TW200817324A - Solid citrate and tartrate salts of DPP-IV inhibitors - Google Patents

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200817324 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明之領域為二肽基肽酶IV之特定選擇性抑制劑之新 穎固態鹽形式。本發明係關於吡咯啶基胺基乙醯基吡咯啶 酬酸化合物之酒石酸鹽及檸檬酸鹽，DPP-IV之有效及選擇 性抑制劑。該等在至少12個月期間内化學及物理上穩定之 新賴鹽類為大體上不易潮解之固體且適合於調配成藥劑。 【先前技術】 二狀基肽酶-IV(DPP-IV)為屬於包括DPP_VII、Dpp-VIII、DPP-ΙΧ及纖維母細胞活化蛋白（FAp)之胺基二肽酶 群的絲胺酸蛋白酶。咸信催化N末端二肽自蛋白質中釋放 之DPP-IV在控制葡萄糖代謝中起作用。活體内投與 ϊν之合成抑制劑可防止導致胰島素分泌增加及葡萄糖耐受 性改善之胰促激素胰升糖素樣肽](GLP-1)及胃抑肽（GIp) 之N末端降解。已開發經取代之胺基乙醯基吡咯啶晒酸作 為抑制劑以用於治療患有血糖控制異常（諸如糖尿病 (Diabetes Mellitus)及相關病狀）之患者。因此，需要將該 專抑制劑调配成便於使用之固態醫藥物質。許多醫藥化合 物之办離驗及鹽為该專典型醫藥調配物。然而，某些胺基 乙醯基咄咯啶_酸之游離鹼形式不為穩定固態且易於吸收 大氣水分。此外，該等游離鹼之某些鹽同樣不為穩定固 態。 2004年11月15曰申請且於2007年3月15日公開之美國申 口月案序號弟 10/5 14,575 號（標題為丨’Heterocyclic Boronic 124241.doc 200817324

Acid Compounds”）作為 US 2007/0060547揭示一大類抑制二 肽基肽酶-IV之吡咯啶晒酸化合物。此外，2006年5月1日 申請且於2006年11月23日公開之美國臨時申請案序號第 11/3 81，085 號（標題為"Pyrr〇Hdine Compounds and Methods for Selective Inhibition of Dipeptidyl Peptidase-IV’1)作為 US 2006/0264400揭示一更特定類選擇性抑制DpiMV之吡 咯啶基胺基乙醯基吡咯啶_酸化合物。本發明之一實施例 展示作為藥劑之特定前景。然而，儘管呈游離鹼形式時在 生物车上有效，但游離鹼化合物以固態形式儲存時在物理 或化學上不穩定。 口此品要適用於用以治療其中醫學上指明必須選擇性 抑制DPP IV之不良狀況之醫藥調配物的化合物之化學上穩 定之鹽形式。 【發明内容】 /發明係關於DPP-IV抑制性吡咯啶基胺基乙醯基_ d比咯 咬-2-_酸（即如本文中所定義之式⑴化合物）的物理及化學 i穩定之有機鹽形式°式⑴化合物之檸檬酸鹽及酒石酸鹽 為大體上不易潮解之固體且可在周圍條件下儲存至少⑵固 月而不分解。該等化合物之固體形式適合於加工、調配' 儲存及投與可適用作用以治療糖尿病之經口攝取型藥劑的 ^㈣抑制劑。亦提供製備該等鹽形式之方法、使用該等 里化式之方法、包括該等鹽形式之醫藥組合物及包括該等 鹽形式之醫藥組合。 本發明之—實施例提供式⑴之吼嘻咬化合物之檸檬酸鹽 124241 .doc 200817324 或酒石酸鹽： HN、bj Η 〇 R3.B、R2 (I)， 異。:體或其任何水合物或溶劑合物…R1R3獨 (其+ 為陽離子)、攜帶_酸保護基之 声工巷4此夠於生踩 pp伯 成吳5其^_ 溶液中或於生物流體中水解 戚匕基之基圑；哎尺2另口3、击 水解成_#®^ 心其所連接Μ原子形成能夠 解成_'基團之壤狀基團；不對稱碳。 分別對於各不對稱硝 y ^ 型之混合物，使得包括：右2明R構型、s構型或兩種構 ⑺八 有立體異構體及所有立體異構體 此口物，且該酒石酸赜邻八 ⑺人& i卩刀具有任何立體異構體構型或其 作匕合物。 在本發明之一實施例Φ，y、= 、例中该酒石酸鹽部分可為L-酒石酸 鹽、D-酒石酸鹽、肉、、* # '、疋酒石酸鹽或其任何組合。在另— 貝％例中，該酒石酸鹽部分為L_酒石酸鹽。 在一實施例中，R2 ；5 R 3甘㈤ 土團可皆為羥基，使得硼原子包 含於與咄咯啶2-位置鍵蛀 關夂基團巾，藉此形成硼脯胺 I邛勺。在另一實施例中 甲式⑴之11及…可皆為羥基且該 /酉石酸鹽為L-酒石酸鹽。 在一實施例中，所主張臨 1叮為其任何水合物或溶劑合 物0 另-實施例係關於式（v)之環狀異構體： 124241 .doc 200817324

其中ca及亇各白 目獨立具有R構型、s構型或兩種構型之混合 物，使得包括# 一— 所有立體異構體及所有立體異構體混合物。 另貝施例係關於式（V)化合物之L-酒石酸鹽。另一實 施例係關於其中R 2 3 及R皆為經基之式（V)化合物之L-酒石 酸鹽。 本&明之另一實施例係關於式（IA)化合物之檸檬酸鹽或 酒石酸鹽：

B" R2 R3 NH (IA)， 其中立體異構體純度為至少約5 5%或至少約9〇%或至少約 9 8 /〇。一貝施例提供其中R2及皆為羥基之鹽。另一實施 例提供式（IA)化合物之l_酒石酸鹽。另一實施例提供其中 R及R3皆為羥基之式（IA)化合物之^酒石酸鹽。 本發明之另一實施例係關於式（IB)化合物之檸檬酸鹽或 I24241.doc 200817324 酒石酸鹽：

(IB), (、 其中立體異構體純度為至少約55%或至少約9〇。/。或至少約 98%。-實施例提供其tR、R3皆為錄之鹽。另一實施 例提ί、式(IB)化合物之]^酒石酸鹽。另一實施例提供其中 R及R白為羥基之式（ΙΒ)化合物之^酒石酸鹽。 、本發明之另一實施例提供大體上不易潮解之固體形式的 、（）（ΙΑ) (ΙΒ)或（V)之任一者之化合物之檸檬酸鹽及酒 石酸鹽或其環狀形式、水合物或溶劑合物。

本發明之一實施例亦係關於 或酒石酸鹽及醫藥學上可接受 藥組合物可經調配以便藉由任 括（但不限於）非經腸注射、經 方式。 一種含有本發明之檸檬酸鹽 之載劑的醫藥組合物。該醫 何給藥途徑給藥，該途徑包 口、頰内、經直腸及其類似 不發明之一實施例 m . >σ療可經由抑制DPP-IV來 凋即或侍以正常化之不良狀況的方 … 動物(諸如人類)投與有效量之 ：V及向甫礼 趟以马鄉 ％月之#杈酸鹽或酒石酸 皿〜冬可經由抑制DPP-IV來調節$ 況。 门即或仔以正常化之不良狀 本I明之一實施例係關於一種本發明 之持' 檬酸鹽或酒石 I24241.doc -10- 200817324 "^或夕種其他藥劑的醫藥組合，該醫藥組合增加胰 島素刀泌，提南胰島素敏感性，減少自胃腸道中糖之吸 收，广強影響血糖控制之内源性肽或蛋白的效應，提供對 二'’：糖控制之内源性肽或蛋白的替代物或其任何組 口 °亥面藥組合可根據本發明調配成醫藥組合物。 本發明亦係關於一種製備本發明之檸檬酸鹽或酒石酸鹽 去製備本發明之醫藥組合物之方法及本發明 酸鹽或酒石酸鹽在用於f 底 才“豕 ^ 、袈備用以》口療可經由抑制DPP-iv來 调節或得以正當化 r— 吊化之不良狀況之藥劑之方法中的用途。 【實施方式】 定義 除非另作定義，否則辦女 有盥、s^ μ所有本文巾利技術及科學術語具 有人通㊉由一般熟習 入Μ α 5所攸屬之此項技術者所瞭解之 含義相同的含義。儘管盥 T解之 ^. s ^^ s/、彼荨本文中所述者類似或等效之 方法及物質可用於命沪士 a 々 下太“ 、貝也本务日月，但合適方法及物質描述如 下。本文中所提及之所有公

,.3, 孖A開案、專利申請案、專利及JL 他參考文獻係以引用的古斗人* ^ ^ 供特定術語之經選擇 乃曰& 義相對於其他定義而古兔耠处^ …凡卜。亥寻疋 晃— 。為軚锃的。此外，該等物質、方、+ 及貫例僅為例示性的日τ立 寸 負方法 丁性的且不意欲作為限制。 本發明之其他特徵及優勢將由 範圍而顯而易見。 卜^方式及申请專利 :不對稱碟相關之術語"絕對構型 鍵之四面體形狀 彳愿不對私石反 、不對稱奴結合之各基團指 124241 .doc 200817324 矣至確疋，其中具有最高原子序數之基團具有第一優先 4右自遠離基團4之側檢視該四面體，則當基團卜3處於 川貝日寺4+古Αι α 、、吖万向排列時指定為R絕對構型且當基團丨_3處於逆時 針方向排列時指定為S絕對構型。 並如本文中所用’術語”及/或”意謂經指定之群之—成員或 2任何組合。除非另有所述，否則術語"或”為包括性之 或。 2術語'，周圍條件”包括範圍介於約15。(：至約45。〇(例如 C 3 0 C、3 5 C )之溫度及範圍介於約2 〇 %至約 咖（例如 25%、3〇%、35%、4〇%、45%、5〇%、55%及 6 0 %)之相對濕度。 術語”不對稱碳，，意謂與4個不同基團共價結合之碳原 子。 广吾”β細胞退化I，欲意謂β細胞功能喪失、_胞功能異 常及諸如β細胞壞死或凋亡之Ρ細胞死亡。 術語”糖尿病及相關病狀”係指一型糖尿病、二型糖尿 病、妊娠期糖尿病、M0DY、葡萄糖耐受異常、空腹血糖 受損、高血糖症、葡萄糖代謝不良、胰島素抵抗、肥胖 症、糖尿病併發症及其類似病狀。 術語”糖尿病併發症”係指與糖尿病相關之病狀、疾病及 不適，包括視網膜病、神經病、腎病、心肌病、皮膚病、 關節硬化、虺狀動脈病及其他已知之糖尿病併發症。 術浯非對映異構體”意謂兩種或兩種以上具有至少兩個 不對稱碳使得該等立體異構體不為彼此鏡像之立體異構體 124241.doc 200817324 之群種的一成員。 術語"DPP-VII、DPP-VIII、DPP-IX 及 FAP”分別意謂胺基 二肽基肽酶VII、VIII、IX及纖維母細胞活化蛋白。該等 DPP酶在其蛋白或寡肽受質之N末端處使二肽部分裂解。 詳言之，術語”DPP_IV”表示二肽基肽_IV(EC 34145，· DPP-IV)，亦稱為”CD_26”。DPP]V優先自在倒數第二位 置處含有脯胺酸或丙胺酸殘基之多肽鏈之N末端裂解一 肽。 < 一 Ο

術浯’對映異構物"意謂一對具有相同分子結構及至少一 個不對稱碳使得該對立體異構體為彼此鏡像之立體異構體 中的一成員。若該對映異構物含有兩個或兩個以上不對稱 石反，則該對映異構物對將在每個不對稱碳處具有相對不對 稱性。 術語"游離鹼”係指其中胺基並未質子化之式之吡咯 啶基胺基乙醯基吡咯啶_酸化合物。 如本文中所用，術語”可水解成經基之基團"係指由脂族 或芳族醇或二醇與_酸之組合形成的酯基。 術語”抑制劑”（及其相應動詞及動名詞）意謂將與酶可逆 地、不可地或暫時地相互作用以便降低、改良、減緩 阻斷㈣i常受質之_性的化合物（包括其鹽）。該相互 作用可出現於酶促位载@斗、> ^， ^處或之内或與該酶相關之別位位點 處。 ，’、 如本文中所用 針對在合成程序 ，術語"N-保護基”或” 呆護"係指彼等欲 期間之不當反應而保護胺基酸或肽之N末 124241.doc 200817324 端或保護胺基的基團。通常所用之N —保護基係揭示於T W. Greene, P. G. Wuts, "Protective Groups In Organic

Synthesis ’ 第 3版’’（John Wiley & Sons，New York (1999)) 中’其據此以引用的方式併入本文中。N-保護基包括醯 基，諸如甲醯基、乙醯基、丙醯基、特戊醯基、第三丁基 乙醯基、2-氯乙醯基、2_溴乙醯基、三氟乙醯基、三氣乙 -基本一甲酿基、鄰硝基苯氧基乙酷基、α-氣丁 基、 本甲fa基、4 -氣本甲酸基、4 -溴苯甲酸基、4 -硝基苯甲醯 基及其類似基團；磺醯基，諸如苯磺醯基、對曱苯磺醯基 /、類似基團，胺基曱酸醋形成基團，諸如苄氧魏基、對 氣节氧羰基、對曱氧基爷氧羰基、對硝基节氧羰基、2_硝 基苄氧羰基、對溴苄氧羰基、3,4-二曱氧基苄氧羰基、 "j5-二曱氧基苄氧羰基、2,4-二曱氧基苄氧羰基、4_曱氧基 卡氧羰基、2-硝基_4,5_二曱氧基苄氧羰基、3,4,5_三甲氧 基卡氧幾基、1-(對聯苯基）小甲基乙氧罗炭基、α，α_二曱基· 3’5·二甲氧基苄氧羰基、二苯曱氧羰基、帛三丁氧羰基、 丙基甲氧羰基、異丙氧羰基、乙氧羰基、曱氧羰基、 ^丙氧羰基、2,2,2，·三氣乙氧羰基、苯氧羰基、4·硝基笨 =\基笫基甲氧羰基、環戊氧羰基、金剛烷氧羰基、 氧羰基、苯硫基羰基及其類似基團；烷基，諸如苄 基、三笨基曱基、苄氧基甲基及其類似基團·，及矽烷基， 二甲基矽烷基及其類似基團。較佳N-保護基為甲醯 土、乙醯基、苯甲醯基、特戊醯基、第三丁基乙醯 磺醯基、芊：n -皿土本 卞基、荼基曱氧羰基（Fmoc)、第三急 124241 .d〇c -14- 200817324 (Boc)及节氧羰基(Cbz)。 術纟吾丨丨光學活料丨丨咅）田 八 思明3有至少一個不對稱碳使得有機化 將使平面偏振光旋轉之有機化合物。 偏::二广：舌性混合物”意謂光學活性化合物於將使平面 偏振“轉之溶液中的混合物。該光學活性混合物可為非 對映異1體之混合物或對映異構物之不等混合物。 術语"前藥’’意謂一旦向活有機體(較佳為哺乳動物，更佳 為人類）投與前藥則將轉化成活性成份或其活性代謝物的 醫藥學切接受之化合物。該轉化可藉由酶促作用、化學 “氧化作用、還原作用或任何其他對於化學或生化反 應之活體内生理過程來進行。 術語，，外消旋混合物，，意謂具有相等比例從而使得其抵消 平面偏振光之彼此旋光性的對映異構物對。 如本文中所用，短語”本發明之鹽”係指式wvn各口定 基胺基乙醯基対錢酸化合物的檸檬酸鹽以及酒石酸 鹽。如本文中所用，單數術語包括複數且同樣’複數術語 包括單數。因此’短語"本發明之鹽”係指單一立體異構物 質’多種立體異構物質及其混合物。本發明之鹽之非限制 性實例包括⑷(2RH-闪(9R)_t各。定_9_基胺基]_乙酿基卜 吼略咬-2-晒酸之L·酒石酸鹽、D_酒石酸鹽或内消旋酒石酸 鹽及其混合物及（b)(2RH _ {7_[(9S)“比嘻。定_9•基胺基]_乙醯 基卜比口各。定-2-_酸之L_酒石酸鹽、〇_酒石酸鹽或内消旋酒 石酸鹽及其混合物。本發明之鹽亦包括⑷⑽)」-"七叫 。比嘻。定·9_基胺基]•乙酿基卜㈣酸；⑻（2r)小γ 124241.doc -15- 200817324 基胺基]•乙醯基卜比㈣以㈣ 任何組合之擰檬酸鹽。 1 h、 術語’’吸濕性，，當用於本文中 接觸之潮濕空氣或氣" ： 貝自與該物質 , n花肢中自發吸收水蒸汽的特性。固離铷 質當其具有吸濕性且一曰吸收〜 士”、 —及收足夠水瘵汽後溶解於其吸收 之水中叶潮解”或”易潮解，，。 、 術語丨’立體異構體”咅抑1, , ”稱“明具有至少一個不對稱碳之單 機分子之絕對構型的一去料^ 的纟。對映異構物及非對映異構體係 ^括於立體異構體之定義内。一立體異構體在有機分子之 各不對稱碳周圍具有一絕對構型。具有一不對稱碳之有機 刀子呈現兩種立體異構體〇具有兩個不對稱碳之有機分子 呈現四種立體里槿髀。目女一 /、 ^ /、有二個不對稱碳之有機分子呈現 八種立體異構體。經由含有一立體異構體之溶液投射平面 偏振光將引起偏振平面之旋轉。 術扣立異構體混合物”意謂兩種或兩種以上立體異構 月旦之此口物且包括對映異構物、非對映異構體及其組合。 。亥立體異構體混合物可能具有或可能不具有光學活性。 2所給百分數下之術語”立體異構體純度”意謂在該所給 百刀數下在立體異構體之混合物中所指定立體異構體佔優 勢。 除非特別說明，否則對於本文中所述之化學基團、官能 基°卩分及化學反應之術語定義按照該等以下之有機化學 教科書及論文中所提供之定義··"以士 pHnc丨ples 〇f ⑴’ganic Chemistry，，5 R〇bens&Caseri〇, W A· Benjamin & 124241.doc -16- 200817324

Co. New York， N.Y， 1965 ; ’’Advanced Organic

Chemistry’’，第 4版，Jerry March，Wiley Interscience，New York，N.Y. 1992 ; T.W. Greene，P. G. Wuts，"Protective Groups In Organic Synthesis，第 3版’’（John Wiley & Sons， New York (1999)及 Hawley’s Condensed Chemical

Dictionary，第 11 版，Sax及 Lewis，Van Nostrand，Reinhold，

New York，N.Y·，1987。此外，對於立體化學術語之定義係 基於，Stereochemistry of Carbon Compounds，，，Ernest Eliel， McGraw-Hill 出版商，New York，N.Y· 1962。該等教科書之 揭示内容以引用的方式併入本文中。 詳細描述 式（I)化合物之檸檬酸鹽或酒石酸鹽（包括其環狀異構 體、水合物及溶劑合物，本文中稱為”本發明之鹽”）具有使 其尤其適用於製備用以治療糖尿病之醫藥調配物的有利特 性。忒等特性包括（例如）活體内抑制之生物活性， 良好的製備產率、水或體液中之良好溶解性及溶解速率及 在周圍條件下歷經較長時間之物理及化學穩定性，該等特 性允許便利加工、調配、儲存及投與本發明之鹽。 本發明涉及以下意外發現：吨咯咬基胺基乙酿基吡，各啶 晒酉文化。物之彳宁棣酸鹽或酒石酸鹽（例如1_{^比咯咬A·基 胺基]乙I基卜比略.定_21朋酸之擰檬酸鹽或酒石酸鹽，一 種為k擇一肽基肽酶Iv抑制劑之式⑴化合物)當呈固能 時具有良絲理穩定性而有利於進行加玉、調配、餘存: 投與。發現式⑴化合物之游離驗（諸如式⑽及（ib)之化合 124241.doc 200817324 物）及多種其他鹽形式在周圍條件下具有不良物理穩定 性。發現該游離驗及其與多種有機酸形成之鹽為油狀物或 南度易潮解固體。 多看下表1 ’很明顯式（I)化合物之游離驗形式及各種其 他鹽（其中…及汉3皆為羥基）並不易於形成固體或若形成固 體，則該等固體在周圍條件下潮解且因此不能用於開發固 月丑背1 51本务明之棒檬酸鹽及酒石酸鹽易於形成固體。此 外σ亥固體在周圍條件下並不潮解且保持可加工狀態。在 至飢且低於70%濕度下（例如在63%相對濕度下），儘管本 發明=鹽最初可吸收某些水，但水分吸收趨於平穩且該鹽 /平衡狀恶下保持其固體粉末形式而使得允許開發固體劑 型。因此，由於儘管本發明之檸檬酸鹽及酒石酸鹽吸收有 限大氣水分，但其仍維持物理及化學上穩定固體狀態，故 ’、具有所需物理穩定性。因此其尤其較佳適合於製備錠劑 及膠囊以及其他固體醫藥調配物。本發明 其不黏而具有良好加工性。因此，其可以精確及可重現之 S加以量測及等分。因此，本發 乂月之鹽具有有助於製備各 種西樂調配物之特性。且如表5中所展示及如下所述，本 日 =之鹽可在大氣水分存在下儲存在周圍條件下歷經較長 才曰（夕12個月）而不發生任何明顯分解。 本發明之一實施例提供式⑴之吡 ^ _ 分疋巷月女基乙驢基σ比口各 °疋_馱化合物之擰檬酸鹽或酒石酸越，^ 士八叫 > 邮、 文现種本發明之鹽。 只月之I可為酸與游離鹼之任 ,^ j立體異構組合。如本文 中所用，術語”酸”係指檸檬酸 夂-飞酒石酸，而術語，,游 I2424l.doc -18· 200817324 或’σ比咯啶化合物”係指吡咯啶基胺基乙醯基吡咯啶國酸。 棹棣酸鹽不具有對掌性但酒石酸鹽具有對掌性且酒石酸鹽 包括（例如）L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、内消旋酒石酸鹽以 及諸如外消旋混合物、非對映異構體混合物、對映異構物 對與非對映異構體之混合物或至少兩種立體異構體之光學 活性混合物的立體混合物。該口比咯啶化合物可為分別具有 式⑴或式（V)之結構的線性或環狀形式。較佳吡咯啶化合 物可為（2R)-l-{7-[(9R)-。比咯啶-9 2-關酸或（211)-1-{7_[(98)-。比咯啶 啶-2-_酸。因此，本發明之 一9-基胺基]-乙醯基比咯啶_ 各°疋-9 -基胺基]-乙驢基} ·。比口各 咯啶基胺基]-乙醯基}-吡咯啶 吡咯啶-9-基胺基μ乙醯基卜。比咯 石酸鹽。更特定言之，本發明 本發明之較佳鹽包括（2R)-l-{7-[(9R)-口比 酉&基卜吡咯啶-2-g明酸或（2R)-l — {7-[(9S)_ 乙酉m基丨比口各σ定-2-晒酸之檸檬酸鹽或酒 。比咯啶-9-基胺基]-乙醯基卜吡 亦即結構（IA)之L -酒石酸鹽： ’本發明之較佳鹽為（2R)-l-{7-[(9R)-醯基卜吡咯啶-2-關酸之L·酒石酸鹽，

其中R2及R3皆為羥基。

本發明之鹽顯示使固體 劑型之經改良之物理性質 周圍條件下潮解。亦發現Ί i2424l.doc 200817324 於形成固體或* / 狀 ―右形成固體則在周圍條件下潮解或變成膠黏 狀難以加工之物質。 檬酸^^尸地發現兩種有機酸鹽（游離驗之酒石酸鹽及棒 發 民不與其他鹽相同之物理及化學不穩定性。本 广2 1㈣如1仆[(9R)-°比略咬冬基胺基l·乙醯基卜比咯 口疋-2-_酸之鲂 土 / 甘 固體且於現酒石酸(l-酒石酸)鹽)易於形成 良之物==周圍條件r不潮解。本發明之鹽顯示經改 性。， 諸如在同溫及尚濕之條件下的物理穩定

g^^r^(2R)'M7W ^ 疋朋酸之1^酒石酸鹽之試樣可在相者古的相 =度⑽)下儲存較長時間；例如觀察到在75二 17；；" 曰產生在統計誤差内可偵測之分解。 本發明之酒石酸鹽或擰檬酸鹽之水合形式可詩製備劑 '為製備該等劑型，使本發明之鹽在η 2 可測定水合物中之吸收水之量，且在任何後 、喟衣備中對於水之重量進行適當定 、日丨成 里1、應以便能夠精確蚩 之所需劑量。適當控制製備醫藥劑型之大氣條件以碹 保在製造過程期間計量活性化合物之精確且可重現量。一 旦製備得該等劑型，即使個別固體劑型之實際總重二 於後績吸收或解吸水分而有所變化，但於各種渴 露將不影響所需劑量之鹽的傳遞。舉 .，、、、又 暴

T7 5 ’以下會似S

及表3說明作為水分吸收之函數的精·配物㈣W 124241 .doc -20· 200817324 月包括式⑴之吼略。定化合物之所有立體異構體之檸 权&L皿及酒石酸臨，々扭 i ㈣映異構物、非對映異構體以及 外肩紅體及立體異構混合物。 亥“合物可能具有或可能 先予活性。在-些實施例中，本發明之鹽可呈有至 少約55%、較佳8〇%、 ，、有 又彳土刈/。取佳98%之光學純度。在 ::他貫施例中，該鹽為酒石酸鹽之光學富集對映異構物及/ 1::Γ定化合物。在其他實施例中’該鹽為立體異構體之 -口物’其包括(但不限於)對映異構物之不等混合 酒石酸鹽及定化合物之非對映異構體 / 治療方法 、、本發明之-實施例提供一種抑制二肽基肽酶_IV之方 法，其包含使酶（二肽基肽酶_IV)與呈任何如上所述之形式 之本發明之鹽接觸。該接觸可在活體外（諸如）經由診斷測 試或筛選測試或在活體内經由如以下所論述之適當途 徑來實現。 本發明之活體内方法涉及作為DPP_IV之選擇性抑制劑之 本發明的鹽。舉例而言’本發明提供一種治療患有可經由 =制DP P.丨V來調節或得以正常化之m兄之哺乳動物 (曰°#如人類）的方法。藉由向哺乳動物（例如人類）投與有效 量之本發明之鹽以治療、控制、改善或預防不良狀況來實 現本發明之方法。經由抑制DPP_IV來實現治療。通常經由 使用3有本發明之鹽之醫藥組合物來實現投藥。為活體内 用作DPP-IV抑制劑’可以如本文所述之任何方式調配本發 12424 丨.d〇c 200817324 明之鹽。 可使用本發明之鹽治療之不良狀況為彼等可藉由抑制 DPP-IV來調節或得以正常化的不良狀況。已知該等不良狀 況至少部分為受酶Dpp_IV調節之肽尤其在其對血糖控制之 生理作用的環境中之出現減少或缺失或活性改變的結果。 因此、，該等不良狀況包括彼等以血糖控制異常為特徵之不 良狀况諸如糖尿病及相關病狀。舉例而言，該不良狀 ^一型糖尿病、二型糖尿病、姓娠期糖尿病、 二搪：二異常、空腹血糖受損、高血糖症、葡萄糖代謝 义匍#糖耐受異常（！ G τ)及其向二型糖尿病之進展 :)胰=症、肥胖症、一胞退化(詳言之，胞之祠 尸Κ病之進/ 性二型糖尿病向胰島素依賴性二型糖 〇 展，哺乳動物受檢者中Ρ細胞之數目及/或大小沾 知失及糖尿病性併發症(諸如視網膜病、神經病：腎 心肌病、皮膚病、糖尿病相關感·、粥樣硬化二丙、 病、中風及類似不良狀況)。 L力脈 在本發明之治療方法之其他實施例中， 藉由抑制Dpp_m m〜τ Α ，島素抵抗為可 八。兴…即或付以正常化之不良狀況的—部 刀牛歹丨而5 ，該不良狀況可為空腹血糖受 — 受異常、多囊性印巢症候群及其類似病況。在1::糖耐 中’可藉由抑制跡㈣調節或得以正常化_貫施例 及胰島新生減少、β·細胞存活或胰島素生物 m涉 可向需要該治療之哺乳動物（尤其人 以預防、消除、緩解或改善 ”本备明之鹽 述各種不良狀況。該等哺乳 I24241.doc -22· 200817324 動物包括(但不限於)諸如家養寵物及農畜之家畜以及諸如 野生動物之非家畜。 向患者投與之鹽之量可為、南人 马適5於抑制DPP-IV而導致治療 患者病狀且對患者產生右刺旦彡鄉 旦、 生有利衫響的任何量。欲投與之鹽之 夏可為有效劑量或其適當分 — 、田刀手该寻量將視個別患者參數 而疋’该等參數包括年齡、身， 干7身體狀况、體型、體重、所治 療之病狀、病狀嚴重程度及可 了亚仃療法。確定適當劑量 之因素為一般技術者所熟知 „ A 且J使用常規實驗並使用處方 西師之技能及素養來提出。舉例 ^ ^ 牛1 J向5 ，可使用標準化學及 生物學檢定且經由使用在荜理學枯 干技術中已知之數學模式技 術對樂物代謝動力學及藥效學特 一 适仃測疋。治療效用及 給樂方案可由該等技術之結果且經 ^ ^ 、工由使用適當藥物代謝動 力4*及/或藥效學模型外推。 本發明之吡咯啶化合物之投與劑量可根據患者之年齡、 體重及病狀以及給藥途徑、劑型及給藥方案及所需結果來 兩整。劑量、途徑及醫藥調配物之最終選擇可由患者的主 治醫師來確m治醫師之學識及判斷將指導該過程。 然而’患者可由於s學原因、心理學原因或實際上任何盆 他原因而堅持要求較低劑量或更加耐受之劑量。 車父佳可以每公斤哺乳動物體重〇 古 丄王jυ毛克鹽之劑量、 更佳以每公斤哺乳動物體重2至丨5毫多 笔見之劑1投與本發明 之鹽。成年人之劑量範圍通常為約0.5至約2,4〇〇毫克/天 較佳為約10毫克至^，〇5〇毫克/天且更佳為約㈣克至約 75〇毫克/天。其可以單次劑量形式或以多至每曰4次仏予 124241 .doc -23 - 200817324 之夕次劑置形式投與。該等劑量僅以游離鹼之重量計。考 慮到欲投與之水合形式之鹽的實際重量，將對酒石酸鹽或 擰檬酸鹽組份及水合水之重量基值進行校正。在某些情況 下’其可適用於以較高劑量起始且當病狀處於控制下時減 少劑量。因此，第一天投與約7〇 mg至約2,4〇〇 mg之初始

U 劑Ϊ，隨後在後續數天投與約2〇至約！，〕〇〇 mg之較低劑量 可為有利的。在其它情況下，以較低劑量開始治療且必要 時提高劑量可為適用的。精確劑量將視投藥模式、所需療 法、投藥劑型、欲治療之受檢者及欲治療之受檢者體重及 主治醫師或獸醫之偏好及經驗而^。依據游離鹼來描述劑 量且由此對擰檬酸鹽或酒石酸鹽進行調整。 本發：之鹽之用途亦包括製造藥物及使用該呈醫藥組合 及/或醫藥組合物形式之藥物的治療方法。 醫藥組合及其在治療中之用途 本發明之鹽可盥篦-鱸杰丨丨Λ人 第1二 合以形成本發明之醫藥組 曰 制或預防可經由抑制DPP- IV末调即或仔以正常化之 卜良狀况的已知試劑。由 合治療之不良狀況A姑笙7 3 由違寺組 K狀况為彼等可經由 正常化的不良狀況。 p獅p-IV而调節或得以 劑，其包括㈣艮於增力二：稱為抗糖尿物 素敏感性之試劑、降低自 ^回胰島 内源性肽或蛋白質在血… 中之糖吸收的試劑、增強 史臼貝在血糖控制中之作 ^ 為在血糖控制中且有已头 之效應的試劑或作 ’、D帛之内源性肽或蛋白質之替補 124241.doc -24- 200817324 療法的試劑。該等試劑包括（但不限於）格列本脲 (glyburide)(例如 Micronase 及 Diabeta)、格列吼嗓 (glipizide)(例如 Glucotrol)、那格列奈（nateglinide)(例如 Starlix)、瑞格列奈（repaglinide)(例如 Prandin)、二曱雙脈 (metformin)(例如 Glucophage)、羅格列酮（rosiglitazone)(例 如Avandia)、阿卡波糖（acarbose)(例如Precose)、米格列醇 (miglitol)(例如 Glyset)、艾塞那肽（exenatide)(例如 Byetta) 及胰島素（例如Humulin及Novolin)。其他例示性試劑包括 (但不限於）雙胍、氣磺丙脲、胰升糖素樣肽-1(GLP-l)或其 擬似物（諸如LY3 15902或LY307161)、格列美脲 (glimepiride)、美格替耐（meglitinide)、苯乙雙胍、吡格列 嗣（pioglitazone)、磺醯脲、曲格列酮（tr〇gHtaz〇ne)、G1- 262570、伊沙列酮（isagiitaz〇ne)、jTT-5〇i、nn-2344、 L895645、YM-440、R-ii9702、AJ9677、KAD1129、APR-H039242、GW-409544、KRP297、AC2993、Exendin-4 及 NN22 11。由字母及數字命名之上述化合物之化學結構、 俗名及藥理學試驗易於自網路中（例如藉由在（}〇〇〇1^搜 尋網址中鍵入字母/數字名稱作為搜尋項）獲得。 本發明之鹽可與一或多種用作抗糖尿病劑之第二藥劑組 合使用（用以治療糖尿病及相關疾病）。可以與本發明之鹽 相同之劑量或以獨立口服劑型經口投與該第二藥劑。亦可 例如藉由刀別、同時或以混合物形式注射來投與本發明之 鹽及第二藥劑。 a 可將本發明之醫藥組合調配成醫藥學上可接受之載劑與 124241.doc -25 - 200817324 一藥劑之醫藥組合物。 ，視第二藥劑之特性而定，本發 約0.01:1至約200:1之重量比存

本發明之鹽與-或多種其他抗糖尿病劑組合使用可產生 大於可能僅自該等抗糖尿病劑之每一者中所獲之的抗高血 糖藥效。本發明之鹽與一或多種其他抗糖尿病劑組合使用 時由於其抗高血糖藥效可大於由該等抗糖尿病劑所產生之 經組合加成之抗高血糖藥效’故其亦可產生協同效應。 調配成本發明之醫藥組合之組份的第：藥劑之有效量將 遲循第二藥劑製造商之推篇、主治醫師之診斷且將由如

PhySlcian’s Desk Refei.enee(pDR)中所指明之量及給藥的治 療方案及投藥因素來加以指導。

本發明之鹽及一或多種第 在本發明之醫藥組合中 明之鹽與第二藥劑通常以 在° 在醫藥組合内之本發明之鹽的投與劑量將根據患者之年 齡、體重及病狀以及投藥途徑、劑型及給藥方案 1 果進行謹慎調整。劑量、途徑及醫藥調配物之最故選：； =主治醫師來確定’該主治醫師之學識及判斷將指 如上所述之組合物可以如上所述之劑型卩單次劑量或每 日一至四次之分次劑量投與。對患者以低劑量組合 逐漸發展成高劑量組合可能係明智的。 本發明之醫藥組合物 本發明包括在有或無如上所述之另—藥劑情況下人 發明之鹽聯合醫藥載劑之醫藥組合物。該 5 •市、’、且合物可與 124241.doc -26- 200817324 栽韌（諸如習知固體戋液f a八认& 肢a，夜體媒劑或稀釋劑）刀相 適合於所需投单彳 仔y)及一類 口、頰内、細古眼L 起凋配。可藉由經 鍤π ΐ , 述徑（例如）向哺乳動物物 種(尤其人類）以錠劑、膠囊 孔動物物 合物中之本發明的鹽。其 面樂組 藉由非經知途經以可、、t μ刹 >丨 形式投與。其可藉由 /射氣劑 或藉由使用適當傳遞F w，卜 ㈣遞之釋放貼片 田得遞衣置進行電遷移）來投與。 含有本發明之鹽之臀薤

Th ς . 未叙合物可藉由例如Remington.

The Sconce and Practice , 1Q 述之習知技術製備。哕έ人 95中所 合物可以例如膠囊、錠劑、喷露 出現。 “…以適合於局部施用之形式 典型醫藥組合物包括盥 〃了為貝武形劑或稀釋劑 可接受之載劑一起調配的太& ηη 釗乏西条學上 己的本發明之鹽或可封閉於可呈、.命 體、膠囊、藥囊、錠劑、紙# + # 了呈液 本發明之鹽。在製造該组人 戰4内的 之習知技術。 卡、且口物 舉例而言，本發明之鹽可 找合或由載劑稀釋或封 閉於載劑内，該載劑可呈安 ^ ^封 至女砥、膠囊、錠劑、藥囊、 或其他容器之形式。當兮# W + ^ 人μ讲劑充當稀釋劑時，其可為用作 活性化合物之媒劑、職开乍 物質。可將該鹽吸附於 次，夜月豆 ^ t! 、顆拉狀固體容器上（例如於筚囊 中）。合適載劑之某些實例向 ，、義 一 /辟 W匕括（但不限於）水、鹽溶液、醇 類、聚乙一醇、聚經基乙氣化 虱匕皂麻油、花生油、撖欖油、 I24241.doc -27- 200817324 明膠、礼糖、白土、蔗糖、糊精、碳酸鎂、糖、環糊精、 直鍵殿粉、硬脂酸镁、滑石、明膠、壤脂、果膠、阿拉伯 膠、纖維素之硬脂酸或低碳垸基喊、石夕酸、脂肪酸、脂肪 酸胺、脂肪酸甘油單醋及甘油二_、異戍四醇脂肪酸酷、 聚氧化乙稀、經甲基纖維素及聚乙稀。比洛咬嗣。同樣，該 載劑或稀釋劑可包括單獨或與蠟混合之在此項技術中已知 的任何持續釋放物質f諸士留 、（名士早硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘 油酉旨）。 Ο 調配物可與不與°比略。定化合物起有害反應之助劑混合。 该寻添加#1可包括（M限於）制劑、乳化劑及懸浮劑、 影響滲透壓之鹽、緩衝兩丨 友衝Μ及/或有色物質防腐劑、甜味劑 或料劑若„亦可”藥組合物進行滅菌。 投藥途經可為有效給¥ ,,,.、 ，、本务明之鹽至適當或所需作用部 勺任何途徑，諸如經口、妳畠 、、二Τ、經肺、頰内、經直腸、 反下（subdermal)、古由 (k 1皮或積存、皮下 (subcUtane〇us)、靜脈内、 液或軟膏劑途徑，較… 肌肉内、鼻内、眼用溶 ^ A 知彳土為經口途彳空。 若將固體載劑用於經口 散劑杈市，則可將製劑壓錠，置於呈 式式之硬明嶋中或其可呈鍵劑或口含劑形 膠…體载劑’則該製劑可呈糖聚、乳液、軟明膠 溶液)液體（諸如水性或非水性液體懸浮液或 可〉主射之劑型涵當4 浮劑製備之水性旱”二可使用合適分散劑或潤濕劑及懸 心；汗液或油狀懸浮液。可注射形式可呈以 124241.doc -28- 200817324 溶劑或稀釋劑製傷之、、六、产+ * / /合液相或懸浮液形式。可接受之溶劑 或媒劑包括消毒水、技^ 、 葛爾氏〉谷液（Ringer’s solution)戋箄 滲生理食鹽水溶液。 /寺 s者，可使用無菌油作為溶劑或懸浮 剤。该油或脂肪酸軔杜 具有非揮發性，其包括天，然或合成 油、知肪酸、單甘、、山b 甘油酯、二甘油酯或三甘油酯。 對於注射，醫藥組合物 k . 物了為適β於以如上所述之適當溶 好例包括(但不限曙乾散劑、旋轉 乾“或贺霧乾燥散劑、 何 ^ ^ 非日日形政劑、顆粒、沈澱物或忾

粒。對於注射，醫筚έ A U rt, ^ 5物可視情況含有穩定劑、PH值調 即劑、界面活性劑、4f丨且η 入士义 生物可用性調整劑及該等試劑之袓 s 〇本电明之鹽可經調配以 、 、 精田，王射（諸如藉ώ故冻 庄射或連績輸液）之非經腸投藥。用。 、、 呈安渐$夕节丨曰a 、 主射之單位劑型可 主女瓶或多劑量容器形式。 本發明之醫藥組合物可藉由採 程序來設計以便在向患者投藥之後所熟知之 ϋ .放、持續釋放或延遲釋放。因此 77之迅速釋 以用於控釋或緩釋。 …合物亦可經調配 本發明之醫藥組合物可包括（例如 苴他料A w紀或脂質體或某些 “他鍈展诏或可以長效釋放形式或腸 供县划件六κ /斗、抽$ g I形式投與以提 八長J储存及/或傳遞效應。因此，較# 縮成顆粒或圓柱體且作為浐在、± έ 、〜面藥組合物壓 柱體且作為積存注射劑或 支架)植入肌内或皮下。該等植入 ⑷… 料，諸如聚矽氧及可生物降解之聚合物，已知惰性材 酯-聚乙交酯。其他可生物降解 彳如♦礼酸父 κ合物之實例包括聚(原 124241 .doc -29- 200817324 酸酯）及聚（酸酐）。 可將本I明之鹽5㈣成持續釋放植人物或適合於在相當 長：：内連‘、杈藥之可植入材料。典型持續釋放植入物係 接又之來合物、可生物降解之聚合物（諸如 • 錢、丙交醋、乙醇酸、乙交輯、己酸及己内s旨之聚合物 • &共竭形成。將計算本發明之鹽在植入物内之 量以傳遞所需單次劑量血液含量之鹽。 Γ 對於經鼻投藥，醫藥組合物可含有溶解或懸浮於用作喷 Π液體載劑(詳言之水性載劑)中的本發明之鹽。該载 劑可含有添加劑，諸如增溶劑(例如丙二醇)、界面活性 二諸::㈣脂(碟脂酿膽驗)或環糊精之吸收⑽ 如對乳本甲酸酯之防腐劑。 對於非經腸應用，尤其適合w射㈣或懸浮液， 車;佳為具有溶解於聚經基化編中之本發明之鹽的水溶 液。 〇 J有滑石及/或碳水化合物載劑或黏合劑或其類似物之 =貴糖衣樂丸鱗囊尤其適合於口服。㈣、糖衣藥丸 Γ:::佳載劑包括乳糖、玉米殿粉及/或馬鈴㈣ nt或㈣|可用於其中可使用增甜媒劑之情況。 典型錠劑可藉由如下習知製錠技術製備。 具有相當於400 mg游離鹼濃度之典型錢劑可藉由調配 叫L·酒石酸鹽、215mg微晶纖維素、5〇m㈣酸氯二 舞、別mg共聚乙稀対咬酮、5〇叫交聯聚乙心㈣、 膠狀二氧化石夕、5 mg硬脂酸鎮及3%固體歐巴代 I2424i.doc -30- 200817324 AMB(opadry AMB)來製備。具有相當於50 mg游離鹼濃度 之另一典型錠劑組合物可藉由將8〇 mg L·酒石酸鹽、8 i 5 mg微晶纖維素、50 mg磷酸氫二鈣、2〇 mg共聚乙烯吡咯 咬S同、20 mg交聯聚乙烯呲咯酮、1 〇 1Τ^膠狀二氧化矽、$ • mg硬脂酸鎂及3%固體歐巴代AMB組合來調配。該鹽可經 文研磨且經由20網篩來篩選。可將經研磨及篩選之鹽與微 曰曰、截”隹素共♦乙稀σ比略σ定酬1、交聯聚乙稀σ比略g同及膠狀 二氧化矽於適當V形摻混機中摻合歷時適當時間及rpm。 ( 所得組合物可與潤滑劑硬脂酸鎂混合。可使用經潤滑之摻 和物以1000 mg之理論錠劑重量壓製錠劑。可使用 AMB塗覆壓製錠劑之一部分。可持續進行塗覆直至達成固 體重量適當增加。 用於I 口才又藥之另一典型膠囊含有本發明之鹽（2⑽％ 之游離鹼當量）、乳糖（75 mg)及硬脂酸鎂（15 mg)。使該混 合物通過6 0網篩且填塞於1號明膠膠囊中。 〇 精由將本發明之鹽(200 mg之游離鹼當量)無菌置於小瓶 中，無菌冷;東乾燥且密封來製造典型可注射製劑。當使用 日夺將小瓶之内容物與2社生理鹽水混合以產生可注射製 劑0 个货、明之鹽可 〜工…么uuu mg之洁性成 份以及醫藥學上可接受之載劑的單位劑型來分配。適合於 經口、經鼻、經肺或經皮投藥之劑型通常包括每曰約〇·5 mg至約2000 mg、較佳約1〇 g芏、、勺1000 mg、更佳約 mg至約750 mg之與醫藥學上可接香 按又之載劑或稀釋劑混合的 124241.doc 31 200817324 鹽（如以游離鹼當量量測）。 根據本發明所製得之㈣之藥_放特性指H各。定化 合物之適當傳遞方式。對錠劑之試樣測試流動性、硬度、 崩解及藥物釋放。詳言之，編滑換和物上之卡爾：數 (CaΑ 及目測來估算適當流動性。壓製旋劑具有約 12 kP之可接受硬度。錠劑亦具有可接受之崩解時間(小於 15分鐘)。無對照比較之數據展示活體外充分釋放 鐘 内大於90%)。 當製備含有本發明之鹽之醫華碉 西+凋配物時，將考慮該鹽之 物理特性。舉例而言，L·酒石酸 ,、 义皿隹衩丨兄溫度及75%之相 對濕度下保持可加工固體狀能靠 ^ 月旦狀心數天。其亦在25〇c/6〇% RH、贼/75%職机/環境濕度下具有相對於游離驗之 改良化學穩定性且在63%相對濕度及室溫下保持可加工固 體狀態歷時兩個月。因A，將在製備含有本發明之鹽之醫 藥調配物期間選擇且保持適當、、w w 订週田咖·度及相對濕度。舉例而 Ο 吕’若選擇環境溫度，則可將太义 J j將本發明之鹽保持在低於65% 相對濕度或較佳低於60%相對濕度之中等濕度下。 此外’儘管本發明之鹽在周圍條件下具有：理穩定性， 但仍將考慮其吸濕性。因此，當製備含有本發明之越之醫 藥調配物時，將使用該鹽之吸濕穩定形式。本發明之鹽當 其重量在適當溫度及相對渴产 丁 ”、、度下穩定時具有吸濕穩定性。 因此’在計量之前，本於明夕$ ^ 之^應與適當溫度及濕度取得 平衡。 此外，當在製備醫藥組合物Λ 口切朋間％量或者計量本發明之 12424! .doc -32- 200817324 鹽日：，應考慮所吸枚之水量。舉例而t，為獲得合適有效 劑夏’可製備與選定溫度及濕度平衡之本發明之鹽且量測 水合水之重量。水量測及隨之而來的重量相關性將提：所 選有效劑量之鹽的實際量。 若崩解劑包括於錠劑或膠囊之調配物中，則該調配物將 以此方式設計且製備以避免由崩解劑與由鹽所吸水分反應 所產生之錠劑或膠囊的過早分解及崩解。 〜 Γ 可採用戶斤有如上所述用於單獨調配鹽之醫藥組合物之實 施例、載劑、途徑方案及其類似物將本發明之醫藥組合二 配成醫藥組合物。 本發明亦涵蓋本發明之鹽的前藥，其在投與時經受代謝 過程之化學轉化而隨後變成活性藥理學物質。肖等前藥通 常將為本發明之鹽的官能衍生物，其可易於活體内轉化成 本發明之鹽。用於選擇且製備適當前藥衍生物之習知程序 係描述於（例如）”Design of Prodrugs,,，H. Bundgaai.d 編， Elsevier，1 985 中。 因此，本發明之另一鲅；1¾拇处 仏丄 v 〜、像徒供一種本發明之鹽單獨或與 另-類型抗糖尿病劑及/或其他類型治療劑組合的醫藥組 合物。 本發明之其他實施例係由以下各物表示：⑴包括如上 所述之本發明之鹽以及至少一種•藥學上可接受之載劑或 稀釋劑的醫藥组合物；〇制& Λ 』酉永、凡口切造本發明之鹽之醫藥組合物的 方法，其中該醫藥學上可接受 .^ ^ 文又之戟劑或稀釋劑適於經口投 藥；（3)製造適合於經口投Μ夕士 & „ ，人、 本之本發明之鹽之醫鞭組合物的 124241 .doc -33 - 200817324 製造本發明之二：:二合物成鍊劑或膠囊之步驟;(4) 接受之載劑$稀釋％ ώ 方法，其中該醫藥學上可 剞；稀釋劑適於非經腸投 腸投藥之本發明之趟…（5)“適合於非經 康乾組合物以形_乾製劑的步驟。4其進—步包括

=使用活體外檢定系統來測定本發 D 抑制活性。可i a π〜 ν f'J ^ λ ^ 述之方法測定本發明之DPP-IV抑

C 制劑之抑制常數（K或lC5〇值）。 製備本發明之鹽的方法 :’:月t Λ施例亦提供-種製備本發明之鹽的方法。 月1曰申請之美國專利申請案序號第60/704,观 及2004年11月15曰申含主夕、， 明之吳國專利申請案序號第 1〇/5 14,575號中提供游離驗 比各疋化合物之製備方法。製 備本發明之酒石酸鹽之一般合成流程作為流程1展示如 下。

U 124241.doc 200817324 流程1

NH η2ν 步驟1 (3R)-3-胺基- 1吡咯啶-1-曱酸苄酯 、Cbz 1. 第三丁基甲醚、D丨水 K2K〇3' BrCH2C.〇2Me 2. Cbz-CI ^ °比咯咬 步驟3

Boc2〇 第三丁基甲謎

^NBoc BOC-PVR h3co2c^一 严

1. 第二BuLi、四氩呋喃一60?C 2, B(OMc)3, -60eC 步驟2

、Cbz 1. NaOH,加熱 2. HCI 步驟5 ,NBoc 〇H⑽ Η): 130〇_酸 1. (+)-蒎二醇、乙酸異丙酯 2. HC1、異丙醇 H02C^一 户bz

Cbz

ϋ \

本^明之鹽可作為如以上合成流程（參見步驟8)所說明 、下貝例4中洋細描述之化合物合成的直接產物而獲 得。在替代方安 〜乃系T，可將游離鹼溶解於適當溶劑中且隨後 可耩由瘵發溶劑分離該鹽。適當溶劑可為( 溶劑或極性非質子w ^ 有杈 F貝子眭有機溶劑或水。可以包括（但不 124241.doc -35- 200817324 藉由喷霧乾燥或冷凍乾燥之多種方々步v# 少種万式來洛發該溶劑，或者 (例如）藉由沈殿而使鹽與溶劑分離。因此，製備本發明之 鹽的方法實例包括（但+限於）將游離驗溶解於含有適當量 之合適酸（例如化學計量之量之擰檬酸鹽或酒石酸鹽）之】至 6個碳的烷醇中，且隨後可藉由蒸發溶劑而分離該鹽。或 者，可將該酸添加至游離鹼溶液且隨後藉由移除溶劑而分 離鹽:此夕卜由胺化合物（諸如本發明之吼略咬化合物）形 成醫藥學上可接受之鹽的方法為此項技術中所熟知。參 見，例如Camille G. Wenmuh’ Academic 卜如，New Y〇rk， N.Y.，1996 之” The Practice 〇f MedicinalChemistry，第 2版”。 將在以下貫例中進一步描述本發明，該等實例並不限制 申請專利範圍中所描述之本發明範壽。 實例 游離鹼之製備及生物活性描述於2〇〇6年5月}日申請之美 國專利申請案序號第11/38 1，〇85號中，其以引用的方式併 入本文中。 實例1-鹽製備 使用以下程序製備或嘗試製備式I之。比洛σ定化合物的多 種鹽（參見圖1)。將50 mmol游離鹼化合物在氮氣層下添加 至1 U堯瓶中且隨後添加25〇 異丙醇（IPA)。將混合物攪 拌20·30分鐘以完全溶解該固體。將5〇 mm〇1所需酸（酒石 酸或擰檬酸）在氮氣層下添加至第二個5〇〇 mL燒瓶中且隨 後添加25 0 mL IPA。將混合物逐漸溫至3CTC且攪拌10_2〇分 鐘直至該固體溶解。將該酸溶液迅速添加至游離鹼溶液中 12424I.doc -36- 200817324 且將混合物在室溫下攪拌0.5小時，隨後過濾。將任何所 得濾餅風乾歷時0.5小時且隨後以150 mL曱基第三丁基醚 (MTBE)洗滌，風乾歷時1-2小時且隨後在真空烘箱中在40-50°C下乾燥隔夜。 嘗試製造吡咯啶化合物之乙酸鹽、己二酸鹽、10-樟腦 磺酸鹽、檸檬酸鹽、癸酸鹽、氫溴酸鹽、L-抗壞血酸鹽、 L-麩胺酸鹽、L-乳酸鹽、L-及R-酒石酸鹽、2-萘磺酸鹽、 棕櫚酸鹽及丁二酸鹽。結果概括於下表1中。 表1 酸 分子量 參考 TWD- 005- 產率 % 註釋 丁二酸 118.1 150 NA 獲得固體，但在過濾時液化 己二酸 146.14 150 NA 非固體；以MTBE稀釋；獲得固 體/液化 2-奈績酸 208.24 150 NA 獲得固體；在過濾時液化 L-酒石酸 150.09 154 95.5 良好可過濾之固體 D-酒石酸 150.09 170 90.0 良好可過濾之固體 D，L-酒石酸 150.09 168 85.4 溶解度所需之Me〇H;良好可過 濾之固體 檸檬酸 192.12 154 100 良好可過濾之固體 棕橺酸 256.4 156 NA 非固體；具有MTBE之膠黏性固 體 癸酸 172.27 156 NA 非固體；具有MTBE之膠黏性固 體 L-抗壞血酸 176.12 158 NA 獲得固體，但在過濾時液化 L-乳酸 90.08 158 NA 非固體；具有MTBE之非固體 10-棒腦$黃酸 232.3 158 NA 非固體；具有MTBE之非固體 乙酸 60.05 158 NA 非固體；具有MTBE之非固體 L-麵胺酸 147.13 158 NA 不溶於所有物質中之酸；使用水 亦不能獲得固體 氫溴酸 80.92 158 NA 獲得固體；在過濾時液化 124241.doc -37- 200817324 僅可分離檸檬酸鹽與L-、D-及DL-酒石酸鹽。其他鹽產 生非固體或產生在過濾時液化之固體。所有鹽藉由差示掃 描熱量測定（DSC)為非晶形。該等檸檬酸鹽及D-酒石酸鹽 s經叉75%相對濕度（rh)時並不穩定但穩定在63% rh下。 與此相反，L-酒石酸鹽當經受75% rh時穩定。對於L-酒 石I鹽，獲得總共丨8· 12 g奶黃色固體（理論值之。 (2R)-i-{7-[(9R)_吡咯啶-9•基胺基]_乙醯基卜吡咯啶_2_國

酉义之酉石酸鹽具有分子式C1()H2()BN3〇3-C4H4〇6及391.25 公克/莫耳之分子量。其為易溶於水及醇類中（>2〇〇〇 mg/mL)之白色至淡棕褐色非晶形固體。其具有適中吸渴性 且在周圍條件下保持可加卫固體狀態。圖2中說明酒石酸 鹽之吸水率。 貫例2_喷霧乾燥程序 為進行噴霧乾燥，使用努彳卷 ϋ有雙流體噴嘴之實驗室規模 貧務乾燥器SD011(BUCHT，古仏, π級型號B-290)。喷嘴蓋及直 二刀別為1 · 5及〇. 7 m m。使用古 燥產物。 吏用阿效此力疋風分離器來收集乾 錯由風扇速度（F—drying)控制 1 中，風扇在1〇〇%之功率下使51机里。在5亥寺測試 將由針閥控制之喷霧氮氣流 ； 子流量叶中Λ 30 -、 （F_atm)設置成357 L/h(在浮 α 土私 ）在開始母個測試之前，將教掃哭 以去離子水消除内應力 之引將乾“ mL/min(蠕動進仏^ ♦、，合液^量（F-feed)設置成9 電熱器、⑽）控制且調Γ (TJn)藉由 便後知目標出口溫度 124241.doc 38 - 200817324 (丁―out)(100°C)。基於一預先於SD〇u 中對於 17DC〇1(mar_ 00 1 -026)所執行之使用測試來定義該等工作參數。 將自旋風分離器與由乾燥室底部中所收集之產物組合。 實例3-藉由喷霧乾燥製備石酸鹽 將1.00 g游離鹼化合物與4.06 g去離子水之溶液及〇62 § L-酒石酸與2.44 g去離子水之溶液在2〇_2yc下攪拌丨5分 鐘。隨後將L-酒石酸溶液添加至游離驗化合物溶液中且將 ' 該混合物在2〇-25。。下攪拌15分鐘。纟喷霧乾燥之前，該 反應混合物具有約25%之固體含量（w/w)。使該程序按比例 增大以分三批轉化5〇〇 g游離鹼成L_酒石酸鹽。 來自一個不同反應之噴霧乾燥產物的結果概括於表2 中 〇

*噴務乾燥產物可於旋風分离鱼哭f 疋风刀雕為（大多數）中或於乾燥室 底部收集（在腔室中埶敏產物由 …、破屋物由於較長時間暴露於較高溫 度而可具有較低純度）。在該批次 τ 腔至中所收集之量 太少而無法進行分析。 此外，藉由HPLC使用以下方法對喷 J頁務刖之〉谷液及，霖 乾燥產物的純度進行分析。 、 1义用 Waters Symmetrv

Cl8(3.〇x15Q mm，3.5㈣管柱。該移動相A係由蝴辛 124241.doc -39- 200817324 烷磺酸鈉、0.1%於90:10之水：甲醇中之TFA組成。 夕 3移動 相B係由25 mM辛烷磺酸鈉、0.1 %於25:75之水·甲㉟中 TFA組成。柱溫為60°C且偵測波長為210 nm。注入體積為 1 5 pL ;流率為1 · 0宅升/分鐘歷時7〇分鐘之運作時間。梯声 如下： 時間(分鐘） 移動相A% 移動相B% Π 0 100 0 5 100 0 50 45 55 60 0 100 65 0 100 65.1 100 0 70 100 0 註釋：以ο·ι毫升/分鐘跑管直至管柱平衡至6(rc。 展示於圖3至6中之所得層析圖分別對應於酒石酸鹽、吼 咯啶化合物及L-酒石酸鹽。 將來自二個反應批次之噴霧乾燥產物組合且圖7中說明 藉由HPLC分析經組合之喷霧乾燥產物而獲得之層析圖。 〇 簡言之，藉由喷霧乾燥而分離之（2R)]-{7-[(9R)-吡咯 啶-9-基胺基]-乙醯基卜吡咯啶·關酸之L•酒石酸鹽具有最 少降解或無產物降解。 實例4-作為化合物合成之直接產物製備本發明之酒石酸鹽 •由經保護之游離鹼如下來製備本發明之酒石酸鹽。將 1.0 kg經保護之游離鹼、0.40 kg酒石酸及2 〇 kg(2 L)純水 饋入反應器中。將混合物攪動不少於丨小時，同時當初期 反應有時具有發熱性時將反應器之内容物保持在30°C下。 隨後添加0·33 kg苯基_酸及3.7 kg甲基第三丁醚（5 L)且將 124241.doc -40 - 200817324 混合物在15〇C至25〇C下糌胜尤w、认0 r 士 ^ 卜攪拌不J於2小時。將試樣收集且 藉由HPLC進行分杯。r«十 斤右反應混合物具有多於〇,5%游離 驗，則將其另外㈣M小時且重新採樣。若混合物具有 〇、·5%或更低之游離驗，則停止«且使該等層分離歷時不 少於15分鐘。排出有機相且將底部水相用於下-步驟。 將水相以4.3 1<：2 2-甲其17〇与+ +" g f基四虱呋喃（5 L)藉由振盪不少於1〇 分鐘來萃取且隨後經不少 卜乂 ％ 1 5刀釦使水層與有機層分離。 再次排出有機相且使水相妳為 a 相、、、工又兩二人以上如上所述使用4,3 kg 2-甲基四氫呋喃（5 L)之萃取循環。 將所得水相與3.7 kg甲某篦二丁而以ς τ、广十 土弟二丁醚（5 L)反應且振盪不少 於1 0分鐘。隨後經不少於丨5公 、丄3刀釦使该專層分離。再次排出 有機相且收集底部水相。將試樣收集詩hplc分析。 將所得水相研磨過瀘、且藉uPLC分析試樣。藉由在 35C至50〇C下施加-〇·8至·〇9 Η。”々吉介r + U.y bar之真空歷時2小時來移除 剩餘溶劑。將所得溶液之試樣收集用於HPLC分析。

U 將溶液之-部分轉移至冷編器塔盤中且冷殊。將該 等冷束塔盤隨後移除且置於產物冷滚器中且保存。將產物 溶液之剩餘部分裝填人冷; 東乾燥器塔盤且經受冷珠乾燥。 IV後使預先冷;東之i合盤經受冷〉東乾燥。 實例5-酒石酸鹽之特性 潮濕箱中之物理穩定性。以50 mmol度量製備酒石酸鹽 以獲得i 8 · i 2 g奶黃色固體。將四個i · 〇 g該鹽試樣置於四個 在 45%、58%、63°/。及 76%相餅、、s 择 丁 — & . 彳日對濕度下在環境溫度（68卞至 72QF)下之獨立潮濕箱中。最初每. 仞母小蚪稱® 一次試樣且隨 124241 .doc 200817324 後每日稱量一次。圖8中說明結果。 在5天之後’該等試樣在45%至63%之RH下獲得9。/〇與 1 3 /。之間的水分且大多數水分獲得發生在前三天内。水分 吸收率與相對濕度成正比且在58% RH與63。/。RH之間具有 極小差異。因此，酒石酸鹽在室溫及至多63%之RH下具有 物理穩定性（亦即保持可流動之固體狀態）。 將’酉石酸鹽之試樣在室溫及4 5 % RH下儲存於開口容器 中兩個月。在兩個月之後該物質保持良好流動特性。 化學穩定性。使用HPLC測定化學穩定性。將酒石酸 鹽在45% RH下於腔室中連續保存兩個月。圖9及1〇為在 45% RH下兩個月之前及之後鹽的hplc層析圖。觀察到純 度幾乎無變化。 在1個月及3個月之後在25cc、4〇。〇及6〇。〇下亦測定酒石 酸鹽及游離鹼之化學穩定性。結果概括於下表中。 表3 檢定(％) 總雜質度(％) 條件 私離驗 酒石酸鹽 游離驗 酒石酸鹽 初始 96 99 7.6 6.5 25°C下3個月 NA 99 NA 5.7 40°C下1個月 97 NA 15.4 NA 40°C下3個月 50 97 29.6 5.9 60°C下1個月 NA 100 NA 5.8 6(TC下3個月 NA ' 92 NA 7.4 實例 6-DPP-VII、DPP-VIII、DPP_IX& FAP檢定。 游離鹼之生物活性及選擇性之分析描述於2〇〇6年5月1曰 申請之美國專利申請案序號第11/381，〇85號中，其以引用 124241.doc •42- 200817324 、，并入本文中。使用與1 0/38 1，〇85申請案中所述相同 之方法將酒石酸鹽之生物活性及選擇性與游離鹼之生物活 f及k擇丨生對比。結果表明游離驗及酒石酸鹽具有可比 效月b且對夕種所測试之Dpp具有選擇性。具體言之，與游 離鹼一樣，相對於；〇ΡΡ_νιΙΙ，酒石酸鹽展示對於Dpp_iv之 良好選擇性。 實例7-錠劑形成 如下製備具有400 mg及50 mg之本發明之鹽的錠劑。將 該鹽研磨且經由20網篩篩選且隨後與微晶纖維素、共聚乙 稀吼嘻啶酮、交聯聚乙烯吡咯酮及膠狀二氧化矽於適當v 形摻混機中在25 rpm下摻合歷時1 〇分鐘。將所得組合物在 25 1 pm下與潤滑劑硬脂酸錤混合2分鐘。使用潤滑摻和物 以1000 mg之理論錠劑重量使用〇·785”χ〇·370”改良型膠囊 狀錠劑模具壓製錠劑。使用Opadry AMB塗覆壓製錠劑之 一部分。持續進行塗覆直至獲得約3%固體重量增加。該 荨I定劑之組成如下所示。 表4 成分 數量(毫克/錠劑） 功能 400毫克濃度 50毫克濃度 本發明之鹽 650 80 卜藥物 微晶纖維素 215 815 稀釋劑 磷酸氫二鈣 50 50 稀釋劑 共聚乙細°比略西同 20 20 黏合劑-防潮層 交聯聚乙稀°比略酮 50 20 特級崩解劑 膠狀二氧化矽 10 10 滑動劑 硬脂酸鎂 5 5 潤滑劑 Opadry AMB 3%固體 3%固體 防潮層成膜劑 12424 丨.doc -43 - 200817324 表5 酒石酸鹽鹽之12個月穩定性試驗 時點 〜^卜觀 水分 檢定(HPLC) 純度(HPLC) 日夺間=0T=N/A，RH=N/A 色固體 10.4 105.1 98.3 時間=1 個月丁=5°C，RH=N/A 色固體 9.8 105.7 98.1 時間=1 個月 T=25°C，RH=60% 色固體 9.9 105.7 98.1 時間=1 個月 T=40°C，RH=75% 色固體 10.0 106.0 98.2 時間=3 個月 T=5°C，RH=N/A 色固體 9.6 106,2 98.0 時間=3個月 T=25°C，RH=60% 色固體 9.4 106.7 98.1 時間=3個月 T=40 °C，RH=75% 色固體 9.2 105.3 97.9 時間=6個月 T=5°C，RH=N/A 色固體 8,9 104.6 97.9 時間=6個月 T=25°C，RH=60% 色固體 9.3 105.9 97.9 個月丁=40°C，RH=75% «ϋ：色固體 9.5 105.6 97.7 時間一9 個月 T=5 °C，RH=N/A 奶白色固體 9.1 106.7 97.8 時間=9個月丁=25 °C，RH=60% 奶白色固體 9.0 107.3 97.8 時間=12個月丁=5 °C，RH=N/A 奶白色固體 9.3 107.8 98.0 時間=12個月 T=251：, RH=600/〇 U黃色固體 9.3 107.7 97.9 表5展示其中R2及R3皆為〇H之式（IA)化合物之[_酒石酸 鹽在若干種溫度及相對濕度下之丨2個月穩定性試驗的結 果。如所見，觀察到在任何測試條件下化學純度大體上無 變化且灰白色固體之物理外觀除在12個月時點時在25t下 觀察到稍微變黃之外並無變化。 ‘官已結合詳細描述對本發明進行描述，但上述描述僅 思4 %明且不限制由附加申請專利範圍之範疇所定義的本 發明範疇。其他態樣、優點及修改處於以下申請專利範圍 之範疇内。 【圖式簡單說明】 .圖1為說明（2RH]7-[(9R)_吡咯啶_9_基胺基]_乙醯基卜 匕各定-2-g朋酸之L-酒石酸鹽之形成的示意圖。 圖2為說明（2RH-{7_[(9R)_a比咯啶_9_基胺基]_乙醯基卜 124241.doc -44 - 200817324 對濕度增加時之吸濕性的 。比咯啶_2-_酸之L-酒石酸鹽當相 圖表。 圖3為由L-酒石酸鹽之高效液相層析（HpLc)分 層析圖。 又之* 圖4為由吡咯啶化合物之HpLc分析所獲之層析圖。 圖5為由口比口各咬化合物之L_酒石酸鹽之HpLc分析所獲的 層析圖。

圖6為對應於対钱合物之L·酒石酸鹽之峰值的放大 倍率。 圖7為由展不本發明之L-酒石酸鹽藉由喷霧乾燥在無產 物降解之情況下得以分離的噴霧乾燥製品之肌c分析所 後之層析圖。 圖8為說明本發明之酒石酸鹽在45%、58%、63%及76% 相對濕度下經5天之典型吸濕性的圖表。 圖9為在45%相對濕度之腔室中保溫處理2個月之前由本 發明之L-酒石酸鹽之HPLC分析所獲的層析圖。 圖1 0為在45%相對濕度之腔室中保溫處理2個月之後由 本發明之L-酒石酸鹽之HPLC分析所獲的層析圖。 124241 .doc -45 -

Claims (1)

1. 200817324 十、申請專利範圍： 1 ·種式⑴之°比。各σ定化合物之擰檬酸鹽或酒石酸鹽：

   ①， 其％狀異構體或其任何水合物或溶劑合物；

   八中R及R刀別為、_〇·Μ+(其中為陽離子）、攜 有關酸保4基之經基或能夠於生理ρΗ值下之水溶液或生 物流體中水解成羥基之基團；或R2及R3連同其所連接之 侧原子形成能夠水解成_酸基團之環狀基團； 在不對稱碳Ca及Cb處之波形線對於每個不對稱碳獨立 地指不R構型、S構型或兩種構型之混合物，從而使得包 括所有立體異構體及所有立體異構體混合物；且 該酒石酸鹽部分具有任何立體異構體構型或其混合 物0 2·如請求項！之鹽’其中R2及R3皆為〇h。 3·如請求項1或2之鹽，其在γ及Cb處具有（R)絕對構型。 4.如凊求項1或2之鹽，其為檸檬酸鹽。 5 ·如請求項1或2之鹽，其為酒石酸鹽。 6 ·如％求項5之酒石酸鹽，其中該酒石酸鹽為光學富集立 體異構體。 7·如凊求項6之酒石酸鹽，其中該酒石酸鹽為酒石酸 鹽〇 124241.doc 200817324 8·如請求項5之酒石酸鹽，其中該酒石酸鹽包含L-酒石疲 鹽與D•酒石酸鹽之立體異構體富集之混合物、L-酒石酿 鹽與D-酒石酸鹽之外消旋混合物、L-酒石酸鹽、D-涵石 酸鹽及内消旋酒石酸鹽之混合物或至少兩種酒石酸鹽么 立版異構體的光學活性混合物。 9.如巧求項1或2之吡咯啶化合物之檸檬酸鹽或酒石酸鹽’ ”中忒式⑴化合物為式（IA)化合物：

   R2

   R3 (IA)， 其具有至少的 A 55/。之立體異構體純度。 1 0 ·如清求項9夕瞒 、<鹽’其中該式（1八）化合物具有至少約90% 立體異構體純度。 〇 1 1, 士口言膏工貝9 、之鹽’其中該式（IA)化合物具有至少約98% 立肢異構體純度。 1 2 ·如請求項9 i1 & 、 皿，其為酒石酸鹽。 13·如岣求項9之_， 14.如請求項1孤"為L-酒石酸鹽。 ^ ^ 、或2之°比^各啶化合物之檸檬酸鹽或酒石酸鹽 '式(1)化合物為式(ΙΒ)化合物·· I24241.doc 200817324

   B〆 R2 R3 NH (IB), 其具有至少約55%之立體異構體純度。 15.如請求項14之式（IB)化合物，其中該立體異構體純度為 至少約90%。 16·如請求項14之式（IB)化合物，其中該立體異構體純度為 至少約98%。 1 7·如凊求項丨或2之吡咯啶化合物之檸檬酸鹽或酒石酸鹽， 其中該環狀異構體為式（V)化合物：

   Ο 其中Ca及亇各自獨立 旧 Ώ八有R構型、s構型或兩種構型 之此a物，從而使得包括所有 所有立體異構體及所有立體異 構脰合物。 18· -種如請求項中任 19.如請求項18之固體”二…上不潮解固體形式。 個月。 體心式，其在周圍條件下穩定至少約12 124241.doc 200817324 2〇·如請求項丨之鹽，其為水合物或溶劑合物。 21. -種醫藥組合，其包含如請求項丨或以之式⑴化合物之 挣棣酸鹽或酒石酸鹽、其環狀異構體或其任何水人物或 溶劑合物及已知之第二藥劑，該第二藥劑增加胰：本二 泌，提高Μ素敏隸，降低胃腸道中之糖吸收，= 内源性肽或蛋白質影響血糖控制之效應，提供影響轉 控制之内源性肽或蛋白質的替代物或其任何組合。 ( ϋ 22·如δ月求項21之醫藥組合，其中該鹽為酒石酸鹽、〇·酒 石酸鹽或内消旋酒石酸鹽或其任何組合。 一 23·=請求項21之醫藥組合，其中該第二藥劑為抗糖尿病 24.如請求項23之醫藥組合，其中該式⑴化合物之檸檬酸鹽 或酒石酸鹽與該抗糖尿病劑的重量比為約㈣1 200:1。 、，勺 25· —種醫藥組合物，其包含： ⑷如#求項1或18之式⑴化合物之檸檬酸鹽或酒石酽 鹽或其核狀異構體或其任何水合物或溶劑合物；及 (b)醫藥學上可接受之載劑。 26· 士 σ月求項25之醫藥組合物，其進一步包含⑷選自由已知 之第二藥劑組成之群的第二藥劑，該已知之第二藥劑: 加胰島素分泌’提高胰島素敏感性，降低胃腸道中之 吸收立曰強内源性肽或蛋白質影響血糖控制之效鹿，： 提供對於影響血糖控制之内源性肽、蛋白質的替;物t 其任何組合。 n彳勿或 12424 丨.doc 200817324 裡如s月求項】或18之式⑴化合物之 鹽或其環狀里槿-……人 衿“鹽或酒石酸 抑制-肽心 或溶劑合物用於製造 肽基肽酶-IV之藥劑的用途。 月求項27之用途，其中該二狀基 治療可經由抑制1…。 姆W係存在於需要 p制一肽基肽g母-IV而調節哎楫 良狀況的哺乳動物内。 "…常化之不 月长員28之用途’其中該不良狀況為血糖押制里常 3〇·如請求項28之用诠甘士 楯抆制異币。 Ή "七 其中該不良狀況為糖尿病。 •二：項28之用途’其中該藥劑係與治療有效量之選自 ==:!劑組成之群的第二藥劑組合使二: 低胃腸道中之h胰島素敏感性’降 控制…’ ：增強内源性肽或蛋白質影響血糖 Μ或提供對於影響血糖控制之内源性肽、蛋 白質的替代物或其任何組合。 贪 32. —種製備如請求 +、、 J員1之式（Ι)之吡咯啶化合物之檸檬酸鹽 U :®石g文鹽的方法’其包含使作為游離驗之式⑴之口比口各 。疋化合物與摔樣酸或酒石酸及苯基_酸於水溶液中接 觸，以分別提供存於水溶液中之式⑴化合物之檸檬酸鹽 或酒石酸鹽，豆中R 2菸D 3办丄^ ’、 及R各自為在酸性條件下可移除之 麵酸保«或其mR3連同其所連接之縣子形成環 狀_酸酿。 J3·如明求項32之方法，其進_步包含喷霧乾燥或冷棟乾燥 式⑴化合物之檸檬酸鹽或酒石酸鹽之水溶液，以提供式 (1)化口物之柃核酸鹽或酒石酸鹽的固體形式。 I2424I.doc