PT2280962E

PT2280962E - Derivados de piridazinona

Info

Publication number: PT2280962E
Application number: PT97348544T
Authority: PT
Inventors: Dieter Dorsch; Oliver Schadt; Frank Stieber; Andree Blaukat
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 2008-04-21
Filing date: 2009-03-24
Publication date: 2012-12-17
Also published as: EA201001648A1; MX2010011454A; CY1113443T1; JP2011518202A; BRPI0911161B8; KR20100137564A; US20110034474A1; BRPI0911161B1; SI2280962T1; JP5576358B2; AU2009240346A1; EP2280962B1; DK2280962T5; IL208336A0; BRPI0911161A2; AU2009240346B2; CN102015694A; US8604036B2; EP2280962A1; WO2009129905A1

Description

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DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE PIRIDAZINONA"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A invenção teve por objetivo arranjar novos compostos com propriedades valiosas, em particular que pudessem ser utilizados na produção de medicamentos. A presente invenção é relativa a compostos e a utilização de compostos, em que a inibição, a regulação e/ou a modulação da transdução de sinal das cinases, em particular das tirosina cinases e/ou das serina/treonina cinases, desempenhe(m) um papel, ainda às composições farmacêuticas que contenham estes compostos, e à utilização dos compostos no tratamento de doenças relacionadas com as cinases. A presente invenção é sobretudo relativa a compostos e à utilização dos compostos nos quais a inibição, a regulação e/ou a modulação da transdução de sinal da Met cinase desempenhe(m) um papel.

Um dos principais mecanismos através do qual se exerce a regulação celular é o da transdução dos sinais extracelulares através da membrana, que por sua vez modulam as vias bioquímicas na célula. A fosforilação proteica é um processo pelo qual os sinais intracelulares são propagados de molécula a molécula, o que resulta ao fim numa resposta celular. Estas cascatas de transdução de sinal são altamente reguladas e sobrepõem-se com frequência, o que resulta da presença de muitas proteínas cinases e também de fosfatases. A fosforilação de proteínas acontece sobretudo no caso dos radicais serina, treonina ou tirosina e, por isso, as proteínas cinases foram classificadas de acordo 2 com a respetiva especificidade do local de fosforilação, ou seja, das serina/treonina cinases e das tirosina cinases. Visto que a fosforilação é um processo de tal forma disseminado nas células e visto que os fenótipos celulares são sobretudo influenciados pela atividade destas vias, pensa-se atualmente que uma série de quadros clínicos e/ou de doenças se deve a uma ativação divergente ou a mutações funcionais nos componentes moleculares de cascatas de cinases. Por conseguinte, a caracterização destas proteínas e destes compostos, que são capazes de modular a sua atividade, despertou um interesse considerável (para um panorama geral, consultar: Weinstein-Oppenheimer et al. Pharma. &. Therap., 2000, 88, 229-279). O papel desempenhado pelo recetor tirosina cinase Met na oncogénese humana, e a possibilidade da inibição da ativação do Met dependente do HGF (hepatocycte growth factor - fator de crescimento dos hepatócitos) são descritos por S. Berthou et al. in Oncogene, Vol. 23, N.° 31, páginas 5387-5393 (2004). O inibidor SU11274 aí descrito, um composto de pirrol-indolina, é potencialmente adequado ao combate contra o cancro.

Outro inibidor da Met cinase na terapia oncológica é descrito por J. G. Christensen et al. in Câncer Res. 2003, 63 (21), 7345-55.

Relativamente a outro inibidor da tirosina cinase para o combate ao cancro, existem relatos de H. Hov et al. in Clinicai Câncer Research Vol. 10, 6686-6694 (2004). O composto PHA-665752, um derivado de indol, é dirigido contra o recetor do HGF c-Met. Além disso, revela-se aí que o HGF e o Met contribuem de forma considerável para o 3 processo maligno de diferentes formas de cancro, como, por exemplo, o mieloma múltiplo.

Por conseguinte, a síntese de pequenos compostos, que inibem, regulam e/ou modulam de forma específica a transdução de sinal das tirosina cinases e/ou das serina/treonina cinases , em particular da Met cinase, r é desejável e constitui um objetivo da presente invenção.

Descobriu-se que os compostos de acordo com a invenção e os seus sais possuem, com uma boa compatibilidade, propriedades farmacológicas de grande interesse.

Em pormenor, a presente invenção é relativa aos compostos com a Fórmula I que inibem, regulam e/ou modulam a transdução de sinal da Met cinase, às composições que contêm estes compostos, e aos processos para a sua utilização no tratamento de doenças e enfermidades condicionadas pela Met cinase, tais como angiogénese, cancro, aparecimento, crescimento e proliferação de tumores, arteriosclerose, doenças oftalmológicas, como a degeneração macular associada à idade, a neovascularização coroidal e a retinopatia diabética, doenças inflamatórias, artrite, trombose, fibrose, glomerulonefrite, neurodegeneração, psoríase, reestenose, cicatrização, rejeição de transplantes, doenças metabólicas e doenças do sistema imunitário, também doenças autoimunes, cirrose, diabetes e doenças dos vasos sanguíneos, neste caso também instabilidade e permeabilidade e outros do género nos mamíferos.

Os tumores sólidos, em particular os tumores de crescimento rápido, podem ser tratados com inibidores da Met cinase. A estes tumores sólidos pertencem leucemia monocítica, carcinoma do cérebro, urogenital, do sistema linfático, do 4 estômago, da laringe e do pulmão, entre estes o adenocarcinoma do pulmão e o carcinoma do pulmão de pequenas células. A presente invenção é relativa a processos para a regulação, modulação ou inibição da Met cinase, para prevenir e/ou tratar doenças ligadas a uma atividade desregulada ou perturbada da Met cinase. Em particular, também se pode empregar os compostos com a Fórmula I no tratamento de certas formas de cancro. Além disso, pode utilizar-se os compostos com a Fórmula I para produzir efeitos aditivos ou sinérgicos no caso de certas quimioterapias oncológicas existentes, e/ou para restabelecer a eficácia de certas quimioterapias ou radioterapias oncológicas existentes.

Além disso, é possivel utilizar os compostos com a Fórmula I no isolamento e no estudo da atividade ou da expressão da Met cinase. Os mesmos adequam-se ainda em particular à utilização em processos de diagnóstico de doenças ligadas a uma atividade desregulada ou perturbada da Met cinase. É possivel mostrar que os compostos de acordo com a invenção apresentam, num modelo tumoral de xenotransplante, uma ação antiproliferativa in vivo. Ministra-se os compostos de acordo com a invenção num doente com uma doença hiperproliferativa, com vista, por exemplo, a inibir o crescimento tumoral, minorar a inflamação que acompanha uma doença linfoproliferativa, inibir a rejeição de transplantes ou os danos neurológicos com base em reparação do tecido, etc. Os presentes compostos são úteis para fins profiláticos ou terapêuticos. Como empregue no presente documento, o conceito "tratar" é utilizado como referência tanto em relação à prevenção de doenças como ao tratamento de enfermidades pré-existentes. Consegue-se impedir a 5 proliferação através da administração dos compostos de acordo com a invenção antes do desenvolvimento e da manifestação da doença, através, por exemplo, do impedimento do crescimento tumoral, do impedimento do crescimento metástico, da redução de reestenoses relacionadas com a cirurgia cardiovascular, etc. Em alternativa, utiliza-se os compostos no tratamento de doenças prolongadas, por meio da estabilização ou da melhoria dos sintomas clinicos do doente. 0 hospedeiro ou doente pode pertencer a qualquer espécie de mamífero, como, por exemplo, espécies de primatas, em particular humanos; roedores, inclusive ratos, ratazanas e hamsters; coelhos; equinos, bovinos, cães, gatos, etc. Os modelos animais têm interesse em estudos experimentais, disponibilizando um modelo para o tratamento de uma doença nos humanos. A suscetibilidade de uma determinada célula relativamente ao tratamento com os compostos de acordo com a invenção pode ser determinada através de testes in vitro. Tipicamente, combina-se uma cultura da célula com um composto de acordo com a invenção em diferentes concentrações, durante um certo período de tempo que chegue para permitir que os agentes ativos sejam capazes de induzir a morte celular ou inibir a migração, usualmente entre aproximadamente uma hora e uma semana. No teste in vitro, pode utilizar-se células de cultura de uma amostra de biopsia. As células viáveis, que ficam depois do tratamento, são em seguida contadas. A dose varia em função do composto específico utilizado, da doença específica, do estado do doente, etc. Tipicamente, uma dose terapêutica é suficiente para reduzir de forma considerável a população celular indesejada no tecido-alvo, enquanto se mantém a capacidade de sobrevivência do doente. Prossegue-se 6 geralmente com o tratamento até se atingir uma redução considerável, por exemplo, pelo menos cerca de 50% de redução da carga celular, e pode continuar-se até que fundamentalmente já não se consiga detetar células indesejadas no organismo.

Com vista a identificar uma via de transmissão de sinal e a detetar interações entre diferentes vias de transmissão de sinal, diversos cientistas desenvolveram modelos ou sistemas modelares adequados, como, por exemplo, modelos de culturas de células (por exemplo, Khwaja et al., EMBO, 1997, 16, 2783-93) e modelos de animais transgénicos (por exemplo, White et al., Oncogene, 2001, 20, 7064-7072). Para determinar certos niveis na cascata de transmissão de sinal, é possivel utilizar compostos interativos de modo a modular o sinal (por exemplo, Stephens et al., Biochemical J., 2000, 351, 95-105). Também se pode utilizar os compostos de acordo com a invenção como reagentes, para testar as vias de transmissão de sinal dependentes das cinases nos animais e/ou em modelos de cultura de células, ou nas doenças clinicas referidas no presente pedido. A medição da atividade das cinases é uma técnica bem conhecida do especialista. Os sistemas de teste genéricos para determinar a atividade das cinases com substratos, por exemplo, histona (por exemplo, Alessi et al., FEBS Lett. 1996, 399, 3, páginas 333-338), ou com a proteina mielina básica encontram-se descritos na literatura (por exemplo, Campos-González, R. e Glenney, Jr., J. R. 1992, J. Biol. Chem. 267, página 14535).

Com vista a identificar os inibidores das cinases, encontram-se à disposição diversos sistemas de ensaios. No ensaio de cintilação por proximidade Scintillation- 7

Promixmity Assay (Sorg et al., J. of\ Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) e no FlashPlate Assay, mede-se a fosforilação radioativa de uma proteína ou de um péptido como substrato com γΑΤΡ. Na presença de um composto inibidor, não se consegue detetar sinal radioativo ou deteta-se um reduzido sinal radioativo. Além disso, pode utilizar-se as tecnologias Homogeneous Time-resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (HTR-FRET) e Fluorescência Polarizada (FP) como processos de ensaio (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191- 214) .

Outros processos de ensaio ELISA não radioativos utilizam anticorpos fosfoespecíficos (AC fosfo). O AC fosfo liga apenas o substrato fosforilado. Esta ligação é detetável com um segundo anticorpo antiovelha conjugado com peroxidase, através de quimioluminescência (Ross et al., 2002, Biochem. J.) .

Existem muitas doenças relacionadas com uma desregulação da proliferação celular e da morte celular (apoptose). As doenças de interesse incluem as que se seguem, sem ficarem a elas limitadas. É possivel utilizar os compostos de acordo com a invenção no tratamento de uma série de diferentes doenças, nas quais ocorre a proliferação e/ou a migração de células da musculatura lisa e/ou de células inflamatórias para a camada íntima de um vaso, do que resulta uma limitada irrigação sanguínea deste vaso, como, por exemplo, no caso de lesões oclusivas neointimais. Às doenças vasculares de transplantes oclusivas de interesse pertencem aterosclerose, doença vascular coronária após transplante, estenose de transplante venoso, reestenose de prótese perianastomótica, reestenose após angioplastia ou colocação de stent e outros do género.

ESTADO DA TÉCNICA

As di-hidropiridazinonas para o combate ao cancro encontram-se descritas no WO 03/037349 AI.

Outras piridazinas para o tratamento de doenças do sistema imunitário, doenças isquémicas e inflamatórias são conhecidas dos EP 1 043 317 AI e EP 1 061 077 Al.

Nos EP 0 738 716 A2 e EP 0 711 759 Bl, encontram-se descritas outras di-hidropiridazinonas e piridazinonas como fungicidas e inseticidas.

Outras piridazinonas encontram-se descritas como agentes cardiotónicos no US 4,397,854.

No JP 57-95964 são reveladas outras piridazinonas.

Encontram-se descritos outros derivados de piridazinona para o combate contra o cancro no WO 2007/065518 Al.

RESUMO DA INVENÇÃO

A invenção é relativa aos compostos com a Fórmula I

em que R significa Ar, R2 significa Η, A, - [C (R3) 2] nHet ou O [C (R3) 2] nHet R3 significa H, 9 W significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal e/ou A, D significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, pirroldi-ilo, oxazoldi-ilo, isoxazoldi-ilo, pirazoldi-ilo, imidazoldi-ilo, tiadiazoldi-ilo, piridazinodi-ilo, pirazinodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal e/ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-6 átomos de C,

Ar significa fenilo monossubstituido, dissubstituido ou trissubstituido por Hal e/ou CN,

Het significa piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, oxazolidinilo ou imidazolidinilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos ou dissubstituidos por =0 e/ou A.

Hal significa F, Cl, Br ou I, n significa 0, 1, 2, 3 ou 4, e aos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive às respetivas misturas em todas as relações.

Por compostos com a Fórmula I entende-se também os hidratos e solvatos destes compostos. 0 objeto da invenção consiste também nas formas opticamente ativas (estereoisómeros), nos enantiómeros, nos racematos, nos diastereómeros, e nos hidratos e solvatos destes compostos. Os solvatos dos compostos são adesões de moléculas de solventes inertes aos compostos, que se formam devido à sua força de atração mútua. Os solvatos são, por exemplo, mono-hidratos ou di-hidratos ou alcoolatos. 10

Por derivados de utilização em farmácia entende-se, por exemplo, os sais dos compostos de acordo com a invenção na forma dos denominados compostos profármacos (prodrugs). Por derivados profármacos entende-se os compostos com a Fórmula I, transformados com, por exemplo, grupos alquilo ou acilo, açúcares ou oligopéptidos, que são rapidamente decompostos no organismo nos compostos de acordo com a invenção eficazes. A estes pertencem igualmente os derivados poliméricos biodegradáveis dos compostos de acordo com a invenção, como descrito, por exemplo, in Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995) A expressão "quantidade eficaz" significa a quantidade de um medicamento ou de uma substância ativa farmacêutica, que provoca uma resposta biológica ou médica num tecido, sistema, animal ou humano, que, por exemplo, é procurada ou pretendida por um investigador ou médico.

Além disso, a expressão "quantidade com eficácia terapêutica" significa uma quantidade que, em comparação com um sujeito correspondente que não tenha recebido esta quantidade, tem por consequência o seguinte: uma melhor terapêutica, uma melhor cura, uma melhor prevenção ou erradicação de uma doença, de um quadro clinico, de um estado patológico, de uma enfermidade, de um distúrbio ou de efeitos secundários, ou também a contenção da progressão de uma doença, de uma enfermidade ou de um distúrbio. A denominação "quantidade com eficácia terapêutica" também abrange as quantidades que são eficazes no aumento da função fisiológica normal. 11 A invenção também tem por objeto a utilização das misturas dos compostos com a Fórmula I, como, por exemplo, misturas de dois diastereómeros com uma relação, por exemplo, de 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 ou 1:1000.

Com particular preferência, as misturas são misturas de compostos estereoisoméricos. A invenção tem por objeto os compostos com a Fórmula I e os seus sais, bem como um processo para a produção dos compostos com a Fórmula I de acordo com as reivindicações 1-2, e dos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, caracterizado por

a) se transformar um composto com a Fórmula II

II

em que R1 tem o significado dado na reivindicação 1, com um composto com a Fórmula III R3-CHL-W-D-R3 III, em que W, D, R2 e R3 têm os significados dados na reivindicação 1, e L significa Cl, Br, I ou um grupo OH livre ou transformado de forma funcional reagente,

ou b) se transformar um composto com a Fórmula II 12 em que R1, R3 reivindicação 1,

dados na

com um composto com a Fórmula V X-D-R2 V, em que D e R2 têm os significados dados na reivindicação 1 e X é um radical de éster do ácido borónico, ou c) se transformar um radical R2 noutro radical R2, ao acilar-se ou alquilar-se um grupo amina, ou d) se proceder à sua libertação de um dos respetivos derivados funcionais, através do tratamento com um meio de solvólise ou de hidrogenólise, e/ou se transformar uma base ou um ácido com a Fórmula I num dos seus sais.

Anterior e posteriormente, os radicais W, D, R1, R2 e R3 têm os significados dados na Fórmula I, se nada for expresso em contrário. 13 A expressão "carbamoílo" significa "aminocarbonilo" e vice- versa. A significa alquilo, estando este não ramificado (linear) ou ramificado, e tendo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos de C. A significa de preferência metilo, ainda etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo ou terc.-butilo, também ainda pentilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo ou 3-metilbutilo, 1,1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo ou 2.2- dimetilpropilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1-metilpentilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo ou 4-metilpentilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1.3- dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 2,3- dimetilbutilo ou 3,3-dimetilbutilo, 1-etilbutilo ou 2-etilbutilo, 1-etil-l-metilpropilo, l-etil-2- metilpropilo, 1,1,2-trimetilpropilo ou 1,2,2-trimetilpropilo. A significa, com total preferência, alquilo com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de C, de preferência metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec.-butilo, terc.-butilo, pentilo, hexilo. R1 significa preferencialmente Ar. R2 significa preferencialmente Η, A, -[C(R3) 2] nHet ou O [C (R3) 2] nHet, R3 significa preferencialmente H,

Ar significa, por exemplo, o-fluorofenilo, m-fluorofenilo ou p-fluorofenilo, o-bromofenilo, m-bromofenilo ou p-bromofenilo, o-clorofenilo, m-clorofenilo ou p-clorofenilo, o-cianofenilo, m-cianofenilo ou p- 14 cianofenilo, ainda preferencialmente, 2,3-difluorofenilo, 2,4-difluorofenilo, 2,5-difluorofenilo, 2,6-difluorofenilo, 3,4-difluorofenilo ou 3,5-difluorofenilo, 2,3-diclorofenilo, 2,4-diclorofenilo, 2,5-diclorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 3,4-diclorofenilo ou 3,5-diclorofenilo, 2,3-dibromofenilo, 2,4-dibromofenilo, 2,5-dibromofenilo, 2,6-dibromofenilo, 3,4-dibromofenilo ou 3,5-dibromofenilo, 2,3,4-triclorofenilo, 2,3,5-triclorofenilo, 2,3,6-triclorofenilo, 2,4,6-triclorofenilo ou 3,4,5-triclorofenilo, p-iodofenilo, 3,6-dicloro-4-aminofenilo, 4-fluoro-3-clorofenilo, 2-fluoro-4-bromofenilo, 2,5-difluoro-4-bromofenilo.

Ar significa, com particular preferência, fenilo monossubstituido, dissubstituido ou trissubstituido por Hal e/ou CN.

Het significa, com particular preferência, piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, oxazolidinilo ou imidazolidinilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos ou dissubstituidos por =0 e/ou A. W significa, com particular preferência, tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal e/ou A. D significa, com particular preferência, tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, pirroldi-ilo, oxazoldi-ilo, isoxazoldi-ilo, pirazoldi-ilo, imidazoldi-ilo, tiadiazoldi-ilo, piridazinodi-ilo, pirazinodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais 15 também estar monossubstituídos, dissubstituídos ou trissubstituídos por Hal e/ou A.

Hal significa preferencialmente F, Cl, Br, mas também I, com particular preferência F ou Cl.

Aplica-se a toda a invenção que todos os radicais que surjam várias vezes podem ser iguais ou diferentes, ou seja, são independentes uns dos outros. Os compostos com a Fórmula I podem ter um ou mais centros quirais e, logo, aparecer em diferentes formas estereoisoméricas. A Fórmula I inclui todas estas formas.

Em conformidade com isso, a invenção tem por objeto sobretudo os compostos com a Fórmula I, em que pelo menos um dos radicais referidos tem um dos significados preferidos anteriormente indicados. Alguns grupos preferidos de compostos podem ser expressos pelas seguintes fórmulas parciais Ia a Ij, que correspondem à Fórmula I e em que os radicais não referidos em detalhe têm o significado indicado na Fórmula I, em que contudo em Ia A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-6 átomos de C; em Ib Ar significa fenilo monossubstituido, dissubstituido ou trissubstituido por Hal e/ou CN; em Ic em Id em Ie R1 significa Ar; R2 significa H, 0 [ C (R3) 21 nHet; R3 significa H; A, - [C (R3) 2] nHet ou 16 em If W significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos trissubstituidos , dissubstituidos ou por Hal e/ou A; em Ig D significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi-ilo, pirroldi-ilo, oxazoldi-ilo, isoxazoldi-ilo, pirazoldi-ilo, imidazoldi-ilo, tiadiazoldi-ilo, piridazinodi- ilo, pirazinodi- ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubsti tuido s ou trissubstituidos por Hal e/ou A; em Ih Het sign if ica piperidinilo, pirrolidi nilo, morfolini lo, piperazinilo, oxazolidinilo ou imidazoli dinil 0, podendo os radi cais também estar monossubs titui dos ou dissubstituidos por =0 e/ou A; em I j R1 sign if ica Ar r R2 sign if ica Η, A, [C (R3) 2] nHet ou 0 [ C ( R3 ) 2 ] n Het; R3 sign if ica H, W sign if ica tiazoldi-ilo, tiofenodi -ilo, furanodi- ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi -ilo, podendo os radicais também estar monossubs titui dos , dissubs tituidos ou trissubst ituidos por Hal e/ou A, D sign if ica tiazoldi-ilo, tiofenodi -ilo, furanodi- ilo, pirroldi-ilo, oxazoldi -ilo, isoxazoldi-ilo r pirazoldi-ilo, imidazoldi -ilo, tiadiazoldi-ilo, piridazinodi-ilo, pirazinodi- 17 ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal, e/ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-6 átomos de C,

Het significa piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, oxazolidinilo ou imidazolidinilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos ou dissubstituidos por =0 e/ou A,

Hal significa F, Cl, Br ou I, n significa 0, 1, 2, 3 ou 4, bem como os respetivos sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive todas as misturas em todas as relações.

Os compostos com a Fórmula I e também as substâncias de partida para a sua produção são de resto produzidos por métodos de si conhecidos, como descritos na literatura (por exemplo, em obras padrão como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Estugarda), e sob condições de reação conhecidas e adequadas às referidas transformações. Neste caso, também é possível recorrer a variantes de si conhecidas, aqui não mencionadas de forma mais pormenorizada.

Os compostos de partida com as Fórmulas II e III são normalmente conhecidos. Caso sejam novos, poderão ser contudo produzidos por métodos de si conhecidos. 18

As piridazinonas com a Fórmula II utilizadas poderão normalmente, caso não se encontrem à venda, ser obtidas de acordo com W. J. Coates, A. McKillop, Synthesis, 1993, 334-342 . É possivel obter preferencialmente os compostos com a Fórmula I, ao transformar um composto com a Fórmula II com um composto com a Fórmula III.

Nos compostos com a Fórmula III, L significa de preferência Cl, Br, I ou um grupo OH livre ou transformado de forma reativa, como, por exemplo, um éster ativado, uma imidazolida ou um alquilsulfoniloxi com 1-6 átomos de C (preferencialmente metilsulfoniloxi ou trifluorometilsulfoniloxi) ou arilsulfoniloxi com 6-10 átomos de C (de preferência fenilsulfoniloxi ou p-tolilsulfoniloxi). A transformação ocorre normalmente na presença de um meio de ligação ácida, de preferência de uma base orgânica, como DIPEA, trietilamina, dimetilanilina; piridina ou quinolina.

Também poderá ser favorável a adição de um hidróxido, carbonato ou bicarbonato de metal alcalino ou de metal alcalino-terroso, ou de outro sal de um ácido fraco de metais alcalinos ou de metais alcalino-terrosos, de preferência de potássio, de sódio, de cálcio ou de césio. O tempo de reação encontra-se, em função das condições aplicadas, entre alguns minutos e 14 dias, a temperatura de reação entre cerca de -30° e 140°, normalmente entre -10° e 90°, em particular entre cerca de 0o e cerca de 70°.

Como solventes inertes adequam-se, por exemplo, os hidrocarbonetos, tais como hexano, éter de petróleo, 19 benzeno, tolueno ou xileno; hidrocarbonetos clorados, tais como tricloroetileno, 1,2-dicloroetano, tetracloreto de carbono, clorofórmio ou diclorometano; álcoois como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol ou terc.-butanol; éteres como éter dietilico, éter di-isopropílico, tetra-hidrofurano (THF) ou dioxano; éteres glicólicos como éter etilenoglicolmonometilico ou etilenoglicolmonoetilico (metilglicol ou etilglicol), éter etilenoglicoldimetilico (diglima); cetonas como a acetona ou a butanona; amidas como acetamida, dimetilacetamida ou dimetilformamida (DMF); nitrilos como o acetonitrilo; sulfóxidos como o sulfóxido de dimetilo (DMSO); dissulfureto de carbono; ácidos carboxilicos, tais como o ácido fórmico ou o ácido acético; nitrocompostos como nitrometano ou nitrobenzeno; ésteres como acetato de etilo ou misturas dos solventes referidos. É dada particular preferência a acetonitrilo, diclorometano e/ou DMF.

Os compostos com a Fórmula I podem ainda ser preferencialmente obtidos ao transformar um composto com a Fórmula IV com um composto com a Fórmula V numa ligação de Suzuki.

Nos compostos com a Fórmula V, X significa um radical de éster do ácido borónico, preferencialmente

Realiza-se a transformação sob as condições padrão de uma ligação de Suzuki. 20 É ainda possível transformar um composto com a Fórmula I noutro composto com a Fórmula I, ao transformar um radical R2 noutro radical R2, através, por exemplo, da redução de grupos nitro (por exemplo, através de hidrogenação em níquel Raney ou Pd-carbono num solvente inerte, como o metanol ou o etanol) em grupos amina.

Além disso, é possível acilar os grupos amina livres de forma usual com um cloreto de ácido ou anidrido de ácido, ou alquilá-los com um halogeneto de alquilo não substituído ou substituído, de forma conveniente num solvente inerte, como diclorometano ou THF e/ou na presença de uma base como a trietilamina ou a piridina, a temperaturas compreendidas entre -60 e +30°.

Além disso, é possível obter os compostos com a Fórmula I ao libertá-los dos respetivos derivados funcionais, através de solvólise, em particular de hidrólise, ou através de hidrogenólise.

As substâncias de partida preferidas para a solvólise ou hidrogenólise são as que contêm, em vez de um ou mais grupos amina e/ou hidroxi livre (s), os respetivos grupos amina e/ou hidroxi protegidos, de preferência os que contêm, em vez de um átomo de H ligado a um átomo de N, um grupo de proteção amina, como, por exemplo, os que correspondem à Fórmula I, mas contendo, em vez de um grupo NH2, um grupo NHR' (em que R' significa um grupo de proteção amina, por exemplo, BOC ou CBZ).

Além disso, prefere-se as substâncias de partida que têm, em vez do átomo de H de um grupo hidroxi, um grupo de proteção hidroxi, por exemplo, as que correspondem à Fórmula I, mas contendo, em vez de um grupo hidroxifenilo, 21 um grupo R"0-fenilo (em que R" significa um grupo de proteção hidroxi).

Também podem existir vários grupos amina e/ou hidroxi protegidos - iguais ou diferentes - na molécula da substância de partida. Se os grupos de proteção existentes forem diferentes uns dos outros, será possível em muitos casos dissocia-los de forma seletiva. FMOC; arilsulfonilo, como Mtr, A expressão "grupo de proteção amina" é geralmente conhecida e é relativa a grupos adequados a proteger (bloquear) um grupo amina de transformações químicas, mas sendo os mesmos de fácil remoção, depois de realizada a reação química pretendida noutros pontos da molécula. Típicos destes grupos são, sobretudo, os grupos acilo, arilo, aralcoximetilo ou aralquilo não substituídos ou substituídos. Dado que os grupos de proteção amina são removidos após a reação (ou a sequência de reação) pretendida, o respetivo tipo e o respetivo tamanho não são de resto críticos; porém, prefere-se aqueles com 1-20, em particular 1-8, átomos de C. A expressão "grupo acilo" deverá ser entendida em sentido lato em ligação com o presente processo. Engloba os grupos acilo derivados de ácidos sulfónicos ou carboxílicos alifáticos, aralifáticos, aromáticos ou heterocíclicos, e sobretudo grupos alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo ou, em particular, aralcoxicarbonilo. Os exemplos dos grupos acilo deste tipo são alcanoílo, como acetilo, propionilo, butirilo; aralcanoílo, como fenilacetilo; aroílo como benzoílo ou toluílo; ariloxialcanoílo como POA; alcoxicarbonilo como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, BOC, 2-iodoetoxicarbonilo; aralquiloxicarbonilo como CBZ ("carbobenzoxi") , 4-metoxibenziloxicarbonilo, 22

Pbf ou Pmc. Os grupos de proteção amina preferidos são BOC e Mtr, ainda CBZ, Fmoc, benzilo e acetilo. A expressão "grupo de proteção hidroxi" também é geralmente conhecida e é relativa a grupos adequados a proteger um grupo hidroxi de transformações químicas, mas sendo os mesmos contudo de fácil remoção, depois de realizada a reação química pretendida noutros pontos da molécula. Típicos destes grupos são os grupos arilo, aralquilo ou acilo não substituídos ou substituídos acima referidos, e também ainda os grupos alquilo. A natureza e o tamanho dos grupos de proteção hidroxi não são críticos, dado que, após a reação ou a sequência de reação química pretendida, os mesmos voltam a ser removidos; prefere-se os grupos com 1-20, em particular 1-10, átomos de C. Os exemplos de grupos de proteção hidroxi são, entre outros, terc.-butoxicarbonilo, benzilo, p-nitrobenzoílo, p-toluenossulfonilo, terc.-butilo e acetilo, sendo dada particular preferência a benzilo e a terc.-butilo. Os grupos COOH no ácido aspártico e no ácido glutâmico são preferencialmente protegidos na forma do respetivo éster de terc.-butilo (por exemplo, Asp(OBut)). A libertação dos compostos com a Fórmula I dos respetivos derivados funcionais ocorre - em função do grupo de proteção utilizado - por exemplo, com ácidos fortes, favoravelmente com TFA ou ácido perclórico, mas também com outros ácidos inorgânicos fortes, tais como o ácido clorídrico ou o ácido sulfúrico, ácidos carboxílicos orgânicos fortes como o ácido tricloroacético ou ácidos sulfónicos, como o ácido benzenossulfónico ou p-toluenossulfónico. É possível a presença de um solvente inerte adicional, mas nem sempre é imprescindível. Como solventes inertes adequam-se, preferencialmente, os ácidos orgânicos, preferencialmente, carboxílicos, como o ácido 23 acético, éteres como o tetra-hidrofurano ou o dioxano, amidas como a DMF, hidrocarbonetos halogenados, como o diclorometano, ainda também álcoois como o metanol, o etanol ou o isopropanol, e água. Entram ainda em linha de conta as misturas dos solventes acima referidos. Utiliza-se TFA preferencialmente em excesso sem a adição de outro solvente, o ácido perclórico na forma de uma mistura de ácido acético e ácido perclórico a 70% numa relação de 9:1. As temperaturas de reação da dissociação encontram-se, favoravelmente, entre cerca de 0 e cerca de 50°, trabalhando-se preferencialmente entre os 15 e os 30° (temperatura ambiente). É possível dissociar os grupos BOC, OBut, Pbf, Pmc e Mtr preferencialmente com, por exemplo, TFA em diclorometano ou com HC1 aproximadamente 3 a 5n em dioxano nos 15-30°, o grupo FMOC com uma solução a cerca de 5 a 50% de dimetilamina, dietilamina ou piperidina em DMF nos 15-30°.

Utiliza-se o grupo tritilo na proteção dos aminoácidos histidina, asparagina, glutamina e cisteína. A dissociação ocorre, em função do produto final pretendido, com TFA/tiofenol a 10%, sendo o grupo tritilo dissociado de todos os aminoácidos referidos, no caso da utilização de TFA/anisol ou TFA/tioanisol, dissocia-se apenas o grupo tritilo de His, Asn e Gin, permanecendo em contrapartida na cadeia lateral da Cys. Utiliza-se o grupo Pbf (pentametilbenzofuranilo) na proteção da Arg. A dissociação ocorre, por exemplo, com TFA em diclorometano.

Os grupos de proteção de remoção hidrogenolítica (por exemplo, CBZ ou benzilo) podem ser dissociados através, por exemplo, do tratamento com hidrogénio, na presença de um catalisador (por exemplo, de um catalisador de metal nobre como o paládio, favoravelmente num suporte como o carbono).

Como solventes adequam-se neste caso os acima referidos, em particular, por exemplo, álcoois como o metanol ou o etanol, ou amidas como a DMF. Realiza-se a hidrogenólise normalmente a temperaturas entre cerca de 0 e 100° e a pressões entre cerca de 1 e 200 bar, de preferência nos 20-30° e 1-10 bar. Ocorre uma boa hidrogenólise do grupo CBZ, por exemplo, em Pd a 5-10%/C em metanol ou com formiato de amónio (em vez de hidrogénio) em Pd/C em metanol/DMF nos 20-30°.

Os sais farmacêuticos e outras formas E possível utilizar os compostos de acordo com a invenção referidos na respetiva forma não salina final. Por outro lado, a presente invenção abrange igualmente a utilização destes compostos na forma dos respetivos sais inócuos em farmácia, que podem ser derivados de diversas bases e de diversos ácidos orgânicos e inorgânicos seguindo procedimentos conhecidos da especialidade. As formas salinas inócuas em farmácia dos compostos com a Fórmula I são produzidas sobretudo de forma convencional. Se o composto com a Fórmula I contiver um grupo de ácido carboxilico, é possível a formação de um dos respetivos sais adequados, ao transformar o composto com uma base apropriada no sal de adição básica correspondente. Estas bases são, por exemplo, hidróxidos de metais alcalinos, entre os quais hidróxido de potássio, hidróxido de sódio e hidróxido de lítio; hidróxidos de metais alcalinoterrosos, tais como hidróxido de bário e hidróxido de cálcio; alcoolatos de metais alcalinos, por exemplo, etanolato de potássio e propanolato de sódio; e diversas bases orgânicas, tais como piperidina, dietanolamina e N-metilglutamina. Pertencem também a estes os sais de alumínio dos compostos com a Fórmula I. No caso de certos compostos, é possível formar sais de adição ácida ao tratar 25 estes compostos com ácidos orgânicos e inorgânicos inócuos em farmácia, como, por exemplo, halogenetos de hidrogénio como o cloreto de hidrogénio, o brometo de hidrogénio ou o iodeto de hidrogénio, outros ácidos minerais e os respetivos sais, como sulfato, nitrato ou fosfato, e outros do género, e sulfonatos de alquilo e sulfonatos de monoarilo, tais como etanossulfonato, toluenossulfonato e benzenossulfonato, e outros ácidos orgânicos e os respetivos sais, como acetato, trifluoroacetato, tartrato, maleato, succinato, citrato, benzoato, salicilato, ascorbato e outros do género. Em conformidade com isso pertencem, aos sais de adição ácida inócuos em farmácia dos compostos com a Fórmula I, os seguintes: acetato, adipato, alginato, arginato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato (besilato), bissulfato, bissulfito, brometo, butirato, canforato, sulfonato de cânfora, caprilato, cloreto, clorobenzoato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, di-hidrogenofosfato, dinitrobenzoato, sulfato de dodecilo, etanossulfonato, fumarato, galacterato (de ácido múcico), galacturonato, gluco-heptanoato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, hemissuccinato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, hipurato, hidrocloreto, hidrobrometo, hidroiodeto, 2-hidroxietanossulfonato, iodeto, isetionato, isobutirato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, metafosfato, metanossulfonato, benzoato de metilo, mono-hidrogenofosfato, 2-naftalinossulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, oleato, pamoato, pectinato, persulfato, acetato de fenilo, propionato de 3-fenilo, fosfato, fosfonato, ftalato, o que no entanto não representa qualquer restrição.

Além disso, pertencem acordo com a invenção cálcio, de cobre aos sais alcalinos dos compostos os sais de aluminio, de amónio, férricos ferrosos de litio de de de 26 magnésio, mangânicos, manganosos, de potássio, de sódio e de zinco, o que no entanto não deverá constituir qualquer restrição. Preferidos dentre os sais anteriormente referidos são o amónio; os sais dos metais alcalinos sódio e potássio, e os sais dos metais alcalinoterrosos cálcio e magnésio. Aos sais dos compostos com a Fórmula I que derivam de bases orgânicas atóxicas inócuas a nivel farmacêutico, pertencem os sais de aminas primárias, secundárias e terciárias, de aminas substituídas, dentre as quais também as aminas substituídas de origem natural, de aminas cíclicas e de resinas de permuta iónica alcalinas, como, por exemplo, arginina, betaína, cafeína, cloroprocaína, colina, N,Ν'-dibenziletilenodiamina (benzatina), diciclo-hexilamina, dietanolamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilenodiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lidocaína, lisina, meglumina, N-metil-D-glucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas poliamínicas, procaína, purinas, teobromina, trietanolamina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina e tris-(hidroximetil)-metilamina (trometamina), o que no entanto não deverá constituir qualquer limitação.

Os compostos da presente invenção, que contêm grupos nitrogenados alcalinos, podem ser quaternados com agentes como os halogenetos de (C1-C4) -alquilo, tais como, por exemplo, cloreto de metilo, de etilo, de isopropilo e de terc.-butilo, brometo de metilo, de etilo, de isopropilo e de terc.-butilo, e iodeto de metilo, de etilo, de isopropilo e de terc.-butilo; sulfatos de di-(Ci-C4)-alquilo, como, por exemplo, sulfato de dimetilo, de dietilo e de diamilo; halogenetos de (Ci0-Ci8) -alquilo, como, por exemplo, cloreto de decilo, de dodecilo, de laurilo, de miristilo e de estearilo, brometo de decilo, de dodecilo, 27 de laurilo, de miristilo e de estearilo, e iodeto de decilo, de dodecilo, de laurilo, de miristilo e de estearilo; e halogenetos de aril-(C1-C4)-alquilo, como, por exemplo, cloreto de benzilo e brometo de fenetilo. Com estes sais consegue-se produzir os compostos de acordo com a invenção tanto hidrossolúveis como oleossolúveis.

Aos sais farmacêuticos acima referidos preferidos pertencem acetato, trifluoroacetato, besilato, citrato, fumarato, gluconato, hemissuccinato, hipurato, hidrocloreto, hidrobrometo, isetionato, mandelato, meglumina, nitrato, oleato, fosfonato, pivalato, fosfato de sódio, estearato, sulfato, sulfossalicilato, tartrato, tiomalato, tosilato e trometamina, o que no entanto não deverá constituir qualquer restrição.

Prefere-se em particular hidrocloreto, di-hidrocloreto, hidrobrometo, maleato, mesilato, fosfato, sulfato e succinato.

Produz-se os sais de adição ácida de compostos alcalinos com a Fórmula I, ao fazer contactar a forma alcalina livre com uma quantidade suficiente do ácido pretendido, preparando-se de forma usual o sal. É possivel regenerar a base livre ao fazer contactar a forma salina com uma base e ao isolar a base livre de forma usual. As formas alcalinas livres distinguem-se em certo sentido das respetivas formas salinas em termos de determinadas propriedades fisicas, como a solubilidade em solventes polares; no âmbito da invenção, os sais correspondem porém de resto às respetivas formas alcalinas livres.

Como referido, forma-se os sais de adição alcalina inócuos a nivel farmacêutico dos compostos com a Fórmula I com metais ou aminas, tais como metais alcalinos e metais 28 alcalinoterrosos ou aminas orgânicas. Os metais preferidos são sódio, potássio, magnésio e cálcio. As aminas orgânicas preferidas são N,N'-dibenziletilenodiamina, cloroprocaina, colina, dietanolamina, etilenodiamina, N-metil-D-glucamina e procaina.

Produz-se os sais de adição alcalina dos compostos ácidos de acordo com a invenção, ao fazer contactar a forma ácida livre com uma quantidade suficiente da base pretendida, preparando-se o sal de forma usual. É possivel regenerar o ácido livre ao fazer contactar a forma salina com um ácido e ao isolar o ácido livre de forma usual. As formas ácidas livres distinguem-se em certo sentido das respetivas formas salinas em termos de determinadas propriedades fisicas, como a solubilidade em solventes polares; no âmbito da invenção, os sais correspondem porém de resto às respetivas formas ácidas livres.

Se um composto de acordo com a invenção contiver mais do que um grupo que possa formar estes sais com inocuidade farmacêutica, a invenção também abarcará sais múltiplos. Às formas salinas múltiplas tipicas pertencem, por exemplo, bitartrato, diacetato, difumarato, dimeglumina, difosfato, dissódio e tri-hidrocloreto, o que no entanto não deverá representar qualquer limitação.

Em relação ao anteriormente referido, verifica-se que a expressão "sal inócuo a nivel farmacêutico" consiste, no presente contexto, numa substância ativa que contém um composto com a Fórmula I na forma de um dos respetivos sais, sobretudo quando esta forma salina confere à substância ativa, comparativamente à forma livre da substância ativa ou a qualquer outra forma salina da substância ativa, anteriormente utilizada, propriedades farmacocinéticas melhoradas. A forma salina inócua a nível 29 farmacêutico da substância ativa também pode conferir a esta substância ativa primeiro uma propriedade farmacocinética pretendida, a qual não tinha anteriormente, e poderá até mesmo influenciar de forma positiva a farmacodinâmica desta substância ativa em termos da sua eficácia terapêutica no organismo. A invenção tem ainda por objeto medicamentos contendo pelo menos um composto com a Fórmula I e/ou os respetivos sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as suas misturas em todas as relações, e eventualmente substâncias de suporte e/ou substâncias auxiliares. É possível ministrar as formulações farmacêuticas na forma de unidades de dosagem, que contêm uma quantidade predeterminada de substância ativa por unidade de dosagem. Uma unidade destas pode conter, por exemplo, 0,5 mg a 1 g, de preferência 1 mg a 700 mg, com especial preferência 5 mg a 100 mg, de um composto de acordo com a invenção, em função do quadro clínico tratado, da via de administração e da idade, do peso e do estado do doente, ou é possível ministrar as formulações farmacêuticas na forma de unidades de dosagem que contêm uma quantidade predeterminada de substância ativa por unidade de dosagem. As formulações preferidas das unidades de dosagem são aquelas que contêm uma dose diária ou uma dose parcial, como acima indicado, ou uma sua fração correspondente, de uma substância ativa. Além disso, é possível produzir estas formulações farmacêuticas com um dos processos geralmente conhecidos na especialidade farmacêutica.

As formulações farmacêuticas podem ser ajustadas à administração através de uma via adequada opcional, como, por exemplo, oral (inclusive bucal ou sublingual), retal, 30 nasal, tópica (inclusive bucal, sublingual ou transdérmica), vaginal ou parenteral (inclusive subcutânea, intramuscular, intravenosa ou intradérmica). É possível produzir estas formulações por todos os processos conhecidos na especialidade farmacêutica, ao colocar, por exemplo, a substância ativa com a substância de suporte ou as substâncias de suporte, ou com a substância auxiliar ou as substâncias auxiliares.

As formulações farmacêuticas ajustadas à administração oral podem ser ministradas na forma de unidades separadas, como, por exemplo, cápsulas ou comprimidos; pós ou granulados; soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; ingredientes de espuma ou espumas comestíveis; ou emulsões líquidas de óleo em água ou emulsões líquidas de água em óleo.

Assim é possível combinar, a título de exemplo, no caso da administração oral na forma de um comprimido ou de uma cápsula, o componente de substância ativa com uma substância de suporte inerte oral, atóxica e inócua a nível farmacêutico, como, por exemplo, etanol, glicerina, água, entre outros. Produz-se os pós ao fragmentar-se o composto para um tamanho fino adequado e ao misturá-lo com uma substância de suporte farmacêutica fragmentada de forma semelhante, como, por exemplo, com um hidrato de carbono comestível, como é o caso, por exemplo, do amido ou do manitol. Um aromatizante, um conservante, um dispersor e um corante também poderão estar presentes.

Fabrica-se as cápsulas ao produzir-se uma mistura em pó, como acima descrito, e ao encher-se com esta revestimentos moldados de gelatina. Os agentes deslizantes e lubrificantes, como, por exemplo, ácido silícico de elevada dispersão, talco, estearato de magnésio, estearato de 31 cálcio ou polietilenoglicol na forma sólida, podem ser adicionados à mistura em pó antes da operação de enchimento. Também é possível adicionar um desintegrante ou um solubilizador, como, por exemplo, ágar-ágar, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio, de modo a melhorar a disponibilidade do medicamento depois da toma da cápsula.

Além disso, é igualmente possível incorporar, se necessário ou pretendido, ligantes, lubrificantes e desintegrantes apropriados e corantes na mistura. Aos ligantes apropriados pertencem amido, gelatinas, açúcares naturais, tais como, glicose ou beta-lactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas, como, por exemplo, goma arábica, adraganta ou alginato de sódio, carboximetilcelulose, polietilenoglicol, ceras, entre outros. Aos lubrificantes utilizados nestas formas de dosagem pertencem oleato de sódio, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio, entre outros. Aos desintegrantes pertencem, sem se ficar a estes limitado, amido, metilcelulose, ágar-ágar, bentonite, goma xantana, entre outros. Formula-se os comprimidos ao, por exemplo, produzir uma mistura de pó, ao granular-se a mesma e ao proceder-se à sua compressão a seco, ao adicionar-se um lubrificante e um desintegrante, e ao comprimir-se isto tudo na forma de comprimidos. Produz-se uma mistura em pó ao misturar-se o composto, fragmentado de forma adequada, com um diluente ou com uma base, como acima descrito, e eventualmente com um ligante, como, por exemplo, carboximetilcelulose, um alginato, gelatinas ou polivinilpirrolidona, um retardador de dissolução, como, por exemplo, parafina, um acelerador de reabsorção, como, por exemplo, um sal quaternário e/ou um absorvente, como, por exemplo, bentonite, caulina ou fosfato de dicálcio. É possível granular a mistura em pó ao humidificar-se a mesma com um ligante, como, por exemplo, xarope, pasta de amido, mucilagem de Acadia ou soluções de 32 materiais celulósicos ou poliméricos, e ao proceder-se à sua compressão através de um crivo. Em alternativa à granulação, é possível deixar a mistura em pó passar por uma máquina de produção de comprimidos, originando-se grumos não uniformes, que são fracionados na forma de granulados. Pode engordurar-se os granulados através da adição de ácido esteárico, de um sal de estearato, de talco ou de óleo mineral, de modo a impedir uma colagem aos moldes da massa fundida para comprimidos. A mistura engordurada é depois comprimida na forma de comprimidos. Também é possível combinar os compostos de acordo com a invenção com uma substância de suporte inerte fluida e, depois, fazer a sua compressão direta em comprimidos sem a realização das etapas de granulação ou de compressão a seco. Poderá existir uma camada de proteção transparente ou opaca, composta por um selante de goma laca, por uma camada de açúcar ou de material polimérico, e por uma camada brilhante de cera. A estes revestimentos é possível adicionar corantes, de modo a se conseguir fazer a distinção entre as diferentes unidades de dosagem.

Os líquidos orais, tais como, por exemplo, solução, xaropes e elixires, podem ser produzidos na forma de unidades de dosagem, pelo que uma certa quantidade conterá uma quantidade predeterminada do composto. Os xaropes podem ser produzidos ao dissolver-se o composto numa solução aquosa com um sabor adequado, enquanto os elixires são produzidos com a utilização de um veículo alcoólico atóxico. As suspensões podem ser formuladas pela dispersão do composto num veículo atóxico. Também é possível adicionar, entre outros, solubilizadores e emulsionantes, como, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados e éter de polioxietilenossorbitol, conservantes, aditivos aromatizantes, como, por exemplo, óleo de hortelã-pimenta 33 ou adoçantes naturais ou sacarina, ou outros adoçantes sintéticos.

As formulações das unidades de dosagem destinadas à administração oral podem estar eventualmente incluídas em microcápsulas. Também se pode produzir a formulação pelo prolongamento ou pela retardação da libertação, como, por exemplo, através do revestimento ou da incorporação de partículas de material em polímeros, ceras, entre outros.

Os compostos com a Fórmula I e os seus sais, tautómeros e estereoisómeros também podem ser ministrados na forma de sistemas de introdução lipossomais, como, por exemplo, pequenas vesículas unilamelares, grandes vesículas unilamelares e vesículas multilamelares. Os lipossomas podem ser compostos por diversos fosfolípidos, como, por exemplo, colesterina, estearilamina ou fosfatidilcolinas.

Os compostos com a Fórmula I e os seus sais, tautómeros e estereoisómeros também podem ser introduzidos com a utilização de anticorpos monoclonais como suportes individuais, aos quais se ligam as moléculas do composto. Os compostos também podem ser ligados a polímeros solúveis como suportes de fármaco dirigidos ao alvo. Estes polímeros podem incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, poli-hidroxipropilmetacrilamidofenol, poli-hidroxietilaspartamidofenol ou óxido de polietileno-polilisina, com substituição por radicais palmitoílo. Além disso, os compostos podem estar ligados a uma classe de polímeros biodegradáveis, adequados a atingir uma libertação controlada de um medicamento, como, por exemplo, ácido poliláctico, poliepsilon-caprolactona, ácido poli-hidroxibutírico, poliortoéster, poliacetais, polidi-hidroxipiranos, policianoacrilatos e copolímeros em bloco de reticulação cruzada ou anfipáticos de hidrogéis. 34

As formulações farmacêuticas ajustadas à administração transdérmica podem ser ministradas na forma de autoemplastros, com vista a um contacto estreito e prolongado com a epiderme do recetor. Assim, é por exemplo possivel introduzir a substância ativa a partir do emplastro por meio de iontoforese, como descrito em termos gerais in Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Os compostos farmacêuticos adaptados à administração tópica podem ser formulados na forma de pomadas, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, géis, pulverizadores, aerossóis ou óleos.

No caso dos tratamentos oftálmicos ou dos tratamentos de outros tecidos externos, como, por exemplo, da boca e da pele, aplicar-se-á de preferência as formulações na forma de pomadas ou de cremes tópicos. No caso da formulação na forma de uma pomada, é possivel utilizar a substância ativa com uma base cremosa parafinica ou com uma base cremosa miscivel com a água. Em alternativa, é possivel formular a substância ativa na forma de um creme com uma base cremosa de óleo em água ou com uma base de água em óleo. Às formulações farmacêuticas ajustadas à aplicação tópica oftálmica pertencem as gotas para os olhos, estando a substância ativa dissolvida ou suspensa num suporte apropriado, em particular num solvente aquoso.

As formulações farmacêuticas adaptadas à aplicação tópica bucal abrangem pastilhas para chupar, pastilhas e colutórios.

As formulações farmacêuticas adaptadas à administração retal podem ser ministradas na forma de supositórios ou de enemas. 35

As formulações farmacêuticas adaptadas à administração nasal, nas quais a substância de suporte é um sólido, contêm um pó grosso com particulas com uma granulometria, por exemplo, de 20-500 microns, que é desta forma absorvida como tabaco de inalar, ou seja, por rápida inalação através das vias nasais a partir de um recipiente mantido bem junto ao nariz com o pó. As formulações apropriadas para a administração como pulverizador nasal ou gotas nasais, com um liquido como substância de suporte, abrangem as soluções de substâncias ativas em água ou em óleo.

As formulações farmacêuticas adaptadas à administração por inalação abrangem os pós ou as nebulizações de particulas finas, que podem ser gerados por diversos tipos de doseadores sob pressão com aerossóis, nebulizadores ou insufladores.

As formulações vaginal podem cremes, géis, pulverização. farmacêuticas adaptadas à administração ser aplicadas como pessários, tampões, pastas, espumas ou formulações para Às formulações farmacêuticas adaptadas à administração parenteral pertencem as soluções injetáveis estéreis aquosas e não aquosas, que contêm antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos, através dos quais a formulação fica isotónica com o sangue do recetor a ser tratado; bem como suspensões estéreis aquosas e não aquosas, que poderão conter agentes de suspensão e espessantes. Pode ministrar-se as formulações em recipientes de dose individual ou de doses múltiplas, como, por exemplo, ampolas e frascos selados, e pode proceder-se ao seu armazenamento no estado liofilizado, de modo a que seja apenas necessária a adição do liquido de suporte estéril, por exemplo, água para fins de injeção, mesmo antes da utilização. As soluções 36 injetáveis e as suspensões produzidas segundo a fórmula podem ser produzidas a partir de comprimidos, granulados e pós estéreis.

Subentende-se que as formulações, a par dos componentes acima referidos em particular, podem conter outros meios usuais na especialidade, em ligação com o respetivo tipo de formulação; assim, por exemplo, as formulações adequadas à administração oral poderão conter aromatizantes.

Uma quantidade com eficácia terapêutica de um composto com a Fórmula I depende de uma série de fatores, inclusive, por exemplo, da idade e do peso do animal, do quadro clinico preciso que requer o tratamento, e da respetiva gravidade, da composição da formulação e da via de administração, e é por último determinada pelo médico assistente ou pelo veterinário. No entanto, uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a invenção com vista ao tratamento do crescimento neoplásico, por exemplo, carcinoma do intestino grosso ou carcinoma da mama, encontra-se geralmente compreendida entre 0,1 e 100 mg/kg de peso corporal do recetor (mamífero) por dia e, muito tipicamente, entre 1 e 10 mg/kg de peso corporal por dia. Assim, no caso de um mamífero adulto com 70 kg de peso, a quantidade efetiva por dia encontrar-se-á normalmente entre 7 0 e 700 mg, podendo esta quantidade ser ministrada como dose individual por dia ou, mais usualmente, numa série de doses parciais (como, por exemplo, duas, três, quatro, cinco ou seis) por dia, indo a dose total diária ser igual. Uma quantidade eficaz de um sal ou de um solvato ou de um respetivo derivado fisiologicamente funcional pode ser determinada por si como parte da quantidade eficaz do composto de acordo com a invenção. Parte-se do princípio que dosagens semelhantes se adequam ao tratamento dos outros quadros clínicos acima referidos. 37 A invenção tem ainda por objeto os medicamentos contendo pelo menos um composto com a Fórmula I e/ou os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, e pelo menos outra substância ativa farmacológica. A invenção tem também por objeto um conjunto (kit) composto por embalagens separadas de (a) uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula I e/ou dos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, e (b) uma quantidade eficaz de outra substância ativa farmacológica. 0 kit contém recipientes apropriados, tais como caixas ou pacotes, frascos individuais, saquetas ou ampolas. 0 kit pode conter, por exemplo, ampolas separadas, nas quais se encontre, por sua vez, uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula I e/ou dos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, e uma quantidade eficaz de outra substância ativa farmacológica dissolvida ou na forma liofilizada.

UTILIZAÇÃO

Os presentes compostos adequam-se como substâncias ativas farmacêuticas aos mamíferos, em particular aos humanos, no tratamento de doenças relacionadas com as tirosina cinases. A estas doenças pertencem a proliferação de células tumorais, a formação patológica de vasos sanguíneos (ou 38 angiogénese), que promove o crescimento de tumores sólidos, e a formação de vasos sanguíneos oculares (retinopatia diabética, degeneração macular associada à idade e outros do género). A presente invenção compreende a utilização dos compostos com a Fórmula I e/ou dos seus sais e solvatos fisiologicamente inócuos, na produção de um medicamento para o tratamento ou para a prevenção do cancro. Os carcinomas preferidos para o tratamento provêm do grupo carcinoma cerebral, carcinoma do trato urogenital, carcinoma do sistema linfático, carcinoma do estômago, carcinoma da laringe e carcinoma do pulmão. Outro grupo de formas de cancro preferidas são leucemia monocítica, adenocarcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de pequenas células, cancro do pâncreas, glioblastomas e carcinoma da mama. Igualmente contemplada está a utilização dos compostos em conformidade com a invenção de acordo com a reivindicação 1 e/ou dos seus sais e solvatos fisiologicamente inócuos na produção de um medicamento para o tratamento ou para a prevenção de uma doença de que faça parte a angiogénese.

Uma doença deste tipo, em que está implicada a angiogénese, é uma doença ocular, como a vascularização da retina, a retinopatia diabética, a degeneração macular associada à idade e outras do género. A utilização dos compostos com a Fórmula I e/ou dos respetivos sais e solvatos fisiologicamente inócuos na produção de um medicamento, destinado ao tratamento ou à prevenção de doenças inflamatórias, também recai no âmbito da presente invenção. A estas doenças inflamatórias pertencem, por exemplo, artrite reumatoide, psoríase, 39 dermatite de contacto, tipo retardado da reação de hipersensibilidade e outras do género.

Também se encontra contemplada a utilização dos compostos com a Fórmula I e/ou dos respetivos sais e solvatos fisiologicamente inócuos na produção de um medicamento para o tratamento ou para a prevenção de uma doença relacionada com a tirosina cinase ou de uma enfermidade relacionada com a tirosina cinase num mamifero, ministrando-se neste processo a um mamifero doente, que careça deste tipo de tratamento, uma quantidade com eficácia terapêutica de um composto de acordo com a invenção. A quantidade terapêutica depende da respetiva doença e pode ser determinada pelo especialista sem grandes custos. A presente invenção contempla igualmente a utilização dos compostos com a Fórmula I e/ou dos respetivos sais e solvatos fisiologicamente inócuos na produção de um medicamento para o tratamento ou para a prevenção da vascularização da retina.

Os processos para o tratamento ou para a prevenção de doenças oculares, como a retinopatia diabética e a degeneração macular associada à idade, constituem igualmente uma parte da invenção. A utilização no tratamento ou na prevenção de doenças inflamatórias, como a artrite reumatoide, a psoríase, a dermatite de contacto e os tipos retardados da reação de hipersensibilidade, assim como no tratamento ou na prevenção de patologias ósseas do grupo osteossarcoma, osteoartrite e raquitismo, também recai no âmbito da presente invenção. A expressão "doenças ou enfermidades relacionadas com as tirosina cinases" diz respeito a estados patológicos associados à atividade de uma ou mais tirosina cinases. As 40 tirosina cinases estão direta ou indiretamente implicadas nas vias de transdução de sinal de diversas atividades celulares, entre as quais a proliferação, a adesão e a migração, assim como a diferenciação. Às doenças associadas à atividade das tirosina cinases, pertencem a proliferação de células tumorais, a vascularização patológica que promove o crescimento de tumores sólidos, a vascularização ocular (retinopatia diabética, degeneração macular associada à idade e outras do género). É possivel ministrar os compostos com a Fórmula I em doentes com vista ao tratamento do cancro, em particular de tumores de crescimento rápido.

Assim sendo, a invenção tem por objeto a utilização dos compostos com a Fórmula I, e dos respetivos sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das suas misturas em todas as relações, na produção de um medicamento para o tratamento de doenças, nas quais a inibição, a regulação e/ou a modulação da transdução de sinal de cinases desempenha(m) um papel.

Neste caso, é dada preferência à Met cinase.

Prefere-se a utilização dos compostos com a Fórmula I e dos respetivos sais, solvatos e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, na produção de um medicamento para o tratamento de doenças que sejam influenciadas pela inibição das tirosina cinases, por intermédio dos compostos de acordo com a reivindicação 1.

Prefere-se em particular a utilização na produção de um medicamento para o tratamento de doenças que são influenciadas pela inibição da Met cinase, por intermédio 41 dos compostos de acordo com a revindicação 1. Particularmente preferida é a utilização no tratamento de uma doença, sendo essa doença um tumor sólido. 0 tumor sólido é preferencialmente selecionado do grupo dos tumores do pulmão, do epitélio escamoso queratinizado, da bexiga, do estômago, dos rins, da cabeça e do pescoço, do esófago, do colo do útero, da tiroide, do intestino, do fígado, do cérebro, da próstata, do trato urogenital, do sistema linfático, do estômago e/ou da laringe. 0 tumor sólido é ainda preferencialmente selecionado do grupo adenocarcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de pequenas células, cancro do pâncreas, glioblastomas, carcinoma do cólon e carcinoma da mama.

Além disso, prefere-se a utilização no tratamento de um tumor do sistema hematológico e do sistema imunitário, de preferência no tratamento de um tumor selecionado do grupo da leucemia mieloide aguda, da leucemia mieloide crónica, da leucemia linfática aguda e/ou da leucemia linfática crónica. É possível ministrar os compostos com a Fórmula I revelados em ligação com outros agentes terapêuticos, inclusive anticancerígenos. Como empregue no presente contexto, o conceito "anticancerígeno" é relativo a qualquer agente que seja ministrado a um doente com cancro, no intuito de tratar esse cancro. 0 tratamento oncológico definido no presente documento pode ser aplicado como terapia única ou abranger, adicionalmente ao composto de acordo com a invenção, a cirurgia convencional, ou a radioterapia ou a quimioterapia. Uma 42 quimioterapia deste tipo pode compreender uma ou mais das seguintes categorias de agentes antitumorais: (i) agentes lesivos do ADN/ antiproliferativos/ antineoplásicos e combinações dos mesmos, como utilizados na oncologia médica, tais como alquilantes (por exemplo, cisplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda nitrogenada, melfalano, clorambucil, bussulfano e nitroureias); antimetabólitos (por exemplo, antifolatos, como as fluoropirimidinas, como 5-fluorouracilo e tegafur, raltitrexed, metotrexato, citosina arabinosídeo, hidroxiureia e gemcitabina); antibióticos antitumorais (por exemplo, antraciclinas, como as adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina e mitramicina); agentes antimitóticos (por exemplo, alcaloides da vinca, tais como vincristina, vinblastina, vindesina e vinorelbina, e taxóides, como taxol e taxoter); inibidores da topoisomerase (por exemplo, epipodofilotoxinas, tais como etoposideo e teniposideo, amsacrina, topotecano, irinotecano e camptotecina) e agentes de diferenciação celular (por exemplo, ácido all-trans-retinóico, ácido 13-cis-retinóico e fenretinida); (ii) agentes citostáticos, como os antiestrogénios (por exemplo, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e iodoxifeno), agentes reguladores de redução do recetor do estrogénio (por exemplo, o fulvestrant), antiandrogénios (por exemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida e acetato de ciproterona), antagonistas da LHRH ou agonistas da LHRH (por exemplo, goserelina, leuprorrelina e buserrelina), progesteronas (por exemplo, acetato de megestrol), inibidores da aromatase (por exemplo, anastrozol, 43 letrozol, vorazol e exemestano) e inibidores da 5a-redutase, como a finasterida; (iii) agentes que inibem a invasão das células cancerígenas (por exemplo, os inibidores da metaloproteinase, como o marimastato, e os inibidores da função do recetor do ativador do plasminogénio urocinase; (iv) os inibidores da função do fator de crescimento, por exemplo, estes inibidores abrangem os anticorpos do fator de crescimento, os anticorpos do recetor do fator de crescimento (por exemplo, o anticorpo anti-erbb2 trastuzumab [Herceptin™] e o anticorpo anti-erbbl cetuximab [C225]), os inibidores da farnesiltransferase, os inibidores da tirosina cinase e os inibidores da serina/treonina cinase, por exemplo, os inibidores da família do fator de crescimento epidérmico (por exemplo, os inibidores das tirosina cinases da família EGFR, como a N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)-quinazolino-4-amina (Gefitinib, AZD1839), a N-(3-etinilfenil)-6,7-bis-(2-metoxietoxi)-quinazolino-4-amina (Erlotinib, OSI-774) e a 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolino-4-amina (Cl 1033)), por exemplo, os inibidores da família dos fatores de crescimento derivados das plaquetas e, por exemplo, os inibidores da família dos fatores de crescimento dos hepatócitos; (v) agentes antiangiogénicos, como os que inibem as ações do fator de crescimento endotelial vascular (por exemplo, o anticorpo contra o fator de crescimento das células endoteliais vasculares bevacizumab [Avastin™] , compostos como os revelados nos pedidos de patente 44 internacionais publicados WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 e WO 98/13354) e os compostos que atuam através de outros mecanismos (por exemplo, linomida, inibidores da função da integrina ανβ3 e angiostatina); (vi) agentes lesivos dos vasos sanguíneos, como a combretastatina A4 e os compostos revelados nos pedidos de patente internacionais WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 e WO 02/08213; (vii) terapias antisense, como, por exemplo, as dirigidas aos alvos anteriormente listados, como o ISIS 2503, um antisense anti-Ras; (viii) preparações de terapia genética, inclusive, por exemplo, preparações para substituir genes alterados, como o p53 alterado ou o BRCA1 ou o BRCA2 alterado, preparações de GDEPT (gene-directed enzyme prodrug therapy = terapia profarmacológica enzimática dirigida a genes), as que utilizam a citosina desaminase, a timidina cinase ou uma enzima nitrorredutase bacteriana, assim como preparações para aumentar a tolerância dos doentes à quimioterapia ou à radioterapia, como a terapia genética de multirresistência (multidrug-resistance gene therapy); e (ix) preparações imunoterapêuticas, inclusive, por exemplo, preparações ex vivo e in vivo para aumentar a imunogenicidade das células tumorais dos doentes, como a transfecção com citocinas, como a interleucina 2, a interleucina 4 ou o fator estimulante das colónias de granulócitos-macrófagos, preparações para reduzir a anergia das células T, preparações com a utilização de 45 células imunitárias transfectadas, como as células dendriticas transfectadas com citocina, preparações com a utilização de linhas celulares tumorais transfectadas com citocina e preparações com a utilização de anticorpos anti-idiotipicos.

Preferencial mas não exclusivamente, combina-se os medicamentos que se encontram na seguinte Tabela 1 com os compostos com a Fórmula I.

Tabela 1. Alquilantes ciclofosfamida bussulfano ifosfamida melfalano hexametilmelamina tiotepa clorambucil dacarbazina carmustina lomustina procarbazina altretamina fosfato de estramustina mecloretamina estreptozocina temozolomida semustina Agentes de platina cisplatina oxaliplatina espiroplatina carboxiftalatoplatina tetraplatina 46 ormiplatina iproplatina carboplatina ZD-0473 (AnorMED) lobaplatina (Aetema) satraplatina (Johnson Matthey) BBR-3464 (Hoffmann-La Roche) SM-11355 (Sumitomo) AP-5280 (Access) Antimetabólitos azacitidina gemcitabina capecitabina 5- fluorouracilo floxuridina 2-clorodesoxiadenosina 6- mercaptopurina 6-tioguanina citarabina 2-fluorodesoxicitidina metotrexato idatrexatos tomudex trimetrexatos desoxicoformicina fludarabina pentostatina raltitrexed hidroxiureia decitabina (SuperGen) clofarabina (Bioenvision) irofulveno (MGI Pharma) DMDC (Hoffmann-La Roche) etinilcitidina (Taiho) 47

Inibidores da topoisomerase amsacrina epirrubicina etoposideo teniposideo ou mitoxantrona irinotecano (CPT-11) 7-etil-10-hidroxicamptotecina topotecano dexrazoxanet (TopoTarget) pixantrona (Novuspharma) análogo da rebecamicina (Exelixis) BBR-3576 (Novuspharma) rubitecano (SuperGen) mesilato de exatecano (Daiichi) quinamed (ChemGenex) gimatecan (Sigma-Tau) diflomotecan (Beaufour-Ipsen) TAS-103 (Taiho) Elsamitrucina (Spectrum) J-107088 (Merck & Co) BNP-1350 (BioNumerik) CKD-602 (Chong Kun Dang) KW-2170 (Kyowa Hakko) Antibióticos antitumorais dactinomicina (actinomicina D) doxorrubicina (adriamicina) desoxirrubicina valrubicina daunorrubicina (daunomicina) epirrubicina terarrubicina idarrubicina rubidazona plicamycinp 48 porfiromicina cianomorfolinodoxorrubicina mitoxantrona (novantrona) amonafida azonafida antrapirazol oxantrazol losoxantrona sulfato de bleomicina (blenoxano) ácido bleomicinico bleomicina A bleomicina B mitomicina C MEN-10755 (Menarini) GPX-100 (Gem Pharmaceuticals) Agentes antimitóticos paclitaxel docetaxel colquicina vinblastina vincristina vinorelbina vindesina dolastatina 10 (NCI) rizoxina (Fujisawa) mivobulina (Warner-Lambert) cemadotina (BASF) RPR 109881A (Aventis) TXD 258 (Aventis) epotilona B (Novartis) T 900607 (Tularik) T 138067 (Tularik) criptoficina 52 (Eli Lilly) vinflunina (Fabre) 49 auristatina PE (Teikoku Hormone) BMS 247550 (BMS) BMS 184476 (BMS) BMS 188797 (BMS) taxoprexina (Protarga) SB 408075 (GlaxoSmithKline) E7010 (Abbott) PG-TXL (Cell Therapeutics) IDN 5109 (Bayer) A 105972 (Abbott) A 204197 (Abbott) LU 223651 (BASF) D 24851 (ASTA Medica) ER-86526 (Eisai) combretastatina A4 (BMS) iso-homo-halicondrina-B (PharmaMar) ZD 6126 (AstraZeneca) PEG-paclitaxel (Enzon) AZ10992 (Asahi) IDN-5109 (Indena) AVLB (Prescient NeuroPharma) Azaepotilona B (BMS) BNP-7787 (BioNumerik) CA-4-Prodrug (OXiGENE) dolastatina-10 (NrH) CA-4 (OXiGENE) Inibidores da aromatase aminoglutetímida letrozol anastrazol formestano exemestano atamestano (BioMedicines) YM-511 (Yamanouchi) 50

Inibidores da timidilato sintase Pemetrexed (Eli Lilly) ZD-9331 (BTG) Nolatrexed (Eximias) CoFactor™ (BioKeys) Antagonistas de ADN trabectedina (PharmaMar) glufosfamida (Baxter International) albumina + 32P (Isotope Solutions) timectacina (NewBiotics) edotreotida (Novartis) mafosfamida (Baxter International) apaziquona (Spectrum Pharmaceuticals) 06-benzilguanina (Paligent) Inibidores da farnesil-transferase arglabina (NuOncology Labs) ionafarnib (Schering-Plough) BAY-43-9006 (Bayer) tipifarnib (Johnson & Johnson) álcool perililico (DOR BioPharma) Inibidores de bomba CBT-1 (CBA Pharma) Tariquidar (Xenova) MS-209 (Schering AG) tri-hidrocloreto de zosuquidar (Eli Lilly) dicitrato de biricodar (Vertex) Inibidores da histona acetiltransferase tacedinalina (Pfizer) SAHA (Aton Pharma) MS-275 (Schering AG) butirato de pivaloiloximetilo (Titan) depsipéptido (Fujisawa) 51

Inibidores da metaloproteinase Inibidores da ribonucleósido redutase neovastat (Aeterna Laboratories) Marimastat (British Biotech) maltolato de gálio (Titan) triapina (Vion) CMT-3 (CollaGenex) BMS-2752 91 (Celltech) tezacitabina (Aventis) didox (Molecules for Health) Agonistas/ antagonistas do TNF-alfa virulizina (Lorus Therapeutics) CDC-394 (Celgene) revimida (Celgene) Antagonistas do recetor da endotelina A atrasentano (Abbot) ZD-4054 (AstraZeneca) YM-598 (Yamanouchi) Agonistas do recetor do ácido retinóico fenretinida (Johnson & Johnson) LGD-1550 (Ligand) alitretinoina (Ligand) Imunomoduladores interferão Oncophage (Antigenics) GMK (Progénies) vacina para o adenocarcinoma (Biomira) CTP-37 (AVI BioPharma) JRX-2 (Immuno-Rx) PEP-005 (Peplin Biotech) vacinas Synchrovax (CTL Immuno) vacina para o melanoma (CTL Immuno) vacina p21-RAS (GemVax) terapia com dexosom (Anosys) Pentrix (Australian Câncer Technology) JSF-154 (Tragen) 52 vacina contra o cancro (Intercell) norelina (Biostar) BLP-25 (Biomira) MGV (Progénies) !3-Alethin (Dovetail) CLL-Thera (Vasogen) Agentes hormonais estrogénios e anti-hormonais estrogénios conjugados etinilestradiol clorotrianiseno idenestrol caproato de hidroxiprogesterona medroxiprogesterona testosterona propionato de testosterona fluoximesterona metiltestosterona dietilestilbestrol megestrol tamoxifeno toremofina dexametasona prednisona metilprednisolona prednisolona aminoglutetimida leuprolida goserelina leuprorrelina bicalutamida flutamida octreotida nilutamida 53 mitotano P-04 (Novogen) 2-metoxiestradiol (EntreMed) arzoxifeno (Eli Lilly) Agentes fotodinâmicos talaporfina (Light Sciences) Theralux (Theratechnologies) motexafina-gadolínio (Pharmacyclics) Pd-bacteriofeoforbida (Yeda) lutécio-texafirina (Pharmacyclics) hipericina Inibidores da tirosina cinase imatinib (Novartis) leflunomida (Sugen/Pharmacia) ZDI839 (AstraZeneca) erlotinib (Oncogene Science) canertinib (Pfizer) esqualamina (Genaera) SU5416 (Pharmacia) SU6668 (Pharmacia) ZD4190 (AstraZeneca) ZD6474 (AstraZeneca) Vatalanib (Novartis) PKI166 (Novartis) GW2016 (GlaxoSmithKline) EKB-509 (Wyeth) EKB-569 (Wyeth) Kahalid F (PharmaMar) CEP-701 (Cephalon) CEP-751 (Cephalon) MLN518 (Millenium) PKC412 (Novartis) fenoxodiol 0 trastuzumab (Genentech) 54 C225 (ImClone) rhu-Mab (Genentech) MDX-H210 (Medarex) 2C4 (Genentech) MDX-447 (Medarex) ABX-EGF (Abgenix) IMC-1C11 (ImClone) Diversos agentes SR-27897 (inibidor CCK-A, Sanofi-Synthelabo) tocladesina (agonista do AMP ciclico, Ribapharm) Alvocidib (inibidor CDK, Aventis) CV-247 (inibidor COX-2, Ivy Medicai) P54 (inibidor COX-2, Phytopharm) CapCell™ (estimulante CYP450, Bavarian Nordic) GCS-IOO (antagonista de gal3, GlycoGenesys) imunogénio G17DT (inibidor da gastrina, Aphton) efaproxiral (oxigenador, Allos Therapeutics) PI-88 (inibidor da heparanase, Progen) tesmilifeno (antagonista da histamina, YM BioSciences) histamina (agonista do recetor da histamina H2, Maxim) tiazofurina (inibidor da IMPDH, Ribapharm) cilengitida (antagonista da integrina, Merck KGaA) SR-31747 (antagonista da IL-1, Sanofi-Synthelabo)

55 CCI-779 (inibidor da mTOR cinase, Wyeth) Exisulind (inibidor da PDE-V, Cell Pathways) CP-461 (inibidor da PDE-V, Cell Pathways) AG-2037 (inibidor GART, Pfizer) WX-UK1 (inibidor do ativador do plasminogénio, Wilex) PBI-1402 (estimulante dos PMN, ProMetic LifeSciences) bortezomib (inibidor do proteassoma, Millennium) SRL-172 (estimulante das células T, SR Pharma) TLK-286 (inibidor da gutationa-S transferase, Telik) PT-100 (agonista do fator de crescimento, Point Therapeutics) midostaurina (inibidor da PKC, Novartis) briostatina-1 (estimulante das PKC, GPC Biotech) CDA-II (promotor de apoptose, Everlife) SDX-101 (promotor de apoptose, Salmedix) ceflatonina (promotor de apoptose, ChemGenex) BCX-1777 (inibidor da PNP, BioCryst) Ranpirnase (estimulante da ribonuclease, Alfacell) galarubicina (inibidor da sintese do ARN, Dong-A) tirapazamina (redutor, SRI 56 International) N-acetilcisteína (redutor, Zambon) R-flurbiprofeno (inibidor da NF-kappaB, Encore) 3CPA (inibidor da NF-kappaB, Active Biotech) Seocalcitol (agonista do recetor da vitamina D, Leo) 131-I-TM601 (antagonista de ADN, TransMolecular) Eflornitina (inibidor da ODC, ILEX Oncology) Ácido minodrónico (inibidor dos osteoclastos, Yamanouchi) indisulam (estimulante do p53, Eisai) aplidina (inibidor de PPT, PharmaMar) rituximabe (anticorpos CD20, Genentech) Gemtuzumabe (anticorpos CD33, Wyeth Ayerst) PG2 (reforçador de hematopoese, Pharmagenesis) Immunol™ (colutório de triclosano, Endo) triacetiluridina (profármaco de uridina, Wellstat) SN-4071 (agente para sarcoma, Signature BioScience) TransMID-107™ (imunotoxina, KS Biomedix) PCK-3145 (promotor de apoptose, Procyon) Doranidazol (promotor de apoptose, Pola) CHS-828 (agente citotóxico, Leo) 57 ácido trans-retinóico (diferenciador, NIH) MX6 (promotor de apoptose, MAXIA), apomina (promotor de apoptose, ILEX Oncology) urocidina (promotor de apoptose Bioniche) Ro-31-7453 (promotor de apoptose, La Roche) brostalicina (promotor de apoptose, Pharmacia)

Consegue-se um tratamento conjunto deste tipo com uma dosagem em simultâneo, consecutiva ou separada dos diferentes componentes do tratamento. . Estes produtos de

combinação utilizam os compostos de acordo com a invenção. ENSAIOS

Os compostos com a Fórmula I descritos nos Exemplos foram testados nos ensaios abaixo descritos, e descobriu-se que apresentam uma ação inibidora das cinases. Conhece-se outros ensaios a partir da literatura e os mesmos puderam ser facilmente realizados pelo especialista (ver, por exemplo, Dhanabal et al., Câncer Res. 59: 189-197; Xin et al., J. Biol. Chem. 274:9116-9121; Sheu et al., Anticancer Res. 18:4435-4441; Ausprunk et al., Dev. Biol. 38:237-248; Gimbrone et al., J. Natl. Câncer Inst. 52:413-427; Nicosia et al., In Vitro 18:538-549).

Medição da atividade da Met cinase 58 A Met cinase é expressa de acordo com as instruções do fabricante (Met, active, Upstate, n.° de catálogo. 14-526), com vista à produção proteica em células de inseto (Sf21; S. frugiperda), e com posterior purificação por cromatografia de afinidade, como proteína humana recombinante "N-terminal 6His-tagged" num vetor de expressão de baculovírus.

No intuito de medir a atividade da cinase, é possível recorrer a diferentes sistemas de medição que se encontram à disposição. No processo de cintilação por proximidade (Sorg et al., J. of. Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) , no processo de FlashPlate ou no teste de ligação de filtro, mede-se a fosforilação radioativa de uma proteína ou de um péptido como substrato com ATP marcado com radioatividade (32P-ATP, 33P-ATP) . No caso de estar presente um composto inibidor, não se deteta sinal radioativo ou este é apenas diminuto. Além disso, é possível recorrer às tecnologias de Homogeneous Time-resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (HTR-FRET) e de polarização de fluorescência (FP) como processos de ensaio (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191-214).

Outros processos de ensaio ELISA não radioativos utilizam anticorpos fosfoespecíficos (AC fosfo) . 0 anticorpo fosfo liga apenas o substrato fosforilado. Consegue-se detetar esta ligação com um segundo anticorpo conjugado com peroxidase, através de quimioluminescência (Ross et al., 2002, Biochem. J.) .

Processo de Flashplate (Met cinase):

Como placas de teste, faz-se uso de placas de microtítulo FlashplateR de 96 poços da empresa Perkin Eimer (N.° de 59 cat. SMP200). Na placa de ensaio, pipetiza-se os componentes da reação da cinase abaixo descrita.

Incuba-se a Met cinase e o substrato poli-Ala-Glu-Lys-Tyr, (pAGLT, 6:2:5:1) com 33P-ATP marcado com radioatividade, na ausência e na presença de substâncias de teste, num volume total de 100 pL, à temperatura ambiente durante 3 horas. Interrompe-se a reação com 150 pL de uma solução de EDTA 60 mM. Após a incubação durante mais 30 min à temperatura ambiente, aspira-se os resíduos e lava-se os poços três vezes com 200 pL de cada vez de solução de NaCl a 0,9%. Realiza-se a medição da radioatividade ligada por meio de um medidor de cintilação (Topcount NXT, da Perkin-Elmer). Como valor integral, utiliza-se a reação da cinase sem inibidor. Este deverá ser de cerca de 6000-9000 cpm. Como valor em branco farmacológico, utiliza-se a estaurosporina numa concentração final de 0,1 mM. Determina-se os valores de inibição (IC50) com a utilização do programa RS1_MTS ().

Condições da reação da cinase por poço: 30 pL de tampão de ensaio 10 pL de substância a ser testada no tampão de ensaio com DMSO 10% 10 pL de ATP (concentração final de 1 pM a frio, 0,35 pCi de 33P-ATP) 50 pL da mistura de Met cinase/substrato em tampão de ensaio; (10 ng de enzima/poço, 50 ng de pAGLT/poço)

Soluções utilizadas:

Tampão de ensaio:

HEPES 50 mM

Cloreto de magnésio 3 mM 60

Ortovanadato de sódio 3 μΜ Cloreto manganoso 3 mM Ditiotreitol (DTT) 1 mM pH = 7,5 (a ajustar com hidróxido de sódio)

Solução de paragem:

Titriplex III (EDTA) 60 mM 33P-ATP: Perkin-Elmer ;

Met cinase: Upstate, n.° de cat. 14-526, volume 1 pg/10 pL; atividade esp. 954 U/mg; poli-Ala-Glu-Lys-Tyr, 6:2:5:1: Sigma n.° de cat. P1152 Testes in vivo

Procedimento experimental: ratos Balb/C fêmeas (Criador: Charles River Wiga) tinham à chegada 5 semanas de idade. Foram aclimatizados durante 7 dias sob as nossas condições de criação. Em seguida, injetou-se em cada rato 4 milhões de células NIH3T3/TPR-Met em 100 pL de PBS (sem Ca++ e Mg++) por via subcutânea na região pélvica. Passados 5 dias, os animais foram aleatorizados em 3 grupos, passando cada grupo de 9 ratos a ter um volume tumoral médio de 110 pL (intervalo: 55 - 165). Ao grupo de controlo ministrou-se 100 pL de veiculo (0,25% de metilcelulose/tampão acetato 100 mM, pH de 5,5), aos grupos de tratamento ministrou-se diariamente 200 mg/kg de "A56" ou "A91" dissolvidos no veículo (volume também de 100 pL/animal) por sonda esofágica. Passados 9 dias, os controlos tinham um volume médio de 1530 pL e terminou-se a experiência.

Medição do volume tumoral: mediu-se o comprimento (C) e a largura (L) com um calibrador e calculou-se o volume tumoral com a Fórmula CxLxL/2. 61

Condições de criação: 4 ou 5 animais por jaula, alimentação com ração para rato comercial (da Saniff).

Anterior e posteriormente, todas as temperaturas encontram-se indicadas em °C. Nos exemplos que se seguem, "acabamento usual" significa: adiciona-se, caso necessário, água, ajusta-se, caso necessário e consoante a constituição do produto final, para valores de pH entre 2 e 10, extrai-se com acetato de etilo ou diclorometano, separa-se, seca-se a fase orgânica com sulfato de sódio, concentra-se por evaporação e purifica-se por cromatografia em silica gel e/ou por cristalização. Valores Rf em sílica gel; agente de controlo da fluidez: acetato de etilo/metanol 9:1.

Espectrometria de massa (MS): EI (ionização por impacto eletrónico) M+ FAB (Fast Atom Bombardment) (M+H)+ ESI (Electrospray Ionization) (M+H)+ APCI-MS (atmospheric pressure Chemical ionization - mass spectrometry) (M+H)+. APCI-MS (atmospheric pressure Chemical ionization - mass spectrometry) (M+H)+.

Métodos de HPLC Método A: 0 :100

Gradiente: 4,5 min/Débito: 3 mL/min 99:01 - Água+0,1%(vol.)TFA :acetonitrilo+0,1%(vol.)TFA 0,0 a 0,5 min: 99:01 0,5 a 3,5 min: 99:01---> 0:100 62 3,5 a 4,5 min: 0:100

Coluna: Chromolith SpeedROD RP18e 50-4,6 Comprimento de onda: 220nm Método B: 4,2 min/Débito.: 2 mL/min 99:01 - 0:100 Água+0,1%(vol.)TFA : acetonitrilo + 0,1%(vol.) TFA 0,0 a 0,2 min: 99:01 0,2 a 3,8 min: 99:01---> 0:100 3,8 a 4,2 min: 0:100

Coluna: Chromolith Performance RP18e; comprimento de 100 mm Diâmetro interno 3 mm Comprimento de onda: 220nm

Tempo de retenção Rt. em minutos [min].

Exemplos

Produção dos compostos de partida Instruções Gerais de Trabalho 1 (IGT 1):

1 equivalente da acetofenona é misturado com 1-1,2 equivalentes do ácido glioxilico e do ácido acético (2 equivalentes) e agita-se durante 3-24 h nos 95-100°C. A mistura de reação é arrefecida, é misturada com água (3-5 mL por g de acetofenona), é neutralizada com 25% de solução amoniacal mediante arrefecimento gélido e é misturada com 1 equivalente de hidróxido de hidrazina. Agita-se durante 3 h sob refluxo, surgindo um precipitado pastoso, sendo por isso em alguns casos necessário adicionar água. Após o 63 arrefecimento, o precipitado é aspirado, é pós-lavado com água e é seco. 4- (6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il)-benzonitrilo

50 g de 4-acetilbenzonitrilo são transformados em conformidade com as IGT 1 na piridazinona.

Rendimento: 50,4 de um sólido amarelo escuro, ESI 198, TR = 2,27 min (Método A). A substância é transformada sem mais purificação. 3-(6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il)-benzonitrilo

7,3 g de 3-acetilbenzonitrilo são transformados em conformidade com as IGT 1 na piridazinona.

Rendimento: 4,12 g de um sólido castanho, ESI 198. A substância continua a ser transformada sem mais purificação.

Exemplo 1

Produz-se a 6-(3,5-difluorofenil)-2-(5'-metil- [2,2']bipiridinil-6-ilmetil)-2H-piridazin-3-ona ("Al") de acordo com o esquema seguinte

.0 64 F

Br F

CH3CN K2C03 p

Br F

Pd(PPh3)2CI2 i

K3P04 F DMÊ 1.1 Uma suspensão de 792 mg (3,81 mmol) de 6-(3,5- difluorofenil)-2H-piridazin-3-ona em 19 mL de acetonitrilo é misturada com 1,05 g (4,19 mmol) de 2-bromo-6-bromometilpiridina e 2,15 g de carbonato de potássio, e é agitada durante 18 horas nos 80°C. A mistura de reação é filtrada e é lavada com acetonitrilo. 0 filtrado é concentrado por evaporação e é distribuído entre éter terc.-butilmetílico e água. A fase orgânica é seca com sulfato de sódio e é concentrada por evaporação. 0 residuo é sujeito a cromatografia numa coluna de silica gel com éter de petróleo/acetato de etilo como agente de controlo da fluidez: 2-(6-bromopiridin-2-ilmetil)-6-(3,5- difluorofenil)-2H-piridazin-3-ona na forma de cristais amarelos; ESI 378, 380. 1.2 Uma suspensão de 189 mg (0,50 mmoles) de 2 —(6 — bromopiridin-2-ilmetil)-6-(3,5-difluorofenil)-2H-piridazin-3-ona, 339 mg (1,20 mmoles) de éster de N- 65 fenildietanolamina do ácido 5-metilpiridino-2-borónico, 425 mg (2,00 mmoles) de tri-hidrato de fosfato de tripotássio em 5 mL de 1,2-dimetoxietanol é aquecida sob nitrogénio para os 80°C, e adiciona-se 70 mg (0,1 mmoles) de cloreto bis-(trifenilfosfino)-paladoso e 2 gotas de trietilamina. Agita-se a uma temperatura de 100°C durante 42 horas. Dilui-se a mistura de reação com diclorometano e aspira-se através de diatomito. O filtrado é distribuído entre água e diclorometano. A fase orgânica é seca com sulfato de sódio e é concentrada por evaporação. O resíduo é sujeito a cromatografia numa coluna de sílica gel com diclorometano/metanol como agente de controlo da fluidez: 6- (3,5-difluorofenil)-2-(5'-metil-[2,2' ]bipiridinil-6-ilmetil)-2H-piridazin-3-ona ("Al") na forma de sólido amarelo; ESI 391; 1H-NMR (de-DMSO): δ [ppm] * 2.35 (s. 3H). 5.57 (s, 2H), 7.20 (d, J - 10 Hz, 1H), 7.30 (d, J - 7 Hz, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.71 (d, J * 8 Hz, 1H), 7.92 (t, J * 7.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 10 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H).

Exemplo 2

Produz-se o 3-[6-oxo-l-(6—{5—[1-(2-pirrolidin-l-iletil)-1H-pirazol-4-il]-pirimidin-2-il}-piridin-2-ilmetil)-1, 6-di-hidropiridazin-3-il]-benzonitrilo ("A2") em analogia com o esquema seguinte 66

2.1 Uma solução mantida sob nitrogénio de 4,27 g (11,2 mmoles) de 6-metil-2-(tributilestanil)-piridina em 77 mL de tolueno é misturada com 392 mg (0,56 mmoles) de cloreto bis- (trifenilfosfino)-paladoso, 293 mg (1,12 mmoles) de trifenilfosfina e 3,18 g (11,2 mmoles) de 5-bromo-2-iodopirimidina. Aquece-se a mistura de reação sob nitrogénio durante 18 horas para os 140°C. A mistura de reação é concentrada por evaporação e o resíduo é sujeito a cromatografia numa coluna de sílica gel com éter terc.-butilmetílico/metanol como agente de controlo da fluidez: 5-bromo-2-(6-metilpiridin-2-il)-pirimidina na forma de cristais castanhos; ESI 250,252. 67 2.2 A uma solução de 2,08 g (8,32 mmoles) de 5-bromo-2-(6- metilpiridin-2-il)-pirimidina em 18 mL de clorobenzeno junta-se 1,48 g (8,31 mmoles) de N-bromossuccinimida e 7,5 mg (31 ymoles) de peróxido de benzoílo (com 25% de água) . Agita-se a mistura de reação durante a noite a uma temperatura de 80°C. A mistura de reação é concentrada no vácuo e o resíduo é sujeito a cromatografia numa coluna de sílica gel com éter de petróleo/acetato de etilo como agente de controlo da fluidez: 5-bromo-2-(6- bromometilpiridin-2-il)-pirimidina na forma de cristais amarelados; ESI 328, 330, 332. 2.3 Uma suspensão de 32,7 mg (0,166 mmoles) de 3-(6-oxo- 1,6-di-hidropiridazin-3-il)-benzonitrilo em 0,5 mL de DMF é misturada com 54,6 mg (0,166 mmoles) de 5-bromo-2-(6-bromometilpiridin-2-il)-pirimidina e 54,1 mg (0,166 mmoles) de carbonato de césio, e agita-se durante 18 horas nos 80°C. A mistura de reação é deitada em água. O precipitado originado é aspirado, é lavado com água e seco no vácuo. Obtém-se 3-{1-[6-(5-bromopirimidin-2-il)-piridin-2- ilmetil]-6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il}-benzonitrilo na forma de cristais ligeiramente acastanhados; ESI 445, 447; 1H-NMR (de-DMSO): δ [ppm] = 5.57 (s, 2H), 7.20 (d, J = 9.5 Hz, 1H). 7.36 (d, J = 8 Hz; 1H), 7.70 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.97 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 8.22 (m, 2H), 8.29 (d, J - 7.5 Hz, 1H), 8.36 (s. 1H), 9.15 (s, 2H). 2.4 Uma solução de 10,0 g (50,5 mmoles) de éster de pinacol do ácido pirazol-4-borónico é dissolvida em 100 mL de acetonitrilo e misturada com 17,5 g (101 mmoles) de hidrocloreto de N-(2-cloroetil)-pirrolidina e 49,4 g (152 mmoles) de carbonato de césio. A suspensão originada é agitada durante 18 horas à temperatura ambiente. A mistura de reação é aspirada e lavada com acetonitrilo. O filtrado é concentrado por evaporação e distribuído entre acetato de 68 etilo e solução de cloreto de sódio saturada. A fase orgânica é seca com sulfato de sódio e é concentrada por evaporação: 1- (2-pirrolidin-l-iletil)-4-(4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-ΙΗ-pirazol na forma de um óleo laranja claro, que sofreu cristalização geral; VH-NMR (de-DMSO): δ [ppm] = 1.25 ($, 12H), 1.65 (m, 4H), 2.44 (m, 4H), 2.79 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.21 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.93 (s, 1H). 2.5 Uma suspensão de 28,9 mg (65 ymol) de 3—{1— [6— (5 — bromopirimidin-2-il)-piridin-2-ilmetil]-6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il}-benzonitrilo, 21 mg (72 ymol) de 1—(2 — pirrolidin-l-iletil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]— dioxaborolan-2-il)-ΙΗ-pirazol e 27,6 mg (130 ymol) de tri-hidrato de fosfato de tripotássio em 0,5 mL de 1,2-dimetoxietano é aquecida sob nitrogénio para os 85°C. Depois, adiciona-se 3,9 mg (6 pmol) de cloreto bis-(trifenilfosfino)-paladoso e 1 gota de trietilamina, e agita-se durante 18 horas nos 80°C. A mistura de reação é arrefecida e é distribuida entre água e acetato de etilo. Seca-se a fase orgânica com sulfato de sódio e concentra-se por evaporação. Purifica-se o resíduo através de HPLC preparativa: formiato de 3-[6-oxo-l-(6-{5-[1-(2-pirrolidin-l-iletil) -lH-pirazol-4-il]-pirimidin-2-il}-piridin-2-ilmetil)-1,6-di-hidropiridazin-3-il]-benzonitrilo ("A2") na forma de um liofilizado ligeiramente amarelado; ESI 530; 1H*NMR {d^DMSO): 5 íppml * 168 (m, 4H), 2.49 (m, 4H)f 2.89 (t, J « 8.6 Hz, 2H)¥ 4,29 (t, 3 * S.S Hz, 2H), 5.59 ($, 2H), 7,21 {4t J * 10 Hz,

1H), 7.32 (d, J * 7.5 Hz; 1H), 7.71 (tf J » 7.8 Hz, 1H)t 7,93 (d. J - 7 J

Hz, 1H)( 7.96 (1 J * 7.9 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.18 (s, 1H, formiato-H ), 8,24 (m, 2H}, 8.31 {d, J « 7,5 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.49 {s, 1H), 9.20 (s, 2H).

Exemplo 3 69

Produz-se a 2-(4-{5-[1-(2-pirrolidin-l-iletil)-lH-pirazol-4 — i1]-pirimidin-2-il}-tiofen-2-ilmetil)-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona ("A3") de acordo com o secruinte escruema 69

DME

O

-A3"

Pd(PPh3>aCi2

KjPO,

DME 3.1 Uma suspensão de 882 mg (4,47 mmoles) de 3-(6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il)-benzonitrilo em 50 mL de DMF é misturada consecutivamente com 890 mg (4,47 mmoles) de (4-bromo-2-tienil)-metanol, 1,80 mg (6,71 mmoles) de trifenilfosfina e 1,50 mg (8,71 mmoles) de azodicarboxilato de di-terc.-butilo. A mistura de reação é concentrada por evaporação e o resíduo é sujeito a cromatografia num coluna de sílica gel com acetato de etilo/ciclo-hexano como agente de controlo da fluidez: 3-[1-(4-bromotiofen-2-ilmetil)-6- 70 οχο-1,6-di-hidropiridazin-3-il]-benzonitrilo na forma de um sólido beije; ESI 372,374. 3.2 Uma solução de 1,00 g (2,69 mmoles) de 3—[1— (4 — bromotiofen-2-ilmetil)-6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il]-benzonitrilo e 905 mg (3,49 mmoles) de bis-(pinacolato)-diboro em 10 mL de DMF é misturada com 791 mg (8,06 mmoles) de acetato de potássio, e procede-se a aquecimento sob árgon para os 70°C. Depois, adiciona-se 94 mg (0,13 mmoles) de cloreto bis-(trifenilfosfino)-paladoso e agita-se durante 1 hora nos 70°C. A mistura de reação é deitada em água. 0 precipitado originado é aspirado, é lavado com água, é seco e é agitado com éter terc. -butilmetí lico: 3- {6-oxo-l-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[l,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiofen-2-ilmetil]-1,6-di-hidropiridazin-2-il}-benzonitrilo na forma de um sólido castanho, que foi utilizado sem mais purificação na reação seguinte. 3.3 Uma solução de 1,00 g (cerca de 2 mmoles) de 3-{6-oxo- 1— [4—(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-tiofen- 2- ilmetil]-1,6-di-hidropiridazin-3-il}-benzonitrilo e 704 mg (2,47 mmoles) de 2-bromo-5-iodopirimidina em 10 mL de éter etilenoglicoldimetilico é misturada com 1,27 g (4,94 mmoles) de tri-hidrato de fosfato de tripotássio, e procede-se a aquecimento sob árgon para os 80°C. Depois, adiciona-se 28 mg (0,04 mmoles) de cloreto bis- (trifenilfosfino)-paladoso e agita-se a mistura de reação durante 18 horas nos 80°C sob árgon. A mistura de reação é aspirada através de diatomito. 0 filtrado é distribuído entre água e acetato de etilo. A fase orgânica é concentrada por evaporação e o residuo é sujeito a cromatografia numa coluna de silica gel com éter de petróleo/acetato de etilo: 3-{1-[4-(5-bromopirimidin-2-il)-tiofen-2-ilmetil]-6-oxo-l,6-di-hidropiridazin-3-il}-benzonitrilo na forma de cristais beijes; ESI 450,452; 71 1H-NMR (de-DMSO): δ [ppm] = 5.56 (s, 2H), 7.16 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.73 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8.38 (t, J = 1 Hz, 1H), 8.98 (s, 2H). 3.4 Realiza-se a última etapa em analogia com o Exemplo 2 anterior. Obtém-se 2-(4-{5-[ 1-(2-pirrolidin-l-iletil)-1H-pirazol-4-il]-pirimidin-2-il}-tiofen-2-ilmetil)-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona ("A3"); 1H-NMR {d6-DMSO): δ [ppm] = 1.85 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 3.05 {m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.70 (t, J * 6.6 Hz, 2H), 4.55 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 5.58 (s, 2H), 7.18 (d, J ~ 9.5 Hz, 1H), 7.74 (t, J ~ 7.8 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.96 (d, J = 8 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.28 (m, 2H), 8.38 (t, J - 1 Hz. 1H), 8.47 (s, 1H), 9.08 <s, 2H), 9.48 (bs, 1H).

Exemplo 4 Produz-se a 2-{6-[5-(l-metilpiperidin-4-ilmetoxi)- pirimidin-2-il]-piridin-2-ilmetil}-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona ("A4") de acordo com o esquema seguinte NC

HCDOH

Exemplo 5 a

Produz-se a 2-{4-[5-(l-metilpiperidin-4-ilmetox pirimidin-2-il]-tiofen-2-ilmetil}-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona ("A5") de acordo com o seguinte esquema

/~~~\ ° í \ f

HO

PPft/DfAD THF

HCOOH 73

Dados farmacológicos

Inibição da Met cinase Tabela 1

Composto n.° IC50 o LO O 1—1 (enzima) (célula) "AI" A B "A2 " A

IC50 10 nM - 1 μΜ = A 1 μΜ - 10 μΜ = B > 10 μΜ = C

Os exemplos que se seguem são relativos a medicamentos: Exemplo A: Ampolas injetáveis

Ajusta-se uma solução de 100 g de uma substância ativa com a Fórmula I e de 5 g de hidrogenofosfato de dissódio em 3 L de água destilada duas vezes com ácido clorídrico 2 N, para um pH de 6,5, filtra-se de forma estéril, deita-se em ampolas injetáveis, liofiliza-se sob condições estéreis e fecha-se de forma estéril. Cada ampola injetável contém 5 mg de substância ativa.

Exemplo B: Supositórios

Funde-se uma mistura de 20 g de uma substância ativa com a Fórmula I com 100 g de lecitina de soja e 1400 g de manteiga de cacau, verte-se para moldes e deixa-se arrefecer. Cada supositório contém 20 mg da substância ativa. 74

Exemplo C: Solução

Prepara-se uma solução de 1 g de uma substância ativa com a Fórmula I, 9,38 g de NaH2PC>4 · 2H20, 28,48 g de Na2HP04 12H20 e 0,1 g de cloreto de benzalcónio em 940 mL de água destilada duas vezes. Ajusta-se o valor de pH para 6,8, enche-se até 1 L e esteriliza-se por irradiação. É possível utilizar esta solução na forma de gotas oftálmicas.

Exemplo D: Pomada

Mistura-se 500 mg de uma substância ativa com a Fórmula I com 99,5 g de vaselina sob condições asséticas.

Exemplo E: Comprimidos

Uma mistura de 1 kg da substância ativa com a Fórmula I, 4 kg de lactose, 1,2 kg de amido de batata, 0,2 kg de talco e 0,1 kg de estearato de magnésio é comprimida de forma usual em comprimidos, passando cada comprimido a conter 10 mg da substância ativa.

Exemplo F: Drageias

Em analogia com o Exemplo E, comprime-se comprimidos, os quais são cobertos em seguida de forma usual com um revestimento de sacarose, amido de batata, talco, adraganta e corante.

Exemplo G: Cápsulas

Deita-se 2 kg da substância ativa com a Fórmula I de forma usual em cápsulas de gelatina dura, passando cada cápsula a conter 20 mg da substância ativa. 75

Exemplo H: Ampolas

Uma solução de 1 kg da substância ativa com a Fórmula I em 60 L de água destilada duas vezes é filtrada de forma estéril, é deitada em ampolas, é liofilizada sob condições estéreis e fecha-se de forma estéril. Cada ampola contém 10 mg da substância ativa.

Lisboa, 29 de Novembro de 2012

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Os compostos com a Fórmula I

'D , Rz em que R1 significa Ar, R2 significa Η, A, - [C (R3) 2] nHet ou 0 [C (R3) 2] nHet, R3 significa H, W significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi- ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal e/ou A, D significa tiazoldi-ilo, tiofenodi-ilo, furanodi- ilo, pirroldi-ilo, oxazoldi-ilo, isoxazoldi-ilo, pirazoldi-ilo, imidazoldi-ilo, tiadiazoldi-ilo, piridazinodi-ilo, pirazinodi-ilo, piridinodi-ilo ou pirimidinodi-ilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos, dissubstituidos ou trissubstituidos por Hal e/ou A, A significa alquilo não ramificado ou ramificado com 1-6 átomos de C, Ar significa fenilo monossubstituido, dissubstituido ou trissubstituido por Hal e/ou CN, Het significa piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, oxazolidinilo ou imidazolidinilo, podendo os radicais também estar monossubstituidos ou dissubstituidos por =0 e/ou A, Hal significa F, Cl, Br ou I, n significa 0, 1, 2, 3 ou 4, 2 e os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.

2. Os compostos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por serem selecionados do grupo N. ° Estrutura e/ou nome "AI" 6-(3,5-difluorofenil)-2-(5'-metil-[2,2']— bipiridinil-6-ilmetil)-2H-piridazin-3-ona "A2 " 3 - [6-oxo-l - ( 6 —{5 —[1-(2-pirrolidin-l-iletil)-lH-pirazol-4-il]-pirimidin-2-ilmetil)-1,6-di-hidropiridazin-3-il}-benzonitrilo "A3 " 2 - (4-{5 - [1- (2-pirrolidin-l-iletil)-lH-pirazol-4 — i1]-pirimidin-2-il}-tiofen-2-ilmetil)-6-(3-cianofenil)-2H-piridazon-3-ona "A4 " 2-{6- [5 - (l-metilpiperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-piridin-2-ilmetil}-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona "A5 " 2-{4 - [5 - (l-metilpiperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-tiofen-2-ilmetil}-6-(3-cianofenil)-2H-piridazin-3-ona e os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as respetivas misturas em todas as relações.

3. Processo para a produção dos compostos com a Fórmula I de acordo com as reivindicações 1-2 e dos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, caracterizado por a) se transformar um composto com a Fórmula II 3 3

II em que R1 tem o significado dado na reivindicação 1, com um composto com a Fórmula III R3-CHL-W-D-R3 III, em que W, D, R2 e R3 têm os significados dados na reivindicação 1, e L significa Cl, Br, I ou um grupo OH livre ou transformado de forma funcional reagente, ou b) se transformar um composto com a Fórmula II

IV reivindicação 1, com um composto com a Fórmula V X-D-R2 V, em que D e R2 têm os significados dados na reivindicação 1 e X significa um radical de éster do ácido borónico, 4 ou c) se transformar um radical R2 noutro radical R2, ao acilar-se ou alquilar-se um grupo amina, ou d) se proceder à sua libertação de um dos respetivos derivados funcionais, através do tratamento com um meio de solvólise ou de hidrogenólise, e/ou se transformar uma base ou um ácido com a Fórmula I num dos seus sais.

4. Medicamento contendo pelo menos um composto com a Fórmula I de acordo com a reivindicação 1-2, e/ou os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, e eventualmente substâncias de suporte e/ou substâncias auxiliares.

5. Compostos com a Fórmula I de acordo com a reivindicação 1-2 e os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização farmacêutica, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, com vista à utilização no tratamento de a) tumores sólidos, selecionados do grupo dos tumores do pulmão, do epitélio escamoso queratinizado, da bexiga, do estômago, dos rins, da cabeça e do pescoço, do esófago, do colo do útero, da tiroide, do intestino, do figado, do cérebro, da próstata, do trato urogenital, do sistema linfático, do estômago e/ou da 5 laringe, adenocarcinoma do pulmão, carcinoma do pulmão de pequenas células, cancro do pâncreas, glioblastomas, carcinoma do cólon e carcinoma da mama, b) tumores do sistema hematológico e do sistema imunitário, selecionados do grupo da leucemia mieloide aguda, da leucemia mieloide crónica, da leucemia linfática aguda e/ou da leucemia linfática crónica, c) vascularização da retina, retinopatia diabética, degeneração macular associada à idade.

6. Medicamento contendo pelo menos um composto com a Fórmula I de acordo com uma das reivindicações 1 a 2, e/ou os seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive as respetivas misturas em todas as relações, e pelo menos outra substância ativa farmacológica.

7. Conjunto (kit), composto por embalagens separadas de (a) uma quantidade eficaz de um composto com a Fórmula I de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 2, e/ou dos seus sais, tautómeros e estereoisómeros de utilização em farmácia, inclusive das respetivas misturas em todas as relações, e (b) uma quantidade eficaz de outra substância ativa farmacológica. Lisboa, 29 de Novembro de 2012