[go: up one dir, main page]

NO338097B1 - Fremstilling av pregabalin og beslektede forbindelser. - Google Patents

Fremstilling av pregabalin og beslektede forbindelser. Download PDF

Info

Publication number
NO338097B1
NO338097B1 NO20065329A NO20065329A NO338097B1 NO 338097 B1 NO338097 B1 NO 338097B1 NO 20065329 A NO20065329 A NO 20065329A NO 20065329 A NO20065329 A NO 20065329A NO 338097 B1 NO338097 B1 NO 338097B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
formula
compound
salt
alkyl
cycloalkyl
Prior art date
Application number
NO20065329A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20065329L (no
Inventor
Shanghui Hu
Carlos Alberto Martinez
Junhua Tao
William Eugene Tully
Patrick Gerard Thomas Kelleher
Yves Rene Dumond
Original Assignee
Warner Lambert Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35295367&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO338097(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Warner Lambert Co filed Critical Warner Lambert Co
Publication of NO20065329L publication Critical patent/NO20065329L/no
Publication of NO338097B1 publication Critical patent/NO338097B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/12—Formation of amino and carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C253/00—Preparation of carboxylic acid nitriles
    • C07C253/30—Preparation of carboxylic acid nitriles by reactions not involving the formation of cyano groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/04—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups
    • C07C227/06—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups by addition or substitution reactions, without increasing the number of carbon atoms in the carbon skeleton of the acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/14—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from compounds containing already amino and carboxyl groups or derivatives thereof
    • C07C227/18—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from compounds containing already amino and carboxyl groups or derivatives thereof by reactions involving amino or carboxyl groups, e.g. hydrolysis of esters or amides, by formation of halides, salts or esters
    • C07C227/20—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from compounds containing already amino and carboxyl groups or derivatives thereof by reactions involving amino or carboxyl groups, e.g. hydrolysis of esters or amides, by formation of halides, salts or esters by hydrolysis of N-acylated amino-acids or derivatives thereof, e.g. hydrolysis of carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/22—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from lactams, cyclic ketones or cyclic oximes, e.g. by reactions involving Beckmann rearrangement
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/24—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one carboxyl group bound to the carbon skeleton, e.g. aspartic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/19—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms containing cyano groups and carboxyl groups, other than cyano groups, bound to the same saturated acyclic carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/273—2-Pyrrolidones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
    • C07D207/277—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/001—Amines; Imines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/002—Nitriles (-CN)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Det beskrives materialer og framgangsmåter for framstilling av (S)-(+)-3aminometyl-5-metyl-heksanoisk syre og strukturelt beslektede forbindelser via enzymatisk kinetisk resolusjon.

Description

OMRÅDE FOR OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse vedrører fram gangs måter og materialer for å framstille enantiomerisk anrikete y-aminosyrer som angitt i innledningen i krav 1, samt forbindelser som angitt i kravene 8-13, via enzymatisk kinetisk resolusjon, og er spesielt nyttig for å framstille y-aminosyrer som oppviser bindingsaffinitet til den humane oc25 -kalsiumkanal subenhet, inkluderende pregabalin og beslektede forbindelser.
DISKUSJON
Pregabalin, (S)-(+)-3-aminometyl-5-metyl-hekasonisksyre er relatert til den endogene inhibitoriske neurotransmittery-aminosmørsyre (GABA), som er involvert i reguleringen av neuronal aktivitet i hjernen. Pregabalin oppviser anti-anfall-aktivitet, som beskrevet i US patent nr. 5,563,175 av R. B. Silverman et al., og er tenkt å være nyttig for å behandle, blant andre tilstander, smerte, fysiologiske tilstander assosiert med psykomotor-stimulerende midler, inflammasjon, gastrointestinal skade, alkoholisme, insomniaog forskjellige psykiatriske forstyrrelser, inkludert mani og bipolar forstyrrelse. Se, respektivt, US patentnr 6,242,488 av L. Bueno et al., US patent 6,326,374 av L. Magnus & C. A. Segal, og US patent 6,001,876 av L. Singh; US patent 6,194,459 to H. C. Akunne et al.; US
patent 6,329,429 to D. Schrier et al.; US patent 6,127,418 av L. Bueno et al.; US
patent 6,426,368 to L. Bueno et al US patent 6,306,910 av L. Magnus & C. A. Segal; og US patentr 6,359,005 av A. C. Pande.
Pregabalin har blitt framstilt på forskjellige måter. Typisk, en racemisk blanding av 3-aminometyl-5-metyl-heksanoisk syre syntetiseres og deretter resolveres til dets R- og S-enantiomerer. Slike framgangsmåter kan benytte et azid-mellomprodukt, etmalonat-mellomprodukt, eller Hofman-syntese. Se respektivt US patent 5,563,175 av R. B. Silverman et al.; US patent 6,046,353, 5,840,956, og 5,637,767 til T. M. Grote et al.; og US patent 5,629,447 og 5,616,793 to B. K. Huckabee & D. M. Sobieray. I hver av disse framgangsmåter omdannes racematetmeden kiral syre (et resolverende middel) for å danne et par av diastereoisomeriske salter, som separeres med kjente teknikker så som fraksjonert krystallisasjon og kromatografi. Disse framgangsmåter involverer således betydelig prosessering i tillegg til framstilling av racematet, som sammen med det resolverende middel, gir økte produksjonskostnader. Imidlertid, de uønskede R-enantiomer kastes ofte siden den ikke kan resirkuleres effektivt, og reduserer dermed den effektive gjennomstrømning for prosessen med 50 %.
Pregabalin har også blitt syntetisert direkte ved anvendelse av kirale hjelpemidler, (4f?,5S)-4-metyl-5-fenyl-2-oksazolidinon. Se for eksempel US patenter 6,359,169, 6,028,214, 5,847,151, 5,710,304, 5,684,189, 5,608,090, og 5,599,973, alle til R. B. Silverman et al.
Selv om disse framgangsmåter tilveiebringer pregabalin i storenantiomeriske renhet, er de mindre hensiktsmessige for storskala syntese på grunn av at de benytter forholdsvis kostnadsdyre reagenser (for eksempel det kirale hjelpemiddel) som er vanskelig å håndtere, og likeledes et spesial kryogenisk utstyr for å nå den nødvendige operasjons temperatur, som kan være så lav som -78°C.
En nylig publisert US patentsøknad beskriver en framgangsmåte for å framstille pregabalin via asymmetrisk hydrogenering av en cyano-substituert olefin for å produsere en kiral cyano-forløper av(S)-3-aminometyl-5-metylheksanoisksyre. Se US patentsøknad nr 2003/ 0212290 A1 av Burketal., publisert 13. november 2003,. Cyano-forløperen reduseres deretter for å gi pregabalin. Den asymmetriske hydrogenering benytter en kiral katalysator som utgjøres aven overgangsmetallbinding til en biofosfin-ligand såsom (f?,f?)-Me-DUPHOS. Framgangsmåten resulterer i betydelig anriking av pregabalin over (R)-3-(am inom etyl)-5- m etyl heks anois k syre.
Framgangsmåten beskrevet i US patent 2003/0212290 A1 representerer en kommersielt gjennomførbar framgangsmåte for framstilling av pregabalin, men ytterligere forbedringer vil være ønskelig av forskjellige grunner. For eksempel, fosfin-ligander, inkluderende liganden (R,R)-Me-DUPHOS, er ofte vanskelig å framstille på grunn av at de oppviser to kirale sentre, som gjør at de blir dyrere. Videre, asymmetrisk hydrogenering krever anvendelse av spesielt utstyr i stand til å håndtere H2, som også fordyrer reaksjonen.
SAMMENDRAG AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer materialer og fram gangs måter for å framstille enantiomerisk anrikete y-aminosyrer (formel 1) så som pregabalin (formel 9). Framgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse involverer en kinetisk resolusjon aven racemisk cyanodiester-mellomprodukt (formel 4 eller formel 12) ved anvendelse av et enzym som er tilpasset til enantio-selektiv hydrolyse av en esterenhet av mellomprodukter. Den resulterende dikarboksyliske syre monoester (formel 3 eller formel 11), som i vesentlig grad er enantioren, undergår ytterligere reaksjon for å gi det ønskede enantiomerisk anrikede y-aminosyrer (formel 1 eller formel 9). Den ikke-reagerte enantiomer (formel 5 eller formel 13) fra den kinetiske resolusjon kan anvendes på nytt i den enzymatiske resolusjon som følger racemiseringen, og dermed forbedrer det totale utbytte.
Framgangsmåten som det er satt opp krav på gir betydelige fordeler over eksisterende fram gangs måter for å framstille de enantiomerisk anrikede y-aminosyrer (formel 1 og formel 9). For eksempel kan de optisk aktive y-aminosyrer framstilles uten anvendelse av kirale hjelpemidler eller rettighetsbeskyttede hydrogeneringskatalysatorer, som bør føre til en lavere enhetskostnad. Siden enzymatiske prosesser kan utføres ved romtemperatur og ved atmosfærisk trykk, kan framgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse hjelpe til å minimere planleggings konflikter som skyldes anvendelse av spesialisert utstyr i stand til å håndtere høyt trykk og lav temperatur. Som angitt i eksemplene, foreliggende oppfinnelse kan anvendes for å framstille pregabalin med utgangspunkt i en racemiskcyano-substituert diester (formel 12), gir godt utbytte (26 % til 31 %) etter en enkel batch resirkulering av den ikke-reagerte enantiomer (formel 13). Dette kan overføres til caen 50 % sparing i kostnader i forhold til malonat-metoden beskrevet ovenfor.
I et aspekt vedrører den foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for å framstille en forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2 alkyl, C3-12 sykloalkyl, og substituert C3.12 sykloalkyl, kjennetegnet ved at framgangsmåten omfatter:
(a) å omdanne en forbindelse av formel 2,
eller et salt derav, med en syre og vann for å gi en forbindelse av formel 1 eller et salt derav, og (b) valgfritt å omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 i formel 2 er som definert i formel 1. I en foretrukket utførelse omfatter framgangsmåten ytterligere å redusere en cyano-enhet av en forbindelse av formel 3,
eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 2 eller et salt derav, hvorR<1>og R2 i formel 3 er definert som i formel 1; og
R<3>i formel 3 er d-12 alkyl, C3.12sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl.
I en foretrukket utførelse omfatter framgangsmåten ytterligere:
(a) å sette en forbindelse av formel 4,
i kontakt med et enzym for å gi forbindelsen av formel 3, eller et salt derav, og en forbindelse av formel 5,
hvor enzymet er tilpasset for enantio-selektiv å hydrolysere forbindelsen av formel 4 til forbindelsen av formel 3 eller et salt derav;
(b) å isolere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; og (c) valgfritt racemisere forbindelsen av formel 5 for å gi forbindelsen av formel 4, hvorR<1>,R<2>, ogR<3>i formel 4 og formel 5 er som definert i formel 3; og
R4 i formel 4 og formel 5 er de samme som eller forskjellig fra R3 og er d.12alkyl,
C3-12sykloalkyl, eller aryl-Ci.6alkyl.
I en foretrukket utførelse er fremgangsmåten for framstilling aven forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, kjennetegnet ved at framgangsmåten omfatter:
(a) å redusere en cyano-enhet av en forbindelse av formel 6,
eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 7,
eller et salt derav
(b) dekarboksylere forbindelsen av formel 7 eller et salt derav for å gi forbindelsen av formel 1 eller et salt derav; og (c) valgfritt å omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat, hvor R<1>og R2 i formel 6 og i formel 7 er som definert i formel 1. I en foretrukket utførelse er fremgangsmåten for fremstilling av en forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2 alkyl, C3-12 sykloalkyl og substituert C3.12 sykloalkyl, hvor frem gangs måten omfatter;
(a) dekarboksylere en forbindelse av formel 3
eller et salt derav, eller hydrolysere og dekarboksylere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 8 eller et salt derav; (b) å redusere en cyano-enhet av forbindelsen av formel 8 eller et salt derav, for å gi forbindelsen av formel 1 eller et salt derav; og (c) valgfritt omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk
akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat, hvor
R<1>og R2 i formel 3 og formel 8 er hver som definert for formel 1;
R3 i formel 3 er d-12 alkyl, C3.12sykloalkyl eller aryl-d-e alkyl;
R5 i formel 8 er hydrogenatom, d-12 alkyl, C3.i2sykloalkyl eller aryl-d_6 alkyl.
I en foretrukket utførelse er framgangsmåten for å framstille en forbindelse av formel 3,
eller et salt derav, hvor
R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12 alkyl,
C3-12sykloalkyl, og substituert C3_i2 sykloalkyl, og R<3>is d-12alkyl, C3_i2sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl, kjennetegnet ved at framgangsmåten omfatter:
(a) å sette en forbindelse av formel 4,
i kontakt med et enzym for å gi forbindelsen av formel 3 og en forbindelse av formel 5,
hvor enzymet er tilpasset enantio-selektiv hydrolysering av forbindelsen av formel 4 til forbindelsen av formel 3 eller et salt derav;
(b) å isolere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; og
(c) valgfritt racemisere forbindelsen av formel 5 for å gi forbindelsen av formel 4, hvorR<1>,R<2>, og R<3>i formel 4 og formel 5 er som definert ovenfor i formel 3; og
R4 i formel 4 og formel 5 er den samme som eller forskjellig fra R3 og er d.12alkyl,
C3-12sykloalkyl, eller aryl-Ci.6alkyl.
I en foretrukket utførelse, i samsvar med ethvert av utførelsene over, er R<1>et hydrogenatom og R2 er isobutyl i forbindelsene av formel 1 til formel 8.
I et andre aspekt vedrører foreliggende oppfinnelsen en forbindelse, kjennetegnet ved at den er av formel 2,
inkluderende salter derav, hvor
R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2 alkyl,
C3-12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke C1.3alkyl eller C5alkyl.
I et ytterligere aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse en forbindelse, kjennetegnet ved at den er av formel 3,
inkluderende salter derav, hvor
R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12 alkyl,
C3-12sykloalkyl, og substituert C3_i2sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke Ci_3alkyl eller C5alkyl.
I et ytterligere aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse en forbindelse ev formel 5,
inkluderende salter derav, hvor
R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12alkyl,
C3.12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke d_3 alkyl eller d alkyl.
I et ytterligere aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse en forbindelse ev formel 6,
inkluderende salter derav, hvor
R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12 alkyl,
C3.i2sykloalkyl, og substituert C3.i2sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke d_3 alkyl eller d alkyl.
I et ytterligere aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse en forbindelse ev formel 7,
inkluderende salter derav, hvor
R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2 alkyl, C3-12 sykloalkyl, og substituert C3.12 sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R2 er hydrogen, er den andre substituent ikke d.3 alkyl eller C5 alkyl.
I et ytterligere aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse en forbindelse valgt blant:
(S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-karboksylisk syre
(3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre,
(2S,3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre,
(2f?,3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre,
( R)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester;
(S)- 3-cyano-2-karboksy-5-metyl-heksanoisk syre,, og
(S)-3-am inom etyl-2-karboksy-5-m etyl-heksanois k syre,
inkluderende salter derav og motsatte enantiomerer derav.
Den foreliggende oppfinnelse inkluderer alle komplekser og salter, enten de er farmasøytisk akseptable eller ikke, solvater, hydrater og polymorfe former av de beskrevne forbindelser. Visse forbindelser kan inneholde en alkenyl eller syklisk gruppe slik at cis/ trans (eller Z/ E) stereoisomerer er mulig, eller kan inneholde en keto- eller oksimgruppe slikattautomerisme kan forekomme. I slike tilfeller inkluderer foreliggende oppfinnelse generelt alle ZIE-isomererog tautomeriske former, en den er rene, vesentlig rene eller blandinger.
KORT BESKRIVELSE AV FIGURENE
Fig. 1 avbilder et skjema for framstilling av enantiomerisk anrikete y-aminosyrer (formel 1). Fig. 2 avbilder et skjema for framstilling av cyano-substituerte diestere (formel 4).
DETAUERT BESKRIVELSE
DEFINISJONER OG FORKORTELSER
Med mindre annet er angitt benytter beskrivelsen definisjonene gitt nedenfor. Noen av
definisjonene av formlene kan inkludere et bindestrek ("-")forå indikere en binding mellom atomer eller et tilfestingspunkt til et navngitt eller ikke-navngitt atom eller gruppe av atomer. Andre definisjoner og form ler kan inkludere et likhetstegn ("=") eller et identitetssymbol ("=') for å indikere en dobbeltbinding eller en trippebinding, respektivt. Visse former kan også inkludere én eller flere stjerner ("<*>") for å indikere stereogenisk (asymmetrisk eller kirale) sentre, selv om fravær av en stjerne ikke indikerer at forbindelsen mangler et stereosenter. Slike formler kan referere til racematet til individuelle enantiomerer eller til individuelle diastereomerer, som kan eller ikke trenger å være rene eller vesentlig rene. ;"Substituerte" grupper er de hvor én eller flere hydrogenatomer har blitt erstattet med én eller flere ikke-hydrogengrupper, gitt at valenskravene oppfylles, og at en kjemisk stabil forbindelse er resultatet av substitueringen. ;"Ca" eller "omtrentlig" idet de anvendes i forbindelse med en målbar numerisk verdi, refererer til den tiltenkte verdi av variabelen og til alle verdier av variabelen som er innenfor den eksperimentelle feil av den indikerte verdi, for eksempel innen 95 % konfidensintervall for gjennomsnittet eller innen ±10 prosent av den indikerte verdi, hvor den er størst. ;"Alkyl" refererer til en rettkjedete og forgrenet mettet hydrokarbongruppe, som generelt har et spesifisert antall karbonatomer (det vil si d-e alkyl refererer til en alkylgruppe som er 1, 2, 3, 4, 5, eller 6 karbonatomer, og d-12alkyl referer til en alkylgruppe som har 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10,11, eller 12 karbonatomer). Eksempler på alkylgrupper inkluderer, uten ;begrensning, metyl, etyl, n-propyl,/-propyl, n-butyl, s-butyl,/-butyl, f-butyl, pent-1-yl, pent-2-yl, pent-3-yl, 3-metylbut-1-yl, 3-metylbut-2-yl, 2-metylbut-2-yl, 2,2,2-trimetylet-1-yl, n-heksyl, og lignende. ;"Alkenyl" refererer til rettkjedete eller forgrenede hydrokarbongrupper som har en eller flere umettede karbon-karbon-bindinger, og som generelt har et spesifikt antall karbonatomer. Eksempler på alkenylgrupper inkluderer, uten begrensning, etenyl, 1-propen-1-yl, 1-propen- ;2-yl, 2-propen-1-yl, 1-buten-1-yl, 1-buten-2-yl, 3-buten-1-yl, 3-buten-2-yl, 2-buten-1-yl, 2-buten-2-yl, 2-metyl-1-propen-1-yl, 2-metyl-2-propen-1-yl, 1,3-butadien-1-yl, 1,3-butadien-2-yl, og lignende. ;"Alkynyl" refererer til rettkjedete eller forgrenede hydrokarbongrupper som har en eller flere trippel karbon-karbon-bindinger, og som generelt har et spesifikt antall karbonatomer. Eksempler på alkenylgrupper inkluderer, uten begrensning, etynyl, 1-propyn-1-yl, 2-propyn-1-yl, 1-butyn-1-yl, 3-butyn-1-yl, 3-butyn-2-yl, 2-butyn-1-yl, og lignende. ;"Alkanoyl" og "alkanoylamino" refererer, respektivt, til alkyl-C(O)- og alkyl-C(0)-NH-, hvor alkyl er definert ovenfor, og inkluderer generelt et spesifisert antall karbonatomer, inkluderende karbonylkarbonet. Eksempler på alkanoylgrupper inkluderer, uten begrensning, formyl, acetyl, propionyl, butyryl, pentanoyl, heksanoyl, og lignende. ;"Alkenoyl" og "alkynoyl" refererer, respektivt til alkenyl-C(O)- og alkynyl-C(O)-, hvor alkenyl og alkynyl er som definert ovenfor. Referanser til alkenoyl og alkynoyl inkluderer generelt et spesifisert antall karbonatomer, ekskluderende karbonylkarbonet. Eksempler på alkenoylgrupper inkluderer, uten begrensning, propenoyl, 2-metylpropenoyl, 2-butenoyl, 3-butenoyl, 2-metyl-2-butenoyl, 2-metyl-3-butenoyl, 3-metyl-3-butenoyl, 2-pentenoyl, 3-pentenoyl, 4-pentenoyl, og lignende. Eksempler på alkynoylgrupper inkluderer, uten begrensning, propynoyl, 2-butynoyl, 3-butynoyl, 2-pentynoyl, 3-pentynoyl, 4-pentynoyl, og lignende. ;"Alkoksy", "alkoksykarbonyl", og "alkoksykarbonylamino," refererer, respektivt, til alkyl-O-, alkenyl-O, og alkynyl-O; til alkyl-O-C(O)-, alkenyl-O-C(O)-, alkynyl-O-C(O)-; og til alkyl-O-C(0)-NH-, alkenyl-0-C(0)-NH-, og alkynyl-0-C(0)-NH-, hvor alkyl, alkenyl, og alkynyl er definert ovenfor. Eksempler på alkoksygrupper inkluderer, uten begrensning, metoksy, etoksy, n-propoksy,/-propoksy, n-butoksy, s-butoksy, f-butoksy, n-pentoksy, s-pentoksy, og lignende. Eksempler på alkoksykarbonylgrupper inkluderer, uten begrensning, metoksy-karbonyl, etoksykarbonyl, n-propoksykarbonyl,/-propoksykarbonyl, n-butoksykarbonyl, s-butoksykarbonyl, f-butoksykarbonyl, n-pentoksykarbonyl, s-pentoksylarbonyl, og lignende. ;"Alkylamino", "alkylaminokarbonyl", "dialkylaminokarbonyl", "alkylsulfonyl", "sulfonylamino-alkyl" og "alkylsulfonylaminokarbonyl" referererer, respektivt til alkyl-NH-, alkyl-NH-C(O)-, ;alkyl2-N-C(0)-, alkyl-S(02)-, HS(02)-NH-alkyl-, og alkyl-S(0)-NH-C(0)- hvor alkyl er som definert ovenfor. ;"Aminoalkyl" og "cyanoalkyl" refererer, respektivt, til NH2-alkyl og N=C-alkyl, hvor alkyl er definert ovenfor. ;"Halo," "halogen" og "halogeno" kan anvendes om hverandre, og refererer til fluor, klor, brom og iod. ;"Haloalkyl", "haloalkenyl", "haloalkynyl", "haloalkanoyl", "haloalkenoyl", "haloalkynoyl", "haloalkoksy" og "haloalkoksykarbonyl" refererer, respektivt, til alkyl, alkenyl, alkynyl, alkanoyl, alkenoyl, alkynoyl, alkoksy, og alkoksykarbonylgrupper substituert med ett eller flere halogenatomer, hvor alkyl, alkenyl, alkynyl, alkanoyl, alkenoyl, alkynoyl, alkoksy, og alkoksy karbonyl er som definert over. Eksempler på halooalkylgrupper inkluderer, uten begrensning, trifluorometyl, triklormetyl, pentafluoretyl, pentakloretyl, og lignende. ;"Hydroksyalkyl" og "oksoalkyl" referer, respektivt til HO-alkyl og 0=alkyl, hvor alkyl er som definert ovenfor. Eksempler på hydroksyalkyl og oksoalkylgrupper inkluderer, rensning, hydroksymetyl, hydroksyetyl, 3-hydroksypropyl, oksometyl, oksoetyl, 3-oksopropyl, og lignende. ;"Sykloalkyl" refererer til mettet monosyklisk og bisyklisk hydrokarbonringer, generelt som har et spesifisert antall karbonatomer som utgjør ringen (dvs. C3.7sykloalkyl) refererer til en sykloalkylgruppe som har 3, 4, 5, 6 eller 7 karbonatomer som ringmedlemmer. Sykloalkylet kan være festet til en morgruppe eller til et substrat av ethvert ringatom, med mindre slik tilpasning vil ødelegge valens kravene. Likeledes, sykloalkylgruppene kan inkludere en eller flere ikke-hydrogensubstituenter med minst slik substituering vil ødelegge valens kravene. Nyttige substituenter inkluderer, uten begrensning, alkyl, alkenyl, alkynyl, haloalkyl, haloalkenyl, haloalkynyl, alkoksy, alkoksykarbonyl, alkanoyl, og halo, som definert ovenfor, og hydroksy, merkapto, nitro, og amino. ;Eksempler på monosyklisk sykloalkylgrupper inkluderer, uten begrensning, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, sykloheksyl og lignende. Eksempler på bisykliske sykloalkylgrupper inkluderer, uten begrensning, bisyklo[1.1.0]butyl, bisyklo[1.1.1]pentyl, bisyklo[2.1.0]pentyl, bisyklo[2.1.1]heksyl, bisyklo[3.1.0]heksyl, bisyklo [2.2.1]heptyl, bisyklo[3.2.0]heptyl, bisyklo- ;[3.1.1]heptyl, bisyklo[4.1.0]heptyl, bisyklo[2.2.2]oktyl, bisyklo 3.2.1]oktyl, bisyklo[4.1.1]oktyl, bisyklo[3.3.0]oktyl, bisyklo [4.2.0]oktyl, bisyklo[3.3.1]nonyl, bisyklo[4.2.1]nonyl, bisyklo-[4.3.0]nonyl, bisyklo [3.3.2]decyl, bisyklo[4.2.2]decyl, bisyklo[4.3.1]decyl, bisyklo[4.4.0]decyl, bisyklo [3.3.3]undecyl, bisyklo[4.3.2]undecyl, bisyklo[4.3.3]dodecyl, og lignende, som kan være festet til en morgruppe eller substrat ved en vilkårlig av ringatomene, med mindre slik tilfesting vil ødelegge valens kravene. ;"Sykloalkenyl" refererer monosykliske og bisykliske hydrogenkarbonringer som har en eller flere enn en umettet karbon-karbon-bindinger og som generelt har et spesifisert antall karbonatomer som utgjør ringen (dvs. C3.7sykloalkenyl referer til sykloalkenylgruppe som har 3, 4, 5, 6 eller 7 karbonatomer som ringmedlemmer). Sykloalkenylen kan være festet til en morgruppe eller til et substrat av et vilkårlig ringatom, med mindre slik tilfesting vil ødelegge valenskravene. Likeledes, sykloalkenylgruppene kan inkludere en eller flere ikke-hydrogensubstituenter med mindre slik substitusjon vil ødelegge valenskravene. Nyttige substituenter inkluderer, uten begrensning, alkyl, alkenyl, alkynyl, haloalkyl, haloalkenyl, haloalkynyl, alkoksy, alkoksykarbonyl, alkanoyl, og halo, som definert ovenfor, og hydroksy, merkapto, nitro, og amino. ;"Sykloalkanoyl" og "sykloalkenoyl" refererer til sykloalkyl-C(O)- og sykloalkenyl-C(O)-, respektivt, hvor sykloalkyl og sykloalkenyl er som definert ovenfor. Referanser til sykloalkanoyl og sykloalkenoyl inkluderer generelt et spesifisert antall karbonatomer, ekskluderende karbonylkarbonet. Eksempler på sykloalkanoylgrupper inkluderer, uten begrensning, syklopropanoyl, syklobutanoyl, syklopentanoyl, sykloheksanoyl, syklo-heptanoyl, 1-syklobutenoyl, 2-syklobutenoyl, 1-syklopentenoyl, 2-syklopentenoyl, 3-syklopentenoyl, 1-sykloheksenoyl, 2-sykloheksenoyl, 3-sykloheksenoyl, og lignende. ;"Sykloalkoksy" og "sykloalkoksykarbonyl" referer, respektivt, til sykloalkyl-O- og sykloalkenyl-Oog til sykloalkyl-O-C(O)-og sykloalkenyl-O-C(O)-, hvor sykloalkyl og sykloalkenyl er som definert ovenfor. Referanser til sykloalkoksy og sykloalkoksykarbonyl inkluderer generelt et spesifisert antall karbonatomer, eksluderende karbonylkarbonet. Eksempler på sykloalkoksy-grupper inkluderer, uten begrensning, syklopropoksy, syklobutoksy, syklopentoksy, sykloheksoksy, 1-syklobutenoksy, 2-syklobutenokdy, 1-syklopentenoksy, 2-syklopentenoksy, 3-syklopentenoksy, 1-sykloheksenoksy, 2-sykloheksenoksy, 3-sykloheksenoksy, og lignende. Eksempler på sykloalkoksykarbonylgrupper inkluderer, uten begrensning, syklopropoksykarbonyl, syklobutoksykarbonyl, syklopentoksykarbonyl, sykloheksoksy- ;karbonyl, 1-syklobutenoksykarbonyl, 2-syklobutenoksykarbonyl, 1-syklopentenoksykarbonyl, 2-syklopentenoksykarbonyl, 3-syklopentenoksykarbonyl, 1-sykloheksenoksykarbonyl, 2-sykloheksenoksykarbonyl, 3-sykloheksenoksykarbonyl, og lignende. ;"Aryl" og "arylen" refererer til monovalente og divalente aromatiske grupper, respektivt, inkluderende 5- og 6- leddete monosykliske aromatiske grupper som inneholder 0 til 4 heteroatomer uavhengig valgt blant nitrogen, oksygen og svovel. Eksempler på monosykliske arylgrupper inkluderer, uten begrensning, fenyl, pyrrolyl, furanyl, tiofeneyl, tiasolyl, isotiasolyl, imidasolyl, triasolyl, tetrasolyl, pyrasolyl, oksasolyl, isooksasolyl, pyridinyl, pyrasinyl, pyridasinyl, pyrimidinyl, og lignende. Aryl og arylengrupper inkluderer også bisykliske grupper, trisykliske grupper, etc, inkluderende fusjonerte 5- og 6-leddede ringer beskrevet ovenfor. Eksempler på multisykliske arylgrupper inkluderer, uten begrensning, naftyl, bifenyl, antrasenyl, pyrenyl, karbasolyl, bens oksasolyl, bensodioasolyl, bensotiasolyl, bensoimidasolyl, bensotiofeneyl, quinolinyl, isoquinolinyl, indolyl, bensofuranyl, purinyl, indolisinyl, og lignende. Aryl- og arylengruppene kan være festet til en målgruppe eller til et substrat i et vilkårlig ringatom, med mindre slik tilfesting vil ødelegge valenskravene. Likeledes, aryl- og arylengrupper kan inkludere en eller flere ikke-hydrogensubstituenter med mindre slik substitusjon vil ødelegge valenskravene. Nyttige substituenter inkluderer, uten begrensning, alkyl, alkenyl, alkynyl, haloalkyl, haloalkenyl, haloalkynyl, sykloalkyl, sykloalkenyl, alkoksy, sykloalkoksy, alkanoyl, sykloalkanoyl, sykloalkenoyl, alkoksykarbonyl, sykloalkoksykarbonyl, og halo, som definert ovenfor, og hydroksy, merkapto, nitro, amino, og alkylamino. ;"Heteroring" "heterosyklyl" refererer til mettet, partielt umettet eller umettet monosyklisk eller bisykliske ringer som har 5 til 7 eller fra 7 til 11 ringmedlemmer, respektivt. Disse grupper er ringmedlemmersom utgjøres av karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer som er uavhengig nitrogen, oksygen eller svovel, og kan inkludere enhver bisyklisk gruppe hvor enhver av de ovenfor definert monosykliske heteroringer er fusjonert til en benzenring. Nitrogen- og svovelheteroatomer kan valgfritt være oksidert. Den heterosykliske ring kan være festet til en målgruppe eller til et substrat i et vilkårlig heteroatom eller karbonatom, med mindre slik tilfesting vil ødelegge valenskravene. Likeledes, enhver av karbonene eller nitrogenring-medlemmenekan inkludere en ikke-hydrogensubstituenter med mindre slik substitusjon vil ødelegge valenskravene. Nyttige substituenter inkluderer, uten begrensning, alkyl, alkenyl, alkynyl, haloalkyl, haloalkenyl, haloalkynyl, sykloalkyl, sykloalkenyl, alkoksy, sykloalkoksy, ;alkanoyl, sykloalkanoyl, sykloalkenoyl, alkoksykarbonyl, sykloalkoksykarbonyl, og halo, som definert ovenfor, og hydroksy, merkapto, nitro, amino, og alkylamino. ;Eksempler på heteroringer inkluderer, uten begrensning, akridinyl, asosinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzzotiofuranyl, besotiofenyl, benzzksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazolinyl, karbazolyl, 4a/-/- karbasolyl, karbolinyl, kromanyl, kromenyl, sinnolinyl, dekahydroquinolinyl, 2H, 6/-/-1,5,2-ditiasinyl, dihydrofuro[2,3-b]tetrahydrofuran, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imizolinyl, imidazolyl, 1/-/-indasolyl, indolenyl, indolinyl, indolisinyl, indolyl, 3/-/-indolyl, isobensofuranyl, isokromanyl, isoindasolyl, isoindolinyl, isoindolyl, isoquinolinyl, isotiasolyl, isoksasolyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroisoquinolinyl, oksadiasolyl, 1,2,3-oksadiasolyl, 1,2,4-oksadiasolyl, 1,2,5-oksadiasolyl, 1,3,4-oksadiasolyl, oksasolidinyl, oksasolyl, oksasolidinyl, pyrimidinyl, fenantridinyl, fenantrolinyl, fenasinyl, fenotiasinyl, fenoksatiinyl, fenoksasinyl, ftalasinyl, piperasinyl, piperidinyl, fteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrasinyl, pyrasolidinyl, pyrasolinyl, pyrasolyl, pyridasinyl, pyridooksasol, pyridoimidasol, pyridotiasol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, 2/-/-pyrrolyl, pyrrolyl, quinasolinyl, quinolinyl, 4H-quinolisinyl, quinoksalinyl, quinuklidinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydroisoquinolinyl, tetrahydroquinolinyl, 6/-/-1,2,5-tiadiasinyl, 1,2,3-tiadiasolyl, 1,2,4-tiadiasolyl, 1,2,5-tiadiasolyl, 1,3,4-tiadiasolyl, tiantrenyl, thiasolyl, tienyl, tienotiasolyl, tienooksasolyl, tienoimidasolyl, tiofenyl, triasinyl, 1,2,3-triasolyl, 1,2,4-triasolyl, 1,2,5-triasolyl, 1,3,4-triasolyl, og xantenyl. ;"Heteroaryl" og "heteroarylen" refererer, respektivt til monovalente og divalente heteroringer eller heterosyklylgrupper, som definert ovenfor, som er aromatiske. Heteroaryl og hetero-arylengruppene representerer en undergruppe av aryl- og arylengrupper, respektivt. ;"Arylalkyl" og "heteroarylalkyl" refererer, respektivt til aryl-alkyl og heteroaryl-alkyl, hvor aryl, heteroaryl, og alkyl er som definert ovenfor, Eksempler inkluderer, uten begrensning, benzyl, fluorenylmetyl, imidasol-2-yl-metyl, og lignende. ;"Arylalkanoyl", "heteroarylalkanoyl", "arylalkenoyl", "heteroarylalkenoyl", "arylalkynoyl" og "heteroarylalkynoyl" refererer, respektivt, til aryl-alkanoyl, heteroaryl-alkanoyl, aryl-alkenoyl, heteroaryl-alkenoyl, aryl-alkynoyl, and heteroaryl-alkynoyl, hvor aryl, heteroaryl, alkanoyl, alkenoyl, og alkynoyl er definert ovenfor. Eksempler inkluderer, uten begrensning, benzoyl, benzylkarbonyl, fluorenoyl, fluorenylmetylkarbonyl, imidasol-2-oyl, imidasol-2-yl-metyl-karbonyl, fenyletenkarbonyl, 1-fenyletenkarbonyl, 1-fenyl-propenkarbonyl, 2-fenyl- ;propenkarbonyl, 3-fenyl-propenkarbonyl, imidasol-2-yl-etenkarbonyl, 1-(imidasol-2-yl)-etenkarbonyl, 1-(imidasol-2-yl)-propenkarbonyl, 2-(imidasol-2-yl)-propenkarbonyl, 3-(imidasol-2-yl)-propenkarbonyl, fenyletynkarbonyl, fenylpropynkarbonyl, (imidasol-2-yl)-etynkarbonyl, (imidasol-2-yl)-propynkarbonyl, og lignende. ;"Arylalkoksy" og "heteroarylalkoksy" refererer, respektivt, til aryl-alkoksy og heteroarylalkoksy, hvor aryl, heteroaryl, og alkoksy er som definert ovenfor. Eksempler inkluderer, uten begrensning, bensyloksy, fluorenylmetyloksy, imidasol-2-yl-metyloksy, og lignende. ;"Aryloksy" og "heteroaryloksy" refererer, respektivt til aryl-O- og heteroaryl-O-, hvor aryl og heteroaryl er definert ovenfor. Eksem pier inkluder, uten begrensning, fenoksy, imidasol-2-yloksy, og lignende. ;"Aryloksykarbonyl", "heteroaryloksykarbonyl", "aryloksykarbonyl" og "heteroarylalkoksy-karbonyl" refererer, respektivt, til aryloksy-C(O)-, heteroaryloksy-C(O)-, arylalkoksy-C(O)-, og heteroarylalkoksy-C(O)-, hvor aryloksy, heteroaryloksy, arylalkoksy, og heteroarylalkoksy er definert ovenfor. Eksempler inkluderer, uten begrensning, fenoksykarbonyl, imidasol-2-yloksykarbonyl, bensyloksykarbonyl, fluorenylmetyloksykarbonyl, imidasol-2-yl-metyloksy-karbonyl, og lignende. ;"Avgangsgruppe" refererer til enhver gruppe som forlater et molekyl i løpet av en fragmenteringsprosess, inkluderende substitusjonsreaksjoner, eliminerings reaksjoner og addisjon-elimineringsreaksjoner. Avgangsgrupper kan være nukleofugale, hvor gruppen forlater med et par av elektroner som tidligere fungerte som bindingen mellom avgangs-gruppen og molekylet, eller kan være elektrofugale, hvor gruppen som forlater ikke har dette elektronpar. Evnen til en nukleofugal avgangsgruppe til å forlate avhenger av dets basestyrke, hvor de sterkeste baser er de svakeste avgangsgrupper. Vanlige nukleofugale avgangsgrupper inkluderer nitrogen (for eksempel fra diasoniumsalter); sulfonater, inkluderende alkysulfonater (for eksempel mesylat,fluoroalkylsulfonater (foreksempel triflat, heksaflat, nonaflat, og tresylat), og arylsulfonater (for eksempel tosylat, brosylat, klosylat, og nosylat). Andre inkluderer karbonater, halidioner, karboksylationer, fenolationer og alkoksider. Noen sterke baser så som NH2" og OH" kan bli bedre avgangsgrupper med behandling med en syre. Vanlige elektrofugale avgangsgrupper inkluderer protonet, C02, og metaller. ;"Enantiomerisk overskudd" eller "ee" er et mål, for en gitt prøve, for overskuddet av en enantiomer i forhold til en racemisk prøve av en kiral forbindelse og uttrykkes som en prosentandel. Enantiomerisk overskudd er definert som 100 x (er -1) / (er + 1), hvor "er" er forholdet av den mer forekomne enantiomer i forhold til en mindre forekommene enantiomer. ;"Diastereomerisk overskudd" eller "de" er et mål, for en gitt prøve for overskuddet av diastereomer over en prøve som har like mengder av diastereomerer og uttrykkes som en prosentandel. Diastereomerisk overskudd er definert som 100 x (dr -1) / (dr + 1), hvor "er" er forholdet av en mer hyppig diastereomer til en mindre hyppig diastereomer. ;"Stereoselektiv," "enantioselektive," "diastereoselektive," og varianter derav, referer til en gitt prosess (for eksempel esterhydrolyse, hydrogenering, hydroformulering,7i-allyl palladium-kobling hydrosilatiering, hydrocyanering, olefin metatese, hydroacylering, allylamin-isomerisering, etc.) som gir mer av en stereoisomer, enantiomer, eller diastereoisomerenn av den andre, respektivt. ;"Høyt nivå av stereoselektivitet"," "høyt nivå av enantio-selektivitet", "høyt nivå av diastereo-selektivitet" og varianter derav, refererer til en gitt prosess som gir produkter som har et overskudd av en stereoisomer, enantiomer, eller diastereoisomer, som omfatter minst ca 90 % av produktene. For et par av enantiomerer eller diastereomerer, vil et høyt nivå av enantio-selektivitet eller diastereo-selektivitet korrespondere til en ee eller de på minst ca 80 %. ;"Stereoisomerisk anriket," "enantiomerisk anriket," "diastereomeriskanriket," og varianter derav, referer, respektivt, til en prøve av forbindelsen som har mer av en stereoisomer, enantiomer eller diastereomer enn den andre. Graden av anrikning kan måles med % av totalt produkt, eller for et par av enantiomerer eller diastereomerer, med ee eller de. ;"I hovedsak ren stereoisomer," "i hovedsak ren enantiomer," "i hovedsak ren diastereomer," og varianter derav, referer, respektivt, til en prøve inneholdende en stereoisomer, enantiomer, eller diastereomer, som omfatter minst 95 % av prøven. For par av enantiomerer og diastereomerer, vil en betydelig ren enantiomer eller diastereomer korrespondere til prøven som har en ee eller de på ca 90 % eller mer. ;En "ren stereoisomer," "ren enantiomer," "rene diastereomer," og varianter derav, refererer, respektivt, til en prøve inneholdende en stereoisomer, enantiomer, eller diastereomer, som omfatter minst ca 99,5 % av prøven. For par av en enantiomerer og diastereomerer, vil en ren enantiomer eller ren diastereomer" korrespondere til prøver som har en ee eller de på 99 % eller mer. ;"Motsatt enantiomer" refererer til et molekyl som er i en ikke-superimposabelt speilbilde av et referansemolekyl, som kan oppnåes ved å invertere alle de av de stereogeniske sentre i referansemolekylet. Foreksempel, dersom referansemolekylet har Sabsolutt stereokjemisk konfigurasjon, da har den motsatte enantiomer R absolutt stereokjemisk konfigurasjon. Likeledes, dersom referansemolekylet har S,S absolutte stereokjemisk konfigurasjon, da har den motsatte enantiomer R, R stereokjemisk konfigurasjon, og så videre. ;"Stereoisomerer" av en spesifisert forbindelse refererer til den motsatte enantiomer av forbindelsen og til enhver diastereoisomer eller geometriske isomerer (Z/E) av forbindelsen. For eksempel, dersom den spesifiserte forbindelse har S, R, Z stereokjemisk konfigurasjon, ;vil dets stereoisomer inkludere dets motsatte enantiomer med R, S, Zkonfigurasjon, dets diastereomerer har S,S,Z konfigurasjon og R, R, Zkonfigurasjon, og det geometriske isomerer har S, R, E konfigurasjon, R, S, E konfigurasjon, S, S, E konfigurasjon, og R, R, E konfigurasjon. ;"Enantioselektiv verdi" eller "E" referer til forholdet mellom spesifisitetskonstanter for hver enantiomer av forbindelsen som undergår en kjemisk reaksjon eller omdanning og kan beregnes (for S-enantiomer) fra uttrykket. ;;hvor Ks og KR er første ordens hastighetskonstanter for omdanningen av S- og R-enantiomerer, respektivt; KSMog KRMer Michaelis konstanter for S- og R-enantiomerer, respektivt; x er den fraksjonelle omdanning av substratet; eep og e&ser enantiomerisk overskudd av produktet og substrat (reaktant), respektivt. ;"Lipase enhet" eller "LU" referer til mengden av enzym (ig) som frigjør 1^mol av titrerbar smørsyre/per min i det den settes i forbindelse med tributyrin og en em uls ifiserer (gummi arabikum) ved 30°C og pH 7. ;"Solvat" referer til et molekylkompleks omfattende en beskrevet eller krevd forbindelse og en støkiometrisk eller ikke-støkiometrisk mengde av én eller flere oppløsningsmolekyler (f.eks, EtOH). ;"Hydrater" referer til et solvat omfattende en beskrevet eller krevd forbindelse og en støkiometrisk eller ikke-støkiometrisk mengde av vann. ;"Farmasøytisk akseptable komplekser, salter, solvater eller hydrater" referer til komplekser, syrer, baseaddisjonssalter, solvater eller hydrater i krevde og beskrevne forbindelser, som er innen rammen av medisinsk vurdering, egnet for anvendelse i kontakt med vev til pasienter uten unødig toksisitet, irritasjon, allergisk respons og lignende, i samsvar med en rimelig nytte/risiko-forhold, og effektiv for deres tiltenkte bruk. ;"Pre-katalysator" eller "katalysator-forløper" refererer til en forbindelse eller sett av forbindelser som omdannes til katalysator før anvendelse. ;"Behandling" referer til å reversere, lindre, inhibere prosessen av, eller hindre en forstyrrelsestilstand hvortil slike termer gjelder, eller forhindre en eller flere symptomer av slike forstyrrelser eller tilstander. ;"Behandling" referer til handlingen " å behandle" som definert umiddelbart ovenfor. ;Tabell 1 angir forkortelser som brukes i beskrivelsen. ; ; I noen av reaksjons skjemaene og eksemplene nedenfor, kan visse forbindelser framstilles ved anvendelse av beskyttende grupper, som hindrer uønsket kjemisk reaksjon i ellers reaktive seter. Beskyttende grupper kan også anvendes for å forbedre løselighet eller på annen måte modifisere fysikalske egenskaper til forbindelsen. For en beskrivelse av strategi for beskyttende grupper, en beskrivelse av materialer og metoder for å installere og fjerne beskyttende grupper, og en sammenligning av nyttige beskyttende grupper for vanlige funksjonelle grupper, inkluderende aminer, karboksylsyrer, alkoholer, ketoner aldehyder og lignende, seT. W. Greene og P.G. Wuts, Protecting Groupsin Organic Chemistry (1999) og P. Kocienski, Protective Groups (2000). ;I tillegg, noen av skjemaene og eksemplene nedenfor kan utelate detaljer i vanlige reaksjoner, inkluderende oksideringer, reduksjoner, og likeledes, som er kjent for fagkyndige personen innen fagfeltet organisk kjemi. Detaljene av slike reaksjoner kan fines i et antall avhandlinger, inkluderende Richard Larock, Comprehensive Organic Transformations ;(1999), og multi-volume serien editert av Michael B. Smith og andre, Compendium of Organic Synthetic Methods (1974-2003). Generelt, utgangs materiale og reagenser kan oppnåes fra konvensjonelle kilder eller framstilles fra litteraturkilder. ;Generelt, de kjemiske omdanninger beskrevet i beskrivelsen kan utføres ved anvendelse av i hovedsak støkiometriske mengder av reaktanter, selv om visse reaksjoner kan ha nytte av å anvende et overskudd av en eller flere av reaktantene. Videre, mange av reaksjonene beskrevet i beskrivelsen, inkluderende den enantioselektive hydrolyse av den racemiske diester (formel 4) beskrevet i detalj nedenfor, kan utføres ved ca RT, men bestemte reaksjoner kan kreve anvendelse av høyere eller lavere temperaturer, avhengig av reaksjons- kinetikk, utbytte og lignende. Videre, mange av de kjemiske omdanninger kan benytte én eller flere kompatible oppløsningsmidler, som kan påvirke reaksjonsraten av utbyttet. Avhengig av naturen til reaktantene, den ene eller flere oppløsningsmidler kan være polar protisk oppløsningsmidler, polare aprotiske oppøsningsmidler, ikke-polare oppløsnings-midler, eller enhver kombinasjon. Enhver referanse i beskrivelsen til et konsentrasjons-område, er temperaturområdet, etpH-område, et katalysatorlastingsområde, og så videre, enten man uttrykkelig bruker ordet "område" eller ikke, inkluderer de indikerte endepunkter. ;Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer materiale og fram gangs måter for å framstille optisk aktiv y-aminosyrer (formel 1) inkluderende farmasøytisk akseptable salter, estere, amider eller prodrug derav. Forbindelsene av formel 1 inkluderer substituenter R<1>og R<2>, som er definert ovenfor. Nyttige forbindelser av formel 1 som involverer de hvor R<1>er hydrogenatom og R<2>er d-12alkyl, C3.i2sykloalkyl, eller substituert d-12 sykloalkyl, eller de hvor R2 er et hydrogenatom og R<1>er d-12alkyl, C3.12sykloalkyl, eller substituert C3.12sykloalkyl. Spesielt nyttige forbindelser av formel 1 inkluderer de hvor R<1>er et hydrogenatom og R2 er d-e alkyl eller C3.7sykloalkyl, eller de hvor R2 er et hydrogenatom og R<1>er d-e alkyl eller C3.7sykloalkyl. Spesielt nyttige forbindelser av formel 1 inkluderer de hvor R<1>er et hydrogenatom og R<2>er d_4 alkyl, såsom pregabalin (formel 9). ;Fig. 1 viser en prosess for framstilling av optisk aktive y-aminosyrer (formel 1). Prosessen inkluderer trinnene å kontakte eller kombinere en reaksjons blanding, som omfattes av en cyano-substituert diester (formel 4) og vann, med et enzym for å gi en produktblanding som inkluderer en optisk aktiv dikarboksylisk syre monoester (formel 3) og en optisk aktiv diester (formel 5). Den cyano-substituerte diester (formel 4) har et stereogenisk senter, som angies med en stjerne ("<*>"), og som beskrevet nedenfor, kan framstilles i samsvar med et reaksjons-skjema vist i fig 2. Før man settes i forbindelse med enzymet, omfatter cyano-substituent diester (formel 4) typisk en racemisk(ekvimolar) blanding av diesteren av formel 5 og dets motsatte enantiomer. Substituenter R<1>, R<2>, og R<3>i formel 3, formel 4, og formel 5, og substituent R<4>i formel 4 og formel 5 er som definert ovenfor i forbindelse med formel 1. Generelt, med mindre annet er forskjellig angitt, idet en bestemt identifiserer (R<1>, R<2>, R<3>, etc.) er definert for første gang i forbindelse med en formel, så vil den samme substituent identifiserer anvendt i påfølgende formler, ha den samme betydning som i den tidligere formel.
Enzymet (eller biokatalysatoren) kan være ethvert protein som, idet det har liten eller ingen effekt på forbindelsen av formel 5, vil katalysere hydrolysen av dets motsatte enantiomer for å gi dikarboksylisk syre monoestere (formel 3). Nyttige enzymer for enantio-selektiv hydrolyse av forbindelsen av formel 4 til formel 3 kan således inkludere hydrolaser, inkluderende lipaser, visse proteaser og andre enantio-selektive esteraser. Slike enzymer kan oppnåes fra en rekke naturlige kilder, inkluderende dyreorganer og mikroorganismer. Se for eksempel tabell 2 for en ikke-begrensende liste av kommersielt tilgjengelige hydrolaser.
Som vist i eksem pelseksjonen, nyttige enzymer for den enantio-selektive omdanning av den cyano-substituerte diester (formel 4 og formel 12) til den ønskede optiske aktive dikarboksyliske syremonoester (formel 3 og formel 11) inkluderer lipaser. Spesielt nyttige lipaser inkluderer enzymer avledet fra mikroorganismen termomyses lanuginosus, såsom de som er tilgjengelige fra Novo-Nordisk A/S under varemerkenavnet LIPOLASE® (CAS no. 9001-62-1). LIPOLASE® enzymer er oppnådd ved neddykket fermentering av en aspergillus orysae mikroorganisme genetisk modifisert med DNA fra termomyses lanuginosus DSM 4109 som koder for aminosyresekvensen til lipasen. LIPOLASE® 100L og LIPOLASE® 100T er tilgjengelig som en væskeløsning og en granular løsning, respektivt. For hver halve nominelle aktivitet på 100 kLU/g. Andre former av LIPOLASE® inkluderer LIPOLASE® 50L, som har halvparten av aktiviteten av LIPOLASE® 100L, og
LIPOZYME® 100L, som har den same aktivitet som LIPOLASE® 100L, men som er gradert for næringsstoffet.
Forskjellige screeningsteknikker kan anvendes for å identifisere egnede enzymer. For eksempel, et stort antall kommersielle tilgjengelige enzymer kan screenes ved anvendelse av høy gjennomstrømningsteknikker beskrevet i eksem pelseksjonen nedenfor. Andre enzymer (eller mikrobielle kilder for enzymer) kan screenes ved anvendelse av anrikningsisomeringsteknikker. Slike teknikker involverer typisk anvendelse av karbon-begrensede eller nitrogen-begrensede media tilsatt anrikningssubstrat, som kan være det racemiske substrat (formel 4) eller en strukturelt lignende forbindelse. Potensielt nyttige mikroorgansimer utvelges for videre undersøkelse basert på deres evne til å vokse i media inneholdende anrikningssubstratet. Disse mikroorganismer evalueres deretter for deres evne til enantioselektivt å katalysere esterhydrolyse ved å sette suspensjonen i forbindelse med de mikrobielle celler med rasematisk substrat og teste for nærvær av det ønskede optiske aktive dikarbosyliske syre monoester (formel 3) ved anvendelse av analytiske metoder så som kiral HPLC, gassvæskekromatografi, LC/MS, og lignende.
Straks en mikroorganisme som har den nødvendige hydrolytiske aktivitet har blitt isolert, kan enzym-engineering benyttes for forbedre egenskapene til en enzymet det produserer. For eksempel, og uten begrensning, enzym-engineering kan anvendes for å øke utbytte og enantioselektiviteten av esterhydrolysen, for å gjøre temperaturen og pH-områdene bredere til enzymet, og for å forbedre enzymets toleranse mot organiske oppløsningsmidler. Nyttige enzymengineeringsteknikker inkluderer rasjonelle designmetoder, såsom seterettet hydrogenese, og in wfro-rettet evolusjonsteknikker som benyttes suksessive runder med vilkårlig mutagenese, gene ekspresjon og høy gjennomstrømningsscreeningforå opptimalisere ønskede egenskaper. Se for eksempel, K. M. Koeller & C.-H. Wong, "Enzymes for chemical synthesis," Nature 409:232-240 (11 Jan. 2001), og referanser angitt deri.
Enzymet kan være i form av hele mikrobielle celler, permeabiliserte mikrobielle celler, ekstraktet av mikrobielle celler, partielt rensede enzymer, rensede enzymer og lignende. Enzymet kan omfatte en dispersjon av partikler som har en gjennomsnittelig partikkel-størrelse, basert på volum, på mindre enn ca 0,1 mm (fin fordelt dispersjon) eller på ca 0,1 mm eller større (grov dispersjon). Grove enzym dispersjoner gir mulige prosesseringsfordeler over finfordelte dispersjoner. Foreksempel, grove enzym partikler kan anvendes repeterende i batch-prosesser eller i semikontinuerlige eller kontinuerlige prosesser, og kan vanligvis (for eksempel ved filtrering) fra andre komponenter i bioomdanningen enklere enn finfordelte enzymer.
Nyttige grove enzym dis persjoner inkluderer kryssbindende enzym krystaller (CLECer) og kryssbundne enzym aggregater (CLEAer) som hovedsaklig utgjøres av enzymer. Andre grove dispersjoner kan inkludere enzymer immobilisert på eller innen et uløselig støttemedium. Nyttige faststoff støttemedier inkluderer polymermatriser, kalsium alginat, polyaktrylamid, EUPERGIT®, og andre polymeriske materialer, og likeledes uorganiske matriser så som CELITE®. For en generell beskrivelse av CLECer og andre enzym-immobiliseringsteknikker, se U.S. patent 5,618,710 av M. A. Navia & N. L. St. Clair. For en generell diskusjon av CLEAer, inkluderende framstilling og anvendelse, se U.S. patent-søknad nr 2003/0149172 av L. Cao& J. Elzinga et al. Se også A. M. Anderson, Biocat. Biotransform, 16:181 (1998) og P. Lopez-Serrano et al., Biotechnol. Lett. 24:1379-83 (2002) for en diskusjon av applikasjon av CLEC og CLEA teknologi for en lipase.
Reaksjonsblandingen kan omfatte en enkeltfase eller kan omfatte multiple faser (for eksempel et to- eller tre-fasesystem). Således, for eksempel, den enantio-selektive hydrolyse vist i fig.1 kan foregå i en enkelt vandig fase, som inneholder enzymet, det opprinnelige racemiske substrat (formel 4), den uønskede optisk aktive diester (formel 5) og den ønskede optiske aktive dikarboksyliske syre monoester (formel 3). Alternativt, reaksjons blandingen kan omfatte et multifasesystem som inkluderer en vandig fase i kontakt med en faststoff-fase (for eksempel enzym eller produkt), en vandig fase i kontakt med en organisk fase, eller en vandig fase i kontakt med en organisk fase og et faststoff fase. For eksempel, den enantio-selektive hydrolyse kan utføres i et to-fase system som utgjøres av en faststoff fase, som inneholder enzymet, og en vandig fase, som inneholder det opprinnelige racemiske substrat, den uønskede optisk aktive diester, og den ønskede optisk aktive dikarboksylisk syre monoester.
Alternativt, den enantioselektive hydrolyse kan utføres i ettre-fase system sammensatt av en faststoff fase, som inneholder enzymet, en organisk fase som innledningsvis inneholder det racemiske substrat (formel 4), og en vandig fase som innledningsvis inneholder en liten fraksjon av det racemiske substrat. Siden den ønskede optisk aktive dikarbosyliske syre monoester (formel 3) har en lavere pKa enn den ikke-reagerte optisk aktive diester (formel 5) og derfor oppviser større vandig løselighet, blir den organiske fase anriket med den ikke-reagerte diester, mens den vandige fase ble anriket med den ønskede dikarbosyliske syre monoester i det reaksjonen foregår.
Mengdene av det racemiske substrat (formel 4) og biokatalysatoren anvendt i den enantio-selektive hydrolyse vil avhenge, blant andre, av forholdene mellom partikulært cyano-substituert diester og enzym. Generelt, imidlertid, reaksjonen kan benytte et substrat som har en innledende konsentrasjon på ca 0,1 M til ca 3,0 M, og i mange tilfeller har en innledende konsentrasjon på ca 1,5 M til ca 3,0 M. Ytterligere, reaksjonen kan generelt benytte en enzymlasting på ca 1 % til ca 10 %, og i mange tilfeller kan benytte en enzymlasting på ca 3 5 til ca 4 % (vol/vol).
Den enantioselektive hydrolyse kan utføres over et bredt spekter av temperaturer og pH. For eksempel, kan reaksjonen utføres ved en temperatur av fra ca 10°C til en temperatur på ca 50°C, men utføres typisk ved ca RT. Slike temperaturer muliggjør generelt fullstendig omdanning (for eksempel ca 42 % til ca 50 %) av racematet (formel 4) innen en rimelig tidsperiode (ca 2 ttil ca24t) uten deaktivering av enzymet. Ytterligere, den enantio-selektive hydrolyse kan utføres ved en pH på ca 5 til en pH på ca 10, mer typisk ved en pH på ca 6 til en pH på ca 9, og ofte med en pH på ca 6,5 til en pH på ca 7,5.
I fravær av pH-regulering, vil reaksjons blandingens pH bli redusert i det hydrolysen av substratet (formel 4) går på grunn av dannelse av den dikarboksyliske syre monoester (formel 3). For å kompensere for denne forandring kan hydrolysereaksjon kjøres med indre pH-kontroll (dvs. i nærvær av en egnet buffer) eller kan kjøres med ekstern pH-kontroll gjennom tilsetning av en base. Egnede buffere inkluderer kaliumfosfat, natriumfosfat, natrium acetat, ammonium acetat, kalsium acetat. BES, BICINE, HEPES, MES, MOPS, PIPES, TAPS, TES, TRICINE, Tris, TRIZMA®, eller andre buffere som har en pKa på ca 6 til en pKa på ca 9. Bufferkonsentrasjonen er generelt i området fra ca 5 mM til ca 1 mM, og typisk områder fra ca 50 mM til ca 200 mm. Egnede baser inkluderer vandige løsninger som utgjøres av KOH, NaOH, NH4OH, etc, som har konsentrasjoner i området fra ca 0.5 M til ca 15 M, og mer typisk i området fra ca 5 M til ca 10 M. Andre uorganiske tilsetningsstoffer så som kalsium acetat kan også anvendes.
Etter eller under den enzymatiske omdanning av racematet (formel 4) kan den ønskede optiske aktive dikarbosyliske syre monoester (formel 3) isoleres fra produktblandingen ved anvendelse av standard teknikker. For eksempel, i tilfelle en enkel (vandig) fase batch-reaksjon, kan produktblandingen ekstraheres en eller flere ganger med en ikke-polar organisk oppløsnings middel, så som heksan eller heptan, som separerer den ønskede dikarboksyliske monoester (formel 2) og den ikke-reagerte diester (formel 5) i vandige og organiske faser, respektivt. Alternativt, i tilfelle en multi-fase reaksjon som benytter vandig og organiske faser anriket medden ønskede monoester (formel 3) og den ikke-reagerte diester (formel 5), respektivt, kan monoesteren og diesteren separeres batch-vis etter reaksjon, eller kan separeres semikontinuerlig eller kontinuerlig under den enantio-selektive hydrolyse.
Som angitt i fig 1, det ikke-reagerte diester (formel 5) kan isoleres fra den organiske fase og racemiseres for å gi det racemiske substrat (formel 4). Det resulterende rasemat (formel 4) kan resirkuleres eller kombineres med ikke-omdannet racemisksubstrat, som deretter undergår enzymatisk omdanning til formel 3 som beskrevet ovenfor. Resirkulering av ikke-reagert diester (formel 5) øker det totale utbytte for den enantio-selektive hydrolyse over 50 %, og øker dermed atom-økonomien i framgangsmåten og senker kostnadene assosiert med deponering av uønskede enantiomerer.
Behandlingen av diesteren (formel 5) med en base som er tilstrekkelig sterk til å abstrahere et surt ot-proton for malonatenheten resulterer generelt i inversjon av det stereogeniske senter og generering av det racemiske substrat. Nyttige baser inkluderer organiske baser så som al koks ider (f.eks natrium etoks id), lineære alifatiske aminer, og sykliske aminer, og uorganiske baser såsom KOH, NaOH, NH4OH, og lignende. Reaksjonen utføres i et kompatibelt oppløsningsmiddel, inkluderende polart optiske oppløsningsmidler så som EtOH eller aprotiske polare oppløsningsmidler så som MTBE. Reaksjonstemperaturer over RT vil typisk forbedre utbyttet av racemiseringsprosessen.
Som vist i fig. 1, den i hovedsak enantio-rene dikarbosyliske syre monoester (formel 3) kan omdannes til en optisk aktiv y-aminosyre (formel 1) ved anvendelse av minst tre forskjellige metoder. I en metode hydrolyseres monoesteren (formel 3) i nærvær av en syrekatalysator eller en basekatalysator for å gi en optisk cyano-substituert dikarboksylisk syre (formel 6) eller korresponderende salt. Cyano-enheten av den resulterende dikarbosyliske syre (eller dets salt) reduseres for å gi en optisk aktiv y-amino dikarboksylisk syre (formel 7) eller et korresponderende salt, som deretter dekarboksyleres med behandling med en syre, med oppvarming, eller begge, for å gi den ønskede optisk aktive y-aminosyre (formel 1). Cyano-enheten kan reduseres via reaksjon med H2i nærvær av en katalytisk mengde av Raney nikkel, palladium, platina, og lignende, eller gjennom reaksjon medet reduserende middel så som iAIH4, BH3-Me2S, og lignende. Nyttige syrer for hydrolyse og dekarboksylerings-reaksjoner inkluderer mineralsyrer, så som HCI04, Hl, H2S04, HBr, HCI, og lignende. Nyttige basekatalysatorer for hydrolysereaksjonen inkluderer forskjellige alkalie og alkalie jordmetall hydroksider, og oksider, inkluderende LiOH, NaOH, KOH, og lignende.
I en annen framgangsmåte undergår dikarboksylisk syre monoester (formel 3) reduktiv syklering for å danne den optisk aktive syklisk 3-karboksy-pyrrolidin-2-one (formel 2) som deretter behandles med en syre for å gi den ønskede enantiomerisk anrikede y-aminosyre (formel 1). Den reduktive ringdannelse kan utføres ved å reagere monoesteren (formel 3) med H2i nærvær av en katalytisk mengde av Raney nikkel, palladium, platina og lignende. En eller flere syrer kan anvendes for å hydrolysere og dekarboksylere den resulterende laktamsyre (formel 2) inkluderende mineralsyrer så som HCI04, Hl, H2S04, HBr, og HCI, og organiske syrer så som HOAc, TFA, p-TSA, og lignende. Konsentrasjonen av syrene kan være i området fra ca 1N til ca 12 N, og mengden av syrene kan være i området fra ca 1 ek til ca 7 ek. Hydrolysen og dekarboksyleringsreaksjonene kan utføres ved en temperatur på ca RT eller høyere, eller ved en temperatur på ca 60°C eller høyere, eller ved en temperatur i området fra ca 60°C til ca 130°C.
I en tredje metode blir ester-enheten av den dikarboksyliske syre monoester (formel 3) først hydrolysert for å gi den cyano-substituerte dikarboksyliske syre (formel 6 eller dets salt) som beskrevet ovenfor. Den resulterende dikarboksyliske syre (eller dets salt) dekarboksyleres deretter for å gi en optisk aktiv cyano-substituert karboksylisk syre eller dets salt (formel 8 hvor R<5>er et hydrogenatom, selv om R5 kan være d.12alkyl, d_i2 sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl som angitt nedenfor) De samme betingelser anvendes for å dekarboksylere laktamsyren (formel 2) eller y-amino dikarboksylisk syre (formel 7) kan anvendes. I stedet for først å hydrolysere esterenheten, kan dikarboksylisk syre monoesteren (formel 3) først dekarboksyleres direkte til en cyano-substituert monoester (formel 8) ved oppvarming av den vandige løsning av dikarboksylisk syre monoester (som et salt) til en temperatur av fra ca 50°Ctil refluks. Krapcho-betingelser (DMSC7 NaCI/vann) kan også anvendes. I begge tilfeller kan cyano-enheten av forbindelsen av formel 8 deretter reduseres for å gi den optisk aktive y-aminosyre (formel 1). I tillegg til Raney nikkel, kan et antall andre katalysatorer anvendes for å redusere cyano-enheten av forbindelsen av formel 3, 6 og 8. Disse inkluderer, uten begrensning, heterogene katalysatorer inneholdende fra ca 0,1 % til ca 20 %, og mer typisk fra ca 1 % til ca 5 %, basert på vekt, av overgangsmetaller så som Ni, Pd, Pt, Rh, Re, Ru, og Ir, inkluderende oksider og kombinasjoner derav, som typisk støttet på forskjellige materialer, inkluderende Al203, C, CaC03, SrC03, BaS04, MgO, Si02, Ti02, Zr02, og lignende. Mange av disse metaller, inkluderende Pd, kan dopes med et amin, et sulfid, eller et andre metall så som Pb, Cu, eller Zn. Nyttige katalysatorer inkluderer således palladium katalysatorer såsom Pd/C, Pd/SrC03, Pd/Al203, Pd/MgO, Pd/CaC03, Pd/BaS04, PdO, Pd svart, PdCI2, og lignende, inneholdende fra ca 1 % til ca 5% Pd, basert på vekt. Andre nyttige katalysatorer inkluderer Rh/C, Ru/C, Re/C, Pt02, Rh/C, Ru02, og lignende.
Den katalytiske reduksjon av cyano-enheten utføres typisk i nærvær av en eller flere polare oppløsningsmidler, inkluderende uten begrensning, vann, alkoholer, etere, estere og syrer, så som MeOH, EtOH, IPA, THF, EtOAc, og HOAc. Reaksjonen kan utføres ved temperaturer i området fra ca5°C til ca 100°C, og reaksjoner ved RT er mestvanlig. Generelt, substrat-til-katalysator-forholdet, kan være i området fra ca 1:1 til ca 1000:1, basert på vekt, og H2-trykk kan være i området fra atmosfærisk trykk, 0 psig, til ca 1500 psig. Mer typisk, substrat-til-katalysator-forholdene er i områdene fra ca 4:1 til ca 20:1, og H2-trykkområdet fra ca 25 psig til ca 150 psig.
Alle de foregående metoder kan anvendes for å omdanne den i hovedsak enantiomerene monoester (formel 3) til den optisk aktive y-aminosyre (formel 1), men hver gi visse fordeler i forhold til de andre. For eksempel, etter syreopparbeidelse av prosessen som benytter en reduktiv ringdannelse kan laktamsyren (formel 2) isoleres og renses ved å ekstrahere den over i et organisk oppløsningsmiddel, mens den cyano-substituerte dikarboksyliske syre (formel 6) kan være mervanskelig å isolere på grunn av dets til sammenligning høyere vandige løselighekt. Isolering av laktam syren (formel 2) reduserer overføring av vannløselige urenheter til den finale produktblanding, og muliggjør høyere reaktantkonsentrasjoner (for eksempel ca 1 M til ca2 M) under hydrolyse og dekarboksylering, og øker dermed prosessgjennomstrømningen. Videre, direkte dekarboksylering ved oppvarming av den vandige løsning av den dikarboksyliske syre monoester (formel 3) gir cyano-monoesteren (formel 8) i høy enantiomerisk renhet. Denne forbindelse kan separeres fra reaksjons-medium ved ekstrahering i et organisk oppløsningsmiddel eller ved direkte faseseparasjon, som sikrer effektiv fjerning av uorganiske urenheter med vannfasen. Høy reaksjons-gjennomstrømning og det å unngå sterke syrebetingelser er to fordeler med denne løsning.
Fig. 2 illustrerer en fram gangs måte for å framstille cyano-substituerte diestere (formel 4), som kan fungere som substrater for den enzymatiske enantio-selektive hydrolyse vist i fig. 1. Prosessen inkluderer en krysset aldolkondensasjon, som omfatter å omdanne et usymmetrisk keton eller et aldehyd (formel 17) med en malonisk syre diester (formel 18) i nærvær av en katalytisk mengde av en base for å gi en a,p-ikke-mettet malonisk syre diester /(formel 19), hvor R<1>, R<2>, R<3>, og R<4>er som definert i forbindelse med formel 1. Denne type krysset aldolreaksjon er kjent som en knoevenagel kondensasjon, som er beskrevet i et antall litteraturoversikter. Sef.eks., B. K. Wilk, Tetrahedron 53:7097-7100 (1997) og referansene angitt deri.
Generelt, enhver base i stand til å generere et enolat ion fra malonisk syre diester (formel 18), kan anvendes, inkluderende sekundære aminer, så som di-n-propylamin, di-/-propylamin, pyrrolidin, etc, og deres salter. Reaksjonen kan inkludere en karboksylisk syre, så som HOAc, for å nøytralisere produktet for å minimere enolisering av det usymmetriske keton eller aldehyd (formel 17). Reaksjoner som involverer usymmetriske ketoner kan også benytte Lewis-syrer, så som titan tetraklorid, sinkklorid, sinkacetat, og lignende for å framme reaksjon. Reaksjonen kjøres typisk i et hydrokarbon oppløsningsmiddel under refluks betingelser. Nyttige oppløsningsmidler inkluder heksan, heptan, sykloheksan, toluen, metyl t-butyl eter, og lignende, med azeotropisk fjerning av vann.
I et påfølgende trinn, undergår en cyanokilde så som HCN, aceton cyanohydrin, et alkalimetall cyanid (NaCN, KCN, etc), eller et alkalisk jordmetall cyanid (magnesium cyanid etc), konjugataddisjon til p-karboner av den a,p-umettede malkonisk syre diester (formel 19). Reaksjonen utføres typisk i en eller flere polare protisk oppløsningsmidler, inkluderende EtOH, MeOH, n-propanol, isopropanol, eller polaraprotiske oppløsningsmidler, såsom DMSO, og lignende. Påfølgende syreopparbeidelse gir cyano-substituert diester (formel 4). For en applikasjon av framgangsmåten avbildet i fig. 2 for å framstille et pregabalin forløper (formel 2) Se US patent 5,637,767 to Grote et al.
De ønskede (S)- eller (R)-enantiomererav enhver forbindelse beskrevet heri, kan ytterligere anrikes gjennom klassisk resolusjon, kiral kromatografi, eller rekrystallisering. Foreksempel, de optiske aktivey-aminosyrer (formel 1 eller formel 9) kan omdannes med en enantiomerisk ren forbindelse (for eksempel syre elle base) for å gi et par av diastereoisomerer, hver sammensatt av en enkelt enantiomer, som separeres via fraksjonen rekrystallisering eller kromatografi. Den ønskede enantiomer regenereres deretter fra den egnede diastereoisomer. Videre, den ønskede enantiomer kan videre ofte anrikes med rekrystallisering i et egnet oppløsningsmiddel, dersom den er tilgjengelig i tilstrekkelig mengde (for eksempel typisk ikke mye mindre enn ca 85 % ee, og i noen tilfeller ikke mye mindre enn ca 90 % ee).
Som beskrevet gjennom beskrivelsen, mange av de beskrevne forbindelser har stereoisomerer. Noen av disse forbindelser kan eksistere som enkle enantiomerer (enantio-rene forbindelser) eller blandinger av rene enantiomerer (anrikede eller racemiske prøver) som avhengig av det relative overskudd av en enantiomer i forhold til den andre i en prøve, kan oppvise optisk aktivitet. Slike stereoisomerer, som er ikke-superimposable speilbilder, oppviser en stereogenisk akse eller en eller flere stereogeniske sentre (dvs. kiralitet). Andre beskrevne forbindelser kan være stereoisomerer som ikke er speilbilder. Slike stereoisomerer, som er kjent som er diastereoisomerer, kan være kirale eller akirale (inneholder intet stereogenisk senter). De inkluderer molekyler inneholdende en alkynyl eller syklisk gruppe, såsom cis/ trans (eller Z/ E) stereoisomerer er mislig, eller molekyler inneholdende to eller flere stereogeniske sentre, hvor inversjon av et enkelt stereogenisk senter generer en korresponderende diastereoisomer. Med mindre annet er angitt eller på annen måte framgår tydelig (for eksempel gjennom anvendelse av stereobindinger, stereosenterbeskrivelser, etc.) inkluderer rammen av foreliggende oppfinnelse, generelt referanseforbindelsen og dets stereoisomerer, enten de er hver rene (for eksempel enantiomeren) eller blandinger (for eksempel enantiomerisk anrikede eller racemiske).
Mange av forbindelsene kan også inneholde en keto- eller oxim-gruppe, slik at tautomerisme kan oppstå. I slike tilfeller, inkluderer generelt den foreliggende oppfinnelse ta utom er is ke former, enten de er hver rene eller blandinger.
Mange av forbindelsene beskrevet i denne beskrivelsen, inkludert de som er representert med formel 1 og formel 9, er i stand til å danne farmasøytisk akseptable salter. Disse salter inkluderer, uten begrensning, syreaddisjonssalter (inkluderende diacidiske) og basesalter. Farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter inkluderer ikke-toksiske salter avledet fra uorganiske syrer såsom hydroklorid, nitrisk, fosforisk, sulforisk, hydrobromisk, hydroiodisk, hydrofluorisk, fosforisk og lignende, og likeledes ikke-toksiske salter avledet fra organiske syrer såsom alifatiske mono- og dikarbosyliske syrer, fenyl-substituerte alkanoiske syrer, hydroksyalkanoiske syrer, alkandioske syrer, aromatiske syrer, alifatiske og aromatiske sulfoniske syrer, acider, etc. Slike salter inkluderer således sulfat, pyrosulfat, bisulfat, sulfit, bisulfit, nitrat, fosfat, monohydrogenfosfat, dihydrogenfosfat, metafosfat, pyrofosfat, klorid, bromid, iodid, acetat, trifluoroacetat, propionat, kaprylat, isobutyrat, oksalat, malonat, sukinat, suberat, sebakat, fumarat, maleat, mandelat, bensoat, klorobensoat, metylbensoat, dinitrobensoat, ftalat, bensensulfonat, toluenesulfonat, fenylacetat, sitrat, laktat, malat, tartrat, metanesulfonat, og lignende.
Farmasøytisk akseptable basesalter inkluderer ikke-toksiske salter avledet fra baser inkluderende metallkationer, såsom alkali og alkalisk jordmetall kation, og likeledes aminer. Eksempler på egnede metallkationer inkluderer, uten begrensning, natrium kationer, (Na<+>), katlium kationer (K<+>), magnesiumkationer (Mg<2+>), kalsium kationer, (Ca<2+>), og lignende. Eksempler på egnede aminer inkluderer, uten begrensning, A/,A/'-dibensyletylendiamin, kloroprosain, kolin, dietanolamin, disykloheksylamin, etylendiamin, A/-metylglukamin, prokain, og f-butylamin. For en beskrivelse av nyttige syreaddisjon og bassalter, se S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts," 66 J. of Pharm. Sei., 1-19 (1977); se også Stahl and Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (2002).
Man kan framstille et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt (eller basesalt) ved å sette en forbindelsesfri base (eller frie syrer) eller zwitterion i kontakt med en tilstrekkelig mengde av en ønsket syre (eller base) for å produsere et ikke-toksisk salt. Dersom saltet presipiteres fra løsning, kan det isoleres ved filtrering; ellers kan saltet gjenvinnes ved evaporering av oppløsningsmiddel. Man kan også generere den frie base (eller frie syre) ved å sette syreaddisjonssaltet i forbindelse med en base (eller med basesaltet med en syre). Selv om visse fysiske egenskaper fra den frie base (eller den frie syre) og dets respektive syreaddisjonssalt (eller basesalt) kan avvike, (for eksempel løselighet, krystallstruktur, hygroskopisitet, etc), er en forbindelses frie base og syreaddisjonssalt (eller dets frie syre og basesalt) ellers det samme for formål med denne beskrivelse.
Beskrevne og krevde forbindelser kan eksistere i både usolvatiserte og solvatiserte former, og som andre typer komplekser i tillegg til salter. Nyttige komplekser inkluderer klatrater eller forbindelse-vert-inklusjonskomplekser hvor forbindelsen og verten foreligger i støkiometriske eller ikke-støkiometriske mengder. Nyttige komplekser kan også inneholde to eller flere organiske, uorganiske eller organiske og uorganiske komponenter i støkiometrisk eller ikke-støkiometriske mengder. De resulterende komplekser kan ioniseres, partielt ioniseres, eller ikke-ioniseres. For en oversikt over slike komplekser, se J. K. Haleblian, J. Pharm. Sei. 64(8):1269-88 (1975). Farmasøytisk akseptable solvater inkluderer også hydrater og solvater hvor krystalliseringsoppløsningsmiddel kan være isotopisk substituert, for eksempel, D20, d6-acetone, d6-DMSO, etc. Generelt, for formålet med denne beskrivelse, referanse til en usolvatisert form av en forbindelse inkluderer også det korresponderende solvat eller hydrerte form av forbindelsen.
De beskrevne forbindelser inkluderer også alle farmasøytisk akseptable isotopiske variasjoner, hvor minst ett atom er erstattet med et atom som har det samme atomnummer, men en atomisk masse som er forskjellig fra den atomiske masse som vanligvis finnes i naturen. Eksempler på isotoper egnet for inkludering i de beskrevne forbindelser inkluderer, uten begrensning, isotoper av hydrogen, såsom<2>H og<3>H; isotoper av karbon, så som13C og<14>C; isotoper av nitrogen, såsom<15>N; isoto<p>er av oksygen, såsom170og<18>0; isotoper av fosfor, så som<31>P and<32>P; isotoper av svovel, så som<35>S; isotoper av fluor, så som<18>F; og isotoper av klor, så som<36>CI. Anvendelse av isotopiske variasjoner (for eksempel, deuterium,<2>H) kan gi visse terapeutiske fordeler resulterende fra større metabolsk stabilitet, foreksempel, øket in vovo halveringstid eller reduserte doserings krav. Videre, visse isotopvariasjoner av de beskrevne forbindelser kan inkorporere en radioaktiv isotop, (for eksempel tritium,<3>H, eller<14>C), som kan være nyttig i medikament og/eller substrat vevsfordelingsstudier.
EKSEMPLER
De følgende eksempler er tiltenkt å være illustrerende og ikke-begrensende, og representerer spesifikke utførelser av foreliggende oppfinnelse.
GENERELLE MATERIALER OG METODER
Enzymscreening ble utført ved anvendelse av en 96 brønnsplate som er beskrevet i
D. Yazbeck et al., Synth. Catal. 345:524-32 (2003. Alle enzymer anvendt for screeningsplaten, (se tabell 2) var tilgjengelig fra kommersielle enzym leverandører inkluderende Amano (Nagoya, Japan), Roche (Basel, Switzerland), Novo Nordisk (Bagsvaerd, Denmark), Altus Biologics Inc. (Cambridge, MA), Biocatalytics (Pasadena, CA), Toyobo (Osaka, Japan), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) and Fluka (Buchs, Switzerland). Screeningsreaksjonene ble utført i en Eppendorf Thermomixer-R (VWR). Påfølgende enzymatiske resolusjoner i større skala benyttet LIPOLASE® 100L og LIPOLASE®100T, som er tilgjengelig fra Novo-Nordisk A/S (CAS nr. 9001-62-1).
NUKLEÆR MAGNETISK RESONANS
Tre hundre MHz<1>H NMR og 75 MHz<13>C NMR spektra ble opptatt på en BRUKER 300 UltraShield™ utsyrt med en 5 mm auto omkoblingsbar PHQNP probe. Spektra ble generelt opptatt nær RT, og standard autolock, autoshim og autogain rutiner ble benyttet. Prøvene ble vanligvis spunnet ved 20 Hz for 1D eksperimentet.<1>H NMR spektra ble opptatt ved anvendelse av 30-graders tipvinkelpulser, 1.0 s resirkuleringsforsinkelse og 16 scans ved en resolusjon på 0.25 Hz/point. Opptaks vinduet var typisk 8000 Hz fra +18 til -2 ppm (Reference TMS at 0 ppm) og prosessering var med 0.3 Hz linjebredding. Typiske akvisasjonstider var 5-10 s. Regulære<13>C NMR spektra ble opptatt ved anvendelse av 30-graders tipvinkelpulser, 2.0 s resirkulerings forsinkelse og 2048 scan med en resolusjon på 1 Hz/point. Spektral bredde var typisk 25 KHz fra +235 til -15 ppm (Referanse TMS ved 0 ppm). Proton dekopling ble applisert kontinuerlig og 1 Hz linjebredding ble applisert under prosessering. Typiske opptakstider bar 102 min.
MASSESPEKTROMETRI
Massespektrometri ble utført på et HEWLETT PACKARD 1100MSD ved anvendelse av HP ChemstationPlus programvare. LCen ble utstyrt meden agilent 1100 kvartærnært LC system og en Agilent væskebehandler som et autosampel. Data ble opptatt under elektronspray ionisering med ACN/vann (inneholdende 0.1% maursyre)som oppløsningsmiddel (10 % ACN til 90 %, 7 min). Temperaturer: probe var 350 °C, kilde var 150 °C. Coron-uttømming var 3000 V for positivt ion og 3000 V for negativt ion.
HØY YTELSES VÆSKEKROMATOGRAFI
Høyytelses væskekromatografi (HPLC) ble utført på en serie 1100 AGILENT TECHNOLOGIES instrumentutstyrt med et Agilent 220 HPLC autosampler, kvarternær pumper og en UV-detektor. LC var PC-kontrollert ved anvendelse av HP Chemstation Plus programvare. Normalfase kiral HPLC ble utført ved anvendelse av kirale HPLC-kolonner tilgjengelig fra Chiral Technologies (Exton, PA) and Phenomenex (Torrance, CA).
GASS KROMATOGRAFI
Gass kromatografi (GC) ble utført ved en agilent 6890N network GC system utstyrt med en FID-detektor med elektrometer, en 7683 Series split/splitless kapillær injektor, et rullebrett som monitorerer fire eksterne hendelser, og et inboard printer/plotter. Enantiomerisk overskudd av diester (formel 13, R<3>=R<4>=Et) og monoester (formel 11, R<3>=Et) ble utført ved anvendelse av CHIRALDEX G-TA kolonne (30 m x 0,25 mm), med helium bærergass, og ved 135°C. Under slike betingelser dekomponer monoesteren til S-3-cyano-5-metyl-heksanoisk syre etylester, og ee ble bestemt basert på dekomponerings produktet. De kirale GC kolonner som ble anvendt i analysen var tilgjengelig fra Astec, Inc (Whippany, NJ).
EKSEMPEL 1: Enzym screening via enzymatisk hydrolyse av (R/S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-hekasonisk syre etylester (formel 20) for å gi (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre (formel 21).
Ensymscreening ble utført ved anvendelse av et screeningskitt sammensatt av individuelle enzymer deponert i separate brønner i en 96 brønnsplate som ble framstilt på forhånd i samsvar med en framgangsmåte beskrevet i D. Yazbeck et al., Synth. Catal. 345:524-32
(2003). Hver av brønnene hadde et tomt volum på 0,3 ml, (grunn brønnplate). En brønn i 96 brønnsplaten inneholdt kun fosfatbuffer (10 jiL, 0,1 M, pH 7.2), og en andre brønn inneholdt kun ACN (10 jiL), og hver av de resterende brønner inneholdt en av de 94 enzymer angitt i tabell 2 (10^L, 100 mg/mil). Før anvendelse ble screeningskittet fjernet fra lagring ved - 80°C og enzymene ble tillatt å tines ved RT i 5 min. Kaliumfosfatbuffer (85^L, 0,1 M, pH 7,2) ble dispensert i hver brønn ved anvendelse av en multikanal pipette. Konsentrert substrat (formel 20, 5^L) ble deretter tilsatt til hver brønn via en multikanal pipette og de 96 reaksjons blandinger ble inkubert ved 30°C og 750 rpm. Reaksjonene ble stoppet og prøvetatt etter 24 t ved å overføre hver av reaksjons blandingene til separate brønner i en 96 brønnsplate. Hver av brønnene hadde et tomt volum på 2 mil (dyp brønnsplate) og inneholdt EtOAc (1 mil) og HCI (1N, 100 ul_). Komponentene i hver brønn ble blandet med aspirering av brønninnhildet meden pipette. Den andre plate ble sentrifugert og 100 DL av organisk supernatant ble overført fra hver brønn til separate brønner i en tredje 96 brønnsplate (grunn plate). Brønner i den tredje plate ble deretter forseglet ved anvendelse av en penetrerbar mattedeksel. Straks brønnene var forseglet ble den tredje plate overført til et GC system for bestemmelse av optisk renhet (ee).
Tabell 3 lister enzym, varmerkenavn, leverandør og E-verdi for noen av enzymene som ble screenet. For et gitt enzym, ble E-verdien tolket som den relative reaktivitet av et par av enantiomerer (substrater). E-verdiene listet i tabell 3 ble beregnet for HPLC-data (fraksjonen omdanning, j, og ee) ved anvendelse av et dataprogram benevnt Ee2, som er tilgjengelig fra University of Graz. Generelt, enzym-oppvisende S-selektivitet og en E-verdi på mer enn 35 er egnet for oppskalering.
EKSEMPEL 2. Enzymatisk resolusjon av (R/S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20) for å gi (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 23) og (R)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22)
En reaktor (392 I) utstyrt med overliggende omrøring ble fylt med kaliumfosfatbuffer (292,2 I, 10 mM, pH 8,0) og LIPOLASE® 100L, type EX (3,9 I). Blandingen ble omrørtved 800 RPM i 1 min og KOH (2 M) ble tilsatt for å justere pH til 8,0. (R/S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20, 100 kg) ble tilsatt, og den resulterende blanding ble titrert med NaOH aq (50 %) under hydrolyse for å opprettholde en pH på 8,0. Graden av reaksjonen ble monitorert med HPLC (C18kolonne, 4,6 mm x 150 mm, deteksjon ved 200 nm). Når man hadde nådd en omdanning på ca 40-45 % (f.eks. etter ca 241) ble reaksjonsblandingen overført til en separasjonstrakt. Den vandige blanding ble ekstrahert med heptan (205 I). EtOH (absolutt) ble tilsatt (opp til ca 5 % vol/vol) for å ødelegge en lett emulsjon som hadde blitt dannet, og de vandige og organiske sjikt ble separert. Ekstraheringstrinnene ble repetert to ganger, og det vandige sjikt inneholdende(3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 23) kan ytterligere konsentreres under vakuum (f.eks 25 til 50 % av dets opprinnelige volum). De organiske sjikt inneholdende (R)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22) ble kombinert, tørket og konsentrert. Den resulterende dietylester ble deretter racemiserti samsvar med eksempel 6. MS m/z [M+H]<+>227.<1>H NMR (300 MHz, D20): 5 2,35 (dd, 6H), 2.70 (t, 3H), 2,85 (m, 1H), 2,99 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 5,60 (q, 2H).<13>C NMR (75 ppm, D20)6 172,19, 171,48, 122,85, 62,70, 59,49, 40,59, 31,83, 27,91, 23,94, 21,74, 14,77.
EKSEMPEL 3. Enzymatisk resolusjon av ( R/ S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20) for å gi (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 23 og (R) 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22).
En reaktor (3,921) utstyrt med overliggende omrøring fylles med kalsiumacetatbuffer (1,47 I, 100 mM, pH 7,0) og ( R/ S)- 3-Cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20,1 kg). Blandingen om røres ved 1100 RPM i 5 min og KOH (5 M) tilsettes for å justere pH til 7,0. LIPOLASE® 100L, type EX (75 ml) tilsettes og den resulterende blanding titreres med KOH (5 M) under hydrolyse for å opprettholde en pH på 7,0. Graden av reaksjon monitoreres med HPLC (Ci8kolonne, 4,6 mm x 150 mm, deteksjon ved 200 nm). Når man nådde en omdanning på ca 42 % til 45 % (f.eks. etter ca 20-25 t) ble reaksjonsblandingen overført til en separasjonstrakt. Den vandige blanding ekstraheres med heksan (100 % vol/vol). EtOH (absolutt) tilsettes (opp til ca 5 % vol/vol) for å ødelegge en liten emulsjon som var blitt dannet, og den vandige og organiske sjikt separeres. Ekstraheringstrinnene repeteres to ganger for å oppnå et vandig sjikt inneholdende (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester kaliumsalt (formel 23) som kan anvendes i påfølgende omdanninger uten isolasjon. De organiske sjikt inneholdende ( R)- 3-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 11) kombineres, tørkes og konsentreres. Den resulterende dimetylester blir deretter racemiserti samsvar med eksempel 6.
EKSEMPEL 4. Framstilling av (S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10) fra (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 23).
Et kar ble fylt med en vandig løsning inneholdende (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 23, 4111 fra eksempel 2). Raney nikkel (50 % aq løsning, Sigma-Aldrich) ble tilsatt til blandingen, og hydrogengass ble introdusert i karet i løpet aven 201 periode for å opprettholde et trykk på 50 psig i rommet i væskebeholderen gjennom reaksjonen. Hydrogeneringsreaksjonen ble monitorert med opptak av H2og HPLC-analyse (C18kolonne, 4,6 mm x 150 mm, deteksjon ved 200 nm) av karinnholdet. Etter reaksjonen ble den vandige blanding filtrert for å fjerne Raney Ni katalysator. pH i den konsentrerte løsning ble justert til 3,0 ved anvendelse av 37 % HCI (ca 14 I). Den resulterende løsning ble ekstrahert tre ganger med EtOAc (50 % vol/vol). De kombinerte organiske sjikt ble konsentrert under vakuum og ga (S)- 4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10). MS m/z [M+H]+186,1130. 13C NMR (75 ppm, CDCI3)5 175,67, 172,23, 54,09, 47,62, 43,69, 37,22, 26,31, 23,34, 22,54. Utbytte 40-42 %; 97 % ee.
EKSEMPEL 5. Framstilling av pregabalin (formel 9) fra (S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10).
Et reaksjonskar (60 I) ble fylt med (S)- 4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10), HCI (36-38 %, 30 I), og vann (29 I). HOAc (1 I) ble tilsatt til løsningen og den resulterende oppstramming ble behandlet i 36-381 ved 80°C og i ytterligere 61 ved 110°C. Graden av reaksjon ble monitorert med HPLC (C18kolonne 4,6 mm x 150 mm, deteksjon ved 200 nm). Vann og overskudd av HCI ble evaporert for å gi en olje, som ble vasket med MTBE (2 x 15 L). Vann ble tilsatt til oljen og blandingen ble om rørt inntil løsningen hadde klarnet. pH i løsningen ble justert til 5,2-5,5 ved anvendelse av KOH (ca 6 kg), som resulterte i presipitering av pregabalin. Blandingen ble oppvarmet til 80°C og deretter avkjølt til 4°C. Etter 101, ble krystallinsk pregabalin filtrert og vasket med IPA (12 I). Filtratet ble konsentrert under vakuum for å gi en restolje. Vann (7,51) og EtOH (5,0 I) ble tilsatt til restoljen og den resulterende blanding ble oppvarmet til 80°C og deretter avkjølt til 4°C. Etter 101 ble en andre mengde pregabalinkrystaller filtrert og vasket med IPA (1 I). De kombinerte pregabalin krystaller ble tørket i vakuum ovn ved 45°C i 241. MS m/z [M+H]<+>160,1340.<1>H NMR (300 MHz, D20): 5 2,97 (dd, J = 5,4, 12,9 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 6,6, 12,9 Hz, 1H), 2,05-2,34 (m,2H), 1,50-1,70 (sept, J= 6,9 Hz, 1H), 1,17 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 0,85 (dd, J= 2,2, 6,6 Hz, 6H).<13>C NMR (75 ppm, D20)6 181,54, 44,32, 41,28, 32,20, 24,94, 22,55, 22,09. Utbytte 80-85 %; ee > 99,5 %.
EKSEMPEL 6. Framstilling av(R/S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20) via racemiseringav (R)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22)
En reaktor ble fylt med (R)-3- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22, 49,5 kg) og EtOH (2501). Natriumetoksid (21 % vekt/vekt i EtOH, 79,0 I, 1,1 ek) ble tilsatt til blandingen, som ble oppvarmet til 80°C i 201. Etter fullføring av reaksjonen ble blandingen tillatt å avkjøles til RT og ble nøytralisert med tilsetning av HOAc (12.2 I). Etter evaporering av EtOH, ble MTBE (150 I) tilsatt til blandingen, og den resulterende løsning ble filtrert og evaporert for å gi ( R/ S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20) i kvantitativt utbytte.
EKSEMPEL 7. Framstilling av (S)-3- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24) fra (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester
(formel 21)
En 50 ml rundbunnet flaske ble fylt med (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 21, 3,138 g, 13,79 mmol), NaCI (927 mg, 1,15 ek), deionisert vann (477 uL, 1,92 ek) og DMSO (9,5 ml). Den resulterende blanding ble oppvarmet til 88°C og opprettholdt ved denne temperatur i 171. En prøve ble tatt fra LC og LC/MS analyse, som viste nærvær av utgangsmaterialet (formel 21) og produktene (formel 245 og formel 25). Temperaturen av blandingen ble deretter økt til 135°C og det ble tillatt å reagere i ytterligere 3,51. En andre prøve ble tatt for LC og LC/MS analyse, som viste fravær av utgangsmaterialet (formel 21) og viste, i tillegg til de ønskede produkter (formel 24 og formel 25), nærvær av ikke-identifiserte biprodukter. (S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24): 97,4 % ee etter 88°C; 97,5 % ee etter 135°C.
EKSEMPEL 8. Bestemmelse av optisk renhet (ee) av (S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10).
Den optiske renhet av (S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre (formel 10) ble bestemt via en derivatiseringsmetode. En prøve av (S)- 4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-3-karbosylisk syre ble esterifisert med EtOH i nærvær av en katalytisk mengde av tørr HCI i dioksan ved 70°C. Den resulterende laktam ester ble analysert ved HPLC (CHIRALPAK AD-H, 4,6 mm x 250 mm) ved anvendelse av en mobil fase av heksan og EtOH (95:5), med en strømningsrate på 1,0 ml/min, injeksjonsvolum på 10^L, kolonnetemperatur på 35°C, og deteksjon ved 200 nm.
EKSEMPEL 9. Bestemmelse av optisk renhet (ee) av pregabalin (formel 9).
Den optiske renhet av pregabalin ble analysert via en derivatiseringsmetode. En prøve av pregabalin ble derivatisert med Marfey's reagens (1-fluoro-2-4-dinitrofenyl-5-L-alaninamid) og deretter analysert med HPLC (LUNA Ci8(2) kolonne, 0,46mm x 150 mm, 3^m) ved anvendelse av en mobil vase av vandig NaP04(20 nM, pH 2,0) og ACN (90:10 i 10 min, 10:90 i 3 min, 90:10 i 5 min), en strømnings rate på 1,2 ml/min et injeksjonsvolum på 10 jiL, kolonnetemperatur på 35°C, og deteksjon ved 200 nm.
EKSEMPEL 10. Enzymatisk resolusjon av ( R/ S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20) for å gi (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester natriumsalt (formel 23) og ( R)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22)
En reaktor (16000 I) utstyrt med overhengende omrøring fylles med kalsiumacetat (254 kg), deionisert vann (1892,7 kg) og LIPOZYME® TL 100 I (næringsgradert LPOLASE®, 983,7 kg). Etter komplett blanding ble ( R/ S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 20, 9000 kg, 85 % renhets analyse) fylt i og blandingen ble omrørt i 24 t. NaOH (2068 kg av en 30 % løsning) tilsettes under reaksjonstiden for å opprettholde pH ved 7,0. Graden av reaksjon monitoreres med HPLC (Ci8kolonne 4,6 mm x 150 mm, deteksjon ved 200 nm) Når man nådde en omdanning på ca 42 % til 45 % (f. eks etter ca 20-251) stoppet titratoren og omrøringen. Den organiske fase separeres umiddelbart, og den vandige fase vaskes to ganger med toluen (780 kg). Det vandige sjikt inneholdende (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester natriumsalt (formel 23) anvendes i påfølgende transformasjoner (eksempel 11) uten isolering. De organiske sjikt inneholdende(R)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 22) kombineres og konsentreres. 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester. Den resulterende dietylester racemiseres deretter i samsvar med eksempel 6.
EKSEMPEL 11. Framstilling av (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24) fra (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre natriumsalt
(formel 23)
En reaktor (16000 I) utstyrt med overhengende røring fylles med en final vandig løsning fra eksempel 10 (9698,6 I, inneholdende (3S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre natriumsalt (formel 23), NaCI (630 kg) og toluen (9001). Blandingen omrøres i 21 under reflukserende betingelser (75-85°C). Omrøringen stoppes; den organiske fase separeres umiddelbart, og den vandige fase vaskes to ganger med toluen (9001). De organiske sjikt, som inneholder (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24) kombineres og konsentreres. Etylesteren (formel 24) hydrolyseres deretter i samsvar med eksempel 12.
EKSEMPEL 12. Framstilling av (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 26) fra (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24).
En reaktor (12000 I) utstyrt med overhengende omrøring fylles med (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester (formel 24, 2196 I fra eksempel 11). KOH (1795,2 kg, 45 % løsning, vekt/vekt) og H20 (693,9 kg) tilsettes til reaksjonsblandingen med kraftig omrøring. Temperaturen opprettholdes ved 25°C. Etter 41 overføres reaksjonsblandingen til et hydrogeneringskar (eksempel 13) uten ytterligere opparbeidelse. EKSEMPEL 13. Framstilling av pregabalin (formel 9) fra (S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre kaliumsalt (formel 26).
En hydrogenator (120001) fylles med vann (942,1 I) og med reaksjonsblandingen fra eksempel 12, som inneholder (S)-3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre
kaliumsalt (formel 26, 4122,91). En Raney ni kkels us pensjon (219,6 kg, 50 % vekt/vekt i H20) tilsettes. Hydrogeneringen utføres under 50 psig ved 35°C. Etter 61 filtreres Raney nikkel av og det resulterende filtrat overføres til en reaktor, (16000 I) for krystallisering. Etter tilsetning av H20 (10981), justeres pH i løsningen til 7,0-7,5 ved anvendelse av HOAc (864,7 kg). Det resulterende presipitat filtreres og vaskes en gang med H20 (5491) og to ganger med IPA (2586 I hver gang). Faststoffet rekrystalliseres med IPA (12296 I) og H20 (61481). Blandingen oppvarmes til 70°C og avkjøles deretter til 4°C. Etter 5-101 filtreres det krystallinske faststoff, vaskes med IPA (5724 L), og tørkes i vakuumovn ved 45°C i 241 for å gi pregabalin som et hvitt krystallinsk faststoff (1431 kg, 30,0 % totalt utbytte, 99,5 % renhet og 99,75 % ee).
Det skal forståes, som anvendt i denne spesifikasjon og de medfølgende patentkrav, entallsformene så som "en", "et", og "den", "det", kan referere til et enkelt objekt eller til et flertall av objekter med mindre sammenhengen klart indikerer noe annet. Således, for eksempel, henvisning til et materiale inneholdende "en forbindelse" kan inkludere en enkelt forbindelse eller to eller flere forbindelser. Det skal forståes at beskrivelsen ovenfor er tiltenkt å være illustrerende og ikke begrensende. Mange utførelser vil være åpenbare for fagkyndige ved lesing av beskrivelsen. Derfor, rammen av oppfinnelsen skal bestemmes med henvisning til de medfølgende patentkrav og inkluderer ekvivalenter av slike utførelser.

Claims (13)

1. Framgangsmåte for å framstille en forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2 alkyl, C3-12 sykloalkyl, og substituert C3.12 sykloalkyl, karakterisert vedat framgangsmåten omfatter: (a) omdanne en forbindelse av formel 2,
eller et salt derav, med en syre og vann for å gi en forbindelse av formel 1 eller et salt derav, og (b) valgfritt å omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R<2>i formel 2 er som definert i formel 1.
2. Framgangsmåte i samsvar med krav 1,karakterisert vedat framgangsmåten ytterligere omfatter å redusere en cyano-enhet av en forbindelse av formel 3,
eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 2 eller et salt derav, hvorR<1>og R2 i formel 3 er definert som i formel 1; og R3 i formel 3 er d-12 alkyl, C3.12sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl.
3. Framgangsmåte i samsvar med krav 2,karakterisert vedat framgangsmåten ytterligere omfatter: (a) å sette en forbindelse av formel 4,
i kontakt med et enzym for å gi forbindelsen av formel 3, eller et salt derav, og en forbindelse av formel 5,
hvor enzymet er tilpasset for enantio-selektiv å hydrolysere forbindelsen av formel 4 til forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; (b) å isolere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; og (c) valgfritt racemisere forbindelsen av formel 5 for å gi forbindelsen av formel 4, hvorR<1>,R<2>, ogR<3>i formel 4 og formel 5 er som definert i formel 3; og R4 i formel 4 og formel 5 er de samme som eller forskjellig fra R3 og er Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl, eller aryl-Ci_6alkyl.
4. Framgangsmåte for framstilling av en forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl, og substituert C3.12 sykloalkyl, karakterisert vedat framgangsmåten omfatter: (a) å redusere en cyano-enhet av en forbindelse av formel 6,
eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 7,
eller et salt derav (b) dekarboksylere forbindelsen av formel 7 eller et salt derav for å gi forbindelsen av formel 1 eller et salt derav; og (c) valgfritt å omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat, hvor R<1>og R<2>i formel 6 og i formel 7 er som definert i formel 1.
5. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel 1,
eller et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl og substituert C3.12 sykloalkyl, Hvor fremgangsmåten omfatter; (a) dekarboksylere en forbindelse av formel 3
eller et salt derav, eller hydrolysere og dekarboksylere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav, for å gi en forbindelse av formel 8
eller et salt derav; (b) å redusere en cyano-enhet av forbindelsen av formel 8 eller et salt derav, for å gi forbindelsen av formel 1 eller et salt derav; og (c) valgfritt omdanne forbindelsen av formel 1 eller et salt derav til et farmasøytisk akseptabelt kompleks, salt, solvat eller hydrat, hvor R<1>og R2 i formel 3 og formel 8 er hver som definert for formel 1; R<3>i formel 3 er d-12 alkyl, C3.12sykloalkyl eller aryl-d-e alkyl; R<5>i formel 8 er hydrogenatom, d-12alkyl, C3.i2sykloalkyl eller aryl-d_6 alkyl.
6. Framgangsmåte for å framstille en forbindelse av formel 3,
eller et salt derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12alkyl, d-12 sykloalkyl, og substituert d-12sykloalkyl, og R<3>is d-12 a|M. C3-12sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl, karakterisert vedat framgangsmåten omfatter: (a) å sette en forbindelse av formel 4,
i kontakt med et enzym for å gi forbindelsen av formel 3 og en forbindelse av formel 5,
hvor enzymet er tilpasset enantio-selektiv hydrolysering av forbindelsen av formel 4 til forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; (b) å isolere forbindelsen av formel 3 eller et salt derav; og (c) valgfritt racemisere forbindelsen av formel 5 for å gi forbindelsen av formel 4, hvorR<1>,R<2>, og R<3>i formel 4 og formel 5 er som definert ovenfor i formel 3; og R4 i formel 4 og formel 5 er den samme som eller forskjellig fra R3 og er d-12alkyl, C3-12sykloalkyl, eller aryl-d-e alkyl.
7. En fremgangsmåte i samsvar med ethvert av kravene 1 til 6,karakterisertved at R<1>er et hydrogenatom og R2 er isobutyl i forbindelsene av formel 1 til formel 8.
8. En forbindelse,karakterisert vedat den er av formel 2,
inkluderende salter derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, C1-12 alkyl, C3-12 sykloalkyl, og substituert C3_i2 sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R2 er hydrogen, er den andre substituent ikke d-3 alkyl eller d alkyl.
9. En forbindelse av formel 3,
inkluderende salter derav, hvor R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, d-12 alkyl, d-i2 sykloalkyl, og substituert d-12 sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke d_3 alkyl eller d alkyl.
10. En forbindelse av formel 5,
inkluderende salter derav, hvor R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke Ci_3alkyl eller C5alkyl.
11. En forbindelse av formel 6,
inkluderende salter derav, hvor R<1>og R<2>er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3.12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R<2>er hydrogen, er den andre substituent ikke Ci_3alkyl eller C5alkyl.
12. En forbindelse av formel 7,
inkluderende salter derav, hvor R<1>og R2 er forskjellige og er hver uavhengig valgt blant hydrogenatom, Cm2alkyl, C3-12sykloalkyl, og substituert C3.12sykloalkyl, gitt at idet en av substituentene representert av R<1>eller R2 er hydrogen, er den andre substituent ikke Ci_3alkyl eller C5alkyl.
13. Forbindelse,karakterisert vedat den er valgt blant: (S)-4-isobutyl-2-okso-pyrrolidin-karboksylisk syre (3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre, (2S,3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre, (2R,3S)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre, ( R)- 3-cyano-2-etoksykarbonyl-5-metyl-heksanoisk syre etylester; (S)- 3-cyano-2-karboksy-5-metyl-heksanoisk syre,, og (S)-3-aminometyl-2-karboksy-5-metyl-heksanoisk syre, inkluderende salter derav og motsatte enantiomerer derav.
NO20065329A 2004-06-21 2006-11-20 Fremstilling av pregabalin og beslektede forbindelser. NO338097B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US58167104P 2004-06-21 2004-06-21
US62903404P 2004-11-18 2004-11-18
PCT/IB2005/001924 WO2006000904A2 (en) 2004-06-21 2005-06-09 Preparation of pregabalin and related compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20065329L NO20065329L (no) 2006-12-19
NO338097B1 true NO338097B1 (no) 2016-08-01

Family

ID=35295367

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20065329A NO338097B1 (no) 2004-06-21 2006-11-20 Fremstilling av pregabalin og beslektede forbindelser.

Country Status (33)

Country Link
US (4) US20050283023A1 (no)
EP (1) EP1831154B1 (no)
JP (5) JP4174551B2 (no)
KR (3) KR100847929B1 (no)
CN (2) CN1972904B (no)
AP (1) AP2466A (no)
AR (1) AR049446A1 (no)
AT (1) ATE455093T1 (no)
AU (1) AU2005256945B2 (no)
BR (1) BRPI0512347B8 (no)
CA (1) CA2571040C (no)
CR (2) CR8765A (no)
CY (1) CY1110337T1 (no)
DE (1) DE602005018965D1 (no)
DK (1) DK1831154T3 (no)
EA (3) EA015418B1 (no)
ES (1) ES2336014T3 (no)
GE (1) GEP20104895B (no)
HK (2) HK1104024A1 (no)
HR (1) HRP20100054T1 (no)
IL (1) IL179614A0 (no)
MA (1) MA28674B1 (no)
ME (1) ME01067B (no)
MX (1) MXPA06014228A (no)
NO (1) NO338097B1 (no)
NZ (1) NZ552220A (no)
PL (1) PL1831154T3 (no)
PT (1) PT1831154E (no)
RS (1) RS51210B (no)
SI (1) SI1831154T1 (no)
TW (6) TWI402248B (no)
UA (1) UA83575C2 (no)
WO (1) WO2006000904A2 (no)

Families Citing this family (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL126999A (en) 1996-07-24 2002-03-10 Warner Lambert Co Pharmaceutical preparations containing isobutylgaba and its history for use in the treatment of pain
EP1866275A1 (en) 2005-04-06 2007-12-19 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Crystalline forms of pregabalin
US7488846B2 (en) 2005-04-11 2009-02-10 Teva Pharmaceuical Industries Ltd. Pregabalin free of lactam and a process for preparation thereof
EP1768950A2 (en) * 2005-04-11 2007-04-04 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Process for making (s)-pregabalin
US20070043241A1 (en) 2005-05-10 2007-02-22 Lilach Hedvati Optical resolution of 3-carbamoylmethyl-5-methylhexanoic acid
KR20070067077A (ko) 2005-05-10 2007-06-27 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 이소부틸글루타르산을 함유하지 않는 프레가발린 및 이의제조 방법
EP1879851B1 (en) 2005-05-10 2010-11-03 Teva Pharmaceutical Industries Ltd Method for the preparation of pregabalin and salts thereof
CZ297970B6 (cs) * 2005-08-10 2007-05-09 Zentiva, A. S Zpusob výroby (S)-3-(aminomethyl)-5-methyl-hexanové kyseliny (pregabalinu)
WO2007035890A1 (en) 2005-09-19 2007-03-29 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. An asymmetric synthesis of ( s ) - ( + ) -3- (aminomethyl) -5-methylhexanoic acid
US7462738B2 (en) 2006-05-24 2008-12-09 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Processes for the preparation of R-(+)-3-(carbamoyl methyl)-5-methylhexanoic acid and salts thereof
WO2007143152A2 (en) * 2006-05-31 2007-12-13 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Preparation of (s)-pregabalin-nitrile
KR20080036060A (ko) * 2006-05-31 2008-04-24 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 프레가발린의 중간체의 제조에 효소 분할을 이용하는 방법
WO2008118427A2 (en) 2007-03-22 2008-10-02 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Synthesis of (s)-(+)-3-(aminomethyl)-5-methyl hexanoic acid
EP1992609A1 (en) * 2007-05-14 2008-11-19 Dipharma Francis S.r.l. A process for the preparation of a (S)(+)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid
JP5157576B2 (ja) 2007-05-14 2013-03-06 住友化学株式会社 光学活性２−アルキル−１，１，３−トリアルコキシカルボニルプロパンの製造方法
KR100846419B1 (ko) * 2007-08-10 2008-07-15 한국과학기술원 프레가발린의 신규한 제조 방법
US20090062393A1 (en) * 2007-08-29 2009-03-05 Protia, Llc Deuterium-enriched pregabalin
WO2009046309A2 (en) * 2007-10-03 2009-04-09 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Pregabalin -4-eliminate, pregabalin 5-eliminate, their use as reference marker and standard, and method to produce pregabalin containing low levels thereof
ITMI20072262A1 (it) * 2007-12-03 2009-06-04 Dipharma Francis Srl Procedimento per la preparazione di acido (s)(+)-3-(amminometil)-5-metilesanoico
US20100312010A1 (en) * 2007-12-18 2010-12-09 Watson Pharma Private Limited Process for the Preparation of (S)-Pregabalin
US20100324139A1 (en) * 2007-12-26 2010-12-23 Generics [Uk] Limited Process to pregabalin
SG176464A1 (en) * 2008-05-09 2011-12-29 Agency Science Tech & Res Diagnosis and treatment of kawasaki disease
EP2294207B1 (en) * 2008-05-21 2012-09-26 Sandoz AG Process for the stereoselective enzymatic hydrolysis of 5-methyl-3-nitromethyl-hexanoic acid ester
US20090312560A1 (en) * 2008-06-10 2009-12-17 Lambertus Thijs Processes for making pregabalin and intermediates therefor
WO2009158343A1 (en) * 2008-06-23 2009-12-30 Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. Stereoselective enzymatic synthesis of (s) or (r)-iso-butyl-glutaric ester
WO2010070593A2 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Pfizer Ireland Pharmaceuticals Malonate esters
IT1394292B1 (it) 2009-05-07 2012-06-06 Dipharma Francis Srl Procedimento per la sintesi di pregabalina
WO2011141923A2 (en) 2010-05-14 2011-11-17 Lupin Limited Improved synthesis of optically pure (s) - 3-cyano-5-methyl-hexanoic acid alkyl ester, an intermediate of (s)- pregabalin
WO2012025861A1 (en) 2010-08-23 2012-03-01 Pfizer Manufacturing Ireland Process for the preparation of ( s ) - 3 - cyano - 5 - methylhexanoic acid derivatives adn of pregabalin
WO2012059797A1 (en) * 2010-11-04 2012-05-10 Lupin Limited Process for synthesis of (s) - pregabalin
KR101306585B1 (ko) * 2011-04-14 2013-09-10 한국외국어대학교 연구산학협력단 프레가발린의 제조방법
CN102952057B (zh) * 2012-11-07 2015-09-09 浙江普洛家园药业有限公司 一种4-异丁基吡咯烷-2-酮的制备方法
JP6225490B2 (ja) * 2013-05-31 2017-11-08 大日本印刷株式会社 医薬品包装体
US10076550B2 (en) * 2014-06-25 2018-09-18 Council Of Scientific & Industrial Research Synergistic pharmaceutical composition for gastroinestinal disorders
WO2016075082A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 Sandoz Ag Stereoselective reductive amination of alpha-chiral aldehydes using omega-transaminases for the synthesis of precursors of pregabalin and brivaracetam
CN104557576B (zh) * 2014-12-19 2019-07-19 浙江华海药业股份有限公司 一种高纯度普瑞巴林的制备方法
CN105348125A (zh) * 2015-11-26 2016-02-24 太仓运通生物化工有限公司 一种以异戊醛为原料合成普瑞巴林的方法
CN107445864B (zh) * 2017-08-09 2020-01-17 无锡殷达尼龙有限公司 一种纯化长碳链氰基酸产物的方法
CN108358799B (zh) * 2018-04-24 2020-11-10 贵州师范大学 一种普瑞巴林的制备方法
CN109503403B (zh) * 2018-12-21 2021-11-16 卓和药业集团股份有限公司 一种普瑞巴林的拆分方法
CN113248416B (zh) * 2020-02-10 2024-03-26 江西博腾药业有限公司 1-((苄氧基)羰基)-4-乙基吡咯烷-3-羧酸的制备方法及其应用
EP4103168A4 (en) * 2020-02-14 2024-04-24 Council Of Scientific & Industrial Research PROCESS FOR PREPARING GAMMA-AMINO-BUTYRIC ACIDS AND THEIR ANALOGS
CN111205288B (zh) 2020-02-19 2021-03-30 四川大学 一种(1S,12bS)内酰胺酯化合物的合成方法
CN113651717B (zh) * 2021-08-05 2024-08-30 浙江工业大学 一种光学纯异丁基丁二腈的消旋方法
CN113880724A (zh) * 2021-12-06 2022-01-04 南京桦冠生物技术有限公司 一种3-(2-氨基苯基)-2-丙烯酸酯的制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5637767A (en) * 1995-06-07 1997-06-10 Warner-Lambert Company Method of making (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid
US20030212290A1 (en) * 2000-01-27 2003-11-13 Burk Mark Joseph Asymmetric synthesis of pregabalin

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3125583A (en) * 1964-03-17 Hjnc oxchaxohxchc o oh
US637767A (en) * 1899-09-25 1899-11-28 Gaylard W Denyes Grain-drill.
SU452196A1 (ru) * 1973-02-12 2001-09-20 Филиал Всесоюзного Научно-Исследовательского Химико-Фармацевтического Института Им. Серго Орджоникидзе СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ γ-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ
JPS60338B2 (ja) * 1980-12-16 1985-01-07 日本新薬株式会社 酪酸誘導体の製法
US4428887A (en) * 1982-07-14 1984-01-31 Monsanto Company Method of producing mono-substituted terminal diesters
US5618710A (en) * 1990-08-03 1997-04-08 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Crosslinked enzyme crystals
US6197819B1 (en) * 1990-11-27 2001-03-06 Northwestern University Gamma amino butyric acid analogs and optical isomers
US5616793A (en) * 1995-06-02 1997-04-01 Warner-Lambert Company Methods of making (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid
DE19623142A1 (de) * 1996-06-10 1997-12-11 Huels Chemische Werke Ag Enantiomerenangereicherte, durch einen tertiären Kohlenwasserstoffrest substituierte Malonsäuremonoester sowie deren Herstellung
IL126999A (en) * 1996-07-24 2002-03-10 Warner Lambert Co Pharmaceutical preparations containing isobutylgaba and its history for use in the treatment of pain
JPH10245369A (ja) * 1997-03-03 1998-09-14 Ajinomoto Co Inc セリン誘導体の製造方法
US6329429B1 (en) * 1997-06-25 2001-12-11 Warner-Lambert Company Use of GABA analogs such as Gabapentin in the manufacture of a medicament for treating inflammatory diseases
AU9019198A (en) * 1997-08-19 1999-03-08 Warner-Lambert Company Methods for treating physiological conditions associated with the use, or sequelae of use, of cocaine or other psychomotor stimulants
US6127418A (en) * 1997-08-20 2000-10-03 Warner-Lambert Company GABA analogs to prevent and treat gastrointestinal damage
WO1999008670A1 (en) * 1997-08-20 1999-02-25 Guglietta, Antonio Gaba analogs to prevent and treat gastrointestinal damage
RU2143002C1 (ru) * 1997-12-24 1999-12-20 Акционерное общество открытого типа "Мосагроген" СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ γ-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ
PL345340A1 (en) * 1998-07-09 2001-12-17 Warner Lambert Co Compositions comprising gaba analogs and caffeine
BR9911887A (pt) * 1998-07-09 2001-03-27 Warner Lambert Co Método para o tratamento da insÈnia
DK1121114T3 (da) * 1998-10-16 2007-04-10 Warner Lambert Co Anvendelse af GABA-analoger til fremstilling af et medikament til behandling af mani og bipolære lidelser
GB0004297D0 (en) * 2000-02-23 2000-04-12 Ucb Sa 2-oxo-1 pyrrolidine derivatives process for preparing them and their uses
US6931007B2 (en) * 2001-07-25 2005-08-16 Longboard, Inc. System and method of serving data messages
EP1333087A1 (en) * 2002-02-05 2003-08-06 Avantium International B.V. Crosslinked enzyme aggregates and crosslinking agent therefore
US20030225149A1 (en) * 2002-04-30 2003-12-04 Blazecka Peter G. Process for preparing highly functionalized gamma-butyrolactams and gamma-amino acids
FR2849024B1 (fr) * 2002-12-20 2007-11-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes chiraux derives d'esters de l'acide hexanoique, procede et intermediaires de preparation, utilisation a la synthese de l'acide 2-(bromomethyl)2-ethyl hexanoique chiral
JP2006061112A (ja) * 2004-08-30 2006-03-09 Sumitomo Chemical Co Ltd 光学活性な２−（シクロペンチルメチル）−マロン酸モノエステルの製造方法
KR20080036060A (ko) * 2006-05-31 2008-04-24 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 프레가발린의 중간체의 제조에 효소 분할을 이용하는 방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5637767A (en) * 1995-06-07 1997-06-10 Warner-Lambert Company Method of making (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid
US20030212290A1 (en) * 2000-01-27 2003-11-13 Burk Mark Joseph Asymmetric synthesis of pregabalin

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BURK et al., "An Enantioselective Synthesis of (S)-(+)-3-Aminomethy1-5-methylhexanoic Acid via Asymmetric Hydrogenation", J. Org. Chem., 2003 68(14): 5731-5734., Dated: 01.01.0001 *
SAMMIS et al., "Highly Enantioselective Catalytic Conjugate Addition of Cyanide to α,β-Unsaturated Imides", J.Am.Chem.Soc., 2003 vol. 125, No. 15, pp. 4442-4443., Dated: 01.01.0001 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2006000904A2 (en) 2006-01-05
TW200846474A (en) 2008-12-01
NO20065329L (no) 2006-12-19
CA2571040C (en) 2009-09-15
AR049446A1 (es) 2006-08-02
CN1972904A (zh) 2007-05-30
US8134023B2 (en) 2012-03-13
MA28674B1 (fr) 2007-06-01
HRP20100054T1 (hr) 2010-05-31
TW200846307A (en) 2008-12-01
NZ552220A (en) 2010-08-27
TWI405747B (zh) 2013-08-21
EA200602099A1 (ru) 2007-04-27
AP2466A (en) 2012-09-17
EP1831154B1 (en) 2010-01-13
EP1831154A2 (en) 2007-09-12
CN102102114A (zh) 2011-06-22
AU2005256945B2 (en) 2008-11-13
US20120015412A1 (en) 2012-01-19
JP4966183B2 (ja) 2012-07-04
ME01067B (me) 2012-10-20
DE602005018965D1 (de) 2010-03-04
HK1161307A1 (en) 2012-08-24
EA200800909A1 (ru) 2008-08-29
KR20080015153A (ko) 2008-02-18
EA015418B1 (ru) 2011-08-30
CA2571040A1 (en) 2006-01-05
ATE455093T1 (de) 2010-01-15
KR100847929B1 (ko) 2008-07-22
JP4782101B2 (ja) 2011-09-28
AU2005256945A1 (en) 2006-01-05
TWI357405B (en) 2012-02-01
AP2006003846A0 (en) 2006-12-31
JP2008110985A (ja) 2008-05-15
BRPI0512347B8 (pt) 2021-05-25
CN1972904B (zh) 2011-02-02
SI1831154T1 (sl) 2010-03-31
DK1831154T3 (da) 2010-04-12
CR8765A (es) 2008-01-02
JP2008504252A (ja) 2008-02-14
GEP20104895B (en) 2010-02-25
RS51210B (sr) 2010-12-31
JP4800346B2 (ja) 2011-10-26
EA200800908A1 (ru) 2008-12-30
TW200900375A (en) 2009-01-01
KR20080015524A (ko) 2008-02-19
TW200846306A (en) 2008-12-01
EA011765B1 (ru) 2009-06-30
US20050283023A1 (en) 2005-12-22
BRPI0512347B1 (pt) 2018-03-20
US8044227B2 (en) 2011-10-25
US20110065168A1 (en) 2011-03-17
CN102102114B (zh) 2013-08-14
PT1831154E (pt) 2010-02-19
KR20080015152A (ko) 2008-02-18
HK1104024A1 (en) 2008-01-04
MXPA06014228A (es) 2007-02-14
IL179614A0 (en) 2007-05-15
TW200604139A (en) 2006-02-01
CY1110337T1 (el) 2015-01-14
UA83575C2 (uk) 2008-07-25
KR100847927B1 (ko) 2008-07-22
JP2008088191A (ja) 2008-04-17
US7838686B2 (en) 2010-11-23
PL1831154T3 (pl) 2010-05-31
JP2009022272A (ja) 2009-02-05
JP4174551B2 (ja) 2008-11-05
WO2006000904A3 (en) 2006-04-27
BRPI0512347A (pt) 2008-03-04
JP2008133289A (ja) 2008-06-12
TW200902481A (en) 2009-01-16
ES2336014T3 (es) 2010-04-07
TWI396743B (zh) 2013-05-21
TWI399361B (zh) 2013-06-21
JP4777332B2 (ja) 2011-09-21
US20090042262A1 (en) 2009-02-12
KR100847928B1 (ko) 2008-07-22
TWI402248B (zh) 2013-07-21
TWI377191B (en) 2012-11-21
CR20110483A (es) 2011-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO338097B1 (no) Fremstilling av pregabalin og beslektede forbindelser.
US20070141684A1 (en) Preparation of gamma-amino acids having affinity for the alpha-2-delta protein
NO20151209L (no) Fremgangsmåter for fremstilling av forbindelser
KR100843684B1 (ko) 프레가발린 및 관련 화합물의 제조방법
MX2008008282A (en) Preparation of gamma-amino acids having affinity for the alpha-2-delta protein

Legal Events

Date Code Title Description
CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: UPJOHN US 1 LLC, US

MM1K Lapsed by not paying the annual fees