PT1615613E - Inibidores da serina protease da hepatite c macrocíclicos de quinoxalinilo - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

"INIBIDORES DA SERINA PROTEASE DA HEPATITE C MACROCÍCLICOS DE QUINOXALINILO"

ÁREA TÉCNICA A presente invenção é relativa a novos macrociclos com uma actividade contra o vírus da hepatite C (HCV) e que podem ser empregues no tratamento de infecções pelo HCV. Em particular, a invenção é relativa a compostos macrocíclicos, às composições que contêm esses compostos e aos métodos para os utilizar, assim como a processos de produção desses mesmos compostos. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO 0 HCV é a principal causa de hepatite que não a A ou a B e constitui um problema de gravidade crescente em termos de saúde pública, tanto nos países desenvolvidos como nos países em vias de desenvolvimento. Estima-se que o vírus infecte mais de 200 milhões de pessoas a nível mundial, ultrapassando o número de indivíduos infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV ou VIH) em aproximadamente cinco vezes. Os doentes infectados pelo HCV correm um risco elevado, devido a muitos sofrerem de infecções crónicas, de desenvolver cirrose hepática, subsequente carcinoma hepatocelular e doença hepática terminal. O HCV é a causa de maior prevalência do cancro hepatocelular e a causa da necessidade de transplante do fígado em doentes no mundo ocidental. 2

Existem barreiras consideráveis ao desenvolvimento de uma terapêutica anti-HCV, que incluem, sem ficarem a elas limitadas, a persistência do virus, a diversidade genética do virus durante a replicação no hospedeiro, a grande taxa de incidência do virus desenvolver mutantes resistentes a medicamentos e a falta de sistemas de cultura infecciosos reproduzíveis e de modelos animais de pequeno porte para a replicação e a patogénese do HCV. Na maior parte dos casos, devido à evolução suave da infecção e à biologia complexa do fígado, é necessário ter muito cuidado na consideração de antivirais, que provocam provavelmente efeitos secundários significativos. Apenas se encontram actualmente disponíveis duas terapias autorizadas para a infecção pelo HCV. 0 regime de tratamento original implica geralmente um período de 3 - 12 meses com interferão-α (IFN-a) intravenoso, enquanto um novo tratamento de segunda geração aprovado implica o co-tratamento com o IFN-α e os miméticos nucleosídicos antivirais gerais como a ribavirina. Ambos os tratamentos revestem-se dos mesmos efeitos secundários relacionados com o interferão, assim como de uma baixa eficácia contra as infecções pelo HCV. É necessário desenvolver agentes antivirais eficazes para o tratamento da infecção pelo HCV, devido ao facto de as terapias existentes serem pouco toleradas e ficarem aquém da eficácia esperada. Numa população de doentes em que a maioria dos indivíduos se encontra cronicamente infectada e assintomática e os prognósticos são desconhecidos, um medicamento eficaz produziria idealmente um número significativamente menor de efeitos secundários do que os tratamentos actualmente disponíveis. A proteína não estrutural 3 da hepatite C (non-structural protein-3 = NS3) é um enzima proteolítica necessária ao processamento da poliproteína virai e, logo, à replicação virai. Apesar do 3 enorme número de variantes virais associadas à infecção pelo HCV, o local activo da protease NS3 fica altamente conservado, tornando a sua inibição um modo atractivo de intervenção. 0 êxito recente no tratamento do HIV com inibidores da protease apoia o conceito de que a inibição da NS3 é um alvo-chave na batalha contra o HCV. 0 HCV é um virus ARN do tipo flaviridae. 0 genoma do HCV está encapsulado e contém uma molécula de ARN de cadeia simples, composta por cerca de 9 600 pares de bases. Codifica um polipéptido contendo aproximadamente 3 010 aminoácidos. A poliproteina do HCV é processada pela peptidase virai e do hospedeiro em 10 péptidos discretos que têm uma série de funções. Existem três proteínas estruturais, C, El e E2. A proteína P7 tem uma função desconhecida e é constituída por uma sequência altamente variável. Existem seis proteínas não estruturais. A NS2 é uma metaloproteinase dependente do zinco, que funciona em conjunto com uma porção da proteína NS3. A NS3 incorpora duas funções catalíticas (em separado da sua associação à NS2): uma serina protease na extremidade de terminação N, que requer a NS4A como cofactor, e a função de helicase dependente de ATP-ase na terminação carboxilo. A NS4A é um cofactor fortemente associado mas não covalente da serina protease. A protease NS3.4A é responsável pela clivagem de quatro locais na poliproteina virai. A clivagem pela NS3-NS4A é autocatalítica, ocorrendo em cis. As três hidrólises restantes, NS4A-NS4B, NS4B-NS5A e NS5A-NS5B ocorrem todas em trans. A NS3 é uma serina protease que se encontra classificada a nível estrutural como uma protease do tipo quimotripsina. Enquanto a serina protease NS possui actividade proteolítica por ela própria, a enzima protease do HCV não é uma enzima eficiente em termos de catálise da clivagem da poliproteina. Demonstrou-se ser necessária uma 4 região hidrofóbica central da proteína NS4A para esta melhoria. A formação complexa da proteína NS3 com a NS4A parece ser necessária a eventos de processamento, aumentando a eficácia proteolítica em todos os locais. Uma estratégia geral de desenvolvimento de agentes antivirais é a de desactivar enzimas codificadas por vírus, incluindo a NS3, que são essenciais à replicação do vírus. Esforços actuais no sentido de descobrir inibidores da protease NS3 foram relatados por S. Tan, A. Pause, Y. Shi, N. Sonenberg, "Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev. Drug Discov.", 1, 867 - 881 (2002). Outras revelações de patentes descrevendo a síntese dos inibidores da protease do HCV são: WO 00/59929 (2000); WO 99/07733 (1999); WO 00/09543 (2000); WO 99/50230 (1999); US5861297 (1999); e US 2002/0037998 (2002).

RESUMO DA INVENÇÃO A presente invenção é relativa a novos compostos macrocíclicos e a métodos para o tratamento de uma infecção da hepatite C, num indivíduo que requer essa terapia com os referidos compostos macrocíclicos. A presente invenção é ainda relativa a composições farmacêuticos contendo os compostos da presente invenção, ou os respectivos sais aceitáveis a nível farmacêutico, em combinação com uma substância de suporte ou um excipiente aceitável em farmácia. Numa execução da presente invenção, revela-se os compostos representados pelas Fórmulas I e II, ou os respectivos sais aceitáveis a nível farmacêutico: 5

em que A é seleccionado de forma independente de hidrogénio; -(C=0)-0-Ri, -(C=0)-R2, -C(=0)-NH-R2, -C(=S)-NH-R2 OU -S (0) 2- R2; G é seleccionado de forma independente de -OH, -0-(Ci Ci2-alquilo) , -NHS(0)2-Ri, -(C=0)-R2,; - (C=0)-O-Ri ou - (C=0)-NH- R2; L está ausente ou é seleccionado de forma independente de -s-, -sch2-, -sch2ch2-, -S(0)2-, -S (0)2CH2CH2-, -S(0)-, - S(0)CH2CH2-, -o-, -och2-, -och2ch2-, -(C=0)-CH2-, CH(CH3)CH2-, -CFHCH2- ou -CF2CH2-; X e Y formam, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, um radical cíclico seleccionado dentre arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; W está ausente ou é seleccionado de forma independente de -0-, -s-, -NH-, -C(0)NRi- ou -NRi~; Z é seleccionado de forma independente de hidrogénio; -CN, -SCN, -NCO, -NCS, -NHNH2, -N3, halogéneo, -R4, -C3-Ci2- cicloalquilo, -C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, 6 heterocicloalquilo, heterocicloalquilo substituído ou -NH-N=CH (Ri) ; cada Ri é seleccionado de forma independente de hidrogénio, Ci-C6_alquilo, Ci-C6-alquilo substituído, C2-C6-alcenilo, C2- C6-alcenilo substituído, substituído, arilalquilo substituído, substituído, substituído, C2-C6-alcinilo, C2-C6-alcinilo C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo arilo, arilo substituído, arilalquilo, substituído, heteroarilo, heteroarilo heteroarilalquilo, heteroarilalquilo heterocicloalquilo ou heterocicloalquilo substituído; cada R2 é seleccionado de forma independente de hidrogénio, Ci-C6-alquilo, Ci-C6-alquilo substituído, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcenilo substituído, C2-C6-alcinilo, Ci-Cõ-alcinilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, alquilamina, dialquilamina, arilamina, diarilamina, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilo substituído; cada R4 é seleccionado de forma independente de: (i) -Ci-C6-alquilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; (ii) -C2-C6-alcenilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; 7 (iii) -C2-C6-alcinilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; R5 e R6 são seleccionados de forma independente um do outro de hidrogénio ou metilo; j =0, 1, 2, 3 ou 4; m = 0, 1 ou 2; e s = 0, 1 ou 2.

Descrição detalhada da invenção

Uma primeira execução da invenção é um composto representado pela Fórmula I como acima descrito, ou um sal aceitável a nível farmacêutico, por si só ou em combinação com uma substância de suporte ou excipiente aceitável a nível farmacêutico.

Uma segunda execução da invenção é um composto representado pela Fórmula II como acima descrito, ou um sal aceitável a nível farmacêutico, por si só ou em combinação com uma substância de suporte ou um excipiente aceitável a nível farmacêutico.

Os subtipos representativos da invenção incluem:

Um composto com a Fórmula III: 8

G (III) em que R7 e R8 são seleccionados de forma independente de R4; e um composto com a Fórmula IV:

A

G H (IV) em que R7 e R8 são seleccionados de forma independente de um composto com a Fórmula I, II, III ou IV, em que W está ausente e Z é tiofenilo; um composto com a Fórmula I, II, III ou IV, em que W é -CH=CH- e Z é tiofenilo; um composto com a Fórmula I, III ou IV, em que L está ausente, R5 e R6 são hidrogénio, j=3, m = 1 e s = 1. 9

Os compostos representativos da invenção incluem os seguintes compostos: o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2- (formamido)-tiazol-4-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = etilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = fenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 4- metoxifenilo, j =3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 4- etoxifenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 5- bromotiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; 10 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-pirid-3-il-etilenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = 1¾ = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 3,4- dimetoxi-fenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-tiofen-2-il-etilenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = indol-2-ilo, j =3, m = s = 1, e R5 = Rõ hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = lH-indol-3-il-metilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = furan-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 1H-benzoimidazol-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = lí/-imidazol-2-ilmetilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio; 11 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OEt, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = cloro, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-3-ilo, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-pirid-3-il-acetilenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -NH-, Z = propargilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -N(etilo)-, Z = benzilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -NH-, Z = pirid-3-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tetrazolilo, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; 12 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = morfolina, j =3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -0-, Z = tiofen-3-il-metilo, j =3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5= Rõ = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

13 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=ieR5= Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s = leR5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados

« 14 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e Rs = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que está ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; 15 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R.6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s = leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

w está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 16

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados, 1, e R5 = = OH, L = carbono a

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s : Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados, = 1 e R5 = = OH, L = carbono a 1, e R5 = = OH, L = carbono a

17 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

f W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

O

* W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a 18 que estão ligados, 18

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s : R-6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados, = 1 e R5 = = OH, L = carbono a

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s : R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados, = 1 e R5 = = OH, L = carbono a

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de que estão ligados, 1, e R5 = OEt, L = carbono a 19Br

> W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R-6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

» W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= R-6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

» W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, =3, m = s = 1 e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

9 20 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

α W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, r5 = r6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-0^, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, em que R1 = ciclobutilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, em que R1 = ciclo-hexilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que R-

y 21 G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1 e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que

G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que

G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-NH-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; 22 o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=S)-NH-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -S(0)2-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0) -0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -O-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^J-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = -NH-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^J-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = -NHS (0)2-fenetilo L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^OJ-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-0H, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^J-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = - (C=0)-O-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão 23 ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^OJ-O-R1, R1 =

ciclopentilo, G = - (C=0)-NH-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = - (C=0)-NH-S (0)2-benzilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -(C=0)CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -CH(CH3)CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, e R5 = Rè = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - 0-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, R5 = metilo e Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - S-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, R5 = metilo e Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -S (0) -, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, R5 = metilo e Rí = hidrogénio; 24 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - S (0)2, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, j =3, m = s = 1, R5 — metilo e Rè = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - SCH2CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e Rè = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = CF2CH2, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - CHFCH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, j =3, m = s = 1 e R5 = Rj = hidrogénio, e o composto com a Fórmula II, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, j =3, m = s = 1 e R5 = Rí = hidrogénio.

Os compostos adicionais da invenção são os com a Fórmula V:

em que A e B são como definidos nas tabelas da Matriz A e da Matriz B. As tabelas da Matriz A e da Matriz B em baixo apresentam os substituintes que estão presentes na 25 estrutura de anel nuclear mostrada na Fórmula (V), sendo que, quando um substituinte A é seleccionado da Matriz A e um substituinte B é seleccionado da Matriz B, se descreve um composto adicional da invenção. Os compostos são formados pela selecção de qualquer elemento da Matriz A com um elemento qualquer da Matriz B, para se obter um macrociclo A,B-substituido com a Fórmula V. Por exemplo, um composto com a Fórmula V, em que A é o elemento 101 da Matriz A e B é o elemento 301 da Matriz B, é designado pelo número 101301.

Por conseguinte, a invenção contempla os compostos com a Fórmula V e os respectivos sais aceitáveis a nível farmacêutico, em que A é um elemento qualquer da Matriz A e B é um elemento qualquer da Matriz B. Os compostos específicos englobam os seguintes 101358; 103304; 101336; 101360; 124301; 101324; 101352; 113301; 108301; 120301; 123352; 101354; 106301; 140301; 134301; 101306; 101326; 101348; 101361; 109301; 101304; 110301; 143301; 101318; 101333; 101347; 101343; 144301; 141301; 133301; 101302; 101327; 101340; 101362; 122301; 101355; 101364; 115301; 101319; 101320; 101350; 101314; 126301; 139301; 131301; 101322; 101330; 101334; 101329; 111301; 101356; 101308; 101367; 101351; 101321; 107365; 101339; 127301; 138301; 132301; 101311; 101331; 101348; 105301; 114301; 101307; 101309; 101368; 101353; 129301; 101313; 101341; 130301; 142301; 136301; 101325; 101332; 101359; 123301; 107301; 101357; 128301; 101323; 101349; 121301; 145301; 107341; 116301; 137301; 101345; 101301; 101303; 101335; 101328; 112301; 104301; 101347; 124301; 101317; 118301; 117301; 101366; 114341; 102301; 135301; 101344; 26 101342; 105316; 107316; 101315; 101346; 101337; 116365; e 101338 .

Matriz

27

28

29

30 . ’ w CD OT-^ ZI titi ti ff D k ti gc r % ti pi «f t* A & *c V »» yc ti C ff Oo-j. A H vc ff fy -frt ti ff r é> ti zH ti p· »» ti_ 7 ff o zH 5 u* «r ff c>ti 5 9 V ff 0-ti ti ff rf Q zx titi ti f* Q titi 5 >£ r ti c ir ff / —z W Po* z/ Nz 5 1/1 ff Λ \ ) n. KK ti âC tf ff 0°" xKf ti IN V* ff Q, °=Q>t zAz ti. ff 0 ' ZI titi ti V Cr ti /tiz ti 9 ·* «* —o W \_/t z^ xz ti ff ir rf —o Q Λ Η. zH r* V r "b XX* ti 31

32

Em conformidade com uma execução alternativa, as composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção podem ainda conter outros agentes anti-HCV. Os exemplos de agentes anti-HCV incluem interferão-a, interferão-β, ribavirina e amantadina. Para mais detalhes, consultar S. Tan, A. Pause, Y. Shi, N. Sonenberg, "Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev. Drug Discov.", 1, 867 - 881 (2002); WO 00/59929 (2000); WO 99/07733 (1999); WO 00/09543 (2000); WO 99/50230 (1999); US 5861297 (1999); e US 2002/0037998 (2002).

De acordo com uma execução adicional, as composições farmacêuticas da presente invenção podem ainda conter outros inibidores da protease do HCV.

Ainda de acordo com outra execução, as composições farmacêuticas da presente invenção podem ainda conter inibidor(es) de outros alvos no ciclo de vida do HCV, inclusive helicase, polimerase, metaloprotease e o local interno de entrada do ribossoma (IRES).

De acordo com outra execução, a presente invenção engloba a utilização das composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção, na produção de um medicamento destinado ao tratamento de infecções da hepatite C num indivíduo que requer esse tratamento. Emprega-se as composições farmacêuticas da presente invenção numa quantidade inibidora ou numa quantidade eficaz a nível virai contra o HCV.

Uma execução adicional da presente invenção inclui métodos para tratar amostras biológicas, ao fazer contactar as amostras biológicas com os compostos da presente invenção. 33

Definições

Em baixo encontram-se listadas definições de diversos termos empregues para descrever a presente invenção. Estas definições aplicam-se aos termos empregues ao longo da presente memória descritiva e nas reivindicações, se nada for expresso em contrário em casos específicos, seja individualmente ou como parte dum grupo mais alargado. 0 termo "Ci-C3-alquilo", "Ci-C6-alquilo" ou "C1-C12 alquilo", como empregue no presente documento, refere-se a radicais hidrocarbonetos saturados de cadeia linear ou ramificada, contendo entre um e três, um e doze, ou um e seis átomos de carbono, respectivamente. Os exemplos de radicais C1-C3-alquilo incluem radicais metilo, etilo, propilo e isopropilo; os exemplos de radicais Ci-C6-alquilo incluem radicais metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, terc.-butilo, neopentilo e n-hexilo; e os exemplos de radicais Ci-Ci2-alquilo incluem radicais etilo, propilo, isopropilo, n-hexilo, octilo, decilo, dodecilo. 0 termo "alquilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo "C2-Ci2-alquilo" ou "Ci-Cê-alquilo" substituído pela substituição independente de um, dois ou três átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-Ce-alquil-OH, C (0)-Ci-C6-alquilo, C(0)H, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-Ci-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, 0C(0)-arilo, OC(0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, 0C0NH2, 0C0NH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC(0)H, NHC(0)-Ci-C6-alquilo, NHC(0)- 34 arilo, NHC (O) -heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, C2-C6_alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-C6_alquil-tio ou metiltiometilo. 0 termo "C2-Ci2-alcenilo" ou "C2-C6_alcenilo", como empregue no presente documento, significa um grupo monovalente derivado de um radical hidrocarboneto, contendo de dois a doze ou de dois a seis átomos de carbono, tendo pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono, pela remoção de um único átomo de hidrogénio. Os grupos alcenilo incluem, por exemplo, etenilo, propenilo, butenilo, l-metil-2-buten-l-ilo, e outros do género. 0 termo "alcenilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo "C2-Ci2-alcenilo" ou "C2-Ce~ alcenilo" substituído pela substituição independente de um, dois ou três átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-C6-alquil-OH, C (0)-Ci-C6-alquilo, OCH2-C3-Ci2-cloalquilo, C(0)H, C(0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-C1-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, OC (0)-arilo, OC (0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 35 0C02-heteroarilo, OCONH2, 0C0NH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC(0)H, NHC(O)-Ci-C6-alquilo, NHC(O)-arilo, NHC(O)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, SO2NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci-C6-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-Cô-alquil-tio ou metiltiometilo. 0 termo "C2-Ci2-alcinilo" ou "C2-C6-alcinilo", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo monovalente derivado de um radical hidrocarboneto contendo dois a doze ou dois a seis átomos de carbono, tendo pelo menos uma ligação tripla de carbono-carbono, pela remoção de um único átomo de hidrogénio. Os grupos alcinilo representativos incluem, por exemplo, etinilo, 1-propinilo, 1-butinilo, e outros do género. 0 termo "alcinilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo "C2-Ci2-alcinilo" ou "C1-C6-alcinilo" substituído pela substituição independente de um, dois ou três átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-C6-alquil-0H, C (0)-Ci-C6-alquilo, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C(0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, C0NH-Ci-C6- 36 alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, 0C(0)-arilo, OC (0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, OCONH2, OCONH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC(0)H, NHC(0)-Ci-C6_alquilo, NHC(0)-arilo, NHC(0)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, C2-C6-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-Cg-alquil-tio ou metiltiometilo. 0 termo "Ci-C6-alcoxi", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo Ci-C6-alquilo, como previamente definido, ligado ao radical molecular parental através de um átomo de oxigénio. Os exemplos de Ci-Cô-alcoxi incluem metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, terc.-butoxi, neopentoxi e n-hexoxi.

Os termos "halo" e "halogéneo", como empregues no presente documento, referem-se a um átomo seleccionado de flúor, cloro, bromo e iodo. 0 termo "arilo", como empregue no presente documento, refere-se a um sistema de anel carbocíclico monocíclico ou bicíclico, tendo um ou dois anéis aromáticos, inclusive 37 fenilo, naftilo, tetra-hidronaftilo, indanilo, idenilo e outros do género. 0 termo "arilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo arilo, como definido no presente documento, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, NO2, CN, Ci-C6_alquil-0H, C (0)-Ci-C6_alquilo, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C (0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-Ci-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, OC (0)-arilo, 00(0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, 0C0NH2, 0C0NH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC (0)H, NHC(0)-Ci-C6-alquilo, NHC(0)-arilo, NHC(O)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci-Ce-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-Cê-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-C6_alquil-tio, ou metiltiometilo. 0 termo "arilalquilo", como empregue no presente documento, refere-se a um radical Ci-C3-alquilo ou Ci-Ce-alquilo ligado a um anel arilo. Os exemplos incluem benzilo, fenetilo e outros do género. 38 0 termo "arilalquilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo arilalquilo, como previamente definido, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-C6-alquil-OH, C (0) -Ci-Cô-alquilo, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C (0)-arilo, C(0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-Ci-Cg-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, NHC(0)H, OC(0)-Ci-C6-alquilo, 0C(0)-arilo, OC (0) -heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, 0C0NH2, 0C0NH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC (0)-Ci-Cê-alquilo, NHC(0)-arilo, NHC(0)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHC0NH2, NHC0NH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, SO2NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroaxilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci-C6-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-C12-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-Cô-alquilo-tio ou metiltiometilo. 0 termo "heteroarilo", como empregue no presente documento, refere-se a um radical ou anel aromático monocíclico, bicíclico ou tricíclico, tendo de cinco a dez átomos do anel, dos quais um átomo do anel é seleccionado de S, 0 e N; zero, um ou dois átomos do anel são heteroátomos 39 adicionais seleccionados de forma independente de S, 0 e N; e os restantes átomos do anel são carbono. Heteroarilo inclui piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isooxazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, tiofenilo, furanilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, benzooxazolilo, quinoxalinilo e outros do género. 0 termo "heteroarilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo heteroarilo como definido no presente documento, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, NO2, CN, Ci-C6-alquil-0H, C (0)-Ci-C6-alquilo, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C(0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-C1-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, 0C(0)-arilo, OC (0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, 0C0NH2, OCONH-Ci-Cô-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC(0)H, NHC(0)-Ci-C6-alquilo, NHC(O)-arilo, NHC(0)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHC0NH2, NHC0NH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-Cg-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci-Cg-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, 40 heteroariltio, benzil-tio, Ci-Cõ-alquil-tio ou metiltiometilo. O termo "C3-Ci2-cicloalquilo" refere-se a um grupo monovalente derivado de um composto de anel carbocíclico saturado, monocíclico ou bicíclico, pela remoção de um único átomo de hidrogénio. Os exemplos incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, biciclo-[2.2.1]-heptilo e biciclo-[2.2.2]-octilo. O termo "C3-Ci2-cicloalquilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo C3-Ci2-cicloalquilo como definido no presente documento, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-Ce-alquil-OH, C (O) -Ci-C6-alquilo, OCH2C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C(0)-arilo, C (O)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, CONH2, CONH-Ci-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(O)-Ci-C6_alquilo, 0C(0)-arilo, OC (O)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, OCONH2, OCONH-Ci-C6-alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC(0)H, NHC(O)-Ci-C6-alquilo, NHC(O)-arilo, NHC(O)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci~ C6-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-C6-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3- 41 alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-C6-alquil-tio ou metiltiometilo. 0 termo "heterocicloalquilo", como empregue no presente documento, refere-se a um sistema fundido de um grupo biciclico ou triciclico ou um anel de 5, 6 ou 7 elementos, em que (i) cada anel contém entre um e três heteroátomos seleccionados de forma independente de oxigénio, enxofre e nitrogénio, (ii) cada anel de 5 elementos tem 0 a 1 ligação dupla e cada anel de 6 elementos tem 0 a 2 ligações duplas, (iii) os heteroátomos de nitrogénio e de enxofre podem ser opcionalmente oxidados, (iv) o heteroátomo de nitrogénio pode ser opcionalmente quaternado, e (iv) qualquer um dos anéis anteriores pode ser fundido num anel benzeno. Os grupos heterocicloalquilo representativos incluem [1,3]dioxolano, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo e tetra-hidrofurilo. 0 termo "heterocicloalquilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo heterocicloalquilo, como previamente definido, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, NO2, CN, Ci-Cê-alquil-OH, C (0)-CiC6-alquilo, OCH2-C3-C12-cicloalquilo, C(0)H, C(0)-arilo, C (0)-heteroarilo, CO2-alquilo, C02~arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-C1-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, 0C(0)-arilo, OC(0)-heteroarilo, 0C02_alquilo, 0C02~arilo, 0C02~heteroarilo, 0C0NH2, OCONH-Ci-Cg-alquilo, OCONH-arilo, 42 OCONH-heteroarilo, NHC(O)H, NHC(O)-Ci-C6-alquilo, NHC(O)-arilo, NHC(O)-heteroarilo, NHC02-alquilo, NHC02-arilo, NHC02-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6_alquilo, S02-arilo, S02-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, S02NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC12, CH2NH2, CH2S02CH3, Ci~ C6-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, C^Ce-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di-Ci-C3-alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-Cõ-alquil-tio ou metiltiometilo. 0 termo "heteroarilalquilo", como empregue no presente documento, refere-se a um radical Ci-C3-alquilo ou Ci-Cê-alquilo, ligado ao anel heteroarilo. Os exemplos incluem piridinilmetilo, pirimidiniletilo e semelhantes. NHC (0)-arilo, NHC(0)- 0 termo "heteroarilalquilo substituído", como empregue no presente documento, refere-se a um grupo heteroarilalquilo, como previamente definido, substituído pela substituição independente de um, dois ou três dos respectivos átomos de hidrogénio por F, Cl, Br, I, OH, N02, CN, Ci-Cg-alquil-OH; C (O)-Ci-Cô-alquilo, OCH2-C3-Ci2-cicloalquilo, C(0)H, C (0)-arilo, C (0)-heteroarilo, C02-alquilo, C02-arilo, C02-heteroarilo, C0NH2, CONH-Ci-C6-alquilo, CONH-arilo, CONH-heteroarilo, OC(0)-Ci-C6-alquilo, OC(0)-arilo, 0C(0)-heteroarilo, 0C02-alquilo, 0C02-arilo, 0C02-heteroarilo, 0C0NH2, 0C0NH-Ci-C6_alquilo, OCONH-arilo, OCONH-heteroarilo, NHC (0) H, NHC (0)-Ci-Cg-alquilo, 43 heteroarilo, NHCC>2-alquilo, NHCCh-arilo, NHCCt-heteroarilo, NHCONH2, NHCONH-Ci-C6-alquilo, NHCONH-arilo, NHCONH-heteroarilo, S02-Ci-C6-alquilo, SC^-arilo, SC^-heteroarilo, S02NH2, S02NH-Ci-C6-alquilo, S02NH-arilo, SC^NH-heteroarilo, CF3, CH2CF3, CHC2, CH2NH2, CH2SO2CH3, Ci-Ce-alquilo, haloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, benzilo, benziloxi, ariloxi, heteroariloxi, Ci-Cg-alcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, amina, benzilamina, arilamina, heteroarilamina, Ci-C3-alquilamina, di- C1-C3 -alquilamina, tio, aril-tio, heteroariltio, benzil-tio, Ci-C6-alquil-tio ou metiltiometilo.

Qualquer grupo substituído acima definido (por exemplo, Ci-C6_alquilo substituído, Ci-C6-alcenilo substituído, Ci-Cô-alcinilo substituído, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo substituído, arilalquilo substituído, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo substituído ou heterocicloalquilo substituído) também pode ser substituído pelos seguintes substituintes apropriados: -F, -Cl, -Br -I, -OH, hidroxi protegido, éteres alifáticos, éteres aromáticos, οχο, -NO2, -CN, -Ci-Ci2-alquilo opcionalmente substituído por halogéneo (como os per-haloalquilos), C2-

Ci2-alcenilo opcionalmente substituído por halogéneo, -C2-Ci2_alcinilo opcionalmente substituído por halogéneo, -NH2, amina protegida, -NH-Ci-Ci2-alquilo, -NH-C2_Ci2-alcenilo, -NH -C2-Ci2-alcinilo, -NH-C3-Ci2-cicloalquilo, -NH-arilo, -NH-heteroarilo, -NH-heterocicloalquilo, -dialquilamina, diarilamina, -di-heteroarilamina, -0-Ci-Ci2-alquilo, -O-Ci-Ci2~alcenilo, -0-C2-Ci2-alcinilo, -0-C3-Ci2-cicloalquilo, -0-arilo, -O-heteroarilo, -O-heterocicloalquilo, -C(0)H, -C(0)-C2-Ci2- C(0)-C i-Ci2_alquilo, -C (0) -C2-Ci2-alcenilo, 44 alcinilo, -C(0)-C3-Ci2-cicloalquilo, -C(0)-arilo, C (0) — heteroarilo, -C (0)-heterocicloalquilo, -C0NH2, -C0NH-Ci-Ci2-alquilo, -CONH-C2-Ci2-alcenilo, -CONH-C2-Ci2-alcinilo, -CONH-C3-Ci2-CÍcloalquilo, -CONH-arilo, -CONH-heteroarilo, -CONH-heterocicloalquilo, -C02-Ci-Ci2-alquilo, -C02-C2-Ci2- alcenilo, -C02-C2-Ci2-alcinilo, -C02-C3-Ci2-cicloalquilo, C02-arilo, -C02-heteroarilo, -C02-heterocicloalquilo, -C02-Ci-Ci2-alquilo, -0C02-C2-Ci2-alcenilo, -0C02-C2-Ci2-alcinilo, -0C02-C3-Ci2-cicloalquilo, -0C02-arilo, -0C02-heteroarilo, -0C02-heterocicloalquilo, -0C0NH2, -OCONH-Ci-Ci2-alquilo, OCONH-C2-Ci2-alcenilo, -OCONH-C2-Ci2-alcinilo, -OCONH-C3-Ci2-cicloalquilo, -OCONH-arilo, -OCONH-heteroarilo, -OCONH-heterocicloalquilo, -NHC(0)H, -NHC (0)-Ci-Ci2-alquilo, NHC (0)-C2-Ci2-alcenilo, -NHC (0) C2-Ci2-alcinilo, -NEC (0) -C3-Ci2-cicloalquilo, -NHC(0)-arilo, -NHC(0)-heteroarilo, NHC (0)-heterocicloalquilo, -NHC02-Ci-Ci2-alquilo, -NHC02-Ci-Ci2-alcenilo, -NHC02-C2-Ci2-alcinilo, -NHCO2-C3-C12- cicloalquilo, -NHC02-arilo, -NHC02-heteroarilo, -NHC02-heterocicloalquilo, -NHC(0)NH2, -NHC (0) NH-Ci-Ci2-alquilo, -NHC (0)NH-C2-i2-alcenilo, -NHC (0) NH-C2-Ci2-alcinilo. NHC (0)NH-C3-Ci2-cicloalquilo, -NHC (0)NH-arilo, -NHC (CONH-heteroarilo, -NHC(0)NH-heterocicloalquilo. NHC(S)NH2, NHC (S)NH-Ci-Ci2-alquilo, -NHC (S) NH-C2-Ci2-alcenilo, NHC (S)NH-C2-Ci2-alcinilo, -NHC (S)NH-C3-Ci2-cicloalquilo, NHC(S)NH-arilo, -NHC(S)NH-heteroarilo, -NHC(S)NH- heterocicloalquilo, -NHC(NH)NH2, -NHC (NH]NH-Ci-Ci2-alquilo, -NHC (NH)NH-C2-Ci2-alcenilo, -NHC (NH)NH-C2-Ci2-alcinilo, NHC(NH)NH-C3-C12-cicloalquilo, -NHC(NH)NH-arilo, -NHC(NH)NH-heteroarilo, -NHC(NH)NH-heterocicloalquilo, -NHC(NH)-Ci-Ci2-alquilo, -NHC (NH)-C2-Ci2-alcenilo, -NHC (NH)-C2-Ci2-alcinilo, -NHC(NH)-C3-Ci2-CÍcloalquilo, -NHC(NH)-arilo, -NHC (NH)-heteroarilo, -NHC(NH)-heterocicloalquilo, -(NH)NH-C1-C12-alquilo, -C (NH) NH-C2-Ci2-alcenilo, - (NH) NH-C2-Ci2-alcinilo, - 45 C(NH)NH-C3-Ci2-cicloalquilo, -C (NH)NH-arilo, -C (NH)NH-heteroarilo, -C(NH)NH-heterocicloalquilo, -S (0)-C1-C12-alquilo, -S (0)-C2-Ci2-alcenilo, -S (0)-C2-Ci2-alcinilo, —S (0) — C3-Ci2-cicloalquilo, -S(0)-arilo, -S (0)-heteroarilo, —S (0) — heterocicloalquilo, -S02NH2, -S02NH-Ci-Ci2-alquilo, -S02NH-C2-Ci2-alcenilo, -S02NH-C2-Ci2-alcinilo, -S02NH-C3-Ci2-cicloalquilo, -S02NH-arilo, -S02NH-heteroarilo, -S02NH-heterocicloalquilo, -NHS02-Ci-Ci2-alquilo, -NHS02-C2-Ci2-alcenilo, -NHS02-C2-Ci2-alcinilo, -NHS02-C3-Ci2-cicloalquilo, -NHS02-arilo, -NHS02-heteroarilo, -NHS02-heterocicloalquilo, -CH2NH2, -CH2S02CH3, -arilo, -arilalquilo, -heteroarilo, heteroarilalquilo, -heterocicloalquilo, -C3-C12- cicloalquilo, polialcoxialquilo, polialcoxi, metoximetoxi, metoxietoxi, -SH, -S-Ci-Ci2-alquilo, -S-C2-Ci2-alcenilo, -S-C2-Ci2-alcinilo, -S-C3-Ci2-cicloalquilo, -S-arilo, -S-heteroarilo, -S-heterocicloalquilo ou metiltiometilo. Os arilos, heteroarilos, alquilos e análogos podem ser ainda substituídos. 0 termo "alquilamina" refere-se a um grupo com a estrutura NH (Ci-Ci2-alquilo) , em que Ci-Ci2-alquilo encontra-se previamente definido. 0 termo "dialquilamina" refere-se a um grupo com a estrutura -N (Ci-Ci2-alquilo) 2, em que Ci-Ci2-alquilo se encontra previamente definido. Os exemplos de dialquilamina são Ν,Ν-dimetilamina, W,W-dietilamina, Ν,Ν-metiletilamina e semelhantes. 0 termo "diarilamina" refere-se a um grupo com a estrutura -N(aril)2 ou -N(arilo substituído)2, em que arilo substituído se encontra previamente definido. Os exemplos 46 de diarilamina são N,N-difenilamina, N,N-dinaftilamina, N,N-di(toluenil)amina e semelhantes. 0 termo "di-heteroarilamina" refere-se a um grupo com a estrutura -N (heteroaril)2 ou - N (heteroarilo substituído)2, em que heteroarilo e heteroarilo substituído se encontram previamente definidos. Os exemplos de di-heteroarilamina são N,N- difuranilamina, N/íí-ditiazolidinilamina, N,N- di-(imidazol)-amina e semelhantes.

Os compostos descritos no presente documento contêm um ou mais centros assimétricos e, logo, dão origem a enantiómeros, diastereómeros e a outras formas estereoisoméricas que poderão ser definidas em termos de estereoquímica absoluta como (R)- ou (S)-, ou como (D)- ou (L)- para aminoácidos. A presente invenção contempla incluir todos estes possíveis isómeros, assim como as respectivas formas opticamente puras e racémicas. É possível preparar os isómeros ópticos a partir dos respectivos precursores opticamente activos, pelos procedimentos acima descritos, ou por dissolução das misturas racémicas. É possível realizar a resolução na presença de um agente de resolução, por meio de cromatografia ou de cristalização repetida ou por uma combinação destas técnicas conhecidas dos especialistas da técnica. Outros detalhes relativos a resoluções podem ser encontrados in Jacques, et al., "Enantiomers, Racemates, and Resolutions" (John Wiley & Sons, 1981) . Se os compostos descritos no presente documento contiverem ligações duplas olefínicas ou outros centros de assimetria geométrica, e se nada for expresso em contrário, determina-se que os compostos incluirão tanto isómeros geométricos E como Z. Do mesmo modo, também estão incluídas todas as formas 47 tautoméricas. A configuração de qualquer ligação dupla de carbono-carbono que apareça no presente documento é seleccionada apenas por motivos de conveniência e não tem por função determinar uma configuração particular, a não ser que tal seja expresso pelo texto; assim, uma ligação dupla de carbono-carbono mostrada de forma arbitrária no presente documento como trans poderá ser cis, trans ou uma mistura das duas em qualquer proporção. 0 termo "indivíduo" como empregue no presente documento é relativo a um mamífero. Por conseguinte, um indivíduo refere-se assim a, por exemplo, cães, gatos, cavalos, vacas, suínos, porquinhos-da-índia e semelhantes. Em termos preferenciais, o indivíduo é humano. Se o indivíduo for humano, o mesmo poderá ser referido no presente documento por doente.

Como empregue no presente documento, o termo "sal aceitável a nível farmacêutico" é relativo aos sais dos compostos formados pelo processo da presente invenção que, no quadro de uma avaliação médica fundamentada, se adeqúem a uma utilização em contacto com os tecidos humanos e de animais inferiores sem toxicidade indevida, irritação, resposta alérgica e semelhantes, e que correspondam a uma taxa razoável de benefício/risco. Os sais aceitáveis a nível farmacêutico são bem conhecidos da técnica. Por exemplo, S. M. Berge, et al. descreve sais aceitáveis a nível farmacêutico em pormenor in "J. Pharmaceutical Sciences", 66: 1 - 19 (1977). É possível preparar os sais in situ durante o isolamento e a purificação finais dos compostos da invenção, ou em separado ao fazer reagir a função de base livre com um ácido orgânico apropriado. Os exemplos de sais aceitáveis a nível farmacêutico incluem os sais de 48 adição ácida atóxicos que são sais de um grupo amina formado com ácidos inorgânicos como o ácido hidroclórico, ácido hidrobrómico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico, ou com ácido orgânicos como o ácido acético, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malónico, ou ao recorrer a outros métodos empregues na técnica, como a permuta iónica. Outros sais aceitáveis a nível farmacêutico incluem sais de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, sulfonato de cânfora, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, formato, fumarato, gluco-heptonato, glicerofosfato, gluconato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, hidro-iodeto, 2-hidroxi-etanossulfonato, lactobionato, lactato, laurato, sulfato de laurilo, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, valerato e semelhantes. Os sais de metais alcalinos ou alcalino-terrosos representativos incluem sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e semelhantes. Outros sais aceitáveis a nível farmacêutico incluem, se apropriado, amónio atóxico, amónio quaternário e catiões amina formados pela utilização de contra-iões tais como halogeneto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, alquilo tendo de 1 a 6 átomos de carbono, sulfonato e sulfonato de arilo.

Como empregue no presente documento, o termo "éster aceitável a nível farmacêutico" é relativo aos ésteres dos compostos produzidos pelo processo da presente invenção, 49 que sofrem hidrólise in vivo e incluem aqueles que se decompõem facilmente no corpo humano, originando o composto parental ou um respectivo sal. Os grupos éster apropriados incluem, por exemplo, os que derivam de ácidos carboxilicos alifáticos aceitáveis a nivel farmacêutico, em particular ácidos alcanóico, alcenóico, cicloalcanóico e alcanodióico, nos quais cada radical alquilo ou alcenilo não terá, de forma vantajosa, mais de 6 átomos de carbono. Os exemplos de ésteres particulares incluem formatos, acetatos, propionatos, butiratos, acrilatos e etilsuccinatos. 0 termo "profármacos aceitáveis a nivel farmacêutico", como empregue no presente documento, é relativo aos profármacos dos compostos produzidos pelo processo da presente invenção, que se encontram no âmbito de uma avaliação médica fundamentada, adequados a utilização em contacto com os tecidos humanos e de animais inferiores sem toxicidade indevida, irritação, resposta alérgica e semelhantes, em correspondência com uma taxa razoável de benefício/risco, e eficazes no propósito a que se destinam, assim como as formas iónicas anfotéricas, se possível, dos compostos da presente invenção. "Profármaco", como empregue no presente documento, significa um composto que pode ser transformado in vivo por via metabólica (por exemplo, através de hidrólise), para dar origem a qualquer composto delineado pelas fórmulas da presente invenção. Conhecem-se diversas formas de profármacos no estado da técnica, por exemplo, como debatido in Bundgaard, (ed.), "Design of Prodrugs", Elsevier (1985); Widder, et al. (ed.), "Methods in Enzymology", vol. 4, Academic Press (1985); Krogsgaard-Larsen, et al., (ed). "Design and Application of Prodrugs, Textbook of Drug Design and Development", Capítulo 5, 113 -191 (1991); Bundgaard, et al., "Journal of Drug Deliver 50

Reviews", 8 : 1 - 38 (1992); Bundgaard, "J. of Pharmaceutical Sciences", 77 : 285 et seq. (1988); Higuchi and Stella (eds.) "Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems", American Chemical Society (1975); e Bernard Testa & Joachim Mayer, "Hydrolysis In Drug and Prodrug Metabolism: Chemistry, Biochemistry And Enzymology", John Wiley and Sons, Ltd. (2002) .

As combinações de substituintes e de variáveis contempladas pela presente invenção são apenas as que resultam da produção de compostos estáveis. O termo "estável", como empregue no presente documento, é relativo a compostos que possuem uma suficiente estabilidade para permitir a produção, e indo essa estabilidade manter a integridade do composto durante um período de tempo suficiente para os fins detalhados no presente documento (por exemplo, administração terapêutica ou profiláctica a um indivíduo).

Os compostos sintetizados podem ser separados de uma mistura de reacção e ainda purificados por um método como a cromatografia de coluna, cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) ou recristalização. Como será constatado pelo especialista, outros métodos de síntese dos compostos das fórmulas do presente documento serão evidentes aos especialistas comuns da técnica. Além disso, as diferentes etapas de síntese podem ser realizadas em sequência ou numa ordem alternada para dar origem aos compostos pretendidos. Além disso, os solventes, as temperaturas, os períodos de duração das reacções, etc. delineados no presente documento destinam-se somente a fins ilustrativos, e um especialista comum da técnica será capaz de reconhecer que a variação das condições de reacção poderá produzir os produtos macrocíclicos com ponte pretendidos da presente invenção. 51

As transformações químicas de síntese e as metodologias de grupos de protecção (protecção e desprotecção) úteis na síntese dos compostos descritos no presente documento são conhecidas do estado da técnica e incluem, por exemplo, as descritas in R. Larock, "Comprehensive Organic Transformations", VCH Publishers (1989); T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis" 2.a Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, "Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis", John Wiley and Sons (1994); e L. Paquette, ed., "Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) . É possível modificar os compostos da pressente invenção ao adicionar diversas funcionalidades por meio de quaisquer das vias de síntese delineadas no presente documento, com vista a melhorar as propriedades biológicas selectivas. Estas modificações são conhecidas do estado da técnica e incluem as que aumentam a penetração biológica num determinado sistema biológico (por exemplo, sangue, sistema linfático, sistema nervoso central), aumentam a disponibilidade oral, aumentam a solubilidade para permitir a administração por injecção, alteram o metabolismo e alteram a taxa de excreção.

Composições farmacêuticas

As composições farmacêuticas da presente invenção contêm uma quantidade de eficácia terapêutica de um composto da presente invenção, formulado em conjunto com uma ou mais substâncias de suporte aceitáveis a nível farmacêutico. Como empregue no presente documento, o termo "substância de suporte aceitável a nível farmacêutico" significa uma substância de carga atóxica, inerte sólida, semi-sólida ou 52 líquida, diluente, material de encapsulamento ou um auxiliar de formulação de qualquer tipo. Alguns exemplos de materiais que podem servir de substâncias de suporte aceitáveis a nível farmacêutico são açúcares como lactose, glucose e sucrose; amidos como amido de milho e amido de batata; celulose e os respectivos derivados, tais como carboximetilcelulose de sódio, etilcelulose e acetato de celulose; adraganta em pó; malte; gelatina; talco; excipientes como manteiga de cacau e ceras de supositórios; óleos como o óleo de amendoim, óleo de semente de algodão; óleo de cártamo; óleo de sésamo; azeite; óleo de milho e óleo de soja; glicóis; tais como propilenoglicol; ésteres como oleato de etilo e laurato de etilo; ágar-ágar; tampões como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; água isenta de pirógenos; soro fisiológico isotónico; solução de Ringer; álcool etílico e soluções de tampão fosfato, assim como outros lubrificantes compatíveis atóxicos, tais como sulfato de lauril-sódio e estearato de magnésio, assim como corantes, agentes de libertação, agentes de revestimento, adoçantes, compostos aromáticos e perfumantes, conservantes e antioxidantes também poderão estar presentes na composição, de acordo com a decisão do formulador. É possível ministrar as composições farmacêuticas da presente invenção a humanos e a outros animais por via oral, rectal, parental, intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, por via tópica (pós, pomadas ou gotas) , por via bocal, ou na forma de um pulverizador oral ou nasal.

As formas de dosagem líquidas destinadas à administração oral incluem emulsões, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires aceitáveis em farmácia. Além dos compostos activos, as formas de dosagem líquidas poderão 53 conter diluentes inertes de uso comum no estado da técnica, tais como, por exemplo, água ou outros solventes, dissolventes e emulsionantes, tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, álcool benzílico, benzoato de benzilo, propilenoglicol, 1,3-butilenoglicol, dimetilformamida, óleos (em particular óleos de semente de algodão, de amendoim, de milho, de gérmen, azeite, óleo de rícino e óleo de sésamo), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurílico, polietilenoglicóis e ésteres de ácidos gordos de sorbitano, e as respectivas misturas. Além de diluentes inertes, as composições orais também podem conter adjuvantes como os agentes molhantes, emulsionantes e agentes de suspensão, adoçantes, aromatizantes e perfumantes. É possível formular preparações injectáveis, por exemplo, suspensões oleaginosas ou aquosas injectáveis estéreis de acordo com o estado da técnica conhecido, recorrendo a agentes de dispersão ou a agentes molhantes e agentes de suspensão adequados. A preparação injectável estéril também pode ser uma solução, suspensão ou emulsão injectável estéril num diluente ou solvente aceitável a nível parental atóxico, por exemplo, na forma de uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues encontram-se a água, solução de Ringer, U.S.P. e solução isotónica de cloreto de sódio. Além disso, emprega-se convencionalmente óleos fixos estéreis como solvente ou meio de suspensão. Neste intuito, é possível empregar qualquer óleo fixo suave, inclusive monoglicéridos ou diglicéridos sintéticos. Além disso, emprega-se ácidos gordos como o ácido oleico na preparação de injectáveis. 54

Pode-se esterilizar as formulações injectáveis por intermédio, por exemplo, de filtração através de um filtro de retenção bacteriana, ou por intermédio da incorporação de agentes de esterilização na forma de composições sólidas estéreis, que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou noutro meio injectável estéril antes da utilização.

De modo a prolongar o efeito de um medicamento, é com frequência desejável abrandar a absorção do medicamento da injecção subcutânea ou intramuscular. Isto poderá ser conseguido pela utilização de uma suspensão liquida de um material cristalino ou amorfo com uma baixa hidrossolubilidade. A taxa de absorção do medicamento dependerá, portanto, da respectiva taxa de dissolução que, por sua vez, poderá depender do tamanho dos cristais e da forma cristalina. Em alternativa, consegue-se a absorção retardada de um medicamento ministrado de forma parental ao dissolver ou suspender o medicamento num veiculo oleico. As formas de retardação injectáveis são produzidas pela formação de matrizes microencapsuladas do medicamento em polímeros biodegradáveis, tais como poliláctido-poliglicólido. Em função da relação de medicamento para polímero e da natureza do polímero particular empregue, será possível controlar a taxa de libertação do medicamento. Os exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli (ortoésteres) e poli(anidridos). Também se prepara as formulações de retardação injectáveis, ao reter o medicamento em lipossomas ou microemulsões compatíveis com os tecidos corporais.

As composições destinadas à administração rectal ou vaginal são de preferência supositórios, que podem ser preparados 55 pela mistura dos compostos da presente invenção com excipientes ou substâncias de suporte não irritantes adequados, tais como manteiga de cacau, polietilenoglicol ou uma cera de supositórios, que são sólidos à temperatura ambiente mas líquidos à temperatura corporal, derretendo por isso na cavidade rectal ou vaginal e libertando o composto activo.

Também é possível empregar composições sólidas do mesmo género como substâncias de carga em cápsulas de gelatina mole ou dura, recorrendo a excipientes como a lactose ou o açúcar do leite, assim como a polietilenoglicóis de elevado peso molecular e outros semelhantes.

Os compostos activos também se podem encontrar na forma microencapsulada com um ou mais excipientes, como anteriormente referido. As formas de dosagem sólidas de comprimidos, drageias, cápsulas, pílulas e granulados podem ser preparadas com revestimentos e capas, tais como revestimentos entéricos, revestimentos de libertação controlada e outros revestimentos bem conhecidos da técnica de formulação farmacêutica. Nestas formas de dosagem sólidas, pode-se adicionar por mistura o composto activo com pelo menos um diluente inerte como a sucrose, a lactose ou o amido. Estas formas de dosagem também poderão conter, como é prática normal, substâncias adicionais além de diluentes inertes, por exemplo, lubrificantes da produção de comprimidos e outros auxiliares à produção de comprimidos, como o estearato de magnésio e a celulose microcristalina. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, as formas de dosagem também poderão conter tampões. Opcionalmente, poderão conter agentes opacificantes e também poderão ter uma composição tal que 56 as faça libertar o(s) ingrediente(s) activo(s) apenas, ou de preferência, numa determinada parte do tracto intestinal, opcionalmente de forma retardada. Os exemplos de composições de incorporação que podem ser empregues incluem as ceras e as substâncias poliméricas.

As formas de dosagem destinadas à administração tópica ou transdérmica de um composto da presente invenção incluem pomadas, pastas, cremes, loções, géis, pós, soluções, pulverizadores, inaladores ou pensos transdérmicos. Adiciona-se o componente activo por mistura sob condições estéreis com uma substância de suporte aceitável a nivel farmacêutico e quaisquer conservantes ou tampões que sejam necessários. 0 âmbito da presente invenção contempla igualmente uma formulação oftálmica, gotas para os ouvidos, pomadas para os olhos, pós e soluções.

As pomadas, pastas, cremes e géis poderão conter, a par do composto activo da presente invenção, excipientes como gorduras animais e vegetais, óleos, ceras, parafinas, amido, adraganta, derivados de celulose, polietilenoglicóis, silicones, betonites, ácido silicico, talco e óxido de zinco, ou as respectivas misturas.

Os pós e os pulverizadores poderão conter, a par dos compostos da presente invenção, excipientes como lactose, talco, ácido silicico, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio e pó de poliamida, ou as misturas destas substâncias. Os pulverizadores poderão conter adicionalmente agentes de expansão convencionais, tais como os clorofluoro-hidrocarbonetos. 57

Os pensos transdérmicos têm a vantagem adicional de proporcionarem um fornecimento controlado de um composto ao corpo. Estas formas de dosagem podem ser produzidas ao dissolver ou ao dispersar o composto no meio apropriado. Também se pode empregar promotores de absorção para aumentar o fluxo do composto através da pele. É possível controlar essa taxa ao fornecer uma membrana de controlo da taxa ou ao dispersar o composto num gel ou numa matriz polimérica.

Actividade antiviral

Uma quantidade ou uma dose inibidora dos compostos da presente invenção poderá ir de cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 500 mg/kg, em alternativa de cerca de 1 a cerca de 50 mg/kg. As quantidades ou as doses inibidoras também variam em função da via de administração, assim como da possibilidade de co-utilização com outros agentes.

Trata-se ou previne-se as infecções virais num indivíduo, como um humano ou um mamífero inferior, ao ministrar ao indivíduo uma quantidade eficaz ou uma quantidade inibidora contra o vírus da hepatite C de um composto da presente invenção, em quantidades tais e durante um período de tempo necessários para atingir o resultado pretendido. Um método adicional da presente invenção é o tratamento de amostras biológicas com uma quantidade inibidora de um composto da composição da presente invenção, em quantidades tais e durante um período de tempo necessários para atingir o resultado pretendido. O termo "quantidade eficaz contra o vírus da hepatite C" de um composto da invenção, como empregue no presente 58 documento, significa uma quantidade suficiente do composto de modo a diminuir a carga virai numa amostra biológica ou num indivíduo. Como do conhecimento da técnica médica, uma quantidade eficaz contra o vírus da hepatite C de um composto da presente invenção será aplicável com uma taxa de benefício/risco razoável a qualquer tratamento médico. 0 termo "quantidade inibidora" de um composto da presente invenção significa uma quantidade suficiente para diminuir a carga virai da hepatite C numa amostra biológica ou num indivíduo. Sabe-se que, ao ministrar a referida quantidade inibidora de um composto da presente invenção a um indivíduo, ela será aplicável com uma taxa de benefício/risco razoável a qualquer tratamento médico determinado por um médico. 0 termo "amostra(s) biológica(s)", como empregue no presente documento, significa uma substância de origem biológica destinada a ser ministrada a um indivíduo. Os exemplos de amostras biológicas incluem o sangue e os respectivos componentes, tais como plasma, plaquetas, subpopulações de células sanguíneas e semelhantes; órgãos como rins, fígado, coração, pulmão e semelhantes; esperma e óvulos; medula óssea e respectivos componentes; ou células estaminais. Assim, outra execução da presente invenção consiste num método para o tratamento de uma amostra biológica, ao fazer contactar a referida amostra biológica com uma quantidade inibidora de um composto ou de uma composição farmacêutica da presente invenção.

Se houver melhoria do estado dum indivíduo, poderá ministrar-se uma dose de manutenção de um composto, de uma composição ou de uma combinação desta invenção, se necessário. Consequentemente, é possível reduzir a dosagem 59 ou a frequência de administração, ou ambas, em função dos sintomas, para um nível em que se conserve o estado melhorado, se tiver ocorrido alívio dos sintomas para o nível pretendido, deverá interromper-se o tratamento. No entanto, o indivíduo poderá requerer tratamento intermitente a longo prazo, caso haja o ressurgimento dos sintomas patológicos.

No entanto, a decisão quanto à utilização diária total dos compostos e das composições da presente invenção será tomada pelo médico assistente no âmbito de uma avaliação médica fundamentada. A dose inibidora específica para um doente em particular dependerá de uma série de factores, inclusive do problema a ser tratado e da gravidade desse problema; da actividade do composto específico empregue; da composição específica empregue; da idade, do peso corporal, do estado geral de saúde, do sexo e da dieta do doente; da altura da administração, da via de administração, e da taxa de excreção do composto específico empregue; da duração do tratamento; dos medicamentos empregues em combinação ou em simultâneo com o composto específico empregue; e de factores semelhantes conhecidos das técnicas médicas. A dose inibidora diária total dos compostos da presente invenção, ministrada a um indivíduo numa única dose ou em doses divididas, pode ser em quantidades, por exemplo, de 0,01 a 50 mg/kg de peso corporal ou, mais usualmente, de 0,1 a 25 mg/kg de peso corporal. As composições de dose única poderão conter estas quantidades ou submúltiplos das mesmas para constituir a dose diária. Dum modo geral, os regimes de tratamento de acordo com a presente invenção contemplam a administração a um doente que requer esse tratamento de cerca de 10 mg a cerca de 1 000 mg do(s) 60 composto(s) da presente invenção por dia num dose única ou em múltiplas doses.

Se nada for expresso em contrário, todos os termos técnicos e científicos empregues no presente documento estão de acordo com o significado comummente conhecido por parte de um especialista do estado da técnica.

Abreviaturas

As abreviaturas empregues nas descrições dos esquemas e nos exemplos que se seguem são: ACN para acetonitrilo; BME para 2-mercaptoetanol; BOP para hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris- (dimetilamino)-fosfónio; COD para ciclooctadieno; DAST para trifluoreto de dietilamino-enxofre; DABCYL para 6- (N-4'-carboxi-4-(dimetilamino)-azobenzeno)-amino-hexil-l-O-(2-cianoetil)-(Ν,Ν-diisopropil)-fosforamidita; DCM para diclorometano; DIAD para azodicarboxilato de diisopropilo; DIBAL-H para hidreto de diisobutil-alumínio; DIEA para diisopropiletilamina; DMAP para N,N-dimetilaminopiridina; DME para éter etilenoglicoldimetílico; DMEM para meios de cultura DMEM = Dulbecco' s Modified Eagles Media; DMF para N,N-dimetilformamida; DMSO para sulfóxido de dimetilo; DUPHOS para 61

V-/ '-Ο EDANS para o ácido 5-(2-amino-etilamino)-naftaleno-1-sulfónico; EDCI ou EDC para hidrocloreto de 1-(3-dietilaminopropil)-3-etilcarbodiimida; EtOAc para acetato de etilo; HATU para hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν', N'-tetrametilurónio;

Cat. de Hoveyda para dicloro-(o-isopropoxifenilmetileno)-(triciclo-hexilfosfino)-ruténio (II); KHMDS é bis-(trimetilsilil)-amida de potássio;

Ms para mesilo; NMM para Ν-4-metilmorfolina

PyBrOP para hexafluorofosfato de bromo-tri-pirolidino-fosfónio;

Ph para fenilo; RCM para metátese de fecho de anel; RT para transcrição reversa; RT-PCR para reacção em cadeia de polimerase por transcrição reversa (reverse transcription-polimerase chain reaction); TEA para trietilamina; TFA para ácido trifluoroacético; THF para tetra-hidrofurano; TLC para cromatografia em camada fina (thin layer chromatography); TPP ou PPh3 para trifenilfosfina; tBOC ou Boc para terc.-butiloxicarbonilo; e 62

Xantphos para 4,5-bis-difenilfosfanil-9,9-dimetil-9H- xanteno.

Processos de síntese

Os compostos e os processos da presente invenção serão melhor compreendidos em ligação com os seguintes esguemas de síntese, que ilustram os processos pelos quais se pode preparar os compostos da invenção.

Esquema 1

Preparou-se todos os análogos da quinoxalina a partir do intermediário comum If. A síntese do composto (1-6) encontra-se apresentada no Esquema 1. A boc-hidroxiprolina (1-1) disponível no mercado é tratada com HC1 em dioxano e é ainda ligada ao ácido (1-2), empregando HATU para dar origem ao intermediário (1-3). É possível empregar outros derivados de aminoácidos contendo um alceno terminal em vez de (1-2) , de modo a criar estruturas macrocíclicas variadas (para mais detalhes consultar o WO/0059929). A hidrólise do (1-3) com LiOH, seguida de outra ligação peptídica à ciclopropilamina (1-4), deu origem ao tripéptido (1-5). Por fim, a metátese de fecho de anel com um catalisador à base 63 de ruténio produziu o intermediário-chave pretendido (1-6) (para mais detalhes acerca da metátese de fecho de anel consultar os artigos recentes: Grubbs et al., "Acc. Chem. Res.", 1995, 28, 446; Shrock et al., "Tetrahedron" 1999, 55, 8 141; Furstner, "A. Angew. Chem. Int. Ed." 2000, 39, 3 012; Trnka et al., "Acc. Chem. Res." 2001, 34, 18; e Hoveyda et al., "Chem. Eur. J." 2001, 7, 945).

Esquema 2

OH 2-1

Preparou-se os análogos de quinoxalina da presente invenção seguindo diferentes vias de sintese. O método mais simples, mostrado no Esquema 2, é o de condensar análogos da 1H-quinoxalin-2-ona disponíveis no mercado, inclusive os compostos 2-1 - 2-5 com o intermediário-chave 1-6 recorrendo às condições de Mitsunobu, seguindo-se hidrólise com LiOH. A literatura existente prevê a formação do produto de Mitsunobu no nitrogénio na posição 1, mas observou-se contudo ligação no carbonil-oxigénio para formar o composto 2-2. Um debate detalhado acerca da identificação e da caracterização do produto de adição oxo de Mitsunobu imprevisto aparece nos exemplos do presente 64 documento. Para mais detalhes acerca da reacção de Mitsunobu, consultar 0. Mitsunobu, "Synthesis" 1981, 1 -28; D. L. Hughes, "Org. React." 29, 1 - 162 (1983); D. L. Hughes, "Organic Preparations and Procedures Int." 28, 127 - 164 (1996); e J. A. Dodge, S. A. Jones, "Recent Res. Dev. Org. Chem." 1, 273 - 283 (1997). 64 Esquema 3

É possível produzir diversos derivados de quinoxalina com a Fórmula (3-3) com as fenildiaminas com a Fórmula (3-1), em que R4 se encontra previamente definido, e os cetoácidos ou ésteres com a Fórmula (3-2), em que R4 se encontra previamente definido, em metanol anidro à temperatura ambiente (TA) (consultar Bekerman et al., "J. Heterocycl. Chem." 1992, 29, 129 - 133 para mais detalhes acerca desta reacção). Os exemplos de fenildiaminas adequadas à criação de derivados de quinoxalina com a Fórmula (3-3) incluem 1,2-diamino-4-nitrobenzo, o-fenilenodiamina, 3,4-diaminotolueno, 4-cloro-l, 2-fenilenodiamina, metil-3,4-diaminobenzoato, benzo[1,3]dioxolo-5,6-diamina, 1,2-diamino-4,5-metilenodioxibenzeno, 4-cloro-3-(trifluorometil)-1,2-benzenodiamina e semelhantes. Os exemplos de cetoácidos adequados à reacção descrita no Esquema 3 incluem os ácido benzoilfórmico, ácido fenilpirúvico, ácido indol-3-glioxílico, ácido indol-3-pirúvico, ácido nitrofenilpirúvico, ácido (2-furil)-glioxílico e semelhantes. Os exemplos de cetoésteres 65 adequados à reacção descrita no Esquema 3 incluem os tiofeno-2-glioxilato de etilo, 2-oxo-4-fenilbutirato de etilo, glioxilato de etil-2-(formilamino)-4-tiazolilo, glioxilato de etil-2-amino-4-tiozolilo, glioxilato de etil-(5-bromotien-2-ilo), glioxilato de etil-3-indolilo, formato de etil-2-metilbenzoílo, formato de etil-3-etilbenzoílo, 4-ciano-2-oxobutirato de etilo, 3-glioxilato de metil-(l-metilindolilo) e semelhantes.

Esquema 4

As quinoxalin-2-onas 3,6-substituidas com a Fórmula (4-4), em que R4 se encontra previamente definido, podem ser produzidas de forma regiosselectiva, de modo a favorecer a substituição na posição 6 começando com a ligação amida de 4-metoxi-2-nitroanilina (4-1) e ácido gloxilico substituído (4-2), para produzir o composto (4-3) . Cria-se a quinoxalin-2-ona 3,6-substituída (4-4) por redução catalítica do nitro do composto (4-3) , seguindo-se condensação na quinoxalin-2-ona 3,6-substituída (4-4). É possível introduzir outros substituintes na (4-4) recorrendo a outras 2-nitroanilinas. Os exemplos de cetoácidos adequados à reacção descrita no Esquema 4 incluem os ácido benzoilfórmico, ácido fenilpirúvico, ácido indol-3-glioxílico, ácido indol-3-pirúvico, ácido nitrofenilpirúvico, ácido (2-furil)-glioxílico e semelhantes. Os exemplos de 2-nitroanilinas adequadas à reacção descrita no Esquema 4 incluem as 4-etoxi-2-nitroanilina, 4-amino-3-nitrobenzotrifluoreto, 4,5-dimeoil- 66 2-nitroanilina, 4-fluoro-2-nitroanilina, 4-cloro-2-nitro-anilina, benzoato de 4-amino-3-nitrometilo, 4-benzoil-2-nitroanilina, 3-bromo-4-metoxi-2-nitroanilina, 3'-amino-4'-metil-2-nitroacetofenona, 5-etoxi-4-fluoro-2-nitroanilina, 4-bromo-2-nitroanilina, 4-(trifluorometoxi)-2-nitroanilina, 4-amino-3-nitrobenzoato de etilo, 4-bromo-2-metil-6-nitroanilina, 4-propoxi-2-nitroanilina, 5-(propiltio)-2-nitroanilina e semelhantes.

Esquema 5

¢4

§4

67 A. Um intermediário-chave, a 3-cloro-lH-quinoxalin-2-ona (5-3), pode ser sintetizado a partir de fenildiaminas com a Fórmula (3-1), como previamente definido, e éster de dietilo do ácido oxálico (5-1), para dar origem à 1,4-di-hidro-quinoxalino-2,3-diona (5-2) sob condições semelhantes, como apresentado no Esquema 3 (consultar Bekerman et al., "J. Heterocycl. Chem." 1992, 29, 129 - 133), a que se segue tratamento com S0C12 (1,37 equiv.) em (1 : 40 de DMF : tolueno) (consultar Loev et al, "J. Med Chem." (1985), 28, 363 - 366 relativamente a mais detalhes). B. A 3-cloro-quinoxalin-2-ona-chave (5-3) é adicionada ao precursor macrociclico (1-6) com as condições de Mitsunobu, sendo a adição por meio de carbonil-oxigénio em vez do nitrogénio esperado na posição 1, para dar origem ao intermediário-chave macrociclico com a Fórmula (5-4). Este intermediário facilita a introdução de diferentes substituintes na posição 3 da quinoxalina.

ACOPLAMENTO DE SUZUKI

Os compostos com a Fórmula (5-5), em que R4 se encontra previamente definido, podem ser sintetizados por meio da reacção de acoplamento de Suzuki com um ácido borónico de arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído em DME, na presença de Pd(PPh3)4 e CS2CO3. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de acoplamento de Suzuki, consultar A. Suzuki, "Pure Appl. Chem." 63, 419 - 422 (1991) e A. R. Martin, Y. Yang, "Acta Chem. Scand." 47, 221 - 230 (1993). Os exemplos de ácidos borónicos adequados ao acoplamento de Suzuki no 68 intermediário-chave macrociclico (5-5) incluem 2-bromotiofeno, ácido fenilborónico, ácido 5-bromotiofeno-3-borónico, ácido 4-cianofenilborónico, ácido 4-trifluorometoxifenilborónico e semelhantes.

REACÇÃO DE SONOGASHIRA

Os compostos com a Fórmula (5-6), em que Ri se encontra previamente definido, podem ser sintetizados por meio da reacção de Sonogashira com o intermediário-chave macrociclico um alcino terminal em acetonitrilo na presença de trietilamina, PdCl2(PPh3)2 e Cul, nos 90°C durante 12 horas. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de Sonogashira, consultar Sonogashira, "Comprehensive Organic Synthesis", Volume 3, Capítulos 2, 4 e Sonogashira, "Synthesis" 1977, 777. Os alcenos terminais adequados à reacção de Sonogashira com o intermediário-chave macrociclico (5-5) incluem etinilbenzeno, 4-ciano- etinilbenzeno, propargilbenzeno e semelhantes.

ACOPLAMENTO DE STILLE

Os compostos com a Fórmula (5-7), em que R4 se encontra previamente definido, podem ser sintetizados pela reacção de acoplamento de Stille com o intermediário-chave macrociclico com a Fórmula (5-4) e arilestananos em dioxano, na presença de Pd(PPh3)4. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de acoplamento de Stille, consultar J. K. Stille, "Angew. Chem. Int." Ed 25, 508 - 524 (1986), M. Pereyre et al., "Tin in Organic Synthesis" (Butterworths, Boston, 1987) pág. 185 - 207 passim, e um artigo acerca de aplicações de síntese in T. N. Mitchell, "Synthesis" 1992, 803 - 815. Os organoestananos adequados 69 ao acoplamento de Stille com o intermediário-chave macrocíclico (5-4) incluem cianeto de tributilestanho, alil-tri-n-butilestanho, 2-tributilestanho-piridina, 2-tri-n-butilestanho-furano, 2-tri-n-butilestanho-tiofeno, 2,3-di-hidron-5-(tri-n-butilestanho)-benzofurano e semelhantes.

Esquema 6

i-1

HO-R„ KjCOj T-eaap. ssafo. ate refluxo 42-24 beras

70

Através do intermediário-chave macrocíclico 3-cloro-quinoxalinilo (5-4), é possível introduzir três classes adicionais de substituintes na posição 3 do anel quinoxalina. Entre os diversos grupos que podem ser introduzidos encontram-se amina monossubstituida, amina dissubstituida, éteres e tioéteres. É possível produzir a quinoxalina amino-substituída (6-1), em que Ri e R4 se encontram previamente definidos, através da adição, a uma solução 0,1 M do intermediário macrocíclico quinoxalinilo (5-4) em 10 mL de DMF, de K2CO3 (2 equiv.) e HNR1R4 (1,2 equiv.), e através de agitação da mistura de reacção resultante à temperatura ambiente durante 5-12 horas. As aminas adequadas a estas condições incluem etilamina, 2-feniletilamina, ciclo-hexilamina, etilmetilamina, diisopropilamina, benziletilamina, 4-pentenilamina, propargilamina e semelhantes.

No caso das aminas em que Ri é hidrogénio e R4 é arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído, será necessário recorrer a um conjunto diferente de condições para se obter o composto (6-1) . A adição de NaH (2 equiv.) e HNR5R6 (1,2 equiv.) a uma solução 0,1 M do intermediário macrocíclico quinoxalinilo (5-4) em THF e a agitação da mistura de reacção resultante durante 5-12 horas dá origem ao composto anilino-substituído (6-1). As aminas adequadas às presentes condições são anilino-4-metoxianilina, 2-amino-piridina e semelhantes.

Consegue-se a introdução de éteres na posição 2 do anel quinoxalina, por meio do tratamento de uma solução 0,1 M do intermediário macrocíclico quinoxalinilo (5-4) em DMF com 71 K2CO3 (2 equiv.) e HOR4 (1,2 equiv.), em que R4 se encontra previamente definido. Depois, é possível agitar a mistura de reacção resultante durante 5-12 horas à temperatura ambiente, para se obter 0 radical éter pretendido na posição 3. Os álcoois adequados a estas condições incluem etanol, propanol, isobutanol, trifluorometanol, fenol, 4-metoxifenol, piridin-3-ol e semelhantes. É possível produzir tioéteres seguindo o mesmo procedimento.

Esquema 7

P

Consegue-se a derivação da porção benzo do anel quinoxalina através da quinoxalina halogeno-substituída com a Fórmula (7-2). É possível produzir a quinoxalina com a Fórmula (7- 72 2) com a fenildiamina bromo-substituida (2~1) com o composto diceto com a Fórmula (3-2), em que W, Z e R3 se encontram previamente definidos, em metanol anidro como previamente detalhado. 0 intermediário (7-3) é produzido sob as condições de Mitsunobu com o precursor macrociclico (1-6) e a quinoxalina bromo-substituida (7-2) . Depois, o intermediário (7-3) pode ser submetido a uma reacção de acoplamento de Suzuki, a reacções de Sonogashira ou a acoplamentos de Stille na posição ocupada por bromo. Ver o texto anterior relativamente a acoplamentos de Suzuki, reacções de Sonogashira e acoplamentos de Stille quanto a mais detalhes. A reacção de Buchwald permite a substituição por aminas, tanto primárias como secundárias, assim como lH-nitrogeno-heterociclos no brometo de arilo. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de Buchwald, consultar J. F. Hartwig, "Angew. Chem. Int." Ed. 37, 2 046 - 2 067 (1998).

DCC

ccc PeO}fAeHN'HCS El^ DCM.fi

Ety<. QCM,

73 É possível produzir o intermediário ácido 2-oxo-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico 3-substituído (8-4) por meio da condensação de 3,4-diaminobenzoato de etilo (8-1) e ácido oxoacético com a Fórmula (8-2), em que R4 se encontra previamente definido, através do método previamente descrito no Esquema 3 (consultar Bekerman et al., "J. Heterocycl. Chem." 1992, 29, 129 - 133 relativamente a mais detalhes). Em seguida, hidrolisa-se o éster de etilo resultante (8-3) com LiOH em MeOH à temperatura ambiente, para dar origem ao intermediário ácido carboxílico (8-4). Depois, é possível transformar o ácido carboxílico (8-4) na cetona substituída (8-6) com a amida de Weinreb (8-5) e posterior tratamento com diversos reagentes de Grignard (consultar Weinreb et al. "Tetrahedron Lett." 1977, 4 171; Weinreb et al, "Synth. Commun." 1982, 12, 989, relativamente a detalhes quanto à produção e à utilização da amida de Weinreb; e consultar B. S. Furniss, A. J. Hannaford, P. W. G Smith, A. R. Tatchell, "Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry", 5.a ed., Longman, 1989). Realiza-se a adição num solvente inerte, geralmente a baixas temperaturas. Os solventes adequados incluem tetra-hidrofurano, éter dietílico, 1,4-dioxano, 1,2-dimetoxietano e hexanos. Em termos preferenciais, o solvente é tetra-hidrofurano ou éter dietílico. Preferencialmente, realiza-se a reacção nos -78°C - 0°C. Em alternativa, é possível empregar o ácido carboxílico (8-4) para produzir diversas amidas com a Fórmula (8-7) , em que Ri e R4 se encontram previamente definidos, da forma descrita em geral no Esquema 8. Todos os diversos compostos quinoxalin-2-ona descritos no Esquema 8 são ainda acoplados ao precursor macrocíclico com as condições de Mitsunobu acima descritas. 74Esquema 9 mt MHj R*

MaOH TA

OJtL ,|LA Η,ΚΝΗ,.Η,Ο 8-1 1-2

>¥«γΎ*γ*4H íH M

HjH R4w» κ 9-4 «/Níí **s $♦

B

Hcr ,NM* ’NH*

+ HO

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IteOH TA ^4 DÍÍSO (COC%

N' "0 H t* H S"í H S-8 *CB. HOAe «* R4<u

É possível produzir outros compostos quinoxalin-2-ona 6-substituídos seguindo os procedimentos apresentados dum modo geral no Esquema 9. A. Redução de 6-nitro e produção de amida É possível produzir a 6-nitro-lH-quinoxalin-2-ona (9-3) do modo previamente descrito a partir do 3,4-diaminonitrobenzeno e do ácido oxoacético com a Fórmula (9-2), em que R4 se encontra previamente descrito. Consegue-se a redução do grupo nitro na posição 6 por meio de Pd/C com Η2ΝΝΗ2·Η20 em MeOH sob refluxo. A amina na posição 6 (9-4) pode depois ser tratada com uma ampla gama de cloretos de ácido para se obter diversas amidas com a Fórmula (9-5) . 75 B. Oxidação do álcool benzílico e aminação redutora É possível produzir a quinoxalin-2-ona com a Fórmula (9-7) através da condensação do álcool 3,4-diaminobenzílico e diversos ácidos oxoacéticos com a Fórmula (9-2), em que R4 se encontra previamente definido, como apresentado nos esquemas anteriores. 0 álcool benzílico resultante (9-7) pode ser depois oxidado sob condições de Swern ou sob quaisquer outras condições de oxidação para se obter o aldeído com a Fórmula (9-8) . Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de Swern, consultar A. J. Mancuso, D.

Swern, "Synthesis" 1981, 165 - 185 passim; T. T. Tidwell, "Org. React." 39, 297 - 572 passim (1990). Relativamente a outras condições de oxidação, consultar B. S. Furniss, A. J. Hannaford, P. W. G. Smith, A. R. Tatchell, "Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry". 5.a ed., Longman, 1989. A posterior aminação redutora com aminas primárias ou secundárias na presença de NaCNBH3 e ácido acético pode dar origem aos compostos com a Fórmula (9-9).

Esquema 10

de quinoxalinilo

Reduz-se os compostos macrocíclicos anteriores, ao tratar uma solução do éster de etilo (7-4) 76 em THF/Me0H/H20 com Li0H»H20 para dar origem ao ácido livre correspondente.

Exemplos

Os compostos e os processos da presente invenção serão melhor compreendidos em ligação com os exemplos que se seguem, cuja função é unicamente ilustrativa.

Exemplo 1. Síntese do precursor peptidico ciclico

IA. Adicionou-se, a uma solução do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la (l,36g, 5 mmoles) e do éster de cis-L-hidroxiprolinometilo disponível no mercado lb (1,0 9g, 6 mmoles) em 15 mL de DMF, DIEA (4 mL, 4 eq.) e HATU (4 g, 2 eq) . O acoplamento é realizado nos 0°C durante 1 hora. Dilui-se a mistura de reacção com 100 mL de EtOAc, a que se segue lavagem com ácido cítrico a 5% 2 x 20 mL, água 2 x 20 mL, NaHCCh 1 M 4 x 20 mL e solução salina 2 x 10 mL, respectivamente. Seca-se a fase orgânica com Na2S04 anidro 77 e a seguir evapora-se, dando origem ao dipéptido lc (1,91 g, 95,8%), que é identificado por HPLC (tempo de retenção = 8,9 min, 30 - 70%, 90% B) , e MS (determinou-se 421,37, M+Na+) . IB. Dissolve-se o dipéptido lc (1,91 g) em 15 mL de dioxano e 15 mL de solução aquosa de LiOH 1 N, e realiza-se a reacção de hidrólise à temperatura ambiente durante 4 horas. Acidula-se a mistura de reacção com ácido cítrico a 5% e extrai-se com 100 mL de EtOAc, a que se segue lavagem com água 2 x 20 mL, NaHC03 1 M 2 x 20 mL e solução salina 2 x 20 mL, respectivamente. Seca-se a fase orgânica com Na2S04 anidro e remove-se em seguida no vácuo, dando origem ao composto de ácido carboxílico livre ld (1,79 g, 97%), que é empregue na síntese da etapa seguinte sem requerer uma maior purificação. IC. Adicionou-se, a uma solução do ácido livre acima obtido (1,77, 4,64 mmoles) em 5 mL de DMF, o éster de etilo do aminoácido D-p-vinilciclopropano le (0,95g, 5 mmoles), DIEA (4 mL, 4 eq.) e HATU (4 g, 2 eq). Realiza-se o acoplamento nos 0°C durante um período de 5 horas. Dilui-se a mistura de reacção com 80 mL de EtOAc, a que se segue lavagem com ácido cítrico a 5% 2 x 20 mL, água 2 x 20 mL, NaHC03 1 M 4 x 20 mL e solução salina 2 x 10 mL, respectivamente. Seca-se a fase orgânica com Na2S04 anidro e evapora-se depois. Purifica-se o resíduo por cromatografia flash em sílica gel, empregando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (5 : 1 -> 3 : 1 -> 1 : 1 -> 1 : 2 -> 1 : 5). Isola-se o tripéptido linear lf na forma de um óleo após remoção dos solventes de eluição (1,59 g, 65,4%), identificado por HPLC (tempo de retenção = 11,43 min) e MS (determinou-se 544,84, M+Na+) . 78 1D. Metátese de fecho de anel (RCM). Desoxigena-se uma solução do tripéptido linear lf (1,51 g, 2,89 mmoles) em 200 mL de DCM seco ao borbulhar N2. O catalisador de primeira geração da Hoveyda (eq. 5% de mol) é em seguida adicionado na forma de um sólido. Sujeita-se a reacção a refluxo sob atmosfera de N2 durante 12 horas. Evapora-se o solvente e purifica-se o residuo por cromatografia flash em silica gel, empregando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (9 : 1 -> 5 : 1 -> 3 : 1 -> 1 : 1 -> : 2 -> 1 : 5) . O precursor peptidico cíclico 1 é isolado na forma de um pó branco, após a remoção dos solventes de eluição (1,24 g, 87%), identificado por HPLC (tempo de retenção = 7,84 min, 30 - 70%, 90% B) , e MS (determinou-se 516,28, M+Na+) . Para mais detalhes relativamente aos métodos de síntese empregues para produzir o precursor peptidico cíclico 1, consultar o WO 00/059929 (2000).

Exemplo 2. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Etapa 2A.

1

2b 79 A uma mistura arrefecida do precursor macrociclico 1, da 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona 2a (1,1 equiv.) e de trifenilfosfina (2 equiv.) em THF, adicionou-se DIAD (2 equiv.) por gotas nos 0°C. Manteve-se a mistura resultante nos 0°C durante 15 min antes de ser aquecida para a temperatura ambiente. Passadas 18 horas, concentrou-se a mistura sob vácuo e purificou-se o resíduo por cromatografia, eluindo com 60% de acetato de etilo-hexano para originar o 2b na forma de um óleo claro (35 mg, 99%). MS (determinado): 704,4 (M+H). H1-NMR [CDC13, δ (ppm) ] : 8.6 (d, 1H) , 8.0 (d, 1H) , 7.8 (d, 1H), 7.6 (m, 2H), 7.5 (d, 2H), 7.2 (t, 1H), 7.0 (brs, 1H), 6.0 (brt, 1H), 5.5 (m, 1H), 5.3 (brd, 1H), 5.2 (t, 1H), 5.0 (m. 1H), 4.6 (brt, 1H) , 4.1-4.3 (m, 3H) , 3.1 (m, 1H) , 5.3 (m, 1H), 2.1-2.3 (m, 2H), 1.3 (brs, 9H), 1.2 (t, 3H).

Etapa 2B.

Agitou-se uma solução do composto 2b e hidróxido de lítio (10 equiv.) em THF/Me0H/H20 (2 : 1 : 0,5) à temperatura ambiente durante 20 horas. Evaporou-se os solventes em excesso no vácuo, diluiu-se o resíduo resultante com água, a que se seguiu acidulação para um pH -5. Extraiu-se a mistura 2 vezes com acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram lavados uma vez com solução 80 salina, foram secos (MgSCU), filtrados e concentrados no vácuo, para dar origem a um resíduo oleico, o qual foi purificado por cromatografia de coluna, eluindo com 2 - 10% de metanol-clorofórmio (87%) . MS (determinado): 676,3 1H-NMR [CD3OD, δ (ppm) ] : 8.14 (1H) , 7.96 (1H) , 7.86 (1H) , 7.65 (1H), 7.62 (1H), 7.59 (1H), 7.19 (1H), 6.07 (1H), 5.53 (1H), 5.52 (1H), 4.81 (1H), 4.75 (1H) , 4.23 (1H) , 4.12 (1H), 2.65-2.7 (2H), 2.52 (1 H), 2.21 (1H), 1.97 (1H), 1.80 (1H), 1.62 (2 H) , 1.54 (1H) , 1.47 (2H) , 1.44 (2H) , 1.41 (2 H), 1.09 (9H) . 13C-NMR [CD3OD, δ (ppm)]: 176.2, 174.1, 173.4, 156.0, 152.9, 141.0, 139.6, 138.9, 138.6, 131.5, 130.6, 130.0, 129.3, 128.1, 127.8, 127.1, 126.6, 78.6, 76.1, 59.8, 53.3, 52.3, 41.4, 34.5, 32.3, 30.0, 27.5, 27.4, 27.2 (3C), 26.1, 22.6, 22.4.

Exemplo 3. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, Z = 2-(formamido-tiazol-4-ilo, j =3, m=s = leR5 = R6 = hidrogénio.

Etapa 3A.

81

Aqueceu-se a 4-metoxi-benzeno-l,2-diamina disponível no mercado 3a (3,6 mmoles) e o éster de etilo do ácido (2-formilamino-tiazol-4-il)-oxoacético 3b (1 equiv.) em etanol (40 mL) até refluxo durante 5 horas. Depois de arrefecida a mistura para a temperatura ambiente, evaporou-se o etanol em excesso no vácuo, e sujeitou-se o resíduo a grande vácuo durante 2 horas, de modo a obter o composto 3c na forma de um pó amarelo esverdeado. MS (determinado): 303,1 (M+H). H1-NMR [DMSO-d, δ (ppm) ] : 8.7 (s, 1H) , 8.6 (m, 2H) , 7.2 - 7.3 (m, 4H), 3.8 (s, 3H).

Etapa 3B.

A uma mistura arrefecida de 1, da quinoxalin-2-ona 3c (1,1 equiv.), de trifenilfosfina (2 equiv.) em THF, adicionou-se DIAD (2 equiv.) por gotas nos 0°C. Manteve-se a mistura resultante nos 0°C durante 15 min antes de se aquecer para a temperatura ambiente. Passadas 18 horas, concentrou-se a mistura no vácuo e purificou-se o resíduo por cromatografia eluindo com 80 - 100% de acetato de etilo-hexano para originar o 3d na forma de um óleo amarelo. MS (determinado): 778,5 (M+H). 82

Etapa 3C.

Agitou-se uma solução de 3d e hidróxido de litio (10 equiv.) em THF/Me0H/H20 (2 : 1 : 0,5) à temperatura ambiente durante 20 horas. Evaporou-se o solvente em excesso no vácuo, diluiu-se o residuo com água e depois acidulou-se para um pH de ~5. Extraiu-se a mistura 2 vezes com acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram lavados uma vez com solução salina, foram secos (MgS04) , filtrados e concentrados no vácuo, para originar um residuo sólido que foi purificado por HPLC. MS (determinado): 750,4 (M+H). MS (determinado): 722,4 (M+H).

Exemplo 4. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = etilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = 1¾ = hidrogénio.

Preparou-se o composto de titulo com 3-etil-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio de tratamento com LiOH, como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 5. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L - ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente. Z = fenilo, j=3m=s=l, eR5=R6 hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com 3-fenil-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu 83 redução do éster de etilo por meio de tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 6. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 4-metoxifenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com 3-(4-metoxifenil)-1H-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu reduções do éster de etilo por meio de tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 7. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 4-etoxifenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com 3-(4-etoxifenil)-1H-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 8. Os compostos com a Fórmula I, em que A = tBOC, G - oh, L - ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente. Z = 5-bromotiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com 3-(5-bromo-tiofen-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 84 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 9. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-pirid-3-iletilenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com 3-[2-(pirid-3-il)-vinil]-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu redução do éster de etilo por meio de tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 10. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 3,4-dimetoxi-fenilo, 1 = 3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio.

Prepara-se 0 composto de titulo com 3- [2-(3,4-dimetoxi-fenil)-vinil]-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu redução do éster de etilo por meio de tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 11. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-tiofen-2-il-etilenilo, j =3, m=s=leR5=R6= hidrogénio. 85

Prepara-se o composto de título com a 3-[2-tiofen-2-il-vinil]-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 12. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = indol-3-ilo, j = m, m = s = 1, e R5 = R{ = hidrogénio.

Preparação da 3-(lH-indol-3-il)-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo pelo aquecimento da fenil-1,2-diamina disponível no mercado (3,6 mmoles) e ácido indol-3-glioxílico (1 equiv.) em etanol (40 mL) até refluxo durante 5 horas. Depois de arrefecida a mistura para a temperatura ambiente, evapora-se o etanol em excesso no vácuo e coloca-se o resíduo sob grande vácuo durante 2 horas, para dar origem à 3-(lH-indol-3-il)-1H-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 3- (lH-indol-3-il)-1H-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que seguiu redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 13. Os compostos com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos 86 de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = lff-indol-3-ilmetilo, i = 3, m = s = leR5 = R6 = hidrogénio.

Preparação da 3-(lH-indol-3-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a fenil-1,2-diamina e o ácido indol-3-pirúvico por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 3-(1H-indol-3-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 3-(lff-indol-3-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 14. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = furan-2-ilo, j =3, m=s = leR5 = R6 = hidrogénio.

Preparação da 3-(furan-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a fenil-1,2-diamina e o ácido furan-2-ilglioxílico por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 3-(furan-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona. 87

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 3- (furan-2-il)-1H-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 15. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente Z = 1H-benzoimidazol-2-ilo, j=3, m=s=leR5=R6 hidrogénio.

Preparação da 3-(lH-benzoimidazol-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a fenil-1,2-diamina e o ácido (ltf-benzoimidazol-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 3- (líí-benzoimidazol-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 3-(lH-benzoimidazol-2-il)-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 16. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente. X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z -lfl-imidazol-2-ilmetilo, j = 3, m=s=leR5=R6= hidrogénio. 88

Preparação da 3-(lH-imidazol-2-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a fenil-1,2-diamina e o ácido (lfí-imidazol-2-ilmetil) -oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 3-(lH-imidazol-2-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 3-(lH-imidazol-2-ilmetil)-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 17. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OEt, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = cloro, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio.

Preparação da 3-cloro-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a fenil-1,2-diamina e o ácido oxálico por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 1,4-di-hidro-quinoxalino-2,3-diona. Depois, trata-se a 1,4-di-hidro-quinoxalino-2,3-diona com SOCI2 em 2,5% de DMF : tolueno, aquece-se para os 130°C, agita-se durante 2 h, filtra-se e concentra-se para dar origem à 3-cloro-lH-quinoxalin-2-ona na forma bruta. 89

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 3-cloro-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2.

Exemplo 18. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-3-ilo, j =3, m = s = 1 e R5 = = hidrogénio.

Coloca-se uma mistura do composto de título do Exemplo 17 (0,055 mmoles), do ácido 3-tiofenoborónico (0,28 mmoles), de carbonato de césio (0,22 mmoles), de mono-hidrato de fluoreto de potássio (0,44 mmoles) num balão de fundo redondo e lava-se duas vezes com nitrogénio. A esta mistura adiciona-se DME e lava-se de novo a solução resultante com nitrogénio antes de se adicionar tetrakis-(trifenilfosfina) de paládio (10% de mol). Após mais duas lavagens com nitrogénio, aquece-se a mistura até refluxo durante 20 horas. Depois, arrefece-se a mistura e dilui-se a mesma em seguida com água e extrai-se três vezes com EtOAc. As camadas de EtOAc combinadas são lavadas uma vez com solução salina, são secas (MgS04) , filtradas e concentradas no vácuo. Purifica-se o resíduo por cromatografia de coluna, eluindo com 20 - 4 0% de EtOAc-hexano para dar origem ao precursor do éster de etilo do composto de título. Em seguida, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2, para se obter o composto de título.

Exemplo 19. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de 90 carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2-pirid-3-ilacetilenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo pela reacção de uma solução desgaseifiçada do composto de titulo do Exemplo 17 (4 mmoles), de 2-pirid-3-ilacetileno (4 mmoles), e de 1 mL de trietilamina e 10 mL de acetonitrilo com PdCl2 (PPh3)2 (0,2 mmoles) e Cul (0,1 mmol). Desgaseifica-se a mistura de reacção resultante e agita-se durante 5 minutos à temperatura ambiente. Depois, aquece-se a reacção para os 90 °C e agita-se durante 12 horas. Subsequentemente, concentra-se a mistura de reacção no vácuo e purifica-se por coluna de silica para dar origem ao éster de etilo do composto de titulo. Em seguida, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2, para se obter o composto de titulo.

Exemplo 20. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilo, j = 3, m=s=leR5=F6= hidrogénio. A uma solução desgaseificada do composto de titulo do Exemplo 17 (1 mmol) e de 2,3-di-hidrobenzofuran-5-il- estanano (2 mmoles), adiciona-se Pd(PPh3)4 (10% de mol). Desgaseifica-se a mistura com nitrogénio duas vezes mais e aquece-se para os 100°C durante 3 horas. Concentra-se a mistura arrefecida no vácuo e purifica-se o residuo por cromatografia de coluna (30% de EtOAc/hexano), para dar origem ao éster de etilo do composto de titulo. Hidrolisa- 91 se em seguida o éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2, para dar origem ao composto de titulo.

Exemplo 21. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -NH-. Z = propargilo, j = 3, m=s=leRs=R6= hidrogénio.

Produz-se o composto de titulo ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de titulo do Exemplo 17 em DMF com propargilamina (1,2 equiv.) na presença de K2CO3 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Depois, extrai-se a mistura de reacção resultante com EtOAc, lava-se com NaHC03, água e solução salina, e concentra-se o extracto lavado no vácuo. Em seguida, purifica-se o resíduo por cromatografia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Hidrolisa-se depois o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH, obtendo-se o composto de título.

Exemplo 22. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L - ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -N(etil)-, Z = benzilo, j =3, m = s = 1 e R5 = Re = hidrogénio.

Produz-se 0 composto de título ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de título do Exemplo 17 em DMF com benziletilamina (1,2 equiv.) na presença de K2C03 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Em seguida, extrai-se a mistura de reacção resultante com EtOAc, lava-se com NaHC03, água e solução salina, e concentra-se o extracto lavado no vácuo. Depois, purifica- 92 se o resíduo por cromatografia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Hidrolisa-se depois o éster de etilo passando ao ácido livre, por meio do tratamento com LiOH para dar origem ao composto de título.

Exemplo 23. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -NH-, Z = pirid-3-ilo, j =3, m = s = 1 e R5 = Rç = hidrogénio.

Produz-se o composto de título ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de título do Exemplo 17 em DMF com a 3-aminopiridina (1,2 equiv.) na presença de K2CO3 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Em seguida, extrai-se a mistura de reacçâo resultante com EtOAc, lava-se com NaHC03, água e solução salina, e concentra-se o extracto lavado no vácuo. Purifica-se depois o resíduo por cromatografia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Depois, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre, por meio do tratamento com LiOH para se obter o composto de título.

Exemplo 24. O composto com a Fórmula I, em que A - tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tetrazolilo, j =3, m=s=leR5=R6= hidrogénio.

Produz-se o composto de título ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de título do Exemplo 17 em DMF com tetrazolo (1,2 equiv.) na presença de K2CO3 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Extrai-se depois a mistura de reacção resultante com EtOAc, lava-se com NaHC03, água e solução salina, e concentra-se o extracto 93 lavado no vácuo. Purifica-se em seguida o resíduo por cromatografia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Depois, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH, para se obter o composto de título.

Exemplo 25. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = morfolina, j = 3, m = s = 1, e Rs = Rç = hidrogénio.

Produz-se o composto de título ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de título do Exemplo 17 em DMF com morfolina (1,2 equiv.) na presença de K2CO3 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Extrai-se depois a mistura de reacção resultante com EtOAc, lava-se com NaHCC>3; água e solução salina, e concentra-se o extracto lavado no vácuo. Purifica-se depois o resíduo por cromatograf ia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Depois, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH, para se obter o composto de título.

Exemplo 26. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -O-, Z = tiofen-3-il-metilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Produz-se o composto de título ao fazer reagir uma solução 0,1 M do composto de título do Exemplo 17 em DMF com tiofen-3-ilmetanol (1,2 equiv.) na presença de K2CO3 (2 equiv.), à temperatura ambiente durante 5-12 horas. Depois extrai-se a mistura de reacção resultante com EtOAc, 94 lava-se com NaHC03, água e solução salina, e concentra-se o extracto lavado no vácuo. Purifica-se em seguida o resíduo por cromatografia em sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Hidrolisa-se depois o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH, para se obter o composto de título.

Exemplo 27. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z - tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R.6 = hidrogénio.

Preparação da 7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-metoxi-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2. 95

Exemplo 28. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, z - tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5= hidrogénio.

Preparação da 6-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se o precursor da 2-nitroamida do presente exemplo com a 4-metoxi-2-nitroanilina (1 equiv.) e o ácido 2-(tiofen-2-il)-oxoacético (1 equiv.) em DMF, na presença de DCC a temperatura ambiente até aos 80°C, para dar origem ao precursor 2-nitroamida (N-(4-metoxi-2-nitro-fenil)-2-oxo-2-tiofen-2-il-acetamida). O precursor 2-nitroamida é sujeito a condições de hidrogenação catalítica (H2/Pd/C em MeOH) produzindo a amina, a que se seguiu fecho do anel para formar a 6-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 29. O composto com a Fórmula I, em que A - TBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 96

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação da 6,7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4,5-dimetoxi-benzeno-l,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6,7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6,7-metoxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 30. O composto com a Fórmula 1, em que A - tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente. Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio. 97

Preparação da 6-ciano-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-ciano-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-ciano-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-ciano-3-tiofen-2-il-lH-quinoxaHn-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 31. 0 composto com a Fórmula 1, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

R.6 = hidrogénio.

Preparação da 6-tetrazol-5-il-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente Exemplo com a 4-ciano-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para 98 dar origem à 6-ciano-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona. Cria-se depois o composto ciano com NaN3 (5 equiv.), Et3N (3 equiv.), em xilenos num tubo vedado e aquecido para os 140°C, e agita-se durante 12 horas para dar origem à 6-tetrazol-5-il-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona após extracção e purificação.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com 6-tetrazol-5-il-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 32. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação da 2-tiofen-2-il-4H-pirido-[2,3-b]-pirazin-3-ona

Prepara-se a pirazin-3-ona do presente exemplo com 2,3-diaminopiridina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 2-tiofen-2-il-4H-pirido-[2,3—b]-pirazin-3-ona . 99

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 2-tiofen-2-il-4H-pirido-[2,3-b]-pirazin-3-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 33. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leRs= hidrogénio.

Preparação da 7-tiofen-2-il-5H-l,3-dioxa-5,8-diaza-ciclopenta[b]naftalen-6-ona

Prepara-se a naftalen-6-ona do presente exemplo com a benzo-[1,3]-dioxol-5,6-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 7-tiofen-2-il-5H-l,3-dioxa-5,8-diaza-ciclopenta[b]naftalen-6-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 7-tiofen-2-il-5H-l,3-dioxa-5,8-diaza-ciclopenta[b]naftalen-6-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas 100 no Exemplo 2, a que se seguiu redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 34. O composto com a Fórmula I, em que A - tHOC, G = OH L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação da 3-tiofen-2-il-lH-benzo[g]quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a naftileno-2,3-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 3-tiofen-2-il-lH-benzo[g]quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 3-tiofen-2-il-lH-benzo[g]quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 35. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 101

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R.6 = hidrogénio.

Preparação da 6-metanossulfonil-3-tiofen-2-il-lH- quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-metanossulfonil-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-metanossulfonil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-metanossulfonil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 36. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 0,

102 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R$ = hidrogénio.

Preparação do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-sulfónico

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com o ácido 3,4-diaminobenzenossulfónico e com o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem ao ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-sulfónico.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com o ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-sulfónico e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 37. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio. 103

Preparação da 6-hidroximetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com (3,4— diamino-fenil)-metanol e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-hidroximetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-hidroximetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 38. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente. Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = P.6 = hidrogénio.

Preparação da 6-piperidin-l-ilmetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se primeiro a quinoxalin-2-ona do presente exemplo através de oxidação de Swern com DMSO e (C0C1)2 da 6-hidroximetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona, para dar origem ao 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6- 104 carbaldeído. Em seguida, o composto 6-carboxaldeído é sujeito a aminação redutora com piperidina em acetonitrilo na presença de NaCNBH3 e ácido acético para dar origem, após um acabamento aquoso e purificação, à 6-piperidin-l-ilmetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-piperidin-l-ilmetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 39. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

O

W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j=3m=s=l, e R5 = R-6 = hidrogénio.

Preparação da 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-nitro-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona. 105

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 40. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação da 6-amino-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo ao reduzir a 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona do Exemplo 39 com H2NNH2.H2O na presença de Pd/C em MeOH sob refluxo.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 6-amino-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2. 106

Exemplo 41. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R-6 = hidrogénio.

Preparação da N-(2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalin-6-il)-2-fenil-acetamida

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo ao tratar a 6-amino-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona do Exemplo 40 com cloreto do ácido fenetílico para dar origem, após acabamento e purificação, à N-(2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalin-6-il)-2-fenil-acetamida.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a N-(2-oxo-3-tiofen-2-il-1,2-di-hidro-quinoxalin-6-il)-2-fenil-acetamida e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 42. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente. X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 107

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio.

Preparação da 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-nitro-benzeno-1,2-diamina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 6-nitro-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 43. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente. Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 -R6 = hidrogénio. 108

Preparação da 6-hidroxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com 3,4-diaminofenol (que é preparado ao tratar 3,4-dinitrofenol com H2NNH2 ·Η20, Pd/C sujeito a refluxo em MeOH) e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-hidroxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-hidroxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 44. O composto com a Fórmula 1, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R-6 hidrogénio.

Preparação da 6-benziloxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo ao tratar a 6-hidroxi-3-tiofen-2-ml-lH-quinoxalin-2-ona do Exemplo 43 109 em DMF com bromometilbenzeno na presença de K2CO3 a uma temperatura entre os 25°C e os 80°C. A mistura de reacção resultante dá origem, após acabamento e purificação, à 6-benziloxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-benziloxi-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu a redução do éster de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 45. O composto com a Fórmula I, em que A = TBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

O

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3m=s=l, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação do éster de etilo do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-1,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com o éster de etilo do ácido 3,4-diamino-benzóico e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem ao éster de etilo do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico. 110

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de título com o éster de etilo do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se sequiu a redução dos ésteres de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 46. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R.6 = hidrogénio.

Preparação da 6-fenilacetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Etapa 40a

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com o éster de etilo do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico do Exemplo 45, por meio de hidrólise do éster de etilo de acordo com o procedimento do Exemplo 2, para dar origem ao ácido carboxilico. 111

Etapa 40b

Depois, dissolve-se o ácido carboxilico em DMF na presença de DCC e de trietilamina e adiciona-se, à mistura de reacção resultante, (MeO)NHMe para formar a amida de Weinreb. A amida de Weinreb é depois tratada com brometo de benzil-magnésio em THF nos -75°C para dar origem, após extracção e purificação, à 6-fenilacetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-fenilacetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se seguiu redução dos ésteres de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 47. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio. 112

Preparação da benzilamida do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxilico

Etapa 41a

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a benzilamida do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxílico do Exemplo 45, por meio da hidrólise do éster de etilo de acordo com o procedimento do Exemplo 2, para dar origem ao ácido carboxilico.

Etapa 41b

Depois, dissolve-se o ácido carboxilico em DMF na presença de DCC e de trietilamina e adiciona-se, à mistura de reacção resultante, benzilamina para dar origem, após extracção e purificação, à benzilamida do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidroquinoxalino-6-carboxilico.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a benzilamida do ácido 2-oxo-3-tiofen-2-il-l,2-di-hidro-quinoxalino-6-carboxilico e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se segue redução dos ésteres de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 48. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados 113 113

λ W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Preparação da 6-fenetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 6-fenilacetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona do Exemplo 46, por meio do tratamento com H2/Pd-C na presença de ácido acético, para produzir o composto 6-fenetilo.

Acoplamento de Mitsunobu a macrociclo

Prepara-se o composto de título com a 6-fenetil-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de título do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, a que se sequiu a redução dos ésteres de etilo por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 49. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OEt, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio. 114

Preparação da 6-bromo-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona

Prepara-se a quinoxalin-2-ona do presente exemplo com a 4-bromo-2-nitroanilina e o ácido (tiofen-2-il)-oxoacético por meio do método descrito no Exemplo 12, para dar origem à 6-bromo-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona.

Acoplamento de Mitsunobu no macrociclo

Prepara-se o composto de titulo com a 6-bromo-3-tiofen-2-il-lH-quinoxalin-2-ona e o composto de titulo do Exemplo 1 sob as condições de Mitsunobu descritas no Exemplo 2, para dar origem ao composto de titulo.

Exemplo 50. O composto com a Fórmula I, em que A - tBOC, G = OH, L ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio. A uma solução desgaseificada do composto de titulo do Exemplo 49 (1 mmol) e tiazol-2-il-estanano (2 mmoles), adiciona-se Pd(PPh3)4 (10% de mol). Desgaseifica-se a mistura com nitrogénio duas vezes mais e aquece-se para os 100°C durante 3 horas. Concentra-se a mistura arrefecida no vácuo e purifica-se o resíduo por cromatografia de coluna 115 (30% de EtOAc/hexano) para produzir o éster de etilo do composto de título. O éster de etilo é depois hidrolisado pelo tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2, para dar origem ao composto de título.

Exemplo 51. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rg = hidrogénio.

Uma mistura do composto de título do Exemplo 49 (0,055 mmoles), do ácido fenilborónico (0,28 mmoles), de carbonato de césio (0,22 mmoles), de mono-hidrato de fluoreto de potássio (0,44 mmoles) é deitada num balão de fundo redondo e é lavada duas vezes com nitrogénio. A esta mistura adiciona-se DME e a solução resultante é de novo lavada com nitrogénio antes de se adicionar tetrakis-(trifenilfosfina) de paládio (10% de mol) . Depois de mais duas lavagens com nitrogénio, aquece-se a mistura até refluxo durante 20 horas. Depois, arrefece-se a mistura, dilui-se com água e extrai-se três vezes com EtOAc. Lava-se uma vez as camadas de EtOAc combinadas com solução salina, seca-se (MgS04), filtra-se e concentra-se no vácuo. Purifica-se o resíduo por cromatografia de coluna, eluindo com 20 - 40% de EtOAc-hexano para dar origem ao precursor de éster de etilo do composto de título. Em seguida, hidrolisa-se o éster de etilo passando ao ácido livre, por meio do tratamento com 116

LiOH como apresentado no Exemplo 2, para se obter o composto de título.

Exemplo 52. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = r6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pela reacção de uma solução desgaseifiçada do composto de título do Exemplo 49 (4 mmoles), de 2-pirid-3-il-acetileno (4 mmoles), e de 1 mL de trietilamina e 10 mL de acetonitrilo com PdCl2(PPh3)2 (0,2 mmoles)) e Cul (0,1 mmol). Desgaseifica-se a mistura de reacção resultante e agita-se durante 5 minutos à temperatura ambiente. Depois, aquece-se a reacção para os 90 °C e agita-se durante 12 horas. Subsequentemente, concentra-se a mistura de reacção no vácuo e purifica-se por coluna de sílica para dar origem ao éster de etilo do composto de título. Hidrolisa-se depois o éster de etilo passando ao ácido livre por meio do tratamento com LiOH como apresentado no Exemplo 2, para se obter o composto de título.

Exemplo 53. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, 117

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pela adição, a uma mistura seca do composto de título do Exemplo 49 (0,068 mmoles), imidazol (2 eq.), Cs2C03 (3 eq.), Xantphos (30% de mol) e Pd(OAc)2, de dioxano sob nitrogénio. Depois desgaseifica-se a mistura de reacção e agita-se a mesma nos 75°C durante 18 horas. Depois de terminada a reacção, monitorizada por TLC, dilui-se a mistura de reacção com DCM, filtra-se e concentra-se no vácuo. Purifica-se depois a mistura de reacção através de cromatografia de coluna de sílica com 5% de MeOH/CHCl3, para dar origem ao éster de etilo do composto de titulo. Em seguida, hidrolisa-se o éster de etilo com as condições apresentadas no Exemplo 2, para dar origem ao composto de título.

Exemplo 54. O composto com a Fórmula 1, em que A - - (C=0) -O-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio. 54a - Desprotecção amina.

Dissolve-se 0,041 mmoles do composto de titulo do Exemplo 2 em 4 mL de uma solução 4 M de HC1 em dioxano e agita-se 118 durante 1 hora. Concentra-se o resíduo de reacção 54a no vácuo. 54b - Reagente cloroformato

Prepara-se o reagente cloroformato 54b ao dissolver 0,045 mmoles de ciclopentanol em THF (3 mL) e ao adicionar 0,09 mmoles) de fosgénio em tolueno (20%) . Agita-se a mistura de reacção resultante à temperatura ambiente durante 2 horas e remove-se o solvente no vácuo. Adiciona-se DCM ao resíduo e concentra-se depois até ao estado seco duas vezes no vácuo, dado origem ao reagente cloroformato 54b. 54c - Produção de carbamato

Prepara-se o carbamato de título ao dissolver o resíduo 54a em 1 mL de THF, ao adicionar 0,045 mmoles de TEA, e ao arrefecer a mistura de reacção resultante para os 0°C. A esta mistura de reacção nos 0°C, adiciona-se o reagente cloroformato 54b em 3 mL de THF. Faz-se reagir a mistura de reacção resultante durante 2 horas nos 0°C, extrai-se com EtOAc, lava-se com bicarbonato de sódio 1 M, água e solução salina, seca-se com MgSCL, e concentra-se no vácuo até ao estado seco. Purifica-se o composto bruto por coluna de sílica e hidrolisa-se em seguida o éster de etilo pelo procedimento apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 55. O composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0) - O-R1, em que R1 = ciclobutilo, G = = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio. Prepara-se 0 composto de 119 título pelo método descrito no Exemplo 54 com o composto de título do Exemplo 2 e ciclobutanol.

Exemplo 56. 0 composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0) -Q-R1, em que R1 = ciclo-hexilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 hidrogénio. Prepara-se o composto de título pelo método descrito no Exemplo 54 com o composto de título do Exemplo 2 e ciclo-hexanol.

Exemplo 57. 0 composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que R1 =

G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pelo método descrito no Exemplo 54 com o composto de título do Exemplo 2 e (R) -3-hidroxitetra-hidrofurano.

Exemplo 58. 0 composto com a Fórmula I, em que A = - (c=0)-0-R1, em que R1 =

120 G = OH, L = ausente X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pelo método descrito no Exemplo 54 com o composto de título do Exemplo 2 e (S) —3— hidroxitetra-hidrofurano.

Exemplo 59. O composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-O-R1, em que R1 =

G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pelo método descrito no Exemplo 54 com o composto de título do Exemplo 2 e

Exemplo 60. 0 composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)- R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, x e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eRi=R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com o composto de título do Exemplo 2 em 4 mL de uma solução 4 M de HCl em dioxano e 121 agita-se a mistura de reacção durante 1 hora. Concentra-se o resíduo de reacção no vácuo. Adiciona-se a este resíduo 4 mL de THF e 0,045 mmoles de TEA, arrefece-se a mistura para os 0°C, à qual se adiciona 0,045 mmoles de cloreto do ácido ciclopentílico. Agita-se a mistura de reacção resultante durante 2 horas nos 0°C. Extrai-se depois a mistura de reacção com EtOAc, lava-se com bicarbonato de sódio 1 M, água e solução salina, seca-se com MgS04 e concentra-se até ao estado seco no vácuo. Purifica-se o composto bruto por meio de coluna de sílica e hidrolisa-se depois o éster de etilo pelo procedimento apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 61. O composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)~ NH-R1, em que R1 = ciclopentilo G = OH, L = ausente X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rç = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com o composto de título do Exemplo 2 em 4 mL de uma solução 4 M de HCl em dioxano e agita-se durante 1 hora. Concentra-se o resíduo de reacção resultante no vácuo, dissolve-se em 4 mL de THF e arrefece-se para os 0°C. À solução nos 0°C adiciona-se 0,045 mmoles de isocianato de ciclopentilo e agita-se a mistura de reacção resultante à temperatura ambiente durante 4 horas. Extrai-se depois a solução com EtOAc, lava-se com HCl a 1%, água e solução salina, seca-se com MgS04, e concentra-se no vácuo até ao estado seco. Purifica-se o composto bruto por meio de coluna de sílica e hidrolisa-se em seguida o éster de etilo pelo procedimento apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 62. O composto com a Fórmula I, em que A = ~(C=S)~ NH-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y 122 são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, i = 3, m =s=l, eR5=R6= hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com o composto de titulo do Exemplo 2 em 4 mL de uma solução 4 M de HC1 em dioxano e agita-se durante 1 hora. Concentra-se o resíduo de reacção resultante no vácuo, dissolve-se em 4 mL de THF e arrefece-se para os 0°C. À solução nos 0°C adiciona-se 0,045 mmoles de isotiocianato de ciclopentilo e agita-se a mistura de reacção resultante à temperatura ambiente durante 4 horas. Extrai-se depois a solução com EtOAc, lava-se com HC1 a 1%, água e solução salina, seca-se com MgS04, e concentra-se no vácuo até ao estado seco. Purifica-se o composto bruto por coluna de sílica e hidrolisa-se em seguida o éster de etilo pelo procedimento apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 63. O composto com a Fórmula I, em gue A = -S(0)2-R1, em gue R1 = ciclopentilo G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a gue estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- •ilo, j = 3, m =s=leR5=R6= hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com o composto de título do Exemplo 2 em 4 mL de uma solução 4 M de HC1 em dioxano e agita-se durante 1 hora. Ao resíduo de reacção concentrado resultante, dissolvido em 4 mL de THF, adiciona-se 0,045 mmoles de TEA e arrefece-se para os 0°C. À solução nos 0°C adiciona-se 0,045 mmoles de cloreto de ciclopentilsulfonilo e agita-se a mistura de reacção resultante nos 0°C durante 2 horas. Extrai-se depois a solução com EtOAc, lava-se com bicarbonato de sódio 1 M, água e solução salina, seca-se com MgS04, e concentra-se no vácuo até ao estado seco. 123

Purifica-se o composto bruto por coluna de silica e hidrolisa-se em seguida o éster de etilo pelo procedimento apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 64. 0 composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -O-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z - tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e Rs = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título pela adição, a uma solução do composto de título do Exemplo 54 e do álcool fenetílico 64a em 0,5 mL de DCM, de 1,2 eq. de PyBrOP, 4 eq. de DIEA e uma quantidade catalítica de DMAP nos 0°C. Agita-se a mistura de reacção resultante durante 1 hora nos 0°C e aquece-se depois a mesma para a temperatura ambiente num período de 4 - 12 horas. Purifica-se a mistura de reacção através de cromatografia flash em sílica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (9 : 1 -> 5 : 1 -> 3 : 1 -> 1 : 1), para dar origem ao composto de título éster de fenetilo isolado 64b. É possível produzir outros ésteres recorrendo aos mesmos procedimentos.

Exemplo 65. O composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0) -O-R1, R1 = ciclopentilo, G = -NH-fenetilo, L = ausente, X e 124 Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5 = R.6 = hidrogénio. 124

Prepara-se o composto de titulo pela adição, a uma solução do composto de titulo do Exemplo 54 e da fenetilamina 65a (0,05 mL) em 0,5 mL de DMF, de EDC (1,2 eg.) e DIEA (4 eg.) nos 0°C. Agita-se a mistura de reacção resultante durante 1 hora. Depois, aquece-se a reacção para a temperatura ambiente durante um periodo de 4 - 12 horas. Purifica-se a mistura de reacção por cromatografia flash em sílica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (9 : 1 -> 5 : 1 -> 3 : 1 -> 1 : 1), para dar origem ao composto de título fenetilamida 65b. É possível produzir outras amidas recorrendo ao mesmo procedimento.

Exemplo 66. O composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = -NHS (0) 2~fenetilo L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3. m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio. 125

Prepara-se o composto de título ao adicionar, a uma solução do composto de título do Exemplo 54 e da β-toluenossulfonamida 66a (10 mg) em 0,5 mL de DCM, 1,2 eq. de PyBrOP, 4 eq. de DIEA e uma quantidade catalítica de DMAP nos 0°C. Agita-se a mistura de reacção resultante durante 1 hora e deixa-se a mesma aquecer para a temperatura ambiente durante um período de 4 - 12 horas. Purifica-se a mistura de reacção por cromatografia flash em sílica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (9 : 1 -> 5 : 1 -> 3 : 1 -> 1 : 1), para dar origem ao composto de título sulfonamida 66b. É possível produzir outras sulfonamidas seguindo o mesmo procedimento.

Exemplo 67. O composto com a Fórmula I, em que A = - (c=0) - 0 1 ** R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-0H, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a oue estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio. 126

Prepara-se o composto de título ao adicionar, a uma solução do composto de título do Exemplo 54 em 0,5 mL de DMF, EDC (1,2 eq.) e DIEA (4 eq.) nos °0 C. Agita-se a mistura de reacção resultante durante 1 hora. Subsequentemente, aquece-se a reacção para a temperatura ambiente durante um período de 4 - 12 horas. Purifica-se a mistura de reacção por cromatografia flash em sílica gel para dar origem à hidroxiamida. Trata-se depois a hidroxiamida com DIBAL-H nos -78°C em THF durante 2 horas. Depois dilui-se a mistura de reacção com 8 mL de EtOAc, lava-se com água e solução salina, seca-se com Na2SC>4, e concentra-se no vácuo para dar origem ao aldeído 67a. A uma solução do aldeído 67a em 0,5 mL de THF, adiciona-se o a-hidroxi-a-metil-propionitrilo (0,1 mL) e uma quantidade catalítica de TFA nos 0°C. Aquece-se a mistura de reacção resultante dos 0°C para a temperatura ambiente durante um período de 4 - 12 127 horas, a que se seguiu hidrólise com ácido hidroclórico concentrado em dioxano. Extrai-se em seguida a reacção com EtOAc, e lava-se com água e solução salina para dar origem ao composto α-hidroxi 67b na sua forma bruta. 0 composto bruto 67b é submetido a uma oxidação de Dess-Martin em THF (0,5 mL), de que resulta o composto α-carbonilo 67c na forma bruta. O 67c bruto é purificado por cromatografia flash em silica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como fase de eluição (9:1-»5:1-»3:1 -> 1 : 1), para dar origem ao composto de titulo o cetoácido isolado 67c.

Exemplo 68. O composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-0-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- ilo, i = 3, . m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com o composto de titulo cetoácido do Exemplo 67 e fenetanol de acordo com o procedimento apresentado no Exemplo 64.

Exemplo 69. 0 composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = - (C=0)-NH-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2- CO II |—1 0 1 -1 -H . m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

Prepara-se o composto de titulo com o composto de titulo cetoácido do Exemplo 67 e fenetilamina de acordo com o procedimento apresentado no Exemplo 65. 128

Exemplo 70. O composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = - (C=0) -NH-S (0) 2-benzilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z - tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 Rç = hidrogénio.

Prepara-se o composto de título com o composto de título cetoácido do Exemplo 67 e α-toluenossulfonamida de acordo com o procedimento apresentado no Exemplo 66.

Exemplo 71. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = - (C=0)CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio.

O O

Síntese do ácido (25)-N-Boc-amino-5-oxo-non-8-enóico 71A. Prepara-se o aminoácido acima mencionado pela adição, a uma solução do éster de monoalilo do ácido malónico em THF seco, sob N2 nos -78°C, de n-Bu2Mg por gotas durante um 129 período de 5 min. Agita-se depois a suspensão resultante à temperatura ambiente durante 1 hora e evapora-se até ao estado seco. 0 sal sólido de Mg 71b é seco sob vácuo.

Mistura-se primeiro o derivado do ácido glutâmico 71a com 1,1'-carbonildiimidazol em THF anidro e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora para activar o radical ácido livre. Em seguida, deita-se o derivado do ácido glutâmico activado através de uma cânula numa solução do sal de Mg 49b e agita-se a mistura de reacção obtida à temperatura ambiente durante 16 horas. Depois, dilui-se a mistura com acetato de etilo e lava-se a solução orgânica com HC1 0,5 N (nos 0°C) e solução salina, seca-se e evapora-se. A resolução do resíduo obtido é realizada por cromatografia em sílica com um sistema de eluentes de acetato de etilo a 35 - 4 0% em hexanos, dando origem ao diéster 71c. 71B. A uma solução agitada de tetrakis-(trifenilfosfina)-Pd (0) em DMF seca, adiciona-se o diéster em DMF. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Evapora-se a DMF a baixa pressão e dilui-se o resíduo com EtOAc. Lava-se a solução de EtOAc com HC1 0,5 N nos 0°C, solução salina, seca-se e evapora-se. Sujeita-se o resíduo a cromatografia em sílica gel utilizando EtOAc a 15% - 20% em hexano como eluente, para dar origem ao intermediário éster de metilo.

Depois, dilui-se o intermediário éster de metilo com THF e água, adiciona-se Li0H*H20 e agita-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 25 horas, monitorizando-se a terminação da hidrólise por TLC. Concentra-se a mistura de reacção sob vácuo para remover a maior parte do THF e 130 dilui-se mais com cloreto de metileno. A solução resultante é lavada com HC1 1 N, é seca com Na2S04 e concentrada sob vácuo. Para remover pequenas impurezas e excesso de B0C2O, purifica-se o produto bruto por cromatografia flash utilizando um gradiente de solvente de 100% de hexano -> 100% de EtOAc como eluente. Obtém-se o ácido (2S)-N-Boc-amino-5-oxo-non-8-enóico 71d. Relativamente a mais detalhes acerca da sintese anterior do aminoácido, consultar T. Tsuda et al., "J. Am. Chem. Soc.", 1980, 102, 6 381 - 6 384 e o WO 00/59929. 71C. Sintese do precursor peptidico cíclico modificado mesilato O precursor peptidico cíclico modificado mesilato é preparado seguindo a via de síntese detalhada no Exemplo 1, empregando o ácido (2S)-N-Boc-amino-5-oxo-non-8-enóico 71d em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, seguindo-se a transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptidico cíclico modificado mesilato formado na 71C e a 3- (tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 72. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -CH(CH3)CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s = l, e R5 = Re = hidrogénio. 131

Síntese do ácido (25,5R)-N-Boc-2-amino-5-metil-non-8-enóico (72h). 72A. A um 2-acetamidomalonato de etilo sólido 72b, adiciona-se (R)-(+)-citronelal 72a numa solução de piridina num minuto. Arrefece-se a solução resultante num banho nos 10°C e adiciona-se anidrido acético em 4 min. Agita-se a solução resultante durante 3 horas à temperatura ambiente e adiciona-se outra porção do 2-acetamidomalonato de etilo 72a. Agita-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante mais 11 horas. Depois, adiciona-se gelo e agita-se a solução durante 1,5 horas, dilui-se em seguida a mistura com 250 mL de água e extrai-se com duas porções de éter. Lava-se a fase orgânica com HC1 IN, NaHC03 sat., seca-se com Na2S04, concentra-se e purifica-se por cromatografia flash (40% de EtOAc/hexano), obtendo-se o composto 72c. 72B. A uma solução desgaseifiçada de 72c em etanol seco, adiciona-se (S, S)-Et-DUPHOS Rh(COD)OTf. Sujeita-se a mistura a 30 psi de hidrogénio e agita-se a mesma num agitador de Parr durante 2 horas. Evapora-se a mistura 132 resultante até ao estado seco para obter o composto bruto 72d, que é empregue na etapa seguinte sem purificação. 72C. Dissolve-se o composto 72d numa mistura de tBuOH/acetona/EbO (1 : 1 : 1) e o mesmo é colocado num banho gélido (0°C). Adiciona-se consecutivamente NMMO e 0s04 e agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 4 horas. Remove-se a maior parte da acetona por evaporação sob vácuo e depois extrai-se a mistura com acetato de etilo. Lava-se ainda a camada orgânica com água e solução salina, seca-se com MgS04 anidro e evapora-se até ao estado seco. Obtém-se o diol 72e com um elevado nivel de pureza por cromatografia de coluna flash, empregando etanol a 1% em acetato de etilo como eluente. 72D. A uma solução do diol 72e em THF/H20 (1 : 1) nos 0°C, adiciona-se NaI04 e agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Remove-se depois a maior parte do solvente de THF por evaporação no vácuo e extrai-se a mistura restante com EtOAc. Lava-se ainda as camadas orgânicas combinadas com solução aquosa de ácido citrico a 5%, NaHC03 a 5% aq. e solução salina, a fase orgânica é depois seca com MgS04 e evaporada até ao estado seco no vácuo. 0 intermediário aldeido 72f é empregue na etapa seguinte na sua forma bruta. 72E. A uma solução de Ph3PCH3Br em tolueno anidro, adiciona-se KHMDS formando uma suspensão que é agitada à temperatura ambiente durante 30 min sob N2. Após agitação, arrefece-se a suspensão para os 0°C, adiciona-se uma solução do intermediário aldeido 72f em THF, aquece-se a mistura para a temperatura ambiente e agita-se durante 1 hora. Evapora-se a maior parte do THF sob vácuo, adiciona- 133 se EtOAc à mistura e lava-se a fase orgânica com água, NaHC03 a 5% aq. e solução salina. Depois, seca-se a fase orgânica com MgS04 e evapora-se até o estado seco no vácuo. Isola-se o composto puro 72g após purificação por cromatografia flash em sílica gel, empregando hexano : EtOAc (3 : 2) como eluente. 72F. A uma solução do 72g bruto em THF, adiciona-se B0C2O e DMAP e aquece-se a mistura de reacção até refluxo durante 2,5 horas. Em seguida, evapora-se a maior parte do THF, dilui-se a mistura bruta com cloreto de metileno e lava-se com HC1 1 N para remover DMAP. Extrai-se ainda a camada orgânica com NaHC03 aq. saturado, seca-se com Na2S04 anidro e concentra-se no vácuo. Dilui-se depois o produto bruto com THF e água, adiciona-se LiOH*H20 e agita-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 25 horas, monitorizando-se a terminação da hidrólise por TLC. Concentra-se a mistura de reacção no vácuo para remover a maior parte do THF e dilui-se ainda a mesma com cloreto de metileno. Lava-se a solução resultante com HC1 1 N, seca-se com Na2S04 anidro e concentra-se no vácuo. Com vista a remover pequenas impurezas e o excesso de B0C2O, purifica-se o produto bruto por cromatografia flash, empregando um gradiente de solvente de 100% de hexano -> 100% de EtOAc como eluente. Obtém-se o ácido (2S,5R)-N-Boc-2-amino-5-metil-non-8-enóico 72h. Relativamente a mais detalhes quanto à anterior síntese do aminoácido consultar o WO 00/59929. Síntese do precursor peptídico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptídico cíclico modificado mesilato utilizando a via de síntese detalhada no Exemplo 134 1, empregando o ácido ((2S,5R)-N-Boc-2-amino-5-metil-non-8-enóico 72h em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de titulo com o precursor peptidico cíclico modificado formado na 72G e a 3- (tiofen-2-il)-1H-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 73. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -0-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente. Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e 1¾ = hidrogénio. OH 0A/oh-NH1BOC 73a OH 0A^,

NHtBoc 73b

A/0 NHtBoc 73c

NHtBoc 73d Síntese da Af-Boc-O-alil- (L)-treonina (73d) 73A. Dissolve-se parcialmente a Boc-(L)-treonina 73a em cloreto de metileno/metanol nos 0°C. Adiciona-se uma solução de diazometano em éter dietílico até ao amarelo, indicando a presença de diazometano. Após evaporação dos solventes, obtém-se o éster de metilo 73b. 73B. Dissolve-se o intermediário 73b em éter dietílico 135 anidro, adiciona-se Ag20 e filtros moleculares 4Â acabados de activar. Por fim, adiciona-se iodeto de alilo à mistura de reacção e agita-se sob refluxo. Adiciona-se duas porções adicionais de iodeto de alilo à mistura de reacção passado um período de 20 horas e de 30 horas, e continua-se a agitar durante um total de 36 horas. Filtra-se depois a mistura através de celite e purifica-se por cromatografia flash em sílica gel, empregando EtOAc/hexano (1 : 4) como eluente, para dar origem ao composto 73c. 73C. Dissolve-se o composto 73c numa mistura de THF/MeOH/íbO (2 : 1 : 1) e adiciona-se LiOH*H20. Agita-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas e acidula-se a mesma com HC1 1 N para um valor de pH de ~3, antes de se remover os solventes no vácuo. Obtém-se o composto bruto resultante 73d. Relativamente a mais detalhes quanto à síntese precedente, consultar o WO00/59929. 73D. Síntese do precursor peptídico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptídico cíclico modificado mesilato com a via de síntese detalhada no Exemplo 1, empregando a N-Boc-O-alil-(L)-treonina 73d em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu a transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico modificado mesilato formado na 73D e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2. 136

Exemplo 74. o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -s_ -, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z — tiofen-2-ilo. j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e Re = hidrogénio. 0 ibochnyAoh A 0 ίΒοεΗΝ,^^χ 0 B tBocHN^^A s HO^CH, 74a O^CH, 74b H,C^S A, 9 c

HjC^S- 74d

HjC S-74* Síntese do ácido (25, 35)-iV-Boc-2-amino-3-(mercaptoalil) - butanóico (74e). 74A. Dissolve-se o composto 74a em piridina e arrefece-se a solução para os 0°C num banho gélido, adiciona-se cloreto de tosilo em pequenas porções e reparte-se a mistura de reacção entre éter dietílico e H20. Lava-se ainda a camada de éter com HCl 0,2 N e solução salina, seca-se com MgS04 anidro, filtra-se e concentra-se no vácuo até ao estado seco. A purificação do material bruto por cromatografia flash em sílica gel, empregando hexano/EtOAc (gradiente de uma relação de 8 : 2 a 7 : 3) como eluente, leva ao isolamento do derivado de tosilo 74b.

tBocHN

V

OH

(BocHN Λ 137 74Β. A uma solução do derivado de tosilo 74b em DMF anidra, adiciona-se tioacetato de potássio e agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 24 horas. Depois, evapora-se a maior parte da DMF no vácuo e reparte-se a mistura restante entre EtOAc e H2O. Volta-se a extrair a camada aquosa com EtOAc, lava-se as camadas orgânicas combinadas com solução salina, seca-se com MgS04 anidro e evapora-se até o estado seco. A purificação do material bruto por cromatografia flash em silica gel, empregando hexano/EtOAc (relação de 4 : 1) como eluente, dá origem ao tioéster 74c. 74C. A uma solução do tioéster 74c, adiciona-se H20/Et0H (relação de 3 : 5) e solução aquosa de NaOH 0,2 M, e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois, adiciona-se iodeto de alilo e continua-se com a agitação à temperatura ambiente durante mais 30 min. Concentra-se a mistura de reacção para metade do seu volume original e extrai-se depois com EtOAc. Acidula-se a camada aquosa para um pH -3 com HC1 0,5 N frio e aquoso e volta-se a extrair com EtOAc. Lava-se as camadas orgânicas combinadas com solução salina, seca-se com MgS04 anidro e evapora-se até ao estado seco no vácuo. A mistura de reacção bruta contém pelo menos quatro produtos; todos os produtos são isolados após cromatografia flash em silica gel, empregando hexano/EtOAc (gradiente de 9 : 1 a 3 : 1) . O produto pretendido 74d é o composto menos polar. 74D. Mistura-se uma solução do composto 74d em MeOH/íbO (3 : 1) com NaOH aquoso (0,3 N) , durante 24 horas à temperatura ambiente e durante 1 hora nos 40°C. Acidula-se a mistura de reacção com HC1 0,5 N frio aquoso, remove-se 0 MeOH no vácuo e extrai-se a mistura aquosa restante com EtOAc. Seca-se a fase orgânica com MgS04 e evapora-se até 138 ao estado seco de modo a obter o composto 74e. Relativamente a mais detalhes quanto à síntese do aminoácido 74e, consultar o WO 00/59929. 74E. Síntese do precursor peptídico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptídico cíclico modificado mesilato com a via de síntese detalhada no Exemplo 1, empregando o ácido (2S, 3S) -IV-Boc-2-amino-3- (mercaptoalil) -butanóico 74e em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico modificado mesilato formado na 74E e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 75. O composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = —S (O) -, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, z -tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e R6 = hidrogénio.

Produção do aminoácido modificado

O

tBocHNVrA()H ^S-y o ^ (75al 139 75Α. Prepara-se ο aminoácido modificado, ao dissolver o metaperiodato de sódio (1,1 eq.) em água e arrefece-se para os 0°C num banho gélido, a que se segue a adição por gotas de uma solução do composto 75d em dioxano. Agita-se a mistura de reacção resultante durante uma hora nos 0°C e durante 4 horas nos 40°C. Concentra-se a mistura de reacção, adiciona-se água e extrai-se a mistura duas vezes com cloreto de metileno. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com água, solução salina, seca-se com MgS04 anidro e concentra-se no vácuo. Reduz-se depois o éster de metilo por meio do método apresentado no Exemplo 74D, para se obter o aminoácido modificado 75a. Relativamente a mais detalhes quanto à oxidação de enxofre, consultar S. A. Burrage et al., "Tett. Lett.", 1998, 39, 2 831 - 2 834. 75B. Sintese do precursor peptidico ciclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptidico ciclico modificado mesilato seguindo a via de sintese detalhada no Exemplo 1, empregando o aminoácido modificado 75a em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptidico cíclico modificado mesilato formado na 75B e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 76. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -S(0)2, X e Y são, em conjunto com os átomos de 140 carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e 1¾ = hidrogénio.

Produção do aminoácido modificado

O

1 0

76A. Prepara-se o aminoácido modificado ao dissolver o metaperiodato de sódio (1,1 eq.) em água e arrefece-se para os 0°C num banho gélido, a que se segue a adição por gotas de uma solução do composto 76d em dioxano. Agita-se a mistura de reacção resultante durante uma hora nos 0°C e durante 4 horas nos 40°C. Concentra-se a mistura de reacção, adiciona-se água e extrai-se a mistura duas vezes com cloreto de metileno. Lava-se as camadas orgânicas combinadas com água, solução salina, seca-se com MgS04 anidro e concentra-se no vácuo. Reduz-se depois o éster de metilo por meio do método apresentado no Exemplo 74D para se obter o aminoácido modificado 76a. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção de oxidação de enxofre, consultar S. A. Burrage et al., "Tett. Lett.", 1998, 39, 2 831 - 2 834. 76B. Sintese do precursor peptidico ciclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptidico ciclico modificado mesilato recorrendo à via de sintese detalhada no Exemplo 1, empregando o aminoácido modificado 76a em vez do ácido 141

Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu a transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico modificado mesilato produzido na 76B e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo pelo método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 77. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -SCH2CH2-, X — Y — tiofen-3-ilo, Z = hidrogénio, j = 0, m = s = 1, e R5 = R6 = CH3.

SH

77a

A

77b 77A. Síntese do ácido (5)-N-Boc-2-amino-3-metil-3-(1-mercapto-4-butenil)-butanóico (77b)

Dissolve-se a L-penicilamina 77a em DMF/DMSO (5 : 1), em seguida adiciona-se 4-bromopenteno e Cs0H*H20 à mistura e continua-se com a agitação durante mais 12 horas. Depois, remove-se a DMF no vácuo, dilui-se a mistura restante com HC1 0,5 N (nos 0°C) para ajustar o valor de pH para ~4 - 5 e extrai-se com 2 porções de EtOAc. Lava-se a fase orgânica com solução salina (2 x) , seca-se com MgS04 e evapora-se até ao estado seco para dar origem ao ácido carboxílico bruto 77a. 142 77Β. Síntese do percursor peptídico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptídico cíclico modificado mesilato seguindo a via de síntese detalhada no Exemplo 1, empregando o aminoácido modificado 77a em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico modificado mesilato produzido na 77B e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 78. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = CF2CH2, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = 1¾ = hidrogénio.

Síntese do ácido (2S)-N-Boc-amino-5-difluoro-non-8-enóico (78b) . 78A. A uma solução do composto cetona 71d (0,30 g, 1 mmol) em 5 mL de DCM, adiciona-se DAST (trifluoreto de 143 dietilamino-enxofre, 0,2 g, 1,2 eq) . Mantém-se a reacção à temperatura ambiente durante um período de 2 - 3 dias. Evapora-se o solvente e purifica-se o resíduo por cromatografia flash em sílica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como eluente (9 : 1 -> 5 : 1 -> 3 : 1^1 : 1), dando origem ao éster de metilo isolado 78a. Relativamente a mais detalhes quanto à síntese anterior, consultar Tius, Marcus A et al., "Tetrahedron", 1993, 49, 16; 3 291 - 3 304. 78B. Dissolve-se o éster de metilo 78a em THF/Me0H/H20 (2 : 1 : 1) e adiciona-se Li0H*H20.

Agita-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas e acidula-se depois com HCl 1 N para um pH - 3 antes de se remover os solventes no vácuo, para dar origem ao ácido (2S)-N-Boc-amino-5-difluoro-non-8-enóico bruto 78b. 78C. Síntese do precursor peptídico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptídico cíclico modificado mesilato seguindo a via de síntese detalhada no Exemplo 1, empregando o ácido (2S)-N-Boc-amino-5-difluoro-non-8-enóico bruto 78b em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-noneóico la, a que se seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico modificado mesilato produzido na 78C e a 3- (tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2. 144

Exemplo 79. 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ~CHFCH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, Z = tiofen-2-ilg, j =3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio.

F 79e Síntese do ácido (2S)-N-Boc-amino-5-fluoro-non-8-enóico (79c) . 79A. A uma solução do composto cetona 71d em 5 mL de metanol, adiciona-se NaBH4 (2 : 2 eq). Agita-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante um período de 2 -6 horas, e depois extingue-se com cloreto de amónio 1 M e extrai-se com EtOAc (30 mL). Evapora-se o solvente e obtém-se o composto hidroxi bruto 79a. 79B. Dissolve-se o composto hidroxi 79a em 5 mL de DCM, a que se adiciona DAST (0,2 g, 1,2 eq) e agita-se nos -45°C durante 1 hora. Depois, aquece-se a mistura de reacção para a temperatura ambiente e agita-se durante um período de 2 -3 dias. Evapora-se o solvente e purifica-se o resíduo por cromatografia flash em sílica gel utilizando diferentes relações de hexanos : EtOAc como eluente (9 : 1 -* 5 : 1 -> 3 145 : 1 -> 1 : 1), dando origem ao composto de monoflúor isolado éster de metilo 79b. Relativamente a mais detalhes quanto à reacção anterior, consultar Buist, Peter H et al., "Tetrahedron Lett.", 1987, 28, 3 891 - 3 894. 79C. Dissolve-se o éster de metilo 79b em THF/Me0H/H20 (2 : 1 : 1) e adiciona-se LiOH*H20. Agita-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas, e acidula-se depois com HC1 1 N para um pH -3 antes de se remover os solventes no vácuo, para dar origem ao ácido (2S)-N-Boc-amino-5-difluoro-non-8-enóico bruto 79c. 79D. Síntese do precursor peptidico cíclico modificado mesilato

Prepara-se o precursor peptidico cíclico modificado mesilato utilizando a via de síntese detalhada no Exemplo 1, recorrendo ao ácido (2S)-N-Boc-amino-5-monofluoro-non-8-enóico 79b bruto em vez do ácido Boc-L-2-amino-8-nonenóico la, a que se seguiu transformação no mesilato correspondente por meio do método descrito no Exemplo 2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptidico cíclico modificado mesilato formado na 79C e a 3- (tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo pelo método apresentado no Exemplo 2.

Exemplo 80. O composto com a Fórmula II, em que A = tBOC, G - OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente. Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 hidrogénio. 146 80Α. Prepara-se o precursor peptídico cíclico saturado pela redução catalítica do precursor peptídico cíclico do Exemplo 1 com Pd/C em MeOH na presença de H2.

Prepara-se o composto de título com o precursor peptídico cíclico saturado mesilato formado na 80A e a 3-(tiofen-2-il)-lH-quinoxilin-2-ona com as condições de Mitsunobu apresentadas no Exemplo 2, a que se seguiu hidrólise do éster de etilo por meio do método apresentado no Exemplo 2.

Os compostos da presente invenção apresentam propriedades de inibição potentes contra a protease NS3 do HCV. Os exemplos que se seguem descrevem os ensaios em que se testa os compostos da presente invenção quanto a efeitos anti-HCV.

Exemplo 81. Ensaio da enzima protease NS3/NS4a

Testa-se a actividade e a inibição da protease do HCV utilizando um substrato fluorogénico extinto internamente. Um grupo DABCYL e um grupo EDANS são ligados às extremidades opostas de um péptido curto. Alivia-se a extinção da fluorescência do EDANS pelo grupo DABCYL aquando da clivagem proteolítica. Mediu-se a fluorescência com um Molecular Devices Fluoromax (ou equivalente), com uma excitação com um comprimento de onda de 355 nm e um comprimento de onda de emissão de 485 nm.

Realiza-se o ensaio em placas de 96 poços brancas da Corning, as "Corning white half-area 96-well plates" (VWR 29444-312 [Corning 3693]) com a protease NS3 do HCV de comprimento total lb titulada com o cofactor NS4A (concentração enzimática final de 1 a 15 nM) . 0 tampão de 147 ensaio é complementado com o cofactor da NS4A 10 μΜ Pep 4A (Anaspec 25336 ou interno, MW 1424.8). Emprega-se o RET SI (Ac-Asp-Glu-Asp (EDANS)-Glu-Glu-Abu-[COO]Ala-Ser-Lys- (DABCYL)-NH2, AnaSpec 22991, MW 1548.6) como substrato peptidico fluorogénico. O tampão de ensaio continha Hepes 50 mM com um pH de 7,5, NaCl 30 mM e BME 10 mM. Segue-se a reacção enzimática durante um período de 30 minutos à temperatura ambiente na ausência e na presença de inibidores.

Os inibidores peptídicos HCV Inh 1 (Anaspec 25345, MW 796.8) Ac-Asp-Glu-Met-Glu-Glu-Cys-OH, [-20°C] e HCV Inh 2 (Anaspec 25346, MW 913.1) Ac-Asp-Glu-Dif-Cha-Cys-OH foram empregues como compostos de referência.

Calculou-se os valores IC50 com XLFit na ActivityBase (IDBS) recorrendo à equação 205: y=A+((B-A)/( 1 +((C/x)AD))>.

Exemplo 82. Ensaio de replicão com base celular

Quantificação do ARN de replicão do HCV em linhas celulares (ensaio com base em células do HCV)

Faz-se a cultura de linhas celulares, inclusive Huh-11-7 ou Huh 9-13, contendo replicões do HCV (Lohmann, et al "Science" 285 : 110 - 113, 1999) com 5 x 103 células/poço em placas de 96 poços e alimenta-se com meio de cultura contendo DMEM (glucose elevada), 10% de soro fetal de vitelo, penicilina-estreptomicina e aminoácidos não essenciais. As células são incubadas numa incubadora com CO2 a 5% nos 37°C. Ao fim do período de incubação, extrai- 148 se o ARN total e o mesmo é purificado a partir de células empregando o Qiagen Rneasy 96 Kit (referência de catálogo 74182) . De modo a amplificar o ARN do HCV para ser possível detectar material suficiente por uma sonda específica do HCV (em baixo), os primers específicos do HCV (em baixo) medeiam tanto a transcrição reversa do ARN do HCV como a amplificação do ADNc por reacção em cadeia de polimerase (PCR) empregando o TaqMan One-Step RT-PCR Master Mix Kit (Applied Biosystems, referência de catálogo 4309169). As sequências nucleotídicas dos primers da RT-PCR, que se encontram localizadas na região NS5B do genoma do HCV, são as seguintes:

Primer forward do HCV "RBNS5bfor" 5' GCTGCGGCCTGTCGAGCT:

Primer reverse do HCV "RBNS5Brev":

5'CAAGGTCGTCTCCGCATAC

Conseguiu-se a detecção do produto da RT-PCR empregando o sistema Applied Biosystems (ABI) Prism 7700 Sequence Detection System (SDS) , que detecta a fluorescência emitida quando a sonda, que está marcada com um corante repórter de fluorescência e um corante de extinção, é processada durante a reacção PCR. Mede-se o aumento na quantidade de fluorescência durante cada ciclo de PCR e este reflecte a quantidade crescente do produto de RT-PCR. Especificamente, a quantificação tem por base o ciclo limiar onde a representação da amplificação passa um determinado limiar de fluorescência. A comparação dos ciclos limiares da amostra com um padrão conhecido proporciona uma medida altamente sensível da concentração modelo relativa em diferentes amostras (ABI User Bulletin #2 11 de Dezembro de 1997) . Os dados são analisados com o programa ABI SDS, versão 1.7. É possível converter a concentração modelo 149 relativa em números de cópias do ARN, ao empregar uma curva padrão de padrões do ARN do HCV com o número de cópias conhecido (ABI User Bulletin #2 11 de Dezembro de 1997).

Detectou-se o produto da RT-PCR empregando a seguinte sonda marcada: 5' FAM-CGAAGCTCCAGGACTGCACGATGCT-TAMRA FAM = corante repórter fluorescente. TAMRA = corante de extinção.

Realiza-se a reacção de RT nos 48°C durante 30 minutos, seguindo-se PCR. Os parâmetros do variador térmico empregues na reacção PCR no ABI Prism 7700 Sequence Detection System foram: um ciclo nos 95°C, 10 minutos seguindo-se 35 ciclos, incluindo cada um uma incubação nos 95°C durante 15 segundos e uma segunda incubação para os 60°C durante 1 minuto.

Para normalizar os dados relativamente a uma molécula de controlo interna dentro do ARN celular, realiza-se a RT-PCR na gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) do ARN mensageiro celular. O número de cópias da GAPDH é muito estável nas linhas celulares empregues. Realiza-se a RT-PCR da GAPDH precisamente na mesma amostra exacta de ARN de que se determina o número de cópias do HCV. Os primers e as sondas da GAPDH, assim como os padrões com que se determina o número de cópias, estão contidos no ABI Pre-Developed TaqMan Assay Kit (referência de catálogo 4310884E) . A relação de ARN de GAPDH/HCV é empregue para calcular a actividade dos compostos avaliados para inibição da replicação do ARN do HCV. 150

Actividade dos compostos como inibidores da replicação do HCV (ensaio de base celular) no replicão contendo linhas celulares Huh-7

Determinou-se o efeito de um composto antivirico especifico nos niveis do ARN de replicão do HCV em células Huh-11-7 ou 9-13, ao comparar a quantidade de ARN do HCV normalizado com a GAPDH (por exemplo, a relação de HCV/GAPDH), nas células expostas ao composto versus as células expostas a 0% de inibição e os controlos com uma inibição de 100%. Especificamente, fez-se a cultura das células com 5 x 103 células/poço numa placa de 96 poços e incubou-se as mesmas com: 1) meios de cultura contendo DMSO a 1% (controlo com inibição de 0%), 2) 100 unidades internacionais, UI/mL de interferão-alfa 2b em meios de cultura/DMSO a 1% ou 3) meios de cultura/DMSO a 1% contendo uma concentração fixa do composto. Em seguida, incubou-se placas de 96 poços como acima descritas nos 37°C durante 3 dias (ensaio de rastreio primário) ou 4 dias (determinação de IC50). Determinou-se a inibição percentual como: % de inibição = [10(M(S-C2)/Cl-C2))]x100 em que S = relação do número de cópias do ARN do HCV/número de cópias do ARN da GAPDH na amostra;

Cl = a relação do número de cópias do ARN do HCV/número de cópias do ARN da GAPDH no controlo com 0% de inibição (meios de cultura/DMSO a 1%); e C2 = a relação do número de cópias do ARN do HCV/número de cópias do ARN da GAPDH no controlo com 100% de inibição (100 Ul/mL do interferão-alfa 2b). 151 A curva de resposta à dose do inibidor foi gerada pela adição do composto em diluições em série triplas em três logs a poços, começando pela concentração mais elevada de um composto especifico nos 10 uM e terminando com a concentração mais baixa de 0,01 uM. Outras séries de diluições (1 uM para 0,001 uM por exemplo) foram realizadas se o valor IC50 não se encontrasse na alcance linear da curva. Determinou-se o IC50 com base no programa IDBS Activity Base, utilizando o "XL Fit" do Microsoft Excel, em que A = valor de inibição de 100% (100 UI/mL do interferão-alfa 2b), B = valor de controlo de inibição de 0% (meios de cultura/DMSO a 1%) e C = ponto médio da curva como definido por C = (B - A/2) + A. Os valores A, B e C são expressos como a relação de ARN do HCV/ARN da GAPDH, como determinado para cada amostra em cada poço de uma placa de 96 poços, como acima descrito. Para cada placa, utilizou-se a média de 4 poços para definir os valores de inibição de 100% e de 0%.

Lisboa, 2 de Fevereiro de 2010

Claims (12)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto com a Fórmula I ou II:

(I) ou (II) A é seleccionado de forma independente de hidrogénio; -(C-O)-O-Ri, -(C=0)-R2, -C (=0) -NH-R2, -C(=S)-NH-R2 OU -s (0) 2—U-2; G é seleccionado de forma independente de -OH, -0-(Ci-Ci2-alquilo) , -NHS(0)2-Ri, -(C=0)-R2,; -(C=0)-0-Ri ou - (C=0) -NH-R2; L está ausente ou é seleccionado de forma independente de -S-, -SCH2-, -SCH2-, -CH2-, -S(0)2-, -S(0)2CH2CH2-, -S (0) -, — s (o) ch2ch2-, -o-, -och2-, -och2ch2-, -(C=0)-CH2- , -CH (CH3) CH2-, -CFHCHz- ou -CF2CH2-; X e Y formam, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, um radical ciclico seleccionado dentre arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; W está ausente ou é seleccionado de forma independente de -o-, -s-, -NH-, -C(0)NRi- ou -NRi~; 2 Z é seleccionado de forma independente de hidrogénio; -CN, -SCN, -NCO, -NCS, -NHM2, -N3, halogéneo, -R4, -C3-Ci2-cicloalquilo, -C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo substituído e -NH-N=CH (Ri) ; cada Ri é seleccionado de forma independente de hidrogénio, Ci-C6-alquilo, Ci-C6-alquilo substituído, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcenilo substituído, C2-C6- alcinilo, C2-C6-alcinilo substituído, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilo substituído; cada R2 é seleccionado de forma independente de hidrogénio, Ci-C6-alquilo, C2-C6-alquilo substituído, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcenilo substituído, C2-C6- alcinilo, C2-C6-Ci-C6-alquilo substituído, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcenilo substituído, C2-C6-alcinilo, C2-C6-alcinilo substituído, C3-Ci2-cicloalquilo, C3-Ci2-cicloalquilo substituído, alquilamina, dialquilamina, arilamina, diarilamina, arilo, arilo substituído, arilalquilo, arilalquilo substituído, heteroarilo, heteroarilo substituído, heteroarilalquilo, heteroarilalquilo substituído, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilo substituído; cada R4 é seleccionado de forma independente de: (i) -Ci-C6-alquilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, 3 arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; (ii) -C2-C6-alcenilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; ou (iii) -C2-C6_alcinilo contendo 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos seleccionados de O, S ou N, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes seleccionados de halogéneo, arilo, arilo substituído, heteroarilo ou heteroarilo substituído; R5 e R6 são seleccionados de forma independente um do outro de hidrogénio ou metilo; j = o, 1, 2, 3 ou 4; m = 0, 1 ou 2; e s = 0, 1 ou 2.

2. O composto da reivindicação 1, tendo o composto a Fórmula III:

(III) 4 em que R7 e R8 são seleccionados de forma independente de R4 como definido na reivindicação 1. 3. 0 composto da reivindicação 1, em que o composto tem a Fórmula IV:

em que R7 e R8 são seleccionados de forma independente de R4 como definido na reivindicação 1.

4. Um composto de acordo com uma das reivindicações 1 -3, em que W está ausente e Z é tiofenilo.

5. Um composto de acordo com uma das reivindicações 1 -3, em que W é -CH=CH- e Z é tiofenilo.

6. Um composto de acordo com a reivindicação 1, que é seleccionado dentre: o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; 5 o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 2-(formamido)-tiazol-4-ilo, j = 3, Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = etilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rè = o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = fenilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 4-metoxifenilo, j = 3, m = s = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 4-etoxifenilo, j = 3, m = s = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 5-bromotiofen-2-ilo, j = 3, m = s hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 2-pirid-3-il-etilenilo, j = 3, m = hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z m = s = 1, e R5 = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z : hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z = hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 1, e R5 = R6 = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 1, e R5 = R6 = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z = 1, e R5 = Rô = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z s = 1, e R5 = R« = 6 o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 3,4-dimetoxi-fenilo, j = 3, m = s hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 2-tiofen-2-il-etilenilo, j = 3, m = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = indol-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = lH-indol-3-il-metilo, j = 3, m = : hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = furan-2-ilo, j = 3, m = s = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = lH-benzoimidazol-2-ilo, j = 3, m = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z = 1, e R5 = Rè = = tBOC, G = OH, L com os átomos de w está ausente, Z = s = 1, e R5 = Re = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z = R6 hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 3 = 1, e R5 = Re = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 1, e R5 = R6 = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z s = 1, e R5 = Re = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 7 = lH-imidazol-2-ilmetilo, j = 3, m = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A L = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = cloro, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = tiofen-3-ilo, j = 3, m = s = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 2-pirid-3-il-acetilenilo, j = 3, m = = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = 2, 3-di-hidrobenzofuran-5-ilo, j = ; = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo propargilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = F o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo, = benzilo, j =3, m = s = 1, e R5 = Rê o composto com a Fórmula I, em que A = ausente, X e Y são, em conjunto carbono a que estão ligados, fenilo pirid-3-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = s = 1, e R5 = Re = = tBOC, G = OEt, com os átomos de W está ausente, Z hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z 1, e R5 = R6 = = tBOC, G = OH, L com os átomos de W está ausente, Z = s = 1, e R5 = Rô = tBOC, G = OH, L com os átomos de w está ausente, z 3, m = s = 1, eRs = tBOC, G = OH, L com os átomos de , w = -NH-, Z = = hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de W = -N(etilo)-, Z = hidrogénio; = tBOC, G = OH, L com os átomos de , w = -NH-, Z = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tetrazolilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rõ = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, z = morfolina, j =3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W = -0-, Z = tiofen-3-il-metilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; 9 o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m = s = 1 e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de 10 carbono a que estão ligados

t W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que está ligados, 11

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, MO

9 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R.6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

12 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de 13 carbono a que estão ligados,

a W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

* W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s = leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, O

» 14 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j=3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que a = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

15 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OEt, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1 e R5 = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m=s=leR5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, =3, m=s=leR5= Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de 16 carbono a que estão ligados,

9 W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados,

O W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, em que R1 = ciclobutilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^OJ-O-R1, em que R1 = ciclo-hexilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão 17 ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, em que R1 =

> G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j =3, m=s=leR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, em que R1 =

G - OH, L - ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-0^, em que R1 =

G OH, L ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = i e R5 = R6 = hidrogénio; 18 o composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-1^, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, w está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e Rs = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-NH-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=S)-NH-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -S(0)2-R1, em que R1 = ciclopentilo, G = OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -0-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Re = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -NH-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5=R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(0=0)-0^, R1 = ciclopentilo, G = -NHS(0)2-fenetilo L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que 19 estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C^O)-O-R1, R1 = ciclopentilo, G = - (C=0)-OH, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, eR5R6= hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-Q-R1, R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-O-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = -(C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-NH-fenetilo, L = ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = - (C=0)-0-R1, R1 = ciclopentilo, G = -(C=0)-NH-S (0)2-benzilo, L ausente, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = R6 = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -(C=0)CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rô = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -CH(CH3) CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rí = hidrogénio; 20 os compostos com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -Ο-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 metilo e Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -S-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -S(O)-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e Rê = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = —S (0) 2, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo e Rj = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -SCH2CH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, R5 = metilo, e Rí = hidrogénio; o composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = CF2CH2, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = 1, e R5 = Rè = hidrogénio; e 0 composto com a Fórmula I, em que A = tBOC, G = OH, L = -CHFCH2-, X e Y são, em conjunto com os átomos de carbono a que estão ligados, fenilo, W está ausente, Z 21 = tiofen-2-ilo, j = 3, m = s = leR5 = R6 = hidrogénio.

em que A e B estão definidos nas tabelas da Matriz A e da Matriz B: 22 Matriz

23

24

25

26 . ’ w CD OT-^ ZI titi ti ff D k ti gc r % ti pi «f t* A & *c V »» yc ti C ff Oo-j. A H vc ff fy -frt ti ff r é> ti zH ti p· »» ti_ 7 ff o zH 5 u* «r ff c>ti 5 9 V ff O-ti ti ff rf Q zx titi ti f* Q titi 5 >£ r ti c ir ff / —z W Po* z/ Nz 5 1/1 ff Λ \ ) n. KK ti âC tf ff 0°" xKf ti IN V* ff Q, °=Q>t zAz ti. ff 0 ' ZI titi ti V Cr ti /tiz ti 9 ·* «* —o W \_/t z^ xz ti ff ir rf —o Q Λ Η. zH r* V r "b XX* ti 27

28

8. Um composto da reivindicação 7, seleccionado dentre os compostos com os números:

Sssçpeste 3L® A B 103304 10132S :-U .v li 101327 ^'o-^aV u 101330 k " /'V^ V cxx 101331 i o 4 i v O 1Θ1332 ψ """v* H Γγ 4* 101-33 S : 9 N «! Αν«^<>ν 10133Õ i> CCC A^vv 1Θ1348 0 XS'·' h «v^^Khs^· S.85 & e mm g^k /yV5^ 101334 ! & '* 1 ^ *, f * ^ 101348 Λ*·· Çí nA|\ a:r° 101350 0: v 1 V ή |^Ύ" 101328 0 H 101380 > Q κ Jk V* rf χ Λ ii Í -JW^ÍW 101381 0 ' jjf^ ^\s 1 " 101382 H xCí:í Hh s 101320 11 Csaspcsto ϊΐ. s A e 106301 i$i r\ 123301 •í í.í‘ 1 J 3 i.^0À·,. A-vjwf·' 112301 v! ΐ< 1 \jH#· „.·.·^χ. ... s Avf jW^MW 124301 ΟγΧ,ν •ís ? vlí ^l«M»v 10*301 ίΛ, A v >< \ - .^-¾¾^ •'λ, ,...i^3j 122301 ^ 7*~ s 0 »w'|ww 111301 <λΑν 114301 \.as^ i 107301 . 3ç " à & ^

&3SÇMSS tS 1. c' A B 1433*1 u A 115301 ΟλΛ r"\ ^ -ii: ^V«|WW' 10130,7 I ^ H /V 'V*' "V* \ JL LA 1012*38 n Ê ^ | i "''v *AX ''.../ % JL w/ i 101323 ° * II 101317 . 0 -Αχ 3§T ^ ΧΓ K \ I ... .^Λ IA w ^ xe· JÍ l í1 i1 «* 108301 Ç'í L-k v A,,h V κ 1 ' 10131S 0 n 35

36

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9. Uma composição farmacêutica que contém uma quantidade inibidora de um composto de acordo com a reivindicação 42 1 ou 8, por si só ou em combinação com uma substância de suporte ou um excipiente aceitável a nivel farmacêutico.

10. Utilização de uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 9, com vista à produção de um medicamento para o tratamento de uma infecção pelo virus da hepatite C num indivíduo.

11. Composição farmacêutica da reivindicação 9 para a produção de um medicamento para inibir a replicação do vírus da hepatite C, sendo essa composição farmacêutica fornecida numa quantidade inibidora da protease NS3 do vírus da hepatite C.

12. A utilização da reivindicação 10, que ainda contempla a utilização em simultâneo de um agente antiviral contra o vírus da hepatite C.

13. A utilização da reivindicação 12, em que o referido agente antiviral contra o vírus da hepatite C adicional é seleccionado do grupo composto por interferão-a, interferão-β, ribavarina e adamantina.

14. A utilização da reivindicação 12, em que o referido agente antiviral contra o vírus da hepatite C adicional é um inibidor da helicase, da polimerase, da metaloprotease ou do IRES do vírus da hepatite C. Lisboa, 2 de Fevereiro de 2010