KR920000102B1 - 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 - Google Patents
안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR920000102B1 KR920000102B1 KR1019910014922A KR910014922A KR920000102B1 KR 920000102 B1 KR920000102 B1 KR 920000102B1 KR 1019910014922 A KR1019910014922 A KR 1019910014922A KR 910014922 A KR910014922 A KR 910014922A KR 920000102 B1 KR920000102 B1 KR 920000102B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- resin
- water
- elution
- product
- doxorubicin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 title description 5
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 title description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 30
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 10
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 claims description 8
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 8
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 7
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 6
- XVXGYZFARCOVHS-BINOZUKVSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(=O)CO)C1 XVXGYZFARCOVHS-BINOZUKVSA-N 0.000 claims description 5
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 5
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 4
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 claims description 4
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 claims description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 claims description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims 8
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 claims 8
- 239000012264 purified product Substances 0.000 claims 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims 3
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 claims 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 24
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 10
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 7
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 4
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 101100412856 Mus musculus Rhod gene Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N esorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)C[C@H](C)O1 ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- HHAVHBDPWSUKHZ-UHFFFAOYSA-N propan-2-ol;propan-2-one Chemical compound CC(C)O.CC(C)=O HHAVHBDPWSUKHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
내용 없음.
Description
본 발명은 수지상의 선택적 흡착에 의한 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법에 관한 것이다.
상기 글리코시드를 거의 순수한 형태로 수득하기 위해서는, 주로 발효제조공정 및 합성 제조공정 모두에 있어서 조생성물중의 유기불순물 및 무기불순물의 양이 특히 높아 평균 12% 내지 25%나 되므로 고도의 특수한 방법이 요구된다.
그러나, 지금까지 공지된 통상의 정제방법에 의하면, 염소화 용매로 조생성물을 추출한 다음 완충제로 세척하면 비록 불순물의 함량이 상당히 저하되긴 하지만 4.5 내지 5.0%의 범위인 최종 생성물이 수득된다.
글리코시드 분자의 취급 및 화학약품에 대한 특별한 민감성을 고려해볼 경우, 상기 순도기준이 허용 가능한 것으로 간주되나, 일반적으로 거의 순수한 최종 생성물을 얻을 수 있도록 하는 개선된 정제법의 연구 분야에 우리의 관심을 불러 일으켜왔다. 임상 실험에 있어서의 항암제로서 안트라시클리논 글리코시드의 사용 및 또한 용량 및 독성에 관한 부수적인 문제를 유념해볼 경우, 일반적으로 독성이 높은 불순물의 최적량 제거가 본 발명이 요구하는 유용성을 분명히 입증하는 것이다.
최대 2%의 불순물을 함유하는 최종 생성물을 얻을 수 있는 본 발명은 산성조건(pH 3 내지 5)하에 여러 형태의 수지상에 조생성물을 흡착시킨 다음 물 또는 물과 극성용매와의 혼합물로 용충출키는 방법을 필수적으로 기초로 하고 있다. 더욱 특히 본 발명의 방법은, 수용성 용해 물질을 함유하는 약산성 수단이 과립 또는 비드(bead)와 같은 입자중에 분산되는 것과 같이 수지상에 흡착되는 상(Phase)을 포함하며, 제1상 또는 그 과정에서 흡착된 물질이 탈흡착되는 후속단계를 포함한다.
흡착성 수지는 수지입자로 충진된 일반적으로 타우어(tower) 또는 칼럼(column)형태인 적합한 용기 중에 함유될 수 있다. 조생성물중에 함유된 불순물의 형태에 따라서, 제1형태의 수지로부터 물질의 탈흡착에 의해 얻어진 용출물을 편리하게는 상이한 형태의 수지상에 연속적으로 흡착시키고, 이어서 공지된 방법에 의해 용출시킨다.
본 크로마토그래프 정제법에 있어서, 중합성 및 이온교환형태 또는 카르복시메틸셀룰로오즈 형태의 흡착수지를 사용할 수 있으며, 정제될 조생성물에 따른 여러 가지 형태의 수지를 사용하는데 있어서 정확한 선택, 적합한 순서, 흡착시의 약산성 조건은 최종 생성물을 고순도로 수득할 수 있게 하며, 염소화 유기용매의 사용의 생략 및 정제시 우수한 수율을 가능케 한다.
하기 실시예는 본 발명을 예시하며 이에 한정되지는 않는다.
[실시예 1]
[4-데메톡시-다우노루비신의 정제]
조상태의 역가가 70.2%이고 불순물 함량이 18%인 4-데메톡시-다우노루비신 15.0g을 0.5% 나트륨 아세테이트 용액 3.6ℓ중에 용해시킨다. 이 용액에 아세트산을 첨가하여 pH 4.7로 조절하여 직경 2.5cm의 칼럼중에 함유된 암버라이트(Amberlite)XAD2 (Rohm and Haas) 수지 400ml 상에 흡착시킨다. 생성물을 물 1000ml로 세척한 다음 물-메탄올(5:1v/v)의 혼합물로 용출시킨다. 제1용출물로서, 아글루콘(aglucon) 및 여러 가지 불순물을 함유하는 용액 2000ml를 수집한다.
물-메탄올(1:1v/v)의 혼합물로 계속 용출시켜 4500ml의 분획을 수집한다: 용액중의 용출물은 10%의 불순물과 함께 상기 4-데메톡시-다우노루비신을 함유한다.
용출물에 염산을 첨가하여 pH 2.8로 조절한 다음 1500ml의 용적으로 진공 농축시킨다. 이러한 농용액에 나트륨 아세테이트를 첨가하여 pH를 4.0으로 조절하고, 약산성 용액을 유속이 150ml/h이고 직경이 2.5cm인 칼럼중에 함유된 CM 세파로오즈(Sepharose) Cl 6B(Pharmacia) 수지 150ml상에 흡착시킨다. 흡착이 완결되면, 칼럼을 우선 물 450ml로 세척하고, 이어서 0.03% 염산으로 용출시킨다.
18%의 불순물을 함유하는 제1용출물 800ml에 나트륨 아세테이트를 첨가하여 pH 4.7로 조절하고, 또 제1정제 단계용 암버라이트 XAD2 수지상에 흡착되어야 할 조 4-데메톡시-다우노루비신 용액을 재순환시키기 위해 수집한다.
순수한 4-데메톡시-다우노루비신을 함유하는 후속 용출물(3500ml)을 50ml의 용적으로 진공 농축시킨 다음 250ml의 아세톤을 가하고, 수득된 침전물을 여과하여 물로 세척한 다음 건조시킨다. 수득된 4-데메톡시-다우노루비신의 출발 조생성물에 대한 수율은 52%이며, 역가는 97%이며 불순물 함량은 3% 미만이다.
[실시예 2]
[다우노루비신의 정제]
역가가 74.2%이고 불순물 함량이 8.5%인 염소화 다우노루비신 15.0g을 물 4500ml에 용해시킨다. 이 용액에 나트륨 아세테이트를 첨가하여 pH 5.0으로 조절하여 유속 600ml/h(1.5/v)에서 직경 2.5cm인 칼럼중에 S112카스텔(Kastell)수지 400ml 또는 암버라이트 ER180(Rohm and Haas) 수지상에 흡착시킨다.
생성물을 1% 염화나트륨 용액 1000ml로 세척한 다음 물-에탄올(1:1v/v)의 혼합물로 용출시킨다.
용액중에 아글루콘을 함유하는 헤드 분획(head fraction) 400ml를 제거하고 계속 용출시켜 순수한 다우노루비신을 함유하는 260ml의 용출물을 재수집한다. 여기에 희염산을 첨가하여 pH 2.5 로 조절하고, 아세톤을 가한 다음 이 생성물을 온도 5℃에서 6시간 동안 결정화시킨다. 생성물을 여과시켜, 아세톤으로 세척한 다음 12시간 동안 진공 건조한다.
출발 조생성물에 대한 수득된 다우노루비신의 수율은 80%이며, HPLC로 측정한 결과 역가가 97%, 불순물 함량이 2.6%이다.
[실시예 3]
[4-데메톡시-독소루비신의 정제]
불순물 함량이 14%인 4-데메톡시-독소루비신 10.4g을 함유하는 수용액 2000ml를 유속 250ml/h에서 직경 2.5cm인 칼럼중에 함유된 ER 180(Rhom and Haas)수지 50ml상에 흡착시킨다.
이어서 불순물의 선택 흡수에 의해 부분 정제된 용출물을 CM 세파로오즈 C1 6B(Pharmacia) 수지 200ml상에 흡착시킨다. 이 생성물을 메탄올 50, 및 농염산 0.015의 혼합물로 용출시키고, 아글루콘 및 기타 불순물을 함유하는 헤드분획(약 800ml)을 제거하나. 이어서 순수 물질을 함유하는 2000ml의 용출물을 수집하여, 60ml로 진공 농축시킨다. 3시간 교반하면서, 300ml의 아세톤을 가한다. 침전물을 여과시켜 아세톤으로 세척한 다음 건조시킨다. 수득된 순수한 4-데메톡시-독소루비신 6.5g의 수율은 이론치의 58.2%이고 불순물 함량은 3%이다.
[실시예 4]
[4′-데속시-독소루비신의 정제]
광물성염의 불순물 함량이 12%, 유기불순물 함량이 12%, 역가가 69.2%인 4′-데속시-독소루비신 15.0g을 물 2000ml중에 용해시킨 다음 이 용액을 유속 600ml/h에서 CM 세파덱스(Sephadex) C25 수지 300ml상에 흡착시킨다. 흡착이 완결되면, 이 용액을 0.03% 염산으로 용출시켜 4′-데속시-독소루비신을 함유하는 분획(6500ml)을 수득한다.
나트륨 수화물 용액을 첨가하여 pH 3.8으로 조절한 상기 용출물을 유속 400ml/h에서 S 112 카스텔 수지 200ml상에 흡착시킨다. 이 생성물을 물 600ml로 세척한 다음 염산을 첨가하여 pH 2.0로 산성화한 메탄올로 용출시킨다.
수득된 600ml의 중간 용출물(Core eluate)을 60ml로 진공 농축시킨다. 교반하에 농축된 용액을 600ml의 아세톤중에 서서히 가한다. 형성된 침전물을 여과시켜 아세톤으로 세척한 다음 건조시킨다.
수득된 4′-데속시-독소루비신의 수율은 이론치의 61%이고 역가는 95.8%이고, 불순물 함량은 4.2%이다.
[실시예 5]
[4′-에피-독소루비신의 정제]
역가가 75.9%이고 불순물 함량이 15%인 조 4′-에피-독소루비신 15.0g을 4000ml의 물에 용해시킨다.
용액에 포름산나트륨을 첨가하여 pH 4.8으로 조절하고, 유속 1600ml/h(4 b.v.)에서 직경 2.5cm인 칼럼중에 함유된 암버라이트 IRC 724 수지 400ml상에 흡착시킨다.
칼럼을 물 800ml로 세척한 다음 메탄올 95, 물 5 및 농염산 0.015의 혼합물로 용출시킨다. 4000ml의 중간 용출물은 10% 불순물을 함유하는 4′-에피-독소루비신과 불순물 함량이 많은 1500ml의 최종 용출물과 함께 수집한다.
중간 용출물을 1500ml로 농축시켜 포름산 나트륨을 첨가하여 pH 4.8로 조절한 다음, 유속 500ml/h(2b.v)에서 직경 2.5cm인 칼럼중에 함유된 카르복시메틸셀룰로오즈와트만 수지 250ml상에 흡착시킨다.
흡착이 완결되면, 생성물을 에탄올 99.3, 물 0.7 및 농염산 0.015의 혼합물로 세척한 다음, 에탄올 90, 물 10 및 농염산 0.05의 혼합물을 용출시켜 3200ml의 중간 용출물을 수집한다.
이 용출물을 60ml로 진공 농축시킨 다음, 생성물을 300ml의 아세톤을 첨가하여 침전시킨다. 수득된 6.9g의 4′-에피-독소루비신의 역가가 91.2%이고 불순물 함량이 3%이며 수율은 55.3%이다.
[실시예 6]
[독소루비신의 정제]
(a) 70g의 독소루비신을 28ℓ의 물에 용해시킨 다음 완충제를 첨가하여 pH 3.7 내지 4.5로 조절하고, 이어서 용액을 직경 6cm인 칼럼 중에 함유된 S 112 카스텔수지 2ℓ상에 흡착시킨다. 이 생성물을 물 35ℓ와 메탄올 15ℓ의 혼합물로 용출한다.
용출물(40ℓ)을 0.5ℓ로 진공 농축시킨 다음 생성물에 5℃에서 3시간 교반하면서 에탄올 1ℓ와 아세톤 4.5ℓ의 혼합물을 첨가하여 결정화시킨다.
이 생성물을 여과시켜, 0.8ℓ의 아세톤으로 세척한 다음 40℃에서 5시간 동안 진공 건조시킨다. 한 번 정제된 독소루비신(Ⅰ) 56.0g이 수득된다.
(b) 방법 (a)에 의해 수득된 한 번 정제된 독소루비신 80.0g을 24ℓ의 물에 용해시키고 완충제를 첨가하여 pH 4.0으로 조절한다.
이 용액을 직경이 12cm인 칼럼중에 함유된 카르복시 메틸셀룰로오즈 와트만 수지 1.6ℓ상에 흡착시킨다.
칼럼 유출물을 제거한다.
3.2ℓ의 물로 세척한 후, 생성물에 염산을 첨가하여 pH 2.5로 조절한 물 55ℓ로 용출시킨다.
46ℓ의 용출물을 수집하여 0.6ℓ의 용적으로 진공 농축시킨 다음, 생성물을 이소프로판올-아세톤(1:3)의 혼합물을 조심스럽게 첨가하여 결정화시킨다.
생성물을 여과하고, 1ℓ의 아세톤으로 세척한 다음 40℃에서 4시간 동안 건조시킨다. 수득된 65g의 독소루비신은 역가가 98.5%이고 불순물 함량이 1.5%이다.
Claims (5)
- pH 약 4.7로 조절된, 조 4-데메톡시-다우노루비신의 수용액을 암버라이트 XAD2 수지상에 흡착시킨 후, 용출용매로 물과 메탄올의 혼합물을 사용하는 용출 공정에 의해 생성물을 탈흡착시키고, 이어 정제된 생성물을 pH 약 4에서 CM 세파로오즈 Cl 6B수지상에 재흡착시킨 후, 용출 용매로 약산성 물을 사용하는 용출 공정에 의해 보다 정제된 생성물을 탈흡착시킴을 특징으로 하는, 발효법 또는 합성법에 의해 제조된 4-데메톡시-다우노루비신의 정제방법.
- pH 약 5로 조절된, 조 다우노루비신의 수용액을 S 112 카스텔또는 암버라이트 ER 180수지상에 흡착시킨 후, 용출 용매로 물과 에탄올의 혼합물을 사용하는 용출 공정에 의해 생성물을 탈흡착시킴을 특징으로 하는, 발효법 또는 합성법에 의해 제조된 다우노루비신의 제조방법.
- pH 3 내지 5로 조절된, 조4-데메톡시-독소루비신의 수용액을 암버라이트 ER 180수지상에 흡착시키고, 이어 정제된 생성물을 CM 세파로오즈 Cl 6B수지상에 재흡착시킨 후, 용출 용매로 메탄올과 약산성 물의 혼합물을 사용하는 용출공정에 의해 보다 정제된 생성물을 탈흡착시킴을 특징으로 하는,, 발효법 또는 합성법에 의해 제조된 4-데메톡시-독소루비신의 정제방법.
- 조 4′-데속시-독소루비신의 수용액을 CM 세파덱스 C 25수지상에 흡착시킨 후, 용출 용매로 약산성 물을 사용하는 용출 공정에 의해 생성물을 탈흡착시키고, 이어 정제된 생성물을 pH 약 3.8에서 S 112 카스텔수지상에 재흡착시킨 후, 용출 용매로 물과 메탄올의 혼합물을 사용하는 용출 공정에 의해 보다 정제된 생성물을 탈흡착시킴을 특징으로 하는, 발효법 또는 합성법에 의해 제조된 4′-데속시-독소루비신의 정제방법.
- pH 약 4.8로 조절된, 조 4′-에피-독소루비신의 수용액을 암버라이트 IRC 724수지상에 흡착시킨 후, 용출 용매로 약산성 물과 메탄올의 혼합물을 사용하는 용출 공정에 의해 생성물을 탈흡착시키고, 이어 정제된 생성물을 pH 약 4.8에서 카르복시메틸셀룰로오즈 수지상에 흡착시킨 후, 용출 용매로 약산성 물과 에탄올의 혼합물을 사용하는 용출 공정에 의해 보다 정제된 생성물을 탈흡착시킴을 특징으로 하는, 발효법 또는 합성법에 의해 제조된 4′-에피-독소루비신의 정제방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019910014922A KR920000102B1 (ko) | 1982-12-23 | 1991-08-23 | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT24939A/82 | 1982-12-23 | ||
| IT24939/82A IT1155446B (it) | 1982-12-23 | 1982-12-23 | Procedimento per la purificazione di glucosidi antraciclinonici mediante adsobimento selettivo su resine |
| KR1019830006090A KR900008743B1 (ko) | 1982-12-23 | 1983-12-22 | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 |
| KR1019910014922A KR920000102B1 (ko) | 1982-12-23 | 1991-08-23 | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019830006090A Division KR900008743B1 (ko) | 1982-12-23 | 1983-12-22 | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR920000102B1 true KR920000102B1 (ko) | 1992-01-09 |
Family
ID=27273406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019910014922A Expired KR920000102B1 (ko) | 1982-12-23 | 1991-08-23 | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR920000102B1 (ko) |
-
1991
- 1991-08-23 KR KR1019910014922A patent/KR920000102B1/ko not_active Expired
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR900008743B1 (ko) | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 | |
| EP3064214A1 (en) | Separation and purification method for vancomycin hydrochloride of high purity | |
| Hrazdina | Column chromatographic isolation of the anthocyanidin-3, 5-diglucosides from grapes | |
| US4440753A (en) | Purification of glycopeptide antibiotics using non-functional resins | |
| JPH0645626B2 (ja) | セフタジジムの回収方法 | |
| KR920000102B1 (ko) | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 | |
| CN113087774B (zh) | 棘白菌素b母核降解杂质的去除方法 | |
| US6649755B1 (en) | Process for preparing acarbose with high purity | |
| CN116854755A (zh) | 一种高纯度京尼平苷的分离纯化方法及其应用 | |
| JP3141029B2 (ja) | ペントスタチンの精製方法 | |
| IE42633B1 (en) | Purification of cephamycin c | |
| RU2332248C1 (ru) | Способ хроматографической очистки бусерелина | |
| US4313875A (en) | Purification of penicillin derivative | |
| JPS628118B2 (ko) | ||
| JP2000351791A (ja) | ドキソルビシンの精製方法 | |
| WO2003014135A1 (en) | Method for purification of acarbose | |
| KR840000798B1 (ko) | N'-메틸-d-아스파라길 아목시실린의 정제방법 | |
| JPH0737434B2 (ja) | ７−ジメチルアミノ−６−デメチル−６−デオキシテトラサイクリンの採取法 | |
| JPS6149317B2 (ko) | ||
| CN116514927A (zh) | 一种替考拉宁的纯化方法 | |
| WO1998026085A1 (fr) | Procedes de fabrication de vancomycine | |
| KR800001596B1 (ko) | 복상식 수지 칼럼을 이용한 세파로스포린 c의 선별 회수법 | |
| RU2026303C1 (ru) | Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина | |
| JPH10225299A (ja) | バンコマイシンの製造方法 | |
| JPH0352448B2 (ko) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A107 | Divisional application of patent | ||
| A201 | Request for examination | ||
| PA0107 | Divisional application |
Comment text: Divisional Application of Patent Patent event date: 19910828 Patent event code: PA01071R01D Filing date: 19831222 Application number text: 1019830006090 |
|
| PA0201 | Request for examination |
Patent event code: PA02012R01D Patent event date: 19910828 Comment text: Request for Examination of Application |
|
| G160 | Decision to publish patent application | ||
| PG1605 | Publication of application before grant of patent |
Comment text: Decision on Publication of Application Patent event code: PG16051S01I Patent event date: 19911126 |
|
| O035 | Opposition [patent]: request for opposition | ||
| PO0301 | Opposition |
Comment text: Request for Opposition Patent event code: PO03011R01D Patent event date: 19920309 |
|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| O073 | Decision to grant registration after opposition [patent]: decision to grant registration | ||
| PO0701 | Decision to grant registration after opposition |
Comment text: Decision to Grant Registration Patent event code: PO07011S01D Patent event date: 19940829 |
|
| GRNT | Written decision to grant | ||
| PR0701 | Registration of establishment |
Comment text: Registration of Establishment Patent event date: 19941007 Patent event code: PR07011E01D |
|
| PR1002 | Payment of registration fee |
Payment date: 19941007 End annual number: 3 Start annual number: 1 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19941230 Start annual number: 4 End annual number: 4 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19960105 Start annual number: 5 End annual number: 5 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19961227 Start annual number: 6 End annual number: 6 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19971222 Start annual number: 7 End annual number: 7 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19981228 Start annual number: 8 End annual number: 8 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 19991223 Start annual number: 9 End annual number: 9 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20010105 Start annual number: 10 End annual number: 10 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20020105 Start annual number: 11 End annual number: 11 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20021230 Year of fee payment: 12 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20021230 Start annual number: 12 End annual number: 12 |
|
| EXPY | Expiration of term | ||
| PC1801 | Expiration of term |
Termination date: 20040910 Termination category: Expiration of duration |