RU2026303C1 - Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина - Google Patents
Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2026303C1 RU2026303C1 SU4942039A RU2026303C1 RU 2026303 C1 RU2026303 C1 RU 2026303C1 SU 4942039 A SU4942039 A SU 4942039A RU 2026303 C1 RU2026303 C1 RU 2026303C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- doxorubicin
- aqueous solution
- solution
- water
- purification
- Prior art date
Links
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 7
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 title claims description 48
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 title claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims abstract description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 16
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- MWWSFMDVAYGXBV-RUELKSSGSA-N Doxorubicin hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MWWSFMDVAYGXBV-RUELKSSGSA-N 0.000 abstract description 10
- 229960002918 doxorubicin hydrochloride Drugs 0.000 abstract description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 8
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 125000005395 methacrylic acid group Chemical group 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1,1,1-trifluorobutane Chemical compound FC(F)(F)CCCBr DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 150000001253 acrylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003972 antineoplastic antibiotic Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Substances CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000002336 sorption--desorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Использование: в качестве противоопухолевого средства. Сущность: продукт - доксорубиции гидрохлорид, выход 86,7 %, БФ C27H29NO11·HCl. Реагент 1: водный раствор сырого доксорубицина сырца. Реагент 2: ионит БД-АМ-15-85, уравновешенный 0,1-0,2 М аммоний ацетатным буфером с pH 4,3-4,6. Реагент 3: вода - 70-80%-ный водный этанол, содержащий 0,001-0,003 н. НС1.
Description
Изобретение относится к технологии очистки противоопухолевого антибиотика доксорубицина гидрохлорида, широко используемого в медицинской практике [1].
Доксорубицин гидрохлорид (адриамицин гидрохлорид) С27Н29NO)11˙HCl мол. м. 580,0 производится в чистотой 98,0%, предлагается также композиция, содержащая 16% доксорубицина с чистотой 99,0% (Каталог Fluka. Chemika Biochemika 1990/91, s.563, nn.44583-44584).
Используемый в способе сорбент БД-АМ-15-85 является сополимером метакриловой, акриловой кислот и диметилакрилата этиленгликоля.
Известен способ очистки доксорубицина, полученного путем химического синтеза, который заключается в следующих стадиях [2]:
0,25%-ный водный раствор сырого доксорубицина гидрохлорида с рН 3,7-4,5 пропускают через смолу S-112 Кастелл [R] при соотношении раствор : смола = (14-15):1;
адсорбированный продукт элюируют смесью вода-этанол (7:3 по объему) при соотношении элюент : смола = 25:1;
элюат концентрируют в вакууме, добавляют раствор этанола в ацетоне (1: 4,5 по объему), гомогенизируют и выдерживают при 0-5оС;
кристаллический продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат;
полученный моноочищенный доксорубицин гидрохлорид вновь растворяют в воде и доводят рН до 4,0;
0,33%-ный раствор пропускают через карбоксиметилцеллюлозу при соотношении объемов водного раствора и карбоксиметилцеллюлозы 15:1;
затем карбоксиметилцеллюлозу промывают водой при соотношении объемов КМЦ : вода = 1:2;
целевой продукт элюируют водой с рН 2,5 при соотношении объемов смола вода = 1:35;
элюат концентрируют в 70-80 раз, добавляют смесь изопропилового спирта с ацетоном (1:3 по объему);
кристаллический целевой продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат.
0,25%-ный водный раствор сырого доксорубицина гидрохлорида с рН 3,7-4,5 пропускают через смолу S-112 Кастелл [R] при соотношении раствор : смола = (14-15):1;
адсорбированный продукт элюируют смесью вода-этанол (7:3 по объему) при соотношении элюент : смола = 25:1;
элюат концентрируют в вакууме, добавляют раствор этанола в ацетоне (1: 4,5 по объему), гомогенизируют и выдерживают при 0-5оС;
кристаллический продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат;
полученный моноочищенный доксорубицин гидрохлорид вновь растворяют в воде и доводят рН до 4,0;
0,33%-ный раствор пропускают через карбоксиметилцеллюлозу при соотношении объемов водного раствора и карбоксиметилцеллюлозы 15:1;
затем карбоксиметилцеллюлозу промывают водой при соотношении объемов КМЦ : вода = 1:2;
целевой продукт элюируют водой с рН 2,5 при соотношении объемов смола вода = 1:35;
элюат концентрируют в 70-80 раз, добавляют смесь изопропилового спирта с ацетоном (1:3 по объему);
кристаллический целевой продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат.
Выход продукта с чистотой, не превышающей 98%, не более 65%.
Целью изобретения является увеличение выхода целевого продукта при сохранении высокой степени очистки.
Эта цель достигается способом очистки сырого доксорубицина, который реализуется совокупностью следующих существенных признаков:
0,12-0,20% -ный водный раствор сырого доксорубицин гидрохлорида с рН 4,3-4,6 пропускают через ионит БД-АМ-15-85, уравновешенный 0,1-0,2 М аммонийацетатным буферным раствором с рН 4,3-4,6;
ионит промывают водой, затем 70-80% -ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,001-0,003 н. соляную кислоту;
доксорубицин элюируют 70-80% -ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,1-0,5 н. соляную кислоту;
абсолютным этиловым спиртом осаждают целевой продукт из элюата.
0,12-0,20% -ный водный раствор сырого доксорубицин гидрохлорида с рН 4,3-4,6 пропускают через ионит БД-АМ-15-85, уравновешенный 0,1-0,2 М аммонийацетатным буферным раствором с рН 4,3-4,6;
ионит промывают водой, затем 70-80% -ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,001-0,003 н. соляную кислоту;
доксорубицин элюируют 70-80% -ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,1-0,5 н. соляную кислоту;
абсолютным этиловым спиртом осаждают целевой продукт из элюата.
Чистоту продукта определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
П р и м е р 1. 140 мг доксорубицина-сырца с чистотой 92,2% растворяют в 70 мл воды. Добавлением муравьиной кислоты доводят рН раствора до 4,3. При этом концентрация доксорубицина в растворе 0,20%. Раствор пропускают через колонку размером d = 1,5 см, Н = 4,5 см, объем 8 мл, заполненную ионитом БД-АМ-15-85 в виде гранул размером 200-350 мкм. Ионит получают радикальной сополимеризацией метакриловой, акриловой кислот с диметакрилатом этиленгликоля [2] . Ионит измельчают, фракционируют, промывают водой, этанолом, водой, 0,5 н. раствором NaOH, водой, 1,0 н. раствором соляной кислоты, водой. После сушки ионит уравновешивают 0,1 н. аммоний ацетатным буферным раствором с рН 4,3.
Сорбцию раствора доксорубицина-сырца ведут со скоростью 160 мл/см2˙ч. В этих условиях проскока вещества нет. Затем сорбент промывают 40 мл воды, 40 мл 70%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,001 н. соляную кислоту. Доксорубицин десорбируют 70% -ным водным раствором этилового спирта, содержащего 0,3 н. соляную кислоту. К элюату (6,5 мл) добавляют 33 мл абсолютного этилового спирта. Выпавший кристаллический продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат.
Получают 123,1 мг доксорубицин гидрохлорида (выход 87,8%) с чистотой 98,5%.
П р и м е р 2. 750 мг доксорубицина с чистотой 92,1% растворяют в 600 мл воды, устанавливают рН 4,6. Концентрация доксорубицина 0,12%. Раствор пропускают через колонку (d = 2,5 см, Н = 10 см, объем 49 мл) с ионитом БД-АМ-15-85, уравновешенным 0,2 М аммоний ацетатным буферным раствором с рН 4,6. Сорбцию ведут при скорости пропускания раствора 180 мл/см2˙ч. Сорбент в колонке промывают 250 мл воды, затем 250 мл 80%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,002 н. соляную кислоту. Доксорубицин десорбируют 30 мл 80%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,5 н. соляную кислоту. К элюату добавляют 180 мл абсолютного этилового спирта. Кристаллический продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат.
Получают 620 мг доксорубицин гидрохлорида (выход 86,7%) с чистотой 98,7%.
П р и м е р 3. 350 мг доксорубицина-сырца с чистотой 92,0% растворяют в 270 мл воды, устанавливают рН 4,5. Концентрация доксорубицина 0,13%. Раствор пропускают через колонку (d = 2,2 см, Н = 6,6 см, объем 23 мл) с ионитом БД-АМ-15-85, уравновешенным 0,1 М аммонийацетатным буферным раствором с рН 4,5. Сорбцию ведут при скорости пропускания раствора 170 мл/см2˙ч. Сорбент промывают 120 мл воды, 120 мл 70%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,001 н. соляную кислоту. Десорбцию осуществляют 20 мл 75 %-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,5 н. соляную кислоту. Элюат обрабатывают 100 мл абсолютного этилового спирта.
Получают 285,1 мг кристаллического доксорубицина (выход 81,5%) при чистоте 99,5%.
П р и м е р 4. 200 мг доксорубицина-сырца с чистотой 92,3% растворяют в 160 мл воды с подкислением до рН 4,4. Концентрация доксорубицина 0,12%. Раствор пропускают через колонку с ионитом БД-АМ-15-85 (d = 1,6 см, Н = 6,4 см, объем 13,2 мл). Ионит уравновешен 0,2 М аммонийацетатным буферным раствором с рН 4,4. Скорость пропускания раствора 190 мл/см2˙ч. Затем сорбент промывают 70 мл воды, 70 мл 80%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,002 М соляную кислоту. Доксорубицин десорбируют 12 мл 70%-ного водного раствора этилового спирта, содержащего 0,4 н. соляную кислоту. Элюат обрабатывают 70 мл абсолютного этилового спирта и получают 160,2 мг кристаллического продукта (выход 82,0%) с чистотой 98,7%.
При выявлении существенности признаков заявленного способа было найдено.
Снижение рН раствора доксорубицина-сырца перед сорбцией до 4,0-4,1 приводит к уменьшению равновесной емкости сорбции. Повышение рН до 5,0-5,5 приводит к увеличению необратимости сорбции и снижению выхода.
Увеличение концентрации соляной кислоты, так же как и концентрации этилового спирта на стадии промывки снижает степень чистоты целевого продукта. Уменьшение концентрации кислоты и спирта на стадии промывки приводит к снижению чистоты целевого продукта и уменьшению выхода.
Уменьшение концентрации кислоты на стадии элюции приводит к увеличению объемов элюата, что затрудняет проведение кристаллизации. Увеличение концентрации кислоты на стадии элюции приводит к побочной реакции - отщеплению аминосахара от доксорубицина и превращению его в адриамицинон.
Анализ примеров конкретного выполнения подтверждает достижение заявленной цели - выход доксорубицин гидрохлорида повысился до 81,5-87,8% при чистоте 98,5-99,5% . В то время, как продукт по способу-прототипу характеризуется выходом, не превышающим 65% при чистоте 98,0%.
Существенным дополнительным преимуществом заявленного решения является значительное упрощение технологии очистки доксорубицина-сырца: по способу-прототипу необходимо выполнение 10 технологических операций, по заявленному способу - всего 6. При этом устранены такие энергетические стадии, как две операции концентрирования. Значительно снижено количество используемого сорбента: для получения 1 кг доксорубицина необходимы 1,5 кг ионита БД-АМ-15-85 или 8,5-9,5 кг карбоксицеллюлозы марки Ватман и 7,5-8,0 кг смолы S-112 Кастелл [R]. Сорбент БД-АМ-15-85 выдерживает сотни циклов регенерации и актов сорбции - десорбции без изменения емкости сорбции и ее 100% обратимости.
Claims (1)
- СПОСОБ ОЧИСТКИ ВОДНОГО РАСТВОРА СЫРОГО ДОКСОРУБИЦИНА колоночной хроматографией на ионообменных смолах при сорбции водных растворов с последующей элюцией и осаждением конечного продукта из элюата, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода при сохранении высокой степени очистки, 0,12 - 0,20% -ный водный раствор подкисленного доксорубицина-сырца пропускают через ионит БД = АМ = 15 - 85, уравновешенный 0,1 - 0,2 М аммоний ацетатным буферным раствором с pH 4,3 - 4,6, затем ионит последовательно промывают водой, 70 - 80% -ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,001 - 0,003 н. соляную кислоту, и элюируют 70 - 80%-ным водным раствором этилового спирта, содержащим 0,1 - 0,5 н. соляную кислоту.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4942039 RU2026303C1 (ru) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4942039 RU2026303C1 (ru) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2026303C1 true RU2026303C1 (ru) | 1995-01-09 |
Family
ID=21577559
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4942039 RU2026303C1 (ru) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2026303C1 (ru) |
-
1991
- 1991-06-03 RU SU4942039 patent/RU2026303C1/ru active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Гаузе Г.Ф., Дудник Ю.В. Противоопухолевые антибиотики, М.: Медицина, 1987, 176 с. * |
| Патент СССР N 1470197, кл. C 07H 15/24 1989. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1440350A3 (ru) | Способ очистки 4Ъ-эпидоксорубицина | |
| Ishikawa et al. | Synthesis and solvolysis of some D-glucopyranosyl bromides having a benzyl group at C-2 | |
| JP6438966B2 (ja) | 高純度塩酸バンコマイシンの分離精製方法 | |
| Doner | Isomerization of D-fructose by base: Liquid-chromatographic evaluation and the isolation of D-psicose | |
| RU2026303C1 (ru) | Способ очистки водного раствора сырого доксорубицина | |
| CA2133644C (en) | Process for making vancomycin | |
| US6649755B1 (en) | Process for preparing acarbose with high purity | |
| JPH07291894A (ja) | クエン酸アルカリ金属塩の製造方法 | |
| Sinaÿ et al. | The Synthesis of the d-Manno Analogue of Muramic Acid, 2-Amino-3-O-(d-1-carboxyethyl)-2-deoxy-d-mannose | |
| US4652640A (en) | Crystalline maltopentaose and process for producing the same | |
| US6734300B2 (en) | Acarbose purification process | |
| WO1999007720A2 (en) | Process for the purification of acarbose, pharmaceutical composition containing same and its use for the treatment of diabetes | |
| CN101463076A (zh) | 一种博莱霉素的精制方法 | |
| JPH0656884A (ja) | グルタチオンの精製法 | |
| US3926973A (en) | Method for separating cephalosporin C | |
| US2957886A (en) | Resolution procedures and apparatus therefor | |
| CN100363374C (zh) | 一种从麦芽糖醇液中提取麦芽糖醇的方法 | |
| KR920000102B1 (ko) | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 | |
| WO2003014135A1 (en) | Method for purification of acarbose | |
| RU2334511C1 (ru) | Способ выделения и очистки копропорфирина iii | |
| KR100284174B1 (ko) | 스피라마이신의 정제방법 | |
| JPS6149317B2 (ru) | ||
| Shimahara et al. | A sulfated galactan from the red seaweed Hypnea charoides | |
| JPH04202176A (ja) | アブシジン酸の精製法 | |
| SU557794A1 (ru) | Способ очистки рутина |