PT97832B

PT97832B - Processo para a preparacao de membranas biocompativeis perfuradas e de pele artificial

Info

Publication number: PT97832B
Application number: PT97832A
Authority: PT
Inventors: Francesco Della Valle; Alessandro Rastrelli; Gabriella Calderini; Aurelio Romeo
Original assignee: Fidia Spa
Priority date: 1990-06-01
Filing date: 1991-05-31
Publication date: 1998-10-30
Also published as: AR244354A1; EP0462426A1; HUT60514A; BR9102225A; IL98255A0; JPH04231061A; HU215534B; SG52545A1; CA2043527A1; AU637235B2; NO912058L; CA2043527C; FI108918B; FI912591A0; KR100195574B1; PT97832A; US5658331A; IT9020513A1; NO303562B1; JP3202257B2

Description

J que são apropriadas para utilização como suporte para o₍| desenvolvimento in vitro de células epiteliais; a invenção refere-se também a pele artificial obtida pelo referido;

i processo e à sua utilização em enxertos. I bector da invenção

A presente invenção refere-se a novas membranas per furadas biologicamente compatíveis, aos processas para a sua preparação, à sua utilização como suporte ao desenvolvimento in vitro de células epiteliais, â peie artificial assim obti da e à sua utilização em enxertos de pele* mstado da técnica

Λ perda de material cutâneo por razões de origem traumática ou patológica éusualmente resolvida por técnica de auto transplantação, utilizando extracçoes de pele de áre as de um doador. Para cobrir áreas maiores, as referidas extracções poderá ser ampliadas por processos cirúrgicos, tais como o enxerto de malha descrito por d. ^auchábal, J. j?last. Surgery, 42, 88-91 (1989)* istes processos dão resultados positivos somente no caso de lesões de pequenas dimensões e pacientes com um estado de saúde geralmente satisfatória.

8e se tratam pacientes idosos ou pacientes em esta do grave de saúde obtêm-se resultados insatisfatórios e surgem numerosos problemas, na medida em que os mencionados pro cessos não podem ser utilizados. Além disso, o tecido de tais doadores não permite uma expansão superior a 10 vezes.

Uma viragem importante no tratamento das referidas lesões por meio da cirurgia de reconstituição foi o desenvol vimento da feécnica que implica a cultura in vitro de ceratinocitos (J. Eheinwald and ã. Green, Cell, ô, 551-544, 1975) que permitiu a expansão in vitro das citadas culturas, a fim de se obterem membranas celulares epidérmicas potencialmente adequadas para cobrirem áreas lesionadas.

nsta técnica tem sido largamente utilizada na prá-

tica clínica, sendo na maior parte dos casos pacientes sofren do de queimaduras (G. G. Gallico et al., I£. Bngl. J. Lied.

3U_r 448-451, 1984), mas surgiram numerosos problemas desde a sua concepção, por exemplo as falhas na retirada de alguns enxertos, a fragilidade da película epitelial e a consequente dificuldade da cirurgia na sua manipulação, o te^po exigi do para a obtenção de quantidades suficientes de culturas epidérmicas e a dificuldade de obtenção de zonas do doador com tamanho suficiente em pacientes coia grandes áreas danlfi cadas na supextfície do corpo. As culturas de epiderme in vá tro requerem tambêpi uma orientação exacta para possibilitai· que o enxerto resulte, sendo esta uma operação es^ecialmente arriscada devido à fragilidade da película epidérmica cultivada in vitro.

Uma abordagem diferente destes problemas encontra-se descrita por íannas et al, Science, 215, 174-176 (1982), que utiliza substitutos déraicos sob a forma de materiais po rosos reabsorvíveis, consistindo na coprecicitação de colágeno de glicosamonoglicanos (GAG). .aím especial ufilisa-se o controitin-6-sulfato, coberto com uma película de membrana fina de silicone. A caracteristica destes materiais consiste em que eles possuem poros hão padronizados que comunicam uns com os outros de modo semelhante ao duma esponja.

2ang et al, em Burns, 12, 540-5^3 (1986) propõem um método conhecido como enxerto de mieropele, que consiste no auto-enxerto de ti‘oços muito pequenos de pele, que depois se desenvolvem para se fundirem formando uu unico' epitêlio. Com este processo, a proporção possível entre a superfície máxima do doador e a expansão da superfície que pode ser coberta é âe 1 : 15.

o. Boyce e -431 (1988) descreve

J. Hansborough, em Surgery, 103, 421a utilização de membranas formadas a p· ” 5 -

tír de eolágeno e GAG, para promover na sua superfície o desenvolvimento de queratinócitos, reduzindo assim a porosidade da superfície do material. Uma camada contínua não porosa & também interposta para limitar o desenvolvimento da cultura de epiderme à superfície da membrana.

A possível antigenicidade dos mencionados substituintes dêraicos, que pode provocar a rejeição do enxerto, ainda não foi devidamente examinada.

Objectivo da invenção

III· Imim·! mi.-.m -n.iu ι;υ ι·ι·ιιιΆι f— .» .n

O objeetivo da presente invenção consiste em proporcionar membranas biocompatíveis que possibilitam a cultura ir vitro dos queratinócitos, sendo o período de tempo necessário para o desenvolvimento da cultura muito mais curto do que era anteriormente possível. íjm .resultado importante obtido pelas membranas de acordo com a invenção ê o da ca pacidade para obter uma colonização por células epiteliais homólogas ou heterólogas, em tempo surpreendentemente curto (6 a 10 dias) em comparação com o tempo normalmente necessário (20-4C dias) jjelos processos convencionais para a preparação de áreas comparáveis de culturas de epiderme in vitro .uSta vantagem resulta da preparação, num curto do de tempo, de uma pele artificial que permite uma cobertur muito rápida de uma área na qual é necessária uma transplan tação epitelial, reduzindo assim os riscos inerentes à perua ^rcessiva de líquido orgânica ou infecção.

Um outro objectivo da presente invenção consiste em obter membranas biocompatíveis que permitam uma rápido de senvolvimento das eulturas de queratinócitos, com uma excelente proporção de superfície do doador/superfície que pode ser coberta compreendida entre 1 : 20 e 1 : 200, sendo consi * **» uex^avelmente mais elevada do que se podia obter anteriormenβ

- 6 te com os processos tradicionais.

liais um objectivo da presente invenção reside em obter uma pele artificial biocompatível e de preferência bio reabsorvível a qual pode ser produzido em pouco tempo, é for te e é manipulada com facilidade no momento da transplantação, e que, além disso, pode ser aplicada à zona da lesão in dependentemente da sua orientação original no recipiente de cultura e pode ser facilmente armazenada.

À este respeito, uma vantagem da pele artificial de acordo vençao q a de que pode ser crioconservada sibilitar a criação de um banco de tecido do células heterólogas.

com a presente infacilmente para po epitelíal, incluin

A possibilidade da crioconservação também reduz coa sideravelmente, ou elimina, depois de pelo menos dois ciclos, o potencial antigénico dos antigenes da superfície, expressos pelas células epiteliais.

descrição .«afr—«»vwWF^'7him.ÍW»u>

listes e outros objectivos são alcançados pelas mem branas bioeompatíveis de acordo coa a presente invenção, cons tituídas por material de origem natural, sintético ou semisija tético e tendo uma espessura compreendida entre 10 e 500 ai crometros, θ de preferência entre 20 e 40 micrémetros, carac terizadas pelo facto de compreenderem uma série ordenada de furos com um tamanho definido e constante, compreendido entr^ 10 e 1000 /4 e de preferência entre 40 e 70 /t, separados uns dos outros por uma distância constante, compreendida entre 50 Q 1000yk , e de preferência 80· x-stas membranas podem ser formadas por materiais de origem natural, biocompatíveis e de preferência também bià reabsorvíveis, tais como colágeno ou coprecipitados de colãgeno e glicosaminoglicanos, celulose, polissacáridos na formà de íéis.

ί.

- Ί ricos, agar, tais como quitina, quitosano, pectinas ou ácidos péjc agarose, goma de xantano, gelano ou borrachas naturais, isoladas ou em misturas de umas com as outras ou com polímeros de origem sintética ou semisintêtica, na presen ça de agentes de precipitação ou de gelificação adequados, tais como sais metálicos, polícatiões ou polianiões.

Âs membranas também podem ser feitas de materiais biocompatíveis e de preferência também bioreabsorvíveis de origem sintética tais como ácido poliláctico, ácido poligli célico oo. seus copolímeros ou derivados, polidioxanonas, polifosfazenos, polissulfonas ou poliuretanos; ou ainda deriva dos semisintéticos de polímeros naturais, tais raticulado com agentes de reticulação tais como como colageno di aldeídos otu seus precursores, ácidos bicarboxílicos ou seus halogenetos, diaminas ou derivados de celulose, de ácido algínieo, de ami do, quitina ou quito sano,, de gelano, de xantano, pectinas ou ácidos pécticos, poliglueanos, polimananos, de agar, agarose, borrachas naturais ou glicosaminoglicanos.

As membranas podem também ser produzidas de políme ros sintéticos, mesmo se a característica da biodegradabilidade, tais como silicone, borrachas de silanos ou siloxanos, fluorpolímeros tais como polifluoretileno, polifluorpropileno, éteres de-polifluor, polistireno, polieloreto de vinilo, poliacrilatos ou seus derivados, polinidroxiacrilatos, polihidroximetacrilatos, polímeros de carboxivinilo e seus derivados, polímeros de anidrido maleico e seus derivados, policloretos de vinilo, álcool polivinílico e seus derivados, pp lietileno e polipropileno.

As membranas são constituídas, de preferência, por derivados siaisintéticos de ácido bialurónico, em especial derivado de ésteres do citado.ácido, conforme se descrevem nos Exemplos 6, 7 ® 24 da patente europeia ml-À G216455, dep_o

sitada ea 7 de Julho de 1986, sendo materiais biocompatíveis e biodegradáveis capazes de libertarem ácido hialurónico na zona da sua aplicação sendo este ácido bem conhecido como au xiliar dos processos de reconstituição dos tecidos. Uma outr característica que torna os referidos materiais espeeialraente apropriados para utilização conforme a presente invenção é a de que eles nao originam de facto fenómenos de intolerãn cia, não sendo imunogénicos.

As membranas biocompatíveis formadas por um ou vários dos materiais acima citados têm uma espessura compreendida entre 10 e 500 / e de preferência entre 20 e 4G / e sao e&i*acterizados pela presença de uma série ordenada de furos com tamanho definido e constante, compreendido entre 10 e 1000 yU e de preferência entre 40 e 70 μ , separados uns tos outros por uma distância constante compreendida entre 50 e 1000 yQ, de preferência 80 μ .

Podem-se preparar por processos convencionais, des critos na literatura técnica, membranas biocompatíveis contí nuas, forcadas por um ou vários dos materiais acima menciona dos·

Obtêm-se as membranas biocompatíveis perfuradas de acordo com a presente invenção .pela utilização de dispositivos de perfuração mecânica, tais como perfuradores adequadamente colocados, ou processos que envolvem a utilização de raios laser térmicos ou ultravioletas de frequência tal que realizam furos, que operam numa faixa com o tamanho adequado e distanciados na membrana.

exemplos a seguir da preparação de uma membrana biocospatível perfurada de acordo com a presente invenção é apresentado somente a título ilustrativo» gxeinplo 1

4* úxoziplo 1

Uma membrana de benziléster de ácido hialurónico com 10<$ de esterificação (conforme se descreve na patente europeia H2A 0216453* depositada em 7»?·86, cora a forma de um quadrado tendo 12 x 12 ca e 25/t de espessura, foi perfurada com a utilização de um dispositivo de raio laser UV com computador, operando com uma frequência de 273/ua nas seguir tes condições operacionais:- frequência de funcionamento 200 Hz, energia de saída 250 xaJ. Com a utilização de um sistema de crivagem .apropriado, obtiveram-se faros com o diâmetro de distanciados em 80 yc, conforme se mostra nas Figuras la e lb.

As membranas biocompatíveis perfuradas de acordo cora a presente invenção podem ser usadas vantajosamente p a cultura in vitro” de células epiteliais, especialmente ara qu ratinócibos.

./ara esta finalidade pode-se fixar as membranas na base de vasos de cultura de células, em grades metálicas ou em qualquer outra estrutura apropriada para culturas de célu las no interface médio ar/cultura, utilizando vaselina estéril, silicone estéril ou outros sistemas adesivos que permitem uma retirada fácil da membrana, ou. por sistemas que envolvem o emprego de materiais biológicos, por exemplo coláge no, fibrina ou cola de fibrina. Pode-se incubar as referidas membi‘anas em meios de cultura adequados para o crescimento de células epiteliais, quer isoladas, quer na presença de ou tras células, tais como fibroblastos irradiados, conforme es tão descritos na mencionada literatura, sem que, dentro do tempo previsto para o Grescimento e colonização dos furos, cause uma alteração nas propriedades mecânicas, o que iria comprometer a sua manuseabilidade e resistência, numa aplica ção particular.

Descrevem-se a seguir alguns dos ensaios realizados, a fim de ilustrar a utilização das membranas da presente invenção.

Itsemplo 2 ensaio a seguir foi realizado para demonstrar a ausência de qualquer inibição pelas membranas feitas de deri vados do ácido bialurónico no desenvolvimento in vitro de culturas de células de queratinócito humano.

...embranas denominadas MAE? 11, cortadas de forma estéril em quadrados com 2 x 2 ® e formadas por benziléster de ácido bialurónico com 100% de esterificação (conforme se descreve na patente europeia KJ? 02164-53 depositada em y.?.86l) foram aplicadas na base de vasos de cultura por meio de silijcone estéril. Golocaram-se 2 x 10^ de queratinócitos humanos nos referidos vasos, num volume de 0,5 ml, na presença de 4>: x 10^x fibroblastos 31'3 letalmente irradiados, na segunda pas sagem.

Incubaram-se as capsulas na tempere tura de 57 3 du rante 2 horas, ea atmosfera de OO^ a 5%, para permitir que as células adiram à matriz. Depois deste período, adicionaram-se 5 2il de um meio de cultura OmO (0-reen n et al., J. í-rbc. fation. Acad. Sei., 76, 56θ5“5563, 1979) c incubaram-se as cápsulas novamente. 0 meio de cultura foi mudado de 2 em 2 dias, trataram-se as células cora tripsina durante 9 dias apÓ3 a colocação e contaram-se. Todas, as experiências foram feitap duas vezes.

,;í n.Q u I r Ar OS

KQ. de queratinócitos % de humanos por placa inibição (x 10^)

ESSÍILIADOS

Kâ. de queratinócitos % de humanos por placa inibição (x 10⁵)

Controlo ^embrana

UÀF? 11 ^{* 11}

2? G i

0 i

-.ates resultados mostram que o biomaterial utiliza do não ten nenhum efeito de inibição nas culturas do querati nócitos.

rxeanlo 3

Desenvolvimento âe queratinócitos humanos con a utilização âe membranas biocompatíveis âa invenção, obtidas pelo processo descrito no .embranas HYAFF ácido bialurónico com 1GÔ% tas na patente europeia 13? a forma âe quadrados com 3 .exemplo 1:11 constituídas por benziléster de âe esterifieação (conforme descri 0216453» depositada era 7*7·86) so x 5 ca foram aderidas à base âe cápsulas âe petri com 6 cm âe diâmetro usando-se vaselina es réril. Fibroblastos 3T3 letalmente irradiados foram introduzidos nas membranas numa concentração de 700.000 células por placa, nas condições descritas no mxemplo 2. Após a adesão das células 3Ί3, ou seja, depois de cerca de 24 horas, adicionou-se uma suspensão de células de queratinócitos humanos provenientes de culturas secundárias, numa concentração de ίΓΊ

38,000 células por cm^. As condições da cultura eram semelha tes âs descritas no nxempio 2. 0 desenvolvimento da cultura de queratinócitos foi inspeceionada diariamente por meio de um microscópio de contraste de fases. Observou-se na aembra12 -

na ο desenvolvimento das células epiteliais inoculadas, tendo estas alcançado a confluência 8 a 10 dias depois da inoculação.

i’em particular importância o facto de que, mesmo no segundo dia após a inoculação, numerosos furos contêm que ratinócitos, sendo o seu crescimento mais activo dentro dos orifícios do que na superfície, até os encherem coiapletamente no õs. dia (Figuras 2, 5 e 4-) .

x<ais um facto de grande importância é o de que as células, quando são analisadas por técnicas histológicas, den tro dos furos, revelam um aspecto basalóids, documentado pelp. verificação de figuras que mostram uma mitose frequente (Figuras 5 ® δ), denotando uma elevada vitalidade de reprodução rístas verificações foram confirmadas por processos imunohistoquímicos utilizando anticorpos específicos (dab).

As células epiteliais, desenvolvidas dentro dos fu ros, pode..i portanto ser consideradas, geralmente, como estar do na fase de proliferação activa e assim podnn ser eficazmente utilizadas em zonas de transplantes.

A pele artificial de acordo com a presente invenção, obtida pelos processos acima mencionados, consiste, por tanto, numa membrana de suporte biocompatível e de preferência bioreabsorvível, formada por materiais de origem natural sintética ou semisintética, e tendo uma espessura compreendida entre 10 e 500 Λ © de preferencia entre 20 e 40 yir, caraç terizada pelo facto de compreender uma série ordenada dc furo com um tamanho definido e constante compreendido entre 10 e 1000 yt, separados uns dos outros numa distância constante compreendida entre 5θ © 1000 ea conjunto com Kicrocolóni as e queratinócitos autólogos ou heterólogos, na fase de pro liferação activa dentro dos furos.

A mencionada pele artificial pode ser facilmente

moldada pelo cirurgião com base nas zonas a serem tratadas, e tem uma resistência mecânica que lhe dá a capacidade de po der ser manipulada sem dificuldade e poder ser saturada. Uma vez implantada na’ zona da lesão, as microscolónias de queratinócitos originam núcleos de crescimento de tecido opítelial de crescimento rápido, o qual nua curto período de tempo cobre completamente, com células epiteliais, a zona sobre a qual se realizou o transplante.

A referida pele artificial é utilizada retirando-se do vaso de cultura, removendo todos os vestígios do meio de cultura por meio de uma solução fisiológica estéril e apl cando-atna zona a ser tratada sem ser necessário prestar uma atenção especial à orientação da aplicação, visto ser igualmente eficaz se for aplicada em qualquer dos seus dois lados em contraste com as culturas de queratinScitos convencionais

A pele artificial de acordo com a ente invença pode ssr utilizada para cobrir lesões mesmo extensas da superfóie do corpo, de origem traumática, tais como queimaduras, de origem cirúrgica tais como zonas de extracção em cirurgia plástica ou de origem patológica, por exemplo úlceras estásicas ou ferimentos por permanência no leito.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1 . Processo para a preparação de membranas biocompatíveis constituídas por materiais de origem natural, sintética ou semi-sintética, tendo uma espessura compreendida entre 10 e 500 μ, de preferência, entre 20 e 40 μ, e uma série ordenada de furos com um tamanho definido e constante compreendido entre 10 e 1000 μ, separados uns dos outros por uma distancia constante compreendida entre 50 e 1000 yu, caracterizado pelo facto de se perfurar uma membrana contínua mediante um sistema de perfuração apropriado, utilizando dispositivos de perfuração mecanica ou com raio laser.

2^a. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o tamanho dos furos estar compreendido entre 40 e 70 P' 3^a. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado

pelo facto de a distancia entre os furos ser igual a 80 )u.
4 . Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o material biocompatível de origem natural ser escolhido do grupo formado por colagénio ou coprecipitados de colagénio e glicosaminoglicartos, celulose, polissacáridos gelifiçados tais como quitina, quitosano, pectinas ou ácidos pécticos, agar, agarose, goma de xantano, gelano, ácido algínico ou alginatos, polimananos ou poliglucanos, amidos e borrachas naturais, ou sozinhos ou em mistura duns com os outros ou com polímeros de origem sintética ou semisintética, na presença de agentes de precipitação ou gelificantes apropriados, tais como sais metálicos, policatiões ou polianiões.
5 . Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se escolher o material biocompatível de origem sintética do grupo constituído por ácido poliláctico, ácido poliglicólico, os seus copolímeros ou os seus derivados, polidioxanonas, polifosfazenos, polissulfonas e poliuretanos.
6 . Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado! pelo facto de se escolher o material biocompatível de origem' semi-sintética do grupo formado por derivados semi-sintéticos¹de polímeros naturais tais como colagénio reticulado com agentes de reticulação tais como dialdeídos ou os seus precursores, ácidos dicarboxílicos ou os seus halogenetos, diaminas e derivados de celulose, de ácido algínico, de amido, de ácido hialurónico, de quitina ou quitosano, de gelarão, de xantano, de pectinas ou ácidos pécticos, de poliglucanos, de polimananos, de agar, de agarose, de borrachas naturais, ou de glicosaminoglicanos. , !
7 . Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado¹pelo facto de a membrana biocampatível consistir em éster de benzilo de ácido hialurónico com 100% de esterificação.
8a. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado: pelo facto de o dispositivo de perfuração mecanica ser um! furador. ' θ
9 . Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de o dispositivo de perfuração por laser ser um laser de radiação ultravioleta.
10 . Processo para a cultura in vitro de células epiteliais com utilização de membranas biocompatíveis formadas de materiais de origem natural, sintética ou semi-sintética e tendo uma espessura compreendida entre 10 e 500 μ, de preferência entre 20 e 40yi, para a cultura in vitro de células epiteliais, caracterizado pelo facto de as células epiteliais serem inoculadas em membranas compreendendo uma série ordenada de furos com um tamanho definido e constante, compreendido entre 10 e 1000 μ e separados uns dos outros por uma distancia compreendida entre 50 e 1000 yu. j

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11^a. Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizadoj pelo facto de as citadas células epiteliais serem queratinócitos.
12 . Processo para a obtenção de pele artificial apropriada para servir para a realização de transplantes de pele no caso de perda de zonas cutaneas, caracterizado pelo facto de sei formar uma membrana de suporte biocompatível feita de! materiais de origem natural, sintética ou semi-sintética e tendo uma espessura compreendida entre 10 e 500 μ, de preferência, entre 20 e 40 μ, a qual contém uma série ordenada de furos com tamanho definido e constante compreendido entre 10 e 1000 μ, separados uns dos outros por uma distancia constante compreendida entre 50 e 1000 yu, em conjunto com microcolónias de queratinócitos autólogos ou heterólogos, na fase de proliferação activa, presentes dentro dos mencionados furos.
13 . Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo facto de o tamanho dos furos estar compreendido entre 40 e 70 u.
14 . Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo facto de a distancia entre os referidos furos ser igual a 80 u.
15 . Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo facto de se escolher o material biocompatível de origem natural do grupo formado por colagénio ou coprecipitados, de colagénio e glicosaminoglicanos, celulose, polissacáridos gelifiçados tais como quitina, quitosano, pectinas ou ácidos pécticos, agar,agarose, goma de xantano, gelano, ácido algínico ou alginatos, polimananos ou poliglucanos, amidos e borrachas naturais ou isolados, ou em mistura uns com os outros ou com polímeros de origem sintética ou semi-sintética, na presença de agentes apropriados de precipitação ou de gelificação, tais como sais metálicos, policatiões ou polianiões.

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16 . Processo de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo facto de se escolher o material biocompatível de origem sintética do grupo formado por ácido poliláctico, ácidoj poliglicólico ou os seus copolímeros ou derivados/ polidioxanonas, polifosfazenos, polissulfonas e poliuretanos.
17^a. Processo de acordo com a reivindicação 12,; caracterizado pelo facto de se escolher o material! biocompatível de origem semi-sintética do grupo formado porj derivados semi-sintéticos de polímeros naturais, tais como colagénio reticulado com agentes de reticulação tais como dialdeídos ou os seus precursores, ácidos dicarboxílicos ou seus halogenetos, diaminas e derivados de celulose, de ácido algínico, de amido, de ácido hialurónico, de quitina ou quitosano, de gelano, de xantano, de pectinas ou ácidos pécticos, de poliglucanos, de polimananos, de agar, de agarose, de borrachas naturais ou de glicosaminoglicanos.
18 . Processo de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo facto de o material biocompatível consistir em éster de benzilo de ácido hialurónico com 100% de esterificação.