應完全之後，以碳酸氫鈉中和該混合物接著利用水洗滌，及無需進一步純化地將1-環丙基-4-硝基萘(化合物7)用於下一步驟中。

將化合物7溶解於甲醇中，且於回流溫度下經水合肼氫化。將粗製1-胺基-4-環丙基萘(化合物8)溶解於乙醇中且在三乙胺存在下與二碳酸二第三丁酯反應以獲得4-環丙基萘-1-基胺基甲酸第三丁酯(化合物14)，自甲基第三丁基酮沉澱出該化合物14。

在乙醇中藉由鹽酸脫除化合物14中之保護基以獲得胺基-4-環丙基萘，其結晶呈鹽酸鹽(化合物8-B)形式。

將4-環丙基萘-1-胺鹽酸鹽(化合物8-B)溶解於二氯甲烷中且在氫氧化鈉存在下利用硫光氣處理以產生對應的異硫氰酸鹽中間物化合物 9。

將1-環丙基-4-異氰硫基萘以DMF進行溶劑交換且與胺基胍鹽酸鹽縮合以產生對應的經取代之硫基半卡肼(化合物13)。在氫氧化鈉水溶液存在下加熱化合物13以形成化合物11，藉由自乙醇與水之混合物結晶、接著自二甲基甲醯胺與水之混合物再結晶來純化該化合物11。

雖然已在本文中顯示並論述本發明之較佳實施例，但熟習此項技藝者明白該等實施例僅以舉例方式提供。熟習此項技藝者現將在不脫離本發明下做出許多改變、變化、及替換。應理解述於本文中之本發明實施例之各種替代例可用於實施本發明。希望以下申請專利範圍界定本發明之範疇且因而涵蓋屬於該等申請專利範圍及其等效物之範疇內之方法及結構。

實例8：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-多晶型1型之製法

如下所述，由粗製2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉製備2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-1型：

步驟1：攪拌2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(60g)及水(300mL)且短暫加熱(40至50℃)直到所有固體溶解。使該溶液冷卻且於冰浴中攪拌1至2小時，於此時段之後開始形成結晶(或若結晶尚未開始，則利用少量2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉晶體對該溶液接晶種)。繼續於冰浴中之攪拌直到結晶完成，且接著藉由於真空下透過燒結過濾漏斗(中等 孔隙度)過濾單離出固體。利用冰冷水(足以覆蓋濾餅)洗滌濾餅且於真空下對液體完全排水以提供濕濾餅(126.5g)。

步驟2：於60至70℃下將該濾餅溶解於水(~70g存在於濾餅中加上130mL；濃度200-250mg/mL)中，接著慢慢添加至乙酸(200mL)。在繼續攪拌下使乙酸/水(1：1 v/v)溶液冷卻至室溫，且接著進一步冷卻至0℃，導致結晶形成，藉由於中等孔隙度燒結過濾漏斗上真空過濾單離出該等結晶。利用冰冷酸/水(1：1 v/v)洗滌固體且於真空烘箱中乾燥以提供2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸(39.5g，78%)。

實例9：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-多晶型2型之製法

如下所述，由2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉製備2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-2型：

在強力攪拌下加熱(30至35℃)2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(50.0g粗製試樣，97.6% a/a；KF=12.6%；實際計算為43.3g)及去離子水(217mL)之懸浮液持續10至15分鐘，於此時段期間，漿液溶解，僅留下痕量固體。透過中等燒結過濾漏斗(medium-frit filter funnel)過濾該混合物且使透明濾液冷卻至10℃。於10至15℃下，歷時10分鐘將溴化氫水溶液(48重量%，18g，106.8毫莫耳，1.05當量)與去離子水(~13mL)之混合物中的約一半加至濾液，於此時段期間形成一些固體。在強力攪拌下添加乙酸乙酯(347mL)，導致所有固體溶解。於10℃下，歷時10分鐘添加殘餘的溴 化氫溶液，且繼續攪拌5至10分鐘，於此時段期間形成渾濁懸浮液。停止攪拌，容許相分離且移除水層。在強力攪拌下利用去離子水(110mL)洗滌有機層5至10分鐘，且於相分離之後移除水層。將該有機層加熱至45至50℃且利用輕度真空移除溶劑，導致形成漿液(最終體積~200mL)，在中度攪拌下加熱(45至50℃)該漿液1小時，逐漸(3至4小時)冷卻至20至25℃，且再於20至25℃下保持12小時，且最終冷卻至5至10℃且保持20至30分鐘。然後於真空透過內襯為Whatman 3號濾紙之布氏漏斗過濾該漿液。快速過濾出固體且使母液循環通過容器以回收殘餘固體，將其與初始批料一起收集。利用冷(5℃)乙酸乙酯(26mL)洗滌該等固體且容許於漏斗上乾燥至少10分鐘，接著浸於正庚烷(30mL)中歷時至少10分鐘且再施加真空維持~6小時。將該等固體轉移至乾燥皿且在真空烘箱(25mmHg)中於35至40℃伴隨氮氣吹拂下乾燥至少16小時。獲得呈自由流動之灰白色固體之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-2型(28.39g，69%)，其含有痕量的水(0.16重量%)及乙酸乙酯(700ppm)。

實例10：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-多晶型1型轉化為多晶型2型

方法1

於60℃下，將乙酸乙酯(200mL)加至含2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-多晶型1型(30g)之丙酮(200mL)溶液。於低真空下移除溶劑之一部分(~200mL)繼而添加新製乙酸乙酯(200mL)，接著進行另一蒸餾循環，於此期間開始結晶。慢慢使水浴溫度增加至70℃，於此時段期間進行另外四個乙酸乙酯添加/蒸餾循環至最終體積~200mL。讓該混合物慢慢冷卻至室溫且接著置於冰箱中過夜。藉由過濾單離出固體，利用冰冷乙酸乙酯洗滌，然後於真空烘箱中乾燥以提供2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-2型。

方法2

於室溫下慢慢蒸發含於一種以下所列溶劑中之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸-1型之溶液至結晶，冷卻，單離出固體結晶然後利用溶劑洗滌以製得固體多晶型2型，如所指明，其含有痕量溶劑及水。

方法3

於60℃下，固體多晶型1型以與其飽和乙腈、乙酸乙酯或甲苯溶液平衡方式保持6天，以產生固體多晶型2型。

於60℃下，固體多晶型1型以與其飽和丙酮溶液平衡方式保持6天，導致分解。

方法4

於60℃下，將固體多晶型1型及溶劑(20μL)加熱持續13天，以產生固體多晶型2型。

實例11A：結晶多晶型1型之分析

X射線粉末繞射

多晶型1型之X射線粉末繞射圖樣顯示於圖1(原始數據)及2(減去背景及剝離Kα2)中；於XRPD圖樣中所觀察到及代表性峰顯示於以下表(基於背景校正及Kα2剝離文檔所建立)中。

示差掃描熱量分析(DSC)

1型之示差掃描熱量分析跡線顯示於圖3中；記錄得轉化溫度為150.7℃。

掃描電子顯微鏡分析(SEM)

SEM分析顯示1型初晶係由盤狀晶體(大小~5μm)之聚結物(典型大小~25μm)所組成。

熱重分析(TGA)

1型之重複TGA掃描顯示於圖4(a)及(b)中，表明該物質不含有顯著水平的揮發物。

溶解度

將1型(~25mg)及存在及不存在氯化鈉(離子強度調整至=0.1M)下製得之乙酸鹽緩衝液(25mM，pH 5，4mL)置於玻璃小瓶中，將其密封且放置於25℃保溫箱中之實驗室旋轉器上。於1、5及7天後，過濾該等試樣且藉由HPLC分析。存在及不存在氯化鈉下於不同時間點之1型溶解度(mg/mL)顯示於下表中：

實例11B：結晶多晶型2型之分析

X射線粉末繞射

多晶型2型之X射線粉末繞射圖樣顯示於圖5(原始數據)及6(減去背景及剝離Kα2)中；於XRPD圖樣中所觀察到及代表性峰顯示於以下表(基於背景校正及Kα2剝離文檔所建立)中。

圖7顯示1型(較下方)及2型(較上方)之XRPD圖樣(y-軸偏移)之疊加圖。

示差掃描熱量分析(DSC)

2型之示差掃描熱量分析跡線顯示於圖8中，記錄得熔點為174.7℃。

¹H NMR光譜分析

多晶型2型之¹H NMR光譜(於DMSO-d₆獲得)顯示於圖9中及主要峰列於下表中：

HPLC

多晶型2型之HPLC跡線顯示於圖10中。該跡線之峰列表提供於下表中：

掃描電子顯微鏡分析(SEM)

SEM分析顯示2型初晶係由柱狀晶體(大小~10μm)之聚結物(典型大小~25μm)所組成。

熱重分析(TGA)

2型之TGA掃描之疊加圖顯示於圖11中，表明該物質不含有顯著水平之揮發物。

溶解度

將2型(~25mg)及存在及不存在氯化鈉(離子強度調整至：=0.1M)下製得之乙酸鹽緩衝液(25mM，pH 5，4mL)置於玻璃小瓶中，將其密封且放置於25℃保溫箱中之實驗室旋轉器上。於1、5及7天後，過濾該等試樣且藉由HPLC分析。存在及不存在氯化鈉下於不同時間點之2型溶解度(mg/mL)顯示於下表中：

於各種不同條件下對2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽2型進行測試以確定藥物質穩定性。於加速條件(40℃-75% RH、或25℃-60% RH)下在1個月時間未觀察到封裝之2型之降解。封裝係在HDPE容器內部的雙重低密度聚乙烯塑膠袋中。

2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽結晶多晶型之穩定性

觀察到2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽之結晶多晶型展現相較羧酸之非晶型固態形式增加的穩定性。2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鹽之結晶多晶型之改良穩定性提供製備相較由羧酸之非晶型固態形式製得之醫藥劑型展現存於給定劑型中之劑量變化性減小、最終醫藥產品中雜質存在量減少、及調配劑型存放期改良之醫藥劑型。

實例12A：X射線粉末繞射(XRPD)

在以布拉格-布倫塔諾(Bragg-Brentano)θ/θ配置之Bruker D8 Advance繞射儀上收集XRPD圖樣。利用CuKα(λ=1.5418Å)陽極(管電壓=40kV，電流=40mA)產生入射x射線光束，使該光束與光源側上之1.0mm初級索勒狹縫(Soller slit)及檢測器側上之1.0mm次級索勒狹縫相平行。利用檢測器側上之1.0mm石墨單色器狹縫移除CuKβ輻射。閃爍檢測器(NaI)併與0.1mm狹縫一起使用。採用0.02°2θ步進及每步進5秒自2至50°2θ之連續掃描。將約25mg物質小心地壓至Si零背景晶圓上以確保獲得扁平製劑。利用Bruker Diffrac⁺ XRD指揮器v2.3軟體收集數據。利用Bruker Diffrac⁺ EVA v9.0軟體在背景減去及Kα2 剝離下獲得峰列表。利用NIST氧化鋁標準品SRM1976完成儀器校直核查。XRPD(Bruker D8 Advance)儀器條件概述於下表中：

實例12B：示差掃描熱量分析(DSC)

使用TA Instruments Q2000示差掃描熱量分析儀進行示差掃描熱量分析。使用NIST可示蹤銦金屬進行溫度校準。藉由將約2-5mg(精確記錄值)物質密封於TA Tzero非氣密盤內製得雙份試樣。對Tzero非氣密盤/蓋子稱重且用於該單元之參照側。採用50mL/min氮吹洗氣流速，依10℃/min速率將該等試樣自25℃加熱至200℃。利用TA通用分析軟體v4.4(TA Universal Analysis software v4.4)測得熔化溫度(T_m)及熔化熱(△H_m)。

實例12C：掃描電子顯微鏡分析(SEM)

於JEOL SEM型號JSM-6100上收集SEM影像。將試樣分散至包括雙面碳膠帶(double-sided carbon tape)之SEM導體棒(SEM stub)上且利 用Denton Desk II裝置以金濺射塗佈歷時60秒。於15kV加速電壓下操作SEM。利用慢速掃描設置為800×640像素之軟體DIPS v2.5(數字成像處理系統(Digital Imaging Processing System))及於50μs下之積分器收集影像(未進行平均值處理)。於範圍自50×至5000×之放大倍率下收集影像。

實例12D：熱重分析(TGA)

利用TA Instrument Q5000進行熱重分析(TGA)。採用經校正之50mg重量校驗重量校準。藉由稱取~5-10mg物質於TA Pt盤中製得雙重複之試樣。採用25mL/min氮吹洗氣流速，依10℃/min速率將該等試樣加熱至200℃。利用TA通用分析軟體v4.4測量重量損耗。

實例13A：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型A型之製法

將去離子水(0.5mL)加至經攪拌之非晶型2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(1.00g，含有1.8重量%水)與乙酸乙酯(4mL)之懸浮液，製得雙相混合物，於室溫下攪拌該雙相混合物18小時。於真空下過濾所得漿液且利用乙酸乙酯(2×10mL)洗滌固體。在真空中於18-20℃伴隨氮吹拂下乾燥濾餅4.5小時，以提供0.78g含有13.0重量%水之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(70.3%回收率，以無水物計)。單離出的固體指定為A型。

實例13B：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型A型之分析

X射線粉末繞射

分析一個Panalytical及一個Inel XRPD圖樣。兩x射線粉末繞射圖樣之再現性及相對峰強度相當一致，這表明良好之顆粒及定向統計。A型之XRPD圖樣顯示於圖13中；於該XRPD圖樣中所觀察到及代表性 峰顯示於以下表中：

A型之示差掃描熱量分析跡線顯示於圖14中。

A型之紅外吸收光譜顯示於圖15中。

A型之拉曼光譜顯示於圖16中。

於各種不同條件下對2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之A型進行測試以確定熱力學穩定性。於加速條件(40℃-75% RH)下在6個月時間未觀察到封裝之A型之降解。此外，於長期條件(25℃-60% RH)下在12個月時間未觀察到封裝之A型之降解。封裝係在HDPE容器中熱密封的無水箔袋內部的雙重低密度聚乙烯塑膠袋中。A型之穩定性結果證實優於固態非晶型游離酸之改善。

實例14A：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基) 乙酸鈉之結晶多晶型B型之製法

製法i：於45-50℃下攪拌2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(3.02g，A型)與水飽和乙酸乙酯(6mL)之混合物16小時，製得雙相混合物，歷時2小時使該雙相混合物逐漸冷卻至室溫且再攪拌21小時可提供均勻懸浮液。真空過濾該懸浮液，利用乙酸乙酯洗滌然後在真空中於18-20℃伴隨氮吹拂下乾燥濾餅2小時可提供2.77g含有12.9重量%水之2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(91.7%回收率，以無水物計)。

製法ii：於~50℃下在水飽和之乙酸乙酯(0.5mL)中攪拌2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉(A型)過夜，固體轉化成油狀物。使用牙科用牙棒(dental pick)刮擦該油狀物及讓其於環境溫度下攪拌。於~3天後，光學顯微鏡分析顯示結晶固體。藉由傾析移除液體且單離出該等固體。

單離出的固體指定為B型。

實例14B：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型B型之分析

X射線粉末繞射

分析一個Panalytical及一個Inel XRPD圖樣。兩x射線粉末繞射圖樣之再現性及相對峰強度相當一致，這表明良好之顆粒及定向統計。B型之XRPD圖樣顯示於圖17中；於該XRPD圖樣中之所觀察到及代表性峰顯示於以下表中：

B型之示差掃描熱量分析跡線顯示於圖18中。

實例15A：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型B'型之製法

於真空在環境溫度下，將2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4- 三唑-3-基硫基)乙酸鈉(含有12.9重量%水之B型)乾燥1至3天獲得灰白色固體，指定為B'型。

實例15B：2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型B'型之分析

顯示於圖19中之B'型之x射線粉末繞射圖樣類似於B型之x射線粉末繞射圖樣，然而，兩圖樣間存在不均勻之峰偏移，這表明相同多晶型之不同溶劑化狀態。B'型之示差掃描熱量分析跡線顯示於圖20中。

2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉結晶多晶型之穩定性

發現2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型展現相較羧酸之非晶型固態形式增加之穩定性。2-(5-溴-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸鈉之結晶多晶型之改良穩定性提供製備相較由羧酸之非晶型固態形式製得之醫藥劑型展現存於給定劑型中之劑量變化性減小、最終醫藥產品中雜質存在量減少、及調配劑型存放期改良之醫藥劑型。

實例16：於採用本文所述方法製得之化合物1之試樣中識別雜質

於採用本文所述方法(包括實例1及2)製得之化合物1之試樣中識別出以下化合物(化合物I-X)為雜質：2-(4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(4-(4-環丙基萘-1-基)-5-羥基-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-胺基-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-溴-4-(1-環丙基萘-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-溴-4-(4-甲基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-溴-4-(4-丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-溴-4-(5-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；2-(5-溴-4-(萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸； 2-(5-氯-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基硫基)乙酸；及4-(5-(羧甲基硫基)-4-(4-環丙基萘-1-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基胺基)-4-側氧基丁酸。

Claims (1)

1. 一種製備化合物5之方法，

   

   包括：(5-i)使化合物6：

   

   與硝酸、水及溶劑接觸以提供化合物7：

   

   (5-ii)使化合物7與氫、木炭載鈀、及一或多種溶劑接觸以提供化合物8：

   

   (5-iii-A)使化合物8與硫氰酸鈉、水及溶劑接觸，及於至少130℃之溫度下加熱該混合物以提供化合物9：

   

   (5-iv-A)使步驟(5-iii-A)之化合物9與甲醯肼及溶劑接觸以提供化合物10：

   

   ；及(5-vi)使步驟(5-iv-A)之化合物10與鹼、水及溶劑接觸以提供化合物5：