PT2727918T

PT2727918T - Compostos e composições como inibidores de proteína quinase

Info

Publication number: PT2727918T
Application number: PT141529453T
Authority: PT
Inventors: Huang Shenlin; Jin Xianming; Liu Zuosheng; Poon Daniel; Tellew John; Wan Yongqin; Wang Xing; Xie Yongping
Original assignee: Array Biopharma Inc
Priority date: 2009-08-28
Filing date: 2010-08-27
Publication date: 2017-01-20
Also published as: ECSP23004573A; LUC00101I2; JO3002B1; IN2012DN02469A; PL2727918T3; US9593099B2; WO2011025927A1; AU2010286569C1; DOP2012000051A; US20160120866A1; US9850229B2; CN102725283A; JP5475888B2; CR20120102A; EP2470526A1; US9593100B2; SG178351A1; DK2470526T3; MY156259A; SMT201700036B

Description

DESCRIÇÃO

COMPOSTOS E COMPOSIÇÕES COMO INIBIDORES DE PROTEÍNA QUINASE REFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS ANTECEDENTES DA INVENÇÃO Campo da Invenção A invenção proporciona uma nova classe de composLos, composições farmacêuticas que compreendem tais compostos e tais compostos para utilização no tratamento ou prevenção de doenças ou distúrbios associados com atividade de quinase anormal ou desregulada, particularmente doenças ou distúrbios que envolvem ativação anormal de B-Raf. Antecedentes

As proteínas quinases representam uma grande família de proteínas, que desempenham um papel central na regulação de uma ampla variedade de processos celulares e controlo de manutenção sobre a função celular. Uma lista parcial, não limitativa, destas quinases incluem: tirosinas quinases recetoras tais como quinase recetora de fator de crescimento derivado plaquetas (PDGF-R), o recetor de fator de crescimento dos nervos, trkB, Met, e o recetor de fator de crescimento dos fibroblastos, FGFR3; tirosinas quinases não recetoras tais como Abl e a quinase de fusão BCR-Abl, Lck, Csk. Fes, Bmx e c-src; e serina/treonina quinases tais como B-Raf, sgk, MAP quinases (por exemplo, MKK4, MKK6, etc.) e SAPK2oí, SAPK2β e SAPK3. Atividade de quinase aberrante foi observada em muitos estados de doença que incluem distúrbios proliferativos benignos e malignos bem como doenças que resultam da ativação inapropriada dos sistemas imunes e nervosos. 0 documento WQ 2010/010154 descreve derivados de 3,4-diarilpirazol como inibidores de quinase. O documento WO 2008/045627 descreve inibidores de proteína quinase representados pela Fórmula I.

Os novos compostos desta invenção inibem a atividade de B-Raf ou formas mutantes do mesmo (por exemplo, V60QE) e espera-se, portanto, que sejam úteis no tratamento de doenças associadas a B-Raf.

SUMARIO DA INVENÇÃO

Num aspeto, a presente invenção proporciona compostos de Fórmula I:

em que: Y é selecionado a partir de N e CRS;

Ri ê -CH2CHMeNH (CO) OMe ; R2, R3, Rs e R5 são independentemente selecionados a partir de hidrogénio, halo, ciano, Cmâlquilo, halo-substituído-C:Í..4alquilo, C;..4alcoxi e halo-substituí do-Ci_ 4alcoxi; com a condição de que quando R5 é fluoro, R3 e R6 não são ambos hidrogénio; R4 é selecionado a partir de -R9 e -NR10Ru; em que R9 é selecionado a partir de C16alquilo, C3-8cicloalquilo, C3. sheterocicloalquilo, arilo e heteroarilo; em que o dito alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo ou heteroarilo de R9 é opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais independentemente selecionados a partir de halo, ciano, Ci-4alquilo, halo-substituído-Ci..4alquilo, Ci4alcoxi e halo-substituído-Cx^alcoxi; e Ri0 e Rn são independentemente selecionados a partir de hidrogénio e Rs; R? é selecionado a partir de Ci_4alquilo, C3.5cicloalquilo e C3_5heterocicloalquilo; em que o dito alquilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo de R7 é opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais independentemente selecionados a partir de balo, ciano, hid.ro.xilo, Cf. 4alquilo, halo-substituído C i.. 4 a 1 qui 1 o, C^alcoxi e halo-substítuído-Ci_4alcoxi; ou R7 é hidrogénio; e os derivados de N-óxido, os tautómeros, e os sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos (por exemplo, hidratos) de tais compostos.

Num segundo aspeto, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que contém um composto de Fórmula I ou um derivado de N-õxido, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um ou mais excipientes adequados.

Num terceiro aspeto, a presente invenção proporciona um composto de Fórmula I ou uma composição farmacêutica conforme descrito acima para utilização num método de tratamento de cancro.

Num quarto aspeto, a presente invenção proporciona a utilização de um composto de Fórmula I no fabrico de um medicamento para tratar o cancro.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Figura 1: Figura 1 ilustra que a adição de um inibidor de molécula, pequena MEK pode reverter a sinalização de ERK induzida, crescimento celular e transformação causada por um inibidor de molécula pequena Raf. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Definições "Alquilo" como um grupo e como um elemento estrutural de outrGS grupos, por exemplo, halo-substituído-alquilo e alcoxi, pode ser de cadeia linear ou ramificado. Ci-4-alcoxi inclui, metoxi, etoxi, e similares. Halo-substituído-Ci. 4alquilo significa um grupo alquilo (ramificado ou não ramificado) em que qualquer um dos hidrogénios pode ser substituído com um halogénio. Por exemplo, halo-substi tuído-Ci_4alquilo pode ser trif luorometilo, difluoroetilo, pentafluoroetilo, e similares. De maneira similar, hidroxi- substituído-Ci_6alquilo significa um grupo alquilo (ramificado ou não ramificado) em que qualquer urn dos hidrogénios pode ser substituído com um hidroxilo. Por exemplo, hidroxi-substituído-Ci-6alquilo inclui 2-hidroxietilo, e similares. De maneira similar, ciano-substit.uído-C]._6alquilo significa um grupo alquilo (ramificado ou não ramificado) em que qualquer um dos hidrogénios pode ser substituído com ciano. "Arilo" significa um montagem de anel aromático bicíclico fusionado ou monocíclico contendo seis a dez átomos de carbono do anel. Por exemplo, arilo pode ser fenilo ou naftilo, preferentemente fenilo. "Arileno" significa um radical divalente derivado de um grupo arilo. "Cicloalquilo" significa uma montagem de anel monocíclico saturado contendo o número de átomos do anel indicado. Por exemplo, C3-i0cicloalquilo inclui ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc. "Heteroarilo" é como definido para arilo acima onde um ou mais dos membros do anel é um heteroátomo. Por exemplo, heteroarilo inclui piridilo, indolilo, indazolilo, quinoxalinilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzo[1,3]dioxol, imidazolilo, benzoimidazolilo, pirimidinilo, furanilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, tienilo, etc. "Heterocicloalquilo" significa cicloalquilo, como definido neste pedido, com a condição de que um ou mais dos carbonos do anel indicadG, sâo substituídos por uma fração selecionada a partir de -0-, -N=, -NR-, -C(0)-, -S-, -S(0) - ou -S(0)2-, em que R é hidrogénio, C1-.4alqu.ilo ou um grupo protetor de azoto. Por exemplo, C3-8heterocicloalquilo como usadG neste pedido para descrever compostos da invenção inclui 2H-piran, 4H-piran, piperidina, 1,4-dioxano, mo r f o1i na, 1,4 -di ti ano, t i ornor fo1i no, imi da z o1i din- 2 -ona, tetrahidrofurano, piperazine, 1,3,5-tritiano, pirrolidina, pirrolidinil-2-ona, piperidine, piperidinona, 1,4-dioxa-8-aza-spiro[4,5]dec-8-ilo, etc, "Halogénio" (ou halo) representa cloro, fluoro, bromo ou iodG. "pMEK" significa Mek fosforilado. "pERK" significa. ERK fosforilado. "Tratar", "tratando" e "tratamento" referem-se a um método de alívio ou abatimento de uma doença e/ou seus sintomas relacionados.

Os compostos da invenção são nomeados usando Chemdraw Ultra (Versão 10.0) e/ou ChemAxon Name Generator (JChem Versão 5.3.1.0).

Descrição das Formas de Realização Preferidas A presente memória descritiva proporciona compostos, composições e utilizações médicas para o tratamento de doença relacionada com quinase, particularmente doenças relacionadas com B-Raf quinase; por exemplo, melanomas metastáticos, tumores sólidos, tumores cerebrais tais como Glioblastoma multiforme (GBM), leucemia mielogénica aguda (AML), cancro de próstata, cancro gástrico, carcinoma papilar da tiroide, carcinoma de grau baixo do ovário, e cancro colorretal.

Numa forma de realização adicional estão compostos selecionados a partir de: N-[(2S)-l-({4-[3-(3- etanossulfonamido-2,4-difluorofenil)-1-(propan-2-il)-1H-pirazol-4-il] pirirnidin-2-.il}amino) propan-2-il] carbamato de me t i lo; N- [ (2 S) -2 - ({4 - [ 3 (5 - cloro - 2 - f luoro - 3 metanossulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-lH-pirazol-4-il]pirimidin-2-il}amino)propil]carbamato de metilo; N-[(2S)-1-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanossulfonamidofenil) -1- (oxan-2-il) · lH-pirazol-4 il]pirimidin-2-il} amino)propan-2-íljcarbamato de metilo;

Noutra forma de realização estão compostos de Fórmula

Ib:

lb em que: R3 é selecionado a partir de cloro, fluorG e metilo; Rs é selecionado a partir de fluoro e cloro; e R7 é selecionado a partir de etilo e xsopropilo.

Numa forma de realização adicional estão compostos selecionados a partir de: N-[ (2S)-1-({4-[3-(S-cloro-2-fluoro-3-metanossulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-1H-pirazol-4 - i 1 ] pirirnidin-2 - i 1}amino) propan-2 -i 1 ] carbamato de metilo; e N- [ (2S) --1- ({4 - [3-- {5--cloro--2--f luoro-3- metanossulfonamidofenil)-lH-pirazol-4-il]pirirnidin-2-il}amino)propan-2-il]carbamato de metilo.

Compostos intermediários descritos no presente documento incluem: 3 -Bromo- 5 -cloro- 2 -fluoroani1ine; éster terc-butílico do ácido ciano-(2- metiltio-pirimidin-4-il)-acético; l-Isopropil-4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-1H- pi razol - 3 - amina; 2- ( (2-Benzi.Iideno-l- etilhidrazinil)metileno)-malononitrilo; 1-(3-Amino-1- isopropil-lH-pirazol-4-il)etanona; 1- (3- Iodo-1-isopropil-lH-pirazol-4-il)etanona; 1-(3-Iodo-l-etil-lH-pirazol-4- i1)etanona; 1-{3 -Iodo-1-meti1-IH-pirazol-4 -i1)etanona; 3 -(Dimetilamino)-1-(3-iodo-1-isopropil-lH-pirazol-4-il)prop-2-en-l-ona; 3-(Dimetilamino)-1-(3- iodo-l-etil-lH-pirazol-4-il)prop-2-en-l-ona,* 3- (Dimetilamino) -1- (3-iodo-l-metil-1H-pi razol-4 -i1) prop-2-en-l-ona; 4 -(3 -Iodo-1-isopropiI- 1H - pi razol -4 -- il) pir irnidin-2 -- amina; 4 - (3 - Iodo -1 -etil - 1H-- pirazol-4-il)pirimidin-2-amina; 4-(3-Iodo-l-metil-lH- pirazol-4-il)pirimidin-2-amina; 4-(3-Iodo-l-isopropil-lH-

dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina; 3-cIoro-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina; e 3-metoxi-2-metil-5- (4,4,5,5-tetramet.il-l, 3,2-dioxa.borolan-2-il)anilina. A presente invenção também inclui todas as variações isotópicas adequadas dos compostos da invenção, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Uma variação isotõpica de um composto da invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é definida como uma em que pelo menos um átomo é substituído por um átomo que tem o mesmo número atómico, mas uma massa atómica diferente da massa atómica usualmente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que pGdem ser incorporados nos compostos da invenção e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos incluem, mas não são limitados a isótopos de hidrogénio, carbono, azoto e oxigénio tais como Í4, 3H, 1XC, 13C, i4C, 1SN, i70; 1SG, 35S, 18F, 36C1 e iz3I. Certas variações isotópicas dos compostos da invenção e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, por exemplo, aquelas em que um isótopo radioativo tal como 3H ou 14C é incorporado, são úteis em estudos de distribuição de fármaco e/ou tecido substrato. Em exemplos particulares, os isótopos 3H e 14C podem ser usados para a sua facilidade de preparação e detetabilidade. Em outros exemplos, si substituição com isótopos tais como 2H pode propiciar certas vantagens terapêuticas que resultam da maior estabilidade metabólica, tal como aumentado semivida in vivo ou requisitos de dosagem reduzidos. As variações isGtópicas dos compostos da invenção ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem geralmente ser preparados por procedimentos convencionais usando variações isotópicas apropriadas de reagente adequado.

Alguns inibidores de Raf, além de aumentar a sinalização de MEK e ERK em células B-Raf do tipo selvagem, também induzem o crescimento celular em linhas de células de cancro e causara a transformação e crescimento em fibroblastos. A indução da sinalização a jusante tem anteriormente sido atribuída a ciclos de retroalimentação da via de Raf publicada. No entanto, a indução de pMEK e pERK pode ocorrer dentro de minutos de tratamento com inibidor de Raf, mesmo antes de eventos de fosforilação de retroalimentação relatados são vistos em B- Raf e C-Raf. A indução de sinalização e crescimento celular ambos ocorrem num padrão bifãsico, com concentrações baixas de composto (0,01-0,1 mM) causando a indução máxima, e concentrações mais altas de composto (1-10 mM) causando indução menos profundei. Tal psidrão bifãsico é também observado em ensaios bioquímicos com B-Raf ou C-Raf purificadG do tipo selvagem e é sugestivo de um mecanismo que envolve a interação de duas subunidades de sinalização. Além disso, dirnerização de Raf pode regular positivamente pMEK, não através de transfosforilaçâo de moléculas de Raf, mas presumivelmente por uma ativação conformacional da quinase. Consistente com esse modelo, tratamento com inibidor de Raf induz a formação de dímero B-Raf/C-Raf em células. Além disso, knockdovm de A- ou B-Raf com ARNip não ab-roga a induçãG de inibidor de Raf de pMEK e pERK, e knockdown de C-Raf somente ligeiramente diminui a indução. Notavelmente, knockdown de K-Ras em células mutantes de K-Ras também somente ligeiramente diminui a indução, implicando que este efeito não é primariamente mediado por Ras. Tomados juntos, os dados sugerem um modelo em que o inibidor que se liga a uma molécula de Raf induz a dirnerização e a ativação conformacional de uma molécula parceira de Raf no dímero. Isto pode explicar porque os tumores de Raf do tipo selvagem e Ras mutante são insensíveis aos inibidores seletivos de Raf quinase e poderiam também ter implicações importantes para toxicidade, uma vez que a indução de forte sinalização mitogénica poderia levara a hiperproliferação de tecidos normais. Entendimento o mecanismo de indução de inibidor de Raf pode levara ao design de inibidores melhorados, A adição de um inibidor de ΜΞΚ em combinação com um inibidor de Raf leva a uma inibição significativa de sinalização de ERK e consequentemente uma diminuição em transformação e proliferação celular. Uma vez que os tratamentos com inibidor de MEK em separado têm levado a dose que limita toxicidades na clínica, uma combinação de inibidor de ΜΞΚ mais Raf podem representar uma estratégia de tratamento superior. A presente invenção também inclui combinações dos inibidores de BRaf revelados nesta invenção com outros agentes. Em particular, a presente invenção trata de combinações com inibidores de MEK1./2. A Figura 1 ilustra que a adição de um inibidor de molécula pequena MEK pode reverter a sinalização de ERK induzida, crescimento celular e transformação causada por um inibidor de molécula pequena Raf. Por exemplo, um composto de Fórmula I {composto 9 da invenção, denominado: (1-(4-(3-(5-cloro-2-fluoro-3- (metilsulfonamido)fenil)-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimídin-2-ilamino)propan-2-íl- carbamato de (S) -metilo) pode levar a uma indução em proliferação celular, visto como uma inibição negativa na Figura 1 de um ensaio de Cell Titer Glo usando células SW620. 0 eixo Y mostra inibição negativa e positive. Cada experiência é mostrada como uma série de 9 diluições seriadas entre 10 e 0,002 (iM. 0 composto AI (N- (4-met.il-.3-(1-(6-(4-metilp.iperazin.~l-ilamino)pirimidin- 4- il)-lH-imidazol-2-ilamino)fenil)--3--(trifluorometil)benzamida) ê um controlo, A3 é um inibidor de MEK (PDQ325901) . 0 composto 9 é testado na ausência e presença de 1 mM, 0,1 mM e 0,01 mM de inibidor de MEK. A3. Farmacologia e Utilidade

Os compostos da invenção modulam a atividade de quinases e, como tal, são úteis para tratar doenças ou distúrbios em que as quinases contribuem à patologia e/ou sintomatologia da doença. Exemplos de quinases que são inibidas pelos compostos e composições descritos no presente documento e contra as quais os métodos descritos no presente documento são úteis incluem, mas não são limitados a, B-Raf, incluindo formas mutantes de B-Raf. A via proteína quinase ativada por mitogénico (MAPK) medeia a atividade de um numero de moléculas efetoras que se coordenam para controlar a proliferação celular, sobrevivência, diferenciação e migração. A estimulação de células por meio de, por exemplo, fatores de crescimento, citocinas ou hormonas resulta no Ras associado a membrana plasmática a tornar-se ligado a GTP e deste modo ativado para recrutar Raf. Esta interaçâG induz a atividade de quinase de Raf que leva a fosforilação direta de MAPK/ERK (MEK), que por sua vez fosforila a quinase relacionada com sinal extracelular (ERK). A ERK ativada então fosforila um amplo arranjo de moléculas efetoras, por exemplo, quinases, fosfatases, fatores de transcrição e proteínas do citoesqueleto. Portanto, a via de sinalização de Ras-Raf-MEK-ERK transmite sinais dos recetores de superfície celular ao núcleo e é essencial, por exemplo, em sobrevivência e proliferação celular. A regulação desta cascata de sinalização é enriquecida ainda pelas isoformas múltiplas de Ras (incluindo K-Ras, N-Ras e H-Ras), Raf (A™ Raf, B-Raf, C-Raf/Raf-1) , MEK (MEK-1 e MEK-2) e ERK (ERK-1 e ERK-2}. Uma vez que 10-20 % de cancros humanos albergam mutações oncogénicas de Ras e muitos cancros humanos têm recetor ativado de fatores de crescimento, esta via é um alvo ideal para a intervenção. 0 papel essencial e a posição de Raf em muitas vias de sinalização foram demonstrados a partir de estudos usando mutantes de Raf inibidores dominantes e desregulados em células de mamíferos bem como a partir de estudos que utilizam as técnicas bioquímicas e genéticas para os organismos modelo. No passado, o foco sobre o Raf sendo um fãrmaco antitumoral alvo centrou-se na sua função como um efetor a jusante de Ras. No entanto, achados recentes sugerem que Raf pode ter um papel prominente na formação de certos tumores sem nenhum requisito de um alelo de Ras oncogénico. Em particular, alelos de ativação de B-Raf e N-Ras foram identificados em -70 % de melanomas, 40 % de carcinoma papilar da tiroide, 30 % de carcinoma de grau baixo do ovário, e 10 % de cancros colorretais. Mutações em K-Ras ocorrem em aproximadamente 90 % de cancros pancreáticos. A maioria das mutações de B-Raf é encontrada dentro do domínio de quina.se, com uma única, substituição (V600E) responsável por pelo menos 80 %. As proteínas de B~ Raf mutado ativam a via de Raf-MEK-ERK através da atividade de quinase elevada para MEK ou através da ativação de C-Raf .

Portanto, desenvolvimento de um inibidor de quinase para B-Raf proporciona uma nova oportunidade terapêutica para o tratamento de muitos tipos de cancros humanos, especialmente para melanomas metastãticos, tumores sólidos, tumores cerebrais tais como Glioblastoma multiforme (GBM), leucemia mielogénica aguda (AML) , cancro de pulmão,· carcinoma papilar da tiroide, carcinoma de grau baixo do ovário, e cancro colorretal. Diversos inibidores de Raf quinase foram descritos como exibindo eficácia na inibição de proliferação de células tumorais em ensaios in vitro e/ou in vivo (veja-se, por exemplo, Patentes US N° 6.391.636, 6.358.932, 6.037.136, 5.717.100, 6.458.813, 6.204.467, e 6.268.391). Outras patentes e pedidos de patente sugerem a utilização de inibidores de Raf quinase para tratar leucemia (veja-se, por exemplo, Patentes US N° 6.268.391. 6.204.467, 6.756.410, e 6.281.193; e Pedidos de Patente US N° 20020137774 e 20010006975 abandonados), ou para tratar cancro de mama (veja-se, por exemplo, Patentes US N° 6.358.932, 5.717.100, 6.458.813, 6.268.391,6.204.467 e 6.911.446). Os dados demonstram que inibidores de Raf quinase podem inibir significativamente a sinalização através da via de ΜΆΡΚ, que leva ao encolhimento dramático em tumores de B-Raf (V600E).

Os compostos da presente invenção inibem processos celulares que envolvem B-Raf quinase por meio do bloqueio da cascata de sinal nestas células de cancro e em último caso indução da estase e/ou morte das células.

De acordo com o anterior, a presente memória descritiva proporciona adicionalmente utilizações médicas para prevenir ou tratar carcinoma de pulmão, cancro de próstata, cancro gástrico, carcinoma pancreático, carcinoma de bexiga, carcinoma de cólon, distúrbios mieioides, cancro de próstata, cancro da tiroide, melanoma, adenomas e carcinomas do ovário, olho, fígado, trato biliar, e sistema nervoso. Além disso, a presente memória descritiva proporciona adicionalmente utilizações médicas ara prevenir ou tratar quaisquer das doenças ou distúrbios descritos acima num indivíduo com necessidade de tal tratamento, cujo método compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz (Veja-se, "Administração e Composições Farmacêuticas", infra) de um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Para quaisquer das utilizações acima, a dosagem requerida variará dependendo do modo de administração, a condição particular a ser tratada e o efeito desejado.

Administração e Composições Farmacêuticas

Em geral, os compostos da invenção serão administrados em quantidades terapeuticamente eficazes via quaisquer dos modos usuais e aceitáveis conhecido na especialidade, individualmente ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos. Uma quantidade terapeuticamente eficaz pode variar amplamente dependendo da gravidade da doença, a idade e saúde relativa do indivíduo, a potência do composto usado e outros fatores. Em geral, resultados satisfatórios são indicados como sendo obtidos sistematicamente em dosagens diárias de desde cerca de 0,03 a 30 mg/'kg por peso corporal. Uma dosagem diária indicada no mamífero grande, por exemplo, seres humanos, está no intervalo de cerca de 0,5 mg a cerca de 2000 mg, convenientemente administrado, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes ao dia ou na forma retardada. Formas farmacêuticas adequadas para administração oral compreendem de cerca de 1 a 500 mg de ingrediente ativo.

Os compostos da invenção podem ser administrados como composições farmacêuticas por qualquer via convencional, em particular entericamente, por exemplo, oralmente, por exemplo, na forma de comprimidos ou cápsulas, ou parentericamente, por exemplo, na forma de soluções injetáveis ou suspensões, topicamente, por exemplo, na forma de loções, géis, pomadas ou cremes, ou numa forma nasal ou de supositório. As composições farmacêuticas que compreendem um composto da presente invenção na forma livre ou numa forma de sal farmaceuticamente aceitável em associação com pelo menos um portador farmaceuticamente aceitável ou diluente pode ser fabricado de uma maneira convencional por métodos de mistura, granulação ou revestimento. Por exemplo, composições orais podem ser comprimidos ou cápsulas de gelatina que compreendem o ingrediente ativo juntamente com a) diluentes, por exemplo, lactose, dextrose, sucrose, manitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, por exemplo, sílica, talco, ácido esteárico, os seus sais de magnésio ou cálcio e/ou polietilenoglicol; para comprimidos também c) ligantes, por exemplo, silicato de alumínio e magnésio, pasta de amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetil celulose de sódio e ou. polivinilpirrolidona; se for desejado d) desintegrantes, por exemplo, amidos, agar, ácido algíníco gu o seu sal de sódio, ou misturas efervescentes; e/ou e) absorventes, corantes, aromatizant.es e adoçantes. As composições injetáveis podem ser soluções isotónicas aquosas ou suspensões, e supositórios podem ser preparados a partir de emulsões gordas ou suspensões. As composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizantes, molhantes ou emulsificantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, podem também conter outras substâncias terapeuticamente valiosas, Por exemplo, os compostos da invenção podem ser formulados num pré-concentrado de microemulsão (MEPC). Os compostos de Fórmula I podem ser preparados a 40 mg/rni numa mistura de 56 % de PEG4 00, 29 % de cremophor EL e 15 % de ácido oleico. A mistura, sem um composto de Fórmula I, é primeiro preparada submetendo a vórtice/agitação. U'm composto da invenção é adicionado e a sonicação é usada para dispersar o pó no veículo. A mistura é aquecida até 80 °C num banho de água por cerca de uma hora sob agitação, com sonicação, a cada 15 minutos. Esta mistura é fisicamente e quimicamente estável a temperatura ambiente por cerca de uma. semana.

Formulações adequadas para aplicações transdérmicas incluem uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção com um portador. Um portador pode incluir solventes farmacologicamente aceitáveis absorvíveis para ajudar na passagem através da pele do hospedeiro. Por exemplo, dispositivos transdérmicos são na forma de uma bandagem que compreende um membro de suporte, um reservatório contendo o composto opcionalmente com esquinas, opcionalmente uma barreira de controlo de taxa para administrar o composto à pele do hospedeiro numa taxa controlada e predeterminada ao longo de um período prolongado de tempo, e significa para fixar o dispositivo à pele. Formulações transdérmicas de matriz podem também ser usadas. As formulações adequadas para aplicação tópica, por exemplo, à pele e olhos, são preferentemente soluções aquosas, pomadas, cremes ou géis bem conhecidos na especialidade. Tais podem conter sdubilizantes, estabilizantes, agentes de aumento de tonicidade, tampões e conservantes.

Os compostos da invenção podem ser administrados em quantidades terapeuticamente eficazes em combinação com um ou mais agentes terapêuticos (combinações farmacêuticas). Por exemplo, efeitos sinergísticos podem ocorrer com outros agentes antitumorais ou antiproliferativos, por exemplo, inibidores de mitose, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos intercalantes, inibidores de fator de crescimento, inibidores de ciclo celular, enzimas, inibidores de topoisomerase, modificadores de resposta biológica, anticorpos, citotõxicos, anti hormonas, anti androgénios, um agente anti-angiogénese, inibidor de quinase, inibidor de pan quinase ou inibidor de fator de crescimento.

Os compostos da invenção podem ser administrados em quantidades terapeuticamente eficazes em combinação com um ou mais excipientes adequados selecionados a partir de amido de milho, amido de batata, amido de tapioca, pasta de amido, amido pregelatinizado, açúcares, gelatina, gomas naturais, gomas sintéticas, alginato de sódio, ácido algínico, tragacanto, goma. guar, celulose, celulose de etilo, acetato de celulose, carboximetil celulose de cálcio, carboximetil celulose de sódio, metil celulose, hidroxipropil metilcelulose, celulose microcristalina, silicato de alumínio e magnésio, polivin.il pirrolidona, talco, carbonato de cálcio, celulose em pó, dextratos, caulim, manitol, ácido silíeico, sorbitol, agar-agar, carbonato de sódio, croscarmelose de sódio, crospovidona, polacrilina de potássio, amido glicolato de sódio, argilas, estearato de sódio, estearato de cálcio, estearato de magnésio, ácido esteárico, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietileno glicol, outros glicóis, laur.il sulfato de sódio, óleo vegetal, hidrogenado, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girassol, óleo de sésamo, azeite de oliva, óleo de milho, óleo de soja, estearato de zinco, oleato de sódio, oleato de etilo, laureato de etilo, sílica, e combinações do mesmo.

Os compostos da invenção podem ser utilizados com um agente terapêutico adicional. 0 agente terapêutico adicional compreende um fãrmaco anti cancro, uma medicação contra a dor, um antiemético, um antidepressivo ou um agente anti- inflamatório. Além disso, o agente terapêutico adicional é um inibidor de Raf quinase diferente ou um inibidor de MEK, mTOR, HSP90, AKT, PI3K, CDK9, PAK, Proteína Quinase C, uma MAP quinase, uma MAPK Quinase, ou ERK e é administrado ao indivíduo concorrentemente com um composto da invenção.

Por exemplo, a adição de um inibidor de MEK em combinação com um inibidor de Raf leva a um significativa inibição de sinalização de ERK e consequentemente uma diminuição em transformação e proliferação celular. Uma vez que tratamentos com inibidor de MEK em separado têm levado a dose que limita toxicidades na clínica, uma combinação de inibidor de MEK mais Raf representa uma estratégia de tratamento superior. Exemplos de inibidores de MEK são AS703 02 6 (EMD Serono) ; MSC1936369B (EMD Serono) ; GSK1120212 (GlaxoSmithKline); AZD6244 (Memorial Sloan-Kettering Cancer Center); PD-0325901 (Pfizer); ARRY-438162 (Array BioPharma); RDEA119 (Ardea Biosciences, Inc.); GDC0941 (Genentech) ; GDC0 973 (Genentech) ; TAK--733 (Millennium Pharmaceuticals, Inc.); R05126766 (Hoffmann-La Roche); e XL-518 (Exelixis).

Em outra forma, de realização da invenção estão combinações e métodos de tratamento de cancro que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto do Sumário da Invenção (inibidor de Raf) e pelo menos um inibidor de proteína quinase MEK.

Onde os compostos da invenção são administrados em conjunto com outras terapêuticas, as dosagens dos compostos coadministrados variarão, claro, dependendo do tipo de co fármaco utilizado, do fármaco específico utilizado, da condição a ser tratada e assim por diante. A invenção também trata de umas combinações farmacêuticas, por exemplo, um kit, que compreende a) um primeiro agente que é um composto da invenção como revelado no presente documento, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, e b) pelo menos um coagente. 0 kit pode compreender instruções para a sua administração.

Os termos "coadministração" ou "administração combinada" ou similares como utilizado no presente documento destinam-se a abranger a administração dos agentes terapêuticos selecionados a um único paciente, e destinam-se a incluir regimes de tratamento em que os agentes não sâo necessariamente administrados pela mesma via de administração ou ao mesmo tempo. 0 termo "combinação farmacêutica" como usado no presente documento significa um produto que resulta da mistura ou combinação de mais de um ingrediente ativo e inclui tanto as combinações fixas como as não fixas dos ingredientes ativos. 0 termo "combinação fixa" significa que os ingredientes ativos, por exemplo, um composto de Fórmula I e um coagente, são ambos administrados a um paciente simultaneamente na forma de uma entidade única ou dosagem. 0 termo "combinação não fixa." significa, que os ingredientes ativos, por exemplo, um composto de Fórmula I e um coagente, são ambos administrados a um paciente como entidades separadas simultaneamente, concorrentemente ou sequencialmente sem nenhum limite de tempo específico, em que tal administração proporciona terapeuticamente níveis eficazes dos 2 compostos no corpo do paciente. 0 último também se aplica a terapêutica de cocktail, por exemplo, a administração de 3 ou mais ingredientes ativos.

Processos para Preparar os Compostos da Invenção A presente invenção também inclui processos para a preparação de compostos da invenção. Nas reações descritas, pode ser necessário proteger grupos funcionais reativos, por exemplo, grupos hidroxi, amino, imino, tio ou carboxí, onde estes são desejados no produto final, para evitar a sua participação indesejada nas reações. Grupos protetores convencionais podem ser usados de acordo com prática padrão, por exemplo, veja-se T.W. Greene e P. G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley e Sons, 1991.

Os compostos de Formula I podem ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema de ReaçâG I:

Esquema de Reação I 0,

0)

I em que Ri, R2, R3, R4, R5, R7, e Y são como foram definidos no Sumário da invenção, P é um grupo protetor adequado (por exemplo, MEM, iyiOM, SEM, R4S02, e similares) , e M é um grupo abandonante (por exemplo, cloro, bromo, iodo, metanosulfoniloxi, p-toluenosulfoniloxi, e similares). Um composto de Fórmula I pode ser sintetizado por meio da remoção do grupo protetor P de um composto de Fórmula 2 (por exemplo, por meio do tratamento com um ácido forte tal como cloreto de hidrogénio na presença de um solvente prótico tal como metanol ou água quando P ê MEM, MOM, ou SEM; ou por meio do tratamento com carbonato de sódio ou potássio aquoso ou metanólico, opcionalmente na presença de um cosolvente tal como tolueno, quando P ê um segundo grupo sul forni lo R48O2) .

Os compostos de Fórmula 2 podem ser preparados por meio da reação de um composto de Fórmula 3 com um agente alquilante de Fórmula 4 na presença de um solvente adequado (por exemplo, DMF, DMSO, e similares) e uma. base adequada (por exemplo, carbonato de potássio, hidreto de sódio, e similares). A reação procede num intervalo de temperatura de cerca de 0 °C a cerca de 150 °C e pode le\^ar até cerca de 24 horas para completar. A mistura de reação é opcionalmente reagida ainda para remover quaisquer grupos protetores.

Os compostos de Fórmula I podem também ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema de Reação II:

Esquema de Reação II

I (5) em que R., R2, R3, R4, RSf e Y são como foram definidos no Sumário da invenção. Um composto de Fórmula I pode ser sintetizado por meio da reação de um composto de Fórmula 5 com um reagente de sulfonilação de Fórmula 6 na presença de uma base adequada (por exemplo, piridina, trietilamina, 4-(N,N-dimetilamino)piridina, e similares) e um solvente adequado (tal como piridina, diclorometano, 2-metilTHF, e similares). A reaçâG procede num intervalo de temperatura de cerca de 0 °C a cerca de 100 °C e pode levar até cerca de 24 horas para completar. A mistura de reação é opciona.lmente reagida ainda para remover quaisquer grupos protetores. Em alguns exemplos, o reagente de sulfonilação pode reagir duas vezes para produzir um derivado de bis-sulfonilo. Neste exemplo, o composto de bis-sulfonilo pode ser convertido a um composto de Fórmula a por meio do tratamento com uma base adequada (por exemplo, hidróxido de sódio ou potássio, ou carbonato de sódio ou potássio) na presença de um solvente prótico tal como metanol ou água, opcionalmente na presença de um cosolvente tal como tolueno ou 2--metilTHF. A reação ocorre num intervalo de temperatura de cerca de 20 °C a cerca de 100 °C e pode levar até cerca de 24 horas para completar.

Os compostos de Fórmula I podem também ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema de Reação III:

Esquema de Reação III

em que Ri, R2, R3, R4, Rs, e Y sao como foram definidos no Sumário da invenção, Rso é um grupo abandonante (por exemplo, iodo, bromo, cloro, trifluorometanosulfoniloxi, e simílcires) , cada Rf pode ser, por exemplo, hidrogénio, metilo, e similares, ou os dois grupos R' podem ser unidos entre si para formar um éster de boronato cíclico. Os dois grupos R90 podem, cada um, ser hidrogénio, ou os dois grupos R90, tomados juntos, podem representar um grupo protetGr de azoto adequado (por exemplo, um R90 pode ser hidrogénio e o outro pode ser BOG). Um composto de Fórmula la pode ser sintetizado por meio da reação de um composto de Fórmula 7 com um composto de Fórmula 8 na presença de um catalisador de metal de transição adequado (por exemplo, tetraquis(trifenilfosfinapaládio)(0) ou PdCl2(dppf), um solvente adequado (por exemplo, DME, dioxa.no, tolueno, etanol, e similares) e uma base adequada (por exemplo, solução de carbonato de potássio anidro ou carbonato de sódio aquoso, e similares). A reação procede num intervalo de temperatura de cercct de 20 °C a cerca de 120 °C e pode levar até cerca de 24 horas para completar, A mistura de reação é opcionalmente reagida ainda para remover quaisquer grupos protetores.

Um composto de Fórmula 1 pode também ser preparado por um similar protocolo de reação de Suzuki em que o um composto de Fórmula 7 é feito reagir com um composto de Fórmula Sa para gerar um composto de Fórmula 9. Sm seguida à desproteção dos grupos R90, uma reação de sulfonilação, como descrito para o Esquema de Reação II, gera um composto de Fórmula la.

Será. apreciado por um perito na especialidade que outras resições de acoplamento organometálicas, por exemplo, usando reagentes de estanho (acoplamento de Stille) ou reagentes de zinco (acoplamento de Negishi), poderiam também ser utilizadas no lugar da reação de acoplamento de Suzuki usando reagentes de boro descritos no Esquema de Reação III.

Os compostos de Fórmula 7 podem ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema, de Reação IV:

Esquema de Reação IV

(11)

Neste exemplo, M é um grupo abandonante (por exemplo, cloro, bromo, iodo, metanosulfonilo, e similares), Rs0 é um grupo abandonante (por exemplo, iodo, bromo, cloro, trifluorometanosulfoniloxi, e similares), e R7 é como definido no Sumário da invenção. Um composto de Fórmula 7 pode ser preparado por meio da reação de um composto de amina de Fórmula 10 com um composto de Fórmula 11. A reação é realizada na presença de uma base adequada (por exemplo, trietilamina, carbonato de potássio, e similares) num solvente tal como isopropanol, DMSO, NMP, ou dioxano numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 120 °C. Em alguns exemplos, as transformações adicionais do grupo Ri novamente introduzido podem subsequentemente ser realizadas para chegar no grupo Ri pretendido final.

Os compostos de Fórmula 11a, que são um subconjunto de compostos de Fórmula 11 em que M é metanosulfonilo, podem ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema de Reação V:

Esquema de Reação V {13}

<t2) (Ha)

Em que R7 e R50 são como foram definidos no Sumário da invenção. Um composto de Fórmula 11a pode ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 12 com um sistema de oxidação adequado (por exemplo, ácido m-cloroperbenzGico num solvente de diclorometano, ou Oxone™ em aquoso metanol, e similares) , numa temperatura de cerca de - 78 °C a cerca de 50 °C. A reação leva até cerca de 24 horas para completar.

Um composto de Fórmula 12 em que R50 é cloro, bromo, ou iodo pode, por sua vez, ser preparado por meio da. reação de um composto de amina de Fórmula 13 com um sistema de reagente de diazotização adequado (por exemplo, ácido nitroso em conjunto com um sal de haleto de cobre (I) , nitrito de isoamilo em conjunto com iodeto de cobre (I)/iodeto de metileno, nitrito de isoamilo em conjunto com trifluroideto de boro, iodo, e iodeto de potássio em acetonitrilo, e similares). A reação ocorre numa temperatura de cerca de 0 a cerca de 80 °C, e leva de cerca de 1 a cerca de 6 horas para completar.

Um composto de Fórmula 13 pode ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 14 com um composto de Fórmula 3, como descrito para o Esquema de Reação I.

Um composto de Fórmula 14 pode ser preparado por meio da ciclizaçâo de um composto de enaminonitrilo de Fórmula 15 com hidrazina ou um sal de hidrazina num solvente adequado (por exemplo, etanol e similares). A reação ocorre numa temperatura de cerca de 2 5 a cerca de 100 °C, e pode levar de cerca de 1 hora a cerca de 24 horas para completar.

Alternativamente, um composto de Fórmula 13 pode ser preparado de um composto de Fórmula 15 num procedimento de uma etapa por meio da reação de um composto de Fórmula 15 com uma hidrazina monossubstituída R7NH-NH2. A reação ocorre numa. temperatura, de cerca de 2 5 a cerca de 100 °C, e pode levar de cerca de 1 hora a cerca de 24 horas para completar.

Um composto de Fórmula 15 pode, por sua vez, ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 16 com DMF DMA ou reagente de Bredereck, opcionalmente na presença de um co solvente tal como DMF, numa temperatura de cerca de 50 a cerca de 150 °C. A reação leva cerca de 1 a cerca, de 24 horas para completar.

Um composto de Fórmula 16 pode ser preparado por meio do tratamento de um composto de Fórmula 17 com um adequado ácido (por exemplo, ácido p-toluenosulfónico, e similares) num solvente inerte adequado (por exemplo, tolueno, e similares). A reação ocorre numa temperatura de cerca de 50 a cerca de 120 °C, e leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar,

Finalmente, um composto de Fórmula 17 pode ser preparado por meio da reação de 4-cloro-2-(metiltio)pirimidina com cianoacetato de terc-butilo na presença de uma base adequada (por exemplo, hidreto de sódio e similares) e um solvente adequado (por exemplo, DMSO e similares), numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 80 °C. A reação leva de cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar.

Os compostos de Fórmula 11b, que são um subconjunto de compostos de Fórmula 11 em que M é um halogénio, podem ser preparados ao proceder como no seguinte Esquema de Reação VI :

Esquema de Reação VI ¢21}

em que R7 e R50 sâo como foram definidos no Sumário da invenção. Um composto de Fórmula 11b, em que M é um halogénio, pode ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 20 com um sistema de reagente de diazotização adequado (por exemplo, ácido nitroso em conjunto com um sal de haleto de cobre (I) , nitri to de sódio em conjunto com ácido p-toluenosulfónico e iodeto de potássio. A reação ocorre numa temperatura de cerca de 0 ει cerca de SO °C, e leva de cerca de 1 a cerca de 6 horas para completar. Alternativamente, tratamento de um composto de Fórmula 20 com um diazotização reagente (por exemplo, nitrito de sódio e similares) na presença de um ácido carboxílico (por exemplo, ácido trifluoroacético e similares) a 0 a 40 °C durante um período de cerca de 0,5 a cerca de 6 horas, seguido por meio do tratamento com, uma solução aquosa básica (por exemplo, solução de carbonato de potássio aquoso e similares) proporciona um composto de Fórmula 21 (tal composto pode existir em formas tautoméricas). Tratamento subsequente de um composto de Fórmula 21 com um agente de cloraçâo (por exemplo, oxicloreto de fósforo e similares), opcionalmente na presença de uma base tal como N,N-dimetilanilina ou DIPEA, e opcionalmente na presença de um solvente inerte tal como acetonitrilo ou tolueno, e um aditivo tal como DMF, numa temperatura de cerca de 50 a cerca de 110 °C, e durante um tempo de cerca, de 1 a cerca de 72 horas, proporciona um composto de Fórmula 11b, em que M é cloro.

Um composto de Fórmula 20 pode, por sua vez, ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 22 com guanidina ou um sal de guanidina (por exemplo, cloridrato de guanidinina ou carbonato de guanidina), opcionalmente na presença de uma base (por exemplo, hidróxido de lítio e similares) num solvente adequado (por exemplo, sec-butanol, NMP e similares) , numa temperatura de cerca de 50 a cerca de 180 °C, e durante um tempo de cerca de 2 a cerca de 48 horas.

Um composto de Fórmula 22 pode ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 23 com DMF DMA ou reagente de Bredereck, opcionalmente na presença de um co solvente tal como DMF, numa temperatura de cerca de 50 a cerca de 150 °C. A reação leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar.

Um composto de Fórmula 23 em que R50 é cloro, bromo, ou iodo pode ser preparado por meio da reação de um composto de amina de Fórmula 24 com um sistema de reagente de diazotização adequado (por exemplo, ácido nitroso em conjunto com um sal de haleto de cobre (I) , nitrito de sódio em conjunto com ácido p-toluenosulfónico e iodeto de potássio, ou isoamilnitrito em conjunto com trifluoreto de boro-THF, iodo, iodeto de potássio, e acetonitrilo). A reação ocorre numa temperatura de cerca de 0 a cerca de 80 °C, e leva de cerca de 1 a cerca de 6 horas para completar. Um composto de Fórmula 24 pode, por sua vez, ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 25 com um reagente organometãlico tal como metillítio, complexo de metillítio-brometo de lítio, ou um reagente de haleto de metilmagnésio, num solvente inerte tal como THF, éter, ou ciclopropil metil éter, numa temperatura de cerca de 0 a cerca de 100 °C, seguido por meio do tratamento com uma solução aquosa de extinção, A reação leva de cerca de 2 a cerca de 48 horas para completar.

Um composto de Fórmula 25 pode ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 2 6 com um composto de Fórmula 3, como descrito para o Esquema de Reação I.

Alternativamente, um composto de Fórmula 25 pode ser preparado de um composto de Fórmula 27, em que os dois grupos R" tomados juntos formam um grupo protetor ãcido-lábil (por exemplo, uma imina tal como benzilideno ou um carbamato tal como t-butilcarbamato), A reação é levada a cabo por meio do tratamento de um composto de Fórmula 27 com um reagente aquoso ácido (por exemplo, ácido clGrídrico concentrado e similares) num solvente tal como etanol, numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 100 °C.

Preferentemente os dois grupos R", tomados juntos, formam uma imina tal como benzilidina.

Um composto de Fórmula 27 pode, por sua vez, ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 28 com um composto de Fórmula 29, em que os dois grupos R" tomados juntos formam um grupo protetor ácido-lábil (por exemplo, uma imina tal como benzilideno ou um carbamato tal como t-butilcarbamato). A reação é realizada num solvente (por exemplo, tolueno, metanol, ou etanol) numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 120 °C, opcionalmente na presença de um catalisador tal como DMAP, e leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar. Opcionalmente, a reação é realizada num solvente inerte (por exemplo, THF e similares) na presença de uma base (por exemplo, n-butillítio e similares) numa temperatura de cerca de - 80 a cerca de 25 °C, ao longo de um tempo de cerca de 0,5 a cerca de 12 horas.

Um composto de Fórmula 29 pode ser preparado por meio dos métodos conhecidos aos peritos na especialidade. Por exemplo, um composto de Fórmula 29, em que os dois grupos R" tomados juntos formam um grupo benzilideno, pode ser preparado por meio da reação de benzaldeído com uma hidrazina monossubstituída R7NHNH2, num solvente ta.1 como etanol ou tolueno, por cerca de 1 a cerca de 24 horas, e numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 120 °C.

Alternativamente, a reação pode ser levada a cabo usando um sal de hidrazina monossubstituída (por exemplo, um sal cloridrato ou um sal oxalato, e similares), em conjunto com uma base (por exemplo, sódio acetato ou trietilamina).

Os compostos de Fórmula 8 ou Fórmula 8a podem ser preparados corno descrito no seguinte Esquema de Reação VII:

Esquema de Reação VII

(50a) (Sa) em que R2, R3, R4; R5, e Y são como foram definidos no Sumário da invenção, M é um grupo abandonante (por exemplo, iodo, bromo, cloro, trifluorometanosulfoniloxi, e similares) , e cada R' pode ser, por exemplo, hidrogénio, metilo, e similares, gu os cígís grupos R' podem ser unidos entre si para formar um éster de boronato cíclico. Os dois Rgo grupos podem, cada um, ser hidrogénio, ou os dois Rgo grupos, tomados juntos, podem representar um grupo protetor de azoto adequado (por exemplo, um R90 pode ser hidrogénio e o outro pode ser BOC) . Os compostos de Fórmula 8 ou Fórmula 8a podem ser preparados por meio da reação de um composto de Fórmula 50 ou Fórmula 50a, respetivamente, com um composto de dihoro (por exemplo, bis(pinacolato)diboro e similares) na presença de um adequado metal de transição catalisador (por exemplo, PdC.l2 (dppf) ) ) e uma base adequada (por exemplo, acetato de potássio e similares) num solvente adequado (por exemplo, tolueno, dioxano e similares). A reação procede num intervalo de temperatura de cerca de 20 °C a cerca de 120 °C e pode levar até cerca de 24 horas para completar. Um composto de Fórmula 50 pode, por sua vez, ser preparado por meio da sulfonilaçao de um composto de Fórmula 51 como descrito para o Esquema de Reação II. Será apreciado por um perito na especialidade que os compostos de Fórmula 51 ou Fórmula 50a, por exemplo, 3-brGirtoanilinas, ou N-BOC-protegido 3-bromoanilinas, pode ser preparado por uma variedade de métodos, incluindo, mas não são limitados a, aqueles descritos adicionalmente nos Exemplos a seguir.

Um composto de Fórmula 70 pode ser preparado como descrito no seguinte Esquema de Reação VIII:

Esquema de

Reação VIII (71) em que RSb é como definido no Sumário da invenção e R55 é selecionado a partir de um Ci-4alquilo ou halo- substituído-Ci_4alquilo, Um composto de Fórmula 70 pode ser preparado por meio do tratamento de um composto de Fórmula 71 com um sistema redutor adequado (por exemplo, hidrogenação ao longo de um paládio catalisador, e similares) num solvente adequado (por exemplo, etanol ou etilo acetato) numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 75 °C, ao longo de um período de cerca de 0,5 a cerca de 12 horas.

Um composto de Fórmula 71 pode, por sua vez, ser preparado por um processo de duas etapas que consiste na conversão do grupo hidroxi de um composto de Fórmula 73 a um grupo abandonante adequado, seguido pelo deslocamento com anião azida. Para a primeira etapa, reagentes adequados incluem tribrometo de fósforo, ou cloreto de metanosulfonilo em combinação com uma base adequada tal como trietilamina. As reações são levadas a cabo num solvente adequado (por exemplo, diclorometano, e similares) , numa temperatura de cerca de 0 a cerca de 50 °C. Para a segunda etapa, o deslocamento é levado a cabo com um reagente de azida (por exemplo, azida de sódio, e similares) num solvente adequado (por exemplo, DMF ou DMSO) numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 150 °C. A reação leva de cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar. Alternativamente, a transformação pode ser levada a cabo numa etapa pGr meio do tratamento de um composto de Fórmula 73 com um reagente de fosfina (por exemplo, trif enilfosf iria, e similares) e um reagente de azodicarboxilato (por exemplo, dietilazodicarboxilato e similares) na presença de ácido hidrazoico (formado in si tu de um sal de azida, tal como azida de sódio, e um ácido). A reação ocorre numa temperatura de cerca de -80 °C a cerca de 75 °C, e leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar.

Um composto de Fórmula 73 pode ser preparado por meio do tratamento de um composto de Fórmula 74 com um cloroformato {por exemplo, cloroformato de metilo e similares) ou um reagente de alcoxicarbonilação alternativo tal como di-terc-butildicarboxilato. A reação ocorre num solvente inerte (por exemplo, diclorometano e similares) numa temperatura de cerca de -80 a cerca de 25 °C, e leva cerca de 1 a cerca de 12 horas para completar. Uma base tal como trietilarnina pode opcionalmente ser usado. A reação pode também ser realizada num sistema de duas fases que consiste num solvente tal como THF ou dioxano, e uma solução aquosa básica, tal como solução aquosa de bicarbonato de sódio, numa temperatura de cerca de 25 °C, durante um período de cerca de 2 a cerca de 16 noras.

Um composto de Fórmula 70 pode também ser preparado como descrito no seguinte Esquema de Reação IX:

Esquema de Reação IX

(75) 0Ό) em que R8b é como definido no Sumário da invenção, R55 é selecionado a partir de um Ci-4alquilo ou halo-substítuído- Ci-4alquilo, e R56 é um grupo protetor adequado, por exemplo, benziloxicarbonilo (CBz), Um composto de Fórmula 70 pode ser preparado por desproteção de um composto de Fórmula 75. Por exemplo, um composto de Fórmula 70 pode ser preparado por meio do tratamento de um composto de Fórmula 75, em que R56 é Cbz, com um sistema redutor adequado (por exemplo, hidrogenação ao longo de um catalisador de paládio, e similares) num solvente adequado (por exemplo, etanol, metanol, MTBE, ou acetato de etilo) numa temperatura de cerca de 25 a cerca de 75 °C, opcionalmente na presença de um ácido tal como cloreto de hidrogénio, ao longG de um período de cerca de 0,5 a cerca de 12 horas. Alternativamente, a desproteção pode ser levada a cabo sob condições de hidrogenação de transferência, usando um dador de hidrogénio adequado tal como ácido fórmico, formato de amónio, ou 1,4- ciclohexadieno. Um composto de Fórmula 75 pode, por sua vez, ser preparado por meio da reação de um composto de Fórmula 76 com um cloroformato (por exemplo, cloroformato de metilo e similares) ou um reagente de alcoxicarbonilação alternativo tal como di-terc-butildicarboxilato. A reação ocorre num solvente inerte (por exemplo, diclorometano e similares) numa temperatura de cerca de -80 a cerca de 25 °C, e leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar. Uma base tal como trietilamina pode opcionalmente ser usado. A reação pode também ser realizada num sistema de duas fases que consiste num solvente tal como THF ou dioxano, e uma solução aquosa básica, tal como solução aquosa de bicarbonato de sódio, numa temperatura de cerca de 2 5 °C, durante um período de cerca de 2 a cerca de 16 horas. Um composto de Fórmula 76 pode ser preparado por prGteção de um composto de Fórmula 77. As condições de proteção podem ser escolhidas para proporcionar preferentemente ou substancialmente o único isómero de Fórmula 76. Alternativamente, as condições podem ser escolhidas em que pouca ou nenhuma preferência para a formação do único isómero de Fórmula 77 é mostrada, mas em que um composto de Fórmula 76 pode, no entanto, ser isolado em suficiente pureza para utilização posterior. Meios de obtenção de tal pureza podem incluir cristalização da base livre ou um sal. Um composto de Fórmula 76, em que R5e é Cbz, pode ser preparado por meio do tratamento de um composto de Fórmula 77 com cloroformato de benzilo. A reação ocorre num solvente inerte (por exemplo, diclorometano e similares) numa temperatura de cerca de -80 a cerca de 2 5 °C, e leva cerca de 1 a cerca de 24 horas para completar. Uma base tal como trietilamina pode opcionalmente ser usada. A reação pode também ser realizada num sistema de duas fases que consiste num solvente tal como THF ou dioxano, e uma solução aquosa básica, tal como solução aquosa de bicarbonato de sódio, numa temperatura de cerca de 25 °C, durante um período de cerca de 2 a cerca de 24 horas. Um sal de um composto de Fórmula 77 pode ser usado, em conjunto com uma base tal como trietilamina ou carbonato de sódio, como entrada no lugar da base livre.

Será apreciado por um perito na especialidade que um composto de Fórmula. 7 0 pode ser um único enantiómero ou uma mistura de enantiómeros, e que um único composto de enantiómero de Fórmula 70 pode ser obtido partindo com um composto único apropriado de enantiómero de Fórmula 74 ou Fórmula 77,

Exemplos pormenorizados da síntese de um composto de Fórmula Ia podem ser encontrados nos Exemplos, infra. Processos Adicionais para Preparar os Compostos da Invenção

Um composto da. invenção pode ser preparado como um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável por meio da reação da forma de base livre do composto com um ácido inorgânico ou orgânico farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável de um composto da invenção pode ser preparado por meio da reação da forma de ácido livre do composto com uma base inorgânica ou orgânica farmaceuticamente aceitável.

Alternativamente, as formas de sal dos compostos da invenção podem ser preparadas usando sais dos materiais de partida ou intermediários.

As formas de ácido livre ou base livre dos compostos da invenção podem ser preparadas a partir do sai de adição de base ou sal de adição de ácido correspondente dos mesmos, respetivamente. Por exemplo, um composto da invenção numa forma de sal de adição de ácido pode ser convertido à base livre correspondente por meio do tratamento com uma base adequada (por exemplo, solução de hidróxido de amónio, hidróxido de sódio, e similares). Um composto da invenção numa forma de sal de adição de base pode ser convertido ao ácido livre correspondente por meio do tratamento com um ácido adequado (por exemplo, ácido clorídrico, etc.).

Os compostos da invenção na forma não oxidada podem ser preparados a partir de N-õxidos de compostos da invenção por meio do tratamento com um agente redutor (por exemplo, enxofre, diõxido de enxofre, trifenil fosfina, boroidrato de lítio, boroidrato de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo, ou similares) num solvente orgânico inerte adequado (por exemplo, acetonitrilo, etanol, aquoso dioxa.no, ou similares) a 0 a 80 CC,

Os derivados de profãrmaco dos compostos da invenção podem ser preparados por meio dos métodos conhecidos aos peritos ordinários na especialidade (por exemplo, para mais pormenores veja-se Saulnier et al,, (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985). Por exemplo, profármacos apropriados podem ser preparados por meio da reação de um composto não derivatizado da invenção com um adequado agente de carbamilação (por exemplo, 1,1-aciloxialqui lcarbanocloridato, carbonato de para··· nitrofenilo, ou similares).

Derivados protegidos dos compostos da invenção podem ser feitos por meios conhecidos aos peritos ordinários na especialidade. Uma descrição pormenorizada de técnicas aplicáveis à criação de grupos protetores e a sua rerrtGçâo podem ser encontradas em T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3a edição, John Wiley e Sons, Inc., 19 9 9 .

Os compostos da presente invenção podem ser preparados convenientemente, ou formados durante o processo da invenção, como solvatos (por exemplo, hidratos). Hidratos de compostos da presente invenção podem ser preparadGS convenientemente por recristalização de uma mistura de solvente aquoso/orgânico, usando solventes orgânicos tais como dioxina, tetrahidrofurano ou metanol.

Os compostos da invençãG podem ser preparados como os seus estereoisómeros individuais por meio da reação de uma mistura racémica do composto com um agente de resolução opticamente ativo para formar um par de compostos diastereoisoméricos, separar os diastereómeros e recuperar os enantiõmeros opticamente puros. Embora a resolução de enantiómeros possa ser levada a cabo usando derivados diastereoisoméricos covalentes dos compostos da invenção, complexos dissociáveis são preferidos (por exemplo, sais diastereoméricos cristalinos). Diastereómeros têm propriedades físicas distintas (por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, solubilidades, reatividade, etc.) e podem ser prontamente separados aproveitando estas dissimilaridades. Os diastereómeros podem ser separados por meio de cromatografia, ou preferentemente, por técnicas de separação/resolução com base nas diferenças em solubilidade. 0 enantiõmero opticamente puro é então recuperado, juntamente com o agente de resolução, por quaisquer meios práticos que não resultariam em racemização. Uma descrição mais pormenorizada das técnicas aplicáveis à resolução de estereoisómeros de compostos a partir da sua mistura racémica pode ser encontrada em Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley e Sons, Inc., 1981.

Em resumo, os compostos de Fórmula I podem ser feitos por um processo, que envolve: (a) esse dos esquemas de reação I a IX; e (b) converter opcionalmente um composto da invenção num sal farmaceuticamente aceitável; (c) converter opcionalmente uma forma de sal de um composto da invenção a uma forma não de sal; (d) converter opcionalmente uma forma nâo oxidada de um composto da invenção num N- óxido farmaceuticamente aceitável; (e) converter opcionalmente uma forma de N-óxido de um composto da invenção à sua forma nâo oxidada; (f) resolver opcionalmente um isómero individual, por exemplo, estereoisõmero, de um composto da invenção de uma mistura de isómeros; e (h)converter opcionalmente um derivado de profãrmaco de um composto da invenção à sua forma não derivatizada.

Na medida que a produção dos materiais de partida não é particularmente descrita, os compostos são conhecidos ou podem ser preparados de modo análogo aos métodos conhecidos na especialidade ou como revelado nos Exemplos a seguir no presente documento,

Um perito na especialidade apreciará que as transformações acima são somente representativas de métodos para a preparação dos compostos da presente invenção, e que outros métodos bem conhecidos podem, de maneira similar, ser usados. A presente invenção é exemplificada adicionalmente, mas não é limitada, pelos seguintes intermediários e exemplos que ilustram a preparação de compostos de Fórmula I de acordo com a invenção. São proporcionados alguns compostos por meio de referência.

As abreviações usadas são como se segue: benziloxicarbonilo (Cbz); terc-butoxicarbonilo (BOC); Proliferação celular (CP); diclorometano, (DCM); N,N- diisopropiletilamina (DIPEA); [1,1'-

Bis(difenilfosfino)ferrocene] dicloropaládio(II) (PdCl2 (dppf)); 1,2-dimetoxietano (DME); N,N-dimetil acetamida (DMA); N,N-dimetilaminopiridina (DMAP); N,N- dimetilo formamida (DMF); Ν,Ν-dimetil formamida dimetilacetal (DMF DMA); dimetilsulfóxido (DMSO); acetato de etilo (EtOAc) ,· cromatografia líquida de alta pressão (HPLC); acetato de isopropilo (iPrOAc); metanosulfonilo (Ms); 2- metiltetrahidrofurano (2-metilTHF); N- metilpirrolidinona (NMP) ,* tetrahidrofurano (THF) cromatografia de camada fina (TLC); e ácido para-toluenosulfónico (pTsOH),

Intermediário. Éster terc-butílico do ácido ciano-(2-metiltio-pirimidin--4-il)-acético

A uma suspensão de hidreto de sódio (7,15 g, 179 mmol, 60 % em óleo) em DMSO (100 ml) foi adicionado cianoacetato de terc-butilo (24,8 g, 170 mmol) a 23 °C. Após a evolução de hidrogénio ter cessado, 4-cloro-2-metiltiopirimidina (13,7 g, 85 mmol) foi adicionada. A reação foi aquecida a 80 °C durante 16 h. A mistura de reação foi então arrefecida até a temperatura ambiente e extinta com cloreto de amónio saturado arrefecido com gelG (3 00 ml) . O sólido foi filtrado e lavado com água (2x200 ml). 300 ml de hexano foi adicionado ao sólido e a suspensão foi aquecida, a 60 °C durante lhe então arrefecida até a temperatura ambiente. 0 sólido foi filtrado e lavado com hexano para propiciar o composto do título; 1H RMN 400 MHz (CDC13) δ 7,82 (d, 1H),

6,74 (d, 1H) , 2,63 (s, 3H) , 2,61 (s, 1H) , 1,52 (s, 9H) ; MS m/z: 266,0 (M + 1).

Intermediário. (2-Metiltio-pirimidin-4-il)-acetonitrilo

A uma solução de Intermediário éster terc-butílico do ácídG ciano-(2-metiltio-pirimidin-4-il)-acético (5,3 g, 20 mmol) em tolueno anidro (100 ml) foi adicionado ácido p-toluenosulfónico (800 mg) . A mistura foi aquecida até o refluxo durante 8 h, arrefecida até a temperatura ambiente e extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa de hidróxido de sódio a 1 N e salmoura, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (3:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para propiciar o composto do título: d-l RMN 400 MHz (CDC13) δ 8,56 (d, 1H) , 7,12 (d, 1H) , 3,84 (s, 2H) , 2,57 (s, 3H) ; MS m/z: 166,0 (M + 1).

Intermediário. 4-(2-(Metiltio)pirimidin-4-il)-lH-pirazol-3-amina

Etapa 1. 3-(Dimetilamino)-2-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)acrilonitrilo. N,N-Dimeti1formamida dimetil acetal (30 ml) foi adicionado ao Intermediário (2-Metiltio-pirimidin-4-il)-acetonitrilo (2,62 g, 15,7 mmol) e a mistura foi aquecida a 100 °C durante 16 h. A mistura de reação arrefecida foi concentrada, e o resíduo foi usado sem purificação adicional.

Etapa 2. 4-(2-(Metiltio)pirimidin-4-ii)-lH-pirazoI-3-amina. Uma mistura de 3-(dimetilamino)-2-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)acrilonitrilo bruto da etapa anterior (quantidade inteira) e monohidrato de hidrazina (2,36 ml, 47 mmol) em etanol anidro (75 ml) foi aquecida a 80 °C durante 16 horas. A mistura de reação foi arrefecida até a temperatura ambiente e concentrada. A mistura de reação foi dividida em partições entre acetato de etilo e salmoura. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia em sílica gel (2 a 5 % de metanol em eluente de diclorometano) para propiciar 4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-1 H-pirazol- 3-amina: 3H RMN 400 MHz (DMSO-dg) δ 11,9 (s, 1H) , 8,3 (s, 1H) , 7,87 (s,

Intermediário. l-IsopropiI-4- (2- (metiltio) pirimidin-4~.il) -lH-pirazol-3-amina:

Intermediário 4-(2-(Metiltio)pirimidin-4-il)-1H- pirazol-3-amina (10,0 g, 40 mmol) foi dissolvido em TI-IF (2 00 ml), seguido por adição de 2-iodopropano (6,3 ml, 63 mmol) e metóxido de sódio (25 % em peso de solução em metanol, 14,3 ml, 63 mmol) . A mistura foi aquecida a 50 °C com agitação sob uma atmosfera de azoto durante 3 d, então foi concentrada sob vácuo. 0 resíduo foi absorvido em acetato de etilo (200 ml) e lavado com solução de carbonato de potássio aquoso e salmoura, então seco em sulfato de sódio, filtrado, e concentrado para proporcionar um resíduo castanho. 0 resíduo foi submetido a cromatografia em sílica gel (eluente de hexano/acetato de etilo) para proporcionar l-isopropil-4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-lH-pirazol-3-amina como um sólido; ΧΗ RMN 400 Mí-Iz (CDC13) δ 8,23 (d, J=5,6 Hz, 1H) , 7,60 (s, 1H) , 6,83 (d, J=5,6 Hz, 1H) , 5,23 (d, J= 2,8 Hz, 2H) , 4,21-4,25 (m, 1H) , 2,50 (s, 3H) , 1,37 (d, J=6,8 Hz, 6H); MS m/z: 250,1 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: l-Etil-4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-lH-pirazol-3-amina e l-Metil-4-(2 -(metiltio)pirimidin-4-il)-lH-pirazol-3-amina. Intermediário. 4-(3-Iodo-l-isopropil-iH-pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina:

Uma mistura de Intermediário l-isopropil-4-(2- (metiltio)pirimidin-4-il)-lH-pirazol-3-amina (4,0 g, 16,0 mmol), isopentilnitrito (13,2 g, 112 mmol), e iodeto de metileno (30 ml) foi aquecida a 100 °C durante 3 h.. A remoção dos voláteis sob vácuo proporcionou um resíduo escuro, que foi purificadG por meio de cromatografia em sílica gel (2:1 eluente de hexano/acetato de etilo) para propiciar o composto do título corno um sólido; MS m/z: 361,1 (M -i- 1) .

De maneira similar, foram preparados: 4-(3-Iodo-l-etil-lH-pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina; 4-(3-Iodo-l-metil-lH- pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina; e 4- (3-iodo·- lH-pirazol-4 il) -2- (metiltio) pirimidina.

Intermediário. 4-(3-lGdo-l-(tetrahidrG-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina.

Uma solução de 4-(3-iodo-lH-pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina (270 mg, 0,85 mmol) e monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (32 mg, 0,17 mmol) em 3,4-dihidro-2H-piran (1 ml) foi aquecida a 60 °C durante 5 h. A mistura arrefecida foi diluída com acetato de etilo, e a misturei foi lavada com água e salmoura, e então seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. O resíduo foi submetido a cromatograf ia em sílica gel (10 % de acetato de etilo em eluente de hexanos) para proporcionar o composto do título. MS (m/z): 402,7 (M+l).

Intermediário. 4-(3-Iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-2-(metilsulf onil) pirimidina.:

A uma solução de Intermediário 4-(3-iodG-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-2-(metiltio)pirimidina (4,51 g, 12,5 mmol) em diclorometano (60 ml) a 0 °C foi adicionado ácido m-cloroperbenzoico (3,65 g, 77 % de pureza, 16,3 mmol). A mistura foi agitada a 0 °C sob azoto durante 3 h, então foi diluída com acetato de etilo e lavada com solução de carbonato de potássio aquoso e salmoura.. A camada orgânica foi seceL em sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada para proporcionar 4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-2-(metilsulfonil)pirimidina como um sólido. MS m/z: 393,0 (M + 1) .

De maneira similar, foram preparados: 4-(3-Iodo-l-etil-lH-pirazol-4-il)-2-(metilsulfonil)pirimidina; e 4-(3-Iodo-l-metil-lH-pirazol-4-il)-2-(metilsulfonil)pirimidina.

Intermediário. l-Benzilideno-2-isopropilhidrazina A um balão de fundo redondo contendo acetato de sódio anidro (8,2g, 0,1 mol) em 125 ml 50 % de etanol foi adicionado sal de isopropilhidrazina HC1 Q]_ i g q 1 mol) e benzaldeído (10,6 g, 0,1 mol) . A mistura fQj_ agitada a ta durante 20 h. A reação foi extraída com éter (3 x 250 ml) As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa de bicarbonato de sódio e salmoura e secas em sulfato de sódio. Filtração, concentração, e co-evaparaçáo com tolueno (3x) proporcionou o composto do título como um óleo. MS m/z 163,3 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados; i-Benzilideno-2-etilhidrazina partindo de oxalato de stilbidraz;Lria( usando metanol e trietilamina no lugar de etanol e acetato de sódio, respetivamente; e l-Benzilideno-2-metilhidrazina partindo de metilhidrazina, usando metanol como solvente, sem adicionar nenhuma base.

Intermediário. 2-((2-Benzilideno-l- isopropilhidrazinil)metileno)-malononitrilo:

Uma solução de Intermediário l-benzilideno-2-isopropilhidrazina (12,9 g, 0,079 utol) em 200 ml de THF anidro foi arrefecida num banho de gelo seco/acetona sob uma atmosfera de árgon. A esta solução foi adicionado n-butillítio (1,6 M em hexanos, 66 ml, 0,106 mol) via seringa. Após completar a adição, a mistura foi agitada na temperatura de gelo seco durante mais 5 minutos. Uma solução de (2-(etoximetileno)malononitrilo (13,6 g, 0,11 mol) em THF (30 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada na temperatura de gelo seco durante 0,5 h, e então foi extinta com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A mistura de reação extinta foi deixada que se aquecesse até a ta e foi extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram combinadas, secas em sulfato de sódio, filtradas, e concentradas. 0 resíduo foi suspenso em etanol com sonicação. 0 precipitado resultante foi colhido via filtração e lavado com uma quantidade pequena de etanol frio para obter 2-((2-benzilideno-l- isopropilhidraziniUmetileno)malononitrilo como um sólido amarelo. 0 licor mãe foi concentrado e o resíduo purificado por meio de cromatograf ia em coluna de sílica gel (1:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para propiciar 2-((2-benzilideno-1-isopropilhidrazinil)metileno)malononitrilo adicional. MS m/z 239,2 (M + 1).

Intermediário. 2-((2-Benzilideno-l- etílhidrazinil)metileno)-malononitrilo:

A uma solução de 2 (etoximetileno) malononitrilo (15,2 g, 0,124 mol) em 100 ml tolueno foi adicionado Intermediário l-benzilideno-2-etilhidrazina (18,4 g, 0,124 mol) . A mistura foi deixada que repousasse até a temperatura ambiente, e um precipitado formado. A mistura de reação foi agitada durante mais 16 h. 0 precipitado foi colhido num filtro e lavado com uma quantidade pequena de etanol frio para obter 2-( (2-benzilideno-l- etilhidrazinil)metileno)malononitrilo como um sólido.

De maneira similar preparado foi 2-((2-Benzilideno-l-meti.lhidrazin.il) -metileno) malononitrilo.

Intermediário. 3 -Amino·-· 1 -isopropil-lH-pirazol -4 - carbonítrilo

Uma mistura de Intermediário 2- ( (2-benzilideno-1™ isopropilhidrazinil)-metileno)malononitrilo (9,42 g, 40 mirto 1) , ácido clorídrico concentrado (5 ml) , e etanol (50 ml) foi aquecida a refluxo durante 20 min. A mistura de reação foi concentrada e éter (50 ml) foi adicionado. A mistura foi sonicada, então a camada superior de éter foi descartada. Ao resíduo foi adicionado 20 ml de solução aquosa de hidróxido de sódio a 5 N e a mistura foi extraída com diclorometano (3x) . As camadas orgânicas foram combinadas, secas em sulfato de sódio, filtradas, e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatograf ia em, coluna de sílica gel (1:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para propiciar 3-amino-1-isopropil-lH-pirazol-4-carbonítrilo como um sólido castanho. ]Ή RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 8,09 (s, 1H) , 5,51 (s, 2H) , 4,22 (m, 1H) , 1,31 (d, J=7 Hz, 6H) ; MS m/z 151,2 (M + 1) .

De maneira similar, foram preparados: 3-amino-l-etil-lH-pirazol-4-carbonítrilo; e 3-amino-l-metiI-l H-pirazol-4-c arbonitr.il o.

Intermediário. 1-¢3-Amino-1-isopropil-lH-pirazol-4 - il)etanona

A uma solução de Intermediário 3-amino-l-isopropil-lH-pirazol-4-carbonitrilo (5,29 g, 36,5 mmol) em 200 ml de THF anidro a 0 °C foi adicionada solução de brometo de metilmagnésio (3 M em éter, 56,5 ml, 0,17 mol) . A mistura de reação foi aquecida a refluxo durante 4 h. A mistura foi arrefecida até 0 °C e foi então extinta com 10 % de ácido clorídrico aquoso ao pH neutro, A reação foi extraída com uma grande quantidade de 9:1 diclorometano/isopropanol. As camadas orgânicas foram combinadas e secas em sulfato de sódio, filtradas, e concentradas. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna de sílica gel (1:1 acetato de etilo/hexanos a 9:1 eluente de acetato de etilo/metanol) para propiciar o composto do título como um sólido castanho claro. LH RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 8,18 (s, 1H), 5,62 (s, 2H), 4,23 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,37 (d, J=7 Hz, 6H); MS m/z 168,2 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados:1-(3-Amino-1-etil-lH-pirazol-4-il)etanona; e 1-(3-Amino-l-metil-lH-pi razo 1 - 4 - i 1) etanona..

Intermediário. 1 (3 Iodo -1 - isopropil lH-pirazol --4-il)etanona

A uma solução de Intermediário 1-(3-amino-l-isopropil-lH-pirazoI-4-i.l) etanona (3,97 g, 24 mmol) e p- Ts0H.H20 (9,07 g, 48 mmol, 2 eq) em 150 ml de acetonitrilo a 0 °C foi adicionado gota a gota uma solução de nitrito de sódio (2,97 g, 43 mmol, 1,8 eq) e iodeto de potássio (8,0 g, 48 mmol, 2,0 eq) em 20 ml água. A mistura foi. agitada a esta temperatura durante 10 minutos e então deixada que se aquecesse até a ta e agitada durante 3 h. A mistura foi concentrada, e então diluída com água e neutralizada corn solução aquosa de carbonato de sódio até o pH 9 a 10. A mistura foi extraída com acetato de etilo (3x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de tiossulfato de sódio, secas em sulfato de sódio, filtradas, e concentradas. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia em coluna de sílica gel (1:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título como um sólido castanho claro. 1H RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ 8,51 (s, 1H) , 4,53 (m, 1H) , 2,37 (s, 3H) , 1,41 (d, J=7 Hz, 6H); MS m/z 279,1 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: l-(3-Iodo-l-etil-1 H-pirazol-4-il) etanona,· e 1-(3-Iodo-l-metil-l H-pirazol-4- il)etanona.

Intermediário. 3-(Dimetilamino)-1-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)prop-2-en-I-ona:

Uma mistura de Intermediário 1-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il) etanona (5,0 g, 18,0 mmol) e N, N- dimetilformamida dimetil acetal (50 ml) foi aquecida a 155 °C durante 20 η. A mistura foi concentrada sob vácuo para proporcionar o composto do título bruto. Ms m/z 334,0 (M + 1) .

De maneira similar, foram preparados: 3- (Dimetilamino)-1-(3-iodo-l-etil-lH-pirazol-4-il)prop-2-en- 1-ona; e 3-(Dimetilamino)-1-(3-iodo-l-metil-lH-pirazol-4-i1) prop-2 -en-1-ona.

Intermediário. 4--(3- Iodo--1 - isopropil - lH-pirazol - 4 - il)pirimidin-2-amina

IJtria mistura de Intermediário bruto 3- (dimeti.Lamino) -1-(3 íodo 1 -isopropi 1 - 1H-pirazol-4 ~i 1) prop- 2-en-l-ona (4,0 g, 12.0 mmol), cloridrato de guanidina (2,63 g, 27,6 mmol), hidróxido de lítio (635 mg, 27,6 mmol), e sec-butanol (50 ml) foi aquecida com agitação num recipiente de reação vedado a 110 °C durante 20 h. A mistura de reação arrefecida foi concentrada, então água foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etilo. Os extratos combinados foram secos em sulfato de sódio, filtrados, e concentrados. Acetato de etilo foi adicionado ao sólido resíduo, e a mistura foi sonicada. 0 produto sólido foi colhido num filtro, enxaguado com acetato de etilo, e seco para dar o composto do título como um sólido ocre. MS m/z 330.0 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: 4-(3-Iodo-l-etil-lH-pirasol-4-.il)pirirnidin-2-amina; e 4- (3-Iodo-l-metil-ÍH- pirazol-4-il)pirimidin-2-amina.

Intermediário. 4-(3-Iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4- il)pirimidin-2-ol

Nitrito de sódio (314 mg, 4,55 mmol) foi adicionado em porções a uma mistura agitada de Intermediário 4-(3-ÍGdo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-amina (500 mg, 1,52 mmol) e ácido trifluoroacético (15 ml) a 0 °C. A mistura foi deixada que se aquecesse até a ta e foi agitada durante 1 h, então o solvente foi removido sob vácuo. A mistura bruta foi diluída com acetato de etilo e lavada com solução saturada de carbonato de potássio aquoso e salmoura para proporcionar o composto do título como um sólido. MS m/z 331,0 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: 4-(3-Iodo-1--etil-IH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ol; e 4-(3-Iodo-l-metil-lH-pirazol- 4-il)pirimidin-2-ol.

Intermediário. 2-Cloro-4 -(3 - iodo-1-isopropil-IH-pirazol-4 -il)pirimidina

Uma solução de Intermediário 4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazo.l-4-il) pirimidin-2-ol (438 mg, 1,33 mmol) em oxicloreto de fósforo (10 ml) foi aquecido a 110 °C durante 16 h. A mistura foi concentrada sob vácuo, entãG solução aquosa de bicarbonato de sódio foi cuidadosamente adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etilo. Os extratos orgânicos combinados foram secos em sulfato de sódio, filtrados, e concentrados para proporcionar o composto do título como um sólido amarelo. MS m/z 349,0 (M + D .

De maneira similar, foram preparados: 2-Cloro-4-(3-iodo-1-etil-lH-pirazol-4-il)pirimidina; e 2-Cloro-4-(3-iodo-1-metil-IH-pirazol-4-il)pirimidina.

Intermediário, l-hidroxipropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo

A uma solução ae (S) -aianinol (10 g, 130 mmol) e bicarbonato de sódio (32,8 g, 390 mmol) em THF-H20 (1:1, 650 ml) a 0 °C roi adicionado gota a gota cl oro forma to de metilo (11,4 ml, 143 mmol). A mistura foi agitada e deixada que se aquecesse até a ta ao longo de 4 h, e foi então extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa de hidróxidG de sódio a 1 N e salmoura, e foi então seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada, para dar o composto do título bruto, que foi usado sem purificação adicional. MS m/z 134,1 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: 1-hidroxipropan- 2-ilcarbamato de (R)-metilo, usando (R)-alinol no lugar de (S) ~a.lan.inol; e l-hidroxipropan-2-ilcarbamato de (S)-l,l-dimetiletilo usando di-t-butil-dicarbonato no lugar de cloroformato de metilo.

Intermediário, l-azidopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo:

A uma solução de Intermediário l-hidroxipropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (2,65 g, 20 mmol) e trietilamina (7,0 ml, 50 mmol) em diclorometano anidro (100 ml) foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (1,91 ml, 23,9 mmol). A mistura foi agitada a ta durante 3 h e foi então extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com solução de hidróxido de sódio a 1 M e salmoura, e foi então seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. 0 produto mesilato bruto foi então dissolvido em DMF seco (70 ml) e azida de sódio (5,2 g, 80 mmol) foi adicionada. A mistura foi aquecida com agitação a 80 °C durante 2 h. A mistura de reação arrefecida, foi concentrada, e o resíduo foi dividido em partições entre acetato de etilo e salmoura. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura; seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatograf ia em sílica gel (8:1 eluente de hexano/acetato de etilo) para propiciar 1-azidopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. MS m/z 159,1 (M + 1) .

De maneira, similar, foram preparados: 1 - az idopropan - 2 -ilcarbamato de (R)-metilo; e l-azidopropan- 2-ilcarbamato de (S)-1,1-dimetiletilo.

Intermediário. 1-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo

A uma solução de Intermediário l-azidopropan-2™ ilcarbamato de (S)-metilo (2,86 g, 18,2 mmol) em acetato de etilo (200 ml) foi adicionado 10 % de paládio em carbono (húmido, 286 mg) , 0 balão foi desgaseifiçado e preenchido de novo com gãs hidrogénio (balão, 1 atmosfera) , e a mistura foi agitada a ta durante 16 horas· A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com acetato de etilo. O filtrado foi concentrado para dar 1-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo bruto, que foi usado sem purificação adicional. 1H RMN 400 MHz (CDCla) δ 4,79 (s, 1H) , 3,71-3,65 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H) , 2,75 (dd, 1H), 2,65 (dd, 1H), 1,14 (d, 3H); MS m/z 133,1 (M + 1) .

De maneira similar, foram preparados: 1-aminopropan-2-ilcarbamato de (R)-metilo; e 1-aminopropan- 2-ilcarbamato de (S)-1,1-dimetiletilo.

Intermediário. 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4- il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo:

Uma solução de Intermediário 2-cloro-4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidina (1,4 g, 4,01 mmol), 1-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (0,8 g, 6 mmol) e trietilamina (2,8ml, 20 mmol) em ísopropanol (30ml) e dioxano (20 ml) foi aquecida num recipiente vedado a 125 °C durante 48 horas. A mistura arrefecida foi concentrada sob vácuo, e bicarbonato de sódio aquoso foi adicionado ao resíduo. A mistura foi extraída com acetato de etilo, e os extratos combinados foram secos em sulfato de sódio, filtrados, e concentrados. 0 resíduo bruto foi purificado por meio de cromatograf ia em coluna de sílica gel (1:2 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título como um sólido branco. MS m/z 445,0 (M + D .

De maneira similar, foram preparados: l-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-il-carbamato de (R)-metilo; 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol --4 -il) pirimidin- 2 -i lamino) propan-2-ilcarbamato de (S)-terc-butilo; 3-(4-(3- iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propanonitrilo; 4-(3-iodo-l- isopropil-lH-pirazol-4-il)-N-metil- pirimidin-2-amina; e N1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-il)-N2, N2-dimetiletano-l,2-diamina.

Intermediário. N-(3-bromo-2,4-difluorofenil)propano-1- sulfonamida

Uma solução de 3-bromo-2,4-difluoroanilina (4,16 g, 20 rnmol, documento EP184384), cloreto de n-propanosulfonilo (4,6 ml, 40 mmol) , piridina, (8 ml), DMAP (97 mg), e DCM (100 ml.) foi agitado a ta durante 16 h. Solução aquosa de bicarbonato de sódio foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (8:1 a 3:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para dar o compGSto do título. MS m/z 313,9 (M + 1).

Intermediário. 3-Fluoro-4-iodopiridin-2-amina

Uma solução de 2-amino-3-fluoropiridina (1,0 g, 8,9 mmol) em THF anidro (4 0 ml) foi tratada gota a gota a -78 °C com n-butillítio (1,6 M em hexanos, 13,9 mi, 22,3 mmol).

Em seguida à adição, a mistura foi agitada a -78 °C durante 1 h, então uma solução de iodo (10,2 g, 40,1 mmol) em THF (20 ml) foi adicionada. A mistura foi extraída com acetato de etilo, e os extratos orgânicos foram lavados com tiossulfato de sódio, bicarbonato de sódio e salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (8:1 a 2:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título. MS m/z 238,9 (M + 1) .

De maneira similar preparado foi: 3-cloro-4- iodopiridin-2 -amina.

Intermediário. 3-Bromo-2,5,6-trifluoroanilina

A um tubo de micro-ondas foi adicionado 1-bromo-2,3,4,5-tetrafluorobenzeno (1,0 g) e 28 % de hidróxido de amónio aquoso (5 ml). A mistura foi aquecida sob irradiação de micro-ondas a 150 °C durante 2 h, então a. mistura foi vertida em água e extraída com hexano. A camada orgânica foi separada, seca com MgS04, então concentrada. 0 resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel (9:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título como um líquido incolor. RMN (400 MHz, CDCl/; δ 6,75 (m, 1H) , 3,95 (s 1, 2H) ppm; MS m/z: 226, 228 (M+H)+.

Intermediário.2,4-Dibromo-3,6 -di c1oroani1ina

Uma mistura de 2,5-diclGroanilina (0,2 g) , W-bromosuccinimida (0,48 g) e THF (20 ml) foi agitada a ta durante 2 h. 0 solvente foi removido, e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel (8:2 eluente de hexanos/acetato de etilo) para propiciar o composto do título. MS m/z: 318 (M+H)+.

Intermediário. 1,3-Dibromo-2,5-diclorobenzeno

Uma mistura agitada de 2,4-dibrGmo-3,β-dicloroanilina (5,0 g), nitrito de terc-Butilo (3,3 g) e EtOH (50 ml) foi aquecida num tubo vedado a 50 °C durante 2 b. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia flash em sílica gel (eluente de hexanos) para propiciar o composto do título. MS m/z: 303 (M+H)+. Intermediário. 3-Bromo-2-c'loro-5-fluoroanilina

Etapa 1. 3-bromo-2-cloro-N-(difenilmetileno)-5- f luoroanilina. Uma mistura de 2,6-dibromo-4 f luoro-1-clorobenzeno (865 mg, 3 mmol), benzofenona imina (0,61 ml, 3,6 mmol), Pd2 (dba) 3 (137 mg, 0,15 mmol), t-butóxido de sódio (432 mg, 4,5 mmol), (S)-BINAP (280 mg, 0,45 mmol) , e tolueno (30 ml) foi aquecida a 80 °C durante 16 h. A mistura foi extraída com acetato de etilo e a fase orgânica combinada lavada com salmoura. A fase orgânica foi. seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatograf ia flash em sílica gel (40:1 a 20:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título como um pó. MS m/z 388,9 (M + 1).

Etapa 2. 3-Bromo-2-cloro~5-fluoroanilina. Uma solução de 3-bromo-2-cloro-N-(difenilmetileno)-5-fluoroanilina (1,16 g) em THF (20 ml) foi tratada com ácido clorídrico a 2 N (1,5 ml, 1 eq) e a mistura foi agitada a ta durante 2 h. A mistura foi extraída com acetato de etilo e a fase orgânica combinada lavada com salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 resíduo bruto foi submetido a cromatografia em sílica gel (40:1 a 15:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título, contaminado por benzofenona. MS m/z 223,9 (M + 1).

De maneira similar, foram preparados: 3-bromo-2,5-dicloroanilina; 3-bromo-2-cloro-5-metilanilina; e 3-bromo-2,5-difluoroanilina.

3-bromo-2,5- 3-bromo-2-cloro-5- 3-bromo-2,S- dicloroanilina metilanilina difluoroanilina

Intermediário. Ácido 3-bromo-5-cloro-2-fluorobenzoico

Uma solução de 2-bromo-4-cloro-l-fluorobenzeno (4,31 g, 2 0 mmol) foi adicionada gota a. gota a uma solução a -78 °C de LDA em THF (preparado a partir de diisopropilamina (3,38 ml, 24 mmol) e n-BuLi (1,6 M, 13,1 ml, 21 mmol)). A mistura foi agitada a -78 °C durante 1 h, e então foi transferida, lentamente (~ 30-60 min) via cânula a uma mistura agitada a -78 °C de gelo seco e THF (40 ml) . A mistura foi agitada a -78 °C durante 1 h, e então foi deixada que se aquecesse até a ta (gãs evolução). A mistura foi concentrada, e foi então tratada com 50 ml de solução de hidróxido de sódio a 1 N. A mistura foi extraída com acetato de etilo (descartada). A camada aquosa foi acidificada com ácido clorídrico a 1 N, e então foi extraída com clorofórmio (3 x 400 ml) . 0 extrato de clorofórmio foi seco em sulfato de sódio, filtrado, e concentrado para proporcionar o composto do título bruto. 0 produto foi contaminado com uma quantidade pequena do produto isomérico ácido 2-brorno-6-cloro-3- fluorobenzoico. 1H RMN para o composto do título ácido 3bromo-5-cloro--2--f luorobenzoico: (400 MHz, CDC13) δ 7,93 (dd, 1H, J = 2,8, 5.6 Hz), 7,79 (dd, 1H, J === 2,8 , 5,6 Hz) ppm.

De maneira similar, foram preparados: ácido 3-bromo- 2.6 --dif luorobenzoico; e ácido 3 - bromo - 2 - f luoro - 5 - metilbenzoico.

Intermediário. 3-bromo-5-cloro-2-fluorofenilcarbamato de terc-butilo

Uma solução de Intermediário bruto ácido 3-bromo-5-cloro-2-fluorobenzoico (2,03 g, 8 mmol), difenilfosforilo azida (2,07 ml, 9,6 mmol, 1,2 eq) , e Dl PE A (1,67 ml, 9,6 mmol, 1,2 eq) em 1:1 t-butanol/tolueno (25 ml) foi aquecido a 110 °C durante 3 6 h. A mistura foi concentrada, então dividida em, partições entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, e foi então seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (30:1 1 a 10:1 eluente de hexanos/acetato de etilo) para proporcionar o composto do título. MS m/z: 267,8 (M+H) + . (M-tBu) .

De maneira similar, foram preparados: 3-bromo-2,6-difluorofenilcarbamato de terc-butilo; e 3-bromo-2-fluoro-5- metilfenilcarbamato de terc-butilo.

Intermediário. 3-Bromo-5-cloro-2-fluoroanilina

Uma solução de 3-bromo-5-cloro-2-fluorofenilcarbamato de terc~butilo (900 mg, 2,78 mmol) era DCM/TFA (1:1,20 ml) foi agitada a ta durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada, então o resíduo foi absorvido em acetato de etilo e lavado com bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada para proporcionar o composto do título bruto (736 mg). MS m/z 223,9 (M+l). I n t e rmed i ã r i o. 5 bromo - 3 me toxi-2 -me til anilina:

Uma mistura heterogénea de reação de 4-bromo-2-metoxi-6-nitrotolueno (500 mg, 2,032 mmol.) , ácido acético (20 ml), e ferro (1135 mg, 20,32 mmol) foi agitada a ta durante 24 h. Acetato de etilo foi adicionado, então a mistura foi filtrada através de celite e o filtrado concentrado. 0 resíduo foi dividido em partições entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo adicionai. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, então secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas para propiciar o composto do título. MS m/z: 218,0 (M+H)+.

Intermediário. 5-cloro-2-flucro-3 -(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborOlan-2-.il) fenilcarbamato de terc-butilo:

Uma mistura de Intermediário 3-bromo-5-c'lo‘>O-2-fluorofenilcarbamato de terc-butilo (1,45 g, 4,46 mmol), bis(pinacolato)diboro (1,7 g, 6,69 mmol), acetato de potássio (1,53 g, 15,6 mmol), PdCI2 (dppf) -CH2C12 (163 mg, 0,22 mmol), e dioxano (100 ml) foi aquecida num tubo vedado a 100 °C durante 16 h. A mistura bruta de reação foi absorvida em acetato de etilo e lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio e salmoura. A Ccimadci orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. 0 composto bruto foi diluído com hexano quente (6 00 ml) , aquecido até 65 °C durante 30 min, então arrefecido até a temperatura cimbiente. A mistura castanha foi filtrada através de Celite e o bolo de filtro foi lavado com hexanos. Os filtrados combinados foram concentrados para propiciar o composto do título bruto como um óleo amarelo. MS m/z 233 (M-pinacol-tBu).

Uma mistura de Intermediário 2-(2-fluoro-3-nitrGfenil)-4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolano (500 mg) , 10 % de paládio em carbono (50 mg) e acetato de etilo (20 ml) foi agitada sob 1 atmosfera de hidrogénio durante 16 h. A mistura foi salpicada com azoto e filtrada. O filtrado foi concentrado para proporcionar o composto do título, que foi usado sem purificação adicional. MS m/z 237,1 (M + 1).

Exemplo 1 N- [ (2S)-1-[(4-(3-r2,6-difluoro-3-(propano-1-sulfonamidc·) fenill-1- (propan-2-il) -lH-pirazol-4-il}pirlmiáln-2- 11)aminolpropan-2-il]carbamato de metilo (Composto 7 no quadro 1)

Uma mistura de Intermediário bruto N-(2,4-difluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)propano-1- sulfonamida (854 mg), Intermediário 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan- 2-ilcarbamato de (S)-metilo (350 mg, 90 % puro), tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (90 mg), 2 M solução aquosa de carbonato de sódio (6 ml) , tolueno (50 ml) , e etanol (6 ml) foi aquecida a 80 °C durante 16 h. A mistura arrefecida foi extraída com acetato de etilo e os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (70:1 a 40:1 eluente de DCM/metanol) para proporcionar o composto do título.

Exemplo 2 N- [ (2S)-1-((4-[3-(2-cloro-5-fluoro-3-metanosulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-lH-pirazol-4-illpirimidin-2- il)amino) propan-2-il] carbamato de irietllo (Composto 15 no quadro 1)

Etapa 1. 1-(4-(3-(3-amino-2-cloro-5-fluorofenil)-1- 1. s op r op i 1 -1H - p i r a z o 1 - 4 - i 1) p i r i mi di n - 2 - i 1 ami no) propan - 2 -ilcarbamato de (S)-metilo. Uma mistura de Intermediário bruto 2-cIoro-5~fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametiI-l,3,2-

dioxaborolan- 2-il)anilina (214 mg), Intermediário 1-Í4-(3 -iodo-1-isopropil-IH-pirazol-4 -il)pirimidin-2-ilamino)propan--2- ilcarbamato de (S)-metilo (68 mg, 0,14 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)-paládio(0) (16 mg), 2 M solução aquosa de carbonato de sódio (3 ml)), tolueno (18 ml), e etanol (3 ml) foi aquecida a 85 °C durante 16 h. A mistura foi extraída com acetato de etilo e os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (60:1 a 40:1 eluente de DCM/metanol) para proporcionar o composto do título (46 mg) contaminado com 1 - (4- (1 -isopropi 1 -1H-pirazol-4 -i 1) piritnidin - 2 -ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. MS m/z 462,1 (M + 1) .

Etapa 2. 1-(4-(3-(2-cIoro-5-fluoro-3- (metanosulfonamido) fen.il) -1 - isopropil - IH-pirazol-4 -il)pirimidin-2 -ilamino)propan-2 -ilcarbamato de (S)- metilo. Uma mistura do produto anilina da etapa 1 (46 mg), piridina (2 ml), trietilamina (1 ml), DCM (4 ml), e cloreto de metanosulfonilo (23 ul, 0,3 mmol) foi agitada a ta durante 16 h. A mistura bruta de reação foi concentrada, então o resíduo foi absorvido numa mistura de tolueno (9 ml) , etanol (1 ml) , carbonato de sódio (2 g) , e água (10 ml) . A mistura agitada foi aquecida a 85 °C durante 16 h. A preparação inicial como para a Etapa 1 proporcionou o produto bruto, que foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (60:1 a 40:1 eluente de DCM/metanol) para proporcionar o composto do título. Exemplo 3 N- [ (2S) -1- [ (4- (3- [5-cloro-2-fluoro-3- (joropano-l-sulfonamido) fenill-1- (propan-2-il) -lí-I-pirazol-4-ilIpirimidin- 2-il)aminolpropan-2-il]carbamato de metilo (Composto 1 no quadro 1)

Etapa 1. 1-(4-(3-(5-cloro-2-fluoro-3-(cere- butoxicarbonilamino) fenil) 1 -isopropil lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. Uma mistura de Intermediário bruto 5-cloro-2-fluoro-3- (4,4,5,5- tetramet.il-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenilcarbamato de terc-butilo (2,0 g) , Intermediário 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (600 mg, 1,34 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (150 mg, 0,13

mmol), 2 M solução aquosa de carbonato de sódio (6,7 ml, 13,5 mmol), tolueno (80 ml), e etanol (6 ml) foi aquecido a 80 °C durante 16 h. A mistura foi extraída com acetato de etilo e os extratos orgânicos combinados foram, lavados com salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (80:1 a 60:1 eluente de DCM/metanol) para proporcionar o composto do título contaminado com óxido de trifenilfosfina. MS m/z 562,1 (M + 1) .

Etapa 2. 1-(4-(3-(3-atnino-5-cloro-2-f luorofenil)-1- isopropi1-lH-pirazol-4 -i1)pirimidin-2 -ilamino)propan-2 -ilcarbamato de (S)-metilo. Uma solução de 1-(4-(3-(5-cloro-2-fluoro-3-(terc-butoxicarbonilamino)fenil)-1-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato(S)-metilo parcialmente purificado (1,15 g) em DCM (50 ml) e TFA (20 ml) foi agitada a ta durante lh. Os solventes foram removidos, então solução aquosa de bicarbonato de sódio foi adicionada. A mistura foi extraída, com acetato de etilo, e então os extratos orgânicos combinados foram lavados com bicarbonato de sódio e salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto foi obtido por meio de cromatografia em sílica gel (60:1 a 40:1 eluente de DCM/metanol); MS m/z 462,1 (M + 1).

Etapa 3. N-[(2S)-1-[ (4-{3-[5-cloro-2-fluoro-3-(propano-1-sulfonamido)feniil-1-(propan-2-il)-lH-pirazol-4-il}pirimidin-2-il)amino]propan-2-il]carbamato de metilo. Uma mistura de 1-(4™ (3--(3-amino-5--cloro-2--fluorofenil)-1-í sopropi1-IH-pirazol-4 -il)pirimidin-2 -ilamino)propan-2 -ilcarbamato de (S)-metilo (41 mg, 0,09 mmol), trietlilamina (1 ml), e DCM (4 ml) foi tratado com propanosulfonilo cloreto (40 mg, 0,27 mmol). A mistura foi agitada a ta durante 16 h. A mistura bruta foi concentrada, e o resíduo foi absorvido numa mistura de tolueno (9 ml) , etanol (1 ml) , carbonato de sódio (2 g) , e água (10 ml) . A mistura agitada foi aquecida a 85 °C durante 16 h. A preparação inicial como para a Etapa 1 proporcionou o produto bruto, que foi purificado por meio de cromatograf ia em sílica gel (60:1 a 40:1 eluente de DCM/metanol) para proporcionar o composto do título.

Exemplo 4 N-[(2S)-l-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanosulfonamidofenil) -1- (oxan-2-.il) -lH-p.irazol-4- illpirimidin-2- iljamino)propan-2-il]carbamato_____de____metllo (Composto 33 no quadro 1) e N-[ (2S)-1-((4-[3-(5-cloro-2-f luoro- 3 - metanosul£onamldof enl 1) - 1H- pi razol -4 - iI] piritttidin-2-il-lamino)propan-2-il]carbamato de metilo (Composto 31 no quadro 1)

Etapa 1,5-Cloro-2-fluoro-3-(4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il) -1 - (tetrahidro-2H-piran-2-il) -lH-pirazol--3-11) anilina. Preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 3, etapa 1, partindo de intermediário 4-(3-iodo-l-(tetrahidro-2H- piran-2-.il) -lH-pirazol-4-il) -2-

(metiltio)pirímidina e intermediário 5-cloro-2-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)anilina. MS m/z 420,0 (M + 1).

Etapa 2 . N- (5-Cloro-2-fluoro--3- (4- (2- (metiltio)pirimidin-4-il)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-lH-pirazol-3-il) fenil) metanosulfonamida) e N- (5-c:loro-2-f luoro-3-(4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-lH-pirazol-3-il)fenil)-N- (metilsulfonil)metanosulfonamida. A uma solução de 5-cloro-2-fluoro-3-(4-(2-(metiltio)pirimidin-4-il)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-lH-pirazol-3-il)anilina (233 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (2 ml) em diclorometano (10 ml) foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (0,13 ml, 1,66 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 16 h, proporcionando uma mistura dos compostos do título (análise de LCMS). Acetato de etilo foi adicionado e a mistura foi lavada com água e salmoura, então a camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada para proporcionar a mistura bruta do título, que foi usada sem purificação adicional. MS m/z monossulfonamida 498,0 (M + 1); bis sulfonamida 576,0 (M + 1)

Etapa 3. N - [ {2 S) - 1 ({4 - [ 3 (5 cloro - 2 f luoro -3- metanosulfonamidofenil)-1-(oxan-2-il)-lH-pirazol-4-illpirimidin-2-il}amino)propan-2-il]carbamate de metilo. A mistura de produto bruto da Etapa 2 foi dissolvida em THF~H20 (1:1, 30 ml) e tratada a ta com Oxone® (1,68 g, 2,75 mmol) . A mistura foi agitada a ta durante 16 h, então acetato de etilo foi adicionado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio, água, e salmoura, então foi seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em NMP (5 ml} e tratado com intermediário 1-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (146 mg, 1,1 mmol) e carbonato de sódio (233 mg, 2,2 mmol) . A mistura foi aquecida com agitação a 110 °C durante 16 h. A mistura de reação arrefecida foi diluída com acetato de etilo, e foi então lavada com água e salmoura. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada, e concentrada. 0 resíduo foi submetido a cromatografia em sílica gel (2 % de metanol em eluente de diclorometano) para proporcionar o composto do título.

Etapa 4 . N-((2S) -1- ({4- [3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanosuifonamidofenil)-lH-pirazol-4-il]pirimidin-2-il}amino)propan-2-il]carbamato de metilo. A uma solução de (2S)-1-(4-(3-(5-cloro-2 -fluoro-3 - (metilsulfonamido)fenil)- 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)- lH-pirazol-4-ii)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilearbamato de metilo (94 mg, 0,16 mmol) em MeOH (15 ml) foi adicionado ácido clorídrico concentrado (0,5 ml). A mistura foi agitada a ta durante 16 h. Bicarbonato de sódio aquoso foi adiciGnadG para ajustar o pH até 9 e a mistura foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. 0 produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em sílica gel (30:1 a 15:1 diclorometano/metanol eluente) para proporcionar o composto do título.

Exemplo 5 N-[(2S)-l-({4-[3-(5 -cloro-2 -flucro-3- metanosulfonamiGofen.il) -l- (propan-2-il) -lH-pirazol-4- illpirimidin-2-________i1}amino)propan-2 -i1]carbamato de metilo (Composto 9 no quadro 1)

Cloreto de metanosulfonilo (0,277 ml, 3,57 mmol) foi adicionado a uma solução de 1-(4-(3-(3-amino-5- cloro-2-fluorofenil)-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (550 mg, 1,2 mmol) em DCM (30 mi) e piridina (10 ml) , e a mistura foi agitada a ta durante 16 h. A solução aquosa de bicarbonato de sódio foi adicionada, e a mistura foi extraída com acetato de etilo e lavada com salmoura. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e concentrada. 0 produto bruto foi purificado por meio de crGmatografia em sílica gel (60:1 a 40:1 DCM/metanol) para proporcionar o composto do título. Uma síntese alternativa é descrita no exemplo 6, infra.

Também isolado a partir da mistura de reação foram: N~ [ (2S)-2-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3-metanosulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-lH-pirazol-4-il]pirimidin-2-il}amino)propil]carbamato de metilo (Composto 32 no quadro 1) ; N-{3-[4-(2- aminopirimidin-4-il)-l-(propan-2-il)-1H- pirazol-3-il]- 5-cloro-2-fluorofenilJmetanosulfonamida (Composto 3 0 no quadro 1) .

Exemplo 6 N- [ (2 S) -1 - ({4 - [ 3 - (5 cloro - 2 f luoro - 3 - metanosulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-IH-pirazol-4-iillpirimidin-2- il|amino)propan-2-il] carbamato de metilo (Composto 9 no quadro 1)

Etapa 1. l-Eenzilideno-2-isopropilhidrazina. Num reator equipado com um agitador mecânico, um termómetro, e um funil de adição sob purga de azoto foram carregados sal hidrogenocloreto de isopropilhidrazina (712 g, 6,43 mol), acetato de sódio (528 g, 6,43 mol), e 50 % de etanGl (4500 ml) . A mistura foi agitada a 20 °C durante 5 min. Benzaldeído (683 g, 6,43 mol) foi adicionado enquanto se mantinha a temperatura de lote abaixo de 23 °C. A mistura foi agitada a 20 °C ao longo de 20 h. Tolueno (6 500 mi) foi adicionado e agitação foi mantida durante 5 min, A camada orgânica foi separada. A solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (4800 ml) foi lentamente adicionada à camada orgânica vigorosamente agitada (Nota: o pH da camada aquosa era ~8,0) . A camada orgânica foi separada e lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (3 000 ml) , Então a camada orgânica foi separada e concentrada sob vácuo (50-+20 torr) a 40 °C para dar o composto do título como um óleo amarelo (usado sem purificação adicional).

Etapa 2. 2-((2-Benzilideno-l- isopropilhidrasinil)metileno)-maiononitrilo. A um balão equipado com um agitador mecânico, um termómetro, e um funil de adição sob purga de azoto foram carregados (etoxietilidina)maiononitrilo (755 g, 6,18 mol), DMAP (150 g, 1,23 mol), e etanol (6400 ml). A mistura fci agitada para dar uma solução de cor laranja escuro e uma endoterma de 2 0 °C a 12 °C foi observada. 1-Benzilideno- 2-isopropilhidrazina {1101 g, bruto) foi adicionada lentamente ao longo de 15 min para dar uma exoterma a 32 °C e uma suspensão laranja. A suspensão laranja foi aquecida até 50 °C e mantida a 50 °C durante 30 min para dar uma suspensão de cor castanho-escuro. Etanol (3200 ml) foi adicionado à mistura e a mistura foi arrefecida até 20 °C e mantida a 20 °C durante 1 h. A suspensão foi filtrada e o bolo sólido foi enxaguado com etanol (3000 ml). 0 sólido foi colhido e seco sob vácuo a 40 °C/5 torr durante 3 h para proporcionar o composto do título como um sólido amarelo. Pureza de HPLC >99 %.

Etapa 3. 3-Amino-l-isopropil-lH-pirazol-4-carbonitrilo. A um balão equipado com um agitador mecânico, um termómetro, um condensador, e um funil de adição sob purga de azoto foram carregados 2-((2-benzilideno-l-isopropilhidrazin.il) metileno) -malononitrilo (632,6 g, 2,65 mol) , MeOH (2,5 L) , e HC1 cone. (12 N) (329,0 ml, 3,94 mol) . A mistura foi aquecida até 63 °C e mantida a 6 3 °C durante 3 0 min para dar uma solução laranja. A mistura foi arrefecida até 15 °C. Heptano (4 L) e MTBE (1 L) foram adicionados e a mistura agitada durante 5 min. Então água (7,5 L) foi adicionada numa corrente ao longo de 30 min a 15 °C a. 25 °C. A mistura foi agitada 10 min a 25 °C após a adição de água ter sido completada. A camada de heptano/MTBE foi separada. A camada aquosa foi lavada com uma mistura (4:1 v/v) de heptano/MTBE (2 x 5 L) por meio de agitação de cada lavagem durante 10 min a 25 °C. As camadas foram separadas. Cloreto de sódio sólido (1 Kg) foi adicionado à camada aquosa. A solução saturada de carbonato de potássio aquoso foi então adicionada à camada aquosa lentamente para controlar a evolução de C02 e para ajustar o pH ~ 9,0. A camada aquosa foi então extraída duas vezes com CH2C12 (1 x 2,2 L, 1 x 800 ml). As camadas combinadas de CH2C12 foram secas em MgS04, filtradas e o filtrado foi concentrado sob vácuo (200 torr) numa temperatura de banho de 30 °C até que o peso residual fosse ~ 1 Kg. Heptano (6,0 L) foi lentamente adicionado (ao longo de ~ 20 min) à solução de CH2C12 com agitação e uma suspensão foi formada. A mistura foi concentrada sob vácuo (60 torr) numa temperatura interna de 25 °C até que o volume residual fosse - 6,2 L. A suspensão foi arrefecida até 15 °C e mantida a esta temperatura durante 10 min. 0 produto foi filtrado e o sólido foi lavado com heptano (1 L) . 0 sólido foi seco sob vácuo (5 torr) a 30 °C durante 4 h para proporcionar o composto do título como um sólido amarelo. Pureza de HPLC >99 %.

Etapa 4. 1-(3-Amino-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-etanona. A um balão equipado com um agitador mecânico, termómetro, refluxo condensador, capacidade de aquecimento/arrefecimento, funil de adição, e entrada/saída de azoto foi carregado 3-avnino-l-isopropil-lH-pirazol-4-carbonitrilo (274 g, 1,82 mol) e ciclopentil metil éter (2600 ml) a 20 °C sob azoto. A suspensão foi arrefecida até -10 °C. Complexo de Metillítio/brometo de lítio a 1,5 M em solução de dietil éter (6,0 L, 9,00 mol) foi adicionado gota a gota ao longo de 2,5 h a -10 °C a 0 °C. Quando a adição de metillítio se completou a suspensão de reação foi rapidamente aquecida até 5 °C a 10 °C e mantida neste intervalo de temperatura durante 1 h. A mistura foi arrefecida até 0 °C e HC1 a 2 N (6,0 L) foi adicionado gota a gota a 5 -10 °C. A camada orgânica (superior) foi separada e extraída com HC1 a 2 N (500 ml). As camadas aquosas combinadas foram agitadas a ta ao longo de 16 h. A mistura foi arrefecida até 15 °C e basifiçada com 50 % de NaOH (260,0 g) para dar um pH de ~ 11,0. A mistura foi extraída com CH2C12 (1x2,0 L, 1x1 L). As camadas combinadas de CH2C12 foram secas em MgS04, filtradas e concentradas sob vácuo para dar um sólido amarelo (278 g) . 0 sólido foi dissolvido em EtOAc (750 ml) após aquecimento até 65 °C. A solução foi arrefecida até a ta e uma suspensão foi obtida. Heptano (1500 ml) foi adicionado lentamente ao longo de 40 min a ta. A suspensão foi arrefecida até -10 °C e mantida a -10 °C durante 30 min. A suspensâG foi filtrada e o bolo de filtro foi enxaguado com heptano (300 ml) . 0 sólido foi seco sob vácuo (5 torr) a 40 °C durante 3 h para dar o composto do título como um sólido castanho claro. Pureza de HPLC >99 %. M.P. 136-139 °C.

Etapa 5. 1-(3-Iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-etanona. Um balão equipado com um agitador mecânico, um termómetro, e um funil de adição sob purga de azoto foi carregado com 1-(3-amino-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-etanona (250,0 g, 1,49 mol) e acetonitrilo (3725 ml). A mistura foi arrefecida até -20 °C. BF3.THF (313,1 g, 2,23 mol) foi adicionado gota a gota enquanto se mantinha a temp, interna < -10 °C. Nitrito de isoamilo (227,5 g, 1,94 mol) foi adicionado gota a gota enquanto se mantinha a temp, interna < -10 °C. A mistura foi deixada que se aquecesse até 10 °C e foi agitado a 10 °C durante 30 min. A mistura foi adicionada numa corrente fina a um balão contendo uma mistura de I2 (28,5 g, 0,112 mol), Kl (371,9 g, 2,24 mol) e acetonitrilo (1160 ml) a 10-15 °C com agitação vigorosa. A adição causou a evolução de azoto gás e uma exoterma ligeira. A mistura foi agitada a ta durante 30 min, HPLC mostrou que não ficou nenhum intermediário diazónio. Então bissulfito de sódio (157,1 g, 1,51 mol) em solução de cloreto de sódio a 8 % (4360 ml) foi adicionado a 15-20 °C. A mistura foi basifiçada com carbonato de potássio saturado até o pH - 8,5. A camada superior de acetonitrilo foi separada e concentrada sob vácuo para dar um resíduo oleoso. 0 óleo foi dissolvido em iPrOAc (2770 ml) e lavado com sdução saturada aquosa de carbonato de sódio (1100 ml). A camada iPrOAc foi separada e concentrada, a um volume residual de 1,5 L. Uma suspensão foi obtida, Ã suspensão foi adicionado heptane (5,5 L) ao longo de 30 min a 20 °C. A suspensão foi agitada durante 10 min a 20 °C após a adição de heptano ter sido completada. A suspensão foi filtrada e o sólido foi enxaguado com heptano (1 L) e então seco a 20 °C sob vácuo (5 torr) durante 16 h para dar o composto do título. MP: 90-92 °C.

Etapa 6. 3-(Dimeti lamino)-1-(3-iodo-l-isopropil--lH-pirazol-4-il)-prop-2-en-l-ona. A um balão equipado com um agitador mecânico, um termómetro, e um funil de adição sob purga de azoto foram carregados l-(3-Iodo-l-isopropil- 1H" pirazol-4-il) --etanona (640 g, 2,30 mol) e DMF (6,4 L) . A solução laranja resultante foi aquecida até 12 0 °C. 0 reagente de Bredereck (598,6 g, 3,43 mol) foi adicionado numa porção. A adição fez com que a temperatura de lote diminuísse até 114 °C e a solução tornou-se de cor laranja mais escuro. A mistura foi agitada a 120 °C durante 20 min. A mistura foi arrefecida até a ta e então concentrada a 5 mmHg a 60 °C para dar um resíduo oleoso. 0 resíduo foi dissolvido em iPrOAc (2400 ml) por meio do aquecimento até 74 °C, A mistura foi arrefecida até 35 °C e agitada para obter uma suspensão. Heptano (6000 ml) foi adicionado a 35 °C a ta ao longo de 1 h. A mistura foi arrefecida até -15 °C e filtrada e o sólido foi seco sob vácuo a 40 °C durante 3 h para dar o composto do título como um sólido. Pureza de HPLC >98 %. MP: 106-109 °C.

Etapa 7. 4- (3-Iodo-l-isopropil--lH-pirazol-4--i 1) -pirimidin-2-amina. A um balão equipado com um agitador mecânico, um termómetro, uma armadilha de Dean-Stark, e um condensador sob purga de azoto foram carregados (E)-3-dimetiiamino-1-(3-iodo- 1- isopropil-lH-pirazol-4-il)-prop-2-en-l-ona (735 g, 2,2 mol), carbonato de guanidina (596 g, 3,3 mol) e NMP (5200 ml) . A mistura foi aquecida até 130 °C e mantida a 130 °C durante 5 h. (Nota: quaisquer frações de ebulição baixa foram colhidas pela armadilha de Dean-Stark), A mistura foi arrefecida até 80 °C e cloreto de sódio aq. a 15 % (7500 ml) foi adicionado a 80 °C a 3 5 °C ao longo de ~ Ih. 0 produto começou a precipitar aproximadamente na metade da adição de cloreto de sódio aquoso. A mistura foi arrefecida adicionalmente até a. ta e mantida durante 3 0 min. 0 produto sólido foi colhido por meio de filtração e seco sob vácuo a 65 °C durante 16 h para dar o composto do título como um sólido. Pureza de HPLC >99 %. MP: 167-169 °C.

Etapa 8. 4-(3-Iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-pirimidin--2-ol. Um balão equipado com um agitador mecânico e termómetro sob purga de azoto foi carregado com TFA (748,8 ml). 4-(3-Iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-pirimidin- 2- amina (300 g, 0,91 mol) foi adicionado em porções como um sólido enquanto se mantinha a temperatura interna a seguir 30 °C usando um banho de água fria. A mistura foi agitada a ta durante 10 min para obter uma solução. A mistura foi arrefecida, até 2 0 °C e nitrito de sódio (79,7 g, 1,27 mol) foi adicionado em porções ao longo de 5 h a 22-28 °C com agitação rápida. (Nota: alguma evolução de gás foi observada e havia uma exoterma suave que foi facilmente controlada usando um banho de água fria) . DCM (12 L) foi adicionado e a mistura foi aquecida até 27 °C. Água (4400 ml) foi adicionada (Nota: gás evolução no começo). Solução de carbonato de potássio saturado (-1500 ml) foi adicionada lentamente à mistura para basificar até o pH ~ 9,0 (Nota: Uma grande quantidade de gás foi evoluída). À mistura foi adicionada uma solução de bissulfito de sódio (32 g, 0,30 mol) em, água (100 ml) . A mistura foi agitada a 27 °C durante 15 min e o pH foi reajustado até -9,0. A camada de DCM foi separada e concentrada sob vácuo (200-100 mmHg) numa temp de banho de 40 °C até o peso residual foi -2300 g (-1750 ml). Ao resíduo foi adicionado MTBE (1500 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada 10 min a 20 °C e foi então filtrada. 0 sólido foi seco 16 h a 30 °C sob vácuo (5 torr) para dar o composto do título como um sólido branco pérola. Pureza de HPLC >99 %. MP: 216-218 °C.

Etapa 9. 2-Cloro-4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-pirimidina. A um balão equipado com um agitador, termómetro, condensador, funil de adição e entrada/saída de azoto foi carregado 4-(3-iodo--1--isopropil--lH-pi razor-4-il)~pirimidin-2-ol (311 g, 942 mmol). Ao sólido foi adicionado acetonitrilo (2500 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada para dar uma suspensão. À suspensão foi adicionado DIPEA (246,2 ml, 1,41 mol), seguido por DMF (218,8 mi, 2,83 mol). A suspensão resultante foi agitada 5 min a 20 °C. Ã suspensão foi adicionado P0C13 (217 g, 1,41 mol) a 2 0 -4 0 °C para dar uma solução laranja. A mistura foi aquecida até 80 °C e mantida a 80 °C durante 3 h. A mistura foi arrefecida até 10 °C e uma solução de hidróxido de amónio (622 ml de 2 8 %) em água desionizada (5550 ml.) foi adicionado lentamente ao longo de 1,5 h, mantendo a temperatura abaixo de 20 °C. Após completar a adição de hidróxido de amónio, a suspensão resultante foi agitada durante 40 min a 10-20 °C. 0 produto sólido foi colhido por meio de filtração e seco durante a noite a 40 °C sob vácuo (5 torr) para dar o composto do título como um sólido castanho. Pureza de HPLC >99 %.

Etapa 10. 2-(metoxicarbonilamino)propiicarbamato de (S)-benzilo. A uma suspensão de dicloridrato de (5)-1,2-diaminopropano (50g, 340 mmol) em diclorometano (500 ml) foi adicionado carbonato de potássio (1190 mmol). A suspensão foi agitada e filtrada para colher o filtrado. 0 filtrado foi arrefecido até 0-5 °C e agitado enquanto cloroformato de benzilo (51 ml, 357 mmol) foi adicionado gota a gota. Após completar a adição, a mistura de reação foi agitada durante 3 h a 0-5 °C, e foi então deixada que se aquecesse até a ta e foi agitada a ta durante a noite. A esta mistura foi adicionada gota a gota trietilamina (71 ml, 510 mmol) e a mistura foi arrefecida até 0-5 °C. Cloroformato de metilo (28 ml, 357 mmol) foi adicionado rentamente a 0-5 °C e a mistura foi deixada que se aquecesse até a ta e foi agitada durante a noite. A mistura foi vertida em água. Os voláteis orgânicos foram removidos sob vácuo. A suspensão aquosa resultante foi filtrada para colher os sólidos, e o bolo de filtro foi então lavado com acetato de etilo para proporcionar um sólido branco (65 g, 92-94 % de pureza de HPLC). Recristalizações múltiplas do acetato de etilo proporcionaram o composto do título como um sólido branco, pureza de HPLC 99,5 %.

Etapa 11. Sal de Ãcido Clorídrico de l-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. Uma solução de 2-(metoxicarbonilamino)propilcarbamato de (S)-benzilo em metanol foi hidrogenado ao longo de um catalisador a 5 % de paládio/C a 50-60 psi. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob vácuo para dar um óleo incolor. 60g do óleo incolor foi dissolvido em 200 ml de diclorometano anidro e a solução foi arrefecida até 0-5 °C num banho de água com gelo. Uma solução de HC1 em metanol (cerca de 75 ml) foi adicionada gota a gota até que o pH da solução fosse < 1. A suspensão resultante foi agitada a 0-5 °C durante 30 min, então g sólido foi colhido via filtração. 0 sólido foi lavado com diclorometano e então com hexanos para dar o composto do título como um sólido branco.

Etapa 12. 3-Bromo-5-cioro-2-fluorobenzaldeído. Uma solução de 2,2,6,6-tetrametilpiperidina (327 g, 98 %, 2,274 mol) e THF (1,9 L, HPLC grade) foi arrefecido até -75 °C (banho de gelo seco-metanol) sob uma atmosfera de ãrgon. Solução a 1,6 M de n-BuLi/hexano (1,47 L, 2,35 moi) foi adicionada lentamente na mistura a -72 até -67 °C ao longo de 1 h. A mistura foi agitada a -72 até -67 °C durante 30 min para dar uma suspensão amarela pálida. 2-Bromo-4-cloro-l-f luorobenzeno (435 g, 97 %, 2,02 mol) foi adicionado lentamente na mistura a -72 até -67 °C ao longo de 30 min, e então a mistura foi agitada a -72 até -67 °C durante mais 30 min. Dimetilformamida (230 g, 99,5 %, 3,14 mol) foi adicionada lentamente na mistura a -70 até -65 °C ao longo de 30 min e então a mistura foi agitada a --7Q até -65 °C durante 30 min para propiciar uma solução castanha clara. 0 banho de arrefecimento foi removido e então solução saturada de cloreto de amónio (720 mi) foi adicionada no lote a -60 até -30 °C ao longo de 15 min para obter uma mistura brumosa. Ácido clorídrico a 6 N foi rapidamente adicionado na mistura a -30 a 10 °C ao longo de 15 min até o pH 1 e então acetato de etilo (2,0 L) foi adicionado a 10 a 20 °C. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (1 x 300 ml) . Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (1 x 800 ml) e salmoura (1 x 500 ml), secos em, sulfato de magnésio, e filtrados. 0 filtrado foi concentrado sob vácuo (60-65 °C) para dar o composto do título como um óleo viscoso ocre, que solidificou mediante o repouso após diversas horas. LH RMN (CDCls) : δ 7,76-8,30 (m, 2H) , 10,0-10,8 (s 1, 1H) ; MS m/z 238,0 (M+l).

Etapa 13. Ácido 3-bromo-5-cloro-2-fluorobenzoico. Uma mistura agitada de 3-bromo-5-cloro-2-fluorobenzaldeído (415 g), terc-butanol (1,2 L) e água (1,2 L) foi aquecida até 30 °C e então permanganate de potássio (33 5 g, 2,12 mol) foi adicionado (5 porções) no lote a 40-45 °C ao longo de 1 h. Os conteúdos púrpuras escuros foram aquecidos de uma maneira etapa a etapa a 45-50 °C durante 30 min, 50-55 °C durante 30 min e 55-60 °C durante 30 min para propiciar uma suspensão castanha-púrpura. A mistura de reação foi deixada que se arrefecesse até 20 °C, então solução de sulfito de sódio saturado foi adicionada a 22- 27 °C, até que um teste de peróxido negativo tenha sido obtido. Água quente (2,5 L, -50 °C) e solução saturada de carbonato de sódio (100 ml) foram adicionadas sequencialmente na mistura ao longo de 15 min. A suspensão escura foi filtrada através de um leito de celite de 1 cm, e o bolo de filtro foi lavado com água quente (4 x 1. L, -50 C) . 0 filtrado combinado foi acidificado com solução de ácido clorídrico a 6 N até o pH 1 para obter uma suspensão oleosa amarela. Acetato de etilo (3 L) foi adicionado na mistura e a mistura foi agitada durante 10 min. A camada orgânica (superior) foi lavada com água (1,2 L) , seca em sulfato de magnésio, filtrada, e concentrada sob vãcuG (60-65 °C) para dar uma suspensão amarela espessa. Hexano (700 ml) foi adicionado no resíduo e a suspensão foi arrefecida até 5-10 °C. O sólido foi colhido por meio de filtração, e o bolo de filtro foi seco sob vácuo (65 °C) durante a noite para dar o composto do título como um sólido amarelo, pf 150-152 0 C; Pureza de HPLC (225 nm) : 97,5 %; ]Ή RMN (d6-

DMSO): δ 7,82 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 13,82 (s 1, 1H); MS m/z 254 (M+H).

Etapa 14. 3-bromo-5-cloro-2-fluorofenilcarbamato de terc-butilo. Uma mistura de ácido 3-bromo-5-cloro-2-fluorobenzoico (243 g, 97,5 %, 0,935 mol) , trietilamina (105 g, 99,5 %, 1,02 mol), e terc-butanol (1,4 L) foi aquecida até 74 °C. Uma solução de difenilfosforilo azida (260 g, 97 %, 0,916 mol) em tolueno (960 ml) foi adicionada lentamente na mistura a 75-79 °C ao longo de 1 h (refluxo suave). A mistura foi aquecida lentamente até 83 °C ao longo de 30 min e mantida a 83-84 °C (refluxo suave) durante 1 h. Os conteúdos foram concentrados sob vácuo (65-70 °C) a iam óleo viscoso. Tolueno (2 L) e água (1,5 L) foram adicionados sequenciaimente no lote e a mistura foi então agitada a 3 5 °C durante 15 min. A camada aquosa foi descartada, a camada orgânica foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (400 ml) e água (4 00 ml) . A camada orgânica foi concentrada sob vácuo (60-65 °C) a -350 ml resíduo (~94 % de pureza). 10 % de acetato de etilo/hexano (~1,2 L, v/v) foi adicionado no lote e a mistura foi então aquecida a 50 °C durante 15 min para dar uma solução homogénea amarela clara. Solução de acetato de etilo/hexano foi transferida numa sílica gel pré-preparada (1,8 kg, 70-200 malha)/leito de hexano num funil de 4 L Pirex Buchner (com discos fritos grossos, 40-60 pm, 16 cm de diâmetro, 18 cm de altura) . 0 produto carbamato de t-butilo foi eluído (pela gravidade) lentamente com 3-5 % de acetato de etilo/ hexano (total volume ~5 L, v/v) para colher o composto do título como um sólido branco pérola, pf 87-88 °C; Pureza de HPLC (225 nm) : 97-98 %; ΧΗ RMN (d6-DMSO) : δ 1,48 (S, 9H), 7,48-7,49 (m, 1H), 7,80-7,82 (m, 1H), 9,42 (S, 1H) ; MS m/z 325 (M+H) .

Etapa 15. 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4- i 1) píri.midi.n-2-ilamino) propan-2-ilcarbamato de (S) - metilo. A um balão de 4 tubuladuras equipado com um agitador mecânico, um termómetro, e um condensador sob purga de azoto foram carregados 2-Cloro-4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol-4-il)-pirimidina (300,0 g), sal de ácido clorídrico de l-aminopropan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (174,3 g) , carbonato de sódio (365,7 g) e DMSO (2400 ml). A mistura foi aquecida com agitação durante 18 b numa temperatura interna de 90 °C. A mistura foi arrefecida até 40 °C. Tolueno (3870 ml) foi adicionado a 37- 43 °C com agitação. Água (7200 ml) foi adicionada a 37- 43 °C. A camada de tolueno foi separada a 37- 43 °C. Ã camada de tolueno foi adicionado solução 1 aquosa de cloreto de sódio a 15 % (3 870 ml) e o pH da camada aq.

foi ajustado a um pH - 5,0 por meio da adição de solução aquosa de ácido cítrico a 10 % a 37 - 43 °C. 0 ajuste de pH requereu -20 ml de ácido cítrico aquoso a 10 %. A camada de tolueno foi então lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2880 ml) a 37 - 43 °C. A camada de tolueno contendo o composto do título foi usada como entrada na etapa 17.

Etapa 16. 5-cloro-2-fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de terc-butilo. A um balão equipado com um agitador mecânico, termómetro, condensador, e manta de aquecimento sob purga de azoto foram carregados 3-bromo-5-cloro-2-fluorofenilcarbamato de terc-butilo (33,0 g), bis(pinacolato)diboro (447,0 g), acetato de potássio (405,6 g) e tolueno (2700 ml). A mistura foi agitada a ta durante 15 min e PdCl2(dppf) (50,4 g) foi adicionado. A mistura foi então aquecida até 108 ±2 °C. (Nota: A mistura tornou-se escura a 50 - 60 °C) IJma solução de 3-bromo- 5- cloro-2-fluorofenilcarbamato de terc-butilo (414 g) em tolueno (1770 ml) foi adicionada a 108 ± 2 °C ao longo de 70 min. A mistura foi mantida a 108 ± 2 °C durante 15 h. A mistura foi arrefecida até a ta sob fluxo de azoto e então foi filtrada através de celite. 0 filtrado contendo o composto do título foi usado como entrada na etapa 17. Etapa 17. 1-(4-(3-(5-cloro-2-fiuoro-3-(tere- butoxicarbonilamino) fen.il.) -1-isoprop.il-lH-pirazol-4 -il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. A um balão foi carregado 1-(4-(3-iodo-l-isopropil-lH-pirazol- 4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo (3870 ml de solução de tolueno, -382 g, 0,861 mol) e 5-cloro·-· 2- fluoro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de terc-butilo (4470 ml solução de tolueno, -467,0 g, 1,26 mol). Ã solução castanha resultante foi adicionada uma solução de carbonato de sódio (349,8 g, 3,30 mol) em água (1400 ml). Ã mistura foi adicionada PdCl2(dppf) (34,5 g, 0,047 mol). A mistura foi aquecida até 80 °C com agitação e foi mantida a esta temperatura durante 2 h. A mistura foi arrefecida até 40 °C e filtrado através de celite. As camadas no filtrado foram separadas. A camada de tolueno contendo o composto do título foi usada diretamente como entrada na etapa 18.

Etapa 18. 1-(4-(3-(3-amino-5-cloro-2-fluorofenil)-1- isopropil-lH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)prcpan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. A um balão foi carregado l-{4-(3- (5-cloro·-2-f luoro-3·-· (terc-butoxicarbonilamino) fenil) -1-isopropi1-IH-pirazol-4 -il)pirimidin-2 -ilamino)propan-2 -ilcarbamato de (S)-metilo (-7,3 L de solução de tolueno,

-483,3 g, 0,86 mol) a 20 °C sob uma atmosfera de azoto. A solução foi adicionado 1HC1 a 2 N (574,3 ml, 6,95 mol) ao longo de -2 0 min enquanto se mantinha a temperatura abaixo de 2 5 °C. A adição de HC1 causou uma exoterma de 19 °C a 24 °C. A mistura foi agitada, a. 20 -23 °C durante 1 h. A mistura de reação foi adicionada água (3100 ml) . A mistura foi agitada 10 min a 20 °C. A camada aquosa foi separada e lavada com 2-metilTHF (3100 ml). A camada aquosa foi lentamente adicionada solução saturada de carbonato de potássio aquoso (-778 ml) . 0 pH da camada aquosa foi - 8,5. A camada aquosa foi extraída com 2-metilTHF (3825 ml) . A camada de 2-metilTHF foi concentrada sob vácuo (60 mmHg, 40 °C) . 0 resíduo foi diluído com 2-metilTHF (-3800 ml) para proporcionar uma solução do composto do título, que foi usado diretamente como entrada na etapa 19. Pureza de HPLC: 95 %.

Etapa 19. 1-(4-(3-(5-cloro-2-fluoro-3-(N- (metilsulfonil)metilsulfonamido) fenil) 1-isopropillH-pirazol-4-il)pirimidin-2-ilamino)propan-2-ilcarbamato de (S)-metilo. A um balão foi carregado 1-(4-(3-(3-amino-5-cloro-2-fluorofeni1)-1-isopropi1-IH-pirazol-4 -il)pirimidin-2-ilamixio)propan--2-ilcarbamato de (S) --metilo (-3,8 L de solução de metilTHF, -396,5 g, 0,86 mol) a 20 °C. Ã solução foi adicionada trietilamina (435,0 g, 4,3 mol). A solução foi arrefecida até 0 até -5 °C. A solução foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (246,0 g, 2,15 mol) gota a gota com agitação ao longo de 20 min a 0 até -5 °C. A mistura foi deixada que se aquecesse até 18-20 °C e foi mantida a esta temperatura durante 20 min. À mistura de reação foi adicionada água (2115 ml) ao longo de 30 min a 18-20 °C. A mistura foi agitada 10 min a 20 °C após a adição ter sido completada. Então o pH foi ajustado até entre 6,0 e 6,5 com HCi a 2 N (-1230 ml). 0 pH foi então ajustado até 7 - 7,5 usando solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A mistura foi agitada 10 min @ 2 0 °C. As camadas foram separadas. A camada de 2-metilTHF contendo o composto do título foi usado diretamente na etapa 20.

Etapa 20. N-[(2S)-1-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanosulfonamidofenil)-1-(propan-2-il)-lH-pirazol- 4-il] pirimidin-2 il}amino) propan-2-il] carbamato de metilo. A um balão foi carregado 1-(4-(3-(5-cloro-2-fluoro- 3-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)fenil)-1-isopropil-lH-pirazol. - 4 - il) pirimidin-2 - ilamino) propan-2 - ilcarbamato de (S)-metilo (-3,8 L de solução de metilTHF, -531,5 g, 0,86 mol) . À solução foi adicionado hidróxido de sódio aquoso a 3 N (1782,8 ml, 5,34 mol) a 15-20 °C com agitação. A mistura foi vigorosamente agitada a 20-23 °C ao longo de 30 min e a eigitação foi interrompida. A camada aquosa foi descartada. HCI a 2 N (- 410 ml) foi adicionado à camada orgânica para ajustar o pH até 6,0-6,5, então a solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (-300 ml) foi adicionada para ajustar o pH - 8,5. A camada aquosa foi descartada. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 15 % (2000 ml) . A camada orgânica foi concentrada sob vácuo (80 torr) numa temperatura de banho de 45 °C para dar uma solução castanha (780 g) . A solução foi diluída com 2-metilTHF (3500 ml) , e então uma suspensão de carbono ativado PICA HP 12 ON (90 g, CDH858) em 2-metilTHF (1 L) foi adicionada. A suspensão preta resultante foi aquecida até 60 °C e mantida a 60 °C durante 16 h. Apôs as 16 h de espera o conteúdo de Pd era de 309 ppm. A mistura, foi arrefecida até 20 °C e filtrada através de uma almofada de celite (pré-humedecida com 2-metilTHF). 0 balão de reação foi enxaguado com 2-metilTHF (500 ml) . Este enxagúe foi então vertido através do bolo de filtro de PICA/celite. Ao filtrado foi adicionado resina PL-TMT (90 g) . A suspensão resultante foi aquecida com agitação até 60 °C e mantida a esta temperatura durante 4 h. Apôs 4 h a 60 °C o conteúdo de Pd era de 2,3 ppm. A mistura foi arrefecida até 20 °C e agitada durante a noite a 20 °C. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite (pré-humedecida com 2-metilTHF). O filtrado foi concentrado sob vácuo (1100 - 80 torr) a 40 - 45 °C para dar um óleo laranja. Este óleo residual foi dissolvido em 3 L de etanol 2 00 proof por meio do aquecimento até 78 °C. A solução laranja clara resultante foi então arrefecida até 20 °C ao longo de 3 h, e um precipitado formado. A mistura foi então arrefecida até 0 °C e mantida 1 h a 0 °C. A mistura foi filtrada e o bolo de filtro foi lavado com etanol (300 ml). O sólido foi seco 14 h a 40 °C para dar o composto do título; MP: 186-189 °C.

Os compostos no seguinte quadro 1 foram preparados de maneira similar aos exemplos acima, usando os materiais de partida apropriados: ___Quadro 1__

Exemplo 122

Ensaio Homogéneo de Proximidade de Luminescência Amplificado B-Raf V6QQE/Mek(B-Raf V600E Bioquímico) B-Raf {V600E; 4pM) e Mek biotinilado (quinase dead; 10 nM) foram combinados a 2X concentrações finais em tampão de ensaio (50 mM de Tris, pH 7,5, 15 mM de MgCl2, 0,01 % de BSA e 1 mM de DTT) e dispensados 10 ml por poço em placas de ensaio (Greiner white placas de ensaio de 384 poçgs #781207) contendo 0,5 ml de 40X de um composto da invenção diluído em 100 % de DMSO. A placa foi incubada durante 60 minutos a temperatura ambiente. A reação de atividade de B-Raf de quinase foi iniciada pela adição de 10 ml por poço de 2X ATP (10 mM) diluído em tampão de ensaio. Após 3 horas, as reações foram

interrompidas com a adição de 10 ml de reagente de parada (60 mM de EDTA, 0,01 % Tween20), 0 produto fosforilado foi medido usando um anticorpo anti-p-MEK de coelho (Cell Signaling, #9121) e o Kit de deteção Alfa Screen IgG (ProteínaA) (PerkínElmer #6760617R), pela adição de 30 ml ao poço de uma mistura do anticorpo (1:2000 diluição) e pérolas de deteção (1:1000 diluição de ambas pérolas) em tampão de pérolas (50 mM de Tris, pH 7,5, 0,01 % de

Tween20). As adições foram levadas a cabo sob condições de escuro para proteger as pérolas de deteção da luz. Uma tampa foi colocada na parte superior da placa e a placa foi incubada durante 1 hora a temperatura ambiente. A luminescência foi lida num instrumento PerkinElmer Envision, A concentração de cada composto durante inibição de 50 % (IC50) foi calculada por regressão não linear usando software de análise de dados XL Fit,

Os compostos da invenção, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, como indicado pelos testes in vitro descritos neste pedido. Por exemplo, os compostos da invenção preferentemente mostram um IC50 no intervalo de 1 x 10"10 a 1 x 1Q~5 M, preferentemente inferior a 500 nM, 250 nM, 100 nM e 50 nM para V6Q0E B-Raf.

Por exemplo, os dados de IC5o para alguns compostos da invenção no Ensaio Homogéneo de Proximidade de Luminescência são mostrados no Quadro, supra.

Exemplo 123

Ensaio de Proliferação de Células A375 (A375 CP) A375 é uma linha de células de melanoma que alberga a mutação B-Raf V600E. As células A375-luc engenheiradas para expressar luciferase são cultivadas em placas de fundo claro branco de 384 poços como 1.500 células/50 μΐ/poço em DMEM contendo 10 % FBS. Os compostos da invenção dissolvidos em 100 % de DMSO em concentrações apropriadas são transferidos às células por um Pin Tool robotico (100 nl). As células são incubadas durante 2 dias a 25 °C, então 25 μΐ de BrightGlo™ é adicionado a cada poço e as placas são lidas por luminescência. A concentração de cada composto durante a inibição de 50 % (IC50) foi calculada por regressão nâo linear usando software de análise de dados XL Fit.

Os compostos da invenção, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, como indicado pelos testes in vitro descritos neste pedido. Por exemplo, os compostos da invenção preferentemente mostram um IC50 no intervalo de inferior a 500 nM, 250 nM, 100 nM e 50 nM para o tipo selvagem e V600E B-Raf.

Por exemplo, os dados de IC50 para alguns compostos da invenção no Ensaio de Proliferação de Células A3 7 5 são mostrados no Quadro, infra.

Exemplo 124 Imunoensaios

As células foram semeadas em, 1640 RPMI + 10 % FBS numa densidade de 30 x 103 células por 96 poços em placas tratadas com cultura de tecido, então incubadas a 37 °C e 5 % C02 durante 24 horas antes dos compostos terem sido adicionados. Os compostos de teste foram diluídos serialmente em DMSO então adicionados às células (concentração final de DMSO de 0,1 %) e incubados a 37 °C e 5 % C02 durante 3 horas. Os níveis de pMEK e pERK foram medidos usando um kit de imunoensaio sanduíche (Meso Scale Discovery). Os sobrenadantes de cultura foram removidos e as células foram lisadas pela adição de tampão de lise frio (proporcionado em kit) durante 30 minutos com agitação suave. Para a deteção de pMEKl/2 (Ser217/221) e pERKl/2 (Thr/Tyr202/204,Thr/Tyrl85/187), os lisados foram adicionados às placas revestidas com anticorpo bloqueado proporcionadas com os kits e incubados durante a noite a 4 °C com agitação. As placas foram lavadas e as fosfoproteínas detetadas usando os anticorpos marcados proporcionados e lidas num instrumento Sector 6000.

Exemplo 125

Ensaio de Viabilidade de Células SW620

As células SW620 foram semeadas em 1640 RPMI + 10 % FBS numa densidade de 1500 células por 96 poços em placas de fundo claro com paredes pretas tratadas com cultura de tecido. Os compostos de teste foram diluídos serialmente em DMSQ então adicionados às células (concentração final de DMSO de 0,1 %) e incubados a 37 °C e 5 % C02 durante 4 dias. Para medir a. viabilidade celular, placas de células foram trazidas até a temperatura ambiente, os meios de cultura foram removidos, e 200 ml de reagente Cell Titer-Glo (Promega, componentes de kit misturados conforme o protocolo do fabricante então diluídos 1:2 com meios de crescimento) foi adicionado a cada poço. As placas foram agitadas durante 5 minutos, então incubadas a temperatura ambiente durante 5 minutos, e a luminescência foi medida (Trilux, Perkin Elmer).

Exemplo 126

Ensaio de agarose macia Ratl

As células Ratl foram suspensas em 1 % de agarose (Lonza) numa densidade de 1000 células por 96 poços. A mistura de agarose/célula foi deixada a solidificar. Os compostos de teste foram diluídos serialmente em DMSO então adicionados na parte superior da mistura de célula/agarose (concentração final de DMSO de 0,2 %) e incubados a 37 °C e 5 % C02. Após 17 dias, crescimento de colónias foi determinado por meio da incubação de células com alamarBlue (TREK Diagnostics) e medição da atividade metabólica com um leitor de placas Spectramax (Molecular Devices, Inc; absorvância medida a 562 nm).

Exemplo 127

Ensaio de Depuração Microssomal de Fígado O ensaio de depuração microssomal in vitro é designado para avaliar riscos potenciais associados com estabilidade metabólica hepática de compostos. 0 composto de teste (1 triM) foi incubado com microssomas de fígado (0,5 tng/ml) de diferentes espécies (ratinho, rato, macaco, cão e ser humano) e NADPH (1 mM) em 100 mM de tampão fosfato de potássio a 37 °C. Sm pontos de tempo de reação específico (0, 5, 10 e 30 minutos), alíquotas de reação foram removidas e as reações foram terminadas pela adição de acetonitrilo frio em gelo contendo padrão interno de espectrometria de massa. As amostras foram centrifugadas e os sobrenadantes foram analisados por LC-MS/MS. Semivida metabólica in vitro (ti/2, min) e depuração intrínseca (CLint, μΐ/min/mg) são com base na taxa e extensão de metabolismo do composto de teste como determinado pelo desaparecimento do composto parental a partir da mistura de reação. Estes valores podem ser colocados em escala para predizer a taxa de depuração metabólica hepática (CLh, μΐ/min/kg) e razão de extração (RE, expresso como uma razão da depuração metabólica hepática predita para o fluxo sanguíneo hepático nessa espécie). Sm geral, os compostos com alto CLint predito ou RE in vitro são considerados como sendo de alto risco para o metabolismo limitado por exposição in vivo.

As razões de extração medidas para alguns compostos da invenção são dadas no Quadro a seguir.__

Exemplo 128

Ensaio de Gene Repórter A549 p38« MAP quinase Bright-Glo

As células A549 foram transfetadas estavelmente com o repórter guiado por promotor de IL--3, pGL3-IL8-Luc. As células foram cultivadas a 4xl05/ml em placas brancas solidas de 384 poços (40ul/poço, 5 %CD-FBS, lxP/S, DMEM) e foram incubadas durante a noite (18-20 horas) a 37 °C. Os compostos de teste foram diluídos serialmente em DMSO., então 50nl de solução de teste foi adicionado à incubação (concentração final de DMSO de 0,1 %) . Após incubar com composto de teste durante 30 min, as células foram estimuladas com Ing/tnl IL-1 beta (lOul de 5ng/mi solução por poço). Bright-Glo (25ul/poço) foi adicionado para medir a expressão de luciferase após 7-8 horas de estimulação. Os dados de IC50 para alguns compostos da invenção são dados no Quadro a seguir.

Exemplo 129

Ensaio Farmacocinético in vívq

Estudo farmacocinético completo: Ratinhos Balb/c machos (n=3, pesos corporais 22-25 g) ou ratos Wistar machos (n=3, pesos corporais 250-300 g) foram administrados com o composto de teste intravenosamente via a veia lateral da cauda ou oralmente via gavagem. A formulação foi tipicamente uma solução de 2,5 mg/rnl do composto em 75 % PEG300 e 25 % de D5W. Seis amostras de sangue de 50 ml cada foram colhidas serialmente durante 24 h após a dosagem. As amostras de sangue foram centrifugadas para separar o plasma. As amostras de plasma. foram, analisadas e quantificadas por LC-MS/MS.

EstudG farmacocinético rápido: Ratinhos Balb/c machos (n=3, pesos corporais 22-25 g) ou ratos Wistar machos (n=3, pesos corporais 250-300 g) foram administrados com o composto de teste intravenosamente (IV) via a veia lateral da cauda ou oralmente (PO) via gavagem. A formulação foi tipicamente uma solução de 2,5 mg/ml do composto em 75 % PEG300 e 25 % D5W. Seis amostras de sangue de 50 ml cada foram colhidas serialmente durante 24 h após a dosagem. As amostras de sangue foram centrifugadas e plasma separado e agrupadas através dos três animais em cada ponto de tempo por via de dose. As amostras de plasma foram analisadas e quantificadas por LC-MS/MS.

Para ambos os estudos farmacocinéticos completo e rápido, os seguintes parâmetros foram calculados por análise de regressão não compartimentai usando software Winnonlin 5,0 (Pharsight, Mountain View, CA, EUA): depuração de plasma (Cl), concentração plasmática máxima (Cmax), área sob a curva de concentração plasmática-tempo (AUCo-inf) , e biodisponibil.idade oral percentual (F%) .

Parâmetros farmacocinéticos em ratinho para alguns compostos da invenção são dados no QuadrG a seguir.

Os compostos de Fórmula I, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, como indicado pelos testes in vitro e in vivo descritos neste pedido. Por exemplo, os compostos de Fórmula I preferentemente mostram um IC50 no Ensaio de Proliferação de Células A375 CP no intervalo de 250 nM ou melhor, preferentemente inferior a 200 nM, 150 nM, 100 nM e 50 nM, 0 grupo 2-(metoxicarbonilamino)-1-propilo em R3 trata de u nível m preferido de atividade e seletividade sobre outras quinases que incluem p38. For exemplo, um aumento superior a 30 vezes em atividade existe entre os compostos 9 e 29 onde a IC50 de A375 é 2 nM e 76 nM, respetivamente. 0 padrão de substituição de fenilo de compostos de Formula Ib é ótimo para estabilidade metabólica (RE em ratinho e ser humano) com flúor ou cloro na posição R5 e flúor, cloro, ou metilo na posição R3. Compare-se, por exemplo, o RE (ser humano) em compostos 9 e 6 de <0,21 e 0,69, respetivamente. A combinação do grupo 2-(metoxicarbonilamino)-1-propilo no R±l o padrão de substituição de R3/R5 e o grupo metilo em R4 tem um efeito surpreendente sobre a exposição de fãrmaco total (AUC). Veja-se, por exemplo, composto 9 (em comparação com os compostos 1, 3, 4, 6 e 7) onde a AUC, numa dose oral de 10 mg/kg, é 30+4 nucromolar*h.

Exemplo 130

Eficácia In vivo - Modelo de Xenoenxerto de Ratinho A375 d_e 14 dias

As células A375 foram crescidas em condições estéreis num incubador a 37° C com 5 % C02 durante duas a quatro semanas. As células foram cultivadas em RPMI-1640 meios suplementados com 10 % FBS. As células foram passadas duas vezes semanalmente com 0,05 % Tripsina/EDTA. No dia do implante, as células foram colhidas em HBSS (Solução Salina Balanceada de Hank), Ratinhos Nu/Nu fêmeas (Charles River, 10-11 semanas no início do estudo) foram implantados com 5x106 células A375/ratinho em 50 % de matrigel, 0,2 ml SQ flanco direito no dia 1. Em 19 dias põs-implante, os ratinhos foram aleatorizados em 6 grupos (9 ratinhos por grupo) , com um volume de tumor médio de 215 mm3 e peso corporal médio de 24 g. 0 composto de teste foi dosificado BID durante 14 dias no começo do dia 19 usando um volume de dosagem de 0,2 ml por dose, com composto formulado na concentração apropriada para conseguir o nível de dose desejado. As observações clínicas foram feitas diariamente. 0 volume de tumor e peso corporal foram medidos duas vezes semanalmente. Pontos finais: Qualquer animal individual ou grupo que exibiu perda de peso corporal que excede 25 % de volume de tumor inicial e/ou em excesso de 3000 mmJ. 0 composto 9 (formulado em 2 0 % de PEG300 / 3 % de ETPGS / 77 % de água) foi dosificado de acordo com o protocolo acima, usando o seguinte regime de dosagem:

Os resultados do volume de tumor foram avaliados a 14 dias pós-primeira dose. Resposta parcial é definida como a que tem crescimento tumoral 20-50 % de crescimento de tumor de controlo. Doença estável é definida como a que tem volume de tumor final dentro de +/-20 % do tamanho de tumor inicial. Regressão parcial é definida como a que tem volume de tumor final <80 % do volume de tumor inicial.

REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para a conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento de Patente Europeia. Embora tenha sido tomado muito cuidado na compilação das referências, não se poderão excluir erros e omissões e o IEP não assume qualquer responsabilidade neste sentido.

Literatura não relacionada com patentes referida na descrição ® T.W. GREENE i P. G, M. WUTS. Protective Groups in Organic Chemistry. John Wiley and. Sons, 1991 [0046] • SAULNIER et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 1994, vol. 4, 1985 [00833 • T. W. GREENE. Protecting Groups in Organic Chemistrv John Wiley and Sons, Inc, 1999 [0084] • JEAN JACQUES ; ANDRE COLLECT ; SAMUEL a WIDEN.

Enantiomers, Racemates and Resolutions. John Wiley And

Sons, Inc, 1981 [0086]

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Um composto da. Fórmula I: I

no qual: Y é selecionado a partir de N e CRS; Ri ê -CH2CHMeNH (CO) OMe ; R2, R3, Rse Rs são independentemente selecionados a partir de hidrogénio, halo, ciano, Ci-4alquilo, C:L-4alquilo halo-substituído, C1-4 alcoxi e Ci-4-alcoxi halo-substituído; com a condição de que quando R5 é fluoro, R3 e R6 não são ambos hidrogénio,· R4 é selecionado a partir de -R9 e -NR10Rn ; em que R9 é selecionado a partir de Ci.6alquilo, C3..8cicloalquilo, C3. sheterocicloalquilo, arilo e heteroarilo; onde o dito alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo ou heteroarilo de R9 ê opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais selecionados independentemente a partir de halo, ciano, Ci..4aiquilo, Ci..4alquilo halo-substituído, 01..4 alcoxi e Ci-4-alcoxi halo-substituído; e Ri0 e Rn são independentemente selecionados a partir de hidrogénio e Rg; R7 é selecionado a partir de Ci-4alquilo, C3. scicloalquilo e C3.sheterocicloalquilo; onde o dito alquilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo de R7 é opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais selecionados independentemente a partir de halo, ciano, hidroxilo, C,.. 4alquilo, Ci_4alquilo halo-substituído, Ci..4 alcoxi e C1..4-alcoxi halo-substituído; ou R7 é hidrogénio,· e os derivados de N-óxido, os tautómeros, e os sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis {por exemplo hidratos) de tais compostos. 2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que R7 é selecionado a partir de C1_4alquilo, C3-5cicloalquilo e C3. sheterocicloalquilo; onde o dito alquilo, cicloalquilo ou heteroc.icloa.lqui.lo de R7 é opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais selecionados independentemente a partir de halo, ciano, hidroxilo, Ci_4alquilo, Ci.4alquilo halo-substituído, Ci_4 alcoxi e Ci_4-alcoxi halo-substituído. 3. 0 composto de acordo com qualquer reivindicação anterior no qual R4 é -R9; em que R9 é selecionado a partir de Ci_3alquilo e C3.8cicloalquilo; em que o dito alquilo ou cicloalquilo de R9 é opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais selecionados independentemente a partir de halo e C^alquilo halo-substituído. 4. 0 composto de acordo com a reivindicação 3 no qual: R2 é selecionado a partir de hidrogénio e fluoro; R3 é selecionado a partir de cloro, fluoro e metilo; R5 é selecionado a partir de hidrogénio, cloro e fluoro; Y é selecionado a partir de N e CR6; e R5 é selecionado a partir de hidrogénio e fluoro. 5. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 selecionado a partir de: N-[(2S)-1-({4-[3-(3-etanossulfonamide-2,4-dífluorofenil)-1-(propan-2-il)-lH-pirazol-4-il]pirimidin-2-il}amino)propan-2-il]carbamato de metilo N-[(2S)-2-({4-[3-(5-c1oro-2 -f1uoro-3- metanossulfonamidofenil) -1- (propan-2-il) -lH-pirazol-4 · il]pirimidin-2-il}amino)propil]carbamato de metilo; N-[(2S)-1-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanossulfonamidofenil) -1- (oxan-2-il) -lH-pirazo.1-4- il] piritnidin-2-il }atnino) propan-2-il] carbamato de metilo; N- [ (2S)-1-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3-rrietanossulfonatn.id.ofen.il) - lH-pirazol-4 - il] pirimidin-2-il}amino)propan-2-il]carbamato de metilo; e 6. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é um composto de Fórmula, lb:

Ib na qual: R?, é selecionado a partir de cloro, fluoro e metilo; R.5 é selecionado a partir de fluoro e cloro; e R7 é selecionado a partir de etilo e isopropilo.
7. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, misturada, com pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.
8. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, em que o excipiente é selecionado a partir do grupo consistindo em amido de milho, amido de batata, amido de tapioca, pasta de amido, amido pregelatinizado, açúcares, gelatina gomas naturais, gomas sintéticas, alginato de sódio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, celulose, etilcelulose, acetato de celulose, carboximetilcelulose de cálcio, carboximetilcelulose sódica, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, celulose microcristalina, silicato de magnésio e alumínio, polivinilpirrolidona, talco, carbonato de cálcio, celulose em pó, dextratos, caulim, manitol, ácido silícico, sorbitol, ágar-ágar, carbonato de sódio, croscarmelose de sódio, crospovidona, polacrilina de potássio, glicolato de amido de sódio, argilas, estearato de sódio, estearato de cálcio estearato de magnésio, ácido esteárico, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenoglicol, outros glicóis, lauril sulfato de sódio, óleo vegetal hidrogenado, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girassol, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho, óleo de soja, estearato de zinco, oleato de sódio, oleato de etilo, laureato de etilo, sílica, e combinações dos mesmos,
9. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, compreendendo adicionalmente um agente terapêutico adicional.
10. A composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 9, em que o agente terapêutico adicional é selecionado a partir de um composto anti cancro, um analgésico, um antiemético, um antidepressivo, e um agente anti inflamatório.
11. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6 ou uma composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 7-10 para utilização num método de tratamento do cancro.
12. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6 no fabrico de um medicamento para o tratamento dG cancro. 1.3 . 0 composto para utilização num método de tratamento de acordo com a reivindicação 11 ou a utilização de acordo com a reivindicação 12, em que o cancro a ser tratado ê selecionado a partir do grupo que consiste em carcinoma pulmonar, carcinoma pancreãtico, carcinoma da bexiga, carcinoma do cólon, distúrbios mieloides, cancro da próstata, cancro da tiroide, melanoma, adenomas e carcinomas do ovário, olho, fígado, trato biliar, e sistema nervoso. 14, 0 composto para utilização num método de tratamento de acordo com a reivindicação 11 ou a utilização de acordo com a reivindicação 12, o método compreendendo adicionalmente administrar ao indivíduo um agente terapêutico adicional, opcionalmente em que o agente terapêutico adicional é administrado ao indivíduo concomitantemente com o composto, 15, 0 composto para utilização num método de tratamento de acordo com a reivindicação 11 ou a utilização de acordo com a reivindicação 12, o método compreendendo adicionalmente administrar ao indivíduo um agente terapêutico adicional, opcionalmente em que o agente terapêutico adicional é administrado ao indivíduo sequencialmente com o composto, 16, 0 composto psira utilização num método de tratamento de acordo com a reivindicação 15 ou a utilização de acordo com a reivindicação 15, em que o composto de Fórmula I é N-[ {28)-1-({4-[3-(5-cloro-2-fluoro-3- metanossulfonamidofenil) -1- (propan-2--il) --lH-pirazol -4-í1]pirimidin-2-i1}amino)propan-2-i1]carbamato de metilo. 17, 0 composto para utilização num, método de tratamento ou a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 14-16, em que: (a) o agente terapêutico adicional compreende um fármaco anti cancro, uma medicação para a dor, um antiemético, um antidepressivo ou um agente anti inflamatório; ou (b) o agente terapêutico adicional é um inibidor de Raf quinase diferente ou um inibidor de MEK, mTOR, HSP90, AKT, PI3K, CDK9, PAK, Proteína Quinase C, uma MAP quinase, uma MAPK Quinase, ou ERK; ou (c) ura inibidor de MEK selecionado a partir de: AS703026; MSC1936369B; GSK1120212; AZD6244; PD-0325901; ARRY-438162; RDEA119; GDC0941; GDC0973; TAK-733; R05126766; e XL-518, 18. 0 composto para utilização num método de tratamento ou a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 17 em que o cancro ê melanoma ou cancro CGlorretal. 19. 0 composto para utilização num, método de tratamento ou a utilização de stcordo com a reivindicação 18 em que o melanoma é melanoma metastâtico ou o cancro colorretal é carcinoma do cólon.
20. Q composto para utilização num método de tratamento ou a utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 a 19, em que o composto se destina a tratar uma condição mediada por Raf quinase, opcionalmente em que a Raf quinase é uma b-Raf quinase mutante tal como b-Raf (V600E).