[go: up one dir, main page]

NO342506B1 - Camptotecinderivater med antitumoraktivitet - Google Patents

Camptotecinderivater med antitumoraktivitet Download PDF

Info

Publication number
NO342506B1
NO342506B1 NO20090252A NO20090252A NO342506B1 NO 342506 B1 NO342506 B1 NO 342506B1 NO 20090252 A NO20090252 A NO 20090252A NO 20090252 A NO20090252 A NO 20090252A NO 342506 B1 NO342506 B1 NO 342506B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
mmol
tumors
nmr
mhz
compound
Prior art date
Application number
NO20090252A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20090252L (no
Inventor
Gabriele Fontana
Ezio Bombardelli
Carla Manzotti
Arturo Battaglia
Cristian Samori
Original Assignee
Indena Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Indena Spa filed Critical Indena Spa
Publication of NO20090252L publication Critical patent/NO20090252L/no
Publication of NO342506B1 publication Critical patent/NO342506B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Nye camptotecinderivater som har antitumoraktivitet, prosessen for fremstilling derav, anvendelse derav som antitumorlegemidler og farmasøytiske sammensetninger inneholdende dem.

Description

Den foreliggende oppfinnelsen angår nye camptotecinderivater som angitt i krav 1 og som har antitumoraktivitet, fremgangsmåter for fremstilling derav som angitt i krav 3, anvendelse derav for fremstilling av antitumorlegemidler og farmasøytiske sammensetninger inneholdende dem.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Camptotecin er et alkaloid ekstrahert fra from Camptotheca acuminata (Nyssaceae), først beskrevet av Wall og Wani i 1966 (J. Am. Chem. Soc. 1966, 88, 3888-3890). Camptotecin, skjønt utrustet med et bredt spekter av antitumoraktivitet, særlig mot colontumor og andre faste tumorer og leukemier, anvendes ikke i behandlingen grunnet dens høye toksisitet, som er særlig manifestert i formen av hemorragiske cyster, gastrointestinal toksisitet og myelosuppresjon.
Et antall av camptotecinanaloger har blitt syntetisert for å oppnå forbindelser som har lav toksisitet og høy oppløselighet. For tiden er to legemidler anvendt i den kliniske praksisen, nemlig CPT-11 og topotecan. Andre derivater, slik som belotecan, rubitecan, eksatecan, gimatecan, pegamotecan, lurtotecan, karenitecin, afeletecan, homocamptotecin, diflomotecan, og mange andre, gjennomgår kliniske forsøk. Forbindelse CPT-11 er et høyoppløselig prodrug for 10-hydroksy-7-etylcamptotecin (alminnelig kjent som SN-38), som er godkjent for behandlingen av mange faste tumorer og ascites (colorektal, hud, mage, lunge, livmorhals, eggstokk, ikke-Hodgkin lymfoma).
Topotecan er en forbindelse løselig i fysiologisk løsning, aktiv mot svulster i lunge, mage, lever, eggstokk, bryst, prostata, spiserør, rektum, myke vevssarcom, hode og hals, glioblastoma, kroniske og akutte myelocyttiske leukemier. Topotecan viser imidlertid alvorlige bivirkninger slik som nøytropeni og trombocytopeni.
Lurtotecan er et mer løselig derivat, som har aktivitet i tumorer i halsen, eggstokken, brystet, kolorektal, og pulmonær mikrocytomi. Uansett har Lurtotecan også hematisk toksisitet.
Rubitecan er et prodrug for oral bruk som er effektivt mot tumorer i bukspyttkjertel, eggstokk og bryst.
Camptotecin og dens analoger, hvilket er tilfellet med alle topoisomerase I inhibitorer, er effektive mot tumorer som er resistente for konvensjonelle legemidler, inkludert topoisomerase II inhibitorer; opprettholder høye topoisomerasenivåer under hele cellesyklusen; induserer ikke multi-legemiddelresistanse) Pgo eller MRP) eller detoksifiserende metabilisme mediert av enzymet.
Forskning fokuseres nå på nye inhibitoerer av topoisomerase I som har lavere toksisitet enn de for tiden anvendte legemidler.
Åpen-ring camptotecinderivater viser høy proteinbinding (særlig med albumin) og lav distribusjon i tumorvevene. Som en konsekvens akkumulerer produktet i kroppen og tumorer blir lite påvirket.
Motsatt fremmer den høye lipofilisiteten av lactonformen adhesjonen av camptotecinderivater til cellemembraner, særlig erytrocytter, som påvirker vev/plasma distribusjonshastigheten. Av denne grunn fokuserer forskning på to alternative tilnærminger: a) utforming av lav proteinbindende produkter som fremdeles har god oppløselighet; b) utforming av høypotente produkter som har en terapeutisk effekt selv ved ekstremt lave doser.
Modifikasjoner ved 7-, 9-, 10- og 11-posisjonene viste vanligvis god toleranse mens de ikke påvirket stabiliteten av DNA-topoisomerase I-camptotecin ternærkompleks, av hvilken dannelsen er ansvarlig for antitumoraktiviteten av forbindelsene.
Produkter med 20R konfigurasjon ble vist enten inaktive eller svært lite aktive i forhold til produktene med 20S-konfigurasjon som stemmer overens med den naturlige konfigurasjonen.
Som en regel betraktes modifikasjoner ved 5-posisjonen ufordelaktige til dannelsen av ternærkomplekset, ettersom modifikasjoner ved pyridonringer D og E er rapportert å gi den skadelige aktiviteten av produktet.
BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
I et første aspekt angår oppfinnelsen camptotecinderivater av generell formel I:
(I)
hvori:
R er F;
RI er hydrogen, alkyl, aminoalkyl, hydroksyalkyl, nitril, alkoksymino, aryloksymino, silylalkyl;
R2 er hydrogen, hydroksyl, alkoksy, aminoalkyl;
R3 er hydrogen, hydroksyl, alkoksy, aminoalkyl, forutsatt at når RI er hydrogen, så er R2 og R3 hydrogen;
hvori alkyl-, acyl-, alkoksy-, aminoalkyl- eller alkoksyminogruppene kan inneholde 1 til 8, fortrinnsvis 1 til 4, karbonatomer, i en rett eller forgrenet kjede, og aryl- og aryloksygruppene kan inneholde 5 til 10 karbonatomer;
de farmasøytisk akseptable saltene, enantiomerene, diastereomerene, derav og tilsvarende blandinger.
Forbindelsene av oppfinnelsen viser lav proteinbinding og har god oppløselighet og høy styrke selv ved lave doser.
Den foretrukkede syntetiske ruten for fremstilling av forbindelsene av oppfinnelsen er illustrert i skjema I og omfatter de følgende trinnene:
a) beskyttelse av grunnsubstanshydroksygruppene;
b) derivatisering ved 5 gjennom dannelse av et karbanion og reaksjon med en elektrofil reagensmiddel;
c) avbeskyttelse av hydroksygruppene;
Skjema 1
I skjema 1 har R, RI, R2 and R3 samme betydning som beskrevet ovenfor, og PG er en hydroksybeskyttende gruppe.
Grunnsubstanser kan være kommersielt tilgjengelige eller oppnås som beskrevet i litteraturen.
Karbanionene ved 5 kan oppnås ved å behandle grunnsubstansen med en sterk organisk base, fortrinnsvis LiHMDS.
Karbanionet reageres in situ med et elektrofilt reagensmiddel, slik som en kilde av halogen eller azadikarboksylat, isocyanat, klorkarbonylderivat, tosylazid.
Silyler og karbamater eller en kombinasjon derav er foretrukket som hydroksybeskyttende grupper.
Forbindelsene av oppfinnelsen ble testet i en cytotoksisitetsundersøkelse på et bredt spekter av tumorceller. Eksempelvis rapporteres cytotoksisitetsdata på NCI-H460 cellelinjen (NSCL-kreft) omhandlende to forbindelser av formel (I), ved å anvende camptotecin og legemidlene Topotecan og SN-38 som referanser:
(fortsetter)
De mest aktive forbindelsene ble evaluert i en DNA-spaltningsundersøkelse som måler den aktive konsentrasjonen og skadeutholdenheten (se delen "Eksempler"). Derivatene av formel (I) viser overraskende høyere utholdenhet i å blokkere DNA-replikasjon enn referansestandardene (særlig topotecan og camptotecin), mens det opprettholder en effektiv cytotoksisk aktivitet.
I et ytterligere aspekt angår oppfinnelsen farmasøytiske sammensetninger inneholdende en forbindelse av formel (I) sammen med farmasøytisk akseptable bærere og eksipienter. De farmasøytiske formene egnet for oral eller parenteral administrasjon av forbindelsene (I) kan være faste, fortrinnsvis kapsler, tabletter og granuler eller flytende, foretrukket injiserbare eller infusjonsløsninger.
De passende formulerte forbindelsene av oppfinnelsen kan anvendes for behandlingen av faste tumorer og leukemier, særlig tumorer i lunge, eggstokk, bryst, mage, lever, prostata, myke vevsarcomer, hode og hals, spiserør, bukspyttkjerte, colon, rektum, glioblastoma, kroniske og akutte myelocyttiske leukemier.
EKSEMPLER
EKSEMPEL I - 20-OTES-Camptotecin
Camptotecin (0,100 g, 0,287 mmol) suspenderes i vannfri dimetylformamid (3 ml), under inert atmosfære og den resulterende suspensjonen tilsettes med imidazol (0,980 g, 1,44 mmol). Blandingen røres i 10 minutter, deretter dryppes trietylsilylklorid (TES-CI) (0,193 ml, 1,15 mmol) deri etterfulgt av tilsetting av 4-dimetylaminopyridin (DMAP) (0,040 g 0,287 mmol). Etter 46 timer ble blandingen fordampet under vakuum, (TLC-kontroll av den fullstendige forsvinningen av reagensmiddelet, eluent CH2Cl2/MeOH = 30/1). Faststoffet gjenoppløses i CH2CI2og vaskes med H20 og mettet NH4Cl. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(2 x 10 ml). De organiske fasene kombineres og tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum, og det ønskede produktet oppnås derved (0,133 g, 0,287 mmol) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,37 (s, 1H, Ar, H-7), 8,25 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,92 (d, 1H, J = 8,0 Hz, Ar), 7,82 (t, 1H, J = 8,0 Hz, Ar), 7,65 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,57 (s, 1H, H-14), 5,67 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,29 (s, 2H, H-5), 5,25 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 2,00-1,84 (m, 2H, H-19), 1,03-0,93 (m, 12 H), 0,80-0,71 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,7, 157,6, 152,5, 151,5, 149,0, 145,9, 130,9, 130,4, 130,0, 128,4, 128,1, 128,0, 127,9, 118,9, 94,4, 75,3, 66,0, 50,0, 33,2, 7,9, 7,2, 6,4.
EKSEMPEL II - 20-OTES SN-38
SN-38 (0,100 g, 0,255 mmol) suspenderes i vannfri dimetylformamid (5 ml), under inert atmosfære og den resulterende suspensjonen tilsettes imidazol (0,087 g, 1,28 mmol). Blandingen røres i 10 minutter, og deretter dryppes trietylsilylklorid (TESCl), (0,171 ml, 1,02 mmol) deri, etterfulgt av tilsetting av 4-dimetylaminopyridin (DMAP) (0,031 g, 0,255 mmol). Etter 52 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og forsvinningen av reagensmiddelet ble overvåket ved TLC (CH2Cl2/MeOH = 10/1) Faststoffet gjenoppløses deretter i CH2CI2og vaskes med H20 og mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(2 x 10 ml). De organiske fasene kombineres og tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum, og oppnår derved det ønskede produktet (0,121 g, 0,240 mmol, 94 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 9,26 (br s, ΙΗ,ΟΗ), 8,14 (d, 1H, J = 9,2 Hz, Ar, H-12), 7,58 (s, 1H, H-14), 7,49 (dd, 1H, J1= 9,2 Hz J2= 2,2 Hz, H-ll), 7,46 (d, 1H, J = 2,2 Hz, H-9), 5,70 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,28 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,23 (s, 2H, H-5), 3,05 (q, 2H, J = 7,5 Hz), 1,97-1,81 (m, 2H, H-19), 1,32 (t, 3 H, J = 7,5 Hz, Me), 0,98-0,88 (m, 12 H), 0,77-0,68 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 172,1, 157,9, 156,6, 152,1, 149,0, 146,7, 144,6, 143,6, 131,9, 128,7, 126,9, 122,8, 117,9, 105,5, 98,5, 75,4, 65,9, 49,5, 32,9, 23,2, 13,5, 7,8 , 7,2, 6,4.
EKSEMPEL III - 10-OTBDMS-20-OTES SN-38
20-OTES SN-38 (0,121 g, 0,240 mmol) løses i en CH2Cl2/THF = 1 : 1 (8 ml) vannfri blanding under inert atmosfære. Imidazol (0,081 g, 1,20 mmol) tilsettes dertil etterfulgt av, etter 10 minutter, tert-butyldimetylsilylklorid (TBDMS-CI), (0,144 mg, 0,957 mmol), deretter av 4-dimetylaminopyridin (DMAP), (0,029 g 0,240 mmol). Etter 18 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og forsvinningen av reagensmiddelet ble overvåket ved TLC ( Heksa n/AcOEt = 1/1) Faststoffet gjenoppløses deretter i CH2CI2og vaskes med H20 og mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(2 x 10 ml) og de organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,127 g, 0,205 mmol, 85 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,14 (d, 1H, J = 8,8 Hz, Ar, H-12), 7,49 (s, 1H, H-14), 7,40 (d, 1H, J = 2,2 Hz, H-9), 7,38 (dd, 1H, J1= 8,8 Hz J2= 2,5 Hz, H-ll), 5,67 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,25 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,23 (s, 2H, H-5), 3,11 (q, 2H, J = 7,6 Hz), 1,99-1,82 (m, 2H, H-19), 1,38 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me), 1,04 (s, 9 H), 1,00-0,92 (m, 12 H), 0,78-0,69 (m, 6 H), 0,30 (s, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,9, 157,7, 155,1, 151,5, 150,1, 146,8, 145,6, 143,5, 132,2, 128,2, 126,9, 125,9, 118,0, 110,5, 97,7, 75,4, 66,0, 49,3, 33,2, 25,6, 23,1, 18,3, 13,7, 7,9, 7,2, 6,4, 4,3.
EKSEMPEL IV - 20-OTES Topotecan
Topotecan (0,100 g, 0,238 mmol) suspenderes i vannfri dimetylformamid (5 ml), under inert atmosfære og den resulterende suspensjonen tilsettes med imidazol (0,081 g, 1,19 mmol). Blandingen røres i 10 minutter, og deretter dryppes trietylsilylklorid (TES-CI), (0,160 ml, 0,952 mmol) deri etterfulgt av tilsetting av
4-dimetylaminopyridin, (DMAP), (0,029 g 0,238 mmol). Etter 52 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og den fullstendige forsvinningen av reagensmiddelet ble overvåket ved TLC (CH2Cl2/MeOH = 10/1). Faststoffet gjenoppløses deretter i CHCI3og H20 og mettet NH4CI, den vandige fasen ekstraheres med CHCI3(2 x 15 ml). De organiske fasene kombineres og tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum, og oppnår derved det ønskede produktet (0,120 g, 0,224 mmol, 94 %) som et blekt gult faststoff.
<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 9,65 (br s, 1H), 8,26 (s, 1H, Ar, H-7), 8,14 (d, 1H, J = 8,8 Hz, Ar, H-12), 7,80 (d, 1H, J = 8,8 Hz, Ar, H-ll), 7,58 (s, 1H, H-14), 5,67 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,25 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,20 (s, 2H, H-5), 4,71 (s, 2 H), 2,81 (s, 6H, 2 Me), 1,97-1,81 (m, 2H, H-19), 0,98-0,88 (m, 12 H), 0,77-0,68 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 172,1, 157,9, 156,6, 152,1, 150,8, 146,8, 144,3, 134,3, 131,2 129,9, 127,9, 123,0, 118,9, 110,1, 98,5, 75,4, 65,9, 51,1, 50,0, 43,1, 32,9, 7,8, 7,2, 6,4.
EKSEMPEL V - lO-OTBDMS 20-OTES Topotecan
20-OTES Topotecan (0,120 g, 0,224 mmol) løses i en CH^I1JTHF = 1 : 1 vannfri blanding (8 ml) under inert atmosfære. Imidazol (0,076 g, 1,12 mmol) tilsettes etterfulgt av, etter 10 minutter, tert-butyldimetylsilylklorid (TBDMS-CI), (0,135 mg, 0,896 mmol), deretter av 4-dimetylaminopyridin (DMAP), (0,027 g 0,224 mmol). Etter 21 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og forsvinningen av reagensmiddelet ble overvåket ved TLC ( Heksa n/AcOEt = 1/1). Faststoffet gjenoppløses deretter i CHCI3og H20 og mettet NH4CI, den vandige fasen ekstraheres med CHCI3(2 x 15 ml). De organiske fasene kombineres og tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,116 g, 0,179 mmol, 80 %) som et blekt gult faststoff.
<Χ>Η NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,26 (s, 1H, Ar, H-7), 8,14 (d, 1H, J = 8,8 Hz, Ar, H-12), 7,81 (d, 1H, J = 8,8 Hz, Ar, H-ll), 7,59 (s, 1H, H-14), 5,64 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,22 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,19 (s, 2H, H-5), 4,71 (s, 2 H), 2,81 (s, 6H, 2 Me), 1,97-1,81 (m, 2H, H-19), 1,04 (s, 9 H), 0,98-0,88 (m, 12 H), 0,77-0,68 (m, 6 H), 0,30 (s, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,7, 157,7, 155,1, 151,5, 150,0, 146,8, 144,3, 134,3, 131,2 129,9, 127,9, 123,0, 118,9, 110,1, 98,5, 75,4, 65,9, 51,1, 50,0, 43,9, 32,9, 25,6, 18,3, 7,8, 7,2, 6,4, -4,3.
EKSEMPEL VI - Fremstilling av 20-OTES 10-hydroksycamptotecin
10-Hydroksycamptotecin (0,100 g, 0,275 mmol) suspenderes i vannfri dimetylformamid (5 ml), under inert atmosfære og den resulterende suspensjonen blir tilsatt med imidazol (0,225 g, 3,31 mmol). Blandingen røres i 10 minutter og deretter dryppes trietylsilylklorid (TES-CI), (0,460 ml, 2,75 mmol deri etterfulgt av tilsetting av 4-dimetylaminopyridin (DMAP) (0,068 g, 0,550 mmol). Etter 24 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og den fullstendige forsvinningen av reagensmiddelet (CH2Cl2/MeOH = 20/1) ble overvåket ved TLC. Faststoffet gjenoppløses deretter i CH2CI2 og vaskes med H20 og mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2 (2 x 10 ml). De organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum, og oppnår derved det ønskede produktet (0,124 g, 0,259 mmol, 94 %) som et blekt gult faststoff.
<X>H NMR (CDCI3+ 5% CD3OD, 400 MHz) δ 8,10 (s, 1H, Ar, H-7), 8,05 (d, 1H, J = 9,2 Hz, Ar), 7,50 (s, 1H, H-14), 7,39 (dd, 1H, J1= 9,2 Hz J2= 2,4 Hz, H-ll), 7,11 (d, 1H, J = 2,2 Hz, H-9), 5,60 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,21 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,15 (s, 2H, H-5), 1,97-1,81 (m, 2H, H-19), 0,98-0,88 (m, 12 H), 0,76-0,68 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3+ 5% CD3OD, 100 MHz) δ 172,2, 157,8, 156,7, 151,8, 149,2, 146,1, 144,1, 130,9, 129,8, 129,0, 128,6, 123,2, 117,8, 108,8, 98,1, 75,4, 65,8, 50,0, 32,9, 7,7, 7,1, 6,3.
EKSEMPEL VII - 10-OTBDMS-20-OTES Camptotecin
10-Hydroksy-20-OTES-Camptotecin (0,105 g, 0,219 mmol) løses i en CH2CI2/THF = 1: 1 vannfri blanding (4 ml) og under inert atmosfære. Imidazol (0,097 g, 1,42 mmol) is tilsettes, etterfulgt etter 10 minutter, av tert-butyldimetylsilylklorid (TBDMS-CI), (0,164 mg, 1,10 mmol), deretter av 4-dimetylaminopyridin (DMAP) (0,040 g, 0,329 mmol). Etter 18 timer fordampes reaksjonsblandingen under vakuum, og den fullstendige forsvinningen av reagensmiddelet (Cicioheksan/AcOEt = 1/3) ble overvåket ved TLC. Faststoffet gjenoppløses deretter i CH2CI2og vaskes med H20 og mettet NH4CI, Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(2 x 10 ml). De organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Cicloheksan/AcOEt = 1/3), og oppnår derved det ønskede produktet (0,117 g, 0,197 mmol, 90 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,22 (s, 1H, Ar, H-7), 8,13 (d, 1H, J = 9,2 Hz, Ar, H-12), 7,51 (s, 1H, H-14), 7,39 (dd, 1H, J1= 9,2 Hz J2= 2,8 Hz, H-ll), 7,22 (d, 1H, J = 2,8 Hz, H-9), 5,66 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 5,25 (s, 2H, H-5), 5,24 (d, 1H, J = 16,5 Hz, H-17), 1,99-1,82 (m, 2H, H-19), 1,03 (s, 9 H), 1,00-0,92 (m, 12 H), 0.78-0,69 (m, 6 H), 0,29 (s, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 172,0, 157,7, 155,1, 151,5, 150,6, 146,1, 145,1, 131,4, 129,4, 129,3, 128,7, 126,7, 118,3, 114,5, 97,7, 75,3, 66,0, 49,9, 33,1, 25,6, 18,3, 7,9, 7,2, 6,4, -4,3.
EKSEMPEL VIII - 5-F-20-OTES-Camptotecin
Camptotecin 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med omrøring under inert atmosfære, avkjøles deretter til en temperatur på -78°C og en 1,0 M LiHMDS løsning i THF (0,260 ml , 0,260 mmol) dryppes deri. Etter 20 minutter tilsettes NFSI (0,089 g, 0,281 mmol) i vannfri THF (2 ml). Etter 2 timer ved -78°C, tillates temperaturen å stige til 25°C og forsvinningen av reagensmiddelet overvåkes ved TLC ( Heksa n/AcOEt = 1/2). Dannelse av de to diastereomerene observeres. Etter 3 timer ved romtemperatur, stanses reaksjonen ved tilsetting av mettet. NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(3 x 15 ml) og de organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 3/1, deretter 2/1 og til slutt 1/1), og oppnår derved en blanding av de to isomerene (0,101 g, 0,210 mmol, 97 %,) (1: 1 isomerforhold) som et blekt gult faststoff. De to isomerene separeres ved ytterligere kromatografi. For elusjon:
1. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,52 (s, 1H, Ar, H-7), 8,25 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,96 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,87 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,69 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,47 (d, 1H, = 61,2 Hz, H-5), 7,45 (s, 1H, H-14), 5,62 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,22 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 2,02-1,84 (m, 2H, H-19), 1,03-0,93 (m, 12 H), 0,80-0,71 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,4, 157,5, 152,3, 151,1, 150,2 (d, J = 1,5 Hz), 150,3 (d, J = 1,5 Hz), 143,6 (d, J = 5,3 Hz), 133.7, 131,7, 130,2, 128,9, 128,4, 127,9 (d, J = 15,0 Hz), 126,3 (d, J = 15,0 Hz), 121.8, 98,9, 93,8 (d, 1JCF= 213,2 Hz, C-5), 75,1, 65,7, 33,1, 7,8, 7,2, 6,4.
2. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,51 (s, 1H, Ar, H-7), 8,25 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,96 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,87 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,68 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,51 (d, 1H, 1JHF= 60,8 Hz, H-5), 7,42 (s, 1H, H-14), 5,62 (d, 1H, J = 17,2 Hz, H-17), 5,20 (d, 1H, J = 17,2 Hz, H-17), 2,02-1,82 (m, 2H, H-19), 1,04-0,93 (m, 12 H), 0,80-0,71 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,2, 157,8, 152,5, 151,2, 150,3, 143,7, 133,7 (d, J = 2,4 Hz), 131,7, 130,2, 128,9, 128,3, 127,9 (d, J = 2,3 Hz), 126,3 (d, J = 16,7 Hz), 121,8 (d, J = 1,5 Hz), 99,0, 93,8 (d, 1JCF = 214,8 Hz, C-5), 75,0, 65,8, 33,3, 7,9, 7,1, 6,4.
EKSEMPEL IX - Fremstilling av 5-F-camptotecin 1. diastereomer
Den første diastereomeren av 5-F-20-OTES-camptotecin (0,025 g, 0,052 mmol) løses i vannfri THF (5 ml) med røring under inert atmosfære. Deretter dryppes Et3N●3HF (0,060 ml, 0,368 mmol) deri. Reaksjonsblandingen las reagere i 28 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmiddelet (Heksan/AcOEt = 1/2) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes over vakuum og residuet kromatograferes (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,019 g, 0,051 mmol, 98 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,52 (s, 1H, Ar, H-7), 8,25 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,96 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,87 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,69 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,59 (s, 1H, H-14), 7,46 (d, 1H, 1JHF= 61,2 Hz, H-5), 5,69 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,26 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 3,87 (br s, 1H, OH), 2,01-1,81 (m, 2H, H-19), 1,05 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,5, 157,6, 151,1, 151,0, 150,2, 144,1, 133,9, 131,9, 130,0, 129,0, 128,5, 127,8, 126,4, 121,7, 98,8, 93,8 (d, 1JCF= 214,0 Hz, C-5), 72,5, 66,0, 31,5, 7,8.
EKSEMPEL X - Fremstilling av 5-F-camptotecin 2. diastereomer
Den andre diastereomeren av 5-F-20-OTES-camptotecin (0,025 g, 0,052 mmol) løses i vannfri THF (5 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,060 ml, 0,368 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reageres i 28 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmiddelet (Heksan/AcOEt = 1/2) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes av under vakuum og residuet kromatograferes (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,018 g, 0,050 mmol, 97 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,52 (s, 1H, Ar, H-7), 8,24 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,96 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,88 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,69 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,56 (s, 1H, H-14), 7,51 (d, 1H, = 60,4 Hz, H-5), 5,69 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,25 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 3,87 (br s, 1H, OH), 1,98-1,78 (m, 2H, H-19), 1,04 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,3, 157,7, 151,2, 151,2, 150,2, 144,2, 133,8, 131,9, 130,0, 129,0, 128,5, 127,8, 126,4, 121,6, 98,9, 93,7 (d, 1JCF= 214,0 Hz, C-5), 72,5, 66,1, 31,6, 7,8.
EKSEMPEL XI - Fremstilling av 5-N3-20-OTES-camptotecin
Camptotecin 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, avkjøles deretter til -78°C og en 1,0 M LiHMDS løsning i THF (0,260 ml, 0,260 mmol) dryppes deretter deri. Etter 20 minutter tilsettes tosylazid (TSN3) (0,055 g, 0,281 mmol) i vannfri THF (2 ml). Etter 2 timer ved -78°C, tillates temperaturen å stige til 25°C og forsvinningen av reagensmiddelet overvåkes ved TLC (Heksan/AcOEt = 2/1). Dannelse av de to diastereomerene observeres. Etter 2 timer og 30 min ved romtemperatur, stanses reaksjonen ved tilsetting av mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2 (3 x 15 ml) og de organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet, bestående av de to diastereomerene, renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 3/1, deretter 2/1 og tilslutt 1/1), som derved gir (0,106 g, 0,210 mmol, 97 %) av en blanding av de to isomerene (forhold av isomerene 1: 1) som et blekt gult faststoff. De to isomerene separeres ved ytterligere kromatografi. For elusjon:
1. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,45 (s, 1H, Ar, H-7), 8,25 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,95 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,86 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,68 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,49 (s, 1H, H-14), 6,97 (s, 1H, H-5), 5,65 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,26 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 2,01-1,84 (m, 2H, H-19), 1,03-0,94 (m, 12 H), 0,80-0,71 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,6, 158,3, 152,2, 150,8, 150,0, 144,0, 132,9, 131,4, 130,1, 128,6, 128,3, 128,2, 128,1, 120,8, 98,7, 75,4, 75,2, 65,7, 33,1, 7,9, 7,2, 6,4.
2. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,45 (s, 1H, Ar, H-7), 8,24 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,95 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,86 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,68 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,46 (s, 1H, H-14), 6,99 (s, 1H, H-5), 5,66 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,22 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 2,02-1,84 (m, 2H, H-19), 1,03-0,94 (m, 12 H), 0,80-0,71 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,4, 158,4, 152,3, 150,9, 150,0, 144,0, 132,9, 131,4, 130,1, 128,6, 128,3, 128,2, 128,1, 120,8, 98,7, 75,3, 75,1, 65,8, 33,3, 7,9, 7,2, 6,4.
EKSEMPEL XII - Fremstilling av 5-N3-camptotecin 1. diastereomer
Diastereomer 1 av 5-N3-20-OTES-camptotecin (0,070 g, 0,139 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,170 ml, 1,016 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reageres i 26 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmiddelet (Heksan/AcOEt =1/1) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes av under vakuum og residuet renses ved flashtromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,053 g, 0,136 mmol, 98 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.44 (s, 1H, Ar, H-7), 8.24 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.93 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.85 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.67 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.63 (s, 1H, H-14), 6.97 (s, 1H, H-5), 5.70 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.29 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 3.99 (br s, 1H, OH), 2.00-1.84 (m, 2H, H-19), 1.04 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me).<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173.6, 158.3, 150.8, 150.7, 149.8, 144.4, 133.1, 131.5, 129.9, 128.6, 128.3, 128.3, 128.1, 120.6, 98.6, 75.4, 72.7, 66.0, 31.5, 7.8.
EKSEMPEL XIII - Fremstilling av 5-N3-camptotecin 2. diastereomer
Diastereomeren 2 av 5-N3-20-OTES-camptotecin (0,055 g, 0,109 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,135 ml, 0,820 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reagerer i 26 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av utgangsreagensmiddelet overvåkes ved TLC (Heksan/AcOEt = 1/1). Løsemiddelet fordampes av under vakuum og residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved det ønskede produktet (0,042 g, 0,107 mmol, 98 %) som et blekt gult faststoff.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,45 (s, 1H, Ar, H-7), 8,23 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,95 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,85 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,68 (t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,60 (s, 1H, H-14), 7,00 (s, 1H, H-5), 5,74 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,28 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 3,86 (br s, 1H, OH), 1,98-1,82 (m, 2H, H-19), 1,04 (t, 3 H , J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,4, 158,4, 150,9, 150,7, 149,8, 144,5, 133,0, 131,5, 129,9, 128,6, 128,4, 128,3, 128,1, 120,6, 98,6, 75,3, 72,6, 66,1, 31,6, 7,8.
EKSEMPEL XIV - Fremstilling av 5-NH2-camptotecin
Diastereomeren 2 av5-N3-20-OH-camptotecin (0,050 g, 0,129 mmol) løses i en blanding av THF (1,5 ml) og vannfri MeOH (6 ml) med røring under inert atmosfære, og tilsettes deretter med Pd/C (14 mg ~ 10%) og to sykluser in vakuo/H2(H2ballongtrykk) utføres. Reaksjonsblandingen reageres i 3 timer ved romtemperatur og forsvinningen av reagensmidlet overvåkes ved TLC ( Heksa n/AcOEt = 1/3), filtreres deretter gjennom celitt og vaskes med CH2CI2(2 x 15 ml). Løsemidlet fordampes av under vakuum. 1H NMR-spektroskopi av reaksjonens urenheter avslører tilstedeværelsen av det ønskede produktet som en 1: 1 blanding av to empimere ved C5-posisjonen. Flashkromatografi (Si02, CH^I1JMeOH = 35/1 deretter 25/1) tillater gjenvinning av blandingen av de to diastereomerene (0,046 g, 0,126 mmol, 98 %).
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,48 (s, 1H, Ar, H-7), 8,22-8,17 (m, 1H, Ar), 7,95-7,90 (m, 1H, Ar), 7,85-7,78 (m, 1H, Ar), 7,68-7,60 (m, 1H, Ar), 7,58 (s, 0,5 H, H-14), 7,54 (s, 0,5 H, H-14) 6,50 (s, 0,5 H, H-5), 6,47 (s, 0,5 H, H-5), 5,74-5,64 (m, 1H, H-17), 5,28-5,22 (m, 1H, H-17), 4,00-2,40 (br s, 3 H, OH NH2), 1,98-1,82 (m, 2H, H-19), 1,07-1,01 (m, 3 H, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,8 (2 C), 158,5 (2 C), 151,2 (2 C), 150,4 (2 C), 149,7 (2 C), 144,5 (2 C), 132,7 (2 C), 131,0 (2 C), 129,8 (2 C), 128,5 (2 C), 128,3 (2 C), 128,0 (2 C), 127,8 (2 C), 120,2 (2 C), 113,8 (2 C), 97,7 (2 C), 72,7 (2 C), 66,3, 66,0, 31,5 (2 C), 7,8, 7,8.
EKSEMPEL XV - 5-di-t-Butoksykarbonylhydrazino-20-OTES-camptotecin
Camptotecin 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, avkjøles deretter til -78°C og en 1,0 M LiHMDS løsning i THF (0,281 ml, 0,281 mmol) dryppes deri. Etter 20 minutter tilsettes di-tertbutylazo dikarboksylat (DTBAC) (0,075 g, 0,324 mmol) i vannfri THF (2 ml) Etter 4 timer ved -78°C, overvåkes fo1svinningen av reagensmiddelet ved TLC (Heksan/AcOEt = 3/1). Dannelse av de to isomerene observeres. Reaksjonen stanses ved tilsetting av mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(3 x 15 ml) og de organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 3/1), og en blanding av de to isomerene oppnås derved (0,145 g, 0,210 mmol, 97 %). De to isomerene separeres ved ytterligere kromatografi. For elusjon:
1. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,80 (br s, 1H, Ar), 8,23 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 8,01 (br d, 1H, Ar), 7,90-7,71 (m, 2H, Ar), 7,70-7,45 (m, 2H, Ar H-14), 6,52 (br s, 1H, H-5), 5,61 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,23 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 2,03-1,81 (m, 2H, H-19), 1,79-1,08 (br s, 18 H), 1,06-0,92 (m, 12 H), 0,80-0,70 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,7, 157,8, 155,5, 155,5, 152,0, 152,0, 151,2, 149,4, 145,0, 132,1, 130,6, 130,0, 128,7, 128,4, 127,9, 119,9, 98,1, 82,7, 81,5, 79,7, 75,2, 65,7, 33,2, 28,3, 27,6, 7,7, 7,2, 6,4.
2. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,79 (br s, 1H, Ar), 8,23 (d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 8,01 (br d, 1H, Ar), 7,85-7,76 (m, 2H, Ar), 7,65 (br t, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,52 (s, 1H, H-14), 6,54 (br s, 1H, H-5), 5,61 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,22 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 2,03-1,82 (m, 2H, H-19), 1,76-1,08 (br s, 18 H), 1,04-0,92 (m, 12 H), 0,80-0,70 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,5, 157,9, 155,5, 155,5, 152,3, 152,0, 151,2, 149,4, 145,1, 132,1, 130,6, 130,0, 128,7, 128.4, 127,9, 119,9, 98,2, 82,9, 81,5, 79,6, 75,2, 65,8, 33,3, 28,3, 27,4, 7,8, 7,2, 6.4.
EKSEMPEL XVI - Fremstilling av 5-di-t-butoksykarbonylhydrazinocamptotecin 1. diastereomer
5-di-t-Butoksykarbonylhydrazino-20-OTES-camptotecin (0,050 g, 0,072 mmol) første diastereomer løses i vannfri THF (4 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,088 ml, 0,542 mmol) deri. Reaksjonsblandingen las reagere i 35 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmiddelet (Heksan/AcOEt = 3/2) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes av under vakuum og residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 3/2), og oppnår derved den ønskede forbindelsen (0,041 g, 0,071 mmol, 98 %) som et blekt gult faststoff.
Produktet renses ytterligere ved krystallisering fra CH2Cl2/Pentan = 1/50.
<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,77 (br s, 1H, Ar), 8,16 (br d, 1H, J = 8,0 Hz, Ar), 7,97 (br s, 1H, Ar), 7,86-7,50 (m, 4 H, Ar), 6,51 (br s, 1H, H-5), 5,66 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,24 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 3,86 (br s, 1H, OH), 2,00-1,80 (m, 2H, H-19), 1,79-1,13 (br s, 18 H), 1,03 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCIa, 100 MHz) δ 173,7, 157,9, 155,5, 155,5, 152,1, 151,3, 150,7, 149,6, 145,7, 132,3, 130,7, 129,9, 128,7, 127,9, 127,6, 120,0, 97,9, 82,8, 81,6, 79,7, 72,7, 66,1, 31,8, 28,3, 27,7, 7,7.
EKSEMPEL XVII - Fremstilling av 5-di-t-butoksykarbonylhydrazinocamptotecin 2. diastereomer
5-di-t-Butoksykarbonylhydrazino-20-OTES-camptotecin (0,050 g, 0,072 mmol) 2. diastereomer løses i vannfri THF (4,5 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,088 ml, 0,542 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reageres i 35 timer ved romtemperatur, forsvinningen av reagensmidlet (Heksan/AcOEt = 3/2) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes fra under vakuum og residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 3/2), og oppnår derved den ønskede forbindelsen (0,040 g, 0,069 mmol, 96 %) som et blekt gult faststoff. Produktet renses ytterligere ved krystallisering fra CH2Cl2/Pentan = 1/50.
<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,79 (br s, 1H, Ar), 8,22 (br d, 1H, J = 8,4 Hz, Ar), 7,99 (br s, 1H, Ar), 7,88-7,50 (m, 4 H, Ar), 6,53 (br s, 1H, H-5), 5,65 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,26 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 3,80 (br s, 1H, OH), 2,00-1,80 (m, 2H, H-19), 1,79-1,13 (br s, 18 H), 1,03 (t, 3 H, J = 7,2 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,6, 157,9, 155,4, 155,4, 152,1, 151,3, 150,8, 149,5, 145,6, 132,3, 130,8, 129,8, 128,7, 127,9, 127,8, 119,8, 98,0, 83,0, 81,5, 79,7, 72,7, 66,3, 31,8, 28,3, 27,7, 7,8.
EKSEMPEL XVIII - Fremstilling av 5-dibenzyloksykarbonylhydrazino-20-OTES-ca m ptoteci n
Camptotecin 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, avkjøles deretter til en temperatur på -78°C og en 1,0 M LiHMDS løsning i THF (0,281 ml , 0,281 mmol) dryppes deri. Etter 20' tilsettes dibenzylazodikarboksylat (0,097 g, 0,324 mmol) i vannfri THF (2 ml). Etter 3 timer ved -78°C, tillates temperaturen å stige til 25 °C og forsvinningen av reagensmidlet overvåkes ved TLC (Heksan/AcOEt = 3/1). Dannelse av de to diastereomerene observeres. Etter 90 minutter ved romtemperatur, stanses reaksjonen ved tilsetting av mettet NH4CI. Den vandige fasen ekstraheres med CH2CI2(3 x 15 ml) og de organiske fasene kombineres, tørkes over Na2S04, filtreres og konsentreres under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 4/1 deretter 7/2), og gir derved et blekt gult faststoff (0,161 g, 0,212 mmol, 98 %). De to isomerene separeres ved ytterligere kromatografi. For elusjon:
1. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,70 (br s, 1H, Ar), 8,39 (br s 1 H, Ar), 8,22 (br d, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,95 (br d, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,83 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,65 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,64-7,00 (m, 11 H, Ar H-14), 6,49 (br s, 1H, H-5), 5,57 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,47-4,44 (m, 5 H), 1,98-1,82 (m, 2H, H-19), 1,02-0,89 (m, 12 H), 0,80-0,70 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,6, 158,0, 156,3, 156,3, 153,0, 152,2, 151,0, 149,6, 144,8, 135,3, 132,1, 130,6, 130,0, 128,6-127,8 (11 C), 119,9, 98,4, 79,5, 75,2, 68,4, 67,9, 65,6, 33,0, 7,9, 7,2, 6,4.
2. diastereomer:<1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,85 (br s, 1H, Ar), 8,58 (br s 1 H, Ar), 8,20 (br s, 1H, Ar), 7,93 (br s, Ar), 7,81 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,63 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,56-6,90 (m, 11 H, Ar H-14), 6,52 (br s, 1H, H-5), 5,55 (d, 1H, J = 16,8 Hz, H-17), 5,44-4,71 (m, 5 H), 1,98-1,80 (m, 2H, H-19), 1,05-0,90 (m, 12 H), 0,81-0,70 (m, 6 H),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171,5, 157,9, 156,4, 156,4, 152,9, 152,4, 150,9, 149,4, 144,8, 135,3, 132,1, 130,6, 129,9, 128,6-127,8 (11 C), 119,9, 98,5, 79,3, 75,2, 68,4, 67,8, 65,6, 32,9, 7,8, 7,2, 6,4.
EKSEMPEL XIX - Fremstilling av 5-dibenzyloksykarbonylhydrazinocamptotecin 1. diastereomer
5-Dibenzyloksykarbonylhydrazino-20-OTES-camptotecin 1. diastereomer (0,140 g, 0,184 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,225 ml, 1,380 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reageres i 52 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmiddelet (Heksan/AcOEt = 1/3) overvåkes av TLC. Løsemidlet fordampes av under vakuum og residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1 deretter 2/3), og oppnår derved (0,113 g, 0,175 mmol, 95 %) som et blekt gult faststoff. Produktet renses ytterligere ved krystallisering fra CH2Cl2/Pentan = 1/50.
<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,67 (br s, 1H, Ar), 8,39 (br s 1 H, Ar), 8,12 (br d, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,95 (br s, 1H, Ar), 7,74 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,65-6,66 (m, 12H, Ar H-14), 6,48 (br s, 1H, H-5), 5,55 (d, 1H, J = 16,0 Hz, H-17), 5,42-4,44 (m, 5 H), 3,86 (br s, 1H, OH), 1,92-1,72 (m, 2H, H-19), 0,95 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,5, 158,0, 156,2, 156,0, 153,0, 150,9, 150,9, 149.5, 145,3, 135,4, 132,2, 130,7, 129,8, 128,7-127,8 (11 C), 119,9, 98,2, 79,6, 72,7, 68,5, 68,0, 65,9, 31,6, 7,8.
EKSEMPEL XX - Fremstilling av 5-dibenzyloksykarbonylhydrazinocamptotecin 2. diastereomer
5-Dibenzyloksykarbonylhydrazino-20-OTES-camptotecin 2. diastereomer (0,140 g, 0,184 mmol) løses i vannfri THF (6 ml) med røring under inert atmosfære, deretter dryppes Et3N*3HF (0,150 ml, 0,921 mmol) deri. Reaksjonsblandingen reageres i 55 timer ved romtemperatur, og forsvinningen av reagensmidlet ( Heksa n/AcOEt = 3/2) overvåkes ved TLC. Løsemidlet fordampes av under vakuum og residuet renses ved flashkromatografi (Si02, Heksan/AcOEt = 1/1), og oppnår derved den ønskede forbindelsen (0,113 g, 0,175 mmol, 95 %) som et blekt gult faststoff. Produktet renses ytterligere ved krystallisering fra CH2Cl2/Pentan = 1/50.
<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8,71 (br s, 1H, Ar), 8,34 (br s 1 H, Ar), 8,18 (br s, 1H, Ar), 7,94 (br s, 1H, Ar), 7,79 (br t, 1H, J = 7,6 Hz, Ar), 7,70-6,70 (m, 12H, Ar H-14), 6,52 (br s, 1H, H-5), 5,53 (d, 1H, J = 16,4 Hz, H-17), 5,44-4,48 (m, 5 H), 3,87 (br s, 1H, OH), 1,90-1,70 (m, 2H, H-19), 0,99 (t, 3 H, J = 7,6 Hz, Me),<13>C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 173,4, 158,0, 156,3, 156,1, 153,0, 151,0, 150,9, 149,6, 145,3, 135,5, 132,3, 130,8, 129,8, 128,7-127,8 (11 C), 119,8, 98,4, 79,5, 72,7, 68.5, 67,8, 66,0, 31,6, 7,7.
EKSEMPEL XXI - Cellevekstinhiberingsundersøkelse
H460 celler fra menneskelig stor-celle lungetumor ble dyrket i RPMI-1640 medium inneholdende 10 % føtalt kalveserum. Cellesensitivitet ble bestemt ved cellevekstinhiberingsassay etter å ha vært utsatt for legemiddel il eller 72 timer. Cellene i logaritmisk vekst ble oppsamlet og sådd i 6-brønnsplater. Tjuefire timer etter såing ble cellene utsatt for legemidlet og telt med en Coulterteller IC50s. IC50er definert som den konsentrasjonen som inhiberes ved 50 % cellevekst sammenlignet med ubehandlede kontrolldyrkninger.
EKSEMPEL XXII - Topoisomerase-I - avhengig DNA-rupturundersøkelse
DNA-rupturer ble bestemt ved å anvende en751-bp BamHI-EcoRI DNA SV40 renset gel (Beretta G.L., Binaschi M., Zagni A.N.D., Capuani L, Capranico G. Tethering a type IB topoisomerase to a DNA site by enzyme fusion to a heterologous siteselective DNA-binding protein domain. Cancer Res 1999; 59:3689-97). DNA-fragmenter ble kun merket ved 3'. DNA-rupturreaksjonen (20,000 cpm/prøve) ble utført i 20 ml 10 mM Tris-HCL (pH 7,6), 150 mM KCI, 5 mM MgCI2, 15 pg/ml BSA, 0,1 mM tiotreitol, og det menneskelige rekombinante enzymet (full lengde topi) i 30 min ved 37°C. Reaksjonene ble blokkert ved å anvende 0,5 % SDS og 0,3 mg/ml K proteinase i 45 min. ved 42°C. DNA-skademotstand ble testet ved ulike tidspunkter ved å tilsette 0,6 M NaCI etter 30 min. inkubasjon med 10 μΜ av legemidlet. Etter presipitering ble DNA resuspendert i denatureringsbuffer (80 % formamid, 10 mM NaOH, 0,01 M EDTA og 1 mg/ml farge) før såing i denatureringsgel (7% polyakrylamid i TBE buffer). Alle DNA rupturnivåer ble målt ved hjelp av-Phospholmager model 425 (Molecular Dynamics) (Dallavalle S., Ferrari A., Biasotti B., et al. Novel 7-oksyiminometyl Camptotecin derivatives with potent in vitro and in vivo antitumor activity. J Med Chem 2001; 44:3264-74).
Motstand mot DNA-skade (%)

Claims (11)

  1. P a t e n t k r a v 1. Forbindelser av generell formel I:
    (I) hvori: R er F, RI er hydrogen, alkyl, aminoalkyl, hydroksyalkyl, nitril, alkoksymino, aryloksymino, silylalkyl; R2 er hydrogen, hydroksyl, alkoksy, aminoalkyl; R3 er hydrogen, hydroksyl, alkoksy, aminoalkyl, forutsatt at når RI er hydrogen, så er R2 og R3 hydrogen; hvori alkyl-, alkoksy-, aminoalkyl- eller alkoksyminogruppene kan inneholde 1 til 8 karbonatomer i en rett eller forgrenet kjede, og aryloksygruppene kan inneholde 5 til 10 karbonatomer; de farmasøytisk akseptable saltene, enantiomerene, diastereomerene derav samt tilsvarende blandinger.
  2. 2. Forbindelse av formel (I) ifølge krav 1, som er: a) 5-F-kamptothecin.
  3. 3. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser av formel (I) ifølge krav 1, omfattende trinnene vist i det følgende Skjema, hvori a) beskyttelse av grunnsubstanshydroksygruppene; b) derivatisering ved 5 gjennom dannelse av et karbanion og reaksjon med et elektrofilt reagensmiddel; c) avbeskyttelse av hydroksygruppene; Skjema I
    hvori R, RI, R2 og R3 har betydningene beskrevet ovenfor og PG er en OH-beskyttende gruppe.
  4. 4. Farmasøytisk sammensetning inneholdende en forbindelse av formel (I) ifølge krav 1 sammen med farmasøytisk akseptable bærere og eksipienter.
  5. 5. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 4, som er i en form egnet for oral eller parenteral administrasjon.
  6. 6. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 2 eller av en sammensetning ifølge krav 4 eller 5 for fremstillingen av et legemiddel for behandling av tumorer.
  7. 7. Anvendelse ifølge krav 6, hvori nevnte legemiddel anvendes for behandlingen av faste tumorer og leukemier.
  8. 8. Anvendelse ifølge krav 6 eller 7, hvor nevnte medikament anvendes til behandling av tumorer på lunge, eggstokk, bryst, mage, lever, prostata, mykt vevsarcomer, spiserør, bukspyttkjertel, hode og hals, glioblastoma, kroniske og akutte myelocyttiske leukemier.
  9. 9. Forbindelse av den generelle formel (I) ifølge krav 1 eller 2 for anvendelse ved behandling av tumorer.
  10. 10. Forbindelse for anvendelse ifølge krav 9, hvor tumorene er faste tumorer eller leukemier.
  11. 11. Forbindelse for anvendelse ifølge krav 9 eller 10, hvor tumorene er valgt fra gruppen bestående av tumorer hos lunge, eggstokk, bryst, mage, lever, prostata, mykt vevsarcomer, spiserør, bukspyttkjertel, hode og hals, glioblastoma, kroniske og akutte myelocyttiske leukemier.
NO20090252A 2006-07-26 2009-01-16 Camptotecinderivater med antitumoraktivitet NO342506B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT001474A ITMI20061474A1 (it) 2006-07-26 2006-07-26 Derivati della camptotecina ad attivita antitumorale
PCT/EP2007/006294 WO2008012003A1 (en) 2006-07-26 2007-07-16 Camptothecin derivatives with antitumor activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20090252L NO20090252L (no) 2009-01-16
NO342506B1 true NO342506B1 (no) 2018-06-04

Family

ID=38668855

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20090252A NO342506B1 (no) 2006-07-26 2009-01-16 Camptotecinderivater med antitumoraktivitet

Country Status (20)

Country Link
US (1) US8193210B2 (no)
EP (1) EP2044080B1 (no)
JP (1) JP5313895B2 (no)
KR (1) KR101496374B1 (no)
CN (1) CN101495485B (no)
AU (1) AU2007278509B2 (no)
BR (1) BRPI0714672B8 (no)
CA (1) CA2658902C (no)
DK (1) DK2044080T3 (no)
ES (1) ES2628022T3 (no)
HK (1) HK1135692A1 (no)
IL (1) IL196652A0 (no)
IT (1) ITMI20061474A1 (no)
MX (1) MX2009000828A (no)
NO (1) NO342506B1 (no)
PL (1) PL2044080T3 (no)
PT (1) PT2044080T (no)
RU (1) RU2450007C2 (no)
SI (1) SI2044080T1 (no)
WO (1) WO2008012003A1 (no)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9379559B2 (en) 2012-02-03 2016-06-28 International Business Machines Corporation System and method of charging a vehicle using a dynamic power grid, and system and method of managing power consumption in the vehicle
PL235836B1 (pl) * 2012-10-25 2020-11-02 Inst Chemii Organicznej Polskiej Akademii Nauk Pochodne kamptotecyny, sposób ich otrzymywania i zastosowanie
CN108690036B (zh) * 2018-05-22 2021-05-25 北京海步医药科技股份有限公司 一种10-二氟甲基喜树碱类化合物及其制备方法和应用
LU102067B1 (en) 2020-09-17 2022-03-18 Narodowy Inst Lekow 7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin derivatives for use in the treatment of cancer

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5972955A (en) * 1995-06-06 1999-10-26 Dr. Reddy's Research Foundation Water soluble C-ring analogues of 20(S)-camptothecin

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1282673B1 (it) * 1996-02-23 1998-03-31 Ist Naz Stud Cura Dei Tumori Derivati della camptotecina e loro uso come agenti antitumorali

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5972955A (en) * 1995-06-06 1999-10-26 Dr. Reddy's Research Foundation Water soluble C-ring analogues of 20(S)-camptothecin

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRUNIN, T. LEGENTIL, L. HENICHART, J.P. RIGO, B.: "Towards new camptothecins. Part 3: Synthesis of 5-methoxycarbonyl camptothecin", TETRAHEDRON, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS, AMSTERDAM, NL, vol. 62, no. 17, 24 April 2006 (2006-04-24), AMSTERDAM, NL, pages 3959 - 3968, XP005367069, ISSN: 0040-4020, DOI: 10.1016/j.tet.2006.02.034 *
SUBRAHMANYAM D ET AL. "Novel C-ring analogues of 20(S)-camptothecin. Part 3: synthesis and their in vitro cytotoxicity of A-, B- and C-ring analogues", BIOORG MED CHEM LETT. 2000, vol. 10(4), s. 369-71 , Dated: 01.01.0001 *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2009102241A (ru) 2010-07-27
ES2628022T3 (es) 2017-08-01
AU2007278509A1 (en) 2008-01-31
KR101496374B1 (ko) 2015-03-04
PL2044080T3 (pl) 2017-10-31
PT2044080T (pt) 2017-06-15
BRPI0714672A2 (pt) 2013-03-26
US8193210B2 (en) 2012-06-05
CN101495485A (zh) 2009-07-29
CN101495485B (zh) 2012-04-11
IL196652A0 (en) 2009-11-18
ITMI20061474A1 (it) 2008-01-27
BRPI0714672B8 (pt) 2021-05-25
EP2044080A1 (en) 2009-04-08
NO20090252L (no) 2009-01-16
RU2450007C2 (ru) 2012-05-10
JP5313895B2 (ja) 2013-10-09
EP2044080B1 (en) 2017-05-10
JP2010500971A (ja) 2010-01-14
CA2658902C (en) 2014-09-23
CA2658902A1 (en) 2008-01-31
US20100010032A1 (en) 2010-01-14
DK2044080T3 (en) 2017-07-17
WO2008012003A1 (en) 2008-01-31
AU2007278509B2 (en) 2012-10-04
HK1135692A1 (en) 2010-06-11
SI2044080T1 (sl) 2017-07-31
BRPI0714672B1 (pt) 2020-10-20
KR20090032100A (ko) 2009-03-31
MX2009000828A (es) 2009-02-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2658900C (en) Camptothecin derivatives with antitumor activity
NO342506B1 (no) Camptotecinderivater med antitumoraktivitet
CA2659050C (en) Camptothecin derivatives with antitumor activity

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees