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TWI393704B - 用作ｃ型肝炎病毒ｎｓ３絲胺酸蛋白酶抑制劑之硫化合物 - Google Patents

用作ｃ型肝炎病毒ｎｓ３絲胺酸蛋白酶抑制劑之硫化合物 Download PDF

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TWI393704B
TWI393704B TW098107879A TW98107879A TWI393704B TW I393704 B TWI393704 B TW I393704B TW 098107879 A TW098107879 A TW 098107879A TW 98107879 A TW98107879 A TW 98107879A TW I393704 B TWI393704 B TW I393704B
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Raymond G Lovey
Yuhua Huang
Siska Hendrata
Anil K Saksena
Stephane L Bogen
Yi-Tsung Liu
F George Njoroge
Srikanth Venkatraman
Kevin X Chen
Mousumi Sannigrahi
Ashok Arasappan
Viyyoor M Girijavallabhan
Francisco Velazquez
Latha Nair
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Merck Sharp & Dohme
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Description

用作C型肝炎病毒NS3絲胺酸蛋白酶抑制劑之硫化合物
本發明係關於新穎C型肝炎病毒("HCV")蛋白酶抑制劑，含有一或多種此種抑制劑之醫藥組合物，製備此種抑制劑之方法，及使用此種抑制劑以治療C型肝炎及相關病症之方法。本發明另外揭示新穎化合物作為HCV NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶之抑制劑。本申請案係請求得自2004年2月27日提出申請之美國專利臨時申請案序號60/548,670之優先權。
C型肝炎病毒(HCV)為(+)-有意義單股RNA病毒，其已被牽連為非A型、非B型肝炎(NANBH)中之主要病因劑，特別是在血液有關聯之NANBH(BB-NANBH)中(參閱國際專利申請案公報案號WO 89/04669與歐洲專利申請案公報案號EP 381 216)。NANBH係與其他類型之病毒所引致之肝病有區別，譬如A型肝炎病毒(HAV)、B型肝炎病毒(HBV)、δ型肝炎病毒(HDV)、巨細胞病毒(CMV)及愛氏噸-巴爾(Epstein-Barr)病毒(EBV)，以及其他肝病形式，譬如酒精中毒與原發性膽硬化。
最近，多肽處理與病毒複製所必須之HCV蛋白酶已被確認、無性繁殖及表現(參閱，例如美國專利5,712,145)。此種大約3000胺基酸之多蛋白，從胺基末端至羧基末端，係含有殼包核酸蛋白質(C)、包膜蛋白質(E1與E2)及數種非結構性蛋白質(NS1,2,3,4a,5a及5b)。NS3為大約68kda蛋白質，被HCV基因組之大約1893個核苷酸編碼，且具有兩個獨特功能部位：(a)絲胺酸蛋白酶功能部位，包含大約200個N-末端胺基酸；與(b)RNA依賴性ATPase功能部位在蛋白質之C-末端處。由於蛋白質順序、整體三次元結構及催化作用機制上之類似性，故NS3蛋白酶被認為是胰凝乳蛋白酶原族群之一個成員。其他似胰凝乳蛋白酶原酵素為彈性蛋白酶、Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、tPA及PSA。HCV NS3絲胺酸蛋白酶係負責多肽(多蛋白)在NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a及NS5a/NS5b接合處之蛋白水解，且因此負責在病毒複製期間產生四種病毒蛋白質。這已使得HCV NS3絲胺酸蛋白酶成為抗病毒化學療法之吸引人之標的。本發明化合物可抑制此種蛋白酶。其亦可調制C型肝炎病毒(HCV)多肽之處理。
已測定出NS4a蛋白質，一種大約6kda之多肽，係為NS3之絲胺酸蛋白酶活性之輔因子。NS3/NS4a接合處藉由NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶之自動分裂係以分子內方式(意即順式)發生，然而其他分裂位置係以分子間方式(意即反式)進行。
HCV蛋白酶之天然分裂位置之分析，揭發半胱胺酸存在於P1處，而絲胺酸存在於P1'處，且此等殘基係在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a及NS5a/NS5b接合處嚴格地保守。NS3/NS4a接合處含有蘇胺酸在P1處，與絲胺酸在P1'處。NS3/NS4a處之Cys→Thr取代被主張係負責此接合處之順式處理之要求條件，而非反式。參閱，例如Pizzi等人(1994)Proc.Natl.Acad.Sci (USA)91 ：888-892，Failla等人(1996)折疊與設計1 ：35-42。NS3/NS4a分裂位置亦比其他位置較容許致突變。參閱，例如Kollykhalov等人(1994)J. Viro1. 68 ：7525-7533。亦已發現在分裂位置上游區域中之酸性殘基係為有效分裂所需要。參閱，例如Komoda等人(1994)J. Viro1. 68 ：7351-7357。
已經報告之HCV蛋白酶抑制劑，包括抗氧化劑(參閱國際專利申請案公報案號WO 98/14181)、某些肽與肽類似物(參閱國際專利申請案公報案號WO 98/17679，Landro等人(1997)Biochem. 36 ：9340-9348，Ingallinella等人(1998)Biochem. 37 ：8906-8914，Llinas-Brunet等人(1998)Bioorg. Med. Chem. Lett. 8 ：1713-1718)、以70-胺基酸多肽也葛林c(eglin c)為基礎之抑制劑(Martin等人(1998)Biochem. 37 ：11459-11468)，親和力抑制劑，選自人類胰分泌胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)與微小物體存庫(MBip)(Dimasi等人(1997)J. Viro1. 71 ：7461-7469)，cVH E2("駱駝化"可變功能部位抗體片段)(Martin等人(1997)Protein Eng. 10 ：607-614)及α1-抗胰凝乳蛋白酶原(ACT)(Elzouki等人(1997)J. Hepat. 27 ：42-28)。經設計以選擇性地破壞C型肝炎病毒RNA之核糖酵素最近已被揭示(參閱BioWor1d Today 9(217) ：4(1998年11月10日))。
亦參考PCT公報案號1998年4月30日公告之WO 98/17679(Vertex醫藥公司)；1998年5月28日公告之WO 98/22496(F. Hoffmann-La Roche AG)；及1999年2月18日公告之WO 99/07734(Boehringer Ingelheim Canada公司)。
HCV係牽連肝硬化及誘發肝細胞癌。對於患有HCV感染之病患之預後，目前是很貧乏的。HCV感染比其他肝炎形式更難以治療，此係由於缺乏與HCV感染有關聯之免疫或緩解所致。目前資料顯示，肝硬化診斷後第四年低於50%之存活率。被診斷患有局部可切除肝細胞癌之病患具有10-30%之五年存活率，然而患有局部不可切除肝細胞癌者具有低於1%之五年存活率。
參考WO 00/59929(US 6,608,027，讓受人：Boehringer Ingelheim(Canada)公司；2000年10月12日公告)，其係揭示下式肽衍生物：
參考A. Marchetti等人,Synlett ,S1 ,1000-1002(1999)，其係描述HCVNS3蛋白酶抑制劑之雙環狀類似物之合成。其中所揭示之一種化合物具有下式：
亦參考W. Han等人,Bioorganic & Medicinal Chem. Lett ,(2000)10 ,711-713，其係描述含有烯丙基與乙基官能基之某些α-酮醯胺、α-酮酯類及α-二酮類之製備。
亦參考WO 00/09558(讓受人：Boehringer Ingelheim有限公司；2000年2月24日公告)，其係揭示下式肽衍生物：
其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物為：
亦參考WO 00/09543(讓受人：Boehringer Ingelheim有限公司；2000年2月24日公告)，其係揭示下式肽衍生物：
其中各種構件係定義於其中。該系列之一種說明性化合物為：
亦參考U.S. 6,608,027(Boehringer Ingelheim,Canada)，其係揭示以下類型之NS3蛋白酶抑制劑：
其中各種部份基團係定義於其中。
C型肝炎之現行療法包括干擾素-α(INFα)，及使用三唑核苷與干擾素之組合療法。參閱，例如Beremguer等人(1998)Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2) ：98-112。此等療法遭遇到低持續回應率及頻繁之副作用。參閱，例如Hoofnagle等人(1997)N. Engl. J. Med. 336 ：347。目前，無疫苗可用於HCV感染。
進一步參考WO 01/74768(讓受人：Vertex醫藥公司)，2001年10月11日公告，其係揭示某些下列通式化合物(R係定義於其中)作為C型肝炎病毒之NS3-絲胺酸蛋白酶抑制劑：
前文所提及之WO 01/74768中所揭示之一種特定化合物具有下式：
PCT公報WO 01/77113;WO 01/081325;WO 02/08198;WO 02/08256;WO 02/08187;WO 02/08244;WO 02/48172;WO 02/08251；及2002年1月18日提出申請之待審美國專利申請案序號10/052,386，係揭示各種類型之肽及/或其他化合物，作為C型肝炎病毒之NS-3絲胺酸蛋白酶抑制劑。此等申請案之揭示內容均併於本文供參考。
仍需要關於HCV感染之新穎治療藥品與療法。仍需要可用於治療或預防或改善C型肝炎之一或多種病徵之化合物。
仍需要治療或預防或改善C型肝炎之一或多種病徵之方法。
仍需要使用本文中所提供之化合物調制絲胺酸蛋白酶活性之方法，特別是HCV NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶。
仍需要使用本文中所提供之化合物調制HCV多肽處理之方法。
在本發明之許多具體實施例中，其係提供新穎種類之HCV蛋白酶抑制劑，含有一或多種此等化合物之醫藥組合物，製備包含一或多種此種化合物之醫藥配方之方法，及使用一或多種此種化合物或一或多種此種配方治療或預防HCV或改善C型肝炎之一或多種病徵之方法。本發明亦提供調制HCV多肽與HCV蛋白酶交互作用之方法。在本文中所提供之化合物中，會抑制HCV NS3/NS4a絲胺酸蛋白酶活性之化合物為較佳。本發明係揭示化合物，以及該化合物之藥學上可接受鹽類、溶劑合物或酯類，該化合物具有結構式I中所示之一般結構：
其中：R1 為H、OR8 、NR9 R10 或CHR9 R10 ，其中R8 、R9 及R10 可為相同或不同，各獨立選自包括H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環烷基-、雜環基-、芳烷基-及雜芳烷基；A與M可為相同或不同，各獨立選自R、OR、NHR、NRR'、SR、SO2 R及鹵基；或A與M係互相連接，以致使上文式I中所示之部份基團：
係形成無論是三,四,六,七或八-員環烷基、四至八-員雜環基、六至十-員芳基或五至十-員雜芳基；E為C(H)或C(R)；L為C(H)、C(R)、CH2 C(R)或C(R)CH2 ；R、R'、R2 及R3 可為相同或不同，各獨立選自包括H、烷基-、烯基-、炔基-、環烷基-、雜烷基-、雜環基-、芳基-、雜芳基-、(環烷基)烷基-、(雜環基)烷基-、芳基-烷基-及雜芳基-烷基-；或者，NRR'中之R與R'係互相連接，以致使NRR'形成四至八-員雜環基；且Y係選自下列部份基團：
其中G為NH或O；且R15 、R16 、R17 及R18 可為相同或不同，各獨立選自包括H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、芳烷基、雜芳基及雜芳烷基，或者，(i)R15 與R16 係互相連接，以形成四至八-員環狀結構，與(ii)同樣地，獨立地，R17 與R18 係互相連接，以形成三至八-員環烷基或雜環基；其中各該烷基、芳基、雜芳基、環烷基或雜環基可為未經取代，或視情況獨立被一或多個部份基團取代，取代基選自包括：羥基、烷氧基、芳氧基、硫基、烷硫基、芳基硫基、胺基、醯胺基、烷胺基、芳胺基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、磺醯胺基、烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、烷基、芳基、雜芳基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧醯胺基、烷氧羰基胺基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵基、氰基及硝基。
上文所指之陳述，"A與M係互相連接，以致使上文式I中所示之部份基團：
係形成無論是三,四,六,七或八-員環烷基、四至八-員雜環基、六至十-員芳基或五至十-員雜芳基"，可如下述以非限制性方式說明。因此，例如在A與M係連接以致使上文式I中所示之部份基團：
形成六員環烷基(環己基)之情況中，式I可描繪如下：
具有此藝中之一般技術者將明瞭當上文部份基團中所示之A與M：
(M-L-E-A一起採用)係連接而形成三,四,七或八-員環烷基、四至八-員雜環基六至十-員芳基或五至十-員雜芳基時，可達到關於式I之類似描述。
陳述"或者，(i)R15 與R16 係互相連接，以形成四至八-員環狀結構，與(ii)同樣地，獨立地，R17 與R18 係連接而形成三至八-員環烷基或雜環基"，係意謂下列可能性：(i)R15 與R16 係連接而形成環狀結構，然而R17 與R18 則否；(ii)R17 與R18 係連接而形成環狀結構，然而R15 與R16 則否；及(iii)R15 與R16 係連接而形成環狀結構，且R17 與R18 亦經連接，以形成環狀結構。此等可能性可彼此獨立存在。
在上文所指之R、R'、R2 及R3 定義中，較佳烷基係由一至十個碳原子所製成，較佳烯基或炔基係由二至十個碳原子所製成，較佳環烷基係由三至八個碳原子所製成；且較佳雜烷基、雜芳基或雜環烷基具有一至六個氧、氮、硫或磷原子。
以式I表示之化合物，本身或併用一或多種本文中所揭示之其他適當藥劑，可用於治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(後天免疫不全徵候簇)及相關病症，以及調制C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶之活性，預防HCV，或改善C型肝炎之一或多種病徵。此種調制、治療、預防或改善可以本發明化合物以及包含此種化合物之醫藥組合物或配方達成。不希望受限於理論，咸認HCV蛋白酶可為NS3或NS4a蛋白酶。本發明化合物可抑制此種蛋白酶。其亦可調制C型肝炎病毒(HCV)多肽之處理。
 詳細說明
於一項具體實施例中，本發明係揭示以結構式I表示之化合物，或其藥學上可接受之鹽或溶劑合物或酯，其中各種部份基團均如上文定義。
於另一項具體實施例中，R1 為NR9 R10 ，且R9 為HR10 為H或R14 ，其中R14 為H、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
於另一項具體實施例中，R14 係選自包括：
於另一項具體實施例中，R2 係選自包括下列部份基團：
於另一項具體實施例中，R3 係選自包括：
其中R31 為OH或O-烷基；且R32 為H、C(O)CH3 、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
於另一項具體實施例中，R3 係選自包括下列部份基團：
於另一項具體實施例中，Y係選自下列部份基團：
其中R15 、R16 、R17 及R18 可為相同或不同，各獨立選自包括H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環烷基、雜環基、芳基及雜芳基，或者R15 與R16 係互相連接，以形成四至八-員環烷基或雜環族結構，及/或R17 與R18 係互相連接，以形成三至八-員環烷基或雜環基，其中各該芳基、雜芳基、環烷基或雜環基可為未經取代，或視情況獨立被一或多個部份基團取代，取代基選自包括：羥基、烷氧基、芳氧基、硫基、烷硫基、芳基硫基、胺基、醯胺基、烷胺基、芳胺基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、磺醯胺基、烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、羧基、烷氧羰基、羧醯胺基、烷氧羰基胺基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵基、氰基及硝基。
於另一項具體實施例中，Y係選自包括：
其中Y31 係選自包括：
Y32 係選自包括：
且Y12 係選自包括H、CO2 H、CO2 Me、OMe、F、Cl、Br、NH2 、N(H)S(O2 )CH3 、N(H)C(O)CH3 、NO2 、S(O2 )NH2 、CF3 、Me、OH、OCF3 及C(O)NH2 。
於另一項具體實施例中，部份基團：
係選自下列結構：
於另一項具體實施例中，部份基團：
係選自下列結構：
於另一項具體實施例中，部份基團：
係選自下列結構：
於又其他具體實施例中，R1 為NHR14 ，其中R14 係選自包括：
R2 係選自包括下列部份基團：
R3 係選自包括下列部份基團：
Y係選自包括：
其中Y31 係選自包括：
Y32 係選自包括：
且Y12 係選自包括H、CO2 H、CO2 Me、OMe、F、Cl、Br、NH2 、N(H)S(O2 )CH3 、N(H)C(O)CH3 、NO2 、S(O2 )NH2 、CF3 、Me、OH、OCF3 及C(O)NH2 ；且以下部份基團：
係為：
本發明之又另一項具體實施例係揭示下文表1 中之化合物，以及稍後在表1、表3、表3A、表4、表4A及表5 中所示之化合物：
於另一項具體實施例中，本發明係揭示表2中之下列化合物：
當使用於上文及在整個本揭示內容中時，下列術語，除非另有指出，否則應明瞭係具有下述意義：
"病患"包括人類與動物兩者。
"哺乳動物"係意謂人類及其他哺乳動物。
"烷基"係意謂脂族烴基，其可為直鏈或分枝狀，且包含約1至約20個碳原子在此鏈中。較佳烷基含有約1至約12個碳原子在此鏈中。更佳烷基含有約1至約6個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基譬如甲基、乙基或丙基，被連接至線性烷基鏈。"低碳烷基"係意謂具有約1至約6個碳原子之基團在此鏈中，其可為直鏈或分枝狀。"經取代之烷基"一詞，係意謂烷基可被一或多個可為相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自包括鹵基、烷基、芳基、環烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、胺基、-NH(烷基)、-NH(環烷基)、-N(烷基)2 、-N(烷基)2 、羧基及-C(O)O-烷基。適當烷基之非限制性實例包括甲基、乙基、正-丙基、異丙基及第三-丁基。
"烯基"係意謂含有至少一個碳-碳雙鍵之脂族烴基，且其可為直鏈或分枝狀，並包含約2至約15個碳原子在此鏈中。較佳烯基具有約2至約12個碳原子在此鏈中；且更佳為約2至約6個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基譬如甲基、乙基或丙基，被連接至線性烯基鏈。"低碳烯基"係意謂約2至約6個碳原子在此鏈中，其可為直鏈或分枝狀。"經取代之烯基"一詞，係意謂烯基可被一或多個可為相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自包括鹵基、烷基、芳基、環烷基、氰基、烷氧基及-S(烷基)。適當烯基之非限制性實例，包括乙烯基、丙烯基、N-丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、N-戊烯基、辛烯基及癸烯基。
"炔基"係意謂含有至少一個碳-碳參鍵之脂族烴基，且其可為直鏈或分枝狀，並包含約2至約15個碳原子在此鏈中。較佳炔基具有約2至約12個碳原子在此鏈中；且更佳為約2至約4個碳原子在此鏈中。分枝狀係意謂一或多個低碳烷基，譬如甲基、乙基或丙基，被連接至線性炔基鏈。"低碳炔基"係意謂約2至約6個碳原子在此鏈中，其可為直鏈或分枝狀。適當炔基之非限制性實例，包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基及3-甲基丁炔基。"經取代之炔基"一詞，係意謂炔基可被一或多個可為相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自包括烷基、芳基及環烷基。
"芳基"係意謂芳族單環狀或多環狀環系統，包含約6至約14個碳原子，較佳為約6至約10個碳原子。芳基可視情況被一或多個"環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均如本文定義。適當芳基之非限制性實例，包括苯基與萘基。
"雜芳基"係意謂芳族單環狀或多環狀環系統，包含約5至約14個環原子，較佳為約5至約10個環原子，其中一或多個環原子為碳以外之元素，例如氮、氧或硫，單獨或併用。較佳雜芳基含有約5至約6個環原子。"雜芳基"可視情況被一或多個"環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均如本文定義。雜芳基字根名稱前之字首氮、氧或硫，係意謂至少一個氮、氧或硫原子個別存在作為環原子。雜芳基之一個氮原子可視情況被氧化成其相應之N-氧化物。適當雜芳基之非限制性實例，包括吡啶基、吡基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代之吡啶酮)、異唑基、異噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1,2,4-噻二唑基、吡基、嗒基、喹喏啉基、呔基、吲哚基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b]噻唑基、苯并呋呫基、吲哚3、氮吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮吲哚基、1,2,4-三基、苯并噻唑基等。"雜芳基"一詞亦指部份飽和雜芳基部份基團，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。
"芳烷基"或"芳基烷基"係意謂芳基-烷基-基團，其中芳基與烷基均如前文所述。較佳芳烷基係包含低碳烷基。適當芳烷基之非限制性實例，包括苄基、2-苯乙基及萘基甲基。對母體部份基團之鍵結係經過烷基。
"烷基芳基"係意謂烷基-芳基-基團，其中烷基與芳基均如前文所述。較佳烷基芳基係包含低碳烷基。適當烷基芳基之非限制性實例為甲苯基。對母體部份基團之鍵結係經過芳基。
"環烷基"係意謂非芳族單-或多環狀環系統，包含約3至約10個碳原子，較佳為約5至約10個碳原子。較佳環烷基環含有約5至約7個環原子。環烷基可視情況被一或多個"環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均如上文定義。適當單環狀環烷基之非限制性實例，包括環丙基、環戊基、環己基、環庚基等。適當多環狀環烷基之非限制性實例，包括1-十氫萘基、正基、金鋼烷基等，以及部份飽和物種，例如氫茚基、四氫萘基等。
"鹵素"或"鹵基"係意謂氟、氯、溴或碘。較佳為氟、氯及溴。
"環系統取代基"係意謂連接至芳族或非芳族環系統之取代基，其例如係置換環系統上之可取用氫。環系統取代基可為相同或不同，各獨立選自包括烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、烷基雜芳基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、醯基、芳醯基、鹵基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、雜芳基磺醯基、烷硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、芳烷硫基、雜芳烷基硫基、環烷基、雜環基、-C(=N-CN)-NH2 、-C(=NH)-NH2 、-C(=NH)-NH(烷基)、Y1 Y2 N-、Y1 Y2 N-烷基-、Y1 Y2 NC(O)-、Y1 Y2 NSO2 -及-SO2 NY1 Y2 ，其中Y1 與Y2 可為相同或不同，且獨立選自包括氫、烷基、芳基、環烷基及芳烷基。"環系統取代基"亦可意謂單一部份基團，其同時置換環系統上兩個相鄰碳原子上之兩個可採用氫(一個H在每一個碳上)。此種部份基團之實例為亞甲二氧基、次乙二氧基、-C(CH3 )2 -及其類似物，其係形成例如以下之部份基團：
"雜環基"係意謂非芳族飽和單環狀或多環狀環系統，包含約3至約10個環原子，較佳為約5至約10個環原子，其中在此環系統中之一或多個原子為碳以外之元素，例如氮、氧或硫，單獨或併用。沒有相鄰氧及/或硫原子存在於此環系統中。較佳雜環基含有約5至約6個環原子。在雜環基字根名稱前之字首氮、氧或硫，係意謂至少一個氮、氧或硫原子個別存在作為環原子。雜環基環中之任何-NH可經保護存在，例如作成-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基團等；此種保護亦被認為是本發明之一部份。雜環基可視情況被一或多個"環系統取代基"取代，其可為相同或不同，且均如本文定義。雜環基之氮或硫原子可視情況被氧化成其相應之N-氧化物、S-氧化物或S,S-二氧化物。適當單環狀雜環基環之非限制性實例包括六氫吡啶基、四氫吡咯基、六氫吡基、嗎福啉基、硫代嗎福啉基、噻唑啶基、1,4-二氧陸圜基、四氫呋喃基、四氫硫苯基、內醯胺、內酯等。
應注意的是，在本發明含有雜原子之環系統中，沒有羥基在鄰近N、O或S之碳原子上，以及沒有N或S基團在鄰近另一個雜原子之碳上。因此，例如在以下環中：
沒有-OH直接連接至標記2與5之碳。
亦應注意的是，互變異構形式，例如以下部份基團：
於本發明之某些具體實施例中被認為是相等的。
"炔基烷基"係意謂炔基-烷基-基團，其中炔基與烷基均如前文所述。較佳炔基烷基含有低碳炔基與低碳烷基。對母體部份基團之鍵結係經過烷基。適當炔基烷基之非限制性實例包括炔丙基甲基。
"雜芳烷基"係意謂雜芳基-烷基-基團，其中雜芳基與烷基均如前文所述。較佳雜芳烷基含有低碳烷基。適當芳烷基之非限制性實例，包括吡啶基甲基與喹啉-3-基甲基。對母體部份基團之鍵結係經過烷基。
"羥烷基"係意謂HO-烷基-基團，其中烷基係如前文定義。較佳羥烷基含有低碳烷基。適當羥烷基之非限制性實例，包括羥甲基與2-羥乙基。
"醯基"係意謂H-C(O)-、烷基-C(O)-或環烷基-C(O)-基團，其中各種基團係如前文所述。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。較佳醯基含有低碳烷基。適當醯基之非限制性實例，包括甲醯基、乙醯基及丙醯基。
"芳醯基"係意謂芳基-C(O)-基團，其中芳基係如前文所述。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。適當基團之非限制性實例，包括苯甲醯基與1-萘甲醯基。
"烷氧基"係意謂烷基-O-基團，其中烷基係如前文所述。適當烷氧基之非限制性實例，包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基及正-丁氧基。對母體部份基團之鍵結係經過醚氧。
"芳氧基"係意謂芳基-O-基團，其中芳基係如前文所述。適當芳氧基之非限制性實例，包括苯氧基與萘氧基。對母體部份基團之鍵結係經過醚氧。
"芳烷氧基"係意謂芳烷基-O-基團，其中芳烷基係如前文所述。適當芳烷氧基之非限制性實例，包括苄氧基與1-或2-萘甲氧基。對母體部份基團之鍵結係經過醚氧。
"烷硫基"係意謂烷基-S-基團，其中烷基係如前文所述。烷硫基之非限制性實例適當，包括甲硫基與乙硫基。對母體部份基團之鍵結係經過硫。
"芳基硫基"係意謂芳基-S-基團，其中芳基係如前文所述。適當芳基硫基之非限制性實例，包括苯硫基與萘基硫基。對母體部份基團之鍵結係經過硫。
"芳烷硫基"係意謂芳烷基-S-基團，其中芳烷基係如前文所述。適當芳烷硫基之非限制性實例為苄硫基。對母體部份基團之鍵結係經過硫。
"烷氧羰基"係意謂烷基-O-CO-基團。適當烷氧羰基之非限制性實例，包括甲氧羰基與乙氧羰基。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。
"芳氧基羰基"係意謂芳基-O-C(O)-基團。適當芳氧基羰基之非限制性實例，包括苯氧基羰基與萘氧基羰基。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。
"芳烷氧基羰基"係意謂芳烷基-O-C(O)-基團。適當芳烷氧基羰基之非限制性實例為苄氧羰基。對母體部份基團之鍵結係經過羰基。
"烷基磺醯基"係意謂烷基-S(O2 )-基團。較佳基團係為其中烷基為低碳烷基者。對母體部份基團之鍵結係經過磺醯基。
"芳基磺醯基"係意謂芳基-S(O2 )-基團。對母體部份基團之鍵結係經過磺醯基。
"經取代"一詞，係意謂在所指定原子上之一或多個氫係被選自所指示之基團取代，其條件是，不會超過所指定原子於存在情況下之正常價鍵，且此取代會造成安定化合物。取代基及/或變數之組合，只有在此種組合會造成安定化合物下才可允許。所謂"安定化合物"或"安定結構"，係意指化合物足夠強健而自反應混合物中留存著，單離至有用純度，及調配成有效治療劑。
"一或多個"或"至少一個"一詞，當表示取代基、化合物、組合劑等之數目時，係指至少一個，且至高達化學上及物理上允許之存在或添加之取代基、化合物、組合劑等之最大數目，依內文而定。此種技術與知識係為相關技師之技術範圍內所習知。
"視情況經取代"一詞，係意謂以特定基團、原子團或部份基團之選用取代。
關於化合物之"經單離"或"呈單離形式"術語，係指該化合物自合成方法或天然來源或其組合單離後之物理狀態。關於化合物之"經純化"或"呈純化形式"術語，係指該化合物得自本文中所述或熟練技師所習知之一或多種純化方法後之物理狀態，其係呈充分純度，可藉由本文中所述或熟練技師所習知之標準分析技術特徵鑒定。
亦應注意的是，在本文之內文、圖式、實例及表格中，具有未滿足價鍵之任何雜原子係被假定為具有氫原子，以滿足該價鍵。
當化合物中之官能基被稱為"經保護"時，這意謂該基團係呈經改質形式，以在化合物接受反應時，排除經保護位置處之不想要副反應。適當保護基係為具有此藝中之一般技術者以及參考標準教科書所明瞭，例如T. W. Greene等人，有機合成之保護基 (1991),Wiley,New York。
當任何變數(例如芳基、雜環、R2 等)在任何成份中或在式I中出現超過一次時，其在各存在處之定義係與其在每一個其他存在處之定義無關。
於本文中使用之"組合物"一詞，係意欲涵蓋一種以特定量包含特定成份之產物，以及直接或間接由特定成份以特定量組合所形成之任何產物。
本發明化合物之前體藥物與溶劑合物，亦意欲被涵蓋於此處。當於本文中採用時，"前體藥物"一詞係表示一種藥物先質之化合物，其在投予病患時，係藉由代謝或化學過程進行化學轉化，而產生式I化合物或其鹽及/或溶劑合物。前體藥物之討論係提供於T.Higuchi與V.Stella，前體藥物作為新穎傳輸系統(1987)14,A.C.S.論集系列，與在藥物設計中之生物可逆載劑，(1987)Edward B. Roche編著，美國醫藥協會與Pergamon出版社中，此兩者均併於本文供參考。
"溶劑合物"係意謂本發明化合物與一或多種溶劑分子之物理締合。此物理締合係涉及不同程度之離子與共價鍵結，包括氫鍵。在某些情況中，溶劑合物能夠隔離，例如當一或多個溶劑分子被併入結晶性固體之晶格中時。"溶劑合物"係涵蓋溶液相與可隔離之溶劑合物。適當溶劑合物之非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物等。"水合物"為溶劑合物，其中溶劑分子為H2 O。
"有效量"或"治療上有效量"，係意欲描述本發明化合物或組合物有效抑制CDK之量，且因此產生所要之治療、改善、抑制或預防效果。
式I化合物可形成鹽，其亦在本發明之範圍內。於本文中指稱之式I化合物，應明瞭係包括指稱其鹽，除非另有指出。當於本文中採用時，"鹽"一詞係表示以無機及/或有機酸類形成之酸性鹽，以及以無機及/或有機鹼類形成之鹼性鹽。此外，當式I化合物含有鹼性部份基團譬如但不限於吡啶或咪唑，與酸性部份基團譬如但不限於羧酸時，可形成兩性離子("內鹽")，且係包含在如本文中使用之"鹽"一詞內。藥學上可接受(意即無毒性、生理學上可接受)之鹽為較佳，惟其他鹽亦可使用。式I化合物之鹽可例如經由使式I化合物與某一數量之酸或鹼，譬如等量，在媒質中，譬如鹽會沉澱於其中者，或在水性媒質中反應，接著冷凍乾燥而形成。
舉例之酸加成鹽，包括醋酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、酸性硫酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、柳酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(toluenesulfonate)(亦稱為甲苯磺酸鹽(tosylate))等。此外，一般被認為適合由鹼性醫藥化合物形成藥學上可使用鹽之酸類，係由例如P. Stahl等人，Camille G.(編著)醫藥鹽手冊.性質、選擇及用途，(2002)Zurich:Wiley-VCH;S. Berge等人，醫藥科學期刊(1977)66(1)1-19；P. Gould，國際製藥學期刊(1986)33201-217;Anderson等人，醫藥化學實務(1996)，大學出版社，New York；及橘皮書(食品藥物管理局，Washington,D.C.在其網站上)討論。此等揭示內容均併於本文供參考。
舉例之鹼性鹽包括銨鹽，鹼金屬鹽，譬如鈉、鋰及鉀鹽，鹼土金屬鹽，譬如鈣與鎂鹽，與有機鹼(例如有機胺類)之鹽，該鹼類譬如二環己基胺類、第三-丁基胺類，及與胺基酸之鹽，該胺基酸譬如精胺酸、離胺酸等。鹼性含氮基團可以作用劑四級化，譬如低碳烷基鹵化物(例如甲基、乙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物)、二烷基硫酸鹽(例如二甲基、二乙基及二丁基硫酸鹽)、長鏈鹵化物(例如癸基、月桂基及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物)、芳烷基鹵化物(例如苄基與苯乙基溴化物)及其他。
所有此種酸鹽與鹼鹽係意欲成為本發明範圍內之藥學上可接受鹽，且對本發明之目的而言，所有酸與鹼鹽係被認為相當於相應化合物之自由態形式。
本發明化合物之藥學上可接受酯類包括下列基團：(1)羧酸酯類，藉由羥基之酯化作用所獲得，其中酯族群之羧酸部份之非羰基部份基團，係選自直鏈或分枝鏈烷基(例如乙醯基、正-丙基、第三-丁基或正-丁基)、烷氧烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(例如苄基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如苯基，視情況被例如鹵素、C1-4 烷基或C1-4 烷氧基或胺基取代)；(2)磺酸酯類，譬如烷基-或芳烷基磺醯基(例如甲烷磺醯基)；(3)胺基酸酯類(例如L-異纈草胺醯基或L-異白胺醯基)；(4)膦酸酯類，及(5)單-、二-或三磷酸酯類。磷酸酯可藉由例如C1-20 醇或其反應性衍生物，或藉由2,3-二(C6-24 )醯基甘油進一步酯化。
式I化合物及其鹽、溶劑合物、酯類及前體藥物，可以其互變異構形式存在(例如作為醯胺或亞胺基醚)。所有此種互變異構形式係意欲被涵蓋在本文中，作為本發明之一部份。
本發明化合物(包括化合物之鹽、溶劑合物、酯類及前體藥物以及前體藥物之鹽與溶劑合物)之所有立體異構物(例如幾何異構物、光學異構物等)，譬如可由於不同取代基上之不對稱碳所致而存在者，包括對掌異構物形式(其甚至可於不對稱碳不存在下存在)、旋轉異構形式、非向性異構物及非對映異構物形式，係意欲被涵蓋在本發明之範圍內，作為位置異構物(例如4-吡啶基與3-吡啶基)。本發明化合物之個別立體異構物可例如實質上不含其他異構物，或可例如經混合成為外消旋物，或與所有其他或其他經選擇之立體異構物混合。本發明之對掌中心可具有如由IUPAC 1974建議所定義之S或R組態。"鹽"、"溶劑合物"、"前體藥物"等術語之使用，係意欲同樣地適用於本發明化合物之對掌異構物、立體異構物、旋轉異構物、互變異構物、位置異構物、外消旋物或前體藥物之鹽、溶劑合物及前體藥物。
式I化合物及式I化合物之鹽、溶劑合物、酯類及前體藥物之多晶形式，欲被包含於本發明中。
應明瞭的是，式I化合物關於本文中所討論之治療應用之利用性，係適用於單獨各化合物，或一或多種式I化合物之一或多種組合，例如在下一緊接段落中所示者。相同之瞭解亦適用於包含一或多種此種化合物之醫藥組合物，及涉及一或多種此種化合物之治療方法。
根據本發明之化合物可具有藥理學性質；特定言之，式I化合物可為HCV蛋白酶之抑制劑，單獨之各化合物，或一或多種式I化合物可與選自式I內之一或多種化合物併用。此等化合物可用於治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(後天免疫不全徵候簇)及相關病症，以及調制C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶之活性，預防HCV，或改善C型肝炎之一或多種病徵。
式I化合物可用於製造藥劑，以治療與HCV蛋白酶有關聯之病症，例如此方法包括使式I化合物密切接觸藥學上可接受之載劑。
於另一項具體實施例中，本發明係提供包含本發明一或多種化合物作為活性成份之醫藥組合物。此等醫藥組合物通常另外包含至少一種藥學上可接受之載劑稀釋劑、賦形劑或載劑(於本文中總稱為載劑物質)。由於此種醫藥組合物之HCV抑制活性，故其在治療C型肝炎及相關病症上具有利用性。
於又另一項具體實施例中，本發明係揭示製備包含本發明化合物作為活性成份之醫藥組合物之方法。在本發明之醫藥組合物與方法中，活性成份典型上係與適當載劑物質混合投予，適當地針對所意欲之投藥形式作選擇，意即口服片劑、膠囊(無論是固體充填、半固體充填或液體充填)、供賦形用之粉末、口服凝膠、酏劑、可分散顆粒、糖漿、懸浮液等，並與習用醫藥實務一致。例如，對於呈片劑或膠囊形式供口服投藥而言，可將活性藥物成份與任何口服無毒性藥學上可接受之惰性載劑合併，譬如乳糖、澱粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露醇、乙醇(液體形式)等。再者，當想要或需要時，適當黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑亦可被摻入混合物中。粉末與片劑可包含約5至約95百分比之本發明組合物。
適當黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖類、玉米增甜劑，天然與合成膠質，譬如阿拉伯膠、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇及蠟類。在潤滑劑中，特別可指出硼酸、苯甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉等供使用於此等劑型。崩解劑包括澱粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。
增甜與矯味劑及防腐劑，在適當情況下亦可加入。一些上文指出之術語，意即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、黏合劑等，係更詳細地討論於下文。
此外，本發明之組合物可被調配在持續釋出形式中，以提供任一種或多種組份或活性成份之速率受控釋出，以使治療作用意即HCV抑制活性等達最佳化。供持續釋出之適當劑型，包括層合片劑，其含有數層不同崩解速率層，或受控釋出聚合體基質，其係以活性成份浸漬，且被製成片劑形式，或含有此種經浸漬或包覆多孔性聚合體基質之膠囊。
液體形式製劑包括溶液、懸浮液及乳化液。以下述作為實例，可指出水或水-丙二醇溶液，用於非經腸注射液，或添加增甜劑與鎮靜劑，用於口服溶液、懸浮液及乳化液。液體形式製劑亦可包括供鼻內投藥之溶液。
適用於吸入之氣溶膠製劑可包括溶液及呈粉末形式之固體，其可併用藥學上可接受之載劑，譬如惰性壓縮氣體，例如氮。
為製備栓劑，係首先使低熔點蠟熔解，譬如脂肪酸甘油酯之混合物，譬如可可豆脂，並藉由攪拌或類似混合，使活性成份均勻地分散於其中。然後，將熔融態均勻混合物倒入合宜大小模具中，使其冷卻及藉以固化。
亦包括固體形式製劑，其係意欲在使用之前不久，被轉化成液體形式製劑，無論是供口服或非經腸投藥。此種液體形式包括溶液、懸浮液及乳化液。
本發明化合物亦可以經皮方式傳輸。經皮組合物可採取乳膏、洗劑、氣溶膠及/或乳化液之形式，並可被包含在基質或儲器型之經皮貼藥中，如同此項技藝中習用於此項目的之方式。
本發明化合物亦可以經口方式、靜脈內方式、鼻內方式或皮下方式投藥。
本發明化合物亦可包括呈單位劑型之製劑。在此種形式中，製劑係被再分成適當大小之單位劑量，含有適當量之活性成份，例如達成所要目的之有效量。
本發明活性組合物在單位劑量製劑中之量可以一般方式改變或調整，從約1.0毫克至約1,000毫克，較佳為約1.0至約950毫克，更佳為約1.0至約500毫克，及典型上為約1至約250毫克，根據特定應用而定。所採用之實際劑量可依病患之年齡、性別、體重及被治療症狀之嚴重性而改變。此種技術係為熟諳此藝者所習知。
一般而言，含有活性成份之人類口服劑型可每天投予1或2次。投藥之量與頻率係根據負責臨床師之判斷作調整。供口服投藥之一般建議每日劑量服法在單一或分離劑量中，可涵蓋從每天約1.0毫克至約1，000毫克之範圍。
一些可使用之術語係描述於下文：
膠囊-係指特殊容器或封閉物，製自甲基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或澱粉，用以容納或含有包含活性成份之組合物。硬殼膠囊典型上係製自相對較高凝膠強度骨質與豬皮明膠之摻合物。膠囊本身可含有少量染料、不透明化劑、增塑劑及防腐劑。
片劑-係指含有活性成份與適當稀釋劑之經壓縮或模製固體劑型。片劑可藉由壓縮混合物或藉由濕式造粒、乾式造粒所獲得之粒化物或藉由壓實製成。
口服凝膠-係指經分散或增溶於親水性半固體基質中之活性成份。
賦形用粉末係指含有活性成份與適當稀釋劑之粉末摻合物，其可被懸浮於水或汁液中。
稀釋劑-係指經常構成組合物或劑型之主要部份之物質。適當稀釋劑包括糖類，譬如乳糖、蔗糖、甘露醇及花楸醇；澱粉，衍生自小麥、玉米、稻米及馬鈴薯；及纖維素，譬如微晶性纖維素。稀釋劑在組合物中之量可涵蓋從約10至約90%之範圍，以全部組合物之重量計，較佳為約25至約75%，更佳為約30至約60重量%，又更佳為約12至約60%。
崩解劑-係指被添加至組合物中，以幫助其破裂開來(崩解)並釋出藥劑之物質。適當崩解劑包括澱粉；"冷水溶性"變性澱粉，譬如羧甲基澱粉鈉；天然與合成膠質，譬如刺槐豆、刺梧桐、瓜爾膠、西黃蓍樹膠及瓊脂；纖維素衍生物，譬如甲基纖維素與羧甲基纖維素鈉；微晶性纖維素與交聯微晶性纖維素，譬如交聯羧甲基纖維素鈉；海藻酸鹽，譬如海藻酸與海藻酸鈉；黏土，譬如膨土；及起泡混合物。崩解劑在組合物中之量可涵蓋從約2至約15%之範圍，以組合物之重量計，更佳為約4至約10重量%。
黏合劑-係指使粉末結合或"膠黏"在一起，並藉由形成顆粒使彼等內聚之物質，因此在配方中充作"黏著劑"。黏合劑會增加已可取用於稀釋劑或膨鬆劑中之內聚強度。適當黏合劑包括糖類，譬如蔗糖；澱粉，衍生自小麥、玉米、稻米及馬鈴薯；天然膠質，譬如阿拉伯膠、明膠及西黃蓍樹膠；海藻衍生物，譬如海藻酸、海藻酸鈉及藻酸銨鈣；纖維素物質，譬如甲基纖維素與羧甲基纖維素鈉及羥丙甲基纖維素；聚乙烯基四氫吡咯酮；及無機物質，譬如矽酸鎂鋁。黏合劑在組合物中之量可涵蓋從約2至約20%之範圍，以組合物之重量計，更佳為約3至約10重量%，又更佳為約3至約6重量%。
潤滑劑-係指被加入劑型中以使得片劑、顆粒等在被壓縮後能夠藉由減少摩擦或磨損，而自模具或模口釋出之物質。適當潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，譬如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點蠟類；及水溶性潤滑劑，譬如氯化鈉、苯甲酸鈉、醋酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇及d'1-白胺酸。潤滑劑經常在壓縮前之那個最後步驟添加，因其必須存在於顆粒之表面上，及位在彼等與壓片機配件之間。潤滑劑在組合物中之量可涵蓋從約0.2至約5%之範圍，以組合物之重量計，較佳為約0.5至約2%，更佳為約0.3至約1.5重量%。
滑劑-預防成塊並改良粒化物之流動特性之物質，以致使流動平滑且均勻。適當滑劑包括二氧化矽與滑石。滑劑在組合物中之量，可涵蓋從全部組合物之約0.1%至約5重量%之範圍，較佳為約0.5至約2重量%。
著色劑-對組合物或劑型提供著色之賦形劑。此種賦形劑可包括食品級染料，及被吸附至適當吸附劑譬如黏土或氧化鋁上之食品級染料。著色劑之量可從約0.1改變至約5%，以組合物之重量計，較佳為約0.1至約1%。
生物利用率-係指當與標準物或對照組比較時，活性藥物成份或治療部份基團從所投予之劑型被吸收至系統循環中之速率與程度。
製備片劑之習用方法係為已知。此種方法包括乾式方法，譬如直接壓縮及藉由壓實所製成粒化物之壓縮，或濕式方法或其他特殊程序。製造其他投藥形式例如膠囊、栓劑等之習用方法，亦為習知。
本發明之另一項具體實施例，係揭示上文所揭示之本發明化合物或醫藥組合物於治療疾病例如C型肝炎等之用途。此方法包括對患有此一或多種疾病且需要此種治療之病患，投予治療上有效量之本發明化合物或醫藥組合物。
於又另一項具體實施例中，本發明化合物可在人類中用於治療HCV，其係在單一療法模式中，或在組合療法(例如雙重組合、三重組合等)模式中，例如併用抗病毒及/或免疫調制劑。此種抗病毒及/或免疫調制劑之實例包括三唑核苷(得自Schering-Plough公司，Madison,New Jersey)與LevovirinTM (得自ICN醫藥，Costa Mesa,California)、VP 50406TM (得自Viropharma公司，Exton,Pennsylvania)、ISIS 14803TM (得自ISIS醫藥，Carlsbad,California)、HeptazymeTM (得自Ribozyme醫藥，Boulder,Colorado)、VX 497TM (得自Vertex醫藥，Cambridge,Massachusetts)、ThymosinTM (得自SciClone醫藥，San Mateo,Califo mia)、MaxamineTM (Maxim醫藥，San Diego,California)、分枝酚酸莫非替(mycophenolate mofetil)(得自Hoffman-LaRoche,Nutley,New Jersey)、干擾素(例如干擾素-α、PEG-干擾素α共軛物)等。"PEG-干擾素α共軛物"係為以共價方式連接至PEG分子之干擾素α分子。說明性PEG-干擾素α共軛物包括干擾素α-2a(RoferonTM ，得自Hoffman La-Roche,Nutley,New Jersey)，呈PEG化干擾素α-2a形式(例如以商標名PegasysTM 銷售)，干擾素α-2b(IntronTM ，得自Schering-Plough公司)，呈PEG化干擾素α-2b形式(例如以商標名PEG-IntronTM 銷售)，干擾素α-2c(Berofor AlphaTM ，得自Boehringer Ingelheim,Ingelheim,Germany)，或同感干擾素，如藉由天然生成干擾素α之同感順序測定所定義者(InfergenTM ，得自Amgen,Thousand Oaks,California)。
如前文陳述，本發明亦包括本發明化合物之互變異構物、旋轉異構物、對掌異構物及其他立體異構物。因此，正如熟諳此藝者所明瞭，一些本發明化合物可以適當異構形式存在。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍內。
本發明之另一項具體實施例係揭示一種製造本文中所揭示化合物之方法。此等化合物可藉由此項技藝中已知之數種技術製備。說明性程序係概述於下列反應圖式中。此等說明不應被解釋為限制本發明之範圍，該範圍係被定義於隨文所附之請求項中。替代之機制途徑與類似結構，將為熟諳此藝者所顯而易見。
應明瞭的是，雖然下述說明性合成圖式係描述少數代表性本發明化合物之製備，但任何天然與非天然胺基酸類兩者之適當取代，將會造成所要化合物之形成，以此種取代為基礎。此種變型係意欲被涵蓋在本發明之範圍內。
對於下文所述之程序，係使用下列縮寫：
THF：四氫呋喃
DMF：N,N-二甲基甲醯胺
EtOAc：醋酸乙酯
AcOH：醋酸
HOOBt：3-羥基-1,2,3-苯并三-4(3H)-酮
EDCI：1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽
NMM：N-甲基嗎福啉
ADDP：1,1'-(偶氮二羰基)雙六氫吡啶
DEAD：偶氮二羧酸二乙酯
MeOH：甲醇
EtOH：乙醇
Et2 O：乙醚
DMSO：二甲亞碸
HOBt：N-羥基苯并三唑
PyBrOP：六氟磷酸溴-參-四氫吡咯基鏻
DCM：二氯甲烷
DCC：1,3-二環己基碳化二亞胺
TEMPO：2,2,6,6-四甲基-1-六氫吡啶基氧基
Phg：苯基甘胺酸
Chg：環己基甘胺酸
Bn：苄基
Bzl：苄基
Et：乙基
Ph：苯基
DMFDMA：N,N-二甲基甲醯胺-二甲基縮醛
iBoc：異丁氧基羰基
iPr：異丙基
t Bu或But ：第三-丁基
Boc：第三-丁氧羰基
Cbz：苄氧羰基
Cp：環戊二烯基
Ts：對-甲苯磺醯基
Me：甲基
HATU：六氟磷酸O-(7-氮苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基
DMAP：4-N,N-二甲胺基吡啶
BOP：苯并三唑-1-基-氧基-參(二甲胺基)六氟磷酸鹽
PCC：氯鉻酸吡錠
KHMDS：六甲基二矽氮化鉀或鉀雙(三甲基矽烷基胺)
NaHMDS：六甲基二矽氮化鈉或鈉雙(三甲基矽烷基胺)
LiHMDS：六甲基二矽氮化鋰或鋰雙(三甲基矽烷基胺)
10% Pd/C：10%鈀/碳(重量比)
TG：硫基甘油
製備標的化合物之一般圖式
本發明化合物係使用下文所述之一般圖式(方法A-E)合成。
方法A
N-Boc官能基1.01於酸性條件下之去除保護係提供其鹽酸鹽1.02，接著，使其在肽偶合操作法下，與N-Boc-第三-白胺酸偶合，而得1.03。於N-Boc去除保護後，係接著以適當異氰酸酯處理，獲得脲1.05。甲酯之水解作用係提供酸1.06。酸1.06與適當P1 -P'一級醯胺部份基團之肽偶合，係提供羥基醯胺1.07。氧化作用(Moffatt氧化作用或相關方法-參閱T. T. Tidwell, Synthesis, 1990, 857)或Dess-Martin過碘烷-J. Org. Chem.,(1983)48, 4155)造成標的化合物1.08。
方法B
酸1.06與適當P1 -P'二級醯胺部份基團之肽偶合，係提供羥基醯胺1.09。氧化作用(Moffatt或Dess-Martin)造成標的化合物1.10。
方法C
在另一種變型中，N-Boc-P2-P3 -酸1.17與適當P1 -P1醯胺部份基團之肽偶合，係提供羥基醯胺1.11。氧化作用(Moffatt或Dess-Martin過碘烷)會造成酮醯胺1.12。N-Boc官能基之去除保護係獲得其鹽酸鹽1.13。以適當異氰酸酯(或異氰酸酯相當物)處理，造成標的化合物1.14。
方法D
在又另一種變型中，係經由與氯甲酸4-硝基苯酯反應，使該鹽酸鹽1.13轉化成胺基甲酸4-硝基苯酯1.15。以所選擇胺(或胺鹽酸鹽)之後續處理，提供標的化合物1.14。
方法E
在又另一種變型中，係如上述使二肽鹽酸鹽1.03轉化成胺基甲酸4-硝基苯酯。以所選擇之胺(或胺鹽酸鹽)處理，提供脲衍生物1.05。水解作用及按方法A/B中所述進一步精巧地完成，係提供標的化合物1.14。
P1-P'部份基團之製備
中間物10.11與10.12之製備
步驟1.
於N2 下，使酮亞胺10.01(50克，187.1毫莫耳)在無水THF(400毫升)中之經攪拌溶液冷卻至-78℃，並以K-t BuO(220毫升，1.15當量)在THF中之1M溶液處理。使反應混合物溫熱至0℃，並攪拌1小時，及以溴基甲基環丁烷(28毫升，249毫莫耳)處理。將反應混合物於室溫下攪拌48小時，並在真空中濃縮。使殘留物溶於Et2 O(300毫升)中，並以HCl水溶液(2M，300毫升)處理。將所形成之溶液於室溫下攪拌5小時，並以Et2 O(1升)萃取。以NaOH(50%水溶液)使水層呈鹼性至pH~12-14，並以CH2 Cl2 (3x300毫升)萃取。使合併之有機層脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，及濃縮，而得純胺(10.02，18克)，為無色油。
步驟2.
於0℃下，將胺10.02(18克，105.2毫莫耳)在CH2 Cl2 (350毫升)中之溶液，以二碳酸二-第三-丁酯(23克，105.4毫莫耳)處理，並在室溫下攪拌12小時。於反應完成後(TLC)，使反應混合物在真空中濃縮，並使殘留物溶於THF/H2 O(200毫升，1：1)中，及以LiOH‧H2 O(6.5克，158.5毫莫耳)處理，並在室溫下攪拌3小時。使反應混合物濃縮，並以Et2 O萃取鹼性水層。以濃HCl使水層酸化至pH~1-2，並以CH2 Cl2 萃取。使合併之有機層脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，及在真空中濃縮，而產生10.03，為無色黏稠油，將其用於下一步驟，無需任何進一步純化。
步驟3.
將酸10.03(15.0克，62毫莫耳)在CH2 Cl2 (250毫升)中之溶液，以BOP試劑(41.1克，93毫莫耳)、N-甲基嗎福啉(27毫升)、N,O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(9.07克，93毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌過夜。將反應混合物以1 N HCl水溶液(250毫升)稀釋，並分離液層，且以CH2 Cl2 (3x300毫升)萃取水層。使合併之有機層脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，並在真空中濃縮，及藉層析純化(SiO2 ，EtOAc/己烷2：3)，而產生醯胺10.04(15.0克)，為無色固體。
步驟4.
將醯胺10.04(15克，52.1毫莫耳)在無水THF(200毫升)中之溶液，於0℃下，以LiAlH4 溶液(1M，93毫升，93毫莫耳)逐滴處理。將反應混合物於室溫下攪拌1小時，並在0℃下，以KHSO4 溶液(10%水溶液)小心地使反應淬滅，及攪拌0.5小時。將反應混合物以HCl水溶液(1M，150毫升)稀釋，並以CH2 Cl2 (3x200毫升)萃取。將合併之有機層以HCl水溶液(1M)、飽和NaHCO3 、鹽水洗滌，並脫水乾燥(MgSO4 )。過濾混合物，並在真空中濃縮，而產生10.05，為黏稠無色油(14克)。
步驟5：
將醛10.05(14克，61.6毫莫耳)在CH2 Cl2 (50毫升)中之溶液，以Et3 N(10.73毫升，74.4毫莫耳)與2-氰化丙醇(10.86克，127.57毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌24小時。使反應混合物於真空中濃縮，並以HCl水溶液(1M，200毫升)稀釋，及萃取在CH2 Cl2 (3x200毫升)中。將合併之有機層以H2 O、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，在真空中濃縮，並藉層析純化(SiO2 ，EtOAc/己烷1：4)，而產生10.06(10.3克)，為無色液體。
步驟6.
於0℃下，將已經由使HCl氣體起泡經過CH3 OH(700毫升)所製成之HCl飽和之甲醇*，以氰醇10.06處理，並加熱至回流，歷經24小時。使反應物在真空中濃縮，而產生10.07，將其使用於下一步驟，無需純化。
*或者，亦可使用藉由添加AcCl至無水甲醇中製成之6M HCl。
步驟7.
於-78℃下，將胺鹽酸鹽10.07在CH2 Cl2 中之溶液(200毫升)，以Et3 N(45.0毫升，315毫莫耳)與Boc2 O(45.7克，209毫莫耳)處理。然後，將反應混合物於室溫下攪拌過夜，並以HCl(2M，200毫升)稀釋，及萃取於CH2 Cl2 中。使合併之有機層脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，在真空中濃縮，及藉層析純化(EtOAc/己烷1：4)，而產生羥基酯10.08。
步驟8.
將甲酯10.08(3克，10.5毫莫耳)在THF/H2 O(1：1)中之溶液，以LiOH‧H2 O(645毫克，15.75毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌2小時。以HCl水溶液(1M，15毫升)使反應混合物酸化，並在真空中濃縮。使殘留物於真空中乾燥，而得10.09，定量產率。
步驟9.
將酸10.09(得自上文)在CH2 Cl2 (50毫升)與DMF(25毫升)中之溶液，以NH4 Cl(2.94克，55.5毫莫耳)、EDCI(3.15克，16.5毫莫耳)、HOOBt(2.69克，16.5毫莫耳)及NMM(4.4克，44毫莫耳)處理。將反應混合物於室溫下攪拌3天。於真空下移除溶劑，並將殘留物以HCl水溶液(250毫升)稀釋，及以CH2 Cl2 萃取。將合併之有機層以飽和NaHCO3 水溶液洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，在真空中濃縮，獲得10.10，將其以本身使用於下文步驟。(或者，10.10亦可於0℃下，經由使10.06(4.5克，17.7毫莫耳)與H2 O2 水溶液(10毫升)、LiOH‧H2 O(820毫克，20.8毫莫耳)在50毫升CH3 OH中反應0.5小時而直接獲得)。
步驟10.
使前一步驟中所獲得之10.10溶液溶於二氧陸圜中之4N HCl內，並在室溫下攪拌2小時。使反應混合物在真空中濃縮，獲得中間物10.11，為固體，使用之而無需進一步純化。
步驟11.
所需要之中間物10.12係使用基本上在上文步驟9、10中所述之程序，以適當試劑得自化合物10.09。
中間物11.01之製備
步驟1
於4-戊炔-1-醇11.02溶液(4.15克；Aldrich)中，添加Dess-Martin過碘烷(30.25克；Aldrich)，並將所形成之混合物攪拌45分鐘，然後添加(第三-丁氧羰基亞甲基)三苯基磷烷(26.75克；Aldrich)。將所形成之暗反應物攪拌過夜，以EtOAc稀釋，以亞硫酸鈉水溶液、飽和NaHCO3 水溶液、水、鹽水洗滌，並脫水乾燥。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之1% EtOAc作為溶離劑，而得所要之化合物11.03(3.92克)。亦獲得一些不純溶離份，但此時放在一旁。
步驟2
使用正-丙醇(20毫升；Aldrich))中之烯烴11.03(1.9克)、正-丙醇(40毫升)中之胺基甲酸苄酯(4.95克；Aldrich)、水(79毫升)中之NaOH(1.29克)、次氯酸第三-丁酯(3.7毫升)、正-丙醇(37.5毫升)中之(DHQ)2PHAL(0.423克；Aldrich)及鋨酸鉀：脫水物(0.1544克；Aldrich)，以及Angew. Chem. Int. Ed. Engl(1998),35,(23/24),第2813-7頁中所提出之程序，獲得粗產物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(1：5)，而得所要之胺基醇11.04(1.37克，37%)，為白色固體。
步驟3
於酯11.04(0.700克)中，添加二氧陸圜中之4M HCl(20毫升；Aldrich)，並使所形成之混合物於室溫下靜置過夜。於減壓下移除揮發性物質，獲得酸11.05(0.621克)，為白色固體。
步驟4
於室溫下，將BOP試劑(3.65克；Sigma)，接著是三乙胺(3.45毫升)，添加至羧酸11.05(2.00克)之二氯甲烷(20毫升)溶液與烯丙基胺(0.616毫升)中，並將所形成之混合物攪拌過夜。使反應混合物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(硫酸鎂)。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用(EtOAc：己烷；70：30)作為溶離劑，提供所要之醯胺11.01(1.73克)，為黏稠黃色油。
中間物12.03與12.04之製備
步驟1
使用基本上關於中間物10.11步驟3-8所述之程序，使化合物12.01轉化成所需要之物質12.02。
步驟2
使用基本上關於中間物10.11步驟9、10所述之程序，使化合物12.02轉化成所需要之中間物12.03。
步驟3
使用基本上關於中間物10.12步驟11所述之程序，使化合物12.02轉化成所需要之中間物12.03。
中間物13.01之製備
步驟1
於1-硝基丁烷13.02(16.5克，0.16莫耳)與乙醛酸在H2 O(28.1克，0.305莫耳)與MeOH(122毫升)中之經攪拌溶液內，於0℃-5℃下，逐滴添加三乙胺(93毫升，0.667莫耳)，歷經2小時。使溶液溫熱至室溫，攪拌過夜，及濃縮至乾涸，而得油狀物。然後，使油溶於H2 O中，並以10%HCl酸化至pH=1，接著以EtOAc萃取。將合併之有機溶液以鹽水洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮至乾涸，獲得產物13.03(28.1克，99%產率)。
步驟2
於化合物13.03(240克，1.35莫耳)在醋酸(1.25升)中之經攪拌溶液內，添加10%Pd/C(37克)。使所形成之溶液於59psi下氫化3小時，接著在60psi下過夜。然後，使醋酸蒸發，並與甲苯共沸3次，接著以MeOH及醚研製。然後過濾溶液，並與甲苯共沸兩次，而得13.04，為灰白色固體(131克，0.891莫耳，66%)。
步驟3
於胺基酸13.04(2.0克，13.6毫莫耳)在二氧陸圜(10毫升)與H2O(5毫升)中之經攪拌溶液內，於0℃下，添加1N NaOH溶液(4.3毫升，14.0毫莫耳)。將所形成之溶液攪拌10分鐘，接著添加二碳酸二-第三-丁酯(0.110克，14.0毫莫耳)，並於0℃下攪拌15分鐘。然後，使溶液溫熱至室溫，攪拌45分鐘，並在冷藏室中保持過夜，及濃縮至乾涸，獲得粗製物質。於此粗製物質在EtOAc(100毫升)與冰中之溶液內，添加KHSO4 (3.36克)與H2 O(32毫升)，並攪拌4-6分鐘。接著分離有機層，並以EtOAc將水層萃取兩次，且將合併之有機層以水、鹽水洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮至乾涸，而得產物13.05，為透明膠質(3.0克，89%產率)。
步驟4
使用基本上關於10.12中間物步驟11所述之程序，使化合物13.05轉化成所需要之中間物13.01。
中間物14.01之製備
步驟1
使用基本上關於13.01中間物步驟13所述之程序，使化合物14.02轉化成所需要之物質14.03。
步驟2
使用基本上關於10.12中間物步驟11所述之程序，使化合物14.03轉化成所需要之中間物14.01。
中間物15.01之製備
步驟1
於亞硝酸銀(9克，58.5毫莫耳)在乙醚(25毫升)中之懸浮液內，於0℃下，慢慢地經過添液漏斗(約15分鐘)，添加4-碘基-1,1,1-三氟丁烷15.02(10克，42.0毫莫耳)在乙醚(25毫升)中之溶液。將所形成之混合物於0℃下激烈攪拌，並溫熱至室溫。50小時後，經過矽藻土墊濾出固體物質。使所形成之乙醚溶液於真空中濃縮，獲得15.03，為無色油，使用之而無需進一步純化。
步驟2
使用基本上關於13.01中間物步驟1-3所述之程序，使化合物15.03轉化成所需要之物質15.04。
步驟3
使用基本上關於10.12中間物步驟11所述之程序，使化合物15.04轉化成所需要之中間物15.01。
中間物16.01之製備
如上文所述處理酸16.02(Winkler,D.；Burger,K.,Synthesis,1996,1419)(中間物10.12之製備)，獲得期望之中間物16.01。
P2/P3-P2部份基團之製備
中間物20.01之製備
胺基酯20.01係按照R.Zhang與J. S. Madalengoitia(J. Org. Chem. 1999,64,330)之方法製成，惟使Boc基團藉由Boc-保護之胺基酸與甲醇性HCl之反應而分裂。(註：在所報告合成之一種變型中，係將鋶亞烷基化合物以其相應之鏻亞烷基化合物置換)。
中間物20.04之製備
步驟1
將市售胺基酸Boc-Chg-OH20.02(Senn化學品，6.64克,24.1毫莫耳)與胺鹽酸鹽20.01(4.5克，22毫莫耳)在CH2 Cl2 (100毫升)中之溶液，於0℃下，以BOP試劑處理，並在室溫下攪拌15小時。使反應混合物於真空中濃縮，然後將其以1M HCl水溶液稀釋，並萃取於EtOAc(3x200毫升)中。將合併之有機層以飽和NaHCO3 (200毫升)洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，並在真空中濃縮，及層析(SiO2 ，EtOAc/己烷3：7)，獲得20.03(6.0克)，為無色固體。
步驟2
將甲酯20.03(4.0克，9.79毫莫耳)在THF/H2 O(1：1)中之溶液，以LiOH.H2 O(401毫克，9.79毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌3小時。以HCl水溶液使反應混合物酸化，並於真空中濃縮，獲得所需要之中間物自由態酸20.04。
中間物20.07之製備
步驟1
使Boc-第三-Leu20.05(Fluka，5.0克，21.6毫莫耳)在無水CH2 Cl2 /DMF(50毫升，1：1)中之溶液冷卻至0℃，並以胺鹽20.01(5.3克，25.7毫莫耳)、NMM(6.5克，64.8毫莫耳)及BOP試劑(11.6克，25.7毫莫耳)處理。將反應物於室溫下攪拌24小時，以HCl水溶液(1M)稀釋，並以CH2 Cl2 萃取。將合併之有機層以HCl(水溶液，1M)、飽和NaHCO3 、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，並在真空中濃縮，及藉層析純化(SiO2 ，丙酮/己烷1：5)，而產生20.06，為無色固體。
步驟2
使甲酯20.06溶液(4.0克，10.46毫莫耳)溶於二氧陸圜中之4MHC1內，並在室溫下攪拌3小時。使反應混合物於真空中濃縮，獲得胺鹽酸鹽20.07，使用之而無需純化。
中間物20.10之製備
步驟1
於1.17(10.4克，28毫莫耳)在DCM(300毫升)中之-20℃溶液內，添加HATU(1.05當量，29.4毫莫耳，11.2克)、胺鹽、中間物12.03(1.0當量，28毫莫耳，5.48克)。於-20℃下10分鐘後，添加DIPEA(3.6當量，100毫莫耳，17.4毫升)。將反應物於此溫度下攪拌16小時。16小時後，將反應物以EtOAc稀釋，並以NaHCO3 、檸檬酸(10%w/w)及鹽水連續洗滌。使有機層以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及在真空中濃縮，而產生14克所需要之中間物20.08。
步驟2
以關於實例198所述之方式(步驟8)，使羥基醯胺20.08氧化成所需要之酮醯胺20.09。LC-MS=507(M+H)+ .
步驟3
按關於20.06之轉變成20.07所述，進行t-Boc官能基20.09之去除保護，獲得所需要之物質20.10。
中間物21.01之製備：
步驟1：
於N-Boc-3，4-脫氫脯胺酸21.02(5.0克，23.5毫莫耳)、二碳酸二-第三-丁酯(7.5克，34.4毫莫耳)及4-N,N-二甲胺基吡啶(0.40克，3.33毫莫耳)在乙腈(100毫升)中之經攪拌溶液內，於室溫下，添加三乙胺(5.0毫升，35.6毫莫耳)。於真空中濃縮之前，將所形成之溶液在此溫度下攪拌18小時。使深褐色殘留物藉急驟式管柱層析純化，以10-25%EtOAc/己烷溶離，而得產物21.03，為淡黃色油(5.29克，84%)。
步驟2：
於脫氫脯胺酸衍生物21.03(10.1克，37.4毫莫耳)、苄基三乙基氯化銨(1.60克，7.02毫莫耳)在氯仿(120毫升)中之經攪拌溶液內，在室溫下，添加50%氫氧化鈉水溶液(120克)。於此溫度下激烈攪拌24小時後，將暗色混合物以CH2 Cl2 (200毫升)與乙醚(600毫升)稀釋。分離液層後，將水溶液以CH2 Cl2 /Et2 O(1：2，3x600毫升)萃取。使有機溶液脫水乾燥(MgSO4 )，並濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化，使用5-20%EtOAc/己烷，而得9.34克(71%)21.04，為灰白色固體。
步驟3：
將21.04(9.34克，26.5毫莫耳)在CH2 Cl2 (25毫升)與CF3 CO2 H(50毫升)中之溶液，於室溫下攪拌4.5小時，然後使其在真空中濃縮，獲得褐色殘留物21.05，將其使用於步驟4，無需進一步純化。
步驟4
將濃鹽酸(4.5毫升)添加至得自步驟3之殘留物21.05在甲醇(70毫升)中之溶液內，並使所形成之混合物在油浴中溫熱至65℃。18小時後，使混合物於真空中濃縮，而得褐色油21.01，進一步使用之而無需純化。
中間物22.01之製備
步驟1
將鉀雙(三甲基矽烷基)胺(158毫升，在甲苯中之0.5M溶液；79毫莫耳)添加至溴化環丙基三苯基鏻(33.12克；86.4毫莫耳)在無水四氫呋喃(130毫升)中之經攪拌懸浮液內，並將所形成之橘色混合物於氮大氣及室溫下攪拌1小時期間，然後添加THF(8毫升)中之醛22.02(9.68克；42.2毫莫耳)。接著，使反應物於氮大氣下回流2小時期間。於冷卻後，添加甲醇、乙醚及Rochelles鹽。分離有機相，以鹽水洗滌，脫水乾燥，及在減壓下濃縮。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：99)至EtOAc-己烷(5：95)，提供烯烴22.03(8.47克)，為黃色油。
步驟2
1M HCl在MeOH/MeOAc中之溶液係以下述方式製成，將14.2毫升氯化乙醯逐滴添加至冷甲醇中，並於室溫下，將所形成之溶液稀釋至200毫升。
使胺基甲酸酯22.03(9.49克；37.5毫莫耳)溶於甲醇(12毫升)中，並添加至MeOH/MeOAc中之1MHCl(150毫升)內，同時在冰浴中冷卻。使所形成之混合物在此溫度下保持1小時，然後移除冰浴，並於室溫下持續攪拌過夜。於減壓下移除揮發性物質，而產生黃色油，將其使用於下一步驟，無需純化。
使黃色油溶於THF(30毫升)與MeOH(20毫升)之混合物中，並以三乙胺(15毫升；108毫莫耳)處理，直到溶液pH=9-10為止。放置在冰浴中之後，以N-Boc-Gly-OSu(11.22克；41毫莫耳)處理混合物。抽離冰浴，並將反應物於室溫下攪拌1小時。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用二氯甲烷中之甲醇(1-3%)，提供所要之醯胺22.04(9.09克)。
步驟3
使醇22.04(9.09克；33.6毫莫耳)溶於丙酮(118.5毫升)中，並以2，2-二甲氧基丙烷(37.4毫升；304毫莫耳)與BF3 ：Et2 O(0.32毫升；2.6毫莫耳)處理，且將所形成之混合物在室溫下攪拌5.5小時期間。將反應溶液以數滴三乙胺處理，並於減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之5-25%EtOAc，提供N,O-縮醛22.05(8.85克)。
步驟4
使胺基甲酸酯22.05(8.81克；28.4毫莫耳)溶於乙腈(45毫升)中，並使溶液在氮大氣下冷卻至-40℃。添加吡啶(6.9毫升；85.3毫莫耳)，接著是四氟硼酸亞銷(6.63克；56.8毫莫耳)，並將所形成之反應混合物保持低於0℃，直到TLC顯示無起始物質殘留為止(約2.25小時)。添加四氫吡咯(20毫升；240毫莫耳)，並抽離冷卻浴，及在室溫下持續攪拌1小時。然後，於減壓下移除揮發性物質。使殘留物快速地通過矽膠墊，提供黃色油。
使黃色油溶於無水苯(220毫升)中，並添加醋酸鈀(0.317克；1.41毫莫耳)，接著在氮大氣下，將所形成之混合物加熱至回流，歷經1.5小時期間。於冷卻後，在減壓下移除揮發性物質，並使暗殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：4)，以提供1)反式-四氫吡咯酮22.06(1.94克)，接著是ii)順式-四氫吡咯酮22.07(1.97克)。
步驟5
將剛製成之MeOAc/MeOH中之1M HCl(10毫升；如上述)添加至N,O-縮醛22.06中，並於室溫下攪拌1小時。於減壓下移除溶劑，並使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用二氯甲烷中之0-4% MeOH作為溶離劑，提供所要之醇22.08(1.42克)，黃色油。
步驟6
於內醯胺22.08(1.29克；8.44毫莫耳)在無水四氫呋喃(55毫升)中之溶液內，添加氫化鋰鋁(2.40克；63.2毫莫耳)，並使所形成之混合物回流8小時。於冷卻後，添加水，接著是15% NaOH水溶液，並使所形成之混合物經過矽藻土過濾，且將固體以THF與MeOH充分洗滌。於減壓下移除溶劑，並使殘留物再溶解於二氯甲烷中，脫水乾燥，及在減壓下濃縮，提供四氫吡咯，使用之而無需純化。
於-60℃及氮大氣下，將Hunig氏鹼(4.5毫升；25.8毫莫耳)添加至N-Boc-L-第三-Leu-OH(1.76克；7.6毫莫耳)、粗製四氫吡咯及HATU(2.89克；7.6毫莫耳)在無水二氯甲烷(50毫升)中之混合物內。使所形成之反應物慢慢回復至室溫過夜。添加EtOAc，並將黃色溶液以稀HCl水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、水、鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥，並於減壓下濃縮。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(1：3)，而得所要之醯胺22.09(2.00克)。
步驟7
使醇22.09(2.00克；5.67毫莫耳)溶於丙酮(116毫升)中，並在冰浴中冷卻10分鐘。然後，將此溶液添加至已冷卻之Jones試劑(14.2毫升；約2毫莫耳/毫升)中，並將所形成之混合物於5℃下攪拌0.5小時，且移除冰浴。將反應物於室溫下再攪拌2小時，接著添加至EtOAc(100毫升)中之硫酸鈉(28.54克)、矽藻土(15克)內。1分鐘後添加異丙醇(15毫升)，然後再攪拌10分鐘，並過濾。使濾液於減壓下濃縮，提供褐色油，使其溶於EtOAc中。將此溶液以水、3%檸檬酸水溶液、鹽水洗滌，脫水乾燥，及濃縮，提供所要之羧酸22.01(1.64克)，為白色固體。
中間物23.01之製備
步驟1：
於酯23.02(6.0克)與分子篩(5.2克)在無水二氯甲烷(35毫升)中之混合物內，添加四氫吡咯(5.7毫升，66.36毫莫耳)。將所形成之褐色漿液於室溫及N2 下攪拌24小時，過濾，並以無水CH3 CN洗滌。濃縮合併之濾液，而產生所要之產物23.03。
步驟2：
於得自前一步驟之產物23.03在CH3 CN中之溶液(35毫升)內，添加無水K2 CO3、氯化甲基烯丙烷(2.77克，30.5毫莫耳)、NaI(1.07克，6.7毫莫耳)。將所形成之漿液於環境溫度及N2下攪拌24小時。添加50毫升冰冷水，接著是2N KHSO4 溶液，直到pH 1為止。添加EtOAc(100毫升)，並將混合物攪拌0.75小時。收集合併之有機層，並以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，及蒸發，而產生所要之產物23.04。
步驟3：
使得自前一步驟之產物23.04(2.7克，8.16毫莫耳)溶於二氧陸圜(20毫升)中，並以剛製成之1N LiOH(9毫升)處理。將反應混合物於環境溫度及N2 下攪拌20小時。使反應混合物溶於EtOAc中，並以H2 O洗滌。使合併之水相冷卻至0℃，並使用1N HCl酸化至pH 1.65。以EtOAc(2 x 100毫升)萃取混濁混合物。將合併之有機層以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，及濃縮，而得所要之酸23.05(3.40克)。
步驟4：
於NaBH(OAc)3 (3.93克，18.5毫莫耳)在CH2 Cl2 (55毫升)中之懸浮液內，添加得自前一步驟之產物23.05在無水CH2 Cl2 (20毫升)與醋酸(2毫升)中之溶液。將漿液於環境溫度下攪拌20小時。將冰冷水(100毫升)添加至漿液中，並攪拌1/2小時。分離有機層，過濾，脫水乾燥，並蒸發，而產生所要之產物23.06。
步驟5：
將得自前一步驟之產物23.06(1.9克)在MeOH(40毫升)中之溶液，以過量CH2 N2 /Et2 O溶液處理，並攪拌過夜。使反應混合物濃縮至乾涸，而產生粗製殘留物。使殘留物於矽膠上層析溶離，以EtOAc/己烷梯度液，獲得1.07克所要之純產物23.07。
步驟6：
將得自前一步驟之產物23.O7(1.36克)在無水CH2 Cl2 (40毫升)中之溶液，以BF3 .Me2 O(0.7毫升)處理。將反應混合物於環境溫度下攪拌20小時，並以飽和NaHCO3 (30毫升)使反應淬滅，及攪拌1/2小時。分離有機層，並將合併之有機層以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，濃縮，而得粗製殘留物。使殘留物於矽膠上層析，以EtOAc/己烷之梯度液溶離，獲得0.88克所要之化合物23.08。
步驟7：
於得自前一步驟之產物23.08(0.92克)在MeOH(30毫升)中之溶液內，在室溫下，添加10% Pd/C(0.16克)，並於環境溫度及1大氣壓力下氫化。將反應混合物攪拌4小時，並濃縮至乾涸，而產生所要之化合物23.01。
P3部份基團之製備
中間物50.01之製備
步驟1
於50.02(15克)在MeOH(150毫升)中之溶液內，添加濃HCl(3-4毫升)，並使混合物回流16小時。使反應混合物冷卻至室溫，並濃縮。使殘留物溶於乙醚(250毫升)中，並以冷飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌。使有機層脫水乾燥(Na2 SO4 )，並濃縮，而得甲酯50.03(12.98克)，進行之無需進一步純化。
步驟2
使得自上文之甲酯50.03溶於二氯甲烷(100毫升)中並在氮大氣下冷卻至-78℃。逐滴添加DIBAL(二氯甲烷中之1.0M溶液，200毫升)，歷經2小時期間。使反應混合物溫熱至室溫，歷經16小時。使反應混合物冷卻至0℃，並逐滴添加MeOH(5-8毫升)。慢慢添加10%酒石酸鈉鉀水溶液(200毫升)，並攪拌。以二氯甲烷(100毫升)稀釋，並分離有機層(伴隨著一些白色沉澱物)。將有機層以1N HCl(250毫升)、鹽水(200毫升)洗滌，脫水乾燥(Na2 SO4 )，及濃縮，提供醇50.04(11.00克)，為透明油。
步驟3
使得自上文之醇50.04溶於二氯甲烷(400毫升)中，並在氮大氣下冷卻至0℃。分次添加PCC(22.2克)，並使反應混合物慢慢溫熱至室溫，歷經16小時。將反應混合物以乙醚(500毫升)稀釋，並經過矽藻土墊過濾。濃縮濾液，並使殘留物溶於乙醚(500毫升)中。使其通過矽膠墊，並濃縮濾液，提供醛50.05，進行之無需進一步純化。
步驟4
基本上使用Chakraborty等人之方法(Tetrahedron,1995,51(33),9179-90)，使得自上文之醛50.05轉化成所要之物質50.01。
特殊實例之製備
實例108：
步驟1與2：
步驟1：
於-78℃及氮大氣下，將KHMDS(200毫升，甲苯中之0.5M溶液)逐滴添加至環己烷羧酸甲酯(11.1克；78毫莫耳)在無水THF(200毫升)中之經攪拌溶液內。於添加完成時，使反應在此溫度下再保持0.5小時，然後添加苄基氯甲基醚(18.6毫升；134毫莫耳)。使反應物溫熱至室溫過夜，並添加水(100毫升)。水溶液處理提供殘留物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc；己烷(1：10)作為溶離劑，而得所要之不純中間物醚(14.98克)，為無色油。
步驟2：
使10%Pd/C(0.5克)與前述粗製醚(4.1克)在MeOH(80毫升)中之黑色懸浮液，於室溫下曝露至氮大氣(氣瓶)過夜。經過矽藻土墊過濾反應物，並將固體以甲醇充分洗滌。使合併之濾液於減壓下濃縮，並使粗產物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc；己烷(1：5)，而得一級醇(108A；0.62克)，無色油。
步驟3：
於0℃及氮大氣下，將氯化甲烷磺醯(0.31毫升)，接著是三乙胺(0.75毫升)，添加至一級醇(108A；0.62克)之經攪拌溶液中。將所形成之混合物於此溫度下攪拌0.5小時。將反應混合物萃取於EtOAc中，並以1M HCl水溶液、飽和NaHCO3 水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及濃縮。以黃色油獲得殘留物(甲烷磺酸酯108B；0.74克)，將其使用於後續步驟，無需純化。
步驟4：
將甲烷硫醇化鈉(0.236克；2當量)添加至甲烷磺酸酯(108B；0.42克)之DMF(2毫升)溶液中，並將混合物加熱至100℃，歷經1小時。水溶液處理，並使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(1：20)，獲得硫化物(108C；0.089克)。
步驟5與6：
步驟5：
使氫氧化鉀(0.25克)溶於水(1毫升)與乙醇(5毫升)之混合物中，並添加至甲酯(108C；0.089克)中，且將所形成之混合物於氮大氣下加熱至回流，度過週末(約72小時)。於冷卻後，使反應物在EtOAc與稀HCl水溶液之間作分液處理。將有機相分離，以鹽水洗滌，脫水乾燥，及濃縮，產生粗製中間物羧酸，使用之而無需純化。
步驟6：
將三乙胺(61微升)，接著是DPPA(95微升)，添加至得自前一步驟之羧酸之甲苯溶液中，並將反應物加熱至100℃過夜。於冷卻後，使反應混合物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間作分液處理。將有機相分離，脫水乾燥，及濃縮，產生異氰酸酯(108D；50毫克)，使用之而無需純化。
步驟7與8：
步驟7：
將二氯甲烷(1毫升)中之異氰酸酯(108D；50毫克)，添加至其鹽酸鹽(108E；以關於20.06之轉變成20.07所述之方式製自20.08；100毫克)與三乙胺(111微升)在二氯甲烷(2毫升)中之混合物內，並將所形成之混合物於室溫下攪拌4小時。使反應混合物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(硫酸鎂)，及濃縮，而產生殘留物，將其使用於步驟8，無需純化。
步驟8：
使前述步驟中之殘留物溶於甲苯(3毫升)與二甲亞碸(3毫升)之混合物中，並添加EDCI(647毫克)，接著是二氯醋酸(140微升)，且將所形成之反應混合物於室溫下攪拌4小時期間。使反應混合物於EtOAc與5%亞硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以10% HCl水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(硫酸鎂)，及濃縮，而產生殘留物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用丙酮：己烷(40：60)作為溶離劑，提供所要之酮基-醯胺(108；11.5毫克)。MS：MH+,592.1.
實例185：
步驟1：
使生氧劑(5.68克)溶於水(5毫升)中，並添加至甲醇(5毫升)中之羧酸185A(1.25克)內，同時在冰浴中冷卻。使反應混合物溫熱至室溫過夜。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物在二氯甲烷與水之間作分液處理。分離水相，並以二氯甲烷萃取(X2)。使合併之有機相脫水乾燥，並濃縮，而產生碸(185B；1.10克)，為白色固體，使用於後續程序，無需純化。
步驟2與3：
步驟2：
使胺基甲酸苄酯(11.01；0.16克)溶於TFA(7毫升)中，並添加硫化二甲烷(1.78毫升)，且使所形成之混合物在室溫下靜置3小時期間，然後於減壓下移除揮發性物質。這獲得殘留物，將其使用於下文步驟3中。
步驟3：
將三乙胺(111微升)添加至得自步驟2之殘留物羧酸(1.17；0.180克)與BOP試劑(0.236克)在二氯甲烷(5毫升)中之混合物內，並將反應混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於醋酸乙酯與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥(硫酸鎂)，並於減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(70：30)作為溶離劑，而得所要之羥基-醯胺(185D；0.165克)，為白色固體。
步驟4：
將過碘烷(0.236克)添加至醇(185D；0.152克)在二氯甲烷(5毫升)中之經攪拌溶液內，並將所形成之白色懸浮液攪拌2小時期間，然後添加至EtOAc與5%亞硫酸鈉水溶液之混合物中。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，並於減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(40：60)作為溶離劑，而得所要之酮基-醯胺(185E；0.147克)，為白色固體。MS：MH+,545.5.
步驟5：
將HCl在二氧陸圜中之溶液(4M；5毫升；Aldrich)，添加至胺基甲酸酯(185E；0.14克)中，並使其在室溫下靜置3小時期間。於減壓下移除揮發性物質，提供其鹽酸鹽(185F；0.126克：含有少量二氧陸圜)。
步驟6與7：
步驟6：
將DPPA(19微升)添加至羧酸(185B;20毫克)與三乙胺(13微升)在甲苯(1毫升)中之混合物內，並將所形成之反應混合物加熱至回流，歷經1小時期間。於冷卻後，使反應物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，並於減壓下移除揮發性物質。獲得粗製中間物異氰酸酯，將其使用於下文步驟7，無需純化。
步驟7：
使得自步驟6之產物溶於二氯甲烷(1毫升)中，並添加至其鹽酸鹽(185F；20毫克)與三乙胺(60微升)在二氯甲烷(1毫升)中之混合物內，且將所形成之混合物在室溫下攪拌1小時期間。使反應物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，並於減壓下移除揮發性物質。使所形成之殘留物藉矽膠板層析純化，使用EtOAc：己烷(1：1)作為溶離劑，提供酮基-醯胺(185；16.3毫克)，為白色固體。MS：MH+,662.5.
式132與210化合物直接自式122化合物之製備
使用硫化物122(以類似如108之方式，使用甲酯210A而非108C製成；20毫克)、生氧劑(27毫克；1.5當量)、水(1毫升)、甲醇(1毫升)及先前提出之程序(185A至185B)，獲得粗製反應產物，使其藉矽膠板層析純化，使用EtOAc作為溶離劑。獲得碸(210；MH+=704.4；5.6毫克)，為白色固體，接著是亞碸類之混合物(132；MH+=688.5；6.3毫克)，亦為白色固體。
化合物113之製備
步驟1與2：
步驟1：
使用環己烷羧酸甲酯(5.55克)、KHMDS(100毫升，甲苯中之0.5M溶液)、無水THF(100毫升)及苄基2-溴基乙醚(10.09克)，以及先前提出之程序(實例108，步驟1)，於矽膠管柱層析(EtOAc:己烷：15：85)後，獲得所要之中間物苄基醚(6.83克)。
步驟2：
使用前述苄基醚(5.00克)、10%Pd/C(1.00克)、甲醇(20毫升)及先前提出之程序(實例108；步驟2)，於矽膠上管柱層析(EtOAc：己烷；1：10)之後，獲得內酯(113B；0.87克)，接著是醇(113A；2.01克)。
步驟3：
步驟3：
將硫代酚鈉(0.68克)添加至內酯(113B；0.84克)在乙醇(15毫升)中之溶液內，並將所形成之混合物於氮大氣下加熱至回流過夜。於冷卻後，水溶液處理，並使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化(EtOAc-己烷；30：70)，獲得羧酸(113C；0.32克)，為黃色固體。
使用前文關於108C之轉化成108所述之化學，以類似方式使113C轉化成113。MS,MH+,668.3.
化合物116之製備：
步驟1與2
步驟1：
使用醇(113A；1.00克)、氯化甲烷磺醯(1.12克)、三乙胺(0.82克)、二氯甲烷(10毫升)及先前提出之程序(108A至108B)，獲得所要之中間物甲烷磺酸酯，並使用於下一步驟，無需純化。
步驟2：
於室溫下，使用前述甲烷磺酸酯、甲烷硫醇化鈉(0.75克)、乙醇(10毫升)及先前提出之程序(108B至108C)，於矽膠管柱層析(EtOAc-己烷；1：10)後，獲得所要之硫化物(116A；0.78克)。使用先前提出之程序(108C至108D)與(108D至108)，使中間物116A轉變成116。MS；MH+,606.1.
化合物198之製備
步驟1與2"
步驟1與2：
步驟1：
使3-苄氧基苯胺(5.00克；Aldrich)溶於濃HCl混合物(10毫升)中，並添加冰(10.00克)。添加水(10毫升)中之亞硝酸鈉(1.85克)，同時在冰浴中冷卻。於添加完成時，添加O-乙基黃酸鉀，並在此溫度下攪拌，直到停止氮氣釋出為止，然後於40-45℃下加熱1.5小時期間。於冷卻後，水溶液處理，並藉矽膠管柱純化層析(己烷中之2-5%EtOAc)，而得中間物黃酸鹽(3.60克)。
步驟2：
將氫化鋰鋁(6.4毫升，THF中之1M溶液)逐滴添加至前述黃酸鹽(1.49克)在THF(10毫升)中之經攪拌溶液內，並於室溫下攪拌0.5小時期間。以過量丙酮使反應淬滅，並於EtOAc與1M HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化(己烷中之1-2%EtOAc)，獲得硫酚(198A；0.84克)，白色固體。
步驟3：
將硫醇(198B；0.72克)添加至NaH(0.08克，礦油中之60%分散液)在無水DMF中之懸浮液內，同時於氮大氣下，在冰浴中冷卻。將所形成之混合物攪拌1小時，並添加甲烷磺酸酯(108B；0.417克)，且使反應物溫熱至室溫過夜。水溶液處理，並使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化(己烷中之3%EtOAc)，獲得硫化物(198C；0.313克)。
步驟4-6：
使用前一步驟中所產生之硫化物(198C)，使用(108C至108D)與(185A至185D)中提出之程序，製成異氰酸酯(198D)。將異氰酸酯(198D)使用於後續程序，無需純化。
步驟7：
將最少量二氯甲烷(約1毫升)中之異氰酸酯(198D；0.139克)，添加至鹽酸鹽(108E；0.080克)與三乙胺(0.126毫升)之混合物中，並將所形成之混合物於室溫下攪拌4小時期間。使反應混合物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，及濃縮。將粗製反應產物(198E)以粗製物使用於下一步驟中。
步驟8：
使得自前一步驟之粗產物(198E)溶於DMSO(3毫升)與甲苯(3毫升)中，並添加EDCI(0.346克)，接著是二氯醋酸(0.074毫升)，且將所形成之混合物於室溫下攪拌4小時期間。使反應物於EtOAc與5%亞硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥，及濃縮。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用丙酮：己烷(30：70)作為溶離劑，而得酮基-醯胺(198；MH+=792.2；55毫克)。
酚199自苄基醚198之製備：
將10%Pd-C(25毫克)，接著是甲酸(0.125毫升)，添加至苄基醚(198；50毫克)在乙醇(4毫升)中之溶液內，並使所形成之黑色懸浮液回流1小時期間。於冷卻後，經過矽藻土墊過濾反應物，並以甲醇洗滌固體。使合併之濾液於減壓下濃縮，而得所要之酚(199；MH+=702.2；23毫克)。
式210化合物之替代製備：
步驟1：
將二甲基甲醯胺(20毫升；無水；Aldrich)添加至氫化鈉(0.56克；Aldrich)中，並將第三-丁基硫醇添加至此懸浮液中，同時於氮大氣下，在冰浴中冷卻。一旦添加完成後，即添加甲烷磺酸酯(108B；按上述製自2.00克醇；108A)，並將所形成之混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與水之間作分液處理，並分離有機相，脫水乾燥(MgSO4 )。於矽膠上管柱層析，使用EtOAc-己烷(2：98)，提供甲酯-硫化物(210A；1.75克)。
將EtOAc添加至水相中，並添加10% HCl水溶液，直到水層pH=1為止。將有機層分離，以水洗滌，脫水乾燥，及在減壓下濃縮，獲得硫化物-羧酸(210B；0.747克)，為白色固體。
步驟2：
於甲醇(75毫升)中之硫化物(210B；2.287克)內，添加生氧劑(18.00克；Aldrich)溶液，並將所形成之白色懸浮液於室溫下攪拌過夜。於減壓下移除揮發性物質，並使白色固體在EtOAc與水之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮，提供碸(210C；2.52克；含有一些溶劑)。
步驟3：
將三乙胺(0.173毫升)，接著是DPPA(0.268毫升)，添加至羧酸(210E；0.325克)在甲苯(3毫升)中之溶液內，並將所形成之混合物加熱至110℃(油浴)，歷經1小時期間。於冷卻後，使反應混合物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮。使殘留物溶於二氯甲烷(1毫升)中，並添加至鹽酸鹽(185F；0.300克)與三乙胺(0.044毫升)在二氯甲烷(3毫升)中之混合物內，且將所形成之反應混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥，及濃縮，而產生粗產物，將其使用於下一步驟，無需純化。
步驟4：
使得自前一步驟之殘留物(210D)溶於二氯甲烷(5毫升)中，並添加Dess-Martin過碘烷(0.527克)，且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。使反應物於EtOAc與5%亞硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，並於減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(70：30)作為溶離劑，而得所要之酮基-醯胺(210；0.310克)。
式284化合物之製備：
步驟1與2：
步驟1：
使用甲苯(10毫升)中之羧酸(210C；2.52克)、DPPA(2.07毫升)、三乙胺(1.34毫升)，以及上文提出之程序，形成粗製異氰酸酯。
步驟2：
使中間物異氰酸酯溶於二氯甲烷(2毫升)中，並添加至鹽酸鹽284A(製自20.04，使用關於20.06成為20.07所述之轉變；1.66克)與三乙胺(3.4毫升)之混合物中，且將混合物在室溫下攪拌過夜。水溶液處理，並使殘留物於矽膠上純化，使用EtOAc-己烷(3：97)，獲得所要之脲(284B)。
步驟3：
使甲酯(284B)溶於二氧陸圜(90毫升)與水(30毫升)之混合物中，並添加氫氧化鋰：單水合物(0.402克；2當量)，且將反應物在室溫下攪拌3小時。使反應混合物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮，而產生羧酸(284C；2.65克)。
步驟4：
將BOP試劑(2.54克)，接著是三乙胺(2.4毫升)，添加至羧酸(284C；2.65克)及鹽酸鹽(12.03；0.933克)在二氯甲烷(20毫升)中之溶液內，並於室溫下攪拌過夜，使反應物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，及濃縮。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用二氯甲烷中之2-10%MeOH作為溶離劑，而得所要之醯胺(284D；2.92克)。
步驟5：
於羧醯胺(284D；2.92克)在甲醇(30毫升)中之溶液內，添加DMF-DMA(1.12毫升)，並將所形成之混合物於室溫下攪拌3小時，然後回流1.5小時，直到T.L.C.顯示無起始物質留置。於冷卻後，使反應物在乙醚與1N HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮。使殘留物矽膠管柱層析，獲得甲酯(284E)，將其按下文步驟6所示處理。
步驟6：
使甲酯(284E)溶於二氧陸圜(30毫升)與水(10毫升)之混合物中，並添加氫氧化鋰：單水合物(0.354克)，且將所形成之混合物攪拌3小時。使反應物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮，提供羧酸(284F；2.80克)。
步驟7與8：
步驟7：
將烯丙基胺(0.045毫升)、BOP試劑(0.266克)及三乙胺(0.25毫升)添加至羥基-酸(284F；0.348克)在二氯甲烷(5毫升)中之溶液混合物內，並將所形成之混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，及濃縮，提供殘留物，將其使用於下文步驟8，無需純化。
步驟8：
使殘留物溶於二氯甲烷(5毫升)中，並添加Dess-Martin過碘烷(0.424克)，且將反應混合物在室溫下攪拌3小時。使反應物於EtOAc與5%亞硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥，及濃縮。粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，而產生所要之酮基-醯胺(284；0.296克)。MH+,732.2.
實例331之製備.式331化合物之式331D與331E中間物之製備：
步驟1.式331B與331C化合物之製備：
使N-苄基-4-甲基丁亞胺(按以下所述製成：Synthesis,1985,679)與四氫噻吩1,1-二氧化物以實例336中所述之方式反應，惟在-78℃下，而得化合物331A，使其以實例336中所述之方式氫解，惟在1大氣壓力下。使粗產物於矽膠上層析，以EtOAc至1：1丙酮-EtOAc之梯度液溶離，獲得第一種外消旋非對映異構物：H1 -NMR(CDCl3 )δ3.2(m,1H),3.1-2.9(m,3H),2.3-2.1(m,2H),2.1-1.9(m,1H),1.9-1.7(m,2H),1.02(d,3H),0.85(d,3H).進一步溶離提供另一種外消旋非對映異構物：H1 -NMR(CDCl3 )δ3.2(m,1H),3.2-2.9(m,4H),2.3-2.1(m,3H),2.1-2.0(m,1H),1.78(六重峰,1H),0.96(m,6H).
步驟2.式331D與331E化合物之製備
以實例336中所述之方式，使化合物331B與331C個別與光氣反應，而得兩種非對映異構異氰酸酯：一種得自較高Rf 胺：H1 -NMR(CDCl3 )δ3.79(dd,J1 =9.9Hz,J2 =3.0Hz,1H),3.25(m,1H),3.1-3.0(m,2H),2.25(m,2H),2.2-2.0(m,1H),2.0-1.7(m,2H),1.09(d,J=6.9Hz,3H),0.93(d,J=6.9Hz,3H).另一種得自較低Rf 胺：H1 NMR(CDCl3 )δ3.92(dd,J1 =6.6Hz,J2 =4.8Hz,1H),3.3-2.9(m,3H),2.4(m,1H),2.3(m,1H),2.2-2.0(m,3H),1.03(t,Δν=6.3,6H).
實例336之製備.式336化合物之製備
步驟1.式336A化合物之製備
將20毫升2N LDA在己烷-THF中之溶液添加至60毫升THF中，並使溶液冷卻至-30℃。然後，於-30℃與-10℃之間，慢慢添加4.80克四氫噻吩1,1-二氧化物(Aldrich化學公司)，並於-10℃下再攪拌10分鐘。於-10℃下，立即添加7.5克N-苄基環己基亞胺(按以下所述製成：Synthesis,1998,1609)。於環境溫度下0.5小時後，以飽和NaHCO3 水溶液使混合物淬滅，並以CH2 Cl2 萃取。使萃液以無水Mg2 SO4 脫水乾燥，過濾，並蒸發濾液。使殘留物於矽膠上層析，以EtOAc-己烷(3：7)溶離，而得1.3克化合物336A：H1 -NMR(CDCl3 )：δ7.5-7.2(m,5H),3.76(ABq,Δν=230Hz,J=12,2H),3.41(m,1H),3.13(m,1H),2.94(m,1H),2.4-1.3(m,14H).
步驟2.式336B化合物之製備
使1.3克化合物336A、30毫升EtOH、1.2毫升4N HCl/二氧陸圜溶液及0.35克10% Pd-C之溶液，於3大氣壓下氫化1.5小時。過濾混合物，並蒸發濾液，將殘留物以2N NaOH處理，並以CH2 Cl2 萃取，使萃液乾燥並蒸發，留下0.51克化合物336B，其係於靜置時固化：H1 -NMR(CDCl3 )δ3.2-2.9(m,3H),2.4-1.8(m,6H),1.7-1.2(m,8H).
步驟3.式336C化合物之製備
於0.75克光氣在30毫升甲苯中之溶液內，於0℃下，慢慢添加0.5克化合物336B與0.80毫升二異丙基乙胺在10毫升CH2 Cl2 中之溶液。將混合物於室溫下攪拌5小時，濃縮至15毫升，過濾，然後以新甲苯稀釋至18毫升，產生0.12M化合物336C溶液，將其用於後續反應。
步驟4.式336化合物之製備
以製備實例108中所述之方式，使化合物336C與化合物20.10反應，產生化合物336，為非對映異構物之混合物。H1 -NMR(DMSO-d6 )δ8.40(m),8.33(m),8.00(d),7.75(s),6.25(m),6.10(s),6.01(s),4.18(m),3.92(m),3.83(m),3.78(m),3.13(m),2.90(m)2.47(m),2.1-0.8(m；MeA ：1.01；MeB ：0.82；But ：0.91),0.40(m),0.19(m).
實例336C.化合物336C之替代合成
步驟1.式336E化合物之製備
以前述實例中所述之方式，使2-氯基四氫噻吩(按以下所述製成：Chem. Pharm. Bull.,1986,34(9),3644)與α-鋰環己烷羧酸反應，而得硫化物酯化合物336D，39%產率。以前述實例中所述之方式，以使化合物336D氧化，而得碸酯化合物336E：H1 NMR(CDCl3 )δ3.73(s,3H)3.3-3.0(m,2H),3.0-2.9(m,1H),2.6-2.4(m,1H),2.4-1.3(m,13H).
步驟2.式336C化合物之製備
於100℃下，以前述實例中所述之方式，使化合物336E以水-二氧陸圜中之LiOH水解，而得碸羧酸化合物336F：H1 NMR(CDCl3 )δ3.4-3.2(m,1H),3.2-3.1(m,1H),3.1-2.9(m,1H),2.3-2.1(m,3H),2.1-1.8(m,3H),1.8-1.3(m,7H)。以前述實例中所述之方式，使化合物336F與疊氮化二苯基磷醯反應，而得化合物336C，為無色固體：H1 NMR(CDCl3 )δ3.2(m,1H),3.1-2.9(m,2H),2.45(d,1H),2.4-1.9(m,4H),1.85-1.5(m,7H),1.5-1.2(m,2H).
化合物349之合成：
於乙酯(349A；10克；0.052莫耳)在乙醚(50毫升)中之溶液內，在-78℃下(浴液溫度)，添加KHMDS(0.5M，在甲苯中；156.087毫升；1.5當量)。將所形成之溶液攪拌30分鐘，然後添加苄基氯甲基醚(11.89毫升；密度1.13；1.65當量)。將反應混合物於-78℃至室溫下攪拌24小時。藉由添加飽和NH4 Cl水溶液使反應停止。接著，將其以醋酸乙酯稀釋，並將合併之有機相以鹽水洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，及在真空中蒸發至乾涸，提供淡褐色油(24.2克)。使其在矽膠上層析(300克)。使管柱以正-己烷中之1%-4%醋酸乙酯溶離，在一些溶離份中提供純349B(6.54克)。
將苄基醚(239B；2.8316克；0.0091莫耳)在CHCl3 (49.5毫升)中之溶液以甲烷磺酸(22.65毫升)處理，並將反應混合物於室溫下攪拌~70分鐘。將冰添加至反應混合物中，並將其以醋酸乙酯稀釋。將有機相以飽和NaHCO3 洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，及在真空中蒸發至乾涸，提供帶黃色油(2.86克)。使其在SiO2 (65克)上層析。使管柱以正-己烷中之15%-25%醋酸乙酯溶離，在一些溶離份中提供純349C(1.5913克)。
使醇(349C；1.14克；0.0051莫耳)在二氯甲烷(6.4毫升)中之經攪拌溶液，在冰浴中冷卻，並以Et3 N(0.7857毫升；密度0.726；1.1當量)與氯化甲烷磺醯(0.4168毫升；密度1.48；1.05當量)處理。~2小時後，將反應混合物以二氯甲烷稀釋，並以6NHCl，接著以飽和NaHCO3 洗滌。使有機相以Na2 SO4 脫水乾燥，並在真空中蒸發至乾涸，提供甲烷磺酸酯349D(1.5447克)，為淡黃色油。
將NaH(0.4114克；在礦油中之60%分散液；2當量)在無水DMF中之經攪拌懸浮液，以第三-丁基硫醇(1.16毫升；密度0.8；2當量)處理，並以冰浴冷卻。將反應混合物攪拌30分鐘，然後添加無水DMF(8+2毫升)中之甲烷磺酸鹽(349D；1.5447克；1當量)。移除冰浴，並將反應混合物於室溫下攪拌過夜。以6N HCl使反應混合物酸化，並以醋酸乙酯萃取。使醋酸乙酯萃液以Na2 SO4 脫水乾燥，並於真空中蒸發至乾涸，提供粗製349D(2.87克)，使其在SiO2 (60克)上層析。使管柱以3%醋酸乙酯溶離，在一些溶離份中提供純349E(1.38克)，為無色油。
將乙酯(349E；1.38克；0.00468莫耳)在乙醇(16毫升)與水(4.13毫升)中之溶液，以KOH顆粒(2.63克；10當量)處理。使所形成之溶液回流7小時，然後使其冷卻至室溫過夜。於真空中蒸發乙醇，並使殘留物在CH2 Cl2 /水之間作分液處理，以6N HCl酸化至pH1。分離有機相，並將水相以CH2 Cl2 萃取三次。使合併之有機相以Na2 SO4 脫水乾燥，並在真空中蒸發至乾涸，提供349F(1.19克)，為灰白色固體，熔點93-95℃。
將已溶於水(31毫升)中之生氧劑(8.24克；3當量)，在0℃下(浴液溫度)，添加至硫化物(349F；1.19克；1當量)在甲醇(31毫升)中之經攪拌溶液內。將反應物於0℃至室溫下攪拌度過週末。於真空中蒸發溶劑，並使殘留物在CH2 Cl2 /水之間作分液處理。分離有機層，並將水層以CH2 C12 萃取兩次。使合併之有機相以Na2 SO4 脫水乾燥，並於真空中蒸發至乾涸，提供349G(1.29克)，為結晶性固體，熔點212℃。
於酯(1.03；4.56克；0.0119莫耳)在二氧陸圜(18.23毫升)中之已冷卻(冰浴)溶液內，添加1.0N LiOH(18.23毫升)，並攪拌。將反應混合物攪拌2小時。TLC顯示一些起始物質仍然殘留，因此添加2+1毫升1.0N LiOH，並攪拌過夜。藉TLC得知反應完成。添加6NHCl，以使反應混合物酸化至pH1，並添加醋酸乙酯(150毫升)。於振盪後，分離醋酸乙酯相，並以醋酸乙酯萃取水相。將合併之醋酸乙酯相以鹽水洗滌一次，脫水乾燥(Na2SO4)，並在真空中蒸發至乾涸，提供1.17，為非晶質固體(4.7805克；包藏溶劑)。
於酸1.17(0.7079克；0.00192莫耳)與胺鹽(12.04；0.5231克；1.16當量)在CH2 Cl2 (10毫升)中之-20℃溶液內，添加HATU(0.77克；1.05當量)，接著是二異丙基乙胺(0.8913克；1.2毫升；3.59當量)。將反應混合物於-20℃下攪拌~16小時。然後，將其以EtOAc(~150毫升)稀釋，並以飽和NaHCO3 、10%檸檬酸連續洗滌，且以Na2 SO4 脫水乾燥。於真空中蒸發溶劑，提供非晶質固體，使其在SiO2 (42克)上層析。以正-己烷中之50%-60%EtOAc溶離管柱，在一些溶離份中提供純349H(0.7835克)。
將羥基醯胺349H(0.7835克；0.00142莫耳)在無水二氯甲烷(32毫升)中之溶液，以Dess-Martin試劑(1.5134克；2.5當量)處理，並攪拌及冷卻(冰浴)。移除冰浴，並將反應混合物於室溫下攪拌2.5小時。添加飽和Na2 S2 O3 (32毫升)，以分解過量氧化劑，並持續攪拌，直到混濁溶液轉變成透明兩相系統為止。然後，將反應混合物以CH2 Cl2 (~100毫升)稀釋，分離有機相，並以飽和NaHCO3 、水洗滌一次，接著脫水乾燥。於真空中蒸乾，提供349I(0.7466克)，為非晶質固體。
將胺基甲酸第三-丁酯349I(0.7466克)以4M HCl/二氧陸圜(20毫升)處理，並在加塞子之燒瓶中留置45分鐘。於真空中蒸發大部份二氧陸圜，並使殘留物以正-己烷蒸發兩次；將其餘殘留物以醚研製，留下349K(0.6341克)，為自由流動性固體。
於酸349G(0.1克；0.0003351莫耳)之甲苯溶液(7.5毫升)中，添加Et3 N(0.0467毫升；46.7微升；1當量)，接著是疊氮化二苯基磷醯(0.072；72微升；1當量)。使反應混合物回流1小時。於冷卻下降後，將其以醋酸乙酯(~50毫升)處理，將有機相以飽和NaHCO3 洗滌，及在真空中濃縮，提供349J(0.1克)。
於胺鹽酸鹽349K(0.1克；0.000207莫耳)在二氯甲烷(5毫升)中之經攪拌懸浮液內，添加二異丙基乙胺(0.135克；5當量)。1分鐘後，添加異氰酸酯349J(0.1克；0.0003385莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時，然後將其以EtOAc稀釋，並以1NHCl、飽和NaHCO3 洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，及最後在真空中蒸發至乾涸，提供非晶質固體。使其在矽膠板上接受預備之TLC，使用正-己烷中之40%丙酮作為溶離劑。將uv正吸收帶以二氯甲烷中之60%丙酮萃取，提供349(0.122克)，為非晶質固體。
化合物350之合成：
於胺鹽酸鹽20.10(0.0966克；0.000223莫耳)在二氯甲烷(5毫升)中之經攪拌懸浮液內，添加二異丙基乙胺(0.144克；5當量)。1分鐘後，添加異氰酸酯349H(0.1克；0.0003385莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌2小時。然後將其以EtOAc(~100毫升)稀釋，接著以1N HCl、飽和NaHCO3 洗滌，以Na2 SO4 脫水乾燥，及最後在真空中蒸發至乾涸，提供非晶質白色固體(0.1731克)。使其在矽膠上接受預備之TLC，使用正-己烷中之40%丙酮作為溶離劑。將uv正吸收帶以二氯甲烷中之60%丙酮萃取，提供350(0.0671克)，為非晶質固體。
實例145式145化合物之製備：
步驟1
將1-丙醇以金屬鈉(361毫克，15.7毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌1小時。於鈉完全溶解後，添加苄基硫醇(2.74毫升，23.2毫莫耳)，並將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時。添加(S)-4-異丙基-唑啶酮(Aldrich，1克，7.74毫莫耳)，並將反應混合物於回流下加熱16小時。使反應混合物於真空中濃縮，並將粗製混合物以冷水稀釋，且以醚(3x150毫升)萃取。使合併之有機層脫水乾燥，過濾，在真空中濃縮，而產生胺145b。以4M HCl使其轉化成其鹽酸鹽，並在高真空中乾燥，而產生145b.HCl(1.9克)。
步驟2
將145b.HCl(1克，4.07毫莫耳)在CH2 Cl2 (50毫升)與飽和NaHCO3 (70毫升)中之溶液，於0℃下，以光氣(15%，在甲苯中，10毫升)處理，並在0℃下攪拌3小時。將反應混合物倒入分液漏斗中，並分離有機層。將有機層以冷NaHCO3 、鹽水洗滌，並脫水乾燥(MgSO4 )。使其濃縮，並以本身使用於下一步驟。
使胺鹽酸鹽(1.04；865毫克，2.7毫莫耳)溶於CH2 Cl2 /DMF1：1中，並冷卻至0℃。將混合物以(C2 H5 )3 N(682毫克，6.75毫莫耳)與按上述製成之異氰酸酯(950毫克，4.07毫莫耳)處理，並於室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑，並使殘留物溶於EtOAc中。將有機層以HCl水溶液、NaHCO3 水溶液、鹽水洗滌。使反應混合物脫水乾燥，過濾，及在真空中濃縮。使殘留物藉層析純化(SiO2 ，EtOAc/己烷1：3)，而產生145c(880毫克)。
步驟3
將145c(500毫克，0.9毫莫耳)在1，2二氯乙烷(10毫升)中之溶液，以MCPBA(70%，500毫克)處理，並於0℃下，以醚及Na2 S2 O3 水溶液稀釋。分離有機層，並以飽和NaHCO3 水溶液及鹽水廣泛洗滌。使反應混合物脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，在真空中濃縮，並藉層析純化(SiO2，EtOAc/己烷2：3)，而產生145d(530毫克)。MS(ESI)550[(M+1)+ ,100],381(95),353(20).
步驟4
145d之轉化成145，係與284B之轉化成284D，及108D之轉化成108中所述之程序相同。MS(ESI)690[(M+1)+ ,100),381(30).
式347中間物之製備：
步驟1：
將二甲基苯甲醛縮醛(10.0毫升，67.2毫莫耳)添加至CBZ-D-丙胺酸(15.0克，67.2毫莫耳)在Et2 O(180毫升)中之冷卻溶液內，接著是BF3 .Et2 O(50.6毫升，403.2毫莫耳)，歷經15分鐘。將反應混合物於-20℃下攪拌4天，並藉由添加冰冷飽和NaHCO3 (350.0毫升)使反應淬滅。將有機層以Et2 O(500毫升)稀釋，分離，以NaHCO3 (5%水溶液)、鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使用Et2 O/己烷使粗製物再結晶，而產生347A(13.6克，65%)。
步驟2
將THF(48.0毫升)添加至經火焰乾燥之燒瓶中，並冷卻至-35℃。將KHDMS(PhMe中之0.5M溶液，42.0毫升，21毫莫耳)添加至其中，接著逐滴添加347A(6.22克，20.0莫耳)與3-溴基-2-丙烯(2.02毫升，20毫莫耳)之混合物，保持內部溫度在-30與-35℃之間。將反應混合物於-35℃下攪拌2小時，然後使其溫熱2.5小時，藉由添加冰冷飽和NaHCO3 (400.0毫升)使反應淬滅。將有機層以Et2 O(600毫升)稀釋，分離，以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於SiO2 上使用CH2 Cl2 純化，而產生347B(14.2克，90%)。
步驟3
於347B(10.7克，29.4毫莫耳)在MeOH(200毫升)中之溶液內，添加LiOH(4N，15毫升)，並在室溫下攪拌30分鐘，以H2 O(500毫升)稀釋，以EtOAc(4x 400毫升)萃取，以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於SiO2 上使用CH2 Cl2 純化，而產生347C(8.65克，88%)。
步驟4
於347C(8.56克，29.4毫莫耳)在EtOH(100毫升)中之冰冷溶液內，添加LiBH4 (960毫克，44.1毫莫耳)，並在室溫下攪拌12小時，於5℃下，將另一部份之LiBH4 (960毫克)添加至其中，及在室溫下攪拌4小時，以H2 O(100毫升)與MeOH(100毫升)稀釋，蒸發至乾涸，溶於H2 O(100毫升)中，以EtOAC(500毫升)萃取，以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於SiO2 上純化，使用CH2 Cl2 中之EtOAc(1-8%)，而產生347D(4.7克，60%)。
步驟5
將t-BuOK(1M，在THF中，3.85毫升)添加至347D(4.06克，15.4毫莫耳)在THF(20毫升)中之冷卻(-5℃)溶液內，並於該溫度下攪拌2小時。使反應混合物濃縮，再溶解於EtOAc(250毫升)與NaOH(2N，50毫升)中。將有機層以EtOAc(600毫升)稀釋，分離，以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於SiO2 上純化，使用EtOAc中之10% CH2 Cl2 ，而產生347E(1.4克)。
步驟6
使347E(1.37克，8.82毫莫耳)溶於EtOH(25毫升)中，並將Pd-C(10重量%，275.0毫克)添加至其中。將反應混合物於氫大氣下攪拌12小時，過濾，濃縮，及在SiO2 上純化，使用EtOAc中之10%CH2 Cl2 ，而產生347F(1.04克，75%)。
步驟7
使347F(2.58克，16.4毫莫耳)溶於PrOH(40毫升)中，並將NaSBu-t(10.2克，82毫莫耳)添加至其中。使反應混合物回流136小時，冷卻，蒸發，及再溶解於EtOAc中，以H2 O洗滌，並使有機層以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮。使粗製物於SiO2 上純化，使用CH2 Cl2 中之30%丙酮，而產生347G(0.6克，19%)與347F(1.1克)。
步驟8
將飽和NaHCO3 添加至347G(0.6克，3.0毫莫耳)在CH2 C12 (30毫升)中之冰冷溶液內。將反應混合物激烈攪拌10分鐘，並將COCl2 (PhMe中之1.85M溶液，4.51毫升)添加至其中，及在室溫下持續攪拌1小時。使有機層以MgSO4 脫水乾燥，過濾，及濃縮至一半體積，而產生347H，為CH2 Cl2 中之溶液。
步驟9
於347H(685毫克，3.0毫莫耳)在DMF(10.0毫升)中之已冷卻溶液(0℃)內，添加20.07(1.05克，3.34毫莫耳)，接著是DIPEA(1.45毫升，8.35毫莫耳)。將反應混合物於室溫下攪拌1.2小時，以醋酸乙酯稀釋，以3%檸檬酸、鹽水洗滌，以MgSO4脫水乾燥，過濾，濃縮，及在SiO2 上純化，使用丙酮/CH2 Cl2 (1：9)，而產生347I(1.57克)。
步驟10
於347I(1.5克，3.34毫莫耳)在CH2 Cl2 (100.0毫升)中之已冷卻溶液(0℃)內，添加m-CPBA(2.51克，10.02毫莫耳)。使反應混合物溫熱至室溫，歷經12小時，以CH2 Cl2 (300.0毫升)稀釋，以鹽水洗滌，以MgSO4 脫水乾燥，過濾，濃縮，及在SiO2 上純化，使用丙酮/CH2 Cl2 (1：9)，而產生347J(1.57克)。
步驟11
347J之轉化成347，係類似284B之轉化成284D與108D之轉化成108中所述之程序。MS(LCMS)計算值681.94，實測值(MH+ )683.2.
表3係列出一些本發明化合物，及其在藉稍後描述之檢測測定時之HCV絲胺酸蛋白酶抑制活性範圍。活性係以Ki*範圍(毫微莫耳濃度)顯示，其係為：A=<75nM；B=75-250nM；及c=>250nM。
表3A係列出根據本發明製成之其他化合物。下述實驗程序係描述按照實驗製備表3A中所示之化合物。
實例792
步驟1
於五亞甲基硫化物(10.09克)在無水苯(120毫升)中之溶液內，分次添加(歷經40分鐘期間)N-氯基琥珀醯亞胺(13.02克)，同時保持內部溫度低於9℃。將所形成之反應混合物在低於15℃下攪拌45分鐘。過濾沉澱物，並使上層清液於減壓下濃縮。將殘留物以冷己烷稀釋，過濾，及在減壓下濃縮上層清液，提供氯化物，為黃色油(11.88克)。
於無水THF(15毫升)中之二異丙基胺(12.5毫升)內，在-78℃及氮大氣下，添加n-BuLi(53毫升，己烷中之1.6M溶液)，並使所形成之混合物在此溫度下保持15分鐘期間，然後添加甲基環己烷羧酸(12.47毫升)，且使反應物於-78℃下再保持40分鐘。將無水THF中之氯化物(50毫升)添加至反應混合物中，並將燒瓶移離冷卻浴，且使其慢慢溫熱至室溫。以含有濃HCl水溶液(2.7毫升)之5% KH2 PO4 水溶液(100毫升)使反應淬滅。將有機物質萃取於Et2 O/EtOAc中，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下濃縮，而產生殘留物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之0-2%EtOAc作為溶離劑。獲得雙環(792A；8.12克)，為黃色油。
步驟2
使硫化物(792A；0.780克)在50% MeOH水溶液(8毫升)中之溶液冷卻至0℃，並添加至生氧劑(5.97克)在50% MeOH水溶液(8毫升)中之已冷卻(0℃)懸浮液內，且使反應物溫熱至室溫過夜，然後於二氯甲烷與水之間作分液處理。將水層進一步以二氯甲烷萃取，並使合併之有機相脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下濃縮。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之(25-35%)EtOAc，而得碸(792B；0.1598克)。重複此反應，使用硫化物(792A；8.12克)、生氧劑(62.06克)、甲醇(30毫升)、水(30毫升)，獲得碸(792B；4.73克)。
使外消旋混合物(792B；0.4925克)進一步藉對掌性HPLC純化，使用預備之Chiralpak AS管柱，使用己烷中之40%i-PrOH(45毫升/分鐘；於218毫微米下監測)，獲得(792B-對掌異構物A；0.247克；滯留時間37分鐘)，接著是(792B-對掌異構物B；0.249克；滯留時間63分鐘)。
步驟3與4：
步驟3
於羧酸(792C；0.172克)與其鹽酸鹽(792D)在二氯甲烷(5毫升)中之溶液內，添加BOP試劑(0.246克)，接著是三乙胺(0.232毫升)，並將所形成之反應混合物在室溫下攪拌過夜。使反應混合物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和NaHCO3 水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，而產生殘留物，將其使用於步驟4，無需純化。
步驟4
於得自步驟3之殘留物中，添加二氧陸圜中之4M HCl(10毫升)，並使溶液在室溫下靜置2小時期間。於減壓下移除揮發性物質，而產生其鹽酸鹽(792E)，使用之而無需純化。
步驟5與6
步驟5
於已溶於無水DMF(1毫升)中之甲酯(792B-對掌異構物A；0.100克)溶液內，添加乙烷硫醇化鈉(0.122克)，並使反應混合物在室溫下攪拌約72小時。使反應物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以水洗滌(X4)，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。
步驟6
使得自步驟5之殘留物溶於無水甲苯(2毫升)中，並添加DPPA(0.083毫升)與Et3 N(0.054毫升)，且將反應物在氮大氣下加熱至120℃，歷經1小時。於冷卻後，使反應物在EtOAc與飽和NaHCO3 水溶液之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，提供異氰酸酯(792F-對掌異構物A)，使用之而無需純化。
步驟7與8
步驟7
於二氯甲烷(3毫升)中之其鹽酸鹽(792E；0.050克)內，添加三乙胺(0.100毫升)，接著是甲苯(1毫升)中之異氰酸酯(792F；約0.040克)，並將反應混合物在室溫下攪拌過夜。使反應混合物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )。於減壓下移除揮發性物質，產生殘留物，將其使用於步驟8，無需純化。
步驟8
使得自步驟7之殘留物溶於二氯甲烷(3毫升)中，並添加Dess-Martin過碘烷(0.100克)，且將反應物在室溫下攪拌1小時。使反應物於EtOAc與10%硫代硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：1)作為溶離劑，獲得酮基-醯胺(792；0.0436克)，為白色固體。
實例795
使用關於製備792所述之程序，按步驟5與6中所述，使792B-對掌異構物B轉變成其相應之異氰酸酯。進一步利用792E與步驟7及8，以及衍生自792B-對掌異構物B之異氰酸酯，製成795。
實例621：
步驟1
於甲醇(20毫升)中之紫蘇酸甲酯(3克)內，添加PtO2 (0.3克)，並將所形成之懸浮液於氫大氣(氣瓶)下放置過夜。經過矽藻土墊過濾此懸浮液，並以甲醇充分洗滌固體。使濾液於減壓下濃縮，而產生環己烷(621A；2.93克)，非對映異構物之混合物，為無色油。
步驟2與3
步驟2
使羧酯類(621A；3.75克)溶於無水乙醚(50毫升)中，並在氮大氣下冷卻至-78℃。逐滴添加KHMDS(69毫升，甲苯中之0.5M溶液)，並將所形成之混合物再攪拌15分鐘，然後添加BOMCl(1.7當量)，並將反應燒瓶移離冷卻容器，且使其慢慢溫熱至室溫。添加水(約10毫升)，並使混合物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(1：20)作為溶離劑，提供中間物苄基醚(3.01克)，無色油。
步驟3
於得自步驟2之苄基醚(2克)中，添加甲醇(10毫升)，接著是10% Pd-C(1克)，並將黑色懸浮液在氫大氣(氣瓶)下放置過夜。經過矽藻土墊過濾反應物，並以甲醇充分洗滌固體。使濾液濃縮，提供所要之醇(621B；1.362克)，為無色油。
步驟4與5
步驟4
使醇(621B；0.32克)溶於二氯甲烷(5毫升)中，並添加氯化甲烷磺醯(0.166毫升)，接著是三乙胺(0.37毫升)，且將所形成之反應物攪拌0.5小時，然後於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，而產生殘留物，將其使用於步驟5，無需純化。
步驟5
使得自步驟4之殘留物溶於DMF(10毫升)中，並添加第三-丁基硫醇化鈉，且將所形成之反應混合物在室溫及氮大氣下攪拌過夜。將混合物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以水洗滌(X4)，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(3：7)作為溶離劑，獲得羧酸(621C；0.214克)。
步驟6
使用硫化物(621C；0.090克)、生氧劑(0.61克)、甲醇(2毫升)、水(2毫升)，及實例792(步驟2)中提出之程序，獲得碸(621D；0.091克)，為白色固體。如上文所述(實例792；步驟6至8)，使碸-羧酸轉化成化合物621。
實例749：
步驟1
程序：於CCl4 中之異丁醛(59克，0.69莫耳)內，在50℃下，逐滴添加單氯化硫(27.6毫升，0.345莫耳，0.5當量)。短暫停滯(10分鐘)後，開始HCl氣體釋出。於HCl釋出停止後，將混合物於55℃下攪拌2.5小時，其TLC顯示反應幾乎完成。然後冷卻至室溫。使粗製物濃縮至乾涸。使用油狀殘留物二硫化物(749A)，而無需純化。
步驟2
於THF中之二硫化物(749A；7.5克，36毫莫耳)內，在0℃下，極慢地添加LiAlH4 (2.76克，72.7毫莫耳，2當量)。將混合物於室溫下攪拌3小時，然後逐滴添加飽和Na2 SO4 ，直到出現白灰色固體為止。於室溫下攪拌10分鐘。將其以CH2 Cl2 稀釋，以MgSO4 脫水乾燥。過濾，及濃縮至乾涸。藉HPFC以己烷中之2~20% EtOAc純化，而得醇(749B；6.81克)。產率89%。
步驟3
於醇(749B；10克，94.2毫莫耳)中，添加3,4-二氫-2H-哌喃(8.8毫升，94.2毫莫耳，1當量)與ZrO2 (2.0克，20% w/w)。將混合物於80℃下攪拌2小時。將反應物以CH2 Cl2 稀釋，並過濾。使濾液濃縮至乾涸，並藉HPFC以己烷中之2~10% EtOAc純化，獲得14.3克產物(749C)。產率80%。
步驟4
於CH2 Cl2 中之醇(108A；3.0克，17.4毫莫耳，1當量)內，在-20℃下，添加吡啶(2.4毫升，29.6毫莫耳，1.7當量)與三氟甲烷磺酐(3.8毫升，22.6毫莫耳，1.3當量)。將反應物於-20~10℃下攪拌2小時，其MS與TLC顯示反應完成。將其以EtOAc稀釋，以飽和NH4 Cl及鹽水洗滌。以MgSO4 脫水乾燥。濃縮至乾涸，而得磺酸酯(749D；5.21克)。產率98%。
步驟5
於THF中，在0℃下，添加NaH(1.02克，25.6毫莫耳，1.5當量)，然後是(749C；4.88克，25.6毫莫耳，1.5當量)。將混合物於0℃下攪拌10分鐘，然後在0℃下添加(749D；5.21克，17.1毫莫耳)。將反應物於室溫下攪拌1小時，其TLC顯示無起始物質。將其以EtOAc與水稀釋。以EtOAc萃取水層。將合併之有機層以H2 O及鹽水洗滌。以MgSO4 使有機層脫水乾燥。使其濃縮至乾涸。使其藉HPFC以己烷中之2~8%EtOAc純化，獲得(749E；5.89克)產物。產率100%。
步驟6
於CH2 Cl2 中之硫化物(749E；0.17克，0.49毫莫耳)內，在0℃下，添加NaHCO3 (0.205克，2.45毫莫耳，5當量)、MCPBA(0.304克，1.23毫莫耳，2.5當量)。將反應物於室溫下攪拌2小時，其TLC與MS顯示反應完成。以CH2 Cl2 稀釋。以飽和NaHCO3 及鹽水洗滌。以MgSO4 脫水乾燥。使其藉HPFC以己烷中之5~20% EtOAc純化，而得0.14克碸(749F)。產率76%。
可使甲酯(749F)轉化成其相應之羧酸，接著是異氰酸酯(實例108；步驟5與6)，並轉化成749(實例792；步驟7與8)。
實例811：
步驟1
於MeOH中之749F(70毫克，0.18毫莫耳)內，添加pTsOH。將反應物於室溫下攪拌過夜。MS顯示反應幾乎完成。使其濃縮至乾涸。以EtOAc稀釋。以飽和NaHCO3 、鹽水洗滌。藉HPFC以己烷中之10~40% EtOAc純化，獲得52毫克醇(811A)，產率99%。
於DMF中之NaH(88毫克，2.21毫莫耳，1.3當量)內，在0℃下，添加醇(811A；0.5克，1.7毫莫耳)與MeI(0.16毫升，2.56毫莫耳，1.5當量)。將反應物於室溫下攪拌2小時，其TLC顯示反應未完成。再一次添加1當量MeI。將反應物於室溫下攪拌過夜。將其以EtOAc稀釋。以水、鹽水洗滌。以MgSO4 脫水乾燥。使其藉HPFC以己烷中之2~10~40% EtOAc純化，而得醚(811B；0.283克)，產率54%。
可使甲酯(811B)轉化成其相應之羧酸，接著是異氰酸酯(實例108；步驟5與6)，並轉化成749(實例792；步驟7與8)。
實例853：
步驟1
於CH2 Cl2 中之醇(811A；56毫克，0.19毫莫耳，1當量)內，在-20℃下，添加吡啶(0.026毫升，0.32毫莫耳，1.7當量)與三氟甲烷磺酐(0.042毫升，0.25毫莫耳，1.3當量)。將反應物於-20~10℃下攪拌2小時，其MS與TLC顯示反應完成。將其以EtOAc稀釋，以飽和NH4 Cl及鹽水洗滌。以MgSO4 脫水乾燥。使其濃縮至乾涸，獲得75.9毫克粗產物(853A)。
步驟2
於醚中之853A(75.9毫克，0.18毫莫耳，1當量)內，在-15℃下，逐滴添加氟化四-正-丁基銨(0.23毫升，0.23毫莫耳，1.3當量)。將反應物於室溫下攪拌過夜。將其以醚稀釋，以飽和NH4 Cl及鹽水洗滌。以MgSO4 脫水乾燥。使其以己烷中之2~10%EtOAc純化，而得32毫克氟化物(853B)。產率60%。
可使甲酯(853B)轉化成其相應之羧酸，接著是異氰酸酯(實例108；步驟5與6)，並轉化成749(實例792；步驟7與8)。
實例455：
步驟1與2
步驟1與2("單鍋反應")
將Dess-Martin過碘烷(21.35克)添加至醇(455A；10.00克)在二氯甲烷(100毫升)中之溶液內，並攪拌45分鐘，然後添加磷烷(17.42克)，及攪拌過夜。使反應混合物於5%硫代硫酸鈉水溶液與EtOAc之間作分液處理，並分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下濃縮。將己烷添加至殘留物中，並將所形成之懸浮液激烈攪拌2小時，及過濾。使濾液於減壓下濃縮並藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：99)作為溶離劑，而得所要之烯烴(455B；7.33克)，為黃色油。
步驟3
將醋酸(26毫升)添加至矽烷基醚在THF(6毫升)與水(14毫升)中之溶液內，並將所形成之混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：5)作為溶離劑，獲得醇(455C；4.46克)，為無色油。
步驟4
於-78℃及氮大氣下，將DAST(1.32毫升)添加至醇(455C；2.00克)在二氯甲烷(50毫升)中之經攪拌溶液內。於添加完成後，移除冷卻浴，並將反應物在室溫下攪拌2小時，然後於EtOAc與水之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，接著藉管柱層析純化。獲得氟化物(455D；0.758克)。
步驟5
使用n-PrOH(18毫升)中之胺基甲酸苄酯(2.06克)、烯烴(455D；0.881克)、NaOH(0.537克)、剛製成之tBuOCl(1.54毫升)、n-PrOH(16毫升)中之(DHQ)2 PHAL(0.176克)、鋨酸鉀(0.065克)，及Angewandte Int.Ed.(Engl),1996,35,2813中所提出之程序，形成粗產物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1：5)作為溶離劑，而得所要之羥基醯胺(45非；0.892克)。
步驟6
將二氧陸圜中之4M HCl(25毫升)(實例Aldrich)添加至t-Bu酯(45非；0.69克)中，並將所形成之溶液於室溫下靜置2小時。於減壓下移除揮發性物質，而產生羧酸(455F；0.613克)，將其使用於後續反應中，無需純化。
步驟7
將BOP試劑(0.254克)，接著是三乙胺(0.240毫升)，添加至羧酸(455F；0.15克)與烯丙基胺(0.043毫升)在二氯甲烷(5毫升)中之混合物內，並將所形成之反應混合物於室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與10%HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物於矽膠上藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(7：3)作為溶離劑，獲得醯胺(455克；0.151克)，為白色固體。
步驟8、9及10
步驟8
於胺基甲酸苄酯(455G；0.037克)中，添加TFA(2毫升)，接著是硫化甲烷(0.5毫升)，並使所形成之溶液在室溫下靜置3小時，然後移除揮發性物質。將粗製反應產物使用於下文步驟9，無需純化。
步驟9
於得自步驟8之殘留物中，添加二氯甲烷(3毫升)、羧酸(455H；0.050克)、BOP試劑(0.047克)及最後是三乙胺(0.044毫升)，並將所形成之混合物在室溫下攪拌過夜。使反應物於EtOAc與10% HCl水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，而產生殘留物，將其使用於下文步驟10，無需純化。
步驟10
於得自步驟9之殘留物中，添加二氯甲烷(3毫升)，接著是Dess-Martin過碘烷(0.075克)，並將此懸浮液在室溫下攪拌2小時，然後於EtOAc與5%硫代硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，而得所要之酮基-醯胺(455；0.0467克)，為白色固體。
實例458：
步驟1
於醇(455C；1.66克)在二氯甲烷(20毫升)中之溶液內，添加Dess-Martin過碘烷(4.22克)，並將所形成之混合物在室溫下攪拌1小時期間，然後於EtOAc與5%硫代硫酸鈉水溶液之間作分液處理。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質，而產生醛(458A；0.775克)，使用之並純化。
步驟2
將DAST(1.11毫升)逐滴添加至醛(458A；0.755克)在二氯甲烷(50毫升)中之經攪拌溶液內，同時於氮大氣下，在冰浴中冷卻。於添加完成後，將所形成之混合物在室溫下攪拌2小時期間，然後於EtOAc與水之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥(MgSO4 )，及在減壓下移除揮發性物質。使殘留物藉矽膠管柱層析純化，而得所要之二氟化物(458B；0.758克)。使用458B與實例455(步驟5至10)中所概述之程序，製成標的458。
實例423：
步驟1
於Garner醛(423A；10.7克)在二氯甲烷(110毫升)中之溶液內，添加(乙氧羰基亞乙基)三苯基磷烷(28.75克)，將所形成之溶液在室溫下攪拌過夜。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物純化藉矽膠管柱層析，使用己烷中之4-10% EtOAc，而得所要之烯烴(423B；12.7克)，為無色油。
步驟2
於乙酯(423B；12.72克)在二氯甲烷(20毫升)中之溶液內，在-78℃及氮大氣下，添加DIBAL-H(90毫升，二氯甲烷中之1M溶液)。於添加完成時，使反應物於此溫度下再保持30分鐘，在室溫下1小時，然後添加MeOH(3毫升)與飽和酒石酸鉀鈉水溶液(3毫升)及EtOAc。分離有機相，以1M HCl水溶液、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO4 )。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之6-35%EtOAc，獲得醇(9.06克)，為無色油。
步驟3
於醇(423C；8.66克)在無水DMF(30毫升)中之溶液內，添加NaH(1.38克)，同時在冰浴中冷卻，並使所形成之混合物保持在室溫下45分鐘，然後添加溴化苄(5毫升)。於添加醚，接著是10%HCl水溶液之前，使反應物溫熱至室溫過夜。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，脫水乾燥(Na2 SO4 )。於減壓下移除揮發性物質，而產生殘留物，使其藉矽膠管柱層析純化，使用己烷中之8% EtOAc，產生苄基醚(8.10克)，為黃色油。使用類似上文關於22.03之轉化成22.01所述之程序，使423D轉變成423E。
實例397：
步驟A
使苄氧基環己胺397a(10.6克，Lancaster)與N-甲基嗎福啉(8.5毫升，d0.920)在200毫升無水二氯甲烷中之溶液冷卻至-78℃。於15分鐘內，使用添液漏斗，添加100毫升無水二氯甲烷中之Boc-酐。於添加完成後，移除冷卻浴，並將混合物再攪拌30分鐘。使反應混合物於300毫升醚與100毫升1N HCl水溶液之間作分液處理。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得產物397b(15.7克；99%)，為白色固體，使用之而無需進一步純化。
步驟B
將20%二氫氧化鈀/碳(30莫耳%；10.8克)添加至苄基醚397b(15.7克)在300毫升甲醇中之溶液內。使不均勻混合物於40psi下接受氫化作用，直到藉TLC(醋酸乙酯/己烷；2：8)不再偵測出起始物質為止。經過矽藻土過濾混合物，並使濾液於減壓下濃縮。產物397c未進行進一步純化(11.1克；99%)。
步驟C
於0℃下，將吡啶(25.0毫升)添加至環己醇397c在300毫升無水二氯甲烷中之溶液內。於15分鐘內，添加100毫升無水二氯甲烷中之氯化甲烷磺醯(8.0毫升)。反應混合物轉變成均勻黃色溶液。將反應混合物於0℃下攪拌15分鐘，然後移除冷卻浴。將反應物於室溫下攪拌約3小時。使混合物於醚(500毫升)與1N HCl水溶液(100毫升)之間作分液處理。將有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液(100毫升)、鹽水(100毫升)洗滌，以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：醋酸乙酯/(己烷-二氯甲烷1：1)；0：10至2：8)，而得產物397d(9.7克；64%)，為白色固體。
步驟D
於250毫升燒瓶中，添加甲烷磺酸酯397d(3.0克)與第三-丁基硫醇鈉鹽(3.44克)。以氮沖洗燒瓶，並添加100毫升無水DMF。使所形成之溶液脫氣(真空/氮沖洗)，並加熱至70℃。反應之流量係藉TLC監控(醋酸乙酯/己烷；2：8)。所有起始物質係在約3小時內消耗。使反應混合物溶於300毫升醋酸乙酯中，並以水(3x50毫升)及鹽水(1x50毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。產物397e未進行進一步純化(2.78克；95%)。
步驟E
將硫化物397e(10.22毫莫耳)在無水二氯甲烷(60毫升)中之溶液，以m-CPBA(5.28克；60%)處理。將均勻混合物於45℃下加熱約3小時。TLC分析(醋酸乙酯/己烷；1：9)顯示所有起始物質已經消耗。使混合物在減壓下濃縮，並使殘留物溶於20毫升醚中，且在0℃下以硫代硫酸鈉溶液處理。將混合物以醚(350毫升)稀釋，並以飽和碳酸氫鈉水溶液(5 x 30毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；3：97至2：8)，而得產物397f(2.45克；75%)，為白色固體。
步驟F
使N-Boc保護之胺397f(2.43克)溶於20毫升二氧陸圜中之4M HCl內。於室溫下攪拌混合物，直到當藉TLC分析(醋酸乙酯/己烷；2：8)測定時，所有起始物質已經消耗為止。3小時後，於減壓下移除所有揮發性物質，而得產物397g(1.90克；98%)，為白色固體。
步驟G
將胺基甲酸對-硝基苯酯397h(640毫克)在10毫升乙腈中之溶液，以胺鹽酸鹽397g(350毫克)處理。將N-甲基嗎福啉(0.37毫升，d0.920)添加至不均勻混合物中，並於室溫下攪拌反應混合物。7小時後，當藉TLC分析(丙酮/己烷；2：8)測定時反應完成。使反應混合物於減壓下濃縮。使殘留物溶於150毫升二氯甲烷中，並以1N HCl水溶液(1 x 30毫升)及飽和碳酸氫鈉水溶液(2x30毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使產物於矽膠上純化(梯度液：丙酮/己烷；1：9至4：6)，而得產物397i(625毫克；87%)，為白色固體。
步驟H
將甲酯397i(610毫克)在15毫升THF/MeOH/水(1：1：1)混合物中之溶液，以鋰羥基單水合物(121毫克)處理。將反應物於室溫下攪拌，並藉TLC監控(丙酮/己烷；3：7)。3小時後，於減壓下移除所有揮發性物質。使殘留物於30毫升1NHCl水溶液與100毫升二氯甲烷之間作分液處理。將水層以二氯甲烷(2x30毫升)逆萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得產物397j(570毫克；96%)，為白色固體。
步驟1
將酸397j(120毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(124毫克)處理。添加胺鹽酸鹽397k(63毫克)，接著添加N-甲基嗎福啉(0.10毫升，d0.920)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫，並攪拌過夜。於真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶入100毫升醋酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15毫升)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15毫升)及鹽水(15毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得所要之產物3971(150毫克；96%)，使用之而無需進一步純化。
步驟J
將3971(150毫克)在6毫升甲苯/DMSO1：1混合物中之溶液，以EDCI(430毫克)與二氯醋酸(0.09毫升，d1.563)處理。將反應混合物於室溫下攪拌約2小時。將反應混合物以二氯甲烷(100毫升)稀釋，並以飽和碳酸氫鈉水溶液(15毫升)、1N HCl水溶液(15毫升)及鹽水(15毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥過濾，並於減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；2：8至5：5)，而得產物397(94毫克；64%)，為白色固體。對C33 H56 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：666.3900,實測值666.3883.
實例398：
步驟A
將酸397j(100毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(103毫克)處理。添加胺鹽酸鹽398a(60毫克)，接著添加N-甲基嗎福啉(0.09毫升，d0.920)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫，並攪拌過夜。於真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶入100毫升醋酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15毫升)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15毫升)及鹽水(15毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得所要之產物398b(115毫克；86%)。
步驟B
將羥基醯胺398b(115毫克)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(210毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌1小時。將混合物以1M亞硫酸鈉溶液(10毫升)及飽和碳酸氫鈉水溶液(10毫升)處理，並攪拌15分鐘。以二氯甲烷(3x30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；2：8至5：5)，而得產物398(60毫克；53%)，為白色固體。對C35 H58 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：692.4057,實測值692.4081.
實例399：
步驟A
將酸397j(100毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(106毫克)處理。逐滴添加胺鹽399a(0.252毫莫耳)與N-甲基嗎福啉(0.09毫升，d 0.920)在1毫升二氯甲烷中之溶液。使反應混合物逐漸溫熱至室溫，並攪拌過夜。於真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶入100毫升醋酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15毫升)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15毫升)及鹽水(15毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得所要之產物399b(85毫克；63%)。
步驟B
將羥基醯胺399b(85毫克)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(157毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌1小時。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)及飽和碳酸氫鈉水溶液(10毫升)處理，並攪拌15分鐘。以二氯甲烷(3 x 30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；2：8至4：6)，而得產物399(50毫克；60%)，為白色固體。對C33 H55 N6 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：679.3853,實測值679.3834.
實例473：
步驟A
將順式-2,6-二甲基-1-亞甲基環己烷(3.0克，ChemSamp公司)添加至固態碳酸氫鈉(6當量，12.19克)在150毫升二氯甲烷中之經攪拌懸浮液內。使混合物冷卻至0℃，並以少量分次添加70% m-CPBA(3當量，17.4克)在150毫升二氯甲烷中之漿液。於添加完成後，移除冷卻浴，並將混合物攪拌約2小時。於0℃下，藉由小心添加飽和硫代硫酸鈉溶液，使過量m-CPBA淬滅。將混合物以飽和碳酸氫鈉溶液(100毫升)洗滌。使有機層在迴轉式蒸發器中濃縮(使用冰水浴)。使殘留物溶於醚(80毫升)與己烷(120毫升)中，並以飽和碳酸氫鈉溶液洗滌數次。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮(冰水浴)。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：醚/己烷；0：10至8：92)，而得產物473b(3.0克；90%)，為無色油。
步驟B
將環氧化物473b(3克)與氯化銨(5當量，5.72克)在80毫升甲醇中之不均勻混合物，以疊氮化鈉(5當量，7.17克)處理，並於65℃下加熱3小時。TLC分析顯示留下一些起始物質，並添加更多氯化銨(1.5當量，1.71克)與疊氮化鈉(1.5當量，2.15克)。將混合物加熱(65℃)過夜。將反應混合物以30毫升水稀釋，並以醚(3 x 100毫升)萃取。使合併之有機萃液以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：醚/己烷；0：10至2：8)，而得其相應之非對映異構產物473b(2.73克；71%)，為無色油。
步驟C
將疊氮醇473b(1.73克)在50毫升乙腈中之溶液，以三苯膦(1.1當量，2.69克)處理，並回流1小時。使反應混合物於減壓下濃縮，並使殘留物在矽膠上層析(梯度液；醚/己烷；5：5至9：1)，而得所要之氮丙啶產物473c(2.0克；98%)。
步驟D
使氮丙啶473c(大約1.5克)在無水二氯甲烷(50毫升)中之溶液冷卻至0℃，並以50毫升無水二氯甲烷中之二碳酸二-第三-丁酯(1.3當量，3.0克)處理。逐滴添加N-甲基嗎福啉(2.5當量，2.9毫升，d0.920)，並將混合物攪拌過夜(溫度：0至25℃)。將混合物以醚(300毫升)稀釋，並以1M HCl水溶液(100毫升)、飽和碳酸氫鈉水溶液(80毫升)及鹽水(80毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：醚/己烷；0：10至1：9)，而得產物473d與473e，為透明油(970毫克)。
步驟E
於20毫升小玻瓶中，添加N-Boc-氮丙啶473e(469毫克)在20毫升無水DMF與第三-丁基硫醇化鈉(2當量，438毫克)中之溶液。使反應物於130℃下，在微波爐中進行30分鐘。將反應混合物以100毫升醚稀釋，並以水(3 x 30毫升)及鹽水(20毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：己烷至醚/己烷4：96)，而得產物473e(140毫克)，為白色固體與未反應之起始物質(120毫克)。
步驟F
使N-Boc保護之胺473f(140毫克)溶於10毫升二氧陸圜中之4M HCl溶液內。將所形成之溶液於室溫下攪拌30分鐘，直到當藉TLC分析(醚/己烷；5：95)測定時，所有起始物質已經消耗為止。於減壓下移除所有揮發性物質，並將殘留物在高真空下放置3小時，而得產物473g(112毫克；98%)，為白色固體。
步驟G
將胺基甲酸對-硝基苯酯473h(1.05當量，212毫克)在3毫升乙腈中之溶液以2毫升乙腈中之胺鹽酸鹽473g(110毫克)處理。添加N-甲基嗎福啉(2.5當量，0.11毫升，d0.920)，並將所形成之黃色溶液於室溫下攪拌8小時。使反應混合物在減壓下濃縮，並使殘留物溶於100毫升二氯甲烷中，且以1N HCl水溶液(1 x 20毫升)及飽和碳酸氫鈉水溶液(2 x 20毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使產物於矽膠上純化(梯度液：己烷至丙酮/己烷，2：8)，而得產物473i(150毫克；63%)。
步驟H
將硫化物473i(150毫克)在無水二氯甲烷(15毫升)中之溶液，以60%m-CPBA(3當量，134毫克)處理。將均勻混合物於45℃下加熱約1.5小時。藉由添加硫代硫酸鈉溶液(20毫升)使過量m-CPBA淬滅，並持續攪拌10分鐘。添加飽和碳酸氫鈉溶液(20毫升)，並使產物溶入醋酸乙酯(100毫升)中。濃縮有機層，並使殘留物溶於醋酸乙酯(80毫升)中。將有機層以飽和碳酸氫鈉溶液(3x10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：醋酸乙酯/己烷；1：3至5：5)，而得產物473j(120毫克；76%)，為無色油。
步驟I
使甲酯473j(110毫克)在10毫升THF/水/MeOH1：1：1混合物中之溶液冷卻至0℃，並以氫氧化鋰單水合物(2.5當量，19毫克)處理。30分鐘後移除冷卻浴，並將混合物於室溫下再攪拌2小時，直到當藉TLC分析(醋酸乙酯/己烷；3：7)測定時，所有起始物質已經消耗為止。以20毫升1M HCl水溶液(混合物之pH值=1)處理反應混合物，並於減壓下移除有機溶劑。將含水殘留物以二氯甲烷(3x50毫升)萃取。使合併之有機萃液以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮，而得產物473k(105毫克；98%)，為透明油。
步驟J
將酸473k(50毫克)在2毫升無水二氯甲烷與1毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，44毫克)處理。添加胺鹽(1.3當量，25毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.036毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(20毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物473m(64毫克)，無需進一步純化。
步驟K
將羥基醯胺473m(0.083毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，70毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(20毫升)，並再持續攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3 x 30毫升)萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；1：9至4：6)，而得產物473(40毫克；62%，歷經兩個步驟)，為白色固體。對C41 H68 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：774.4839,實測值774.4834.
實例474：
步驟A
將酸473k(50毫克)在2毫升無水二氯甲烷與1毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，44毫克)處理。添加胺鹽474a(1.3當量，25毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.036毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(20毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物474b(65毫克)，無需進一步純化。
步驟B
將羥基醯胺474b(0.083毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，70毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(20毫升)，並再持續攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3x30毫升)萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；1：9至4：6)，而得產物474(40毫克；62%，歷經兩個步驟)，為白色固體。對C41 H70 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：776.4995，實測值776.5005.
實例696：
步驟A
使酸696a(3.0克)在140毫升無水DMF中之溶液冷卻至0℃，並以碳酸銫(1.1當量，5.04克)處理，接著添加溴化苄(1.2當量，2.00毫升，d 1.438)。將反應混合物攪拌24小時(溫度：0至25℃)。將混合物以醋酸乙酯(350毫升)稀釋，並以水(3 x 50毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：己烷至醋酸乙酯/己烷25：75)，而得產物696b(3.82克；90%)，為透明油。
步驟B
於氬大氣下，將N-甲基嗎福啉-N-氧化物(1.3當量，1.9克)在第三-丁醇(20毫升)、THF(7毫升)及水(3.5毫升)中之溶液，以四氧化鋨(0.1當量，318毫克)處理。將所形成之淡黃色溶液攪拌5分鐘，接著逐滴添加30毫升THF中之苄基酯696b(3.8克)。將反應混合物於室溫下攪拌20小時。經過短路徑矽膠過濾混合物，並以醋酸乙酯(500毫升)洗滌固體。將有機層以鹽水(80毫升)洗滌，以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；2：8至55：45)，而得產物696c(3.5克；83%)，為糊劑。
步驟C
使N-Boc胺696c(3.5克)溶於60毫升二氧陸圜中之4MHCl內。將所形成之溶液於室溫下攪拌約2小時。於減壓下移除所有揮發性物質，獲得產物696d(2.8克；98%)，使用之而無需進一步純化。
步驟D
將N-Boc-第三-丁基甘胺酸(2.15克)在100毫升無水二氯甲烷與20毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，4.96克)處理。添加30毫升DMF中之胺鹽696d(1.1當量，2.8克)，接著添加N-甲基嗎福啉(4當量，4.08毫升，d0.920)。將反應混合物於0℃下攪拌過夜。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於300毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(1x100毫升)、1M HCl水溶液(100毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(100毫升)及鹽水(100毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(醋酸乙酯/己烷；6：4)，而得產物696e(3.29克；79%)，為無色油。
步驟E
使N-Boc胺696e(1.24克)溶於30毫升二氧陸圜中之4M HCl內。將所形成之溶液於室溫下攪拌約2小時。於減壓下移除所有揮發性物質，而得產物696f(1.06克；98%)，為白色固體。
步驟F
將N-甲基嗎福啉(1.3當量，0.39毫升，d0.920)添加至胺-二醇696f(1.06克)在50毫升二氯甲烷中之不均勻混合物內。5分鐘後，添加異氰酸酯溶液(1.05當量，9.63毫升，甲苯中之0.3M溶液)。亦添加DMF(5毫升)，並於室溫下攪拌漿液。混合物逐漸轉化(於4小時內)成透明均勻溶液。將混合物以醋酸乙酯(300毫升)稀釋，並以1M HCl水溶液洗滌。以100毫升醋酸乙酯逆萃取水層。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；3：7至6：4)，獲得產物696g(1.6克；98%)，為無色油。
步驟G
將二醇696g(1.5克)溶液以2,2-二甲氧基丙烷(2當量，0.6毫升，d 0.847)與催化量之吡錠對-甲苯磺酸(0.1當量，62毫克)處理。將混合物於50℃下攪拌過夜。將混合物以200毫升醋酸乙酯稀釋，並以50毫升飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。以醋酸乙酯(100毫升)萃取水層。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；5：95至35：65)，而得產物696h(1.33克；83%)，為白色固體。
步驟H
使苄基酯696h(1.33克)溶於70毫升醋酸乙酯中，並以20%二氫氧化鈀/碳(0.1莫耳%；144毫克)處理。使不均勻混合物於50psi下氫化3小時。將混合物以200毫升二氯甲烷稀釋，並經過短路徑矽藻土過濾。於減壓下濃縮濾液，而得產物696i(1.14克；98%)，為白色固體。
步驟I
將酸696i(100毫克)在3毫升無水二氯甲烷與3毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，93毫克)處理。添加胺鹽696j(1.2當量，47毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.08毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物696k，無需進一步純化。
步驟J
將羥基醯胺696k(0.178毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，150毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3x30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；15：85至1：1)，而得產物696(120毫克；93%)，為白色固體。對C35 H60 N5 O9 S[M+H]+ HRMS之計算值：726.4112,實測值726,4128.
實例697：
步驟A
將酸696i(100毫克)在3毫升無水二氯甲烷與3毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，93毫克)處理。添加胺鹽697a(1.2當量，50毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.08毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物697b，無需進一步純化。
步驟B
將羥基醯胺697b(0.178毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，150毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3x30毫升)萃取。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；15：85至1：1)，而得產物697(120毫克；91%)，為白色固體。對C36 H60 N5 O9 S[M+H]+ HRMS之計算值：738.4112，實測值738.4092.
實例837：
步驟A
於0℃下，將環硫丙烷(10克，9.727毫升，d1.028，Aldrich)在200毫升二氯甲烷中之溶液，以間-氯基過氧苯甲酸(2.3當量，76克，70%m-CPBA)在二氯甲烷(400毫升)中之漿液處理。移除冷卻浴，並將混合物攪拌3小時。藉過濾移除固體，並於減壓下濃縮濾液。使殘留物溶於醋酸乙酯(400毫升)中，並以飽和碳酸氫鈉溶液廣泛地洗滌溶液。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物藉管柱層析純化，而得產物837b，為白色固體。
步驟B
於氮大氣下，將四乙氧化鈦(2當量，24.2毫升，d1.088)添加至環己酮(1.2當量，7.18毫升，d0.947)在150毫升無水THF中之溶液內。5分鐘後，逐滴添加50毫升THF中之第三-丁烷亞磺醯基醯胺(7.0克，Aldrich)。將混合物加熱至60℃過夜。將反應混合物倒入等體積飽和碳酸氫鈉溶液中，並迅速攪拌，及立即經過濾紙whatman#1過濾。以醋酸乙酯(100毫升)洗滌濾餅。分離濾液中之液層，並以醋酸乙酯(100毫升)萃取水層。將合併之有機層以飽和碳酸氫鈉溶液(100毫升)洗滌，以硫酸鎂脫水乾燥過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(醋酸乙酯/己烷；3：7)，而得產物837d(7.5克；55%)，為無色油。使產物保持在惰性大氣及-20℃下。
步驟C
於乾燥大氣下，將正-丁基鋰(1.1當量，7.6毫升，環己烷中之1.6M溶液)逐滴添加至碸837b(1.15當量，1.35克)在100毫升無水THF中之已冷卻(-78℃)溶液內。將混合物於該溫度下攪拌1小時，然後經由套管，轉移至亞磺醯基亞胺837d(2.23克)在100毫升無水THF中之已預先冷卻(-78℃)溶液內。將所形成之混合物於-78℃下攪拌，並藉TLC監控(丙酮/己烷；3：7)。所有亞磺醯基亞胺837d起始物質係於2小時內消耗。藉由添加飽和氯化銨水溶液(5毫升)使反應淬滅。使混合物達到室溫，並於醋酸乙酯(200毫升)與飽和碳酸氫鈉水溶液(80毫升)之間作分液處理。將水層以醋酸乙酯(2 x 60毫升)逆萃取。將合併之有機層以鹽水洗滌，以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：二氯甲烷至丙酮/二氯甲烷；3：7)，而得其相應之非對映異構產物837e與837f，為1.4：1混合物(1.64克；50%合併產率)。
步驟D
使亞磺醯基醯胺837e(910毫克)溶於50毫升甲醇中，並以20毫升二氧陸圜中之4M HCl溶液處理。將混合物攪拌約1小時，直到當藉TLC(丙酮/己烷；1：9)測定時，所有起始物質已經消耗為止。使混合物濃縮至乾涸。添加二氯甲烷(10毫升)，以製造均勻溶液，然後添加醚(80毫升)，並形成白色沉澱物。藉過濾回收胺鹽酸鹽產物837g(700毫克；98%)，為白色固體。
步驟E
將胺鹽酸鹽837g(2.960毫莫耳)在40毫升二氯甲烷中之溶液，以20毫升飽和碳酸氫鈉溶液處理，並於0℃下激烈攪拌10分鐘。停止攪拌，並分離液層。經過針頭，將光氣(10毫升，甲苯中之20%溶液)以一份添加至有機層(下層)中。在添加10分鐘後，立即將混合物於0℃下激烈攪拌，及進一步在室溫下攪拌3小時。將混合物以100毫升二氯甲烷稀釋，並分離液層。將有機層以50毫升冷飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，並以硫酸鎂脫水乾燥。過濾有機層，並以50毫升甲苯稀釋。濃縮所形成之溶液，並保持為甲苯中之0.118M溶液。
步驟F
將胺鹽酸鹽837i(1.5毫莫耳)在30毫升二氯甲烷中之溶液，以5毫升飽和碳酸氫鈉水溶液處理。將混合物攪拌10分鐘，接著添加異氰酸酯837h(1.03當量，13.1毫升，甲苯中之0.118M溶液)。將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物以二氯甲烷(200毫升)稀釋，並以飽和碳酸氫鈉溶液(40毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；1：9至1：1)，提供產物837j(740毫克；84%)，為白色固體。
步驟G
使苄基酯837j(740毫克)溶於20毫升甲醇中，並以20%二氫氧化鈀/碳(0.1莫耳%；90毫克)處理。使不均勻混合物於50psi下氫化2小時。TLC(丙酮/己烷；35：65)顯示所有起始物質已經消耗。將混合物以100毫升二氯甲烷稀釋，並經過短路徑矽藻土過濾。於減壓下濃縮濾液，而得產物837k(620毫克；98%)，為白色固體。
步驟H
將酸837k(69毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，74毫克)處理。添加胺鹽8371(1.2當量，39毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.06毫升，d 0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物837m，無需進一步純化。
步驟1
將羥基醯胺837m(0.138毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，117毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3 x 30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；2：8至1：1)，而得產物837(66毫克；70%)，為白色固體。對C34 H56 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：678.3900,實測值678.3883.
實例838：
步驟A
將酸837k(69毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，74毫克)處理。添加胺鹽838a(1.2當量，39毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.06毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物838b，無需進一步純化。
步驟B
將羥基醯胺838b(0.138毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，117毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3 x 30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；1：9至4：6)，而得產物838(71毫克；76%)，為白色固體。對C34 H56 N5 O7 S[M+H]+ HRMS之計算值：678.3900，實測值678.3883.
實例869：
步驟A
將酸837k(69毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，74毫克)處理。添加胺鹽869a(1.2當量，37毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.06毫升，d 0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物869b，無需進一步純化。
步驟B
將羥基醯胺869b(0.138毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液，以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，117毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3 x 30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；18：85至45：55)，而得產物869(69毫克；75%)，為白色固體。
製備實例868：
步驟A
將酸837k(69毫克)在2毫升無水二氯甲烷與2毫升無水DMF中之溶液於0℃下攪拌，並以HATU(1.4當量，74毫克)處理。添加胺鹽868a(1.2當量，39毫克)，接著是N-甲基嗎福啉(4當量，0.06毫升，d0.920)。將反應混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發性物質，並使殘留物溶於50毫升醋酸乙酯中。將有機層以水(10毫升)、1M HCl水溶液(10毫升)、飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產物868b，無需進一步純化。
步驟B
將羥基醯胺868b(0.138毫莫耳)在10毫升無水二氯甲烷中之溶液以Dess-Martin過碘烷(2.0當量，117毫克)處理。將反應混合物於室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10毫升)處理，並攪拌5分鐘。亦添加飽和碳酸氫鈉溶液(10毫升)，並再持續攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3x30毫升)萃取混合物。使合併之有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過濾，及濃縮。使殘留物於矽膠上層析(梯度液：丙酮/己烷；1：9至4：6)，而得產物868(73毫克；78%)，為白色固體。
實例833：
步驟1
於二乙碸酸833a(2.06克，8.79毫莫耳)在無水THF中之溶液內，在-78℃及N2 下，添加LiHMDS溶液(19.3毫升，1.0M，在THF中)。將混合物於-78℃下攪拌30分鐘，然後使其伴隨著冷丙酮浴溫熱至0℃。接著使其再冷卻至-78℃，並於其中添加2-溴基乙基醚(1.8毫升，13.2毫莫耳)。於-78℃下攪拌30分鐘後，使混合物溫熱至室溫，並攪拌2小時。使其再一次再冷卻至-78℃，並於其中添加LiHMDS溶液(10.6毫升，10.6毫莫耳)。於-78℃下攪拌30分鐘後，使混合物溫熱至室溫，並攪拌3小時，然後以1N HCl水溶液使反應淬滅，直到pH值約1-2為止。將溶液以CH2 Cl2 (2x450毫升)萃取。使合併之有機溶液脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，及濃縮。使粗產物溶於1N NaOH溶液(300毫升)中，並以EtOAc(100毫升)萃取。分離液層後，以1NNaOH(2x150毫升)洗滌有機溶液。使用6NHCl溶液，使合併之水溶液酸化至pH~1。將其以EtOAc(3x300毫升)萃取。將有機溶液合併，脫水乾燥(MgSO4 )，過濾，及濃縮，而得2.3克產物(833b；7.56毫莫耳，89%)。
步驟2
於甲苯中之酸833b(2.30克，7.56毫莫耳)內，在室溫及N2 下，添加三乙胺(1.15毫升，8.32毫莫耳)與疊氮化二苯基磷醯(1.79毫升，8.32毫莫耳)。將所形成之混合物於室溫下攪拌30分鐘，並加熱至回流，歷經5.5小時。使其冷卻至室溫後，添加更多甲苯，以構成異氰酸酯833c之0.19M溶液，使用之而無需進一步純化。
使用前述程序，使833c轉變成833。
亦揭示表4與表4A中之下列化合物。表4與表4A中化合物之製備係描述於下文：
實例1005：
步驟1
於5克1005-A(可市購得自Aldrich)在100毫升EtOAc中之溶液內，在0℃下，添加40毫升飽和NaHCO3 溶液，接著以一份添加6.5毫升Cbz-Cl。將所形成之混合物攪拌2小時，並分離液層。以50毫升EtOAc逆萃取水層。將合併之有機層以鹽水洗滌一次，以MgSO4 脫水乾燥，及濃縮成無色液體，其係於靜置時固化。獲得10.7克1005-B，為白色固體。MS：274[M+Na]+ .
步驟2
於10.7克1005-B在120毫升DCM中之溶液內，在0℃下，添加7.04毫升三乙胺與4.05毫升氯化甲烷磺醯。將混合物於0℃下攪拌10分鐘，並在室溫下1.5小時。將混合物以1MKHSO4 溶液、水、鹽水洗滌，並以MgSO4 脫水乾燥。濃縮溶劑，獲得粗產物，使其在矽膠管柱上純化，以DCM溶離。獲得13克1005-C，為無色濃稠油。MS：352[M+Na]+ .
步驟3
於8.3克Cs2 CO3 在100毫升無水DMF中之懸浮液內，添加3.3毫升硫基醋酸。於深褐色漿液中，添加12.97克1005-C在30毫升無水DMF中之溶液。將所形成之混合物於室溫下攪拌過夜，以300毫升冰水稀釋，並以2x250毫升EtOAc萃取。將合併之有機層以水、鹽水洗滌，並以MgSO4 脫水乾燥。蒸發溶劑，獲得~10克粗產物，使其在矽膠管柱上，以己烷中之10%EtOAc純化。獲得4.8克1005-D，為白色固體。MS：310[M+H]+ ,332[M+Na]+ .
步驟4
於4.4克1005-D在15毫升AcOH中之溶液內，添加15毫升30% H2 O2 與30毫升AcOH之溶液。將所形成之溶液於室溫下攪拌20小時。添加75毫克10% Pd/C，並將混合物攪拌1小時，經過矽藻土墊過濾，並以MeOH沖洗。使合併之濾液濃縮，並與3 x 100毫升甲苯共蒸發，而得固體。添加90毫升無水DCM，以溶解固體，並於此溶液中，添加15毫升甲苯中之20%光氣(Fluka)，接著是1.8毫升無水DMF。氣體釋出，並將混合物於室溫下攪拌2小時，及濃縮，而產生固體殘留物。於矽膠上純化，以DCM溶離，獲得3.94克1005-E，為固體。MS：356,358[M+Na]+ .
步驟5
將900毫克1005-E、1.0毫升第三-丁基胺及0.4毫升NMM在40毫升DCM中之混合物於室溫下攪拌0.5小時，以1M KHSO4 溶液、鹽水洗滌，並以MgSO4 脫水乾燥。蒸發溶劑，獲得445毫克粗產物，使其在矽膠上，以DCM與DCM中之5%EtOAc純化。獲得617毫克1005-F。MS：379[M+Na]+ .
步驟6
將600毫克1005-F、2.64克碳酸銫及0.5毫升碘化甲烷在10毫升無水DMF中之混合物於室溫下攪拌過夜，以50毫升冰冷水稀釋，並以2x50毫升EtOAc萃取。將合併之有機溶液以水洗滌兩次，以鹽水洗滌一次，以MgSO4 脫水乾燥。於真空下移除溶劑，獲得620毫克1005-G，為白色固體。MS：385[M+H]+.
步驟7
將1005-G(600毫克)與Pd(OH)2(70毫克)在MeOH中之溶液，於氫大氣下放置過夜。過濾固體，並以MeOH充分洗滌。於減壓下移除揮發性物質，而得胺(1005-J；380毫克)。MS：251[M+H]+ .
步驟8
於其鹽酸鹽(Bachem；2.24克)在二氯甲烷(50毫升)中之溶液內，添加NMM(2.6毫升)，接著是氯甲酸對-硝基苯酯(2.42克)，並將所形成之混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物以冷1N HCl水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，乾燥，及在減壓下移除揮發性物質。使粗製反應產物藉矽膠層析，使用EtOAc：己烷(1：10)作為溶離劑，而得胺基甲酸酯(1005-K；2.97克)。
步驟9
使用步驟8中所提出之程序，胺基甲酸酯1005-L係製自胺-鹽酸鹽1.04。
步驟10
將NMM(0.12毫升)添加至胺(1005-J；0.20克)與胺基甲酸酯(1005-L；0.375克)在乙腈(15毫升)中之混合物內，並將所形成之混合物於室溫及氮大氣下攪拌過夜。於減壓下移除揮發性物質，並使殘留物在EtOAc與水之間作分液處理。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮。使粗製反應產物藉矽膠管柱層析純化，使用EtOAc：己烷(2：3)作為溶離劑，提供所要之脲(1005-M；0.43克)。MS：559.28[M+H]+ .
步驟11
將水(2毫升)中之氫氧化鋰(0.020克)添加至甲酯(1005-M；0.41克)在二氧陸圜(15毫升)中之溶液內，並將所形成之混合物於室溫下攪拌過夜。添加HCl水溶液(0.01N)，並將有機物質萃取於EtOAc中。分離有機相，脫水乾燥，及濃縮，而產生羧酸(1005-N；0.395克)。MS：545.32[M+H]+ .
步驟12
於-20℃及氮大氣下，將Hunig氏鹼(0.050毫升)添加至羧酸(1005-N；0.030克)及其鹽酸鹽(13.01；0.015克)在二氯甲烷(5毫升)中之混合物內。使反應物在此溫度下保持20小時期間。水溶液處理獲得粗製反應產物(1005-O)，將其使用於下文步驟13。
步驟13
於二氯甲烷(3毫升)中之粗製物(1005-O；上文步驟12)內，添加Dess-Martin過碘烷(0.050克)，並將所形成之混合物在室溫下攪拌24小時期間。水溶液處理，及矽膠板層析，使用二氯甲烷：甲醇(20：1)作為溶離劑，獲得所要之α-酮基-醯胺(0.0282克)，為白色固體。Ki*範圍為：A=<75nM；B=75-250nM；C=>250nM。
表4A列出代表本發明之又其他化合物：
本發明係關於新穎HCV蛋白酶抑制劑。此利用性可以其抑制HCV NS2/NS4a絲胺酸蛋白酶之能力証明。關於此種証實之一般程序係藉由下述活體外檢測說明。
HCV蛋白酶抑制活性之檢測：
分光光度測定檢測：對HCV絲胺酸蛋白酶之分光光度測定檢測可在本發明化合物上，按照由R. Zhang等人,Analytical Biochemistry,270(1999)268-275所述之程序進行，其揭示內容係併於本文供參考。以色原質酯受質之蛋白水解為基礎之檢測，係適用於連續監測HCV NS3蛋白酶活性。該受質係衍生自NS5A-NS5B接合順序之P側(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X=A或P)。其C-末端羧基係以四種不同發色團醇類(3-或4-硝基酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮酚)之一酯化。下文所示者為此等新穎分光光度測定酯受質之合成、特徵鑒定，及應用至HCV NS3蛋白酶抑制劑之高通過量篩檢與詳細動力學評估。
物質與方法：
物質：供檢測相關緩衝劑用之化學試劑係得自Sigma化學公司(St. Louis,Missouri)。供肽合成用之試劑係得自Aldrich化學品，Novabiochem(San Diego,Califomia)、Applied Biosystems(Foster City,California)及Perseptive Biosystems(Framingham,Massachusetts)。肽係以手動方式或在自動化ABI431A型合成器(得自Applied Biosystems)上合成。UV/VIS分光計LAMBDA 12型係得自Perkin Elmer(Norwalk,Connecticut)，而96-井UV板係得自Corning(Corning,New York)。預熱板塊可得自USA科學(Ocala,Florida)，而96-井板旋渦器係得自Labline儀器(Melrose Park,Illinois)。具有單色計之Spectramax Plus微滴定板讀取器係得自Molecular裝置(Sunnyvale,California)。
酵素製備：重組異種二聚體HCV NS3/NS4A蛋白酶(菌種1a)係利用先前發表之程序(D. L. Sali等人，Biochemistry,37(1998)3392-3401)製成。蛋白質濃度係藉由Biorad染色方法，使用先前藉由胺基酸分析定量之重組HCV蛋白酶標準物測定。在檢測引發之前，利用Biorad Bio-Spin P-6預填充柱，將酵素儲存緩衝液(50mM磷酸鈉pH 8.0,300mM NaCl,10%甘油,0.05%月桂基麥芽苷及10mM DTT)交換成檢測緩衝液(25mM MOPS pH 6.5,300mM NaCl,10%甘油，0.05%月桂基麥芽苷，5μM EDTA及5μM DTT)。
受質合成與純化：受質之合成係按由R. Zhang等人(同前出處)所報告進行，並經由使用標準擬案，將Fmoc-Nva-OH固定至氯化2-氯基三苯甲烷樹脂而引發(K. Barlos等人，Int. J. Pept. Protein Res.,37(1991),513-520)。接著使用Fmoc化學，將肽組合在一起，無論是以手動方式或在自動ABI 431型肽合成器上。使經N-乙醯化及完全保護之肽片段自樹脂分裂，無論是藉由二氯甲烷(DCM)中之10%醋酸(HOAc)與10%三氟乙醇(TFE)，歷經30分鐘，或藉由DCM中之2%三氟醋酸(TFA)，歷經10分鐘。使合併之濾液與DCM洗液以共沸方式蒸發(或藉由Na2 CO3 溶液重複萃取)，以移除使用於分裂中之酸。使DCM相以Na2SO4脫水乾燥，並蒸發。
使用標準酸-醇偶合程序，將酯受質組合在一起(K. Holmber等人，Acta Chem. Scand.,B33(1979)410-412)。使肽片段溶於無水吡啶(30-60毫克/毫升)中，於其中添加10莫耳當量發色團與催化量(0.1當量)之對-甲苯磺酸(pTSA)。添加二環己基碳化二亞胺(DCC，3當量)，以引發偶合反應。產物形成係藉HPLC監控，並可在室溫下反應12-72小時之後發現完成。於真空下蒸發吡啶溶劑，並藉由與甲苯共沸蒸發而進一步移除。使肽酯以DCM中之95% TFA去除保護兩小時，並以無水乙醚萃取三次，以移除過量發色團。使經去除保護之受質於C3或C8管柱上藉由逆相HPLC，以30%至60%乙腈梯度液(使用六份管柱體積)純化。在HPLC純化後之總產率可為大約20-30%。分子質量可藉由電噴霧離子化作用質量光譜確認。將受質於乾燥下以乾粉形式儲存。
受質與產物之光譜：受質及其相應發色團產物之光譜，係在pH 6.5檢測緩衝液中獲得。消光係數係使用多重稀釋液，在1公分比色杯中之最適宜偏離峰波長(對3-Np與HMC為340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫微米)下測得。最適宜偏離峰波長係被定義為在受質與產物間之吸光率上產生最大分率差異(產物OD-受質OD)/受質OD)之波長。
蛋白酶檢測：HCV蛋白酶檢測係於30℃下，在96-井微滴定板中，使用200微升反應混料進行。使檢測緩衝液條件(25mM MOPS pH 6.5,300mM NaCl,10%甘油,0.05%月桂基麥芽苷，5μM EDTA及5μM DTT)，對NS3/NS4A異種二聚體達最佳化(D.L. Sali等人，同前出處)。典型上，係將150微升緩衝劑、受質及抑制劑之混合物放置在井中(DMSO之最後濃度≦4% v/v)，並允許在30℃下預培養大約3分鐘。然後，使用五十微升檢測緩衝液中之預先溫熱蛋白酶(12nM，30℃)，以引發反應(最後體積200微升)。板係使用裝有單色計之Spectromax Plus微滴定板讀取器，監測適當波長(對3-Np與HMC為340毫微米，對PAP為370毫微米，及對4-Np為400毫微米)下之吸光率變化，歷經檢測長度(60分鐘)(可接受之結果可以利用截止濾器之板讀取器獲得)。於Nva與發色團間之酯鏈結蛋白分解之分裂作用係於適當波長下，對著作為對照組進行非酵素水解作用之無酵素空白試驗進行監測。受質動力學參數之評估係涵蓋30倍受質濃度範圍(~6-200μM)進行。初速度係使用線性回歸測得，而動力學常數係經由使用非線性回歸分析，使數據吻合至Michaelis-Menten方程式而獲得(Mac曲線吻合1.1,K. Raner)。計算轉換數(kcat )，假設酵素為完全活性。
抑制劑與失活劑之評估：競爭性抑制劑Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH及Ac-DTEDVVP(Nva)-OH之抑制常數(Ki )，係於酵素與受質之固定濃度下，根據關於競爭性抑制動力學之重排Michaelis-Menten方程式：vo /vi =I+[I]o /(Ki (1+[S]o -Km ))，其中vo 為未被抑制之初速度，vi 為在任何特定抑制劑濃度([I]o )之抑制劑存在下之初速度，而[S]o 為所使用之受質濃度，經由將vo /vi 對抑制劑濃度([I]o )作圖，以實驗方式測得。使用線性回歸，使所形成之數據吻合，並使用所形成之斜率1/(Ki (1+[S]o /Km )計算Ki 值。下文表5係列出一些本發明化合物所獲得之Ki*值(以毫微莫耳濃度表示)。數種其他化合物係在前文頁數之表中指出。
雖然本發明已搭配上文所提出之特殊具體實施例加以描述，但其許多替代方式、修正及其他變異將為一般熟諳此項技藝者所明瞭。所有此種替代方式、修正及變異，均意欲落在本發明之精神與範圍內。

Claims (39)

  1. 一種化合物，或該化合物之立體異構物，或該化合物之藥學上可接受之鹽，該化合物具有式I中所示之一般結構： 其中：R1 為H、OR8 、NR9 R10 或CHR9 R10 ，其中R8 、R9 及R10 可為相同或不同，各獨立選自H、(C1 -C8 )烷基-、(C2 -C8 )烯基-、(C2 -C8 )炔基-、芳基-、(C1 -C8 )雜烷基-、雜芳基-、環烷基-、雜環基-、芳-(C1 -C8 )烷基-及雜芳-(C1 -C8 )烷基所組成之群；該部分基團： 係選自下列所組成之群： R2 及R3 可為相同或不同，各獨立選自H、(C1 -C8 )烷基、(C1 -C8 )雜烷基、(C2 -C8 )烯基、(C2 -C8 )雜烯基、(C2 -C8 )炔基、(C2 -C8 )雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、芳-(C1 -C8 )烷基、雜芳基及雜芳-(C1 -C8 )烷基所組成之群；且Y係選自下列部份基團： 其中G為NH或O；且R15 、R16 、R17 及R18 可為相同或不同，各獨立選自H、(C1 -C8 )烷基、(C1 -C8 )雜烷基、(C2 -C8 )烯基、(C2 -C8 )雜烯基、(C2 -C8 )炔基、(C2 -C8 )雜炔基、環烷基、雜環基、芳基及雜芳基所組成之群，或者，(i)R15 與R16 係互相連接，以形成四至八-員環狀結構，與(ii)同樣地，獨立地，R17 與R18 係互相連接，以形成六-員環烷基或雜環基，其限制條件為，當該部分基團為時，R17 與R18 不互相連接以形成六-員環烷基或雜環基；其中各該(C1 -C8 )烷基、芳基、雜芳基、環烷基或雜環基可為未經取代，或視情況獨立被一或多個部份基團取代，取代基選自：羥基、(C1 -C8 )烷氧基、芳氧基、硫基、(C1 -C8 )烷硫基、芳基硫基、胺基、醯胺基、(C1 -C8 )烷胺基、芳胺基、(C1 -C8 )烷基磺醯基、芳基磺醯基、磺醯胺基、(C1 -C8 )烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、(C1 -C8 )烷基、芳基、雜芳基、酮基、羧基、(C1 -C8 )烷氧羰基、羧醯胺基、(C1 -C8 )烷氧羰基胺基、(C1 -C8 )烷氧羰基氧基、(C1 -C8 )烷基脲基、芳基脲基、鹵基、氰基及硝基所組成之群； 其中各芳基係為苯基或；各雜芳基係為吡啶基、噻吩基或 噻唑基；各環烷基係為非芳族單一或多環系統，其包含3至10個碳原子；且各雜環基係為非-芳族飽和單環系統，其包含3至10個環原子，其中此環系統中之1至3個原子係獨立選自N、O及S。
  2. 如請求項1之化合物，其中R1 為NR9 R10 ，且R9 為H，R10 為H、(C1 -C8 )烷基、芳基、(C1 -C8 )雜烷基、雜芳基、環烷基、(C1 -C8 )烷基-芳基、(C1 -C8 )烷基-雜芳基、芳基-(C1 -C8 )烷基、(C2 -C8 )烯基、(C2 -C8 )炔基或雜芳基-(C1 -C8 )烷基。
  3. 如請求項2之化合物，其中R10 係選自下列所組成之群：
  4. 如請求項1之化合物，其中R2 係選自下列部份基團所組成之群：
  5. 如請求項1之化合物，其中R3 係選自下列所組成之群： 其中R31 為OH或O-(C1 -C8 )烷基；且R32 為H、C(O)CH3 、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
  6. 如請求項5之化合物，其中R3 係選自下列部份基團所組成之群：
  7. 如請求項1之化合物，其中Y係選自下列部份基團： 其中R15 、R16 、R17 及R18 可為相同或不同，H、(C1 -C8 )烷基、(C1 -C8 )雜烷基、(C2 -C8 )烯基、(C2 -C8 )雜烯基、(C2 -C8 )炔基、(C2 -C8 )雜炔基、環烷基、雜環基、芳基、及雜芳基所組成之群，或者，R15 與R16 係互相連接，以形成四至八-員環烷基或雜環族結構；R17 與R18 係互相連接，以形成三至八-員環烷基 或雜環基，其限制條件為，當該部分基團為時，R17 與R18 不互相連接以形成六-員環烷基或雜環基；其中各該芳基、雜芳基、環烷基或雜環基可為未經取代，或視情況獨立被一或多個部份基團取代，取代基選自下列所組成之群：羥基、(C1 -C8 )烷氧基、芳氧基、硫基、(C1 -C8 ) 烷硫基、芳基硫基、胺基、醯胺基、(C1 -C8 )烷胺基、芳胺基、(C1 -C8 )烷基磺醯基、芳基磺醯基、磺醯胺基、(C1 -C8 )烷基磺醯胺基、芳基磺醯胺基、(C1 -C8 )烷基、芳基、雜芳基、羧基、(C1 -C8 )烷氧羰基、羧醯胺基、(C1 -C8 )烷氧羰基胺基、(C1 -C8 )烷氧羰基氧基、(C1 -C8 )烷基脲基、芳基脲基、鹵基、氰基及硝基。
  8. 如請求項7之化合物，Y係選自下列所組成之群： 其中Y31 係選自下列所組成之群： Y32 係選自下列所組成之群： 且Y12 係選自下列所組成之群：H、CO2 H、CO2 Me、OMe、F、Cl、Br、NH2 、N(H)S(O2 )CH3 、N(H)C(O)CH3 、NO2 、S(O2 )NH2 、CF3 、Me、OH、OCF3 及C(O)NH2 。
  9. 如請求項1之化合物，其中部份基團： 係選自下列結構：
  10. 如請求項9之化合物，其中部份基團： 係選自下列結構：
  11. 如請求項10之化合物，其中部份基團： 係選自下列結構：
  12. 如請求項1之化合物，其中：R1 為NHR10 ，其中R10 係選自下列所組成之群： R2 係選自下列部份基團所組成之群： R3 係選自下列部份基團所組成之群： Y係選自下列所組成之群： 其中Y31 係選自下列所組成之群： Y32 係選自下列所組成之群： 且Y12 係選自H、CO2 H、CO2 Me、OMe、F、Cl、Br、NH2 、N(H)S(O2 )CH3 、N(H)C(O)CH3 、NO2 、S(O2 )NH2 、CF3 、Me、OH、OCF3 及C(O)NH2 所組成之群；且以下部份基團： 係為：
  13. 一種用於治療由C型肝炎病毒(HCV)引起病症之醫藥組合物，其包含至少一種如請求項1之化合物作為活性成份。
  14. 如請求項13之醫藥組合物，其另外包含至少一種藥學上可接受之載劑。
  15. 如請求項14之醫藥組合物，其另外含有至少一種抗病毒劑。
  16. 如請求項15之醫藥組合物，其又另外含有至少一種干擾素。
  17. 如請求項16之醫藥組合物，其中該至少一種抗病毒劑為三唑核苷，而該至少一種干擾素為α-干擾素或經PEG化之干擾素。
  18. 一種如請求項1之化合物之用途，其係用以製造用於治療由C型肝炎病毒(HCV)引起病症之藥劑。
  19. 如請求項18之用途，其中該藥劑係供口服或皮下投藥。
  20. 一種製備用於治療由C型肝炎病毒(HCV)引起病症之醫藥組合物之方法，該方法包括使至少一種如請求項1之化合物與至少一種藥學上可接受之載劑混合。
  21. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之立體異構物，或該化合物之藥學上可接受之鹽，該化合物係選自下文所列示結構之化合物：
  22. 一種治療由C型肝炎病毒(HCV)引起病症之醫藥組合物，該組合物包含治療上有效量之一或多種如請求項21之化合物，及藥學上可接受之載劑。
  23. 如請求項22之醫藥組合物，其另外含有至少一種抗病毒劑。
  24. 如請求項23之醫藥組合物，其又另外含有至少一種干擾素或PEG-干擾素α共軛物。
  25. 如請求項24之醫藥組合物，其中該至少一種抗病毒劑為三唑核苷，而該至少一種干擾素為α-干擾素或經PEG化之干擾素。
  26. 一種如請求項21之化合物之用途，其係用以製造用於治療由C型肝炎病毒引起病症之藥劑。
  27. 一種抑制C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性之活體外方法，其包 括使HCV蛋白酶與一或多種如請求項21之化合物接觸。
  28. 預防或改善由C型肝炎引起之一或多種病徵之醫藥組合物，其包含治療上有效量之一或多種如請求項21之化合物。
  29. 如請求項28之醫藥組合物，其中C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶為NS3/NS4a蛋白酶。
  30. 如請求項29之醫藥組合物，其中一或多種化合物會抑制HCV NS3/NS4a蛋白酶。
  31. 一種抑制C型肝炎病毒(HCV)多肽之處理之活體外方法，其包括使含有HCV多肽之組合物，於其中該多肽係經處理之狀態下，與一或多種如請求項21之化合物接觸。
  32. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  33. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  34. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  35. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  36. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  37. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  38. 一種顯示C型肝炎病毒(HCV)蛋白酶抑制活性之化合物，或該化合物之對掌異構物，或該化合物之藥學上可接受鹽，該化合物具有以下結構：
  39. 如請求項1之化合物，其係呈經純化形式。
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Families Citing this family (66)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE212037T1 (de) 1996-10-18 2002-02-15 Vertex Pharma Inhibitoren von serinproteasen, insbesondere von ns3-protease des hepatitis-c-virus
SI1730110T1 (sl) * 2004-02-27 2010-10-29 Schering Corp Žveplove spojine kot inhibitorji NS3 serin proteaze virusa hepatitisa C
US7816326B2 (en) 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
GB0426661D0 (en) * 2004-12-06 2005-01-05 Isis Innovation Pyrrolidine compounds
WO2006130666A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Medicaments and methods combining a hcv protease inhibitor and an akr competitor
NZ563369A (en) * 2005-06-02 2011-03-31 Schering Corp Controlled-release formulation useful for treating disorders associated with hepatitus C virus
WO2006130626A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Method for modulating activity of hcv protease through use of a novel hcv protease inhibitor to reduce duration of treatment period
US20060275366A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Controlled-release formulation
WO2006130554A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis c virus
US20070237818A1 (en) * 2005-06-02 2007-10-11 Malcolm Bruce A Controlled-release formulation of HCV protease inhibitor and methods using the same
JP5160415B2 (ja) * 2005-06-02 2013-03-13 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 医薬処方物およびそれを用いる治療方法
US20070021351A1 (en) * 2005-06-02 2007-01-25 Schering Corporation Liver/plasma concentration ratio for dosing hepatitis C virus protease inhibitor
PL1891089T3 (pl) 2005-06-02 2015-05-29 Merck Sharp & Dohme Inhibitory proteazy HCV w połączeniu z pokarmem
WO2006130552A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis c virus
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
JP2009528353A (ja) * 2006-03-03 2009-08-06 シェーリング コーポレイション Ｈｃｖのプロテアーゼ阻害剤およびｉｒｅｓ阻害剤の医薬的組み合わせ
AU2007227580A1 (en) 2006-03-16 2007-09-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes and intermediates for preparing steric compounds
US20070287664A1 (en) * 2006-03-23 2007-12-13 Schering Corporation Combinations of HCV protease inhibitor(s) and CYP3A4 inhibitor(s), and methods of treatment related thereto
NZ571826A (en) 2006-04-11 2012-01-12 Novartis Ag HCV/HIV inhibitors and their uses
DE102006059317A1 (de) 2006-07-04 2008-01-10 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von β-Amino-α-hydroxy-carbonsäureamiden
RU2009109355A (ru) 2006-08-17 2010-09-27 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) Ингибиторы вырусной полимеразы
EP2099430A2 (en) * 2006-12-07 2009-09-16 Schering Corporation Ph sensitive matrix formulation
US8546420B2 (en) 2006-12-22 2013-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. 4, 5-ring annulated indole derivatives for treating or preventing of HCV and related viral infections
WO2008078563A1 (ja) * 2006-12-22 2008-07-03 Sumitomo Seika Chemicals Co., Ltd. ３－ベンジルオキシベンゼンチオールの製造方法
KR20090094154A (ko) 2006-12-22 2009-09-03 쉐링 코포레이션 Ｈｃｖ 및 관련 바이러스 감염을 치료 또는 예방하기 위한 4,5-환 환상 인돌 유도체
CN101611025A (zh) 2006-12-22 2009-12-23 先灵公司 5,6-环化的吲哚衍生物及其使用方法
JP2010535156A (ja) 2007-08-03 2010-11-18 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼ阻害剤
BRPI0816116A2 (pt) 2007-08-29 2015-03-03 Schering Corp Derivados de indol 2,3-substituídos para o tratamento de infecções virais.
WO2009032125A1 (en) 2007-08-29 2009-03-12 Schering Corporation 2,3-substituted azaindole derivatives for treating viral infections
PE20090630A1 (es) 2007-08-29 2009-05-16 Schering Corp Derivados de indol 2-carboxi sustituidos y metodos para su utilizacion
DK2061513T3 (da) 2007-09-14 2011-11-21 Schering Corp Fremgangsmåde til behandling af patienter med hepatitis C
EP2205584A1 (en) * 2007-10-10 2010-07-14 Novartis Ag Spiropyrrolidines and their use against hcv and hiv infection
US8765757B2 (en) 2007-11-16 2014-07-01 Merck Sharp & Dohme Corp. 3-heterocyclic substituted indole derivatives and methods of use thereof
WO2009064852A1 (en) 2007-11-16 2009-05-22 Schering Corporation 3-aminosulfonyl substituted indole derivatives and methods of use thereof
MX2010006313A (es) 2007-12-19 2010-06-25 Boehringer Ingelheim Int Inhibidores de la polimerasa virica.
US7964560B2 (en) * 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
MX2010013630A (es) 2008-06-13 2010-12-21 Schering Corp Derivados triciclicos de indol y metodos de uso de los mismos.
EP2323631A1 (en) * 2008-08-07 2011-05-25 Schering Corporation Pharmaceutical formulations of an hcv protease inhibitor in a solid molecular dispersion
US8188137B2 (en) 2008-08-15 2012-05-29 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
EP2376078A2 (en) 2008-12-12 2011-10-19 Schering Corporation Deuterated compounds as hepatitis c virus (hcv) inhibitors
RU2011127080A (ru) 2009-01-07 2013-02-20 Сайнексис, Инк. Производное циклоспорина для применения в лечении заражения вирусом гепатита с и вич
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
CA2763140A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three linked aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
CA2768838A1 (en) * 2009-07-29 2011-02-03 Schering Corporation Enantio- and stereo-specific syntheses of beta-amino-alpha- hydroxy amides
EP2503881B1 (en) 2009-11-25 2015-05-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
AU2010341537A1 (en) 2009-12-22 2012-08-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused Tricyclic Compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
AR080676A1 (es) 2010-03-09 2012-05-02 Schering Corp Compuestos de sililo triciclicos fusionados y metodos de uso de los mismos para el tratamiento de enfermedades virales
EP2598149A4 (en) 2010-07-26 2014-09-10 Merck Sharp & Dohme SUBSTITUTED BIPHENYLENE COMPOUNDS AND METHOD FOR USE THEREOF FOR THE TREATMENT OF VIRUS DISEASES
US9133116B2 (en) 2010-09-28 2015-09-15 Panacea Biotec Ltd. Bicyclic compounds
EP2621279B1 (en) 2010-09-29 2018-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tetracycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2012073249A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Arch Pharmalabs Limited A novel process for the preparation of 3-(benzyloxy)- benzenethiol, a key intermediate for the preparation of pharmaceutical drugs.
JP2014515023A (ja) 2011-04-13 2014-06-26 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション ２’−置換ヌクレオシド誘導体およびウイルス疾患の処置のためのその使用方法
EP2697242B1 (en) 2011-04-13 2018-10-03 Merck Sharp & Dohme Corp. 2'-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033901A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic-substituted benzofuran derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033900A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033899A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted benzofuran compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013039876A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Silyl-containing heterocyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP3063140A4 (en) 2013-10-30 2017-11-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Pseudopolymorphs of an hcv ns5a inhibitor and uses thereof
WO2017059411A1 (en) * 2015-10-01 2017-04-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Inhibitors of menaquinone biosynthesis
US10874686B2 (en) 2015-10-01 2020-12-29 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Anthranilyl-adenosinemonosulfamate analogs and uses thereof
AU2017282653B2 (en) 2016-06-21 2021-08-12 Orion Ophthalmology LLC Aliphatic prolinamide derivatives
US20230218644A1 (en) 2020-04-16 2023-07-13 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
US11351149B2 (en) 2020-09-03 2022-06-07 Pfizer Inc. Nitrile-containing antiviral compounds
US12083099B2 (en) 2020-10-28 2024-09-10 Accencio LLC Methods of treating symptoms of coronavirus infection with viral protease inhibitors
WO2024153137A1 (zh) * 2023-01-17 2024-07-25 西藏海思科制药有限公司 一种手性氨基醇医药中间体的制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003062265A2 (en) * 2002-01-18 2003-07-31 Schering Corporation Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
TWI314927B (en) * 2004-02-27 2009-09-21 Schering Corporatio Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69133402T2 (de) * 1990-04-04 2004-11-11 Chiron Corp. (N.D.Ges.D. Staates Delaware), Emeryville Protease von hepatitis-c-virus
US5922757A (en) 1996-09-30 1999-07-13 The Regents Of The University Of California Treatment and prevention of hepatic disorders
ATE212037T1 (de) 1996-10-18 2002-02-15 Vertex Pharma Inhibitoren von serinproteasen, insbesondere von ns3-protease des hepatitis-c-virus
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
AU757072B2 (en) 1997-08-11 2003-01-30 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C inhibitor peptide analogues
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
US6608027B1 (en) * 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
ATE297946T1 (de) 2000-04-03 2005-07-15 Vertex Pharma Inhibitoren von serin proteasen, speziell der hepatitis-c-virus ns3-protease
RU2002129564A (ru) 2000-04-05 2004-05-10 Шеринг Корпорейшн (US) Макроциклические ингибиторы сериновой ns3-протеазы, включающие n-циклические р2 структурные элементы вируса гепатита с
CA2406532A1 (en) 2000-04-19 2001-11-01 Schering Corporation Macrocyclic ns-3 serine protease inhibitors of hepatitis c virus compri sing alkyl and aryl alanine p2 moieties
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
KR100904788B1 (ko) * 2000-07-21 2009-06-25 쉐링 코포레이션 Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3-세린 프로테아제억제제로서의 신규한 펩티드
SK742003A3 (en) 2000-07-21 2003-06-03 Schering Corp Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
US20020068702A1 (en) 2000-07-21 2002-06-06 Marguerita Lim-Wilby Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
SV2003000617A (es) * 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
EP1343807B1 (en) 2000-12-12 2009-04-29 Schering Corporation Diaryl peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatits c virus
US7816326B2 (en) * 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
JP5160415B2 (ja) 2005-06-02 2013-03-13 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 医薬処方物およびそれを用いる治療方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003062265A2 (en) * 2002-01-18 2003-07-31 Schering Corporation Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
TWI314927B (en) * 2004-02-27 2009-09-21 Schering Corporatio Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease

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Publication number Publication date
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