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KR890008321A - 식물 게놈으로 유전자의 지시성 통합 - Google Patents

식물 게놈으로 유전자의 지시성 통합 Download PDF

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KR890008321A
KR890008321A KR1019880015144A KR880015144A KR890008321A KR 890008321 A KR890008321 A KR 890008321A KR 1019880015144 A KR1019880015144 A KR 1019880015144A KR 880015144 A KR880015144 A KR 880015144A KR 890008321 A KR890008321 A KR 890008321A
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gene
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보이르 마르쿠스
포트리쿠스 인고
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에른스트 알테르
시바-가이기 아게
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Abstract

내용 없음

Description

식물 게놈으로 유전자의 지시성 통합
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1 도는 유전자 타겟팅(taregeting)실험의 계략도이고, 제 2 도는 플라스미드 pHP23△ 및 pABDH의 작성도 이다.

Claims (57)

  1. 통합되는 DNA를 함유하며 그 DNA가 식물 게놈내의 상응하는 DNA영역과 충분한 상동성을 갖거나, 또는 상동 영역을 함유하는 식물 세포의 형질전환시 상동 재조합에 의하여 통합되는 DNA가 식물 게놈내의 지정 부위로 정확하게 특이적으로 지시 통합될 수 있게 충분한 상동성을 갖는 DNA서열에 의해 측면을 접하는 것을 특징으로 하는 유전자, 유전자 단편 또는 기타 유용한 DNA서열을 식물 게놈내의 지정부위에 정확하게 특이적으로 지시 통합시킬 수 있는 재조합 DNA분자.
  2. 제 1 항에 있어서, 임의로 식물 세포에서 작용할수 있는 발현시그널의 조절하에 있는 통합되는 DNA가 식물 게놈내의 특정 영역과 상동성을 갖는 측면 DNA서열과 연결된 재조합 DNA분자.
  3. 제 1 항에 있어서, 임의로 식물 세포에서 작용할수 있는 발현시그널의 조절하에 있는 통합되는 DNA가 식물 게놈내의 상응하는 DNA영역과 충분한 상동성을 가져 상동 재조합에 의하여 상기 상동 게놈 DNA를 통합되는 상기 DNA로 직접 교환할 수 있는 재조합 DNA분자.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 상기 DNA가 게놈 DNA, cDNA 또는 합성 DNA로 구성된 재조합 DNA분자.
  5. 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 상기 DNA가 게놈 DNA 또 cDNA 및/또는 합성 DNA로 구성된 재조합 DNA분자.
  6. 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 DNA가 상이한 속에 속하는 몇개 생물로부터 유래한 유전자 또는 기타 DNA단편으로 구성된 재조합 DNA분자.
  7. 제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 DNA가 상이한 균주에 속하는 생물, 또는 동일한 속의 동일 종 또는 상이한 종의 변종에 속하는 생물로부터 유래한 유전자 또는 DNA단편으로 구성된 재조합 DNA분자.
  8. 제 1항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 DNA가 동일한 생물의 1개 이상의 유전자 부분으로 구성된 재조합 DNA분자.
  9. 제 1항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서, 통합되는 DNA가 형질전환된 식물에게 유용하고 소망스런 특성을 부여하는 구조 유전자인 재조합 DNA분자.
  10. 제 9 항에 있어서, 상기 구조 유전자가 식물에게 병원균, 제초제, 살충제 또는 기타 생물독에 대하여 향상된 내성 또는 내약력을 부여하는 재조합 DNA분자.
  11. 제 9 항에 있어서, 상기 구조 유전자가 잎, 종자, 괴경, 뿌리 및 줄기에서 저장 물질 및 보관물질의 형성과 질을 향상시키는 재조합 DNA분자.
  12. 제 11 항에 있어서, 상기 구조 유전자가 식물 저장 단백질 유전자인 재조합 DNA분자.
  13. 제 9 항에 있어서, 상기 구조 유전자가 약제학적으로 허용되는 활성물질을 코드하는 재조합 DNA분자.
  14. 제 1 항에 있어서, 통합되는 DNA가 조절기능을 갖는 비-코딩 DNA서열인 재조합 DNA분자.
  15. 제 2 항에 있어서, 상기 발현시그널이 식물 또는 식물 비루스의 유전자로부터 유래한 재조합 DNA분자.
  16. 제 15 항에 있어서, 상기 발현시그널이 리불로스-1,5-이인산 카르복실라제의 하부단위 또는 클로로필-a/b-결합단백질을 코드하는 식물 유전자로부터 유래하는 재조합 DNA분자.
  17. 제 15 항에 있어서, 상기 발현 시그널이 식물 비루스의 유전자로부터 유래하는 재조합 DNA분자.
  18. 제 17 항에 있어서, 식물 비루스가 꽃양배추 모자이크 비루스(CaMV)인 재조합 DNA분자.
  19. 제 18 항에 있어서, CaMV게놈의 35S발현시그널을 포함하는 재조합 DNA분자.
  20. 제 18 항에 있어서, CaMV게놈의 19S발현시그널을 포함하는 재조합 DNA분자.
  21. 제 1 항에 있어서, 측면 DNA서열이 식물 고유 유전자 또는 게놈의 영역과 상동성을 갖는 DNA서열인 재조합 DNA분자.
  22. 제 1 항에 있어서, 측면 DNA서열이 유전자 또는 유전자 단편 또는 공지된 방법을 이용하여 표적 식물의 게놈으로 인위적으로 통합되었고 또 그의 뉴클레오티드 서열이 전체적으로 또는 부분적으로 공지된 기타 유용한 DNA서열과 상동성을 갖는 DNA서열인 재조합 DNA분자.
  23. 제 22 항에 있어서, 상기 측면 DNA와 식물 게놈으로 인위적으로 통합된 DNA가 상동 재조합되어 식물게놈에게 기능 단위를 형성하는 서로 상보적인 DNA서열인 재조합 DNA분자.
  24. 제 23 항에 있어서, 재조합이 발생하면 상호 상보적인 DNA서열들이 표현형 마커 또는 기타 쉽게 선별 가능한 단백질 산물을 코드하는 재조합 DNA분자.
  25. 제 21 항 내지 제 24 항중 어느 한 항에 있어서, 상기 유전자 또는 유전자 단편 또는 기타 유전자 단편이 천연적으로 발현율이 높은 식물 게놈내의 영역에 위치하는 재조합 DNA분자.
  26. 제 21 항에 있어서, 식물 저장 단백질 유전자를 포함하는 재조합 DNA분자.
  27. 제 1 항에 있어서, (a) 상기 재조합 DNA분자가 제 9 항 내지 제 14 항중 어느 한 항에 따른 구조 유전자를 함유하고, (b) 상기 구조 ㅇ유전자가 제 15 항 내지 제 20 항중 어느 한 항에 따른 식물 세포에서 작용할 수 있는 임의의 발현시그널과 기능적으로 연결되어 있으며, (c) 구조 유전자 및 임의의 발현시그널로 구성된 상기 기능 단위가 상동 영역을 함유하는 식물 세포의 형질전환시 상동 DNA서열과 접한 유전자 서열이 상동 재조합에 의하여 식물 게놈내의 지정 부위에 지시 통합되도록 식물 세포내의 상응하는 DNA영영과 충분한 상동성을 갖는 DNA서열과 접해있는 재조합 DNA분자.
  28. 제 1 항 내지 제 27 항중 어느 항에 따른 재조합 DNA분자를 이용하여 공지된 방법으로 유전자, 유전자 단편 또는 기타 유용한 DNA서열을 식물 세포로 형질전환시키고, 또 식물 세포에서 상동 재조합을 이용하여 식물 게놈내의 원하는 지정 부위로 조절되게 통합시키는 트랜스제닉 식물의 제조방법.
  29. 제 28 항에 있어서, 상동 DNA영역을 함유하는 식물 물질의 형질전환을 아그로박테륨(Agrobacterium)형질전환계를 이용하여 실행한 방법.
  30. 제 28 항에 있어서, 상기 형질전환을 CaMV형질전환계를 이용하여 실행한 방법.
  31. 제 28 항에 있어서, 상기 형질전환을 직접 유전자 전달법으로 실행한 방법.
  32. 제 28 항에 있어서, 상기 형질전환이 공동 형질전환인 방법.
  33. 제 28 항에 있어서, 천연적 유전자 또는 변형된 유전자 또는 유전자 단편 또는 기타 유용한 DNA서열이 식물 게놈내의 상동 DNA영역과의 재조합에 의하여 식물 게놈으로 통합되는 방법.
  34. 제 28 항에 있어서, 통합된 유전자의 발현효율이 높고 및/또는 조절이 유리한 식물 게놈 영역에서 통합을 실행하는 방법.
  35. 제 33 항에 있어서, 상기 상동 게놈 DNA영역이 식물 게놈의 천연적 성분인 방법.
  36. 제 33 항에 있어서, 상기 상동 게놈 DNA영역이 공지된 방법 단계에 의하여 인위적으로 식물 게놈으로 통합되었던 DNA영역인 방법.
  37. 제 36 항에 있어서, 상기 상동 게놈 DNA영역이 상이한 생물로부터 유래한 방법.
  38. 제 33 항 내지 제 37 항중 어느 한 항에 있어서, 상기 상동 게놈 DNA영역이 높은 발현 효율을 갖는 영역에 존재하는 방법.
  39. 제 36 항 또는 제 37 항에 있어서, 상기 상동 게놈 DNA영역이 포현형 마커 또는 기타 쉽게 선별 가능한 단백질 산물을 코드하는 방법.
  40. 제 1 항 내지 제 27항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA분자를 함유하는 DAN전달 백터.
  41. 제 1 항 내지 제 27항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA분자를 함유하는 DAN발현 백터.
  42. 제 40 항에 따른 DNA전달 백터를 함유하는 숙주 세포.
  43. 제 41 항에 따른 DNA전달 백터를 함유하는 숙주 세포.
  44. 제 42 항 또는 제 43 항에 있어서, 제 1 항 내지 제 27 항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA분자를 함유하는 숙주 세포.
  45. 제 42 항 또는 제 43 항에 있어서, 미생물인 숙주 세포.
  46. 제 42 항 또는 제 43 항에 있어서, 식물 세포인 숙주 세포.
  47. 제 1 항 내지 제 27 항중 어느 한 항에서 청구된 재조합 DNA분자로 형질전환된, 트랜스제닉 식물 및 그의 종자로 구성된 식물 물질.
  48. 제 1 항 내지 제 27 항중 어느 한 항에 따른 재조합 DNA분자를 함유하는 식물 세포.
  49. 제 48 항에 따른 식물 세포를 함유하는, 트랜스제닉 식물과 그의 종자로 구성된 식물 물질.
  50. 제 48 항에서 청구된 식물 세포로부터 재분화한, 트랜스제닉 식물과 그의 종자로 구성된 식물 물질.
  51. 제 47 항, 제 49 항 또는 제 50 항중 어느 한 항에 있어서, 솔라나세아애(Solanaceae), 크루시페라에(Cruciferae), 콤보지타애(Compositae), 릴리아세아애(Liliaceae), 비타세아애(Vitaceae), 체노포디아세아애(Chenopodiaceae), 루타세아애(Rutaceae), 알리아세아애(Alliaceae), 아마릴리다세아애(Amaryllidaceae), 아스파라가세아애(Asparagaceae), 오르키다세아애(Orchidaceae), 팔마애(Palmae), 브로멜리아세아애(Bromeliaceae), 루비아세아애(Rubiaceae), 테아세아애(Theaceae), 무사세아애(Musaceae), 그라미네아애(Gramineae) 또는 레구미노사애(Leguminosae)으로 구성된 선정된 식물 물질.
  52. 제 47 항, 제 49 항 또는 제 50 항중 어느 한 항에 있어서, 솔라나세아애(Solanaceae), 크루시파라에(Cruciferae) 및 그라미네아애(Gramineae)로 구성된 군으로부터 선정된 식물 물질.
  53. 제 47 항, 제 49 항 또는 제 50 항중 어느 한 항에 있어서, 프라가리아(Pragaria), 로투스(Lotus), 메디카고(Medicago), 오노브리키스(Onobrychis), 트리폴룸(Trifolium), 트리고넬라(Trigonella), 비그나(Vigna), 시트러스(Citrus), 리눔(Linum), 제라늄(Geranium), 마나하트(Manihot) , 다우쿠스(Daucus), 아라비도프시스(Arabidopsis), 브라씨카(Brassica), 라파누스(Raphanus), 시나피스(Sinapis), 아트로파(Atropa), 카프시쿰(Capsicum), 다투라(Datura), 효시아무스(Hyoscyamus), 리코페르시콘(Lycopersicon), 니코티아나(Nicotiana), 솔라눔(Solanum), 페투니아(Petunia), 디기탈리스(Digitalis), 마조라나(Majorana), 시코륨(Cichorium), 헬리안투스(Helianthus), 락투카(Lactuca), 브로무스(Bromus), 아스파라구스(Asparagus), 안티르히눔(Antirrhinum), 헤메로칼리스(Hemorocallis), 헤메시아(Nemesia), 펠라르고늄(Pelargonium), 파니쿰(Panicum), 페니세툼(Pennisetum), 라눈클루스(Ranunculus), 세네시오(Senecio), 살피글로씨스(Salpiglossis), 쿠쿠미스(Cucumis), 블라윌리아(Browallia), 글리신(Glycine), 룰륨(Lolium), 제아(Zea), 트리티쿰(Triticum) 및 소굼(Sorghum)으로 구성된 군으로부터 선정된 작물, 및 이포모애아(Ipomoea), 파씨플로라(Passiflora), 시클라멘(Cyclamen), 말루스(Malus), 프루누스(Prunus), (로사(Rosa), 루부스(Rubus), 포푸르스(Populus), 산탈룸(Santalum), 알륨(Allium), 릴륨(Lilium), 나르시쑤스(Narcissus), 아나나스(Ananas), 아라키스(Arachis), 파세울루스(Phaseolus) 및 피숨(Pisum)으로 구성된 군에서 선정된 식물 물질.
  54. 제 47 항, 제 49 항 또는 제 50 항중 어느 한 항에 있어서, 룰륨(Lolium), 제아(Zea), 트리티쿰(Triticum), 소굼(Sorghum), 사카룸(Saccharum), 브로무스(Bromus), 오리자애(Oryzae), 아베나(Avena), 호르데움(Hordeum), 세칼레(Secale) 및 세타리아(Setaria)으로 구성된 군으로부터 선정된 식물 물질.
  55. 돌연변이체 및 변종을 포함한, 제 47 항 및 제 49 항 내지 제 54 항중 어느 한 항에 따른 트랜스제닉 식물의 후대.
  56. 원형질체. 세포, 캘러스, 조직, 기관, 종자, 화분, 밑씨, 접합체, 배아 또는 트랜스제닉 식물로부터 수득할 수 있는 기타 증식물질을 포함하는 제 47 항 및 제 49 항 내지 제 55 항중 어느 한 항에 따른 트랜스제닉 식물의 태아.
  57. 본 발명의 방법을 이용하여 형질전환되어 적어도 일부는 트랜스제닉 세포로 구성된 트랜스제닉 식물 또는 그의 후대로부터 유래하는 꽃, 줄기, 열매, 잎, 뿌리와 같은 식물의 부위
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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