TW200835510A

TW200835510A - Compound of resorcinol derivative with polymer

Info

Publication number: TW200835510A
Application number: TW096136886A
Authority: TW
Inventors: Masaharu Nakamura; Masayuki Kitagawa; Keiichirou Yamamoto; Chieko Seno
Original assignee: Nippon Kayaku Kk
Priority date: 2006-10-03
Filing date: 2007-10-02
Publication date: 2008-09-01
Also published as: ES2584840T3; EP2070971B1; JPWO2008041610A1; US20150011715A1; US20160279164A1; JP5548364B2; EP2070971A4; CA2664852A1; WO2008041610A1; EP2070971A1; US20090239782A1

Description

200835510 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於一種間苯二酚衍生物之高分子結合體、其製造方法及其用途；該間苯二酚衍生物之高分子結合體，係聚乙二醇結構部分與側鏈中含有羧基的聚合物部分之共聚物的羧基，與間苯二酚衍生物的羥基形成酯鍵而成者。【先前技術】已知間苯二酚衍生物藉由與熱休克蛋白9〇 (HSP90)家族蛋白質結合、抑制HSP9〇家族蛋白質功能，而顯示抗腫瘤活性等活性（非專利文獻〇。作為間苯二酚衍生物，已知有具有吼唑骨架（專利文獻1〜4)、異噁唑骨架（專利文獻5)、二ϋ坐骨架（專利文獻6〜8)之化合物等。又，作為與HSP90家族蛋白質結合之化合物，除間苯二酚衍生物以外，已知有來自天然物之Geldanamycin(格爾德黴素）、Radicic〇1(瑞迪士可黴素）（專利文獻9)、作為Geldanamycin衍生物之17-A A G專（非專利文獻2)’作為低分子化合物，已知有σ票呤衍生物即PU3及其衍生物等（非專利文獻3)。然而，該等化合物中有許多在抗腫瘤效果方面無法理想地用作醫藥品，亦有許多在物性方面缺乏水溶性。例如，正在進行臨床試驗之17-A AG，係利用大量的DM SO(二甲基亞石風）進行投與。又，許多來自天然物之化合物，其分子量亦較大，因而在生物體内的穩定性方面上存在問題。另一方面，已知有藉由使藥劑與聚乙二醇和聚天冬胺酸的故段共聚物結合形成微胞，而顯示水溶性之分子（專利 125237.doc 200835510 文獻1 〇)’已知有將疏水性物質與聚乙二醇類和聚酸性胺基酸的嵌段共聚物的側鏈羧酸結合而成為高分子藥物輸送體之局分子載體（專利文獻11〜12)。專利文獻12中，記載有聚酸性胺基酸為聚麩胺酸時與為聚天冬胺酸時之抗腫瘤效果不同，已知有，若發揮效果則必須適當地選擇高分子載體與包容化合物之組合。又，已知有使聚乙二醇類與聚麵fee酸的欣段共聚物的側鏈羧基與喜樹驗（canipt〇thecine) 類的齡性羥基結合而成之喜樹鹼類高分子結合體（專利文獻13)。然而，專利文獻9〜12中並未就間苯二酚衍生物之高分子結合體加以記載。 [專利文獻1]國際公開第03/055860號公報 [專利文獻2]國際公開第04/050087號公報 [專利文獻3]國際公開第04/056782號公報 [專利文獻4]國際公開第04/096212號公報 [專利文獻5]國際公開第04/072051號公報 [專利文獻6]國際公開第05/000300號公報 [專利文獻7]國際公開第〇6/〇5576〇號公報 [專利文獻8]國際公開第〇5/〇18674號公報 [專利文獻9]國際公開第〇6/〇95783號公報 [專利文獻10]曰本專利第2694923號公報 [專利文獻11]曰本專利第3268913號公報 [專利文獻12]曰本專利第33 1〇〇〇〇號公報 [專利文獻13]國際公開第〇4/〇39869號公報 [非專利文獻 1] Hsp90 inhibitors as novel cancer 125237.doc 200835510 chemotherapeutic agents. Trends Mol Med. 2002; 8(4

Suppl·): p.S55-61 o [非專利文獻2] The clinical applications of heat shock protein inhibitors in cancer-present and future. Curr. Cancer Drug Targets. 2003 Oct; 3(5): p.385-390 o [非專利文獻 3] Vilenchik，m. et al. Targeting wide-range oncogenic transformation via PU24FC1, A specific inhibitor of tumor Hsp90. Chem. Biol. 1 15 787-797(2004) 【發明内容】 [發明所欲解決之問題] 如上所述，已知有HSP90家族抑制劑顯示抗腫瘤活性等活性，亦有正在進行臨床開發之化合物，但並未獲得具有作為藥物所要求的水溶性及穩定性、且充分發揮抗腫瘤活性之化合物，業者正謀求臨床上可使用之HSP90抑制劑。 [解決問題之技術手段] 為了解決上述課題本發明們進行了積極研究，結果發現一種間苯二酚衍生物之高分子結合體，其係間苯二酚衍生物的羥基與聚乙二醇結構部分和側鏈中含有羧基的聚合物部分之共聚物的羧基形成酯鍵而成，從而完成本發明。即，本發明係關於以下（1)〜（11)。 (1) 一種間苯二紛衍生物之高分子結合體，其係聚乙二醇結構部分及側鏈中含有羧基的聚合物部分的羧基，與間苯二盼衍生物的經基形成酯鍵而成。 (2) 如上述（1)之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中 125237.doc 200835510 聚乙二醇結構部分與側鏈中含錢基的聚合物部分係嵌段型聚合物。 (3) 如上述（1)或之間笨二酚衍生物之高分子結合體，〃中側鏈中含有羧基之聚合物部分係聚酸性胺基酸。 (4) 如上述（3)之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中側鏈中含有羧基之聚合物部分係聚麩⑮酸或聚天冬胺酸。 (5) 如上述（1)至（4)中任一項之間苯二酚衍生物之高分子結合體’其係以通式（1) [化1]

R,-0(CH2CH20)rRrNH.[(C〇CHNH)d.(c〇CH NH)e-(COCHNH)f]-R3 、R4

OH 乂 (1) [式中，R!表示氫原子或者可含有取代基之碳數為卜6之烷土 2表示、、、σ 5基，R3表示氫原子或者碳數1〜6之醯基或碳數1〜6之烷氧基羰基，h表示間苯二酚衍生物之羥基殘基，R5表不選自由碳數1〜3〇之烷氧基、碳數7〜3〇之芳烷氧基、可含有取代基之碳數丨〜⑽之烷基胺基、可含有取代基之二（碳數1〜30)烷基胺基、將羧基保護之胺基酸以及 -N(R6)CONH(R7)所組成群之基，I、表示可相同亦可不同之石反數3〜6之環狀烷基或可被第三胺基取代之碳數1〜5之烷基，1表示5〜1 1500之整數，4表示1〜2〇〇之整數，6、[分別表示0〜200之整數，且d+e+f表示3〜2〇〇之整數，聚麵胺酸之各構成單元之結合順序為任意]來表示。 (6) 如上述（5)之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其卞 125237.doc 200835510

Ri係可含有取代基之碳數1〜6之烷基，R2係碳數2〜6之伸烧基，R3係碳數1〜6之醯基或碳數1〜6之烷氧基羰基，1為 100〜300之整數，d為1〜100之整數，e、f分別為〇〜1〇〇之整數，且d+e+f為6〜100之整數，Rs係選自由將羧基保護的胺基酸及-N(R6)CONH(R7)所組成群之基。 (7) 如上述（6)之間苯二齡衍生物之高分子結合體，其中 1為甲基，R2為伸丙基，&為乙醯基，為異丙胺基羰基異丙胺基。 (8) 如上述（1)至（7)中任一項之高分子結合體，其中間苯二酚衍生物係以通式（2) [化2]

HO

[式中，環A表示可含有取代基之由5個原子構成之雜芳香環；X表示Μ基、羥基、_素原子、硝基、氰基、可含有取代基之烷基、烯基或炔基，可含有取代基之碳環或雜環芳基、烷硫基、芳硫基、烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、胺磺醯基、烧氧基、芳氧美、醯氧基、烷氧基羰氧基或胺曱醯氧基，或者，可含有取代基之胺基、醯胺基、烷氧基羰基胺基、脲基、磺醯胺基、胺磺醯胺基、甲醯基、醯基、羧基、烷氧基羰基、胺甲醯基或石夕烧基，Rs表示可含有取代基之碳環或雜環芳基，可含有取代基之烷基、烯基或炔基，或者可含有取代基之胺 125237.doc -10· 200835510 基或醯胺基]表示之間苯二酚衍生物。 (9)如上述（1)至中任一項之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中上述（8)之環八係選自下述通式（3_丨）至（3_7) [化3]

[式中R8表不上述（8)中所示之取代基；γ表示Μ基，經基，氫原子，豳素原子，胺甲醯基，院氧基幾基，氛基，烧石此基彳石爪基，院基亞續酿基，芳基亞續酿基，烧基續醯基，芳基料基，胺伽基，燒氧基，芳氧基，酿氧基，烧氧基純基，胺甲醯氧基，或者，可含有取代基之胺基、醯胺基、料基隸絲、脲基、俩胺基、胺確醯胺基、甲醯基、醯基或料基]中的任—取代基。

(3-7)

(3-6) 壯ϋ ι述⑴至(9)中任一項之間苯二酚衍生物之高分子、“體’其中間苯二紛衍生物係選自 [化4]

125237.doc -11 - 200835510

(5·11) (5-12) (5-13) (5-14) (5-15)

(5-21) 所組成群。 (11)一種間苯二酚衍生物之高分子結合體， /、係精由使聚乙二醇結構部分與側鏈中含有羧基的聚合物部分之共聚物，與間苯二酚衍生物的羥基於有機溶劑中使用脫水縮八劑形成酯鍵，而獲得。

(12)-種如上述⑴至（1〇)中任—項之間苯二紛衍生物之高分子結合體之製造方法’其特徵在於：使聚乙二醇結構部分及側鏈中含有羧基之聚合物部分的羧基，與間苯二酚衍生物的減，於有機溶劑中利用脫水縮合劑形成醋鍵。 —(13)-種抗癌劑，其係將如上述⑴至叫中任—項之間苯二酚衍生物之高分子結合體作為有效成分。 [發明之效果] 本發明提供一種間笨二酚γ ^ >、紛何生物之高分子結合體，其係藉由抑制HSP9〇家族而顯示扞抗腫瘤活性，且水溶性及藥物動態方面亦優異。本發明之古乃之向分子結合體，藉由將其共聚 125237.doc ~ 12 - 200835510 物二間本一酚何生物適當地組合’與間苯二酚衍生物單體比較，可改盖宾八 , &又。同刀子結合體在生物體内之藥物動態、穩定 [生水/合性。因此，可於長期内保持抗腫瘤效果，進而投與時無需使用對先前溶解間苯二酚衍生物單體(包容化合物)為必而之DMSO。本發明之高分子結合體，由於具有長期的抗腫瘤效果而抑制包容化合物的總投與量，因此亦可期待毒性減輕。進而，本發明之高分子結合體，即使於酶

不存在下亦緩慢釋放顯示抗腫瘤活性之間苯二酚衍生物。【實施方式】本發明之間苯二紛衍生物《高分子結合體之特徵在於·· 其具有間苯4衍生物㈣基、與聚乙二醇結構部分和側鏈中含有《的聚合物#分之共聚物的羧基形成賴之結構。至於本發明之側鏈中含有羧基之聚合物部分，例如可舉出：聚丙烯酸、”基丙烯酸、聚蘋果酸、聚天冬胺酸或聚麩胺酸等，較好的是聚天冬胺酸或聚麩胺酸等。本發明之聚乙二醇結構部分，亦包含將兩侧末端或一側末端加以修飾之聚乙二醇，兩側末端之修飾基可相同亦可不同。至於末端之修飾基，可舉出可含有取代基之碳數 1〜6之炫基。具體而言，可舉出··甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、第三丁基、苄基、二甲氧基乙基、二乙氧基乙基等。較好的是可含有取代基之碳數 1〜4之烷基，具體可舉出：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、第三丁基、二甲氧基乙基等。較 125237.doc -13- 200835510 好的疋烷氧基聚乙二醇，更好的是曱氧基聚乙二醇。來乙一醇結構部分之分子量，通常為300〜500000左右，車乂子的疋500〜10〇〇〇〇左右，更好的是⑽〜$⑼⑽左右。又聚乙2醇結構部分與側鏈中含有羧基的聚合物部分之共聚物之每一分子的平均羧基數為1〜300個左右，較好的是 3 200個’更好的是6〜6〇個。羧基數，係藉由使用鹼之中和滴定而求出。 Γ 月之聚乙__結構部分與側鏈中含有魏基的聚合物 4刀之，、聚物’包含接枝型聚合物及嵌段型聚合物，較好的是嵌段型聚合物。至於♦乙一 S手結構部分與側鏈中含有羧基的聚合物部分 2共聚物’例如可舉出：絲基聚乙二醇-聚丙烯酸、燒乳基聚乙一醇-聚甲基丙稀酸、燒氧基聚乙二醇·聚頻果 I、烷虱基聚乙二醇-聚天冬胺酸、烷氧基聚乙二醇_聚胺酸專，較好的县、p备# 疋烷虱基聚乙二醇-聚天冬胺酸、烷氧 5^乙一醉-聚麵胺酸。本么月之聚乙—醇結構部分與側鏈中含有羧基的聚部分之共聚物之分子量，通f為⑽〜觸⑼左右，較二是600〜100000左右，的右更好的是800〜80000。再者，於太％明書中，所謂分子量# ^ 本说里係扎以GPC法（凝膠滲透色譜法）之重量平均分子量。疋於本發明中，盘平7 一祆乙二醇結構部分和側鏈中含聚合物部分之共聚物姓人 π規暴的 κ物結合之間苯二酚衍生物的結合— 為表示藥效之量則盔牲右 …、特別限定，通常為聚合物總鲮基數之 125237.doc -14- 200835510 1〜100%，較好的是10-90%。以下，說明本發明中所使用之各基之定義。其中，於無特別說明之情形時，並不受限於此。所謂齒素原子’表示說原子、氯原子、漠原+、或礙原〇所謂烧基，於無特別說明之情形時，表示碳數㈣較好 =是碳數之鏈狀、支鏈狀、或環狀烧基。至於鏈狀烧例：可舉出：甲基、乙基、丙基、正丁基、正戊基、正己基等。至於支鏈狀炫基，例如可舉出：異丙基、第三 T基、2,2_二甲基丙基等。至於環狀烷基，例如可舉出·· 環丙基、環丁基、環戍基、土衣己基、adamantyl(金剛烷基）等。所謂烯基，於無特別說明之情形時，表示在任意i處以上具有碳-碳雙鍵之碳數2〜20較好的是碳數2〜8之鍵狀、支鏈狀、或環狀稀基。至於鏈狀稀基，例如可舉出：乙稀 m稀基或卜丁稀基#婦基，2•丁稀基或2•戊稀基、土等。至於支鏈狀烯基，例如可舉出··異丙烯基、甲基-1-丁烯基、或香葉基（geranyi)等。所謂炔基’於無特別說明之情形時，表示在任意i處以上具有碳碳雙鍵之碳數2〜20較好的是碳數2〜8之快基。例 ::出·乙炔基、κ丙炔基、3,3-二甲基-1_ 丁炔基等之 = 丙快基、2_丁快基、3-苯基丙快基、Μ-二土 -2-戊块基、3_三甲基石夕烧基_2_丙块基等之2·快基等。至於妷裱芳基，例如可舉出苯基、萘基等。 125237.doc -15- 200835510 至於雜環芳基’例如可舉出··吨淀基、喊咬基、喹琳基 (qmnolyl)、啥則木基、萘口定基^叩她厂⑻㈣）、。夫喃基、比咯基、吲哚基、咪唑基、咄唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基等。至於兄戴為可含有取代基之情形時之取代基，例如可舉出氫原子、鲼基、羥基、鹵素原子、硝基、氰基、烷基、=基、炔基、碳環或雜環芳基、烷硫基、芳硫基、烷 :I基、芳基亞磺醯基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、胺石:酿基、垸氧基、芳氧基、醯氧基、烧氧基羰氧基、胺 ^氧基胺基、酸胺基、燒氧基魏基胺基、脈基、石黃酿 Υ ⑹基 '甲酿基、酿基、羧基、烧氧基魏基、胺甲醯基、或矽烷基等。方香環上之取代位置，可為鄰位、間位、對位。至於燒硫基，於無特 r ^ A …、σ月之炀形時，表示碳數1〜8之況石瓜基，例如可舉出甲於矣Μ 出甲&基、異丙硫基、节基硫基等。至於方石爪基，例如可舉中·婪美篝5 π 出.本基硫基、萘基硫基”比咬基硫 " 於烷基亞磺醯基，於無特碳數1〜8之燒基亞續醯基，例如載之：科’表- 里丙美亞石旦航苴 + 甲基亞靖醯基、 "丙基亞〜醯基、苄基亞磺醯基等例如可舉出··苯基 Μ方基亞磺醯基，酿基等。至於可含有取代基之基…比咬基亞續心基、城石黃酿基、块基石黃 ^ 規基«基，於無特別記载之情方^醯基等。至於基石黃醯基，例如可舉出f基續數】〜s之燒異丙基磺醯基、苄基 125237.doc -16 - 200835510 〜醯基等。至於芳基磺醯基，例如基績醯基、_基續醯基等。至於胺基續醯基、萘二f基胺伽基、苯基胺伽基等。’、s 土’例如可舉出至於燒氧基，於無特別說烷氧基，例如可舉出 ^時，表示碳數卜8之於芳氧基，例如可舉i >基乳基等。至等。至於醯氧蔡基氧基"比録氧基之醯氧基，例如可兴 /夺，表不碳數1〜8 氧基羰氧基，於盔# 虱基專。至於烷 %無特別說明之情形時，表氧基羰氧基，例如汀與山表不石反數1〜8之烷苴# 如可舉出甲氧基羰基氧基、三氟甲顏芙妒基荨。至於胺甲酿氧基，例如可舉出二甲= : 苯基胺T醯氧基等。 ^基胺甲醯氧基、至於胺基，例如基、㈣基、H舉出：無取代胺基、二甲胺基、嗎淋基，例如可^1_1_基'苯基胺基等。至於酿胺乙醯胺基、苯甲醯胺基等。如可舉一基胺基、乙氧基= :基=:基等。至於腺基，例如可舉出三甲基脲甲院㈣基本二脲，基等:、至於續醯胺基’例如可舉出舉出二甲基胺續醯胺基等。、_基，例如可 n基’例如可舉出乙醯基、三甲基乙酿基暴、π比咬銷其塋 1 基 ^。至於烧氧基数基，例如可舉出曱氧基羰土虱基碳基等。至於胺甲醯基，例如胺甲醯基、笨基胺甲醢基等。出一甲基 125237.doc 17 - 200835510 至於矽烷基，例如可舉出三甲基矽烷基、三異丙基矽烷基、第二丁基-二苯基-矽燒基等。作為通式（2)中之X，較好的是鹵素原子、可含有取代基之烷基、㉟曱醯基、胺磺醯基，尤其好的是氯原子、溴原子乙基、異丙基。作為通式（2)中之X之取代基，較好的是氫原子、經基。作為通式（2)中之R8，較好的是可含有取代基之苯基、

不基…tb咯基、巧絲。作為通式⑺中之R8之取代基，較好的疋私基、i素原子H絲基、可含有取代基之胺基。作為通式（2)中之環A，較好的是咪4基、㈣基、三唾基、異^坐基。作為通式⑺中之環A之取代基，較好的是 $原子m基、羥基、烷基、烷基磺醯基、胺甲醯基、烷氧基羰基，尤其好的是氫原子、㈣、羥基、甲基。 a力；本I明中，所謂間苯二酚衍生物，若係具有間苯二酚 :架且：有抗腫瘤活性等活性之化合物，則無特別限定。 2 ’間苯二紛衍生物，亦包含其藥理學上所許可之鹽义 ^二為間苯：㈣生物，較好的是具有上述通式⑺所表通 )(夂7)所表示之結構等，亦包含其互變異構所明互、交異構體，係指各個異構體可快速地相互變換 ::如下述通式―)中所表示之關係，物 125237.doc -18- 200835510 [化5]

(4-1) 作為本發明之間苯二酚衍生物之具體例，可舉出以 [化6]

<5-1} (5-2) (5-3) (5-4) (5-5)

(5-21) 所表示之結構，但並不限定於該等結構。 125237.doc -19- 200835510 至於本發明之間苯二酚衍生物之高分子結合體，可舉出以上述通式（1)[式中，R!表示氫原子或可含有取代基之碳數1〜6之烧基，R2表示結合基，h表示氫原子或碳數之酿基或碳數1〜6之烷氧基羰基，I表示間苯二酚衍生物之 .基殘基’ 表示選自由可含有取代基之碳數1〜之烧氧基、可含有取代基之碳數7〜30之芳烷氧基、可含有取代基之石反數1〜30之烧基胺基、可含有取代基之二（碳數丨〜川）^ 基胺基、將羧基保護之胺基酸及-N(R6)c〇NH(R7)所組成群之基’ R6、R?表示可相同亦可不同之碳數3〜6之環狀烷基或可被第二胺基取代之碳數1〜5之烧基，t表示5〜Π500之整數，d表示1〜200之整數，e、f分別表示〇〜2〇〇之整數，且d+e+f表示3〜200之整數]表示之化合物。至於通式（1)之心中之碳數1〜6之烷基，可舉出可含有取代基之直鏈或支鏈狀之碳數1〜6之烧基，例如可舉出：曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基等，較好的是直鏈或支鏈狀之碳數1〜4之烷基，尤其好的是直鏈或支鏈狀之碳數1〜3之烷基，例如可舉出：甲基、乙基、正丙基異丙基，更好的是甲基。作為非取代燒基或取代基’較好的是含有烷基之烷基。作為以通式（1)之R2所表示之結合基，並無特別限定，可舉出碳數2〜6之伸烷基，較好的是碳數2〜4之伸烷基，例如可舉出伸乙基、伸丙基、伸丁基等，尤其好的是伸丙基。作為通式（1)之I中之碳數i〜6之醯基，並無特別限定， 125237.doc -20- 200835510 例如可舉出··曱醯基、乙醯基、丙醯基、三甲基乙醯臭等’較好的是碳數1〜3之醯基，尤其好的是乙醯基。作為通式（1)之R3中之碳數1〜6之烷氧基羰基，並無特別限定’例如可舉出甲氧基羰基、乙氧基羰基、第三丁氧基幾基。於通式（1)之I即間苯二酚衍生物的殘基中，作為間苯二酚衍生物，可舉出上述間苯二酚衍生物，若係具有藉由脫水縮合劑與聚合物的羧酸部分形成酯鍵的羥基、且具有抗腫瘤活性之間苯二酚衍生物，則無特別限定。通式U)之R5表示選自由碳數為丨〜％之烷氧基、碳數 7〜30之芳烷氧基、可含有取代基之碳數丨〜”之烷基胺基、可含有取代基之二（碳數卜川）烷基胺基、將羧基保基酸及-no^conh^)所組成群之基，&、&為可相同亦可不同之碳數3〜6之環狀烷基或可被第三胺基取代之碳數 1〜5之烷基。作為通式（1)之心，於一分子中可相同亦可不同，又，間苯二紛衍生物之高分子結合體中所使用之聚合物’可為單質亦可為混合物。、至於通式（1)之I中之碳數丨〜川之烷氧基，可舉出直鏈或支鏈狀之碳數氧基’較好的是直鏈或支鍵狀之碳數1〜10之絲基，例如可舉出··甲氧基、乙氧基、正丙 n 氧基 '第三τ氧基等，作為碳數 7〜3〇之芳烧氧基，可舉出直鏈或支鏈狀之碳數7〜3〇之芳炫氧基’較好的是直鏈或支鏈狀之碳數7〜2〇之芳炫氧基，例如可舉出4-苯基丁氧基等。 125237.doc -21 - 200835510 至於通式（1)之Rs中之可含有取代基之碳數丨〜％之烷基胺基或可含有取代基之二（碳數丨〜％)烷基胺基，可舉出直鏈或支鏈狀之％數1〜30之烷基胺基或二（碳數卜⑽）烷基胺基，較好的是直鏈或支鏈狀之碳數卜汕之烷基胺基或二 (碳數1〜20)烷基胺基，例如可舉出：甲胺基、乙胺基、正丙胺基、異丙胺基、正丁胺基、第三丁胺基、苄基胺基、乙醯胺基、二甲胺基、二乙胺基、二丙胺基、二異丙胺基、二丁胺基、二苄基胺基、甲基苄基胺基等。作為非取代烷基胺基或取代基，較好的是含有烷基之烷基胺基。至於通式（1)之R5中之將羧基保護之胺基酸，可舉出通苇肽合成中所使用之保護羧基之胺基酸，例如可舉出苯丙胺酸苄酯等。於通式（1)之R5中，至於_N(R6)c〇NH(R7)[R6、R7為可相同亦可不同之碳數3〜6之環狀烷基或可被第三胺基取代之碳數1〜5之烷基]，並無特別限定，例如可舉出環己胺基羰基環己基胺基、異丙胺基羰基異丙胺基等。以上述通式（1)表示之間苯二酚衍生物之高分子結合體中之總麩胺酸數係以d+e+f表示，為3〜2〇〇個左右，較好的是6〜100個左右，更好的是6〜4〇個左右。間苯二酚衍生物所結合之麩胺酸數d相對於總麵胺酸數 (d+e+f)之比例為卜丨㈧％，較好的是1〇〜9〇%。作為上述通式（1)之t，為5〜115〇〇左右之整數，較好 8〜2300左右之整數，更好的是1〇〇〜3〇〇左右之整數。疋以上述通式（1)表示之間苯二酚衍生物之高分子結合 125237.doc -22- 200835510 體:亦可於水中形成以聚乙：醇結構部分為外殼之微胞。 -月之間苯—紛何生物之高分子結合體，係藉由使聚乙二^结構部分與側鏈中含有縣之聚合物部分的叛基， ” “㉟彳4·生物的經基’於有機溶劑中利用脫水縮合劑形成酷鍵而獲得，本發明亦包含本製造方法。#，例如，

將以專利文獻u中記载的方法製備之聚乙：醇結構部分· =麩胺酸之嵌段共聚物、根據f要將進行反應的基以外的 B此基加以保濩之間苯二酚衍生物’於溶劑中較好的是 N，N-二甲基甲醯胺（DMF)、二甲基_2_味嗤咬酮 (DMI)、N_f基料烧酮（NMp)等非質子性極性溶劑中，於〇〜較好較5〜5(rc下，利用二環己基碳二酿亞胺 (DCC)、二異丙基碳二醯亞胺（DIpc)、l乙基_3_(3_二甲胺基丙基）碳二醯亞胺鹽酸鹽（wsc)、卜乙氧基羰基_2_乙氧基-1，2-二羥基喹啉酮（EEDQ)等脫水縮合劑進行反應之製 ia·方法·又，進行細合反應時，亦可使用]Si,N-二甲胺基〇比定（DMAP)等反應助劑。於縮合反應後，根據需要進行脫保護，再藉由通常的分離純化等操作，而製造間苯二酚衍生物之高分子結合體。又，R5為-N(R6)CONH(R7)基（R0、R?為可相同亦可不同之石反數3〜6之環狀烷基或可被第三胺基取代之碳數U之烧基）之間苯二酚衍生物之高分子結合體，亦可藉由將上述碳二醯亞胺類用作縮合劑之反應而獲得。作為於通式（1)的化合物中的Rs中導入將碳數丨〜3〇的烧氧基、碳數7〜30的芳烷氧基、碳數1〜30的烷基胺基、二 125237.doc •23- 200835510 «數i〜3G)烧基胺基或縣加以保護之胺基酸的方法，亦可採用如下之方法等：以如上述之方法使聚合物的叛基活性化後，於驗性條件下，佶脾金卜使將與欲添加量對應的醇、對應的胺或減加以保護之胺基酸等活性化後，再使胺基酸與聚合物反應。將聚合物純化後’可藉由同樣的反應使聚合物中的未反應㈣基再活性化，亦可將間苯二盼衍生物的經基縮合於此，或者使不同的醇、胺等與㈣重複反應以

:成尺5之各種取代基之混成體，繼而將間苯二酚衍生物的經基縮合。又’亦可於將間苯二㈣生物縮合後，將保護碳數卜30的烷氧基、碳數7〜3〇的芳烷氧基、碳數卜3〇的烷基胺基、二（碳數^30)烷基胺基或羧基之胺基酸等導入。其中，本發明之間苯二酚衍生物之高分予結合體之製造法並不限定於上述方法。本發明亦包含將本發明之間苯二酚衍生物之高分子結合體作為有效成分之抗癌劑。可將該高分子結合體使用於注射劑、錠劑、散劑等通常使用之劑型中。至於製劑化時通系使用之藥學上許可之載體，例如可使用黏合劑、潤滑劑、崩解劑、溶劑、賦形劑、助溶劑、分散劑、穩定劑、懸濁劑、防腐劑、止痛劑、色素、香料等。較好的是作為注射劑使用，通常例如可使用水、生理食鹽水、5%葡萄糖或甘露醇液、水溶性有機溶劑（例如，丙三醇、乙醇、一甲基亞石風、N-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇、Crem〇ph〇r(氕化萬麻油聚氧乙烯-40)等或其等之混合液）或者水與該水溶性有機溶劑之混合液等。 125237.doc -24- 200835510 本發明之間苯二酚衍生物之高分子結合體之投與量，當然可根據患者的性別、年齡、生理狀態、病態等加以變更，以非經口方式，通常成人每天，作為活性成分投與 0_01〜500 mg/m2，較好的是投與〇1〜25〇 mg/m2。注射投與，係經由靜脈、動脈、患部（腫瘤部）等路徑進行。 [實施例] 以下，利用實施例更具體地說明本發明，但本發明並不限定於該等實施例。實施例1與化合物1(由分子量為12000的甲氧基聚乙二醇部分及聚合數約為23的聚麩胺酸部分所構成之嵌段共聚物與5-(2,4-二羥基-5-異丙基_苯基）_4_(4_甲氧基_苯基）_2,4_ 二氫U，4]三唑-3-酮（式（5-3))之結合體：通式⑴之 RfMe(甲基）、R2=伸丙基，r3=Ac(乙醯基）、r4=間苯二盼衍生物的羥基，R尸異丙胺基羰基異丙胺基，d+e+f=23， t=273)之製造將藉由專利文獻12中記載之方法（參考例丨）所製備之甲氧基聚乙二醇·聚麵胺酸後段共聚物（麵胺酸之聚合數約為 23，1·1〇 g)溶解於二甲基甲醯胺（47 ml)中。於室溫下擾掉片刻後，加入藉由專利文獻8中記載之方法所合成之5_ (2,4-二羥基-5-異丙基-苯基）-4-(4-曱氧基-苯基）_2，扣二氫-[1，2,4]三唑-3-酮（260 mg)、二甲胺基吡啶（28 mg)、二異丙基碳二醯亞胺（0.47 ml)，進而於26°C下攪拌20小時。反應結束後，於反應液中加入乙酸乙酯（70 ml)、乙醇（7〇 ml)、二異丙醚（564 ml)。於室溫下攪拌，然後靜置至目的物沈 125237.doc -25- 200835510 澱’除去上清液。將所得沈殿物以乙醇/二異丙鍵(1/4 ⑽）’ 500 ml)清洗2次，渡取。將所得固體溶解於乙猜/水 (9/1 (v/v)’ 100 ml)中，然後於離子交換樹脂（陶氏化學 (Dow Chemical)公司製 D〇WEX5〇(H+)，1〇响中進行通塔’以乙腈/水（9Π (v/v)，30叫進行溶出。於所得溶出部分中加入水（50 ml)後，於減壓下餾去乙腈，冷凍乾燥，藉此獲得化合物1 (1.04 g)。根據化合物iiHpLc(高效液相層析法）測定之結果，化合物丨中未檢出游離之間苯二酚衍生物。化合物1中之間苯二紛衍生物之含量，可藉由以下方法而獲知：量取一部分的化合物i，於鹼性條件下將其水解，以HPLC將自甲氧基聚乙二醇_聚麩胺酸嵌段共聚物中切斷之間苯二酚衍生物進行定量。藉由上述方法測定本化合物1中之間苯二酚衍生物之含量為丨5 · i Q/。（ w/w)。實施例2 與化合物2(由分子量為12000之甲氧基聚乙二醇部分及聚合數約為23之聚麩胺酸部分構成之嵌段共聚物與4-{5-羥基-4·[4-(嗎啉_4_基）-苯基]-4Η·[1，2,4]三唑-3-基} -6-異丙基-苯_1，3·二醇（式（5_8))之縮合體··通式（1)之 Ri=Me(甲基）、R2 =伸丙基、r3：=Ac(乙醯基）、R4=間苯二酚衍生物的羥基、R5=異丙胺基羰基異丙胺基，d+e + f=23， t=273)之製造使用4-{5-羥基-4-[4-(嗎啉-4-基）-苯基]-4H_[l，2,4]三唑-3-基}-6-異丙基-苯-l，3-二醇（80mg)來代替實施例l之5-(2,4-二羥基-5-異丙基-苯基）_4-(4-甲氧基-苯基）-2,4-二氫-Π，2,4]三唑-3-酮，藉由與實施例1同樣之操作，合成化合 125237.doc -26- 200835510 物2(524 mg)。再者，化合物2中之間苯二紛街生物之含有率為 14.57% (w/w)。 /施例3與化合物3(由分子量為12刪之甲氧基聚乙二酉予部分及聚合數約為23之聚麩胺酸部分構成之♦段共聚物與M 丁 -2-快基）-6-[Μ4-甲氧基一苯基）_5_甲基-異鳴、嗤| 基]-苯_1，3_二醇（式（5_19))之縮合體：通式⑴之&(甲基）R2 4申1¾基、R3—Ac(乙醯基）、r4=間苯二紛衍生物的羥基、R5=異丙胺基羰基異丙胺基，d+e+f=23，卜273)之製造使用4-( 丁-2-炔基）-6_[4_(4_甲氧基_苯基）_5_甲基-異噁唑_ 3_基]-苯-1，3-二醇（3·4 mg)來代替實施例丨之^^心二羥基_ 5-異丙基-苯基）-4-(4-曱氧基_苯基）-2,4·二氫-[H4]三唑酮，藉由與實施例1同樣之操作，合成化合物3(21·6 mg)。再者，化合物3中之間苯二酚衍生物之含有率為1〇·4% (w/w) 〇實施例4與化合物4(由分子量為12000之曱氧基聚乙二醇部分及聚合數約為23之聚麩胺酸部分構成之嵌段共聚物與5_(2,4_二羥基-5-異丙基-苯基）_4-異丙基-2,4_二氫_ [1，2,4]三唑-3-酮（式（5-4))之縮合體··通式〇)之Ri=Me(曱基）、Rf伸丙基、R3=Ac(乙醯基）、r4=間苯二酚衍生物的經基、R5=異丙胺基魏基異丙胺基，d+e+f=23，t=273)之製造使用5-(2,4-二羥基-5-異丙基-苯基）_4_異丙基-2,4-二氫-[1，2,4]三唑-3-酮（277.3 mg)來代替實施例1之5-(2,4-二羥 125237.doc -27- 200835510 基-5-異丙基-苯基）-4-(4-甲氧基_苯基）_2,4_二氫-[^斗]三唑-3-酮，藉由與實施例1同樣之操作，合成化合物4(136 g)。再者，化合物4中之間苯二酚衍生物之含有率為丨丨3〇/〇 (w/w) 〇試驗例1本發明化合物於酶不存在下自包容藥劑中之釋放將化合物1、化合物2、化合物3、化合物4以聚合物濃度計為1 mg/ml分別溶解於PBS(磷酸緩衝生理食鹽水··阳值為7.1)中，於37°C下保温。藉由HPLC將自該高分子結合體中釋放出的間苯二酚衍生物加以分離，利用標準曲線進行定量。將定量值與由高分子結合體的藥劑含量求出的總藥劑量之比示於圖1。由試驗結果確認，本發明之間苯二酚化合物之高分子結合體，即使於酶不存在下，亦可緩慢釋放顯示抗腫瘤活性之間苯二酚衍生物（包容化合物）達數十小時以上。試驗例2針對小白鼠結腸癌Colon 26移植小白鼠之抗腫瘤效果將於BALB/cA小白鼠皮下繼代培養之小白鼠結腸癌 Colon 26腫瘤製成約2 mm正方形之塊，用套管針將其移植入CDF1小白鼠的背側部皮下。於腫瘤移植後第7天，將本發明之間苯二酚衍生物之高分子結合體（化合物丨）及作為對照之經内包的間苯二酚衍生物（5_(2,4_二羥基異丙基·笨基）-4-(4-甲氧基-苯基）_2,扣二氫-[^，糾三唑_3_酮）由尾靜脈投與。將本發明化合物i溶解於5%葡萄糖注射液中，進 125237.doc -28- 200835510 行單次投與。用DMSO溶解作a對昭肝朴馮對照之間苯二酚衍生物（包容化合物），加入TWEEN 80，鋏德用w巧结以 …、俊用5%葡萄糖注射液進行稀釋’ 1天1次連績投與5天。投盘絲 ^ ^ 仅興傻，定期測定腫瘤之長徑（L mm)及短徑（W mm)，藉由（LxW2)/2算出腫瘤體積，由投與開始日的腫瘤體積求出各測定日之平均相對腫瘤體積（表1) 0 [表1]

結果，本發明之間苯二酚化合物之高分子結合體（化合物1 )，以單次投與可長期抑制腫瘤的增殖，且與連續投與 5天間苯二酚衍生物（包容化合物）之效果比較，抗腫瘤效果

增強。即，說明間苯二酚化合物之高分子結合體與間苯二酚衍生物比較，可改善生物體内之藥物動態、穩定性，於長期内保持抗腫瘤效果。進而，因可抑制包容化合物之總給藥量，故亦可期待毒性減輕。又，間苯二酚化合物之高分子結合體與間苯二紛衍生物比較，水溶性增加，投與時可不使用對溶解包容化合物為必需之DMSO。參考例1 分子量約為12000的單甲氧基聚乙二醇與聚合數約為28的聚麩胺酸之嵌段共聚物N-乙醯化物之合成將一側末端為甲氧基、一側末端為3-胺基丙基之聚乙二醇（SUNBRIGHT MEPA-12T，日本油脂公司製，平均分子 125237.doc -29- 200835510 量為12000，1.〇8)溶解於〇]\480(2〇1111)中，然後加入丫-节基L-麩胺酸酯N-羧酸酐（0.77 g)，於35°C下攪拌20小時。於反應液中加入乙醇（80 ml)及二異丙醚（320 ml)，於室溫下攪拌90分鐘後，濾取沈澱物，用乙醇/二異丙醚（1/4 (v/v)，1〇〇 ml)清洗。將所得沈澱物溶解於DMF (20 ml) 中，加入醋酸酐（0.4 ml)，於室溫下攪拌15小時。於反應液中加入乙醇（80 ml)及二異丙醚（320 ml)，於室溫下攪拌 90分鐘後，濾取沈澱物，用乙醇/二異丙醚（1/4 (ν/ν)，ι00 ml)清洗，藉此獲得丨.56 g之聚合物。將所得聚合物溶解於 DMF (47 ml)中，然後加入5%鈀·碳（780 mg)，於35°C下進行3小時加氫分解。於反應液中加入曱醇（9() mi)及矽藻土 (8 g)授拌2小時後，過濾除去5%把-碳。於減壓下鶴去甲醇，然後加入乙醇（90 ml)及二異丙醚（360 ml)，於室溫下攪拌90分鐘。濾取沈澱物，用乙醇/二異丙醚（1/4 (v/v)， 1 〇〇 ml)清洗後’溶解於10%食鹽水（100 ml)中。以1 N氫氧化納水溶液將溶解液的pH值調整為1〇〇，然後利用分配吸附秘脂官柱層析法進行純化，將溶出的溶液進行減壓濃 ^ “、：後進行冷;東乾燥’藉此獲得目的化合物（1 . 1 8 g)。基於使用0·02 N氫氧化鈉水溶液之滴定，一分子本化合物中之麩胺酸之聚合數約為28。再者，一分子本化合物中之麵胺酸之聚合數’可藉由調整丫-苄基L-麩胺酸酯N-綾酸酐之等量而加以控制。【圖式簡單說明】圖1係間苯二酚衍生物的釋放量相對於本發明之化合物 125237.doc -30- 200835510 1(被包容之間苯二酚衍生物為5-(2，心二羥基-5-異丙基-苯基）-4-(4-甲氧基-苯基）-2,4-二氫-[1，2,4]三唑-3-酮（式（5-3)) 之高分子結合體）、化合物2(被包容之間苯二酚衍生物為4-{5-羥基-4·[4-(嗎啉-4-基）-苯基；|-4H-[1，2,4]三唑-3-基}-6-異丙基-苯-1，3-二醇（式（5-8))之高分子結合體）、化合物3(被包容之間苯二酚衍生物為4-( 丁-2-炔基）-6-[4-(4-甲氧基-苯基）-5-甲基-異噁唑-3-基]-苯-1，3-二醇（式（5-19))之高分子結合體）及化合物4(包容之間苯二酚衍生物為5-(2,4-二經基異丙基-苯基）-4·異丙基_2,4_二氫-[1，2,4]三u坐-3__(式 (5_4))之高分子結合體）的PBS溶液（pH值為7.1，37°C)中的間苯二酚衍生物的總結合量之比例。圖1中，_鲁_表示本發明之化合物1、_▲_表示化合物2、__表示化合物3、表示化合物4之釋放量之比例。 125237.doc •31 -

Claims

200835510 十、申請專利範圍：種間苯一酚衍生物之高分子結合體，其係聚乙二醇結構部分與側鏈中含有羧基的聚合物部分之共聚物的側鏈之羧基，與間苯二酚衍生物之羥基形成酯鍵者。 2·如明求項丨之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中聚乙醇、、、°構邛分與側鏈中含有魏基的聚合物部分之共聚物係嵌段型聚合物。 3·如請求項1或2之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中側鏈中含有羧基之聚合物部分係聚酸性胺基酸。 4·如晴求項3之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中側鏈中含有羧基之聚合物部分係聚麩胺酸或聚天冬胺酸。 5·如請求項1至4中任一項之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中間苯二酚衍生物之高分子結合體係以通式（丨）表示之化合物： [化7]

RrO(CH2CH2〇)rR2-NH.[(COCHNH)d.(COCHNH)c.(COCHNH)f].R3 ⑴ 〇々OH R5 [式中，1表示氫原子或者可含有取代基之碳數1〜6之烷基’ R2表不結合基’ R3表示氯原子或者碳數1〜6之酿基或碳數1〜6之烧氧基羰基，r4表示間苯二酚衍生物之殘基’ R5表示選自由碳數1〜30之烧氧基、碳數7〜30之芳炫氧基、可含有取代基之二（碳數1〜30)烷基胺基、可含有取代基之碳數1〜30之烷基胺基、將羧基保護之胺基 125237.doc 200835510 酸及-N(R6)CONH(R7)所組成群之基，ι、R7表示可相同亦可不同之碳數3〜6之環狀烷基或可被第三胺基取代之碳數1〜5之烷基，t表示5〜1 1500之整數，d表示卜汕❹之整數，e、f分別表示〇〜200之整數，且d+e+f表示3〜2〇〇之整數’聚麩胺酸之各構成單元之結合順序為任意]。 6.如請求項5之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中Ri 為可含有取代基之碳數之烷基，Rz為碳數2〜6之伸烷 r〜、基，R3為碳數1〜6之醯基或碳數1〜6之烷氧基羰基，t為 ? 1〇0〜300之整數，d為1〜100之整數，e、f分別為0〜100之整數，且d+e+f為6〜100之整數，Rs為選自由將羧基保護的胺基酸及-N(R0)CONH(R7)所組成群之基。 7·如請求項6之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中& 為甲基，R2為伸丙基，I為乙醯基，Rs為異丙胺基羰基異丙胺基。 8.如請求項1至7中任一項之高分子結合體，其中間苯二酚衍生物係以通式（2)表示之間苯二酚衍生物： ‘ [化 8]

[式中，環A表示可含有取代基之由5個原子構成之雜環芳基，又表示魏基，經基，齒素原子，確基，氰基，可含有取代基之烷基、烯基或炔基，可含有取代基之碳環或雜環务基、烧硫基、芳硫基、燒基亞績醯基、芳基亞 125237.doc 200835510 石戸、1基、燒基續醯基、芳基磺醢基、胺磺酿基、院氧基、芳氧基、醯氧基、烷氧基羰氧基或胺甲醯氧基，或者’可含有取代基之胺基、醯胺基、烷氧基羰基胺基、腺基、續St胺基、胺磺醯胺基、甲醯基、醯基、羧基、烧氧基幾基、胺甲醯基或矽烷基；R8表示可含有取代基之碳環或雜環芳基，可含有取代基之烷基、烯基或炔基’或者’可含有取代基之胺基或醯基胺基]。 9·如請求項1至8中任一項之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中請求項8之環Λ係選自通式（3-1)至（3-7)中的任一取代基： [化9]

[式中，Rs表示請求項8中所表示之取代基；γ表示巯基，羥基，氫原子，_素原子，胺曱醯基，烷氧基羰基，氰基，烷硫基，芳硫基，烷基亞磺醯基，芳基亞磺醯基，烷基％醯基，芳基磺醯基，胺磺醯基，烷氧基，芳氧基，醯氧基，烷氧基羰氧基，胺曱醯氧基，或者，可含有取代基之胺基、醯基胺基、燒氧基幾基胺基、脈基、％醯胺基、胺磺醯胺基、甲醯基、醯基或矽烷基]。 10·如請求項丨至9中任一項之間苯二酚衍生物之高分子結合體，其中間苯二酚衍生物係選自由式(5_υ至(5_21)所組成之群·· 125237.doc 200835510 [化 ίο]

(5-1) (5^2)

(5-6) (5.7)

Η

(5-4)

(5-5) (5-3)

一_ ^苯二酚衍生物之高分子結合體，其係藉由使聚乙 -醇結構部分和側鏈中含有羧基的聚合物部分之共：物’與間苯二齡衍生物的經基’於有機溶劑中利用脫水縮合劑形成酯鍵而獲得。 12. 一種如請求項1至10中任一項之間苯二 ;处人1 咐何生物之咼分子、，、。合體之製造方法，其特徵在於 1更聚乙二醇結構部 125237.doc 200835510 分和側鏈甲含有羧基的聚合物部分之共聚物，與間苯二種抗癌劑，其係將如請求項Jilt 酚何生物之鬲分子結合體作為有效成分 13. 紛衍生物，於有機溶劑中利用脫水縮合一種抗癌劑，,、 IS日鍵。項之間笨 125237.doc