PT2937094T

PT2937094T - Composição farmacêutica para o tratamento de dor de cabeça e método de preparação da mesma

Info

Publication number: PT2937094T
Application number: PT138642533T
Authority: PT
Inventors: Yan Xijun; Wu Naifeng; Zhang Shunnan; Yang Jianhui; Liu Yan; Shao Xingyun; Gao Song; Dong Lina; Bai Xiaolin; Sun Yan; Xu Bo; Zheng Yongfeng; Fan Lijun
Original assignee: Tasly Pharmaceutical Group Co
Priority date: 2012-12-21
Filing date: 2013-12-19
Publication date: 2018-06-01
Also published as: AU2013362431B2; HRP20180783T1; ES2667579T3; BR112015014973B8; PL2937094T3; LT2937094T; KR102123972B1; EP2937094B1; CA2895335C; UA117361C2; CA2895335A1; JP6091651B2; JP2016503040A; US20150352168A1; EA201591194A1; PE20151148A1; KR20150096798A; BR112015014973A2; EP2937094A1; MX2015007901A

Description

DESCRIÇÃO

COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA O TRATAMENTO DE DOR DE CABEÇA E MÉTODO DE PREPARAÇÃO DA MESMA

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se ao campo da medicina tradicional chinesa (MTC). Mais especificamente, a invenção refere-se à composição farmacêutica para o tratamento da dor de cabeça, método preparativo e a sua utilização.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Dor de cabeça é um sintoma comum na vida diária. Quase todo as pessoas vão ter dor de cabeça na vida. As causas da dor de cabeça são variadas. Atualmente, existem muitos remédios para tratar a dor de cabeça no exterior ou na China, a maioria dos quais, no entanto, foca no tratamento sintomático da dor (em pouquíssimos casos, dor de cabeça é tratada por cirurgia). Os resultados não são satisfatórios, porque os medicamentos concentram-se no tratamento sintomático e não na raiz da causa. Como resultado disso, a dor de cabeça ataca os pacientes recorrentemente. 0 uso prolongado de agentes analgésicos pode causar resistência a drogas e dependência, de modo que o medicamento deste tipo não deve ser usado por longo tempo. No entanto, a dor de cabeça não pode ser curada radicalmente. Além disso, de acordo com condições com diferentes causas, existem diferentes tipos de drogas aplicadas clinicamente, por exemplo, o agente anti-ansiedade, o agente antidepressivo, o inibidor simpático, bloqueadores dos canais de cálcio e agentes antiepiléticos, etc. Devido aos seus efeitos secundários graves, a administração a longo prazo reduzirá a sua eficácia de tal modo que os doentes tenham de aumentar gradualmente a dose do fármaco. 0 resultado, no entanto, não é satisfatório. Quanto mais drogas tomam, mais severa é a dor de cabeça. Agora, a pílula de Zhengtian (Zhengtianwan) é uma medicina tradicional chinesa (MTC) cuja fórmula compreende tanto a MTC quanto a droga química. A MTC trabalha por um mecanismo de ativação do sangue, removendo a estase e a dor de parada da droga química. Na prática, seu efeito curativo não é definido para alcançar o propósito de curar radicalmente. Agora, há muitos TCMs para tratar a dor de cabeça. Mas a maioria deles tem efeito mais lento; e essa desvantagem influenciará a qualidade de vida dos pacientes. A Patente Chinesa (ZL 93100050.5) descreveu uma composição medicinal compreendendo 11 TCMs de Radix Angelicae Sinensis (Dang gui) e Rhizoma Chuanxiong (Chuan xiong), Radix Paeoniae alba (Bai shao), Radix Rehmanniae Preparata (Shu dihuang), Ramulus Uncariae com Uncis (Gou teng), Caulis Spatholobi (Ji Xueteng), Spica Prunellae (Xia Kucao), Semen Cassiae (Jue mingzi), Concha Margaritifera Usta (Zhen zhumu), Rhizoma Corydalis (Yuan hu) e Erva Asarum (Xi xin) . São os frutos da prática clínica a longo prazo sob a orientação da teoria da medicina chinesa, tendo os efeitos terapêuticos do tratamento da dor de cabeça causada por danos internos. Clinicamente, pode ser aplicado no tratamento de várias doenças de cefaleia, como cefaleia angioneurótica, enxaqueca e alguns sintomas como tontura e cefaleia, etc., causados por hipertensão. De acordo com a proporção desta receita, o grânulo desta composição é produzido pela Tasly Pharmaceutical Group Co. Ltd., denominado "Yang Xue Qing Nao Granule". As funções e indicações aprovadas pelas autoridades são nutrir sangue e acalmar o fígado, ativar o sangue e remover a obstrução nos canais, utilizados para diversos tipos de cefaleia provocada pela deficiência de sangue e hiperatividade do fígado, síndrome do nervo craniano traumático, tontura e vertigem, irritação e irritabilidade, insónia e devaneio. Em clínica, tem sido geralmente usado para tratamento de dor de cabeça causada por deficiência de sangue, estase de sangue e deficiência de Yin e hiperatividade de Yang. Desde entrar no mercado, Yang Xue Qing Nao Granule ganhou ampla popularidade entre os pacientes devido aos seus efeitos terapêuticos tranquilizantes.

Agora, tem sido literariamente relatado que o Yang Nao Qing Não Granule é geralmente preparado pelo seguinte método. As 11 TCMs são extraídas com água, que é precipitada com etanol para dar o extrato e, em seguida, o extrato é misturado com excipientes para se preparar em vários tipos de formulações farmacêuticas. Por exemplo, as patentes chinesas (03140844.3, 200410019825.4) divulgaram um processo em que as 11 TCMs foram misturadas em proporção, extraídas com água por 3 vezes, combinadas para obter um extrato após concentração apropriada, que foi adicionada com 2 vezes de etanol para deixar em repouso por 24 horas para precipitar para obter sobrenadante. O sobrenadante foi concentrado para um extrato com densidade relativa de 1,3 ± 1,4. A taxa de rendimento foi de 10%. O referido extrato foi misturado com sacarose e dextrina numa proporção de 1:3:1 para produzir grânulos.

No entanto, devido à natureza diferente de cada TCM, a extração de ingredientes ativos usando todos os métodos de extração juntos geralmente resulta na extração incompleta ou aumenta o defeito da baixa taxa de rendimento. Por exemplo, os ingredientes principais de Radix Angelicae Sinensis (Dang gui) e Rhizoma Chuanxiong (Chuan xiong) são solúveis em etanol, então o etanol era melhor. Da mesma forma, o Ramulus Uncariae cum Uncis contém uma variedade de alcaloides indólicos, que é dominada pela ricnofilina e isorhincofilina e uma pequena quantidade de constituintes de flavona. A sua decocção em água e extrato são provados para ter efeitos significativamente bioativos da sedação, analgesia e anti hipertensão. Assim, a extração pela água é mais adequada.

Como mostrado nas patentes chinesas (200510073290.3 e 200510014828.3), foram descritas 11 MTCs, em que Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba e Rhizoma Corydalis foram refluxadas com etanol para ter uma solução refluxante, o resíduo foi misturado com as outras 6 TCMs (excluindo Ramulus Uncariae cum Uncis) incluindo Radix Rehmanniae Preparata etc. e extraído por 3 vezes. Durante o processo de 3a decocção, o Ramulus Uncariae cum Uncisfoi adicionado e o liquido de extração foi combinado para concentrar em vácuo. O etanol foi utilizado para precipitar e a solução obtida foi deixada em repouso. Após filtração, o filtrado foi misturado com a solução de refluxo acima referida, e o etanol foi recuperado sob pressão reduzida, concentrado e seco para se obter o extrato.

Na prática, entretanto, a extração de Radix Paeoniae alba combinada com TCMs resultará no extrato final um pouco menos na capacidade de fusão. A adição posterior do Ramulus Uncariae cum Uncis no extrato pode fazer com que o medicamento flutue na superfície, de modo a influenciar a extração. Não só isso, mas a operação é complicada com o risco de vapor perigoso. A extração do semen cassiae por água é propensa a causar problemas de extração de pasta ou dificuldade de drenagem.

Em vista dos problemas acima mencionados, após repetidas pesquisas experimentais, um novo método de preparação e uma composição medicinal feita por este novo método foram desenvolvidos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO O objetivo da presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica para uso no tratamento da dor de cabeça.

Outro objetivo da presente invenção é proporcionar um método de preparação da referida composição.

Outro objetivo da presente invenção é proporcionar uma utilização da referida composição na preparação de fármacos para o tratamento da dor de cabeça, sindroma do nervo craniano traumático, tonturas e vertigens, irritação e irritabilidade, insónia e devaneio. A composição para utilização da presente invenção compreende: 4-9 partes em peso de Radix Angelicae Sinensis, 4-9 partes em peso de Rhizoma Chuanxiong, 2-8 partes em peso de Radix Paeoniae alba, 2-8 partes em peso de Radix Rehmanniae Preparata, 10- 15 partes em peso de Ramulus Uncariae cum Uncis, 10-15 partes em peso de Caulis Spatholobi, 10-15 partes em peso de Spica Prunellae, 10-15 partes em peso de Semen Cassiae, 10-15 partes em peso de Concha Margaritifera Usta, 4-9 partes em peso de Rhizoma Corydalis e 0,5-2 partes em peso de Herba Asari. A referida composição é preparada por um método como se segue: a) Preparação do Extrato # 1: Radix Angelica Sinensis, Rizoma Chuanxiong, Rizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento em refluxo com etanol e filtrados para remover impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 1 para uso posterior; b) . Preparação do extrato # 2: Extrato de Radix Paeoniae alba é extraído usando aquecimento em refluxo com etanol e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 2 para uso posterior; c) . Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, decocados com água, filtrados, concentrados, nos quais é adicionado etanol para que fique parado, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o Extrato # 3 para uso posterior; d). Preparação das formulai^es: três extratos supramencionados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos e granulados para obter o produto final.

De preferência, a referida composição para utilização da presente invenção é preparada por um método como se segue: a) . Preparação do extrato # 1: Mistura de Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiongf Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae, extraída usando aquecimento a refluxo com 3~6 vezes de 50~80% de etanol por 2~3 vezes, a primeira vez para 0,5-2,5 horas; a segunda e/ou terceira vez durante 0,5 a 2 horas e filtrada para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1250 ~ 1350 (70~80°C) para dar o Extrato # 1 para uso posterior; b) . Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 3~6 vezes de 50~80% etanol, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo por 2~3 vezes, a primeira vez por 0,5~2,5 horas, a segunda e/ou terceira vez por 0,5 a 2 horas e filtrada; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,10-1,35 (55-65°C) para dar o Extrato # 2 para uso posterior; c) . Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata,

Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi , Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são combinados, decocados com 4~10 vezes de água por 2~3 vezes, a primeira vez para 0,5~ 3 horas, a segunda e/ou a terceira vez durante 1 a 3 horas, filtradas, concentradas até a densidade relativa ser 1,06-1,10 (75-85°C), na qual é adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 60-85%, deixado em repouso por 12~24 horas e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1270 ~ 1350 (75 ~ 85°C) para dar o Extrato # 3 para uso posterior; d). Preparação das formulações: três extratos supramencionados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para obter o produto final.

Mais preferencialmente, a referida composição para utilização da presente invenção é preparada por um método como se segue: a) . Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1300-1110 (74-76°C) para dar o Extrato # 1 para uso posterior; b) . Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 4 vezes de etanol a 60%, embebido, extraido usando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até que a densidade relativa seja de 1,23 a 1,33 (65°C) para dar o extrato # 2 para uso posterior; c) . Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser 1,06-1,10 (80 ° C), na qual o etanol é adicionado para fazer um teor final de etanol de 65~70%, deixado em repouso por 12~24 horas e filtrado ; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1320 ~ 1325 (79-81°C) para dar o Extrato # 3 para uso posterior; d). Preparação das formulações: três extratos supramencionados são adicionados com quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para obter o produto final.

Em que, os referidos excipientes no passo d) incluem um ou mais tipos de agente de enchimento e agente aromatizante. O referido agente de enchimento é selecionado de entre um ou mais tipos de celulose, amido, amido solúvel, açúcar em pó, dextrina, manitol, sacarose, lactose e celulose microcristalina, etc. O referido agente aromatizante é selecionado de entre um ou mais tipos de esteviosina, aspartame, glicerol, sacarina sódica, sorbitol, manitol, xilitol, alta frutose e ciclamato de sódio.

De um modo preferido, o referido agente de enchimento é selecionado de dextrina, amido, amido solúvel, sacarose, lactose e celulose microcristalina, e o referido agente aromatizante é selecionado de esteviosina e aspartame.

De um modo muito preferido, o referido agente de enchimento é selecionado de dextrina e o agente aromatizante é selecionado de esteviosina.

Numa forma de realização, a raiz dos supracitados três Extratos preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma

Corydalis e Herba Asari para os excipientes é 40:60 a 65:35 em percentagem de peso.

Numa outra forma de realização, a raiz dos supracitados três Extratos preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma Corydalis e Herba Asari para os excipientes é 55:45 a 65:35 em percentagem de peso.

Em que a proporção acima mencionada é uma razão entre o extrato seco convertido dos três extratos acima mencionados para os excipientes.

De acordo com a presente invenção, a referida composição farmacêutica pode ser preparada em qualquer uma das formulações orais farmaceuticamente aceitáveis, incluindo, mas não se limitando a, grânulos, comprimidos e cápsulas, etc., preferivelmente os grânulos.

De acordo com a presente invenção, a referida formulação pode ser preparada por qualquer um dos métodos farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, método de granulação por secagem por pulverização, método de granulação por pulverização em leito fluidizado, método de granulação por molhagem, método de granulação a seco e método de granulação por laminação.

De preferência, a referida formulação pode ser preparada pelo método de granulação por pulverização em leito fluidizado.

De acordo com a presente invenção, o referido método de granulação por pulverização de leito fluidizado compreende os seguintes passos: tomar uma parte do agente de enchimento, dissolvendo-o com água purificada, adicionando agente aromatizante para dissolver agitando bem para dar lama; adicionando três extratos bem preparados à suspensão acima mencionada, agitando, ajustando a densidade da pasta, filtração online; colocando o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secagem; granulando com uma peneira; mistura totalmente e embalagem para ter o produto final.

Em que, a quantidade de adição do referido agente aromatizante representa 0-1% em peso do agente de enchimento total. A relação entre a parte do agente de enchimento primeiramente adicionada e o resto do agente de enchimento é de 1:4 a 1,5:1 em peso percentual.

De acordo com a presente invenção, a referida composição farmacêutica pode ser preparada na especificação de embalagem apropriada, que depende das suas várias formas de dosagem, por exemplo, para os grânulos, a especificação pode ser selecionada de 3 g/saco ou 4 g/saco.

De acordo com a presente invenção, o método de extração da referida composição farmacêutica é obtido seguindo as experiências de rastreio. 1. A razão pela qual extrair 11 TCMs respetivamente

Os principais ingredientes da Radix Angelicae Sinensis incluem: ácido ferúlico, capaz de inibir a coagulação sanguínea e a formação de trombos; vitamina Bi2 solúvel em água, ácido fólico, ácido folínico e ácido nicotínico, capazes de promover significativamente a geração de eritrócitos e hemoglobina; e angelica polissacarídeo, capaz de facilitar o crescimento de células reticulares de leucócitos em ratinhos e resistir à anemia.

Os principais ingredientes do Rhizoma Chuanxiong incluem aroma especial de alcaloides semelhantes a óleo voláteis, ácido ferúlico e óleo volátil, etc. 0 extrato alcoólico do Rhizoma Chuanxiong tem efeitos de dilatar a artéria coronária, aumentando o fluxo sanguíneo coronário, protegendo o miocárdio contra isquemia, reduzindo a pressão arterial significativamente, anti coagulação e anti trombos, etc. Além disso, a tetrametilpirazina é capaz de sedação, dilatando o sangue vascular, protegendo o miocárdio contra isquemia, bem como reduzindo a pressão arterial, anti coagulação e anti trombos, etc. Os principais ingredientes bioativos são o etanol solúvel em Rhizoma Chuanxiong e Radix Angelicae Sinensis, então a extração com etanol é usada. A Radix Paeoniae alba contém principalmente vários glicosideos, como a paeoniflorina, bem como óleo volátil, taninos e açúcar. Seus glicosideos totais comprovadamente têm efeitos de anti inflamação, regulação imunológica, proteção do fígado, sedação e analgesia, etc. Entre eles, a concentração de paeoniflorina é a mais alta, que é facilmente extraída com etanol ou água quente devido à sua estrutura de éster. Como resultado, o extrato pela solução de etanol é mais estável.

Os principais ingredientes de Rhizoma corydalis são numerosos alcaloides, entre os quais a tetrahidropalmatina, coridalina, coridalis L e dehidrocoridalina são comprovados para ter as funções biológicas fortes, capazes de sedar significativamente, hipnótico, reduzindo a resistência coronária e aumentando o fluxo de sangue, etc. Todos de Rhizoma Corydalis, extrato de vinagre e extrato de água são encontrados para ter efeito de aliviar a dor, e o etanol tem o melhor efeito entre outros. Ao mesmo tempo, têm certo efeito de sedação central. 0 seu alcaloide é composto principalmente de amina quaternária e álcali aminado terciário; o primeiro é solúvel em água e extraído com água. Ambos, no entanto, podem ser extraídos com solução de etanol e a taxa de rendimento é alta. 0 Semen Cassíae contém uma série de ingredientes de fisiologia, crisofanol, emodina, reina e lactona do Semen Cassíae. Assim, a extração por etanol é razoável.

Ramulus Uncariae cum Uncis contém principalmente vários tipos de alcaloides indólicos, dominados por ricinofilina e isorhincofilina, bem como um pouco de flavonoides. Tanto a sua decocção de água e extrato têm efeitos marcantes de sedação, aliviando a dor e reduzindo a pressão arterial. Portanto, extração por água é razoável.

Para o resto desta composição farmacêutica, a Radix Rehmanniae Preparata, a Caulis Spatholobi, a Spica Prunellae, a Concha Margaritifera Usta e a Herba Asari funcionam como drogas adjuvantes e drogas de transporte nesta fórmula. Os ingredientes químicos aí contidos incluem álcoois, aminoácidos, esteróis, antraquinonas, muitos tipos de açúcares e uma variedade de oligoelementos essenciais como o Fe. Descobriu-se que a sua decocção de água tem um efeito enriquecedor no sangue aumentando a contagem de hemácias, aumentando a hemoglobina, reduzindo o açúcar no sangue, reduzindo a pressão sanguínea e diminuindo os lípidos no sangue, etc. Como resultado, de acordo com os requisitos de fórmula e qualidade dos ingredientes bioativos, o método de extração com álcool extratora de água é usado para extrair os ingredientes bioativos.

Com base na análise supracitada, o método de extração por etanol é aplicado aos medicamentos de Radix Angelicae Sinensis, Rizoma Chuanxiongf Radix Paeoniae albaf Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae} o método de extração do álcool com extração da água para a Radix Rehmanniae Preparata, a

Caulis Spatholobi, a Spica Prunellae, a Concha Margaritifera Usta e a Herba Asari. 2. Investigação da extração da Radix Paeoniae alba sozinha ou em combinação A Radix Paeoniae alba é o principal fármaco da fórmula, cujo principal ingrediente bioativo, a paeoniflorina, atua como indicador de determinação. A taxa de rendimento, o teor de paeoniflorina e a capacidade de dissolução foram utilizados como indicadores para a investigação da extração da Radix Paeoniae alba isolada ou em combinação. Os processos de produção foram concebidos, respetivamente, em que o 1° processo incluiu os passos de tomar Radix Paeoniae alba na dose de prescrição, em que 5 vezes maior de etanol a 70% foi adicionado para extrair duas vezes por refluxo, 2 horas de cada vez; e o 2° processo incluiu os passos de tomar Radix Paeoniae alba, Radix Angelicae sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma corydalis e semen Cassiaena na dose prescrita, na qual 5 vezes de etanol a 70% foram adicionados para extrair por refluxo duas vezes, 2 horas para cada vez. Os extratos resultantes foram combinados respetivamente, a quantidade apropriada dos extratos (aproximadamente iguais a 0,03 g de medicamento em bruto de Radix Paeoniae alba) foi sugada, o etanol foi adicionado a um volume constante de 20 ml e filtrado para obter o fluido como a solução de amostra. O restante dos extratos foi seco para investigar sua taxa de rendimento, conteúdo de paeoniflorina e capacidade de dissolução. Método para determinação de paeoniflorina Aparelho e reagente O HPLC Agilent 1100 foi equipado com bomba quaternária, DAD, amostrador automático, desgaseificador on-line e termostato de coluna.

Paeoniflorina padrão (obtida do Instituto de Análise de Produtos Biológicos da China Pharmaceutical) , metanol (cromatograficamente puro), água purificada, isopropanol, ácido cítrico (analiticamente puro)

Condições cromatográficas: Coluna Agilent Zorbax SB-Cie (250 mm x 4,6 mm, 5 pm)

Fase móvel: solução de isopropanol-metanol-ácido cítrico a 5% (2:18:80)

Caudal: 1,0 ml/min; temperatura da coluna: 30°C; comprimento de onda de deteção: 240nm Preparação da solução de teste: como mencionado anteriormente.

Preparação da solução padrão: foi recolhida quantidade apropriada de paeoniflorina padrão e pesada com precisão para preparar a solução padrão (com 1 ml de solução contendo 0,015 mg de soluto) adicionando 80% de metanol. Método de medição: 10 testes e soluções padrão foram respetivamente sugados com precisão, injetados no HPLC e medidos.

Os resultados foram mostrados abaixo.

Tabela 1 Investigação da extração da Radix Paeoniae alba sozinha ou em. combinação

Como mostrado nos resultados, em termos de conteúdo de paeoniflorina, o extrato preparado pela extração de Radix Paeoniae alba sozinho foi ligeiramente superior ao da combinação (3,18%). Em termos de taxa de rendimento, o primeiro foi menor que o segundo. Em termos de capacidade de dissolução, o primeiro era muito melhor que o segundo. Comparado com este último, o primeiro processo teve vantagens de menor tempo de aquecimento de concentração, menor perda de paeoniflorina, aumento da taxa de transferência e elevado teor no produto. Assim, considerando vários fatores de forma abrangente, o processo de extração da Radix Paeoniae alba isoladamente foi razoável. 3. Investigação da extração de Ramulus Uncariae cum Uncis de diferentes formas 0 teor de ricnofilina e a taxa de rendimento foram utilizados como indicadores para a investigação da extração de Ramulus Uncariae cum Uncis de diferentes maneiras (onde Ramulus Uncariae cum Uncis é decocto mais cedo ou mais tarde) . Uma mistura de Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta, Ramulus Uncariae com

Uncis e Herba Asari foi tomada com uma dose prescrita. Os processos de produção foram projetados respetivamente. Io processo era que mistura acima referida foi adicionada com 6 vezes de água, extraiu-se por 3 vezes para que o extrato, pela primeira vez durante 2 horas, as segunda e terceira vezes, durante 1 hora. 2o processo foi o de que Radix Rehmanniae Preparata, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae e Concha Margaritifera Usta foram adicionados com 6 vezes de água, extraídos durante 2 horas, filtrados e os resíduos resultantes foram misturados com o Ramulus Uncariae cum Uncis, extraídos duas vezes com 6 vezes, de água, cada um por 1 hora para ter o extrato. 0 teor de ricinofilina e a taxa de rendimento dos extratos acima obtidos foram medidos respetivamente. Método para determinação de ricinofilina Aparelho e reagente 0 HPLC Agilent 1100 foi equipado com bomba quaternária, DAD, amostrador automático, desgaseificador on-line e termostato de coluna.

Ricinofilina padrão, metanol (cromatograficamente puro), água purificada, trietilamina, ácido acético glacial (analiticamente puro)

Condições cromatográficas: Coluna Agilent Zorbax SB-Cie (250 mm x 4,6 mm, 5 μπι)

Fase móvel: solução de trietilamina de metanol-10 mmol (48:52), ajustada para pH = 5,0 com ácido acético

Caudal: 1,0 ml/min; temperatura da coluna: 30°C; Comprimento de onda de deteção: 254nm

Preparação da solução padrão: foi recolhida quantidade apropriada de ricinofilina convencional e pesada com precisão para preparar a solução padrão (com 1 ml de solução contendo 10 μΐ de soluto) por adição de metanol.

Preparação da solução de ensaio: quantidade apropriada (aproximadamente igual a 2g de medicamento bruto Ramulus Uncariae cum Uncis) de extrato de água combinado foi aspirada, alcalinizada adicionando 5 ml de água de amónia, extraída com clorofórmio durante 3 vezes e combinada, evaporada até à secura com banho de água. Os resíduos foram dissolvidos por adição de metanol a um volume de 20 ml, filtrados para dar a solução de teste. Método de medição: Testes de 10μ1 e soluções padrão foram respetivamente sugados com precisão, injetados no HPLC e medidos.

Os resultados foram mostrados abaixo.

Tabela 2 Investigação da extração de Ramulus Uncariae cum

Uncis de diferentes formas

Tal como mostrado nos resultados, em termos do conteúdo de ricinofilina, o extrato preparado por o Io processo foi quase a mesma que pelo 2o processo. Em termos de taxa de rendimento, o extrato preparado pelo Io processo foi ligeiramente superior ao do 2o processo, mas a diferença foi pequena. A operação inconveniente trazida pelo 2o processo devem ser considerados, por exemplo, o fármaco talvez flutuava na superfície, o que pode influenciar a extração e causar risco de segurança em potencial. Devido ao seu processo simplificado, fácil operação e maior segurança, o Io processo foi razoável.

Como mostrado na pesquisa farmacológica, confirma-se que a referida composição farmacêutica tem efeitos de melhorar a microcirculação do piai cerebral, aumentar o fluxo sanguíneo cerebral, relaxar o vasoespasmo e parar a dor. Como mostrado na experiência de farmacodinâmica, comparada com a preparada por métodos conhecidos nas técnicas anteriores, a composição farmacêutica tem um efeito excelente no tratamento da dor de cabeça.

Formas de realização Exemplo 1

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 253,5g de Radix Angelicae Sinensis, 253,5g de Rhizoma

Chuanxiong, 202,7g de Radix Paeoniae alba, 202,7g de Radix Rehmanniae Preparata, 506,8g de Ramulus Uncariae cum

Uncisf 506,8g de Caulis Spatholobi, 506, 8g de Spica

Prunellae, 506,8g de Semen Cassiae, 506,8g de Concha Margaritifera Usta, 253,5g de Rhizoma Corydalis e 50,5g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 7 0%, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,300 ± 1,310 (74,76°C), para dar 253 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do Extracto # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes com etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,23-1,33 (65 ° C) para dar 42 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 65-70%, deixado em repouso durante 12 a 24 horas e filtrado ; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,320 ~ 1,325 (79-81°C) para dar 305 g de extrato # 3 para utilização posterior. 300 g de dextrina foram dissolvidos com água purificada, em que foram adicionados 3,0 g de esteviosina para dissolver por agitação para dar pasta. Adicionaram-se 600 g de três Extratos bem preparados na suspensão e agitaram-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 45°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 250,0 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60“C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 80 ~ 90°C, para secar completamente.

Os grânulos resultantes foram separados, peneirados e totalmente misturados para produzir grânulos. O pacote foi saco de travesseiro de filme composto de alumínio-plástico com especificação de 4 g/saco.

Exemplo 2

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 338g de Radix Angelicae Sinensis, 338g de Rhizoma Chuanxiong, 270,3g de Radix Paeoniae alba, 270,3g de Radix Rehmanniae Preparata, 675,7g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 675,7g de Caulis Spatholobi, 675,7g de Spica Prunellae, 615.lq de Semen Cassiae, 615.lq de Concha Margaritifera Usta, 338g de Rhizoma Corydalis e 67.3g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 7 0%, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1300 ± 1310 (74 - 76°C) para dar 335 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes com etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,23 ~ 1,33 (65°C) para dar 55 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi , Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C), na qual foi adicionado etanol para perfazer um teor final de etanol de 65-72%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,320 ~ 1,325 (79-81°C) para dar 420 g de extrato # 3 para utilização posterior. 83 g de sacarose foram dissolvidos com água purificada por agitação para dar a suspensão espessa. Adicionaram-se 810 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitaram-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 - 1,23 (42 ~ 45°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 320 g de resto da sacarose foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de líquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C, para secar completamente.

Os grânulos resultantes foram separados, peneirados e totalmente misturados para produzir grânulos. O pacote foi saco de travesseiro de filme composto de alumínio-plástico com especificação de 3 g/saco.

Exemplo 3

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 150g de Radix Angelicae Sinensis, 150g de Rhizoma Chuanxiong, 225g de Radix Paeoniae alha, 225g de Radix Rehmanniae Preparata, 551g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 551g de Caulis Spatholobi, 551g de Spica Prunellae, 551g de Semen Cassiae, 551g de Concha Margaritifera Ustaf 225g de Rhizoma Corydalis e 19g de Herba Asa ri.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong,· Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 5 vezes de etanol 70%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,250 a 1,310 (70-74°C) para dar 210 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes com etanol a 80%, embebido, extrído utilizando aquecimento por refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,15 ~ 1,25 (65°C) para dar 50 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Ãsari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 60-65%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,27 ± 1,320 (75-80°C) para dar 545 g de extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveram-se 231 g de dextrina com água purificada, em que foram adicionados 3,0 g de esteviosina para dissolver agitando bem para dar a pasta. 805 g de três Extratos bem preparados foram adicionados à suspensão e agitados passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 151 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de líquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C, para secar completamente.

Exemplo 4

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 250g de Radix Angelicae Sinensis, 250g de Rhizoma Chuanxiong, 250g de Radix Paeoniae alba, 250g de Radix Rehmanniae Preparata, 740g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 740g de Caulis Spatholobi, 740g de Spica Prunellae, 740g de Semen Cassiae, 740g de Concha Margaritifera Usta, 250g de Rhizoma Corydalis e 50g de Herba Asa ri.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong,· Rizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes 80% de etanol, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1300 ~ 1350 {75 ~ 80°C) para dar 300 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo por 3 vezes, a primeira vez durante 3 horas e a segunda vez durante 1 hora e a terceira vez durante 0,5 horas e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,20 ~ 1,35 (60°C) para dar 60 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 8 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez durante 2 horas, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 80-85%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,30 ~ 1,350 (80-85°C) para dar origem a 425 g de extrato # 3 para utilização posterior. 80 g de amido solúvel foram dissolvidos com água purificada, em que foi adicionada 3 g de estiosiosina para dissolver por agitação para dar a suspensão. Adicionou-se 785 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitou-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 330 g de resto do amido solúvel foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60“C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C, para secar completamente.

Exemplo 5

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 338g de Radix Angelicae Sinensis, 338g de Rhizoma Chuanxiong, 75g de Radix Paeoniae alba, 75g de Radix Rehmanniae Preparata, 510g de Ramulus Uncariae cum Uncisf 510g de Caulis Spatholobi, 510g de Spica Prunellae, 510g de Sêmen Cassiae, 510g de Concha Margaritifera Usta, 337g de Rhizoma Corydalis e 37g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong,· Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes 50% de etanol, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 2 horas e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1300 ± 1350 (73-78°C) para dar 330 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 5 vezes de etanol a 70%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 1 hora e a segunda vez durante 1 hora e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,23 - 1,35 (65°C) para dar 15 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 10 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 2 horas, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 63-70%, deixado em repouso durante 12 a 24 horas e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,290 ± 1,330 (78-83°C) para dar 253 g de # 3 de extrato para utilização posterior.

Dissolveram-se 320 g de dextrina com água purificada, na qual 3 g de esteviosina foram adicionados para dissolver agitando bem para dar a suspensão espessa. Adicionou-se 598 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitou-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 - 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 240 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de líquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C para secar completamente.

Exemplo 6

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 300g de Radix Angelicae Sinensis, 300g de Rhizoma

Chuanxiong, 400g de Radix Paeoniae alha, 400g de Radix Rehmanniae Preparata, 650g de Ramulus Uncariae cum

Uncis, 650g de Caulis Spatholobi, 650g de Spica

Prunellae, 650g de Semen Cassiae, 650g de Concha

Margaritifera Usta, 300g de Rhizoma Corydalis e 50g de Herba Asa ri.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong,· Rizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 3 vezes com 3 vezes de etanol a 60%, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 0,5 hora, e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,29 ± 1,340 (73-78°C) para dar 315 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes 80% de etanol, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo por 3 vezes, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 1 hora e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,18-1,33 (65°C) para dar 90 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 7 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06-- 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 70-75%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,310-1,330 (77-82°C) para dar 375 g de Extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveram-se 84 g de dextrina com água purificada, na qual foram adicionados 3 g de esteviosina para dissolver agitando bem para dar a suspensão. Adicionou-se 780 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitou-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 336g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C para secar completamente.

Exemplo 7

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 338g de Radix Angelicae Sinensis, 338g de Rhizoma Chuanxiong, 300g de Radix Paeoniae alba, 300g de Radix Rehmanniae Preparata, 413g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 413g de Caulis Spatholobi, 413g de Spica Prunellae, 413g de Semen Cassiae, 413g de Concha Margaritifera Usta, 337g de Rhizoma Corydalis e 75g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 6 vezes de etanol 70%, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 0,5 horas e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,260 ~ 1,310 {74 ~ 76°C) para dar 300 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 2 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,21 - 1,34 (55°C) para dar 70 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 6 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06- 1,10 (80°C) , na qual foi adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 65-75%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1300 a 1300 (79— 81°C) para dar 424 g de extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveram-se 40 g de dextrina com água purificada, na qual foram adicionados 3 g de esteviosina para dissolver agitando bem para dar a pasta. 794 g de três Extratos bem preparados foram adicionados à suspensão e agitados por etapas. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 - 1,23 (42 - 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 - 100. 163 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 - 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 - 90°C para secar completamente.

Exemplo 8

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 450g de Radix Angelicae Sinensis, 450g de Rhizoma

Chuanxiong, 350g de Radix Paeoniae alba, 350g de Radix Rehmanniae Preparata, 570g de Ramulus Uncariae cum

Uncis, 570g de Caulis Spatholobi, 570g de Spica

Prunellae, 570g de Semen Cassiae, 570g de Concha Margaritifera Usta, 450g de Rhizoma Corydalis e lOOg de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 6 vezes 80% de etanol, a primeira vez por 1 hora e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,29 ± 1,340 (73-78°C) para dar 390 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 3 vezes de etanol a 60%, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2,5 horas e a segunda vez durante 2 horas, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,17-1,33 (65°C) para dar 65 g de extrato # 2 para uso posterior.

Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata,

Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 9 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez por 3 horas, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06 a 1,08 (80), na qual foi adicionado etanol para perfazer um teor final de etanol de 65-75%, deixada em repouso durante 12-22 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1310 a 1330 (77-82 °C) para dar 385 g de extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveram-se 110 g de dextrina com água purificada, na qual foram adicionados 3 g de esteviosina para dissolver agitando bem para dar a pasta. 840 g de três Extratos bem preparados foram adicionados à suspensão e agitados por etapas. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 256 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C para secar completamente.

Exemplo 9

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 253,5g de Radix Angelicae Sinensis, 253,5g de Rhizoma Chuanxiong, 202,7g de Radix Paeoniae alba, 202,7g de Radix Rehmanniae Preparata, 506,8g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 506,8g de Caulis Spatholobi , 506,8g de Spica Prunellae, 506,8g de Semen Cassiae, 506,8g de Concha Margaritifera Usta, 253,5g de Rhizoma Corydalis e 50,5g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Ãngelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 70%, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,250 ± 1,310 (70-74°C) para dar 253 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes com etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,23 ± 1,33 (65°C) para dar 42 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada atiiHa densidade relativa ser de 1,06~ 1,10 (80°C) , na qual foi adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 65-75%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,27 ± 1,320 (75-80°C) para dar 305 g de extrato # 3 para utilização posterior. 300 g de amido solúvel foram dissolvidos com água purificada, em que foram adicionados 3,0 g de esteviosina para dissolver por agitação para dar a suspensão. Adicionaram-se 600 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitaram-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 250,0 g de resto do amido solúvel foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de líquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 80 ~ 90 °C para secar completamente.

Exemplo 10

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 338g de Radix Angelicae Sinensis, 338g de Rhizoma

Chuanxiong, 270,3g de Radix Paeoniae alba, 270,3g de Radix Rehmanniae Preparata, 675,7g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 675,7g de Caulis Spatholobi, 675,7g de Spica Prunellae, 615.lq de Semen Cassiae, 615.lq de Concha

Margaritifera Usta, 338g de Rhizoma Corydalis e 67.3g de Herba Asari.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 7 0%, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,280 ~ 1,320 (75 ~ 80°C) para dar 335 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 4 vezes com etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,23 ~ 1,33 {65 ° C) para dar 55 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06~ 1,10 (B0°C), em que foi adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 60-65%, deixada em repouso durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,315 ± 1,320 (76,79°C) para dar 420 g de extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveu-se 80 g de celulose microcristalina com ua purificada, na qual se adicionaram 3,0 g de aspartame para dissolver agitando bem para dar a pasta. Adicionaram-se 810 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitaram-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100.

320 g de restos de celulose microcristalina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de líquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60 °C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C, para secar completamente.

Exemplo 11

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 150g de Radix Angelicae Sinensis, 150g de Rhizoma

Chuanxiong, 225g de Radix Paeoniae alba, 225g de Radix Rehmanniae Preparata, 551g de Ramulus Uncariae cum Uncis, 551g de Caulis Spatholobi, 551g de Spica

Prunellae, 551g de Semen Cassiae, 551g de Concha Margaritifera Usta, 225g de Rhizoma Corydalis e 19g de Herba Asa ri.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 5 vezes de etanol 70%, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,290 ~ 1,300 (75 ~ 77°C) para dar 210 g de extrato # 1 de para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionada com 4 vezes 80% de etanol, embebida, extraída utilizando aquecimento a refluxo durante 2 vezes, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 2 horas, e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,15 ~ 1,25 (65°C) para dar 50 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata,

Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica

Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrada, concentrada atii^a densidade relativa ser de 1,06~ 1,10 (80°C), em que foi adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 65-70%, deixado em repouso durante 12 a 24 horas e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,310 ~ 1,315 (79 ± 82°C) para dar 545 g de extrato # 3 para utilização posterior. 231 g de lactose foram dissolvidos com água purificada, em que foi adicionado 3,0 g de aspartame para dissolver por agitação para dar a suspensão. 8 05 g de três Extratos bem preparados foram adicionados à suspensão e agitados passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 0,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 151 g de resto da lactose foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C para secar completamente.

Exemplo 12

Foram utilizados os seguintes materiais medicinais: 250g de Radix Angelicae Sinensis, 250g de Rhizoma Chuanxiong, 250g de Radix Paeoniae alba, 250g de Radix Rehmanniae Preparata, 740g de Ramulus Uncariae cum

Uncís, 740g de Caulis Spatholobi, 740g de Spica Prunellae, 740g de Semen Cassiae, 740g de Concha Margaritifera Usta, 250g de Rhizoma Corydalis e 50g de Herba Asa ri.

Preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rizoma Corydalis e Semen Cassiae foram misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes 80% de etanol, a primeira vez por 2,5 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,280 ~ 1,300 (75 ~ 77°C) para dar 300 g de extrato # 1 para utilização posterior.

Preparação de extrato # 2: Radix Paeoniae alba foi adicionado com 6 vezes de etanol a 60%, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo por 3 vezes, a primeira vez por 2 horas, a segunda vez por 1 hora e a terceira vez por 0,5 hora e filtrado; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,20 ~ 1,35 (60°C) para dar 60 g de extrato # 2 para utilização posterior.

Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari foram misturados, decocados por 2 vezes com 8 vezes de água, a primeira vez por 3 horas e a segunda vez durante 2 horas, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06~ 1,10 (80°C) , em que foi adicionado etanol para fazer um conteúdo final de etanol de 80-85%, deixada em repouso durante 12-24 horas e filtrada; e o etanol foi recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,280 ~ 1,330 (75 ~ 80°C) para dar origem a 425 g de extrato # 3 para utilização posterior.

Dissolveu-se 80 g de dextrina com água purificada, na qual foi adicionado 3 g de aspartame para dissolver agitando bem para dar a suspensão. Adicionou-se 785 g de três Extratos bem preparados à suspensão e agitou-se passo a passo. A densidade da pasta resultante foi ajustada para 1,12 ~ 1,23 (42 ~ 50°C) e a pasta foi filtrada em linha com peneira de malha 60 ~ 100. 330 g de resto da dextrina foram colocados no granulador. Uma série de parâmetros foi ajustada, por exemplo, frequência do ventilador, temperatura de entrada de ar, frequência de alimentação de liquido e pressão de pulverização, para fazer materiais em estado bem fluidizado no leito fluidizado. Os materiais foram granulados por pulverização a uma temperatura de 30 ~ 60°C e secos. A temperatura foi ainda aumentada para 70 ~ 90°C para secar completamente.

Os efeitos benéficos das referidas composições farmacêuticas no tratamento da dor de cabeça foram demonstrados seguindo 2 pesquisas farmacodinâmicas.

Pesquisa Farmacodinâmlca 1. Efeito de melhoria da composição farmacêutica (YXQN) na enxaqueca induzida por nitroglicerina em ratos 1. Materiais 1.1 Animais: ratos SD, machos, pesando 180-200g foram fornecidos por Beijing Weitonglihua Animal Experimental Technology Co., Ltd. Os animais foram criados em gaiolas separadas sob luz natural com excelente ventilação e livre acesso a água e comida. A dieta animal foi alimentada com grânulos comprados da Jinan Dakang Feed Inc. (Certificado N°: 364). Ambiente de alimentação para animais de teste foi de acordo com o regulamento de animais de teste Tianjin. 1.2 Fármaco: o fármaco testado foi preparado pelo modo do Exemplo 1 (YXQN-1) e o fármaco de comparação pelo modo da patente chinesa ZL200510073290.3 (YXQN-2). Ambos foram fornecidos por Tasly Pharmaceutical Co., Ltd. 0 comprimido de Qiyeanshen (N° de aprovação: Z45022054), como medicamento de controlo positivo, foi produzido por Guangxi Beihai Pharmaceutical Co., Ltd (LOT: 20130123). Dosagem diária: 20mg por dia. 1.3 Reagente: Kit de ensaio NOS, kit de ensaio de proteína azul brilhante de Coomassie e kit de ensaio de NO foram adquiridos da Nanjing Jiancheng Science & Technology Co., Ltd (LOT: 20120726) , kit Rat 5-HT foi comprado da Shanghai Jianglai Bio-tech Co., Ltd (LOTE: 12-05), o kit ELISA foi adquirido à Shanghai Meilian Bio-tech Co., Ltd e o kit DA ELISA de rato foi comprado de Xangai Kaibo Bio-tech Co., Ltd. Solução salina normal e 10% de hidrato de cloral. 1.4 Aparelho: Espectrofotómetro ultravioleta Shimadzu UV2100, emulsificador de dispersão de alto cisalhamento FLUKO F6/10, centrífuga refrigerada de alta velocidade Hettich ROTANTA 460R, balança eletrónica e detetor de fluxo sanguíneo Doppler ultrassónico. 2. Método 2.1 Agrupamento e administração

Os animais foram divididos aleatoriamente em 9 grupos de acordo com o peso corporal, 10 ratos em cada grupo: o grupo modelo; grupo controlo positivo; grupo de controlo em branco; grupos de dosagem alta, média e baixa de YXQN-1 (1,562 g, 0,781 g e 0,391 extrato/kg, respetivamente); grupos de dosagem alta, média e baixa de YXQN-2 (1,562 g, 0,781 g e 0,391 extrato/kg, respetivamente). Preventivamente, os grupos de controlo YXQN-1, YXQN-2 e positivo foram administrados por 10 dias consecutivos. Medicamento positivo foi administrado na dose de 20mg por dia. 0 volume igual de solução salina normal foi administrado intragastricamente para modelar o grupo de controlo e o grupo de controlo em branco. 2.2 Estabelecimento do modelo de observação do comportamento

Com exceção do grupo de controlo em branco, os ratos restantes receberam injeção subcutânea de nitroglicerina (10ml/kg). Modelos experimentais de ratos com enxaqueca foram duplicados. Depois de administrados intragastricamente, aqueles ratos, tendo duas orelhas avermelhadas e maior frequência de cabeça raspando com patas dianteiras, foram tomados como modelo de sucesso. (1) Orelha avermelhada: observar o tempo em que a orelha avermelhada apareceu e desapareceu após a modelagem; (2) coçar a cabeça: para observar a frequência da raspagem da cabeça a cada 30 minutos após a modelagem, o tempo a arranhando cabeça apareceu com cabeça arranhando consecutiva por 5 vezes ou mais como o símbolo e o tempo coçando a cabeça desapareceu com a cabeça raspando de menos de 5 vezes durante um intervalo, depressão e fadiga como o símbolo. 2.3 Determinação do biomarcador

Todos os modelos animais foram feitos e administrados à luz do método acima mencionado. O sangue e o cérebro foram recolhidos 4 horas após a modelagem para preparar homogeneizados de sangue e cérebro, e congelados reservados para uso posterior. O método de colorimetria química foi realizado de acordo com o rótulo do kit para testar o conteúdo de NO e a atividade de NOS no soro; bem como o conteúdo de 5-HT, 5-HIAA, NA DA no cérebro. 2.4 Gestão Estatística

Todos os dados foram analisados com o software SPSS 20.0, os resultados foram expressos como x, os testes ± s e t foram utilizados entre os grupos. 3. Resultados 3.1 orelhas avermelhadas

Nenhuma orelha avermelhada foi observada no grupo de controlo em branco. Orelhas avermelhadas apareceram em YXQN-1, YXQN-2 e no grupo modelo 3 min após a modelagem. Comparado com o grupo modelo, não houve diferença significativa no tempo em que as orelhas avermelhadas apareceram. Após o tratamento, em comparação com o grupo modelo, o tempo em que as orelhas avermelhadas desapareceram nos grupos de dosagem média e baixa de YXQN-1 teve significância estatística (P <0,05, P <0,01), mas não houve diferença significativa nos grupos YXQN-2. Comparado com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de dosagem alta e média de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P <0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 3.

Tabela 3 efeito de YXQN-1 e YXQN-2 no tempo em as orelhas avermelhadas apareceram e desaparecerem em ratos (min, x± s)

3.2 Frequência de coçar a cabeça

No grupo de controlo em branco, a cabeça coçada ocasionalmente aparecia uma ou duas vezes durante um período de tempo. Por volta do 3o minuto após a modelagem, a cabeça coçada apareceu nos grupos YXQN-1, YXQN-2 e modelo, não tendo significância estatística, em comparação com o grupo modelo. Após o tratamento, havia mais vezes de cabeça coçada durante o período de 0°-30° min e 30°-60° min. Em comparação com o grupo modelo, os grupos de dosagem alta, média e baixa de YXQN-1 tiveram significância estatística (P <0,05, P <0,01) na frequência da cabeça coçada. A diferença significativa ainda não havia sido encontrada em cada grupo de dosagem do YXQN-2. Em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de dosagem média e baixa de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P <0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 4.

Tabela 4 efeito de YXQN-1 e YXQN-2 na frequência de cabeça coçada em ratos (x± s) durante cada período de tempo

3.3 Nivel de NO e NOS no soro

Comparado com o grupo modelo, o nível sérico de NO e NOS em ratos nos grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 teve significância estatística (P <0,05, P <0,01). A diferença significativa ainda não havia sido encontrada em cada grupo de dosagem do YXQN-2. Em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de dosagem média e baixa de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P <0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 5.

Tabela 5 efeito de YXQN-1 e YXQN-2 no nível sérico de NO e NOS em ratos (x± s)

3.4 Conteúdo de 5-HT, 5-HIAA e DA

Comparado com o grupo modelo, o conteúdo de 5-HT, 5-HIAA e DA em ratos nos grupos de alta, média e baixa dosagem de YXQN-1 teve significância estatística (P <0,05, P <0,01). A diferença significativa ainda não havia sido encontrada em cada grupo de dosagem do YXQN-2. Em termos de 5-HT e 5-HIAA, em comparação com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de dosagem média e baixa de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P <0,05). Em termos de DA, comparado com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, os grupos de dosagem média e alta de YXQN-1 tiveram diferença significativa (P <0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 6.

Tabela 6 efeito de YXQN-1 e YXQN-2 nos teores de 5-HT, 5- HIAA e DA em ratos (x± s)

4. Conclusão A referida composição farmacêutica da presente invenção pode melhorar os indices comportamentais e os índices bioquicos induzidos por nitroglicerina em modelos de ratos com enxaqueca. Como mostrado na pesquisa, a referida composição farmacêutica da presente invenção provada ter um efeito na melhoria dos índices comportamentais induzidos por nitroglicerina em modelos de ratos com enxaqueca, o que é melhor do que o fármaco de comparação.

Investigação Farmacodinâmica 2. Efeito da composição farmacêutica (YXQN) na alteração do fluxo sanguíneo cerebral no modelo de coelhos com enxaqueca 1. Materiais 1.1 Os 36 coelhos comercialmente disponíveis, pesando 2,2 ± 0,5 kg, foram divididos aleatoriamente em 6 grupos, 6 coelhos em cada grupo. Os animais foram criados em laboratório da faculdade de medicina básica da Universidade Médica de Tianjin, sob luz natural, com excelente ventilação e livre acesso a água e alimentos. 1.2 Fármacos: o fármaco testado foi preparado pelo método do

Exemplo 1 (YXQN-1) e o fármaco de comparação foi preparado pelo método da patente chinesa ZL200510073290.3 (YXQN- 2). Ambos foram fornecidos pela Tasly Pharmaceutical Co., Ltd. 1.3 Aparelho: detetor de corrente sanguínea Doppler por ultrassons 2. Método 2.1 Agrupamento e administração

Os animais foram divididos aleatoriamente em 6 grupos de acordo com o peso corporal, 6 coelhos em cada grupo: o grupo modelo; grupo de controlo em branco; grupos de alta e baixa dosagem de YXQN-1 (0,782g e 0,391g extrato/kg, respetivamente); grupos de alta e baixa dosagem de YXQN-2 (0,782g e 0,391g extrato/kg, respetivamente). Os grupos controle modelo e branco foram administrados por perfusão gástrica com volume igual de solução salina normal. Método de modelagem animal foi o mesmo como referido anteriormente Farmacodinâmica Research 1. Salvo tratamento por drogas, o grupo modelo foi administrado por injeção na veia da orelha de 5-HT (2 mg/kg) durante 3 dias consecutivos, e no 3o dia

Diabona (7,5 mg/coelho) foi adicionada. 0 fluxo sanguíneo cerebral foi analisado 30min após a última administração. Os coelhos foram fixados em coelheira. Detetor de 2MHz foi usado no temporal para detetar, com um volume de amostragem de 7mm e uma profundidade de 26 ± 2mm. 2. Gestão Estatística

Todos os resultados foram expressos como os testes x ± s e t foram utilizados entre os grupos. PI=2*Vs-Vd/Vs+Vd PI: índice de impulso

Vs: velocidade do fluxo sanguíneo do pico de contração Vd: velocidade do fluxo sanguíneo do final da diástole VM: média da velocidade do fluxo sanguíneo 3. Resultados

3,1 Vs, Vd, Une PI A velocidade do fluxo sanguíneo no grupo de controlo em branco permaneceu inalterada. Após a modelagem, as velocidades do fluxo sanguíneo nos grupos YXQN-1, YXQN-2 e modelo diminuíram, não tendo significância estatística, quando comparadas ao grupo modelo. Após o tratamento, em comparação com o grupo modelo, os grupos de dosagem alta e baixa de YXQN-1 tiveram significância estatística (P <0,05, P <0,01). A diferença significativa ainda não havia sido encontrada em cada grupo de dosagem do YXQN-2. Comparado com o grupo de dosagem igual de YXQN-2, o grupo de alta dosagem de YXQN-1 teve diferença significativa (P <0,05). Os resultados foram mostrados na Tabela 7.

Tabela 7: Efeito de YXQN-1 e YXQN-2 na alteração do fluxo sanguíneo cerebral em coelhos (xt s)

4. Conclusão A referida composição farmacêutica da presente invenção pode melhorar a alteração do fluxo sanguíneo cerebral no modelo de coelhos com enxaqueca. Como mostrado nesta pesquisa, a referida composição farmacêutica poderia melhorar a alteração induzida pela nitroglicerina do fluxo sanguíneo cerebral em coelhos com enxaqueca, que era melhor do que o do fármaco de comparação.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição farmacêutica para utilização no tratamento de dor de cabeça compreendendo 4-9 partes em peso de Radix Angelicae Sinensis, 4-9 partes em peso de Rhizoma Chuanxiong, 2-8 partes em peso de Radix Paeoniae alba, 2-8 partes em peso de Radix Rehmanniae Preparata,10-15 partes em peso de Ramulus Uncariae cum Uncis, 10-15 partes em peso de Caulis Spatholobi, 10-15 partes em peso de Spica Prunellae,10-15 partes em peso de Semen Cassiae, 10-15 partes em peso de Concha Margaritifera Usta, 4-9 partes em peso de Rhizoma Corydalis e 0,5-2 partes em peso de Herba Asari, caracterizado por a referida composição ser preparada por um método como se segue: a) . Preparação do extrato # 1: Mistura de Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae, extraída usando aquecimento a refluxo com etanol e filtrada para remover impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 1 para uso posterior; b) . preparação do extrato # 2: Extrato de Radix Paeoniae alba é extraído usando aquecimento em refluxo com etanol e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 2 para uso posterior; c) . Preparação do extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta eHerba Asari são misturados, decocados com água, filtrados, concentrados, nos quais o etanol é adicionado para que ele fique parado e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para dar # 3 Extrato para uso posterior; d) , preparação de formulações: os três extratos supramencionados são adicionados com uma quantidade apropriada de excipientes, secos e granulados para obter o produto final.
2. Composição para utilização de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a referida composição ser preparada por um método como se segue: a) . Preparação do Extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiaesão misturados, extraídos utilizando aquecimento a refluxo com 3~6 vezes de 50~80% de etanol durante 2~3 vezes, a primeira vez durante 0,5-2,5 horas, a segunda e/ou a terceira vez durante 0,5-2 horas, e filtrados para remova as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1.250 ~ 1.350 a 70~80°C para dar o Extrato # 1 para uso posterior; b) . Preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 3~6 vezes de 50~80% etanol, embebido, extraído usando aquecimento a refluxo por 2~3 vezes, a primeira vez por 0.5-2.5 horas, o segundo e/ou terceira vez por 0,5-2 horas e filtrada; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,10 ~ 1,35 a 55 - 65°C para dar o Extrato # 2 para utilização posterior; c) . preparação do extrato # 3 -.Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são combinados, decocados com 4~10 vezes de água durante 2~3 vezes, a primeira vez durante 0,5-3 horas, a segunda e/ ou a terceira vez, durante 1 a 3 horas, filtrada, concentrada até a densidade relativa ser de 1,06 ± 1, 10 a 75-85°C, na qual é adicionado etanol para obter um teor final de etanol de 60-85%, deixado repousar durante 12 a 24 horas e filtrada; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,270 + 1,350 a 75-85°C para dar o Extrato # 3 para utilização posterior; d) , preparação de formulações: os três extratos supramencionados são adicionados com uma quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para obter o produto final.
3. Composição para utilização de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por a referida composição ser preparada por um método como se segue: a) , preparação do extrato # 1: Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae são misturados, extraídos usando aquecimento a refluxo por 2 vezes com 4 vezes de etanol 70%, a primeira vez por 2 horas e a segunda vez por 1 hora e filtrada para remover as impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser 1,300-1,110 a 74-76°C para dar 0 Extrato # 1 para uso posterior; b) . preparação do Extrato # 2: Radix Paeoniae alba é adicionado com 4 vezes etanol a 60%, embebido, extraído utilizando aquecimento por refluxo durante 2 vezes, pela primeira vez durante 2 horas e pela segunda vez durante 1 hora e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até que a densidade relativa seja de 1,23 a 1,33 a 65°C para dar o extrato # 2 para uso posterior; c) . preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asarisão misturados, decocados por 2 vezes com 5 vezes de água, a primeira vez durante 2 horas e a segunda vez durante 1 hora, filtrados, concentrados até a densidade relativa ser de 1,06 ± 110 a 80°C, na qual é adicionado etanol para fazer um teor final de etanol de 65 ~ 70%, deixado em repouso por 12 ~ 24 horas e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado até a densidade relativa ser de 1,320 ~ 1,325 a 79-81°C para dar o Extrato # 3 para utilização posterior; d), preparação de formulações: os três extratos supramencionados são adicionados com uma quantidade apropriada de excipientes, secos, granulados para obter o produto final.
4. Composição para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada por os referidos excipientes no passo d) incluem um ou mais tipos de agente de enchimento e agente aromatizante; preferencialmente, o dito agente de enchimento é selecionado de dextrina, amido, amido solúvel, sacarose, lactose e celulose microcristalina; o referido agente aromatizante é selecionado de esteviosina, aspartame; mais preferencialmente, o referido agente de enchimento é dextrina e o referido agente aromatizante é esteviosina.
5. Composição para utilização de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a relação em peso dos supracitados três extratos preparados por Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxíong, Radix Paeoniae alba, Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Semen. Cassiae, Concha Margaritifera Usta, Rhizoma Corydalis e Herba Asari para os excipientes é 40:60 a 65:35, de preferência 55:45 a 65:35.
6. Composição de acordo com a reivindicação 5, caracterizada por a referida razão dos supracitados Extratos para os excipientes ser uma razão do extrato seco convertido dos três Extratos acima mencionados para os excipientes.
7. Composição para uso de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por no passo d), a formulação preparada por modo de granulação por pulverização em leito fluidizado, compreendendo os seguintes passos: tomar uma parte do agente de enchimento, dissolvendo-o com água purificada, adicionando agente aromatizante para dissolver agitando bem para dar pasta; adicionando três extratos bem preparados à suspensão acima mencionada, agitando, ajustando a densidade da pasta, filtração online; colocando o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secagem; granulação com uma peneira; mistura totalmente e embalagem para obter o produto final.
8. Composição para uso de acordo com a reivindicação 7, caracterizada por a quantidade de adição do referido agente aromatizante representar 0-1% em peso do agente de enchimento total, e a razão em peso entre a parte do agente de enchimento primeiramente adicionada e o resto do agente de enchimento adicionado mais tarde é de 1:4 a 1,5:1.
9. Método para preparar a composição farmacêutica para utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por o método compreender os seguintes passos: a) . Preparação do extrato # 1: Mistura de Radix Angelicae Sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Corydalis e Semen Cassiae, extraída usando aquecimento a refluxo com etanol e filtrada para remover impurezas; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 1 para uso posterior; b) . preparação do extrato # 2: Radix Paeoniae alba é extraída utilizando aquecimento a refluxo com etanol e filtrada; e o etanol é recuperado e concentrado para dar o extrato # 2 para uso posterior; c) . preparação do Extrato # 3: Radix Rehmanniae Preparata, Ramulus Uncariae com Uncis, Caulis Spatholobi, Spica Prunellae, Concha Margaritifera Usta e Herba Asari são misturados, decocados com água, filtrados, concentrados, nos quais é adicionado etanol para que ele fique parado e filtrado; e o etanol é recuperado e concentrado para dar Extrato # 3 para uso posterior; d). preparação de formulações: tomar uma parte do agente de enchimento, dissolvendo-o com água purificada, adicionando um agente aromatizante para dissolver agitando bem para dar uma pasta; adicionando três extractos bem preparados à suspensão acima mencionada, agitando, ajustando a densidade da pasta, filtração online; colocando o resto do agente de enchimento em um granulador; realizar granulação por pulverização ajustando os parâmetros de granulação; secagem; granulação com uma peneira; mistura totalmente e embalagem para obter o produto final.
10. Utilização da composição farmacêutica de qualquer uma das reivindicações 1-8 na preparação de medicamentos para o tratamento da dor de cabeça, síndroma do nervo craniano traumático, tonturas e vertigens, irritação e irritabilidade, insónia e devaneio.