TW202039498A

TW202039498A - 嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

Info

Publication number: TW202039498A
Application number: TW108143715A
Authority: TW
Inventors: 鄒昊; 李正濤; 王元昊; 餘健; 祝偉
Original assignee: 大陸商上海拓界生物醫藥科技有限公司
Priority date: 2018-11-30
Filing date: 2019-11-29
Publication date: 2020-11-01
Also published as: EP3889153A1; AU2019386036A1; EP3889153A4; WO2020108590A1; BR112021009880A2; MX2021006026A; CA3120791A1; ZA202102728B; KR20210097144A; CN113272303B; JP2022509149A; CN113272303A

Abstract

本發明涉及嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。特別地，本發明涉及通式(I)所示的嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法、含有該衍生物的醫藥組成物，以及其作為SHP2抑制劑用於預防和/或治療腫瘤或者癌症的用途，其中通式(I)中的各個取代基與說明書中定義相同。

Description

嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

本發明屬於醫藥領域，涉及嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。特別的本發明涉及通式(I)所示的嘧啶並五員氮雜環類衍生物、其製備方法、含有該衍生物的組成物，其作為SHP2抑制劑及其用於預防和/或治療腫瘤或者癌症的藥物中的用途。

含Src同源2蛋白質酪胺酸磷酸酶2(Src homology domain 2containing tyrosine phosphatase-2，SHP2)是由PTPN11基因編碼的一種進化保守的非受體型蛋白酪胺酸磷酸酶(PTP)，主要由兩個SH2結構域(N-SH2、C-SH2)和一個PTP催化域組成，廣泛表達於人類各個組織，在維持組織發育和細胞穩態等方面發揮了重要作用。SHP2與藉由Ras-有絲分裂原-活化的蛋白激酶、JAK-STAT或磷酸肌醇3-激酶AKT通路的信號有關。PTPN11基因的突變以及隨後SHP2的突變已經在多種人類疾病中獲得識別，例如努南綜合症(Noonan Syndrome)、豹皮綜合症(Leopard Syndrome)、幼年性骨髓單核細胞白血病、成神經細胞瘤、黑色素瘤、急性骨髓性白血病以及乳腺癌、肺癌和結腸癌(與Claim19相同)。因此，對於治療各種疾病的新療法的發展而言，SHP2代表可具有高吸引力的靶點。

已公開的SHP2靶點的相關研究的專利申請有WO2018136264A、WO2015003094A、WO2018160731A、WO2018130928A1、WO2018136265A、WO2018172984A、WO2018081091、WO2016203405、WO2017211303A、WO2018013597A等；目前諾華的SHP2抑制劑TNO 155及JACOBIO的SHP2抑制劑JAB-3068均在處於I期臨床階段，尚無已上市的該靶點的產品，因此仍需要繼續開發更高效的新的SHP2抑制劑，以期為患者提供新的有效的抗癌藥物。

本發明提供一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽，

其中：

R¹選自氫原子、氘原子、羥基、氰基、硝基、鹵素、羧基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、胺基、烯基和羥烷基；

R²為

，

Y¹選自-S-、-NH-、-S(O)₂-、-S(O)₂-NH-、-C(=CH₂)-、-S(O)-和一個鍵；

環A選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地為5-12員的單環或多環；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、芳基、雜芳基、C₂-₆烯基、C₄-₈環烯基、C_2-6炔基、-CHR^aR^b、-NR^aR^b、-烯基-NR^aR^b、-烯基-O-R^a、-烯基-C(O)₂R^a、-烯基-R^a、-烯基-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-C(O)R^b、-C(O)NR^aR^b、-C(O)R^a、-CO-烯基-NR^aR^b、-NR^aC(O)R^b、-C(O)₂R^a、-O-烯基-CO-OR^a、-O-烯基-CO-NR^aR^b、-O-烯基-NR^aR^b、-OR^a、-SR^a、-NR^a-CO-NR^aR^b、-NR^a-烯基-NR^aR^b、-NR^a-烯基-R^b、-NR^aS(O)₂R^b、-NR^aS(O)R^b、-NR^aS(O)₂NR^aR^b、-NR^aS(O)NR^aR^b、-S(O)₂NR^aR^b、-S(O)NR^aR^b、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-P(O)R^aR^b、-N(S(O)R^aR^b)和-S(O)(NR^a)R^b，其中該烷基、烷氧基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N，較佳X¹為CR^c；

R^c選自選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、胺基、硝基、羥基、羰基、羧基、鹵素和氰基；

R⁴選自氫、C₁-₆烷基、3-12員的單雜環或者多環雜環和C_3-8環烷基，其中該烷基、雜環基和環烷基各自獨立地視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、C_1-3烷基、胺基、烷胺基、羥烷基和烷氧基的基團取代；

R⁵選自氫、羥基、C_1-6烷基和C_3-8環烷基，其中該烷基或者環烷基視需要被一個或者多個胺基取代；或者

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成3-12員的單雜環或多環雜環，其中該單雜環或多環雜環視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、鹵素取代或未取代的C_1-6烷基、胺基、烷氧基、羥烷基、芳基、雜芳基、雜環基、烷胺基、鹵素取代或未取代的烷氧基和-NR^aS(O)NR^aR^b的基團取代，該多環雜環包括但不限於橋環雜環、螺環雜環；

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成的示例性的環包括但不限於：

或者R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中s和t各自獨立地視需要選自0和1；

每個R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、氟原子、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、氟取代或者未取代的烷基和氟取代或者未取代的烷氧基；或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一起形成CO、C=NH、C=N-OH、3-12員雜環基或者C_3-8環烷基；

p選自0、1、2、3和4；

每個R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、氟原子、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、氟取代或者未取代的烷基、氟取代或者未取代的烷氧基和-NR^aS(O)NR^aR^b；

或者R^7a、R^7b與它們共同連接的碳原子一起形成3-12員雜環基、5-10員雜芳基、C_3-8環烷基或者C=NR^7c，其中該環視需要被取代；

R^7c選自氫原子、氘原子和C_1-6烷基；

q選自0、1、2、3和4；

W不存在或者選自-O-、-S-和-NR^w-；

R^w選自氫原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、-C(O)C_1-6烷基、-C(O)₂C_1-6烷基、C_1-6烷基醚、鹵素取代或者未取代的C_1-6烷基和鹵素取代或者未取代的C_1-6烷氧基；

環B不存在或者為3-10員環；

為單鍵或者雙鍵；

當環B不存在時Y²為CR^2aR^2b、NR^2a或者O，Y³為CR^3aR^3b、NR^3a或者O；

當環B為3-10員環時；

1)Y²為CR^2a或者N，Y³為CR^3a或者N，

為單鍵；或者

2)Y²為C且Y³為C，

為雙鍵；

每個R^2a、R^2b、R^3a和R^3b各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、芳基、雜芳基、C₂-₆烯基、C₄-₈環烯基、C_2-6炔基、-NR^aR^b、-烯基-NR^aR^b、-烯基-O-R^a、-烯基-C(O)₂R^a、-烯基-R^a、-烯基-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-C(O)R^b、-C(O)NR^aR^b、-C(O)R^a、-CO-烯基-NR^aR^b、 -NR^aC(O)R^b、-C(O)₂R^a、-O-烯基-CO-OR^a、-O-烯基-CO-NR^aR^b、-O-烯基-NR^aR^b、-OR^a、-SR^a、-NR^a-CO-NR^aR^b、-NR^a-烯基-NR^aR^b、-NR^a-烯基-R^b、-NR^aS(O)₂R^b、-NR^aS(O)R^b、-NR^aS(O)₂NR^aR^b、-NR^aS(O)NR^aR^b、-S(O)₂NR^aR^b、-S(O)NR^aR^b、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-P(O)R^aR^b、-N(S(O)R^aR^b)和-S(O)(NR^a)R^b，其中該芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

R^a和R^b各自獨立地選自氫、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、C_3-8環烷基、5-10員雜芳基和芳基，其中該芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

m選自0、1、2、3和4；

每個R⁸獨立的選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

或者兩個相連的R⁸一起形成苯基、5員雜芳基、6員雜芳基或3-6員雜環基，其中該每一個環視需要被一個或多個選自鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基和C_1-6的烷基的取代基取代。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中s和t各自獨立地視需要選自0和1；

每個R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基，或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一種形成3-12員雜環基或C_3-8環烷基；

p選自0、1和2；

每個R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b如上述通式(I)中所定義；

q為1或2；

W不存在；

環B不存在或者為3-10員環；

為單鍵或者雙鍵；

當環B不存在時，Y²為CR^2aR^2b或者O，Y³為CR^3aR^3b；或者

當環B為3-10員環時；

Y²為CR^2a或者N，Y³為CR^3a或者N，

為單鍵；或者

Y²為C且Y³為C，

為雙鍵；

每個R^2a、R^2b和R^3a各自獨立地選自氫原子、氘原子和C_1-6烷基；

m選自0、1、2、3和4；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

或者兩個相連R⁸一起形成苯基、5員雜芳基、6員雜芳基或3-6員雜環基，其中該每一個環視需要被一個或多個選自鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基和C_1-6的烷基的取代基取代。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中其中R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中：

環B選自苯基、5員雜芳環和6員雜芳環，較佳為苯環或吡啶環；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；且

m選自0、1、2、3和4。

，

其中R⁹和R¹⁰各自獨立地選自氫原子、氘原子、羥基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵素、C_1-6羥烷基、芳基、雜芳基、雜環基、胺基、C_1-6烷胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b，較佳選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b；或者

R^a和R^b如上述通式(I)中所定義。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基和苯基，其中該苯基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；R³各自較佳選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和苯基，其中該苯基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；且

n選自0、1、2、3、4和5。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N，較佳X¹為CR^c，該R^c為氫原子。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中X¹和X²均為CR^c且X³為N，或者X¹為CR^c且X²和X³均為N，該R^c為氫原子。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、胺基和羥基。

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

A環為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和取代苯基；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N，較佳X¹為CR^c，該R^c為氫原子；

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

，且

R⁹和R¹⁰各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b上述通式(I)中所定義。

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

n選自0、1、2、3、4和5；

R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6的烷基和C_1-6烷氧基，或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一起形成3-12員雜環基或C_3-8環烷基；

p為1或2；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6的烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b上述通式(I)中所定義；

q為1或2；

W不存在；

環B不存在，Y²為CR^2aR^2b或者O，Y³為CR^3aR^3b；且

每個R^2a、R^2b、R^3a和R^3b各自獨立地選自氫原子、氘原子和C_1-6的烷基。

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

n選自0、1、2、3、4和5；

R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

p為1或2；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b上述通式(I)中所定義；

q為1或2；

W不存在；

環B選自苯基、5員雜芳基和6員雜芳基；

Y²為C且Y³為C，

為雙鍵；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6的烷基和C_1-6烷氧基；

m選自0、1、2、3和4。

R¹選自氫原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基，較佳為苯基或吡啶基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6烷胺基和鹵C_1-6烷胺基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、-OR^a、-CHR^aR^b和-NR^aR；

R^a和R^b各自獨立地選自氫、氘原子、羥基、C_1-6烷基和C_3-8環烷基，其中該烷基、雜環基和環烷基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氘原子、氰基、胺基和羥基的取代基取代；

n選自0、1、2、3、4和5；

X³為N，X¹和X²各自獨立地為CR^c，該R^c為氫原子；

s和t各自獨立地視需要自0和1；

p為1；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基和C_1-6烷基；

q為1；

W不存在；

Y²為C且Y³為C；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；且

m選自0、1、2、3、4。

在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽，

其中：

R¹選自氫原子、C_1-6烷基、鹵烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基，較佳為苯基或吡啶基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、-OR^a、-CHR^aR^b和-NR^aR^b；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

m選自0、1、2、3和4；

n選自1、2、3和4。

本發明中，當Y¹為一個鍵時，由於圍繞該鍵的旋轉受到限制，因此本發明提供的化合物可為阻轉異構體的混合物存在，其對映體過量在0-98%之間。當化合物是純的阻轉異構體時，每個手性中心的立體化學可以由aR或aS指定，這些名稱也可用於富含一種阻轉異構體的混合物。可以藉由手性色譜法分離出aR和aS阻轉異構體。

在Eliel,E.L.& Wilen,S.H.'Stereochemistry of Organic Compounds' John Wiley and Sons,Inc.1994中可以找到對阻轉異構和軸向手性的進一步描述。

本發明典型的通式(I)的化合物，包括但不限於：

其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽。

本發明提供一種製備通式(I)所示化合物的方法，其中式(I)化合物為通式(I-A)所示化合物或者通式(I-B)所示化合物，其特徵在於

式(I-2)所示的化合物與式(I-3)所示化合物在鹼性條件下，在催化劑存在下經Suzuki偶聯，得到式(I-A)所示化合物，該催化劑選自鈀/碳、雷尼鎳、四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀、三(二亞苄基丙酮)二鈀或2- 雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯，較佳為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀和2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯；或者

式(I-2)所示的化合物與式(I-4)所示化合物在鹼性條件下，經C-S偶聯，得到式(I-B)所示化合物；

該提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；

B(OR)₂為硼酸酯或硼酸；包括但不限於4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷)、聯硼酸新戊二醇酯、B(OBu-n)3或B(OPr-i)3；

Z選自鹵素或磺醯基；

R¹、X¹、X²、X³、R³、R⁴和R⁵如上述通式(I)中所定義。

為了完成本發明的目的，本發明可採用如下合成方案：

通式(I-1)所示化合物經胺化得到式(I-2)所示的化合物，其中Z和Z’各自獨立的選自鹵素和磺醯基，其他取代基如前述實施方案定義，本發明合成方案的反應溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

本發明提供一種製備通式(II)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽的方法，其中式(II)化合物為通式(II-A)所示化合物或者通式(II-B)，包括以下步驟：

式(II-7)所示的化合物和式(II-8)所示化合物在鹼性條件下，在催化劑存在下經Suzuki偶聯，得到式(II-A)所示化合物；

或者式(II-7)所示的化合物與式(II-9)所示化合物在鹼性條件下，經C-S偶聯，得到式(II-B)所示化合物；

該催化劑選自鈀/碳、雷尼鎳、四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀、三(二亞苄基丙酮)二鈀或2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯，較佳為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀和2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯；

Z選自鹵素、磺醯基或亞磺醯基；

環A、環B、R¹、R³、R⁸、B、m和n如上述通式(II)中定義。

本發明提供的製備通式(II)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽的方法，進一步包括通式(II-5)所示的化合物和式(II-6)所示化合物在鹼性條件下反應，得到通式(II-7)所示化合物的步驟，

該提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉或第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰。

Z、R¹、R⁸、環B和m如通式(II)中定義。

視需要的，本發明提供的製備通式(II)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽的方法，進一步包括如下步驟：

1)通式(II-1)所示的化合物和(II-2)所示化合物在鹼性條件下反應，得到通式(II-3)所示化合物；2)通式(II-3)所示化合物在正丁基鋰條件下分子內環化反應，得到式(II-4)所示化合物；通式(II-4)所示化合物手性選擇性還原胺化，並脫去胺基保護基團，得到式(II-5)所示化合物；該提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉或第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰，

Z、R⁸、環B和m如通式(II)中定義。

本發明提供一種如式(I-2)所示的化合物或其可藥用鹽，

其中R¹、X¹、X²、X³、R⁴和R⁵如通式(I)中所定義；

Z選自鹵素或磺醯基。

本發明提供一種如式(I-1)所示的化合物或其可藥用鹽

其中R¹、X¹、X²、X³如通式(I)中所定義；

Z和Z’各自獨立地選自鹵素和磺醯基。

本發明提供一種經式(I-2)所示的化合物或其可藥用鹽、式(I-1)的化合物或其可藥用鹽製備(I)所示的化合物的方法。

本發明的另一方面涉及一種醫藥組成物，其含有治療有效劑量的通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，本發明中治療有效量的劑量可選0.1-2000mg。本發明還涉及一種製備該醫藥組成物的方法，其包括將通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，或通式(II)所示的化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用的鹽與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑相混合。

本發明進一步涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備SHP2抑制劑中的用途。

本發明進一步涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備由SHP2活性介導的疾病或病症的用途。

本發明進一步涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在作為SHP2抑制劑在製備用於預防和/或治療腫瘤或癌症的藥物中的用途。

本發明進一步涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物在製備預防或者治療努南綜合症、豹皮綜合症、幼年性骨髓單核細胞白血病、神經母細胞瘤、黑色素瘤、急性骨髓性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、結腸癌、頭癌、胰腺癌、頭和頸鱗狀細胞癌、胃癌、肝癌、間變性大細胞淋巴瘤或成膠質細胞瘤藥物中的用途。

本發明進一步涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其用作藥物。

本發明還涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其作為SHP2抑制劑。

本發明還涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其作為SHP2抑制劑用於預防和/或治療腫瘤或癌症。

本發明還涉及通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用鹽，或包含其的醫藥組成物，其預防或者治療努南綜合症、豹皮綜合症、幼年性骨髓單核細胞白血病、神經母細胞瘤、黑色素瘤、急性骨髓性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、結腸癌、頭癌、胰腺癌、頭和頸鱗狀細胞癌、胃癌、肝癌、間變性大細胞淋巴瘤或成膠質細胞瘤。

本發明還涉及一種治療預防和/或治療腫瘤或癌症的方法，其包括向需要其的患者施用治療有效劑量的作為SHP2抑制劑的通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽。

本發明還涉及一種預防或者治療努南綜合症、豹皮綜合症、幼年性骨髓單核細胞白血病、神經母細胞瘤、黑色素瘤、急性骨髓性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、結腸癌、頭癌、胰腺癌、頭和頸鱗狀細胞癌、胃癌、肝癌、間變性大細胞淋巴瘤或成膠質細胞瘤的方法，其包括向需要其的患者施用治療有效劑量的作為SHP2抑制劑的通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式，或其可藥用鹽。

含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑。可按照本領域任何已知製備醫藥組成物的方法製備口服組合物，此類組成物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用製劑。片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。這些賦形劑可以是惰性賦形劑，造粒劑、崩解劑，粘合劑，和潤滑劑。這些片劑可以不包衣或可藉由掩蓋藥物的味道或在胃腸道中延遲崩解和吸收，因而在較長時間內提供緩釋作用的已知技術將其包衣。

也可用其中活性成分與惰性固體稀釋劑或其中活性成分與水溶性載體或油溶媒混合的軟明膠膠囊提供口服製劑。

水懸浮液含有活性物質和用於混合的適宜製備水懸浮液的賦形劑。此類賦形劑是懸浮劑，分散劑或濕潤劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。

油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油，或礦物油配製而成。油懸浮液可含有增稠劑。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。可藉由加入抗氧化劑保存這些組合物。

本發明的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。油相可以是植物油，或礦物油或其混合物。適宜的乳化劑可以是天然產生的磷脂，乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑。此類製劑也可含有緩和劑、防腐劑、著色劑和抗氧劑。

本發明的醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本發明化合物恆定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恆定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。

本發明的醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。為此目的，可使用任何調和固定油。此外，脂肪酸也可以製備注射劑。

可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本發明化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。

如本領域技術人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於多種因素，包括但並非限定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。

發明的詳細說明

除非有相反陳述，在說明書和權利要求書中使用的術語具有下述含義。

術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子的烷基，更佳含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、羧基和羧酸酯基。

術語“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳包含3至12個碳原子，更佳包含3至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。

術語“螺環烷基”指5至20員的單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實例包括：

術語“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)_m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包含3至12個環原子，其中1~4個是雜原子；最佳包含3至8個環原子，其中1~3是雜原子；最佳包含3至6個環原子，其中1~2是雜原子。單環雜環基的非限制性實例包括吖丁啶基、吡咯烷基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、二氫咪唑基、二氫呋喃基、二氫吡唑基、二氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基、吡喃基等，較佳吖丁啶、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。

該雜環基環可以稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，其非限制性實例包括：

和

等。

術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至10員，例如苯基和萘基。更較佳苯基。該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基或羧酸酯基。

術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員，含1至3個雜原子；更佳為5員或6員，含1至2個雜原子；較佳例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，較佳為咪唑基、四唑基、吡啶基、噻吩基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有選吡啶基。該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

雜芳基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基和羧酸酯基。

術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。

術語“鹵烷基”指被一個或多個鹵素取代的烷基，其中烷基如上所定義。

術語“鹵烷氧基”指被一個或多個鹵素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定義。

術語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基如上所定義。

術語“烷胺基”指被一個或兩個烷基取代的胺基，其中烷基如上所定義。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。

術語“胺基”指-NH₂。

術語“氰基”指-CN。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“側氧基”指=O。

術語“羰基”指C=O。

術語“羧基”指-C(O)OH。

術語“硫基”指-S-。

術語“巰基”指-SH。

“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。

“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。

“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

“可藥用鹽”是指本發明化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時具有安全性和有效性，且具有應有的生物活性。

以下結合實施例進一步描述本發明，但這些實施例並非限制著本發明的範圍。

實施例

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d ₆)，氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用Shimadzu 2010 Mass Spectrometer或Agilent 6110A MSD質譜儀。

HPLC的測定使用Shimadzu LC-20A systems、Shimadzu LC-2010HT series或安捷倫Agilent 1200 LC高壓液相色譜儀(Ultimate XB-C18 3.0*150mm色譜管柱或Xtimate C18 2.1*30mm色譜管柱)。

手性HPLC分析測定使用Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D., 3um、Chiralpak AS-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralpak AS-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OD-3 150×4.6mm I.D.,3um、Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D.,3μm、ChiralCel OJ-H 150×4.6mm I.D.,5um、Chiralcel OJ-3 150×4.6mm I.D.,3um色譜管柱；

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。

管柱層析一般使用煙臺黃海矽膠100~200目、200~300目或300~400目矽膠為載體。

手性製備管柱使用DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,10um)或Phenomenex-Amylose-1(250mm*30mm,5um)。

CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf150(TELEDYNE ISCO)。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。

本發明的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，重複操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。

實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，C：石油醚/乙酸乙酯體系，D：石油醚/乙酸乙酯/甲醇，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。

實施例1

(R)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

第一步

5-溴-2，4-二氯-6-甲基嘧啶1b

將5-溴-6-甲基嘧啶-2,4-二醇1a(1.5g,7.32mmol)溶於8mL三氯氧磷中，加入0.3mL N,N-二甲基甲醯胺，升溫至115℃攪拌反應4小時。反應結束後將反應液減壓濃縮，加入20mL冰水混合物中，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(5mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物1b(950mg，產率：54%)。

MS(ESI)m/z 242.8[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 2.72(s,3H)。

第二步

5-溴-2-氯-N-(2,2-二甲氧基乙基)-6-甲基吡啶-4-胺1d

將化合物1b(940mg，3.89mmol)和2,2-二甲氧基乙胺1c(817mg,7.77mmol)溶於15mL乙醇中，在0℃下加入1.1mL三乙胺(785mg,7.77mmol)，室溫攪拌12小時。反應結束後將反應液減壓濃縮，加入水，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠管柱色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到白色固體標題化合物1d(790mg，產率：65%)。

MS(ESI)m/z 311.8[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 5.82(s,1H),4.49(t,J=4.8Hz,1H),3.66(t,J=5.6Hz,2H),3.45(s,6H),2.48(s,3H)。

第三步

8-溴-7-咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-醇1e

將化合物1d(780mg,2.51mmol)溶於8mL濃硫酸中，65℃條件下反應2小時。反應結束後，加入100mL冰水混合物，加入飽和氫氧化鈉溶液至pH=6，用二氯甲烷和異丙醇混合溶劑萃取(50mL×3，體積比3：1)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物1e(560mg，產率：92%)。

MS(ESI)m/z 227.9,229.9[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 7.81(d,J=1.6Hz,1H),7.36(d,J=1.6Hz,1H),2.43(s,3H)。

第四步

8-溴-5-氯-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶1f

向化合物1e(300mg，1.32mmol)與三氯氧磷(7.58g)的懸浮液中加入N，N-二異丙基乙胺(5.6mL,5.57mmol)，110℃下反應3小時。將反應結束後將反應液減壓濃縮，加入50mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(200mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物1f(210mg，產率：36%)。

MS(ESI)m/z 247.9[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 8.10(s,1H),7.75(s,1H),2.56(s,3H)。

第五步

(R)-N-(R)-8-(8-溴-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺1h

將化合物1f(180mg，0.73mmol)、(R)-2-甲基-N-((R)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)丙烷-2-磺醯胺1g(268mg,0.73mmol，採用專利申請“WO2016203406 A1”公開的方法製備而得)和N，N-二異丙基乙胺(0.36 mL,2.19mmol)溶於5mL二甲基亞碸中，90℃下反應30分鐘。反應結束後加入20mL乙酸乙酯和40mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到白色固體標題化合物1h(200mg，產率：56%)。

MS(ESI)m/z 468.0,470.0[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 7.77(d,J=1.6Hz,1H),7.54(d,J=1.6Hz,1H),5.02(d,J=8.4Hz,1H),3.84-3.77(m,2H),3.37-3.33(m,1H),3.17-3.03(m,2H),2.55(s,3H),2.21-2.15(m,1H),2.09-1.89(m,3H),1.81-1.64(m,3H),1.62-1.54(m,1H),1.53-1.39(m,2H),1.26(s,9H)。

第六步

(R)-N-((R)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)-2-甲基丙烷-2-磺醯胺1j

氮氣氛下，依次將化合物1h(170mg，0.36mmol)、2，3-二氯苯硼酸1i(138mg，0.73mmol)、碳酸銫(355mg,1.09mmol)、四三苯基膦鈀(42mg,0.036mmol)溶於2mL甲苯和2mL乙醇的混合溶液中。120℃條件下反應1小時。反應液冷卻至室溫，加入10mL乙酸乙酯和10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到黃色油狀標題化合物1j(37mg，產率：19%)。

MS(ESI)m/z 534.4[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 7.83-7.25(m,5H),3.92-3.75(m,2H),3.22-2.95(m,2H),2.18(s,3H),2.11-1.18(m,20H)。

第七步

(R)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺1

將化合物1j(25mg，0.047mmol)溶於2mL 1,4-二噁烷中，在0℃下加入1mL 4M的氯化氫1,4-二噁烷溶液，室溫下攪拌反應30分鐘。向反應液中加入10mL乙酸乙酯，過濾，用乙酸乙酯洗滌(10mL×3)，所得固體溶於10mL水中，加入飽和碳酸氫鈉至pH=9.用氯仿萃取(20mL×2)，用飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)和飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，得到標題化合物1(9.3mg，產率：42%)。

MS(ESI)m/z 430.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 7.70-7.62(m,2H),7.47-7.39(m,2H),7.31(d,J=1.6Hz,1H),3.97-3.81(m,2H),3.29-3.18(m,2H),3.11-3.04(m,1H),2.19(s,3H),2.17-2.10(m,1H),2.06-1.90(m,3H),1.88-1.82(m,1H),1.81-1.70(m,2H),1.66-1.50(m,3H)。

實施例2

(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

第一步

(3S,4S)-8-(8-溴-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺2b

將化合物1f(150mg,0.53mmol)、(3S,4S)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺2a(154mg,0.63mmol，採用專利申請“WO2015107495 A1”公開的方法製備而得)和N，N-二異丙基乙胺(31mg,1.06mmol)溶於3mL二甲基亞碸中，90℃下反應1小時。反應結束後加入15mL乙酸乙酯和30mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(10mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到黃色固體標題化合物2b(150mg，產率：75%)。

MS(ESI)m/z 380.1,382.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.59(s,1H),7.42(s,1H),4.23-4.16(m,1H),3.83(d,J=8.8Hz,1H),3.72(d,J=8.8Hz,1H),3.64-3.55(m,2H),3.30-3.22(m,1H),3.20-3.14(m,1H),3.04(d,J=4.4Hz,1H),2.57(s,3H),2.03-1.98(m,1H),1.93-1.86(m,1H),1.84-1.74(m,2H),1.26(d,J=6.4Hz,3H)。

第二步

(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺2

氮氣氛下，依次將化合物2b(50mg,0.131mmol)、2，3-二氯苯硼酸1i(30mg,0.158mmol)、磷酸鉀(55.6mg,0.262mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(5.95mg,0.007mmol)和2-二環己基膦-2’,6’-二甲氧基聯苯混懸於1mL 1,4-二噁烷溶液中。100℃條件下反應1小時。反應液冷卻至室溫，加入5mL乙酸乙酯和4mL水，用乙酸乙酯萃取(8mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(8mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以乙酸乙酯、甲醇和氨水沖提純化，得到標題化合物2(9.7mg，產率：16%)。

MS(ESI)m/z 446.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.57-7.50(m,2H),7.41(d,J=1.2Hz,1H),7.32(t,J=7.6Hz,1H),7.28(d,J=1.6Hz,1H),4.25-4.19(m,1H),3.86(d,J=8.8Hz,1H),3.76(d,J=8.8Hz,1H),3.72-3.63(m,2H),3.40-3.18(m,2H),3.07(d,J=4.8Hz,1H),2.23(s,3H),2.10-2.01(m,1H),1.98-1.77(m,3H),1.27(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例3

a(R)-(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺阻轉異構體1

實施例4

a(S)-(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺阻轉異構體2

將實施例2(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺(17mg)藉由手性管柱(DAICEL CHIRALPAK IC(250mm*30mm,10um)超臨界流體色譜法拆分(流動相：45% EtOH+0.1%NH₃H₂O/55% scCO₂，流速80ml/min)，第一個沖提峰分離得到5.2mg，d.e.98.91%。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.72-7.60(m,2H),7.47-7.39(m,2H),7.34-7.25(m,1H),4.95-4.91(m,1H),4.42-4.23(m,1H),3.96-3.88(m,1H),3.80-3.68(m,2H),3.55-3.42(m,1H),3.30-3.07(m,2H),2.18(s,3H),2.05-1.95(m,2H),1.89-1.72(m,2H),1.5(d,J=6.8Hz,3H)。手性分析方法為Chiralpak IC-3 100 7.47-7.39(m,2H)流動相為A-超臨界二氧化碳，B-EtOH+0.05% DEA，流速2.8ml/min，等度40% B。保留時間(RT)1.495min。

第二個沖提峰分離得到4.4mg，d.e.99.33%。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 7.72-7.60(m,2H),7.46-7.39(m,2H),7.32-7.28(m,1H),5.01-4.90(m,1H),4.45-4.23(m,1H),3.97-3.87(m,1H),3.80-3.65(m,2H),3.55-3.44(m,1H),3.27-3.07(m,2H),2.18(s,3H),2.05-1.94(m,2H),1.87-1.70(m,2H),1.25(d,J=6.8Hz,3H)。手性分析方法為Chiralpak IC-3 100 7.46-7.39(m,2H)流動相為A-超臨界二氧化碳，B-EtOH+0.05% DEA，流速2.8ml/min，等度40% B。保留時間(RT)2.716min。

實施例5

(R)-8-(8-(2,3-二氯吡啶-4-基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例5的合成步驟參見實施例1，其中以化合物(2,3-二氯吡啶-4-基)硼酸替換化合物1i。

MS(ESI)m/z 431.0[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.42(d,J=4.8Hz,1H),7.72(d,J=2.0Hz,1H),7.46(d,J=1.6Hz,1H),7.42(d,J=4.8Hz,1H),3.97-3.84(m,2H),3.29-3.15(m,2H),2.89(t,J=7.2Hz,1H),2.22(s,3H),2.13-2.04(m,1H),2.01-1.87(m,3H),1.83-1.74(m,1H),1.73-1.67(m,1H),1.66-1.58(m,1H),1.55-1.41(m,3H)。

實施例6

(R)-8-(8-(3-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例6的合成步驟參見實施例1，其中以化合物(3-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)硼酸替換化合物1i。

MS(ESI)m/z 427.2[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.16(d,J=5.2Hz,1H),7.69(s,1H),7.45(s,1H),6.95(d,J=5.2Hz,1H),4.06(s,3H),3.94-3.82(m,2H),3.27-3.16(m,2H),3.01(t,J=7.2Hz,1H),2.21(s,3H),2.16-2.08(m,1H),2.00-1.91(m,2H),1.88-1.77(m,2H),1.74-1.64(m,2H),1.62-1.45(m,3H)。

實施例7

(R)-8-(8-(2-氯-4-(二氟甲氧基)苯基-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例7的合成步驟參見實施例1，其中以化合物(2-氯-4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸替換化合物1i。

MS(ESI)m/z 462.2[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 7.68(d,J=1.2Hz,1H),7.44(d,J=1.2Hz,1H),7.24(dd,J=2.0,8.4Hz,1H),6.97(t,J=73.6Hz,1H),3.90-3.80(m,2H),3.26-3.13(m,2H),2.92-2.88(m,1H),2.19(s,3H),2.10-1.95(m,2H),1.95-1.87(m,2H),1.84-1.75(m,1H),1.74-1.68(m,1H),1.66-1.58(m,1H),1.56-1.41(m,3H)。

實施例8

(S)-1'-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺

第一步

1-氧雜-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸第三丁酯8c

氮氣氛下，將化合物8a(10g，75.66mmol)溶於DMF(300mL)，在10℃下加入氫化鈉(60%煤油混合物，9.1g，226.98mmol)。反應體系於室溫條件下攪拌30分鐘。再加入化合物二(2-氯乙基)胺基甲酸第三丁基酯8b(18.3g，75.66mmol)和氫化鈉(22.6g，151.32mmol)，室溫條件下反應1小時，再加熱至50℃繼續反應12小時。反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(50mL)，乙酸乙酯(200mL)萃取。合併有機相，水(80mL×2)和飽和氯化鈉(80mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到棕色固體化合物8c(1.9g，產率：8.34%)。

MS(ESI)m/z 246.0[M+H-56]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 7.78(d,J=8.0Hz,1H),7.62(t,J=7.2Hz,1H),7.48(d,J=7.2Hz,1H),7.40(t,J=7.2Hz,1H),4.15-4.13 (m,2H),3.08(s,2H),3.05-2.99(m,2H),1.92(dt,J=4.4Hz,J=13.2Hz,2H),1.49(s,9H),1.40-1.35(m,2H)。

第二步

(S)-1-((S)-第三丁基亞磺醯胺基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸第三丁酯8e

將化合物8c(1.60g，5.31mmol)溶於無水甲苯(20mL)並加入四乙氧基鈦(2.42g，10.62mmol)，室溫條件下攪拌20分鐘。再將化合物(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺8d(965mg，7.96mmol)加入反應體系，90℃條件下反應15小時。冷卻至0℃並加入硼氫化鋰(139mg，6.37mmol)繼續反應30分鐘。反應完成後在0℃下逐滴滴加甲醇(8mL)。再加入水(20mL)和乙酸乙酯(30mL)並攪拌5分鐘。矽藻土濾去懸浮物並用乙酸乙酯洗滌(50mL)。乙酸乙酯萃取(70mL×2)，合併有機相，飽和氯化鈉(30mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體化合物8e(530mg，產率：24.5%)。

MS(ESI)m/z 307.2[M+H-Boc]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 7.31(d,J=5.6Hz,1H),7.22-7.18(m,3H),5.56(d,J=8.0Hz,1H),4.48(d,J=10.4Hz,1H),4.02-3.97(m,1H),3.13(d,J=15.6Hz,1H),3.08-2.95(m,2H),2.73(d,J=16.0Hz,1H),2.05-1.96(m,1H),1.73-1.72(m,1H),1.54-1.52(m,1H),1.46(s,9H),1.31(s,9H)。

第三步

(S)-N-((S)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺8f

將化合物8e(460mg，1.13mmol)溶於二氯甲烷(5mL)，0℃條件下加入三氟乙酸(1mL)，室溫條件下攪拌1小時。減壓濃縮得到粗產品，加入飽和碳酸氫鈉水溶液至pH=7-8。二氯甲烷萃取(10mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(8mL)，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到黃色油狀化合物8f(230mg，產率：66%)。

MS(ESI)m/z 307.2[M+H]⁺

第四步

(S)-N-((S)-1'-(8-溴-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺8g

氮氣氛下，將化合物8f(123mg，0.50mmol)和化合物1f(230mg，0.75mmol)溶於二甲基亞碸(3mL)，加入二異丙基乙基胺(129mg，1.0mmol)，90℃條件下攪拌1小時。加入乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL×2)，合併有機相，水(8mL×2)和飽和氯化鈉溶液洗滌(8mL×2)，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產物，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化得到白色固體化合物8g(250mg，產率：97%)

MS(ESI)m/z 516.1,518.1[M+H]⁺

第五步

(S)-N-((S)-1'-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺8h

氮氣氛下，將化合物8g(100mg，0.19mmol)和化合物1i(55.3mg，0.29mmol)溶於1,4-二噁烷(2mL)，室溫條件下加入碳酸鉀(161mg，0.76mmol)。加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(8.7mg，0.0095mmol)和2-二環己基膦-2’,6’-二甲氧基聯苯(7.8mg，0.019mmol)，100℃條件下加熱攪拌1小時。加入乙酸乙酯(10mL)和水(8mL)，乙酸乙酯萃取(8mL×2)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(5mL)，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產物，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化得到黃色固體化合物8h(15mg，產率：13.5%)。

MS(ESI)m/z 582.3[M+H]⁺

第六步

(S)-1'-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺8

將化合物8h(15mg，0.026mmol)溶於二氯甲烷(2mL)與甲醇(0.2mL)中，0℃條件下加入氯化氫的1,4-二噁烷溶液(0.5mL，4N)，室溫反應20分鐘。減壓濃縮，飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7-8。二氯甲烷萃取(8mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(5mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到化合物8(6.3mg，產率：50.7%)。

MS(ESI)m/z 478.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 7.72(s,1H),7.65(d,J=8Hz,1H),7.45-7.41(m,3H),7.32-7.24(m,4H),4.97-4.95(m,1H),4.86-4.85(m,1H),4.13(s,1H),3.91-3.88(m,2H),3.20(d,J=8Hz,1H),2.93(d,J=8Hz,1H),2.20(s,3H),2.09-2.06(m,2H),1.72(d,J=13.6Hz,1H),1.62(d,J=13.6Hz,1H)。

實施例9

(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

第一步

5-溴-2-氯-4-肼基-6-甲基嘧啶9a

將化合物1b(3.0g，12.40mmol)溶於乙醇(30mL)中，並加入水合肼(1.86g,37.21mmol)。室溫條件下攪拌4h，過濾，濾餅用乙醇(10mL×3)洗滌。所得固體真空乾燥得到黃色固體化合物9a(2.8g，產率：95%)。

MS(ESI)m/z 236.7,238.7[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d ₄)δ 2.43(s,3H)。

第二步

8-溴-5-氯-7-甲基-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶9b

將化合物9a(1.4g,5.90mmol)溶於原甲酸三甲酯(20mL)，100℃條件下反應2小時。反應結束後真空濃縮得到粗產品(1.4g)，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化得到白色固體化合物9b(330mg，產率：23%)。

MS(ESI)m/z 246.4,248.4[M+H]⁺

第三步

(3S,4S)-8-(8-溴-7-甲基-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺9c

將化合物9b(120mg，0.48mmol)和DIEA(310mg，2.40mmol)溶於DMSO(4.0mL)，加入化合物2a(140mg，0.58mmol)，90℃條件下持續反應1小時。反應完成後加入水(50mL)，乙酸乙酯萃取(25mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，所得殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化得到黃色固體化合物9c(110mg，產率：60%)。

MS(ESI)m/z 381.1,383.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.69(s,1H),4.21-4.15(m,1H),3.82(d,J=8.8Hz,1H),3.75-3.62(m,3H),3.44-3.25(m,2H),3.04(d,J=4.4Hz,1H),2.53(s,3H),2.10-1.98(m,1H),1.95-1.74(m,3H),1.24(d,J=6.0Hz,3H)。

第四步

(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺9

氮氣氛下，將化合物9c(50mg，0.13mmol)，化合物1i(30mg，0.16mmol)和磷酸鉀(55.2mg，0.26mmol)混懸於1,4-二噁烷(2mL)中，再加入2-二環己基膦-2’,6’-二甲氧基-聯苯(S-Phos，5.3mg，0.013mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(Pd2(dba)3，5.5mg，0.006mmol)，10006條件下反應1小時。反應液過濾並將濾液減壓濃縮得到粗產物，殘餘物用矽膠色譜法以乙酸乙酯、甲醇和氨水沖提純化得到化合物9(12.1mg，產率：20.6%)。

MS(ESI)m/z 447.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ 8.70(s,1H),7.57(dd,J=7.6Hz,J=1.6Hz,1H),7.36-7.27(m,2H),4.26-4.18(m,1H),3.89-3.70(m,4H),3.52-3.31(m,2H),3.08(br s,1H),2.23(s,3H),2.11-2.01(m,1H),1.98-1.77(m,3H),1.27(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例10

(3S,4S)-8-(8-(2-氯-6-氟苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

第一步

2-(2-氯-6-氟苯基)-3-羰基丁腈10b

將2-(2-氯-6-氟苯基)乙醯腈10a(2.0g,11.8mmol)溶於3.6mL乙酸乙酯中，加入乙醇鈉(6.8g,11.8mmol)，85℃下攪拌5小時。反應結束後向反應液中加入30mL水，飽和檸檬酸水溶液調節pH至4~5。用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(40mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體化合物10b(2.2g，產率：88%)。

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.42-7.36(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.17-7.11(m,1H),5.18(s,1H),2.43(s,3H)。

第二步

(Z)-2-(2-氯-6-氟苯基)-3-甲氧基丁-2-烯腈10c

氮氣氛下，將化合物10b(2.0g,9.45mmol)溶於30mL四氫呋喃中，加入碳酸鉀(2.61g,18.9mmol)和硫酸二甲酯(1.79mL,18.9mmol)，室溫條件下反應10小時。反應結束後，將反應液濃縮，加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL濃縮，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(40mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色油狀標題化合物10c(2.6g，產率：97%)。

MS(ESI)m/z=225.8[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOH-d4)δ 7.34-7.28(m,1H),7.22-7.15(m,1H),7.14-7.08(m,1H),3.81(s,3H),2.46(s,3H)。

第三步

4-胺基-5-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基嘧啶-2-酚10d

向化合物10c(1.0g,4.4mmol)的乙醇(5mL)溶液中加入乙醇鈉(0.90g,13.3mmol)和脲(0.40g,6.6mmol)，80℃下反應12小時。反應結束後將反應液過濾，向濾液中加入2M鹽酸調節pH=6，二氯甲烷和異丙醇(20mL×3,v/v=3：1)萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到黃色固體化合物10d(0.42g，產率：37%)。

MS(ESI)m/z=254.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOH-d4)δ 7.46-7.54(m,2H),7.24-7.28(m,1H),1.92(s,3H)。

第四步

8-(2-氯-6-氟苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-酚10e

向化合物10d(0.32g，1.3mmol)的DMF(10mL)溶液中加入2-氯乙醛(0.40mL,2.52mmol)，80℃下反應2小時。反應結束後加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(50mL乙酯)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到標題化合物10e(30mg，產率：8%)。

MS(ESI)m/z 277.9[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.77(d,J=1.6Hz,1H),7.58-7.47(m,2H),7.39-7.32(m,1H),7.26(d,J=1.6Hz,1H),6.96(s,1H),2.01(s,3H)。

第五步

5-氯-8-(2-氯-6-氟苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶10f

向化合物10e(30mg，0.11mmol)中加入三氯氧磷(1mL)和DIEA(0.2mL,1.2mmol)，在110℃條件下反應2小時。將反應液減壓濃縮，加入二氯甲烷(50mL)和冰水(100mL)，飽和碳酸氫鈉溶液調節pH=8。用二氯甲烷萃取(50mL 8)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物10f(24mg，產率：75%)。

MS(ESI)m/z 295.8[M+H]⁺

1H NMR：(400MHz,DMSO_d6)δ 8.12(d,J=0.8Hz,1H),7.71(d,J=0.8Hz,1H),7.66-7.60(m,1H),7.58-7.54(m,1H),7.44(t,J=8.8Hz,1H),2.25(s,3H)。

第六步

(3S,4S)-8-(8-(2-氯-6-氟苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺10

將化合物10f(60mg，0.20mol)溶於DMSO(1.5mL)中，加入化合物2a(49mg,0.20mmol)和DIEA(0.1mL,0.61mmol)。反應液於90℃反應30分鐘，反應完成後加入水(40mL)，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠製備板層析法以二氯甲烷和甲醇(0.1%氨水)純化得到得標題化合物10(32mg，產率36.4%)。

MS(ESI)m/z 430.2[M+H]⁺

¹H NMR：TJN180745-173-1C3(400MHz,MeOD_d4)δ 7.69(d,J=1.2Hz,1H),7.52-7.46(m,1H),7.45(d,J=1.2Hz,1H),7.44-7.41(m,1H),7.26-7.20(m,1H),4.31-4.22(m,1H),3.91(d,J=8.8Hz,1H),3.83-3.72(m,3H),3.37-3.31(m,1H),3.28-3.20(m,1H),3.11(d,J=5.2Hz,1H),2.19(s,3H),2.11-1.95(m,2H),1.87-1.76(m,2H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例11

(3S,4S)-8-(8-(2,3-二氯-6-氟苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例11的合成步驟參見實施例10，其中以化合物2-(2,3-二氯-6-氟苯基)乙醯腈替換化合物10a。

MS(ESI)m/z 464.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400Hz,CD₃OD)δ 7.78-7.65(m,2H),7.46(d,J=1.2Hz,1H),7.28(t,J=8.4Hz,1H),4.35-4.19(m,1H),3.91(d,J=8.8Hz,1H),3.87-3.73(m,3H),3.42-3.33(m,1H),3.30-3.19(m,1H),3.12(d,J=4.8Hz,1H),2.20(s,3H),2.11-1.97(m,2H),1.92-1.76(m,2H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例12

(3S,4S)-8-(8-(2-溴-3-氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例12的合成步驟參見實施例10，其中以化合物2-(2-溴-3-氯苯基)乙醯腈替換化合物10a。

MS(ESI)m/z 492.3[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.70(d,J=1.6Hz,1H),7.63(dd,J=1.6Hz,8.0Hz,1H),7.49-7.43(m,2H),7.27(dd,J=1.2Hz,7.6Hz,1H),4.31-4.22(m,1H),3.90(d,J=8.8Hz,1H),3.80-3.71(m,3H),3.37- 3.32(m,1H),3.27-3.19(m,1H),3.10(d,J=4.8Hz,1H),2.17(s,3H),2.07-1.96(m,2H),1.88-1.76(m,2H),1.25(d,J=7.2Hz,3H)。

實施例13

(3S,4S)-3-甲基-8-(7-(三氟甲基)-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

第一步

4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶13b

將2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-酚13a(100mg，0.21mmol)溶於三氯氧磷(20mL)中，氮氣保護，120℃下反應5小時。反應完成後，反應液進行減壓濃縮，得到黃色固體標題化合物13b(4g，粗品)，粗品不進行純化直接用於下一步。

第二步

N-(2,2-二甲氧基乙基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺13c

將化合物13b(4g，17.50mmol)溶於N,N二甲基甲醯胺(10mL)中，加入化合物1c(2.84mL,26.24mmol)和三乙胺(5.31g,52.49mmol)。在6-11℃反應12小時。反應完成後，將反應液倒入40mL水中，用飽和氫氧化鈉水溶液調節pH值到10，用乙酸乙酯(25mL×3)萃取。合併後的有機相，用飽和氯化鈉水溶液(25mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，所得粗品用矽膠色譜法以乙酸乙酯和石油醚沖提純化，得到黃色固體標題化合物13c(1.12g，兩步產率：33%)。

MS(ESI)m/z 298.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 6.52(s,1H),4.54(t,J=5.2Hz,1H),3.59(d,J=5.2Hz,2H),3.40(s,6H),2.50(s,3H)。

第三步

5-溴-N-(2,2-二甲氧基乙基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺13d

將化合物13c(1.02g，3.43mmol)溶於N,N二甲基甲醯胺(15mL)中，加入N-溴代琥珀醯亞胺(0.67g,3.77mmol)。氮氣保護下，在70℃反應1小時。反應完成後，將反應液倒入100mL水中，然後用乙酸乙酯(40mL×3)萃取。合併後的有機相，用飽和氯化鈉水溶液(50mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮得到粗品，用矽膠色譜法以乙酸乙酯和石油醚沖提純化，得到黃色固體標題化合物13d(1.1g，產率：85%)。

MS(ESI)m/z 377.8[M+H+2]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 4.62(t,J=5.2Hz,1H),3.65(d,J=5.6Hz,2H),3.41(s,6H),2.51(s,3H)。

第四步

8-溴-5-(甲硫基)-7-(三氟甲基)咪唑並[1,2-c]嘧啶13e

將化合物13d(1.05g，2.79mmol)溶於濃硫酸(15mL)中，在65℃反應12小時。反應完成後，將反應液用25mL乙酸乙酯稀釋後，倒入100mL的冰水中，用飽和氫氧化鈉溶液調節pH值到11-13。將水相分離出來，用乙酸乙酯(35mL×3)萃取。合併乙酸乙酯相後，用飽和氯化鈉水溶液(25mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，得到黃色固體標題化合物13e(642mg，產率：74%)。

MS(ESI)m/z 313.8[M+H+2]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.01(s,1H),7.87(d,J=1.6Hz,1H),2.85(s,3H)。

第五步

8-溴-5-(甲基亞硫醯基<亞磺醯>)-7-(三氟甲基)咪唑並[1,2-c]嘧啶13f

將化合物13e(290mg，0.93mmol)溶於二氯甲烷(8mL)中，在0-3℃下，加入間氯過氧苯甲酸(481mg,2.79mmol)。在0-3℃下反應2小時。反應完成後，反應液在0-3℃下用25mL飽和亞硫酸氫鈉溶液淬滅，並在此溫度下攪拌10分鐘，用二氯甲烷(25mL×3)萃取。合併後的有機相，依次用飽和碳酸氫鈉溶液(30mL×2)和飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，得到黃色固體標題化合物13f(225mg，產率：74%)。

MS(ESI)m/z 327.7[M+H+2]⁺

第六步

(3S,4S)-8-(8-溴-7-(三氟甲基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺13g

將化合物13f(163mg，0.67mmol)溶於二甲基亞碸(5mL)中，再加入(3S,4S)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺二鹽酸鹽2a(163mg, 0.67mmol)和N,N二異丙基乙胺(260mg,2.01mmol)。在60℃反應2小時。反應完成後，將反應液用30mL水稀釋，再用3/1氯仿異丙醇混合溶劑(30mL×3)萃取。合併後的有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，所得到粗品用矽膠色譜法以甲醇和二氯甲烷沖提純化，得到黃色固體標題化合物13g(115mg，產率：39%)。

MS(ESI)m/z 435.7[M+H+2]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.78(d,J=1.2Hz,1H),7.57(d,J=0.8Hz,1H),4.23-4.17(m,1H),3.84(d,J=9.2Hz,1H),3.74-3.66(m,3H),3.42-3.35(m,1H),3.33-3.27(m,1H),3.06(d,J=4.4Hz,1H),2.09-2.00(m,1H),1.95-1.88(m,1H),1.86-1.78(m,2H),1.26(d,J=6.8Hz,3H)。

第七步

(3S,4S)-3-甲基-8-(7-(三氟甲基)-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺13

將化合物13g(100mg，0.23mmol)和化合物13h(139mg,0.69mmol，採用專利申請“WO2016203405 A1”公開的方法製備而得)溶於二甲基亞碸(5mL)中，再加入N,N二異丙基乙胺(238mg,1.84mmol)。在120℃反應4小時。反應完成後，將反應液用30mL乙酸乙酯稀釋，再用飽和氯化鈉水溶液(20mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，所得殘餘物用製備高效液相色譜分離純化(Welch Xtimate C18 150*30mm*5um；條件：37-67%B(A：水(0.05%氨水),B：乙腈)；流速：25ml/min)，得到標題化合物13(8.9mg，產率：7%)。

MS(ESI)m/z 533.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.44-8.30(m,1H),7.95(d,J=1.2Hz,1H),7.65(d,J=1.2Hz,1H),7.34-7.25(m,2H),4.32-4.19(m,1H),4.07-3.95(m,2H),3.91(d,J=8.8Hz,1H),3.76(d,J=8.8Hz,1H),3.62-3.52(m,1H),3.51-3.42(m,1H),3.09(d,J=4.8Hz,1H),2.10-1.93(m,2H),1.89-1.75(m,2H),1.24(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例14

1-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-胺

第一步

5-溴-2-氯-N-(2,2-二甲氧基乙基)嘧啶-4-胺14b

將5-溴-2,4-二氯嘧啶14a(600mg,2.63mmol)溶於15mL乙醇中，加入2,2-二甲氧基乙胺1c(554mg,5.27mmol)和三乙胺(0.73mL，5.27mmol)，室溫下攪拌12小時。反應結束後將反應液減壓濃縮，加入20mL冰水混合物，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(5mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體化合物14b(710mg，產率：91%)。

MS(ESI)m/z=295.9,297.9[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.14(s,1H),5.77(br s,1H),4.50(t,J=5.2Hz,1H),3.67(t,J=5.2Hz,2H),3.45(s,6H)。

第二步

8-溴-7-咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-醇14c

將化合物14b(700mg,2.36mmol)溶於7mL濃硫酸中，65℃條件下反應2小時。反應結束後，加入100mL冰水混合物，加入飽和氫氧化鈉溶液至pH=6，用二氯甲烷和異丙醇混合溶劑萃取(50mL，體積比3：1)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物14c(330mg，產率：65.3%)。

MS(ESI)m/z=213.7,215.7[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOH-d4)δ 7.88(d,J=1.6Hz,1H),7.51(s,1H),7.43(d,J=1.6Hz,1H)。

第三步

8-溴-5-氯-咪唑並[1,2-c]嘧啶14d

向化合物14c(300mg，1.4mmol)與三氯氧磷(19.25g)的懸浮液中加入N,N-二異丙基乙胺(6.0mL,36.45mmol)，110℃下反應3小時。將反應結束後將反應液減壓濃縮，加入50mL飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(50mL)溶液，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(80mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物14d(230mg，產率：55%)。

MS(ESI)m/z=231.8,233.8[M+H]⁺

第四步

(1-(8-溴咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲酸第三丁酯14f

將化合物14d(220mg，0.95mmol)、(4-甲基哌啶-4-基)甲酸第三丁酯14e(203mg,0.95mmol)，和N,N-二異丙基乙胺(0.47mL,2.84mmol)溶於5mL二甲基亞碸中，90℃下反應1.5小時。反應結束後加入20mL乙酸乙酯和40mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL乙3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到黃色固體標題化合物14f(220mg，產率：54.3%)。

MS(ESI)m/z 409.9[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.88(s,1H),7.66(d,J=1.6Hz,1H),7.49(d,J=1.6Hz,1H),4.45(br s,1H),3.57-3.49(m,2H),3.37-3.27(m,2H),2.26-2.20(m,2H),1.85-1.77(m,2H),1.45(s,12H)。

第五步

(1-(8-((3氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2,c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲酸第三丁酯14h

氮氣氛下，依次將化合物14f(210mg，0.51mmol)、化合物14g(237mg，0.77mmol)、N,N-二異丙基乙胺(0.17mL,1.02mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(23.4mg,0.026mmol)和4,5-雙二苯基膦-99-二甲基氧雜蒽(29.6mg,0.051mmol)溶於6mL 1,4-二噁烷中。在100℃條件下反應15小時後，繼續升溫至120℃條件下反應3小時。將反應液冷卻至室溫，加入10mL乙酸乙酯和10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL乙酯)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮，殘餘物用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體標題化合物14h(25mg，產率：9.9%)。

MS(ESI)m/z 493.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.03(s,1H),7.72(d,J=5.2Hz,1H),7.63(d,J=1.2Hz,1H),7.52(d,J=1.2Hz,1H),6.41(d,J=5.2Hz,1H),4.48(br s,1H),3.78-3.70(m,2H),3.53-3.44(m,2H),2.32-2.25(m,2H),1.88-1.79(m,2H),1.48-1.44(m,12H)。

第六步

1-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-胺14

將化合物14h(25mg，0.051mol)溶於3mL二氯甲烷中，在0℃下加入1mL三氟乙酸。反應液於25℃反應2小時加入飽和碳酸氫鈉至pH=9，用氯仿萃取(20mL×2)，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，收集濾液，濾液減壓濃縮得標題化合物14(3.7mg,產率18.6%)。

MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.04(s,1H),7.72(d,J=5.2Hz,1H),7.62(d,J=1.6Hz,1H),7.51(d,J=1.6Hz,1H),6.43(d,J=5.2Hz,1H),3.71-3.64(m,4H),1.87-1.77(m,2H),1.73-1.66(m,2H),1.30(s,3H)。

實施例15

(R)-8-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例15的合成步驟參見實施例14，其中以化合物1g替換化合物14e。

MS(ESI)m/z 433.1[M+H]+

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.03(s,1H),7.72(d,J=5.2Hz,1H),7.62(s,1H),7.53(s,1H),6.43(d,J=4.4Hz,1H),4.02-3.91(m,2H),3.33-3.19(m,2H),2.94(t,J=7.2Hz,1H),2.13-2.00(m,1H),1.92-1.84(m,3H),1.80-1.73(m,1H),1.70-1.65(m,1H),1.51-1.46(m,2H),1.45-1.37(s,2H)。

實施例16

(R)-8-(8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例16的合成步驟參見實施例14，其中以化合物1g替換化合物14e，以化合物13h替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 449.1[M+H]+

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.44(s,1H),7.98(s,1H),7.62(s,1H),7.57-7.47(m,2H),7.25-7.18(m,1H),3.96-3.84(m,2H),3.22(q,J=8.0Hz,2H),2.93(t,J=7.2Hz,1H),2.12-2.00(m,1H),1.92-1.83(m, 3H),1.79-1.74(m,1H),1.66-1.61(m,1H),1.54-1.48(m,2H),1.44-1.38(m,2H)。

實施例17

(3S,4S)-3-甲基-8-(8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例17的合成步驟參見實施例14，其中以化合物2a替換化合物14e，以化合物13h替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 479.0[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.36(d,J=4.4Hz,1H),7.75(d,J=1.2Hz,1H),7.49(d,J=1.6Hz,1H),7.31(dd,J=4.4,8.4Hz,1H),7.24(d,J=8.4Hz,1H),4.30-4.22(m,1H),3.94-3.83(m,3H),3.76(d,J=8.8Hz,1H),3.46-3.38(m,1H),3.37-3.32(m,1H),3.09(d,J=4.8Hz,1H),2.53(s,3H),2.07-1.95(m,2H),1.86-1.76(m,2H),1.24(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例18

(3S,4S)-3-甲基-8-(8-((3-(三氟甲基)吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例18的合成步驟參見實施例14，其中以化合物2a替換化合物13e，以化合物3-(三氟甲基)吡啶-4-硫醇鈉替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 465.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.77-8.63(m,1H),8.36-8.24(m,1H),8.14-8.04(m,1H),7.91-7.80(m,1H),7.61-7.51(m,1H),6.94-6.83(m,1H),4.33-4.20(m,1H),4.00-3.84(m,3H),3.80-3.70(m,1H),3.53-3.35(m,2H),3.14-3.05(m,1H),2.11-1.93(m,2H),1.90-1.74(m,2H),1.24(t,J=6.0Hz,3H)。

實施例19

1-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-胺

第一步

5-溴-2-氯-4-肼基嘧啶19a

將化合物14a(5.0g，22.0mmol)溶於乙醇(55mL)中，加入水合肼(1.4g,26.4mmol)。室溫條件下攪拌4小時後，過濾。濾餅用正己烷 (30mL)洗滌。所得固體真空乾燥得到黃色固體化合物19a(3.4g，產率：69%)。

MS(ESI)m/z 222.9,224.9[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ 9.03(br s,1H),8.15(s,1H),4.62(br s,2H)。

第二步

8-溴-5-氯-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶19b

將化合物19a(3.2g,14.35mmol)溶於原甲酸三甲酯(32mL)中，90℃條件下反應2小時。過濾反應液並將濾液真空濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體標題化合物(840mg，產率：25%)。

MS(ESI)m/z 234.7[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 9.02(s,1H),8.04(s,1H)。

第三步

(1-(8-溴-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲酸第三丁酯19c

將化合物19b(200mg，0.856mmol)、化合物14e(220mg，1.03mmol)和DIEA(221mg，1.71mmol)溶於DMSO(4.0mL)中，28℃條件下反應2小時。0℃條件下緩慢滴加水(150mL)，過濾反應液，並將濾餅真空乾燥得到黃色固體化合物19c(400mg，產率：90%)。

MS(ESI)m/z 410.8,412.8[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 8.76(s,1H),7.82(s,1H),4.46(br s,1H),3.69-3.60(m,2H),3.51-3.39(m,2H),2.32-2.22(m,2H),1.84-1.76(m,2H),1.45(s,12H)。

第四步

(1-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)-[1,2,4]三唑並[4,3-c]吡啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲酸第三丁酯19d

氮氣氛下，向1,4-二噁烷(4mL)中加入化合物19c(200mg，0.486mmol)、化合物14g(108mg，0.583mmol)和DIEA(188mg，1.46mmol)，再加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(44mg，0.048mmol)和4，5-雙二苯基膦-9，9-二甲基氧雜蒽(56mg，0.097mmol)。100℃條件下持續反應16小時。反應完成後加入水(30mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液(30mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體標題化合物19d(129mg，產率：54%)。

MS(ESI)m/z 494.0[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 8.82(s,1H),7.99(s,1H),7.75(d,J=5.6Hz,1H),6.49(d,J=5.6Hz,1H),4.48(s,1H),3.94-3.85(m,2H),3.68-3.59(m,2H),2.38-2.27(m,2H),1.87-1.77(m,2H),1.46(s,12H)。

第五步

1-(8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)-[1,2,4]三唑並[4,3-c]嘧啶-5-基)-4-甲基哌啶-4-胺19

將化合物19d(129mg，0.26mmol)溶於二氯甲烷溶液(3.0mL)中，加入三氟乙酸(1.0mL)，室溫條件下反應1小時。反應完成後用1N NaOH水溶液調節pH至10。氯仿萃取(15mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉(15mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到化合物19(34.5mg，產率：33%)。

MS(ESI)m/z 393.9[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 8.81(s,1H),7.97(s,1H),7.75(d,J=5.6Hz,1H),6.49(d,J=5.6Hz,1H),3.87-3.78(m,4H),1.84-1.77(m,2H),1.69-1.60(m,2H),1.30(s,3H)。

實施例20

(R)-8-(7-胺基-8-(2,3-二氯苯基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

第一步

5-溴-2-(甲硫基)嘧啶-4,6-二胺20a

將化合物20a(10g，64mmol)溶於DMF(100mL)中，加入N-溴琥珀醯亞胺(13.7g,76.8mmol)，在3-7℃下反應12小時。反應完成後加入水500mL，飽和氫氧化鈉溶液12mL調節pH至10。用乙酸乙酯(200 mL×5)萃取，合併有機相，減壓濃縮，粗品殘餘物用矽膠色譜法，以甲醇和二氯乙烷沖提純化得到黃色固體標題化合物20b(12g，產率：80%)。

MS(ESI)m/z 236.7[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 5.12(br s,4H),2.45(s,3H)。

第二步

8-溴-5-(甲硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-7-胺20c

將化合物20b(5.7g，24mmol)溶於DMF(70mL)中，加入2-氯乙醛(7.1g,36mmol)，在80℃下反應2小時。反應完成後加入水500mL，加入飽和氫氧化鈉溶液調節pH至10。用乙酸乙酯(200mL×5)萃取，合併有機相，減壓濃縮，粗品殘餘物用矽膠色譜法，以石油醚和乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體標題化合物20c(3.6g，產率：57%)。

MS(ESI)m/z 260.8[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.45(d,J=1.2Hz,1H),7.35(d,J=1.6Hz,1H),4.81(br s,2H),2.71(s,3H)。

第三步

(8-溴-5-(甲硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-7-基)胺基二甲酸二第三丁基酯20d

將化合物20c(3.8g，15mmol)溶於THF(40mL)中，加入二碳酸二第三丁基酯(9.6g,44mmol)和DMAP(0.34g,2.9mmol)，在20℃下反應12小時。反應完成後加入水100mL，用乙酸乙酯(70mL×3)萃取，合併有機相，減壓濃縮，粗品殘餘物用矽膠色譜法，以石油醚和乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體標題化合物20d(3.2g，產率：48%)。

MS(ESI)m/z 460.9[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.74(d,J=1.6Hz,1H),7.60(d,J=1.6Hz,1H),2.75(s,3H),1.45(s,18H)。

第四步

(8-溴-5-(甲基亞硫醯基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-7-基)胺基二甲酸二第三丁基酯20e

將化合物20d(0.40g，0.87mmol)溶於DCM(10mL)中，加入間氯過氧苯甲酸(0.53g,2.6mmol)，在0℃下反應1小時。反應完成後加入飽和亞硫酸氫鈉水溶液15mL，攪拌15分鐘，加入30mL水，用二氯甲烷(25mL×3)萃取，合併有機相，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)和飽和氯化鈉水溶液(20mL)洗滌，減壓濃縮，得到黃色固標題化合物20e(0.4g，產率：97%)。

MS(ESI)m/z 476.7[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 8.77(d,J=1.2Hz,1H),7.88(d,J=1.2Hz,1H),3.18(s,3H),1.45(s,18H)。

第五步

(8-溴-5-((R)-1-(((R)-第三丁基亞硫醯基)胺基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-7-基)胺基二甲酸二第三丁基酯20g

將化合物20e(1.9g，4.0mmol)和化合物1g(0.58g,2.3mmol)溶於DMSO(20mL)中，加入DIEA(0.87g,6.8mmol)，在50℃下反應2小時。反應完成後加入水50mL，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合併有機相，飽和氯化鈉水溶液(50mL×3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，粗品殘餘物用C-18色譜法，以氨水(10mM)和甲醇沖提純化，得到黃色固體標題化合物20g(1.0g，產率：37%)。

MS(ESI)m/z 669.3[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl3)δ 7.65(s,1H),7.55-7.50(m,1H),3.83-3.64(m,2H),3.41(q,J=6.8Hz,1H),3.25(d,J=6.0Hz,1H),3.16-2.97 (m,2H),2.19-2.04(m,2H),1.92-1.82(m,2H),1.80-1.64(m,4H),1.63-1.53(m,2H),1.45(s,18H),1.25(s,9H)。

第六步

(R)-N-((R)-8-(7-胺基-8-溴咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺20h

將化合物20g(100mg，0.15mmol)溶於DCM(3mL)中，加入TFA(1mL)，在5-8℃下反應1小時。反應完成後減壓濃縮，加入水20mL，飽氫氧化鈉溶液調節pH=13，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，再用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到黃色固體標題化合物20h(37mg，產率：38%)。

MS(ESI)m/z 469.0[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 7.42-7.36(m,1H),7.29-7.27(m,1H),4.68(s,2H),3.79-3.73(m,1H),3.45-3.33(m,1H),3.24(d,J=5.2Hz,1H),3.10-2.97(m,2H),2.19-2.06(m,1H),2.05-1.96(m,1H),1.90-1.65(m,6H),1.48-1.42(m,2H),1.24(s,9H)。

第七步

(R)-N-((R)-8-(7-胺基-8-(2,3-二氯苯基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺20i

氮氣氛下，將化合物20h(100mg，0.21mmol)和2，3-二氯苯硼酸1i(203mg,1.07mmol)溶於二噁烷(4mL)中，加入Pd-118(42mg,0.064mmol)和第三丁醇鈉(82mg,0.85mmol)，在微波中溫度130℃下反應30分鐘。反應完成後減壓濃縮，所得殘餘物用矽膠色譜法以甲醇和二氯乙烷沖提純化，得到黃色標題化合物20i(85mg，產率：43%)。

MS(ESI)m/z 535.0[M+H]⁺

第八步

(R)-8-(7-胺基-8-(2,3-二氯苯基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺20

將化合物20i(80mg,0.085mmol)溶於二噁烷(3mL)中，再加入氯化氫的二噁烷溶液(1mL,4mol/L)，反應液在0-7℃攪拌30分鐘。反應結束後加入水(25mL)，用乙酸乙酯(25mL×3)洗滌。水相用飽和氫氧化鈉溶液調節PH值至8~9，用二氯甲烷(25mL×3)萃取。合併有機相，用飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，硫酸鈉乾燥，過濾。濾液進行減壓濃縮得到粗產品，用製備高效液相色譜分離純化(Phenomenex Gemini-NX 150*30mm*5um；條件：33-63%B(A：水(0.04%氨水+10mM碳酸氫銨)，B：乙腈)；流速：30ml/min)，得到標題化合物20(19.3mg，產率：53%)。

MS(ESI)m/z 431.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.59(dd,J=1.6,8.0Hz,1H),7.42-7.37(m,2H),7.34(dd,J=1.6,8.0Hz,1H),7.18(d,J=2.0Hz,1H),3.92-3.75(m,2H),3.24-3.07(m,2H),2.95(t,I=7.2Hz,1H),2.14-2.03(m,1H),1.97-1.88(m,2H),1.86-1.77(m,2H),1.73-1.63(m,2H),1.55-1.43(m,3H)。

實施例21

(3S,4S)-8-(7-胺基-8-(2,3-二氯苯基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例21的合成步驟參見實施例20，其中以化合物2a替換化合物1g。

MS(ESI)m/z 477.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.60(dd,J=2.0Hz,8.0Hz,1H),7.43(d,J=2.0Hz,1H),7.40(t,J=7.6Hz,1H),7.34(dd,J=2.0Hz,7.6Hz,1H),7.19(d,J=1.6Hz,1H),4.30-4.23(m,1H),3.90(d,J=8.8Hz,1H),3.79-3.70(m,3H),3.28-3.22(m,1H),3.21-3.15(m,1H),3.14-3.10(m,1H),2.09-1.93(m,2H),1.88-1.72(m,2H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例22

(R)-8-(7-胺基-8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

第一步

(R)-N-((R)-8-(7-胺基-8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺22a

將化合物20h(50mg，0.11mmol)和3-氯-2-氟吡啶-4-硫醇酸鈉14g(49mg，0.27mmol)溶於二甲基亞碸(4.0mL)中，加入N,N-二異丙基乙胺(76mg,0.59mmol)。90℃條件下反應20小時。反應完成後，加入乙酸乙酯(20mL)，15mL飽和氯化鈉水溶液洗滌3遍，硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮得到粗品，用矽膠色譜法以二氯甲烷和甲醇沖提純化，得到黃色固體化合物22a(36mg，產率：54%)。

MS(ESI)m/z 552.0[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 7.74(d,J=5.6Hz,1H),7.29(s,1H),7.27(s,1H),6.52(d,J=5.2Hz,1H),5.10(br s,2H),4.05-3.85(m,2H),3.40(q,J=6.8Hz,1H),3.31-3.24(m,1H),3.23-3.07(m,2H),2.14-2.03(m,2H),1.91-1.84(m,2H),1.78-1.56(m,4H),1.52-1.43(m,2H),1.23(s,9H)。

第二步

(R)-8-(7-胺基-8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺22

將化合物22a(33mg，0.052mmol)溶於二噁烷(3.0mL)中，加入鹽酸甲醇(0.5mL)。6-9℃條件下反應0.5小時。反應完成後，加入25mL水，用20mL乙酸乙酯洗滌。水相用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH至8-9，用二氯甲烷(20mL甲烷)萃取。合併有機相，用20mL飽和氯化鈉水溶液洗滌，硫酸鈉乾燥，過濾。濾液減壓濃縮，所得到粗品用製備高效色譜法(Phenomenex Gemini-NX 150*30mm*5um；條件：31-61%B(A：水(0.04%氨水+10mM碳酸氫銨),B：乙腈)；流速：30ml/min)純化，得到標題化合物22(10mg，產率：38%)。

MS(ESI)m/z 448.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 7.75(d,J=5.2Hz,1H),7.33(s,1H),7.29-7.27(m,1H),6.54(d,J=5.6Hz,1H),5.06(br s,2H),4.06-3.83(m,2H),3.28-3.12(m,2H),2.94(t,J=7.2Hz,1H),2.11-1.99(m,1H),1.90-1.82(m,3H),1.79-1.75(m,1H),1.73-1.63(m,2H),1.58-1.52(m,1H),1.49-1.42(m,2H)。

實施例23

(R)-8-(7-胺基-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-8-氮雜螺[4.5]癸烷-1-胺

實施例23的合成步驟參見實施例22，其中以化合物13h化合物14g。

MS(ESI)m/z 464.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.39-8.29(m,1H),7.47(s,1H),7.34(d,J=2.4Hz,2H),7.19(s,1H),3.97(t,J=13.2Hz,2H),3.29-3.16(m,2H),2.94(t,J=7.2Hz,1H),2.15-2.04(m,1H),1.97-1.87(m,2H),1.86-1.75(m,2H),1.75-1.61(m,2H),1.59-1.48(m,2H),1.47-1.39(m,1H)。

實施例24

(3S,4S)-8-(7-胺基-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例24的合成步驟參見實施例22，其中以化合物2a替換化合物1g，以化合物13h替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 480.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.34(t,J=2.8Hz,1H),7.48(d,J=1.6Hz,1H),7.38-7.31(m,2H),7.19(d,J=1.6Hz,1H),4.30-4.19(m,1H),3.88(d,J=8.8Hz,1H),3.87-3.78(m,2H),3.74(d,J=8.8Hz,1H),3.41-3.33(m,1H),3.30-3.23(m,1H),3.07(d,J=5.2Hz,1H),2.04-1.88(m,2H),1.84-1.72(m,2H),1.23(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例25

(3S,4S)-8-(7-胺基-8-((3-氯-2-甲基吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例25的合成步驟參見實施例22，其中以化合物2a替換化合物1g，以化合物3-氯-2-甲基吡啶-4-硫醇鈉替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 460.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.95(d,J=5.6Hz,1H),7.48(s,1H),7.18(d,J=1.6Hz,1H),6.56(d,J=5.2Hz,1H),4.28-4.22(m,1H),3.91-3.81(m,3H),3.78-3.73(m,1H),3.41-3.33(m,1H),3.27-3.11(m,1H),3.10-3.06(m,1H),2.03-1.94(m,2H),1.83-1.74(m,2H),1.24(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例26

(3S,4S)-8-(7-胺基-8-((3-氯-2-氟吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-3-甲基-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-4-胺

實施例26的合成步驟參見實施例22，其中以化合物2a替換化合物1g。

MS(ESI)m/z 464.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.74(d,J=5.6Hz,1H),7.49(d,J=2.0Hz,1H),7.18(d,J=1.2Hz,1H),6.60(d,J=5.2Hz,1H),4.29-4.21(m,1H),3.91-3.81(m,3H),3.75(d,J=8.8Hz,1H),3.43-3.34(m,1H),3.29-3.24(m,1H),3.07(d,J=4.8Hz,1H),2.03-1.91(m,2H),1.85-1.72(m,2H),1.24(d,J=6.4Hz,3H)。

實施例27

(S)-1'-(8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

第一步

(3-溴吡啶-2-基)甲醇27b

將化合物27a(17.2g，79.6mmol)溶於甲醇(50mL)，在0℃下加入硼氫化鈉(15.1g，398mmol)。反應體系於室溫條件下攪拌12小時。反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(600mL)，乙酸乙酯(200mL×3)萃取。合併有機相，飽和氯化鈉(200mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到白色固體化合物27b(9.7g，產率：64.8%)。

MS(ESI)m/z 187.8[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD-d ₄)δ=8.52(d,J=4.8Hz,1H),8.01(dd,J=1.2,8.0Hz,1H),7.26(dd,J=4.4,6.4Hz,1H),4.77(s,2H)。

第二步

3-溴-2-(氯甲基)吡啶27c

將化合物27b(9.70g，51.6mmol)溶於二氯甲烷(20mL)，室溫下加入二氯亞碸(7.48mL，103mmol)。室溫條件下攪拌3小時。反應完成後在0℃下加入飽和碳酸氫鈉水溶液(300mL)，二氯甲烷萃取(80 mL×3)。合併有機相，飽和氯化鈉(100mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粉紅油狀物化合物27c(10.3g，產率：96.9%)。

MS(ESI)m/z 207.7[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ=8.55-8.45(m,1H),8.12-7.99(m,1H),7.37-7.21(m,1H),4.84-4.80(m,2H)。

第三步

4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸1-(第三丁基)酯4-乙基酯27e

氮氣氛下，將化合物27c(9.97g，38.7mmol)溶於四氫呋喃(80mL)中，-78℃條件下逐滴滴加LDA(13.5mL,2M四氫呋喃和正己烷溶液)。滴加完畢後在-78℃下攪拌1小時。再在-78℃下逐滴滴加化合物27d(8.8g,35.07mmol)，並繼續在-78℃條件下攪拌9小時。反應完成後加入飽和氯化銨水溶液(400mL)，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(100mL×2)，無水硫酸鈉乾燥。真空濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色油狀物化合物27e(14.8g，產率：89.4%)。

MS(ESI)m/z 429.0[M+H]⁺

第四步

4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)-1-(第三丁氧羰基)哌啶-4-羧酸27f

將化合物27e(14.8g，34.6mmol)溶於甲醇(3mL)，0℃條件下加入氫氧化鈉水溶液(13.8g,346mmol，溶於40mL水)，80℃條件下攪拌12小時。反應完成後將反應液濃縮，再向其中加入乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)。加入飽和氫氧化鈉水溶液(10mL)調節pH至12，分離水相，並用乙酸乙酯洗滌(80mL×2)。向所得水相中加入2N鹽酸(25mL)調節pH至3，乙酸乙酯萃取(100mL×3)。合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(150mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到白色固體化合物27f(11.4g，產率：82.4%)

MS(ESI)m/z 344.0[M-56+H]⁺

第五步

5-羰基-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸第三丁基酯27g

氮氣氛下，在-15℃條件下將氫化鈉(60%煤油混合物，1.32g，33.1mmol)加入到化合物27f(11.0g，27.6mmol)的四氫呋喃(100mL)中。在-15℃條件下攪拌1小時。再將反應液冷卻到-78℃，逐滴滴加2.5M正丁基鋰的正己烷溶液(16.5mL，41.3mmol)，在-78℃條件下攪拌1小時。反應完成後在0℃下加入飽和氯化銨水溶液(400mL)，乙酸乙酯萃取(100mL×3)。合併有機相，飽和氯化鈉(100mL×2)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。真空濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化，得到白色固體化合物27g(4.60g，產率：55.2%)。

MS(ESI)m/z 246.9[M-56+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ=8.82(dd,J=1.6,4.8Hz,1H),8.12(dd,J=1.6,7.6Hz,1H),7.50(dd,J=4.8,7.6Hz,1H),4.08(td,J=3.6,13.6Hz,2H),3.25(s,2H),3.12(br s,2H),1.88-1.77(m,2H),1.51(br s,2H),1.49(s,9H)。

第六步

(S)-5-((S)-第三丁基亞磺醯胺基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸第三丁基酯27h

氮氣氛下，將鈦酸四乙酯(9.4mL,44.6mmol)加入到化合物27g(4.50g，14.9mmol)的無水甲苯(80mL)中，室溫條件下攪拌10分鐘。再將化合物8d(5.4g，44.6mmol)加入反應液中，120℃條件下反應5小時。冷卻至0℃並加入硼氫化鋰(1.58g，89.2mmol)繼續反應30分鐘後，升溫至室溫攪拌1小時。反應完成後在0℃下逐滴滴加甲醇(20mL)。再加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)並攪拌5分鐘。矽藻土濾去懸浮物並用乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)洗滌。合併有機相，飽和氯化鈉(500mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產品，用矽膠色譜法以石油醚、乙酸乙酯沖提純化，得到黃色固體化合物27h(4.40g，產率：72.6%)。

MS(ESI)m/z 408.1[M+H]⁺

第七步

(S)-N-((S)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺27i

將化合物27g(4.40g，10.8mmol)溶於二氯甲烷(15mL)，0℃條件下加入三氟乙酸(5mL)，0℃條件下攪拌1小時。減壓濃縮得到粗產品，加入4M氫氧化鈉水溶液至pH=11。氯仿和異丙醇(體積比3：1)萃取(30mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到黃色油狀終產物27i(3.32g，產率：100%)。

MS(ESI)m/z 307.9[M+H]⁺

第八步

(S)-N-((S)-1'-(8-溴咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺27j

氮氣氛下，將化合物27i(3.30mg，10.7mmol)和化合物10d(2.50g，10.7mmol)溶於二甲基亞碸(40mL)，加入二異丙基乙基胺(7.7g，59.8mmol)，90℃條件下攪拌2小時。加入乙酸乙酯(50mL)和水(100mL)，乙酸乙酯萃取(50mL×2)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(50 mL×3)，無水硫酸鈉乾燥。減壓濃縮得到粗產物，用矽膠色譜法以二氯甲烷、甲醇沖提純化得到化合物27j(2.96g，產率：54.6%)。

MS(ESI)m/z 503.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ=8.41(d,J=4.8Hz,1H),7.97(s,1H),7.92(d,J=1.5Hz,1H),7.81(d,J=7.5Hz,1H),7.66(d,J=1.5Hz,1H),7.32(dd,J=5.0,7.5Hz,1H),4.61(br s,2H),3.95-3.83(m,2H),3.30-3.21(m,2H),2.99(d,J=16.6Hz,1H),2.40(dt,J=4.0,12.7Hz,1H),2.14(dt,J=3.6,12.4Hz,1H),1.82(br d,J=13.3Hz,1H),1.54(br d,J=12.3Hz,1H),1.36(s,9H)。

第九步

(S)-N-((S)-1'-(8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺27l

氮氣氛下，將化合物27j(70mg，0.14mmol)和化合物27k(33mg，0.21mmol，採用專利申請“WO2016203405 A1”公開的方法製備而得)溶於1,4-二噁烷(1mL)，室溫條件下加入二異丙基乙胺(54mg，0.42mmol)。加入三(二亞苄基丙酮)二鈀(13mg，0.014mmol)和2-二環己基膦-2’,6’-二甲氧基聯苯(14mg，0.028mmol)，110℃條件下加熱攪拌12小時。反應完成後將反應液過濾，所得濾液濃縮，殘餘物用C-18反相色譜法以水、甲醇沖提純化得到棕色油狀化合物27l(45mg，產率：55.1%)。

MS(ESI)m/z 583.1[M+H]⁺

第十步

(S)-1'-(8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺27

將化合物27l(25mg，0.035mmol)溶於1,4-二噁烷中，0℃條件下加入氯化氫的1,4-二噁烷溶液(0.2mL，4N)，2-7℃下反應1小時。反應完成後加入水(30mL)，乙酸乙酯萃取(15mL×2)。合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL)，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮後殘餘物用C-18反相色譜法純化得到化合物27(3.9mg，產率：19.0%)。

MS(ESI)m/z 479.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD-d4)δ=8.38(d,J=4.8Hz,1H),8.06(s,1H),7.90-7.84(m,2H),7.57(s,1H),7.50(d,J=5.2Hz,1H),7.30(dd,J=5.6,7.6Hz,1H),5.90(d,J=6.0Hz,1H),4.16(s,1H),4.06(br d,J=13.6Hz,2H),3.48-3.36(m,2H),3.30-3.24(m,1H),3.01(br d,J=16.4Hz,1H),2.20-2.01(m,2H),1.80-1.71(m,1H),1.61-1.53(m,1H)。

實施例28

(S)-1'-(7-胺基-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例28的合成步驟參見實施例22，其中以化合物27i替換化合物1g，以化合物13h替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 513.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD-d4)δ 8.39-8.31(m,2H),7.85(d,J=7.6Hz,1H),7.51(d,J=1.6Hz,1H),7.40-7.31(m,2H),7.28(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),7.20(d,J=1.2Hz,1H),4.09(s,1H),4.07-3.94(m,2H), 3.42-3.32(m,2H),3.25(d,J=16.4Hz,1H),2.95(d,J=16.8Hz,1H),2.15-2.00(m,2H),1.76-1.66(m,1H),1.59-1.43(m,1H)。

實施例29

(S)-1'-(7-胺基-8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺

實施例29的合成步驟參見實施例22，其中以化合物8f替換化合物1g，以化合物27k替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 493.1[M+H]⁺

¹HNMR：(400MHz,CD₃OD)δ 7.71-7.13(m,7H),5.98(br s,1H),4.16-3.88(m,3H),3.52-3.36(m,2H),3.22-3.09(m,1H),2.95-2.78(m,1H),2.22-1.90(m,2H),1.82-1.40(m,2H)。

實施例30

(S)-1'-(7-胺基-8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺

實施例30的合成步驟參見實施例22，其中以化合物8f替換化合物1g，以化合物13h替換化合物14g。

MS(ESI)m/z 512.2[M+H]⁺

¹HNMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.34(dd,J=1.6,4.0Hz,1H),7.49(d,J=2.0Hz,1H),7.41-7.37(m,1H),7.36-7.31(m,2H),7.25-7.17(m,4H),4.04-3.92(m,3H),3.39-3.33(m,1H),3.31-3.28(m,1H),3.16(d,J=15.6Hz,1H),2.81(d,J=15.6Hz,1H),2.12-1.92(m,2H),1.66(d,J=13.2Hz,1H),1.49(d,J=13.2Hz,1H)。

實施例31

(S)-1'-(8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺

實施例31的合成步驟參見實施例27，其中以化合物8f替換化合物27i，以化合物13h替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 497.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.39(s,1H),8.05(d,J=5.6Hz,1H),7.86(d,J=5.2Hz,1H),7.56(d,J=5.2Hz,1H),7.47-7.30(m,3H),7.28-7.16(m,3H),4.12-3.95(m,3H),3.51-3.37(m,2H),3.19(dd,J=5.2,15.2Hz,1H),2.86(dd,J=5.2,15.2Hz,1H),2.16-1.96(m,2H),1.77-1.66(m,1H),1.62-1.49(m,1H)。

實施例32

(S)-1'-(8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-1,3-二氫螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺

實施例32的合成步驟參見實施例27，其中以化合物8f替換化合物27i。

MS(ESI)m/z 478.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.06(s,1H),7.85(d,J=1.2Hz,1H),7.56(d,J=1.6Hz,1H),7.50(d,J=5.2Hz,1H),7.44-7.40(m,1H),7.28-7.23(m,3H),5.89(d,J=5.6Hz,1H),4.11(s,1H),4.06-4.00(m,2H),3.45-3.38(m,2H),3.20(d,J=16.0Hz,1H),2.92(d,J=16.0Hz,1H),2.08-2.01(m,2H),1.75-1.68(m,1H),1.63-1.57(m,1H)。

實施例33

(S)-1'-(8-(2,3-二氯苯基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例33的合成步驟參見實施例8，其中以化合物27i替換化合物8f。

MS(ESI)m/z 479.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.35(d,J=4.8Hz,1H),7.86(d,J=7.6Hz,1H),7.72(s,1H),7.64(d,J=8.0Hz,1H),7.47-7.39(m,2H),7.35-7.25(m,2H),4.11(s,1H),3.91(d,J=11.2Hz,2H),3.39-3.31(m, 1H),3.29-3.23(m,1H),2.95(d,J=16.4Hz,1H),2.19(s,3H),2.16-2.02(m,2H),1.74(d,J=13.2Hz,1H),1.53(d,J=13.2Hz,1H)。

實施例34

(S)-1'-(8-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例34的合成步驟參見實施例27，其中以化合物13h替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 498.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.39(d,J=4.8Hz,1H),8.36(d,J=4.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.88-7.83(m,1H),7.56(d,J=1.6Hz,1H),7.44(d,J=8.0Hz,1H),7.36-7.26(m,2H),4.11(s,1H),4.08-4.01(m,2H),3.47-3.36(m,2H),3.27(d,J=16.4Hz,1H),2.97(d,J=16.4Hz,1H),2.18-2.02(m,2H),1.75(d,J=12.8Hz,1H),1.53(d,J=14.0Hz,1H)。

實施例35

(S)-1'-(8-((3-氯-2-甲氧基吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例35的合成步驟參見實施例27，其中以化合物3-氯-2-甲氧基吡啶-4-硫醇鈉替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 494.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.38(d,J=4.4Hz,1H),8.06(s,1H),7.90-7.83(m,2H),7.67(d,J=5.6Hz,1H),7.55(d,J=1.2Hz,1H),7.30(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),6.21(d,J=5.2Hz,1H),4.17(s,1H),4.07(br d,J=13.2Hz,2H),3.96(s,3H),3.49-3.38(m,2H),3.26(d,J=16.8Hz,1H),3.01(d,J=16.8Hz,1H),2.17-2.04(m,2H),1.75(d,J=13.6Hz,1H),1.58(d,J=13.6Hz,1H)。

實施例36

(S)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例36的合成步驟參見實施例27，其中以化合物3-氯-2-(環丙基胺基)吡啶-4-硫醇鈉替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 519.3[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD_d4)δ 8.36(d,J=4.4Hz,1H),8.04(s,1H),7.88-7.83(m,2H),7.62(d,J=5.6Hz,1H),7.56(d,J=1.6Hz,1H),7.29(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),5.91(d,J=5.6Hz,1H),4.13-4.00(m,3H),3.50-3.37(m,2H),3.27-3.19(m,1H),2.70-2.63(m,1H),2.18-2.03(m,2H),1.75(br d,J=14.0Hz,1H),1.54(br d,J=13.2Hz,1H),0.82-0.76(m,2H),0.58-0.52(m,2H)。

實施例37

(S)-1'-(8-((3-氟-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例37的合成步驟參見實施例27，其中以化合物3-氟-2-(甲基胺基)吡啶-4-硫醇鈉替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 477.3[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD_d4)δ 8.37(d,J=4.8Hz,1H),8.04(s,1H),7.90-7.82(m,2H),7.57(d,J=1.6Hz,1H),7.47(d,J=5.6Hz,1H),7.30(dd,J=4.8,7.2Hz,1H),5.90(t,J=5.2Hz,1H),4.14(s,1H),4.03(br d,J=13.6Hz,2H),3.47-3.35(m,2H),3.27(d,J=16.8Hz,1H),2.99(d,J=16.8Hz,1H),2.92(s,3H),2.14-2.01(m,2H),1.74(br d,J=13.2Hz 1H),1.55(br d,J=14.0Hz,1H)。

實施例38

(S)-1'-(8-((2-(甲基胺基)吡啶-3-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例38的合成步驟參見實施例27，其中以化合物2-(甲基胺基)吡啶-3-硫醇鈉替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 459.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD_d4)δ 8.34(d,J=4.0Hz,1H),8.04(dd,J=1.6,5.2Hz,1H),7.85-7.74(m,3H),7.64(d,J=1.6Hz,1H),7.54(s,1H),7.27(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),6.58(dd,J=4.8,7.6Hz,1H),4.08(s,1H),3.84(br d,J=13.2Hz,2H),3.30-3.18(m,3H),2.95-2.89(m,4H),2.13-1.98(m,2H),1.69(br d,J=13.6Hz,1H),1.48(br d,J=14.0Hz,1H)。

實施例39

(S)-1-(4-((5-(5-胺基-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-8-基)硫基)-3-氯吡啶-2-基)-3-甲基吖丁啶-3-醇

實施例39的合成步驟參見實施例27，其中以化合物1-(3-氯-4-巰基吡啶-2-基)-3-甲基吖丁啶-3-醇替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 549.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD_d4)δ 8.36(d,J=4.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.88-7.82(m,2H),7.62(d,J=5.2Hz,1H),7.56(d,J=1.6Hz,1H),7.29(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),5.98(d,J=5.6Hz,1H),4.16-4.12(m,2H),4.12-4.02(m,5H),3.50-3.36(m,2H),3.27(br d,J=16.8Hz,1H),2.97(d,J=16.4Hz,1H),2.18-2.02(m,2H),1.75(br d,J=13.2Hz,1H),1.55(s,4H)。

實施例40

實施例40的合成步驟參見實施例27，其中以化合物3-氯-2-嗎啉代吡啶-4-硫醇鈉替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 549.2[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,MeOD_d4)δ 8.36(d,J=5.2Hz,1H),8.07(s,1H),7.83-7.89(m,2H),7.79(d,J=5.2Hz,1H),7.56(s,1H),7.29(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),6.27(d,J=5.6Hz,1H),4.02-4.14(m,3H),3.80-3.88(m,4H),3.32-3.50(m,4H),3.24-3.29(m,3H),2.97(br d,J=16.0Hz,1H),2.04-2.18(m,2H),1.75(br d,J=12.8Hz,1H),1.54(br d,J=12.8Hz,1H)。

實施例41

(S)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

第一步

(S)-N-((S)-1'-(8-溴-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺41a

將化合物27i(260mg，0.85mmol)和化合物1f(271mg,1.10mmol)溶於二甲基亞碸(3mL)，加入二異丙基乙基胺(547mg，4.23mmol)，90℃條件下攪拌1小時。向反應液中加入水(30mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3).合併有機相，再用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液藉由減壓濃縮得到粗產物，用矽膠色譜法以甲醇、二氯甲烷沖提純化得到黃色固體化合物41a(370mg，產率：84.5%)

MS(ESI)m/z 518.8[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.40(d,J=4.8Hz,1H),7.87(d,J=1.2Hz,1H),7.82(d,J=7.6Hz,1H),7.63(d,J=2.0Hz,1H),7.33(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),4.72-4.66(m,1H),3.95-3.84(m,2H),3.31-3.19(m,3H),3.01-2.94(m,1H),2.58(s,3H),2.37(dt,J=4.0,12.8Hz,1H),2.13(dt,J=4.0,12.8Hz,1H),1.80(d,J=12.8Hz,1H),1.52(d,J=14.0Hz,1H),1.34(s,9H)。

第二步

(S)-N-((S)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺41c

將化合物41a(50mg，0.10mmol)，化合物41b(77mg，0.39mmol，採用專利申請“WO2018013597 A1”公開的方法製備而得)和磷酸鉀(41mg,0.19mmol)溶於1,4-二噁烷(1mL)中，在攪拌的情況下，氮氣置換三次。氮氣氛下，快速的加入1,10-菲羅啉(3.5mg,0.02mmol)和碘化亞銅(1.8mg,0.01mmol)，再氮氣置換三次，在130℃條件下加熱攪拌10小時。向反應液加入水(50mL)並用乙酸乙酯萃取(40mL×3)，合併有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(70mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾。濾液藉由減壓濃縮得到粗產物，用矽膠色譜法以二氯甲烷和甲醇沖提純化，得到白色固體化合物41c(36mg，產率：58.5%)。

MS(ESI)m/z 611.1[M+H]⁺

第三步

(S)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺41

將化合物41c(36mg，0.059mmol)溶於乾燥的二噁烷(1mL)，10℃條件下滴加氯化氫的1,4-二噁烷溶液(1mL，4N)，10℃反應15分鐘。向懸濁的反應液中加入水(30mL)，並用乙酸乙酯萃取(30×3)。將水相用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=8，再用氯仿萃取(40mL×4)。將所有有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液進行減壓濃縮得到粗產物。粗產物藉由高效液相色譜法製備純化，得到化合物41(2.3mg，產率：7.7%)。

MS(ESI)m/z 507.3[M+H]⁺

1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ=8.35(d,J=4.4Hz,1H),7.85(d,J=7.6Hz,1H),7.76(d,J=1.6Hz,1H),7.58(d,J=5.6Hz,1H),7.48(d,J=1.6Hz,1H),7.29(dd,J=5.2Hz,7.6Hz,1H),5.75(d,J=6.0Hz,1H),4.12-4.00(m,3H),3.46-3.34(m,2H),3.29-3.23(m,1H),3.01-2.92(m,4H),2.55(s,3H),2.17-2.01(m,2H),1.74(d,J=13.6Hz,1H),1.53(d,J=13.6Hz,1H)。

實施例42

(S)-1'-(8-((2-胺基-3-氯吡啶-4-基)硫基)-7-甲基咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例42的合成步驟參見實施例41，其中以化合物27k化合物41b。

MS(ESI)m/z 493.1[M+H]⁺

¹H NMR：(400MHz,CDCl₃)δ 8.45(d,J=4.4Hz,1H),7.67(d,J=7.6Hz,1H),7.61(d,J=5.2Hz,1H),7.56(d,J=1.2Hz,1H),7.44(d,J=1.2Hz,1H),7.18(dd,J=5.2,7.6Hz,1H),5.86(d,J=5.2Hz,1H),4.89(s,2H),4.11(s,1H),4.05-3.93(m,2H),3.39-3.28(m,2H),3.25(d,J=16.4Hz,1H),2.93(d,J=16.4Hz,1H),2.58(s,3H),2.15-2.06(m,1H),2.05-1.98(m,1H),1.82-1.73(m,1H),1.54-1.45(m,1H)。

實施例43

實施例43的合成步驟參見實施例27，其中以化合物41b替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 493.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ 8.36(d,J=4.8Hz,1H),8.04(s,1H),7.88-7.81(m,2H),7.60-7.52(m,2H),7.29(dd,J=5.2,7.2Hz,1H),5.83(d,J=5.2Hz,1H),4.12(s,1H),4.05(d,J=13.6Hz,2H),3.48-3.36(m,2H),3.29-3.23(m,1H),3.01-2.95(m,1H),2.94(s,3H),2.18-2.03(m,2H),1.74(br d,J=13.2Hz,1H),1.54(br d,J=13.2Hz,1H)。

實施例44

(S)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基胺基)吡啶-4-基)硫基)咪唑並[1,2-c]嘧啶-5-基)-2-甲基-5,7-二氫螺[環戊二烯並[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺

實施例44的合成步驟參見實施例27，其中以化合物3-溴-6-甲基甲基吡啶酸甲基酯替換化合物27a，以化合物41b替換化合物27k。

MS(ESI)m/z 507.2[M+H]⁺

¹HNMR：(400MHz,CD₃OD)δ 8.04(s,1H),7.85(d,J=1.2Hz,1H),7.76(d,J=7.6Hz,1H),7.59-7.55(m,2H),7.18(d,J=8.0Hz,1H),5.83(d,J=5.6Hz,1H),4.15(s,1H),4.12-3.96(m,2H),3.48-3.37(m,2H),3.23(d,J=16.8Hz,1H),2.99(d,J=16.8Hz,1H),2.94(s,3H),2.53(s, 3H),2.14-2.04(m,2H),1.73(br d,J=13.2Hz,1H),1.62(br d,J=13.2Hz,1H)。

生物學評價

以下結合測試例進一步描述解釋本發明，但這些實施例並非意味著限制本發明的範圍。

測試例1、本發明化合物對SHP2野生型體外磷酸酶活性檢測

1、實驗材料及儀器

2、實驗步驟

將0.2nM重組表達的全長SHP2(aa 1-593)，0.5nM帶有雙磷酸化位點的激活型多肽IRS1(序列：H2N-LN(pY)IDLDLY(dPEG8)LST(pY)ASINFQK-醯胺)以及一系列濃度的測試化合物(終濃度為1μM、0.3μM、0.1μM、0.03μM、0.01μM、0.003μM、0.001μM、0.0003μM、0.0001μM、0.00003μM)加入磷酸酶反應液(60mM HEPES,PH 7.50.005% Brij-35,75mM NaCl,75mM KCl,1mM EDTA,5mM DTT)中，室溫振盪(350rpm)30分鐘。再加入終濃度為30μM反應受質DiFMUP室溫反應30分鐘後，用5μL反應終止液(60mM HEPES,pH 7.5，0.2% SDS)終止磷酸酶反應。在螢光讀板儀MD SpectraMax上讀取Ex358nm/Em455螢光值。

化合物的IC₅₀值用四參數logit方法計算. 下列公式中x代表化合物濃度的對數形式；F(x)代表效應值(該濃度條件下細胞增殖的抑制率)：F(x)=((A-D)/(1+((x/C)^B)))+D。A、B、C和D為四個參數。不同的濃度對應不同的抑制率，做出一條反曲線，從曲線上算出抑制劑的IC₅₀。用Primer premier 6.0計算化合物的IC₅₀。

本發明化合物對SHP2體外活性藉由以上的試驗進行測定，選取有口服活性的SHP2抑制劑SHP099和RMC4550作為陽性藥，SHP099化合物結構公開於文獻J.Med.Chem.2016,59,7773-7782中，具體化合物購買自上海皓元生物醫藥科技有限公司。RMC4550化合物結構公開於文獻Nature Cell Biology,2018,20,1064-1073中，具體化合物購買自上海藥明康德新藥開發有限公司。

測得的IC₅₀值見表1。

測試例2、本發明化合物對SHP2突變體E67K和E69K體外磷酸酶活性檢測

1、實驗材料及儀器參見野生型體外酶活檢測

2、實驗步驟

由於SHP2E69K和E76K突變體蛋白本身有不依賴於磷酸化多肽激活的本底酶活，因此同時檢測了在激活型多肽存在與不存在兩種條件下化合物對突變體酶活的抑制。

將0.2nM重組表達的帶有E69K和E76K全長SHP2(aa1-593)(近岸蛋白生產)，分別加或不加0.5nM帶有雙磷酸化位點的激活型多肽IRS1(序列：H2N-LN(pY)IDLDLY(dPEG8)LST(pY)ASINFQK-醯胺)以及一系列濃度的測試化合物(終濃度為1μM、0.3μM、0.1μM、0.03μM、0.01μM、0.003μM、0.001μM、0.0003μM、0.0001μM、0.00003μM)加入磷酸酶反應液(60mM HEPES,PH 7.50.005% Brij-35,75mM NaCl,75mM KCl,1mM EDTA,5mM DTT)中，室溫震盪(350rpm)30分鐘。再加入終濃度為30μM反應受質DiFMUP室溫反應30分鐘後，用5μL反應終止液(60mM HEPES,pH 7.5，0.2% SDS)終止磷酸酶反應。在螢光讀板儀MD SpectraMax上讀取Ex358nm/Em455螢光值。化合物對突變體酶活抑制的IC₅₀值用四參數logit方法計算，方法參考測試例1。

測試例3、KYSE-520細胞內p-ERK的檢測

1、實驗材料及儀器

2、實驗步驟

將處於對數生長期的KYSE-520(南京科佰)細胞種於含有10%FBS的1640培養基(30000細胞/孔)中在96孔板過夜貼壁(5% CO₂，37℃)。然後加入一系列濃度的測試化合物(10μM，3μM，1μM，0.3μM，0.1μM，0.03μM，0.01μM，0.003μM，0.001μM)，在37℃，5%CO₂下作用2小時。然後用細胞裂解液終止細胞培養，用基於均相時間分辨螢光HTRF的方法檢測(Cisbio，64ERKPEG)KYSE-520細胞內磷酸化ERK水平，在兼容的HTRF讀數器(MD SpectraMax)上讀取螢光值(Ex337nm/Em625/665nm)。化合物對細胞內磷酸化ERK抑制的IC₅₀值用四參數logit方法。下列公式中x代表化合物濃度的對數形式；F(x)代表效應值(該濃度條件下細胞增殖的抑制率)：F(x)=((A-D)/(1+((x/C)^B)))+D。A、B、C和D為四個參數。不同的濃度對應不同的抑制率，做出一條反曲線，從曲線上算出抑制劑的IC₅₀。Primer premier 6.0計算化合物的IC₅₀。

測試例4、KYSE-520細胞增殖實驗

1、實驗材料及儀器

2、實驗步驟

將處於對數生長期的KYSE-520細胞在含有10%FBS的1640培養基中在96孔板(600細胞/孔)中過夜貼壁，然後用一系列濃度的測試化合物處理(10μM、3μM、1μM、0.3μM、0.1μM、0.03μM、0.01μM、0.003μM、0.001μM)。將給藥的細胞板在37℃，5%CO₂下孵7天後，用CellTiter-Glo(Promega，G7573)測定給藥板的每個孔中的活細胞數目。每孔加入100μL檢測試劑，並將板在室溫下孵育10分鐘。然後，使用Envision讀板儀(PerkinElmer)測量每個孔中的螢光信號。KYSE-520增殖抑制IC₅₀值用四參數logit方法計算。下列公式中x代表化合物濃度的對數形式；F(x)代表效應值(該濃度條件下細胞增殖的抑制率)：F(x)=((A-D)/(1+((x/C)^B)))+D。A、B、C和D為四個參數。用Primer premier 6.0將IC₅₀值進一步計算為最佳擬合曲線中50%增殖抑制所需的化合物濃度。

測試例5、hERG電流抑制實驗

1、實驗材料及儀器

2、實驗步驟

本實驗採用手動膜片鉗系統(HEKAEPC-10信號放大器及數字轉換系統，購自德國HEKA Electronics)作全細胞電流的記錄。表面生長有CHO hERG細胞(由丹麥Sophion Bioscience公司提供，細胞代數為P21)的圓形玻片被放置於倒置顯微鏡下的電生理記錄槽中。記錄槽內以細胞外液作持續灌流(大約每分鐘1mL)。實驗過程採用常規全細胞膜片鉗電流記錄技術。實驗均在常規室溫下進行(~25℃)。細胞鉗制在-80mV的電壓下。細胞鉗制電壓去極化到+20mV以激活hERG鉀通道，5秒後再鉗制到-50mV以消除失活並產生尾電流。尾電流峰值用作hERG電流大小的數值。上述步驟所記錄的hERG鉀電流在記錄槽內持續的細胞外液灌流下達到穩定後則可以疊加灌流待測試的藥物，直到藥物對hERG電流的抑制作用達到穩定狀態。一般以最近的連續3個電流記錄線重合作為判斷是否穩定狀態的標準。達到穩定態勢以後以細胞外液灌流沖洗直到hERG電流回復到加藥物之前的大小。試驗數據由HEKA Patchmaster(V2x73.2)，Microsoft Excel以及Graphpad Prism 5.0提供的數據分析軟件進行分析。

藥物代謝動力學評價

測試例6、本發明化合物的藥物代謝動力學測試

1、摘要

以大鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了大鼠靜脈注射以及灌胃給予本發明化合物後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本發明化合物在大鼠體內的藥物代謝動力學行為，評價其藥動學特徵。

2、試驗方案

2.1 試驗藥品

實施例3和4中RT為1.495min的阻轉異構體、實施例17、實施例41、43。

2.2 試驗動物

每組健康6-8週雄性SD大鼠3隻。

2.3 藥物配製

靜脈注射給藥：稱取一定量藥物，加10%體積的N,N-二甲基乙醯胺、33%體積的三甘醇和57%體積的水配製成1mg/mL的無色澄清透明液體；

灌胃給藥：稱取一定量藥物，加0.5%質量的羥丙甲纖維素、0.1%體積的吐溫80和99.4%體積的水配製成1mg/mL的白色懸濁液。

2.4 給藥

SD大鼠禁食過夜後，靜脈注射給藥，給藥劑量為1mg/kg。或者灌胃給藥，給藥劑量為5mg/kg。

3、操作

大鼠靜脈注射給藥本發明化合物，給藥後0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、24小時由頸靜脈採血0.2mL，置於含EDTA-K2的試管中，4℃、4000轉/分鐘離心5分鐘分離血漿，於-75℃保存。

或者大鼠灌胃給藥本發明化合物，給藥後0.25、0.5、1、2、4、8、24小時由頸靜脈采血0.2mL，置於含EDTA-K2的試管中，4℃、4000轉/分鐘離心5分鐘分離血漿，於-75℃保存。

測定不同濃度的藥物灌胃給藥後大鼠血漿中的待測化合物含量：取給藥後各時刻的大鼠血漿50μL，加入內標地塞米松(50ng/mL)的乙腈溶液200μL，渦旋混合30秒，4℃、4700轉/分鐘離心15分鐘，血漿樣品取上清液加水稀釋三倍，取2.0μL進行LC/MS/MS分析。

4、藥物代謝動力學參數結果

本發明化合物的藥物代謝動力學參數如下：

結論：本發明化合物的藥物代謝吸收較好，具有藥物代謝動力學優勢。

Claims

一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，

其中：

R¹選自氫原子、氘原子、羥基、氰基、硝基、鹵素、羧基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、胺基、烯基和羥烷基；

R²為
，

Y¹選自-S-、-NH-、-S(O)₂-、-S(O)₂-NH-、-C(=CH₂)-、-S(O)-和一個鍵；

環A選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地為5-12員的單環或多環；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、烷基、烷氧基、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、芳基、雜芳基、C₂-₆烯基、C₄-₈環烯基、C_2-6炔基、-CHR^aR^b、-NR^aR^b、-烯基-NR^aR^b、-烯基-O-R^a、-烯基-C(O)₂R^a、-烯基-R^a、-烯基-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-C(O)R^b、-C(O)NR^aR^b、-C(O)R^a、-CO-烯基-NR^aR^b、-NR^aC(O)R^b、-C(O)₂R^a、-O-烯基-CO-OR^a、-O-烯基-CO-NR^aR^b、-O-烯基-NR^aR^b、-OR^a、-SR^a、-NR^a-CO-NR^aR^b、-NR^a-烯基-NR^aR^b、-NR^a-烯基-R^b、-NR^aS(O)₂R^b、-NR^aS(O)R^b、-NR^aS(O)₂NR^aR^b、-NR^aS(O)NR^aR^b、- S(O)₂NR^aR^b、-S(O)NR^aR^b、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-P(O)R^aR^b、-N(S(O)R^aR^b)和-S(O)(NR^a)R^b，其中該烷基、烷氧基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N；

R^c選自選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、胺基、硝基、羥基、羰基、羧基、鹵素和氰基；

R⁴選自氫、C₁-₆烷基、3-12員的單雜環或者多環雜環和C_3-8環烷基，其中該烷基、雜環基和環烷基各自獨立地視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、C_1-3烷基、胺基、烷胺基、羥烷基和烷氧基的基團取代；

R⁵選自氫、羥基、C_1-6烷基和C_3-8環烷基，其中該烷基或者環烷基視需要被一個或者多個胺基取代；或者

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成3-12員的單雜環或多環雜環，其中該單雜環或多環雜環視需要被一個或多個選自鹵素、羥基、鹵素取代或未取代的C_1-6烷基、胺基、烷氧基、羥烷基、芳基、雜芳基、雜環基、烷胺基、鹵素取代或未取代的烷氧基和-NR^aS(O)NR^aR^b的基團取代；或者

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中s和t各自獨立地視需要自0和1；

每個R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、氟原子、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、氟取代或者未取代的烷基和氟取代或者未取代的烷氧基；或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一起形成CO、C=NH、C=N-OH、3-12員雜環基或者C_3-8環烷基；

p選自0、1、2、3和4；

每個R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、氟原子、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、氟取代或者未取代的烷基、氟取代或者未取代的烷氧基和-NR^aS(O)NR^aR^b；

或者R^7a、R^7b與它們共同連接的碳原子一起形成3-12員雜環基、5-10員雜芳基、C_3-8環烷基或者C=NR^7c，其中該環視需要被取代；

R^7c選自氫原子、氘原子和C_1-6烷基；

q選自0、1、2、3和4；

W不存在或者選自-O-、-S-和-NR^w-；

R^w選自氫原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、-C(O)C_1-6烷基、-C(O)₂C_1-6烷基、C_1-6烷基醚、鹵素取代或者未取代的C_1-6烷基和鹵素取代或者未取代的C_1-6烷氧基；

環B不存在或者為3-10員環；

為單鍵或者雙鍵；

當環B不存在時Y²為CR^2aR^2b、NR^2a或者O，Y³為CR^3aR^3b、NR^3a或者O；

當環B為3-10員環時；

3)Y²為CR^2a或者N，Y³為CR^3a或者N，
為單鍵；或者

4)Y²為C且Y³為C，
為雙鍵；

每個R^2a、R^2b、R^3a和R^3b各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、芳基、雜芳基、C₂-₆烯基、C₄-₈環烯基、C_2-6炔基、-NR^aR^b、-烯基-NR^aR^b、-烯基-O-R^a、-烯基-C(O)₂R^a、-烯基-R^a、-烯基-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-CO-NR^aR^b、-烯基-NR^a-C(O)R^b、-C(O)NR^aR^b、-C(O)R^a、-CO-烯基-NR^aR^b、-NR^aC(O)R^b、-C(O)₂R^a、-O-烯基-CO-OR^a、-O-烯基-CO-NR^aR^b、-O-烯基-NR^aR^b、-OR^a、-SR^a、-NR^a-CO-NR^aR^b、-NR^a-烯基-NR^aR^b、-NR^a-烯基-R^b、-NR^aS(O)₂R^b、-NR^aS(O)R^b、-NR^aS(O)₂NR^aR^b、-NR^aS(O)NR^aR^b、-S(O)₂NR^aR^b、-S(O)NR^aR^b、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-P(O)R^aR^b、-N(S(O)R^aR^b)和-S(O)(NR^a)R^b，其中該芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

R^a和R^b各自獨立地選自氫、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、C_3-8環烷基、5-10員雜芳基和芳基，其中該芳基和雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；

m選自0、1、2、3和4；

每個R⁸獨立的選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

或者兩個相連的R⁸一起形成苯基、5員雜芳基、6員雜芳基或3-6員雜環基，其中該每一個環視需要被一個或多個選自鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基和C_1-6的烷基的取代基取代。
如申請專利範圍第1項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，X¹為CR^c。
如申請專利範圍第1項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中s和t各自獨立地視需要自0和1；

每個R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基，或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一種形成3-12員雜環基或C_3-8環烷基；

p選自0、1和2；

每個R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b如申請專利範圍第1項所述；

q為1或2；

W不存在；

環B不存在或者為3-10員環；

為單鍵或者雙鍵；

當環B不存在時，Y²為CR^2aR^2b或者O，Y³為CR^3aR^3b；或者

當環B為3-10員環時；

Y²為CR^2a或者N，Y³為CR^3a或者N，
為單鍵；或者

Y²為C且Y³為C，
為雙鍵；

每個R^2a、R^2b和R^3a各自獨立地選自氫原子、氘原子和C_1-6烷基；

m選自0、1、2、3和4；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

或者兩個相連R⁸一起形成苯基、5員雜芳基、6員雜芳基或3-6員雜環基，其中該每一個環視需要被一個或多個選自鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基和C_1-6的烷基的取代基取代。
如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中：

環B選自苯基、5員雜芳環和6員雜芳環；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；且

m選自0、1、2、3和4。
如申請專利範圍第4項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，環B選自苯環或吡啶環。
如申請專利範圍第1項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

其中，R⁹和R¹⁰各自獨立地選自氫原子、氘原子、羥基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵素、C_1-6羥烷基、芳基、雜芳基、雜環基、胺基、C_1-6烷胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b；或者

R^a和R^b如申請專利範圍第1項所述。
如申請專利範圍第6項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R⁹和R¹⁰各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b。
如申請專利範圍第1至7項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基和苯基，其中該苯基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代；且

n選自0、1、2、3、4和5。
如申請專利範圍第8項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R³各自選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和苯基，其中該苯基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氫原子、氘原子、氰基、胺基、硝基、羧基、羥基、羥烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基和鹵烷氧基的取代基取代。
如申請專利範圍第1至9項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N。
如申請專利範圍第10項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹為CR^c，該R^c為氫原子。
如申請專利範圍第10或11項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹和X²均為CR^c且X³為N，或者X¹為CR^c且X²和X³均為N，該R^c為氫原子。
如申請專利範圍第1至12項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、胺基和羥基。
如申請專利範圍第1、6或7項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

A環為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和取代苯基；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N；

R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成
，且

R⁹和R¹⁰各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基、胺基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b如申請專利範圍第1項所述。
如申請專利範圍第14項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹為CR^c，所該R^c為氫原子。
如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和取代苯基；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N；

R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6的烷基和C_1-6烷氧基，或者R^6a、R^6b與它們共同連接的碳原子一起形成3-12員雜環基或C_3-8環烷基；

p為1或2；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6的烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b如申請專利範圍第1項所述；

q為1或2；

W不存在；

環B不存在，Y²為CR^2aR^2b或者O，Y³為CR^3aR^3b；且

每個R^2a、R^2b、R^3a和R^3b各自獨立地選自氫原子、氘原子和C_1-6的烷基。
如申請專利範圍第16項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹為CR^c，該R^c為氫原子。
如申請專利範圍第1至5、8至11、13項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中

R¹選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基和取代苯基；

n選自0、1、2、3、4和5；

X¹、X²和X³各自獨立地選自CR^c和N，且其中至少一個為N；

R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

p為1或2；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基、C_1-6烷基和-NR^aS(O)NR^aR^b，R^a和R^b如申請專利範圍第1項所述；

q為1或2；

W不存在；

環B選自苯基、5員雜芳基和6員雜芳基；

Y²為C且Y³為C，
為雙鍵；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6的烷基和C_1-6烷氧基；

m選自0、1、2、3和4。
如申請專利範圍第18項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，該X¹為CR^c，該R^c為氫原子。
如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，R⁴和R⁵與它們共同連接的氮原子一起形成

R¹選自氫原子、C_1-6烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、鹵C_1-6烷基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6烷胺基和鹵C_1-6烷胺基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、-OR^a、-CHR^aR^b和-NR^aR；

R^a和R^b各自獨立地選自氫、氘原子、羥基、C_1-6烷基和C_3-8環烷基，其中該烷基、雜環基和環烷基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氘原子、氰基、胺基和羥基的取代基取代；

n選自0、1、2、3、4和5；

X³為N，X¹和X²各自獨立地為CR^c，該R^c為氫原子；

s和t各自獨立地視需要自0和1；

R^6a和R^6b各自獨立地選自氫原子、氘原子、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

p為1；

R^7a和R^7b各自獨立地選自氫原子、氘原子、胺基和C_1-6烷基；

q為1；

W不存在；

環B選自苯基、5員雜芳環和6員雜芳環；

Y²為C且Y³為C；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、胺基、羥基、氰基、硝基、羧基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；且

m選自0、1、2、3、4。
如申請專利範圍第20項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，環A為苯基或吡啶基。
如申請專利範圍第20項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，環B為苯環或吡啶環。
如申請專利範圍第1至5、8至13和20至22項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽：

其中：

R¹選自氫原子、C_1-6烷基、鹵烷基和胺基；

Y¹為-S-或者一個鍵；

環A為芳基或雜芳基；

R³各自獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、胺基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_3-8環烷基、3-12員雜環基、-OR^a、-CHR^aR^b和-NR^aR^b；

R^a和R^b各自獨立地選自氫、氘原子、羥基、C_1-6烷基和C_3-8環烷基，其中該烷基、雜環基和環烷基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自鹵素、氘原子、氰基、胺基和羥基的取代基取代；

環B選自苯基、5員雜芳環和6員雜芳環；

每個R⁸獨立地選自氫原子、氘原子、鹵素、氰基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基；

m選自0、1、2、3和4；

n選自1、2、3和4。
如申請專利範圍第23項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，環A為苯基或吡啶基。
如申請專利範圍第23項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其中，環B為苯環或吡啶環。
如申請專利範圍第1至25項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，其為
一種製備申請專利範圍第1至22和26項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽的方法，其中式(I)化合物為通式(I-A)所示化合物或者通式(I-B)，其中

式(I-2)所示的化合物與式(I-3)所示化合物在鹼性條件下，在催化劑存在下經Suzuki偶聯，得到式(I-A)所示化合物，該催化劑選自鈀/碳、雷尼鎳、四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀、三(二亞苄基丙酮)二鈀或2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯；或者

式(I-2)所示的化合物與式(I-4)所示化合物在鹼性條件下，經C-S偶聯，得到式(I-B)所示化合物；

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；

B(OR)₂為硼酸酯或硼酸；

Z為鹵素或磺醯基；

環A、R¹、X¹、X²、X³、R³、R⁴、R⁵和n如申請專利範圍第1項中定義。
如申請專利範圍第27項所述的方法，其中，該催化劑為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀和2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯。
一種製備申請專利範圍第23至25項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽的方法，其中式(II)化合物為通式(II-A)所示化合物或者通式(II-B)，包括以下步驟：

式(II-7)所示的化合物和式(II-8)所示化合物在鹼性條件下，在催化劑存在下經Suzuki偶聯，得到式(II-A)所示化合物；

或者式(II-7)所示的化合物與式(II-9)所示化合物在鹼性條件下，經C-S偶聯，得到式(II-B)所示化合物；

該催化劑選自鈀/碳、雷尼鎳、四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀、三(二亞苄基丙酮)二鈀或2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯；

提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰；

B(OR)₂為硼酸酯或硼酸；

Z選自鹵素、磺醯基和亞磺醯基；

環A、環B、R¹、R³、R⁸、B、m和n如申請專利範圍第23項中定義。
如申請專利範圍第29項所述的方法，其中，該催化劑為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀和2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯。
如申請專利範圍第29或30項所述的方法，其進一步包括通式(II-5)所示的化合物和式(II-6)所示化合物在鹼性條件下反應，得到式(II-7)所示化合物的步驟，

該提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼選自三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉和第三丁醇鉀，該無機鹼選自氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉和氫氧化鋰。
一種如式(I-2)所示的化合物或其可藥用鹽，

其中R¹、X¹、X²、X³、R⁴和R⁵如申請專利範圍第1項定義；

Z為鹵素或磺醯基。
一種如式(I-1)所示的化合物或其可藥用鹽

其中R¹、X¹、X²、X³如申請專利範圍第1項定義；

Z和Z’各自獨立地選自鹵素和磺醯基。
一種經式(I-2)所示的化合物或其可藥用鹽、式(I-1)的化合物或其可藥用鹽製備式(I)所示的化合物的方法。
一種醫藥組成物，其含有如申請專利範圍第1至26項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
一種申請專利範圍第1至26項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，或如申請專利範圍第35項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備預防或者治療由SHP2活性介導的疾病或病症的藥物。
一種申請專利範圍第1至26項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，或如申請專利範圍第35項所述的醫藥組成物的用途，其做為SHP2抑制劑在製備用於預防和/或治療腫瘤或癌症的藥物。
如申請專利範圍第1至26項中任一項所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體或其混合物形式、或其可藥用的鹽，或如申請專利範圍第35項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備預防或者治療努南綜合症、豹皮綜合症、幼年性骨髓單核細胞白血病、神經母細胞瘤、黑色素瘤、急性骨髓性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、結腸癌、頭癌、胰腺癌、頭和頸鱗狀細胞癌、胃癌、肝癌、間變性大細胞淋巴瘤或成膠質細胞瘤的藥物。