PT1764368E - Derivados halogenados anti-mitóticos de alcalóides de vinca - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

DERIVADOS HALOGENADOS ANTI-MITÓTICOS DE ALCALOIDES DE VINCA

Os alcaloides dímeros de Catharanthus roseus e seus derivados, correntemente chamados alcaloides de Vinca, são largamente utilizados em quimioterapia anti-cancerosa há cerca de trinta anos. São representados por quatro produtos: - dois compostos naturais, a vinblastina e a vincristina, - dois produtos de hemissíntese, a vindesina, obtida a partir da vinblastina, e a vinorelbina, sintetizada a partir dos alcaloides monómeros precursores, catarantina e vindolina.

Vincristina

Vinblastina os

Vindesina Vinorelbina

Estrutura dos alcaloides de Vinca utilizados em quimioterapia

No âmbito dos nossos trabalhos de investigação visando obter novos derivados desta família que possam conduzir a novas 1 aplicações em quimioterapia anti-cancerosa, adoptámos uma posição original que consiste em utilizar a reactividade excepcional dos meios acima referidos, susceptível de induzir profundas modificações nestas moléculas altamente funcionalizadas.

Assim, já preparámos uma série de compostos difluorados na posição 20', que são actualmente inacessíveis pelos métodos clássicos de síntese (Patente FR 2 707 988 de 21.07.93, WO 95/03312) e cujas propriedades farmacológicas são particularmente interessantes.

Fórmula geral dos compostos descritos na Patente FR 2 707 988 A aplicação desta química invulgar a este tipo de moléculas complexas permitiu-nos preparar uma nova família de compostos halogenados, igualmente inacessíveis pela química clássica. A presente invenção, realizada no Centre de Recherhes Pierre Fabre, tem como objectivo derivados de alcaloides de vinca, o seu modo de preparação e a sua aplicação em terapêutica. A invenção refere-se a um sal de vinflunina com um ácido farmaceuticamente aceitável, o ácido tartárico. 2 A 20', 20 '-difluoro-3', 4'diidrovinorelbina ou vinflunina é um composto reivindicado na patente FR 2 707 988 de 21/07/1993 WO (95/03312) . O ditartarato de vinflunina pode ser preparado como segue: O derivado da fórmula a seguir é dissolvido no derivado cloro, de preferência, clorofórmio ou 2,2-dicloropropano, ou uma mistura de clorofórmio ou 2,2-dicloropropano, e acrescentado num meio superácido, mantendo a temperatura do último entre -45 e -35°C. O derivado difluoro, 4'-desoxi-20',20'-difluorovinblastina, então, constitui o produto final da reacção da maioria. O HPLC analítico indica uma relação entre o composto em cerca de 50%.

Esta reacção é ilustrada no diagrama a seguir:

Rj-CH et K Q% 4!'dfesoxs-20', 20'-dsfluorovsnbiastina «lupia iigaçia

Hjp O Hl

Outros agentes geradores de iões supereletrófilos como tetrabromuro de carbono CBr4 o dibromometano CH2Br2 ou tribrometo de boro BBr3 leva também a 4' -desoxi-20' , 20'- difluorovinblastina sendo assim a maior parte. 3

Este método é, portanto, um processo de preparação de 4'-desoxi-20', 20'-difluorovinblastina, com desempenho superior ao obtido pela técnica anterior. O 4'-desoxi-20', 20'-difluorovinblastina obtido seguindo este meio pode sofrer uma contracção do seu ciclo C', como descrito acima, pela reacção com N-bromosuccinimida em cloreto de metileno na presença de um ácido, tal como o ácido trifluoroacético, a uma temperatura abaixo de -10°C. Após a neutralização em meio básico, os compostos intermediários, 9'-bromoindolenina de 4'-desoxi-20', 20'-difluorovinblastina, instável e não isolado, sofre hidrólise, de preferência numa mistura de [cloreto de metileno : água: tetrahidrofurano], na presença ou não de tetrafluoroborato. Da mesma forma como descrito acima, a adição de AgBF4 aumenta a velocidade de reacção. A maior parte do composto obtida com um rendimento de cerca de 80% corresponde a 20',20'-difluoro-3',4'-diidrovinorelbina ou vinflunina. A figura abaixo resume a reacção:

4 A sequência de estas duas etapas é, portanto, um processo de síntese de vinflunina, mais vantajoso que o anterior em que: 1) a reacção de fluoração em meio superácido é feita a partir de compostos naturais, tal como vimblastina ou 3', 4'-anidrovinblastina, acessível directamente pela extracção de folhas de Catharanthus roseus, e não de vinorelbina, produto semi-sintético mais caro. 2) o rendimento da reacção de difluoração por este novo método é de cerca de 50%, contra 25% do processo anterior, 3) purificação por cromatografia dos compostos obtidos, incluindo a 4 '-desoxi-20,20 '-difluorovinblastina é menos delicada do que no caso anterior. O exemplo a seguir ilustra a invenção, sem limitar o seu alcance. As características espectroscópicas confirmam a estrutura do composto obtido de acordo com a invenção.

Exemplo 1: 20',20'-difluoro-3',4'-diidrovinorelbina (vinflunina).

Dissolver 90g (0,108 mol) de 4'-desoxi-20',20'- difluorovinblastina em 800 ml de cloreto de metileno arrefecido a -45° C, sendo adicionado 10,4 ml (0,135 mol) de ácido trifluoroacético. Foi colocado o conjunto de distância de radiação, e derramou cerca de 30 minutos numa solução de 19,3g (0,108 mol) de N-bromosuccinimida numa mistura de 200 ml de cloreto de metileno e 10,4 ml (0,135 mol) de ácido trifluoracético para assegurar que a temperatura ambiente não subia acima de -45° C. 5

Depois de 30 minutos, a mistura é neutralizada pela adiçao de 300 ml de uma solução a 10% de NaHC03, em seguida, uma vez que uma solução de 23,4 g (0, 12 mole) de tetrafluoroborato de prata numa mistura de 300 ml de tetraidrofurano e 100 ml de água. É permitido voltar à temperatura ambiente mexendo durante cerca de duas horas.

Após filtração, a fase orgânica é separada, lavada duas vezes com 150 ml de água. Após a secagem mais MgS04, da solução é evaporada e o resíduo é dissolvido em 500 ml de metanol e então evaporado para obter 97 g de resíduo seco, contendo 88% de 20', 20'-difluoro-3', 4'diidrovinorelbina ou vinflunina. A purificação é feita por preparado CLHP mais sílica ligada Cis (tamanho de partícula 15-25 μ) , com eluente constituído por água, ácido acético, acetato de amónia, metanol e acetonitrila. As fracções purificadas estão metade concentrada num pH = 7 e extraídas duas vezes com tolueno. A fase orgânica é lavada três vezes com água destilada e analisadas por HPLC analítica. A vinflunina, dissolvida em tolueno, foi extraída com uma solução aquosa contendo exactamente dois equivalentes (mol) de ácido tartárico. A fase aquosa foi então liofilizada para obter o ditartarato de vinflunina.

Tal como os alcaloides antitumores de Catharanthus roseusf os compostos preparados de acordo com a invenção são "Veneno de fuso mitótico"

Esta propriedade foi confirmada através da inibição da polimerização da tubulina em microtúbulos na presença do 6 composto da invenção, seguindo o método descrito por R. C. Weisenberg (Science 177, 1196-7, 1972).

Tendo em conta estas propriedades farmacológicas caracteristicas dos alcaloides da vinca, o composto da presente invenção pode ser utilizada na quimioterapia do cancro.

As preparações farmacêuticas que contenham esta substância activa podem ser formatadas para a administração por via oral, intravenosa ou subcutânea, de uma forma convencional, bem conhecida pelos peritos na técnica. 09-09-2010 7

Claims (6)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Ditartarato de vinflunina.
2. 2. Preparação farmacêutica contendo o ditartarato de vinflunina de acordo com a reivindicação 1.
3. 3. Preparação farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pela forma de administração oral, intravenosa ou subcutânea.
4. 4. Ditartarato de vinflunina de acordo com a reivindicação 1 para uso como medicamento.
5. 5. Ditartarato de vinflunina de acordo com a reivindicação 1 para utilização como medicamento para quimioterapia anticancerígena.
6. 6. Uso de ditartarato de vinflunina de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para quimioterapia anticancerígena. 09-09-2010 1