RU2117672C1 - Липопептиды, способ получения, лекарственное средство и штамм actinoplanes sp. dsm 7358 в качестве продуцента липопептидов - Google Patents
Липопептиды, способ получения, лекарственное средство и штамм actinoplanes sp. dsm 7358 в качестве продуцента липопептидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2117672C1 RU2117672C1 RU94022485/04A RU94022485A RU2117672C1 RU 2117672 C1 RU2117672 C1 RU 2117672C1 RU 94022485/04 A RU94022485/04 A RU 94022485/04A RU 94022485 A RU94022485 A RU 94022485A RU 2117672 C1 RU2117672 C1 RU 2117672C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lipopeptides
- lipopeptide
- chromatography
- fatty acid
- buffer
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
- C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
- C07K7/60—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation occurring through the 4-amino group of 2,4-diamino-butanoic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/827—Actinoplanes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Oncology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Использование: в медицине. Сущность изобретения: липопептиды формулы I:
,
где R1 = 3,4-ненасыщенная или насыщенная или независимо от этого разветвленная или неразветвленная жирная кислота с длиной цепи от 12 до 15 включительно атомов углерода; способ их получения заключается в том, что культивируют Actinoplanes sp. DSM-7358 в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минерального вещества в аэробных условиях с последующим выделением посредством осаждения при pH 0,5 - 4,0 и очисткой на ионообменных смолах или хроматографии на гидрофобной матрице, причем обе хроматографии можно проводить альтернативно или последовательно в любой последовательности, лекарственное средство, обладающее антибиотической активностью против граммположительных бактерий, в особенности против бактерий, устойчивых к гликопептидам на основе активнодействующего вещества и соответствующего фармацевтического носителя, содержащее в качестве активного вещества липопептиды формулы I в эффективном количестве; штамм Actinoplanes sp. DSM-7358 в качестве продуцента липопептидов I. 4 с. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил. , 4 табл.
где R1 = 3,4-ненасыщенная или насыщенная или независимо от этого разветвленная или неразветвленная жирная кислота с длиной цепи от 12 до 15 включительно атомов углерода; способ их получения заключается в том, что культивируют Actinoplanes sp. DSM-7358 в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минерального вещества в аэробных условиях с последующим выделением посредством осаждения при pH 0,5 - 4,0 и очисткой на ионообменных смолах или хроматографии на гидрофобной матрице, причем обе хроматографии можно проводить альтернативно или последовательно в любой последовательности, лекарственное средство, обладающее антибиотической активностью против граммположительных бактерий, в особенности против бактерий, устойчивых к гликопептидам на основе активнодействующего вещества и соответствующего фармацевтического носителя, содержащее в качестве активного вещества липопептиды формулы I в эффективном количестве; штамм Actinoplanes sp. DSM-7358 в качестве продуцента липопептидов I. 4 с. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил. , 4 табл.
Description
Для характеристики штамма Actinoplanes sp. DSM 7358 проводят сравнение близко родственных штаммов по методу ISP, разработанному Ширлингом и Готлибом (Int. J. of Sys. Bacteriol. 16, 3 (1966), стр. 313 - 340). Результаты сравнений, приведенные в таблице 1, показывают, что штамм Actinoplanes sp. DSM 7358 по своим морфологическим и физиологическим признакам отличается от других штаммов.
3a) Получение липопептида A 1437 B и D.
Ферментер на 500 л запускают в работу при следующих условиях:
Питательная среда: 11 г/л сахарозы, 6 г/л мясного экстракта, 0,3 г/л экстракта дрожжей, 0,6 г/л сульфата магния, 0,1 г/л KH2PO4, 10 мкм FeCl3•6H2O, 0,6 г/л L-валина, pH 7,3 (перед стерилизацией)
Продолжительность инкубации: 120 часов
Температура при инкубации: 30oC
Скорость при перемешивании: 50 об/мин,
Аэрационные условия: 150 л мин-1
Путем повторного добавления этанольного раствора полиоли удается подавить процесс пенообразования. Производство штамма достигает максимума через 96 - 120 часов.
Питательная среда: 11 г/л сахарозы, 6 г/л мясного экстракта, 0,3 г/л экстракта дрожжей, 0,6 г/л сульфата магния, 0,1 г/л KH2PO4, 10 мкм FeCl3•6H2O, 0,6 г/л L-валина, pH 7,3 (перед стерилизацией)
Продолжительность инкубации: 120 часов
Температура при инкубации: 30oC
Скорость при перемешивании: 50 об/мин,
Аэрационные условия: 150 л мин-1
Путем повторного добавления этанольного раствора полиоли удается подавить процесс пенообразования. Производство штамма достигает максимума через 96 - 120 часов.
После окончания ферментации Actinoplanes sp. DSM 7358 культуральный бульон фильтруют при добавлении около 2% фильтрующего средства (например, целита®), культуральный фильтрат охлаждают до 4oC и pH устанавливают на уровне 1,5. Через 4 часа продукт обрабатывают на центрифуге при 10000 об.(g) и образующий осадок повторно суспендируют в дистиллированной воде. Путем нейтрализации суспензии указанное вещество переходит в раствор. Последний вымораживают и лиофилизируют. Выход составляет около 1,5 г/л сырого продукта (= 750 г).
3b) Разделение сырого продукта методом йонной хроматографии (с получением B + D).
Хроматографическую колонку емкостью 3,2 л (10 см внутренний диаметр х 40 см высота) загружают DEAE-сефарозой Фаст-Флау и эквилибрируют 10 ммолями калийфосфатного буфера, pH 7,0 в 40% метанола (буфер A). Затем в колонке растворяют 25 г A 1437 B сырого продукта (полученного от аналогии с примером 3a) в 3,5 л воды, вводят в колонку и промывают 1 л воды, а затем 6 л буфера A. В прогоне и промывных водах остаются примеси сырого продукта. Затем вводят 10 - 100 ммолей фосфата калия, pH 7,0-градиента в 40% метаноле, 25 - 35 ммолями фосфата калия элюируют A 1437 D-пептид и с 40 - 55 ммолями выделяют антибиотик А 1437 B.
Соответствующие фракции очищают от метанола под вакуумом. Для очистки от солей используют проникающую дианионовую колонку HP-20, производства фирмы Мицубиси, Япония, емкостью 1 л, 9 л фракций, содержащих чистый B-пептид, подают в колонку, после чего промывают 3 л очищенной от солей воды. Элюируют смесью воды-изопропанола по градиентному методу (0 - 50% спиртовых компонентов). Путем промывания 15 - 25% изопропанола чистый A 1437 B очищают от носителя. Этот продукт из колонки специально собирают, концентрируют в вакууме и подвергают криогенной сушке. Получают 4,8 г A 1437 B 97%-ной чистоты. После соответствующего обессоливания A 1437 D-содержащих фракций получают 3,1 г антибиотика. Чистота составляет 98%.
4a) Получение липопептидов A 1437 A и C.
Процесс получения аналогичен описанному в п. 3a с той лишь разницей, что L-валин в питательной среде заменяют на 4 г/л лейцина и ферментацию проводят в 50 л биореакторе. Выход составляет 1,3 г/л сырого пептида (= 65 г).
4b) Выделение липопептидов A 1437 A и C.
10 г сырого продукта растворяют в 100 мл дистиллированной воды и обрабатывают в соответствии с представленной ниже схемой.
Схема обработки сырого продукта: 10 г сырого пептида в 100 мл дистиллированной воды.
↓
Адсорбация на Q-сефарозе в быстром потоке (фирма Фармазия) (5 х 20 см колонка)
↓
Элюирование со следующими градиентами: буфер A: NaH2PO4 1 ммоль в 50% метаноле, pH 5,9; буфер B: NaH2PO4 100 ммолей в 50% метаноле, pH 5,3; 20 мин.: буфер A 60 мин при 25% в буфере B, затем 30 минут при 25% в буфере B,
↓
Лиофилизация A 1437 A или C-фракций и растворение в элюенте.
Адсорбация на Q-сефарозе в быстром потоке (фирма Фармазия) (5 х 20 см колонка)
↓
Элюирование со следующими градиентами: буфер A: NaH2PO4 1 ммоль в 50% метаноле, pH 5,9; буфер B: NaH2PO4 100 ммолей в 50% метаноле, pH 5,3; 20 мин.: буфер A 60 мин при 25% в буфере B, затем 30 минут при 25% в буфере B,
↓
Лиофилизация A 1437 A или C-фракций и растворение в элюенте.
↓
Удаление солей на биогеле P2 (100 - 200 меш) фирмы Биорад (колонка 7 х 20 см)
↓
1,6 г липопептида A 1437 A (80%-ный) 1,2 г липопептида A 1437 C (80%-ный)
↓
RP-хроматография на нуклеозиле ®C18 (7 мкм) (колонка 20 х 250 мм, 200 мг загрузка)
Элюирование со следующими градиентами: буфер A: дистиллированная вода, 0,1% ТФА; буфер B: ацетонитрил; 10 мин: буфер B 60 мин - 90% буфер B при скорости потока 10 мл/мин.
Удаление солей на биогеле P2 (100 - 200 меш) фирмы Биорад (колонка 7 х 20 см)
↓
1,6 г липопептида A 1437 A (80%-ный) 1,2 г липопептида A 1437 C (80%-ный)
↓
RP-хроматография на нуклеозиле ®C18 (7 мкм) (колонка 20 х 250 мм, 200 мг загрузка)
Элюирование со следующими градиентами: буфер A: дистиллированная вода, 0,1% ТФА; буфер B: ацетонитрил; 10 мин: буфер B 60 мин - 90% буфер B при скорости потока 10 мл/мин.
↓
Лиофилизация A 1437 A или C-фракций
↓
150 мг A 1437 A (чистота более 95%)
5a) Получение липопептидов A 1437 E, F, G, и H.
Лиофилизация A 1437 A или C-фракций
↓
150 мг A 1437 A (чистота более 95%)
5a) Получение липопептидов A 1437 E, F, G, и H.
Получение проводят, как описано в примере 3a, с той лишь разницей, что в среде получения вместо L-валина используют 1,5 г/л L-изолейцина и ферментацию проводят в 50 л биореакторе. Выход составляет 1,4 г/л сырого пептида (70 г).
5b) Разделение сырого продукта методом йонной хроматографии.
На колонке, описанной в примере 3a, и по методике, приведенной в примере 3a, проводят разделение 25 г сырого липопептида, выделенного в соответствии с примером 5 a; с 14 - 19 ммолями буфера элюируют липопептид A 1437 F (выход: 1,8 г); 18 - 25 ммолями буфера элюируют A 1437 E (выход: 1,3 г); 35 - 50 ммолями - соответственно A 1437 H (выход: 2,7 г) и 64 - 82 ммолями буфера элюируют A 1437 G (выход 1,9 г).
Соответствующие фракции соединяют и освобождают от метанола в вакууме.
5c) Очистка компонентов из примера 5b на реверсивной фазе RP-18.
Проникающую препаративную колонку для хроматографического анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) при высоком давлении емкостью 500 мл (5,1 см (внутренний диаметр) х 25 см высота) заполняют ликросорбом (Li Chrosorb) G RP-18,10 мкм и вводят солесосодержащий раствор a 1437 G с 1,9 г антибиотика. Элюируют способом линейного градиента с 5% ацетонитрила в 10 ммолях калийфосфатного буфера pH 7,0 и 36% ацетонитрила в 10 ммолях калийфосфатного буфера, pH 7,0. При использовании 24 - 26% ацетонитрила выделяют липопептид A 1437 G. После концентрирования в вакууме, удаления солей на 100 мл поглощающей смолы® дианион HP - 20 в смеси вода / 50% изопропанол после проведения криогенной сушки получают 1,1 г липопептида A 1437 G с чистотой 99%.
Соответствующую дополнительную очистку A 1437 H-раствора, полученного в соответствии с примером 5b, проводят с помощью градиента растворителя 10 - 50% ацетонитрила в 10 ммолях калийфосфатного буфера, pH 7,0. Элюирование антибиотика осуществляют с 37 - 39% частями растворителя. После концентрирования соответствующих фракций и обессоливания на ®дианионе HP - 20, а также последующей криогенной сушки получают 2,2 г липопептида A 1437 H чистотой более 98%.
5d) Очистка липопептидных антибиотиков A 1437 E и F из примера 5b на MCl-геле.
Полученный в соответствии с примером 5b солесодержащий A 1437 F-раствор с 1,8 г антибиотика подают в 1 л MCl-геля CHP 20P (производства Мицубиси Кэзей Корпорейшн). Колонка имеет следующие размеры: внутренний диаметр 6 см, высота 35 см. Поле загрузки носителя с подлежащим разделению продуктом промывают буфером A (5 ммолей калийфосфатного буфера pH 7,0 с 20% ацетонитрила) и элюируют по градиентному методу против буфера B (5 ммолей калийфосфатного буфера, pH 7,0 с 70% ацетонитрила). 34 - 35%-частей растворителя ведет к элюированию чистого антибиотика. После концентрирования в вакууме и обессоливания на ®дианионе PH-20 получают 1,4 г липопептида с чистотой более 98%. Аналогичная обработка сырого продукта A 1437 E из примера 5a дает 1 г липопептида A 1437 с чистотой более 98%.
6a) Получение липопептида A 1437 K.
Получение проводят, как описано в примере 4a, с той лишь разницей, что в среде получения вместо L-валина в питательном растворе используют 500 мг/л L- α -аминомасляной кислоты (или 1 г/л рацемата) и процесс ферментации проводят в биореакторе емкостью 10 л. Выход составляет 1,1 г/л сырого пептида (= 10 г).
6b) Выделение липопептида A 1437 K.
10 г сырого продукта растворяют в 100 мл дистиллированной воды и обрабатывают по приведенной ниже схеме.
Схема обработки (А 1437 К): 10 г сырого пептида в 100 мл дистиллированной воды, поглощение на Q-сефарозе в быстром потоке (3,5 х 17 см колонка); элюирование со следующими градиентами: буфер A: NaH2PO4 1 ммоль в 50% метаноле, pH 5,9; буфер B: NaH2PO4 100 ммолей в 50% метаноле, pH 5,3; 20 мин; буфер A - - -> 45 мин на 25% буфере, последующие 45 мин - при 25%-ном буфере B; лиофилизация A 1437 K-фракций.
Обессоливание на биогеле P2 (100 - 200 меш) (7 х 20 см колонка),
700 мг A 1437 K (60%-ный),
RP-хроматография (обращенно-фазовая хроматография) на нуклезиле
C18 7 мкм (20 х 250 мм колонка).
700 мг A 1437 K (60%-ный),
RP-хроматография (обращенно-фазовая хроматография) на нуклезиле
C18 7 мкм (20 х 250 мм колонка).
Загрузка: 50 мг предварительно очищенного продукта
Элюирование со следующим градиентом
буфер A: дважды дистиллированная вода, 0,1% ТФА,
буфер B: ацетонитрил
10 мин: буфер A /5% буфер B - -> через 60 мин - 70% буфер B при 10 мл/мин скорости потока
лиофилизация A 1437 K-фракций
5,6 мг A 1437 (>95%)
7a) Получение липопептидов A 1437 L и M.
Элюирование со следующим градиентом
буфер A: дважды дистиллированная вода, 0,1% ТФА,
буфер B: ацетонитрил
10 мин: буфер A /5% буфер B - -> через 60 мин - 70% буфер B при 10 мл/мин скорости потока
лиофилизация A 1437 K-фракций
5,6 мг A 1437 (>95%)
7a) Получение липопептидов A 1437 L и M.
Получение проводят по аналогии с примером 4a, но вместо L-валина в получаемую смесь вводят 500 мл/г L-норвалина (или 1 г/л рацемата) и ферментацию проводят в биореакторе емкостью 10 л. Выход составляет 1,2 г/л сырого пептида (= 12 г).
7b) Выделение липопептидов A 1437 L и M.
10 г сырого продукта растворяют в 100 мл дистиллированной воды и обрабатывают в соответствии с приведенной ниже схемой:
Схема обработки: 10 г сырого пептида в 100 мл дистиллированной воды; поглощение на Q-сефарозе в быстром потоке, (3,5 х 17 см колонка).
Схема обработки: 10 г сырого пептида в 100 мл дистиллированной воды; поглощение на Q-сефарозе в быстром потоке, (3,5 х 17 см колонка).
Элюирование со следующим градиентом:
Буфер A: NaH2PO4 1 ммоль в 50% метаноле, pH 5,9,
Буфер B: NaH2PO4 100 ммолей в 50% метаноле, pH 5,3,
20 мин: буфер A - - -> 45 мин 25% буфер B, последующие 45 мин - в 25% буфере B,
лиофилизация A 1437 L и M-фракций,
очищение от солей на биогеле P2 (100 - 200 меш) (7 х 20 см колонка)
900 мг A 1437 L и M (около 60%)
RP-(-обращенно-фазовая) хроматография на нуклезиле C18 7 мкм (20 х 250 мм колонка)
Загрузка: 50 мг предварительно очищенного продукта
элюирование со следующим градиентом: буфер A: дважды дистиллированная вода, 0,1% ТФА
буфер B: ацетонитрил
10 мин: буфер A/5% буфера B - - - через 60 мин на 70% буфере B при скорости потока 10 мл/мин,
лиофилизация A 1437 L и M-фракций 5,8 мг A 1437 (>95%-ный) 6,7 A 1437 M(>95%-ный)
8) HPLC-система (использование метода высокоэффективной жидкостной хроматографии при высоком давлении) для определения A 1437 липопептидов.
Буфер A: NaH2PO4 1 ммоль в 50% метаноле, pH 5,9,
Буфер B: NaH2PO4 100 ммолей в 50% метаноле, pH 5,3,
20 мин: буфер A - - -> 45 мин 25% буфер B, последующие 45 мин - в 25% буфере B,
лиофилизация A 1437 L и M-фракций,
очищение от солей на биогеле P2 (100 - 200 меш) (7 х 20 см колонка)
900 мг A 1437 L и M (около 60%)
RP-(-обращенно-фазовая) хроматография на нуклезиле C18 7 мкм (20 х 250 мм колонка)
Загрузка: 50 мг предварительно очищенного продукта
элюирование со следующим градиентом: буфер A: дважды дистиллированная вода, 0,1% ТФА
буфер B: ацетонитрил
10 мин: буфер A/5% буфера B - - - через 60 мин на 70% буфере B при скорости потока 10 мл/мин,
лиофилизация A 1437 L и M-фракций 5,8 мг A 1437 (>95%-ный) 6,7 A 1437 M(>95%-ный)
8) HPLC-система (использование метода высокоэффективной жидкостной хроматографии при высоком давлении) для определения A 1437 липопептидов.
Приведенная ниже система дает возможность разделять и количественно дифференцировать липопептиды в смеси сырья или в культуральном фильтрате.
Время удерживания составляет от 11,5 минут (A 1437 E) до около 15,9 минут (A 1437 H).
Растворитель: A калий-фосфатный буфер, pH 7,0 10 ммолей, B ацетонитрил (см. табл. 2)
Колонка: Шандон ODS, гиперсил RP-18 (обращенно-фазовая хроматография) (120 х 4,6 мм с 20 х 4,6 мм предварительной колонкой) или
Нуклеозил 120 RP-18 обращенно-фазовая хроматография (120 х 4,6 мм с 20 х 4,6 предварительной колонкой),
Скорость потока: 1,5 мл/мин
Обнаружение: 210 нм,
Введение: 10 мкм
7) Сравнение между Actinoplanes nipponensis ATCC 31145 и Actinoplanes spec. DSM 7358.
Колонка: Шандон ODS, гиперсил RP-18 (обращенно-фазовая хроматография) (120 х 4,6 мм с 20 х 4,6 мм предварительной колонкой) или
Нуклеозил 120 RP-18 обращенно-фазовая хроматография (120 х 4,6 мм с 20 х 4,6 предварительной колонкой),
Скорость потока: 1,5 мл/мин
Обнаружение: 210 нм,
Введение: 10 мкм
7) Сравнение между Actinoplanes nipponensis ATCC 31145 и Actinoplanes spec. DSM 7358.
По описанному в примере 1b методу от обоих штаммов отбирают предварительную культуру, которую в дальнейшем используют для прививания производящей среды следующего состава:
Среда 1: как описано в примере 3a
Среда 2: как среда 1, но, однако, без L-валина
Среда 3: глюкоза 30 г/л, соевая мука 20 г/л, Fe2(SO4)3 0,3 г/л, MnCl2•4H2O 0,3 г/л и CoCl2•6H2O pH 7,3 соответственно по 100 мл среды в колбе Эрленмейера на 300 мл.
Среда 1: как описано в примере 3a
Среда 2: как среда 1, но, однако, без L-валина
Среда 3: глюкоза 30 г/л, соевая мука 20 г/л, Fe2(SO4)3 0,3 г/л, MnCl2•4H2O 0,3 г/л и CoCl2•6H2O pH 7,3 соответственно по 100 мл среды в колбе Эрленмейера на 300 мл.
Инкубацию проводят при 30oC во вращающейся встряхивающей машине. Через 48, 96 и 144 часа определяют концентрацию A 1437 липопептидов в фильтрате культуры методом HPLC высокоэффективной жидкостной хроматографии при высоком давлении (см. пример 6). В средах 2 и 3 при штамме Actinoplanes nipponensis ATCC 31145 липопептидов не обнаруживают. В среде 1 через 144 часа удается определить очень незначительные количества некоторых липопептидов. Если в качестве основы использовать специфическую идентичную экстинкцию этих соединений в сравнении с A 1437 пептидами, то образующееся количество составит по меньшей мере в 100 раз (более 1 мг/л) низкую концентрацию A 1437 B, которую удалось получить при синтезе из штамма Actinoplanes spec. DSM 7358 в среде 1 за тот же период времени.
8) Активность A 1437 липопептидов.
Чувствительность относящихся микроорганизмов к A 1437 липопептидам определяют с помощью Агар - разбавление - теста. В качестве агара используют агар Бюллера-Хинтона с добавлением к нему в случае с S.pyogenes и Enterococcen 10% крови лошади. Содержащие антибиотик пластины прививают с помощью многоканального шприцевого устройства (5•104 единиц/место стационарной культурой соответствующего штамма). Минимальную ингибирующую концентрацию МНК определяют при 37oC. Минимальная ингибирующая концентрация представляет собой концентрацию антибиотика, при которой после 24-часовой инкубации не отмечается видимого роста микроорганизмов.
Результаты приведены в таблице 3. Используемый в качестве контрольного вещества амфомицин получают с фирмы Берингер Маннгейм (Германия).
Амфомицин производят на фирме в виде тонкого химиката
Соединения K, L M обладают активностью in vitro, сравнимой с активностью соединений A - H.
Соединения K, L M обладают активностью in vitro, сравнимой с активностью соединений A - H.
9a) Характеристика A 1437 D.
Липопептид A 1437 D выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Данные оптического вращения: +35o (с = 0,1 метанол).
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 15,1 минут.
время удерживания: 15,1 минут.
Аминокислоты: 2 аспарагиновые кислоты, 1 аспарагин, 1 β -метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляные кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин
FAB-MS: m/e = 1303, 6952 /(M+H)+/
Молярная масса: 1302, 6884 (C59H94N14O19)
CID-MS: m/z = 356, 491, 517, 520, 741, 761, 938, 982
ИК/KBr/:v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
FAB-MS: m/e = 1303, 6952 /(M+H)+/
Молярная масса: 1302, 6884 (C59H94N14O19)
CID-MS: m/z = 356, 491, 517, 520, 741, 761, 938, 982
ИК/KBr/:v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
9b) Характеристика A 1437 B
Липопептид A 1437 B выделяют в виде твердого аморфного продукта.
Липопептид A 1437 B выделяют в виде твердого аморфного продукта.
Значение оптического вращения: +27o (с = 0,1, метанол)
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 12,8 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 12,8 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицин, 2 2,3-диаминомасляные кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
FAB-MS: m/e = /(M+H)+/
Молярная масса: 1303 (C59H93N13O20)
CID-MS: m/z = 356, 407, 518, 521, 741, 762, 938, 982
ИК (KBr): δ = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
Молярная масса: 1303 (C59H93N13O20)
CID-MS: m/z = 356, 407, 518, 521, 741, 762, 938, 982
ИК (KBr): δ = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9c) Характеристика A 1437 C
Липопептид A 1437 C выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Липопептид A 1437 C выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Значение оптического вращения: +30o /с = 0,1, метанол/
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 14,1 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 14,1 минут.
Аминокислоты: 2 аспарагиновые кислоты, 1 аспарагин, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
Молярная масса 1288 (С58H92N14O19).
CID-MS: m/z = 356, 392, 503, 503, 741, 747, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
9d) Характеристика A 1437 A.
Липопептид A 1437 A выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Оптическое вращение: +30o /с = 0,1, метанол/
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 11,8 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 11,8 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
молярная масса: 1289 (C58H91N13O20)
CID-MS: m/z = 356, 478, 504, 507, 741, 748, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
CID-MS: m/z = 356, 478, 504, 507, 741, 748, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9e) Характеристика A 1437 F.
Липопептид A 1437 F выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Значение оптического вращения: +31o /с = 0,1, метанол/,
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 13,8 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография при высоком давлении:
время удерживания: 13,8 минут.
Аминокислоты: 2 аспарагиновые кислоты, 1 аспарагин, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
молярная масса: 1288 (C58H92N14O19)
CID-MS: m/z = 356, 392, 503, 506, 741, 747, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
CID-MS: m/z = 356, 392, 503, 506, 741, 747, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
9f) Характеристика A 1437 E.
Липопептид A 1437 E выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 11,5 минут.
время удерживания: 11,5 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
молярная масса: 1289 (C58H91N13O20)
CID-MS: m/z = 356, 393, 504, 507, 741, 748, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
CID-MS: m/z = 356, 393, 504, 507, 741, 748, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9g) Характеристика A 1437 H.
Липопептид A 1437 H выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Значение оптического вращения: +32o /с = 0,1, метанол/
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 15,9 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 15,9 минут.
Аминокислоты: 2 аспарагиновые кислоты, 1 аспарагин, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
молярная масса: 1316 (C60H96N14O19)
CID-MS: m/z = 356, 420, 531, 534, 741, 775, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
CID-MS: m/z = 356, 420, 531, 534, 741, 775, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2930, 1660, 1530, 1450, 1400.
9h) Характеристика A 1437 G.
Липопептид A 1437 G выделяют в виде твердого аморфного вещества.
Значение оптического вращения: +34o /с = 0,1, метанол/
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография
время удерживания: 13,6 минут.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография
время удерживания: 13,6 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколиновая кислота, 1 валин.
молярная масса: 1317 (C60H95N13O20)
CID-MS: m/z = 356, 421, 532, 535, 741, 776, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
CID-MS: m/z = 356, 421, 532, 535, 741, 776, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9i) Характеристика A 1437 K.
Липопептид A 1437 K выделяют в виде твердого аморфного вещества.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 12,5 минут.
время удерживания: 12,5 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколин, 1 валин.
FAB-MS: m/z = /(M + H)+/
молярная масса: 1299 (C58H91N13O20).
молярная масса: 1299 (C58H91N13O20).
CID-MS: m/z = 393, 504, 507, 741, 748, 938, 981
IK (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
IK (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9j) Характеристика A 1437 L.
Липопептид A 1437 L выделяют в виде твердого аморфного вещества.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 13,0 минут.
время удерживания: 13,0 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколин, 1 валин.
FAB = = MS: m/e = /(M + H)+/
молярная масса: 1289 (C59H93N13O20).
молярная масса: 1289 (C59H93N13O20).
CID-MS: m/z = 407, 518, 741, 761, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
9k) Характеристика A 1437 M.
Липопептид A 1437 M выделяют в виде твердого аморфного вещества.
HPLC: Высокоэффективная жидкостная хроматография:
время удерживания: 9,8 минут.
время удерживания: 9,8 минут.
Аминокислоты: 3 аспарагиновые кислоты, 1 β - метиласпартат, 2 глицина, 2 2,3-диаминомасляных кислоты, 1 пролин, 1 пипеколин, 1 валин.
FAB-MS: m/e = /(M + H)+/
молярная масса: 1275 (C57H89N13O20).
молярная масса: 1275 (C57H89N13O20).
CID-MS: m/z = 379, 490, 493, 724, 741, 938, 981
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
ИК (KBr): v = 3420 (шир.), см-1, 2925, 1650, 1535, 1450, 1400.
10) C13-химические сдвиги.
В таблице 4 представлены C-13-химические сдвиги CH-сигналов A 1437 B.
Для сравнения с 1H-данными, NH-химические соединения NH-сигналов соответственно для Pip и Pro даются с указанием CaP-сдвигов соответствующих спиновых систем.
Claims (9)
1. Липопептиды общей формулы I
где R1 - 3,4-ненасыщенная, или насыщенная, или независимо от этого разветвленная или неразветвленная жирная кислота с длиной цепи 12 - 15 атомов углерода.
где R1 - 3,4-ненасыщенная, или насыщенная, или независимо от этого разветвленная или неразветвленная жирная кислота с длиной цепи 12 - 15 атомов углерода.
2. Липопептид по п.1, отличающийся тем, что R1 имеет длину цепи 12 - 15 атомов углерода.
3. Липопептид по п.1, отличающийся тем, что R1 имеет длину цепи с 12, 13, 14 или 15 атомами углерода.
4. Липопептид по п. 1, отличающийся тем, что R1 означает : a) iC13 - жирную кислоту, b) iC14 - жирную кислоту, c) aiC13 - жирную кислоту или d) aiC15 - жирную кислоту.
5. Липопептид по п.5, отличающийся тем, что R1 означает
6. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
7. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
8. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
9. Способ получения липопептидов по пп.1 - 8, заключающийся в том, что культивируют Actinoplanes sp. DSM 7358 в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные вещества в аэробных условиях с последующим выделением целевого продукта и его очисткой.
6. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
7. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
8. Липопептид по п.4, отличающийся тем, что R1 означает
9. Способ получения липопептидов по пп.1 - 8, заключающийся в том, что культивируют Actinoplanes sp. DSM 7358 в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные вещества в аэробных условиях с последующим выделением целевого продукта и его очисткой.
10. Способ по п.9, отличающийся тем, что выделение осуществляют осаждением при pH 0,5 - 4,0.
11. Способ по п. 9, отличающийся тем, что очистку осуществляют хроматографией на ионообменных смолах или хроматографией на гидрофобной матрице, при этом обе хроматографии можно проводить альтернативно или последовательно в любой последовательности.
12. Лекарственное средство, обладающее антибиотической активностью против грамм-положительных бактерий, в особенности против бактерий, устойчивых к гликопептидам на основе активнодействующего вещества и соответствующего фармацевтического носителя, отличающееся тем, что в качестве активнодействующего вещества она содержит липопептиды по пп.1 - 8 в эффективном количестве.
13. Штамм Actinoplanes sp. DSM 7358 в качестве продуцента липопептидов по пп.1 - 8.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DEP4319007.3 | 1993-06-08 | ||
| DE4319007 | 1993-06-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94022485A RU94022485A (ru) | 1996-04-20 |
| RU2117672C1 true RU2117672C1 (ru) | 1998-08-20 |
Family
ID=6489896
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94022485/04A RU2117672C1 (ru) | 1993-06-08 | 1994-06-07 | Липопептиды, способ получения, лекарственное средство и штамм actinoplanes sp. dsm 7358 в качестве продуцента липопептидов |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6194383B1 (ru) |
| EP (2) | EP0629636B1 (ru) |
| JP (1) | JP2660161B2 (ru) |
| KR (2) | KR0174264B1 (ru) |
| AT (2) | ATE198209T1 (ru) |
| AU (1) | AU672691B2 (ru) |
| CA (1) | CA2125376C (ru) |
| CY (1) | CY2190B1 (ru) |
| CZ (1) | CZ285322B6 (ru) |
| DE (2) | DE59409616D1 (ru) |
| DK (2) | DK0864584T3 (ru) |
| ES (2) | ES2153224T3 (ru) |
| FI (1) | FI942660L (ru) |
| GR (2) | GR3029591T3 (ru) |
| HK (1) | HK1012009A1 (ru) |
| HU (1) | HU217177B (ru) |
| IL (2) | IL109917A (ru) |
| MA (1) | MA23216A1 (ru) |
| NO (1) | NO942110L (ru) |
| NZ (1) | NZ260682A (ru) |
| OA (1) | OA10066A (ru) |
| PL (2) | PL179581B1 (ru) |
| PT (1) | PT864584E (ru) |
| RU (1) | RU2117672C1 (ru) |
| SK (1) | SK281830B6 (ru) |
| TW (1) | TW455591B (ru) |
| UY (1) | UY23762A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA943983B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2605625C2 (ru) * | 2011-10-03 | 2016-12-27 | Университет Науки И Технологии Лилля 1-Устл | ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА Bacillus sp. И ВКЛЮЧАЮЩАЯ ИХ КОМПОЗИЦИЯ |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4411025A1 (de) * | 1994-03-30 | 1995-10-05 | Hoechst Ag | Lipopeptid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
| DE19807972A1 (de) | 1998-02-25 | 1999-08-26 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Lipopeptidantibiotika-Calciumsalze, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung |
| KR100291406B1 (ko) * | 1999-05-13 | 2001-05-15 | 이길정 | 직거 염색기용 기어박스 |
| KR100423751B1 (ko) * | 1999-05-18 | 2004-03-22 | 심선희 | 지그염색기의 직물이송속도 유지장치 |
| KR100331966B1 (ko) * | 1999-10-23 | 2002-04-10 | 윤기룡 | 염색된 직물의 직물권취장치 |
| US6696412B1 (en) | 2000-01-20 | 2004-02-24 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | High purity lipopeptides, Lipopeptide micelles and processes for preparing same |
| US6511962B1 (en) * | 2000-07-17 | 2003-01-28 | Micrologix Biotech Inc. | Derivatives of laspartomycin and preparation and use thereof |
| US6750199B2 (en) | 2000-07-17 | 2004-06-15 | Micrologix Biotech Inc. | Antimicrobial sulfonamide derivatives of lipopeptide antibiotics |
| US6737403B2 (en) | 2000-07-17 | 2004-05-18 | Micrologix Biotech Inc. | Derivatives of laspartomycin and preparation and use thereof |
| US20060014674A1 (en) | 2000-12-18 | 2006-01-19 | Dennis Keith | Methods for preparing purified lipopeptides |
| US7125844B2 (en) | 2002-01-03 | 2006-10-24 | Migenix Inc. | Dab9 derivatives of lipopeptide antibiotics and methods of making and using the same |
| US20040157803A1 (en) * | 2002-03-04 | 2004-08-12 | Williams Deryck J. | Nematicidal fatty acid and fatty acid ester related compounds |
| US6887900B2 (en) * | 2002-03-04 | 2005-05-03 | Divergence, Inc. | Nematicidal compositions and methods |
| CN1839150A (zh) | 2003-07-17 | 2006-09-27 | 麦根克斯有限公司 | 脂肽抗菌衍生物组合物及其应用方法 |
| US7368629B2 (en) * | 2004-02-04 | 2008-05-06 | Divergence, Inc. | Nucleic acids encoding anthelmintic agents and plants made therefrom |
| DE102004060750A1 (de) | 2004-12-15 | 2006-07-13 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Verfahren zur Deacylierung von Lipopeptiden |
| GB0821540D0 (en) * | 2008-11-25 | 2008-12-31 | Merlion Pharmaceuticals Pte Ltd | Lipopeptide compounds and their use |
| EP2504353B2 (en) | 2009-11-23 | 2023-09-13 | Cubist Pharmaceuticals LLC | Lipopeptide compositions and related methods |
| KR101151878B1 (ko) | 2010-06-08 | 2012-05-31 | 미원상사주식회사 | 지방산 트리펩타이드염 및 이를 함유하는 항균 조성물 |
| WO2013012101A1 (ko) * | 2011-07-15 | 2013-01-24 | 미원상사주식회사 | 지방산 트리펩타이드염 및 이를 함유하는 항균 조성물 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4000397A (en) | 1975-03-21 | 1976-12-28 | Spectra-Physics, Inc. | Signal processor method and apparatus |
| US4001397A (en) * | 1975-08-11 | 1977-01-04 | Pfizer Inc. | Antibiotic compound 41,012 |
| DE4411025A1 (de) * | 1994-03-30 | 1995-10-05 | Hoechst Ag | Lipopeptid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
-
1993
- 1993-12-17 TW TW082110700A patent/TW455591B/zh not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-04-25 UY UY23762A patent/UY23762A1/es not_active IP Right Cessation
- 1994-05-06 HU HU9401465A patent/HU217177B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-06-01 AT AT98110484T patent/ATE198209T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-06-01 AT AT94108443T patent/ATE174604T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-06-01 ES ES98110484T patent/ES2153224T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-01 ES ES94108443T patent/ES2127312T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-01 DE DE59409616T patent/DE59409616D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-01 DE DE59407475T patent/DE59407475D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-01 PT PT98110484T patent/PT864584E/pt unknown
- 1994-06-01 DK DK98110484T patent/DK0864584T3/da active
- 1994-06-01 EP EP94108443A patent/EP0629636B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-01 DK DK94108443T patent/DK0629636T3/da active
- 1994-06-01 EP EP98110484A patent/EP0864584B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-03 NZ NZ260682A patent/NZ260682A/en unknown
- 1994-06-06 CZ CZ941381A patent/CZ285322B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-06-06 SK SK685-94A patent/SK281830B6/sk unknown
- 1994-06-06 PL PL94303716A patent/PL179581B1/pl unknown
- 1994-06-06 PL PL94334634A patent/PL180230B1/pl unknown
- 1994-06-06 AU AU64620/94A patent/AU672691B2/en not_active Ceased
- 1994-06-06 FI FI942660A patent/FI942660L/fi unknown
- 1994-06-06 MA MA23529A patent/MA23216A1/fr unknown
- 1994-06-07 RU RU94022485/04A patent/RU2117672C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1994-06-07 IL IL10991794A patent/IL109917A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-06-07 JP JP6125062A patent/JP2660161B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-07 NO NO942110A patent/NO942110L/no not_active Application Discontinuation
- 1994-06-07 CA CA002125376A patent/CA2125376C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-07 ZA ZA943983A patent/ZA943983B/xx unknown
- 1994-06-08 OA OA60522A patent/OA10066A/fr unknown
- 1994-06-08 KR KR1019940012795A patent/KR0174264B1/ko not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-03-05 US US08/811,843 patent/US6194383B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-07-11 KR KR1019980028496A patent/KR100319563B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1998-07-21 IL IL12545098A patent/IL125450A0/xx unknown
- 1998-12-10 HK HK98113032A patent/HK1012009A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-03-05 GR GR990400678T patent/GR3029591T3/el unknown
-
2000
- 2000-06-16 CY CY0000024A patent/CY2190B1/xx unknown
-
2001
- 2001-01-10 GR GR20010400022T patent/GR3035204T3/el not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Neu H.C. Science. - 1992, 257, с.1064 - 1073. Bodasnzky Miklos, Sigler Gerald F.et.al. Journal amer. chemical Society.- 1973, 95, N 7, p.2352 - 2357. Strong Robert C., Bodanszky Agnes et al. Antimicrobial Agents and chemotherapy. - 1970, p.42 - 45. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2605625C2 (ru) * | 2011-10-03 | 2016-12-27 | Университет Науки И Технологии Лилля 1-Устл | ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА Bacillus sp. И ВКЛЮЧАЮЩАЯ ИХ КОМПОЗИЦИЯ |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2117672C1 (ru) | Липопептиды, способ получения, лекарственное средство и штамм actinoplanes sp. dsm 7358 в качестве продуцента липопептидов | |
| JP5729919B2 (ja) | チアクマイシン生産 | |
| JPS6253158B2 (ru) | ||
| US4977083A (en) | Processes for preparing A54145 compounds | |
| JPH0732704B2 (ja) | 新規なエピデルミン産生菌株 | |
| JPS6010718B2 (ja) | メイタンシノ−ル，メイタナシンおよびメイタンシノ−ル・プロピオネ−トの製造法 | |
| KR100271997B1 (ko) | Fa-70d물질, 이를 생산하기 위한 방법 및 그 용도 | |
| US4292309A (en) | Antibiotics C-14482 B1, B2 and B3 | |
| US3907764A (en) | Pepsinostrepins, novel protease inhibitors from streptomyces | |
| RU2784815C1 (ru) | Штамм Streptomyces sp. KMM 9044 - продуцент соединений, обладающих антибактериальной активностью | |
| KR930001870B1 (ko) | 신규의 항진균 물질 krf-001 복합체의 발효 및 정제방법 | |
| US5451570A (en) | Antibiotic, balhimycin, a process for its production and its use as pharmaceutical | |
| CZ282296B6 (cs) | Nové antibiotikum, Balhimycin, způsob jeho výroby a jeho použití jako léčiva | |
| WO1989002441A1 (en) | Antibiotic compounds | |
| US5087614A (en) | Enzyme inhibitor and method of producing the same | |
| JP2516202B2 (ja) | グリコペプチド系抗生物質 | |
| Gross | Peptide antibiotics | |
| NO176026B (no) | Fremgangsmåte for fremstilling av antibiotikum GE 2270 faktor A | |
| JPH01228495A (ja) | 酵素阻害剤、その製法並びに用途 | |
| KR810001056B1 (ko) | 항생물질 c-15003의 제조법 | |
| JP3030896B2 (ja) | Ｗｂ９６８物質群およびその製造法 | |
| KR810000510B1 (ko) | 메이탄시노올 유도체의 제조방법 | |
| JP3560626B2 (ja) | 有用物質の回収法 | |
| EP0368949A1 (en) | Novel antibiotic compounds | |
| JPS6034556B2 (ja) | 抗生物質ｃ−１５００３ |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20030608 |