SK281173B6

SK281173B6 - Použitie kombinácie beta-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu s inhibítorom biosyntézy cholesterolu, farmaceutický prostriedok a súprava s ich obsahom

Info

Publication number: SK281173B6
Application number: SK783-95A
Authority: SK
Inventors: Harry R. Davis
Original assignee: Schering Corporation
Priority date: 1992-12-23
Filing date: 1993-12-21
Publication date: 2000-12-11
Also published as: IL108112A0; CN1095591A; AU5872094A; CN1090479C; CZ287125B6; CZ164395A3; SK78395A3; WO1994014433A1; PL309636A1; HU9501854D0; CA2152351C; JP3992728B2; SG45147A1; DK0675714T3; HRP931515B1; NZ259790A; LV10919B; LT3300B; EE03383B1; EP0675714B1

Abstract

Ide o kombináciu beta-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu s inhibítorom biosyntézy cholesterolu, farmaceutického prostriedku a súpravy s ich obsahom, použiteľných na zníženie hladín cholesterolu v plazme alebo prevenciu aterosklerózy.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka použitia kombinácie B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu s inhibítorom biosyntézy cholesterolu, farmaceutického prostriedku a súpravy s ich obsahom.

Doterajší stav techniky

Bola zistená pozitívna korelácia medzi hladinami cholesterolu v plazme a výskytom klinických príhod spojených s koronárnou srdcovou chorobou. Regulácia celotelovej homeostázy cholesterolu u ľudí a zvierat zahrnuje moduláciu biosyntézy cholesterolu, biosyntézy žlčových kyselín a katabolizmus lipoproteínov plazmy obsahujúcich cholesterol. Pečeň je hlavný orgán zodpovedný za biosyntézu a katabolizmus cholesterolu, a teda je hlavným faktorom určujúcim hladinu cholesterolu v plazme. Pečeň je miesto syntézy a sekrécie lipoproteínov s veľmi nízkou hustotou (VLDL), ktoré sú ďalej metabolizované na lipoproteíny s nízkou hustotou (LDL) v krvnom obehu. LDL sú prevládajúcim typom lipoproteínov prenášajúcich cholesterol v plazme a zvýšenie ich koncentrácie je v korelácii so zvýšenou aterosklerózou.

Ďalším dôležitým faktorom určujúcim homeostázu cholesterolu je absorpcia cholesterolu v tenkom čreve. Priemerný jedinec požívajúci stravu západného typu prijme denne 300 - 500 mg cholesterolu. Okrem toho prejde denne 600 - 1 000 mg cholesterolu cez črevnú stenu. Tento cholesterol je súčasťou žlče a je vylučovaný pečeňou. Proces absorpcie cholesterolu je zložitý a mnohotvárny. Existujú údaje, že približne 50 % v celkového cholesterolu v črevnom lúmene je absorbovaných bunkami lemujúcimi črevnú stenu, teda enterocytmi.

Tento cholesterol zahrnuje tak cholesterol pochádzajúci zo stravy, ako aj ten, ktorý pochádza zo žlče a z pečene. Veľká časť novo absorbovanéro cholesterolu v eneterocytoch je esterifikovaná enzýmom acyl-CoA:cholesterol acyltransferázou (ACAT). Tieto estery sú potom pretvorené spolu s triglyceridmi a ďalšími zložkami (fosfolipidmi, apoproteínmi) na ďalšiu skupinu lipoproteínov, chylomikróny.

Chylomikróny sú vylučované črevnými bunkami do lymfy, z ktorej môžu byť transportované do krvi. Prakticky všetok cholesterol absorbovaný v čreve sa dostáva do pečene touto cestou. Ak sa absorpcia cholesterolu v čreve akýmikoľvek prostriedkami zníži, dostáva sa menej cholesterolu do pečene. Následkom toho dochádza k zníženie pečeňovej tvorby lipoproteínu (VLDL) a zvýšeniu pečeňového vylučovania cholesterolu z plazmy, prevažne vo forme LDL. Čistým dôsledkom inhibície črevnej absorpcie cholesterolu je teda zníženie hladiny cholesterolu v plazme.

β-laktámové látky, ako je (3R-4S)-l,4-bis-(4-metoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinón opísaný v PCT/US92/05972, sú silné inhibítory črevnej absorpcie cholesterolu, ktoré u niekoľkých živočíšnych druhov (škrečok, potkan, králik, opica) navodili nízke hladiny cholesterolu v plazme.

Bolo zistené, že inhibícia biosyntézy cholesterolu inhibítormi 3-hydroxy-3-metyglutaryl koenzým A reduktázy (EC 1.1.1.34) je účinným spôsobom na zníženie hladiny cholesterolu v plazme (Witzum, 1989) a zníženie aterosklerózy. Zistilo sa, že kombinovaná liečba inhibítorom HMG CoA reduktázy a činidlom sekvestrujúcim žlčové kyseliny je u ľudí trpiacich hyperlipémiou účinnejšia ako monotera pia jedným z týchto dvoch prostriedkov (Illingworth, 1988).

Neočakávane sme zistili, že kombinácia B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu a inhibítora HMG CoA reduktázy lovastatínu (MEVACOR™) spôsobí u psov a opíc druhu Rhesus kŕmených štandardnou stravou a u škrečkov a králikov, ktorým bol podávaný cholesterol, väčší pokles hladiny cholesterolu v plazme, ako každý z týchto prostriedkov sám. Tento nález bol neočakávaný, pretože samotné inhibítory HMG CoA reduktázy neznižujú hladiny cholesterolu v plazme škrečkov a opíc.

Podstata vynálezu

Vynález sa týka použitia B-laktámovéro inhibítora absorpcie cholesterolu na kombinovanú aplikáciu s inhibítorom biosyntézy cholesterolu na výrobu lieku na liečbu alebo prevenciu aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu v plazme.

Ďalej sa vynález týka farmakologického prostriedku zahrnujúceho účinné množstvo inhibítora biosyntézy cholesterolu, B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu a farmaceutický nezávadného nosiča a tiež súpravy zahrnujúcej jednu nádobku s účinným množstvom inhibítora biosyntézy cholesterolu vo farmaceutický nezávadnom nosiči a ďalšiu nádobku s účinným množstvom B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu vo farmaceutický nezávadnom nosiči.

Inhibítory biosyntézy cholesterolu použiteľné v kombinácii podľa opisovaného vynálezu zahrnujú inhibítory HMG CoA reduktázy ako je lovastatín, pravastatín, fluvastetín, simvstatín a Cl-981; inhibítory HMG CoA syntetázy, ako je L-659, 699 (E,E-1 l-[3'R-(hydroxymetyl)-4'-oxo-2'R-oxetanyl]-3,5,7R-trimetyl-2,4-undekadienová kyselina); inhibítory skvalénepoxidázy ako jeNB-598 ((E-N-(6,6-dimetyl-2-heptén-4-ynyl)-3-[(3,3'-bitiofén-5-yl)metoxyjbenzén-metánamín hydrochlorid). Výhodne využívané inhibítory HMG CoA reduktázy sú lovastatín, pravastatín a simvastatín.

B-laktámové inhibítory absorpcie cholesterolu zahrnujú tie, ktoré boli identifikované ako nové zlúčeniny vo vzorci (I) uvedenom v PCT/US92/05972 registrovanom 21.6.1992 a publikovanom ako W093/02048 4.2.1993 a ďalej tie, ktoré boli identifikované vo vzorci (II) v prihláške PCT opisujúcej ich použitie na zníženie hladiny cholesterolu. Táto prihláška PČT je citovaná v opisovanom vynáleze a vzorce (1) a (11) sú tu uvedené takto:

R Λ

v ktorom

A je -CH=CH-B, -C=C-B, -(CH₂)_p-X-B, kde p je 0, 1 alebo 2 a X je väzba, -NH- alebo -S(O)₀.2, heteroaryl, heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom, W-substituovaný heteroaryl alebo W-substituovaný heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom, pričom heteroaryl je vybraný zo skupiny zahrnujúcej pyrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, triazinyl, imidozalyl, fiazolyl, tienyl, oxazolyl a furanyí, ďalej heteroaryly obsahujúce dusík, ich N-oxidy, kde W sú 1 až 3 substituenty na uhlíkových atómoch kruhu vybrané zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, hydroxyalkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, alkoxykarbonylalkoxy, (nižší alkoxy-imino)nižší alkyl, nižší alkándioyl, nižší alkyl nižšieho alkándiolylu, alyloxy,

SK 281173 Β6

CF₃, -OCF₃, benzyl, R^l4-benzyl, benzyloxy, R¹⁴-benzyloxy, fenoxy, R¹⁴-fenoxy, dioxolanyl, NO2, NR¹⁰R, NR^l0Ŕ(nižší alkyl)-, NR^l0R(nižší alkoxy)-, OH, halogén, NHC(O)OR⁵, NHC(O)R⁵, R⁶O2SNH-, (R⁶O2S)2N-, -S(O)2NH2, -S(0)o_2R¹⁰, terc.-butyldimetylsilyloxymetyl, -C(O)R¹² a -CH2-NR”, pričom substítuenty na substituovaných atómoch hctcroarylového kruhu, ak sú prítomné, sú vybrané zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, alkoxy, -C(O)OR⁵, -C(O)R⁵, OH, NR^laRⁿ(nižší alkyl)-,

NR’°R(nižší alkoxy)-, -(SO)₂NH₂ a 2-(trimetylsily)etoxymetyl, -C(O)B alebo -(CH₂)_k.NR¹³, kde k je 1 alebo 2 D je B’-(CH₂)_mC(O)-, kde m je 1, 2, 3, 4 alebo 5, B'-(CH₂)_q-, kde q je 2,3,4,5 alebo 6,

B'-(CH₂)eZ(CH₂)_r-, kde Z je -0-, -C(0)-, fenylén, -NR⁸alebo -S(0)o.₂, e je 0,1, 2, 3, 4 alebo 5 a r je 1,2, 3,4 alebo 5 ak súčet e a r je 1,2, 3 ,4, 5 alebo 6,

B'-(C₂-C₆alkenylén)-, B'-(C₄-C₆alkadienylén)-, B'-(CH₂)_tZ(C₂-C6alkenylén)-, kde Zje definované a kde t je O, 1, 2 alebo 3, ak súčet t a počtu uhlíkových atómov v alkenylénovom reťazci je 2,3,4,5 alebo 6,

B'-(CH₂)f-V-(CH₂)_g-, kde V je C₃-C₆cykloalkylén, f je 1, 2, 3; 4 alebo 5 a g je 0,1,2, 3,4 alebo 5, ak súčet f ag je 1, 2, 3,4, 5 alebo 6,

B'-(CH₂)_t-V-(C₂-C₆alkenylén)- alebo B'-(C₂-C₆alkenylén)-V-(CH₂)_t-, kde V a t sú definované, ak súčet t a počtu uhlíkových atómov v alkenylénovom reťazci je 2, 3, 4, 5 alebo 6,

B'-(CH₂)_a-Z-(CH₂)i,-V-(CH₂)_d-, kde Z a V sú definované a a, b a d sú nezávisle od seba O, 1, 2, 3,4, 5 alebo 6, ak súčet a, b a d je 0,1,2, 3, 4, 5 alebo 6, T-(CH₂)_S-, kde T je cykloalkyl s 3 až 6 atómami uhlíka a s je 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, alebo naftylmetyl, heteroarylmetyl alebo W-substituovaný heteroarylmetyl, kde heteroaryl a W sú definované, B je

B' je naftyl, heteroaryl alebo W-substituovaný heteroaryl, kde heteroaryl je definovaný alebo

je vodík, fluór, Ci.₁₅alkyl, Ci._]5alkenyl, Ci._l5alkinyl alebo B-(CH₂)_h, kde h je 0,1,2 alebo 3,

R¹, R² a R³ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a W za predpokladu, že ak W je halogénová skupina, je to h-halogénová alebo m-halogénová skupina, alebo R' je vodík a R² a R³ spolu so susediacimi atómami uhlíka, na ktoré sú viazané, tvoria dioxolanylový kruh,

R¹, R² a R³ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a W alebo R¹ je vodík a R² a R³ spolu so susediacimi atómami uhlíka, na ktoré sú viazané, tvoria dioxolanylový kruh,

íuranyl, benzodioxolyl, tetrahydronaftyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl alebo chinolyl,

R⁵ je nižší alkyl, fenyl, R^l4-fenyl, benzyl alebo R¹⁴-benzyl, R⁶ je OH, nižší alkyl, fenyl, R¹⁴-fenyl, benzyl alebo R¹⁴-benzyl,

R⁷ je nižší alkyl, alkoxy, OH, halogén, -NR^l0R, -NHC(O)OR⁵, -NHC(0)R⁵, N0₂, -CN, -Nj, -SH, -S(O)₀.₂

-(nižší alkyl), -C00R⁹, -CONR¹⁰R, -COR¹², fenoxy, benzyloxy, -OCF₃ alebo terc.-butyldimetylsilyloxy a kde a je 2 alebo 3, R⁷ skupiny môžu byť rovnaké alebo rozdielne, R⁸ je vodík, nižší alkyl, fenyl-nižší alkyl alebo -C(O)R⁹, R⁹ je vodík, nižší alkyl, fenyl alebo fenyl-nižší alkyl, R¹⁰ a R¹¹ sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a nižší alkyl,

R¹² je vodík OH, alkoxy, fenoxy, benzyloxy, r~^ , -NR'“R¹¹, nižší alkyl, fenyl alebo R^l4-fenyl,

R¹³ je -0-, -CH₂-, -NH- alebo -N(nižší alkyl)-, a

R¹⁴ sú 1 až 3 skupiny vybrané nezávisle zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, nižší alkoxy, -COOH, N0₂, -NR¹⁰R, OH alebo halogénovú skupinu alebo ich farmaceutický prijateľné soli.

Výhodne vo všeobecnom vzorci β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu

R je vodík,

D je B'-(CH₂)_q-, B'-(CH₂)_e-Z-(CH₂)r, B'-(C₂-C₆alkenylén)alebo B'-(CH₂)f-V-(CH2)_g-, kde B', Z, V, q, e, r, f a g sú definované,

R⁴ je fenyl, R⁷-substituovaný fenyl alebo indanyl, kde R⁷ je nižší alkyl, nižší alkoxy, halogénová skupina, -OCF3, nižší alkyltio, -NR¹⁰R, -CN, OH alebo COR¹², kde R¹⁰, R¹¹ a R¹² majú význam definovaný v nároku 2 a A je -(CH2)_P-X-B, kde X, B a p sú definované.

Ďalej je výhodné, ak vo všeobecnom vzorci β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu D je B'-(CH₂)_q-, kde B' je fenyl a q je 3 alebo 4, B'-(CH₂X-Z-(CH₂)_r-, kde B' je p-fluorfenyl alebo p-metoxyfenyl, ójc. nula, Z je -O- a r je 2, B'-(C₂-C₆alkenylén)-je 3-fenyl-l-propenyl, alebo B'-(CH₂)f-V-(CH₂)g-, kde B' je fenyl, f-je1, V je cyklopropylén a g je nula,

A je -(CH₂)_p-X-B, kde p je nula, X je väzba a B je definované,

R¹, R² a R³ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, OH, -N02, nižší alkoxy, alkoxyalkoxy, nižší, alkyl nižší alkandioyl, m-halogénovú skupinu, NR^,eRŽ^l(nižší alkoxy), alyloxy, fenoxy, aikoxykarbonylalkoxý-a·· -C(0)R¹², pričom R¹⁰, R¹¹ a R¹² majú definovaný význam, R⁴ je (R⁷)n-substituovaný fenyl, v ktorom n je 1 a R⁷ je nižší alkyl, nižší alkoxy, halogénová skupina, -OCF₃, nižší alkyltio, -NR¹⁰R, -CN, OH alebo -COR¹², pričom R¹⁰, R a R¹² majú definovaný význam.

i i i í

i

kde R²⁰ je fenyl, W-substituovaný fenyl, naftyl, W-substituovaný naftyl, benzodioxolyl, heteroaryl, W-substituovaný heteroaryl, heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom a W-substituovaný heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom, pričom heteroaryl je definovaný;

R²¹, R²² a R²³ sú nezávisle vybrané zo skupiny zloženej z H alebo R²⁰;

W sú 1-3 substítuenty nezávisle vybrané ako je uvedené;

E, F a G sú nezávisle: väzba; C₃-C6cykloalkylén; C_rCi_Oalkylén; C_rCioalkenylén; C|-C|_Oalkinylén; alkylénový, alkenylénový alebo alkinylénový definovaný reťazec, substituovaný jedným alebo viacerými substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej fenyl, W-substituovaný fenyl, heteroaryl a W-substituovaný heteroaryl, kde heteroaryl je definovaný; alkylénový, alkenylénový alebo alkinylénový definovaný reťazec, substituovaný

SK 281173 Β6 jedným alebo viacerými substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej -0-, -S-, -S0-, -SO--, NR⁸, -C(0)-, -C₃-C₆cykloalkylén, fenylén, W-substituovaný fenylén, heteroarylén a W-substituovaný heteroarylén; alebo prerušený alkylénový, alkenylénový alebo alkinylénový definovaný reťazec, substituovaný jedným alebo viacerý mi substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahrnujúcej fenyl, W-substituovaný fenyl, heteroaryl a W-substituovaný heteroaryl; alebo jeden zo substituentov R²¹ -E a R²²-F je vybraný zo skupiny zahrnujúcej halogénovú skupinu, OH, nižší alkoxy, -OC (O)R⁵NR¹⁰R“, -SH alebo S (nižší alkyl); kde R⁵, R⁶ a R⁸-R¹⁴ sú definované; za predpokladu, že G je väzba, R²³ nie je H a ak R²³ je W-substituovaný fenyl, potom W nie je p-halogénová skupina; alebo ich farmaceutický nezávadné soli.

Výhodne sú využívané zlúčeniny podľa vzorca (I), kde R je H. Iná skupina látok výhodne užívaných podľa vzorca (I) je tá, v ktorej je B'-(CH₂),-, B'-(CH₂)-Z-(CH₂)_r; B'-(C₂-C₆ alkenylén)- alebo B'-(CH₂)_rV-(CH₂)_q-, kde B', Z, V, q, e, r, f a g sú definované. Treťou skupinou výhodne používanou pri užívaných zlúčeninách podľa vzorca (I) je tá, v ktorej R⁴ je fenyl, R⁷-substituovaný fenyl alebo indanyl. Ďalšia skupina výhodne používaných zlúčenín podľa vzorca (I) je tá, v ktorej A je -(CH₂)_P-X-B, kde X, B e P sú definované.

Osobitne výhodné sú zlúčeniny podľa vzorca (I), v ktorých D je:

B'-(CH₂)-, pričom B' je fenyl a q je 3 alebo 4; B'-(CH₂)_e-Z-(CH₂)_r, pričom B' je p-fluorofenyl alebo p-metoxyfenl, e je nula, Z je -O- a r je 2;

B'-(C₂-C₆alkenylén)-je 3-fenyl-l-propenyl; alebo B'-(CH₂)f-V-(CH₂)_q-, pričom B'je fenyl, f je 1, V je cyklopropylén a g je nula. Osobitne výhodné sú ďalej zlúčeniny podľa vzorca (I), v ktorých A je -(CH₂)-X-B, pričom p je nula a X je väzba. R¹, R² s R³ vo vzorci (I) sú výhodne vybrané zo skupiny zahrnujúcej H, OH, -N0₂, nižší alkoxy, alkoxyalkoxy, nižší alkyl-nižší alkándiol, m-halogénovú skupinu, NR¹⁰R(nižší alkoxy)-, alyloxy, fenoxy, alkoxykarbonylalkoxy a -C(O)R¹². Zlúčeniny podľa vzorca (I), v ktorých tak R¹, ako aj R³ sú H, a R² je v pozícii para, sú ešte výhodnejšie.

R⁷ vo vzorci (I) sa výhodne vyberá zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, nižší alkoxy, halogénovú skupinu, -OCF₃, nižšiu alkyltioskupinu, NR¹⁰Rⁿ, -CN, OH a -COR¹². Ešte výhodnejšie sú zlúčeniny podľa vzorca (I), v ktorých n je 1 a R⁷ je v para pozícii.

Výhodne používaný B-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu je (3R-4S)-l,4-bis(4-metoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinón.

Konkrétne B-laktámovým inhibítorom absorpcie cholesterolu je (3R-4S)-l,4-bis-(4-metoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinón.

Inhibítor biosyntézy cholesterolu je vybraný zo skupiny zahrnujúcej inhibítory 3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým A reduktázy, inhibítory syntézy skvalénu a inhibítory skvalénepoxidázy ako aj zo skupiny zahrnujúcej lovastatín, pravastatín, fluvastatín, simvastatín, CI-981, L659, 699, skvalestatín 1 a NB-598.

Vynález opisuje aj farmaceutický prostriedok na liečbu alebo prevenciu aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu v plazme, ktorý obsahuje B-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu, inhibítor biosyntézy cholesterolu a farmaceutický prijateľný nosič.

Inhibítor biosyntézy cholesterolu je vybraný zo skupiny zahrnujúcej inhibítory 3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým A reduktázy, inhibítory syntézy skvalénu, inhibítory skva lénepoxidázy, lovastatín, pravastatín, fluvastatín, simvastatín, CI-981, L659,699, skvalestatín 1 aNB-598.

Predmetom vynálezu je aj súprava obsahujúca v oddelených nádobkách v jednom balení farmaceutické prostriedky na použitie v kombinácii pri liečbe alebo prevencii aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu, v ktorej jedna nádoba obsahuje účinné množstvo inhibítora biosyntézy cholesterolu vo farmaceutický prijateľnom nosiči a druhá nádoba obsahuje účinné množstvo B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu vo farmaceutický prijateľnom nosiči.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady a testy opisujú a ukazujú účinnosť kombinácie podľa opisovaného vynálezu na zníženie hladiny cholesterolu v plazme. V testoch bol použitý (3R-4S)-1,4-bis(4-metoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinón (ďalej látka A) ako B-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu a lovastatín ako inhibitor HMG CoA reduktázy.

Príklad 1

Hypocholesterolemický účinok kombinácie látky A a lovastatínu na škrečky kŕmené cholesterolom

Postup

Samci zlatého škrečka sýrskeho (Charles River Labs, Wilmington, MA.) s telesnou hmotnosťou 100 až 125 g boli živení Wayneho diétou pre hlodavce až do začiatku pokusu. Na začiatku pokusu (1. deň) boli chrčkovia rozdelení do skupín (n = 4 - 6 v skupine) a kŕmení diétou Purina Chow 5001 doplnenou 0,5 % hmotnostných cholesterolu (Research Diets Inc., New Brunsnrick, NJ.). Látka A (3 mg/kg) a lovastatín (10 mg/kg) boli podávané raz denne počas 7 dní začínajúc 1. dňom pomocou kŕmiacej kanyly v 0,2 ml kukuričného oleja. Zvieratá boli usmrtené 7. deň dekapitáciou , krv bola zachytená do skúmaviek obsahujúcich kyselinu ctylcndiamintetraocfiovú (EDTA) a plazma bola získaná centrifúgáciou pri nízkych otáčkach pri 4 °C.

Hladiny cholesterolu v plazme nakŕmených zvierat boli stanovené modifikáciou cholesteroloxidázovej metódy Allaina a spol., Clin. Chem. 20, 470-475 (1974). Činidlá nutné pre jej uskutočnenie boli v súprave od firmy Wako Pure Chemicals Industries, Ltd. (Osaka, Japonsko). Objem 10 ul séra bol použitý na stanovenie cholesterolu v 1 ml pufra obsahujúceho 0,15 M tris s pH 7,0 a ďalej p-chlorofenol (0,1 %), cholesteroloxidázu (0,13 U/ml), cholesterolesterhydrolázu (0,13 U/ml), peroxidázu (2,4 U/ml) a 4-aminoantipyrín (0,015 %). Stanovenia boli uskutočnené 10 min. pri 37 °C spolu so štandardmi cholesterolu, a absorbancie vzniknutého červeného chinónového farbiva boli stanovené spektrofotometricky pri 505 nm.

Výsledky

Škrečky kŕmené diétou obsahujúcou 0,5 % cholesterol počas Ί dni vykazovali dvojnásobné zvýšenie hladiny cholesterolu v plazme. Zvýšenie bolo hlavne vo VLDL a LDL (Schnitzer-Plokoff a spol., Comp. Biochem. Physiol. 99A, 665-670 (1991)). Látka A v dávke 3 mg/kg.deň spôsobila 15-% zníženie hladiny cholesterolu v plazme, zatiaľ čo lovastatín v dávke 10 mg/kg.deň nemal vplyv (tabuľka 1). Ak bola látka A a lovastatín podané v kombinácii, hladina cholesterolu v plazme sa znížila o 31 %, teda významne viac ako u každej z obidvoch látok podanej samostatne (tabuľka 1).

SK 281173 Β6

Tabuľka 1

Skupina

Dávka N (mg/kg.deň)

Kontrola

Látka A 3

Lovastatín 10

Látka A + Lovastatín (3 + 10)

Cholesterol v plašme chrikov (mg/dl)

227 i 6

196 t 6^a

223 - 14

156 í ll’dí

Hodnoty sú aritmetické priemery ± SEM. ^ap< 0,05 oproti kontrolnej skupine, ^bp< 0,05 oproti látke A alebo lovastatínu samotnému.

Príklad 2

Hypocholesterolemický účinok látky A v kombinácii s lovastatínom na králiky kŕmené cholesterolom

Postup

Králičí samci plemena Novozélandský biely s hmotnosťou 2,4 - 2,6 kg boli držaní 1 týždeň na diéte obsahujúcej 1 % cholesterolu a 6 % podzemnicového oleja. Zvieratá, ktorých odpoveď bola príliš nízka, alebo príliš vysoká, a ktoré vykazovali hladinu cholesterolu v sére odlišujúcu sa od priemeru o viac ako jednu strednú odchýlku boli vylúčené a boli utvorené štyri skupiny králikov s ekvivalentnou hladinou cholesterolu v sére (n = 8 v každej skupine). Králikom bola potom podávaná diéta obsahujúca 0,5 % cholesterolu a 6 % podzemnicového oleja, samotná, alebo spoločne s 0,03 % látka A; 0,015 % lovastatínu; alebo 0,03 % látky A a 0,015 % lovastatínu. Vzorky séra z nakŕmených zvierat boli odobrané raz týždenne počas 4 týždňov a hladiny cholesterolu v sére boli stanovené ako je opísané v príklade 1.

Výsledky

Jednotýždňové podávanie diéty s 1 % cholesterolu a 6 % podzemnicového oleja spôsobilo, že priemerné hladiny cholesterolu v sére boli približne 1 000 mg/dl (tabuľka 2). Všetky štyri skupiny králikov vykazovali počas 4-týždenného trvania pokusu podobnú spotrebu potravy a hmotnostné prírastky. Bolo vypočítané, žc dávka látky A rovná 0,03 % v diéte je 14 mg/kg.deň a 0,015 % dávka lovastatínu je 7 mg/kg.deň. V kontrolnej skupine sa zvýšili hladiny cholesterolu v sére za 4 týždne z 1 015 na 1 358 mg/dl (tabuľka 2). Látka A samotná spôsobila 29 %-né zníženie cholesterolu v sére po 4 týždňoch v porovnaní so začiatočnou hladinou, zatiaľ čo lovastatín samotný spôsobil za ten istý čas 33 %-né zníženie, podľa ANOVA však tieto časové zmeny neboli štatisticky významné. Kombinácia látky A a lovastatínu vyvolala štatisticky významné zníženie vo všetkých meraných týždenných intervaloch, pričom pokles po 4 týždňoch bol 61% oproti začiatočnej hladine (tabuľka 2). Relatívne zníženie hladiny cholesterolu v sére bolo ešte vyššie, ak hodnoty po 4 týždňoch boli porovnané s údajmi pre kontrolnú skupinu; v tomto prípade bol pokles spôsobený samotnou látkou A 47 %, samotným lovastatínom 51 % a pri kombinácii látky A s lovastatínom 72 %.

Tabuľka 2

Skupina Hladiny cholesterolu v sére králikov (mg/dl) Týždeň

	0	1	2 3	4
Kontrola	1015	1138	1316 1437	1358
	- 90	í 170	1 164 t 211	t 193
Látka A	1005	781	879* 808’	713*
(0,03 % v diéte)	89	- 122	t 109 t 121	t 112
Lovaatatín	993	895	839' 767*	667“
(0,01$ % v diéta)	Í 95	í 150	! ® t a?	t 81
Látka A * lovastatín	986	552^b·'	^b5o6*>^b427·’	^b382“'^b
(0,03 % + 0,015 *	Í 93	^76	t 56 t 62	t 66
v diéte)

Hodnoty predstavujú aritmetický priemer ± SEM s 8 králikmi v skupine ^ap< 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou; ^bp< 0,05 oproti hodnote v týždni 0 podľa ANOVA.

Príklad 3

Hypocholesterolemický účinok látky A v kombinácii s lovastatínom u opíc (Rhesus) kŕmených bezcholesterolovou diétou

Postup

Dvadsať opíc druhu Rhesus (17 samcov, 3 samice) s hmotnosťou 4,4 až 8,5 kg bolo kŕmených 2 týždne beztukovou opičou diétou (Perina 5038-7) obsahujúcou 5 % kukuričného oleja. Boli utvorené štyri skupiny opíc s ekvivalentnými hladinami cholesterolu a telesnou hmotnosťou (n = 5 v každej skupine). Opiciam bola ďalej potom podávaná beztuková diéta obsahujúca 5 % kukuričného oleja samotného alebo s 3 mg/kg. deň látky A; 20 mg/kg.deň lovastatínu; alebo látky A (3 mg/kg.deň) spolu s lovastatínom (20 mg/kg. deň). Vzorky séra na lačno boli odobrané každý týždeň počas 3 týždňov a hladiny cholesterolu v sére boli stanovené ako v príklade L Štatistické rozdiely boli stanovené pomocou programu ANOVA a Dunettového t-testu pre zmeny hladiny cholesterolu v sére. Úroveň pravdepodobnosti p<0,05 bola braná ako štatisticky významná.

Výsledky

Kontrolné zvieratá držané na beztukovej diéte obsahujúcej 5 % kukuričného oleja si udržiavali stálu hladinu cholesterolu v sére počas celého pokusného obdobia 3 týždne (tabuľka 3). Látka A (3 mg/kg.deň) s lovastatín (20 mg/kg.deň), ak boli podávané jednotlivo, spôsobili ľahké zníženie hladiny cholesterolu v sére po 3 týždňoch, tieto výsledky však neboli štatisticky významné v porovnaní s kontrolnou skupinou po 3 týždňoch. Kombinácia látky A * lovastatínu spôsobila pri všetkých pokusných intervaloch významne vyššie zníženie cholesterolu v plazme ako každý z obidvoch prostriedkov samotný a dosiahla 25 %-né znfeženie 3. týždeň (tabuľka 3). >>.

Tabuľka 3

Skupina Hladiny cholesterolu v sére opíc

	O	1	(mg/dl) Týždeň 2	3
Kontrola	131	129	125	132
	íl	⁺-7	í 8	í 8
Látka A	140	122	117	125
(3 mg/kg.deň)	í 10	in	1 7	1 9
Lovestatín	139	127	117	120
(20 mg/kg7deň)	⁺-7	1 6	i 5	1 6
Látka A + lovastatín 136	108*	101	102’
(3 + 20 mg/kg.deň) (v diéte)	i 8	í 7	i 7	1 8

Hodnoty predstavujú aritmetický priemer ± SEM s 5 opicami v skupine. *p< 0,05 v porovnaní s kontrolnou skupinou.

Príklad 4

Hypocholesterolemický účinok látky A v kombinácii s lovastatínom u psov kŕmených štandardnou diétou

Postup

Pätnásť psov (samcov) plemena bígel bolo rozdelených do troch skupín s ekvivalentnými hladinami cholesterolu v sére a telesnou hmotnosťou (n = 5 v každej skupine). Psi boli kŕmení 7 dni diétou Perina Dog Chow (5006) obsahujúcou maltodextrín a buď 0,0234 % látky A, alebo 0,0234 % lovastatínu, alebo kombináciu látky A (0,0234 %) a lo5

SK 281173 Β6 vastatínu (0,0234 %). Vzorky séra boli získané na začiatku,

3. a 7. deň a celkové hladiny cholesterolu v sére boli stanovené ako v príklade 1.

Štatistické rozdiely boli stanovené pomocou programu ANOVA a úroveň pravdepodobnosti p < 0,05 bola braná ako štatisticky významná.

Výsledky

Psi kŕmení štandardnou diétou obsahujúcou buď látku A v koncentrácii 0,0234 % (5 mg/kg.deň) alebo lovastatín (0,0234 %, teda 5 mg/kg. deň) vykazovali hladiny cholesterolu v sére, ktoré sa nelíšili 3. ani 7. deň od začiatočného stavu hodnôt (tabuľka 4). Kombinácia látky A (0,0234 %, teda 5 mg/kg.deň) a lovastatínu (0,0234 %, teda 5 mg/kg.deň) spôsobila 33 %-né zníženie hladiny cholesterolu v sére 7. deň v porovnaní so začiatočnou hodnotou (tabuľka 4).

Tabuľka 4

Skupina	Hladiny cholesterolu v sére psov (mg/dl) Deň
0	3	7
Dátke A	114	106	109
(5 mg/kg.deň)	Í 5	- 13	- 10
Lovestatín	107	10?	114
(5 mg/kg.deň)	- 10	- 8	Í 9
Látka A * lovastatín	109	89	77®, b
(3*5 mg/kg.deň)	ie	- 4	ÍJ

Hodnoty predstavujú aritmetický priemer ± SEM s 5 psami v skupine. ^ap < 0,05 v porovnaní so začiatočnou hodnotou, ^bp < 0,05 v porovnaní s hodnotami pre 7, deň so samotnou látkou A alebo samotným lovastatínom.

Pretože sa vynález týka spôsobu liečby zloženej z podania kombinácie obidvoch zložiek, tieto zložky môžu byť podávané súčasne alebo po sebe, alebo môže byť podávaný jediný farmaceutický prostriedok skladajúci sa z inhibítora biosyntézy cholesterolu a β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu vo farmaceutický nezávadnom nosiči. Zložky kombinácie môžu byť podávané samotné alebo spolu v akejkoľvek obvyklej perorálnej alebo parenterálnej forme, ako sú kapsule, tablety, prášok, prášok v oplátke, suspenzie alebo roztok. Prostriedky je možné pripraviť použitím obvyklých farmaceutických nosičov a aditív a obvyklých techník. Takéto farmaceutický nezávadné nosiče a aditíva zahrnujú netoxické plnivá, spojivá, činidlá zaisťujúce ľahký rozklad, pufre, konzervačné látky, antioxidanty, mazivá, stučňovadlá, činidlá zvyšujúce hustotu, farbivá a emulgátory.

Reprezentatívne zostavy zahrnujúce β-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu sú opísané v PCT/US92/05972, ktorý je citovaný. Reprezentatívne zostavy zahrnujúce inhĺbítor biosyntézy cholesterolu sú dobre známe odborníkom v obore. Tam, kde tieto dve aktívne zložky sú podávané ako jediný prostriedok, formy podávania opísané v citovanej prihláške PCT môžu byť ľahko modifikované odborníkmi v obore.

Denné dávky látok v kombinácii podľa opisovaného vynálezu, ktorá je použiteľná na zníženie hladiny cholesterolu v plazme, sú tieto: typické dávkovanie inhibítorov biosyntézy cholesterolu u cicavcov je 0,1 až 80 mg/kg telesnej hmotnosti za deň, podávané v jednej alebo viacerých dávkach, obvykle raz až dvakrát denne, typické dávkovanie B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu u cicavcov je 0,1 až 10 mg/kg telesnej hmotnosti za deň v jednej alebo viacerých dávkach. Presné dávkovanie akejkoľvek zložky podávanej kombinácie je stanovené ošetrujúcim lekárom a závisí od účinnosti podávanej látky, veku, telesnej hmotnosti, zdravotného stavu a odpovede pacienta.

Na zníženie hladiny cholesterolu v plazme u jedincov potrebujúcich takúto liečbu sa látky v kombinácii podľa vynálezu podávajú pacientom všeobecne v takýchto dávkových rozsahoch: 10 až 40 mg inhibítorov HMG CoA reduktázy sa podáva obvykle raz až dvakrát denne, takže celková dávka je 10 až 80 mg na deň. Pre ďalšie inhibítory biosyntézy cholesterolu sa podáva dávka 1 až 1 000 mg raz až dvakrát denne, takže celková denná dávka je 1 mg až 2 g. Pokiaľ ide o B-laktámové inhibítory absorpcie cholesterolu, podáva sa dávka 1 až 1 000 mg raz až štyrikrát denne. V prípade, že zložky kombinácie sa podávajú oddelene, počet dávok jednotlivých zložiek za deň nemusí byť nutne rovnaký, napr. ak jedna zložka má dlhšiu aktivitu pôsobenia a môže byť teda podávaná menej často.

Pretože opisovaný vynález sa týka zníženia hladiny cholesterolu v plazme pôsobením kombinácie aktívnych zložiek, ktoré môžu byť podávané oddelene, týka sa tiež kombinovania farmaceutických prostriedkov vo forme súpravy. Takáto súprava obsahuje dve oddelené zložky: farmaceutický prostriedok obsahujúci inhibítor biosyntézy cholesterolu a farmaceutický prostriedok obsahujúci B-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu. Súprava bude výhodne obsahovať návod na podávanie jednotlivých zložiek. Forma súpravy je osobitne výhodná, ak jednotlivé zložky majú byť podávané v odlišných formách (napr. perorálnej a parenterálnej) alebo v rôznych intervaloch.

Priemyselná využiteľnosť

Kombinácie inhibítorov biosyntézy cholesterolu a B-laktámových inhibítorov absorpcie cholesterolu pripraviteľné pomocou spôsobu podľa vynálezu sú použiteľné na zníženie hladiny cholesterolu v plazme a ďalej na spôsob liečby alebo na prevenciu aterosklerózy, založený na podávaní týchto kombinácií.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie kombinácie B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu s inhibítorom biosyntézy cholesterolu na výrobu lieku na liečbu alebo na prevenciu aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu v plazme.
2. Použitie podľa nároku 1, kde B-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu má všeobecný vzorec v ktorom

A je -CH=CH-B, -C=C-B, -(CH₂)_p-X-B, kde p je 0, 1 alebo 2 a X je väzba, -NH- alebo -S(O)₀.₂, heteroaryl, heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom, W-substituovaný heteroaryl alebo W-substituovaný heteroaryl s prikondenzovaným benzénovým kruhom, pričom heteroaryl je vybraný zo skupiny zahrnujúcej pyrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, triazinyl, imidozalyl, tiazolyl, tienyl, oxazolyf a furanyl, ďalej heteroaryly obsahujúce dusík, ich N-oxidy, kde W sú 1 až 3 substituenty na uhlíkových atómoch kruhu, vybrané zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, hydroxyalkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, alkoxykarbonylalkoxy, (nižší alkoxy-imino)nižší alkyl, nižší alkándioyl, nižší alkyl nižšieho alkándiolylu, alyloxy,

SK 281173 Β6

CF₃, -OCF₃, benzyl, R¹⁴-benzyl, benzyloxy, R^l4-benzyloxy, fenoxy, R¹⁴-fenoxy, dioxolanyl, NO2, NR¹⁰Rⁿ, NR^R¹'(nižší alkyl)-, NR¹⁰R‘‘(nižší alkoxy)-, OH, halogén, NHC(O)OR⁵, NHC(O)R⁵, R⁶O2SNH-, (R⁶O2S)2N-, -S(O)2NH2, -S(0)o.2R¹⁰, terc.-butyldimetylsilyloxymetyl, -C(O)R¹² a -CH2-N R¹³, pričom substituenty na substituovaných atómoch heteroarylového kruhu, ak sú prítomné, sú vybrané zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, alkoxy, -C(O)OR⁵, -C(O)R⁵, OH, NR^R¹'(nižší alkyl)-,

NR‘°Rⁿ(nižší alkoxy)-, -(SO)₂ NH₂ a 2-(trimetylsily)etoxymetyl, -C(O)B alebo -(CH₂)_k-N R¹³, kde k je 1 alebo 2,

D je B'-(CH₂)mC(O)-, kde m jc 1, 2, 3, 4 alebo 5, B'-(CH₂)_q-, kde q je 2, 3, 4, 5 alebo 6,

B’-(CH₂)eZ(CH₂)_r-, kde Z je -0-, -C(0)-, fenylén, -NR^Salebo -S(O)0.2, e je 0,1, 2, 3,4 alebo 5 a r je 1, 2, 3,4 alebo 5 ak súčet e a r je 1,2, 3,4, 5 alebo 6, B'-(C2-C6alkenylén)-, B'-(C4-C⁶alkadienylén)-, B'-(CH2)_tZ(C₂-C₆alkenylén)-, kde Z je definované a kde t je 0,1, 2 alebo 3, ak súčet t a počtu uhlíkových atómov v alkenylénovom reťazci je 2,3,4, 5 alebo 6,

B'-(CH₂)f-V-(CH₂)_g-, kde V je C₃-C₆cykloalkylén, f je 1, 2, 3, 4 alebo 5 a g je O, 1, 2, 3, 4 alebo 5, ak súčet fa gje 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, B'-(CH₂)í-V-(C₂-C₆alkenylén)- alebo B'-(C₂-C₆alkcnylén)-V-(CH₂)_t-, kde V a t sú definované, ak súčet t a počtu uhlíkových atómov v alkenylénovom reťazci je 2,3,4,5 alebo 6,

B'-(CH₂)_a-Z-(CH₂)_b-V-(CH₂)_d-, kde Z a V sú definované a a, b a d sú nezávisle od seba 0,1,2, 3, 4, 5 alebo 6, ak súčet a, b ad je 0,1,2,3,4,5 alebo 6,

T-(CH₂)s-, kde T je cykloalkyl s 3 až 6 atómami uhlíka a s je 1,2,3,4, 5 alebo 6, alebo naftylmetyl, heteroarylmetyl alebo W-substituovaný heteroarylmetyl, kde heteroaryl a W sú definované, B je

B' je naftyl, heteroaryl alebo W-substituovaný heteroaryl, kde heteroaryl je definovaný alebo

R je vodík, fluór, C|-_I5alkyl, C_ri5alkenyl, Ci-₁₅alkinyl alebo B-(CI l₂)_h, kde h je 0,1, 2 alebo 3,

R¹, R² a R³ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a W za predpokladu, že ak W je halogénová skupina, je to h-halogénová alebo m-halogénová skupina, alebo R* je vodík a R² a R³ spolu so susediacimi atómami uhlíka, na ktoré sú viazané, tvoria dioxolanylový kruh, R¹', R² a R³’ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a W alebo R¹' je vodík a R² a R³ spolu so susediacimi atómami uhlíka, na ktoré sú viazané, tvoria dioxalanylový kruh,

R⁴ je , kde a je 0,1,2 alebo 3, indanyl, benzofuranyl, benzodioxolyl, tetrahydronaftyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl alebo chinolyl,

R^s je nižší alkyl, fenyl, R^I4-fenyl, benzyl alebo R¹⁴-benzyl, R⁶ je OH, nižší alkyl, fenyl, R¹⁴-fenyl, benzyl alebo R^l4-benzyl,

R⁷ je nižší alkyl, alkoxy, OH, halogén, -NR¹⁰R“, -NHC(O)OR⁵, -NHC(O)R⁵, N0₂, -CN, -N₃, -Síl, -S(0)o.₂

-(nižší alkyl), -COOR⁹, -CONR¹⁰R“, -COR¹², fenoxy, benzyloxy, -0CF₃ alebo terc.-butyldimetylsiloxy a kde a je 2 alebo 3, R⁷ skupiny môžu byť rovnaké alebo rozdielne, R⁸ je vodík, nižší alkyl, fény 1-niž.ší alkyl alebo -C(O)R⁹, R⁹ je vodík, nižší alkyl, fenyl alebo fenyl-nižší alkyl, R¹⁰ a R“ sú nezávisle vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík a nižší alkyl,

R¹² je vodík OH alkoxy, fenoxy benzyloxy, , NR^IOR“, nižší alkyl, fenyl alebo R¹⁴-fenyl,

R¹³ je -0-, -CH₂-, -NH- alebo -N(nižší alkyl)-, a

R¹⁴ sú 1 až 3 skupiny vybrané nezávisle zo skupiny zahrnujúcej nižší alkyl, nižší alkoxy, -COOH, N₂, -NR¹⁰R“OH alebo halogénovú skupinu, alebo ich farmaceutický prijateľné soli.
3. Použitie podľa nároku 2, kde vo všeobecnom vzorci β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu

R je vodík,

D je B’-(CH₂)_q-, B'-(CH₂)_e-Z-(CH₂)_r-, B'-(C₂-C₆alkenylén)alebo B'-(CH₂)f-V-(CH₂)_g-, kde B', Z, V, q, e, r, f a g sú definované v nároku 2,

R⁴ je fenyl, R⁷-substituovaný fenyl alebo indanyl, kde R⁷ je nižší alkyl, nižší alkoxy, halogénová skupina, -OCF₃, nižší alkyltio, -NR¹⁰R¹¹, -CN, OH alebo COR¹², kde R¹⁰, R¹¹ a R¹² majú význam definovaný v nároku 2 a

A je -(CH₂)_p-X-B, kde X, B a p sú definované v nároku 2.
4. Použitie podľa nároku 2, kde vo všeobecnom vzorci β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu

D je B'-(CH₂)_q-, kde B'je fenyl a q je 3 alebo 4, B'-(CH₂)_c-Z-(CH₂)_r-, kde B'je p-fluorfenyl alebo p-metoxyfenyl, e je nula, Zje -O- a r je 2, B'-(C₂-C₆ alkenylén)-je 3-fenyl-l-propenyl, alebo Β'-(ΰΗ₂)_Γν-(ΓΗ₂)_β-, kde B' je fenyl, f je 1, V je cyklopropylén a gje nula,

A je -(CH₂)_P-X-B, kde p je nula, X je väzba a B je definované v nároku 2,

R¹, R² a R³ sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny zahrnujúcej vodík, OH, -N0₂, nižší alkoxy, alkoxyalkoxy, nižäf alkyl nižší alkandioyl, m-halogénovú skupinu, NR¹⁰R¹¹' (nižší alkoxy), alyloxy, fenoxy, alkoxykarbonylalkoxy a -C(0)R¹², pričom R¹⁰, R¹¹ a R¹² majú význam definovaný v nároku 2,

R⁴ je (R⁷)„-substituovaný fenyl, v ktorom n je 1 a R⁷ je nižší alkyl, nižší alkoxy, halogénová skupina, -OCF₃, nižší alkyltio, -NR¹⁰R-CN, OH alebo -COR¹², pričom R¹⁰, R¹¹ a R¹² majú význam definovaný v nároku 2.
5. Použitie podľa nároku 2, kde β-laktámovým inhibítorom absorpcie cholesterolu je (3R-4S)-l,4-bis-(4-metoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinón.
6. Použitie podľa nároku 1, kde inhibítor bíosyntézy cholesterolu je vybraný zo skupiny zahrnujúcej inhibítory 3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým A reduktázy, inhibítory syntézy skvalénu a inhibítory skvalénepoxidázy.
7. Použitie podľa nároku 1, kde inhibítor biosyntézy cholesterolu je vybraný zo skupiny zahrnujúcej lovastatin, pravastatín, fluvastatín, simvastatín, CI-981, L659, 699, skvalestatín 1 aNB-598.
8. Farmaceutický prostriedok na liečbu alebo prevenciu aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu v plazme, vyznačujúci sa tým, že obsahuje β-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu, inhibítor biosyntézy cholesterolu a farmaceutický prijateľný nosič.
9. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 8, vyzná í u j ú c i sa tým, že inhibítor biosyntézy cholesterolu je vybraný zo skupiny zahrnujúcej inhibítory 3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým A reduktázy, inhibítory syntézy skvalénu, inhibítory skvalénepoxidázy, lovasta7

SK 281173 Β6 tin, pravastatín, fluvastatín, simvastatín, CI-981, L659, 699, skvalestatín 1 a NB-598.
10. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 8, vyzná č u j ú c i sa tým,žc obsahuje β-laktámový inhibítor absorpcie cholesterolu definovaný v nárokoch 2 až 5.
11. Súprava obsahujúca v oddelených nádobkách v jednom balení farmaceutické prostriedky na použitie v kombinácii pri liečbe alebo prevencii aterosklerózy alebo na zníženie hladiny cholesterolu, vyznačujúca sa t ý m , že jedna nádoba obsahuje účinné množstvo inhibítora biosyntézy cholesterolu vo farmaceutický prijateľnom nosiči a druhá nádoba obsahuje účinné množstvo B-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu vo farmaceutický prijateľnom nosiči.
12. Súprava podľa nároku 11, vyznačuj úca sa t ý m , že jedna nádoba obsahuje účinné množstvo inhibítora biosyntézy cholesterolu definovaného v nárokoch 6 alebo 7 vo farmaceutický prijateľnom nosiči a druhá nádoba obsahuje účinné množstvo β-laktámového inhibítora absorpcie cholesterolu definovaného v nárokoch 2 až 5 vo farmaceutický prijateľnom nosiči.