MX2007015422A

MX2007015422A - Oxadiazoles o isoxazoles policiclicos y su uso como ligandos del receptor de s1p.

Info

Publication number: MX2007015422A
Application number: MX2007015422A
Authority: MX
Inventors: Sven Weiler; Frederic Zecri; Rainer Albert
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2005-06-08
Filing date: 2006-06-07
Publication date: 2008-02-21
Also published as: KR20080014009A; BRPI0612028A2; JP2008545767A; US20080306124A1; WO2006131336A1; CA2610310A1; AU2006256968A1; EP1893591A1

Abstract

Se dan a conocer compuestos policiclicos de la Formula I: (ver formula I) los cuales son utiles como ligandos del receptor de esfingosina-1-fosfato (S1P), en particular como inmunosupresores.

Description

OXADIAZOLES O ISOXAZO LES PO IC1CL1COS Y SU U SO COMO LIGAN DOS DE L REC EPTOR DE S1 P La presente invención se refiere a compuestos policíclicos, a procesos para su producción , a su uso como productos farmacéuticos, y a composiciones farmacéuticas que los comprenden . De una manera más particular, la presente invención proporciona, en un primer aspecto, un compuesto de la Fórm ula I : en donde: X es -N= e Y es -O-; o bien X es -O- e Y es -N = ; o bien X es C H e Y es O; Ri es bife nililo sustituido, 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo está mono-sustituido; fenilo sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados a partir de halógeno, nitrilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono , alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alqu ilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, haloalcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono , halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , alqueniloxi lo de 2 a 6 átomos de carbono, alquiniloxilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalq uilo de 3 a 6 átomos de carbono , cicloalqui lo de 3 a 6 átomos de carbono-alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquiloxilo de 3 a 6 átomos de carbono , fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, y heterociclil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono; o heteroarilo de 5 ó 6 miembros sustituido; R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido por halógeno, OH, N H2, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alqui lo de 1 a 4 átomos de carbono-carboni loxi lo; ami no; carboxilo; sulfamoílo ; carbamoílo ; o H N -CO-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; o R2 es R3- R4-COOH ó R3-R4-CON R5R6, en donde R3 es SO2-N H ; SO2-N-(alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) ; CO-N H ; CO-N-(alqui lo de 1 a 4 átomos de carbono) ; CH2-0; NH-CO; ó N-(alquilo de 1 a 4 átomos de carbono)CO; y R4 es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente interrumpido por O, S, ó C=CH2, o fenileno opcionalmente sustituido, o cicloalquileno de 3 a 6 átomos de carbono; y cada uno de R5 y R6 es independientemente hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, o R5 y R6, junto con el átomo de nitrógeno con el que están enlazados, forman un residuo heterocíclico, y el anillo A puede estar opcionalmente sustituido, en el entendido de que, cuando Y es O, X es -N= ó -CH = , y R2 es SO2N H-R4-COOH , en donde R4 es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono ramificado, entonces, i. R T es diferente de fenilo, ya sea mono-sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o bien disustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, y alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono; o ii. Ri es diferente de tienilo o furilo monosustituido, o un derivado fisiológicamente hidrolizable del mismo, una sal, hidrato, y/o solvato del mismo. Halógeno puede ser fl úor, cloro, o bromo, de preferencia flúor o cloro. Alquilo o alcoxilo, como un grupo o presente en un grupo, puede ser de cadena recta o ramificada. Alquileno de 1 a 6 átomos de carbono puede ser de cadena recta o ramificada. Halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, como un grupo o como una f racción presente en un grupo , puede ser alqu ilo de 1 a 8 átomos de carbono o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono sustituido por 1 a 5 átomos de halógeno, por ejemplo CF3 ó C F3-CH2-O-. Alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono puede ser halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono ad icionalmente sustituido por alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, por ejemplo en la posición 1 . Se puede aplicar lo mismo a los otros grupos . Cuando R, es bifenili lo sustituido , 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo , cualquiera y/o ambas fracciones de fenilo pueden estar sustituidas , por ejemplo mono- o di-sustituidas , por ejemplo por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alqui lo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o n itrilo. De una manera preferible , cuando menos una fracción de fenilo de bifenililo , 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo está mono-sustituida, por ejemplo como se indica anteriormente. De una manera alternativa, cada fracción de feni lo del bifenililo, 4-fenoxi-feni lo, o 4-(feni l-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo está mono-sustituida , por ejemplo como se i ndica anteriormente, por ejemplo por halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , y opcionalmente como sustituyente sobre la segunda fracción de fenilo cualquiera de halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono.

Cuando R es fenilo sustituido, puede estar mono- ó disustituido. Cuando R< es fenilo di-sustituido, un sustituyente puede ser de preferencia halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono o haloalcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, y el segundo sustituyente como se indica anteriormente. Los ejemplos de un heteroarilo de 5 ó 6 miembros como Ri incluyen , por ejemplo, tienilo, furilo, o piridilo. Se prefiere tienilo. Cuando R, es heteroarilo sustituido, está mono- ó di-sustituido, de preferencia di-sustituido. Los sustituyentes pueden ser, por ejemplo, halógeno, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, por ejemplo CF3, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y/o fenilo opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono. Un residuo heterocíclico, como se forma por R5R6, significa un anillo heterocíclico de 3 a 8, de preferencia de 5 a 8 miembros, saturado, insaturado, o aromático, que comprende 1 ó 2 heteroátomos, de preferencia seleccionados a partir de N , O, y S , y opcionalmente sustituido. Cuando R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido por halógeno, OH , NH2, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono- carboniloxilo, el sustituyente de preferencia está sobre el último átomo de carbono, es decir, en la posición ?. Cuando R4 es fenileno opcionalmente sustituido o cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, puede ser 1,4-fenileno o cicloalquileno de 3 a 6 átomos de carbono, por ejemplo ciciohexileno, opcionalmente sustituido por halógeno. El anillo A puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo por halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, o nitrilo. Los siguientes significados se prefieren de una manera independiente, colectiva, o en cualquier combinación o subcombinación: i) Ri es bifenililo, 4-fenoxi-fenilo o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo lleva un halo-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, por ejemplo CF3; ii) Ri es fenilo sustituido por halo-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, por ejemplo CF3, y por un segundo sustituyente como se indica anteriormente; iii) Ri es tienilo disustituido por halo-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, por ejemplo CF3,y fenilo; iv) R2 es SO2NH; v) R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ?-sustituido por NH2, en donde R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono de cadena ramificada o recta, por ejemplo alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; de preferencia R2 es CH2-NH2; vi) R2 es R3-R4-COOH; vii) R2 es R3-R4-CONR5R6; viii) R3 es S02-NH; S02N-(alquilo de 1 a 4 átomos de carbono); NH-CO; o NJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono)-CO; ix) R4 es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono ramificado o lineal opcionalmente interrumpido por O; de preferencia R4 es alquileno lineal de 1 a 6 átomos de carbono; x) cada uno de R5 y R6 es independientemente H o alquilo de 1 a 2 átomos de carbono; xi) el anillo A está insustituido. Los compuestos de la Fórmula I pueden existir en forma libre o en forma de sal, por ejemplo sales de adición con, por ejemplo, ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo ácido clorhídrico o ácido acético, o sales que se pueden obtener cuando R2 es o comprende COOH, con una base, por ejemplo sales alcalinas, tales como sodio o potasio, o sales de amonio sustituido o insustituido. Se apreciará que los compuestos de la Fórmula I pueden existir en la forma de isómeros ópticos, racematos, o diaestereoisómeros.

Por ejemplo, R4 puede comprender un átomo de carbono asimétrico, cuando R4 es alquileno ramificado. Se debe entender que la presente invención abarca todos los enantiómeros y conformadores y sus mezclas. Se aplican consideraciones similares en relación con los materiales de partida que exhiban átomos de carbono asimétricos, como se menciona anteriormente. Un derivado fisiológicamente hidrolizable de un compuesto de la Fórmula I significa un compuesto que es hidrolizable bajo condiciones fisiológicas para proporcionar un compuesto de la Fórmula I , y un subproducto que por sí mismo es fisiológicamente aceptable, por ejemplo un éster que se hidroliza para proporcionar un compuesto de la Fórmula I y un alcohol no tóxico en los niveles de dosificación deseados . La presente invención también incluye un proceso para la producción de un compuesto de la Fórmula I , cuyo proceso comprende: a) para la producción de un compuesto de la Fórmula I , en donde X es -N= e Y es O, y R2 es como se define anteriormente, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula I I : en donde el anillo A y R2 son como se definen anteriormente, con un compuesto de la Fórmula l l l : en donde R, es como se define anteriormente, o un derivado funcional del mismo, por ejemplo un éster activado, cloruro de acilo, o anhídrido; o b) para la producción de un compuesto de la Fórmula I , en donde X es -N= e Y es O, y R2 es R3-R4-COOH o R3-R4-CON R5R6, en donde R3 es N H-CO ó NJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono)-CO, y R4, R5, y Rß son como se definen anteriormente, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula IV: en donde R^ y el anillo A son como se definen anteriormente, y R'2 es N H2 o NHJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono), con un agente acilante, o siguiendo una reacción de Sandmeyer; o c) para la producción de un compuesto de la Fórmula I , en donde Y es -N= y X es O, ciclar en la presencia de, por ejemplo, un reactivo de Burgess, un compuesto de la Fórmula V: en donde R R2, y el anillo A son como se definen anteriormente; o d) para la producción de un compuesto de la Fórmula I , en donde Y es O y X es CH , hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VI : en donde , es como se define anteriormente, con un compuesto de la Fórmula Vil: en donde R2 es como se define anteriormente; o e) convertir un compuesto de la Fórmula I en otro compuesto de la Fórmula I, y recuperar el compuesto resultante de la Fórmula I en forma libre o en la forma de una sal, y cuando se requiera, convertir el compuesto de la Fórmula I obtenido en forma libre hasta la forma de sal deseada, o viceversa. Los pasos del paso del proceso a) a e) se pueden llevar a cabo de acuerdo con los métodos conocidos en este campo, o como se da a conocer más adelante en los Ejemplos. Los ejemplos de la conversión de un compuesto de la Fórmula I en otro compuesto de la Fórmula I pueden incluir, por ejemplo: i) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde - es bifenililo sustituido, 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo está mono-sustituido, convertir un compuesto de la Fórmula I, en donde R^ es diferente de bifenililo sustituido, 4-fenoxi- fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo está mono-sustituido, en un compuesto de la Fórmula I en donde R, es bifenililo sustituido, 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo está mono-sustituido; ii) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde R2 es R3-R4-COOH, hidrolizar un compuesto de la Fórmula I, en donde el COOH presente en R2 está en la forma de un éster fisiológicamente hidrolizable, por ejemplo un metil-éster; iii) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde R2 es R3-R -CONR5R6, convertir un compuesto de la Fórmula I, en donde R2 es R3R4-COOH, en un éster activado, y hacer reaccionar el éster activado con la amina deseada para introducir los grupos R5 y R6 deseados. El compuesto de la Fórmula II utilizado como material de partida se puede obtener mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula VIII: en donde R2 y el anillo A son como se definen anteriormente, con hidroxilamina. El compuesto de la Fórmula IV se puede producir mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula IX: R,-COOH IX en donde R, es como se define anteriormente, o un derivado funcional del mismo, por ejemplo un éster activado, cloruro de acilo, o anhídrido, con un compuesto de la Fórmula X: en donde R'2 es como se define anteriormente. Los compuestos de la Fórmula V se pueden preparar mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula lll con un compuesto de la Fórmula XI: en donde R2 y el anillo A son como se definen anteriormente. Hasta donde no se describa particularmente la producción de los materiales de partida, los compuestos son conocidos o bien se pueden preparar de una manera análoga a los métodos conocidos en la materia, o como se da a conocer posteriormente en la presente. Los siguientes Ejemplos son ilustrativos de la invención. EDC significa 1-et¡l-3-(3-dimetil-amino-propil)-carbodi-imida. Eiemplo 1: 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-bencen-sulf onamida a) Ácido 2-trifluoro-meiil-bifenil-4-carboxílico. A una solución del ácido 4-cloro-3-trifluoro-metil-benzoico (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, el ácido borónico correspondiente (1.5 equivalentes), X-Phos (0.05 equivalentes), KF (3 equivalentes), y finalmente Pd(OAc)2 (0.05 equivalentes); entonces la mezcla de reacción se agita a 90°C durante 15 horas. La mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar el compuesto del título. b) N-hidroxi-4-sulfamoM-benzamidina. A una solución del 4-sulfamido-benzonitrilo (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agrega, a -25°C (baño de hielo/metanol) una solución de hidroxilamina en agua (20 equivalentes). Luego la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se extrae con acetato de etilo y se lava con agua. La capa orgánica se seca sobre Na2S04, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. La N-hidroxi-4-sulfamoil-benzamidina se aisla mediante precipitación utilizando una mezcla de acetato de etilo/hexanos. c) El compuesto del título se prepara como sigue: A una solución del compuesto del paso a) (1 equivalente) en dioxano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, EDC (1.3 equivalentes) y HOBt (1.3 equivalentes); entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego se agrega la N-hidroxi-sulfamoil-benzamidina del paso b) (1.3 equivalentes) a la mezcla de reacción, y se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente, seguido por agitación durante la noche a 95°C. Entonces la mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea, para proporcionar la 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-¡l]-bencen-sulfonamida (m/z = 446 (M + H)+). Eiemplo 2: Ácido N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-iI)- [1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil)-succinámico. a) Ácido 2=trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. A una solución del ácido 4-cloro-3-trifluoro-metil-benzoico (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, el ácido borónico correspondiente (1.5 equivalentes), X-Phos (0.05 equivalentes), KF (3 equivalentes), y finalmente Pd(OAc)2 (0.05 equivalentes); luego la mezcla de reacción se agita a 90°C durante 15 horas. La mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar el compuesto del título. b) N-4-amino-N- idroxi-benzamidina. A una solución del 4-amino-benzonitrilo (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agrega, a -25°C (baño de hielo/metanol) , una solución de hidroxilamina en agua (20 equivalentes) . Luego la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 1 6 horas. La mezcla de reacción se extrae con acetato de etilo y se lava con agua; la capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. La 4-amino-N-hidroxi-benzamidina se aisla mediante precipitación utilizando una mezcla de acetato de etilo/hexanos. c) 4-[5-(2-trifluoro-met¡l-b¡fenil-4-¡l)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-?l]-fenii-amina. A una solución del compuesto del paso a) ( 1 equivalente) en dioxano, se le agregan , bajo una atmósfera inerte, EDC (1 .3 equivalentes) y HOBt (1 .3 equivalentes) ; entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego se agrega la N-hidroxi-benzamidina del paso b) ( 1 .3 equivalentes) a la mezcla de reacción, y se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente, seguido por agitación durante la noche a 95°C. Entonces la mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea, para proporcionar la 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil-amina. g) A una solución de la 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil-amina (1 equivalente) en acetonitrilo, se le agrega, bajo una atmósfera inerte, anhídrido succínico ( 1 .1 equivalentes) , y la mezcla de reacción se agita a 90°C durante 1 6 horas. Luego la mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se aisla el producto deseado mediante filtración después de la precipitación utilizando una mezcla de acetato de etilo y hexanos, m/z = 480 (M-H)\ Eiemplo 3: 4-[5-(4-fenoxi-3-trifluoro-metil-fenil)-[1 ,2, oxadiazol-3-il]-bencen-sulf onamida.

A una solución de la 4-[5-(4-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-bencen-sulfonamida obtenida siguiendo un procedimiento como se describe en el Ejemplo 1 ( 1 equivalente) en N ,N-dimetil-formamida, se le agregan, a 0°C (baño de hielo/agua) y bajo una atmósfera inerte, fenol (3 equivalentes) y NaH (3 equivalentes). Entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 1 6 horas. La mezcla de reacción se apaga cuidadosamente utilizando una solución de HCl 2N , y se extrae con acetato de etilo, se lava con agua, la capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra bajo presión reducida.

El producto deseado se aisla mediante precipitación utilizando una mezcla de acetato de etilo/hexanos, o mediante HPLC de preparación inversa (m/z - 460 (M + H)+) . Eiemplo 4: Ácido N-{4-[5-(4-fenoxi-3-trifluoro-meti l-fe?pil)- [1 ,2,4]-o adiazol-3-il]-fenil}-succinámico.

Se repite el procedimiento del Ejemplo 3, pero utilizando, como material de partida, el ácido N-{4-[5-(3-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinámico, para proporcionar el compuesto del título (m/z = 498.4 (M + H)+) . Siguiendo el procedimiento descrito en los Ejemplos 1 a 4, y utilizando los materiales de partida apropiados, se obtienen los compuestos de la Fórmula X^ en donde R , , R3 y R4 son como se definen en la siguiente Tabla TABLA 1 Siguiendo el procedimiento descrito en los Ejemplos 1 a 4, y utilizando los materiales de partida apropiados, se obtienen los compuestos de la Fórmula X2: ? < 2 en donde R^ y R2 son como se definen en la siguiente Tabla 2.

TABLA 2 Ejemplo 175 El compuesto del Ejemplo 175 se prepara repitiendo el procedimiento del Ejemplo 1, pero utilizando, como material de partida, el terbutil-éster del ácido [4-(N-hidroxi-carbamimidoil)-bencilj-carbámico (disponible después de la N-protección con BOC20 en dioxano/agua/NaOH a partir del clorhidrato de 4-amino-metil-benzonitrilo comercial), y la siguiente formación de la N-hidroxi-amidina con hidroxilamina al 50 por ciento en agua y tetrahidrofurano como solvente, para proporcionar el compuesto del título después de la remoción del grupo protector de Boc con ácido trifluoro-acético/agua (95/5; 5 minutos, temperatura ambiente). Eiemplo 176: El compuesto se prepara como se da a conocer para el compuesto del Ejemplo 175, pero utilizando, como material de partida, el 4-(1-amino-1-metil-etil)-benzonitrilo.

Eiemplo 177: A una solución del terbutil-éster del ácido {4-[5-(4-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-bencil}-carbámico obtenido siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 y en el Ejemplo 175 (1 equivalente) en N,N-dimetil-formamida, se le agrega, a 0°C (baño de hielo/agua), bajo una atmósfera inerte, NaH (3 equivalentes), y después de 30 minutos, trifluoro-etanol (5 equivalentes). Entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se apaga cuidadosamente con ácido acético (95 por ciento), y se concentra. Después de eso, el residuo se disuelve en cloruro de metileno, se lava con agua, la capa orgánica se seca sobre Na2S04, se filtra, y se concentra. El producto deseado se obtiene después de la purificación sobre gel de sílice (ciciohexano/acetato de etilo, 4/1, como la fase móvil), y la desprotección subsiguiente (de acuerdo con el Ejemplo 175). Eiemplo 179: 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,3,4]-oxadiazol-2-il]-bencen -sulfonamida. 4-h idrazino-carbonil-bencen-sulf onamida. A una solución del ácido 4-sulfonamido-benzoico (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, Et3N (1.3 equivalentes) y cloruro de sulfonilo (1.1 equivalentes) . Entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos. La temperatura se reduce hasta 0°C (baño de hielo/agua) , y se agrega lentamente a la mezcla de reacción hidrazina en solución en metanol (30 equivalentes) ; la mezcla resultante se agita desde 0°C hasta la temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se apaga con agua y se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre Na2S04, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. El producto deseado se aisla mediante precipitación utilizando una mezcla de acetato de etilo/hexanos. A una solución del ácido 4-fenil-3-trifluoro-metil-benzoico (descrito anteriormente) ( 1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, Et3N ( 1 .3 equivalentes) y cloruro de sulfonilo (1 .1 equivalentes); entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla de reacción se apaga con agua y se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra bajo presión reducida. La 4-[N'-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-carbonil)-hidrazino-carbonilj-bencen-sulfonamida se aisla utilizando cromatografía por evaporación instantánea. A una solución de la 4-[N'-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-carbonil)-hidrazino-carbonil]-bencen-sulfonamida (1 equivalente) en acetonitrilo, se le agregan , bajo una atmósfera inerte, Et3N ( 1 .3 equivalentes) y el reactivo de Burgess ( 1 .5 equivalentes) . Entonces la mezcla de reacción se agita bajo reflujo durante 10 horas. La mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea (acetato de etilo/hexanos), para proporcionar la 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,3,4]-oxadiazol-2-il]-bencen-sulfonamida deseada (m/z = 444 (M- H)"). Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 179, y utilizando los materiales de partida apropiados, se obtienen los compuestos de la Fórmula X3: en donde R, y R2 son como se definen en la siguiente Tabla 3.

TABLA 3 Eiemplo 183: 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[ ,3,4]-oxadiazol-2-il]-feni I-amina. Ácido 2'-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico.

El ácido 4-cloro-3-(trifluoro-metil)-benzoico (1 equivalente), ácido fenil-borónico (1.8 equivalentes), Pd(OAc)2 y diciclohexil-fosfino-2,4,6-tri-isopropil-bifenilo, se disuelven en tetrahidrofurano, se ponen a reflujo durante 90 minutos. Después de enfriarse, la mezcla de reacción se filtra a través de Hyflo Super Cel®, y se concentra. El residuo crudo se purifica sobre gel de sílice utilizando dietil-éter/c-hexano como la fase móvil. 5-(4-nitro-fenil)-3-(2-tr¡fluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadia?ol.

El ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico (1 equivalente) se disuelve en POCI3, y se agrega 4-nitro-benzhidrazida (1 equivalente). Después de 3 horas a reflujo, se agrega otro equivalente de 4-nitro-benzhidrazida, y se mantiene durante 3 horas adicionales a reflujo. Después de remover el POCI3 bajo presión reducida, el residuo se disuelve en acetato de etilo, y se extrae con una solución saturada de NaHC03. La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, y se utiliza el producto del título para el siguiente paso sin mayor purificación. 4-[5-(2-trif I uoro-metil-bif eni l-4-il)-[1, 3, ]-oxadiazol-2-il]-f en ilamina.

El 5-(4-nitro-f en il)-3-(2-trif luoro-f enil-bif eni l-4-il)-[1, 2, 4]-?xa-diazol se disuelve en metanol/acetato de etilo, 1/1, y se hidrogena a temperatura ambiente bajo presión normal con Pd/C al 10 por ciento como catalizador durante 16 horas. Después de la filtración a través de Hyflo Super Cel®, la mezcla de reacción se concentra y se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno ? cloruro de metileno/metanol, 95/5, como la fase móvil). ESI-MS (ESI ): 380 (M - 1H)-. Ejemplo 184: Ácido N-{4-[5-(2-írifluoro-meíil-bifenil-4-il)-[1,3,4]-oxadiazol-2-il]-fenil}-succinámico.

La 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1, 3, 4]-oxadiazol-2-il]-f enilamina (1 equivalente) se disuelve en cloruro de metileno, y se agregan 4-metil-morfolina (2 equivalentes) y anhídrido succínico (2 equivalentes). Después de 16 horas a temperatura ambiente, se obtiene el producto del título puro después de la cromatografía en columna de gel de sílice (cloruro de metileno ? cloruro de metileno/metanol, 90/10, como la fase móvil). ESI-MS (ESI ): (M - 1H)": 480 (M - 1H)\ Eiemplo 185: {4-[5-(2-t rif luoro- metil-bif eni l-4-i I )-isoxazol-3JIJ-fenil}-metanol. 4-etinil-2-trifluoro-metil-bifenilo.

A una solución de la 4-bromo-2-trifluoro-anilina (1 equivalente) en benceno, se le agrega, bajo una atmósfera inerte, nitrito de pentilo normal (1 equivalente) a 50°C. Después de 1 hora a reflujo, se agrega un equivalente de nitrito de pentilo normal. Después de 2 horas adicionales a reflujo, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, y se concentra bajo presión reducida. El residuo oscuro se purifica sobre gel de sílice utilizando c-hexano ? c-hexano/acetato de etilo, 9/1 , como la fase móvil (aceite color naranja pálido), para proporcionar el 4-bromo-2-trifluoro-metil-bifenilo. El 4-bromo-2-trifluoro-metil-bifenilo (1 equivalente) se disuelve en tolueno/trietil-amina (4/1) bajo un gas de argón, y se agregan Cul (0.33 equivalentes) y Pd(Ph3P)2CI2 (0.42 equivalentes), y se mantienen a 60°C durante 20 minutos. Después de esto, se agrega por goteo dimetil-silil-acetileno (11.5 equivalentes) a la mezcla de reacción. Después de 18 horas a 60°C, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se filtra a través de Hyflo Super Cel®, y se extrae tres veces con una solución acuosa saturada de NH4CI. La capa orgánica se seca con Na2SO4, se concentra, y se purifica sobre gel de sílice utilizando c-hexano como eluyente, proporcionando un líquido color café pálido de trimetil-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il-etinil)-silano. El trimetil-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il-etinil)-silano se disuelve en metanol/NaOH 1N (4/1), y se mantiene a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de remover el metanol bajo presión reducida, el residuo se disuelve en cloruro de metileno, y se extrae con una solución acuosa diluida de HCl. La fase orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra. El 4-etinil-2-trifluoro-metil-bifenilo se obtiene como un líquido color café pálido. Oxima de 4-bromo-benzaldehído.

A una solución del 4-bromo-benzaldehído (1 equivalente) en etanol, se le agregan, a temperatura ambiente, K2C03 (1.1 equivalentes) y clorhidrato de hidroxilamina (1 equivalente). Después de 18 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtra y se concentra bajo presión reducida. El residuo cristalino se disuelve en cloruro de metileno, y se extrae con una solución acuosa diluida de HCl. La solución acuosa se extrae con acetato de etilo, y las fases orgánicas combinadas se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. El residuo color café pálido cristalino (oxima de 4-bromo-benzaldehído) se utiliza para la formación del isoxazol sin mayor purificación. 3-(4-bromo-fenil)-5-(2-trifluoro-meti 1-bif en il-4-N)-isoxazol.

A una solución del 4-etinil-2-trifluoro-metil-bifenilo ( 1 equivalente) en cloruro de metileno, se le agrega una solución acuosa al 10 por ciento de NaOCI a 0°C. Después de esto, se agrega una solución de oxima de 4-bromo-benzaldehído (1 .1 equivalentes) (b), y luego se agita a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluye con cloruro de metileno, y se extrae tres veces con agua. La capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra. Después de la recristalización a partir de metanol, se obtiene el 3-(4-bromo-fenil)-5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol puro (cristales color café pálido) . {4-[5-(2-trifluoro-meti l-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil}-metapol.

El compuesto del título se obtiene empleando el procedimiento del 3-(4-bromo-fenil)-5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-i I) -isoxazol utilizando la oxima de 4-hidroxi-metil-benzaldehído en lugar de la oxima de 4-bromo-benzaldehído. ESI-MS (ESI+): 396 (M + H) + . Eiemplo 186: 4-[5-(2-tpfluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencil-amina.

A una solución del producto final del Ejemplo 185, {4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil}-metanol (1 equivalente) en cloruro de metileno/CCI4, 1/4, se le agregan azida de sodio (1.2 equivalentes) y trifenil-fosfina (2J equivalentes). Después de 6 horas a reflujo, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se apaga con agua, y se extrae tres veces con cloruro de metileno. El material crudo (azida) se purifica sobre gel de sílice con cloruro de metileno como la fase móvil. El intermediario purificado (azida) se disuelve en metanol, y se hidrogena bajo presión normal con Pd/C al 10 por ciento como catalizador, hasta que desaparece todo el material de partida. Después de esto, la mezcla de reacción se filtra a través de Hyflo Super Cel®, se concentra, y se purifica sobre gel de sílice, utilizando cloruro de metileno/metanol/ácido acético al 50 por ciento, 9/1/0J25 como eluyente, para proporcionar el compuesto del título (sal de acetato) como un liofilizado amarillo pálido. ESI-MS (EST): 395 (M + 1H) + . Eiemplo 187: Ácido {4-[5-(2-trifluoro-metil-bifeniI-4-il)-isoxazol- 3-il]-bencen-sulfonil-amino}-propiónico. 4-eti n i l-2-t rif luoro- metil-bif en i I o.

A una solución de la 4-bromo-2-trifluoro-anilina (1 equivalente) en benceno, se le agrega, bajo una atmósfera inerte, nitrito de pentilo normal (1 equivalente) a 50°C. Después de 1 hora a reflujo, se agrega un segundo equivalente de nitrito de pentilo normal. Después de 2 horas adicionales a reflujo, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, y se concentra bajo presión reducida. El residuo oscuro se purifica sobre gel de sílice utilizando c-hexano -> c-hexano/acetato de etilo, 9/1, como la fase móvil (aceite color naranja pálido), para proporcionar el 4-bromo-2-trifluoro-metil-bifenilo.

El 4-bromo-2-trifluoro-metil-bifenilo ( 1 equivalente) se disuelve en tolueno/trietil-amina (4/1 ) bajo un gas de argón , y se agregan Cul (0.33 equivalentes) y Pd(Ph3P)2CI2 (0.42 equivalentes) , y se mantienen a 60°C durante 20 minutos. Después de esto, se agrega por goteo trimetil-silil-acetileno ( 1 1 .6 equivalentes) a la mezcla de reacción. Después de 1 8 horas a 60°C, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se filtra a través de Hyflo Super Cel®, y se extrae tres veces con una solución acuosa saturada de NH4CI. La capa orgánica se seca con Na2SO4, se concentra, y se purifica sobre gel de sílice utilizando c-hexano como el eluyente, proporcionando un líquido color café pálido de (trimetil-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il-etinil)-silano) . El (trimetil-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il-etinil)-silano) se disuelve en metanol/NaOH 1 N (4/1 ) , y se mantiene a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de remover el metanol bajo presión reducida, el residuo se disuelve en cloruro de metileno, y se extrae con una solución acuosa diluida de HCl . La fase orgánica se seca sobre Na2S04, se filtra, y se concentra. Se obtiene un líquido color café pálido. Mefil-éster del ácido 3-[4-(hidroxi-imino-metiI)-bencen-sulfonil-amino]-propiónico.

A una solución del cloruro de 4-ciano-bencen-sulfonilo ( 1 equivalente) en piridina seca, se le agrega, a temperatura ambiente, H-ß-Ala-OMe ( 1 equivalente) . Después de 1 hora a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida, y el residuo se disuelve en acetato de etilo, y se extrae con una solución acuosa diluida de HCl. La fase orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra. El residuo color café pálido tipo miel (metil-éster del ácido 3-[4-ciano-bencen-sulfonil-amino)-propiónico) se utiliza para el paso b) sin mayor purificación. El metil-éster de 3-(4-ciano-bencen-sulfonil-amino)-propiónico ( 1 equivalente) se disuelve en ácido fórmico (75 por ciento) , y se agrega Ra-Ni (FLUKA 83440; 4 equivalentes) . Después de 3 horas a 1 00°C, la mezcla de reacción se filtra a través de Hyflo Super Cel®, y el catalizador/Hyflo Super Cel® se lava dos veces con etanol (con precaución ? inflamable) . La solución resultante se concentra y se utiliza para el paso 3) sin mayor purificación . El clorhidrato de hidroxilamina ( 1 .25 equivalentes) se disuelve en agua, y se agrega NaHC03 ( 1 .9 equivalentes). Después de 30 minutos a temperatura ambiente, se agrega el producto final del paso 2) disuelto en metanol. Después de 2 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentra, y el residuo se extrae tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secan sobre Na2SO4, se filtran, y se concentran. Después de la purificación (cromatografía por evaporación instantánea; gel de sílice; cloruro de metileno/metanol , 95/5, como la fase móvil), se aisla el compuesto del título puro. Ácido 3-{4-[5-(2-t rif I uoro-meti 1-bif eni l-4-il)-isopazol-3-il]-ben cen-sulfo nil-am¡no}-propiónico.

A una solución del 4-etinil-2-trifluoro-metil-bifenilo (1 equivalente) en cloruro de metileno, se le agrega una solución acuosa al 10% de NaOCI a 0°C. Después de esto, se agrega una solución del metil-éster del ácido 3-[4-(hidroxi-imino-metil)-bencen-sulfonil-aminoj-propiónico (1.1 equivalentes), y luego se agita a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluye con cloruro de metileno, y se extrae tres veces con agua. Las capas orgánicas combinadas se secan sobre Na2S0 , se filtran, y se concentran. El éster resultante se saponifica como sigue: Se disuelve LiOH (1.6 equivalentes) en metanol/agua (1/1), y se agrega el éster (1 equivalente). Después de 4 horas a 50°C, se remueve el metanol bajo presión reducida, se ajusta el pH a aproximadamente 3 con HCl 1N, y la mezcla de reacción se extrae tres veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secan sobre Na2S04, se filtran, se concentran, y se purifican sobre gel de sílice (cloruro de metiléno/metanol, 95/5, como la fase móvil).

ESI-MS (ESI ): 515 (M - 1H)\ Eiemplo 188: 4-[5-(2-trifluoro-metil- ifenil-4-il)-isoxazoI-3-il]-fenil-amina. 3-(4-nitro-fenil)-5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol.

El compuesto del título se obtiene empleando el procedimiento del 3-(4-bromo-fenil)-5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol, utilizando la oxima de 4-nitro-benzaldehído en lugar de la oxima de 4-bromo-benzaldehído. ESI-MS (ESI*): 411 (M + 1H) + . 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil-amina.

El 3-(4-nitro-fenil)-5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol se disuelve en metanol/acetato de etilo, 1/1, y se hidrogena a temperatura ambiente bajo presión normal con Pd/C al 10 por ciento como catalizador durante 16 horas. Después de la filtración a través de Hyflo Super Cel®, la mezcla de reacción se concentra y se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno ? cloruro de metileno/metanol, 95/5, como la fase móvil). Se aisla la 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil-amina como un aceite color café. ESI-MS (ESI+): 381 (M + 1H) + . Eiemplo 189: Ácido N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil}-succinámico.

La 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil-amina se disuelve en cloruro de metileno, y se agregan 4-metil-morfolina (2 equivalentes) y anhídrido succínico (2 equivalentes). Después de 16 horas a temperatura ambiente, se obtiene el producto del título puro después de la cromatografía en columna de gel de sílice (cloruro de metileno ? cloruro de metileno/metanol, 90/10, como la fase móvil). ESI-MS (ESI"): (M - 1H)": 479 (M - 1H)\ Eiemplo 190: Ácido (R)-2-{4-[5-(2-trifluoro- etil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonil-amino}-propiónico.

Cloruro de 4-[5-(2-trifluoro-meti 1-bif eni l-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonilo.

La [5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-fenil-amina (1 equivalente) se disuelve en acetonitrilo, y después de la adición de HCl (concentrado al 37 por ciento) y de una solución acuosa de aNO2 (1.5 equivalentes), la mezcla de reacción se mantiene a 8°C durante 30 minutos. A esta reacción se le agregan una solución saturada de SO2 en ácido acético glacial (1 mililitro), y subsiguientemente una solución de CuCI2 en agua (0.5 equivalentes). Después de 3 horas a temperatura ambiente, el precipitado se filtra, se disuelve en cloruro de metileno, y se seca sobre Na2SO4. Después de remover el solvente, se obtiene el compuesto del título como cristales grises. ESI-MS (ESI*): 364 (M + 1H) + . El cloruro de 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonilo (1 equivalente) se disuelve en tetrahidrofurano, y se agregan H-DAIa-OH (3 equivalentes), trietil-amina (1 equivalente), y NaOH 1N (2 equivalentes). Después de 18 horas a temperatura ambiente, la reacción se diluye con agua, y el pH se ajusta con HCl 1N hasta aproximadamente 3. Después de la extracción con cloruro de metileno (tres veces), la capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno/metanol/ácido acético al 50 por ciento, 9/1 /0J 25, como la fase móvil) . ESI-MS (ES T) : 51 7 (M + 1 H) + . Eiemplo 191 : Ácido (S)-2-{4-[5-(2-trifluoro-metii-bife?n?il-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonil-ami no}-propiónico.

El cloruro de 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonilo ( 1 equivalente) se disuelve en tetrahidrofurano, y se agregan H-Ala-OH (3 equivalentes), trietil-amina (1 equivalente), y NaOH 1 N (2 equivalentes) . Después de 1 8 horas a temperatura ambiente, la reacción se diluye con agua, y el pH se ajusta con HCl 1 N hasta aproximadamente 3. Después de la extracción con cloruro de metileno (tres veces) , la capa orgánica se seca sobre Na2SO4, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno/metanol/ácido acético al 50 por ciento, 9/1 /0J 25, como la fase móvil). ESI-MS (EST): 51 7 (M + 1 H) + . Eiemplo 192: 4-{5-[4-(2, 2, 2-trif I uoro-etoxi)-3-trif I moro-metí I-feni I ]-¡soxazol-3-il}-bencen-sulf onamida. (4-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-tripneíi l-si laño. El compuesto se sintetiza de acuerdo con el procedimiento dado en: J. Org. Chem.46(11 ):1981 , página 2283. 4-etin?l-1-fluoro-2-trifluoro-metil-1-benceno. El producto final del paso 1) se hace reaccionar como se da en J. Org. Chem. 46(11 ):1981 , página 2283. 4-[5-(4-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-isoxazol-3-ií]-bencen-sulfonarnida. El compuesto del título se sintetiza de acuerdo con el Ejemplo 183 c). 4-[5-(4-(2,2,2-trifluoro-etoxi)-3-trifluoro-metiI-fenil]-¡soxazo!-3-i!}-be cen-sulfonamida La 4-[5-(4-fluoro-3-trifluoro-metil-fenil)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonamida (1 equivalente) se disuelve en N,N-dimetil-formamida, y después de la adición de NaH (2 equivalentes, FLUKA 62863), se agrega 2,2,2-trifluoro-etanol después de 30 minutos a temperatura ambiente. Después de 3 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentra, y el compuesto del título se aisla después del tratamiento con dietil-éter como un sólido amarillo pálido. ESI-MS (ESI"): 465 (M - 1H)\ Eiemplo 193: 2-etil-4-[5-(2-trifluoro-metiI-bifenil-4-il)-[1 ,2,¿ oxadiazoD-3-il]-bencen-sulfonamida. 4-bromo-2-etil-bencen-sulfonamida. A una solución del cloruro de 4-bromo-2-et¡l-bencen-sulfonilo (4.4 gramos, 0.015 moles) en dioxano (60 mililitros), se le agregó una solución de NH4OH concentrado (6 mililitros). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se removió bajo presión reducida, y el aceite resultante se disolvió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se extrajo, se secó sobre Na2S04, y se concentró. El producto deseado (4 gramos) se aisló después de la cristalización utilizando una mezcla de acetato de etilo y hexanos. 4-ciano-2-etil-bencen-sulfonami a. A una solución de la 4-bromo-2-etil-bencen-sulfonamida (1.0 gramos, 0.004 moles) en NMP (30 mililitros), se le agregó CuCN (3.6 gramos, 0.04 moles), y la mezcla de reacción se agitó a 140°C durante 3 días. Después de permitir que se enfriara la mezcla de reacción, se agregaron entonces acetato de etilo y agua, la capa orgánica se lavó con agua, se extrajo, se secó sobre Na2SO4, y se concentró. La purificación utilizando columna por evaporación instantánea seguida por cristalización, proporcionó el compuesto deseado (160 miligramos). 3-e!il-N-hi roxi-4-sulfamoil-benzamidina. A una solución de la 4-ciano-2-etil-bencen-sulfonamida (160 miligramos, 0.0007 moles) en tetrahidrofurano (6 mililitros), se le agregó una solución de hidroxilamina (al 50 por ciento en agua) (6 mililitros). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo, se lavó con agua, se extrajo, se secó sobre Na2SO4, y se concentró. El producto deseado (140 miligramos) se aisló después de la cristalización utilizando una mezcla de acetato de etilo y hexanos. Ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. A una solución del ácido 4-cloro-3-trifluoro-metil-benzoico (5 gramos, 0.02 moles) en tetrahidrofurano (200 mililitros), se le agregaron, bajo una atmósfera inerte, ácido fenil-borónico (5.3 gramos, 5.04 moles), X-Phos (1 gramo, 0.002 moles), KF (4 gramos, 0.06 moles), y finalmente Pd(OAc)2 (240 miligramos, 0.001 moles);la mezcla de reacción se agitó entonces a 90°C durante 15 horas. La mezcla de reacción se concentró a sequedad, y se purificó utilizando cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar el compuesto del título (5 gramos). 2-etil-4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-bencen-sulfonamida. A una solución del ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico (50 miligramos, 0.0002 moles) en N,N-dimetil-formamida (2 mililitros), se le agregaron, bajo una atmósfera inerte, EDC (40 miligramos, 0.0002 moles), HOBt (30 miligramos, 0.0002 moles); la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos, y luego se agregó 3-etil-N-hidroxi-4-sulfamoíl-benzamidina (50 miligramos, 0.0002 moles) en solución en N,N-dimetil-formamida (1 mililitro). La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 15 horas. La mezcla de reacción se concentró a sequedad, y se purificó utilizando cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar el compuesto del título (60 miligramos). ESI-MS (EST): 474 (M + 1H) + . Eiemplo 194: 2-etil-4-[5-(2'-fluoro-2-trifluoro-mTtil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-bencen-sulfonamida.

El compuesto se obtiene empleando el procedimiento del Ejemplo 193, utilizando el ácido 2'-fluoro-2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico en lugar del ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. ESI-MS (ESI"): 478 (M - 1H)\ Eiemplo 195: 2-etil-4-[5-(4-fenil-5-trifluoro-metil-tiofen-2-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-bencen-sulfonamida.

El compuesto se obtiene empleando el procedimiento del Ejemplo 193, utilizando el ácido 4-fenil-5-trifluoro-metil-tiofen-2-carboxílico en lugar del ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. ESI-MS (ESI ): 478 (M - 1H)\ Eiemplo 196: 4-[5-(4-ciclohexil-3-trifluoro- etil-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-2-etil-bencen-sulf onamida.

El compuesto se obtiene empleando el procedimiento del Ejemplo 193, utilizando el ácido 4-ciclohe?il-3-trifluoro-metil-benzoico en lugar del ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. ESI-MS (EST): 480 (M + 1H) + . Eiemplo 197: 3-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxa?ol-3-il]-bencen-sulfonil-amino}-propionamida. 1) El ácido {4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonil-aminoj-propiónico se prepara como se describe en el Ejemplo 187, empezando a partir del 4-etinil-2-trifluoro-metil-bifenilo. 2) El ácido 3-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-isoxazol-3-il]-bencen-sulfonil-amino}-propiónico (1 equivalente) se disuelve en N,N-dimetil-formamida, y subsiguientemente se agregan clorhidrato de N-(3-dimetil-amino-propil)-N'-etil-carbodi-imida (EDC. HCl; 1.5 equivalentes), hidroxi-benzotriazol (HOBt; 1.3 equivalentes), NH4OH al 25 por ciento en agua (1.2 equivalentes), y di-isopropil-etil-amina (1.5 equivalentes). Después de 16 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentra y se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno/metanol, 95/5 ? cloruro de metileno/metanol/ácido acético al 50 por ciento, 90/10/0J25, como la fase móvil), dando como resultado el compuesto del título puro. ESI-MS (ESI ): 514 (M - 1H)\ ESI-MS (EST): 516 (M + 1H) + . Eiemplo 198: N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-b¡fenil-4-il)-[1 ,3,4]-oxadiazol°2-il]-fenil}-succinamida. 1) 5-(4-nitro-fenil)-3-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadiazol. Este compuesto se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 183, empezando a partir del ácido 2-trifluoro-metil-bifenil-4-carboxílico. 2) 4-[5-(2-trif I uoro-metil-bif eni l-4-il)-[1, 3, 4]-oxadiazol-2-il]-f en ilamina. Este compuesto se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 184, utilizando el compuesto del paso 1). 3) Acido {4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,3,4]-oxadiazol-2-il]-fenilj-succinámico. El producto final (1 equivalente) del paso 2) se disuelve en cloruro de metileno, y se agregan 4-metil-morfolina (2 equivalentes) y anhídrido succínico (2 equivalentes). Después de 16 horas a temperatura ambiente, se obtiene el producto del título puro después de la cromatografía en columna de gel de sílice (cloruro de metileno ? cloruro de metileno/metanol, 90/10, como la fase móvil). ESI-MS (ESI ): (M - 1H)": 480 (M - 1H)\ 4) N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,3,4]-oxadiazol-2-il]-fenilj-succinamida. El compuesto se obtiene empleando el mismo procedimiento que se da para el Ejemplo 197 en el último paso (2). ESI-MS (ESI ): 479 (M - 1H)". ESI-MS (EST): 481 (M + 1H) + . Eiemplo 199: N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinamida. a) Ácido 2-trifluoro-meti)-bifenil-4-carboxílico: Se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 1a). b) N-4-amino-N-hidroxi-benzamidina: Se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 1b). c) 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil-amina: Se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 2f). d) Ácido N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinámico: Se prepara como se da a conocer en el Ejemplo 2g). e) N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinamida. A una solución del ácido N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinámico (1 equivalente) en tetrahidrofurano, se le agregan, bajo una atmósfera inerte, EDC (1.3 equivalentes) y HOBt (1.3 equivalentes); entonces la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego se agrega una solución de hidróxido de amonio (10 equivalentes) a la mezcla de reacción, y se agita durante 4 horas a temperatura ambiente. Entonces la mezcla de reacción se concentra a sequedad, y se purifica utilizando cromatografía por evaporación instantánea para proporcionar la N-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinamida, m/z = 479 (M-H)". Eiemplo 200: N-metil-N'-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifen¡l-4-i])-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinamida.

El compuesto del título se sintetiza de una manera similar a la que se da a conocer en el Ejemplo 199 e), utilizando una solución de metil-amina en metanol en lugar de hidróxido de amonio en el último paso, m/z = 493 (M-H)". Eiemplo 201: N, N-di metil-N '-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifen i I-4-il)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-succinamida.

El compuesto del título se sintetiza de una manera similar a la que se da anteriormente en el Ejemplo 199 e), utilizando una solución de dimetil-amina en metanol en lugar de hidró?ido de amonio en el último paso, m/z = 507 (M-H)'. Eiemplo 202: 3-{4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1,3,4]-oxadiazol-2-il]-bencen-sulfonil-amino]-propionamida.

La 4- [5- (2-t rif luoro- meti I -bif en i l-4- i l)-[1 ,3, 4] -oxadiazol -2-il]-f en ilamina (1 equivalente) se disuelve en acetonitrilo, y después de la adición de HCl (0.55 mililitros; concentrado al 37 por ciento), y de una solución acuosa de NaN02 (1.5 equivalentes), la mezcla de reacción se mantiene a 8°C durante 30 minutos. A esta reacción se le agrega una solución saturada de S02 en ácido acético glacial (1 mililitro), y subsiguientemente una solución de CuCI2 en agua (0.5 equivalentes). Después de 3 horas a temperatura ambiente, el precipitado se filtra, se disuelve en cloruro de metileno, y se seca sobre Na2S04. Después de remover el solvente, se utiliza el compuesto del título para el siguiente paso sin mayor purificación. ESI-MS (ESI+): 465 (M + 1H) + . El cloruro de 4-[5-(2-trifluoro-metil-bifenil-4-il)-[1 ,3,4]-oxadiazol-2-il]-bencen-sulfonilo (1 equivalente) se disuelve en tetrahidrofurano, y se agregan H-ßAla-NH2 (3 equivalentes), trietil -amina (1 equivalente), y NaOH 1N (2 equivalentes). Después de 18 horas a temperatura ambiente, la reacción se diluye con agua, y el pH se ajusta con HCl 1N hasta aproximadamente 3. Después de la extracción con cloruro de metileno (tres veces), la capa orgánica se seca sobre Na2S04, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica sobre gel de sílice (cloruro de metileno/metanol, 8/2, como la fase móvil). ESI-MS (ESI+): 517 (M + 1H) + . Los compuestos de la Fórmula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, exhiben valiosas propiedades farmacológicas, por ejemplo, como antagonistas del receptor de S1P1, por ejemplo, como se indica en las pruebas in vitro e in vivo, y por consiguiente, se indican para terapia. A. In Vitro Los compuestos de la Fórmula I tienen una afinidad de enlace con los receptores de S1P individuales, como se determina en los siguientes ensayos: A. In Vitro: Ensayo de activación de GPCR que mide el enlace de GTP |y-35S1 con las membranas preparadas a partir de células CHO que expresan los receptores EDG humanos Ensayo de enlace de S 1 P Í (EDG-1 ) GTP [?-35S]: Se preparan membranas homogeneizadas a partir de clones de células CHO que expresan establemente una marca c-myc N-terminal de EDG-1 humana. Las células se cultivan en suspensión en dos botellas rodantes de 850 centímetros cuadrados durante 3 a 4 días antes de cosecharse. Las células se centrifugan, se lavan una vez con suero regulado con fosfato frío, y se vuelven a suspender en <20 mililitros del Regulador A (H EPES 20 mM , pH de 7.4, EDTA OJ mM, cóctel inhibidor de proteasa completo sin EDTA [1 tableta/25 mililitros]) . La suspensión celular se homogeneiza sobre hielo, utilizando un homogeneizador Polytron a 30,000 revoluciones por minuto en tres intervalos de 15 segundos cada uno. El homogenato se centrifuga primeramente a 2 ,00 revoluciones por minuto sobre un centrífugo de mesa de baja velocidad durante 1 0 minutos. El sobrenadante, después de pasar a través de un cernidor de células, se vuelve a centrifugar entonces a 50,000 x g durante 25 minutos a 4°C . El granulo se vuelve a suspender en el Regulador B (glicerol al 1 5 por ciento, H EPES 20 mM , pH de 7.4, EDTA 0J mM, cóctel inhibidor de proteasa completo sin EDTA [1 tableta/10 mililitros]) . La concentración de proteína de la preparación se determina utilizando el kit BCA Protein Assay (Ensayo de Proteína BCA) (Pierce) utilizando BSA como el estándar. Las membranas se ponen en alícuotas, y se mantienen congeladas a -80°C. Se preparan soluciones de los compuestos de prueba desde 10 mM hasta 0.01 nM en sulfóxido de dimetilo. El S1P se diluye en una solución de albúmina de suero bovino al 4 por ciento como el control positivo. Se diluye la cantidad deseada de la preparación de membrana con regulador de ensayo helado (HEPES 20 M, pH de 7.4, NaCI 100 mM, MgCI2 10 mM, albúmina de suero bovino sin ácido graso al 0J por ciento, GDP 5 µM), y se pone en vórtex. Se distribuyen 2 microlitros o menos del compuesto en cada pozo de una placa de ensayo de poliestireno de 96 pozos de fondo redondo, seguido por la adición de 100 microlitros de membranas diluidas (de 3 a 10 microgramos/pozo), y se mantienen sobre hielo hasta la adición de GTP?S caliente. Se diluye [35S]-GTP?S a 1:1000 (volumen/volumen) con regulador de ensayo, y se agregan 100 microlitros a cada pozo. La reacción se lleva a cabo a temperatura ambiente durante 90 minutos antes de que se cosechen las membranas sobre una placa de filtro Perkin-Elmer Unifilter® GF/B-96 utilizando un cosechador Packard Filtermate Harvester. Después de varios lavados con el regulador de lavado (HEPES 20 mM, pH de 7.4, NaCI 100 mM, MgCI2 10 mM), y de un enjuague con etanol al 95 por ciento, el filtro se seca en un horno a 37°C durante 30 minutos. Se agrega Microscint-20, y la placa se sella para el conteo de cintilación en el TopCount. Los valores EC50 se obtienen ajustando las curvas de enlace de GTP [?-35S] (datos brutos) con la herramienta de ajuste de la curva de respuesta a la dosis de GraphPad Prism. Se utilizan seis o doce concentraciones diferentes para generar una curva de respuesta a la concentración (utilizando tres puntos de datos por concentración) . Se llevan a cabo ensayos de enlace de S 1 P3, -5, -6, y -8 GTP [?-35S] de una manera comparable al ensayo de enlace de S1 P1 GTP [?-35S] , utilizando membranas de células CHO que expresan establemente los receptores marcados con c-myc C-terminal o receptores no marcados. Para cada preparación de membrana, primero se ejecutan los experimentos de titulación con un control de S 1 P para determinar la cantidad óptima de membranas que se deben agregar por pozo de ensayo. Los compuestos de la Fórmula I se prueban de acuerdo con el ensayo anterior, y muestran una afinidad de enlace con los receptores de S 1 P, por ejemplo los receptores S 1 P1 , con una EC50 < 1 µM. De una manera más particular, los compuestos de la Fórmula I exhiben selectividad para el receptor S1 P1 . Por ejemplo, los compuestos de los Ejemplos 45, 54, 1 45, 1 94, y 1 96 tienen una EC50 < 1 nM en el ensayo de receptor S1 P1 anterior, y son cuando menos 20 veces selectivos para el receptor S 1 P1 comparándose con el receptor S 1 P3, y cuando menos 20 veces selectivos para el receptor S1 P1 comparándose con el receptor S1 P8. B. Sn Vitro: Ensayo de flujo de calcio FLIPR Los compuestos de la Fórmulas I se prueban para determinar su actividad agonista sobre S1 P1 , S1 P3, S1 P5, y S1 P6 con un ensayo de flujo de calcio FLIPR. Dicho de una manera breve, las células CHO que expresan un receptor de S1P se mantienen en un medio F-12K (ATCC), que contiene suero bovino fetal al 1 por ciento. Al segundo día, las células se lavan tres veces (25 microlitros cada una) con regulador de lavado. Se agregan aproximadamente 25 microlitros de tinte a cada pozo, y se incuban durante 1 hora a 37°C y con C02 al 5 por ciento. Luego las células se lavan cuatro veces con regulador de lavado (25 microlitros cada una). El flujo de calcio se ensaya después de agregar 25 microlitros de solución SEW2871 (publicada por Rosen y colaboradores, utilizada como referencia) a cada pozo de células. Se lleva a cabo el mismo ensayo con las células que expresan cada uno de los diferentes receptores de S1P. La titulación en el ensayo de flujo de calcio FLIPR se registra durante un intervalo de 3 minutos, y se cuantifica como el porcentaje de respuesta de máxima altura pico en relación con la activación de S1P-1. Los compuestos de la Fórmula I son activos en este ensayo en una concentración de 10"12 a 3J0"5 nM. C. In Vivo: Ensayos de rastreo para la medición del consumo de linfocitos sanguíneos Medición de linfocitos circulantes: Los compuestos que se van a probar se disuelven en DMSO/PEG200, y se diluyen adicionalmente con agua desionizada. A las ratas (raza Lewis, hembras, de 6 a 12 semanas de edad) se les administra 1 miligramo/kilogramo del compuesto que se va a probar, en 4 mililitros/kilogramo de vehículo (máximo 2 por ciento de sulfóxido de dimetilo/máximo 2 por ciento de PEG200/agua) mediante aplicación oral. Se incluyen DMSO/PEG200/agua y FTY720 (0.3 miligramos/kilogramo) como controles negativo y positivo, respectivamente. Se recolecta la sangre de la vena sublingual a las 2, 6, 24, y 48 horas después de la administración bajo anestesia corta con isofluorano. Las muestras de sangre entera se someten al análisis hematológico. Los conteos de linfocitos periféricos se determinan utilizando un analizador automatizado. Las sub-poblaciones de linfocitos de sangre periférica se tiñen con anticuerpos específicos conjugados con fluorócromo, y se analizan utilizando un seleccionador de células de activación por fluorescencia (Facscalibur) . Se utilizan dos ratas para evaluar la actividad de consumo de linfocitos de cada compuesto rastreado. El resultado es una ED50, que se define como la dosis efectiva requerida para exhibi r el 50 por ciento de consumo de linfocitos sangu íneos. Los compuestos de la Fórmula I se prueban de acuerdo con el ensayo anterior, y tienen una ED50 menor de 1 0 miligramos/kilogramo. Los compuestos de la Fórmula I , por consiguiente, son útiles en el tratamiento y/o la prevención de enfermedades o trastornos mediados por las interacciones de los linfocitos, por ejemplo en trasplante, tales como rechazo agudo o crónico de alo- ó xenoinjertos de células, tejidos, u órganos, o función demorada de injerto, enfermedad del injerto contra el huésped, enfermedades autoinmunes, por ejemplo artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia gravis, diabetes tipo I ó I I y los trastornos asociados con la misma, vasculitis, anemia perniciosa, síndrome de Sjóegren, uveítis, soriasis, oftalmopatía de graves, alopecia areata y otras, enfermedades alérgicas, por ejemplo asma alérgico, dermatitis atópica, rinitis/conjuntivitis alérgica, dermatitis alérgica por contacto, enfermedades inflamatorias opcionalmente con reacciones aberrantes subyacentes , por ejemplo enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn o colitis ulcerativa, asma intrínseco, lesión inflamatoria del pulmón , lesión inflamatoria del hígado, lesión inflamatoria glomerular, ateroesclerosis, osteoartritis, dermatitis irritante por contacto y otras dermatitis eczematosas, dermatitis seborreica, manifestaciones cutáneas de trastornos inmunológicamente mediados, enfermedad inflamatoria de los ojos, queratoconjuntivitis, miocarditis o hepatitis, por ejemplo hepatitis aguda o crónica, isquemia/lesión por reperfusión , por ejemplo infarto de miocardio, embolia, isquemia del intestino, insuficiencia renal o choque hemorrágico, choque traumático, cáncer, por ejemplo cáncer de mama, linfomas de células-T o leucemias de células-T, síndrome nefrótico, enfermedades infecciosas, por ejemplo choque tóxico (por ejemplo, inducido por súper-antígeno) , choque séptico, síndrome de insuficiencia respiratoria de adultos o infecciones virales, por ejemplo SI DA, hepatitis vi ral , por ejemplo hepatitis B ó C, infección bacteriana crónica, o enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo enfermedad de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica, o demencia senil. Los ejemplos de los trasplantes de células, tejidos, u órganos sólidos incluyen, por ejemplo, islotes pancreáticos, células totipotentes, médula ósea, tejido córneo, tejido neuronal , corazón , pulmón, corazón-pulmón combinados, riñon, hígado, intestino, páncreas, tráquea, o esófago. Para los usos anteriores, la dosificación requerida, desde luego, variará dependiendo del modo de administración, de la condición particular que se vaya a tratar, y del efecto deseado. En general , se indica que se obtienen resultados satisfactorios sistémicamente en dosificaciones diarias de aproximadamente 0.03 a 5.0 miligramos/kilogramo de peso corporal. Una dosificación diaria indicada en el mamífero superior, por ejemplo en los seres humanos, está en el intervalo de aproximadamente 0.5 miligramos a aproximadamente 500 miligramos, convenientemente administrados, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día, o en una forma retardada. Las formas de dosificación unitaria adecuadas para administración oral comprenden de aproximadamente 0J a 50 miligramos de ingrediente activo. Los compuestos de la Fórmula I se pueden administrar por cualquier vía convencional , en particular enteralmente, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de tabletas o cápsulas , o parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables , tópicamente, por ejemplo en la forma de lociones, geles, ungüentos o cremas, o en una forma nasal o de supositorio. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la Fórmula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable en asociación con cuando menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, se pueden fabricar de una manera convencional mezclando con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la Fórmula I se pueden administrar en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo como se indica anteriormente. Estas sales se pueden preparar de una manera convencional, y exhiben el mismo orden de actividad que los compuestos libres. De conformidad con lo anterior, la presente invención proporciona además: 1.1. Un método para prevenir o tratar trastornos o enfermedades mediadas por los linfocitos, por ejemplo tales como se indican anteriormente, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, cuyo método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; 1.2. Un método para prevenir o tratar rechazo de trasplante agudo o crónico o enfermedades inflamatorias o autoinmunes mediadas por células-T, por ejemplo como se indica anteriormente, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, cuyo método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; 2. Un compuesto de la Fórmula I, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, para utilizarse como un producto farmacéutico, por ejemplo en cualquiera de los métodos indicados en 1 .1 ó en 1 .2 anteriores. 3. Una composición farmacéutica, por ejemplo, para utilizarse en cualquiera de los métodos como en 1 .1 ó 1 .2 anteriores, la cual comprende un compuesto de la Fórmula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo. 4. Un compuesto de la Fórmula I , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en la preparación de una composición farmacéutica para utilizarse en cualquiera de los métodos como en 1 .1 ó 1 .2 anteriores. Los compuestos de la Fórmula I se pueden administrar como el único ingrediente activo o bien en conjunto con, por ejemplo, como un adyuvante para, otros fármacos, por ejemplo agentes inmunosupresores o inmunomoduladores u otros agentes antiinflamatorios, por ejemplo para el tratamiento o la prevención de rechazo agudo o crónico de alo- ó xeno-injerto o trastornos inflamatorios o autoinmunes, o un agente quimioterapéutico, por ejemplo un agente anti-proliferativo de células malignas. Por ejemplo, los compuestos de la Fórmula I se pueden utilizar en combinación con un inhibidor de calcineurina, por ejemplo ciclosporina A ó FK 506; un inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina, 40-O-(2-hidroxi-et¡l)-rapamicina, CCI779, ABT578, AP23573, biolimus-7 o biolimus-9; una ascomicina que tiene propiedades inmunosupresoras, por ejemplo ABT-281, ASM981, etc.; corticosteroides; ciclofosfamida; azatiopreno; metotrexato; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico o una sal; micofenolato-mofetil; 15-desoxi-espergualina o un homólogo, análogo, o derivado inmunosupresor de la misma; un inhibidor de PKC, por ejemplo como se da a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 02/38561 ó WO 03/82859, por ejemplo el compuesto del Ejemplo 56 ó 70; un inhibidor de la cinasa JAK3, por ejemplo N-bencil-3,4-dihidroxi-benciliden-ciano-acetamida, -ciano-(3, 4-d i hidroxi )-]-N-bencil-cinamamida (Tirfostina AG 490), prodigiosina 25-C (PNU 156804), [4-(4'-hidroxi-fenil)-amino-6,7-dimetoxi-quinazolina] (WHI-P131), [4-(3'-bromo-4'-hidroxi-fenil)-amino-6,7-dimetoxi-quinazolina] (WHI-P154), [4-(3',5'-dibromo-4'-hidro?i-fenil)-amino-6,7-dimetoxi-quinazolina] WHI-P97, KRX-211, 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1-il}-3-oxo-propionitrilo, en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo el mono-citrato (también denominado como CP-690,550), o un compuesto como se da a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 04/052359 ó WO 05/066156; anticuerpos monoclonales inmunosupresores, por ejemplo anticuerpos monoclona es para receptores de leucocitos, por ejemplo MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CDd, CD25, CD28, CD40, CD45, CD52, CD58, CDdO, CD86, o sus ligandos; otros compuestos inmunomoduladores, por ejemplo una molécula de enlace recombinante que tenga cuando menos una porción del dominio extracelular de CTLA4 o un mutante del mismo, por ejemplo cuando menos una porción extracelular de CTLA4 o un mutante del mismo unida a una secuencia que no sea de proteína CTLA4, por ejemplo CLTA4lg (por ejemplo, designada como ATCC 68629) , o un mutante de la misma, por ejemplo LEA29Y; inhibidores de moléculas de adhesión, por ejemplo antagonistas de LFA-1 , antagonistas de ICAM-1 ó -3, antagonistas de VCAM-4, o antagonistas de VLA-4; o un agente quimioterapéutico, por ejemplo paclitaxel , gemcitabina, cisplatino, doxorrubicina, o 5-fluoro-uracilo; o un agente anti-infeccioso. Cuando los compuestos de la Fórmula I se administran en conjunto con otra terapia inmunosupresora/inmunomoduladora, antiinflamatoria, quimioterapéutico, o anti-infecciosa, las dosificaciones del compuesto inm unosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio, quimioterapéutico, o anti-infeccioso co-administrado, desde luego, variarán dependiendo del tipo de co-fármaco empleado, por ejemplo si es un esteroide o un inhibidor de calcineurina, del fármaco específico empleado, de la condición que se esté tratando, etc. De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona, en un aspecto todavía adicional: 5. Un método como se define anteriormente, el cual comprende la co-administración, por ejemplo de una manera concomitante o en secuencia, de una cantidad no tóxica terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I y cuando menos una segunda sustancia de fármaco por ejemplo, ún fármaco inmunosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio, o quimioterapéutico, por ejemplo como se indica anteriormente. 6. Una combinación farmacéutica, por ejemplo un kit, que comprende: a) un primer agente, el cual es un compuesto de la Fórmula I como se da a conocer en la presente, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, y b) cuando menos un co-agente, por ejemplo un agente inmunosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio, quimioterapéutico, o antiinfeccioso. El kit puede comprende instrucciones para su administración. Los términos "co-administración" o "administración combinada", o similares, como se utilizan en la presente, pretenden abarcar la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, y se pretende que incluyan regímenes de tratamiento en donde los agentes no necesariamente se administren por la misma vía de administración o al mismo tiempo. El término "combinación farmacéutica", como se utiliza en la presente, significa un producto que resulta de la mezcla o combinación de más de un ingrediente activo, e incluye tanto las combinaciones fijas como no fijas de los ingredientes activos. El término "combinación fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo un compuesto de la Fórmula I y un co-agente, se administran ambos a un paciente de una manera simultánea en la forma de una sola entidad o dosificación. El término "combinación no fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo un compuesto de la Fórmula I y un co-agente, se administran ambos a un paciente como entidades separadas, ya sea de una manera simultánea, concurrente, o en secuencia, sin límites de tiempo específicos, en donde esta administración proporciona niveles terapéuticamente efectivos de los compuestos en el cuerpo del paciente. Ésto último también se aplica a la terapia de cóctel , por ejemplo la administración de tres o más ingredientes activos .

Claims

REIVINDICACION ES

1 . U n compuesto de la Fórmula I : en donde: X es -N = e Y es -O- ; o bien X es -O- e Y es -N = ; o bien X es C H e Y es O; Ri es bifenililo sustituido , 4-feno?i-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono) -fenilo, en donde cuando menos u no de los grupos fenilo está mono-sustituido; fenilo sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados a parti r de halógeno, nitrilo, alqui lo de 1 a 6 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alco?ilo de 1 a 8 átomos de carbono, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono , alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alqui lo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono, alco?ilo de 1 a 8 átomos de carbono-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, haloalcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alquenilo?ilo de 2 a 6 átomos de carbono, alquiniloxilo de 2 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquiloxilo de 3 a 6 átomos de carbono, fenil-alco?ilo de 1 a 4 átomos de carbono, y heterociclil-alco?ilo de 1 a 4 átomos de carbono; o heteroarilo de 5 ó 6 miembros sustituido; R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido por halógeno, OH, NH2, alco?ilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carboniloxilo; amino; carbo?ilo; sulfamoílo; carbamoílo; o HN-CO-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; o R2 es R3-R4-COOH ó R3-R4-CONR5R6, en donde R3 es S02-NH; S02-N-(alquilo de 1 a 4 átomos de carbono); CO-NH; CO-N-(alquilo de 1 a 4 átomos de carbono); CH2-0; NH-CO; ó NJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono)CO; y R4 es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente interrumpido por O, S, ó C=CH2, o fenileno opcionalmente sustituido, o cicloalquileno de 3 a 6 átomos de carbono; y cada uno de R5 y R6 es independientemente hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, o R5 y R6, junto con el átomo de nitrógeno con el que están enlazados, forman un residuo heterocíclico, y el anillo A puede estar opcionalmente sustituido, en el entendido de que, cuando Y es O, X es -N= ó -CH = , y R2 es S02NH-R4-COOH, en donde R4 es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono ramificado, entonces, i. R, es diferente de fenilo, ya sea mono-sustituido por halógeno, alquilo de 1 a ß átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o haloalcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o bien disustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados a partir de halógeno, alquilo de 1 a d átomos de carbono, y alcoxilo de 1 a d átomos de carbono; o ii. R, es diferente de tienilo o furilo monosustituido, o un derivado fisiológicamente hidrolizable del mismo, una sal, hidrato, y/o solvato del mismo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde es bifenililo sustituido, 4-fenoxi-fenilo, o 4-(fenil-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono)-fenilo, en donde cuando menos uno de los grupos fenilo está mono-sustituido.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en donde R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido por halógeno, OH, NH2, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carboniloxilo; amino; carboxilo; sulfamoílo; carbamoílo; ó HN-CO-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono.

4. Un proceso para la producción de un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, cuyo proceso comprende: a) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde X es -N= e Y es O, y R2 es como se define anteriormente, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula II: en donde el anillo A y R2 son como se definen anteriormente, con un compuesto de la Fórmula lll: en donde -i es como se define anteriormente, o un derivado funcional del mismo; o b) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde X es -N= e Y es O, y R2 es R3-R4-COOH o R3-R4-CONR5R6, en donde R3 es NH-CO ó NJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono)-CO, y R4, Rs, y Rß son como se definen anteriormente, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula IV: IV en donde R, y el anillo A son como se definen en la reivindicación 1, y R'2 es NH2 o NHJalquilo de 1 a 4 átomos de carbono), con un agente acilante, o siguiendo una reacción de Sandmeyer; o c) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde Y es -N= y X es O, ciclar en la presencia de un reactivo de Burgess, un compuesto de la Fórmula V: en donde R,, R2, y el anillo A son como se definen en la reivindicación 1: o d) para la producción de un compuesto de la Fórmula I, en donde Y es O y X es CH, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VI: en donde R^ es como se define en la reivindicación 1, con un compuesto de la Fórmula Vil: en donde R2 es como se define en la reivindicación 1; o e) convertir un compuesto de la Fórmula I en otro compuesto de la Fórmula I, y recuperar el compuesto resultante de la Fórmula I en forma libre o en la forma de una sal, y cuando se requiera, convertir el compuesto de la Fórmula I obtenido en forma libre hasta la forma de sal deseada, o viceversa.

5. Un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse como un producto farmacéutico.

6. Una composición farmacéutica, la cual comprende un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.

7. Un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en la preparación de una composición farmacéutica para utilizarse en la prevención o el tratamiento de trastornos o enfermedades mediadas por los linfocitos.

8. Una combinación farmacéutica, la cual comprende: a) un primer agente, el cual es un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, y b) cuando menos un coagente, el cual es un agente inmunosupresor, inmunomodulador, anti-inflamatorio, quimioterapéutico, o anti-infeccioso.

9. Un método para prevenir o tratar trastornos o enfermedades mediadas por los linfocitos, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, cuyo método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.